JP2000119182A

JP2000119182A - ヘムオキシゲナーゼ誘導促進剤

Info

Publication number: JP2000119182A
Application number: JP28713598A
Authority: JP
Inventors: Susumu Okabe; 進岡部; Satoru Takahashi; 悟高橋; Mitsuo Mazaki; 光夫真崎; Toshihiro Okamoto; 俊博岡本
Original assignee: Nippon Chemiphar Co Ltd
Current assignee: Nippon Chemiphar Co Ltd
Priority date: 1998-10-09
Filing date: 1998-10-09
Publication date: 2000-04-25

Abstract

(57)【要約】【課題】新規なヘムオキシゲナーゼ（ＨＯ）誘導促進
剤を提供すること。【解決手段】本発明は、レミノプラゾールを有効成分
とするＨＯ誘導促進剤に関する。ウサギの胃上皮細胞、
マウスの肝臓を用いた実験からレミノプラゾールが優れ
たＨＯ誘導促進作用を有することが明らかになった。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【発明の属する技術分野】本発明は、ヘムオキシゲナー
ゼ誘導促進剤に関し、詳細には、レミノプラゾール（Ｌ
ｅｍｉｎｏｐｒａｚｏｌｅ；（±）−２−［［２−（イ
ソブチルメチルアミノ）ベンジル］スルフィニル］−１
Ｈ−ベンズイミダゾール）を有効成分とするヘムオキシ
ゲナーゼ誘導促進剤に関する。

【０００２】

【従来の技術】レミノプラゾールは、本発明者らにより
見いだされた抗潰瘍剤であり、優れた防御因子増強作用
を併せ持つプロトンポンプ阻害剤である。（特公平６−
７００１８号公報，特公平７−２６３６号公報等）

【０００３】ヘムオキシゲナーゼ（ＨＯ）は、ヘムの代
謝の第一段階で働く律速酵素であり、細胞内遊離ヘムを
一酸化炭素（ＣＯ）、鉄（Ｆｅ）、ビリベルジンに分解
する酵素である。ビリベルジンはさらに還元酵素により
ビリルビンに変換される。ＨＯにはＨＯ−１及びＨＯ−
２の二つのアイソザイムが知られている。ＨＯ−１は誘
導性の酵素であり、ヘム、金属、サイトカイン、ＮＯド
ナー、熱ショック、エンドトキシン、イミダゾール及び
ピリジン誘導体、ホルモン、低酸素暴露、酸化ストレス
などにより転写レベルで誘導され、細胞内ヘムの恒常性
とヘム蛋白質量の維持に役割を果たしているとされてい
る。哺乳類の組織に広く存在し、生体においては、動物
炎症モデルにおいて発現し、ヒト腺癌にて過剰発現して
いることが示され、腫瘍細胞における活性が高いことも
報告されいる。各種ストレス、炎症モデルでの検討か
ら、ＨＯ−１の誘導は細胞障害に対する内因性の防御機
構の一部と考えられており、ヘム分解により生じたビリ
ベルジン、ビリルビンは抗酸化、抗補体作用を有し、Ｃ
Ｏは情報伝達物質として、鉄は遺伝子調節因子としての
機能を有することから、これらが防御作用に関与してい
ることが考えられている。

【０００４】一方、ＨＯ−２は構成型の酵素であり、特
に脳、精巣に多く存在し、化学的誘発剤はグルココルチ
コイドのみであるとされている。また、ＮＯドナーによ
り活性が抑制される。

