ITBO20080212A1 - Procedimento per l'estrazione di principi attivi ed estratto cosi ottenuto - Google Patents
Procedimento per l'estrazione di principi attivi ed estratto cosi ottenuto Download PDFInfo
- Publication number
- ITBO20080212A1 ITBO20080212A1 IT000212A ITBO20080212A ITBO20080212A1 IT BO20080212 A1 ITBO20080212 A1 IT BO20080212A1 IT 000212 A IT000212 A IT 000212A IT BO20080212 A ITBO20080212 A IT BO20080212A IT BO20080212 A1 ITBO20080212 A1 IT BO20080212A1
- Authority
- IT
- Italy
- Prior art keywords
- extract
- leaves
- polystachya
- lippia
- solvent
- Prior art date
Links
- 238000000605 extraction Methods 0.000 title claims description 13
- 239000000284 extract Substances 0.000 claims description 60
- 241001516481 Polystachya Species 0.000 claims description 36
- 241001604074 Lippia Species 0.000 claims description 34
- 235000010688 Yerba dulce Nutrition 0.000 claims description 34
- KDSWDGKIENPKLB-QJDQKFITSA-N verbascoside Chemical compound O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](C)O[C@H]1O[C@H]1[C@H](OC(=O)CCC=2C=C(O)C(O)=CC=2)[C@@H](CO)O[C@@H](OCCC=2C=C(O)C(O)=CC=2)[C@@H]1O KDSWDGKIENPKLB-QJDQKFITSA-N 0.000 claims description 29
- QFRYQWYZSQDFOS-UHFFFAOYSA-N verbascoside Natural products CC1OC(COC2C(O)C(COC3OC(C(O)C(O)C3O)C(=O)O)OC(Oc4cc(O)cc5OC(=CC(=O)c45)c6ccc(O)c(O)c6)C2O)C(O)C(O)C1O QFRYQWYZSQDFOS-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 28
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 21
- 230000003078 antioxidant effect Effects 0.000 claims description 18
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 claims description 16
- 230000012010 growth Effects 0.000 claims description 14
- 230000008569 process Effects 0.000 claims description 14
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical group CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 11
- 239000002904 solvent Substances 0.000 claims description 10
- HFPZCAJZSCWRBC-UHFFFAOYSA-N p-cymene Chemical compound CC(C)C1=CC=C(C)C=C1 HFPZCAJZSCWRBC-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 8
- 239000000047 product Substances 0.000 claims description 8
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 8
- FNMHEHXNBNCPCI-QEOJJFGVSA-N Isoacteoside Chemical compound O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](C)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](OCCC=2C=C(O)C(O)=CC=2)O[C@H](COC(=O)\C=C\C=2C=C(O)C(O)=CC=2)[C@H]1O FNMHEHXNBNCPCI-QEOJJFGVSA-N 0.000 claims description 7
- FNMHEHXNBNCPCI-RYEKTNFUSA-N isoacteoside Natural products C[C@@H]1O[C@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](COC(=O)C=Cc3ccc(O)c(O)c3)O[C@@H](OCCc4ccc(O)c(O)c4)[C@@H]2O)[C@H](O)[C@H](O)[C@H]1O FNMHEHXNBNCPCI-RYEKTNFUSA-N 0.000 claims description 7
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 claims description 6
- 239000003963 antioxidant agent Substances 0.000 claims description 6
- 235000016709 nutrition Nutrition 0.000 claims description 6
- 239000000341 volatile oil Substances 0.000 claims description 6
- 230000036642 wellbeing Effects 0.000 claims description 6
- 239000005913 Maltodextrin Substances 0.000 claims description 5
- 229920002774 Maltodextrin Polymers 0.000 claims description 5
- 239000003814 drug Substances 0.000 claims description 5
- 230000002879 macerating effect Effects 0.000 claims description 5
- 229940035034 maltodextrin Drugs 0.000 claims description 5
- GRWFGVWFFZKLTI-IUCAKERBSA-N (-)-α-pinene Chemical compound CC1=CC[C@@H]2C(C)(C)[C@H]1C2 GRWFGVWFFZKLTI-IUCAKERBSA-N 0.000 claims description 4
- RXBQNMWIQKOSCS-UHFFFAOYSA-N (7,7-dimethyl-4-bicyclo[3.1.1]hept-3-enyl)methanol Chemical compound C1C2C(C)(C)C1CC=C2CO RXBQNMWIQKOSCS-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- FAMPSKZZVDUYOS-UHFFFAOYSA-N 2,6,6,9-tetramethylcycloundeca-1,4,8-triene Chemical compound CC1=CCC(C)(C)C=CCC(C)=CCC1 FAMPSKZZVDUYOS-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- WRYLYDPHFGVWKC-UHFFFAOYSA-N 4-terpineol Chemical compound CC(C)C1(O)CCC(C)=CC1 WRYLYDPHFGVWKC-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- WEEGYLXZBRQIMU-UHFFFAOYSA-N Eucalyptol Chemical compound C1CC2CCC1(C)OC2(C)C WEEGYLXZBRQIMU-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- UAHWPYUMFXYFJY-UHFFFAOYSA-N beta-myrcene Chemical compound CC(C)=CCCC(=C)C=C UAHWPYUMFXYFJY-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- CRPUJAZIXJMDBK-UHFFFAOYSA-N camphene Chemical compound C1CC2C(=C)C(C)(C)C1C2 CRPUJAZIXJMDBK-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- ULDHMXUKGWMISQ-UHFFFAOYSA-N carvone Chemical compound CC(=C)C1CC=C(C)C(=O)C1 ULDHMXUKGWMISQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- IRAQOCYXUMOFCW-OSFYFWSMSA-N cedr-8-ene Chemical compound C1[C@]23[C@H](C)CC[C@H]3C(C)(C)[C@@H]1C(C)=CC2 IRAQOCYXUMOFCW-OSFYFWSMSA-N 0.000 claims description 4
- LNTHITQWFMADLM-UHFFFAOYSA-N gallic acid Chemical compound OC(=O)C1=CC(O)=C(O)C(O)=C1 LNTHITQWFMADLM-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 claims description 4
- FBSFWRHWHYMIOG-UHFFFAOYSA-N methyl 3,4,5-trihydroxybenzoate Chemical compound COC(=O)C1=CC(O)=C(O)C(O)=C1 FBSFWRHWHYMIOG-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims description 4
- 229930015704 phenylpropanoid Natural products 0.000 claims description 4
- NDVASEGYNIMXJL-UHFFFAOYSA-N sabinene Chemical compound C=C1CCC2(C(C)C)C1C2 NDVASEGYNIMXJL-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- 235000015872 dietary supplement Nutrition 0.000 claims description 3
- 230000003308 immunostimulating effect Effects 0.000 claims description 3
- 235000013372 meat Nutrition 0.000 claims description 3
- 125000001474 phenylpropanoid group Chemical group 0.000 claims description 3
- 150000008442 polyphenolic compounds Chemical class 0.000 claims description 3
- 235000013824 polyphenols Nutrition 0.000 claims description 3
- DTGKSKDOIYIVQL-WEDXCCLWSA-N (+)-borneol Chemical compound C1C[C@@]2(C)[C@@H](O)C[C@@H]1C2(C)C DTGKSKDOIYIVQL-WEDXCCLWSA-N 0.000 claims description 2
- NDVASEGYNIMXJL-NXEZZACHSA-N (+)-sabinene Natural products C=C1CC[C@@]2(C(C)C)[C@@H]1C2 NDVASEGYNIMXJL-NXEZZACHSA-N 0.000 claims description 2
- 229930007105 (-)-alpha-thujone Natural products 0.000 claims description 2
- REPVLJRCJUVQFA-UHFFFAOYSA-N (-)-isopinocampheol Natural products C1C(O)C(C)C2C(C)(C)C1C2 REPVLJRCJUVQFA-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- DSSYKIVIOFKYAU-XCBNKYQSSA-N (R)-camphor Chemical compound C1C[C@@]2(C)C(=O)C[C@@H]1C2(C)C DSSYKIVIOFKYAU-XCBNKYQSSA-N 0.000 claims description 2
- WUOACPNHFRMFPN-SECBINFHSA-N (S)-(-)-alpha-terpineol Chemical compound CC1=CC[C@@H](C(C)(C)O)CC1 WUOACPNHFRMFPN-SECBINFHSA-N 0.000 claims description 2
- WRYLYDPHFGVWKC-SNVBAGLBSA-N 4-Terpineol Natural products CC(C)[C@]1(O)CCC(C)=CC1 WRYLYDPHFGVWKC-SNVBAGLBSA-N 0.000 claims description 2
- KMRMUZKLFIEVAO-UHFFFAOYSA-N 7,7-dimethylbicyclo[3.1.1]hept-3-ene-4-carbaldehyde Chemical compound C1C2C(C)(C)C1CC=C2C=O KMRMUZKLFIEVAO-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 239000005973 Carvone Substances 0.000 claims description 2
- 241000723346 Cinnamomum camphora Species 0.000 claims description 2
- KMRMUZKLFIEVAO-RKDXNWHRSA-N Myrtenal Natural products C1[C@H]2C(C)(C)[C@@H]1CC=C2C=O KMRMUZKLFIEVAO-RKDXNWHRSA-N 0.000 claims description 2
