JP2000053572A - ＯＲＬ１（ｏｐｉｏｉｄ ｏｒｐｈａｎ）受容体拮抗薬 - Google Patents
ＯＲＬ１（ｏｐｉｏｉｄ ｏｒｐｈａｎ）受容体拮抗薬Info
- Publication number
- JP2000053572A JP2000053572A JP10226850A JP22685098A JP2000053572A JP 2000053572 A JP2000053572 A JP 2000053572A JP 10226850 A JP10226850 A JP 10226850A JP 22685098 A JP22685098 A JP 22685098A JP 2000053572 A JP2000053572 A JP 2000053572A
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- carbon atoms
- hydrogen
- alkyl
- carbons
- hydroxy
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
Landscapes
- Other In-Based Heterocyclic Compounds (AREA)
- Plural Heterocyclic Compounds (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
Abstract
(57)【要約】
【解決手段】下記一般式（Ｉ）
【化１】
で表される化合物を有効成分とするＯＲＬ１受容体拮抗
薬。 【効果】本発明の化合物は、ＯＲＬ１受容体のリガンド
であるｎｏｃｉｃｅｐｔｉｎの作用に拮抗する非ペプチ
ド性ＯＲＬ１受容体拮抗薬であり、ＯＲＬ１受容体の生
理作用やその作用機序の解明に有用である。
薬。 【効果】本発明の化合物は、ＯＲＬ１受容体のリガンド
であるｎｏｃｉｃｅｐｔｉｎの作用に拮抗する非ペプチ
ド性ＯＲＬ１受容体拮抗薬であり、ＯＲＬ１受容体の生
理作用やその作用機序の解明に有用である。
Description
【０００１】
【発明の属する技術分野】本発明は、ＯＲＬ１受容体に
対する拮抗薬に関する。
対する拮抗薬に関する。
【０００２】
【従来の技術】ＯＲＬ１受容体は、オピオイド受容体の
ｃＤＮＡクローニングの過程で従来のオピオイドμ、
δ、κ受容体に高いアミノ酸配列相同性を有する受容体
として、１９９４年にＭｏｌｌｅｒｅａｕ等（Ｍｏｌｌ
ｅｒｅａｕ Ｃｅｔａｌ,Ｆ．Ｅ．Ｂ．Ｓ．Ｌｅｔｔ.，
３４３,４２−４６（１９９４））によって発見され
た。また１９９５年になり、２つのグループから相次い
でＯＲＬ１受容体に対する内因性リガンドとして、内因
性オピオイドκ受容体作動性リガンドであるｄｙｎｏｒ
ｐｈｉｎｅＡに類似した、アミノ酸残基17個からなるｎ
ｏｃｉｃｅｐｔｉｎ（Ｍｏｌｌｅｒｅａｕ等、Ｎａｔｕ
ｒｅ，３７７，５３２−５３５（１９９５））およびｏ
ｒｐｈａｎｉｎｅ ＦＱ（Ｒａｉｎｓｃｈｅｉｄ等、Ｓ
ｃｉｅｎｃｅ，２７０，７９２−７９４（１９９５））
が単離構造決定された。
ｃＤＮＡクローニングの過程で従来のオピオイドμ、
δ、κ受容体に高いアミノ酸配列相同性を有する受容体
として、１９９４年にＭｏｌｌｅｒｅａｕ等（Ｍｏｌｌ
ｅｒｅａｕ Ｃｅｔａｌ,Ｆ．Ｅ．Ｂ．Ｓ．Ｌｅｔｔ.，
３４３,４２−４６（１９９４））によって発見され
た。また１９９５年になり、２つのグループから相次い
でＯＲＬ１受容体に対する内因性リガンドとして、内因
性オピオイドκ受容体作動性リガンドであるｄｙｎｏｒ
ｐｈｉｎｅＡに類似した、アミノ酸残基17個からなるｎ
ｏｃｉｃｅｐｔｉｎ（Ｍｏｌｌｅｒｅａｕ等、Ｎａｔｕ
ｒｅ，３７７，５３２−５３５（１９９５））およびｏ
ｒｐｈａｎｉｎｅ ＦＱ（Ｒａｉｎｓｃｈｅｉｄ等、Ｓ
ｃｉｅｎｃｅ，２７０，７９２−７９４（１９９５））
が単離構造決定された。
【０００３】その後、ＯＲＬ１受容体の薬理学的機能お
よびその内因性リガンドであるｎｏｃｉｃｅｐｔｉｎの
薬理学的作用の研究が行われている。例えば、ＯＲＬ１
受容体に対する内因性リガンドであるｎｏｃｉｃｅｐｔ
ｉｎをマウスの脳室内に投与することにより、ｈｏｔ−
ｐｌａｔｅ試験およびｔａｉｌ−ｆｌｉｃｋ試験におい
て痛覚過敏現象が現れることが知られている(Ｇｒａｅ
ｍｅＨｅｎｄｅｒｓｏｎ等、Ｔｒｅｎｄｓ ｉｎ Ｐｈ
ａｒｍａｃｏｌｏｇｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅ，１８
（８），２９３−３００（１９９７）Ａｕｇ．)。ま
た、ラットの中核側坐核または視床下部腹側正中に対し
てｎｏｃｉｃｅｐｔｉｎを投与することにより、ラット
の食喰行動を促進することも知られている（Ｓｔｒａｔ
ｆｏｒｄ Ｔ．Ｒ等、Ｎｅｕｒｏｒｅｐｏｒｔ，８
(２)，４２３-６(１９９７)，ｊａｎ ２０）。また、
ラットの静脈内にｎｏｃｉｃｅｐｔｉｎを投与すること
により、心拍数、血圧および全身末梢抵抗が低下するこ
とも知られている（Ｓａｎｄｒｏ等、Ｅｕｒ．Ｊ．Ｐｈ
ａｒｍａｃｏｌ．，３３３，１７７−１７９（１９９
７）およびＨ．Ｃ．Ｃａｍｐｉｏｎ等、Ｐｅｐｔｉｄｅ
ｓ，１８，Ｎｏ．５，７２９−７３２（１９９７））。
また、モルモットから取り出した気管に対してｎｏｃｉ
ｃｅｐｔｉｎを作用させることにより、電気刺激によっ
て誘発される副交感神経からのアセチルコリンの遊離を
抑制することが知られている（Ｐａｔｅｌ Ｈ．Ｊ等、
ＢｒｉｔｉｓｈＪｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｐｈａｒｍａｃ
ｏｌｏｇｙ，１２０(５),７３５−７３６（１９９７）
Ｍａｒ）。このようにＯＲＬ１受容体およびその内因性
リガンドであるｎｏｃｉｃｅｐｔｉｎには、特異な生理
活性があることが報告されている。
よびその内因性リガンドであるｎｏｃｉｃｅｐｔｉｎの
薬理学的作用の研究が行われている。例えば、ＯＲＬ１
受容体に対する内因性リガンドであるｎｏｃｉｃｅｐｔ
ｉｎをマウスの脳室内に投与することにより、ｈｏｔ−
ｐｌａｔｅ試験およびｔａｉｌ−ｆｌｉｃｋ試験におい
て痛覚過敏現象が現れることが知られている(Ｇｒａｅ
ｍｅＨｅｎｄｅｒｓｏｎ等、Ｔｒｅｎｄｓ ｉｎ Ｐｈ
ａｒｍａｃｏｌｏｇｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅ，１８
（８），２９３−３００（１９９７）Ａｕｇ．)。ま
た、ラットの中核側坐核または視床下部腹側正中に対し
てｎｏｃｉｃｅｐｔｉｎを投与することにより、ラット
の食喰行動を促進することも知られている（Ｓｔｒａｔ
ｆｏｒｄ Ｔ．Ｒ等、Ｎｅｕｒｏｒｅｐｏｒｔ，８
(２)，４２３-６(１９９７)，ｊａｎ ２０）。また、
ラットの静脈内にｎｏｃｉｃｅｐｔｉｎを投与すること
により、心拍数、血圧および全身末梢抵抗が低下するこ
とも知られている（Ｓａｎｄｒｏ等、Ｅｕｒ．Ｊ．Ｐｈ
ａｒｍａｃｏｌ．，３３３，１７７−１７９（１９９
７）およびＨ．Ｃ．Ｃａｍｐｉｏｎ等、Ｐｅｐｔｉｄｅ
ｓ，１８，Ｎｏ．５，７２９−７３２（１９９７））。
また、モルモットから取り出した気管に対してｎｏｃｉ
ｃｅｐｔｉｎを作用させることにより、電気刺激によっ
て誘発される副交感神経からのアセチルコリンの遊離を
抑制することが知られている（Ｐａｔｅｌ Ｈ．Ｊ等、
ＢｒｉｔｉｓｈＪｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｐｈａｒｍａｃ
ｏｌｏｇｙ，１２０(５),７３５−７３６（１９９７）
Ｍａｒ）。このようにＯＲＬ１受容体およびその内因性
