JP2000069954A - 分離型混合培養法 - Google Patents
分離型混合培養法Info
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Abstract
(57)【要約】
【課題】 複数の培養槽を用い、それらの間をフィルタ
ーを介した送液チューブで連結する、複数種の細胞を分
離して混合培養する方法において、通過する濾過培地流
量が大きく、フィルターの目詰まりも少ない培養法、及
びその培養法に適した分離型混合培養装置を提供する。 【解決手段】 セラミックフィルターを両端付近に装着
した送液チューブからなる濾過モジュールにより複数の
培養槽を相互に連結し、濾過モジュールに設けられた送
液ポンプを一定期間毎に反転させながら連続運転するこ
とから成る培養法、及び培養装置。
ーを介した送液チューブで連結する、複数種の細胞を分
離して混合培養する方法において、通過する濾過培地流
量が大きく、フィルターの目詰まりも少ない培養法、及
びその培養法に適した分離型混合培養装置を提供する。 【解決手段】 セラミックフィルターを両端付近に装着
した送液チューブからなる濾過モジュールにより複数の
培養槽を相互に連結し、濾過モジュールに設けられた送
液ポンプを一定期間毎に反転させながら連続運転するこ
とから成る培養法、及び培養装置。
Description
【０００１】
【産業上の利用分野】本発明は、複数種の細胞を培養す
る場合ないしは当該複数種の細胞の培養生産物を得る場
合において、複数種の細胞が同一培養槽に混在すること
による培養効率の低下ないしは培養生産物の生産効率の
低下を防ぐ目的で、複数種の細胞を各々一種づつ、一つ
の培養槽で培養し、両端またはその付近にセラミックフ
ィルターを装着したチューブからなる濾過モジュール
で、各培養槽を相互に連結して、ポンプによって培地の
みを交互に交換する、ことから成る細胞を分離して混合
培養する方法を提供する。更に、本発明は、上述の培養
方法に適した分離型混合培養装置を提供する。
る場合ないしは当該複数種の細胞の培養生産物を得る場
合において、複数種の細胞が同一培養槽に混在すること
による培養効率の低下ないしは培養生産物の生産効率の
低下を防ぐ目的で、複数種の細胞を各々一種づつ、一つ
の培養槽で培養し、両端またはその付近にセラミックフ
ィルターを装着したチューブからなる濾過モジュール
で、各培養槽を相互に連結して、ポンプによって培地の
みを交互に交換する、ことから成る細胞を分離して混合
培養する方法を提供する。更に、本発明は、上述の培養
方法に適した分離型混合培養装置を提供する。
【０００２】本発明の細胞の培養法は、複数種の細胞を
混合して培養する際に、種類が異なる細胞のお互いの培
養特性に及ぼし合う影響を解析し、培養プロセスの効率
化、適正化をはかるための試験、研究目的にも使用でき
る。
混合して培養する際に、種類が異なる細胞のお互いの培
養特性に及ぼし合う影響を解析し、培養プロセスの効率
化、適正化をはかるための試験、研究目的にも使用でき
る。
【０００３】
【従来の技術】複数種の細胞を同一培養槽内で混合培養
し、当該混合培養物から細胞ないしはその生産物を得る
場合は多い。こういった混合培養を行うのは、例えば、
一方の細胞種の代謝産物を他方の細胞種が別の物質に変
換する場合、あるいは一方の細胞種が生産する増殖促進
因子が、他方の細胞種の増殖を促進する場合などが考え
られる。
し、当該混合培養物から細胞ないしはその生産物を得る
場合は多い。こういった混合培養を行うのは、例えば、
一方の細胞種の代謝産物を他方の細胞種が別の物質に変
換する場合、あるいは一方の細胞種が生産する増殖促進
因子が、他方の細胞種の増殖を促進する場合などが考え
られる。
【０００４】しかし、両細胞の培養特性や代謝産物の生
産条件が異なっている場合、両細胞を同一培養槽、すな
わち同一培養条件下で培養することは、培養効率や培養
産物の生産性の大幅な低下をもたらす場合がある。例え
ば、一方の微生物が他方の微生物の増殖促進因子を生産
することを利用して、２種の微生物を混合培養する場合
があるが、一方が好気性菌であり他方が嫌気性菌である
場合、同一培養槽で２種類の微生物を好気条件下あるい
は嫌気条件下で混合培養しても、適切な培養条件あるい
は生産条件とはならない。
産条件が異なっている場合、両細胞を同一培養槽、すな
わち同一培養条件下で培養することは、培養効率や培養
