HUT77600A

HUT77600A - A hipotalamusz működésének módosításában neurokémiai iniciátor szerepét betőltő pregnán és kolánszármazékok,és ezeket tartalmazó gyógyszerkészítmények

Info

Publication number: HUT77600A
Application number: HU9700327A
Authority: HU
Inventors: Nathan William Adams; David L. Berliner; Clive L. Jennings-White
Original assignee: Pherin Pharmaceuticals, Inc.
Priority date: 1994-08-04
Filing date: 1995-08-04
Publication date: 1998-06-29
Also published as: WO1996004296A1; US5563131A; JPH10506105A; AU703524B2; AU3206495A; JP3834060B2

Description

A találmány tárgya nazális adagolásra alkalmas gyógyászati készítmény, amely pregnán vagy kólán típusú szteroidot és gyógyászati szempontból elfogadható vivőanyagot tartalmaz. A szteroid (I) általános képletű anyag, ahol

Pi jelentése: oxo-, vagy a- vagy β-hidroxi-, a- vagy B-acetoxi-, a- vagy Β-propionil-oxi-, a- vagy B-metoxi-, a- vagy B- rövid szénláncú acil-oxi-, a- vagy B- rövid szénláncú alkil-oxi- vagy a- vagy B-benzoil-oxi-csoport;

P₂ jelentése: metil-, hidroxi-metil-, acil-oxi-metil-, alkoxi-metil-, rövid szénláncú alkil-, hidroxi-alkil-, acil-oxi-alkil- vagy alkoxi-alkil-csoport;

P₃ jelentése: hidrogén- vagy halogénatom; 0x0-, hidroxil-, alkoxi- vagy acil-oxi-csoport;

P₄-től P₁₂-ig terjedő szubsztituensek mindegyike, egymástól függetlenül, lehet: hidrogén- vagy halogénatom, metil-, halogén-metil-, dihalogén-metil- vagy perhalogén-metil-csoport;

R₁₃ jelentése: hidrogénatom, metil-, metilén-, halogénnel szubsztituált metil-, halogénnel szubsztituált metilén-, etil-, etilenil-, acetilenil-, metil-metilenil- vagy metil-metinil-csoport;

lévő kettős kötések alternatív helyeit jelzik; és „j” vagy „k” hármas kötést is jelezhetnek;

és ha P₂ metilcsoportot, és P₃ hidroxilcsoportot jelent, akkor P₂ és P₃ együttvéve gyűrűs étert is képezhet;

A találmány szerinti hatóanyagok és készítmények képesek a hipotalamusznak mind a viselkedésre, mind az autonóm idegrendszerre kifejtett szabályzó hatásának módosítására. A vegyületek e hatásukat az orrjáratok felső részében elhelyezkedő vomeronazális receptorok közvetítésével fejtik ki. Ennek előnyös következménye, hogy a vegyületeknek a vér-agy-gáton való átjutása nem okoz gondot. Ez teszi lehetővé, hogy a hatásos vegyületek a hatásukat már pikomoláris koncentrációban is kifejtik.

Képviselő:

Danubia Szabadalmi és Védjegy Iroda Kft. Budapest

KÖZZÉTÉTELI PÉLDÁN/

A HIPOTALAMUSZ MŰKÖDÉSÉNEK MÓDOSÍTÁSÁBAN NEUROKÉMIAI INICIÁTOR SZEREPÉT JÁTSZÓ PREGNÁNÉS KOLÁNSZÁRMAZÉKOK ^5 L ''-íc A i-C'Q.

\A\L t'-·- ^s rí ú

S,íV'íÍ

Bejelentő: Pherin Corporation, Menlo Park, CA,

Amerikai Egyesült Államok

Feltalálók:

JENNINGS-WHITE Clive L., Salt Laké City, UT,

BERLINER Dávid L., Atherton, CA

ADAMS Náthán William, Salt Laké City, UT,

Amerikai Egyesült Államok

Aktaszám: 85204-2444C-SZŐ-fa • ·

- 2 A találmány általában olyan gyógyászati készítményekre és módszerekre vonatkozik, amelyekkel az emberi hipotalamusz funkciójának változtatása, így egyének hipotalamusza által közvetített (médiáit), egyes viselkedési és fiziológiai állapotok befolyásolhatók. Pontosabban, a találmány egyes pregnán- és kólán tipusú szteroidok alkalmazására vonatkozik neurokémiai működtető (indító) egységekként fiziológiában és viselkedésben.

A találmány egyes vegyületekre, nevezetesen pregnán és kólán tipusú szteroidokra, továbbá e vegyületek alkalmazási módszereire vonatkozik emberi vomeroferinekként, a hipotalamusz funkciójának módosítása céljából, s ennek útján egyes következményes viselkedési és fiziológiai állapotok befolyásolására, például szorongás csökkentése céljából. A pregnán szerkezetű szteroidokat jellemzi: a négy gyűrűből álló szteroid váz; a 13- és 10-helyzetű metilcsoport, valamint a 17-helyzetben kapcsolódó etilcsoport. A pregnének a pregnánok egyik alcsoportját alkotják, amelyek legalább egy kettős kötést tartalmaznak [G. Ohloff és munkatársai: Helv. Chim. Acta 66. 192-217 (1983)], (ezt a közleményt hivatkozásként foglaljuk e leírásunkba). Ohloff kimutatta, hogy számos szteroid (androsztének) olyan szaggal bírrtok, amely a különböző izomer, diasztereomer és enantiomer formáktól függően változó. Közölték, hogy ennek a csoportnak egyes tagjai feromonként hatnak bizonyos emlős fajokban: így például az 5a-androszt-16-en-3-on és 5a-androszt-16-en-3a-ol malacokon hatásos [D. R. Melrose és munkatársai: Br. vet. J. 127. 497-502 (1971)]. Ezek a kandisznó által termelt 16• ·

-androsztének párosodó viselkedést idéznek elő nemi ciklusban lévő kocákon [Claus és munkatársai: Experientia 35., 1674-1675 (1979)].

A kólán típusú szteroidok jellemzői: az 5 szénatomos oldallánc, a 2-pentil-csoport a szteroid váz 17-es helyzetében. Egyes vizsgálatokban megállapították, hogy bizonyos fajokban bizonyos 16-androsztén-származékok (így az 5a-androszt-16-en-3ot-ol és 5a-androszt-16-en-3-on) különböző jellemzői (paraméterei) - így a koncentráció, metabolizmus és lokalizáció - szexuálisan (nem szerint) dimorfok [Brokksbank és munkatársai: J. Endocr. 52, 239-251 (1972); Claus és munkatársai: J. Endocr. 68. 483-494 (1976); Kwan és munkatársai: Med. Sci. Rés. 15. 1443-1444 (1987)]. így például azt találták, hogy az 5a-androszt-16-en-3ct-ol és 5a-androszt-16-en-3-on, valamint az androszta-4,16-dién-3-on koncentrációja nők és férfiak perifériás vérében, nyálában és hónaljváladékában különböző [T. K. Kwan és munkatársai: Med. Sci. Rés. 15., 1443-1444 (1987)]; és feltételezték, hogy ezek az anyagok emberi feromonként működnek a választás és döntés befolyásolásában [ugyanott; lásd még: Gower és munkatársai: „Szaggal rendelkező szteroidok jelentősége a hónalj szagában” a következő helyen: Perfumery, szerk. Van Toller és Dodds, Chapman és Hall, 68-72. old. (1988); D. A. Kirk-Smith és munkatársai: Rés. Comm. Psychol. Psychiat. Behav. 3, 379 (1978)]. Közölték, hogy az androsztenoi (5a-androszt-16-en-3a-ol) feromonszerű aktivitást fejt ki férfiak kereskedelmi forgalomban lévő kölnivizében és nők parfümjében (férfiak számára a neve: Andron™, nők számára a neve: Andron™, • · · · forgalmazza Jövan). A 2295916 számú japán szabadalmi dokumentum olyan parfümkészítményekre vonatkozik, melyek androsztenolt és/vagy annak analógjait tartalmazzák. Az emberi hónaljváladékban továbbá azonosították az androsztadién-3B-olt (és talán a 3a-olt) is (Gower és munkatársai, fenti idézet 57-60). Másrészt hiányzik az egyetértés az irodalomban abban a vonatkozásban, hogy bármelyik vélt feromon valóban játszik-e szerepet emlősök, különösen emberek szexuális vagy szaporodási viselkedésében. [Lásd G. K. Beauchamp és munkatársai: „A feromon fogalma emlősök kémiai kommunikációjában: kritika” a következő helyen: Mammalian Olfaction, Reproductive Processes and Behaviour, szerk. R. L. Doty, Academic Press 1976. Lásd továbbá Gower és munkatársai fentebb idézett közleményét, 68-73. old].

Leírták néhány ösztrén típusú szteroid feromon sajátságait egyes emlős fajokon R. P. Michel és munkatársai [Natúré 218, 746 (1968)] közük, hogy ösztrogének (különösen az ösztradiol) hím Rhesus majmokra ferumon vonzást fejtenek ki. R. F. Parrot [Hormones and Behaviour 7, 207-215 (1976)] közli, hogy ösztradiol-benzoát befecskendezése párosodó viselkedést vált ki petefészküktől megfosztott patkányokon; továbbá közli az ösztradiol vérszintjének szerepét a szexuális válasz kiváltásában [C. H. Phoenix: Physiol. and Behaviour 16. 305-310 (1976)], valmint a nőstény szexuális válasz kiváltásában Rhesus majmokon [C. H. Phoenix: Hormones and Behaviour 8, 356-362 (1977)]. Másrészt nincsen egyetértés az irodalomban abban a vonatkozás• · bán, hogy a feromonok egyáltalán játszanak-e szerepet emlősállatok szaporodási viselkedésében és egyedek közötti kommunikációjában [G. K. Beuchamp és munkatársai: fentebb idézett kritika, lásd a következő helyen: fentebb idézett mű, 1976].

Találmányunk egyik megvalósítása arra vonatkozik, hogy egyes pregnán és kólán típusú szteroidok nem-szisztémás, nazális (orrnyálkahártyán át végzett) adagolásával emberi egyedek specifikus viselkedési vagy fiziológiai válasza, például a negatív indulatok, negatív hangulat és negatív jellembeli vonások csökkentése elérhető. Közelebbről, a nazális adagolás révén lehetővé válik egy eddig csak kevéssé megértett neuroendrokrin szerkezet - amelyet általában vomeronazális szervnek (VNO) ismernek; másik neve „Jacobson-szerv - neurokémiai receptorainak az érintkezése egy vagy több szteroiddal vagy szteroidot (szteroidokat) tartalmazó készítményekkel. Ez a szerv a legtöbb magasabb rendű állaton az orrnyílásokon át hozzáférhető - a kígyóktól az emberekig - és többek között vonatkozásba hozták a feromon érzékelésével egyes állatfajokban. [Általában lásd: MullerSchwarze & Silverstein: Chemical Signals, Plenum Press, New York (1980)]. A vomeronazális szerv érzékelő hámjának axonjai - amelyek a szájpadlás felett helyezkednek el - alakítják ki a vomeronazális ideget, és közvetett szinaptikus kapcsolatban állnak a járulékos szaglógumóval; közvetlen átvitelük van innen a cortico-mediális amigdaloid alapi és hipotalamuszban jelenlévő magvakhoz. Az idegvégződések disztális axonjai szintén a VNO-ban lévő neurokémiai recep• ·

- ⁶ torok szerepét játszhatják [L. J. Stensaas és munkatársai: J, Steroid Biochem. and Molec. Bioi. 39. 553 (1991)]. Ez az ideg közvetlen szinaptikus kapcsolatban áll a hipotalamusszal.

A. Johnson és munkatársai [J. Otolaryngology 14. 71-79 (1985)] igazolták, hogy a vomeronazális szerv a legtöbb felnőtt emberben jelen van; azonban arra következtetnek, hogy ez a szerv valószínűleg nem funkcionális jellegű. Ezzel ellentétes eredményeket közölnek L. Stensaas és munkatársai [lásd a fentebb idézett közleményt; valamint D. T. Mórán és munkatársai: J. Steroid Biochem. and Molec. Bioi. 39, (1991)], azok szerint a VNO funkcionális, kémiai érzékelő receptor.

Nyilvánvaló, hogy kívánatos lenne az emberi vomeroferinek és feromonok azonosítása és szintézise; valamint gyógyászati készítmények és módszerek kidolgozása a hipotalamusz funkciójának befolyásolásában történő alkalmazás céljára. Ez a találmányunk azzal a váratlan felismeréssel áll kapcsolatban, hogy bizonyos neurokémiai ligandumok - különösen pregnán és kólán típusú szteroidok és rokonvegyületek, vagy pregnánokat, kolánokat vagy rokonvegyületeket tartalmazó gyógyászati készítmények - humán egyedeknek nazálisán adagolva bizonyos nazális érzékelő hámsejtek kemoreceptoraihoz specifikusan kötődnek, ez a kötődés egy sor neurofiziológiai választ vált ki, s ennek eredményeként az egyéb hipotalamikus funkciója módosul. Megfelelő adagolás esetén egyes ilyen vegyületeknek a hipotalamuszra kifejtett hatása az autonóm idegrendszer működését, valamint különböző viselkedési vagy fiziológiai jelenségeket érint, amilye• · · · • · nek például (azonban korlátozás nélkül): a szorongás, a menstruáció előtti feszültség, félelem, agresszív viselkedés, éhség, vérnyomás és más viselkedési és fiziológiai működések, amelyeket normális körülmények között a hipotalamusz szabályoz [lásd: O. Appenzeller: „Az autonóm idegrendszer; bevezetés az alapvető és klinikai fogalmakba (1990); Ρ. I. Korner: „Az autonóm kardiovaszkuláris működés központi idegrendszeri szabályzása”; N. M. Levy és munkatársai: „A szív idegi szabályzása”; mindkét közlemény a következő helyen: Handbook of Physiology, 2. fejezet: A kardiovaszkuláris rendszer - a szív I. kötet, Washington DC, 1979, American Physiological Society; A. P. Fishman és munkatársai szerk. 3. fejezet: A légzőrendszer. II. kötet: „A légzés szabályzása Bethesda MD (1986) American Physiological Society.]

Egyes esetekben pregnán vagy kólán típusú szteroidot vagy rokonvegyületet önmagában adagolunk, más esetekben pregnán és/vagy kólán típusú szteroidok és/vagy rokonvegyületek kombinációit adagoljuk; ismét más esetekben egy vagy több pregnán vagy kólán típusú szteroidot egy vagy több ösztrán vagy ösztrén típusú szteroiddal, androsztán vagy androsztén szteroiddal vagy rokonvegyülettel együtt adagolunk.

A fentiek alapján a találmány egyik célja olyan gyógyászati készítmények kialakítása, amelyek humán vomeroferineket vagy feromonokat tartalmaznak, és nazális adagolásra alkalmasak egy egyén számára.

A találmány egy további célja módszerek kidolgozása ezen készítmények alkalmazására egy egyén hipotalamikus • · · funkciójának módosítása céljából. A találmánynak egy másik célja módszerek kialakítása e készítmények alkalmazására egyének olyan fiziológiai és viselkedési funkcióinak a befolyásolására, amelyeket normális körülmények között a hipotalamusz szabályoz.

Végül a találmánynak még további célja módszerek kifejlesztése a hipotalamusz működésének módosítására, ami a következő' előnyökkel jár: 1) az adagolás közvetlenül a kemoreceptorokra történik az orrjáratokban, a vomeronazális szervben „pilula és tű nélkül”, azaz nem-invazív módon;

2) a hatóanyag hatását a találmány szerinti rendszeren át, és nem a keringési rendszeren át fejti ki, tehát az agy funkcióját nem érinti, tekintet nélkül a vér-agy-gátra; 3) a találmány közvetlen utat mutat a hipotalamusz befolyásolására: a feromonreceptorok és a hipotalamusz között csupán egyetlen szinaptikus kapcsolat van; és 4) a hatóanyag igen specifikus hatása biztosított, ami nagy mértékben csökkenti nemkívánt mellékhatások lehetőségét, mivel az érzőidegek az agyban specifikusan irányítottak.

A találmány további céljai, előnyei és újdonságai részletes ismertetésre kerülnek részben az alább következő leírásban, részben nyilvánvalóvá válnak a területen jártas szakemberek számára az alábbiak vizsgálatával, vagy a találmány gyakorlati kivitelezése során elsajátíthatók.

A találmány céljait olyan gyógyászati készítmény kialakításával érjük el, amely egy egyénen nazális adagolásra alkalmas. A készítmény gyógyászati szempontból elfogadható ···· ·· ···* ·· • · · · · · • · ···· ♦ ·· vivőanyagot és egy (I) általános képletű pregnán tipusú szteroidot tartalmaz, ahol az (I) képletben

P! jelentése; oxo-; vagy a- vagy B-hidroxi-; a- vagy Bacetoxi-, a- vagy B-propionil-oxi-; a- vagy B-metoxi-, a- vagy B- rövid szénláncú acil-oxi-, a- vagy B- rövid szénláncú alkil-oxi- vagy a- vagy B-benzoil-oxi-csoport;

P₃ jelentése: hidrogén- vagy halogénatom, oxo-, hidroxil-, alkoxi- vagy acil-oxi-csoport;

és ha P₂ metilcsoportot, és P₃ B-hidroxi-csoportot jelent, akkor P₂ és P₃ együttesen gyűrűs étert is képezhet;

R₁₃ jelentése: hidrogénatom; metil-, metilén-, halogénnel szubsztituált metil-, halogénnel szubsztituált metiléncsoport; etil-, etilenil-, acetilenil-, metil-metilenil-, metil-metinil-csoport;

„a”, „b”, „c”, „d”, „e, „h”, „i és „j” adott esetben jelenlévő kettős kötések alternatív helyeit jelzik; és „j” vagy „k” hármas kötést is jelenthet. A halogénszubsztituenseken fluor-, bróm-, klór- vagy jódatomot értünk.

