HUT65411A - Combined preparation with thrombolytic action - Google Patents

Description

A jelen találmány trombolitikus hatással rendelkező újszerű készítményekre vonatkozik.

Trombózisok úgy keletkeznek, hogy a véredényeken belül véralvadék képződik. Megkülönböztetünk vénás trombózisokat, ideértve a tüdőembóliákat, valamint artériás trombózisokat, az akut szívinfarktust is beleértve.

Mind a tüdőembólia, mind a szívinfarktus az életet is fenyegető eset, melyek azonnali orvosi beavatkozást tesznek szükségessé.

Az utóbbi években a különféle inváziv módszerek mellett az artériás és a vénás trombózisok gyógykezelése céljából plazminogénaktivátorokkal végzett enzimatikus trombolizist is végeztek. Ezek a trombolitikumnak nevezett anyagok a plazminogént — vagyis a fibrinolizis-rendszernek a vérben levő inaktív proenzimjét — átalakítják plazminná, vagyis aktív proteolitikus enzimmé. Másrészt viszont a plazmin feloldja a fibrinszálakat, melyek a véralvadék lényeges alkotóelemei, ami az elzáródott véredények újbóli megnyílását és a véráramlás helyreállítását eredményezi. A plazmin azonban egy viszonylag kis mértékben specifikus proteáz. Ez azt jelenti, hogy a vérben képződik, megbontja a vérben levő proteolitikus komponenseket, melyek az intakt hemosztázishoz elengedhetetlenül szükségesek ( igy pl. a fibrinogént ) és ezáltal bizonyos körülmények között veszélyes vérzési kockázatot okoz.

···· * · ·· • · * · · · · • · · · ··· · ···· ·· · · «··

- 3 Az első generációs trombolitikumok — igy a sztreptokináz és az urokináz — olyan anyagok, melyek a vérkeringésbe injekciózva a plazminogént szisztemikusan plazminná alakítják át és ezzel egy szisztemikus proteolizist okoznak. A nevezett anyagokkal való trombusoldó kezeléseket ennélfogva gyakran vérzési komplikációk kisérik. Szén dilemmából a kivezető utat egy fibrinre nézve specifikus trombolizis kifejlesztése jelenti, melynek során szövettipusu rekombinált plazminogénaktivátorokat alkalmaznak, melyek rövidített neve : t-PA. A t-PA a vérkeringésben csak mérsékelt affinitással rendelkezik a plazminogénhez. Fibrinszála-c jelenlétében azonban, melyekkel specifikus kötődési helyeken reagálni képes, ez az affinitás megsokszorozódik, ami a vérrög felületén plazmin képződését eredményezi. Ezt a koncepciót mind in vitro, mind állatokon végzett vizsgálatokkal igazolni lehetett ; a klinikai vizsgálatok mégis azt az eredményt hozták, hogy nagy mennyiségű t-PA alkalmazása szükséges egy koszorusér-trombózis gyors feloldása céljából.

Nagy dózisban történő t-PA infundálása esetén azonban, a sztreptokinázzal és az urokinázzal kapcsolatban említettekhez hasonlóan szisztemikus proteolizis lép fel, amihez egy viszonylagos vérzési kockázat társul. Manapság a t-PA relatív fibrinspecifitásáról beszélnek. Ennek oka a t-PA egyik lényeges tulajdonságán alapozik ; nevezetesen ez a molekula egy proteáz, ami kedvező körülmények között (nagy értékű

- 4 enzimkoncentráció, hosszú expozíciós idő, nagy szubsztrátumkoncentráció, optimális pH és ionmiliő) a plazminogént fibrin távollétében is képes plazminná átalakítani. A t-PA valamennyi feltételnek eleget tesz a jelenleg alkalmazott szabványszerü klinikai gyógyítási módszerek tekintetében.

A fibrinspecifitás kritériumát jobban teljesítő, még specifikusabb plazminogénaktivátorok utáni kutatás során találtak egy fibrinolitikus hatású, természetes eredetű uj anyagot, melyet v-PA jelzéssel illettek ( az anyag másik neve : DSPA, ami a Desmodus Salivary Plasminogen Activator szavakból származik, európai szabadalmi bejelentés, a közzététel száma : 0 385 417 )·

A jelen találmány egy trombolitikus hatású készítményre vonatkozik, amely a DSPA β és a DSPA γ 46,000, illetve 42,000 molekulasulyu, fibrint meg nem kötő kis molekulasulyu alakjaiból (európai szabadalmi bejelentés, melynek közzétételi száma : No. 0 383 417), valamint egy fibrint megkötő plazminogénaktivátorból áll.