- RXBQNMWIQKOSCS-RKDXNWHRSA-N Myrtenol Natural products C1[C@H]2C(C)(C)[C@@H]1CC=C2CO RXBQNMWIQKOSCS-RKDXNWHRSA-N 0.000 claims description 2
- PXRCIOIWVGAZEP-UHFFFAOYSA-N Primaeres Camphenhydrat Natural products C1CC2C(O)(C)C(C)(C)C1C2 PXRCIOIWVGAZEP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- KMJLGCYDCCCRHH-UHFFFAOYSA-N Spathulenol Natural products CC1(O)CCC2(C)C1C3C(CCC2=C)C3(C)C KMJLGCYDCCCRHH-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 241001073567 Verbenaceae Species 0.000 claims description 2
- XCPQUQHBVVXMRQ-UHFFFAOYSA-N alpha-Fenchene Natural products C1CC2C(=C)CC1C2(C)C XCPQUQHBVVXMRQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- OVKDFILSBMEKLT-UHFFFAOYSA-N alpha-Terpineol Natural products CC(=C)C1(O)CCC(C)=CC1 OVKDFILSBMEKLT-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- PSVBPLKYDMHILE-UHFFFAOYSA-N alpha-humulene Natural products CC1=C/CC(C)(C)C=CCC=CCC1 PSVBPLKYDMHILE-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- VYBREYKSZAROCT-UHFFFAOYSA-N alpha-myrcene Natural products CC(=C)CCCC(=C)C=C VYBREYKSZAROCT-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- MVNCAPSFBDBCGF-UHFFFAOYSA-N alpha-pinene Natural products CC1=CCC23C1CC2C3(C)C MVNCAPSFBDBCGF-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 229940088601 alpha-terpineol Drugs 0.000 claims description 2
- KQAZVFVOEIRWHN-UHFFFAOYSA-N alpha-thujene Natural products CC1=CCC2(C(C)C)C1C2 KQAZVFVOEIRWHN-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- USMNOWBWPHYOEA-UHFFFAOYSA-N alpha-thujone Natural products CC1C(=O)CC2(C(C)C)C1C2 USMNOWBWPHYOEA-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 230000003110 anti-inflammatory effect Effects 0.000 claims description 2
- CKDOCTFBFTVPSN-UHFFFAOYSA-N borneol Natural products C1CC2(C)C(C)CC1C2(C)C CKDOCTFBFTVPSN-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 229940116229 borneol Drugs 0.000 claims description 2
- 229930006739 camphene Natural products 0.000 claims description 2
- ZYPYEBYNXWUCEA-UHFFFAOYSA-N camphenilone Natural products C1CC2C(=O)C(C)(C)C1C2 ZYPYEBYNXWUCEA-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 229930008380 camphor Natural products 0.000 claims description 2
- 229960000846 camphor Drugs 0.000 claims description 2
- 229940117948 caryophyllene Drugs 0.000 claims description 2
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 claims description 2
- IRAQOCYXUMOFCW-UHFFFAOYSA-N di-epi-alpha-cedrene Natural products C1C23C(C)CCC3C(C)(C)C1C(C)=CC2 IRAQOCYXUMOFCW-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- AZOCECCLWFDTAP-RKDXNWHRSA-N dihydrocarvone Natural products C[C@@H]1CC[C@@H](C(C)=C)CC1=O AZOCECCLWFDTAP-RKDXNWHRSA-N 0.000 claims description 2
- DTGKSKDOIYIVQL-UHFFFAOYSA-N dl-isoborneol Natural products C1CC2(C)C(O)CC1C2(C)C DTGKSKDOIYIVQL-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- FRMCCTDTYSRUBE-HYFYGGESSA-N ent-spathulenol Chemical compound C1CC(=C)[C@H]2CC[C@@](C)(O)[C@@H]2[C@H]2C(C)(C)[C@H]21 FRMCCTDTYSRUBE-HYFYGGESSA-N 0.000 claims description 2
- 229940074391 gallic acid Drugs 0.000 claims description 2
- 235000004515 gallic acid Nutrition 0.000 claims description 2
- 229960001438 immunostimulant agent Drugs 0.000 claims description 2
- 239000003022 immunostimulating agent Substances 0.000 claims description 2
- 238000002803 maceration Methods 0.000 claims description 2
- IBKQQKPQRYUGBJ-UHFFFAOYSA-N methyl gallate Natural products CC(=O)C1=CC(O)=C(O)C(O)=C1 IBKQQKPQRYUGBJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 235000013336 milk Nutrition 0.000 claims description 2
- 239000008267 milk Substances 0.000 claims description 2
- 210000004080 milk Anatomy 0.000 claims description 2
- GRWFGVWFFZKLTI-UHFFFAOYSA-N rac-alpha-Pinene Natural products CC1=CCC2C(C)(C)C1C2 GRWFGVWFFZKLTI-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 229930006696 sabinene Natural products 0.000 claims description 2
- GCRTVIUGJCJVDD-IUCAKERBSA-N trans-Dihydrocarvone Chemical compound CC(C)[C@H]1CC[C@H](C)C(=O)C1 GCRTVIUGJCJVDD-IUCAKERBSA-N 0.000 claims description 2
- KXSDPILWMGFJMM-UHFFFAOYSA-N trans-sabinene hydrate Natural products CC1(O)CCC2(C(C)C)C1C2 KXSDPILWMGFJMM-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 238000002604 ultrasonography Methods 0.000 claims description 2
- USMNOWBWPHYOEA-MRTMQBJTSA-N α-thujone Chemical compound O=C([C@@H]1C)C[C@@]2(C(C)C)[C@@H]1C2 USMNOWBWPHYOEA-MRTMQBJTSA-N 0.000 claims description 2
- 238000002156 mixing Methods 0.000 claims 4
- 239000002537 cosmetic Substances 0.000 claims 1
- 238000001035 drying Methods 0.000 claims 1
- 239000003755 preservative agent Substances 0.000 claims 1
- 230000002335 preservative effect Effects 0.000 claims 1
- 230000003068 static effect Effects 0.000 claims 1
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 23
- 238000011282 treatment Methods 0.000 description 15
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 13
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 13
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 10
- 230000002225 anti-radical effect Effects 0.000 description 10
- 235000005911 diet Nutrition 0.000 description 9
- 210000003205 muscle Anatomy 0.000 description 7
- GVJHHUAWPYXKBD-UHFFFAOYSA-N (±)-α-Tocopherol Chemical compound OC1=C(C)C(C)=C2OC(CCCC(C)CCCC(C)CCCC(C)C)(C)CCC2=C1C GVJHHUAWPYXKBD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 210000003022 colostrum Anatomy 0.000 description 6
- 235000021277 colostrum Nutrition 0.000 description 6
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 6
- 241000282887 Suidae Species 0.000 description 5
- GLEVLJDDWXEYCO-UHFFFAOYSA-N Trolox Chemical compound O1C(C)(C(O)=O)CCC2=C1C(C)=C(C)C(O)=C2C GLEVLJDDWXEYCO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 235000006708 antioxidants Nutrition 0.000 description 5
- 230000037213 diet Effects 0.000 description 5
- 235000013305 food Nutrition 0.000 description 5
- 230000010354 integration Effects 0.000 description 5
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 5
- 241000287828 Gallus gallus Species 0.000 description 4
- HVYWMOMLDIMFJA-DPAQBDIFSA-N cholesterol Chemical compound C1C=C2C[C@@H](O)CC[C@]2(C)[C@@H]2[C@@H]1[C@@H]1CC[C@H]([C@H](C)CCCC(C)C)[C@@]1(C)CC2 HVYWMOMLDIMFJA-DPAQBDIFSA-N 0.000 description 4
- 230000007123 defense Effects 0.000 description 4
- 230000000378 dietary effect Effects 0.000 description 4
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 4
- 235000012631 food intake Nutrition 0.000 description 4
- 239000012071 phase Substances 0.000 description 4
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 4
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 229930003427 Vitamin E Natural products 0.000 description 3
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 3
- 238000010411 cooking Methods 0.000 description 3
- WIGCFUFOHFEKBI-UHFFFAOYSA-N gamma-tocopherol Natural products CC(C)CCCC(C)CCCC(C)CCCC1CCC2C(C)C(O)C(C)C(C)C2O1 WIGCFUFOHFEKBI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 230000002519 immonomodulatory effect Effects 0.000 description 3
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 3
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 3
- 230000004044 response Effects 0.000 description 3
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 3
- 235000019165 vitamin E Nutrition 0.000 description 3
- 229940046009 vitamin E Drugs 0.000 description 3
