IT202100029000A1 - Composizioni immunostimolanti per animali da compagnia - Google Patents
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Description
Descrizione del brevetto per invenzione industriale avente per titolo:
?COMPOSIZIONI IMMUNOSTIMOLANTI PER ANIMALI DA COMPAGNIA?
L?invenzione ha per oggetto composizioni comprendenti piceatannolo e funghi medicinali o loro estratti. Le composizioni dell?invenzione sono utili per aumentare le difese immunitarie negli animali da compagnia, in particolare nel cane.
Stato della tecnica
Il fenomeno dell'antibiotico resistenza sta suscitando sempre maggior allarme e molti sforzi di ricerca sono finalizzati allo sviluppo di alternative efficaci al trattamento delle malattie infettive. Di grande importanza ? l'approccio ?One Health? che tiene conto del benessere di uomini, animali e piante tenendo conto delle loro interrelazioni (
2017). Questo approccio ? considerato fondamentale nella lotta all'antibiotico resistenza poich? l'abuso di antibiotici in tutti i settori comporta la diffusione interspecie di geni legati all?antibiotico resistenza attraverso il trasferimento orizzontale (
2017; 2016).
In particolare, in medicina veterinaria un grande abuso di antibiotici, utilizzati anche nella pratica diagnostica. Negli ultimi anni sono state considerate diverse alternative per sostituire l'utilizzo di antibiotici nella pratica veterinaria, tra cui la terapia diretta verso l?ospite, la quale offre una nuova frontiera nella lotta contro l'antibiotico resistenza e un'alternativa efficace alle terapie tradizionali dirette contro i patogeni (
2018).
Una delle strategie per aumentare le difese dell?ospite ? l'utilizzo di peptidi antimicrobici ( 2019; 2020), piccoli peptidi che coprono differenti ruoli nei mammiferi che vanno dalla protezione verso le infezioni batteriche alla riparazione delle ferite alla modulazione dei processi infiammatori ( 2012). I peptidi antimicrobici possono essere utilizzati direttamente come sostituti o coadiuvanti degli antibiotici oppure possono essere stimolati da molecole endogene o esogene per aumentare le difese dell'ospite prevenendo o trattando l?origine dell?infezione (
2019; 2018; 2014).
Una delle classi di peptidi pi? utilizzata ? quella delle catelicidine, altamente conservate tra le specie (14). Le catelicidine possiedono un'alta attivit? antibatterica verso un largo range di microrganismi; in particolare la catelicidina di cane K9CATH ? stato dimostrato avere una forte attivit? antimicrobica verso Gram positivi e Gram negativi. Inoltre, alcuni studi hanno mostrato che ? possibile stimolare l'espressione della K9CATH utilizzando molecole esogene, tra cui estratti di Boldo e Filipendula olmaria in cheratinociti di cane ( 2017).
US 2012/0295968 descrive composizioni comprendenti tetraidrocannabinolo, cannabidiolo e altri componenti tra i quali Cordyceps sinensis, Ganoderma lucidum, Pleurotis ostreatus o Hericeum erinaceus utili per il trattamento di una variet? di patologie (dolore, cancro, HIV, neurodegenerazione e altre). WO 2020188577 descrive composizioni per il trattamento di malattie infiammatorie immuno-mediate comprendenti associazioni sinergiche di cannabinoidi e funghi immunostimolanti tra i quali Cordyceps e Inonotus obliquus. WO2006007848 descrive composizioni ad attivit? immunostimolante a base polisaccaridi estratti da funghi quali Cordiceps, Hericium, Auricularia, Lentinula edodes.
Descrizione dell?invenzione
Si ? ora trovato che combinazioni di basidiomiceti medicinali con piceatannolo hanno effetti sinergici sulla stimolazione dell?espressione di peptidi endogeni ad attivit? antimicrobica e sono pertanto utili per aumentare le difese immunitarie dell?ospite.
L?invenzione ha pertanto per oggetto composizioni immunostimolanti utili in ambito veterinario comprendenti un?associazione sinergica di basidiomiceti medicinali e piceatannolo.
Per basidiomicete medicinale si intende un fungo macroscopico utilizzato in medicina cinese, ayurvedica o altre discipline mediche sotto forma di estratti o polvere per la prevenzione, l'alleviamento o la guarigione di molteplici malattie e/o nell'equilibrare una dieta sana. Rassegne approfondite che discutono le caratteristiche e gli impieghi dei funghi medicinali sono riportate ad esempio in Biomed J 2014;37(6):345-56 e in Foods. 2016; 5(4): 80.
