HUT64337A

HUT64337A - Thiangazole, its production, preparative containing it and application of said compound

Info

Publication number: HUT64337A
Application number: HU9301854A
Authority: HU
Inventors: Gerhard Hoefle; Norbert Bedorf; Edgar Forche; Klaus Gerth; Herbert Irschik; Rolf Jansen; Brigitte Kunze; Hans Reichenbach; Florenz Sasse; Heinrich Steinmetz; Wolfram Trowitzsch-Kienast; Johannes Paul Pachlatko
Original assignee: Biotechnolog Forschung Gmbh; Ciba Geigy Ag
Priority date: 1990-12-24
Filing date: 1991-12-06
Publication date: 1993-12-28
Also published as: HU9301854D0; AU9036991A; BR9107189A; NZ241030A; AU659423B2; EP0564479A1; WO1992011258A1; CA2097594A1; JPH06504197A

Description

A jelen találmány (I) általános képletu vegyületekre, és többek között különösen az (la) képletü, tiangazolnak nevezett vegyületre és az (I) és (la) képletü vegyületek gyógyászatilag elfogadható savaddiciós sóira vonatkozik. A találmány kiterjed azokra a gyógyászati készítményekre is (a vírusellenes hatásúak kivételével), amelyek a vegyületeket a szokásosan talmazzák .

vagy (la) alkalmazott formálási adjuvánsokkal együtt tarA készítmények, amelyeknek hatóanyaga egy (I) képletü vegyület, alkalmasak az Arthropoda és

Acarina rendbe tartozó kártevők irtására, valamint emberek, állatok és növények paraziták által okozott betegségeinek megszüntetésére. Különösen a készítmények antelmintikus, akaricid és inszekticid hatását kell kiemelnünk. A gyógyá szati készítmények mellett a találmány körébe tartoznak az (I) vagy (la) képletü vegyületeken alapuló peszticidek is. A találmány magába foglalja a hatóanyagok és a fenti készítmények előállítását, valamint ezek emberekben, állatokban és növényekben paraziták irtására, különösen férgek, így nématódák, cesztódák és trematódák melegvérű állatokban, különösen házi- és haszonállatokban, valamint az Arthropoda rendbe tartozó, előnyösen rovarok és az Acarina rendet képviselő kártevők irtására való alkalmazását is.

A jelen találmány különösen az (I) általános képletű vegyületekre és gyógyászatilag elfogadható savaddíciós sóikra, és mindenekelőtt az (la) képletű tiangazolra és gyógyászatilag elfogadható savaddíciós sóira vonatkozik.

A tiangazolt úgy kapjuk, hogy a myxobacterium Polyangium spec. DSM 6267 [a Budapesti Egyezménynek megfelelően a DSM (Deutsche Sammlung von Mikroorganismen und Zellkulturen, Braunschweig, Németország) gyűjteményben 1990. december 13án deponálva] szénforrást, nitrogénforrást és ásványi sókat tartalmazó táptalajon tenyésztjük, az összegyűjtött sejttömeget acetonnal extraháljuk, az egyesített extraktumokat bepároljuk, a koncentrátumot dietil-éter és víz elegyében felvesszük, a vizes fázist elválasztjuk, és szükséges esetben dietiléterrel extraháljuk, az egyesített dietil-éteres fázist bepároljuk, a koncentrátumot metanol és heptán elegyében felvesszük, a metanolos fázist elválasztjuk, és szükséges esetben heptánnal extraháljuk, ezután bepároljuk, és terc-butil-metil-éterrel extraháljuk, a terc-butil-metil-éteres extraktumot Florisil adszorbensen átszűrjük, » · · · ♦ a tiangazolt (vagy az antibiotikus és/vagy fungicid hatású anyagot)az extraktumból kikristályosítjuk, kívánt esetben a tiangazolt (vagy az antibiotikus és/vagy fungicid hatású anyagot) gyógyászatilag elfogadható savaddiciós sóvá alakítjuk.

A myxobacterium Polyangium spec. DSM 6267 által termelt tiangazol az (la) képletnek megfelelő konfigurációval rendelkezik. Az (I) általános képletű tiangazol cisz-transz izomerekhez úgy juthatunk, hogy a fenti eljárással előállított tiangazolt hővel vagy UV fénnyel kezeljük.

A találmány körébe tartozó mindegyik vegyület önmagában ismert módon gyógyászatilag elfogadható savaddiciós sóvá alakítható.

Az (I) és (la) képletű vegyületek sóik, különösen gyógyászatilag elfogadható, azaz fiziológiailag elviselhető sóik formájában is létezhetnek. A gyógyászatilag nem elfogadható sók szintén használhatók például elkülönítési vagy tisztítási célokra. Csak a gyógyászatilag elfogadható sók használhatók gyógyításra, ezért ezek az előnyösek.

A gyógyászatilag elfogadható savaddiciós sókon azokat a sókat értjük, amelyek fiziológiásán nem előnytelenek, hanem elviselhető addiciós vegyületek, ilyenek különösen az (I) képletű vegyületek szervetlen vagy szerves bázissal képezett

sói, amelyeket

() képletű alapmolekula

komplexei

bázissal vagy ekvivalens mennyiségű sóképző

-acetamiddal alkot. Ezek elsősorban fémsók vagy ammóniumsók,

így alkálifém- és alkáliföldfémsók, például nátrium-, kálium-, magnézium- vagy kalciumsók vagy ammóniával vagy megfelelő szerves aminokkal, különösen tercier monoaminokkal és heterogyűrűs bázisokkal, például trialkil-aminokkal, így trietil-aminnal vagy dialkil-aminokkal, így dietil-aminnal vagy dipropil-aminnal vagy más szerves bázisokkal, így N,N'-dimetil-piperazinnal képezett sók.