【０００５】ＨＯ−１の誘導と病態との関連性について
は、幾つかの報告がされている。急性炎症時にＨＯ−１
は誘導され、それはその後の持続炎症の消失に関与する
ことが示されており、ＨＯ−１の誘導剤（鉄プロトポル
フィリン）は持続炎症の消失をさらに促進することが示
されている（文献１）。そのメカニズムは不明である
が、ＨＯ活性増大に由来するｂｉｌｅｐｉｇｍｅｎｔ
の抗酸化作用、抗補体作用の関与、ＣＯによるｉＮＯＳ
の活性低下（ｔｏｘｉｃ・ＮＯの生成抑制）、アラキド
ン酸代謝に関与する酵素の阻害などが考察されている。
また、組織修復促進作用の観点からは、ＨＯ−１遺伝子
を導入した血管内皮細胞では増殖、血管新生の亢進が示
されており、出血、血栓、低酸素虚血などの炎症反応部
位での細胞障害の程度を制御する適応性機構であること
が示されている（文献２）。さらに、肝臓においては、
出血性ショックモデルでＨＯ−１の誘導が観察され、そ
の活性増大に由来するＣＯが血管のｔｏｎｅ、特に門脈
循環の維持に貢献することが示されており、栄養補給の
血流量は血流停滞後の細胞生存にとって極めて重要な決
定因子であり、ＨＯ−１活性増大に由来する血管拡張は
門脈循環の血流の維持に寄与し、致死的なストレス負荷
前のストレス応答としての防御的な性質であるものと考
察されている（文献３）。

【０００６】また、ＨＯ−１ｍＲＮＡの誘導は哺乳類の
細胞における様々な酸化的ストレスに対する恒常的（ｇ
ｅｎｅｒａｌ）反応であり、ＨＯの誘導はｉｎｖｉｔ
ｒｏ及びｉｎｖｉｖｏでの実験的酸化障害（皮膚の繊
維芽細胞、肺のａｄｅｎｏｃａｒｃｉｎｏｍａｃｅｌ
ｌ、冠血管内皮細胞、シスプラチン誘発腎尿細管毒性な
ど）に対する細胞保護作用をｍｅｄｉａｔｅしているこ
とが報告されている（文献４−７）。たとえば、ヘモグ
ロビンによるＨＯ誘導は致死的なエンドトキシン血症か
らラットを保護し、酸化剤誘発の腎尿細管毒性のモデル
で、ＨＯの誘導は有益であるとの示唆がされており、Ｃ
Ｏの産生が腎血流量維持を助けるためと考察されている
（文献７，８）。

【０００７】さらに、ブタ動脈平滑筋培養細胞を酸化ス
トレス剤（グルコースオキシダーゼ、Ｃｄｃｌ２、マレ
イン酸ジエチル）あるいは酸化ＬＤＬにて処理するとＨ
Ｏ−１が誘導されてくる。血液中で活性酸素が増加する
と過酸化脂質の形成とそれに続くＬＤＬの取り込みが増
加し、これらはそれぞれ細胞障害、動脈内膜への沈着を
引き起こし、動脈硬化の発症および増悪の要因となって
いる。したがって、ＨＯ−１の誘導は動脈硬化症におい
て、酸化ストレスに対し細胞を保護する重要な役割を果
たしていると推察されている（文献９）。

【０００８】以上の観点から、ＨＯ−１の誘導促進剤
は、抗炎症剤、損傷治癒促進剤、肝保護剤、腎保護剤、
動脈硬化治療剤、抗ガン剤、白内障治療剤などとして、
様々な酸化的ストレスに対する生体防御剤としての有用
性が期待される。

【０００９】ところで、レミノプラゾールタイプの化合
物であるオメプラゾール、ランソプラゾールなどのプロ
トンポンプ阻害剤がＨＯ−１を誘導するとの報告はなさ
れていない。また、ＨＯ−１の誘導を示す化合物として
は、ブロモベンゼン、ベンジルピリジン、２，２’−ジ
ピリジルジスルフィド等のピリジン誘導体、２−ベン
ジルイミダゾール等のイミダゾール誘導体が報告（文献
１０）されているが、何れもレミノプラゾールとは構造
が異なる。