リガンドであるｎｏｃｉｃｅｐｔｉｎには、特異な生理
活性があることが報告されている。
【０００４】
【発明が解決しようとする課題】このようにＯＲＬ１受
容体には様々な生理活性があることが明らかになりつつ
あり、本受容体生理機構の解明およびその性質を利用し
た新規な薬剤の開発が望まれている。しかしながら、果
たしてどのような作用機序で上記のような生理活性が発
現するかについてはほとんど解明されていないのが現状
である。
容体には様々な生理活性があることが明らかになりつつ
あり、本受容体生理機構の解明およびその性質を利用し
た新規な薬剤の開発が望まれている。しかしながら、果
たしてどのような作用機序で上記のような生理活性が発
現するかについてはほとんど解明されていないのが現状
である。
【０００５】一般的にこのような新規受容体の作用機序
について調べる場合においては、その受容体に親和性を
有する拮抗薬が重要であり、特に全身投与が可能な非ペ
プチド性の拮抗薬が望ましい。しかし、ＯＲＬ１受容体
の拮抗薬として有用な化合物は未だ見出されていない。
本発明は非ペプチド性のＯＲＬ１受容体拮抗薬を提供す
ることを目的とする。
について調べる場合においては、その受容体に親和性を
有する拮抗薬が重要であり、特に全身投与が可能な非ペ
プチド性の拮抗薬が望ましい。しかし、ＯＲＬ１受容体
の拮抗薬として有用な化合物は未だ見出されていない。
本発明は非ペプチド性のＯＲＬ１受容体拮抗薬を提供す
ることを目的とする。
【０００６】
【課題を解決するための手段】本発明者らは、上記課題
を解決するために鋭意検討した結果、一般式（Ｉ）に示
す物質がＯＲＬ１受容体に対して親和性を示すと同時に
ｎｏｃｉｃｅｐｔｉｎに対して拮抗作用を示すことを見
出し、本発明を完成するに至った。
を解決するために鋭意検討した結果、一般式（Ｉ）に示
す物質がＯＲＬ１受容体に対して親和性を示すと同時に
ｎｏｃｉｃｅｐｔｉｎに対して拮抗作用を示すことを見
出し、本発明を完成するに至った。
【０００７】すなわち、本発明は一般式（Ｉ）
【化４】 ［式中、…は二重結合又は単結合を表し、Ｒ1は炭素数
１から５のアルキル、炭素数４から７のシクロアルキル
アルキル、炭素数７から１３のアラルキル、炭素数４か
ら７のアルケニル、またはアリルを表し、Ｒ2は水素、
ヒドロキシ、炭素数１から５のアルカノイルオキシ、ま
たは炭素数１から５のアルコキシを表し、Ｒ3は水素、
ヒドロキシ、炭素数１から５のアルカノイルオキシ、ま
たは炭素数１から５のアルコキシを表し、Ａは−ＸＣ
（＝Ｙ）−（ここで、ＸはＮＲ4、Ｓ、またはＯを表
し、ＹはＯを表し、Ｒ4は水素または炭素数１から５の
アルキルを表す）、−ＸＣ（＝Ｙ）Ｚ−、−Ｘ−、また
は−ＸＳＯ2−（ここで、ＸはＮＲ4、ＳまたはＯを表
し、ＹはＯまたはＳを表し、ＺはＮＲ4またはＯを表
し、Ｒ4は水素または炭素数１から５のアルキルを表
す）を表し、Ｂは原子価結合、炭素数１から１４の直鎖
もしくは分岐アルキレン、２重結合および／または３重
結合を１から３個含む炭素数２から１４の直鎖もしくは
分岐の非環状不飽和炭化水素、またはチオエーテル結
合、エーテル結合および／もしくはアミノ結合を１から
５個含む炭素数１から１４の直鎖もしくは分岐の飽和ま
たは不飽和炭化水素（ただしヘテロ原子は直接Ａに結合
することはない）を表し、Ｒ5は水素または下記の基本
骨格：
１から５のアルキル、炭素数４から７のシクロアルキル
アルキル、炭素数７から１３のアラルキル、炭素数４か
ら７のアルケニル、またはアリルを表し、Ｒ2は水素、
ヒドロキシ、炭素数１から５のアルカノイルオキシ、ま
たは炭素数１から５のアルコキシを表し、Ｒ3は水素、
ヒドロキシ、炭素数１から５のアルカノイルオキシ、ま
たは炭素数１から５のアルコキシを表し、Ａは−ＸＣ
（＝Ｙ）−（ここで、ＸはＮＲ4、Ｓ、またはＯを表
し、ＹはＯを表し、Ｒ4は水素または炭素数１から５の
アルキルを表す）、−ＸＣ（＝Ｙ）Ｚ−、−Ｘ−、また
は−ＸＳＯ2−（ここで、ＸはＮＲ4、ＳまたはＯを表
し、ＹはＯまたはＳを表し、ＺはＮＲ4またはＯを表
し、Ｒ4は水素または炭素数１から５のアルキルを表
す）を表し、Ｂは原子価結合、炭素数１から１４の直鎖
もしくは分岐アルキレン、２重結合および／または３重
結合を１から３個含む炭素数２から１４の直鎖もしくは
分岐の非環状不飽和炭化水素、またはチオエーテル結
合、エーテル結合および／もしくはアミノ結合を１から
５個含む炭素数１から１４の直鎖もしくは分岐の飽和ま
たは不飽和炭化水素（ただしヘテロ原子は直接Ａに結合
することはない）を表し、Ｒ5は水素または下記の基本
骨格：
【化５】 を持つ有機基（ただし炭素数１から５のアルキル、炭素
数１から５のアルコキシ、炭素数１から５のアルカノイ
ルオキシ、ヒドロキシ、弗素、塩素、臭素、ヨウ素、ア
ミノ、ニトロ、シアノ、イソチオシアナト、トリフルオ
ロメチル、トリフルオロメトキシ、およびメチレンジオ
キシからなる群から選ばれる少なくとも一種以上の置換
基により置換されていてもよい）を表し、Ｒ6は水素、
Ｒ7は水素、ヒドロキシ、炭素数１から５のアルコキ
シ、または炭素数１から５のアルカノイルオキシ、ある
いはＲ6とＲ7は一緒になって−Ｏ−を表し、Ｒ8は水
素、炭素数１から５のアルキルを表す。］で表される化
合物を有効成分とするＯＲＬ１受容体拮抗薬である。
数１から５のアルコキシ、炭素数１から５のアルカノイ
ルオキシ、ヒドロキシ、弗素、塩素、臭素、ヨウ素、ア
ミノ、ニトロ、シアノ、イソチオシアナト、トリフルオ
ロメチル、トリフルオロメトキシ、およびメチレンジオ
キシからなる群から選ばれる少なくとも一種以上の置換
基により置換されていてもよい）を表し、Ｒ6は水素、
Ｒ7は水素、ヒドロキシ、炭素数１から５のアルコキ
シ、または炭素数１から５のアルカノイルオキシ、ある
いはＲ6とＲ7は一緒になって−Ｏ−を表し、Ｒ8は水
素、炭素数１から５のアルキルを表す。］で表される化
合物を有効成分とするＯＲＬ１受容体拮抗薬である。
【０００８】
【発明の実施の形態】上記のように、本発明は一般式
（Ｉ）で表されるＯＲＬ１受容体に親和性を示す拮抗薬
である。
（Ｉ）で表されるＯＲＬ１受容体に親和性を示す拮抗薬
である。
【０００９】本ＯＲＬ１受容体拮抗薬の一般式（Ｉ）に
示す化合物中、Ｒ1は炭素数１から５のアルキル、炭素
数４から７のシクロアルキルアルキル、炭素数４から７
のアルケニル、またはアリルが好ましい。中でも好まし
くは、メチル、シクロプロピルメチル、またはアリルで
ある。
示す化合物中、Ｒ1は炭素数１から５のアルキル、炭素
数４から７のシクロアルキルアルキル、炭素数４から７
のアルケニル、またはアリルが好ましい。中でも好まし
くは、メチル、シクロプロピルメチル、またはアリルで
ある。
【００１０】Ｒ2としては、水素、ヒドロキシ、アセト
キシ、またはメトキシが好ましい。
キシ、またはメトキシが好ましい。
【００１１】Ｒ3としては、水素、ヒドロキシ、アセト
キシ、またはメトキシが好ましく、特にヒドロキシ、ア
セトキシ、またはメトキシが好ましい。
キシ、またはメトキシが好ましく、特にヒドロキシ、ア
セトキシ、またはメトキシが好ましい。
【００１２】Ａとしては、具体的には−ＮＲ4Ｃ（＝
Ｏ）−、−ＮＲ4Ｃ（＝Ｓ）−、−ＮＲ4Ｃ（＝Ｏ）Ｏ
−、−ＮＲ4Ｃ（＝Ｏ）ＮＲ4−、−ＮＲ4Ｃ（＝Ｓ）Ｎ
Ｒ4−、−ＮＲ4Ｃ（＝Ｏ）Ｓ−、−ＯＣ（＝Ｏ）−、−
ＯＣ（＝Ｏ）Ｏ−、−ＳＣ（＝Ｏ）−、−ＮＲ4−、−
Ｏ−、−ＮＲ4ＳＯ2−、−ＯＳＯ2−などが挙げられ
る。中でも−ＮＲ4Ｃ（＝Ｏ）−または−ＮＲ4Ｃ（＝
Ｏ）Ｏ−が好ましく、より好ましくは−ＮＲ4Ｃ（＝
Ｏ）−である。Ｒ4としては、炭素１から５の直鎖もし
くは分枝アルキル、中でもメチル、エチル、プロピル、