Az előnyös szteroidok egyik csoportjában „b” kettős kötést jelent, különösen akkor, ha „d” vagy „e” szintén kettős • ·· · ο· • · · · • · · · tt · • ··· · · · fc ···· ·· ···· * ·»

- 10 kötést jelent. A szteroidok egy másik előnyös csoportjában „a és „c kettős kötést jelent, vagy csak „c” jelent kettős kötést. Egy további előnyös csoportban „h” kettős kötést jelez, míg „i” és „j” egyszerű kötés; vagy „j” kettős kötést jelent; vagy „j” hármas kötést jelent. Egy további csoportban „h” nincsen jelen, és „j” vagy „i” kettős kötést jelent; vagy „i” és „j” nincsen jelen; vagy „j” és „i” kettős kötést jelent; vagy „j” hármas kötést jelent.

Leírásunkban a rövid szénláncú alkil- és rövid szénláncú alkoxicsoport 1-6 szénatomos láncot tartalmazó csoportokra, előnyösen 1-4 szénatomos csoportokra vonatkozik.

A találmány továbbá (I) általános képletű, új pregnán típusú és kólán típusú vegyületekre is vonatkozik, ahol

Ρϊ jelentése: oxo-, vagy a- vagy β-hidroxi-, a- vagy β-acetoxi-, a- vagy β-propionil-oxi-, a- vagy β-metoxi-, a- vagy β- rövid szénláncú acil-oxi-, a- vagy β- rövid szénláncú alkil-oxi- vagy a- vagy β-benzoil-oxi-csoport;

P₃ jelentése: hidrogén- vagy halogénatom; oxo-, hidroxil-, alkoxi- vagy acil-oxi-csoport;

P₄-től P₁₂-ig terjedő szubsztituensek mindegyike, egymás tói függetlenül, lehet: hidrogén- vagy halogénatom, metil-, halogén-metil-, dihalogén-metil- vagy perhalogén-metil-csoport;

• · ···· · ·»

- 11 R₁₃ jelentése: hidrogénatom, metil-, metiién-, halogénnel szubsztituált metil-, halogénnel szubsztituált metiién-, etil-, etilenil-, acetilenil-, metil-metilenil- vagy metil-metinil-csoport;

„a”, „b”, „c”, „d”, „e”, „h”, „i” „j” és „h” adott esetben jelenlévő kettős kötések alternatív helyeit jelzik; és „j” vagy „k” hármas kötést is jelezhetnek;

és ha P₂ metilcsoportot, és P₃ hidroxilcsoportot jelent, akkor P₂ és P₃ együttvéve gyűrűs étert is képezhet; azon megkötésekkel, hogy

i) ha Pi jelentése oxocsoport, b jelen van; e, a, c, d nincsenek jelen, P₂ jelentése metilcsoport; és P3. ^p4. ^p7. ^p9. ^P1O. ^P11 és P₁₃ jelentése hidrogénatom, akkor - akár jelen van h, akár hiányzik

- P₆-nak jelen kell lennie, és nem lehet hidrogénatom;

ii) ha P₄ jelentése OH csoport, és c jelen van; e, a, b és d hiányoznak; P₂ metilcsoportot jelent; és ^p3. ^p4. ^p7. ^p9. ^P1O. ^P11, ^P12 és P₁₃ jelentése hidrogénatom, akkor:

(a) ha h jelen van, akkor P₆-nak jelen kell lennie, és hidrogénatom nem lehet:

(b) ha h hiányzik, és P₆ jelen van, akkor P₆ hidrogénatom nem lehet;

(c) ha h hiányzik, és P₆ jelen van, akkor mind i, mind j jelen van;

iii) ha P, jelentése B-OH csoport, és b jelen van; e, a, c, d hiányoznak; P₂ metilcsoportot jelent; és • *

- 12 ρ₃. ?4. Ρ7. Pg. Ριο. ^Ρ11 ^és Ρ13 jelentése hidrogénatom, akkor:

(a) ha h jelen van, akkor i-nek és/vagy j-nek jelen kell lennie; vagy P₆ nem lehet hidrogénatom;

(b) ha h jelen van, akkor j hármas kötést nem jelenthet;

iv) ha P ·, α-OH csoportot jelent, b jelent van; e, a, c, d hiányoznak, és P₂ metilcsoportot jelent; és P₃, P4, P7, Pg, P10. P11 és P13 jelentése hidrogénatom, akkor:

(a) ha h jelen van, akkor i-nek hiányoznia kell, és P₆ nem lehet hidrogénatom;

(b) ha mind i, mind j hiányzik, akkor P₆ nem lehet hidrogénatom;

v) ha P! jelentése oxocsoport, és b, valamint d jelen van; e, a és c hiányoznak; P₂ jelentése metilcsoport; és P 3. P4· P7. Pg. P11 és P₁₃ jelentése hidrogénatom, akkor: ha h hiányzik, és i jelen van, akkor P₆-nak jelen kell lennie, és hidrogénatomot nem jelenthet;

vi) ha P, és P₃ jelentése oxocsoport, és b jelen van; h, e, a, c és d hiányoznak; P₂ metilcsoportot jelent; P₄, P₅, P₇, P₈, P₉, P₁₀, P_n és P₁₃ jelentése hidrogénatom, akkor:

(a) ha P₆ hiányzik, akkor j nem lehet kettős kötés;

·· ··

- 13 (b) ha Ρθ hidrogénatom, akkor i-nek vagy j-nek jelen kell lennie;

vii) ha Ρϊ jelentése O-metil-csoport, a és c jelen van; és P₂ metilcsoportot jelent; e, b, d és h hiányoznak; és P₃, P₄, P₇, P₈, P₉, P₁₀, Pn és P₁₃ jelentése hidrogénatom, akkor (a) ha P₆ jelentése hidrogénatom, akkor i-nek vagy j-nek jelen kell lennie;

(b) ha P₆ hiányzik, akkor i és j egyszerre nem lehet kettős kötés;

viii) ha P₁ jelentése oxocsoport, és a, b, c, d, e hiányoznak; P₂ jelentése metilcsoport; és P₃, P₄, P₇, P₉, P10. P11. P12 θ^δ P13 jelentése hidrogénatom, akkor (a) ha h hiányzik, és j mint kettős kötés van jelen, akkor P₆ nem lehet hidrogénatom;

(b) ha h, i és j hiányzik, akkor P₆ nem lehet hidrogénatom, és (c) ha h jelen van, akkor j hármas kötés nem lehet;

ix) ha P, OH csoportot jelent, a, b, c, d, e és h hiányoznak; P₂ jelentése metilcsoport; P₃, P₄, P₇,

P₈> P9. P10. P11. P12 és P₁₃ jelentése hidrogénatom, akkor:

(a) ha j kettős kötést jelent, és i hiányzik, akkor P₆ jelentése hidrogénatomtól eltérő;

(b) ha i jelentése kettős kötés, és j hiányzik, akkor P₆ jelentése hidrogénatomtól eltérő;

···· ·· ···· · ··

- 14 (c) i és j egyidőben kettős kötések nem lehetnek;

(d) ha i és j hiányoznak, akkor P₆ hidrogénatom nem lehet;

x) ha Pi oxocsoportot jelent, e és b jelen van; és a, c, d hiányzik; P₂ metilcsoportot jelent; és P₃, P₄, P₇, P9. P10. P11 és P13 jelentése hidrogénatom, akkor:

(a) ha h jelen van, akkor j hármas kötés nem lehet;

(b) ha h hiányzik, és i kettős kötést jelent, akko P₆ jelentése a hidrogénatomtól eltérő;

(c) ha h hiányzik és i kettős kötés, akkor P₆ jelentése a hidrogénatomtól eltérő;

(d) ha h hiányzik, és sem i, sem j nem jelent kettős kötést, akkor P₆ jelentése a hidrogénatomtól eltérő;

xi) ha Pj oxocsoportot, P₃ OH csoportot jelent, b jelen van, a, e, c, d, h, i, j hiányoznak, P₂ metilcso portot jelent, és P₄, P₇, P₉, P₁₀, P,, és P₁₃ jelentése hidrogénatom, akkor P₆ nem lehet hidrogénatom;

xii) ha P₁ jelentése oxocsoport, b jelen van, a, e, c, d, h és i hiányoznak; P₆ és P₂ jelentése metilcsoport; és P₃, P₄, P₅, P₇, P₈, P₉, P₅₀ és P_n hidrogénatomot jelent, akkor:

(a) ha j kettős kötést jelent, akkor P₁₃ etilenilcsoport nem lehet;

• · • « · · · • · · · · · « ··· ···· ···· ·· ···· * ··

- 15 (b) ha sem j sem k nem jelent kettős vagy hármas kötést, akkor P₁₃ acetilenilcsoport nem lehet;

xiii) ha Pí jelentése OH csoport, c jelen van, és a, b, e, d, h és i hiányoznak, P₂ és P₆ metilcsoportot jelent; és P₃, P₄, P₅, P₇, P₈, P₉, P₁₀, P,, és P₁₂jelentése hidrogénatom, akkor:

(a) ha j kettős kötést jelent, akkor P₁₃ jelentése az etilcsoporttól eltérő;

(b) ha j hiányzik, és k jelentése kettős kötés, akkor P₁₃ jelentése a metil-metilenil-csoporttól eltérő;

(c) ha j és k hiányoznak, akkor P₁₃ jelentése az etilcsoporttól eltérő; és (d) ha k jelentése hármas kötés, akkor P₁₃ metil-metinil-csoportot nem jelenthet.

A találmány további céljait úgy érjük el, hogy módszert nyújtunk a hipotalamusz működésének és/vagy az autonóm idegrendszer működésének módosítására egy egyénen. Ligandumot nyújtunk egy nazális érzékelő hámsejt felületén lévő kemoreceptor számára, ahol a sejt a szaglóhámtól eltérő szövet része; és a ligandumot az egyén orrjáratán belül úgy adagoljuk, hogy a ligandum specifikusan a kemoreceptorhoz kötődik, s így az egyén hipotalamikus működésének módosítását eredményezi.

E bejelentésünk összes megvalósítási módja a megvalósítási formákban leírt szteroid szerkezetek működési ekvivat ·

- 16 lenseire vonatkozik, és azokat magában foglalja, valamint vonatkozik azokra a módosított szteroidokra, amelyek az említett működési ekvivalenciát mutatják, akár közlik explicit módon, akár nem közlik ezeket a módosított szteroidokat.

Az alábbiakban röviden ismertetjük az ábrákat.

Az 1. ábra szemlélteti az integrált EVG, GSR és ST adatokat az A1-P1 vegyület esetében férfiakon a 16. és 17. példának megfelelő tesztben.

A 2. ábra szemlélteti az integrált EVG adatokat az A1-P1, A2-P1, A4-P1, A3-P1, A1-P4, A2-P4 vegyületre nőkön.

A 3. ábra bemutatja az ST mérések adatait az A1-P1, A2-P1, A4-P1, A3-P1, A1-P4, A2-P4 vegyületek esetében nőkön.

A 4. ábra szemlélteti GSR mérések adatait nőkön az A1-P1, A2-P1, A4-P1, A3-P1, A1-P4, A2-P4 vegyületek esetében.

Az 5. ábra szemlélteti az ST, GSR és EVG mérések adatait nőkön, az A1-P3 vegyület esetében.

A 6. ábra szemlélteti az RF és EKG mérések adatait nőkön az A1-P3 vegyület esetében.

A 7. ábra bemutatja az EEG mérések adatait nőkön az A1-P3 vegyület esetében.

A 8. ábra szemléltei Sl, GSR és EVG mérések eredményeit férfiakon az A1-P3 vegyület esetében.

A 9. ábra bemutatja RF és EKG mérések adatait férfiakon az A1-P3 vegyület esetében.

A 10. ábra szemlélteti EEG mérések adatait férfiakon az

A1-P3 vegyület esetében.

• · • · « 4 » · • ··· ···* ·*·· ♦» ···· · ·♦

- 17 A 11. és 12. ábra mutatja ST, GSR és EVG mérések eredményeit férfiakon, illetve nőkön az A2-P3 vegyület esetében.

A 13. és 14. ábra szemlélteti EEG mérések adatait férfiakon, illetve nőkön az A2-P3 vegyület esetében.

A 15. és 16. ábra mutatja RF és EKG mérések adatait férfiakon, illetve nőkön az A2-P3 vegyület esetében.

A 17. és 18 ábra ST, GSR és EVG mérések adatait mutatja férfiakon, illetve nőkön az A8-P1 vegyület esetében.

A 19. és 20. ábra RF és EKG mérések adatait mutatja férfiakon, illetve nőkön az A8-P1 vegyület esetében.

A 21. és 22. ábra EEG mérések adatait mutatja férfiakon, illetve nőkön az A8-P1 vegyület esetében.

A 23. és 24. ábra ST, GSR és EVG mérések adatait szemlélteti férfiakon, illetve nőkön az A6-P1 vegyület esetében.

A 25. és 26. ábra RF és EKG mérések adatait mutatja férfiakon, illetve nőkön az A6-P1 vegyület esetében.

A 27. és 28. ábra EEG mérések adatait mutatja férfiakon, illetve nőkön az A6-P1 vegyület esetében.

A 29., 30. és 31. ábrák ST, GSE, EVG, RF, EKG és EEG mérések adatait mutatják férfiakon a 20,21 -dimetil-pregna-5,20-dién-3B-ol esetében.

A 32., 33. és 34. ábrák ST, GSE, EVG, RF, EKG és EEG mérések adatait szemléltetik nőkön a 20,21-dimetil-pregna-5,20-dién-3B-ol esetében.

« · » » • · » · • · · ♦ · « » ♦ >· · ·· ···· » «I

- 18 A 35., 36. és 37. ábrák ST, GSR, EVG, RF, EKG és EEG mérések adatait szemléltetik férfiakon a 20,21-dimetil-pregna-5,20-dién-3-on esetében.

A 38., 39. és 40. ábrák ST, GSR, EVG, RF, EKG és EEG mérések adatait szemléltetik nőkön 20,21-dimetil-pregna-5,20-dién-3-on esetében.

A 41., 42. és 43. ábrák ST, GSR, EVG, RF, EKG és EEG mérések adatait szemléltetik férfiakon A14-P2 vegyület esetében.

A 44., 45. és 46. ábrák ST, GSE, EVG, RF, EKG és EEG mérések adatait szemléltetik férfiakon A7-P2 vegyület esetében.

Az 50., 51. és 52. ábrák ST, GSR, EVG, RF, EKG és EEG mérések adatait szemléltetik nőkön A7-P2 vegyület esetében.

Az 53. és 54. ábra ST, GSR, EVG, EEG mérések adatait mutatja férfiakon A11-P1 vegyület esetében.

Az 55. ábra EEG mérések adatait mutatja férfiakon A13-P1 vegyület esetében.

Az 56., 57. és 58. ábrák ST, GSR, EVG, RF, EKG és EEG mérések adatait mutatják nőkön A13-P1 vegyület esetében.

Az 59. ábra EVG, EDA és BT adatokat mutat be nőkön az A3-P1 vegyület esetében.

A 60. ábra EVG, EDA és BT mérések adatait szemlélteti nőkön az A4-P1 vegyület esetében.

A 61. és 62. ábra mérési adatokat szemléltet férfiakon, illetve nőkön az A8-P1 vegyület esetében.

A 63. és 64. ábra mérési adatokat mutat be férfiakon, illetve nőkön az A13-P8 vegyület esetében.

• ·

- 19 A 65. és 66. ábra mérési adatokat mutat be férfiakon, illetve nőkön az A6-P1 vegyület esetében.

A 67. és 68. ábra mérési adatokat mutat be férfiakon, illetve nőkön az A6-P1 vegyület 20-metil-származéka esetén.

A 69. és 70. ábra mérési adatokat szemléltet férfiakon, illetve nőkön az A1-P1 vegyület 20,21-dimetil-származékának az esetében.

A 71. és 72. ábra mérési adatokat mutat be férfiakon, illetve nőkön az A6-P1 vegyület 20,21-dimetil-származékának az esetében.

A 73. és 74. ábra mérési adatokat mutat be férfiakon, illetve nőkön az A14-P2 vegyület esetében.

A 75. és 76. ábra mérési adatokat mutat be férfiakon, illetve nőkön az A12-P1 vegyület esetében.

A 77. és 78. ábra mérési adatokat mutat be férfiakon, illetve nőkön az A7-P2 vegyület esetében.

A 79. és 80. ábra mérési adatokat mutat be férfiakon, illetve nőkön az A13-P1 vegyület esetében.

A 81. és 82. ábra mérési adatokat mutat be férfiakon, illetve nőkön az A2-P7 vegyület esetében.

A 83. és 84. ábra mérési adatokat mutat be férfiakon, illetve nőkön az A3-P5 vegyület esetében.

A 85.-96. ábrák a II. táblán látható kolánszármazékokra vonatkoznak. A 85. és 86. ábra mérési adatokat mutat be férfiakon, illetve nőkön az A8-C1 vegyület esetében.

A 87. és 88. ábra mérési adatokat mutat be férfiakon, illetve nőkön az A2-C1 vegyület esetében.

«· ·»«· •••J *·

- 20 A 89. és 90. ábra mérési adatokat mutat be férfiakon, illetve nőkön az A2-C1 vegyület esetében.

A 91. és 92. ábra mérési adatokat mutat be férfiakon, illetve nőkön az A1-C1 vegyület esetében.

A 93. és 94. ábra mérési adatokat mutat be férfiakon, illetve nőkön az A3-C1 vegyület esetében.

A 95. és 96. ábra mérési adatokat mutat be férfiakon, illetve nőkön az A13-C1 vegyület esetében.

Az alábbiakban találmányunkat részletesen leírjuk,

I. Definíciók

Az „emóció” (affektus, indulat) átmeneti érzelmi állapot. Tipikusan negatív emóció például az idegesség, feszültség, szégyen, szorongás, ingerlékenység, harag, düh és hasonlók.

A „hangulatok” hosszabban tartó érzelmi állapotok, ilyen például a bűntudat, szomorúság, reménytelenség, értéktelenség érzése, bűnbánat, boldogtalanság, nyomorúság és hasonlók. „Jellemvonások” egy egyén személyiségének maradandóbb jellemzői. Tipikusan negatív jellemvonások: az érzékenység, önsajnálat, gáncsolhatóság, konokság, haragtartás, elkeseredettség, félénkség, lustaság és hasonlók.

