IT202000032396A1 - Composizione di combinazione contenente un principio attivo derivato da alghe e suoi usi in ambito medico e nutrizionale - Google Patents

Description

Deposito di una domanda di brevetto per invenzione industriale dal titolo:

COMPOSIZIONE DI COMBINAZIONE CONTENENTE UN PRINCIPIO ATTIVO DERIVATO DA ALGHE E SUOI USI IN AMBITO MEDICO E NUTRIZIONALE.

DESCRIZIONE

CAMPO DELL'INVENZIONE

La presente invenzione concerne una composizione contenente un principio attivo derivato da alghe e suoi usi in ambito medico e nutrizionale.

La presente invenzione origina nel settore dei nutraceutici, integratori e dei prodotti farmaceutici.

In particolare, la presente invenzione riguarda un integratore alimentare per la somministrazione orale idoneo a rallentare i segni dell?invecchiamento dell?organismo umano.

TECNICA ANTERIORE

Con il termine di invecchiamento o senescenza si intende l'insieme dei processi fisiologici che concorrono a determinare una riduzione funzionale unitamente ad una deformazione strutturale dell?organismo umano legata all'et?.

Nella senilit? o vecchiaia i fenomeni connessi con il processo di senescenza si sono gi? stabiliti in forma evidente e definitiva.

Questa situazione ? preceduta da un periodo di tempo di 10-15 anni che generalmente interessa l?arco di tempo dai 40 a circa 60 anni, e che rappresenta la fase di transizione alla vecchiaia. In tale periodo si riscontrano le prime alterazioni degli organi e dei tessuti in particolare il tessuto elastico, il tessuto mesenchimale e reticolo-endoteliale.

L?organo e i tessuti che sono interessati per primi ed in cui sono pi? evidenti i segni dell?invecchiamento sono i tessuti tegumentari, principalmente la pelle, viceversa l?organo in cui i segni dell?invecchiamento si manifestano in maniera pi? tardiva ? costituita dal cervello.

Con il progredire dell?et? inizia una progressiva atrofia del tessuto elastico della cute ed un concomitante avvizzimento degli stati superficiali dell?epidermide che si accompagna alla formazione di rughe. Queste sono quindi conseguenza di un cedimento delle strutture cutanee di sostegno e del ripetuto stiramento di alcune aree, soprattutto del viso.

In particolare, la degradazione delle fibre collagene, l?azione di ossidazione delle cellule epidermiche unitamente all?esposizione ad agenti esterni, principalmente luce solare rappresentano le principali cause della formazione delle rughe e dell?invecchiamento della cute. L'azione combinata di questi fattori determina l?invecchiamento cutaneo e la comparsa, anche precoce, delle rughe.

Viceversa, nell?organismo l?invecchiamento cerebrale avendo un andamento progressivo risulta essere meno evidente sino al momento in cui si manifestano i primi segni di decadimento delle funzionalit? cognitive.

Le funzioni intellettive maggiormente interessate dal declino cognitivo sono rappresentate dalla memoria, capacit? di apprendimento, di linguaggio e di orientamento spazio-temporale.

Recenti prove hanno dimostrato che l'accumulo di cellule senescenti nei tessuti e negli organi ? un fattore determinante del processo di invecchiamento e delle malattie legate all'et? nei mammiferi.

Generalmente la senescenza si accompagna con forme lievi di disturbi neuro cognitivi che non impediscono di svolgere le pi? comuni attivit? quotidiane e di mantenere normali relazioni interpersonali e di condurre una vita autonoma.

Queste forme lievi interessano principalmente la fascia di popolazione con et? superiore ai 60 anni.

Con il progredire dell?et? queste forme si cronicizzano, avendo una matrice a degenerazione progressiva e possono evolvere in forme invalidanti come la demenza senile ed il morbo di Alzheimer.

Esiste una forte domanda di prodotti nutrizionali la cui assunzione rallenti i segni dell?invecchiamento dell?organismo in particolare della pelle e del sistema nervoso centrale.

Uno scopo della presente invenzione risiede nel fornire una composizione o integratore contenente una combinazione di componenti di origine naturale che sia idonea a rallentare i segni dell?invecchiamento dell?organismo in particolare della pelle.

Un altro scopo della presente invenzione consiste nel fornire una composizione o un integratore a base di una combinazione di ingredienti attivi di origine naturale idonei a prevenire o trattare forme neurodegenerative e disturbi cognitivi collegati all?invecchiamento dell?organismo umano.

Rappresenta un ulteriore oggetto della presente invenzione un metodo per prevenire o ritardare la comparsa dei segni dell?invecchiamento cutaneo in un essere umano.