産物の生産性の大幅な低下をもたらす場合がある。例え
ば、一方の微生物が他方の微生物の増殖促進因子を生産
することを利用して、２種の微生物を混合培養する場合
があるが、一方が好気性菌であり他方が嫌気性菌である
場合、同一培養槽で２種類の微生物を好気条件下あるい
は嫌気条件下で混合培養しても、適切な培養条件あるい
は生産条件とはならない。
【０００５】また、複数の細胞種を混合培養した場合、
用いた細胞種間でお互いの培養特性に影響を与え合い、
結果として培養効率および生産物の生産性や品質に好ま
しくない影響を与える場合があり、そのような場合に
は、その原因の解明と、それを基にしたプロセスの適正
化を図る必要が生じる。
用いた細胞種間でお互いの培養特性に影響を与え合い、
結果として培養効率および生産物の生産性や品質に好ま
しくない影響を与える場合があり、そのような場合に
は、その原因の解明と、それを基にしたプロセスの適正
化を図る必要が生じる。
【０００６】このような課題を克服するために、２つ培
養槽の間を濾過モジュールを介して培養液のみを循環さ
せる各種の培養装置が提案されている。すなわち、ホロ
ーファイバーを使用したクロスフロー方式（Journal of
Fermentation and Bioengineering, 84(1997), 59-6
4、特開平8-66178）、およびメンブレンフィルターを介
した混合培養装置（江畑朋治ら、生物化学工学会平成３
年度大会要旨集、４７頁）がある。
養槽の間を濾過モジュールを介して培養液のみを循環さ
せる各種の培養装置が提案されている。すなわち、ホロ
ーファイバーを使用したクロスフロー方式（Journal of
Fermentation and Bioengineering, 84(1997), 59-6
4、特開平8-66178）、およびメンブレンフィルターを介
した混合培養装置（江畑朋治ら、生物化学工学会平成３
年度大会要旨集、４７頁）がある。
【０００７】
【発明が解決しようとする課題】上に記載の混合培養装
置の問題点はホローファイバーあるいはメンブレンフィ
ルターによる濾過効率が著しく低い点にある。例えば、
上記のホローファイバーを用いたクロスフロー方式の濾
過装置では、単位濾過面積当たりの濾過流量は１ml/h/c
m2と限定されたものであり、両培養槽中の培地の混和速
度は著しく低いといわざるを得ず、培地のみを交換する
混合培養という目的を十分に達成できない。またホロー
ファイバーあるいはメンブレンフィルターに対して一方
向に培養液を濾過する結果、これらの濾過担体が目詰ま
りを起こし、さらに濾過流量が低下するという問題もあ
る。
置の問題点はホローファイバーあるいはメンブレンフィ
ルターによる濾過効率が著しく低い点にある。例えば、
上記のホローファイバーを用いたクロスフロー方式の濾
過装置では、単位濾過面積当たりの濾過流量は１ml/h/c
m2と限定されたものであり、両培養槽中の培地の混和速
度は著しく低いといわざるを得ず、培地のみを交換する
混合培養という目的を十分に達成できない。またホロー
ファイバーあるいはメンブレンフィルターに対して一方
向に培養液を濾過する結果、これらの濾過担体が目詰ま
りを起こし、さらに濾過流量が低下するという問題もあ
る。
【０００８】上記メンブレンフィルターは単位面積あた
りの濾過流量がホローファイバーよりも更に低いことが
最大の問題点である。この問題点をある程度解消したホ
ローファイバーにおいても濾過方向が一方向であること
から、培養液中の細胞によって濾過担体が目詰まりを起
こして濾過流量が低下するという問題が起きる。いずれ
にしても、上に記載の混合培養装置において両培養槽の
培地を迅速に混和して、実質上両培養槽の培養液組成を
均質にするためには、上記ホローファイバーやメンブレ
ンフィルターの濾過担体よりもはるかに濾過流量の高い
濾過担体が必要である。また、このような分離混合培養
法を長時間、安定に連続運転可能にするためには、細胞
による濾過担体の目詰まりを起こさないような濾過方法
の開発も望まれいた。
りの濾過流量がホローファイバーよりも更に低いことが
最大の問題点である。この問題点をある程度解消したホ
ローファイバーにおいても濾過方向が一方向であること
から、培養液中の細胞によって濾過担体が目詰まりを起
こして濾過流量が低下するという問題が起きる。いずれ
にしても、上に記載の混合培養装置において両培養槽の