【００１０】文献１）Ｗｉｌｌｉｓ．Ｄ，ｅｔａｌ：
ＮａｔｕｒｅＭｅｄｉｃｉｎｅ２，８７−９０（１９
９６）文献２）Ｄｅｒａｍａｕｄｔ，Ｂ．ＭＪＭ．，ｅｔａ
ｌ：Ｊ．Ｃｅｌｌ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．６８，１２１−１
２７（１９９８）文献３）Ｍｉｃｈａｅｌ，Ｂ．，ｅｔａｌ：Ａｍ．
Ｊ．Ｐｈｙｓｉｏｌ．２７１，Ｇ９２９−Ｇ９３５（１
９９６）文献４）Ｖｉｌｅ，ＧＦ．，ｅｔａｌ：Ｐｒｏｃ．Ｎ
ａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．９１，２６０７−２６１０
（１９９４）文献５）Ｌｅｅ，ＴＣ．，ｅｔａｌ：Ｃａｎｃｅｒ
Ｒｅｓ．：５４，１６６０−１６６４（１９９４）文献６）Ａｂｒａｈａｍ，ＮＧ．，ｅｔａｌ．：Ｐｒ
ｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．９２，６７９８−
６８０２（１９９５）文献７）Ａｇａｒｗａｌ，Ａ．，ｅｔａｌ．：Ｋｉｄ
ｎｅｙ．Ｉｎｔ．４８，１２９８−１３０７（１９９
５）文献８）Ｏｔｔｅｒｂｅｉｎ，Ｌ．，ｅｔａｌ：Ａ
ｍ．Ｊ．Ｒｅｓｐｉｒ．Ｃｅｌｌ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．
１３，５９５−６０１（１９９５）文献９）Ｒｉｃｈａｒｄ，Ｃ．Ｍ．，ｅｔａｌ：ＦＥ
ＢＳＬｅｔｔ．３６８，２３９−２４２（１９９５）文献１０）Ｋｏｂａｙａｓｈｉ，Ｙ，ｅｔａｌ：Ｊａ
ｐ．Ｊ．Ｔｏｘｉｃｏｌ．Ｅｎｖｉｒｏｎ．Ｈｅａｌｔ
ｈ．４２，４６８−４７８（１９９６）

【００１１】

【発明が解決しようとする課題】新規なＨＯ誘導促進剤
の提供が望まれている。

【００１２】

【課題を解決するための手段】本発明者らはレミノプラ
ゾールに関する鋭意研究を行った結果、レミノプラゾー
ルが胃酸分泌抑制作用や胃腸の細胞保護作用のみなら
ず、優れたＨＯ誘導促進作用をも有することを見いだし
本発明を完成した。即ち、本発明は、レミノプラゾール
を有効成分として含有するヘムオキシゲナーゲ誘導促進
剤を提供するものである。また、本発明は、レミノプラ
ゾールを有効成分として含有する抗酸化剤を提供するこ
とにもある。さらにまた、本発明は、レミノプラゾール
を有効成分として含有する肝保護剤を提供することにも
ある。

【００１３】

【発明の実施の形態】レミノプラゾールは、特公平６−
７００１８号公報、特開平２−２６４７４８号公報、特
開昭６４−３１５７号公報、特開平２−７８６６５号公
報等に記載の公知化合物であり、こららの特許公報記載
の製造方法に準じて製造することができる。レミノプラ
ゾールがＨＯ誘導促進作用を有することは後記実施例１
及び２から明らかになった。即ち、後記実施例１のウサ
ギの胃上皮細胞を用いた実験では、レミノプラゾールの
濃度に依存してＨＯ活性の増大が認められた。また、マ
ウスの肝臓を用いた実験においてもレミノプラゾール投
与により、ＨＯが誘導されることが明らかになった。更
に、後記実施例３のウサギの胃粘膜細胞を用いたインド
メタシン投与による細胞内グルタチオン含量低下をレミ
ノプラゾールは有意に抑制することが認められることか
ら抗酸化作用を有することも明らかになった。一方、レ
ミノプラゾールが極めて安全性が高いことは特公平６−
７００１８号公報等に記載の通りである。

【００１４】従って、レミノプラゾールは、ＨＯ誘導促
進剤として、例えば抗炎症剤、損傷治癒促進剤、肝保護
剤、腎保護剤、動脈硬化治療剤、抗ガン剤、白内障治療
剤などとして、様々な酸化的ストレスに対する生体防御
剤としての有用性が期待され、特に肝保護剤として有用
である。なお、レミノプラゾールは後記実施例３から明
らかなように抗酸化的作用も有することから、抗酸化剤
として、例えば酸化的ストレスが関与する前記疾患の
他、潰瘍性大腸炎、クローン病、心筋梗塞、肝硬変、虚
血、尿毒症などの疾患への応用も期待される（文献１
１）。文献１１）「活性酸素と疾患」井上正康監修学
会出版センター（１９８７）