A találmány egyik előnyös foganatosítási módja gyógyászati készítményekre vonatkozik (az antivirális hatásúak kivételével), amelyek hatóanyagként egy találmány szerinti vegyületből állnak vagy egy ilyen találmány szerinti vegyületet a szokásos hordozó- és/vagy hígítóanyagokkal együtt tartalmaznak. A találmány szerinti vegyületek ebben az összefüggésben a gyógyászatilag elfogadható savaddíciós sókat is jelentik. Ezek a készítmények emberekben és állatokban paraziták irtására alkalmasak.

Végül, a találmány kiterjed a mezőgazdaságban, kertészetben, erdőgazdaságban és hasonló alkalmazási területeken használható növényvédő készítményekre is, amelyek tiangazolból állnak vagy a tiangazolt (kívánt esetben egy mezőgazdaságilag elfogadható sóját) szükséges esetben a szokásos hordozóanyagokkal vagy hígítóanyagokkal együtt tartalmazzák.

A jelen találmány olyan vegyületekre, előnyösen tiangazol típusú vegyületekre is kiterjed, amelyek a 3.igénypontban megadott paraméterek közül eggyel vagy többel jellemezhetők.

A találmányt a továbbiakban részletesen, kísérleti adatok bemutatásával ismertetjük.

• a

A) Előállítási körülmények

A.l. Termelő törzs: bacterium Polyangium spec. Strain Pl 3007 Myxobacteriales rend, Sorangineae alrend, Polyangiaceae család.

A.2. A termelő törzs eredete: Az Alhambra (Granada, Spanyolország) kertjeinek homokjából 1986 októberében izolálták a GBF (Gesellschaft für Biotechnologische Forschung mbH, Brunswick/Németország) munkatársai.

A. 3. A termelő törzs leírása: a vegetatív sejtek hengeresek szélesen behajló végekkel (Polyangium típus), általában 0,6-0,8 x 4-6 mikron méretűek. Tápanyaghiány esetében, például víz-agaron, élő Escherichia coli keneten tenyésztve á szervezet termőtestecskéket képez. Ezek kis-közepes méretű, lemezszerű, gömb- vagy tojásalakú, aranytól vörösesbarnáig változó színű, általában 30-80 mikrométer közötti átmérőjű sporangiumok alkotta oszlopok. A sproangiumoszlopok nagyon nagyok is lehetnek, de méretük tág határok, általában 100 és 600 mikrométer között változik. A Pl 3007 víz-agaron élő Escherichia coli baktériumon jól nő, miközben a tápanyagként szolgáló baktériumokat lebontja. A baktériumsejtek csúszó mozgása következtében a telep fokozatosan, mozgó tömegként borítja be a tenyészlemezt. Emellett a szervezet jól nő élesztő-agaron is (VY/2 agar: 0,5% sütőélesztő; 0,1% CaC12.H₂O; 0,5 mg/liter ciano-köbölamin; pH 7,2). Növekedés

ti· « · · ·

közben mélyen behatol a tenyészszubsztrátumba, és az élesztősejteket jelentős mértékben lebontja. Kataláz és oxidáz pozitív. Folyékony közegben a törzsek kis sejtcsomókat képeznek mind rázólombikokban 160-as fordulatszám mellett (100 ml tápközeg 250 ml-es Erlenmeyer lombikban vagy 500 ml közeg 1000 ml-es Erlenmeyer lombikban), mind bioreaktorokban (egészen 300 literes méretig kipróbálva). Az alkalmas táptalajok közül példaként a Poll táptalajt említjük: Probion PS (Methylomonas clarae-ből származó egysejt fehérje; Hoechst, Frankfurt) 0,4%; keményítő 0,3%; MgSO₄.7H2O· 0,1%; CaC12.2H₂O 0,05%; 1 ml/1 standard nyomelem-oldat (G.Drews, Messbiologisches Praktikum, 2nd edition, 6.oldal, Springer Verlag, Berlin 1974) és 1 ml/liter standard vitaminoldat (H, G. Schlegel, Allgemenine Mikrobiologie, 6th edition, 174. oldal, Thieme-Verlag, Stuttgart 1985); pH 7,0. A tenyészetet 3-4 napon át 30°C-on tartjuk. A Pl 3007 például az agarlemezekről vagy folyékony tenyészetekből származó vegetatív sejtek peptonoldatban -80°C-on való fagyasztásával vagy folyékony nitrogénben eltartható_s

A.4. A termelő törzs működése: A sejtextraktumokban vagy bizonyos mértékig a Pl 3007 XAD eluátumaiban is kimutatható olyan aktivitás, amely gátolja bizonyos gombák növekedését agar diffúziós tesztekben (ld. alább). Kémiailag az anyag többek között 3 tiazolingyűrűből és egy oxazolgyuruből áll, és a tiangazol nevet kapta.

• ·

A.5. A törzs hozzáférhetősége: A termelő törzset a Deutsche Sammlung von Mikroorganizmen (Brunswick) gyűjteményben a DSM 6267 számon a szabadalom tárgyát képező törzsként deponáltuk.

A. 6. A tiangazol kimutatása: A tiangazol kvalitatív kimutatására a sejttömeget acetonnal extraháljuk vagy a tenyészetet XAD 1180 (Messrs. Rohm and Haas) adszorbens gyantával keverjük, és szűrés után az XAD-t metanollal és acetonnal eluáljuk. A koncentrált extraktumok kis részleteit gátlás szempontjából, például Mucor hiemalis felhasználásával vizsgáljuk, és a tiangazol mintát vékonyréteg-kromatográfiásan, tiszta anyaggal összehasonlítva azonosítjuk. A feldolgozást, elkülönítést és kémiai jellemzést a B) fejezetben leírt módon végezzük.

A. 7. A tiangazol előállítási körülményei: Rázott lombikokban a tiangazol a növekedés alatt képződik, és a legnagyobb aktivitását a logaritmikus fázis vége és a stacionárius fázis eleje között éri el.