SOMMARIO DELL'INVENZIONE

Nell?ambito dell?attivit? di ricerca gli inventori hanno osservato che l'accumulo di cellule senescenti nei tessuti e negli organi ? un fattore determinante del processo di invecchiamento e delle malattie legate all'et? nei mammiferi. La rimozione selettiva delle cellule senescenti negli animali modificati geneticamente pu? invertire o ritardare gli aspetti dell'invecchiamento. Le cellule senescenti sono metabolicamente attive, ma la loro funzione ? stata alterata rispetto alle loro controparti non senescenti. Una delle principali caratteristiche esposte dalle cellule senescenti ? l'espressione del fenotipo secretorio associato alla senescenza (SASP). I mediatori secreti dalle cellule della senescenza possono agire in modo paracrino sulle cellule vicine per indurre cambiamenti fenotipici e funzionali simili alla senescenza e quindi contribuire alla disfunzione degli organi e alla patogenesi delle malattie legate all'et?, guidando l'invecchiamento dell'organismo.

Partendo da queste osservazioni gli inventori hanno riscontrato che nell'accumulo cerebrale di astrociti senescenti l'aumento del microambiente infiammatorio ? associato ad un declino cognitivo prematuro.

Un fenomeno simile ? stato riscontrato per i fibroblasti, un tipo di cellule presenti nei tessuti connettivi, come il derma (strato intermedio della pelle) e l'ipoderma (strato pi? profondo della pelle, o tessuto sottocutaneo). I fibroblasti assolvono il compito di sintetizzare componenti essenziali della matrice extracellulare formata da una componente fibrosa di fibre connettivali (fibre collagene, fibre reticolari e fibre elastiche) e da una componente non fibrosa (sostanza fondamentale amorfa), a base di acqua, sali, proteoglicani, glicosamminoglicani e glicoproteine. Partendo da queste premesse si ? osservato come l?astaxantina svolga un?azione stimolante dei meccanismi biologici che rallentano l'espressione del fenotipo secretorio associato alla senescenza, contribuendo a ritardare e formare nel microambiente una risposta infiammatoria associata all?invecchiamento cutaneo e al decadimento delle funzioni cognitive.

Nell?ambito dell?attivit? di screening di sostanze biologicamente attive gli inventori hanno inoltre osservato che l?attivit? antiossidante della astaxantina viene potenziata quando ? combinata con la quercetina, una sostanza ad azione antiossidante di origine naturale.

Partendo da queste promesse si ? sorprendentemente trovato che la combinazione di astaxantina e quercetina oltre ad un robusto effetto antiossidante ha un effetto di inibizione sulle cellule senescenti degli astrociti e dei fibroblasti. Questo effetto rende idonea la combinazione di astaxantina e quercetina nella prevenzione e/o nel trattamento di forme di invecchiamento dell?organismo umano, in particolare nella prevenzione o trattamento di forme di declino cognitivo o di invecchiamento della cute di un essere umano.

In generale la combinazione di astaxantina e quercetina trova qui applicazione nel rallentamento del decadimento delle funzioni cognitive e dell?invecchiamento della cute.

In accordo ad un aspetto generale, la presente invenzione quindi prevede una composizione per ritardare il naturale processo di senescenza, comprendente una combinazione di astaxantina e quercetina in un veicolo e/o eccipiente fisiologicamente accettabile.

Tipicamente, nella composizione dell?invenzione i principi biologicamente attivi astaxantina e quercetina sono forniti in un quantitativo farmaceuticamente, nutraceutico, o dietetico efficace.

In generale, la composizione qui descritta trova applicazione nella prevenzione o nel trattamento dell?invecchiamento della pelle e dei disturbi cognitivi connessi con l?invecchiamento dell?organismo umano.

In accordo ad un aspetto, viene fornita una composizione comprendente una combinazione di astaxantina e quercetina ed un veicolo fisiologicamente accettabile e/o edibile per l?uso nella prevenzione e/o trattamento dell?invecchiamento o senescenza della pelle.

In accordo ad un altro aspetto viene fornito un integratore alimentare contenente una composizione comprendente una combinazione di astaxantina e quercetina ed un veicolo e/o eccipiente commestibile per l?uso nella prevenzione o nel trattamento dei disturbi cognitivi.

In accordo ad un ulteriore aspetto viene fornito un metodo per la prevenzione o il trattamento delle patologie neurodegenerative e/o disturbi cognitivi comprendente la somministrazione ad un individuo di una composizione contenente una combinazione di astaxantina e quercetina ed un veicolo edibile e/o fisiologicamente accettabile.

Secondo alcune forme di realizzazione, la composizione dell'invenzione ? una composizione farmaceutica, un nutraceutico, un integratore che pu? essere introdotto nel regime dietetico di un individuo in necessit? di trattamento.

La presente invenzione verr? descritta in modo dettagliato di seguito facendo riferimento alle seguenti figure.

