JP2000007673A - 抗マラリア活性を有する新規化合物又はその塩 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】 【課題】 抗マラリア活性を有する新規化合物質又はそ
の塩を提供する。 【解決手段】下記の一般化学式（１）で示される新規物
質又はその塩。 【化１】 尚、式中、Ｒ₁、Ｒ₂は同一又は相異なっている水素又は
炭化水素、Ｒ₃、Ｒ₄は一方が水素、他方が水酸基、アシ
ルオキシ基、又は一緒になって形成されるケト基、Ｒ₅
はアシル基又はエーテル型保護基である。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【発明の属する技術分野】本発明は、マラリア原虫類に
よる感染症の予防及び治療に有用な新規化合物又はその
塩に関するものである。

【０００２】

【従来の技術】マラリア原虫感染によって引き起こされ
るマラリアは人類最大の寄生原虫感染症である。世界保
健機構（ＷＨＯ）の最新統計によると地球上の８．３％
の人口である３億６５００万人が何のマラリア対策も立
てられない地区（主としてアフリカ）に住み、全人口の
４６％に当たる２２億１７００万人がマラリアの流行地
に居住しており、毎年、世界中で２億６７００万人もの
人々がマラリアに感染し、その内２００万人が死亡して
いる（ＷＨＯ報告）。マラリアの起因病原体は、プラス
モジウム（Ｐｌａｓｍｏｄｉｕｍ）属に属する原虫であ
り、例えば、アフリカ、アジア、ラテンアメリカの熱帯
地域全体に分布する熱帯熱マラリア原虫（Ｐ．ｆａｌｃ
ｉｐａｒｕｍ）、世界各地の熱帯と温帯の一部に分布す
る三日熱マラリア原虫（Ｐ．ｖｉｖａｘ）、主として熱
帯西アフリカに分布する卵形マラリア原虫（Ｐ．ｏｖａ
ｌｅ）及び世界各地に分布する四日熱マラリア原虫
（Ｐ．ｍａｌａｒｉａｅ）等の原虫が挙げられ、これら
の原虫がハマダラ蚊を媒介として人に感染する。それ
故、媒介者であるハマダラ蚊を殺虫剤で駆除することが
マラリア撲滅の決め手と考えられてきた。ところが殺虫
剤を広く散布したところ環境破壊を引き起こし、殺虫剤
を散布するベクターコントロールプロジェクトは破綻し
てしまった（Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒａｐｙ ｏｆ Ｐａｒ
ａｓｉｔｉｃ Ｄｉｓｅａｓｅｓ及びＭｏｄｅｒｎ Ｐ
ａｒａｓｉｔｏｌｏｇｙ）。

【０００３】また、従来マラリアは、正しい診断がなさ
れ適切な治療がなされれば完治できる疾病であるとされ
ていたが、近年、多剤耐性株がタイ国を中心に蔓延し、
マラリアの治療及び予防にはクロロキン、プリマキン、
メフロキン、ドキシサイクリン、アルテミシニン及びピ
リメサミン等が用いられているが、いかなる予防剤をも
ってしても感染からの保護を保証することはできず、多
剤耐性マラリアに唯一有効な治療薬は腎不全を引き起こ
す可能性が極めて高いキニーネであり、これが最終治療
手段として用いられているが、現在の医療水準から見て
リスクの高い治療薬である。そのため、毒性が低く、マ
ラリア感染を治療し、治療後の再燃がないような薬剤の
開発が望まれている。

【０００４】

【発明が解決しようとする課題】本発明の目的は、毒性
が低く、極めて高い抗マラリア活性を有する新規化合物
を提供することにある。

【０００５】

【課題を解決するための手段】本発明者らは、このよう
な課題を解決するために鋭意研究を重ねた結果、生薬・
常山（原植物：ジョウザンアジサイ＝Ｄｉｃｈｒｏａ
ｆｅｂｒｉｆｕｇａＬｏｕｒ．）に含まれる植物アルカ
ロイドの一種であるフェブリフギン（Ｆｅｂｒｉｆｕｇ
ｉｎｅ、化合物（２））又はイソフェブリフギン（Ｉｓ
ｏｆｅｂｒｉｆｕｇｉｎｅ、化合物（３））から誘導さ
れる新規化合物が、極めて高い抗マラリア活性を有する
ことを見いだし、本発明を完成するに至った。

【化２】

【０００６】すなわち、本発明は一般化学式（１）で表
される新規化合物（以下「本発明化合物」と称す）又は
その塩に関するものである。

【化３】 尚、式中、Ｒ_１、Ｒ₂は同一又は相異なっている水素又
は炭化水素、Ｒ₃、Ｒ₄は一方が水素、他方が水酸基、ア
シルオキシ基、又は一緒になって形成されるケト基、Ｒ
₅はアシル基又は選択的に離脱可能なエーテル型保護基
である。

【０００７】前記一般化学式において、Ｒ_１、Ｒ₂が同
一又は相異なっている炭化水素である場合、該炭化水素
は、炭素数１〜６の直鎖状又は分枝状の脂肪族炭化水
素、炭素数７〜９のアリールアルキル基、炭素数６〜１
４の芳香族炭化水素であり、Ｒ ₃、Ｒ₄の何れかがアシル
オキシ基である場合、該アシルオキシ基は、炭素数２〜
７の脂肪族アシルオキシ基、炭素数７〜１１の芳香族ア
シルオキシ基、総炭素数８〜１２のアリールアルキルカ
ルボニルオキシ基、アミノ酸の水素が離脱した残基であ
るカルボニルオキシ基であり、Ｒ₅がアシル基である場
合、該アシル基は、炭素数２〜１８の脂肪族アシル基、
炭素数７〜１１の芳香族アシル基、総炭素数８〜１２の
アリールアルキルカルボニル基、アミノ酸の水酸基が離
脱した残基であるカルボニル基であり、またＲ₅が選択
的に離脱可能なエーテル型保護基である場合、該エーテ
ル型保護基は、置換メチルエーテル型保護基、置換ベン
ジル型保護基である（Ｒ_１〜Ｒ₅について以下同じ）。