- 239000011709 vitamin E Substances 0.000 description 3
- LXEKPEMOWBOYRF-QDBORUFSSA-N AAPH Chemical compound Cl.Cl.NC(=N)C(C)(C)\N=N\C(C)(C)C(N)=N LXEKPEMOWBOYRF-QDBORUFSSA-N 0.000 description 2
- 238000002965 ELISA Methods 0.000 description 2
- 206010018910 Haemolysis Diseases 0.000 description 2
- OJMMVQQUTAEWLP-UHFFFAOYSA-N Lincomycin Natural products CN1CC(CCC)CC1C(=O)NC(C(C)O)C1C(O)C(O)C(O)C(SC)O1 OJMMVQQUTAEWLP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- LRHPLDYGYMQRHN-UHFFFAOYSA-N N-Butanol Chemical compound CCCCO LRHPLDYGYMQRHN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 2
- 235000021052 average daily weight gain Nutrition 0.000 description 2
- 235000012000 cholesterol Nutrition 0.000 description 2
- 230000034994 death Effects 0.000 description 2
- 238000010586 diagram Methods 0.000 description 2
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 2
- 230000009246 food effect Effects 0.000 description 2
- 230000008588 hemolysis Effects 0.000 description 2
- 210000000987 immune system Anatomy 0.000 description 2
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 2
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 2
- 230000006651 lactation Effects 0.000 description 2
- OJMMVQQUTAEWLP-KIDUDLJLSA-N lincomycin Chemical compound CN1C[C@H](CCC)C[C@H]1C(=O)N[C@H]([C@@H](C)O)[C@@H]1[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](SC)O1 OJMMVQQUTAEWLP-KIDUDLJLSA-N 0.000 description 2
- 229960005287 lincomycin Drugs 0.000 description 2
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 2
- 230000036542 oxidative stress Effects 0.000 description 2
- 230000035935 pregnancy Effects 0.000 description 2
- 230000003244 pro-oxidative effect Effects 0.000 description 2
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 2
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 2
- 238000003307 slaughter Methods 0.000 description 2
- 238000001694 spray drying Methods 0.000 description 2
- 238000001256 steam distillation Methods 0.000 description 2
- 230000009469 supplementation Effects 0.000 description 2
- NDAJNMAAXXIADY-UHFFFAOYSA-N 2-methylpropanimidamide Chemical compound CC(C)C(N)=N NDAJNMAAXXIADY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000001381 Arachidonate 5-Lipoxygenase Human genes 0.000 description 1
- 108010093579 Arachidonate 5-lipoxygenase Proteins 0.000 description 1
- 206010011224 Cough Diseases 0.000 description 1
- 108060003951 Immunoglobulin Proteins 0.000 description 1
- 238000012404 In vitro experiment Methods 0.000 description 1
- 102000004895 Lipoproteins Human genes 0.000 description 1
- 108090001030 Lipoproteins Proteins 0.000 description 1
- 102000011779 Nitric Oxide Synthase Type II Human genes 0.000 description 1
- 108010076864 Nitric Oxide Synthase Type II Proteins 0.000 description 1
- 102000003923 Protein Kinase C Human genes 0.000 description 1
- 108090000315 Protein Kinase C Proteins 0.000 description 1
- 206010037660 Pyrexia Diseases 0.000 description 1
- 102100029469 WD repeat and HMG-box DNA-binding protein 1 Human genes 0.000 description 1
- 101710097421 WD repeat and HMG-box DNA-binding protein 1 Proteins 0.000 description 1
- 230000009471 action Effects 0.000 description 1
- 230000016571 aggressive behavior Effects 0.000 description 1
- 230000003698 anagen phase Effects 0.000 description 1
- 238000000540 analysis of variance Methods 0.000 description 1
- 238000010171 animal model Methods 0.000 description 1
- 230000000844 anti-bacterial effect Effects 0.000 description 1
- 230000001093 anti-cancer Effects 0.000 description 1
- 230000001430 anti-depressive effect Effects 0.000 description 1
- 230000001518 anti-nephritic effect Effects 0.000 description 1
- 230000000840 anti-viral effect Effects 0.000 description 1
- 230000006851 antioxidant defense Effects 0.000 description 1
- 239000002249 anxiolytic agent Substances 0.000 description 1
- 230000000949 anxiolytic effect Effects 0.000 description 1
- 238000003782 apoptosis assay Methods 0.000 description 1
- 230000006907 apoptotic process Effects 0.000 description 1
- 239000006286 aqueous extract Substances 0.000 description 1
- 239000008346 aqueous phase Substances 0.000 description 1
- 230000006399 behavior Effects 0.000 description 1
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 1
- 210000000601 blood cell Anatomy 0.000 description 1
- 244000144987 brood Species 0.000 description 1
- 230000003177 cardiotonic effect Effects 0.000 description 1
- 230000030833 cell death Effects 0.000 description 1
- 230000003915 cell function Effects 0.000 description 1
- 230000006037 cell lysis Effects 0.000 description 1
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 1
- 235000020940 control diet Nutrition 0.000 description 1
- 230000001461 cytolytic effect Effects 0.000 description 1
- 231100000433 cytotoxic Toxicity 0.000 description 1
- 230000001472 cytotoxic effect Effects 0.000 description 1
- 230000006378 damage Effects 0.000 description 1
- 230000007850 degeneration Effects 0.000 description 1
- 238000004821 distillation Methods 0.000 description 1
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 description 1
- 230000037406 food intake Effects 0.000 description 1
- 230000006870 function Effects 0.000 description 1
- 229930182470 glycoside Natural products 0.000 description 1
- 239000007952 growth promoter Substances 0.000 description 1
- 230000005802 health problem Effects 0.000 description 1
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 1
- 230000007124 immune defense Effects 0.000 description 1
- 230000028993 immune response Effects 0.000 description 1
- 230000036039 immunity Effects 0.000 description 1
- 102000018358 immunoglobulin Human genes 0.000 description 1
- 229940072221 immunoglobulins Drugs 0.000 description 1
- 239000002955 immunomodulating agent Substances 0.000 description 1
- 210000004185 liver Anatomy 0.000 description 1
- 208000004396 mastitis Diseases 0.000 description 1
- 230000001404 mediated effect Effects 0.000 description 1
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 1
- 210000002569 neuron Anatomy 0.000 description 1
- 230000000324 neuroprotective effect Effects 0.000 description 1
- 230000035764 nutrition Effects 0.000 description 1
- 239000003960 organic solvent Substances 0.000 description 1
- 244000052769 pathogen Species 0.000 description 1
- 238000005502 peroxidation Methods 0.000 description 1
- 230000000144 pharmacologic effect Effects 0.000 description 1
- -1 phenylpropanoids glycosides Chemical class 0.000 description 1
- 230000005522 programmed cell death Effects 0.000 description 1
- 230000001737 promoting effect Effects 0.000 description 1
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 1
- 230000000384 rearing effect Effects 0.000 description 1
- 230000011514 reflex Effects 0.000 description 1
- 238000011160 research Methods 0.000 description 1
- 238000005070 sampling Methods 0.000 description 1
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 1
- 230000000638 stimulation Effects 0.000 description 1
- 239000013589 supplement Substances 0.000 description 1
- 230000002195 synergetic effect Effects 0.000 description 1
- 238000005979 thermal decomposition reaction Methods 0.000 description 1
- 150000003712 vitamin E derivatives Chemical class 0.000 description 1