BREVE DESCRIZIONE DELLE FIGURE

Alcune caratteristiche e vantaggi della presente invenzione risulteranno evidenti dalle accluse figure in cui:

la figura 1 illustra grafici a barre che mostrano i risultati del test comparativo su astrociti senescenti con quercetina (Q) e astaxantina (A) date singolarmente ed in combinazione (Q+A). Viene raffigurato l?effetto di Q (5?M), A (5?M) e (Q+A) (5?M) sui livelli di astrociti senescenti. La barra nera evidenzia l?effetto sinergico di inibizione della combinazione (Q+A) sulle cellule senescenti degli astrociti. Le cellule sono state esposte ai principi attivi per 48 ore prima dell?analisi SA-? Gal cellule;

la figura 2 illustra grafici a barre che mostrano i risultati del test comparativo su fibroblasti senescenti con quercetina (Q) e astaxantina (A) date singolarmente ed in combinazione (Q+A). Viene raffigurato l?effetto di Q (5?M), A (5?M) e (Q+A) (5?M) sui livelli di fibroblasti senescenti. La barra nera evidenzia l?effetto sinergico di inibizione della combinazione (Q+A) sulle cellule senescenti dei fibroblasti. Le cellule sono state esposte ai principi attivi per 48 ore prima dell?analisi SA-? Gal cellule.

DESCRIZIONE DETTAGLIATA DELL'INVENZIONE

In accordo ad alcuni aspetti dell'invenzione, la combinazione di astaxantina e quercetina qui descritta stimola i meccanismi biologici che rallentano l'espressione del fenotipo secretorio associato alla senescenza, contribuendo a ritardare e formare nel microambiente una risposta infiammatoria associata all?invecchiamento cutaneo e al decadimento delle funzioni cognitive.

In un aspetto generale viene qui descritto un regime di trattamento comprendente la somministrazione di una composizione a base di una combinazione di astaxantina e quercetina in una popolazione di individui con et? superiore a 50 anni, preferibilmente superiore a 60 anni per trattare la senescenza dell?organismo umano o specifici segni e/o manifestazioni dell?invecchiamento, in particolare della cute o del cervello.

Prove sperimentali in vitro su un marcatore di senescenza biochimica ?galattosidasi associata alla senescenza (SA-?-Gal) hanno evidenziato un?attivit? anti-senolitica della combinazione di astaxantina e quercetina in particolare su astrociti e fibroblasti.

In accordo ad un aspetto viene fornita una composizione di combinazione come definita nella acclusa rivendicazione 1.

Ulteriori forme di realizzazione della composizione di combinazione dell?invenzione sono definite nelle rivendicazioni 2-5 quivi accluse.

Vantaggiosamente, la combinazione di astaxantina e quercetina fornisce un effetto protettivo su astrociti, cellule costituenti della neuroglia che si trovano nel sistema nervoso centrale e si distinguono in astrocita fibroso, che si ritrovano nella sostanza bianca e astrocita protoplasmatico. Questo effetto determina protegge alcune funzioni corticali neuronale rallenta il processo di senescenza neuronale migliorando la regolazione dei processi che presiedono alle principali funzioni cognitive. Questo sinergismo d?azione consente di realizzare un trattamento profilattico o terapeutico del decadimento delle funzioni cognitive.

In un aspetto dell?invenzione viene quindi fornita una composizione di combinazione di astaxantina e quercetina per l?uso in ambito neurologico, in particolare nel trattamento di patologie o affezioni connesse con l?invecchiamento del cervello. Il cervello ? un organo particolarmente suscettibile allo stress ossidativo per via del metabolismo di questo organo che comporta un elevato tasso di consumo di glucosio ed ossigeno.

Nella composizione dell?invenzione la combinazione della quercetina con astaxantina esercita un effetto antinfiammatorio e antiossidante sinergico che riduce i ROS sulla salute cerebrale, specialmente in un soggetto con et? superiore a 50 anni, quando originano i primi segni di un rallentamento della funzione e capacit? cognitive.

Queste attivit? biologiche rendono la composizione di combinazione idonea per l?uso nella prevenzione o trattamento delle malattie o disturbi neurocognitivi e/o il declino cognitivo, in particolare patologie neurodegenerative, forme di declino cognitivo come ad esempio la demenza senile, perdita di memoria, forme di declino cognitivo di origine vascolare, danno neuronale ad esempio a seguito di eventi ischemici.

Queste attivit? sono riscontrabili sottoponendo individui, ad esempio di et? tra 60 e 70 anni, con test CogHealth, una prova che valuta il tempo di risposta e l?accuratezza su 5 parametri cognitivi attraverso un gioco con 5 carte su computer, al tempo 0 e poi ogni 4 settimane di trattamento.

In accordo ad un altro aspetto dell?invenzione, la combinazione di quercetina con astaxantina esercita un effetto antinfiammatorio e antiossidante sinergico sulla pelle, particolarmente evidente in un individuo adulto, ad esempio di et? superiore a 50 anni.

L?effetto antiaging sulla pelle ? da ricondurre alla inibizione della combinazione Q+A sulle cellule senescenti dei fibroblasti ed anche all?azione antiossidante della combinazione.