ブチル、またはイソブチルが好ましい。
Ｏ）−、−ＮＲ4Ｃ（＝Ｓ）−、−ＮＲ4Ｃ（＝Ｏ）Ｏ
−、−ＮＲ4Ｃ（＝Ｏ）ＮＲ4−、−ＮＲ4Ｃ（＝Ｓ）Ｎ
Ｒ4−、−ＮＲ4Ｃ（＝Ｏ）Ｓ−、−ＯＣ（＝Ｏ）−、−
ＯＣ（＝Ｏ）Ｏ−、−ＳＣ（＝Ｏ）−、−ＮＲ4−、−
Ｏ−、−ＮＲ4ＳＯ2−、−ＯＳＯ2−などが挙げられ
る。中でも−ＮＲ4Ｃ（＝Ｏ）−または−ＮＲ4Ｃ（＝
Ｏ）Ｏ−が好ましく、より好ましくは−ＮＲ4Ｃ（＝
Ｏ）−である。Ｒ4としては、炭素１から５の直鎖もし
くは分枝アルキル、中でもメチル、エチル、プロピル、
ブチル、またはイソブチルが好ましい。
【００１３】Ｂとしては、−（ＣＨ2）ｎ−（ｎ＝０〜
１０）、−ＣＨ＝ＣＨ−（ＣＨ2）ｎ−（ｎ＝０〜
４）、−Ｃ≡Ｃ−（ＣＨ2）ｎ−（ｎ＝０〜４）、−Ｃ
Ｈ2−Ｏ−、−ＣＨ2−Ｓ−、−ＣＨ＝ＣＨ−ＣＨ＝ＣＨ
−（ＣＨ2 ）ｎ−（ｎ＝０〜４）が好ましく、特に−
（ＣＨ2）ｎ −（ｎ＝１〜３）、−ＣＨ＝ＣＨ−（ＣＨ
2）ｎ−（ｎ＝０〜４）、−Ｃ≡Ｃ−（ＣＨ2）ｎ−（ｎ
＝０〜４）、−ＣＨ2−Ｏ−、−ＣＨ2−Ｓ−が好適な例
として挙げられる。中でも炭素数１から３の直鎖アルキ
レン、−ＣＨ＝ＣＨ−、−Ｃ≡Ｃ−、−ＣＨ2Ｏ−、ま
たは−ＣＨ2Ｓ−が好ましく、より好ましくは−ＣＨ＝
ＣＨ−または−Ｃ≡Ｃ−である。
１０）、−ＣＨ＝ＣＨ−（ＣＨ2）ｎ−（ｎ＝０〜
４）、−Ｃ≡Ｃ−（ＣＨ2）ｎ−（ｎ＝０〜４）、−Ｃ
Ｈ2−Ｏ−、−ＣＨ2−Ｓ−、−ＣＨ＝ＣＨ−ＣＨ＝ＣＨ
−（ＣＨ2 ）ｎ−（ｎ＝０〜４）が好ましく、特に−
（ＣＨ2）ｎ −（ｎ＝１〜３）、−ＣＨ＝ＣＨ−（ＣＨ
2）ｎ−（ｎ＝０〜４）、−Ｃ≡Ｃ−（ＣＨ2）ｎ−（ｎ
＝０〜４）、−ＣＨ2−Ｏ−、−ＣＨ2−Ｓ−が好適な例
として挙げられる。中でも炭素数１から３の直鎖アルキ
レン、−ＣＨ＝ＣＨ−、−Ｃ≡Ｃ−、−ＣＨ2Ｏ−、ま
たは−ＣＨ2Ｓ−が好ましく、より好ましくは−ＣＨ＝
ＣＨ−または−Ｃ≡Ｃ−である。
【００１４】Ｒ5としては、水素または下記の基本骨
格：
格：
【化６】 を持つ有機基（ただし炭素数１から５のアルキル、炭素
数１から５のアルコキシ、炭素数１から５のアルカノイ
ルオキシ、ヒドロキシ、弗素、塩素、臭素、アミノ、ニ
トロ、シアノ、イソチオシアナト、トリフルオロメチ
ル、トリフルオロメトキシ、およびメチレンジオキシか
らなる群から選ばれる少なくとも一種以上の置換基によ
り置換されていてもよい）が好ましい。
数１から５のアルコキシ、炭素数１から５のアルカノイ
ルオキシ、ヒドロキシ、弗素、塩素、臭素、アミノ、ニ
トロ、シアノ、イソチオシアナト、トリフルオロメチ
ル、トリフルオロメトキシ、およびメチレンジオキシか
らなる群から選ばれる少なくとも一種以上の置換基によ
り置換されていてもよい）が好ましい。
【００１５】より具体的な例としてはフェニル、４−メ
チルフェニル、３−メチルフェニル、２−メチルフェニ
ル、３，４−ジメチルフェニル、３，５−ジメルルフェ
ニル、４−メトキシフェニル、３−メトキシフェニル、
２−メトキシフェニル、３，４−ジメトキシフェニル、
４−ヒドロキシフェニル、３−ヒドロキシフェニル、
３，４−ジヒドロキシフェニル、４−フルオロフェニ
ル、３−フルオロフェニル、２−フルオロフェニル、
３，４−ジフルオロフェニル、パ−フルオロフェニル、
４−クロロフェニル、３−クロロフェニル、２−クロロ
フェニル、３，４−ジクロロフェニル、２，４−ジクロ
ロフェニル、２，４，５−トリクロロフェニル、２，
４，６−トリクロロフェニル、４−ブロモフェニル、３
−ブロモフェニル、２−ブロモフェニル、４−ニトロフ
ェニル、３−ニトロフェニル、２−ニトロフェニル、４
−アミノフェニル、３−アミノフェニル、２−アミノフ
ェニル、４−トリフルオロメチルフェニル、３−トリフ
ルオロメチルフェニル、２−トリフルオロメチルフェニ
ル、４−トリフルオロメトキシフェニル、３−トリフル
オロメトキシフェニル、２−トリフルオロメトキシフェ
ニル、３，４−メチレンジオキシフェニル、３−フラニ
ル、２−フラニル、３−チエニル、２−チエニル、シク
ロペンチル、シクロヘキシルが好ましい。
チルフェニル、３−メチルフェニル、２−メチルフェニ
ル、３，４−ジメチルフェニル、３，５−ジメルルフェ
ニル、４−メトキシフェニル、３−メトキシフェニル、
２−メトキシフェニル、３，４−ジメトキシフェニル、
４−ヒドロキシフェニル、３−ヒドロキシフェニル、
３，４−ジヒドロキシフェニル、４−フルオロフェニ
ル、３−フルオロフェニル、２−フルオロフェニル、
３，４−ジフルオロフェニル、パ−フルオロフェニル、
４−クロロフェニル、３−クロロフェニル、２−クロロ
フェニル、３，４−ジクロロフェニル、２，４−ジクロ
ロフェニル、２，４，５−トリクロロフェニル、２，
４，６−トリクロロフェニル、４−ブロモフェニル、３
−ブロモフェニル、２−ブロモフェニル、４−ニトロフ
ェニル、３−ニトロフェニル、２−ニトロフェニル、４
−アミノフェニル、３−アミノフェニル、２−アミノフ
ェニル、４−トリフルオロメチルフェニル、３−トリフ
ルオロメチルフェニル、２−トリフルオロメチルフェニ
ル、４−トリフルオロメトキシフェニル、３−トリフル
オロメトキシフェニル、２−トリフルオロメトキシフェ
ニル、３，４−メチレンジオキシフェニル、３−フラニ
ル、２−フラニル、３−チエニル、２−チエニル、シク
ロペンチル、シクロヘキシルが好ましい。
【００１６】Ｒ6は水素が好ましく、Ｒ7は水素、ヒドロ
キシ、炭素数１から５のアルコキシ、または炭素数１か
ら５のアルカノイルオキシが好ましい。また、Ｒ6とＲ7
が一緒になって−Ｏ−であるものも好ましい。
キシ、炭素数１から５のアルコキシ、または炭素数１か
ら５のアルカノイルオキシが好ましい。また、Ｒ6とＲ7
が一緒になって−Ｏ−であるものも好ましい。
【００１７】Ｒ8は水素、炭素数１から５のアルキルが
好ましい。
好ましい。
【００１８】これら一般式（Ｉ）に示すＯＲＬ１受容体
拮抗薬は、特許第２５２５５５２に示される方法に従っ
て製造することができる。
拮抗薬は、特許第２５２５５５２に示される方法に従っ
て製造することができる。
【００１９】上記ＯＲＬ１受容体拮抗薬に対する薬理学
的に好ましい酸付加塩としては、塩酸塩、硫酸塩、硝酸
塩、臭化水素酸塩、ヨウ化水素酸塩、リン酸塩等の無機
酸塩、酢酸塩、乳酸塩、クエン酸塩、シュウ酸塩、グル
タル酸塩、リンゴ酸塩、酒石酸塩、フマル酸塩、マンデ
ル酸塩、マレイン酸塩、安息香酸塩、フタル酸塩等の有
機カルボン酸塩、メタンスルホン酸塩、エタンスルホン
酸塩、ベンセンスルホン酸塩、ｐ−トルエンスルホン酸
塩、カンファ−スルホン酸塩等の有機スルホン酸塩等が
あげられ、中でも塩酸塩、マレイン酸、臭化水素酸塩、
リン酸塩、酒石酸塩、メタンスルホン酸塩等が好まれる
が、もちろんこれらに限られるものではない。
的に好ましい酸付加塩としては、塩酸塩、硫酸塩、硝酸
塩、臭化水素酸塩、ヨウ化水素酸塩、リン酸塩等の無機
酸塩、酢酸塩、乳酸塩、クエン酸塩、シュウ酸塩、グル
タル酸塩、リンゴ酸塩、酒石酸塩、フマル酸塩、マンデ
ル酸塩、マレイン酸塩、安息香酸塩、フタル酸塩等の有
機カルボン酸塩、メタンスルホン酸塩、エタンスルホン
酸塩、ベンセンスルホン酸塩、ｐ−トルエンスルホン酸
塩、カンファ−スルホン酸塩等の有機スルホン酸塩等が
あげられ、中でも塩酸塩、マレイン酸、臭化水素酸塩、
リン酸塩、酒石酸塩、メタンスルホン酸塩等が好まれる
が、もちろんこれらに限られるものではない。
【００２０】上記一般式（Ｉ）で表される化合物は、実
施例に示すようにＯＲＬ１受容体に結合し、ＯＲＬ１受
容体のリガンドであるｎｏｃｉｃｅｐｔｉｎの作用に拮
抗することから、ＯＲＬ１受容体拮抗薬として有用であ