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K36/00—Medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicines
- A61K36/18—Magnoliophyta (angiosperms)
- A61K36/185—Magnoliopsida (dicotyledons)
- A61K36/85—Verbenaceae (Verbena family)
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23K—FODDER
- A23K20/00—Accessory food factors for animal feeding-stuffs
- A23K20/10—Organic substances
- A23K20/111—Aromatic compounds
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23K—FODDER
- A23K50/00—Feeding-stuffs specially adapted for particular animals
- A23K50/30—Feeding-stuffs specially adapted for particular animals for swines
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23K—FODDER
- A23K50/00—Feeding-stuffs specially adapted for particular animals
- A23K50/70—Feeding-stuffs specially adapted for particular animals for birds
- A23K50/75—Feeding-stuffs specially adapted for particular animals for birds for poultry
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
- A23L33/00—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof
- A23L33/10—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof using additives
- A23L33/105—Plant extracts, their artificial duplicates or their derivatives
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
- A61P37/02—Immunomodulators
- A61P37/04—Immunostimulants
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P39/00—General protective or antinoxious agents
- A61P39/06—Free radical scavengers or antioxidants
Landscapes
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Polymers & Plastics (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Food Science & Technology (AREA)
- Natural Medicines & Medicinal Plants (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Immunology (AREA)
- Birds (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Public Health (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Zoology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Animal Husbandry (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Botany (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Mycology (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Toxicology (AREA)
- Alternative & Traditional Medicine (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Medical Informatics (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Nutrition Science (AREA)
- Extraction Or Liquid Replacement (AREA)
- Treatment Of Liquids With Adsorbents In General (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
Description
Descrizione
PROCEDIMENTO PER L’ESTRAZIONE DI PRINCIPI ATTIVI ED ESTRATTO
COSÌ OTTENUTO
Campo tecnico
La presente invenzione ha per oggetto un procedimento per l’estrazione di principi attivi ad attività antiossidante. La presente invenzione concerne, inoltre, gli estratti così ottenuti ed il loro uso per la preparazione di farmaci o sostanze nutrizionali.
Arte nota
È stato dimostrato da numerosi studi che lo stress ossidativo è atto a produrre nel tempo danni biologici che possono portare alla morte cellulare, e che possono essere correlati sia agli effetti relativi alla perossidazione delle lipoproteine e alla morte per degenerazione, che alla morte per apoptosi e, dunque alla morte cellulare programmata. È ben nota e descritta in letteratura l’azione antiossidante del verbascoside, un principio attivo di origine vegetale, dimostrata mediante sperimentazioni sia in vivo che in vitro. È ulteriormente noto che tale principio attivo possiede altre caratteristiche di interesse sia farmacologico che nutrizionale. In particolare, in letteratura sono state descritte proprietà antiinfiammatorie (mediante inibizione della 5-lipossigenasi e della proteina chinasi C, Diaz, A. M. Life Sciences 2004, 74, 2515; mediante inibizione della ossido nitrico sintasi inducibile, in vivo e in vitro, Marzocco et al., NaunynSchmiedeberg’s Arch Pharmacol, 2007, 375, 349-358.), antitumorali (Deepak, M. Indian Drugs, 1999, 36, 336; Zhang, F. Planta Med. 2002, 68, 115; Li, J. Planta Med. 1997, 63, 499), antibatteriche (Ellis B. E. et al. Phytochemistry, 1983, 22, 1941), antivirali (J. Nat. Prod. 1998, 6, 567), cardiotoniche (Pennacchio, M. European Journal of Pharmacology 1996, 30, 169), anti-nefrite e di protezione del fegato (Lee, K. J. Life Sciences 2004, 74, 1051) e neuroprotettive, in particolare per riduzione dello stress ossidativo causato da MPP in cellule neuronali PC12 (Sheng, G. Q. Eur. J. Pharmacol. 2002, 451, 119). Inoltre, sono stati evidenziati effetti ansiolitici e antidepressivi (Mora et al., Pharmacology, Biochemistry and Behavior 2005, 82, 373) e di promozione della crescita e del benessere.
Risulta però difficile produrre tale principio attivo per uso industriale, data la quantità molto bassa presente nei tessuti vegetali e dato l’elevato costo del relativo processo di purificazione.
Presentazione dell’invenzione
Il compito della presente invenzione è quello di risolvere i problemi citati, escogitando un procedimento per l’estrazione di principi attivi, in particolare verbascoside e isoverbascoside, da tessuti vegetali, in modo da consentirne l’uso in campo zootecnico, farmaceutico e alimentare.
Nell’ambito di tale compito, è ulteriore scopo della presente invenzione quello di fornire un estratto ottenuto mediante il procedimento per l’estrazione secondo l’invenzione, che consenta di essere impiegato nella preparazione di farmaci o di integratori alimentari.
Gli scopi citati vengono raggiunti, secondo la presente invenzione, dal procedimento per l’estrazione di principi attivi secondo la rivendicazione 1.
Ulteriori scopi e vantaggi della presente invenzione risultano evidenti dalla seguente descrizione dettagliata dell’invenzione.
Il procedimento secondo l’invenzione prevede l’estrazione dei citati principi attivi con azione antiossidante, particolarmente per uso farmaceutico, zootecnico e nutrizionale, dalle foglie di una specie vegetale, la Lippia polystachya, della famiglia delle Verbenaceae, utilizzando miscele diverse di metanolo, etanolo, butanolo e acqua per ottenere principi attivi antiossidanti del tipo polifenoli, con presenza in particolare di verbascoside e isoverbascoside ad alta attività antiossidante.
Il procedimento prevede di macerare le foglie di Lippia polystachya con diversi solventi così da potere estrarre la frazione dei polifenoli.
Le foglie e il solvente sono in un rapporto quantitativo prefissato. Preferibilmente la percentuale di foglie è compresa tra il 5 e il 20%, e la percentuale di solvente è compresa tra 80 e 95%.
Ad esempio è risultata vantaggiosa l’estrazione dopo macerazione in etanolo in soluzione compresa tra il 50 e il 70%. L’utilizzo di etanolo e acqua risulta più affidabile e sicuro degli altri solventi organici utilizzabili. L’estrazione avviene a una temperatura compresa tra 20 e 40°C preferibilmente mediante ultrasuoni. Mediante centrifugazione è poi possibile separare l’estratto concentrato dalle foglie esauste.
Successivamente l’estratto viene miscelato ad acqua e maltodestrine in un rapporto quantitativo stabilito in funzione del tenore di finilpropanoidi glicosidici desiderato, ad esempio in un rapporto 1:1, rispetto all’estratto secco. Infine tale miscela viene essiccata per spray-drying in modo da ottenere un estratto finale ad elevata resa in fenilpropanoidi, in particolare verbascoside e isoverbascoside.