【０００８】さらにこのものにおいて、Ｒ_１、Ｒ₂の炭
化水素が炭素数１〜６の直鎖状又は分枝状の脂肪族炭化
水素である場合に、該脂肪族炭化水素は、メチル基、エ
チル基、ｎ−プロピル基、ｉ−プロピル基、ｎ−ブチル
基、ｉ−ブチル基、ｓ−ブチル基、ｔ−ブチル基、直鎖
又は各種分枝したペンチル基、直鎖又は各種分枝したヘ
キシル基等のものが例としてあげられる。また、炭化水
素が炭素数７〜１１のアリールアルキル基である場合
に、該アリールアルキル基は、ベンジル基、フェニルエ
チル基、フェニルプロピル基、ナフチルメチル基等のも
のが例としてあげられる。そしてこれらの芳香環には、
炭素数１〜６のアルキル基、ハロゲン基、ニトロ基、炭
素数１〜６のアルキルオキシ基等の各種置換基の一つま
たは複数に置換されていてもされていなくても良いもの
である。さらにまた、炭化水素が炭素数６〜１４の芳香
族炭化水素である場合、該芳香族炭化水素は、フェニル
基、ナフチル基、アントラニル基等のものが例としてあ
げられ、これらの芳香環には、炭素数１〜６のアルキル
基、ハロゲン基、ニトロ基、炭素数１〜６のアルキルオ
キシ基等の置換基の一つまたは複数に置換されていても
されていなくても良いものである。

【０００９】一方、Ｒ₃、Ｒ₄の何れかがアシルオキシ基
である場合に、該アシルオキシ基は、炭素数２〜７の脂
肪族アシルオキシ基、炭素数７〜１１の芳香族アシルオ
キシ基、総炭素数８〜１２のアリールアルキルカルボニ
ルオキシ基、アミノ酸の水素が離脱した残基であるカル
ボニルオキシ基が例としてあげられる。そしてアシルオ
キシ基が炭素数２〜７の脂肪族アシルオキシ基である場
合に、該脂肪族アシルオキシ基としては、アセチルオキ
シ基、プロピオニルオキシ基、ブチリルオキシ基、イソ
ブチリルオキシ基、バレリルオキシ基、ピバロイルオキ
シ基、ヘキサノイルオキシ基等が例としてあげられる。
また、アシルオキシ基が炭素数７〜１１の芳香族アシル
オキシ基である場合に、該芳香族アシルオキシ基として
は、ベンゾイルオキシ基、ナフトイルオキシ基等が例と
してあげられる。これらの芳香環は、炭素数１〜６のア
ルキル基、ハロゲン基、ニトロ基、炭素数１〜６のアル
キルオキシ基等の置換基の一つまたは複数に置換されて
いてもされていなくても良いものである。さらにアシル
オキシ基が総炭素数８〜１２のアリールアルキルカルボ
ニルオキシ基である場合に、該アリールアルキルカルボ
ニルオキシ基としては、フェニルアセチルオキシ基、フ
ェニルプロピオニルオキシ基、ナフチルアセチルオキシ
基等が例としてあげられる。これらの芳香環は、炭素数
１〜６のアルキル基、ハロゲン基、ニトロ基、炭素数１
〜６のアルキルオキシ基等の置換基の一つまたは複数に
置換されていてもされていなくても良いものである。さ
らにまた、アシルオキシ基がアミノ酸の水素が離脱した
残基のカルボニルオキシ基で有る場合に、該アミノ酸の
カルボニルオキシ基としては、グリシルオキシ基、アラ
ニルオキシ基、バリルオキシ基、ロイシルオキシ基、イ
ソロイシルオキシ基、β−アミノプロピオニルオキシ
基、γ−アミノブチリルオキシ基等のものが例としてあ
げられる。