培地を迅速に混和して、実質上両培養槽の培養液組成を
均質にするためには、上記ホローファイバーやメンブレ
ンフィルターの濾過担体よりもはるかに濾過流量の高い
濾過担体が必要である。また、このような分離混合培養
法を長時間、安定に連続運転可能にするためには、細胞
による濾過担体の目詰まりを起こさないような濾過方法
の開発も望まれいた。
【０００９】
【課題を解決するための手段】本発明者等は、濾過流量
の大きい濾過担体を鋭意研究した結果、濾過流量が大き
く、洗浄や殺菌が容易で、耐久性にも優れたセラミック
フィルターを両端またはその付近に装着したチューブか
ら成る濾過モジュールを作成した。この濾過モジュール
で２つの培養槽を連結し、チューブに装着したポンプに
よって両培養槽の培地のみを交互送液して迅速に交換で
きる分離型混合培養装置を開発した。具体的には、図１
に示すような装置である。本発明は、このような分離混
合培養装置、およびそれを使用することによる、複数の
培養槽中の培地組成が相互に均質であり、長時間安定に
連続培養可能な分離混合培養法を提供するものである。
の大きい濾過担体を鋭意研究した結果、濾過流量が大き
く、洗浄や殺菌が容易で、耐久性にも優れたセラミック
フィルターを両端またはその付近に装着したチューブか
ら成る濾過モジュールを作成した。この濾過モジュール
で２つの培養槽を連結し、チューブに装着したポンプに
よって両培養槽の培地のみを交互送液して迅速に交換で
きる分離型混合培養装置を開発した。具体的には、図１
に示すような装置である。本発明は、このような分離混
合培養装置、およびそれを使用することによる、複数の
培養槽中の培地組成が相互に均質であり、長時間安定に
連続培養可能な分離混合培養法を提供するものである。
【００１０】上記の培養装置において、濾過モジュール
に設けられた送液ポンプにより、培養液の送液方向を一
定期間毎に反転させて運転することにより、両培養槽中
の培地組成が迅速に均質化され、同時に濾過液自身を用
いて定期的にフィルターの逆洗を行うことになり、フィ
ルターの目詰まりを防ぐことができた。この濾過モジュ
ールを用いた場合の単位面積当たりの濾過流量は、８９
ml/h/cm2（濾過面積３４cm2）とホローファイバーの１m
l/h/cm2 に比較して著しく大きく、２つに分離された培
養槽間の培地のみの交換を迅速に行うことができた。
に設けられた送液ポンプにより、培養液の送液方向を一
定期間毎に反転させて運転することにより、両培養槽中
の培地組成が迅速に均質化され、同時に濾過液自身を用
いて定期的にフィルターの逆洗を行うことになり、フィ
ルターの目詰まりを防ぐことができた。この濾過モジュ
ールを用いた場合の単位面積当たりの濾過流量は、８９
ml/h/cm2（濾過面積３４cm2）とホローファイバーの１m
l/h/cm2 に比較して著しく大きく、２つに分離された培
養槽間の培地のみの交換を迅速に行うことができた。
【００１１】本発明の培養方法の実施に適した培養装置
の該略図を図１に示した。
の該略図を図１に示した。
【００１２】図１の上段に示した本発明の装置は、各々
撹拌用モーター（５）によって駆動される撹拌機（２）
を備えた２つの培養槽（１）、および両培養槽を連結す
るセラミック濾過モジュールから構成される。このモジ
ュールはセラミックフィルター（３）を両端に装着した
送液チューブ（６）及び送液チューブの途中に設けられ
た送液ポンプ（７）から成る。培養時には、両培養槽中
の培養液（４）を撹拌しながら、適切な培養条件下で培
養を行う。培養中、送液ポンプ（７）を作動して、培地
を一定時間毎に交互に方向を反転して送液する。この送
液により、各培養液（４）はセラミックフィルター
（３）で濾過されて細胞は培養液中に留まり、培地のみ
が他方の培養槽に送られ、その培養槽内の培養液と混合
される。送液方向が反転すると、セラミックフィルター
から排出される培地により、フィルター表面が逆洗され
るため、セラミックフィルターの細胞等による目詰まり
が防止される。
撹拌用モーター（５）によって駆動される撹拌機（２）
を備えた２つの培養槽（１）、および両培養槽を連結す
るセラミック濾過モジュールから構成される。このモジ
ュールはセラミックフィルター（３）を両端に装着した
送液チューブ（６）及び送液チューブの途中に設けられ
た送液ポンプ（７）から成る。培養時には、両培養槽中