B. Fermentálás bioreaktorban

A bioreaktor (b50) 65 literes (Messrs.Giovanola Freres, Monthey, Svájc), két lapátkeverővei van ellátva. Közeg: Probion PSC (Methylomonas clarae-ből származó egysejt fehérje; Hoechst, Frankfurt) 0,4%; keményítő 0,3%,” MgSO₄.7H₂O 0,1%; CaCl₂.2H₂O 0,05%; standard nyomelem-oldat ··« ml/liter (ld. fentebb) és ciano-kobolamin 0,5 mg/liter; pH 7,2. 60 liter táptalajt 5 liter, rázólombikból származó, jól növekedő tenyészettel oltunk be. A levegőztetés mértéke 200 Nl/óra, a sebesség 200 fordulat/perc. Az oxigén parciális nyomása, amelyre vonatkozó telítettség a fermentálás kezdetén 100%, a 95 órán át tartó fermentáció végére 85%-ra csökken. A pH értéke a fermentáció folyamán 7,0-ről 7,2-re emelkedik (NI = normál liter = 1 liter levegő normál körülmények között).

A tiangazol elkülönítése

309 g nedves Polyangium Pl 3007 sejttömeget 500 ml acetonnal keverünk. A szilárd maradékot centrifugálással elválasztjuk, és négy alkalommal, kb. 150-150 ml acetonnal 30 percen át extraháljuk, majd centrifugáljuk. Az egyesített acetonos felülúszót vákuumban bepároljuk. A 6,7 g maradékot dietil-éter és víz elegyében oldjuk. A vizes fázist három alkalommal dietil-éterrel extraháljuk, majd elöntjük. Az egyesített dietil-éteres fázisokat vákuumban bepároljuk, és a 3,54 g maradékot metanol és heptán elegyében oldjuk. A heptános fázis elválasztása után a metanolos fázist még három alkalommal heptánnal extraháljuk, és aztán vákuumban bepároljuk. A heptános fázist elöntjük. A metanolos fázisból kapott 1,93 g nyers terméket 500 ml terc-butil-metil-éterrel 50 ml Florisil adszorbensen átszűrjük. A szurletet vákuumban bepároljuk, és petrolétert adunk hozzá. 82 mg termék válik ki kristályok formájában. Az anyalugot közepes nyomású kromatográfiás eljárással [oszlop (átmérő x hossz) 37 x 420 mm, szilikagél 15 mikron, 60 angström (HD-SIL-1560, Messrs.Kronwald)] tisztítjuk, eluálószerként petroléter, terc-butil-metil-éter és metanol 50:49:1 térfogatarányú elegyét használjuk, (átfolyási sebesség 28 ml/perc, kimutatás UV abszorpcióval 278 nm-en). A 45 perces retenciós idejű fő csúcsot tartalmazó frakciókat egyesítjük és terc-butil-metil-éter és petroléter elegyéből kristályosítjuk, így 35 mg további terméket kapunk. A hozam 117 mg.

A tiangazol fizikai adatai

Tioangazol kimutatása analitikai HPLC alkalmazásával: Oszlop (átmérő x hossz) 4 x 250 mm, töltet: HD-SIL 18-5-100 (Messrs. Kronwald), kimutatás: UV abszorpcióval 290 nm-en, eluálószer metanol:víz = 80:20; átfolyási sebesség: 1,5 ml/perc, t_R = 5,8 perc; metanol:víz = 75:25 alkalmazásakor a t_R = 10,5 perc.

op. 140°C.

UV (metanol):	lambda_max (epszilon/lg epszilon)	= 211 (váll),
218 (váll)	, 223 (37884/4,578), 228	(váll), 288
(36384/4,561)	, 300 (váll).
IR(CHC1₃) :	3432(közepes),	1664(erős),	1633(erős),
1577(közepes)	, 1567(közepes)	, 1536(közepes),	1465(gyenge),
1449 (gyenge)	, 1413 (gyenge),	1370(gyenge), 1168 (közepes),
1102(közepes)	, 1015(közepes),	963(közepes) cm	1.
¹H-NMR(CDC1₃,	300,133 MHz):	delta = 7,48 (m,	2H); 7,35 (m,

3H); 7,13 (d, 1H, J= 16,2Hz); 7,04 (d, 1H, J

16,2Hz);

6,91 (m, 1H); 3,85	(d, 1H, J = 11,2Hz); 3,81 (d, 1H,	J =
10,6Hz); 3,74	(d,	1H,	J = 11,4Hz);	3,37	(d, 1H,	J =
11,2Hz); 3,27	(d, 1H,	J	= 11,4Hz); 3,20	(d,	1H, J = 11,	3Hz) ;
2,93 (d, 3H,	J = 5,1Hz)	; 2,63 (s, 3H);	1,68	(s , 3H) ;	1,66
(s, 3H); 1,59	(s, 3H)

¹³C-NMR(CDd₃, 75,473 MHz): delta = 179,22 s; 178,07 s;

167,90 s; 162,50 s; 162,36 s; 153,39 s; 141,99 d; 135,12 s;

129,73 d; 129,18 s; 128,92 d(2C), 127,62 d(2C); 122,48 d,

83,69 s, 83,53 s; 79,45 s; 43,22 t; 42,50 t; 41,99 t, 26,15 q, 25,70 q; 25,53 q; 24,38 q; 11,75 q. (Az s, d, t és q azokat a jelfelbomlásokat jelenti, amelyek egy SFORD ¹³C-NMR-spektrumot alkotnának. A 2C kétszeres jelintenzitást jelöl.) (+)FAB-MS(xenon, 3-nitro-benzil-alkohol mátrix): m/z = 540 = (M+H)⁺.

Nagyfelbontású FAB-MS: a [^C26^H29^N5^O2^S3^+H1 képletre számított: 540,1562; talált: 540,1688.

EI-MS (210°C, 70 eV): m/z(%) = 541(2,1), 540(5,1), 539(14) [M⁺], 524(12), 493(16), 379(4,5), 337(20), 301(50), 280(21), 260(44), 213(23), 202(74), 182(18), 172(31), 150(14),

140(19), 130(22), 115(21), 103(10), 85(22), 73(100).