【００１０】Ｒ₅がアシル基である場合、該アシル基
は、炭素数２〜１８の脂肪族アシル基、炭素数７〜１１
の芳香族アシル基、総炭素数８〜１２のアリールアルキ
ルカルボニル基、アミノ酸の水酸基が離脱した残基であ
るカルボニル基が例としてあげられる。そしてアシル基
が炭素数２〜１８の脂肪族アシル基である場合に、該脂
肪族アシル基としては、アセチル基、プロピオニル基、
ブチリル基、イソブチリル基、バレリル基、イソバレリ
ル基、ピバロイル基、ヘキサノイル基、ラウロイル基、
ミリストイル基、ステアロイル基等が例としてあげられ
る。また、アシル基が炭素数７〜１１の芳香族アシル基
である場合に、該芳香族アシル基としては、ベンゾイル
基、ナフトイル基等が例としてあげられる。これらの芳
香環は、炭素数１〜６のアルキル基、ハロゲン基、ニト
ロ基、炭素数１〜６のアルキルオキシ基等の置換基の一
つまたは複数に置換されていてもされていなくても良い
ものである。さらに、アシル基が総炭素数８〜１２のア
リールアルキルカルボニル基である場合に、該アリール
アルキルカルボニル基としては、フェニルアセチル基、
フェニルプロピオニル基、ナフチルアセチル基等が例と
してあげられる。これらの芳香環は、炭素数１〜６のア
ルキル基、ハロゲン基、ニトロ基、炭素数１〜６のアル
キルオキシ基等の置換基の一つまたは複数に置換されて
いてもされていなくても良いものである。さらに、アシ
ル基がアミノ酸の水酸基が離脱した残基のカルボニル基
である場合に、該アミノ酸のカルボニル基としては、グ
リシル基、アラニル基、バリル基、ロイシル基、イソロ
イシル基、β−アミノプロピオニル基、γ−アミノブチ
リル基等が例としてあげられる。一方、Ｒ₅が選択的に
離脱可能なエーテル型保護基である場合、該エーテル型
保護基としては、置換メチルエーテル型保護基、置換ベ
ンジル型保護基が例としてあげられる。そしてＲ₅が置
換メチルエーテル型保護基である場合に、該置換メチル
エーテル型保護基としては、メトキシメチル基、メチル
チオメチル基、ベンジルオキシメチル基、ｔ−ブトキシ
メチル基、２−メトキシエトキシメチル基等が例として
あげられる。また、置換ベンジル型保護基である場合
に、該置換ベンジル型保護基としては、ベンジル基、ｐ
−メトキシベンジル基、ｐ−ニトロベンジル基、ｐ−ハ
ロベンジル基、ｐ−シアノベンジル基等が例としてあげ
られる。

【００１１】

【発明の実施の形態】以下、本発明の実施の形態につい
て詳細に説明する。上記の一般化学式（１）で示される
本発明化合物は、前述したようにフェブリフギン又はイ
ソフェブリフギンを出発原料として簡単に調製される。
このフェブリフギン、イソフェブリフギンについては、
Ｃｈｅｍ．Ｐｈａｒｍ．Ｂｕｌｌ．，４６（１），１−
５（１９９８）にその分析データ等が詳しく掲載されて
おり、また該文献に引用されるＪ．Ａｍ．Ｃｈｅｍ．Ｓ
ｏｃ．，６９，１８３７−１８３８（１９４７）、Ｊ．
Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．，１７，１４−１８（１９５２）、
Ｊ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．，１７，１３２−１４０（１９
５２）、Ｊ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．，１８，１５３−１７
７（１９５３）、Ｊ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．，１８，１７
８−１８３（１９５３）、Ｊ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．，３
８，１９３７−１９４０（１９７３）、生薬学雑誌，４
４，２８８−２９２（１９９０）等の文献において既に
調製もされている公知の化合物であり、これらに記載さ
れる通常の方法によっても得ることもできる。そしてフ
ェブリフギン（２）又はイソフェブリフギン（３）を、
アルデヒドあるいはケトン化合物（Ｒ_１ＣＯＲ₂）とマ
ンニッヒ型の反応をさせることで、６’位が前述したよ
うな置換基Ｒ_１，Ｒ₂に置換された状態で環化縮合して
８’位の置換基Ｒ₃、Ｒ₄がケト基となった本発明化合物
の一つであるケトニルフェブリフギン（化学式（４
ａ））またはケトニルイソフェブリフギン（化学式（４
ｂ））を得ることができる。これらのものは、後述する
ようにＲ_１、Ｒ₂が何れもメチル基のもの（化学式（１
０）（１１））についてのＮＭＲ等の分析結果から、第
１０’位の水素の立体配置が異なるだけで、残りは同じ
立体配置をとるものと判断され、そこでこれらのものは
一般化学式（１ａ）として記載される。

【化４】

【００１２】さらに、一般化学式（１ａ）のものを還元
することで、Ｒ₃、Ｒ₄の何れか一方が水酸基で他方が水
素になった本発明化合物（一般化学式（５））を得るこ
とができる。また、前記一般化学式（１ａ）の１’位の
水酸基の水素を、前述したような保護基（置換基）Ｒ₅
で保護（置換）することで本発明化合物（一般化学式
（６））を得ることができ、このものをさらに還元する
ことで、Ｒ₃，Ｒ₄の何れか一方が水酸基で他方が水素に
なった本発明化合物（一般化学式（７））を得ることが
でき、さらにこの水酸基を、前述したような保護基（置
換基）Ｒ₃（またはＲ₄）で保護（置換）することで本発
明化合物（一般化学式（８））を得ることができる。さ
らに、このものを脱Ｒ₅化することで、本発明化合物
（一般化学式（９））を得ることができる。

【００１３】

【化５】

【００１４】マンニッヒ型の環化反応をさせるためのア
ルデヒド又はケトン化合物としては、ホルムアルデヒ
ド、アセトアルデヒド、プロピオンアルデヒド、ベンズ
アルデヒド、フェニルアセトアルデヒド等の各種アルデ
ヒド化合物、アセトン、メチルエチルケトン、ジエチル
ケトン、アセトフェノン等の各種ケトン化合物を用いる
ことができ、これらアルデヒド化合物、ケトン化合物の
選択により、前述したように６’位がＲ_１，Ｒ₂の置換
基で置換された一般化学式（１）の新規化合物を得るこ
とができる。そしてこれらアルデヒドまたはケトン化合
物は、単独若しくはメタノール、エタノール、クロロホ
ルム、四塩化炭素、ヘキサン等の溶媒中で反応させるこ
とになるが、これら溶媒については、前記マンニッヒ型
の環化反応を阻害しないもので有れば特に制限はない。