Si ? osservato che la combinazione della quercetina con astaxantina esercita un effetto antiossidante sinergico che riduce i ROS determinando un rallentamento nel processo di invecchiamento della pelle, specialmente in un soggetto con et? superiore a 50 anni. Questo effetto si accompagna ad un?azione antinfiammatoria su derma ed epidermide.

Questi effetti sono alla base dell?uso antiaging sulla pelle della composizione di combinazione come qui descritta.

Inoltre, la somministrazione della composizione di combinazione migliora l?aspetto della pelle promuovendo il rinnovamento delle cellule degli strati profondi ed intermedi dell?epidermide ed incrementando l?elasticit? riducendo cos? la profondit? di corrugazioni e rughe fornendo un effetto di ringiovanimento.

Nell?ambito della presente invenzione, la misura dell?attivit? antiossidante pu? essere realizzata con il metodo ?Oxygen-Radical Absorbance Capacity? (ORAC)(Cao, G.; et al, (1993) Free Radic. Biol. Med. 14(3):303-11), oppure con la metodica Total Radical-Trapping Antioxidant Parameter (TRAP) (Ghiselli, A.; et al (1995) Free Radic. Biol. Med. 18(1):29-36; Wayner, D. D et al (1985) FEBS Lett.

187(1):33-7) i quali determinano la capacit? delle sostanze di ritardare o spegnere ROS prodotti mediante generatori di radicali liberi.

L?effetto riscontrato ? sinergico e rende la composizione di combinazione idonea nella prevenzione o trattamento dell?invecchiamento cutaneo e dei relativi segni sulla pelle, ad esempio, rughe facciali, corrugazioni della pelle, raggrinzimento, inspessimento del tegumento, perdita di elasticit?.

Questi effetti sono riconducibili alla combinazione delle due componenti biologicamente attive della composizione dell?invenzione.

Uno dei principi biologicamente attivi della composizione di combinazione ? astaxantina o suo estere. La astaxantina appartiene all?ampia classe dei composti terpenici e chimicamente ? un cheto-carotenoide avente nome chimico di 3,3'-diidrossi-?-carotene-4,4'-dione ed avente la seguente formula

L?astaxantina appartiene alla famiglia delle xantofille, carotenoidi che contengono atomi di ossigeno sugli anelli terminali.

La struttura chimica con 4 atomi di ossigeno, in particolare un ossidrile e un chetone per ciascuna delle due estremit? rende l?astaxantina una xantofilla con due specifiche caratteristiche:

- carattere anfipatico (idrofobico nella catena polienica centrale e idrofilico ai due estremi). Questa caratteristica favorisce il posizionamento della molecola trasversalmente al doppio strato fosfolipidico delle membrane cellulari;

- elevato potere antiossidante. Questa propriet? ? riconducibile al potere disattivante nei confronti dei radicali dell?ossigeno (ROS), dovuto all?azione coordinata dei doppi legami coniugati e dei gruppi chetone.

L?astaxantina contiene due centri chirali, ciascuno dei quali pu? assumere due conformazioni stereoisomeriche, per un totale di 3 stereoisomeri 3R,3?R e 3R,3?S meso e 3S,3?S.

In natura ? maggiormente rappresentata la forma 3S-3?S.

L?astaxantina prodotta per via sintetica ? una miscela delle tre diverse forme.

Ad esempio, l?astaxantina prodotta per via sintetica contiene miscele dei tre stereoisomeri, ad esempio nelle proporzioni 1:2:1.

L?astaxantina pu? esistere in due principali forme, quella non esterificata e quella esterificata, ad esempio 60-90% mono e 10-30% di- estere, in particolare 80% mono- e 20% di-estere.

Idonee fonti naturali di astaxantina sono Euphausia pacifica, Euphausia superba, Haematococcus pluvialis, Pandalus borealis, Xanthophyllomyces dendrorhous, precedentemente nota come Phaffia rhodozyma.

In particolare, la microalga Haematococcus pluvialis contiene i maggiori livelli di astaxantina ed ? la principale fonte per la produzione non sintetica di astaxantina e preferita nell?ambito della presente. La astaxantina pu? essere prodotta ed ottenuta da fonti naturali, come le alghe, mediante tecnologie convenzionali ad esempio come descritto in nel brevetto USA N. 6,022,701 a nome di Boussiba; Sammy, V.; Avigad, C.; et al. (2000), dal titolo Procedure for large-scale production of astaxanthin from haematococcus, nel quale viene descritto: ?A process for cultivating Haematococcus for the large scale production of astaxanthin-enriched Haematococcus cells comprises: (a) cultivating said Haematococcus cells under conditions suitable for optimal vegetative growth of said cells, wherein said conditions comprise growing the cells under a light intensity in the range of about 30-140.mu.mol photons.m<-2>.S<-1 >and at a temperature of between about 15-28.degree; and (b) collecting the cells grown according to (a) and cultivating them further under conditions suitable for optimal induction and accumulation of astaxanthin in said cells, wherein said conditions comprise inoculating said cells of (a) into a growth solution containing essentially a carbon source and growing said cells at a temperature of below 35 degree.? Una idonea fonte di astaxantina per gli usi dell?invenzione ? da biomassa algale macinata.