の培養液（４）を撹拌しながら、適切な培養条件下で培
養を行う。培養中、送液ポンプ（７）を作動して、培地
を一定時間毎に交互に方向を反転して送液する。この送
液により、各培養液（４）はセラミックフィルター
（３）で濾過されて細胞は培養液中に留まり、培地のみ
が他方の培養槽に送られ、その培養槽内の培養液と混合
される。送液方向が反転すると、セラミックフィルター
から排出される培地により、フィルター表面が逆洗され
るため、セラミックフィルターの細胞等による目詰まり
が防止される。
【００１３】図１の下段には、別の態様の培養装置を示
している。すなわち、前の装置に比較して、濾過モジュ
ールを２本使用して両培養槽が連結されている。各々の
送液チューブには送液ポンプが設けられている。２つの
ポンプを相互に相反する方向に培溶液を送液することに
よって、両培養槽の液量の変化をなくし、しかも、より
迅速な培地の交換を行うこともできる。
している。すなわち、前の装置に比較して、濾過モジュ
ールを２本使用して両培養槽が連結されている。各々の
送液チューブには送液ポンプが設けられている。２つの
ポンプを相互に相反する方向に培溶液を送液することに
よって、両培養槽の液量の変化をなくし、しかも、より
迅速な培地の交換を行うこともできる。
【００１４】図示しないが、３つ以上の培養槽のそれぞ
れを１本以上の当該濾過モジュールで相互に連結し、同
様の方法で各培養槽間の培地のみを交換することによ
り、３つ以上の細胞種の分離型混合培養装置も可能であ
る。
れを１本以上の当該濾過モジュールで相互に連結し、同
様の方法で各培養槽間の培地のみを交換することによ
り、３つ以上の細胞種の分離型混合培養装置も可能であ
る。
【００１５】図１に示すような、培養装置を使用して両
培養槽で異なる２種類の酵母をそれぞれ培養したとこ
ろ、両培養槽間で酵母の混入もなく、両培養液の組成も
実質上均一であり、両種の酵母を同一培養槽で混合培養
したときよりも酵母の増殖速度が速いことが確認され
た。
培養槽で異なる２種類の酵母をそれぞれ培養したとこ
ろ、両培養槽間で酵母の混入もなく、両培養液の組成も
実質上均一であり、両種の酵母を同一培養槽で混合培養
したときよりも酵母の増殖速度が速いことが確認され
た。
【００１６】
【実施例】以下、本発明を実施例にて説明するが、本発
明の技術範囲は、これらの技術範囲に限定されるもので
はない。
明の技術範囲は、これらの技術範囲に限定されるもので
はない。
【００１７】［実施例１］−培養槽の培地交換能力 セラミックフィルター（マルチポアロンAD-1、三井研削
砥石社製）をチューブの両端に装着した濾過モジュール
を作成した。この濾過モジュールのチューブ部分にペリ
スタリック方式のポンプを装着し、２つの培養槽を連結
して図１に示すような分離型混合培養装置を作成した。
砥石社製）をチューブの両端に装着した濾過モジュール
を作成した。この濾過モジュールのチューブ部分にペリ
スタリック方式のポンプを装着し、２つの培養槽を連結
して図１に示すような分離型混合培養装置を作成した。
【００１８】当該培養装置の両培養槽間の培地交換能力
を確認するため、グルコース溶液を用いて培地交換を行
い、両培養槽中の混和状態を測定した。セラミックフィ
ルター濾過モジュールを１セット装着した場合（濾過速
度３L/h）と３セット装着（濾過速度１５L/h）した場合
を比較した。グルコース濃度が２%と０%の液を、各培養
槽に各々３Ｌづつ入れ、５００ml送液する毎にペリスタ
ポンプの運転方向を切り替えながら運転した。各培養槽
中のグルコース濃度をグルコスタット法で経時的に測定
した。
を確認するため、グルコース溶液を用いて培地交換を行
い、両培養槽中の混和状態を測定した。セラミックフィ
ルター濾過モジュールを１セット装着した場合（濾過速
度３L/h）と３セット装着（濾過速度１５L/h）した場合
を比較した。グルコース濃度が２%と０%の液を、各培養
槽に各々３Ｌづつ入れ、５００ml送液する毎にペリスタ
ポンプの運転方向を切り替えながら運転した。各培養槽
中のグルコース濃度をグルコスタット法で経時的に測定
した。
【００１９】図２に示すように各培養槽中のグルコース
濃度は、運転条件から求めたシュミレーションの結果と
ほぼ同一の挙動を示し、濾過流量を増加させることに伴
い混和速度が上昇し、両培養槽間での迅速な培地の交換
が確認された。
濃度は、運転条件から求めたシュミレーションの結果と