A találmány szerinti vomeroferinek felhasználhatók a hipotalamusz egy vagy több hormonális, viselkedési vagy autonóm funkciójának a serkentésére a VNO-val végbemenő érintkezés útján. A hipotalamusz szervezeti funkcióinak széles köre következtében, valamint a VNO és a hipotalamusz idegi kapcsolata révén a találmány szerinti vomeroferinek ·>··· ····

- 21 abban a helyzetben vannak, hogy stimulálni képesek az olyan funkciókat, mint az endokrin termelés szabályzása, például a hipofízis vazopresszin- és oxitocin-kibocsátásának szabályzása, valamint számos más peptid kibocsátása. A vazopresszin antidiuretikus hormon, mivel hatása a vesén belül érvényesül, növeli a vízfelvételt és vizelet koncentrálódását. Ezenfelül hatása a szervezeten belül a vérnyomás szabályzására irányul, mivel az artériák sima izomzatára hat; továbbá hatással van a metabolizmusra, mivel a májban a glikogén glükózzá alakulását fokozza. Az oxitocin amelynek receptorai a méh és az emlő simaizomzatában találhatók - az emlők simaizomzatának összehúzódása által a tejelválasztást csökkentheti, és méhösszehúzódásokat vált ki a szülés során. A hipotalamusz továbbá szabályozza a hormonok felszabadulását a hipofízis elülső lebenyéből, így az ACTH, prolaktin, LH (luteinizáló hormon), GH (növekedési hormon), TSH (tiroid-serkentő hormon), FSH (follikuluszstimuláló hormon) és béta-endorfin felszabadulását is szabályozza. Ennek alapján például az LH elválasztás szabályozásának a képessége a termékenység szabályzásához vezethet nőstényekben, vagy a tesztoszteron-termelődés szabályzásához hímekben. A tesztoszteron-termelődés növekedése kóros állapotok, például csekély libidó kezelésére használható férfiakon, vagy az izmot pusztító betegségek vagy állapotok - például az öregedés - kezelésére. A tesztoszteron csökkentése felhasználható olyan kóros állapotok kezelésére, mint például a prosztatarák.

• ·

- 22 A hipotalamusz viselkedéssel kapcsolatos működésének szabályzása (kontrollja) is megvalósítható a jelen találmány szerinti vomeroferinek alkalmazásával. Ismert, hogy a hipotalamusz szabályoz olyan viselkedési formákat, mint a félelem, düh, öröm, valamint az olyan napi ritmusokat, amelyek az alvást és az ébrenlétet kontrollálják. A hipotalamusz által szabályzott további funkciók közé tartozik az étvágy, szomjúság; szimpatikus (idegrendszeri) funkciók, így a menekülés és küzdelem; a kardiovaszkuláris szabályzás funkciói; a hőmérséklet szabályzása, valamint a zsigeri működések, így a bél izomzatának és az emésztés célját szolgáló savelválasztásnak a kontrollja. Ennek következtében - jóllehet a szervezet különböző részeiből a hipotalamuszba irányuló számos érzékelési bemenet létezik - az a véleményünk, hogy a találmány szerinti vomeroferinek első ízben nyitnak utat stimulálásra az orrüregen át, belégzés útján (inhalálással) a VNO-ban lévő hámsejtekkel érintkezve; s ez módszert jelent a hipotalamusz fentebb részletezett funkcióinak a serkentésére.

A „pregnán típusú szteroidok” (az alábbiakban rövidebben: pregnán szteroidok) olyan alifás, többgyűrűs szénhidrogének, amelyekre jellemző a négygyűrűs szteroid szerkezet (váz) (szteránváz) a 10- és 13-helyzetű metilcsoporttal, valamint a 17-helyzetű etilcsoporttal (beleértve a telítetlen csoportokat is). A pregnének a pregnánok olyan alcsoportját képviselik, amelynek tagjai az általános értelmezés szerint legalább egy kettős kötést tartalmaznak. Továbbá, valamennyi fentebb leírt származékot, amelyek a fentebb leírt szerkezeti • · · ·

- 23 jellemzőkkel rendelkeznek, generikusan szintén pregnán szteroidoknak neveznek.

A „kólán típusú szteroid (az alábbiakban röviden: kólán szteroid) olyan alifás policiklusos szénhidrogén, amelyre jellemző a négygyűrűs szteroid váz (szteránváz), a 10- és 13helyzetben metilcsoporttal, és a 17-helyzetben 2-pentil-csoporttal (beleértve a telítetlen csoportokat is).

„Kemoreceptoron” olyan receptormolekulát értünk, amely egy „kemoszenzoros” (kémiailag érzékelő) hámsejt felületén helyezkedik el, s amely sztereospecifikus módon kapcsolódik különleges ligandumhoz vagy ligandumokhoz. Ez a specifikus kötődés egy szignál (jel) átvitelét iniciálja (kezdeményezi), mely afferens (érzékelő) idegimpulzust indít. Kemoreceptorok találhatók többek között az ízlelő szemölcsökben, szaglóhámban és a vomeronazális szövetben.

A „pregnén típusú szteroidok (a következőkben pregnén szteroidok) fogalmán e leírásunkban olyan alifás policiklusos szénhidrogéneket értünk, amelyek négygyűrűs szteroid szerkezettel rendelkeznek, és az A gyűrűben legalább egy kettős kötést, a 10- és 13-helyzetben metilcsoportot, és a 17helyzetben etilcsoportot tartalmaznak (beleértve telítetlen csoportokat); valamint 3-helyzetben oxo-, hidroxilcsoportot, vagy a hidroxilcsoport valamilyen származékát, például alkoxi-, észter-, benzoát-, cipionát-, szulfát- vagy glükuronidszármazékát tartalmazzák. Az ilyen szerkezeti jellemzőket tartalmazó származékokat generikusan szintén pregnén szteroidoknak nevezik.

- 24 Az (A) szerkezeti képlet mutatja a négygyűrűs szteroid szerkezetet, amely a pregnán és pregnén szteroidok közös szerkezeti vonása, továbbá a csoportok és szubsztituensek helyzetét jelző számozási rendszert.

„Szexuális szempontból dimorf” (szexuálisan dimorf) kifejezés azt jelenti, hogy egy farmakológiai (gyógyászati) hatóanyag hatása - vagy az arra adott válasz - azonos állatfaj hím, illetve nőstény egyedein különböző.

Egy hatóanyag „hatásos mennyisége” olyan mennyiségi és koncentrációs tartományt jelent, amely egy ilyen hatóanyagra szoruló egyénnek adagolva körülbelül a kívánt fiziológiai és/vagy pszichológiai hatást váltja ki. A jelen esetben az erre szoruló egyénnek olyan fiziológiai vagy viselkedési vonása van, amelyet normális körülmények között a hipotalamusz szabályoz, s ahol kívánatos a hipotalamusz funkciójának vagy e jellemző vonásnak a befolyásolása. Egy adott hatóanyag hatásos mennyisége például a befolyásolni kívánt működéstől, a kívánt hatástól és az adagolás módjától függően változhat. így például, ha egy szeroidot oldatban adagolnak egy egyén arcbőrére, akkor a hatásos koncentráció az 1 pg/ml és 100 pg/ml tartományban, előnyösen 10-50 gg/ml, és legelőnyösebben 20-30 pg/ml tartományban van. Ha a szteroidot közvetlenül a VNO-ba vezetjük, akkor a hatásos mennyiség körülbelül 1 pikogramm és körülbelül 1 nanogramm tartományban, még előnyösebben körülbelül 10 pikogrammtól körülbelül 50 pikogrammig terjedő tartományban van. Ha a szteroidot krém vagy aeroszol, vagy kenőcs alkalmazásával az orrjáratba adagoljuk, akkor a hatásos mennyiség tartománya

- 25 körülbelül 100 pg és 100 pg között van, előnyösen körülbelül 1 ng és körülbelül 10 pg között van. Ebből következik, hogy egyes hatóanyagok bizonyos úton adagolva hatékonyak lehetnek, más úton adagolva viszont nem fejtenek ki hatást.

A „hipotalamusz” a középagy (dienkefalon) része, amely magában foglalja a harmadik agykamra ventrális falát a hipotalamikus barázda alatt, valamint az agykamra alját képező szerkezeteket, továbbá a látóidegkereszteződést, tuber cinereumot, infundibulumot és az emlőalakú testeket. A hipotalamusz szabályozza az autonóm idegrendszert, és számos fiziológiai és viselkedési funkciót - így az úgynevezett küzdési és menekülési válaszokat, szexuális motiválást, a szervezet vízegyensúlyát, a cukor és zsír metabolizmusát, éhséget, a testhőmérséklet szabályzását, endokrin mirigyek elválasztását és más funkciókat kontrollál. Továbbá a hipotalamusz a vazopresszin forrása, amely a vérnyomást szabályozza; valamint az oxitocin forrása, amely a szülést és a tejelválasztást megindítja. Az e leírásunkban közölt vomeroferin terápiával potenciálisan a hipotalamusz összes funkciói modulálhatok.

A „ligandum” leírásunkban olyan molekulát jelent, amely egy receptorsejt felületén megjelenő receptormolekulával végbemenő specifikus kötődés útján kémiai szignálként (jelként) működik, s ezáltal megindítja a szignál átvitelét a sejtfelüieten keresztül. A ligandumok kemoszenzoros receptorokkal végbemenő kötődése mérhető. A kemoszenzoros szövet, így a vomeronazális érzékelő hám vagy a szaglóhám többféle neuroreceptorsejtet tartalmaz, amelyek mindegyike legalább • · · · · ·

- 26 egy sejtfelületi receptorral rendelkezik. Számos receptormolekula ligandumok iránti specificitása azonos. Ennek következtében, ha a szövet egy ligandum hatása alá kerül, amelylyel szemben specifikus (például a VNO egy vomeroferin hatása alatt van), akkor a sejtfelületi receptorpotenciál összegeződő változása mérhető.

E leírásunkban a „rövid szénláncú alkilcsoport” 1-4 szénatomos, egyenes vagy elágazó szénláncú, telített szénhidrogéncsoportot, például metil-, etil-, η-propil-, izobutil- és ehhez hasonló csoportokat jelent. „Alkoxicsoporton” e leírásunkban a konvencionális értelmezés szerint olyan -OR- csoportot értünk, ahol R jelentése a fentebb meghatározott alkilcsoport.

A „feromon” olyan anyag, amely lehetővé teszi azonos faj tagjai között a kommunikációt kémiai úton, elválasztás és perifériás kémiai érzékelés (kemorecepció) útján. Emlősállatokban a feromonokat általában az orr vomeronazális szervében elhelyezkedő receptorok fogják fel. A feromonok általában a fejlődést, szaporodást és rokon viselkedési vonásokat érintik. A „vomeroferin általánosabb fogalom, amely magában foglalja a feromonokat, és bármilyen forrásból származó anyagra vonatkozik, amely kemoszenzoros hírvivőként működik, specifikus vomeronazális érzékelő hámsejt receptorához kötődik, és fiziológiai vagy viselkedési hatást vált ki. A „vomeroferin fiziológiai hatását a vomeronazális szerv (VNO) közvetíti (mediálja).

- 27 A pikogramm (pg) a nanogramm (ng) ezredrésze. A nanogramm a mikrogramm (pg) ezredrésze. A pg a mg ezredrésze.

II. A találmány megvalósítási módjai

A. A találmányban alkalmazható pregnánok

A találmány bizonyos pregnán szteroidok csoportjára irányul.

A pregnánok csoportján belül a pregnánok egy alcsoportja nézetünk szerint új. A következőkben szintéziseket közlünk a „Pregnánok” című, 1. táblában feltüntetett vegyületek előállítására.

Az 1. tábla bemutatja azokat a pregnánokat, amelyekre a találmány vonatkozik, ezek azonban a találmány oltalmi körét nem korlátozzák. Az ezt követő reakcióvázlatokban az ezen pregnánok előállítására alkalmazható közbenső termékek és szubstruktúrák szintéziseit szemléltetjük.

« ·

- 28 I. tábla PREGNÁNOK

	r.	>	4	•	i ·	T	•
1x6^	\s&	/*£	\^L
	-X#	-<		Jdí?		λ£	xtí£
·<	ÍU3^	μ*£	<		Ftdf -4¾	óé	xA
	ld£	s&	^Ar		^af )-4¾		^al -4¾
	*£				xtíji	xtí?
* ?·**Ύ	,d£	nA			<	•4j£ító
¹	xt£	aA	xt^	-a$	&Z	xA&í
M.				isg		„cAbA
•xff,	4t	&		•ΦΖ·	4?	xA	4Í
«ζφί£	-45^	Xp.	•ΦΣ-	,rtf -4¾	4ζ	xA	JA
’^SL		xi£	x&		&	xA	xtíjf
			X<L		xA	XÍX.	Λ)! -4¾
	.oá	c			.<$£	<
isSL		d£ld#.	í£:		dsr

- 29 SZUBSTRUKTÚRÁK SZINTÉZISE

Az előző I. táblára hivatkozva az alábbiakban az A1-A13 sorban, illetve P1-P8 oszlopban látható közbenső termékek szintézisét példákkal szemléltetjük.

Szubstruktúrák szintézise: A típus

Lásd az 1) reakcióvázlatot [L. Percy és munkatársai: J. Amer. Chem. Soc. 70. 887 (1948)].

Egy további, kereskedelmi forgalomban lévő szubstruktúra például az (1) képletű 17a-etinil-tesztoszteron.

Az A2-ben kereskedelmi forgalomban lévő szubstruktúrák, például a dehidroepiandroszteron és pregnenolon láthatók.

Az A3 típus szintézisét szemlélteti a 2) rakcióvázlat [G. Dávid és munkatársai: J. Org. Chem. 50. 3931 (1985)].

Az A4 szubstruktúra szintézisét szemlélteti a 3) reakcióvázlat [I. Z. Kabore és munkatársai: Tetrahedron 34. 2807 (1978)].

Az A5 szubstruktúra szintézisét szemlélteti a 4) reakcióvázlat [I. Dory és munkatársai: Acta Chim. Hung. 20. 67 (1959); valamint Bernhard és munkatársai: 1 297 603 számú német szabadalom (1969)].

Az A6 szubstruktúra szintézisét szemlélteti az 5) reakcióvázlat [A. M. Krubiner és munkatársai: J. Org. Chem. 34., 3502 (1969)], valamint a 6) reakcióvázlat [R. Sciaky és A. Consonni: Gazz. Chim. Ital. 92. 730 (1962)].

Az A7 szubstruktúra szintézisét szemlélteti a 7) reakcióvázlat.

• ··« « · ··»·

- 30 Az A8 szubstruktúra szintézisét szemlélteti a 8) reakcióvázlat [V. Petrow és munkatársai: J. Steroid Biochem. 19, 1491 (1983)].

Az A9 szubstruktúra szintézisét szemlélteti a 9) reakcióvázlat [S. R. Schow és munkatársai: Steroids 30. 389 (1977)].

Szintén kereskedelmi forgalomból beszerezhető szubstruktúra például a (2) képletű 17a-etinil-dihidrotesztoszteron.

Az A10-ben kereskedelmi forgalomban lévő szubstruktúrák, például a pregnanolon és androszteron látható.

Az A10 szubstruktúra szintézisét szemlélteti továbbá a 10) reakcióvázlat [J. M. Kohli és munkatársai: Phytochemistry 1_0, 442 (1971)].

Az A11 szubstruktúra szintézisét szemlélteti a 11) reakcióvázlat (lásd a példát is) [F. Brown és C. Djerassi: J. Amer. Chem. Soc. 102. 807 (1980)].

Az A12 szubstruktúra szintézisét szemlélteti a 12) reakcióvázlat.

Az A13 szubstruktúra szintézisét szemlélteti a 13) reakcióvázlat.

Szubstruktúrák szintézise: P típus

A P1 szubstruktúra szintézisét szemlélteti a 14) reakcióvázlat [A. K. Bőse és N. G. Steinberg: Synthesis 595 (1970)], valamint a 15) reakcióvázlat [S. T. Schow és munkatársai: Steroids 30, 389 (1977)].

• V

- 31 A P2 szubstruktúra szintézisét szemlélteti a 16) reakcióvázlat [R. Breslow és L. M. Maresca: Tetrahedron Letters, 7, 623 (1977)], valamint a 17) reakcióvázlat [B. G. Hazra és munkatársai: J. Chem. Soc., Perkin Trans I 1819 (1993)].

A (3) képletű 5a-pregn-17(20)-βη-3β-οΙ szintén egy kereskedelmi forgalomból beszerezhető szubstruktúra.

Kereskedelmi forgalomban lévő P3 szubstruktúra például a (4) képletű pregna-5,16-dien-3p-ol. (Szteraloidok)

Ha a P3 szubstruktúra nincsen kereskedelmi forgalomban, akkor szintézise a 18) reakcióvázlatban bemutatott úton végezhető [J. P. Dusza és W. Bergman: J. Org. Chem. 25, 79 (1960)].

A P4 szubstruktúra szintézisét szemlélteti a 19) reakcióvázlat [C. W. Shoppee és munkatársai: J. Chem. Soc. 3388 (1964)].

Egy további, kereskedelmi forgalomban lévő szubstruktúra például az (5) képletű 5a-pregnan-3p-ol (Szteraloidok).

A P5 szubstruktúra szintézisét szemlélteti a 20) reakcióvázlat [A. M. Krubiner és munkatársai: J. Org. Chem. 34, 3502 (1969)].

A P6 szubstruktúra szintézisét szemlélteti a 21) reakcióvázlat [Ε. P. Oliveto és munkatársai: J. Am. Chem. Soc. 73, 5073 (1951)].

A P7 szubstruktúra szintézisét szemlélteti a 22) reakcióvázlat [P. Crabble és E. Velarde: 3 681 410 számú Egyesült Államok-beli szabadalmi leírás (1972)].

A P8 szubstruktúra szintézisét szemlélteti a 23) reakcióvázlat [M. D. Giroud és J. Jacques: Bull. Soc. Chim.