Nagyfelbontású EI-MS:

^C26^H29^N5°2^S3	képletre	számított:	539,1483 ;	talált:	539,1488
^C25^H27^N5°2^S2	képletre	számított:	493,1606;	talált:	493,1604
^c14^H17ⁿ4°2^s2	képletre	számított:	337,0793:	talált:	337,0793
^c16^h17^N2^S2	képletre	számított:	301,0833;	talált:	301,0833
^C13^H12^N2^S2	képletre	számított:	260,0442;	talált:	260,0444
^C12^H12^N1^S1	képletre	számított:	202,0690;	talált:	202,0691.

Kereskedelmi nevek:

HD-Sil-15-60 és HD-Sil-18-5-100 (Kronwald) Florisil (Flori din Corp., magnézium-szilikát gél).

C. Biológiai hatás

Meglepő módon azt találtuk, hogy a jelen találmány szerinti, (I) általános képletű vegyületek, és különösen a találmány szerinti (la) képletnek megfelelő szerkezetű tiangazol értékes parazitaellenes hatóanyag emberekben, állatokban és növényekben alkalmazva, emellett a melegvérű állatok, halak és növények számára jól elviselhetők. Nemcsak a férgekkel, így nematódákkal, cesztódákkal és trematódák kai, elsősorban pedig a nematódákkal (hengeress férgekkel) szemben mutatnak a vegyületek széles spektrumú hatást, amelyek az emberi és állati szervezet, különösen az emlősök parazitái, hanem eredményesen alkalmazhatók fitopatogén rovarok és növényeken pókok ellen, amelyek a mezőgazdaságban a haszon és dísznövényeken, különösen a gyapot-, zöldség és gyümölcsültetvényeken, erdőkben jelennek meg, és használhatók a raktározott áruk és anyagraktárak, valamint az egészségügyi szektorban, különösen házi- és haszonállatok védelmére is. A tiangazol emellett még hatásos minden vagy egy bizonyos fejlődési stádiumban levő egyébként érzékeny vagy akár rezisztens rovar- és pókfajokkal szemben is.

Az (I) és (la) képletű vegyületek egy speciális tulajdonságaként említjük azt a meglepő mértéket, amelyben a melegvérű állatok a vegyületeket eltűrik, és amely ezeket a vegyületeket minden más antelmintikum fölé emeli. Ez a tulajdonság a vegyületekkel való bánást a gyakorlatban, a féreggel fertőzött állatok kezelésében rendkívüli mértékben megkönnyíti, mivel a kezelt állatok még aránylag nagy dózisokat is elviselnek bármilyen tünet megjelenése nélkül.

A találmány szerinti (I) és (la) képletű új vegyületek antelmintikumként alkalmazhatók például a Rhabditida, Ascaridida, Spirurida, Trichocephalida rendekhez (K. I. Skrajabin szerint) tartozó parazita nematódák vagy Cyclophyllidae, Pseudophyllidae rendbeli (Wardle és McLeod szerint) cesztódák vagy a Digenea rendhez tartozó trematódák irtására háziállatokban és tenyésztett haszonállatokban, így tehenekben, juhokban, kecskékben, lovakban, sertésekben, szarvasokban, macskákban, kutyákban és baromfifélékben. A tiangazolt az állatoknak egyetlen vagy ismételt dózisokban adagolhatjuk, az egyedi dózisok előnyösen 1 és 50 mg/kg testtömeg között változnak az állat fajától függően. Bizonyos esetekben nyújtott adagolással jobb hatást érhetünk el vagy összességében kisebb dózis alkalmazása is elegendő.

Az Insecta és Acarina csoportba tartozó állati kártevőknél a jelen találmány szerinti (I) és (la) képletű vegyületek a kártevő azonnali vagy későbbi, például vedléskor bekövetkező pusztulását, vagy csökkent peterakást és/vagy alacsonyabb kikelési arányt okozhat. A fentebb említett állati kártevők lehetnek a Lepidoptera rendhez tartozók, ilyenek például: az Acleris spp., Adoxophyes spp., Aegeria spp., Agrotis spp., Alabama argillaceae, Amylois spp., Anticarsia gemmatalis, Archips spp., Argyrotaenia spp., Autographa spp., Busseola fusca, Cadra cautella, Carposina nippoensis, Chilo spp., Choristoneura spp. , Clysia ambiguella, Cnaphalocrocis spp. , Cnephasia spp., Cochylis spp., Coleophora spp., Crocidolomia binotalis, Cryptophlebia leucotreta, Cydia spp., Diatraea spp., Diparopsis castanea, Earias spp., Ephestia spp., Eucosma spp., Eupoecilia ambiguella, Euproctis spp., Euxoa spp., Grapholita spp., Hedya nubiferana, Heliothis spp., Hellula undalis, Hyphantria cunea, Keiferia lycopersicella, Leucoptera scitella, Lithocollethis spp., Lobesia botrana, Lymantria spp., Lyonetia spp., Malacosoma spp., Mamestra brassicae, Manduca sexta, Operophtera spp., Ostrinia nubialis, Pammene spp., Pandemis spp., Panolis flammea, Pectinophora gosssypiella, Phthorimaea operculella, Pieris rapae, Pieris spp., Plutella xylostella, Prays spp., Scirpophaga spp., Sesamia spp., Sparganothis spp., Spodoptera spp., Synanthedon spp., Thaumetopoea spp., Totrix spp., Trichoplusia ni and Yponomeuta spp.;

a Coleoptera rendhez tartozók, ilyenek például: Agriotes spp., Anthonomus spp., Atomaria lineáris, Chaetocnema tibialis, Cosmopolites spp., Curculio spp., Dermestes spp., Diabrotica spp., Epilachna spp., Eremnus spp., Leptinotarsa decemlineata, Lissorhoptrus spp., Melolontha spp., Orycaephilus spp., Otiorhynchus spp., Phlyctinus spp., Popillia spp., Psylliodes spp., Rhizopertha spp., Scarabeidae, Stiphilus spp., Sitotroga spp., Tenebrio spp., Tribolium spp. és Trogoderma spp. ;

