IT8219804A1 - Formulazioni farmaceutiche ad attivita' antiinfiammatoria, analgesica, antipiretica e gastroprotettiva - Google Patents

Description

Stadio Consulenza brevettitele s.r.l

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DESCRIZIONE DELL'INVENZIONE

La presente invenzione riguarda una nuova via di somministra zione, una nuova formulazione farmaceutica e un nuovo impiego terapeutico del morniflumato, estere beta-morfolinoetilico dello acido nifiumico, di formula (l):

COOCH_CH_?N

Sia l'acido nifiumico che il marniflumato sono composti noti, impiegati in terapia come antiinfiammatori, analgesici e antipiretici, ma sono utilizzati per vie di somministrazione diverse: il primo esclusivamente per via orale o topica, il marniflumato esclusivamente per via rettale.

E' stato ora trovato, e costituisce oggetto della presente invenzione, che il morniflumato pu? essere vantaggiosamente impie gato per somministrazione orale, sotto forma di capsule, compres se o formulazioni analoghe.

Per questa via di somministrazione, infatti, il prodotto risulta ben assorbito e rapidamente distribuito nell'organismo, mantiene sostanzialmente le propriet? farmacologiche del composto acido di partenza, senza produrne le azioni indesiderate.

Infatti il morniflumato ? completamente sprovvisto di effetti ulcerogeni a livello gastrico e manifesta ima lesivit? a livello intestinale, e una tossicit? acuta, notevolmente inferiori rispetto all'acido nifiumico.

?E* stato inoltre trovato, e costituisce un altro oggetto della presente invenzione, che il morniflumato esercita una attivit? antiulcera e gastroprotettiva, in quanto antagonizza gli effetti di altri agenti ulcerogeni o comunque gastro-lesivi ?

Per questa sua sorprendente propriet?, il morniflumato (i) pu? essere utilmente utilizzato anche in associazioni con a!l tri composti antiinfiammatori non steroidei il cui impiego viene fortemente limitato dagli effetti collaterali a livello gastrico?

Sono qui di seguito riportate le prove effettuate per eviden ziare le caratteristiche di assorbim?nto e di attivit? del morniflumato quando viene somministrato per via orale, impiegando acido nifiumico come composto di riferimento, nonch? 1*effetto protettivo esercitato dal morniflumato nei confronti di agenti gastrolesivi?

Biodisponibilit? e farmacocinetica nel ratto

Sono stati utilizzati ratti maschi del peso corporeo di 250-300 g, digiuni da 18 ore ma con acqua ad libitum?

La somministrazione orale di acido nifiumico o di morniflumato ? stata effettuata mediante sondaggio gastrico usando sospensio ni di amido di mais al 5% (10 ml/kg); le sostanze sono state somministrate alla dose equimolecolare di 253 yumol/kg?

La determinazione dei composti in esame ? stata effettuata per cromatografia liquida ad alta pressione (HPLC)?

Mudo umsuienza Dieremjaie w.?.

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I risultati ottenuti sono rappresentati dai diagrammi della figura, che riportano in ordinata i livelli plasmatici (ospres si in /ug/ml) rispettivamente di acido nifiumico (- ) e di morniflumato (- ) come tale, in funzione del tempo (espresso in ore), conseguenti alla somministrazione orale di acido nifiumico (diagramma di sinistra) e di morniflumato (diagramma di destra).

La somministrazione orale di acido nifiumico produce livelli plasmatici con picco di 177 yug/ml alla 3 ora e con emivita di scomparsa di circa 5 ore.

La somministrazione orale di morniflumato produce livelli plasmatici di acido nifiumico con picco di 50 yug/ml a un'ora ed emivita di circa 5 ore, nonch? livelli plasmatici molto esi gui e rapidamente decrescenti di morniflumato.

Questi risultati e le analogie riscontrate con i valori di emivita piasmatica rilevati dopo somministrazione intravenosa di morniflumato, nonch? la rapida comparsa nel plasma di acido nifiumico dopo somministrazione intravenosa di morniflumato,fanno ritenere che l'estere venga assorbito come tale dal tratto gastro-intestinale e venga quindi rapidamente idro lizzato nel plasma ad acido nifiumico, biologicamente attivo. D'altro canto il fatto che il morniflumato dopo somministrazio ne orale mantenga sostanzialmente l'attivit? farmacologica dell'acido nifiumico, nonostante la disparit? di livelli plasmatici in acido libero, fa presupporre che la quota di estere oruDio consulenza Brew?ruaie tri.