る。これらＯＲＬ１受容体拮抗薬は、ＯＲＬ１受容体の
生理作用やその作用機序の解明のためのｉｎ ｖｉｖｏ
もしくはｉｎ ｖｉｔｒｏの実験、または細胞レベルで
の実験に用いることができる。また、ＯＲＬ１受容体を
介して起こると考えられる各種病変の治療および予防薬
の研究に有用である。例えばＯＲＬ１受容体拮抗薬は、
痛覚閾値の低下した状態の改善などに適応可能であると
考えられている。
施例に示すようにＯＲＬ１受容体に結合し、ＯＲＬ１受
容体のリガンドであるｎｏｃｉｃｅｐｔｉｎの作用に拮
抗することから、ＯＲＬ１受容体拮抗薬として有用であ
る。これらＯＲＬ１受容体拮抗薬は、ＯＲＬ１受容体の
生理作用やその作用機序の解明のためのｉｎ ｖｉｖｏ
もしくはｉｎ ｖｉｔｒｏの実験、または細胞レベルで
の実験に用いることができる。また、ＯＲＬ１受容体を
介して起こると考えられる各種病変の治療および予防薬
の研究に有用である。例えばＯＲＬ１受容体拮抗薬は、
痛覚閾値の低下した状態の改善などに適応可能であると
考えられている。
【００２１】本発明のＯＲＬ１受容体拮抗薬およびその
薬理学的に好ましい酸付加塩を臨床に用いる場合には、
担体、賦形剤などと混合した医薬組成物として、経口ま
たは非経口的に投与することができる。投与剤型として
は、注射剤、錠剤、カプセル剤、顆粒剤、散剤、シロッ
プ剤、座剤、軟膏剤、ローション剤等を挙げることがで
きる。その使用量は症状、年齢、体重、投与方法等に応
じて適宜選択されるが、成人に対して、注射剤の場合、
有効成分量として１日０．０００１ｍｇ〜１ｇであり、
経口剤の場合、０．００５ｍｇ〜３ｇであり、それぞれ
１回または数回に分けて投与することができる。
薬理学的に好ましい酸付加塩を臨床に用いる場合には、
担体、賦形剤などと混合した医薬組成物として、経口ま
たは非経口的に投与することができる。投与剤型として
は、注射剤、錠剤、カプセル剤、顆粒剤、散剤、シロッ
プ剤、座剤、軟膏剤、ローション剤等を挙げることがで
きる。その使用量は症状、年齢、体重、投与方法等に応
じて適宜選択されるが、成人に対して、注射剤の場合、
有効成分量として１日０．０００１ｍｇ〜１ｇであり、
経口剤の場合、０．００５ｍｇ〜３ｇであり、それぞれ
１回または数回に分けて投与することができる。
【００２２】
【実施例】以下、本発明を実施例に基づき、より具体的
に説明する。
に説明する。
【００２３】実施例１．［3Ｈ］ｎｏｃｉｃｅｐｔｉｎ
を用いたＯＲＬ１受容体拮抗実験 まず、ＣＨＯ細胞を１０％（ｖ／ｖ）牛胎児血清（ＦＣ
Ｓ）（Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ Ｉｎｄｕｓｔｒｉｅ
ｓ），１００Ｕ／ｍｌペニシリンＧ，１００μｇ／ｍｌ
ストレプトマイシン（ＧＢＣＯ ＢＲＬ）含有最少必須
培地α（α−ＭＥＭ）で５％ＣＯ2存在下３７℃で培養
した。
を用いたＯＲＬ１受容体拮抗実験 まず、ＣＨＯ細胞を１０％（ｖ／ｖ）牛胎児血清（ＦＣ
Ｓ）（Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ Ｉｎｄｕｓｔｒｉｅ
ｓ），１００Ｕ／ｍｌペニシリンＧ，１００μｇ／ｍｌ
ストレプトマイシン（ＧＢＣＯ ＢＲＬ）含有最少必須
培地α（α−ＭＥＭ）で５％ＣＯ2存在下３７℃で培養
した。
【００２４】また、ヒトオピオイドｏｒｐｈａｎ受容体
（ＯＲＬ１）のｃＤＮＡクローニングのために、 ヒト
ｏｒｐｈａｎ受容体の配列をＧＥＮＥＢａｎｋで調べ合
成ＤＮＡオリゴマーを設計・作製した。このＤＮＡ合成
オリゴマーをプライマーとし、ヒト脳ｃＤＮＡ（ａｍｙ
ｇｄａｌａ）（ＣＬＯＮＴＥＣＨ ｌａｂ．Ｉｎｃ）を
鋳型としてポリメラーゼ チェイン リアクション（ＰＣ
Ｒ）をおこなった。増幅したＤＮＡ断片をＴＡ ｃｌｏ
ｎｉｎｇｋｉｔ（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ Ｃｏ．Ｌｔ
ｄ）中のｐＣＲ３ベクターにライゲーションした。ライ
ゲーションはＴ４リガーゼを用い、１６℃、一晩行っ
た。その反応液の一部をＴＯＰ１０Ｆ’（コンピテント
セル）のトランスフォーメーションに用いた。トランス
フォーメーション後の大腸菌をアンピシリン添加ＬＢプ
レートにまき、３７度で一晩インキュベーションし、シ
ングルコロニーを形成させた。形成したコロニー・大腸
菌クローンを少量のＴｅｒｒｉｆｉｃ Ｂｒｏｔｈで培
養し、アルカリＳＤＳ法によりプラスミドを抽出した。
プラスミドに増幅ＤＮＡが挿入されていることを制限酵
素で切断・確認した後、ＰＣＲ増幅ＤＮＡの配列をジデ
オキシ・サンガー法により決定した。解析したＤＮＡ塩
基配列は既知の配列とアミノ酸レベルで一致した。この
ＯＲＬ１のｃＤＮＡが挿入されたｐＣＲ３ベクターをＯ
ＲＬ１／ｐＣＲ３とした。
（ＯＲＬ１）のｃＤＮＡクローニングのために、 ヒト
ｏｒｐｈａｎ受容体の配列をＧＥＮＥＢａｎｋで調べ合
成ＤＮＡオリゴマーを設計・作製した。このＤＮＡ合成
オリゴマーをプライマーとし、ヒト脳ｃＤＮＡ（ａｍｙ
ｇｄａｌａ）（ＣＬＯＮＴＥＣＨ ｌａｂ．Ｉｎｃ）を
鋳型としてポリメラーゼ チェイン リアクション（ＰＣ
Ｒ）をおこなった。増幅したＤＮＡ断片をＴＡ ｃｌｏ
ｎｉｎｇｋｉｔ（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ Ｃｏ．Ｌｔ
ｄ）中のｐＣＲ３ベクターにライゲーションした。ライ
ゲーションはＴ４リガーゼを用い、１６℃、一晩行っ
た。その反応液の一部をＴＯＰ１０Ｆ’（コンピテント
セル）のトランスフォーメーションに用いた。トランス
フォーメーション後の大腸菌をアンピシリン添加ＬＢプ
レートにまき、３７度で一晩インキュベーションし、シ
ングルコロニーを形成させた。形成したコロニー・大腸
菌クローンを少量のＴｅｒｒｉｆｉｃ Ｂｒｏｔｈで培
養し、アルカリＳＤＳ法によりプラスミドを抽出した。
プラスミドに増幅ＤＮＡが挿入されていることを制限酵
素で切断・確認した後、ＰＣＲ増幅ＤＮＡの配列をジデ
オキシ・サンガー法により決定した。解析したＤＮＡ塩
基配列は既知の配列とアミノ酸レベルで一致した。この
ＯＲＬ１のｃＤＮＡが挿入されたｐＣＲ３ベクターをＯ
ＲＬ１／ｐＣＲ３とした。
【００２５】次に、トランスフェクション用のプラスミ
ドを得るため、ＯＲＬ１／ｐＣＲ３プラスミド保持ＴＯ
Ｐ１０Ｆ’を１００ｍｌのＬＢ培地で一晩撹拌培養し
た。ＱＩＡｆｉｌｔｅｒ（ＱＩＡｇｅｎ）を用いプラス
ミドを抽出した。トランスフェクション前日、ＣＨＯ細
胞を２×１０5個／培地２ｍｌ／ｄｉｓｈとなるように
３５ｍｍ ｄｉｓｈに播種し通常の培養液で培養した。
約２０時間後、培養液を除去し、生理的リン酸緩衝液
（−）（ＰＢＳ（−））（日水製薬（株））２ｍｌで細
胞を２度洗浄し、ＦＣＳ非添加α−ＭＥＭ（１００Ｕ／
ｍｌペニシリンＧ，1１００μｇ／ｍｌストレプトマイ
シン）２ｍｌを添加した。また、ＴｒａｎｓＩＴＴＭ
Ｐｏｌｙａｍｉｎｅ Ｔｒａｎｓｆｅｃｔｉｏｎ Ｒｅａ
ｇｅｎｔ（Ｐａｎｖｅｒａ Ｃｏ．）とＯＲＬ１／ｐＣ
Ｒ３プラスミドを混合しＴｒａｎｓ ＩＴＴＭ ｒｅａｇ
ｅｎｔ／ＤＮＡ ｃｏｍｐｌｅｘを形成させた。Ｔｒａ
ｎｓ ＩＴＴＭ ｒｅａｇｅｎｔ／ＤＮＡ ｃｏｍｐｌｅ
ｘを先のＦＣＳ未添加α−ＭＥＭ中の細胞に添加し、５
％ＣＯ2存在下３７℃で４時間培養した後、通常の培養
液に置換して更に培養を続けた。３日後、細胞を継代
し、Ｇ４１８選択培地（４００μｇ／ｍｌＧ４１８，
１０％（ｖ／ｖ）ＦＣＳ， １００Ｕ／ｍｌペニシリン
Ｇ， １００μｇ／ｍｌ ストレプトマイシン含有α−Ｍ
ＥＭ培地)中で培養した。以後３日毎に培地を新鮮なＧ
４１８選択培地に入れ換えて２回生存・増殖したＯＲＬ