【００１５】本発明化合物は、フェブリフギン又はイソ
フェブリフギンを、アルデヒド又はケトン化合物の溶液
中、シリカゲル存在下で反応させ、得られた反応生成物
をシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより分離精製
することで得ることができる。また本発明化合物は、フ
ェブリフギン又はイソフェブリフギンを含むアルデヒド
又はケトン溶液を、アルデヒド又はケトン溶液にて作成
したシリカゲルカラムにのせ、原料のフェブリフギン又
はイソフェブリフギンが溶出しなくなるまでアルデヒド
又はケトン−アルコールの系によりアルコール濃度を徐
々に高くしながら溶出し、溶出液を減圧濃縮後、シリカ
ゲルカラムクロマトグラフィーで分画することによって
も得ることができる。

【００１６】本発明化合物は塩を形成していてもよく、
例えば、無機酸との塩、有機酸との塩等の薬学的に許容
される塩が用いられる。無機酸との塩としては、例え
ば、塩酸、臭化水素酸、硝酸、硫酸、りん酸等との塩が
用いられる。有機酸との塩としては、例えば、酢酸、ト
リフルオロ酢酸、マレイン酸、フマル酸、シュウ酸、酒
石酸、クエン酸、コハク酸、リンゴ酸、メタンスルホン
酸、ベンゼンスルホン酸、ｐ−トルエンスルホン酸等と
の塩が用いられる。本発明化合物を合成するための出発
原料となるフェブリフギン又はイソフェブリフギンは、
生薬・常山より通常知られた抽出、分離の手法により精
製して得ることができる。さらに、フェブリフギン又は
イソフェブリフギンは、生薬・常山以外に、アマチャ、
アジサイ等のアジサイ属の植物からも同様の方法で得る
ことができる。

【００１７】生薬・常山は、東南アジア、中国南部で樹
陰に生える常緑低木であるジョウザンアジサイ（Ｄｉｃ
ｈｒｏａ ｆｅｂｒｉｆｕｇａ Ｌｏｕｒ．）の根を日
干しにしたものであり、古くから薬用に供されている。
生薬・常山はフェブリフギン、イソフェブリフギンなど
のアルカロイドを約０．１％含み、抗マラリア作用をも
つ生薬として有名である。その有効成分はフェブリフギ
ンなどのアルカロイドであり、いくつかの動物マラリア
に対してはキニーネよりも強い作用を示すが、ヒトマラ
リアに対しては効力が弱い。また、毒性はキニーネより
もはるかに強いことが知られている。また、アマチャ
は、日本全国の山林や山中に自生する落葉低木で、葉を
発酵乾燥させたもので、甘味薬として使用される。また
アジサイは、一般に野生種を改良、育成し園芸種とした
ものである。何れもフェブリフギン、イソフェブリフギ
ン等のアルカロイドが含まれていることが知られてい
る。

【００１８】本発明化合物又はその塩を、マラリア等の
原虫類による感染症の予防及び治療に使用する場合、投
与経路としては、経口、皮下注射、静脈注射、局所投与
等のいずれでもよい。また、製剤としては、通常、製薬
的に許容される担体や賦形剤、その他添加剤を用いて製
造した散剤、錠剤、細粒剤、丸剤、カプセル剤、顆粒剤
等の経口剤、点眼剤、注射剤、坐剤等の非経口剤が挙げ
られる。製薬的に許容される担体や賦形剤、その他添加
剤としては、グルコース、ラクトース、ゼラチン、マン
ニトール、でんぷんペースト、トリケイ酸マグネシウ
ム、コーンスターチ、ケラチン、コロイド状シリカ等が
あり、さらには、安定剤、増量剤、着色剤及び芳香剤の
様な補助剤を含有してもよい。これらの製剤は、各々当
業者に公知慣用の製造方法により製造できる。本発明化
合物又はその塩の製剤中の配合量としては、０．１〜１
００重量％が好ましく、さらに好ましくは０．１〜８０
重量％であり、０．１〜５０重量％が好適である。ま
た、１日当たりの投与量は、患者の症状、体重、年齢、
性別等によって異なり一概に決定できないが、通常成人
１日当り本発明化合物を０．１〜１０００ｍｇ、好まし
くは１〜６００ｍｇを１回又は２〜４回程度に分けて投
与するのが好ましい。

【００１９】

【実施例】次に、本発明を実施例によって具体的に説明
する。

【００２０】＜フェブリフギン及びイソフェブリフギン
の抽出・精製＞生薬・常山の細片１０ｋｇをメタノール
約２０ｌに３日間浸した後、濾過し、溶媒を減圧留去し
粗抽出物１３８ｇを得た。この粗抽出物に０．１Ｍ塩酸
水溶液５００ｍｌを加え、酢酸エチル５００ｍｌで３回
抽出し、中性〜酸性画分を除いた。中性〜酸性画分を除
いた後の水層を、アンモニア水によりアルカリ性（ｐＨ
８〜９）とした後、酢酸エチル５００ｍｌで３回抽出
し、その抽出液を浴温約３０℃で溶媒を減圧留去し、粗
アルカロイド画分１５ｇを得た。この粗アルカロイド画
分を、シリカゲルカラムクロマトグラフィーに付し、ヘ
キサン−酢酸エチル（１：１）〜酢酸エチル、酢酸エチ
ル−メタノール（９：１〜１：１）の順に、溶媒の極性
を段階的に高くすることにより分画し、酢酸エチル−メ
タノール（９：１〜１：１）で溶出される画分を集め、
溶媒を減圧留去し、粗フェブリフギン及びイソフェブリ
フギンを得た。更に、シリカゲルカラムクロマトグラフ
ィー（クロロホルム−メタノール＝４９：１〜９：１）
により、分離精製を行うことにより、純粋なフェブリフ
ギン（２７ｍｇ）及びイソフェブリフギン（５０ｍｇ）
を得た。得られたフェブリフギン（２）又はイソフェブ
リフギン（３）については、質量分析、ＮＭＲ分析等の
結果により同定したが、この結果は、前記文献に記載さ
れるものと一致していることを確認し、その詳細の掲載
を省略する。