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?immodificata presente inizialmente nel plasma raggiunga pi? rapidamente, grazie alla sua maggiore lipofilia, gli spazi extraplasmatici e quindi le sedi dell'infiammazione.

Attivit? antiinflaminatoria nel test dell'edema da carragenina Sono stati impiegati ratti Charles River CD(SD) di sesso ma schile, di peso corp?reo di 140-180 g, stabulati in condizioni normali, digiuni da 18 ere e con libero accesso all'acqua? L'attivit? dei composti in esame, somministrati per via orale a diverse dosi, mediante sonda gastrica, sospesi in amido di mais al 5%.e nel volume costante di 20 ml/kg, ? stata valutata misurando la protezione offerta nei confronti dello sviluppo di edema indotto nella zampa di ratto iniettando (a distanza di un'ora dalla somministrazione del principio attivo) 0,1 mi di carragenina all'1% in soluzione fisiologica nell?aponeurosi subplantare della zampa posteriore destra, secondo la metodica di Winter (Winter C.A. et al*, Proc. Soc. Exp. Biol* Med.

111, 544, 1962).

I controlli ricevevano il solo veicolo.

II volume della zampa trattata ? stato misurato mediante pletismometro secondo Lence ad acqua mercurio (Lence P.,Arch. Int. Pharmacodyn. 16, 237, 1962) immediatamente prima e a diversi tempi dopo l'iniezione dell'agente flogogeno,

I valori di ED^Q, determinati dalle aree sottese alla curva volume delia zampa-tempo, sono esposti nella Tabella 1?

<????0 >Lonsolenza Breveffivale iri

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TABELLA 1

composto attivit? determinata dalle aree sottese alla curva volume dell ' edema- tempo

P.R.

50

^imol/kg (rapp. di potenza)

morniflumato 303 0, 79

(676 - 136)

ac . nifiumico 239 1

(475 - 121)

Attivit? antiinf iammatoria nel test dell <? >eritema da U.v.

Sono state impiegate cavie di sesso maschile, digiune da 18 ore e con libero accesso all* acqua, del peso di 340?400 g, previamente sottoposte a depilazione su un fianco e quindi alla irradiazione ultravioletta utilizzando una sorgente UV da 500 W schermata e raffreddata ad acqua, costruita secondo Kro mayer da Helios Italquartz (Milano ) .

I fermaci venivano somministrati come sospensione mediante sondaggio gastrico un'ora prima dell 'esposizione UV; i con-trolli ricevevano un equi volume del solo veicolo (amido di mais al 5%, 5 ml/kg) . L'intensit? dell 'eritema ? stata valu tata, da un osservatore ignaro del trattamento , un'ora dopo l'esposizione UV, secondo la scala di punteggio non parametri ca di Awouters e coll . (Arzneim.-Forsch. 25, 1509, 1975) . So

* no stati considerati "protetti" gli animali con grado di eritema inferiore a 1 ; dalle incidenze cos? ottenute sono stati calcolati i valori di ED^Q secondo Litchfield e Wilcoxon (j. Fharma col. Exp. Ther. 96, 99, 1949) (vedi Tabella 2) .

TABELLA. 2

composto EDen P.R.

50

(piol/kg) (rapp. di potenza)

mornifluraato 51 0,93

(109 - 24)

ac. nifiumico 55 1

(91 - 33)

Attivit? analgesica nel "writhing" test da fenilchinone

Sono stati impiegati topi maschi di 19-22 g, stabulati in condii zioni normali, digiuni da 18 ore e con libero accesso all'acqua? L'attivit? dei composti in esame, somministrati per via orale a varie dosi, mediante sonda esofagea, sospesi in amido di mais al 5% e nel volume costante di 10 ml/kg, ? stata valutata misurando la protezione offerta nei confronti di una caratteristica sindrome (writhing) indotta mediante iniezione endoperitoneale di 0,1 ml/10 g di peso corporeo di una soluzione acquosa di fe nilchinone (0,02% in etanolo 5 %) secondo un modello sperimentale modificato (Arzneim.-Forsch. 31(1), 87, 1981) rispetto a quel, lo riportato in letteratura da Siegmund (j. Pharmacol. Exp. Ther.