【００１５】レミノプラゾールを有効成分として含有す
るＨＯ誘導促進剤、肝保護剤及び抗酸化剤は、経口、非
経口いずれにおいても投与できるが、経口により投与す
ることが好ましい。経口投与剤の剤型としては、散剤、
錠剤、カプセル剤、顆粒剤、丸剤等が挙げられる。これ
らの調製には、通常の賦形剤、崩壊剤、結合剤、滑沢
剤、色素、希釈剤などが用いられる。賦形剤としては、
でんぷん、ブドウ糖、乳糖等が、崩壊剤としては、デン
プン、ＣＭＣ−Ｃａ等が、結合剤としては、アラビアゴ
ム、ＨＰＣ、ゼラチン、ＰＶＰ等が、滑沢剤としては、
ステアリン酸Ｍｇ、タルク等が用いられる。非経口投与
剤の剤型としては、注射剤等が挙げられる。投与量は、
通常成人において、１００μｇ〜１０００ｍｇ、好まし
くは、１日１ｍｇ〜５００ｍｇであるが、年令、症状等
により増減することができる。

【００１６】次に実施例を挙げて本発明を説明する。

【実施例】

【実施例１】胃上皮細胞におけるＨＯ活性の測定（方法）１．ウサギ胃粘膜細胞の調製及び培養胃粘膜細胞の調製はＷａｔａｎａｂｅらの方法（文献１
２）に準じて行った。ウサギ（日本白色種、雄性、体重
２．５〜４ｋｇ）をペントバルビタール（５０ｍｇ／ｋ
ｇ，ｉ．ｖ．）麻酔下に脱血致死させ、胃を摘出した。
粘膜を剥離後、直ちにハサミで細切した。リン酸緩衝生
理食塩水（ＰＢＳ）で洗浄後、粘膜を０．０７％コラゲ
ナーゼ（和光純薬）を含むハンクス液中で３７℃、１５
分間インキュベートし、その後Ｃａ²⁺，Ｍｇ²⁺を除去し
た１ｍＭＥＤＴＡ及び１ｍｇ／ｍｌウシ血清アルブ
ミン含有ハンクス液で洗浄した。この操作を２回繰り返
した後、懸濁液を孔径３００μｍと１００μｍの金属メ
ッシュに通した。濾過された細胞の生存率をトリパンブ
ルー色素排除法にて測定し、８０％以上の細胞を培養し
た。胃粘膜細胞（２ｘ１０６細胞）をラット尾Ｉ型コラ
ーゲン（Ｓｉｇｍａ）でコーティングした６０ｍｍディ
シュに播種した。培地は１０％胎児ウシ血清、１００
ｕｎｉｔｓ／ｍｌペニシリン、１００ｕｎｉｔｓ／
ｍｌストレプトマイシン、０．２５μｇ／ｍｌアン
ホテリシンＢを含むＦ１２培地を使用した。細胞をＣＯ
₂インキュベーター中で３７℃、３〜４日間培養し、ほ
ぼコンフルエントの状態のものを実験に供した。培養さ
れた粘膜細胞は約７０〜８０％上皮細胞、約１０〜１５
％壁細胞、約５〜１０％主細胞であった。

【００１７】２．胃粘膜細胞からのヘムオキシゲナーゼ
（ＨＯ）の調製胃粘膜細胞をレミノプラゾールで処理した後、５ｍＭ
ＭｇＣｌ₂含有１０ｍＭＴｒｉｓ−ＨＣｌ緩衝液（ｐ
Ｈ７．４）３ｍｌを加え、ラバーポリスマンで回収し
た。凍結融解３回により細胞を破砕し、１００，０００
ｘｇで２０分間遠心した。得られた沈殿を３％Ｔｒｉ
ｔｏｎ−Ｘ１００を含む０．１Ｍリン酸カリウム緩衝
液（ｐＨ７．４）０．５ｍｌを加え、ホモジナイズし
た。得られたホモジネートを酵素標品とした。