ほぼ同一の挙動を示し、濾過流量を増加させることに伴
い混和速度が上昇し、両培養槽間での迅速な培地の交換
が確認された。
【００２０】［実施例２］−分離型混合培養装置による
異種酵母の培養 ２種類の醸造用酵母が、混合培養中にお互いの培養特性
に及ぼす影響を分離型培養装置で評価した。醸造用酵母
Ａ株とＢ株（どちらも Saccharomycescerevisiae に分
類される）を、上記の分離型混合培養装置を用い菌体同
士は分離した状態で混合培養した場合と、同一培養槽の
中で混合培養した場合で酵母増殖特性を比較した。
異種酵母の培養 ２種類の醸造用酵母が、混合培養中にお互いの培養特性
に及ぼす影響を分離型培養装置で評価した。醸造用酵母
Ａ株とＢ株（どちらも Saccharomycescerevisiae に分
類される）を、上記の分離型混合培養装置を用い菌体同
士は分離した状態で混合培養した場合と、同一培養槽の
中で混合培養した場合で酵母増殖特性を比較した。
【００２１】糖源として、グルコース２%およびマルト
ース７%を含む完全合成培地を用いた。培養液量は３Lと
し、Ａ株、Ｂ株を培地の容量の各々０．５%と０．２５%
に植菌し、培養温度は ２７℃で、通気を行わずに攪拌
培養を行った。培養槽間での培地交換の流量は３L/hで
行った。培養中の菌数の測定は、培養液を希釈して寒天
平板培地にまき、生じたコロニー数により生菌数を算出
した。同一培養槽でＡ株とＢ株を混合培養した場合、個
々の菌株の菌数測定は、色素培地上でのＡ株とＢ株のコ
ロニーの発色の違いを利用して行った。
ース７%を含む完全合成培地を用いた。培養液量は３Lと
し、Ａ株、Ｂ株を培地の容量の各々０．５%と０．２５%
に植菌し、培養温度は ２７℃で、通気を行わずに攪拌
培養を行った。培養槽間での培地交換の流量は３L/hで
行った。培養中の菌数の測定は、培養液を希釈して寒天
平板培地にまき、生じたコロニー数により生菌数を算出
した。同一培養槽でＡ株とＢ株を混合培養した場合、個
々の菌株の菌数測定は、色素培地上でのＡ株とＢ株のコ
ロニーの発色の違いを利用して行った。
【００２２】Ａ株、Ｂ株各々の増殖挙動を図３に示す。
分離型培養装置を使用してＡ株とＢ株間の接触無しに混
合培養を行わせた場合は、両株を同一培養槽で混合培養
を行った場合に比べ、特にＢ株の増殖速度が増加してい
ることが確認された。これらの醸造用酵母２株では同一
培養槽で混合培養を行うことにより、特にＢ株の増殖量
が低下することが明らかになった。また、分離型培養装
置によって両株を培養した場合、一方の株を培養した培
養槽に他方の菌株の混入が無いことを、上記色素培地に
よって確認した。
分離型培養装置を使用してＡ株とＢ株間の接触無しに混
合培養を行わせた場合は、両株を同一培養槽で混合培養
を行った場合に比べ、特にＢ株の増殖速度が増加してい
ることが確認された。これらの醸造用酵母２株では同一
培養槽で混合培養を行うことにより、特にＢ株の増殖量
が低下することが明らかになった。また、分離型培養装
置によって両株を培養した場合、一方の株を培養した培
養槽に他方の菌株の混入が無いことを、上記色素培地に
よって確認した。
【００２３】
【発明の効果】本発明の分離型混合培養装置による細胞
の培養方法により、同一培養槽で複数種の細胞を混合培
養した場合の培養効率の低下や培養産物の生産効率の低
下を防ぐことができ、産業上極めて有用である。
の培養方法により、同一培養槽で複数種の細胞を混合培
養した場合の培養効率の低下や培養産物の生産効率の低
下を防ぐことができ、産業上極めて有用である。
【図１】 分離型混合培養装置の概略図であり、上段は
濾過モジュール１本で両培養槽を連結した場合、下段は
濾過モジュール２本で両培養槽を連結した場合を示す。 １：培養槽 ２：撹拌機 ３：セラミックフィルタ
ー ４：培養液 ６：送液チューブ ７：送液ポンプ
濾過モジュール１本で両培養槽を連結した場合、下段は
濾過モジュール２本で両培養槽を連結した場合を示す。 １：培養槽 ２：撹拌機 ３：セラミックフィルタ
ー ４：培養液 ６：送液チューブ ７：送液ポンプ
【図２】 分離型混合培養槽でのグルコース溶液の混和
状態を示すグラフであり、左側は理論値から、右側は実
験値から作成したものである。
状態を示すグラフであり、左側は理論値から、右側は実
験値から作成したものである。
【図３】 分離型混合培養装置で２種類の酵母を培養し
たときの生菌数の変化を示すグラフであり、左側はＡ株