１受容体遺伝子導入細胞クローンを数十クローン得た。
ドを得るため、ＯＲＬ１／ｐＣＲ３プラスミド保持ＴＯ
Ｐ１０Ｆ’を１００ｍｌのＬＢ培地で一晩撹拌培養し
た。ＱＩＡｆｉｌｔｅｒ（ＱＩＡｇｅｎ）を用いプラス
ミドを抽出した。トランスフェクション前日、ＣＨＯ細
胞を２×１０5個／培地２ｍｌ／ｄｉｓｈとなるように
３５ｍｍ ｄｉｓｈに播種し通常の培養液で培養した。
約２０時間後、培養液を除去し、生理的リン酸緩衝液
（−）（ＰＢＳ（−））（日水製薬（株））２ｍｌで細
胞を２度洗浄し、ＦＣＳ非添加α−ＭＥＭ（１００Ｕ／
ｍｌペニシリンＧ，1１００μｇ／ｍｌストレプトマイ
シン）２ｍｌを添加した。また、ＴｒａｎｓＩＴＴＭ
Ｐｏｌｙａｍｉｎｅ Ｔｒａｎｓｆｅｃｔｉｏｎ Ｒｅａ
ｇｅｎｔ（Ｐａｎｖｅｒａ Ｃｏ．）とＯＲＬ１／ｐＣ
Ｒ３プラスミドを混合しＴｒａｎｓ ＩＴＴＭ ｒｅａｇ
ｅｎｔ／ＤＮＡ ｃｏｍｐｌｅｘを形成させた。Ｔｒａ
ｎｓ ＩＴＴＭ ｒｅａｇｅｎｔ／ＤＮＡ ｃｏｍｐｌｅ
ｘを先のＦＣＳ未添加α−ＭＥＭ中の細胞に添加し、５
％ＣＯ2存在下３７℃で４時間培養した後、通常の培養
液に置換して更に培養を続けた。３日後、細胞を継代
し、Ｇ４１８選択培地（４００μｇ／ｍｌＧ４１８，
１０％（ｖ／ｖ）ＦＣＳ， １００Ｕ／ｍｌペニシリン
Ｇ， １００μｇ／ｍｌ ストレプトマイシン含有α−Ｍ
ＥＭ培地)中で培養した。以後３日毎に培地を新鮮なＧ
４１８選択培地に入れ換えて２回生存・増殖したＯＲＬ
１受容体遺伝子導入細胞クローンを数十クローン得た。
【００２６】このようにして得られたクローンについ
て、ホルスコリンにより誘導されるｃＡＭＰ量の上昇を
ＯＲＬ１受容体作動薬Ｎｏｃｉｃｅｐｔｉｎ／Ｏｒｐｈ
ａｎｉｎＦＱが抑制するかどうかを調べ、抑制率の高か
ったクローン細胞を更に２回、クローン化と反応性の検
討を繰り返し、最終的にｃＡＭＰ産生抑制作用の強かっ
た細胞を選定した。
て、ホルスコリンにより誘導されるｃＡＭＰ量の上昇を
ＯＲＬ１受容体作動薬Ｎｏｃｉｃｅｐｔｉｎ／Ｏｒｐｈ
ａｎｉｎＦＱが抑制するかどうかを調べ、抑制率の高か
ったクローン細胞を更に２回、クローン化と反応性の検
討を繰り返し、最終的にｃＡＭＰ産生抑制作用の強かっ
た細胞を選定した。
【００２７】次に、ヒトＯＲＬ１受容体発現細胞を用い
た被験化合物の受容体結合試験の試験法および試験結果
を示す。
た被験化合物の受容体結合試験の試験法および試験結果
を示す。
【００２８】（１）細胞培養 ヒトＯＲＬ１受容体発現細胞（ＯＲＬ１／ＣＨＯ）は１
０％（ｖ／ｖ）ＦＣＳ，１００Ｕ／ｍｌペニシリンＧ，
１００μｇ／ｍｌストレプトマイシン含有α−ＭＥＭ培
地（ＤＮＡ，ＲＮＡ（＋））で５％ＣＯ2存在下３７℃
で培養した。なおＦＣＳは５６℃で３０分間非働化処理
した後使用した。
０％（ｖ／ｖ）ＦＣＳ，１００Ｕ／ｍｌペニシリンＧ，
１００μｇ／ｍｌストレプトマイシン含有α−ＭＥＭ培
地（ＤＮＡ，ＲＮＡ（＋））で５％ＣＯ2存在下３７℃
で培養した。なおＦＣＳは５６℃で３０分間非働化処理
した後使用した。
【００２９】（２）結合実験用ヒトＯＲＬ１受容体発現
細胞粗膜画分の調製 ＯＲＬ１／ＣＨＯを大量に培養し、細胞がほぼコンフレ
ントになった時点で細胞をセルスクレーパーを用いて回
収した。ＰＢＳ（−）に懸濁後、冷却遠心（３０００ｒ
ｐｍ）で回収した細胞を一旦凍結保存した。１５ｍＭ
Ｈｅｐｅｓ−ｂｕｆｆｅｒｅｄ ｓａｌｉｎｅ（ｐＨ
７．４）（含 １４０ｍＭ ＮａＣｌ，４．７ｍＭ ＫＣ
ｌ，２．２ｍＭ ＣａＣｌ2，１．２ｍＭ ＭｇＣｌ2，
１．２ｍＭＫＨ2ＰＯ4，１１ｍＭ Ｇｌｕｃｏｓｅ）
中、細胞をポッタ−型ホモジナイザ−を用いホモジナイ
ズした。２℃，１６０００ｘｇで２０分間遠心し、得ら
れた沈渣を同緩衝液で同ホモジナイザ−を用いて懸濁
し、上記遠心分離操作を更に２回繰り返した。得られた
沈渣を適当量の同緩衝液で懸濁し、−８０℃で保存し
た。なお標本の蛋白量は牛血製アルブミンを標準物質と
して、Ｐｒｏｔｅｉｎ Ａｓｓａｙ Ｒｅａｇｅｎｔｓ
（Ｂｉｏ−Ｒａｄ社）を用いて算出した。
細胞粗膜画分の調製 ＯＲＬ１／ＣＨＯを大量に培養し、細胞がほぼコンフレ
ントになった時点で細胞をセルスクレーパーを用いて回
収した。ＰＢＳ（−）に懸濁後、冷却遠心（３０００ｒ
ｐｍ）で回収した細胞を一旦凍結保存した。１５ｍＭ
Ｈｅｐｅｓ−ｂｕｆｆｅｒｅｄ ｓａｌｉｎｅ（ｐＨ
７．４）（含 １４０ｍＭ ＮａＣｌ，４．７ｍＭ ＫＣ
ｌ，２．２ｍＭ ＣａＣｌ2，１．２ｍＭ ＭｇＣｌ2，
１．２ｍＭＫＨ2ＰＯ4，１１ｍＭ Ｇｌｕｃｏｓｅ）
中、細胞をポッタ−型ホモジナイザ−を用いホモジナイ
ズした。２℃，１６０００ｘｇで２０分間遠心し、得ら
れた沈渣を同緩衝液で同ホモジナイザ−を用いて懸濁
し、上記遠心分離操作を更に２回繰り返した。得られた
沈渣を適当量の同緩衝液で懸濁し、−８０℃で保存し
た。なお標本の蛋白量は牛血製アルブミンを標準物質と
して、Ｐｒｏｔｅｉｎ Ａｓｓａｙ Ｒｅａｇｅｎｔｓ
（Ｂｉｏ−Ｒａｄ社）を用いて算出した。
【００３０】（３）受容体−リガンド結合試験 結合実験は１５ｍＭ Ｈｅｐｅｓ−ｂｕｆｆｅｒｅｄ
ｓａｌｉｎｅ（ｐＨ７．４）（含 １４０ｍＭ ＮａＣ
ｌ，４．７ｍＭ ＫＣｌ，２．２ｍＭ ＣａＣｌ2，
１．２ｍＭ ＭｇＣｌ2，１．２ｍＭＫＨ2ＰＯ4，１１
ｍＭ Ｇｌｕｃｏｓｅ）中で行った。結合置換試験は各
化合物または陽性対照としてＯｒｐｈａｎｉｎ ＦＱ／
Ｎｏｃｉｃｅｐｔｉｎを１０μＭ、１ｎＭ［3Ｈ］ｎｏ
ｃｉｃｅｐｔｉｎ（Ｔｙｒ１４）（ＤｕＰｏｎｔ ＮＥ
Ｎ／第一科学薬品）、膜量約１０μｇｐｒｏｔｅｉｎ／
ａｓｓａｙ ｔｕｂｅにて行った。また反応温度は２５
℃、反応時間は１時間で行った。非特異的結合はＯｒｐ
ｈａｎｉｎ ＦＱ／ｎｏｃｉｃｅｐｔｉｎ １０μＭ存
在下で求めた。また反応液が０．５ｍｌ／ｔｕｂｅとな
るように同上緩衝液で調整した。反応終了時にブランデ
ルセルハーベスターを用い反応液を吸引ろ過し、ろ過後
フィルターを氷冷した５０ｍＭ トリス塩酸緩衝液（ｐ
Ｈ７．４）で３回洗浄した。フィルタ−はＷｈａｔｍａ
ｎｎのガラス繊維濾紙を、あらかじめ０．３％（ｖ／
ｖ）ポリエチレンアミンに浸して使用した。濾過洗浄後
のフィルターとシンチレ−タ−５ｍｌ（シンチゾールＥ
Ｘ−Ｈ，同人化学）をバイアルに入れ、１２時間以上抽
出した後、結合したトリチウム体による放射活性をシン
チレーションカウンターにて測定した。その結果、図１
に示すように、（−）−１７-（シクロプロピルメチ
ル）−３，１４−β−ジヒドロキシ−４，５α−エポキ
シ−６β−［Ｎ−メチル−トランス−３−（３−フリ
ル）アクリルアミド］モルヒナン塩酸塩（化合物１と呼
称）、および（−）−１７-（シクロプロピルメチル）
−３，１４−β−ジヒドロキシ−４，５α−エポキシ−
６β−［Ｎ−メチル−３−（４−トリフルオロメチルフ
ェニル）プロピオルアミド］モルヒナンマレイン酸塩
（化合物２と呼称）を被験物質として用いた場合、それ
ぞれ６６％および６０％のｎｏｃｉｃｅｐｔｉｎに対す
る結合阻害作用が観察された。
ｓａｌｉｎｅ（ｐＨ７．４）（含 １４０ｍＭ ＮａＣ
ｌ，４．７ｍＭ ＫＣｌ，２．２ｍＭ ＣａＣｌ2，
１．２ｍＭ ＭｇＣｌ2，１．２ｍＭＫＨ2ＰＯ4，１１
ｍＭ Ｇｌｕｃｏｓｅ）中で行った。結合置換試験は各
化合物または陽性対照としてＯｒｐｈａｎｉｎ ＦＱ／
Ｎｏｃｉｃｅｐｔｉｎを１０μＭ、１ｎＭ［3Ｈ］ｎｏ
ｃｉｃｅｐｔｉｎ（Ｔｙｒ１４）（ＤｕＰｏｎｔ ＮＥ
Ｎ／第一科学薬品）、膜量約１０μｇｐｒｏｔｅｉｎ／
ａｓｓａｙ ｔｕｂｅにて行った。また反応温度は２５
℃、反応時間は１時間で行った。非特異的結合はＯｒｐ
ｈａｎｉｎ ＦＱ／ｎｏｃｉｃｅｐｔｉｎ １０μＭ存