- 32 Francé 62 (1963); valamint az 1 536 034 számú francia szabadalom (1968)]. Lásd a 24) reakcióvázlatot is.

17a-PREGNÁNOK

A P1, P4 és P5 szubstruktúrák normális konfigurációja a 17-helyzetben béta. A megfelelő 17a-analógok kiinduló anyagként 17a-pregnolon alkalmazásával előállíthatok. Példaként említjük a (6), (7) és (8) képletű vegyületeket [A. M. Krubiner és munkatársai: J. Org. Chem. 34. 3502 (1969)].

METIL-PREGNÁNOK

Az alábbi módszerrel lehetővé válik metilcsoport bevitele 20-helyzetben, ha ezt a szerkezet lehetővé teszi; nevezetesen a P1, P2, P3, P4 és P6 szubstruktúrák esetén. Ezt az utat a 25) reakcióvázlat szemlélteti [J. B. Jones és K.

D. Gordin: Can. J. Chem. 50, 2712 (1972)], lásd továbbá a 26) reakcióvázlatot [J. P. Dusza és W. Bergmann: J. Org. Chem. 25, 79 (1960)]; továbbá lásd a 27) reakcióvázlatot. D. G. Loughead [J. Org. Chem. 50. 3931 (1985)] 6a-metil-analógokat közöl, így a (9) képletű termék előállítását is.

A 3 681 410 számú Egyesült Államok-beli szabadalomban is (9) képletű 6a-metil analógok előállítását közük. A 3 492 318 számú Egyesült Államok-beli szabadalomban a (10) képletű 18-metil-analógok, illetve (11) képletű 21-metil-analógok előállítását közlik.

Egyes metilezett pregnenolon prekurzorok kereskedelmi forgalomban vannak, például a (12), (13), (14) és (15) • ·

- 33 képletű 16a(P)-metil-vegyületek.

Továbbá a 17a-metil-pregnenolon is könnyen hozzáférhető: lásd az 1 363 191 számú francia szabadalmat, illetve a 28) reakcióvázlatot.

Ennélfogva a 6-, 16- vagy 17-helyzetben metilcsoportot hordozó, pregnenolonból szintetizált vegyületek is előállíthatok a megfelelő metil-pregnenolon prekurzor alkalmazásával.

Dimetil-vegyületek - például a leírt 18,21 -dimetil-pregna-4,16-dien-20-in-3-on - három általános módszer egyikével készíthetők:

Az első módszer szerint egy metilezett, például 6-, 16vagy 17-helyzetben metilezett prekurzort olyan módszerrel kezelünk, aminek segítségével egy metilcsoport például 20helyzetbe vihető.

A második módszer szerint úgy járunk el, hogy dimetilezett prekurzort, például a kereskedelmi forgalomban lévő 6,16a-dimetil-pregnenolont alkalmazunk.

További dimetilezett pregnenolon prekurzorokat például a 29) reakcióvázlatban bemutatott úton állíthatunk elő [S. Júlia és munkatársai: Bull, Soc. Chim. Francé 1495 (1962)]; lásd továbbá a 30) reakcióvázlatot [E. Shapiro és munkatársai: J. Med. Pharm. Chem. 5, 975 (1962)]; valamint a 31) reakcióvázlatot [J. Cairns és munkatársai: J. C. S. Perkin I, 1558 (1976)]; a 32 reakcióvázlatot [R. Deghenghi és R. Gaudry: J. Amer Chem. Soc. 4668 (1961); valamint 927 515 • ·

- 34 számú angol szabadalom]; a 33 reakcióvázlatot [R. Deghenghi és R. Gaudry; Tetrahedron Letters, 489 (1962)]; és a 34) reakcióvázlatot (W. J. Adams és munkatársai: J. Chem. Soc. 1490 (1956)].

A harmadik módszer szerint nem-metilezett prekurzorokból - például pregnenolonból - indulunk ki, és olyan módszert alkalmazunk, amellyel két metilcsoport bevihető, mint a 35) reakcióvázlatban bemutatott példában.

A 20,21-dimetil-pregnánok 24-norkolánok néven is ismertek. A 24-norkolánok egy más módon egy kólán prekurzor lebontásával is előállíthatok, mint például a 36) reakcióvázlatban bemutatott úton [Y. Hirano és munkatársai: Chem. Pharm. Bull. 31_, 394 (1983)].

HALOGÉN-PREGNÁNOK

A 3 681 410 számú Egyesült Államok-beli szabadalomban ismertetik a (16)-(23) képletű vegyületek előállítását. D. H. Barton és munkatársai közük a (24) képletű vegyület előállítását (Tetrahedron Letters 24. 1605 (1983); B. Jiang és Y. Xu közük a (25) képletű vegyület előállítását [Tetrahedron Letters 33, 511 (1992)].

Egyes metilezett pregnenolon prekurzorok kereskedelmi forgalomban vannak, például a (12), (13) és (14) képletű 16a^)-metil-származékok.

Továbbá könnyen hozzáférhető a 17a-metil-pregnenolon is (lásd az 1 363 191 számú francia szabadalmat, illetve a • · · ·

- 35 28) reakcióvázlatot.

Ennek alapján a 6-, 16- vagy 17-helyzetben metilcsoportot hordozó, pregnenolonból szintetizált vegyületek is előállíthatok a megfelelő metil-pregnenolon prekurzor alkalmazásával.

- 36 KOLÁNOK

κ.			ί'		Ο O9L	κ		1'
«ο			1'			ο	1'
in	ί¹ ο			ο	1'	ο	V 0
		Μ		V	X	1'	1'
<η			ί	V	Á' 1	ο	¥ ο
ÍM			1'	ο		1'	V 0
-	1'		1'	ο	'Á'	ο	V ο
£		<Μ	«η	<ρ	00	r^·	ΓΟ

- 37 SZUBSTRUKTÚRÁK SZINTÉZISE

A II. táblára hivatkozva az alábbiakban az A1-A13 sorban, illetve C1-C7 oszlopban látható szubstruktúrák szintézisét példákkal szemléltetjük.

Szubstruktúrák szintézise: A típus

Az A1 szubstruktúra szintézisét szemlélteti a 37) reakcióvázlat.

Lásd példában.

Az A2 szubstruktúra kereskedelmi forgalomban van, például a (26) képletű pregnenolon, (27) képletű sztigmaszterin és a (828) képletű kolénsav.

Az A3 szubstruktúra szintézisét szemlélteti a 38) reakcióvázlat.

Lásd példában.

Az A6 szubstruktúra szintézisét szemlélteti a 39) reakcióvázlat.

Lásd példában.

Az A8 szubstruktúra szintézisét szemlélteti a 40) reakcióvázlat.

Lásd példában.

Az A11 szubstruktúra szintézisét szemlélteti a 41) reakcióvázlat [D. H. R. Barton és munkatársai: J. Chem. Soc. Perkin Trans. I, 1805 (1986)].

Az A13 szubstruktúra szintézisét szemlélteti a 42) reakcióvázlat.

Lásd példában.

• · · ·

- 38 Szubstruktúrák szintézise: C típus

A C1 szubstruktúra szintézisét szemlélteti a 43) reakcióvázlat [J. P. Schmit és munkatársai: J. Org. Chem. 40. 1586 (1975)].

A C2 szubstruktúra szintézisét szemlélteti a 44) reakcióvázlat [W. Bergmann és J. P. Dusza: J. Org. Chem. 23. 1245 (1958)].

A C3 szubstruktúra szintézisét szemlélteti a 45) reakcióvázlat [J. E. van Lier és L. L. Smith: J. Org. Chem. 36. 2631 (1970)].

A C4 szubstruktúra szintézisét szemlélteti a 46) reakcióvázlat [A. Burger és munkatársai: Tetrahedron 44. 1141 (1988)].

A C5 szubstruktúra szintézisét szemlélteti a 47) reakcióvázlat [A. B. Turner: Chemistry and Industry, 385 (1979)].

A C6 szubstruktúra szintézisét szemlélteti a 48) reakcióvázlat [G. Stoeck és H. Stein; 854 517 számú német szabadalom (1952)].

A C7 szubstruktúra szintézisét szemlélteti a 49) reakcióvázlat [A. Burger és munkatársai: Tetrahedron 45. 155 (1989)].

24-NORKOLÁNOK ÉS 24-METILKOLÁNOK

A 24-helyzetben egy szénatommal rövidített vagy hoszszabbított oldalláncot tartalmazó szerkezetek hasonló módszerekkel állíthatók elő; hasonló módon a 23-metil-kolánok is hozzáférhetők. Erre példaként említjük a (29) képletű 23- 39 -metil- és a (30) képletű 24-metil-származékot [J. P. Schmit és munkatársai: J. Org. Chem. 40. 1586 (1975)]; a (31) képletű 24-metil-származékot [Y. M. Sheikh és C. Djerassi: Steroids 26. 129 (1975)]; valamint a (32) képletű 24-nor-, (33) képletű 23-metil- és a (34) képletű 24-metil-vegyületet [M. Morisaki és munkatársai: Chem. Pharm. Bull. 28. 606 (1980)]; a (35) képletű 24-nor-vegyületet [D. H. R. Barton és munkatársai: J. Chem. Soc. Perkin Trans. I. 1805 (1986)]; a (36) képletű 24-nor-, és (37) képletű 24-metil-származékot (A. Burger és munkatársai: Tetrahedron 44. 1141 (1988)]; a (38) képletű 24-nor-vegyületet [Β. M. Trost és munkatársai: Tetrahedron Letters 34. 587]; végül a (39) képletű 24-nor-vegyületet [A. Burger és munkatársai: Tetrahedron 45. 155 (1989)].

C. Szintetikus módszerek

1. 3-, 6-, 19-, 20- és 21-helyzetű származékok előállítása

Találmányunk módszereiben alkalmazott vegyületek a

3-, 6-, 19-, 20- és 21-helyzetben szubsztituált pregnán szteroidok. Számos 3-szubsztituált szteroid ismert vegyület, melyek a 3-oxo-szteroidokból származtathatók. Amint az 1) szintézisvázlatban látható, az (1J képletű pregna-4,20-dien-3-on a (2) képletű 3,5,20-trién-éterré vagy a (3) képletű 1,4,20-trien-3-onná alakítható, amelyek alkalmas kiinduló anyagok 6-, illetve 3-szubsztituált hidroxilszármazékok céljára.

• ·

- 40 Az alkoxiszármazékokat a megfelelő hidroxi-szteroidokból állítjuk elő alkilezőszerrel, amilyen például a trimetil-oxónium-(fluoro-borát), trietil-oxónium-(fluoro-borát) vagy a metil-(fluor-szulfonát). E reakciót inért klórozott szénhidrogén oldószerben, például metilén-kloridban hajtjuk végre. Egy más módon az alkilezéshez nátrium-hidridet, kálium-metanolátot vagy kálium-terc-butanolátot, ezüst-oxidot vagy bárium-oxidot alkalmathatunk poláris, aprotikus oldószerekben. Ilyen oldószer például a dimetil-formamid (DMF), dimetil-szulfoxid (DMSO), valamint a hexametil-foszforamid.

A szakterületen jártas személy számára a szteroidokhoz vezető szintetikus reakciók általános eljárásai ismertek. Ha a reakciók időtartamának és hőmérsékletének a meghatározása szükséges, akkor ez rutinszerű módszerekkel elvégezhető. A szükséges reagensek beadása után az elegyet inért gázatmoszférában keverjük, és egy órás időközökben alikvot részleteket veszünk ki. Ezeket az alikvot mintákat kromatográfiásan vizsgálva megfigyeljük (monitorozzuk) a kiinduló anyag eltűnését, amikor a feldolgozási eljárás megkezdhető. Ha a kiinduló anyag nem fogy el 24 órán belül, akkor az elegyet forráspontig melegítjük, és óránként - mint fentebb elemezzük, mindaddig, amíg a kiinduló anyag eltűnik. Ebben az esetben a kiinduló anyagot a feldolgozás megkezdése előtt lehűtjük.

A termékek tisztítását kromatográfíával és/vagy kristályosítással végezzük, amint ez a szakterületen jártas egyén számára ismeretes.

«·«« • w»· *♦

- 41 2. 19-OH-származékok előállítása

19-OH-pregna-4,17-dien-3-on szintézise

E vegyület szintézisének egyik módszerét a 3) szintézisvázlatban mutatjuk be.

D. Gyógyászati készítmények és alkalmazási módszerek

A találmány tárgyának egyik megvalósítási módja módszer a hipotalamusz funkciójának módosítására egy egyénen. Egy másik megvalósítási forma egy egyén autonóm (idegrendszeri) funkciójának a módosítása. Ezek az autonóm funkciók például (azonban korlátozás szándéka nélkül): a puizusszám, légzési sebesség (percenkénti légzésszám), az agy elektromos hullámainak az alakulásai (az alfa-kortikális aktivitás százalékos értéke), valamint a testhőmérséklet. További megvalósítási formák például (azonban azokra korlátozás nélkül): negatív emóciók, negatív hangulat vagy negatív jellemvonások csökkentése egy egyénen. További megvalósítási lehetőség: módszer női mentruáció előtti stressz kezelésére. A találmánynak mindezen kiviteli formái bizonyos pregnán vagy kólán szteroidok, pregnán és kólán szteroidok kombinációi, valamint egy vagy több pregnán vagy kólán szteroid és egy vagy több androsztán és/vagy ösztrén szteroid kombinációinak a nem-szisztémás, nazális adagolása útján megvalósíthatók.

Ez a különleges adagolási mód különbözik más adagolási módoktól, például a bevételtől vagy az injekciótól, számos fontos szempontból: a szteroid ligandum nazális adagolása közvetlen érintkezést tesz lehetővé a VNO-val. A talál·» ·

- 42 mány szerinti módszerek (eljárások) kivitelezése során a megfelelő ligandumot közvetlenül az orrjáratban lévő kemoreceptorokra és a vomeronazális szervre adagoljuk tabletták vagy tű nélkül, azaz nem-invazív módon. A gyógyszerhatást a ligandumoknak találmányunkban leírt, specifikus receptorokhoz végbemenő kötődése közvetíti (médiaija); ezek a receptorok az orrban lévő érzékelő hámsejtekben, előnyösen a VNO-ban helyezkednek el. így a gyógyszerhatás az idegrendszer, és nem a keringési rendszer útján érvényesül, tehát az agy működése a vér-agy-gát figyelembe vétele nélkül befolyásolható. Ezek a kezelési módszerek a hipotalamusz közvetlen befolyásolását teszik lehetővé az idegrendszer útján, mivel a feromon receptorok és a hipotalamusz között egyetlen szinaptikus kapcsolat van. Mivel az érzékelő idegek az agyban specifikus helyekre irányulnak, e módszer igen specifikus gyógyszerhatást biztosít, és nagy mértékben csökkenti nem kívánt mellékhatások lehetőségét.

A VNO-val megvalósuló érintkezés fontos, mivel a VNO kapcsolatban áll a kemoreceptív/feromon működéssel. A VNO vakon végződő, csöves divertikulumok (tágulatok) párjából áll, amelyek az orrsövény alsó végénél találhatók. A VNO olyan érzékelő hámot tartalmaz, amelynek az axonjainak közvetlen szinapszisai vannak a mandulaalakú szervhez (amygdala-hoz), és innen a hipotalamuszhoz. A VNO létezését a legtöbb szárazföldi gerinces állaton - beleértve az emberi magzatot is - megfelelően igazolták; az általános vélemény szerint azonban felnőtt emberekben csökevényes (lásd Johnson és munkatársai fentebb idézett közleményét).

• ·

- 43 A találmányunkban leírt ligandum-anyagok - vagy azok szulfát-, cipionát-, benzoát-, propionát- vagy glükunorát-származékai adagolhatok közvetlenül (önmagukban), előnyösen azonban e vegyületeket készítmények alakjában adagoljuk. A készítményeket folyékony adagolási formában, így például folyadékok, szuszpenziók alakjában vagy hasonló formákban, előnyösen a pontos adagolás szerinti egyszeri adagolásra alkalmas adagolási egység formájában állítjuk elő. A folyékony adagolási formák például orrcseppek vagy aeroszol alakjában alkalmazhatók. Eljárhatunk más módon is, úgy, hogy a hatásos komponenst krém vagy kenőcs készítmény alakjában készítjük ki, és az orrüregen belül topikusan (helyileg) alkalmazzuk. Ezenfelül a vomeroferin olyan pára (gőz) formájában is adagolható, amelyet az orrüregben felszabadított, egy löketnyi levegő-”puff” tartalmaz. Egy másik, alternatív adagolási módszer szerint ezeket a hatóanyagokat szabályzott felszabadulással juttatjuk ki úgy, hogy tömegesen vagy mikroszkópos szinten szintetikus polimerek, például szilikon és természetes polimerek, így zselatin vagy cellulóz alkalmazásával kapszulás készítménnyé alakítjuk. A felszabadulás sebessége a diffúzió sebességének szabályzására alkalmazott polimer rendszer megfelelő választásával kontrollálható [R. S. Langer és N. A. Peppa: Biomaterials 2, 201 (1981)]. A természetes polimerek, így a zselatin és a cellulóz lassan feloldódnak - néhány perctől órákig terjedő időtartam alatt - míg a szilikon hónapokon át érintetlen marad. A készítmény a szokásos, gyógyászati szempontból elfogadható vivőanyagot vagy adalékanyagot, és egy vagy • · • ·

- 44 több (I) általános képletű hatásos pregnán- vagy kolánvegyületet tartalmaz; a készítmény tartalmazhat, vagy nem tartalmaz ezeken kívül más, egy vagy több androsztán- vagy ösztrén szteroidot. Ezeken kívül a készítmények más orvosi anyagokat, gyógyszerészeti anyagokat, vivőanyagokat, segédanyagokat tartalmazhatnak.