St?lto UJU5UW?*? ?-- 8 -119, 184, 1957).

I controlli ricevevano il solo veicolo?

I valori di ED__ determinati dalle curve dose-risposta sono

50

riportati in Tabella 3?

TABELLA 3

composto ED,

50 P.R.

(juuol/kg) (rapp. di potenza)

mornifluraato 118 1 ,05

(190 - 73)

ac. nifiumico 124

( 156 - 99)

Attivit? antipiretica

Sono stati impiegati ratti maschi del peso di 130-140 g, digiuni da 18 ore ma con libero accesso all 'acqua?

La febbre ? stata indotta iniettando sotto cute, nella regione della cute dorsale, 10 ml/kg di una sospensione al T 5% di lievito di birra in gomma arabica all '1%?

I farmaci in esame erano somministrati, 4 ore dopo l 'agente pirogeno, mediante sondaggio gastrico come sospensione in air? do di mais al 5% in ragione di 10 ml/kg; i controlli ricevevano il solo veicolo?

Gli incrementi rispetto al valore basale della temperatura ret? tale venivano rilevati ai differenti tenpi dalla sommini^ strazione usando un elettrotermometro multicanale Ellab.

Era considerato effetto antipiretico una significativa riduzione (t-test) dell?incremento termico rispetto ai control li? I valori di ED-,, (esposti in Tabella 4) venivano interno

polati graficamente sulla base delle inibizioni percentuali rispetto ai controlli osservati ad un'ora dalla somministra zione del farmaco?

TABELLA 4

composti <ED>50 P.R.<approx>

(^unol/kg) (rapp di potenza)

morniflumaio 97 0,58

ac. nifiumico 56 1

Attivit? gastrolesiva

Sono stati impiegati ratti di sesso maschile del peso di 220-320 g stabulati in condizioni standard e tenuti a digiuno per 24 ore prima della prova e con libero accesso all'acqua? I farmaci venivano somministrati mediante sonda gastri ca, sospesi in amido di mais al 5$, nel volume costante di 10 ml/kg? I controlli ricevevano il solo veicolo?

?A 5 ore dalla somministrazione gli animali sono stati sacrificati, Lo stomaco veniva tagliato lungo la piccola curvatura, lavato sotto acqua corrente e veniva esaminata macroscopica mente, da un osservatore ignaro del trattamento, la presenza di ulcere nella parte glandolare della mucosa.

Venivano rilevati:

a) la somma dei massimi diametri di tutti gli spots ulcerativi; b) il numero degli spots ulcerativi.

Il valore di 50 (riportato in Tabella 5) veniva calcolato s?e condo Litchfield e Wilcoxon (j, Pharmacol. Exp, Ther, 96, 99, 1949) con criterio tutto-nulla considerando "ulcerati" (con ul cera) gli animali con lesioni gastriche con estensione c.omples siva uguale o superiore a 2 mm,

TABELLA 5

composto UD 50 (ynnol/kg)

mom iflumato inattivo

ac. nifiumico 117

(184 - 71)

Effetto perforante intestinale

La prova ? stata effettuata in ratti di sesso maschile di peso corporeo iniziale di 250-300 g, normalmente alimentati, in quan O?UQIU wimuieiiiAi I/IVT

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<?>to i danni a carico dell'intestino sono pi? intensi in animali alimentati?

I farmaci venivano somministrati quotidianamente, come sospen-sione in amido di mais al 5% e nel volume costante di 10 ml/kg, per 12 giorni consecutivi, mentre i controlli ricevevano l'equi valente volume di veicolo.

Sugli animali morti nel corso del trattamento veniva eseguito l'esame autoptico: quando si osservavano ulcere perforate inte-stinali, o peritonite essudativa, il test veniva considerato po sitivo.

La dose quotidiana provocante perforazioni intestinali nel 50% degli animali (PD^Q) veniva calcolata secondo Litchfield e Wil^ coxon sulla base del numero dei morti durante i 12 giorni di trattamento.

I risultati appaiono dalla Tabella 6

TABELLA 6

composto P.R (jim ol/kg/die)

morniflumato 970 0, 19

ac. nifiumico 184 1 Studio Consulenza Brevettale s.r.l.