Si riporta di seguito un diagramma schematico, rappresentativo delle fasi del procedimento descritto (si veda la figura 1).
figura 1
Per migliorare l’effetto antiossidante e le caratteristiche organolettiche è inoltre possibile arricchire l’estratto concentrato con olio volatile ottenuto dalle foglie di Lippia polystachya mediante distillazione in corrente di vapore.
Più precisamente, il procedimento prevede in tale caso di estrarre l’olio volatile in corrente di vapore, e quindi la frazione ricca in fenilpropanoidi mediante l’uso di idoneo solvente, ed es. etanolo e acqua.
Nella fase successiva, l’estratto concentrato viene miscelato ad acqua, maltodestrine e, a differenza del procedimento precedentemente descritto, all’olio volatile recuperato dalla citata distillazione in corrente di vapore.
Infine, come nel procedimento precedentemente descritto, la miscela così formata viene essiccata per spray-drying per ottenere l’estratto finale ad alta resa in principi attivi ad azione antiossidante, in particolare verbascoside e isoverbascoside.
Si riporta di seguito un diagramma schematico, rappresentativo delle fasi del procedimento secondo la variante descritta (si veda figura 2).
figura 2
Esempio 1 di estratto finale.
Mediante estrazione idro-alcoolica si ottiene il seguente estratto finale:
Ac. 3,4 diidrossibenzoico in percentuale compresa tra 0,5 e-1%;
Verbascoside in percentuale compresa tra 5 e 10%;
Isoverbascoside in percentuale compresa tra 0,5 e 1%
Acido gallico in percentuale compresa tra 3 e 4%;
Metil gallato in percentuale compresa tra 3,5 e 4%
Esempio 2 di distillato in corrente di vapore.
Mediante distillazione in torre di vapore è possibile realizzare la separazione del distillato contenente indicativamente:
α-pinene in percentuale pari a 0,82 %;
Camphor in percentuale pari a 0,31 %;
Sabinene in percentuale pari a 1,84 %;
Myrcene in percentuale pari a 0,90 %;
p-cymene in percentuale pari a 0,33 %;
Limonane in percentuale pari a 2,88 %;
Linaiolo in percentuale pari a 0,67 %;
1,8-Cineolo in percentuale inferiore a 0,1;
p-cimene in percentuale pari a 0,29 %;
Ȗ-terpinene in percentuale inferiore a 0,1 %;
Trans-sabinene in percentuale pari a 0,83 %;
ȕ-thujone in percentuale pari a 0,87 %;
α-thujone in percentuale pari a 1,07 %;
Camphene in percentuale pari a 1,75 %;
Borneolo in percentuale pari a 0,52 %;
Terpinen-4-olo in percentuale pari a 0,62 %;
Myrtenal in percentuale pari a 0,26 %;
α-terpineolo in percentuale pari a 0,34 %;
Myrtenolo in percentuale pari a 0,51 %;
Trans dihydrocarvone in percentuale pari a 0,50 %;
Carvone in percentuale pari a 78,9 %;
Thymolo in percentuale pari a 1,37 %;
α-cedrene in percentuale pari a 0,1 %;
ȕ-caryophyllene in percentuale pari a 1,05 %;
α- humulene in percentuale inferiore a 0,1 %;
ȕ-selinene in percentuale inferiore a 0,1 %;
spathulenolo in percentuale pari a 0,3 %;
Attività antiossidante
La capacità antiossidante degli estratti finali ottenuti mediante il procedimento di estrazione secondo l’invenzione è stata valutata mediante il test KRL, che permette di valutare la resistenza globale del sangue sottoposto ad attacco radicalico ( Prost, M.1989, brevetto FR 2,642,526; Prost, M.1992, brevetto US 5,135,850.) Le difese antiossidanti intra- ed extra-cellulari contribuiscono a mantenere l’integrità di membrana e le funzioni cellulari fino alla lisi cellulare. Il potenziale globale di difesa antiradicalica viene espresso come tempo necessario perché il 50% delle cellule sanguigne siano lise (T1/2 in minuti). Il test consente anche di determinare in vitro la capacità antiossidante o l’azione pro-ossidante di differenti composti (Stocher, et al., 2000. Ann. Fals. Exp.Chim.
949:471-483.). Infatti, aggiungendo al sangue una sostanza con azione antiradicalica si osserva un aumento del potenziale globale di difesa contro l’aggressione radicalica rispetto ad un sangue controllo, privo di sostanze aggiunte.
L’efficacia antiradicalica delle sostanze viene espressa come percentuale del potenziale di difesa antiradicalica del sangue controllo (% rispetto T1/2 del sangue controllo).
I risultati sono standardizzati in equivalenti Trolox (analogo idrosolubile della vitamina E).
Sono stati testati i seguenti prodotti:
verbascoside (titolato al 50%)
estratto finale di Lippia polystachya (titolato al 5% di verbascoside)
Sono state effettuate tre prove indipendenti, in un range di concentrazione dei prodotti da 0 a 1g per L, confrontando l’attività antiossidante dei prodotti per mg di prodotto e per mg di principio attivo. E’ stato inoltre determinato il range entro cui l’attività antiossidante varia in modo lineare alla concentrazione, cioè in assenza di effetti pro-ossidanti.
Ai fini della standardizzazione dei risultati il Trolox, analogo idrosoluibile della vitamina E, avente PM 250,29 g/mole, è stato valutato nel range di concentrazioni da 0 a 1000 μmoli/L in ogni sperimentazione. Limitatamente al range di concentrazioni per le quali la risposta è lineare, l’espressione dell’efficacia antiradicalica dei prodotti è stata espressa in equivalenti mmole di Trolox per grammo di prodotto e per grammo di principio attivo.
Campioni di sangue diluito in assenza e in presenza di differenti dosi di composti sono stati sottoposti a radicali liberi organici, prodotti in fase acquosa a 37°C a pressione ambiente dalla decomposizione termica di una soluzione di 50 mM di 2,20-azobis(2-amidinopropane) de-idrocloruro (AAPH). L’emolisi è stata registrata da un turbidimetro usando un lettore a microplacca a 96 cavità. I risultati sono stati espressi in tempo richiesto per raggiungere il 50% dell’emolisi massima, in minuti (HT50), che è riferita alla resistenza globale del sangue all’attacco di radicali liberi. L’efficienza globale antiradicalica è stata definita come la percentuale dell’incremento di HT50 mediato dal composto rispetto al sangue controllo. Prove citotossiche preliminari senza l’aggiunta di AAPH hanno mostrato che, nel range di concentrazione testato da 0 a 1 g/L, il verbascoside e l’estratto acquoso di Lippia polystachya non presentavano alcuna attività citolitica rispetto ai campioni di sangue.
Risultati
Il verbascoside e l’estratto di Lippia polystachya presentano in vitro una capacità antiradicalica molto forte che aumenta in modo crescente con la dose del prodotto fino a concentrazioni molto elevate (si veda la tabella 1).
Tabella 1. Efficacia antiradicalica media del verbascoside e dell’estratto di Lippia polystachya (valore % di aumento del T1/2 rispetto al sangue controllo, ottenuto come media di 3 prove indipendenti).
mg/L Verbascoside ± deviazione Lippia ± deviazione
standard Polystachya standard
0 0 - 0 -
1 5,54 0,45 - -
2 9,49 0,74 - -
5 23,13 0,65 - -
10 49,49 2,62 11,49 0,34
20 103,91 4,60 19,63 0,82
50 242,38 9,11 49,69 1,41
100 419,84 22,26 114,24 4,33
200 741,00 34,19 228,22 3,81
500 - 425,69 2,97
1000 - 571,9 3,24
L’estratto di Lippia polystachya presenta, rapportato alla dose di verbascoside presente, un potere antiradicalico superiore al verbascoside in purezza ad evidenziare una verosimile azione sinergica tra i diversi principi attivi presenti nell’estratto.