【００１８】３．ＨＯ活性の測定ラット肝臓からビリベルジン還元酵素をＴｅｎｈｕｎｅ
ｎらの方法（文献１３）に準じて部分精製した。ＨＯ活
性はＳｈｉｂａｈａｒａらの方法（文献１４）に従って
測定した。酵素標品を０．５ｍＭＮＡＤＰＨ、１ｕｎ
ｉｔビリベルジン還元酵素及び２５ｍＭｈｅｍａｔ
ｉｎ（Ｓｉｇｍａ）含有０．１Ｍリン酸カリウム緩衝
液（ｐＨ７．４）１ｍｌ中で３７℃、２時間インキュベ
ートした。生成したビリルビン量をビリベルジン還元酵
素存在下及び非存在下でのＡ４６０とＡ５４０の差から
算出し、ＨＯ活性とした。

【００１９】文献１２）Ｗａｔａｎａｂｅ，Ｓ．，ｅｔ
ａｌ：Ｊ．Ｇａｓｔｒｏｅｎｔ．Ｈｅｐａｔｏｌ．
９，３２５−３３３（１９９４）文献１３）Ｔｅｎｈｕｎｅｎ，Ｒ．，ｅｔａｌ：Ｂｉ
ｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ９，２９８−３０３（１９７０）文献１４）Ｓｈｉｂａｈａｒａ，Ｓ．，ｅｔａｌ：
Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２６２，１２８８９−１２８
９２（１９８７）

【００２０】（結果）１．レミノプラゾールによりヘムオキシゲナーゼ（Ｈ
Ｏ）の誘導が誘起されるか否かについて検討した。培養
細胞にレミノプラゾール（１〜３０μＭ）を添加し、２
時間後のＨＯ活性を測定した。胃上皮細胞では通常はＨ
Ｏ活性は非常に低値であったが、レミノプラゾールを処
置すると、濃度依存的にＨＯ活性の有意な増大が認めら
れた。レミノプラゾールは３，１０及び３０μＭで対照
群に比較してそれぞれ３．３倍、７．３倍及び７．２倍
とＨＯ活性を有意に増大させた。２．レミノプラゾール（１０μＭ）を添加して経時的
（０．５〜３時間）にＨＯ活性を測定した結果、レミノ
プラゾールによるＨＯ活性の増大には時間依存性が見ら
れ、その発現は培養細胞系でのレミノプラゾールの細胞
保護効果の発現と類似していた。レミノプラゾール添加
の１，２及び３時間後においてＨＯ活性は対照群に比較
してそれぞれ４．４倍、７．９倍及び９．０倍と有意に
増大した。３．蛋白合成阻害薬シクロヘキシミド（１μｇ／ｍｌ）
及びｍＲＮＡ合成阻害剤アクチノマイシンＤ（０．５μ
ｇ／ｍｌ）をレミノプラゾール添加の１時間前に処理し
た場合、レミノプラゾール（１０μＭ）により誘導され
るＨＯ活性の増大（レミノプラゾール添加２時間後）は
有意に抑制され、内因性の蛋白が関与していることが示
唆された。シクロヘキシミド及びアクチノマイシンＤは
ＨＯ活性に影響を及ぼさなかったが、レミノプラゾール
により増大したＨＯ活性（４９．８８±８．７４ｐｍｏ
ｌｅ／ｈｒ／ｍｇ）はシクロヘキシミド及びアクチノマ
イシンＤの前処置によりそれぞれ１６．９０±４．２９
ｐｍｏｌｅ／ｈｒ／ｍｇ及び１３．１５±３．３６ｐｍ
ｏｌｅ／ｈｒ／ｍｇと有意に抑制された。４．ＨＯ阻害薬である亜鉛プロトポルフィリン（０．１
〜１０μＭ、レミノプラゾールと同時添加）は濃度依存
的にレミノプラゾール（１０μＭ）によるＨＯ活性の増
大を抑制した。亜鉛プロトポルフィリンの１及び１０μ
Ｍはそれぞれ６１．４％及び７３．６％の有意な抑制率
を示した。以上の結果より、レミノプラゾールにより胃上皮細胞に
ＨＯが誘導されることが判明し、このＨＯは誘導型のＨ
Ｏ−１であることが強く示唆された。