【００２１】＜実施例１＞フェブリフギン（２）からア
セトニルフェブリフギン（１０）の合成 フェブリフギン（２）６ｍｇのアセトン溶液２ｍｌにシ
リカゲル３００ｍｇを加え、室温で７時間撹拌した。反
応溶液を濾過してシリカゲルを除去した後、シリカゲル
カラムを用い、クロロホルム−メタノール（４９：１〜
１９：１）により分画し、アセトニルフェブリフギン
（１０）４．３ｍｇを得た。 アセトニルフェブリフギン（１０）の分析結果 EI-MS m/z 341[M]^{＋ １} H-NMR(500MHz,CDCl_３)δ8.30(1H,dd,J=1.3,7.9), 8.0
3(1H,s), 7.77(1H,dt,J=1.3,7.6), 7.72(1H,br.d,J=7.
9), 7.49(1H,dt,J=1.3,7.6), 6.12(1H,s), 3.52(1H,m),
3.12(1H,dt,J=11.8,3.9), 3.04(1H,dd,J=3.9,14.1),
2.77(1H,ddd,J=3.9,7.1,10.2), 2.57(1H,dd,J=10.6,14.
9), 2.35(1H,dt,J=3.4,10.6), 2.02,1.83,1.69(each l
H,m), 1.17,1.14(each 3H,s)

【化６】

【００２２】＜実施例２＞イソフェブリフギン（３）か
らアセトニルイソフェブリフギン（１１）の合成 イソフェブリフギン（３）１０ｍｇを含むアセトン溶液
１ｍｌを、シリカゲルカラムにのせ、原料のイソフェブ
リフギンが溶出しなくなるまでアセトン−メタノールの
系にてメタノール比率を徐々に高くしながら（１０：０
〜８：２）６時間以上かけて溶出し、溶出液を減圧濃縮
後、シリカゲルカラムクロマトグラフィー（クロロホル
ム−メタノール＝１０：０〜８：２）で分画することに
よってアセトニルイソフェブリフギン（１１）５．０ｍ
ｇを得た。 アセトニルイソフェブリフギン（１１）の分析結果 白色非晶質固体 EI-MS m/z 341[M]^＋ 高分解能EI-MS m/z 341.1721(m/z 341.1739 calcd. for
Ｃ_１９Ｈ_２３Ｎ_３Ｏ _３） CD(MeOH)λmax(Δε) 308.0nm(3.168), 264.2nm(3.36
6), 230.6nm(6.053), 199.8nm(-0.8909) UV(MeOH)λmax(ε) 315.8nm(1841), 304.0nm(2349), 26
5.4nm(5517), 225.6nm(19097), 201.2nm(17298), 193.2
nm(14648) IR(neat)3470(OH), 1726, 1680(C=O)cm^−１ [α]_Ｄ+212.06^○（cO.232,CHCl３)^１ H-NMR(600MHz,CDCl_３)δ8.3(1H,ddd,J=0.8,1.3,7.9,H
-5), 8.06(1H,s,H-2),7.77(1H,ddd,J=1.3,6.9,8.5,H-
7), 7.72(1H,ddd,J=0.8,1.6,8.5,H-8), 7.49(1H,ddd,J=
1.6,6.9,7.9,H-6), 6.05(1H,s,H-7'), 3.63(1H,br.s,w
Ｈ=10,H-1'), 3.18(1H,dd,J=1.1,11.1,15.9,H-9'), 3.1
6(1H,br.d,J=8.0,H-4'), 2.99(1H,ddd,J=1.8,4.8,11.1,
H-10'), 2.56(1H,dd,J=4.4,15.6,H-9'), 2.32(1H,dt,J=
3.0,10.9,H-4'), 1.94(1H,br.dd,J=3.8,13.8,H-2'), 1.
91(1H,br.tq,J=4.0,13.0,H-3'), 1.66(1H,br.d,J=13.8,
H-3'), 1.53(1H,ddt,J=2.5,5.0,13.3,H-2'), 1.16(3H,
s,H-12'), 1.13(3H,s,H-11')^１３ C-NMR(150MHz,CDCl_３)δ203.4(s,C-8'), 161.6(s,C
-4), 146.3(s,C-8), 146.2(d,C-2), 134.7(d,C-7), 12
7.5(d,C-8), 127.3(d,C-5), 127.1(d,C-6), 121.6(s,C-
4), 68.1(d,C-1'), 66.1(d,C-7'), 63.8(s,C-6'), 59.9
(d,C-10'), 45.8(t,C-4'), 42.2(t,C-9'), 30.7(t,C-
2'), 25.1(q,C-12'), 20.2(t,C-3'), 15.1(q,C-11').