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Tossicit? acuta

La tossicit? per somminis trazione unica ? stata determinata per via orale in due specie animali, sottoposti a digiuno con acqua ad libitum 18 ore prima dell ' esperimento:

- in topi di sesso maschile, del peso di 26-31 g e di sesso femminile, del peso di 20-25 g?

- in ratti di sesso maschile, del peso di 155-190 g e di sesso femminile, del peso di 140-165 g.

Sono stati ottenuti i risultati esposti nella Tabella 7, espres si come valore di DL^g, calcolato con il metodo di Litchfield-Wilcoxon:

studio Consulenza ureveiruaie MI

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TABELLA 7

composto specie sesso P.R.

<DL>50

animale

(m mol/lcg)

maschio 9,96 0

(12,46 - 7,96) , 10 ratto

femmina 11,46

morniflumato (14,89 - 8,82)

maschio 11,23 0,12

(18,10 - 6,96)

topo

femmina 12,50

(19,63 - 7,96)

ratto maschio 0,99

(1,20 - 0,82)

ac. nifiumico

topo maschio 1,33

(1r60 - 1,10)

? I risultati esposti pi? sopra dimostrano pertanto che il morniflumaio (l),nella formulazione per somministrazione orale secondo 1*invenzione, ? un composto ad attivit? antiinfiammatoria, analgesica e antipiretica efficace e sicuro, imprevedibilmente del tutto sprovvisto di attivit? ulcerogena anche a dosi molto elevate.

La presente invenzione si riferisce anche a tutti gli aspetti industrialmente applicabili connessi all'uso orale del morniflumato - come tale o sotto forma di sali di addizione con aci di farmaceuticamente accettabili - in qualit? di agente antiin fiammatorio, analgesico e antipiretico. Un aspetto essenziale dell 'invenzione dell 'invenzione ? quindi costituito da formula zioni farmaceutiche, contenenti quantit? predeterminate di mor niflumato o di suoi sali, per somministrazione orale, sotto forma di capsule, compresse o formulazioni analoghe, mescolate con opportuni eccipienti scelti tra quelli comunemente in uso per questo tipo di composizioni.

La dose unitaria pu? variare da 0,3 a 0,8 g(preferibilmente 0,5 g) di principio attivo e la posologia ? da 2 a 4 somministrazioni giornaliere.

Si riporta a titolo esemplificativo, senza voler in alcun modo limitare 1 'invenzione, la composizione di una compressa del peso unitario di 0,6 g, dosata a 0,5 g di principio attivo: morniflumato HC1 0,5 g polivinilpirrolidone 0,015 g

Avicel 0,078 g

magnesio stearato 0,007 g

Ancor pi? sorprendentemente ? stato poi dimostrato che il morni fiurnato non solo ? di per s? privo di effetti ulcerogeni, ma antagonizza in maniera significativa gli effetti gastrolesivi provocati da altri agenti, in alcuni modelli di ulcera sperimen tale, come posto in evidenza dalla sperimentazione qui sotto riassunta?

Attivit? citoprotettiva sulla necrosi gastrica da etanolo

Lo studio di questa attivit? ? stato effettuato utilizzando un modello sperimentale descritto da Derelanko M?-J. e Long'J.F? (Proc. Soc? Exp? Biol? Med? 166, 394, 1981)?

A ratti maschi Charles River CD (SD) a digiuno da 18 ore ? stato somministrato morniflumato a varie dosi per via orale, in sospensione in amido di mais al 5%, in volume costante di 2,5 ml/kg.

Dopo 20 minuti gli animali sono stati trattati mediante sonda gastrica con 1 mi di etanolo assoluto?

Trascorsi 60 minuti si ? proceduto al sacrificio, lo stomaco ? stato estratto, aperto lungo la piccola curvatura ed esam_i nato macroscopicamente per rilevare la presenza di lesioni ne erotiche nella porzione ghiandolare della mucosa gastrica, se condo una scala arbitraria di punteggio a 9 punti (0-8).

Un gruppo di animali trattato con il solo veicolo e l'agente lesivo nelle medesime condizioni ? servito da controllo*

La differenza statistica dei valori tra trattati e controlli ? stata saggiata mediante il test "U" di Mann e Whitney.

Il valore di ED_ _ per il mornif lumaio , calcolato sulla base 50

delle inibizioni percentuali nei confronti dei rispettivi con troni, ? risultato di 1 2 mg/kg ( 28 /umol/kg) .