A titolo di esempio, l?estrazione di una idonea astaxantina da alghe o microalghe prevede che la raccolta delle aplanospore sia effettuata al termine della fase verde, quando il livello di clorofilla ? al minimo, utilizzando come fonte la microalga H. pluvialis. La biomassa di H. pluvialis viene essiccata, macinata e standardizzata, ad esempio un contenuto di astaxantina dall?1 al 10%, preferibilmente al 4-6%.

In alternativa la astaxantina pu? essere purificata, estratta come oleoresina standardizzata al 8-12% di astaxantina mediante tecnologia convenzionale ad esempio con CO2 supercritica, oppure come polvere con contenuto di astaxantina dal?1 al 5%.

In alcune forme di realizzazione, la composizione dell'invenzione contiene astaxantina in un quantitativo compreso da 0,01 a 100mg, da 0,5 a 40mg, da 2 a 12 mg.

In certe forme di realizzazione la composizione dell?invenzione contiene astaxantina in una quantit? compresa da 0,1 a 35% in peso, da 0,5 a 20% in peso, da 1 a 15%, in peso.

Nella composizione di combinazione dell?invenzione l?astaxantina viene combinata con la quercetina.

La quercetina ? un flavonolo di origine vegetale avente nome IUPAC 3,3?,4?5,7-pentaidrossiflavone ed avente la seguente formula di struttura:

Nella composizione la quercetina pu? essere in forma libera, ad esempio come quercetina aglicone oppure anche di suo derivato o metabolita, ad esempio di 3-metilquercetina.

La quercetina ? una molecola biologicamente attiva provvista di attivit? antinfiammatoria, antiossidante ed immunoprotettiva. La quercetina inoltre abbina all?azione di inibizione delle proteasi, polimerasi e trascrittasi inversa un?azione di soppressione su girasi di DNA e di legame con proteine del capside virale.

Da un punto di vista biologico, la quercetina agisce come scavanger di radicali liberi, donando una coppia di elettroni attraverso o-chinone/chinone metide.

La quercetina, una volta assunta da un individuo, si ossida spontaneamente per formare O-semichinone e O-chinone / chinone methide (QQ), che pu? legarsi alle proteine tioli che formano composti tossici. Questo processo di effetti sia antiossidanti che pro-ossidanti ? definito "quercetina paradosso ". Tuttavia, QQ pu? essere riciclato in quercetina da donatori di elettroni come NADH o ascorbato, o si formano insieme, con glutatione 6-glutationil-quercetina o 8-glutationilquercetina (GSQ).

L?assenza di gravi effetti collaterali anche a seguito di somministrazione di elevati dosaggi di quercetina la rende idonea per gli usi dell?invenzione.

In accordo ad alcune forme di realizzazione, la quercetina ? presente nella composizione in un quantitativo da 0,1 a 30% da 0,5 a 20%, da 1 a 10% ad esempio 5% in peso rispetto al peso totale della composizione.

In alcune forme di realizzazione, la composizione dell'invenzione contiene quercetina in un quantitativo compreso da 1 a 1500mg, da 10 a 1000mg, da 100 a 750 mg, ad esempio 250mg o 500 mg per unit? di dosaggio, ad esempio capsula. Idonee componenti biologicamente attive di quercetina e astaxantina della composizione possono essere di origine sintetica o naturale. In quest?ultimo caso le due componenti attive possono essere presenti nella composizione come tali o in forma di un estratto da una pianta o sua porzione che li contiene. L?estratto pu? essere ottenuto mediante tecnologie convenzionali di estrazione della tecnica farmaceutica.

Nella presente domanda, con il termine "sinergismo o attivit?/effetto sinergico" si intende un'attivit?/effetto che ? maggiore della somma delle attivit?/effetti del singolo principio attivo. In particolare, il sinergismo si verifica quando almeno due sostanze o principi attivi interagiscono in un modo che potenzia o aumenta uno o pi? dei loro effetti. Pertanto, due sostanze o principi attivi che producono effetti evidentemente simili talvolta produrranno effetti esagerati o ridotti quando utilizzati contemporaneamente e una valutazione quantitativa ? necessaria per distinguere questi casi da una semplice azione additiva (Tallarida RJ. Drug Synergism: its detection and applications. J PharmacolExpTher. 2001 Sep:298(3):865-72).

In accordo ad alcuni aspetti dell?invenzione viene fornito un integratore comprendente una composizione di combinazione secondo una qualsiasi delle forme di realizzazione qui descritte o rivendicate.

Un idoneo integratore ? un integratore dietetico o nutrizionale.

Tipicamente, il sinergismo tra principi attivi, farmaci o integratori si verifica quando due ingredienti attivi interagiscono in maniera o con modalit? che aumentano o evidenziano uno o pi? dei loro effetti.