【化７】

【００２３】＜実施例３＞アセトニルフェブリフギン
（１０）の合成（別法） フェブリフギン（１０ｍｇ）を用い、実施例２と同様に
してアセトニルフェブリフギン３ｍｇを得た。

【００２４】＜実施例４＞アセトニルイソフェブリフギ
ン（１１）の合成（別法） イソフェブリフギン（１０ｍｇ）を用い、実施例１と同
様にしてアセトニルイソフェブリフギン５ｍｇを得た。

【００２５】＜実施例５＞アセトニルイソフェブリフギ
ンの還元体（１２）の合成 アセトニルイソフェブリフギン（１１）５ｍｇをメタノ
ール１ｍｌに溶解し、氷冷下にて水素化硼素ナトリウム
２ｍｇを添加した。１５分間撹拌した後、反応溶液に水
１ｍｌを加え、３ｍｌの酢酸エチルで抽出した。減圧下
溶媒を留去した後、残渣を２％メタノール−クロロホル
ムを用いたアルミナカラムクロマトグラフィーにて精製
し、８’位のケト基が水酸基に還元された還元体である
８’−ヒドロキシ−アセトニルイソフェブリフギン（１
２）２ｍｇを得た。このものは、一般式（１）で示され
るＲ₃が水酸基になったα型（１２ａ）とＲ₄が水酸基に
なったβ型（１２ｂ）の混合物であるが、前記精製では
分離することはできなかった。これらの生成比は^１Ｈ−
ＮＭＲスペクトルの結果からα型：β型＝約１：９であ
ることが観測された。 ８’−ヒドロキシ−アセトニルイソフェブリフギン（１
２）の分析結果 白色針状結晶 EI-MS m/z 343 ８’−β−ヒドロキシ−アセトニルイソフェブリフギン
（１２ｂ）の^１Ｈ−ＮＭＲスペクトル分析結果^１ H-NMR(CDCl_３,300MHz)δ9.16(s), 8.32(1H,dd,J=8.0,
1.4), 7.75(1H,dd,J=8.5,1.6), 7.66(1H,d,J=8.0), 7.4
9(1H,l,J=8.0), 5.14(1H,d,J=2.2), 4.31(1H,m), 3.60
(1H,m), 3.04(1H,m), 2.94(1H,m), 2.64(1H,m), 2.44(1
H,dt,J=14.8,3.0), 2.29(1H,dt,J=11.0,3.0), 1.92(1H,
m), 1.35(3H,s), 1.03(3H,s).

【化８】

【００２６】＜実施例６＞アセトニルイソフェブリフギ
ンのアセチル化 アセトニルイソフェブリフギン（１１）１ｇを２ｍｌの
ピリジンに溶解し、氷冷下１ｇの無水酢酸を滴下した。
滴下後、室温にて６時問撹拌した後、反応溶液を酢酸エ
チルで抽出し、滅圧下、溶媒を留去した。粗生成物はシ
リカゲルカラムクロマトグラフィーによりへキサン−酢
酸エチルの混合溶媒系により精製し、１’位の水酸基の
水素がアセチル化した１’−アセチル−アセトニルイソ
フェブリフギン（１３）０．９ｇを得た。 １’−アセチル−アセトニルイソフェブリフギン（１
３）の分析結果 EI-MS 383[M]^{＋ １} H-NMR(CDCl_３,500MHz)δ8.30(1H, br.d, J=8.3), 8.0
3(1H, s), 7.78(1H, br.t, J=8.3), 7.72(1H, d, J=8.
3), 7.49(1H, t, J=8.3), 6.18(1H, s), 4.95(1H, dt,
J=6.0,2.9), 3.40(1H, br.d, J=11.9), 3.10(1H,m), 2.
83(1H,dd,J=11.9,13.0), 2.67(1H,br.t,J=8.0), 2.47(1
H,dd,J=3.6,14.8), 2.14,1.25,1.19(each3H,s)

【化９】

【００２７】＜実施例７＞アセチルアセトニルイソフェ
ブリフギン（１３）の還元 アセチルアセトニルイソフェブリフギン（１３）５．７
ｍｇを実施例５と同様、水素化硼素ナトリウム２ｍｇを
用いて還元し、シリカゲルカラムクロマトグラフィーに
て精製し、８’位のケト基が還元された８’−ヒドロキ
シ−アセチルアセトニルイソフェブリフギン（１４）を
得た。このものは前記精製の過程で、前記一般式（１）
においてＲ₃が水酸基になったα−型である８’−α−
ヒドロキシ−アセチルアセトニルイソフェブリフギン
（１４ａ）０．７ｍｇと、Ｒ₄が水酸基になったβ−型
である８’−β−ヒドロキシ−アセチルアセトニルイソ
フェブリフギン（１４ｂ）１．６ｍｇとに分離すること
ができた。 ８’−α−ヒドロキシ−アセチルアセトニルイソフェブ
リフギン（１4ａ）の分析結果 EI-MS 385[M]^{＋ １} H-NMR(CDCl_３,300MHz)δ9.97(1H,s), 8.31(1H,ddd,J=
0.4,1.7,7.8), 7.78(1H,ddd,J=1.7,6.8,8.4), 7.71(1H,
ddd,J=1.0,8.4), 7.50(1H,ddd,J=1.3,6.7,8.4), 4.93(1
H,br.s,WH=7.6), 4.84(1H,dd,J=1.5,2.5), 3.98(1H,br.
t,J=3.4), 3.09(1H,m), 3.05(1H,m), 2.20(3H,s), 1.49
(3H,s), 1.14(3H,s) ８’−β−ヒドロキシ−アセチルアセトニルイソフェブ
リフギン（１4ｂ）の分析結果 EI-MS 385[M]^{＋ １} H-NMR(CDCl_３,300MHz)δ9.10(1H,s), 8.32(1H,dd,J=
1.3,8.4), 7.75(1H,dd,J=1.6,6.7), 7.66(1H,br.d,J=7.
4), 7.49(1H,ddd,J=1.3,6.7,8.0), 5.28(1H,d,J=2.1),
4.96(1H,br.d,J=3.2), 4.31(1H,br.t,J=3.2), 3.23(1H,
br.d,J=11.6), 3.07(1H,m), 2.16(3H,s), 1.38(3H,s),
1.04(3H,s)