az Orthoptera rendhez tartozók, ilyenek példul a Blatta spp, Blattella spp., Gryllotalpa spp., Leucophaea maderae, Locusta spp., Periplaneta spp. és Schistocerca spp.;

az Isootera rendhez tartozók, ilyen például a Reticulitermes spp. ;

a Psocoptera rendhez tartozók, ilyen például a Lipscelis spp. ;

az Anoplura rendhez tartozók, ilyenek például a Haematopinus spp., Linognathus spp., Pediculus spp., Pemphigus spp. és Phylloxera spp.;

a Mallophacra rendhez tartozók, ilyenek példul a Damalinea spp. és a Trichodectes spp.;

a Thysanoptera rendhez tartozók, ilyenek például a Frankliniella spp., Hercinothrips spp., Taeniothrips spp., Thrips palmi, Thrips tabaci és Scirtothrips aurantii;

a Heteroptera rendhez tartozók, ilyenek például a Cimex spp., Distantiella theobroma, Dysdercus spp., Euchistus spp., Eurygaster spp., Leptocorisa spp., Nezara spp., Piesma spp., Rhodnius spp., Sahlbergella singularis, Scotinophara spp. és Triatoma spp.;

a Homoptera rendhez tartozók, ilyenek például az Aleurothrixus floccosus, Aleyrodes brassicae, Aonidiella spp., Aphididae, Aphis spp., Aspidiotus spp., Bemisia tabaci, Ceroplaster spp., Chrysomphalus aonidium, Chrysomphalus dictyospermi, Coccus hesperidum, Empoasca spp., Eriosoma larigerum, Erythroneura spp., Gascardia spp., Laodelphax spp., Lecanium corni, Lepidosaphes spp., Macrosiphus spp., Myzus spp., Nephotettix spp., Nilaparvata spp., Paratoria spp., Pemphigus spp., Planococcus spp., Pseudaulacaspis spp., Pseudococcus spp., Psylla spp., Pulvinaria aethiopica, Quadraspidiotus spp., Rhopalosiphum spp., Saissetia spp., Scaphoideus spp., Schizaphis spp., Sitobion spp., Trialeurodes vaporariorum, Trioza erytreae és Unaspis citri;

a Hvmenoptera rendhez tartozók, ilyenek például az Acromyrmex, Atta spp., Cephus spp., Diprion spp., Diprionidae, Gilpinia polytoma, Hoplocampa spp., Lasius spp., Monomorium pharaonis, Neodiprion spp., Solenopsis spp. és Vespa spp.;

a Diptera rendhez tartozók, ilyenek például az Aedes spp. Antherigona soccata, Bibio hortulanus, Calliphora erythrocephala, Ceratitis spp., Chrysomyia spp., Culex spp., Cuterebra spp., Dacus spp., Drosophila melanogaster, Fannia spp., Gastrophilus spp., Glossina spp., Hypoderma spp., Hyppobosca spp., Liriomyza spp., Lucilia spp., Melanagromyza spp., Musca spp., Oestrus spp., Orseolia spp., Oscinella frit, Pegomyia hyoscyami, Phorbia spp., Rhagoletis pomonella, Sciara spp., Stomoxys spp., Tabanus spp., Tannia spp. és Tipula spp.;

a Siphonaptera rendhez tartozók, például Ceratophyllus spp. és Xenopsylla cheopis;

az Acarina rendhez tartozók, ilyenek az Acarus siro, Aceria sheldoni, Aculus schlechtendali, Amblyomma spp., Argas spp., Boophilus spp., Brevipalpus spp., Bryobia praetiosa, Calipitrimerus spp., Chorioptes spp., Dermanyssus gallinae, Eotetranychus carpini, Eriophyes spp., Hyalomma spp., Ixodes spp., Olygonychus pratensis, Ornithodoros spp., Panonychus spp., Phyllocoptruta oleivora, Polyphagotarsonemus latus,

Psoroptes spp., Rhipicephalus spp., Rhizoglyphus spp., Sarcoptes spp., Tarsonemus spp. és Tetranychus spp.; és a Thysanura rendhez tartozók, ilyen például a Lepisma saccharina.

A találmány szerinti (I) és (la) képletű vegyületek ezért nagyon alkalmasak a rovarok és pókok csoportjába tartozó kártevők irtására gyapot-, gyümölcs-, kukorica-, szójaültetvényeken, zöldségtáblákon és citromfélék esetében. Különösen növényevő rovarok, így Anthonomus grandis, növényevő rovarok, például a Spodoptera littoralis vagy Heliothis virescens lárvái, szívó rovarok, így például Aphis craccivora vagy Bemisia tabaci és talajban található rovarok, így Diabrotica balteata irtására használhatók.

Az (I) és (la) képletű vegyületek bevonószerként is alkalmazhatók magok (gyümölcs, gumó, gabona) és vágott növények kártékony rovaroktól és a talajban található fitopatogén rovaroktól való megvédésére.

A találmány így olyan készítményekre, amelyek hatóanyagként (I) vagy (la) képletű vegyületet tartalmaznak, különösen haszonnövények védelmére alkalmas készítményekre és ezeknek a mezőgazdaság területén, így a növénytermesztésben, kertészetben és erdőgazdaságban vagy hasonló területen való alkalmazására is kiterjed.

A találmány magába foglalja a fenti készítmények előállítását is, amely abból áll, hogy a hatóanyagot az alábbiakban leírt anyagok vagy anyagcsoportok közül eggyel vagy többel homogénen elkeverjük, és/vagy összeőröljük. A formálási lépést kiegészíthetjük dagasztással, granulálással (granulátum esetében) és, kívánt esetben préseléssel (szemcsék esetében). A találmány növények kártevőinek irtására és/vagy emlősökben férgek okozta betegségek megelőző és/vagy gyógyító kezelési eljárására is vonatkozik, amelynek megfelelően egy találmány szerinti (I) vagy (la) képletű vegyületet vagy valamely találmány szerinti készítményt a kártevő tartózkodási helyére felviszünk.