I risultati inoltre mostrano come l’attività antiossidante varia in modo proporzionale alla concentrazione fino a 50 mg/L per il verbascoside e fino 100 mg/L per l’estratto di Lippia polystachya.
Così, considerando il range di concentrazioni in cui la risposta è lineare, la capacità antiossidante risulta16,8 e 38,2 mM di Trolox per grammo di principio attivo rispettivamente per il verbascoside e l’estratto di Lippia polystachya (si veda figura 3).
Figura 3. Efficacia antiradicalica media del verbascoside, dell’estratto di Lippia polystachya e del Trolox in funzione della concentrazione del principio attivo (valore percentuale di aumento del T1/2 rispetto al sangue controllo, calcolato come media di tre prove indipendenti).
Attività immunostimolante e immunomodulante
Lo stimolo delle naturali difese immunitarie è di sempre maggior interesse ai fini d’un contenimento degli interventi terapeutici e d’una maggior efficacia nella risposta ai patogeni in alimentazione animale ed umana.
Su tali basi sono state condotte due sperimentazioni rispettivamente nel suinetto in post-svezzamento e nella scrofa in fase finale di gestazione-inizio lattazione. Il suinetto è stato prescelto quale modello animale in considerazione del particolare status immunitario presente nel post svezzamento, nel quale va esaurendosi la copertura passiva dovuta alle immunoglobuline ricevute dalla madre attraverso il colostro ed ancora non è completamente efficiente il sistema di difesa del giovane animale. La seconda prova condotta sulla scrofa ha voluto verificare la possibilità di una modulazione della risposta immunitaria del riproduttore per i positivi riflessi che può avere sull’immunità passiva trasmessa al neonato.
Prova I: suinetti in post-svezzamento
Per la prova sperimentale sono stati utilizzati 160 suinetti, metà maschi castrati e metà femmine, del peso iniziale di 8,1±1,40 kg suddivisi in 4 gruppi sperimentali di 40 soggetti ciascuno. Gli animali, marchiati individualmente tramite marca auricolare, sono stati ripartiti in modo uniforme in base al peso vivo, al sesso e alla nidiata di appartenenza.
Gli animali sono stati alimentati ad libitum con diete isoenergetiche ed isoproteiche idonee a soddisfare i fabbisogni nelle diverse fasi di accrescimento. Il mangime sperimentale è stato differenziato per i livelli di inclusione (mg/kg) di verbascoside ed estratto di Lippia polystachya nelle due fasi di crescita considerate (si veda la tabella 2):
trattamenti Principio attivo
(mg/kg mangime)
CONTROLLO (lincomicina) 0
Verbascoside Basso (V1) 5
Verbascoside Alto (V2) 10
Estratto Lippia polystachya 3,75
Tabella 2
La prova ha avuto una durata di 56 giorni.
Durante il corso della sperimentazione sono stati effettuati due prelievi ematici da sette soggetti per gruppo sperimentale rispettivamente a 0 e a 56 giorni per la successiva valutazione dell’attività immunomodulante attraverso analisi Elisa di IgG e IgA (Bethyl Laboratories Inc., USA).
L’analisi dei parametri ematici è stata effettuata mediante analisi delle misure ripetute (SPSS-PC).
Le IgA sieriche sono risultate significativamente superiori (P<0,05) a seguito del trattamento alimentare con estratto di Lippia polystachya come evidenziato in Figura 4, mentre non sono state evidenziate differenze significative tra Controllo e verbascoside.
Le IgG sieriche sono risultate significativamente superiori (P<0,01) a seguito del trattamento alimentare con estratto di Lippia polystachya come evidenziato in Figura 5, mentre non sono state evidenziate differenze significative tra il trattamento di controllo e il trattamento a base di verbascoside.
Prova II: influenza dell’estratto di Lippia polystachya sulla modulazione del sistema immunitario nella scrofa
Allo scopo di valutare gli effetti della somministrazione dell’estratto di Lippia polystachya sulla modulazione del sistema immunitario è stato determinato il contenuto in IgG e IgA del colostro.
Per la prova sperimentale sono state utilizzate 50 scrofe primipare suddivise in due gruppi sperimentali. Il trattamento dietetico è stato effettuato nel mangime durante l’ultimo mese di gravidanza e in top dressing in lattazione.
Gli animali sono stati alimentati durante l’ultimo mese di gestazione e la lattazione con diete isoenergetiche ed isoproteiche di cui una controllo ed una integrata con estratto di Lippia polystachya, in modo da apportare 36 mg/giorno di verbascoside.
Nel corso della prova sono stati effettuati campioni individuali di colostro durante il parto da tutte le scrofe e sono stati utilizzati per le successive analisi i campioni relativi ai soggetti i cui prelievi erano avvenuti prima della poppata dei suinetti. L’attività immunomodulante è stata valutata attraverso analisi Elisa di IgG e IgA (Bethyl Laboratories Inc., USA).
Il tenore in IgA è risultato del 30% superiore (P=0,04) nel colostro delle scrofe che hanno ricevuto l’integrazione con estratto di Lippia polystachya (Figura 6). Il tenore in IgG del colostro è risultato superiore del 7%, ma in modo non statisticamente significativo, nel colostro delle scrofe che hanno ricevuto l’integrazione con estratto di Lippia polystachya (si veda figura 7).
Promotore delle performance e del benessere
Scopo della presente ricerca è valutare gli effetti della somministrazione dell’estratto di Lippia polystachya, ricco di fenilpropanoidi glucosidi, su performance di crescita e benessere.
Prova I: suinetti in post svezzamento
Per la prova sperimentale sono stati utilizzati 80 suinetti, metà maschi castrati e metà femmine, del peso iniziale di 8,1 (± 1,30 d.s.) kg suddivisi in due gruppi sperimentali di 40 soggetti ciascuno. Gli animali, marchiati individualmente tramite marca auricolare, e sono stati ripartiti in modo uniforme in base al peso vivo, al sesso e alla nidiata di appartenenza.
Gli animali sono stati alimentati ad libitum con diete isoenergetiche ed isoproteiche idonee a soddisfare i fabbisogni nelle diverse fasi di accrescimento. Il mangime sperimentale è stato differenziato per l’inclusione di 750 g/t di estratto di Lippia polystachya in modo da apportare 3,75 mg di verbascoside per kg di mangime. Il gruppo controllo conteneva lincomicina (100 mg/t) mentre il gruppo trattato era privo di medicazione.
La prova ha avuto una durata complessiva di 56 giorni.
Nel corso della prova sono stati effettuati i seguenti rilievi:
peso individuale dei suinetti a 0 giorni e a 56 giorni;
consumo alimentare;
tasso di mortalità giornaliero;
interventi terapeutici giornalieri.
I dati raccolti sono stati sottoposti ad analisi della varianza (SPSS-PC).
L’integrazione con l’estratto di Lippia polystachya, in assenza di medicazione del mangime, ha fatto registrare analoghe condizioni sanitarie rispetto all’uso del mangime medicato ed ha permesso di registrare accrescimenti ponderali giornalieri medi significativamente superiori (P<0,05) (si veda la tabella 3). Il trattamento, oltre a migliorare dell’8,8% gli accrescimenti, ha stimolato l’assunzione alimentare (+4,17%) e migliorato complessivamente l’indice di conversione alimentare del 4,27% (si veda la figura 8)
Tabella 3. Performance di crescita degli animali in relazione ai diversi trattamenti alimentari ed al sesso nella prima fase di crescita
n = 40 animali per gruppo;<a,b>P<0.05
figura 8. Variazione percentuale del trattamento alimentare rispetto al Controllo.
Prova II: broiler
Per la prova sperimentale sono stati utilizzati 11000 broiler, maschi ross 508, suddivisi in due gruppi sperimentali di 5500 soggetti ciascuno. I broiler sono stati alimentati ad libitum con diete isoenergetiche ed isoproteiche idonee a soddisfare i fabbisogni nelle diverse fasi di accrescimento. Il mangime sperimentale è stato differenziato per l’inclusione di 900 g/t di estratto di Lippia polystachya in modo da apportare 4,5 mg di verbascoside per kg di mangime. La prova ha avuto una durata complessiva di 56 giorni.