Nell?ambito della presente domanda con il termine di combinazione si intende che uno o pi? principi attivi sono addizionati o miscelati con uno o altri ingredienti.

In alcune forme di realizzazione, la composizione dell'invenzione pu? comprendere uno o pi? ulteriori sostanze o principi attivi.

La composizione dell?invenzione pu? contenere uno o pi? di altri agenti biologicamente attivi in particolare scelti tra le vitamine, ad esempio vitamina C, vitamina E, vitamina A, vitamina D, vitamina K, una o pi? vitamine del gruppo B and esempio B1, B2, B6, B12 o niacina.

In certe forme di realizzazione la composizione dell?invenzione contiene una vitamina in un quantitativo compreso da 0,001 a 20% in peso, da 0,05 a 10% in peso o da 0,5 a 5% in peso.

Secondo alcune forme di realizzazione, la composizione dell'invenzione comprende ulteriormente uno o pi? micronutrienti e/o minerali ad esempio sali di Mg, K, Na, Zn, Fe, Cr, Se, Mn.

Le composizioni della presente invenzione comprendono qualsiasi composizione realizzata somministrando l'associazione di principi attivi di origine naturale della presente invenzione e un veicolante fisiologicamente accettabile.

Tali composizioni sono adatte per uso nutrizionale, farmaceutico o dietetico nei mammiferi, in particolare negli esseri umani.

Il termine "veicolo" come utilizzato nella presente indica un mezzo, eccipiente, diluente con cui l'associazione di principi biologicamente attivi ? somministrata. Qualsiasi veicolo e/o eccipiente adatto per la forma di preparazione desiderata per la somministrazione ad essere umani ? contemplato per l'uso con i composti descritti nella presente invenzione.

Nell?ambito della presente domanda, il termine "fisiologicamente accettabile" intende indicare sostanze commestibili che sono approvate dalle autorit? sanitarie per l'uso nelle applicazioni farmaceutiche, fitoterapiche, nutrizionali o alimentari. Il termine "commestibile" significa materiali di qualit? alimentare che sono approvati dalle autorit? di regolamentazione per l'uso nelle applicazioni farmaceutiche o alimentari.

La composizione dell?invenzione pu? assumere un'ampia variet? di forme di preparazione, a seconda della via di somministrazione desiderata.

La composizione dell?invenzione pu? essere in forme solida.

Le composizioni in forma solida comprendono compresse, pillole, capsule, polveri, granuli ed idonee forme di dosaggio controllato.

Una composizione ? un integratore in forma di granuli idrosolubili.

Nel caso di preparazioni in forma solida possono essere impiegati veicoli, ad esempio uno o pi? di amidi, zuccheri, cellulosa microcristallina, diluenti, agenti di granulazione, lubrificanti, leganti, disgreganti e simili.

Tipicamente, le compresse, capsule, pillole e simili possono anche contenere un agente legante come gomma adragante, acacia, amido di mais, o gelatina; eccipienti come dicalcio fosfato; un agente disgregante come amido di patata, amido di mais, acido alginicio; un agente lubrificante come magnesio stearato; un agente dolcificante come saccarosio, lattosio o saccarina. Se si desidera, le compresse possono essere rivestite mediante tecniche tradizionali. Quando la forma dell?unit? di dosaggio ? quella in capsula, essa pu? contenere, in aggiunta ai materiali del tipo precedentemente descritto, un veicolo liquido come un olio grasso.

In accordo a certe forme di realizzazione la composizione dell?invenzione contiene un eccipiente a base di cellulosa che comprende i) esteri organici di cellulosa ad esempio scelti tra cellulosa acetato, cellulosa proprionato, cellulosa triacetato, cellulosa acetato proprionato, cellulosa acetato butirrato, ii) esteri inorganici di cellulosa ad esempio scelti tra nitrocellulosa, cellulosa solfato, iii) eteri di cellulosa scelti tra a) alchileteri di cellulosa ad esempio scelti tra metilcellulosa, etilcellulosa, etilmetilcellulosa; b) idrossialchileteri di cellulosa ad esempio scelti tra idrossietilcellulosa, idrossipropilcellulosa, idrossipropil cellulosa, idrossietilcellulosa, idrossipropilmetilcellulosa, etilidrossietilcellulosa; c) carbossialchil cellulosa ad esempio carbossimetilcellulosa, loro Sali e loro miscele. In certe forme di realizzazione gli eccipienti a base di cellulosa sono reticolati con agenti reticolanti fisiologicamente accettabili.

In accordo ad alcune forme di realizzazione la composizione dell?invenzione comprende ulteriormente uno o pi? componenti addizionali, come additivi, riempitivi, cariche, stabilizzanti, emulsionanti, plasticizzanti, agenti filmanti, agenti umidificanti, addensanti, strutturanti.