Egy szemiokémiai ligandum közlésének legvalószínűbb eszköze (útja) a természetes út, a másik egyednek a bőrén lévő feromon inhalálása. Mivel ezek a vegyületek viszonylag kevéssé illékonyak, úgy gondoljuk, hogy még a legbensőségesebb érintkezés során is emberi egyed egy másik egyednek a bőréből legfeljebb pikogrammnyi mennyiségű, természetesen előforduló szteroidot lélegezhet be. A belélegzett menynyiséggel kapcsolatosan úgy értékeljük, hogy csupán körülbelül 1 % éri el a vomeronazális szer receptorait. Az adagolandó vomeroferin mennyisége természetesen a kezelendő egyéntől, a bántalom súlyosságától, az adagolás módjától, az adagolás gyakoriságától, és az orvos döntésétől függ. Legalább körülbelül 10 pikogramm egyszeri adagolással, közvetlenül a vomeronazális szer üregébe juttatva képes átmeneti autonóm válasz kiváltására. Ha az orrüregbe adagolunk, akkor a dózis körülbelül 100 pikogrammtól körülbelül 100 mikrogrammig, előnyösen körülbelül 1 nanogrammtól körülbelül 10 mikrogrammig, még előnyösebben körülbelül 10 nanogrammtól 1 mikrogrammig terjed. Az adagolás gyakorisága előnyösen az egy órányi (óránkénti) dózistól a havi dózisig, előnyösen a napi nyolcszori dózistól a minden másodnapon adagolt dózisig, még előnyösebben a naponta 1-3 al····

- 45 kálómmal alkalmazott dózisig terjed. Az egy vagy több hatásos vegyületet és adott esetben gyógyászati segédanyagokat valamilyen vivőanyagban - amilyen például a víz, a konyhasóoldat, vizes dextrózoldat, glicerin, etanol - tartalmazó kenőcsök valamilyen kenőcsalapanyag, például vazelin, zsír vagy lanolin alkalmazásával állíthatók elő.

Cseppfolyósított, gyógyászatilag adagolható készítményeket például úgy állíthatunk elő, hogy egy hatásos vegyületet - a fenti meghatározás szerint - és adott esetben gyógyszerészeti segédanyagokat valamilyen vivőanyagban, például vízben, konyhasóoldatban, vizes dextrózoldatban, glicerinben vagy etanolban oldunk vagy diszpergálunk, s így oldatot vagy szuszpenziót alakítunk ki. Kívánt esetben az adagolandó gyógyászati készítmény kisebb mennyiségben nem toxikus segédanyagokat, például nedvesítő-, emulgeáló-, pH -szabályzó szereket, például nátrium-acetátot, szorbitán-monolaurátot, dietanol-amin-nátrium-acetátot, trietanol-amin-oleátot is tartalmazhat. Az ilyen adagolási formák előállításának pontos módszerei ismertek, vagy a szakterületen jártas egyén számára nyilvánvalók; lásd például a következő helyen: Remington’s Pharmaceutical Sciences, Mack

Publishing Co., Easton, PA, 15. kiadás (1975). Az adagolandó készítmény vagy gyógyszerforma bármely esetben egy vagy több hatóanyag olyan mennyiségét tartalmazza, amely képes a kezelendő egyén tüneteinek enyhítésére (megszüntetésére).

Aeroszol adagolása céljából a hatásos komponenst előnyösen finoman elosztott formában, felületaktív anyaggal és • ·

- 46 hajtógázzal együtt juttatjuk ki (visszük fel). A hatásos komponensek általában 0,OO1-től 2 tömeg%-ig terjedő, előnyösen 0,004-0,10 tömeg% mennyiségben vannak jelen.

A felületaktív anyagoknak (nedvesítőszereknek) természetesen nemtoxikusaknak és előnyösen a hajtószerben oldhatónak kell lenniük. Az ilyen szerek reprezentatív képviselői a 6-22 szénatomos zsírsavak észterei vagy parciális észterei, például a kapronsav, oktánsav, laurinsav, palmitinsav, sztearinsav, linolénsav, olesztearinsav és olajsav alifás, többértékű alkohollal alkotott észterei vagy gyűrűs anhidridje, amely például etilénglikolból, glicerinből, eritritből, arabitból, mannitból származtatható; valamint a szorbitból származó hexit-anhidridek (a szorbitán-észtereket „Spans” néven hozzák forgalomba), valamint ezeknek az észtereknek a poli(oxi-etilén)- és poli(oxi-propilén)-származékai. Alkalmazhatók továbbá vegyes észterek, például a vegyes vagy természetes gliceridek is. Előnyös felületaktív szerek a szorbitán-oleátok, például az „Arlacel C” (szorbitán-szeszkvioleát), „Span 80” (szorbitán-monooleát) és „Span 85” (szorbitán-trioleát). A felületaktív szer mennyisége a készítmény tömegére vonatkoztatva 0,1 és 20 % között, előnyösen 0,25 és 5 % között lehet.

A készítmény fennmaradó része rendszerint hajtószer. A cseppfolyósított hajtószerek környezeti körülmények között általában gázok, amelyek nyomás alatt cseppfolyósodnak. Az alkalmas cseppfolyósított hajtógázok közé tartoznak a rövid szénláncú, legfeljebb 5 szénatomot tartalmazó alkánok, így a bután és propán; fluorozott vagy fluorozott-klórozott alkánok, • ·

- 47 így a „Freon” kereskedelmi néven forgalmazott hajtógáz. A fenti anyagok keverékei is használhatók.

Az aeroszol előállítása során egy megfelelő billentyűzárral ellátott tartóedényt (konténert) a megfelelő, finoman elosztott hatóanyagot (hatásos komponenst) és felületaktív szert tartalmazó megfelelő hajtószerrel megtöltünk. így a komponenseket magasabb nyomáson tartjuk, míg a billentyűzár működtetésével fel nem szabadulnak.

Az adagolásnak egy még további módja egy illékony, cseppfolyós készítmény felvitele a bőrre, előnyösen arcbőrre. A készítmény általában valamilyen alkoholt, például etanolt vagy izopronanolt tartalmaz. A készítménybe kellemes illatú szert is foglalhatunk.

F. Az indulat (emóció), hangulat és jellemvonás mérése

Az emóciókkal, hangulatokkal és jellemvonásokkal kapcsolatos érzelmi állapotokat általában kérdőív segítségével mérjük. így például egy egyénnek olyan kérdőíveket adhatunk, amelyek számos, az érzelmi állapotokra vonatkozó jelzőt tartalmaznak. Az egyén kiértékeli a jelző által leírt érzelmi állapotot, és egy számszerű skála szerint besorolja az érzelem erősségét. A rokon jelzők csoportosítása és az egyéni értékelés statisztikai elemzése minden egyes jelző vonatkozásában alapot szolgáltat a különböző érzelmi állapotok méréséhez.

Egy más módon az érzelmi állapotok autonóm idegrendszeri változásokkal, például olyan változásokkal is mérhetők, mint a poligráffal végezhető kiértékelések (galvánikus bőr• ·

- 48 válasz, pulzusszám és hasonló paraméterek) [M. Cabanac: Annual Review of Physiology 37. 415 (1975); J. D. Hardy: „A testhőmérséklet szabályzása” 59. fejezet, 1417. old. a következő helyen: Medical Physiology II. köt. VB Mountcastle (1980); W. Bouscein: „A bőr elektromos aktivitása” (Plenum Press 1992)]. Ezen túlmenően nem-verbális jelek, így az arckifejezés és testhelyzet is kiértékelhetők.

III. PÉLDÁK

Az alábbi példák célja a találmány szemléltetése, ami azonban nem jelent korlátozást.

A példák leírásában alkalmazott rövidítések a következők: DMF: Ν,Ν-dimetil-formamid, DMSO: dimetil-szulfoxid; THF: tetrahidrofurán; DKM diklór-metán.

Megjegyezzük, hogy a példák kivitelezésében alkalmazott petroléter forráspontja 50-70 °C .

1. példa

Pregna-4,20-dien-3a-(P)-ol [(1) képletű vegyület]

5,0 ml (5,0 mmól) 1 moláris (mólos) lítium-trisziamil-bórhidrid oldathoz argongáz alatt -78 °C hőmérsékleten keverés közben 1,10 g (3,70 mmól) pregna-4,20-dien-3-on és 14 ml száraz THF oldatát adjuk, majd a reakcióelegyet szobahőmérsékletre hagyjuk felmelegedni. Három óra elmúltával az elegyet -78 °C-ra hűtjük, és az alábbi sorrendben a következő reagenseket adjuk hozzá: 2 ml vizet, 6 ml etanolt,

- 49 10 ml 12 %-os vizes KOH oldatot és 50 ml 3 %-os hidrogén-peroxid oldatot. Az elegyet szobahőmérsékletre hagyjuk felmelegedni keverés közben. Két óra múlva 200 ml etil-acetátot adunk hozzá, és a keverést folytatjuk. A szerves fázist elkülönítjük, telített NaHSO₃ oldattal, telített NaHCO₃ oldattal, utána telített konyhasóoldattal mossuk, vízmentes nátrium-szulfáton szárítjuk, és vákuumban bepároljuk. Az így kapott 2,1 g nyers terméket „flash” (gyors) kromatográfiával 210 g szilikagélen (230-400 mesh finomságú) tisztítjuk, eluálószerként etil-acetátot tartalmazó diklór-metánt (DKM) használunk, amelynek koncentrációját növeljük (a kezdeti 5:95-ről a végső 7:93-ig), s így három frakciót kapunk. Az első frakció (tömege 0,8 g) szennyezett 3a-alkoholt tartalmaz. A 2. frakció (tömege 0,1 g) 3a- és 3p-alkohol keveréke. A 3. frakció (0,25 g) tiszta 3p-alkohol (hozama 23 %). Az 1. frakciót gyorskromatográfiával ismételten tisztítjuk 80 g szilikagélen (230-400 mesh), eluálószerként etil-acetátot tartalmazó hexánt alkalmazunk (10:90 aránnyal indulunk, s ezt 15:85re változtatjuk), s így 0,15 g tiszta 3a-alkoholt kapunk (a hozam 14 %).

2. példa

Pregna-3,5,20-trien-3-il-metil-éter [(2) képletű vegyület]

Az 1) szintézisvázlatban bemutaott (2), (3), (4) és (5) képletű vegyületeket az alábbiak szerint állítjuk elő.

1,00 g (3,35 mmól) (1_) képletű pregna-4,20-dien-3-on és 5,0 ml (41 mmól) 2,2-dimetoxi-propán, 5,0 ml DMF és 0,2 ml • ·

- 50 metanol elegyét 26,9 mg (0,141 mmól) katalitikus mennyiségű p-toluolszulfonsav-monohidrát jelenlétében 2 órán át visszafolyató hűtő alatt forraljuk. Lehűtés után 153,6 mg (1,828 mmól) nátrium-hidrogén-karbonátot adunk hozzá, és a reakcióeiegyet 75 ml hexán és 50 ml jég-víz elegy között megoszlatjuk. A szerves fázist kétszer 50 ml vízzel mossuk, egyszer mossuk 50 ml konyhasóoldattal, majd 17 mm magassággú, 30 mm átmérőjű szilikagéloszlopon szűrjük. A terméket 100 ml hexánnal tovább eluáljuk. Az egyesített eluátumokat bepároljuk, és a maradékot aceton-metanol elegyből átkristályosítjuk. így halványsárga, fénylő lemezkék alakjában 828,7 mg (2,652 mmól, 79 %) hozammal kapjuk a cím szerinti terméket, op.: 111-114 °C.

3. példa

Pregna-1,4,20-trien-3-on [(3) képletű vegyület]

1,19 g (3,99 mmól) (1) képletű pregna-4,20-dién-3-ont 40 ml benzolos oldatban argongáz alatt 2,72 g (12,1 mmól)

2,3-diklór-5,6-diciano-1,4-benzokinonnal (DDQ) 24 órán át visszafolyató hűtő alatt forraljuk, majd a szuszpenziót lehűtjük, éterrel hígítjuk, és kétszer 100 ml 5 tömeg%-os nátronlúgoldattal, utána kétszer 100 ml vízzel, majd 100 ml konyhasóoldattal mossuk. Az így kapott emulzióhoz 100 ml étert adunk, az elegyet nátrium-szulfáton szárítjuk, majd 20 g nátrium-szulfátból készült oszlopon át szűrjük. A maradékot kétszer 50 ml éterrel mossuk, az egyesített szűrleteket vákuumban bepároljuk, majd gyorskromatográfiával tisztítjuk • ·

- 51 (szorbensként szilikagélt, eluálószerként 25 % etil-acetátot tartalmazó hexánt használunk, s így 0,26 g (0,88 mmól, 22 %) hozammal kapjuk a cím szerinti terméket halványsárga, kristályos anyag formájában.

4. példa

Pregna-1,4,20-trien-3-ol [(4) képletű vegyület]

0,26 g (0,088 mmól) (3) képletű pregna-1,4,20-trien-3-ont 25 ml vízmentes éterrel készült oldatban argongáz alatt

250,5 mg (6,601 mmól) lítium-alumínium-hidriddel 2 órán át redukáljuk, majd az elegyet 2,50 g Glauber-sóval elbontjuk. Az így kapott szuszpenziót 70 percig keverjük, szűrjük, és kétszer 50 ml éterrel mossuk. Az egyesített szűrletet vákuumban bepároljuk, és a maradékot preparatív vékonyréteg-kromatográfiával (TLC) tisztítjuk. Szorbensként alumínium-oxidot, eluálószerként 35 % etil-acetátot tartalmazó hexánt alkalmazva a cím szerinti vegyületet fehér tűk alakjában 26,1 mg (87,4 pmól, 10 %) hozammal kapjuk, op.: 98-128 °C.

5. példa

Pregna-4,20-dien-6p-ol-3-on ((5j képletű vegyület]

763,4 mg (3,42 mmól) 77,4 %-os m-klór-perbenzoesavat (MCPBA) 30 ml 1,2-dimetoxi-etánban (DME) szuszpendálunk, és ezt a szuszpenziót, valamint 6 ml vizet, majd 2,4 ml 5 tömeg%-os nátronlúgoldatot adunk 400,3 mg (1,281 mmól) • « . - 52 (2J képletű pregna-3,5,20-trien-3-il-metil-éter, 20 ml DME és 2 ml víz oldatához 85 perc alatt keverés közben. A reakciót 5 órán át folytatjuk, majd a reakcióelegyet 50 ml telített nátrium-hidrogén-karbonát oldatba öntjük. Az elegyet háromszor 50 ml éterrel extraháljuk, és az egyesített szerves kivonatot előbb 50 g 5 tömeg%-os nátrium-tioszulfát-pentabidrát oldattal, háromszor 50 ml konyhasóoldattal mossuk, magnézium-szulfáton szárítjuk, és céliten átszűrjük. A maradékot 10 ml éterrel mossuk, majd az egyesített szűrletet vákuumban bepároljuk. A maradékot előbb gyorskromatográfiával (szilikagélen, 35 % etil-acetátot tartalmazó hexán eluálószerrel), majd preparatív TLC-vel (eluálószer 35 % etil-acetátot tartalmazó hexán, szilikagélen) tisztítjuk, s így 95,5 mg (0,304 mmól, 24 %) hozammal fehér kristályos anyagok nehezen szétválasztható keverékét kapjuk.

6. példa

20,21-Dimetil-pregna-5,20-dien-3p-ol [(6) képletű vegyület]

Amint a 2) szintézisvázlatban látható, a (6), (7j, (8) és (9) képletű vegyületeket a következőképpen állítjuk elő.

25,99 g ( 70,00 mmól) (etil-trifenil)-foszfónium-bromid, 7,86 g (70,0 mmól) kálium-terc-butanolát és 80 ml vízmentes DMSO keverékét argongáz alatt mintegy 80 °C hőmérsékletű olajfürdőben 1 órán át melegítjük keverés közben, majd 4,43 g (14,0 mmól) pregn-5-en-30-ol-2O-on és 80 ml meleg, vízmentes DMSO elegyét adjuk hozzá. A vörös szuszpenziót 1 órán át keverjük, majd a melegítést megszün• « < 9 9 9

- « · · · ··«» ·· ··*· * ·*

- 53 tétjük, és az elegyet 200 ml sójégre öntjük. A keveréket háromszor 100 ml éterrel extraháljuk, az egyesített szerves kivonatot 100 ml konyhasóoldattal mossuk, nátrium-szulfáton szárítjuk, és céliten szűrjük. A maradékot 50 ml éterrel mossuk, az egyesített szűrleteket vákuumban bepároljuk. A sárga maradékot 95 %-os etanolban melegítéssel felvesszük, rövid ideig 1 g aktívszénnel forraljuk, és céliten szűrjük. Hűtés és szűrés után a kapott terméket etanolból még kétszer átkristályosítva a cím szerinti vegyületet fehér kristályok alakjában 1,746 g (5,314 mmól, 38%) hozammal kapjuk, op.: 140-145 °C.

7. példa

20,21-Dimetil-pregna-4,20-dién-3,6-dion [(7) képletű vegyület]

460,1 mg (1,400 mmól) 20,21 -dimetil-pregna-5,20-dien-3β-οΙ [(6) képletű vegyület] és 50 ml aceton oldatához 2,0 ml 2,67 moláris Jones-reagenst (5,3 mmól) adunk, és a reakcióelegyet 45 percig keverjük, utána 1,0 ml izopropanollal elbontjuk, 100 ml vízbe öntjük, és háromszor 50 ml etil-acetáttal extraháljuk. Az egyesített szerves kivonatot 50 ml telített nátrium-hidrogén-karbonát-oldattal, majd 50 ml tömény konyhasóoldattal mossuk, magnézium-szulfáton szárítjuk, és céliten szűrjük. A csapadékot 25 ml etil-acetáttal mossuk, majd az egyesített szűrletet vákuumban bepároljuk. A maradékot gyorskromatográfiával tisztítjuk (szilikagéien, eluálószerként 25 % etil-acetátot tartalmazó hexán használatával), majd a kapott anyagot 95%-os etanolból átkristályosít- 54 juk. így 138,2 mg (0,4059 mmól, 29 %) hozammal kapjuk a cím szerinti vegyületet sárga, tűs kristályok alakjában, op.: 172-178 °C.