Fibrint megkötő plazminogénaktivátorként például a következők jönnek tekintetbe : prourokináz (scu-PA), t-PA és a v-PA trombolitikum nagy molekulasulyu alakjai (DSPA al és DSPA a2, európai szabadalmi bejelentés, közzétételi száma : 0 383 417 ) 52,000 molekulasúllyal.

A v-PA (DSPa) nevű trombolitikus hatóanyag a természet• · · ·

- 5 ben előforduló uj plazminogénaktivátor, amely a véralvadékot az emberi szervezetben feloldja és igy például szívinfarktus kezelésére alkalmas (európai szabadalmi bejelentés, közzétételi száma : Ko. ÜJ83 417).

Az anyag kis koncentrációban jelen van a Desmodus spec. (vérszopó denevérek) nembe tartozó valamennyi denevérfajta nyálában és az említett állatfajtába tartozó állatok nyálmirigyeinek sejtjeiből azt exprimálni lehet. A Desmodus spec. nemhez tartozó denevérekhez tartozik fogalmilag az amerikai kontinensen élő valamennyi denevérfajta: különösen alaposan a Desmodus nem Közép-Amerikában és Mexikóban élő példányait vizsgálták.

A találmány továbbá felöleli még az olyan gyógyszerkészítményeket is, melyek a fentiekben megnevezett nem fibrinkötő és fibrinkötő tulajdonságú plazminogénaktivátorok, valamint szokásos segéd- és hordozóanyagok kombinációin alapszanak.

A fibrint megkötő és a fibrint meg nem kötő plazminogénaktivátorok fentiekben leirt kombinációja által a v-PA fibrinolitikus képessége sokkal erősebbé válik a hagyományos plazminogénaktivátorokhoz képest.

PÉLDA

Egy Petri-csészében fibrinogént és plazminogént trombin

- 6 hozzáadásával alvadásra késztetünk, majd, a kapott fibrinrétegbe 3 mm átmérőjű lyukakat stancolunk, melyekbe v-PA-t adunk különféle koncentrációkban és kombinációkban. Nedves kamrában 37 °C hőmérsékleten végzett inkubálás után a v-PA fibrinspecifikus plazminogénaktivátornak mind a két molekuláris formája a koncentrációtól függő oldási udvart eredményez.

Mármost, ha a molekulárisán különböző kétféle v-PA formát egymással kombináljuk, úgy ez kifejezetten nagyobb oldási udvarokat eredményez, mint amilyen oldási udvarokat az egyszerű additiv hatás alapján várni lehet. A nagy és a kis molekulasulyu v-PA kombinálásával tehát in vitro szinergetikus hatást érünk el a fibrinolizis tekintetében. Ezt a szinergetikus hatást arra lehet visszavezetni, hogy a v-PA kis molekulasulyu formája — melynél hiányzik az u.n. ujjdomén — a fibrint meg nem kötő tulajdonsága folytán jobban be tud diffundálni egy fibrinalvadékba és ott az alvadékot fibrinolitikus aktivitásánál fogva fellazítja. A nagy molekulasulyu fibrinmegköto v-PA-változat azután a már fellazított fibrinalvadékot teljesen oldani képes.

A fenti fibrinlemez-teszt eredményeinek kiszámítása azt mutatta, hogy a kétféle formában levő v-PA kombinálásával egyértelműen szinergetikus hatást lehet elérni. (Berenbaum, M.C. Clin. exp. Immunoi., 28, 1 - IS, 1977 ).

Claims (2)

1. Trombolitikus hatású készítmény, amely a v-PA (DSPA β és DSPA y ) fibrint meg nem kötő formái — melyek molekulasúlya 46,000 és 42,000 — továbbá fibrint megkötő plazminogénaktivátorok, valamint szokásos segéd.- és hordozóanyagok kombinációjából áll.

2. Az 1. igénypont szerinti trónbólitikus hatású készítmény, azzal jellemezve, hogy a fibrint megkötő plazminogénaktivátor prourokináz ( scu-PA ), vagy t-PA, vagy pedig a v-PA trombolitikum nagyobb molekulasulyu formái (DSPA al és DSPA a2 ), mimellett ez utóbbiak molekulasúlya: 52,000.