【化１０】

【００２８】＜実施例８＞フェブリフギンからメタナリ
ルフェブリフギン（１５）の合成 アセトンをホルムアルデヒドにした以外は実施例１と同
様に反応、精製をすることで、Ｒ_１，Ｒ₂が水素に置換
されたメタナリルフェブリフギン（１５）を合成した。 メタナリルフェブリフギンの分析結果 EI-MS 313[M]^{＋ １} H-NMR(CDCl_３,500MHz)δ8.27(1H,dd,J=1.1,8.1), 7.8
6(1H,s), 7.76(1H,ddd,J=1.5,7.0,8.1), 7.70(1H,dd,J=
0.7,8.4), 7.49(1H,ddd,J=1.5,7.0,8.4), 5.71(1H,br.d
d,J=6.5,11.5), 3.33(1H,dd,J=6.6,10.6), 3.16(1H,dd,
J=3.3,15.4), 2.92(1H,br.d,J=11.4), 2.80(1H,t,J=11.
4), 2.48(1H,dd,J=11.4,15.0), 2.25(1H,ddd,J=3.7,8.
1,11.7), 2.17(1H,dt,J=2.9,12.1), 2.06(1H,br.dq,J=1
2.5,3.2),1.77(1H,m), 1.71(1H,dt,J=12.5,6.4)

【化１１】

【００２９】＜熱帯熱マラリア原虫の培養＞本実験で
は、Ｐ．ｆａｌｃｉｐａｒｕｍ ＦＣＲ−３ ｓｔｒａ
ｉｎ（ＡＴＣＣ３０９３２）及び、Ｐ．ｆａｌｃｉｐａ
ｒｕｍ Ｈｏｎｄｕｒａｓ−１ ｓｔｒａｉｎ（ＡＴＣ
Ｃ３０９３５）の原虫を用いた。実験に用いた培地は、
濾過滅菌したＲＰＭＩ１６４０培地で、ｐＨを７．４に
合わせ、ヒト血清を１０％となるように添加した。マラ
リア原虫の培養はＯ_２濃度５％、ＣＯ_２濃度５％、Ｎ_２
濃度９０％、温度は３６．５℃で行った。ヘマトクリッ
ト値（赤血球浮遊液中に占める赤血球の体積の割合）は
５％にして用いた。培養開始時の熱帯熱マラリア原虫の
初期感染率は０．１％とした。２４穴培養プレートを用
いて培養し、培地は毎日交換し、感染率４％で植継ぎを
行った。感染率は薄層塗末標本を作成し、ギムザ染色あ
るいはＤｉｆｆ−Ｑｉｃｋ染色を行った後、顕微鏡（油
侵、１，０００×）下で計測し、マラリア原虫感染率を
下記式から算出した。 マラリア原虫感染率（％）＝｛（感染赤血球数）／（総
赤血球数）｝×１００

【００３０】＜試験例１＞マラリア原虫増殖阻害スクリ
ーニング試験 培養したマラリア原虫感染赤血球を遠心分離で集め、血
清を含む培地で洗浄を行った後、非感染赤血球を加え、
初期感染率を０．３％とした。このときのヘマトクリッ
ト値は３％とした。試験に用いる本発明化合物（アセト
ニルフェブリフギン、アセトニルイソフェブリフギン、
アセトニルイソフェブリフギンの還元体）又は陽性対照
薬（キニーネ(Quinine)、ピリメタミン(Pyrimethamin
e)、メフロキン(Mefloquine)、アルテスナート(Artesun
ate)）は、滅菌水、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（Ｄ
ＭＦ、以下同じ）、あるいはジメチルスルホキシド（Ｄ
ＭＳＯ、以下同じ）に溶解し、所定濃度の試験液とし
た。２４穴培養プレートに試験液を５〜１０μｌずつ加
えた。試験液はｄｕｐｌｉｃａｔｅあるいはｔｒｉｐｌ
ｉｃａｔｅにとった。コントロールは滅菌水、ＤＭＦ、
あるいはＤＭＳＯを１０μｌ／ウェル加えた。次に、あ
らかじめ所定濃度に調製した熱帯熱マラリア原虫培養液
を９９０〜９９５μｌずつ加え、静かにピッペッティン
グを行い培地に一様に懸濁させた。培養プレートはＣＯ
_２−Ｏ_２−Ｎ_２（５％、５％、９０％）インキュベータ
ー中で７２時間培養した後、それぞれのウェルについて
薄層塗末標本を作成し、ギムザ染色あるいはＤｉｆｆ−
Ｑｉｃｋ染色した後、顕微鏡下で観察し、試験液添加群
及びコントロールのマラリア原虫感染率を算出した。上
記で求めたマラリア原虫感染率から次式によって増殖阻
害率を算出し、５０％増殖阻害濃度（ＥＣ₅₀）を求め
る。 増殖阻害率（％）＝｛１−（ｂ−ａ）／（ｃ−ａ）｝×
１００ ａ：初期感染率 ｂ：試験液添加時の感染率 ｃ：コントロールの感染率