Nel corso della prova sono stati effettuati i seguenti rilievi:
peso individuale di un campione di 200 soggetti per trattamento a 21, 28, 35, 42, 49 e 56 giorni;
consumo alimentare totale;
tasso di mortalità giornaliero;
interventi terapeutici giornalieri.
L’integrazione con l’estratto di Lippia polystachya, in assenza di medicazione del mangime, ha ridotto del 40% la mortalità (141 rispetto a 361 soggetti morti) nell’intero periodo di crescita. Inoltre le condizioni di benessere dei soggetti in prova sono state evidenziate anche dall’assoluta assenza di trattamenti terapeutici durante tutto il periodo di allevamento nel gruppo trattato mentre il controllo ha richiesto tre interventi. L’integrazione con l’estratto di Lippia polystachya ha permesso inoltre di registrare accrescimenti ponderali giornalieri medi significativamente superiori al gruppo controllo ed alla normale curva di crescita (si veda la figura 9).
4
0 10 20 30 40 50 60 70
Età, d
Figura 9. Curva di crescita di broiler alimentati con dieta controllo o integrata con estratto di Lippia polystachya e curva teorica di crescita.
Prova III: scrofe
Per la prova sperimentale, condotta nel periodo estivo, sono state utilizzate 21 scrofe primipare suddivise in 2 gruppi sperimentali. Il trattamento dietetico è stato effettuato in top dressing dal momento dell’entrata in sala parto, circa 5 giorni prima della data prevista di parto. Del gruppo trattato hanno ricevuto 36 mg/giorno di estratto di Lippa polystachya.
Nel corso della prova sono stati effettuati i seguenti rilievi e prelievi:
- peso della scrofa all’ingresso in sala parto e allo svezzamento
- spessore del grasso dorsale all’ingresso in sala parto e allo svezzamento - incidenza problemi sanitari (mastiti, febbre, tosse)
- consumo alimentare individuale
- peso della nidiata dopo bilanciamento (a 1d) e allo svezzamento
- nati totali, vivi, morti, svezzati
- mortalità suinetti giornaliero
- Interventi terapeutici giornaliero
L’integrazione con l’estratto di Lippia polystachya ha fatto registrare, a parità di soggetti nati vivi, allattati e svezzati, un peso vivo allo svezzamento significativamente superiore dei suinetti allo svezzamento ad indicare una maggior produzione di latte delle scrofe del gruppo Lippa polystachya (tabella 4).
Tabella 4. Effetto del trattamento alimentare sul peso vivo dei suinetti allo svezzamento.
Qualità delle carni
Per la prova sperimentale sono stati utilizzati 40 suini, metà maschi castrati e metà femmine, del peso iniziale di circa 25 kg suddivisi in 2 gruppi sperimentali da 20 soggetti ciascuno ripartiti in box da 4 ciascuno in modo uniforme in base al peso vivo, sesso e alla nidiata di appartenenza.
Gli animali sono stati alimentati ad libitum per tutto il periodo con diete isoenergetiche ed isoproteiche. Il mangime sperimentale è stato differenziato per l’inclusione di 700 g/t di estratto di Lippia polystachya in modo da apportare 3,5 mg di verbascoside per kg di mangime.
La macellazione dei suini è avvenuta in due periodi: al raggiungimento dei 110 kg PV per i maschi castrati e ad un PV medio di 165 kg per le femmine.
In sede di macellazione si è provveduto al prelievo di campioni di muscolo longissimus dorsi per la determinazione di: colore, pH, colesterolo, perdite essudative, perdite di cottura.
L’integrazione con Estratto di Lippia polystachya ha consentito di ridurre le perdite essudative del muscolo LD del 19% e del 15% nei soggetti macellati rispettivamente a 110 e 165 kg di PV (pesi caratteristici della produzione del suino leggero da macelleria – media europea, e della produzione del suino pesante italiano – Gran Suino Padano). I risultati sperimentali sono riportati nelle tabelle 5 e 6.
L’effetto di riduzione delle perdite essudative conferma l’attività antiossidante a livello muscolare, riconducibile probabilmente ad un risparmio di vitamina E. Infatti è noto e ampiamente documentato in letteratura che integrazioni sovranutrizionali di vitamina E fanno registrare nel suino una riduzione delle perdite essudative.
Tabella 5. Effetto del trattamento alimentare sulle perdite essudative e di cottura del muscolo longissimus dorsi di suini maschi castrati macellati a 110 kg PV.
Tabella 6. Effetto del trattamento alimentare sulle perdite essudative e di cottura del muscolo longissimus dorsi di suini femmine macellate a 165 kg PV.
È da osservare che il contenuto in colesterolo del muscolo Longissimus dorsi, analizzato mediante HPLC, è risultato ridotto nel 32% nel gruppo trattato rispetto al controllo ove, coerentemente ai valori riportati nella bibliografia del ramo, ha un valore di 53.2 mg/ 100 mg di tessuto muscolare.
Il procedimento secondo l’invenzione raggiunge pertano lo scopo di consentire l’estrazione di principi attivi, in particolare verbascoside e isoverbascoside, da tessuti vegetali, in modo tale da ottenere un estratto finale atto ad essere impiegato vantaggiosamente sia in campo zootecnico, che farmaceutico e alimentare.
In particolare è stato dimostrato, come precedentemente descritto, che l’estratto finale ottenibile con il procedimento secondo l’invenzione può essere utilmente impiegato nella preparazione di farmaci o di integratori alimentari, come antiossidante, immunostimolante e immunomodulante, oppure come promotore della crescita e del benessere, o per migliorare la qualità nutrizionale e tecnologica delle carni.
Claims (11)
- Rivendicazioni 1) Procedimento per l’estrazione di principi attivi ad attività antiossidante, in particolare polifenoli, dalle foglie della specie vegetale della Lippia polystachya della famiglia delle Verbenaceae, comprendente le seguenti fasi in successione: a) macerare dette foglie in un solvente secondo un prefissato rapporto quantitativo; b) estrarre dette foglie macerate in detto solvente c) separare mediante centrifugazione un estratto concentrato da foglie esauste d) miscelare a detto estratto concentrato acqua e maltodestrine in un dato rapporto quantitativo in funzione del titolo in fenilpropanoidi glicosidici desiderato e) essiccare detta miscela per ottenere un estratto finale ad elevata resa in detti principi attivi.
- 2) Procedimento secondo la rivendicazione 1, caratterizzato dal fatto che nella fase di a) macerare dette foglie, detto solvente è etanolo in soluzione compresa tra il 50 e il 70%.
- 3) Procedimento secondo la rivendicazione 1 o 2, caratterizzato dal fatto che in detta fase di a) macerare dette foglie in detto solvente la percentuale di dette foglie è compresa tra il 5 e il 20%, e la percentuale di detto solvente è compresa tra 80 e 95%.
- 4) Procedimento secondo la rivendicazione 3, caratterizzato dal fatto che detta fase di a) macerare dette foglie in detto solvente ha una durata fino a 15 giorni su una apparecchiatura di macerazione statica.
- 5) Procedimento secondo una o più delle precedenti rivendicazioni, caratterizzato dal fatto che detta fase di b) estrarre dette foglie macerate avviene a una temperatura compresa tra circa 20 e circa 40°C mediante ultrasuoni.
- 6) Procedimento secondo la rivendicazione 5, caratterizzato dal fatto che detta fase di b) estrarre dette foglie macerate avviene in un intervallo di tempo compreso tra 30 e 60 minuti circa.