8. példa

20,21-Dimetil-pregna-4,20-dien-3-on [(8) képletű vegyület]

400,3 mg (1,218 mmól) 20,21-dimetil-pregna-5,20-dien-3β-οΙ [(6) képletű vegyület] és 5 ml DKM oldatát 525,4 mg (2,437 mmól) piridínium-klór-kromáttal 42 órán át oxidáljuk. Ezután 3,5 ml étert adunk hozzá, és a kapott szuszpenziót 60 mm magasságú, 5 mm átmérőjű szilikagéloszlopon szűrjük. Az oszlop eluálását 3,5 ml éterrel folytatjuk, és az egyesített szűrletet vákuumban bepároljuk. Gyorskromatográfiás tisztítás után a kapott terméket víztartalmú etanolból átkristályosítva 43,6 mg (0,134 mmól, 11 %) hozammal kapjuk a cím szerinti vegyületet sárga kristályok alakjában, op.: 157-165 °C.

9. példa

Pregna-4,20-dién-3,6-dion [(9) képletű vegyület]

300,5 mg (1,000 mmól) pregna-5,20-dien-3p-ol és 35 ml aceton oldatát jégvízfürdőben hűtjük, és 0,71 ml (1,9 mmól)

2,67 moláris Jones-reagenst adunk hozzá. Az elegyet 90 percig keverjük, ekkor még 0,71 ml Jones-reagenst adunk hozzá, és a reakciót 45 percig folytatjuk. Ekkor 1,0 ml izopropanolt teszünk hozzá, és az elegyet 100 ml vízbe • ·

- 55 öntjük. Ezt követően az elegyet kétszer 50 ml etil-acetáttal extraháljuk, és az egyesített szerves oldatot sorrendben 50 ml telített nátrium-hidrogén-karbonát oldattal, utána 50 ml vízzel, végül 50 ml tömény sóoldattal mossuk, majd 22 mm magasságú, 21 mm átmérőjű szilikagél 60 oszlopon szűrjük. Az oszlop eluálását 25 ml etil-acetáttal folytatjuk, és az egyesített szűrleteket vákuumban bepároljuk. A bepárlási maradékot 95 %-os etanolból átkristályosítva 104,6 mg (0,3348 mmól, 33 %) hozammal jutunk a cím szerinti vegyülethez, halványságra por alakjában, op.: 114-120 °C.

10. példa

Pregna-5,17,20-trien-3p-ol f(10) képletű vegyület]

106,5 mg (2 mmól) lítium-alumínium-hidrid és 122,9 mg (0,9220 mmól) alumínium-klorid 10 ml száraz THF-nal készült szuszpenziójához argongáz alatt 439,4 mg (1,397 mmól) 17a-etinil-androszténdiol 10 ml száraz THF-nal készült oldatát adjuk. A reakcióelegyet 17 órán át visszafolyató hűtő alatt forraljuk, majd 2 órán át 1,00 g (3,10 mmól) nátrium-szulfát-dekahidráttal keverve elbontjuk. A reakcióelegyet szűrjük, és a maradékot 10 ml-es részletekben THF-nal háromszor mossuk. A szűrleteket egyesítjük, és vákuumban bepároljuk. Az így kapott 0,44 g fehér, szilárd terméket gyorskromatográfiáva, tisztítjuk (ezt szilikagélen, eluálószerként 30 % etil-acetátot tartalmazó hexánnal végezzük), majd a kapott terméket víztartalmú etanolból kétszer átkris• · · · • ·

- 56 tályosítjuk. így 92,0 mg (0,303 mmól, 22 %) hozammal kapjuk a cím szerinti vegyületet fénylő, fehér kristályok alakjában, op.: 144-149 °C.

11. példa

5a-Klór-6p,19-epoxi-5-pregn-17-en-3p-ol f(11) képletű vegyület]

Amint a 3) szintézisvázlat szemlélteti, a (11). (12). (13) és (J4) képletű vegyületeket a következőképpen állítjuk elő.

3,0 g (8,22 mmól) (etil-trifenil)-foszfónium-bromid, 0,92 g (8,2 mól) kálium-terc-butanolát és 9,2 ml vízmentes DMSO keverékét argongáz alatt 1 órán át 76-86 °C hőmérsékletű fürdőben reagáltatjuk, majd 555,9 mg (1,640 mmól) 5ot-klór-6β, 19-epoxi-androsztán-3p-ol-17-on 9,2 ml meleg, vízmentes DMSO-val készült oldatát adjuk hozzá, és a reakcióelegyet további 1 órán át keverjük. Utána a reakcióelegyet 25 ml jég-konyhasóoldat elegyébe öntjük, és háromszor 10 ml éterrel extraháljuk. Az egyesített szerves kivonatot tömény sóoldattal mossuk, magnézium-szulfáton szárítjuk, és céliten szűrjük. A maradékot 5 m, éterrel kétszer mossuk, és az egyesített szűrletet vákuumban beszárítjuk. A sárga, olajszerű maradékot gyorskromatográfiával tisztítjuk (szilikagélen, eluálószerként 60 % etil-acetátot tartalmazó hexán alkalmazásával), s így 0,34 g (0,97 mmól, 59 %) hozammal fehér, szirupos szilárd terméket kapunk.

- 57 12. példa

5α-ΚΙ0Γ-6β,19-epoxi-pregn-17-en-3-on f(12) képletű vegyület]

0,34 g (0,97 mmól) f 11) képletű 5a-klór-6p, 19-epoxi-pregn-17-en-3p-ol és 35 ml aceton oldatát jég-aceton fürdőben hűtjük, és 0,47 ml 2,67 moláris Jones-reagenst adunk hozzá. 40 perces keverés után a reakcióelegyet 0,5 ml izopropanol hozzáadásával elbontjuk, majd 15 ml vizet adunk hozzá, az illékony komponenseket vákuumban eltávolítjuk, és a maradékot háromszor 15 ml DKM-nal extraháljuk. Az egyesített szerves kivonatot 15 ml telített nátrium-hidrogén-karbonát oldattal és 15 ml tömény sóoldattal mossuk, magnézium-szulfáton szárítjuk, és céliten szűrjük. A maradékot kétszer 5 ml DKM-nal mossuk, és az egyesített szűrleteket vákuumban beszárítjuk. Az így kapott maradékot szilikagélen gyorskromatográfiával tisztítjuk, eluálószerként 30 % etil-acetátot tartalmazó hexánt használunk, s így 0,34 g (0,97 mmól, kvantitatív) hozammal kapjuk a cím szerinti terméket fehér, kristályos formában.

13. példa

6β, 19-Epoxi-pregna-4,17-dien-3-on

Í(13) képletű vegyület]

0,34 g (0,97 mmól) (12) képletű 5a-klór-6p, 19-epoxi-pregn-17-en-3-ont melegítéssel oldunk 10 ml vízmentes metanolban, 0,60 g (6,1 mmól) kálium-acetátot adunk hozzá, és környezeti nyomáson 6,5 ml oldószert ledesztillálunk. A ma• ·

- 58 radékot vákuumban bepároljuk, 25 ml vízben felvesszük, és háromszor 10 ml DKM-nal extraháljuk. Az egyesített szerves kivonatot magnézium-szulfáton szárítjuk, és céliten szűrjük. A maradékot 10 ml DKM-nal mossuk, és az egyesített szűrleteket vákuumban bepároljuk. így 290,0 mg (0,9281 mmól, 96 %) hozammal fehér, kristályos, szilárd terméket kapunk, amely vékonyréteg-kromatográfiával (VRK) vizsgálva (szilikagélen, 60 % etil-acetátot tartalmazó hexán, mint eluálószer alkalmazásával), homogén, R_f értéke 0,61.

14. példa

Pregna-4,17-dien-19-ol-3-on f( 14) képletű vegyület]

290,0 mg (0,9281 mmól) 6β, 19-epoxi-pregna-4,17-dien-3-on és 10 ml jégecet oldatához 1,12 g (17,1 mmól) cinkport adunk (amelyet előzőleg 10 %-os sósavoldattal 2 percig keverve, majd szűrés után vízzel és acetonnal mosva aktiválunk). Az így kapott szuszpenziót 10 percig 99-102 °C-os hőmérsékleten tartjuk erélyes keverés közben, majd céliten szűrjük. A maradékot négyszer 10 ml ecetsavval mossuk, és az egyesített szűrletet vákuumban bepároljuk. A maradékot 50 ml etil-acetátban felvesszük, 50 ml vízzel, utána 50 ml telített nátrium-hidrogén-karbonát oldattal, végül 50 ml tömény sóoldattal mossuk, magnézium-szulfáton szárítjuk, és céliten át szűrjük. A maradékot 10 ml etil-acetáttal mossuk, a szűrleteket egyesítjük, vákuumban beszárítjuk. A maradékot etil-acetátból átkristályosítva fehér, kristályos, cím sze• ·

- 59 rinti terméket kapunk, 46,4 mg (0,148 mmól, 16 %) hozammal, op.: 192-195 °C.

15. példa

Pregn-4-en-3p-ol-20-in [(15.) képletű vegyület]

200,1 mg (0,6750 mmól) pregna-4-en-3-on-20-int és

343,8 mg (1,352 mmól) lítium-alumínium-tri(terc-butoxi)-hidridet 3,6 ml vízmentes éterben szuszpendálunk. Az elegyet 4 órán át reagáltatjuk, ekkor további 343,5 mg (1,351 mmól) hidridet adunk hozzá, és a reakciót még 16 órán át folytatjuk (lásd a 4) szintézisvázlatot). A reakcióelegyet 3,41 g nátrium-szulfát-dekahidráttal elbontjuk, 15 percig keverjük, majd kovaföldön szűrjük. A maradékot ötször 10 ml éterrel extraháljuk, és az egyesített szűrletet vákuumban bepároljuk. Az így kapott maradékot gyorskromatográfiával tisztítjuk (szilikagélen, eluálószerként 25 % etil-acetátot tartalmazó hexán alkalmazásával), és az így kapott terméket víztartalmú etanolból átkristályosítjuk. így 85,0 mg (0,285 mmól, 42 %) cím szerinti vegyületet kapunk fehér por alakjában, op.: 120,5-123,5 °C.

16. példa

20,21 - Dimetil-pregna-4,20E-dien-3,6-dion [(1_6) képletű vegyület]

400,0 mg (1,281 mmól) 20,21 -dimetil-pregna-5,20E-diβη-3β-οΙ és 45 ml aceton oldatához 1,75 ml (4,67 mmól) 2,67

- 60 moláris Jones-reagenst adunk, és a reakcióelegyet 30 percig keverjük, majd 85 ml vízbe öntjük, és háromszor 40 ml etil-acetáttal extraháljuk. Az egyesített szerves kivonatot előbb 40 ml telített nátrium-hidrogén-karbonát oldattal, majd utána 40 ml tömény sóoldattal mossuk, magnézium-szulfáton szárítjuk, és diatomaföldön szűrjük. A maradékot 10 ml etil-acetáttal mossuk, a szűrleteket egyesítjük, és vákuumban bepároljuk. A maradékot előbb gyorskromatográfiával tisztítjuk (szilikagélen, eluálószerként 20 % etil-acetátot tartalmazó hexán alkalmazásával), s az így kapott terméket víztartalmú etanolból átkristályosítjuk. így 119,1 mg (0,3497 mmól, 22 %) hozammal kapjuk a terméket halványsárga, tűs kristályok alakjában, op.: 171-173 °C. VRK elemzés (szilikagélen, 20 % etil-acetátot tartalmazó hexán alkalmazásával) azt mutatja, hogy a termék egy túlnyomó mennyiségű komponenst - amelynek R_f értéke 0,17, és egy kisebb mennyiségű szenynyezést, amelynek R_f értéke 0,24 - tartalmaz.

17. példa

20-Metil-pregna-4,20-dién-3,6-dion f(17) képletű vegyület]

400,0 mg (1,272 mmól) 20-metil-pregna-5,20-dien-30-ol és 45 ml aceton oldatához 1,83 ml (4,89 mmól) 2,67 moláris Jones-reagenst adunk, és a reakcióelegyet 20 percig keverjük, majd 0,91 ml izopropanollal elbontjuk, és az elegyet 85 ml vízbe öntjük. Az így kapott keveréket háromszor 40 ml etil-acetáttal extraháljuk. Az egyesített szerves kivonatot előbb • ·

- 61 40 ml telített nátrium-hidrogén-karbonát oldattal, majd 40 ml tömény sóoldattal mossuk, magnézium-szulfáttal szárítjuk, és diatomaföldön szűrjük. A maradékot 25 ml etil-acetáttal mossuk, és az egyesített szűrletet vákuumban bepároljuk. Az így kapott szilárd maradékot víztartalmú etanolból átkristályosítva 235,0 mg (0,7298 mmól, 57 %) cím szerinti terméket kapunk sárga kristályok alakjában, op.: 148-150 °C. VRK elemzés (szilikagélen, 20 % etil-acetátot tartalmazó hexán alkalmazásával) azt mutatja, hogy ez a termék túlnyomó mennyiségben olyan anyagot tartalmaz, amelynek R, értéke 0,24; továbbá egy csekély mennyiségű szennyezést, amely a startponton marad.

18. példa

Pregna-4,16-dién-3,6-dion [(1_8) képletű vegyület]

45,5 mg (0,151 mmól) pregna-5,16-dien-3p-ol és 5 ml aceton oldatához 0,23 ml (0,61 mmól) 2,67 moláris Jones-reagenst adunk, és az elegyet 20 percig keverjük, utána 0,11 ml izopropanollal elbontjuk, 10 ml vizet adunk hozzá, és a keveréket háromszor 5 ml etil-acetáttal extraháljuk. Az egyesített szerves kivonatot előbb 5 ml telített nátrium-hidrogén-karbonát oldattal, majd 5 ml tömény konyhasóoldattal mossuk, magnézium-szulfáton szárítjuk, és diatomaföldön szűrjük. A maradékot 5 ml etil-acetáttal mossuk, és az egyesített szűrletet vákuumban bepároljuk. Az így kapott lepárlási maradékot preparatív VRK-val dolgozzuk fel (ehhez szilikagélt

- 62 és eluálószerként 25 % etil-acetátot tartalmazó hexánt használunk), s így 10,6 mg (33,9 pmól, 22 %) terméket kapunk halványsárga, szilárd formában, amely VRK vizsgálat alapján egységes: R_f-értéke 0,41 (szilikagélen, 25 % etil-acetátot tartalmazó hexán, mint eluálószer alkalmazásával), míg a kiinduló anyag R_f értéke 0,30.

19. példa

Pregna-4,17,20-trién-3,6-dion f(19) képletű vegyület]

214,5 mg (0,7187 mmól) pregna-5,17,20-trien-3p-ol és 25 ml aceton oldatához 1,03 ml (2,75 mmól) 2,67 moláris Jones-reagenst adunk, és a reakcióelegyet 20 percig keverjük, utána 0,52 ml izopropanollal elbontjuk. A reakcióelegyet 50 ml vízre öntjük, és háromszor 25 ml etil-acetáttal extraháljuk. Az egyesített szerves kivonatot 25 ml telített nátrium-hidrogén-karbonát oldattal, utána 25 ml tömény sóoldattal mossuk, magnézium-szulfáton szárítjuk, és diatomaföldön szűrjük. A maradékot 10 ml etil-acetáttal mossuk, és az egyesített szűrletet vákuumban bepároljuk. A maradékot aktívszénnel kezelve víztartalmú etanolból átkristályosítjuk, s így 67,7 mg (0,218 mmól, 30 %) hozammal halványsárga tűk alakjában kapjuk a cím szerinti vegyületet, op.: 140-143 °C. E termék VRK elemzése (szilikagélen, eluálószerként 25 % etil-acetátot tartalmazó hexán alkalmazásával) azt mutatja, hogy R,-értéke 0,43, és csekély szennyezéseket tartalmaz, amelyek R_f értéke 0,86, 0,14, 0,08, illetve 0,00 (a pregna-5,17-dien-3p-ol R_f-értéke 0,32).

• · · ·

- 63 20. példa

21-Metilén-20(R)-metil-pregn-4-en-3-on f(20) képletű vegyület]

208,2 mg (0,6337 mmól) 21-metilén-20(R)-metil-pregn-5-βη-3β-οΙ, 3,6 ml (35 mmól) ciklohexanon és 18 ml toluol oldatához 3,6 ml forró toluolban oldott 0,39 g (1,9 mmól) alumínium-izopropanolátot adunk, és az elegyet nedvesség kizárásával 2 órán át visszafolyató hűtő alatt forraljuk. Ekkor jégbe hűtjük, 0,92 ml vizet, 2,2 ml 3,6 N kénsavoldatot adunk hozzá, és az elegyet 1 percig rázzuk. Utána 4,6 ml vizet adunk hozzá, 5 percig rázzuk, és a vizes fázist elvetjük. Az illékony komponenseket azeotrópos és vízgőzdesztillációval eltávolítjuk, és a visszamaradó vizes szuszpenziót háromszor 5 ml DKM-nal extraháljuk. Az egyesített szerves kivonatot egy Pasteur-pipettába helyezett, diatomaföldágyon nyugvó nátrium-szulfát rövid oszlopán szűrjük. A maradékot 5 ml DKM-nal mossuk, a szűrleteket egyesítjük, vákuumban bepároljuk. A filmszerű maradékot átkristályosítva a cím szerinti terméket 152,7 mg (0,4677 mmól, 74 %) hozammal fehér kristályok alakjában kapjuk, op.: 138-139 °C. A VRK elemzés szerint (szilikagélen, 25 % etil-acetátot tartalmazó hexán alkalmazásával) az anyag egy túlnyomó menynyiségű terméket tartalmaz, amelynek R_f-értéke 0,54; továbbá nyomnyi mennyiségben szennyezést tartalmaz, amelynek Rfértéke 0,71 (a kiinduló anyag R_rértéke 0,36).