在下で求めた。また反応液が０．５ｍｌ／ｔｕｂｅとな
るように同上緩衝液で調整した。反応終了時にブランデ
ルセルハーベスターを用い反応液を吸引ろ過し、ろ過後
フィルターを氷冷した５０ｍＭ トリス塩酸緩衝液（ｐ
Ｈ７．４）で３回洗浄した。フィルタ−はＷｈａｔｍａ
ｎｎのガラス繊維濾紙を、あらかじめ０．３％（ｖ／
ｖ）ポリエチレンアミンに浸して使用した。濾過洗浄後
のフィルターとシンチレ−タ−５ｍｌ（シンチゾールＥ
Ｘ−Ｈ，同人化学）をバイアルに入れ、１２時間以上抽
出した後、結合したトリチウム体による放射活性をシン
チレーションカウンターにて測定した。その結果、図１
に示すように、（−）−１７-（シクロプロピルメチ
ル）−３，１４−β−ジヒドロキシ−４，５α−エポキ
シ−６β−［Ｎ−メチル−トランス−３−（３−フリ
ル）アクリルアミド］モルヒナン塩酸塩（化合物１と呼
称）、および（−）−１７-（シクロプロピルメチル）
−３，１４−β−ジヒドロキシ−４，５α−エポキシ−
６β−［Ｎ−メチル−３−（４−トリフルオロメチルフ
ェニル）プロピオルアミド］モルヒナンマレイン酸塩
（化合物２と呼称）を被験物質として用いた場合、それ
ぞれ６６％および６０％のｎｏｃｉｃｅｐｔｉｎに対す
る結合阻害作用が観察された。
【００３１】実施例２．ｆｏｒｓｋｏｌｉｎ誘発、ｃＡ
ＭＰ蓄積を指標としたＯＲＬ１受容体拮抗試験 チャイニーズハムスター卵巣細胞(ＣＨＯ ｃｅｌｌ)を
１０％ウシ胎児血清、５０Ｕ／ｍｌペニシリン、５０μ
ｌ／ｍｌ硫酸ストレプトマイシンを含むＦ１２培地に
て、３７℃、５％ＣＯ2下培養した。また、ヒト前骨髄
性白血病細胞ＨＬ−６０より抽出したｔｏｔａｌＤＮＡ
を鋳型として、ＲＴ-ＰＣＲ法によりｈｕｍａｎ ｎｏｃ
ｉｃｅｐｔｉｎ受容体（ＮｏｃｉＲ）ｃＤＮＡを得た。
このようにして得られたｃＤＮＡを発現ベクターｐｃＤ
ＮＡ３（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ，Ｃａｒｌｓｂａｄ，Ｃ
Ａ，ＵＳＡ）にサブクローニングし、リポフェクチン法
によりＣＨＯ細胞にトランスフェクトした。これを５０
０μｌ／ｍｌのＧ４１８（ＧＩＢＣＯ ＢＲＬ，Ｇａｉ
ｔｈｅｒｓｂｕｒｇ，ＮＹ，ＵＳＡ）存在下で培養し、
生存するクローンをｆｏｒｓｋｏｌｉｎにより誘発され
るｃＡＭＰ蓄積に対するｎｏｃｉｃｅｐｔｉｎの抑制効
果を指標としてスクリーニングし、ｈｕｍａｎ Ｎｏｃ
ｉＲを安定的に発現する細胞株（ＣＨＯ／ＮｏｃｉＲ）
を樹立した。
ＭＰ蓄積を指標としたＯＲＬ１受容体拮抗試験 チャイニーズハムスター卵巣細胞(ＣＨＯ ｃｅｌｌ)を
１０％ウシ胎児血清、５０Ｕ／ｍｌペニシリン、５０μ
ｌ／ｍｌ硫酸ストレプトマイシンを含むＦ１２培地に
て、３７℃、５％ＣＯ2下培養した。また、ヒト前骨髄
性白血病細胞ＨＬ−６０より抽出したｔｏｔａｌＤＮＡ
を鋳型として、ＲＴ-ＰＣＲ法によりｈｕｍａｎ ｎｏｃ
ｉｃｅｐｔｉｎ受容体（ＮｏｃｉＲ）ｃＤＮＡを得た。
このようにして得られたｃＤＮＡを発現ベクターｐｃＤ
ＮＡ３（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ，Ｃａｒｌｓｂａｄ，Ｃ
Ａ，ＵＳＡ）にサブクローニングし、リポフェクチン法
によりＣＨＯ細胞にトランスフェクトした。これを５０
０μｌ／ｍｌのＧ４１８（ＧＩＢＣＯ ＢＲＬ，Ｇａｉ
ｔｈｅｒｓｂｕｒｇ，ＮＹ，ＵＳＡ）存在下で培養し、
生存するクローンをｆｏｒｓｋｏｌｉｎにより誘発され
るｃＡＭＰ蓄積に対するｎｏｃｉｃｅｐｔｉｎの抑制効
果を指標としてスクリーニングし、ｈｕｍａｎ Ｎｏｃ
ｉＲを安定的に発現する細胞株（ＣＨＯ／ＮｏｃｉＲ）
を樹立した。
【００３２】このようにして得られたＣＨＯ／Ｎｏｃｉ
Ｒを２４ｗｅｌｌプレートに１×１０5個／ｗｅｌｌの
細胞密度で播種し１２時間培養した後、ＨＥＰＥＳ−ｂ
ｕｆｆｅｒ ｓａｌｉｎｅ（１４０ｍＭ ＮａＣｌ，４．
７ｍＭ ＫＣｌ，２．２ｍＭＣａＣｌ2，１．２ｍＭ Ｍ
ｇＣｌ2，１．２ｍＭ ＫＨ2ＰＯ4，１１ｍＭ ｇｌｕｃ
ｏｓｅおよび１５ｍＭ ＨＥＰＥＳ，ｐＨ ７．４）で一
回洗浄後、ｃＡＭＰ分解酵素抑制剤である３−ｉｓｏｂ
ｕｔｙｌ−１−ｍｅｔｈｙｌｘａｎｔｈｉｎｅ（ＩＢＭ
Ｘ）１ｍＭを含む０．４５ｍｌのＨＥＰＥＳ-ｂｕｆｆ
ｅｒ ｓａｌｉｎｅ中で３７℃、１０分間プレインキュ
ベートした。ここに、種々の濃度の化合物１とｎｏｃｉ
ｃｅｐｔｉｎを同時に処置することより、ｎｏｃｉｃｅ
ｐｔｉｎの細胞内ｃＡＭＰ蓄積抑制作用に対する拮抗作
用を指標として検討した。
Ｒを２４ｗｅｌｌプレートに１×１０5個／ｗｅｌｌの
細胞密度で播種し１２時間培養した後、ＨＥＰＥＳ−ｂ
ｕｆｆｅｒ ｓａｌｉｎｅ（１４０ｍＭ ＮａＣｌ，４．
７ｍＭ ＫＣｌ，２．２ｍＭＣａＣｌ2，１．２ｍＭ Ｍ
ｇＣｌ2，１．２ｍＭ ＫＨ2ＰＯ4，１１ｍＭ ｇｌｕｃ
ｏｓｅおよび１５ｍＭ ＨＥＰＥＳ，ｐＨ ７．４）で一
回洗浄後、ｃＡＭＰ分解酵素抑制剤である３−ｉｓｏｂ
ｕｔｙｌ−１−ｍｅｔｈｙｌｘａｎｔｈｉｎｅ（ＩＢＭ
Ｘ）１ｍＭを含む０．４５ｍｌのＨＥＰＥＳ-ｂｕｆｆ
ｅｒ ｓａｌｉｎｅ中で３７℃、１０分間プレインキュ
ベートした。ここに、種々の濃度の化合物１とｎｏｃｉ
ｃｅｐｔｉｎを同時に処置することより、ｎｏｃｉｃｅ
ｐｔｉｎの細胞内ｃＡＭＰ蓄積抑制作用に対する拮抗作
用を指標として検討した。
【００３３】ｆｏｒｓｋｏｌｉｎにより誘発されるｃＡ
ＭＰ蓄積に対して、ｎｏｃｉｃｅｐｔｉｎによる抑制分
をａとし、さらに化合物１の添加よるｎｏｃｉｃｅｐｔ
ｉｎの抑制効果に対する変化分をｂとして、化合物１に
よる拮抗率を（ｂ／ａ）×１００（％）により算出した
ところ、図２に示すように、本発明の化合物１は、１０
-5Ｍの濃度で有意なｎｏｃｉｃｅｐｔｉｎに対する拮抗
作用が観察された。
ＭＰ蓄積に対して、ｎｏｃｉｃｅｐｔｉｎによる抑制分
をａとし、さらに化合物１の添加よるｎｏｃｉｃｅｐｔ
ｉｎの抑制効果に対する変化分をｂとして、化合物１に
よる拮抗率を（ｂ／ａ）×１００（％）により算出した
ところ、図２に示すように、本発明の化合物１は、１０
-5Ｍの濃度で有意なｎｏｃｉｃｅｐｔｉｎに対する拮抗
作用が観察された。
【００３４】
【発明の効果】本発明のＯＲＬ１受容体拮抗薬は、ＯＲ
Ｌ１受容体を介した各種生理作用機序の解明に有用であ
り、さらにＯＲＬ１受容体を介して起こると考えられる
各種病変の治療および予防薬の研究に有用である。
Ｌ１受容体を介した各種生理作用機序の解明に有用であ
り、さらにＯＲＬ１受容体を介して起こると考えられる
各種病変の治療および予防薬の研究に有用である。
【図１】ｎｏｃｉｃｅｐｔｉｎとＯＲＬ１受容体の結合
に対する、化合物１および２の阻害作用を示す。
に対する、化合物１および２の阻害作用を示す。
【図２】ｎｏｃｉｃｅｐｔｉｎの細胞内ｃＡＭＰ蓄積抑
制作用に対する化合物１の拮抗作用を示す。
制作用に対する化合物１の拮抗作用を示す。
───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (72)発明者 山根 深一 神奈川県鎌倉市手広1111番地 東レ株式会 社基礎研究所内 (72)発明者 鈴木 知比古 神奈川県鎌倉市手広1111番地 東レ株式会 社基礎研究所内 (72)発明者 佐藤 公道 京都府京都市左京区下鴨夜光町23−３ Ｆターム(参考） 4C034 CP05 CP13 CP17 CP22 CP23 CP24 CP31 4C063 AA01 BB08 BB09 CC15 CC75 CC76 CC80 CC82 CC92 CC94 CC96 DD12 DD14 DD15 EE01 4C086 AA01 AA02 BC30 CB09 GA02 GA04 GA07 GA08 MA01 MA04 NA14 ZA08 ZC42