Az antelmintikummal védendő célállat minden melegvérű állat, amely férgekkel fertőzhető, különösen minden emlős állat, ezen belül emberek, és madarak, de különösen házi- és tenyésztett állatok és dédelgetett háziállatok, így tehenek, lovak, szamarak, juhok, kecskék, lámák, tevék, szarvasok, sertések, kutyák, macskák, nyulak, csirkék, pulykák, kacsák, libák, fácánok, foglyok és hasonlók, valamint minden prémje miatt tenyésztett állat. Természetesen fertőzött állatkerti állatok is sikeresen kezelhetők.

Mint ismeretes, a melegvérű állatokban előforduló élősködők közül különösen a férgek okoznak nagy kárt a megfertőzött állatban. A férgek által okozott kár nagyon nagy gazdasági jelentőségű lehet ott, ahol az állatállományban féreggel kapcsolatos rendellenességek krónikus és különösen járványos formában lépnek fel. A kár a megbetegedett állatban többek között úgy jelentkezik, hogy a produktivitás, a más betegségekkel szembeni ellenállóképesség csökken, az elhullás nő. Különösen veszélyes rendellenességeket idéznek elő azok a férgek, amelyek a gyomor-bél trak tuson és más szerveken élősködnek, és a számos megelőző intézkedés ellenére aránylag gyakran fordulnak elő kérődzőkben, így tehenekben, juhokban és kecskékben, valamint lovakban, sertésekben, baromfifélékben, szarvasokban, kutyákban és macskákban.

A jelen leírásban a férgek kifejezés különösen a gyomor- és béltraktusban és más szervekben (például májban, tüdőben, vesében, nyirokerekben, vérben stb.) élősködő Platyhelminthes törzsébe tartozó galandférgekre (cesztódákra), mételyekre (trematódákra) , és a Nematohelminthes törzsébe tartozó fonálférgekre (nematódákra) és rokon fajokra, azaz a laposférgekre, szívóiérgekre és hengeresférgekre utal.

Az egyik legsürgetőbb feladat ezért olyan gyógyászati készítmények rendelkezésre bocsátása, amelyek alkalmasak a férgek minden fejlődési stádiumában való irtására és az ezekkel a férgekkel való megfertőződés megelőzésére.

Noha számos antelmintikus hatású anyag ismert, amelyet már különféle féregfajok irtására ajánlottak, ezek nem teljesen kielégítőek, vagy azért, mert az elviselhető dózisban nem lehet kihasználni a teljes aktivitási spektumukat, vagy a terápiásán hatásos dózisban nemkívánatos mellékhatást fejtenek ki vagy nemkívánt tulajdonságokat mutatnak. Ilyen vonatkozásban a napjainkban bizonyos anyagcsoportokkal szemben egyre inkább jelentkező rezisztencia is fokozott jelentőséggel bír. Az Albendazol, amelyet például az irodalomban ismertetnek [1 464 326 számú nagy-britanniai szabadalmi leírás; Am. J. Vet. Rés. 3.8, 1425-1426 (1977);

• * · ·

- 20 Am. J. Vet. Rés. 37, 1515-1516 (1976); Am. J. Vet. Rés. 38, 807-808 (1977); Am. J. Vet. Rés. 38, 1247-1248 (1977)] csak korlátozott spektrumú antelmintikus hatást fejt ki kérődzőkben. A benzimidazol-rezisztens fonálférgekkel és kifejlett májmétellyel· szemben a hatása egyáltalán nem megfelelő, mivel az utóbbi, különösen a kór okozása szempontjából fontos éretlen, vándorló formájára nem hat a gazdaállat által elviselhető dózisban. Teljesen új alapszerkezettel rendelkező vegyületekkel számos rezisztencia-probléma elkerülhető.

A jelen találmány körébe tartozó, fitopatogén kártevőkkel szemben védendő növények közül például a következő fajokat említjük: gabonafélék (búza, árpa, rozs, zab, rizs, kukorica, cirok), répafélék (cukorrépa és takarmányrépa), magvas, csonthéjas és lágy gyümölcsök (alma, körte, szilva, őszibarack, mandula, cseresznye, földieper, málna és szeder), hüvelyes növények (bab, lencse, borsó, szója), olajnövények (repce, mustár, mák, olajfa, napraforgó, kókuszdió, ricinus, kakaóbab, földimogyoró), uborkafélék (uborka, tök, dinnye), rostnövények (gyapot, len, kender, juta), citrusfélék (narancs, citrom, grapefruit, mandarin), zöldségek (spenót, fejes saláta, spárga, káposzta, répa, hagyma, paradicsom, burgonya, paprika), borostyánfélék (avokádó, cimetfa, kámfor) vagy olyan növények, mint a dohány, dió, kávé, padlizsán, cukornád, tea, bors, szőlő, komló, banán, természetes gumiültetvények, valamint dísznövények.

Az (I) és (la) képletü vegyületeket általában készítmények formájában alkalmazzuk, és a kezelendő termőterületre vagy növényre további vegyületekkel egyidőben vagy egymást követően vihetjük fel. Ezek a további vegyületek lehetnek növényi tápanyagok, mikrotápanyag donorok vagy más, a növény növekedését befolyásoló készítmények. Lehetnek továbbá herbicidek, valamint inszekticidek, fungicidek, baktericidek, nematicidek, molluscicidek vagy ezen készítmények közül néhánynak a keverékei, kívánt esetben további hordozókkal, felületaktív anyagokkal vagy más alkalmazást elősegítő adjuvánssal együtt, amelyeket a formálási technológiában rendszerint használnak.