- 7) Procedimento secondo una delle rivendicazioni precedenti, caratterizzato dal fatto che tra la fase di a) macerare dette foglie e la fase di b) estrarre dette foglie macerate comprende le ulteriori fasi di: a1) distillare in corrente di vapore dette foglie macerate in modo da separare un distillato da dette foglie macerate a2) separare da detto distillato l’aroma di detta Lippia polystachya sotto forma di olio volatile e prima di detta fase di d) miscelare a detto estratto concentrato acqua e maltodestrine d1) miscelare a detto estratto concentrato detto olio volatile.
- 8) Procedimento secondo una delle rivendicazioni precedenti, caratterizzato dal fatto che in detta fase di d) miscelare a detto estratto concentrato acqua e maltodestrine il detto relativo rapporto quantitativo è di circa 1:1.
- 9) Estratto di foglie di Lippia polystachya ottenuto secondo una qualsiasi delle rivendicazioni da 1 a 8.
- 10) Estratto secondo la rivendicazione 9, comprendente Verbascoside dal 5 al 10% Isoverbascoside da 0,5 all’1% Acido gallico da 3 a 4 Metilgallato dal 3,5 al 4%.
- 11) Estratto ottenibile secondo il metodo della rivendicazione 7, detto olio volatile 7, comprendendo indicativamente 0,82 % di α-pinene 0,31 % di Camphor 1,84 % di Sabinene 0,90 % di Myrcene 0,33 % di p-cymene 2,88 % di Limonane 0,67 % di Linaiolo < 0,1 % di 1,8-Cineolo 0,29 % di p-cimene < 0,1 % di Ȗ-terpinene 0,83 % di Trans-sabinene 0,87 % di ȕ-thujone 1,07 % di α-thujone 1,75 % di Camphene 0,52 % di Borneolo 0,62 % di Terpinen-4-olo 0,26 % di Myrtenal 0,34 % di α-terpineolo 0,51 % di Myrtenolo 0,50 % di Trans dihydrocarvone 78,9 % di Carvone 1,37 % di Thymolo 0,1 % di α-cedrene 1,05 % di ȕ-caryophyllene < 0,1 % di α- humulene < 0,1 % di ȕ-selinene 0,3 % di spathulenolo 12) Estratto secondo una qualsiasi delle rivendicazioni da 9 a 11 per uso come medicamento. 13) Estratto secondo la rivendicazione 12 per uso come antiossidante e conservante. 14) Estratto secondo la rivendicazione 12 per uso come immunostimolante. 15) Estratto secondo la rivendicazione 12 per uso come antinfiammatorio. 16) Estratto secondo una qualsiasi delle rivendicazioni da 9 a 11 per uso come integratore nutrizionale. 17) Estratto secondo la rivendicazione 16 per uso come promotore del benessere, della crescita e della produzione lattea. 18) Estratto secondo la rivendicazione 16 per uso atto a migliorare le caratteristiche tecnologiche e nutrizionali delle carni e prodotti derivati. 19) Estratto secondo una qualsiasi delle rivendicazioni da 9 a 11 per uso come cosmetico.
Priority Applications (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| IT000212A ITBO20080212A1 (it) | 2008-04-04 | 2008-04-04 | Procedimento per l'estrazione di principi attivi ed estratto cosi ottenuto |
| PCT/IB2009/051298 WO2009122337A1 (en) | 2008-04-04 | 2009-03-27 | Process for extracting active components from lippia polystachya and extract thus obtained |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| IT000212A ITBO20080212A1 (it) | 2008-04-04 | 2008-04-04 | Procedimento per l'estrazione di principi attivi ed estratto cosi ottenuto |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| ITBO20080212A1 true ITBO20080212A1 (it) | 2009-10-05 |
Family
ID=40296626
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| IT000212A ITBO20080212A1 (it) | 2008-04-04 | 2008-04-04 | Procedimento per l'estrazione di principi attivi ed estratto cosi ottenuto |
Country Status (2)
| Country | Link |
|---|---|
| IT (1) | ITBO20080212A1 (it) |
| WO (1) | WO2009122337A1 (it) |
Family Cites Families (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPH1150050A (ja) * | 1997-08-06 | 1999-02-23 | Lion Corp | 抗酸化剤 |
| CA2475958C (en) * | 2002-02-13 | 2008-07-29 | Van Beek Global, Llc | Compositions and methods for increasing milk production in animals |
| DE10217353A1 (de) * | 2002-04-18 | 2003-11-13 | Elke Foltys De Garcia | Verfahren und Vorrichtung zur Gewinnung von Pflanzen-Inhaltsstoffen |
| FR2850572B1 (fr) * | 2003-02-03 | 2005-04-01 | Rocher Yves Biolog Vegetale | Utilisation du verbascoside comme agent stimulant la synthese de proteines de choc thermique par les cellules de la peau |
| JP2006036787A (ja) * | 2005-09-29 | 2006-02-09 | Fancl Corp | キサンチンオキシダーゼ阻害剤 |
-
2008
- 2008-04-04 IT IT000212A patent/ITBO20080212A1/it unknown
-
2009
- 2009-03-27 WO PCT/IB2009/051298 patent/WO2009122337A1/en active Application Filing
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| WO2009122337A1 (en) | 2009-10-08 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Dalle Zotte et al. | Herbs and spices inclusion as feedstuff or additive in growing rabbit diets and as additive in rabbit meat: A review | |
| Castillo-López et al. | Natural alternatives to growth-promoting antibiotics (GPA) in animal production. | |
| Karásková et al. | Current use of phytogenic feed additives in animal nutrition: a review | |
| Achilonu et al. | Biochemical proximates of pumpkin (Cucurbitaeae spp.) and their beneficial effects on the general well‐being of poultry species | |
| KR101991913B1 (ko) | 천연추출물의 혼합물을 유효성분으로 포함하는 반려동물 뇨의 악취제거 기능을 갖는 음수제 및 사료용 조성물 | |
| US11564952B2 (en) | Water-soluble and water-insoluble propolis products with high antioxidant capacity and their production methods | |
| Arif et al. | Effect of Aloe vera and clove powder supplementation on growth performance, carcass and blood chemistry of Japanese quails | |
| Saeed et al. | Raw propolis as a promising feed additive in poultry nutrition: trends and advances | |
| JP2007204423A (ja) | ササ抽出物の製造方法及び該抽出物の利用 | |
| Seidavi et al. | A review on practical applications of Citrus sinensis by-products and waste in poultry feeding | |
| Rivera et al. | Bioactive constituents in ethanolic extract leaves and fruit juice of Morinda citrifolia | |
| Rizwan | Therapeutic potential of Thymus vulgaris: A Review | |
| Kheiri et al. | Effect of Heracleum persicum extract on performance and some haematological parameters in broiler chicks. | |
| Kumari et al. | Study on the immuno-modulatory effect of herbal extract of Asparagus racemosus Willd. in broiler chicks | |
| Valcheva-Kuzmanova et al. | Anti-anxiety effect of Aronia melanocarpa fruit juice administered subchronically to rats | |
| ITBO20080212A1 (it) | Procedimento per l'estrazione di principi attivi ed estratto cosi ottenuto | |
| Nanda et al. | Effect of polyherbal formulations on blood haematological constituents and immunity in non‐descript goats | |
| TR202008787A2 (tr) | Özel ekstraksi̇yon yöntemi̇ i̇le elde edi̇len propoli̇si̇n sivi karişimlarda kullanilmasi | |
| Kacemi et al. | Bee Pollen as a Source of Pharmaceuticals: Where Are We Now? | |
| KR20090117448A (ko) | 연교추출물을 이용한 사료 첨가용 항산화제 | |
| Kalia et al. | Effect of Salix alba leave extract on growth performance, antioxidant level and immune status of broiler chickens reared at high altitude cold desert | |
| de Oliveira et al. | as a Phytoherbal Growth Promoter for Broiler Farming–A Review | |
| Hassan et al. | Effect of watery and alcoholic medicinal plants extractions on in-vitro ruminant | |
| Lihong et al. | Advances in propolis research and propolis industry in China | |
| ES2730385A1 (es) | Producto alimenticio para animales que comprende carvacrol, p-cimenol y aliina, y procedimiento para su obtencion |