Claims (3)
- 【請求項１】一般式（Ｉ） 【化１】 ［式中、…は二重結合又は単結合を表し、Ｒ1は炭素数
１から５のアルキル、炭素数４から７のシクロアルキル
アルキル、炭素数７から１３のアラルキル、炭素数４か
ら７のアルケニル、またはアリルを表し、Ｒ2は水素、
ヒドロキシ、炭素数１から５のアルカノイルオキシ、ま
たは炭素数１から５のアルコキシを表し、Ｒ3は水素、
ヒドロキシ、炭素数１から５のアルカノイルオキシ、ま
たは炭素数１から５のアルコキシを表し、Ａは−ＸＣ
（＝Ｙ）−（ここで、ＸはＮＲ4、Ｓ、またはＯを表
し、ＹはＯを表し、Ｒ4は水素または炭素数１から５の
アルキルを表す）、−ＸＣ（＝Ｙ）Ｚ−、−Ｘ−、また
は−ＸＳＯ2−（ここで、ＸはＮＲ4、ＳまたはＯを表
し、ＹはＯまたはＳを表し、ＺはＮＲ4またはＯを表
し、Ｒ4は水素または炭素数１から５のアルキルを表
す）を表し、Ｂは原子価結合、炭素数１から１４の直鎖
もしくは分岐アルキレン、２重結合および／または３重
結合を１から３個含む炭素数２から１４の直鎖もしくは
分岐の非環状不飽和炭化水素、またはチオエーテル結
合、エーテル結合および／もしくはアミノ結合を１から
５個含む炭素数１から１４の直鎖もしくは分岐の飽和ま
たは不飽和炭化水素（ただしヘテロ原子は直接Ａに結合
することはない）を表し、Ｒ5は水素または下記の基本
骨格： 【化２】 を持つ有機基（ただし炭素数１から５のアルキル、炭素
数１から５のアルコキシ、炭素数１から５のアルカノイ
ルオキシ、ヒドロキシ、弗素、塩素、臭素、ヨウ素、ア
ミノ、ニトロ、シアノ、イソチオシアナト、トリフルオ
ロメチル、トリフルオロメトキシ、およびメチレンジオ
キシからなる群から選ばれる少なくとも一種以上の置換
基により置換されていてもよい）を表し、Ｒ6は水素、
Ｒ7は水素、ヒドロキシ、炭素数１から５のアルコキ
シ、または炭素数１から５のアルカノイルオキシ、ある
いはＲ6とＲ7は一緒になって−Ｏ−を表し、Ｒ8は水
素、炭素数１から５のアルキルを表す。］で表される化
合物を有効成分とするＯＲＬ１受容体拮抗薬。 - 【請求項２】一般式（Ｉ）において、Ｒ1がメチル、シ
クロプロピルメチル、またはアリルであり、Ｒ2、Ｒ3が
各々独立して水素、ヒドロキシ、アセトキシ、またはメ
トキシであり、Ａが−ＮＲ4Ｃ（＝Ｏ）−または−ＮＲ4
Ｃ（＝Ｏ）Ｏ−（ここでＲ4は水素または炭素数１から
５のアルキルを表す）であり、Ｂが炭素数１から３の直
鎖アルキレン、−ＣＨ＝ＣＨ−、−Ｃ≡Ｃ−、−ＣＨ2
−Ｏ−、または−ＣＨ2−Ｓ−であり、Ｒ5が請求項１の
定義に同じであり、Ｒ6とＲ7が一緒になって−Ｏ−であ
り、Ｒ8が水素である請求項１記載のＯＲＬ１受容体拮
抗薬。 - 【請求項３】一般式（Ｉ）においてＲ5が下記の基本骨
格： 【化３】 を持つ有機基（ただし炭素数１から５のアルキル、炭素
数１から５のアルコキシ、炭素数１から５のアルカノイ
ルオキシ、ヒドロキシ、弗素、塩素、臭素、ヨウ素、ア
ミノ、ニトロ、シアノ、イソチオシアナト、トリフルオ
ロメチル、トリフルオロメトキシ、およびメチレンジオ
キシからなる群から選ばれる少なくとも一種以上の置換
基により置換されていてもよい）である請求項２記載の
ＯＲＬ１受容体拮抗薬。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP10226850A JP2000053572A (ja) | 1998-08-11 | 1998-08-11 | ＯＲＬ１（ｏｐｉｏｉｄ ｏｒｐｈａｎ）受容体拮抗薬 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP10226850A JP2000053572A (ja) | 1998-08-11 | 1998-08-11 | ＯＲＬ１（ｏｐｉｏｉｄ ｏｒｐｈａｎ）受容体拮抗薬 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JP2000053572A true JP2000053572A (ja) | 2000-02-22 |
Family
ID=16851554
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP10226850A Pending JP2000053572A (ja) | 1998-08-11 | 1998-08-11 | ＯＲＬ１（ｏｐｉｏｉｄ ｏｒｐｈａｎ）受容体拮抗薬 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JP2000053572A (ja) |
Cited By (8)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2008133297A1 (ja) | 2007-04-24 | 2008-11-06 | Toray Industries, Inc. | ジスキネジアの治療または予防剤 |
| WO2009044883A1 (ja) | 2007-10-05 | 2009-04-09 | Toray Industries, Inc. | モルヒナン誘導体またはその薬理学的に許容される酸付加塩を有効成分とする皮膚性状改善治療薬 |
| WO2011093441A1 (ja) | 2010-01-29 | 2011-08-04 | 東レ株式会社 | 胆道疾患の治療又は予防剤 |
| US8183256B2 (en) | 2007-06-22 | 2012-05-22 | Toray Industries, Inc. | Remedy or preventive for integration dysfunction syndrome |
| WO2012105475A1 (ja) | 2011-01-31 | 2012-08-09 | 東レ株式会社 | 悪液質の治療又は予防剤 |
| US11214577B2 (en) | 2019-03-29 | 2022-01-04 | Humanwell Pharmaceutical US | Morphinans useful for treating medical disorders |
| US11324742B2 (en) | 2018-03-08 | 2022-05-10 | Victoria Link Ltd. | Treatment of demyelinating diseases |
| US11897871B1 (en) | 2021-06-14 | 2024-02-13 | Scorpion Therapeutics, Inc. | Methods for treating cancer |
-
1998
- 1998-08-11 JP JP10226850A patent/JP2000053572A/ja active Pending
Cited By (14)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2008133297A1 (ja) | 2007-04-24 | 2008-11-06 | Toray Industries, Inc. | ジスキネジアの治療または予防剤 |
| US8183256B2 (en) | 2007-06-22 | 2012-05-22 | Toray Industries, Inc. | Remedy or preventive for integration dysfunction syndrome |
| WO2009044883A1 (ja) | 2007-10-05 | 2009-04-09 | Toray Industries, Inc. | モルヒナン誘導体またはその薬理学的に許容される酸付加塩を有効成分とする皮膚性状改善治療薬 |