- 64 21. példa

21-Metilén-20(R)-metil-pregn-4-en-3p-ol [(2JL) képletű vegyület]

100,0 mg (0,3063 mmól) (20) képletű 21-metilén-20(R)-metil-pregn-4-én-3-on és 319,4 mg (1,256 mmól) lítium-tri(terc-butoxi)-alumínium-hidrid 5 ml vízmentes THF-nal készült szuszpenzióját argongáz alatt 6 órán át keverjük, majd 48 pl vizet, 48 pl 15 tömeg%-os nátrium-hidroxid oldatot, utána 143 pl vizet adunk hozzá. Az elegyet diatomaföldön szűrjük és a maradékot négyszer 5 ml THF-nal extraháljuk. Az egyesített szűrletet vákuumban bepároljuk, és a lepárlási maradékot víztartalmú etanolból kétszer átkristályosítjuk. így

42,6 mg (0,130 mmól, 42 %) hozammal kapjuk a cím szerinti vegyületet fehér lemezes kristályok alakjában, op.: 121-123 °C. VRK elemzés (szilikagélen, 25 % etil-acetátot tartalmazó hexán alkalmazásával) azt mutatja, hogy a termék egy túlnyomó mennyiségű komponensből - amelynek R_f-értéke 0,38 - és egy csekély mennyiségű minor termékből áll, amelynek R_f-értéke 0,43 (a kiinduló anyag R_{-értéke 0,50).

22. példa

21-Metilén-20(R)-metil-pregn-4-én-3,6-dion f(22) képletű vegyület]

149,8 mg (0,4560 mmól) 21 -metilén-20(R)-metil-pregn-5-βη-3β-οΙ és 15 ml aceton elegyéhez 0,68 ml (1,8 mmól)

2,67 moláris Jones-reagenst adunk, és a reakcióelegyet 20 percig keverjük, majd 0,34 ml izopropanollal elbontjuk. A ke- 65 verőket 30 ml vízbe öntjük, és háromszor 15 ml etil-acetáttal extraháljuk. Az egyesített szerves kivonatot előbb 15 ml telített nátrium-hidrogén-karbonát-oldattal, majd 15 ml tömény sóoldattal mossuk, magnézium-szulfáton szárítjuk, és diatomaföldön szűrjük. A maradékot 10 ml etil-acetáttal mossuk, és az egyesített szűrletet vákuumban bepároljuk. A bepárlási maradékot preparatív VRK módszerrel dolgozzuk fel (ehhez szilikagél GF szorbenst alkalmazunk, szemcsemérete 1000 μ, eluálószerként 25 % etil-acetátot tartalmazó hexánt használunk), s így 49,7 mg (0,146 mmól, 32 %) hozammal kapjuk a cím szerinti terméket, amely VRK elemzés alapján homogén (R,-értéke 0,47, 25 % etil-acetátot tartalmazó hexánnal, mint eluálószerrel; a kiinduló anyag R_f-értéke 0,35).

23. példa

Pregn-4-en-3p-ol-20-in f(23) képletű vegyület]

200,1 mg (0,6750 mmól) pregn-4-en-3-on-20-in és 3,6 ml vízmentes éter szuszpenziójához 343,8 mg (1,352 mmól) lítium-tri(terc-butoxi)-alumímium-hidridet adunk, és az elegyet 4 órán át keverjük. Ekkor még 343,5 mg (1,351 mmól) hidridet adunk hozzá, és a reakcióelegyet 16 órán át tovább keverjük; ekkor 3,41 mg Glauber-sót teszünk hozzá, és a szuszpenziót 15 percig keverjük, majd diatomaföldön szűrjük, és a maradékot ötször 10 ml éterrel extraháljuk. Az egyesített szűrletet vákuumban bepároljuk, a maradékot gyorskromatográfiával tisztítjuk (szilikagélen, 25 % etil• ·

- 66 -acetátot tartalmazó hexán alkalmazásával), és a kapott terméket víztartalmú etanolból átkristályosítjuk. így fehér por alakjában 85,0 mg (0,285 mmól, 42 %) cím szerinti vegyületet kapunk, op.; 120,5-123,5 °C. A VRK elemzés szerint (szilikagélen, 25 % etil-acetátot tartalmazó hexán alkalmazásával) e termék R_f-értéke 0,23; nyomokban tartalmaz szennyezést, amely R_f-értéke alapján (0,29) kiinduló anyag.

24. példa

Pregn-4,16-dien-6p-ol-3-on-20-in f(24) képletű vegyület]

471,0 mg (1,527 mmól) pregna-3,5,16-trien-20-in-3-il-metil-éter és 9,4 ml 1,2-dimetoxi-etán szuszpenziójához 290,0 mg (1,680 mmól) 3-klór-perbenzoesav, 9,4 ml 1,2-dimetoxi-etán és 3,6 ml víz keverékét adjuk, és a reakcióelegyet 30 percig keverjük, majd az elegyet 50 ml telített nátrium-hidrogén-karbonátba öntjük, és háromszor 50 ml etil-acetáttal extraháljuk. Az egyesített szerves kivonatot 50 g 5 tömeg%-os nátrium-tioszulfát-pentahidrát oldattal, utána háromszor 50 ml tömény sóoldattal mossuk, magnézium-szulfáton szárítjuk, és diatomaföldön szűrjük. A maradékot 25 ml etil-acetáttal mossuk, a szűrleteket egyesítjük, és vákuumban bepároljuk. A bepárlási maradékot eló'bb gyorskromatográfiával tisztítjuk (szilikagélen; 50 % etil-acetát és 50 % hexán keverékével eluálunk), majd a kapott terméket víztartalmú etanolból átkristályosítjuk. így 145,9 mg (0,4700 mmól, 31 %) hozammal kapjuk a cím szerinti terméket halványsárga, szilárd alakban, op.: 300 °C felett.

• · · · · · • * fc · ·

- 67 25. példa

Kola-5,16,20(22)ίπβη-3β-οΙ f(25) képletű vegyület]

12,13 g (31,48 mmól) propil-trifenil-foszfónium-bromid,

3,54 g (31,5 mmól) kálium-terc-butanolát és 35 ml vízmentes DMSO szuszpenzióját argonatmoszférában tartva 72-87 °C hőmérsékletű olajfürdőbe helyezzük, és 1 órán át keverjük. Ekkor 1,9807 g (6,298 mmól) pregna-5,16-dien-3p-ol-20-on 35 ml meleg, vízmentes DMSO-val készült keverékét adjuk hozzá, és a reakcióelegyet 90 percig keverjük, majd az elegyet 90 ml jég-konyhasóoldat keverékébe öntjük, és háromszor 45 ml éterrel extraháljuk. Az egyesített szerves kivonatot 45 ml tömény sóoldattal mossuk, nátrium-szulfáton szárítjuk, szűrjük. A maradékot 10 ml éterrel mossuk, a szűrleteket egyesítjük és vákuumban bepároljuk. Az olajszerű maradékot gyorskromatográfiával tisztítjuk (szilikagélen, 20 % etil-acetátot tartalmazó hexán használatával), így 103,6 mg (0,3042 mmól, 4,8 %) cím szerinti terméket kapunk ámbraszínű gyanta alakjában.

26. példa

Kola-4,20(22)E-dién-4,6-dion

1(26) képletű vegyület]

300,0 mg (0,8758 mmól) kola-5,20(22)E-dien-33-ol és 30 ml aceton keverékéhez 1,26 ml (3,36 mmól) 2,67 moláris Jones-reagenst adunk, és a reakcióelegyet 20 percig keverjük, majd 0,63 ml izopropanollal elbontjuk, és a keveréket 60 • · • · • · · fc · · • · · · ·· ···· · ··

- 68 ml vízbe öntjük, majd háromszor 50 ml etil-acetáttal extraháljuk. Az egyesített szerves kivonatot 30 ml telített nátrium-hidrogén-karbonát oldattal és 30 ml tömény konyhasóoldattal mossuk, magnézium-szulfáton szárítjuk, és diatomaföldön szűrjük. A maradékot 10 ml etil-acetáttal mossuk, és az egyesített szűrletet vákuumban bepároljuk. A maradékot víztartalmú etanolból átkristályosítva 139,3 mg (0,3929 mmól, 45 %) sárga, szilárd terméket kapunk, op.: 109-116 °C. A VRK elemzés szerint (szilikagélen, 25 % etil-acetátot tartalmazó hexán használatával) ez az anyag tartalmaz egy túlnyomó mennyiségű terméket, melynek R_f-értéke 0,45; valamint szennyezéseket, amelyek R,-értéke 0,24, 0,1, illetve 0,08 [a kola-4,20(22)E-dien-3-on R_f-értéke 0,49],

27. példa

Kola-4,20(22)E-dien-3-on

1(27) képletű vegyület]

1,5777 g (4,605 mmól) kola-5,20(22)E-dien-3p-ol, 26 ml (0,25 mól) ciklohexanon és 130 ml toluol keverékéhez 26 ml forró toluolban 2,82 g (13,8 mmól) alumínium-izopropanolátot adunk, majd a reakcióelegyet nedvesség kizárásával 4 órán át visszafolyató hűtő alatt forraljuk. Lehűlés után 6,7 ml vizet és 16 ml 6,3 N kénsavoldatot adunk hozzá, és a keveréket 1 percig rázzuk. Ekkor még 32 ml vizet adunk hozzá, 5 percig rázzuk, utána a vizes réteget elvetjük. Az illékony komponenseket azeotrópos és vízgőzdesztillálással eltávolítjuk, és a visszamaradó vizes szuszpenziót háromszor 20 ml DKM-nal extraháljuk. Az egyesített szerves ki· ·*»· «« ·ν» * · · * · * · * υ · · • · · · ··»· • «•η · ··»· · ·«

- 69 vonatot magnézium-szulfáton szárítjuk, és diatomaföldön szűrjük. A maradékot 10 ml DKM-nal mossuk, a szűrleteket egyesítjük, és vákuumban bepároljuk. A maradékot aktívszén alkalmazásával víztartalmú etanolból átkristályosítjuk, így halványsárga kristályok alakjában 1,3317 g (3,1904 mmól, 85 %) cím szerinti vegyületet kapunk, op.: 133-135 °C. VRK elemzés szerint (szilikagélen, 25 % etil-acetátot tartalmazó hexán használatával) ez a termék egységes, R_f-értéke 0,49; a kiinduló anyag R_rértéke 0,31.

28. példa

Kola-4,20(22)E-dien-3p-ol f(28) képletű vegyület]

400,0 mg (1,175 mmól) kola-4,20(22)E-dien-3-on, 1,2250 g (4,8158 mmól) lítium-tri(terc-butoxi)-alumínium-hidrid és 15 ml vízmentes éter szuszpenzióját argongázzal védve 8 órán át keverjük, utána 6,07 g Glauber-sót adunk hozzá, az elegyet 5 percig keverjük, majd diatomaföldön szűrjük. A maradékot ötször 15 ml éterrel extraháljuk, és egyesítés után a szűrletet vákuumban bepároljuk. A maradékot preparatív VRK-val dolgozzuk fel (szilikagélen, amelynek szemcsemérete 1000 μ, 5 % etil-acetátot tartalmazó DKM, mint eluens használatával), s így 49,9 mg (0,146 mmól, 12 %) hozammal halványsárga, szilárd terméket kapunk, amely VRK-elemzés alapján homogén (szilikagélen, 5 % etil-acetátot tartalmazó DKM használatával), R_f-értéke 0,34; a pregna-5,20-dien-3p-ol R_f-értéke 0,26.

» ·* «··· ..

* *» · « • * * , * « · · **·· Ί··¹! ·· ···· ♦ ··

- 70 29. példa

Kola-3,5,20(22) E-trien-3-i l-metil-éter [(29) képletű vegyület]

808,6 mg (2,374 mmól) kola-4,20(22)E-dien-3-on, 3,1 ml (25 mmól) 2,2-dimetoxi-propán, 3,1 ml DMF, 0,13 ml metanol és 28,0 mg (0,147 mmól) p-toluolszulfonsav-monohidrát keverékét nedvesség kizárásával 4 órán át visszafolyató hűtő alatt forraljuk. Lehűlés után 0,17 g nátrium-hidrogén-karbonátot adunk hozzá, és a keveréket 30 ml víz és 50 ml éter között megoszlatjuk. A szerves fázist 30 ml tömény sóoldattal mossuk, magnézium-szulfáton szárítjuk, és diatomaföldön szűrjük. A maradékot 10 ml éterrel mossuk, a szűrleteket egyesítjük, és vákuumban bepároljuk. A szilárd maradékot acetonból átkristályosítva 453,8 mg (1,280 mmól, 54 %) halványsárga, szilárd, cím szerinti terméket kapunk, op.: 94-96 °C. A VRK elemzés szerint (szilikagéien, 10 % etil-acetátot tartalmazó hexán használatával) a termék R_f-értéke 0,62, nyomokban kiinduló anyagot tartalmaz, amelynek R_f-értéke 0,14).

30. példa

Kola-4,20(22 )Ε-όϊβη-6β-οΙ-3-οη

Γ(30) képletű vegyület]

Kola-3,5,20(22)E-trien-3-il-metil-éter és 5,9 ml 1,2-dimetoxi-etán keverékébe 2,5 perc alatt 183,0 mg (1,060 mmól)

3-klór-perbenzoesav, 5,9 ml 1,2-dimetoxi-etán és 2,3 ml víz keverékét adjuk. A reakcióelegyet 30 percig keverjük, majd 30 ml telített nátrium-hidrogén-karbonát oldatba öntjük, és

- 71 háromszor 30 ml etil-acetáttal extraháljuk. Az egyesített szerves kivonatot 30 g 5 tömeg%-os nátrium-tioszulfát-pentahidráttal, majd háromszor 30 ml tömény sóoldattal mossuk, magnézium-szulfáton szárítjuk, és diatomaföldön szűrjük. A maradékot 10 ml etil-acetáttal mossuk, a szűrleteket egyesítjük, és vákuumban bepároljuk. Az így kapott szilárd terméket előbb gyorskromatográfiával dolgozzuk fel (szilikagélen, 60 % etil-acetát és 40 % hexán elegyének az alkalmazásával), majd preparatív VRK szerint kezeljük (szilikagélen, amelynek szemcsemérete 1000 μ; 50 % etil-acetát és 50 % hexán keverékével, mint eluálószerrel). így 114,3 mg (0,3206 mól, 33 %) fehér, kristályos anyagot kapunk, amely a VRK elemzés szerint (szilikagélen, 50 % etil-acetát és 50 % hexán elegyének a használatával) két komponensből áll; a túlnyomó mennyiségű komponens R_f-értéke 0,48, a kis mennyiségű komponensé 0,41, a kola-4,20(22)E-dien-3-on R_f-értéke 0,74.

31. példa

A VNO stimulálásával kiváltott autonóm (idegrendszeri) válaszok mérése nőnek és 24 férfinek a 32. példában leírt módon az alábbi anyagokat adagoltuk, és megfigyeltük (monitoroztuk) a különböző paramétereket, (jelölések az I., illetve II. tábla szerint)

A1-P3: pregna-4,16-dien-3-on

A2-P3: pregna-5,16-dien-3p-ol

A8-P1: 3-metoxi-pregna-3,5,20-trién • · • · • · · · · · • ··· · « · * ···· · · ···· · ··

- 72 Α6-Ρ1:

Α14-Ρ2

Α7-Ρ2:

Α13-Ρ1

Α11-Ρ1

Α1-Ρ1:

Α2-Ρ1:

Α4-Ρ1:

Α3-Ρ1:

Α1-Ρ4:

Α2-Ρ4:

pregna-4,20-dién-3,6-clion

20,21 -dimetil-pregna-5,20-dien-3p-ol

20,21-dimetil-pregna-5,20-dien-on 6p,19-epoxi-pregna-4,17-dien-3-on

19-hidroxi-pregna-4,17(20)-dien-3-on pregna-4,20-dien-6p-ol-3-on pregna-1,4,20-trien-3-on pregna-4,20-dien-3-on pregna-5,20-dien-3p-ol pregna-4,20-dien-3p-ol pregna-4,20-dion-3p-ol pregn-4-en-3-on pregn-5-en-3p-ol

Kontrollként propiIéngIikölt is adagoltunk. A propilénglikollal, mint kontrollal összehasonlítva a vizsgálati vegyületek szignifikáns változást idéznek elő: a VNO-ban az integrált receptorpotenciálban; a galvanikus (elektromos) bőrválaszban („galvanic skin response”, GSR), a bőrhőmérséklet (ST), az elektroenkefalogrammal (EEG) mért kortikális alfa-hullám aktivitás százalékos értékében; az elektrokardiogrammban (EKG); valamint a légzésszámban (RF). Eredményeinket a 2.-58. ábrákban mutatjuk be. Más pregnánszármazékokon további teszteket végeztünk, ezek eredményeit az 59.-84. ábrákban szemléltetjük. A kolánszármazékokkal végzett tesztek eredményei a 85.-96. ábrákban láthatók.

• · ···· · · ···· ·

- 73 32. példa

Elektrofiziológiai vizsgálatok

Az alábbi elektrofiziológiai vizsgálatokat klinikailag normális, mindkét nemhez tartozó, önkéntes embereken hajtottuk végre, akiknek kora 20 és 45 év között változott. Érzéstelenítőszert nem használtunk, és terhes nőket nem vettünk fel a vizsgálatokba.

Stimuláló és regisztráló rendszerünk egy „többfunkciós miniszondából” állt, amelyet másutt közöltek [L. Monti-Bloch és munkatársai: „Feltételezett feromonok hatása az emberi vomeronazális szerv és szaglóhám elektromos aktivitására”, J. Steroid Biochem. Molec. Bioi. 39. 573-582 (1991)]. A regisztráló elektród 0,3 mm méretű ezüstgolyó, amelyhez 0,1 mm méretű, teflonnal szigetelt ezüstdrót csatlakozik: az elektród felületét először úgy kezeljük, hogy ezüst-klorid közbenső felület alakul ki, amelyet azután zselatinnal fedünk. Ezt egy kis átmérőjű teflon katéteren felül (átmérője 5 mm) úgy helyezzük el, hogy az elektród hegye körülbelül 2 mm-re kiemelkedik. A teflon katéter hossza 10 cm, és egy többcsatornás rendszer terminális kiterjedését képviseli, amely folyamatos levegőáramot szállít, amely utóbbi kemoszenzor stimulusok elkülönített impulzusait szállítja. A levegőáram először egy kis kamrába lép, és átbuborékol egy oldaton, amely vagy vomeroferint vagy szagos anyagot tartalmaz hígítószerben, vagy csak önmagában a hígítószert tartalmazza. Egy szolenoidot alkalmazunk a levegőáram viszszairányítására a kamrából egy olyan pályára, amely a kamra mellett halad el. Ez lehetővé teszi a stimuláns elkülöní• · · · ·· ···· · ··

- 74 tett impulzusát a levegőáramban. Egy második, külső tefloncső - amely 2 mm átmérőjű - veszi körül a katéter-elektród együttest, melynek központi végződése egy aspirátorhoz csatlakozik, amely 3 ml/s mértékű, folyamatos szívást biztosít. A külső szívócsőnek ez a koncentrikus elrendeződése lehetővé teszi, hogy a kibocsátott kemoszenzoros stimulusok egy helyre lokalizálódjanak, amelyet „minifield”-nak (minimezőnek) nevezünk (átmérője megközelítőleg 1 mm), s amely kikerüli az anyagok diffúzióját akár a stimulálás kiszemelt helyén kívüli területre, akár a légzőrendszerbe. A teljes stimuláló és regisztráló rendszer elhelyezhető az érzékelő hámon belül a VNO-n belül, vagy a szaglóhám vagy légzőhám felületén.