Attivit? antiulcera verso le lesioni da anti infiammatori non steroidei

La prova ? stata condotta su ratti Charles River CD ( SD) di sesso maschie, del peso corporeo di 200-270 g, a digiuno da 1 8 ore ?

<?>L'agente lesivo (acido nifiumico 100 mg/kg; acido acetilsalicilico 150 mg/kg; indometacina 20 mg/kg) e il morniflumato sono stati somministrati contemporaneamente per via orale, in sospensione di amido di mais al 5%, nel volume costante di 10 ml/kg, A distanza rispettivamente di 5 ore dal trattamento con acido acetilsalicilico (intervalli che costituiscono il picco dell 'attivit? ulcerogena degli agenti impiegati ) , gli animali sono stati sacrificati e gli stomaci isolati ed esaminati per la presenza di ulcere secondo i criteri indicati in precedenza.

Un gruppo di animali trattato con il solo agente lesivo ? servito in ciascuna prova come controllo.

I valori di ED^, determinati sulla base delle inibizioni percentuali nei confronti dei rispettivi controlli , sono risultati :

OIUUIU bunauiciiM DI eremi aie s.r.i.

17

Agente lesivo mor nifi-amato

m yumol/kg

ac. acetil salicilico 36 83 indometacina 74 171

ac. nifiumico 199 461

Sulla base di questi risultati il morniflumato ha dimostrato di esercitare un' attivit? gastroprotettiva nei confronti di diversi modelli sperimentali di ulcera indotta.

Tale attivit? ? stata confermata anche a segui to di somministra zione del composto per via parenterale.

Il morniflumato pu? pertanto essere impiegato, come tale o sotto forma di un opportuno sale, come agente antiulcera in composizio ni farmaceutiche per somministrazione orale o parenterale, sotto forma rispettivamente di capsule, compresse o fiale, in associazione con eccipienti farmaceuticamente accettabili scelti tra quel^ li comunemente impiegato per queste formulazioni .

Per questa svia azione gastroprotettiva, il morniflumato pu? inolL tre essere vantaggiosamente impiegato in condizioni farmaceutiche per somministrazione orale, del tipo di quelle indicate in precedenza, in associazione con altri antiinf iammatori non steroidei, quali indometacina, acido nifiumico, salicilati , ecc?? ? ? , dei quali antagonizza gli effetti ulcerogeni . In queste formulazio ni il rapporto tra i principi attivi potr? variare da 30: 1 a 1 : 30 a seconda dell 'attivit? specifica propria di ciascun composto. Un altro aspetto della presente invenzione ? quindi costituito <? >da formulazioni farmaceutiche contenenti agenti infiammatori non steroidei in associazione con morniflumato ?

RIVENDICAZIONI

1 . Formulazione farmaceutica ad attivit? antiinfiammatoria, analgesica e antipiretica , contenente come principio attivo il morniflumato di formula ( i ) :

OOCH-CH -N

o un suo sale farmaceuticamente accettabile, caratterizzata dal fatto che ? somministrabile per via orale?

2. Formulazione farmaceutica secondo la rivendicazione 1 , in forma di capsule, compresse o formulazioni analoghe contener ti da 0,3 a 0, 8 g di principio attivo per unit? di dose.

3? Formulazione farmaceutica ad attivit? antiulcera e gastro protettiva, per somminis trazione orale o parenterale, caratterizzata dal fatto che in qualit? di principio attivo contiene morniflumato ( l) o un suo sale farmaceuticamente accettabile.

4? Formulazione farmaceutica ad attivit? antiinfiammatoria e gastroprotettiva, caratterizzata dal fatto che in qualit? di principio attivo contiene morniflumato ( i) da solo o in asso ciazione con altri agenti an ti infiamma tori non steroidei? 5 ? Formulazione farmaceutica secondo la rivendicazione 4, caratterizzata dal fatto che nel caso di associazione i compo

Claims (1)

1. ? nenti attivi si trovano in rapporto compreso tra 30: 1 e 1 : 30 a seconda dell 'attivit? specifica propria di ciascuno? Milano, 23 febbraio 1982

   CowJ?m Brefelhi?le s.rl

   !' Ufficiai? *Rogtn!

   flre?e?.