| AU2011211223B2 (en) * | 2010-01-29 | 2014-10-23 | Toray Industries, Inc. | Therapeutic or prophylactic agent for biliary diseases |
| CN102711759A (zh) * | 2010-01-29 | 2012-10-03 | 东丽株式会社 | 胆道疾病的治疗或预防药 |
| WO2011093441A1 (ja) | 2010-01-29 | 2011-08-04 | 東レ株式会社 | 胆道疾患の治療又は予防剤 |
| RU2554857C2 (ru) * | 2010-01-29 | 2015-06-27 | Торэй Индастриз, Инк. | Терапевтическое или профилактическое средство для заболеваний желчных путей |
| US10131672B2 (en) | 2010-01-29 | 2018-11-20 | Toray Industries, Inc. | Therapeutic or prophylactic agent for biliary diseases |
| WO2012105475A1 (ja) | 2011-01-31 | 2012-08-09 | 東レ株式会社 | 悪液質の治療又は予防剤 |
| US9006262B2 (en) | 2011-01-31 | 2015-04-14 | Toray Industries, Inc. | Therapeutic or prophylactic agent for cachexia |
| US11324742B2 (en) | 2018-03-08 | 2022-05-10 | Victoria Link Ltd. | Treatment of demyelinating diseases |
| US11214577B2 (en) | 2019-03-29 | 2022-01-04 | Humanwell Pharmaceutical US | Morphinans useful for treating medical disorders |
| US11897871B1 (en) | 2021-06-14 | 2024-02-13 | Scorpion Therapeutics, Inc. | Methods for treating cancer |
| US12084434B2 (en) | 2021-06-14 | 2024-09-10 | Scorpion Therapeutics, Inc. | Methods for treating cancer |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| JP6779793B2 (ja) | リンパ腫を治療するためのｅｚｈ２阻害剤 | |
| Mullershausen et al. | Persistent signaling induced by FTY720-phosphate is mediated by internalized S1P1 receptors | |
| JP2023078375A (ja) | Ｓ１ｐ１活性を調節するための化合物およびその使用法 | |
| US20040096436A1 (en) | Methods for inhibiting protein kinases in cancer cells | |
| EP3685838A1 (en) | Compound for treatment or prevention of obesity or diseases related to obesity, and application thereof | |
| EP2648754A2 (en) | Methods of inhibiting metastasis from cancer | |
| US11040038B2 (en) | Methods for treating diseases associated with abnormal ACVR1 expression and ACVR1 inhibitors for use in the same | |
| US20200268766A1 (en) | Pharmaceutical compositions for treating pain | |
| BR112015026292B1 (pt) | Uso de 1-etil-7-(2-metil-6-(1h-1,2,4-triazol-3-il)piridin-3-il)-3,4-dihidropirazino [2,3-b]pirazin-2(1h)- ona e métodos in vitro | |
| JP2022527825A (ja) | 薬物送達のためのイオン液体 | |
| US7374895B2 (en) | Guanosine triphosphate (GTP) binding protein-coupled receptor proteins that bind histamine and are expressed in the brain | |
| KR20190018486A (ko) | 암의 예방 및/또는 치료를 위한 화합물, 조성물 및 방법 | |
| JP2018515594A (ja) | トリアゾール誘導体およびｐｄｅ４活性化体としてその使用 | |
| JP2005516888A (ja) | 過分極活性化型環状ヌクレオチド依存性チャンネルに標的を定めることによる疼痛の治療 | |
| JP2000053572A (ja) | ＯＲＬ１（ｏｐｉｏｉｄ ｏｒｐｈａｎ）受容体拮抗薬 | |
| EP1853316A1 (en) | Use of an antagonist of epac for treating human cardiac hypertrophy | |
| Mergler et al. | Transient receptor potential channel TRPM8 agonists stimulate calcium influx and neurotensin secretion in neuroendocrine tumor cells | |
| TW201620911A (zh) | 銜接子關聯激酶１之抑制劑、包含其之組成物、及其使用方法 | |
| CN113272294A (zh) | 2,6-双(((1h-苯并[d]咪唑-2-基)硫)甲基)吡啶和n2,n6-二苄基吡啶-2,6-二甲酰胺衍生物以及相关化合物作为磷酸肌醇3-激酶(pi3k)抑制剂用于治疗癌症 | |
| JP2009537626A (ja) | ９−ヒドロキシエリプチシン誘導体による悪性表現型の復帰変異 | |
| JP6469009B2 (ja) | がん処置用β−ヒドロキシラーゼ阻害剤 | |
| JP2014511839A (ja) | 抗癌治療薬 | |
| EP3064582A1 (en) | RESISTANT MUTANT 90 kDA HEAT SHOCK PROTEIN | |
| JP2003532724A (ja) | ソマトスタチン誘導体に親和性を有する、ヒダントイン誘導体 | |
| Mahle et al. | Melatonin receptor ligands and their potential clinical applications |