Elektro-vomeronazogramm (EVG):

A regisztrálásokat nyugodt szobában, fekvő egyénen végeztük; a többfunkciós miniszondát kezdetben az orrüregben stabilizáltuk a vesztibulumban elhelyezett nazális retraktorral. A referens és alapelektródok 8 mm méretű ezüst korongokból álltak, amelyeket a szemöldökök között (a glabellán) helyeztünk el.

A VNO bemenetét - vagy vomeronazális üreget - úgy azonosítottuk, hogy előbb kitágítottuk az orrnyílást és az orr tornácát, ezután hatszoros nagyítású binokuláris nagyítóval halogénlámpás megvilágítást alkalmaztunk a teflon katéter végének a bevezetésére, valamint a regisztráló elektród és katéter egyesítésére a VNO nyílásában, ahol a megfelelő, megközelítőleg 1 mm mélységig stabilizáltuk a vomeronazális

- 75 járaton belül. A regisztráló elektród optimális elhelyezését jelzi, hogy a vizsgálati anyag válaszaként megfelelő depolarizáció jelentkezik.

A regisztráló elektródból érkező elektromos szignálokat DC erősítőbe tápláljuk, utána digitalizáljuk, számítógépen monitorozzuk, és tároljuk. Mérjük a szignálok csúcstól csúcsig terjedő amplitúdóját, valamint integráljuk a depolarizációs hullám alatti területet, miközben folyamatosan monitorozzuk mind a komputer képernyőjén, mind a digitális oszcilloszkópon megjelenő szignált. Az 1. és 2. ábrában szemléltetjük az integrált EVG-t az A1-P1, A2-P1, A4-P1, A3-P1, A1-P4 és A2-P4 vegyületek esetében (jelölések a táblák szerint). A légzőmozgások által létrehozott, mesterséges eredményeket úgy szüntetjük meg, hogy az egyéneket megszoktatjuk szájon át lélegezni a szájpad és garat zárásával. A folytonos (folyamatos) levegőáramba 25-800 fmol koncentrációban vomeroferint juttatunk 300 milliszekundumtól 1 szekundumig tartó időn át. A rövid teszt-impulzusok minden egyes sorozatát 3-5 perces intervallumokkal különítettük el. A tészt-stimulusokat hordozó sorok minden egyes komponensét teflonból, üvegből vagy rozsdamentes acélból készítettük, és minden egyes használat előtt tisztítottuk, és sterilizáltuk. Az aktivitást standard elektroenkefalográfiás (EEG) elektródokkal regisztráltuk, amelyeket a nemzetközi 10120 rendszer szerinti Cz-A1 és Tz-A1 helyzetekbe állítottunk; az alapelektródot a csecsnyúlványra helyeztük. A bőr hőmérsékletét (ST) egy kis méretű (1,0 mm) termisztor-szondával regisztráltuk, amelyet a jobb fülcimpán helyeztünk el. A légzésszámot (RF) ···· ·· ···· · ··

- 76 beállítható feszültségátvivővel mértük, amelyet a mellkas alsó részén helyeztünk el. Az összes elektromos szignált DC útján erősítettük, digitalizáltuk (MP-100, Biopac Systems) és számítógép használatával folyamatosan monitoroztuk.

Statisztikai elemzés:

Az EVG-értékeket, csúcstúl csúcsig tartó változásokat és más paraméterek frekvenciaváltozásait mértük, és statisztikailag elemeztük. Az eredmények szignifikanciáját párosított „t-próbákkal vagy variancia-analízissel (ANOVA) határoztuk meg.

A vomeroferinek hatásai a reflexekre:

Vizsgálatokat végeztünk a központi idegrendszer (CNS) VNO-nak vomeroferin általi stimulálására adott reflex-válaszainak a meghatározására. A vomeroferinek által kiváltott, szexuálisan dimorf lokális válaszok visszatükröződtek a férfi, illetve női egyedek autonóm válaszaiban.

Regisztráltuk a Cz-ből és Tz-ből eredő, kortikális aktivitást férfi és női egyedeken, amidőn a VNO-ra olyan levegő-impulzusokat vittünk (300 milliszekundumtól 1 szekundumig tartó időn át), amelyek 200 fmol vomeroferint tartalmaztak. Előzetes bizonyíték is fennáll arra vonatkozóan, hogy az EVG nem áll kapcsolatban a trigeminus nociceptor (fájdalomérző) végződéseivel, mivel egy helyiérzéstelenítő szernek (2 % lidokain) az orrsövény légzőhámján történő alkalmazása az EVG-t sem nem blokkolja, sem csökkenti [L. Monti-Bloch és Β. I. Grosser: „Feltételezett feromonok hatása az emberi • · · · · · • ··♦ ···· ···· ·· ···· · ··

- 77 vomeronazális szerv és szaglóhám elektromos aktivitására”, J. Steroid Biochem. Molec. Bioi. 39. 573 (1991)]; továbbá az egyének nem számoltak be fájdalomérzésről, mint a stimulálási eljárások következményéről.

Claims

Szabadalmi igénypontok

1. Egy egyénen nazális adagolásra alkalmas gyógyászati készítmény, amely egy szteroidot és gyógyászati szempontból elfogadható vivőanyagot tartalmaz, ahol a szteroid (I) általános képletében

Pi jelentése: oxo-, vagy a- vagy β-hidroxi-, a- vagy B-acetoxi-, a- vagy β-propionil-oxi-, a- vagy β-metoxi-, a- vagy β- rövid szénláncú acil-oxi-, a- vagy β- rövid szénláncú alkil-oxi- vagy a- vagy B-benzoil-oxi-csoport;

P₂ jelentése: metil-, hidroxi-metil-, acil-oxi-metil-, alkoxi-metil-, rövid szénláncú alkil-, hidroxi-alkil-, acil-oxi-al kil- vagy alkoxi-alkil-csoport;

P₃ jelentése: hidrogén- vagy halogénatom; oxo-, hidroxilalkoxi- vagy acil-oxi-csoport;

P₄-től P₁₂-ig terjedő szubsztituensek mindegyike, egymás tói függetlenül, lehet: hidrogén- vagy halogénatom, metil-, halogén-metil-, dihalogén-metil- vagy perhalogén-m etil-csoport;

R₁₃ jelentése: hidrogénatom, metil-, metilén-, halogénnel szubsztituált metil-, halogénnel szubsztituált metilén-, etil-, etilenil-, acetilenil-, metil-metilenil- vagy metil -metinil-csoport;

„a, „b”, „c, „d”, „e”, „h”, „i” „j és „h” adott esetben jelenlévő kettős kötések alternatív helyeit jelzik; és „j” vagy „k” hármas kötést is jelezhetnek;

• ·

- 79 és ha P₂ metilcsoportot, és P₃ hidroxilcsoportot jelent, ak kor P₂ és P₃ együttvéve gyűrűs étert is képezhet;
2. Az 1. igénypont szerinti készítmény, ahol „b” jelentése kettős kötés.
3. A 2. igénypont szerinti készíatmény, ahol „e vagy „d” jelentése kettős kötés.
4. Az 1. igénypont szerinti készítmény, ahol „a” és „c” jelentése kettős kötés.
5. Az 1. igénypont szerinti készítmény, ahol „h” adott esetben jelen lévő kettős kötés, és „i”, valamint „j” hiányzik.
6. Az 1. igénypont szerinti készítmény, ahol „j” jelentése kettős kötés.
7. Az 1. igénypont szerinti készítmény, ahol „j” jelentése kettős kötés.
8. Az 1. igénypont szerinti készítmény, ahol P₁₃ jelentése hidrogénatom, metil-, metiléncsoport, halogénnel szubsztituált metil- vagy halogénnel szubsztituált metiléncsoport.
9. Az 1. igénypont szerinti készítmény, ahol P₁₃ jelentése etil-, etilenil-, acetilenil-, metil-metilenil- vagy metil-metinil-csoport.
10. Az 1.-9. igénypontok bármelyike szerinti gyógyászati készítmény, ahol a szteroid a vivőanyagban oldva van.
11. Az 1.-9. igénypontok bármelyike szerinti gyógyászati készítmény, ahol a készítmény folyadékformában van.
12. Az 1.-9. igénypontok bármelyike szerinti gyógyászati készítmény, ahol a készítmény kiegészítőleg gyógyászati szempontból elfogadható kenőcsalapanyagot is tartalmaz.

• ·

- 80
13. Az 1.-9. igénypontok bármelyike szerinti gyógyászati készítmény, amely legfeljebb egy szteroidot tartalmaz.
14. Az 1.-9. igénypontok bármelyike szerinti gyógyászati készítmény, amely egynél több szteroidot tartalmaz.
15. Az (I) általános képletű vegyületek, ahol

Pf jelentése: oxo-, vagy a- vagy β-hidroxi-, a- vagy B-acetoxi-, a- vagy β-propionil-oxi-, a- vagy B-metoxi-, a- vagy B- rövid szénláncú acil-oxi-, a- vagy B- rövid szénláncú alkil-oxi- vagy a- vagy B-benzoil-oxi-csoport;

P₂ jelentése: metil-, hidroxi-metil-, acil-oxi-metil-, alkoxi-metil-, rövid szénláncú alkil-, hidroxi-alkil-, acil-oxi-al kil- vagy alkoxi-alkil-csoport;

P₃ jelentése: hidrogén- vagy halogénatom; oxo-, hidroxilalkoxi- vagy acil-oxi-csoport;

P₄-től P₁₂-ig terjedő szubsztituensek mindegyike, egymás tói függetlenül, lehet: hidrogén- vagy halogénatom, metil-, halogén-metil-, dihalogén-metil- vagy perhalogén-m etil-csoport;

R₁₃ jelentése: hidrogénatom, metil-, metilén-, halogénnel szubsztituált metil-, halogénnel szubsztituált metilén-, etil-, etilenil-, acetilenil-, metil-metilenil- vagy metil -metinil-csoport;

„a”, „b”, „c”, „d”, ,e”, „h”, „i” „j” és „h” adott esetben jelenlévő kettős kötések alternatív helyeit jelzik; és „j vagy „k” hármas kötést is jelezhetnek;

és ha P₂ metilcsoportot, és P₃ hidroxilcsoportot jelent, ak kor P₂ és P₃ együttvéve gyűrűs étert is képezhet;

• ·

- 81 azon megkötésekkel, hogy

i) ha P! jelentése oxocsoport, b jelen van; e, a, c, d nincsenek jelen, P₂ jelentése metilcsoport; és P₃. P4. P7, P9. P10. P11 ®s P₁₃ jelentése hidrogénatom, akkor - akár jelen van h, akár hiányzik

- P₆-nak jelen kell lennie, és nem lehet hidrogénatom;

ii) ha Pi jelentése OH csoport, és c jelen van; e, a, b és d hiányoznak; P₂ metilcsoportot jelent; és P₃. P4. P7. P9- P10. P11. ^pi2 ®s P₁₃ jelentése hidrogénatom, akkor:

(a) ha h jelen van, akkor P₆-nak jelen kell lennie, és hidrogénatom nem lehet;

(b) ha h hiányzik, és P₆ jelen van, akkor P₆ hidrogénatom nem lehet;

(c) ha h hiányzik, és P₆ jelen van, akkor mind i, mind j jelen van;

iii) ha P, jelentése B-OH csoport, és b jelen van; e, a, c, d hiányoznak; P₂ metilcsoportot jelent; és P₃. P₄, P₇, P₉, P₁₀, P11 és P₁₃ jelentése hidrogénatom, akkor:

(a) ha h jelen van, akkor i-nek és/vagy j-nek jelen kell lennie; vagy P₆ nem lehet hidrogénatom;

(b) ha h jelen van, akkor j hármas kötést nem jelenthet;

iv) ha P! α-OH csoportot jelent, b jelent van; e, a, c, d hiányoznak, és P₂ metilcsoportot jelent; és P₃,

99 9· • · • · · 9 9 9 « · « · • · · · · « •··· · ··

- 82 P₄, Pz- Pg. P10. P11 ^és P13 jelentése hidrogénatom, akkor:

(a) ha h jelen van, akkor i-nek hiányoznia kell, és P_e nem lehet hidrogénatom;

(b) ha mind i, mind j hiányzik, akkor P₆ nem lehet hidrogénatom;

v) ha P^ jelentése oxocsoport, és b, valamint d jelen van; e, a és c hiányoznak; P₂ jelentése metilcsoport; és P₃, P₄, P₇, P₉, P,, és P₁₃ jelentése hidrogénatom, akkor: ha h hiányzik, és i jelen van, akkor P₆-nak jelen kell lennie, és hidrogénatomot nem jelenthet;

vi) ha Pt és P₃ jelentése oxocsoport, és b jelen van; h, e, a, c és d hiányoznak; P₂ metilcsoportot jelent; P₄, P₅, P₇, P₈, P₉, P₁₀, P,i és P₁₃ jelentése hidrogénatom, akkor:

(a) ha P₆ hiányzik, akkor j nem lehet kettős kötés;

(b) ha P₆ hidrogénatom, akkor i-nek vagy j-nek jelen kell lennie;

vii) ha P₁ jelentése O-metil-csoport, a és c jelen van; és P₂ metilcsoportot jelent; e, b, d és h hiányoznak; és P₃, P₄, P₇, P₈, P₉, P₁₀, P_1t és P₁₃ jelentése hidrogénatom, akkor (a) ha P₆ jelentése hidrogénatom, akkor i-nek vagy j-nek jelen kell lennie;

(b) ha P₆ hiányzik, akkor i és j egyszerre nem lehet kettős kötés;

«* «··t

- 83 viii) ha Pi jelentése oxocsoport, és a, b, c, d, e hiányoznak; P₂ jelentése metilcsoport; és P₃, P₄, P₇Pg. P10. ^pn. ^pi2 és P₁₃ jelentése hidrogénatom, akkor (a) ha h hiányzik, és j mint kettős kötés van jelen, akkor P₆ nem lehet hidrogénatom;

(b) ha h, i és j hiányzik, akkor P₆ nem lehet hidrogénatom, és (c) ha h jelen van, akkor j hármas kötés nem lehet;

ix) ha P_t OH csoportot jelent, a, b, c, d, e és h hiányoznak; P₂ jelentése metilcsoport; P₃, P₄, P₇,

P₈. ^pg. ^pio. ^pi 1. ^pi2 ®s P₁₃ jelentése hidrogénatom, akkor:

(a) ha j kettős kötést jelent, és i hiányzik, akkor P₆ jelentése hidrogénatomtól eltérő;

(b) ha i jelentése kettős kötés, és j hiányzik, akkor P₆ jelentése hidrogénatomtól eltérő;

(c) i és j egyidőben kettős kötések nem lehetnek;

(d) ha i és j hiányoznak, akkor P₆ hidrogénatom nem lehet;

x) ha P! oxocsoportot jelent, e és b jelen van; és a, c, d hiányzik; P₂ metilcsoportot jelent; és P₃, P₄, P₇, ^p9. ^pio> ^pn és P₁₃ jelentése hidrogénatom, akkor;

(a) ha h jelen van, akkor j hármas kötés nem lehet;

» · • · » · ···*· a· «·

- 84 • · * f ·· (b) ha h hiányzik, és i kettős kötést jelent, akkor P₆ jelentése a hidrogénatomtól eltérő;

(c) ha h hiányzik és i kettős kötés, akkor P₆ jelentése a hidrogénatomtól eltérő;

(d) ha h hiányzik, és sem i, sem j nem jelent kettős kötést, akkor P₆ jelentése a hidrogénatomtól eltérő;

xi) ha P! oxocsoportot, P₃ OH csoportot jelent, b jelen van, a, e, c, d, h, i, j hiányoznak, P₂ metilcsoportot jelent, és P₄, P₇, P₉, P₁₀, P_n és P₁₃ jelentése hidrogénatom, akkor P₆ nem lehet hidrogénatom;

xii) ha P! jelentése oxocsoport, b jelen van, a, e, c, d, h és i hiányoznak; P₆ és P₂ jelentése metilcsoport; és P₃, P₄, P₅, P₇, P₈, P₉, P₁₀ és P,, hidrogénatomot jelent, akkor;

(a) ha j kettős kötést jelent, akkor P₁₃ etilenilcsoport nem lehet;

(b) ha sem j sem k nem jelent kettős vagy hármas kötést, akkor P₁₃ acetilenilcsoport nem lehet;

xiii) ha Ρϊ jelentése OH csoport, c jelen van, és a, b, e, d, h és i hiányoznak, P₂ és P₆ metilcsoportot jelent; és P₃, P₄, P₅, P₇, P₈, P₉, P₁₀, Ρ_υ és P₁₂jelentése hidrogénatom, akkor:

(a) ha j kettős kötést jelent, akkor P₁₃ jelentése az etilcsoporttól eltérő;

t

- 85 (b) ha j hiányzik, és k jelentése kettős kötés, akkor P₁₃ jelentése a metil-metilenil-csoporttól eltérő;

(c) ha j és k hiányoznak, akkor P₁₃ jelentése az etilcsoporttól eltérő; és (d) ha k jelentése hármas kötés, akkor P₁₃metil-metinil-csoportot nem jelenthet.