を培養した培養槽の生菌数を、右側はＢ株を培養した培
養槽の生菌数を示している。
たときの生菌数の変化を示すグラフであり、左側はＡ株
を培養した培養槽の生菌数を、右側はＢ株を培養した培
養槽の生菌数を示している。
───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き Ｆターム(参考） 4B029 AA02 BB07 CC01 DA05 DF05 DG06 4B065 AA72X BC25
Claims (4)
- 【請求項１】 複数の培養槽を用意し、それらの間を両
端付近にセラミックフィルターを装着したチューブで連
結し、このチューブを介して、双方向に送液可能なポン
プにより培養槽内の培地のみを交互に交換することによ
って、各培養槽の細胞は混合することなしに複数種の細
胞を分離して混合培養する細胞の培養方法。 - 【請求項２】 所望の時間毎に送液方向を変えることに
より、培養している細胞によるセラミックフィルターの
目詰まりを防止することを特徴とした、請求項１に記載
の培養法。 - 【請求項３】 細胞が２種類の酵母であり、培養槽が２
つであり、その各々の培養槽で１種類の酵母を培養する
ことを特徴とする請求項１又は２記載の培養法。 - 【請求項４】 複数の培養槽、該複数の培養槽のそれぞ
れを連結する両端にセラミックフィルターを装着した送
液チューブ、該チューブに設けられた双方向に送液可能
なポンプを構成要素として含むことを特徴とする分離型
混合培養装置。
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|---|---|---|---|
| JP24263798A JP4412751B2 (ja) | 1998-08-28 | 1998-08-28 | 分離型混合培養法 |
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|---|---|---|---|
| JP24263798A JP4412751B2 (ja) | 1998-08-28 | 1998-08-28 | 分離型混合培養法 |
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| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JP2000069954A true JP2000069954A (ja) | 2000-03-07 |
| JP4412751B2 JP4412751B2 (ja) | 2010-02-10 |
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|---|---|---|---|
| JP24263798A Expired - Fee Related JP4412751B2 (ja) | 1998-08-28 | 1998-08-28 | 分離型混合培養法 |
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| JP (1) | JP4412751B2 (ja) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP2009509559A (ja) * | 2005-10-04 | 2009-03-12 | アルテリス | 細胞培養方法およびそれを実施するための装置 |
-
1998
- 1998-08-28 JP JP24263798A patent/JP4412751B2/ja not_active Expired - Fee Related
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP2009509559A (ja) * | 2005-10-04 | 2009-03-12 | アルテリス | 細胞培養方法およびそれを実施するための装置 |
| US8137959B2 (en) | 2005-10-04 | 2012-03-20 | Artelis S.A. | Method of cell cultures and device for implementing it |
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