A találmány szerinti (I) és (la) képletű vegyületek jó peszticid hatását mutatja, hogy az említett kártevők legalább 50-60%-át elpusztítják.

A találmány szerinti vegyületek és a vegyületeket tartalmazó készítmények állati kártevők elleni hatása lényegesen szélesíthető és az uralkodó körülményekhez igazítható azáltal, hogy más inszekticideket és/vagy akaricideket adunk hozzájuk. Ilyen alkalmas adalékokra példaként az alábbi vegyületcsoportok képviselőit említjük: szerves foszforvegyületek, nitro-fenolok és származékaik, formamidinek, karbamidok, karbamátok, piretroidok, klórozott szénhidrogének és Bacillus thuringiensis készítmények.

Az (I) és (la) képletű vegyületeket módosítatlan formában vagy előnyösen a formálási technológiában szokásosan használt adjuvánsokkal együtt alkalmazzuk, és ezért ismert módon például emulgeálható koncentrátumokká, közvet lenül permetezhető vagy hígítható oldatokká, híg emulziókká, nedvesíthető porokká, oldódó porokká, porozószerekké, granulákká alakítjuk vagy polimer anyagba kapszulázzuk. Mint ahogy a készítményeket, az alkalmazás módszereit, így a permetezést, porlasztást, porozást, szórást vagy öntést is az elérni kívánt célnak és az uralkodó viszonyoknak megfelelően választjuk meg.

Az (I) vagy (la) képletű vegyületek vagy valamely, legalább egy fenti vegyületet tartalmazó agrokémiai készítmény alkalmazásának egyik előnyös módszere a levélre való felvitel. Az alkalmazás száma és az alkalmazási arány a megfelelő kórokozóval való fertőzés veszélyétől függ. Azonban, az (I) és (la) képletű vegyületek a talajon át, a gyökereken keresztül (szisztémás hatás) is bejuthatnak a növénybe, ha a növény helyét folyékony készítménnyel átitatjuk, vagy, ha a vegyületet szilárd formában, például granulátumként (talajon való alkalmazás) a talajra visszük fel. Az áztatásos rizsföldeken az ilyen granulátum mért menynyiségét vihetjük fel az elöntött rizsföldre. Az (I) és (la) képletű vegyületeket azonban a magokon bevonatként is alkalmazhatjuk, oly módon, hogy a magokat a vegyületet tartalmazó folyadékkal átitatjuk vagy szilárd készítménnyel bevonjuk. A készítményeket, azaz hatóanyagként egy találmány szerinti vegyületet vagy azok kombinációját és kívánt esetben szilárd vagy folyékony adjuvánst tartalmazó készítményeket ismert módon állítjuk elő, például úgy, hogy a hatóanyagokat szaporítószerekkel, például oldószerekkel, szilárd hordozókkal, és kívánt esetben felületaktív anyagokkal homogénen keverjük és/vagy őröljük.

Alkalmas oldószerek az aromás szénhidrogének, előnyösen a 8-12 szénatomos alkil-benzol frakciók, például xilol elegyek vagy alkilezett naftalinszármazékok, alifás vagy cikloalifás szénhidrogének, így ciklohexán, paraffinok vagy tetrahidronaftalin, alkoholok, így etanol, propanol vagy butanol és glikolok, azok éterei és észterei, így például a propilénglikol, dipropilénglikol-éter, etilénglikol, etilénglikol-monometil- vagy -monoetil-éter, ketonok, így a ciklohexanon, izoforon vagy diaceton-alkohol, erősen poláros oldószerek, így N-metil-2-pirrolidon, dimetil-szulfoxid vagy dimetil-formamid, vagy víz, növényi olajok, így repceolaj, ricinusolaj, kókuszdióolaj vagy szójaolaj; és kívánt esetben szilikonolaj ok.

Az alkalmazott szilárd hordozók például porok és diszpergálható porok esetében általában a természetes ásványi töltőanyagok, többek között a kalcit, talkum, kaolin, montmorillonit vagy attapulgit. A fizikai tulajdonságok javítására nagydiszperzitású kovasavat vagy nagydiszperzitású abszorbens polimereket is alkalmazhatunk. Megfelelő granulált adszorbens hordozók a porózus típusok, például a habkő, téglatörmelék, szepiolit vagy bentonit; és alkalmas nem adszorbens hordozók a kalcit és a homok. Emellett nagyszámú szervetlen vagy szerves granulált anyag használható, különösen dolomit vagy porított növényi maradékok.

Megfelelő felületaktív vegyületek az (I) vagy (la) képletű vegyületek más inszekticidekkel vagy akaricidekkel és nemionos, kationos és/vagy anionos, jó emulgeáló, diszpergáló és nedvesítő tulajdonságú felületaktív anyagokkal való kombinációi. A felületaktív anyag-on a felületaktív anyagok keverékeit is értjük.

Mind az úgynevezett vízoldható szappanok, mind a vízoldható szintetikus felületaktív vegyületek alkalmas anionos felületaktív anyagok.

Megfelelő szappanok az alkálifémsók, alkáli-földfémsók vagy 10-22 szénatomos zsírsavak helyettesítetlen vagy helyettesített ammóniumsói, például az olaj sav vagy sztearinsav vagy kókuszolajból vagy tallolajból kapható természetes zsírsavkeverékek nátrium- vagy káliumsói. A felületaktív anyagok között még a zsírsavak metil-taurin-sóit is megemlíthetjük.

Gyakrabban azonban úgynevezett szintetikus felületaktív anyagokat alkalmazunk, különösen zsírszulfonátokat, zsírszulfátokat, szulfonált benzimidazol-származékokat vagy alkil-aril-szulfonátokat.