Esempi di basidiomiceti medicinali comprendono Lentinula edodes, Inonotus obliquus, Poria cocos, Cordyceps sinensis, Hericium erinaceus, Auricularia auricula, Polyporus umbellatus, Ganoderma lucidum, Grifola frondosa, Agaricus s..
Le composizioni dell?invenzione contengono preferibilmente almeno due e pi? preferibilmente almeno tre basidiomiceti medicinali. Sono particolarmente preferiti Lentinula edodes, Inonotus obliquus e Poria cocos, in forma di polvere essiccata o di estratto acquoso titolato in polisaccaridi, in particolare di polisaccaridi quali alfa- e betaglucani di peso molecolare medio Mn compreso fra 2500 e 500.000 Dalton. Il contenuto in polisaccaridi degli estratti varia tipicamente dal 10 al 30% in peso.
Una fonte preferita di piceatannolo, stilbenoide fenolico presente in diverse piante, ? un estratto di Passiflora edulis, in particolare un estratto secco di semi avente un contenuto di piceatannolo dal 3 al 10% in peso.
Le composizioni dell?invenzione possono inoltre contenere luteolina o un estratto che la contiene, ad esempio un estratto di Arachis hypogaea, cannabidiolo o estratti di Cannabis sativa privi di tetraidrocannabinolo.
Composizioni preferite secondo l?invenzione comprendono Lentinula edodes, Inonotus obliquus e Poria cocos ed estratto di Passiflora edulis o la quantit? equivalente di piceatannolo. Le quantit? per dose unitaria dei componenti dipenderanno ovviamente dalla specie di animale e dal peso. In linea di massima saranno comunque comprese nei seguenti intervalli:
- Lentinula edodes o un suo estratto da 1 a 500 mg, preferibilmente da 1 a 50 mg;
- Inonotus obliquus o un suo estratto 1 a 500 mg, preferibilmente da 1 a 50 mg; - Poria cocos o un suo estratto 1 a 500 mg, preferibilmente da 1 a 50 mg;
- Piceatannolo da 1 a 100 mg.
Potranno inoltre essere presenti uno o pi? componenti scelti fra Cordyceps sinensis, Hericium erinaceus, Auricularia auricula, ognuno in quantit? da 1 a 500 mg.
L?attivit? dei componenti delle composizioni dell?invenzione ? stata valutata in colture di cheratinociti e di monociti di cane che costitutivamente esprimono in coltura il gene camp (Cathelicidin Antimicrobial Peptide), che codifica per la catelicidina K9CATH.
Cheratinociti di cane (CPEK, CELLnTEC, Switzerland) e monociti-macrofagi (DH82, ATCC, USA) sono stati mantenuti in coltura a 37?C in ambiente umidificato al 5% di CO2. I cheratinociti sono stati coltivati nel loro terreno di base specifico CnT-09 supplementato con 10% siero fetale bovino, 1% glutammina, 1% penicillina/streptomicina. I monociti sono stati mantenuti in coltura con "Eagle?s minimum essential medium? (EMEM) supplementato con 10% siero fetale bovino, 1% glutammina, 1% penicillina/streptomicina. Raggiunte le condizioni di coltura ottimali, 50000 CPEK/ml e 100000 DH82/ml sono state seminate e mantenute in coltura per 24h, 48h, 72h. L?espressione genica relativa di camp, il gene codificante per la catelicidina K9CATH, ? stata valutata per tutti i tempi in seguito a trattamento con gli estratti selezionati, considerando le colture non trattate come controllo.
I risultati ottenuti dimostrano che Inonotus obliquus aumenta l?espressione di camp rispetto al controllo non trattato, dopo 48h nei cheratinociti (2.274 ? 0,17; p<0.001) e nei monociti dopo 24h e 48h di trattamento (rispettivamente 1.544 ? 0,148; p<0.001 e 1.329 ? 0,063; p<0.01). Poria cocus aumenta l?espressione di camp dopo 24h di trattamento nei monociti (1.557 ? 0,110; p<0.001). Lentinula edodes aumenta l?espressione del gene di interesse dopo 48h di trattamento nei monociti (1.634?0,057; p<0.001) insieme a Cordyceps sinensis, Hericium erinaceus e Auricularia uricula dopo 48h nei monociti (rispettivamente 1.526 ? 0,148; p<0.001; 1.746 ? 0.196; p<0.001; 1.520 ? 0.105; p<0.001); il piceatannolo aumenta significativamente l?espressione di camp nei cheratinociti dopo 48h e 72h (rispettivamente di 2.116 ? 0,243; p<0.001; 1.889 ? 0.132; p<0.001). Particolari sinergie sono state osservate usando miscele, indipendentemente dai rapporti di dose, a base di Lentinula, Cordyceps, Hericium, Auricularia, Poria, Inonotus. Ulteriori sinergie sono state osservate aggiungendo piceatannolo (estratto da Passiflora edulis) e/o luteolina (estratto da Arachis hypogaea) e/o cannabidiolo (estratto di Cannabis sativa).