【００２１】

【実施例２】肝臓におけるＨＯｍＲＮＡ発現（方法）ＦｅｍａｌｅＢＡＬＢ／ｃマウス（体重１
９−２０ｇ）にレミノプラゾール（１００ｍｇ／ｋｇ）
を経口投与し（ｎ＝２）、経口投与１，３，５及び７時
間後にエーテル麻酔下に肝臓を摘出し、直ちにドライア
イスにて凍結した。凍結した組織よりｔｏｔａｌＲＮ
Ａを抽出した。ＲＮＡの抽出操作はＣｈｏｍｃｙｎｓｋ
ｉらの方法（文献１５）に基づいて行った。Ｔｏｔａ
ｌＲＮＡ３μｇより文献１６に従ってｆｉｒｓｔ
ｓｔｒａｎｄｃＤＮＡを作成した。ＲａｔＨＯ−１
ｃＤＮＡ（文献１７）の５６−３１９を増幅する５’
−ＡＧＧＣＣＡＣＣＡＡＧＧＡＧＧＴＧＣＡＣＡ−３’
（ｓｅｎｓｅｐｒｉｍｅｒ）及び５’−ＡＡＧＧＧＡ
ＴＧＧＣＣＴＣＣＴＧＣＣＡＧＴ−３’（ａｎｔｉｓｅ
ｎｓｅｐｒｉｍｅｒ）を作成した。ＰＣＲの条件はＳ
ｈｉｂａｈａｒａら（文献１７）の報告を参考に、９５
℃ ４５ｓ、５５℃ ４５ｓ、７２℃ １．５ｍｉｎ、
３０ｃｙｃｌｅｓで行った。Ｄｅｎｓｉｔｏｍｅｔｒ
ｉｃａｎａｌｙｓｉｓは文献１８に準じて行った。

【００２２】文献１５）Ｃｈｏｍｃｙｎｓｋｉ．，ｅｔ
ａｌ：Ａｎａｌ．Ｂｉｏｌ．１６２，１５６−１５９
（１９８７）文献１６）Ｏｋａｍｏｔｏ，Ｔ．，ｅｔａｌ：Ｂｉｏ
ｃｈｅｍ．Ｂｉｏｐｈｙｓ．Ｒｅｓ．Ｃｏｍｍｕｎ．２
２６，７６２−７６８（１９９６）文献１７）Ｓｈｉｂａｈａｒａ，ｅｔａｌ：Ｐｒｏ
ｃ．Ｎａｔｌ，Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．８２，７８６５−７
８６９（１９８５）文献１８）Ｏｋａｍｏｔｏ，Ｔ．，ｅｔａｌ：Ｊｐ
ｎ．Ｊ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．７６，９７−９９（１９
９８）

【００２３】（結果）Ｎｏｒｍａｌｌｉｖｅｒにおい
てＨＯ−１ｍＲＮＡは検出され、ＨＯ−１はＮｏｒｍ
ａｌｌｉｖｅｒにおいてはｃｏｎｓｔｉｔｕｔｉｖｅ
に発現されていると考えられた。レミノプラゾール投
与後１時間ではＨＯｍＲＮＡはＮｏｒｍａｌを１０
０％とすると約２００％に誘発され、３，５及び７時間
後ではそれぞれ２１０％、１９０％及び１７０％に誘発
された。このことから、レミノプラゾール投与後、肝臓
においてＨＯ−１が誘導されることが判明した。

【００２４】

【実施例３】細胞内ＧＳＨ含量低下作用の検討（方法）実施例１の１．に記載した方法によりウサギ胃
粘膜細胞を調製及び培養し、薬物適用後の細胞生存率及
び細胞内ＧＳＨ含量を測定した。細胞生存率はＭＴＴ法
（文献１９）にて測定した。胃粘膜細胞をＰＢＳで洗浄
後、０．１ｍｌのＭＴＴ溶液（ＭＴＴ５ｇ／Ｌ蒸留水
溶解）を加え、２時間後に塩酸含有イソプロパノールで
ＭＴＴを抽出し、抽出液の吸光度を５９５ｎｍにて測定
した。また、細胞内ＧＳＨ含量は実施例１の２．に記載
した胃粘膜細胞のホモジネートを用い、還元型グルタチ
オン（ＧＳＨ）定量用キット（ＢＯＸ社）により測定し
た。文献１９）Ｍｏｓｍａｎｎ，Ｔ．：Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏ
ｌ．Ｍｅｔｈｏｄｓ．６５，５５−６３（１９８３）