In certe forme di realizzazione la composizione dell?invenzione comprende come eccipiente un acido grasso idrogenato, preferibilmente avente una catena con da 3 a 20 atomi di carbonio, da 14 a 18 atomi di carbonio. Un tipico esempio di idoneo acido grasso idrogenato ? olio di palma idrogenato.

Diversi altri materiali possono essere presenti come rivestimenti o materiali idonei a modificare la forma fisica dell?unit? di dosaggio.

Ad esempio, le compresse possono essere rivestire con gomma lacca zucchero o entrambi. Se si desidera, le compresse possono essere ricoperte con una pellicola gastroresistente mediante tecniche standard.

In accordo ad alcune forme di realizzazione la composizione ? una polvere, vantaggiosamente una polvere che scorre ad esempio disperdibile in acqua, preferibilmente contenente dallo 0,5 al 10% dall?1 al 5% in peso di astaxantina di origine naturale.

In accordo ad alcune forme di realizzazione la composizione ? una biomassa algale contenente astaxantina vantaggiosamente ottenuta mediante spray-drying, preferibilmente contenente dallo 0,5 al 10% dall?1 al 10% in peso di astaxantina. Quando la composizione si presenta in forma liquida pu? essere in forma di sospensione, emulsione, soluzione, oleolita. In questi casi il veicolo ? liquido e pu? essere scelto ad esempio tra acqua, glicoli, oli, alcol e loro miscele, ad esempio a formare emulsioni olio/acqua o acqua/olio. Secondo alcune forme di realizzazione la composizione pu? essere in forma liquida a base acquosa oppure semifluida a base di olio.

Ad esempio, le formulazioni in sciroppo, elisir o olii possono contenere, saccarosio come agente dolcificante, metile e propilparabeni come conservanti, un colorante e un aromatizzante quale aroma di ciliegia o di arancia.

In accordo ad alcune forme di realizzazione la composizione ? un olio o oleolita contenente astaxantina preferibilmente dall?1 al 25% dal 5 al 20% in peso di astaxantina.

Nella composizione possono essere altres? presenti agenti aromatizzanti, conservanti, agenti coloranti e simili.

In alcune forme di realizzazione, i principi attivi contenuti nella composizione della presente invenzione possono essere combinati o miscelati come principi attivi in miscela intima con un veicolo commestibile adatto e/o un eccipiente secondo le tecniche farmaceutiche e dell?industria alimentare o nutrizionale tradizionale.

Le composizioni ad uso nutrizionale possono essere adeguatamente presentate in singola forma farmaceutica e preparate mediante uno qualsiasi dei metodi ben noti nella tecnica farmaceutica o alimentare.

La quantit? di composti attivi nelle composizioni dell?invenzione ? tale che si otterr? un dosaggio preventivo o terapeuticamente efficace.

In alcune forme di realizzazione, nelle composizioni della presente invenzione, i principi attivi sono normalmente formulati in unit? di dosaggio. L'unit? di dosaggio pu? contenere da 0,1 a 1.000 mg di ciascun principio attivo per unit? di dosaggio per la somministrazione quotidiana.

In alcune forme di realizzazione, la formulazione conterranno quantitativi di principi attivi che dipenderanno dalla gravit? della forma da trattare e dalle ulteriori terapie in corso, dallo stato di salute individuale e dalla risposta all'associazione dei principi attivi.

Secondo alcune forme di realizzazione, la composizione dell'invenzione ? un nutraceutico, integratore, un prodotto nutrizionale o un dietetico.

I seguenti esempi sono forniti principalmente per illustrare la presente invenzione e non intendono limitare il campo di protezione come risulta dalle accluse rivendicazioni.

ESEMPIO 1

Nell'accumulo cerebrale di astrociti senescenti (e altri importanti sottotipi di cellule cerebrali) l'aumento del microambiente infiammatorio ? stato associato a un declino cognitivo prematuro. Simile evidenze si sono riscontrate con fibroblasti. Sono state effettuati test comparativi in vitro su campioni di astrociti e fibroblasti. I risultati dei due test sono illustrati nelle accluse Figure 1 e 2 a cui si rimanda.

Nei due test comparativi i fibroblasti e astrociti senescenti sono stati trattati con quercetina (Q) e astaxantina (A) singolarmente ed in combinazione (Q+A) alla concentrazione di 5?M.

? stato registrato l?effetto di Q (5?M), A (5?M) e (Q+A) (5?M) sui livelli di fibroblasti senescenti. Al termine del test si ? riscontrato l?effetto sinergico di inibizione della combinazione (Q+A) sulle cellule senescenti dei fibroblasti. Le cellule sono state esposte ai principi attivi per 48 ore prima dell?analisi SA-? Gal cellule.

Materiali e Metodi

Fibroblasti e astrociti primari dei topi sono stati coltivati. Per la produzione di colture senescenti, le cellule sono state contate e un numero uguale di cellule seminate (4 ? 103 cellule / cm2) ad ogni passaggio in coltura continua fino a quando la crescita della coltura ? rallentata a meno di 0,5 raddoppi di popolazione (PD) / settimana. Le colture di astrociti e fibroblasti sono state sottoposte a coltura continua fino all'inizio della senescenza replicativa e all'arresto della crescita in 3 repliche biologiche.