Le composizioni dell?invenzione potranno essere formulate in modo adatto alla somministrazione per via orale e saranno preparate secondo metodi convenzionali ben noti in tecnica farmaceutica, come quelli descritti in ?Remington?s Pharmaceutical Handbook?, USA, utilizzando eccipienti, diluenti, agenti di carica, antiagglomeranti, aromi, dolcificanti, accettabili per il loro uso finale.
Le composizioni dell?invenzione saranno presentate in forma di capsule, compresse, cialde, granulati, polveri disperdibili, sospensioni, barrette, biscotti. Le composizioni possono anche essere usate come additivi di alimenti o mangimi (petfood) variamente formulati (gelatine, crocchette, zuppe e simili). Oltre che per via orale, le composizioni possono anche essere applicate topicamente, opportunamente formulate in gel, pomate o lozioni.
Nelle formulazioni esemplificate di seguito, Lentinula si riferisce ad un estratto
acquoso di Lentinula edodes con contento in polisaccaridi del 30% determinato per via
spettrofotometrica, Hericium si riferisce ad una polvere di sporofori di Hericium erinaceus,
Inonotus si riferisce ad un estratto idroetanolico di Inonotus obliquus con contenuto di
almeno il 10% di polisaccaridi, Cordyceps si riferisce ad un estratto acquoso di micelio di
Cordyceps sinensis con contenuto del 30% di polisaccaridi determinato per HPLC,
Auricularia si riferisce ad una polvere di sporofori di Auricularia auricula, Poria si
riferisce ad un estratto acquoso di frutti di Poria cocus con contenuto in polisaccaridi del
10%, Cannabis si riferisce ad un estratto di Cannabis sativa privo di THC e con contenuto
di cannabidiolo da 0.1 a 20%.
Esempio 1 - Compresse filmate gastro-protette
Ingrediente mg/cpr
Lentinula 10
Cordyceps 10
Hericium 10
Auricularia 10
Poria 10
Inonotus 20
Piceatannolo 2
Cellulosa 20
Biossido di silicio 20
Magnesio stearato 150
Filmatura gastro-resistente 5
Altri eccipienti qb
TOTALE 500
Esempio 2 - Compresse filmate gastro-protette Ingrediente mg/cpr Lentinula 5 Cordyceps 5 Hericium 5 Auricularia 5 Poria 10 Inonotus 5 Piceatannolo 2 Luteolina 2 Cannabidiolo 1 Cellulosa 20 Biossido di silicio 25 Magnesio stearato 100 Filmatura gastro-resistente 5 Altri eccipienti qb TOTALE 550
Esempio 3 - Compresse a rilascio immediato Ingrediente mg/cpr Lentinula 5 Hericium 5 Auricularia 5 Poria 10 Inonotus 5 Piceatannolo 2 Luteolina 2 Cannabidiolo 2 Sorbitolo 85 Aroma 20 Magnesio stearato 7,5 Biossido di silicio 2,5 Acesulfame K 5,0 Sodio croscarmellose 6,0 Altri eccipienti qb Totale 250 Esempio 4 - Compresse a lento rilascio
Ingrediente mg/cpr Lentinula 15 Cordyceps 5 Hericium 15 Auricularia 5 Poria 20 Inonotus 5 Piceatannolo 2 Luteolina 2 Cannabidiolo 2 Cellulosa microcristallina 90 Fosfato di calcio 200 Idrossipropilmetilcellulosa 55 Magnesio stearato 5 Biossido di silicio 4 Altri eccipienti qb Totale 600
Esempio 5 - Compresse tri-strato a rilascio differenziato Strato interno a rilascio immediato
Ingrediente mg/cpr Lentinula 5 Cordyceps 5 Sorbitolo 20 Aroma 20 Magnesio stearato 2,5 Biossido di silicio 2,5 Acesulfame K 5,0 Sodio croscarmellose 6,0 Strato intermedio
Piceatannolo 2 Luteolina 2 Cannabidiolo 1 Cellulosa microcristallina 100 Fosfato di calcio 100 Magnesio stearato 4,5 Biossido di silicio 3,5 Sodio croscarmellose 1 Strato a rilascio protratto