【００３１】＜試験例２＞マウスＦＭ３Ａ細胞増殖阻害
試験 マウス乳癌由来ＦＭ３Ａ細胞の野生株であるＦ２８−７
株を用いた。培地はＥＳ培地に非働化した胎児牛血清を
２％となるように添加し、ＣＯ_２濃度５％、３７℃で培
養した。この条件下でのＦＭ３Ａ細胞の倍加時間は約２
時間であった。前培養を行い、対数増殖期に入った細胞
を５×１０^４ｃｅｌｌｓ／ｍｌになるように培地で希釈
する。サンプルはマラリア活性測定時に調整したものを
用いた。２４穴培養プレートにサンプル溶液を５〜１０
μｌずつ加えた（培地等を加えると最終濃度は１×１０
^−４〜１×１０^−５Ｍとなった）。化合物はｄｕｐｌｉ
ｃａｔｅあるいはｔｒｉｐｌｉｃａｔｅにとり、コント
ロールとして滅菌水、ＤＭＦ、あるいはＤＭＳＯを１０
μｌ加えたウェルも同時に用意した。次に、用意してお
いた培養細胞浮遊液を９９０〜９９５μｌずつ加え、静
かにピペッティングを行い培地に一様に懸濁させた。４
８時間培養した後、それぞれのウェルについて細胞数を
セルコントローラー（ＣＣ−１０８，Ｔｏａ Ｍｅｄｉ
ｃａｌ Ｅｌｅｃｔｒｉｃｓ社製）で計数し、下記式に
より増殖率を算出し、５０％増殖阻害率（ＩＣ₅₀）を算
出した。 増殖率（％）＝｛（Ｃ−Ａ）／（Ｂ−Ａ）｝×１００ Ａ：初期細胞数 Ｂ：２日後のコントロールの細胞数 Ｃ：サンプル添加した２日後の細胞数 細胞増殖阻害活性は、サンプルを添加したウェルの細胞
数及びコントロールの細胞数から算出する。これによ
り、サンプルの細胞毒性を評価する。

【００３２】＜薬効判定＞そして熱帯熱マラリア原虫と
マウスＦＭ３Ａ細胞に対するサンプルのＥＣ₅₀値、ＩＣ
₅₀値からサンプルの抗マラリア作用を評価する。マラリ
ア原虫に対する選択毒性の指標として用いられる化学療
法係数を下記式により算出し、薬効判定を行った。 化学療法係数＝（マウスＦＭ３Ａ細胞に対するサンプル
のＩＣ₅₀値）÷（熱帯熱マラリア原虫に対するサンプル
のＥＣ₅₀値） 各サンプルについての熱帯熱マラリア原虫とマウスＦＭ
３Ａ細胞に対するサンプルのＥＣ₅₀値、ＩＣ₅₀値、並び
に化学療法係数を表１に示す。

【００３３】

【表１】 表１から明らかなように、本発明化合物は、毒性が低
く、極めて優れたマラリア原虫増殖阻害活性を有してい
る。

【００３４】

【発明の効果】本発明化合物又はその塩は抗マラリア原
虫作用を有し、マラリア等の原虫類による感染症の予防
及び治療薬として有用である。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (72)発明者 高谷 芳明 宮城県仙台市太白区大塒町19−６−205 (72)発明者 綿矢 有佑 岡山県岡山市門田屋敷２丁目２−58−102 Ｆターム(参考） 4C065 AA03 BB09 CC01 DD01 EE02 HH02 JJ03 JJ04 JJ05 KK01 LL03 PP08 PP14 4C086 AA03 CB18 NA14 ZB38

Claims (2)

【特許請求の範囲】
1. 【請求項１】下記の一般化学式（１）で示される新規物
   質又はその塩。 【化１】 尚、式中、Ｒ_１、Ｒ₂は同一又は相異なっている水素又
   は炭化水素、Ｒ₃、Ｒ₄は一方が水素、他方が水酸基、ア
   シルオキシ基、又は一緒になって形成されるケト基、Ｒ
   ₅はアシル基又は選択的に離脱可能なエーテル型保護基
   である。
2. 【請求項２】 請求項１に示される一般化学式（１）に
   おいて、Ｒ_１、Ｒ₂が同一又は相異なっている炭化水素
   である場合、該炭化水素は、炭素数１〜６の直鎖状又は
   分枝状の脂肪族炭化水素、炭素数７〜９のアリールアル
   キル基、炭素数６〜１４の芳香族炭化水素であり、
   Ｒ₃、Ｒ₄の何れかがアシルオキシ基である場合、該アシ
   ルオキシ基は、炭素数２〜７の脂肪族アシルオキシ基、
   炭素数７〜１１の芳香族アシルオキシ基、総炭素数８〜
   １２のアリールアルキルカルボニルオキシ基、アミノ酸
   の水素が離脱した残基であるカルボニルオキシ基であ
   り、Ｒ ₅がアシル基である場合、該アシル基は、炭素数
   ２〜１８の脂肪族アシル基、炭素数７〜１１の芳香族ア
   シル基、総炭素数８〜１２のアリールアルキルカルボニ
   ル基、アミノ酸の水酸基が離脱した残基であるカルボニ
   ル基であり、またＲ₅が選択的に離脱可能なエーテル型
   保護基である場合、該エーテル型保護基は、置換メチル
   エーテル型保護基、置換ベンジル型保護基である。