Sono stati utilizzati astrociti e fibroblasti a passaggio precoce a PD = 24 e astrociti e fibrociti a passaggio tardivo a PD = 84.

Quantificazione del carico cellulare senescente.

La senescenza cellulare ? stata valutata in 3 repliche biologiche mediante il marcatore di senescenza biochimica ?-galattosidasi associata alla senescenza (SA-?-Gal) utilizzando un kit commerciale (Sigma Aldrich, UK) secondo le istruzioni del produttore, con un minimo di 100 cellule valutate per replicato.

Le colture di astrociti e fibroblasti primari sono state considerate senescenti al PD84, a quel punto sono state considerate senescenti. Ci? ? stato verificato mediante caratterizzazione molecolare e biochimica della cinetica di crescita delle colture; La colorazione con ?-galattosidasi (SA-?gal) associata alla senescenza ha dimostrato un aumento significativo del numero di cellule senescenti dall'8% nelle cellule di passaggio precoce al 36% nelle cellule di passaggio tardivo (Fig. 1a). I fattori SASP in mezzi condizionati derivati da cellule senescenti hanno dimostrato livelli alterati per diverse proteine SASP chiave; abbiamo osservato livelli elevati di IL-8, MMP-3, MMP-10 e TIMP2, ma ridotti livelli di IL10 (figura 1b).

Gli astrociti e fibroblasti di passaggio sono stati trattati con quercetina, astaxantina o quercetina astaxantina a una dose di 5?M e la vitalit? delle cellule senescenti (cellule SA-?-gal ) e delle cellule totali ? stata misurata. Il numero di cellule vitali viene calcolato rispetto alle cellule trattate solo con veicolo (DMSO). n = 3 esperimenti indipendenti, ANOVA unidirezionale.

La combinazione astaxantina e quercetina ha mostrato un?azione sinergica su fibroblasti e astrociti rispetto ai due principi biologicamente attivi presi singolarmente.

ESEMPIO 2

Integratore per la prevenzione e/o trattamento dell?invecchiamento della pelle e/o dei disturbi cognitivi connessi con l?invecchiamento dell?organismo umano, avente la seguente formulazione:

Astaxantina 12mg

Quercetina 250mg

Eccipienti 800 mg

Claims (10)

RIVENDICAZIONI

1. Composizione per rallentare e/o prevenire e/o trattare forme di invecchiamento dell?organismo umano comprendente una combinazione di astaxantina opzionalmente in forma di estere fisiologicamente accettabile e quercetina ed un veicolo fisiologicamente accettabile.

2. Composizione secondo la rivendicazione 1 in cui detta astaxantina ? contenuta o ? estratta da una da una alga scelta tra Euphausia pacifica, Euphausia superba, Haematococcus pluvialis, Pandalus borealis, Xanthophyllomyces dendrorhous, preferibilmente H. pluvialis e loro miscele.

3. Composizione secondo la rivendicazione 1 o 2 in cui detta alga ? una biomassa algale, preferibilmente in forma essiccata e macinata oppure in forma di polvere.

4. Composizione secondo una qualsiasi delle rivendicazioni 1-3 in cui la quercetina ? in forma libera in particolare di quercetina aglicone oppure di un suo derivato o metabolita preferibilmente 3-metilquercetina.

5. Composizione secondo una qualsiasi delle rivendicazioni 1-4 comprendente ulteriormente una vitamina preferibilmente scelta tra vitamina del gruppo B in particolare vitamina B2, B3, B5, B6, B12, vitamina A, vitamina C, vitamina D, in particolare D3 e loro miscele ed opzionalmente un micronutriente o minerale preferibilmente scelto tra di Zn, Mg, K, Na, Fe, Cr, Se, Mn, Ca e loro miscele.

6. Uso di una composizione secondo una qualsiasi delle rivendicazioni 1-5 per la prevenzione o trattamento dell?invecchiamento della pelle e delle sue manifestazioni o segni.

7. Uso della composizione secondo la rivendicazione 6 in cui dette manifestazioni o segni sulla pelle sono rughe, corrugazioni della pelle, raggrinzimento, inspessimento del tegumento, perdita di elasticit?, in particolare della pelle del viso.

8. Composizione secondo una qualsiasi delle rivendicazioni 1-6 per l?uso nella prevenzione o trattamento di forme di decadimento cognitivo o di una patologia neurodegenerativa.

9. Composizione per l?uso secondo la rivendicazione in cui la patologia neurodegenerative ? scelta tra demenza senile, declino cognitivo, morbo di Alzheimer, deficit memonico o mnestico.

10. Integratore alimentare comprendente una composizione secondo una qualsiasi delle rivendicazioni 2-5 o per l?uso secondo una qualsiasi delle rivendicazioni 6-9.