Hericium 5 Auricularia 5 Poria 10 Inonotus 5 Fosfato di calcio 120 Idrossipropilmetilcellulosa 100 Magnesio stearato 2 Biossido di silicio 2 Altri eccipienti qb Totale 1500
Esempio 6 - Formulato oro-dispersibile
Ingrediente mg/dose Lentinula 10 Cordyceps 10 Hericium 5 Auricularia 5 Poria 5 Inonotus 5 Piceatannolo 5 Luteolina 2 Cannabidiolo 1 Sorbitolo 160 Aroma arancia 20 Aroma mandarino 5 Aerosil 5 Fruttosio 1250 Altri eccipienti qb Totale 1500 Esempio 7 - Discoide gommoso
Ingrediente mg/dose Lentinula 5 Cordyceps 5 Hericium 5 Auricularia 5 Poria 10 Inonotus 5 Piceatannolo 2 Luteolina 2 Cannabis estratto 4 Gomma base 200 Aroma timo 2 Levilite 20 Talco F.U. 20 Magnesio stearato vegetale 15 Gomma lacca 12 Xilitolo 125 Gomma arabica 6 Biossido di titanio 6 Cera carnauba 0,2 Altri eccipienti qb Totale 500 Esempio 8 ? forma liquida per uso orale Ingrediente mg/dose Lentinula 5 Cordyceps 5 Hericium 5 Auricularia 5 Poria 5 Inonotus 5 Piceatannolo 2 Luteolina 2 Cannabis estratto 4 Magnesio gluconato 250 Zinco gluconato 25 Fruttosio 2500 Aroma albicocca 25 Acido citrico anidro 50 Colorante: Betacarotene 1% 25 Aerosil 200 10 Acqua qb
Esempio 9 ? Gel per applicazione topica Ingrediente % Lentinula 0,05 Cordyceps 0,1 Hericium 0,1 Auricularia 0,1 Poria 0,1 Inonotus 0,1 Piceatannolo 0,05 Luteolina 0,1 Cannabis estratto 0,1 Sodio ialuronato 0,5 Acqua q.b.
Esempio 10 ? Biscotto per cane
Ingrediente % Farina di farro 19 Farina di segale 27 Olio di semi di girasole 3 Formaggio grattugiato 8 Farina di avena 19 Lentinula 0,05 Cordyceps 0,1 Hericium 0,1 Auricularia 0,1 Poria 0,1 Inonotus 0,1 Piceatannolo 0,05 Luteolina 0,1 Cannabis estratto 0,1 Acqua qb a 100
Claims (8)
1. Composizioni comprendenti un?associazione sinergica di basidiomiceti medicinali o loro estratti e piceatannolo o una sua fonte vegetale.
2. Composizioni secondo la rivendicazione 1 in cui la fonte di piceatannolo ? un estratto di Passiflora edulis.
3. Composizioni secondo la rivendicazione 1 o 2 in cui i basidiomiceti sono scelti fra Lentinula edodes, Inonotus obliquus, Poria cocos, Cordyceps sinensis, Hericium erinaceus, Auricularia auricula, Polyporus umbellatus, Ganoderma lucidum, Grifola frondosa, Agaricus s..
4. Composizioni secondo la rivendicazione 1 in cui i basidiomiceti sono Lentinula edodes, Inonotus obliquus e Poria cocos.
5. Composizioni secondo la rivendicazione 4 comprendenti inoltre uno o pi? componenti scelti fra Cordyceps sinensis, Hericium erinaceus, Auricularia auricula, estratto di Arachis hypogaea, estratto di Cannabis sativa.
6. Composizioni secondo la rivendicazione 4 in cui le quantit? per dose unitaria dei componenti sono comprese nei seguenti intervalli:
- Lentinula edodes o un suo estratto da 1 a 500 mg, preferibilmente da 1 a 50 mg; - Inonotus obliquus o un suo estratto 1 a 500 mg, preferibilmente da 1 a 50 mg; - Poria cocos o un suo estratto 1 a 500 mg, preferibilmente da 1 a 50 mg;
- Piceatannolo da 1 a 100 mg.
7. Composizioni secondo una o pi? delle rivendicazioni precedenti in forma di comprendenti estratti di capsule, compresse, cialde, granulati, polveri disperdibili, sospensioni, gel.
8. Composizioni delle rivendicazioni 1-7 per uso nel trattamento di condizioni di deficit immunitario negli animali da compagnia.
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