【００２５】（結果）１．培養胃上皮細胞にインドメタシンを添加すると細胞
内ＧＳＨ含量の低下が見られるが（インドメタシン適用
１時間後）、レミノプラゾールを前処理（インドメタシ
ン適用２時間前）しておくと、細胞傷害及び細胞内ＧＳ
Ｈ含量の低下が濃度依存的に抑制された。インドメタシ
ンを添加すると細胞内ＧＳＨ含量は対照群の３６．７％
にまで低下するが、レミノプラゾールの１０及び３０μ
Ｍの前処置はその低下を抑制し、それぞれ対照群の７
０．８％及び６７．４％にまで有意にｒｅｖｅｒｓｅさ
せた。２．蛋白合成阻害薬シクロヘキシミド（１μｇ／ｍｌ）
及びｍＲＮＡ合成阻害剤アクチノマイシンＤ（０．５μ
ｇ／ｍｌ）をレミノプラゾール添加と同時に処理した場
合、インドメタシン誘発ＧＳＨ含量の低下に対するレミ
ノプラゾールの抑制効果（インドメタシン適用１時間
後）を消失させた。インドメタシンを添加すると細胞内
ＧＳＨ含量は対照群の３１．４％にまで低下したが、レ
ミノプラゾールの１０μＭの前処置はその低下を対照群
の７２．２％にまでｒｅｖｅｒｓｅさせた。シクロヘキ
シミド及びアクチノマイシンＤは無処置及びインドメタ
シン添加による細胞内ＧＳＨ含量に影響を及ぼさなかっ
た。レミノプラゾール単独群での細胞内ＧＳＨ含量は
７．１２±０．７６ｐｍｏｌｅ／２ｘ１０⁵ｃｅｌｌｓ
であったが、シクロヘキシミド及びアクチノマイシンＤ
をレミノプラゾールと同時添加した場合の細胞内ＧＳＨ
含量はそれぞれ、３．５４±０．７２ｐｍｏｌｅ／２ｘ
１０⁵ｃｅｌｌｓ及び３．６０±０．７８ｐｍｏｌｅ／
２ｘ１０⁵ｃｅｌｌであり、レミノプラゾールの抑制効
果は消失した。３．ＨＯ阻害薬である亜鉛プロトポルフィリン（１０μ
Ｍ、レミノプラゾールと同時添加）はインドメタシン誘
発ＧＳＨ含量の低下に対するレミノプラゾールの抑制効
果（インドメタシン適用１時間後）を阻害した。インド
メタシンを添加する細胞内ＧＳＨ含量は対照群の３４．
７％にまで低下したが、レミノプラゾールの１０μＭの
前処置はその低下を対照群の７２．０％にまでｒｅｖｅ
ｒｓｅさせた。亜鉛プロトポルフィリンは無処置及びイ
ンドメタシン添加による細胞内ＧＳＨ含量に影響を及ぼ
さなかった。レミノプラゾール単独群での細胞内ＧＳＨ
含量は５．９３±０．８２ｐｍｏｌｅ／２ｘ１０⁵ｃｅ
ｌｌｓであったが、亜鉛プロトポルフィリンをレミノプ
ラゾールと同時添加した場合の細胞内ＧＳＨ含量は３．
７３±０．５８ｐｍｏｌｅ／２ｘ１０⁵ｃｅｌｌｓであ
り、レミノプラゾールの抑制効果は阻害された。以上の結果から、レミノプラゾールは内因性蛋白（一部
ヘムオキシゲナーゼ−１）を介して抗酸化作用を示すも
のと考えられる。

【００２６】

【実施例４】製剤例（顆粒）顆粒１ｇ中下記成分を含有する。レミノプラゾール２００ｍｇラクトース４５０ｍｇトウモロコシデンプン３００ｍｇＨＰＣ５０ｍｇ

Claims

【特許請求の範囲】

【請求項１】レミノプラゾールを有効成分として含有
するヘムオキシゲナーゲ誘導促進剤。
【請求項２】レミノプラゾールを有効成分として含有
する抗酸化剤。
【請求項３】レミノプラゾールを有効成分として含有
する肝保護剤。