A zsírszulfonátok vagy zsírszulfátok általában alkálifémsók, alkáli-földfém-sók, helyettesítetlen vagy helyettesített ammóniumsók formájában vannak jelen, és általában 8-22 szénatomos alkilcsoportot tartalmaznak, amely magába foglalja az acilcsoport alkilrészét is, ilyenek például a ligninszulfonsav, dodecil-szulfát vagy természetes zsírsavakból kapott zsíralkoholszulfátok keverékének nátriumvagy kalciumsója. Ezen vegyületek körébe tartoznak a szulfátéit vagy szulfonált zsíralkohol-etilén-oxid adduktumok is. A szulfonált benzimidazol-származékok előnyösen 2 szulfonsavcsoportot és egy körülbelül 8-22 szénatomos zsírsavcsoportot tartalmaznak. Az alkil-aril-szulfonátokra példaként a dodecil-benzolszulfonsav, dibutil-naftalinszulfonsav vagy a naftalinszulfonsav és formaldehid kondenzátum nátrium-, kalcium- vagy trietanol-amin-sóit említhetjük. A megfelelő foszfátsók, például a p-nonil-fenol 4-14 mól etilén-oxiddal alkotott adduktja foszforsavas észterének sói vagy foszfolipidek szintén alkalmasak.

Nemionos felületaktív anyagok különösen az alifás vagy cikloalifás alkoholok, telített vagy telítetlen zsírsavak és alkil-fenolok poliglikol-éter-származékai, amelyek 3-30 glikol-éter csoportot és az alifás szénhidrogénrészben 8-20 szénatomot, az alkil-fenolok alkilrészében 6-18 szénatomot tartalmaznak. További megfelelő, nemionos felületaktív anyagok a polietilén-oxid és az alkilláncban 1-10 szénatomos polipropilénglikol, etilén-diamino-polipropilén-glikol és alkil-polipropilénglikol vízoldható adduktumai, amelyek 20-250 etilénglikol-éter-csoportot és 10-100 propilénglikol-éter-csoportot tartalmaznak. Ezekben a vegyületekben általában egy propilénglikol egységre számítva 1-5 etilénglikol egység található.

A nemionos felületaktív anyagok jellemző példái a nonil-fenol-polietoxi-etanolok, ricinusolaj-poliglikol-éterek, polipropilén/polietilén-oxid adduktumok, tributilfenoxi-polietoxi-etanol, polietilénglikol és oktil-fenoxi

-polietoxi-etanol. A poli(oxi-etilén)-szorbitán zsírsavészterei, például a poli(oxi-etilén)-szorbitán-trioleát szintén megfelelő nemionos felületaktív anyag.

Kationos felületaktív anyagok közül különösen a kvaterner ammóniumsókat emelhetjük ki, amelyek N-helyettesítoként legalább egy 8-22 szénatomos alkilcsoportot és további helyettesítőként helyettesítetlen vagy halogénatommal helyettesített kevés szénatomos alkilcsoportot, benzilcsoportot vagy hidroxi-(kevés szénatomos)alkil-csoportot tartalmazhatnak. Ezek a sók előnyösen halogenidek, metil-szulfátok vagy etil-szulfátok, ilyen például a szteariltrimetil-ammónium-klorid vagy benzil-di(2-klór-etil)-etil-ammónium-bromid.

A formálási technológiában szokásosan alkalmazott felületaktív anyagok például az alábbi közleményekben kerültek ismertetésre:

McCutcheon¹s Detergents and Emulsifiers Annual, MC Publishing Corp., Glen Rock, NJ, USA, 1988,

H. Stache, Tensid-Taschenbuch, 2nd edition, C.Hanser Verlag, Munich, Vienna, 1981,

M. and J. Ash, Encyclopedia of Surfactants, Vol. I-III, Chemical Publishing Co., New York, 1980-1981.

A haszonnövények védelmére alkalmazható peszticid készítmények általában 0,1-99%, különösen 0,1-95% (I) vagy (la) képletű vegyületet tartalmaznak más inszekticiddel vagy akariciddel, 1-99,9% szilárd vagy folyékony adjuvánssal és 0-25%, különösen 0,1-25% felületaktív anyaggal együtt. Míg a kereskedelmi termékeket előnyösen koncentrátummá formálják, a végfelhasználó általában híg készítményeket használ, amelyeknek hatóanyagtartalma jelentősen alacsonyabb. A jellemző alkalmazási koncentráció 0,1 és 1000 ppm, előnyösen 0,1 és 500 ppm közötti. Haszonnövény védelme esetén az alkalmazási arány 1 és 2000 g, előnyösen 10 és 1000 g, különösen 20 és 600 g közötti mennyiségű hatóanyag/hektár kezelendő terület.

A melegvérű állatoknak a férgek irtására a hatóanyagot előnyösen oldatok, emulziók, szuszpenziók, takarmányadalékok, porok és tabletták, többek között pezsgőtabletták, bóluszok, kapszulák és mikrokapszulák formájában adagoljuk, szükségképpen figyelembe véve a formálási adjuvánsok fiziológiai elfogadhatóságát.

Tabletták és bóluszok esetében alkalmas kötőanyagok a kémiailag módosított természetes polimer anyagok, amelyek vízben vagy alkoholban oldódnak, ilyenek a keményítő-, cellulóz- vagy fehérjeszármazékok, például a metil-cellulóz, karboxi-metil-cellulóz, etil-hidroxi-etil-cellulóz, fehérjék, így a kazein, zselatin és hasonlók és szintetikus polimerek, mint például a poli(vinil-alkohol), poli(vinil-pirrolidon) stb. A tabletták töltőanyagokat (például keményítőt, mikrokristályos cellulózt, cukrot, laktózt stb.), síkosítóanyagokat és szétesést elősegítő anyagokat is tartalmaznak.

Amennyiben az antelmintikus készítményeket takarmánykoncentrátumokká formáljuk, a hordozóanyag például takarmány, takarmány őrlemény vagy fehérjekoncentrátum lehet. A hatóanyag mellett az ilyen takarmánykoncentrátumok vagy készítmények adalékokat, vitaminokat, antibiotikumokat, kemoterápiás szereket vág más peszticideket, különösen bakteriosztatikumokat, fungisztatikumokat vagy coccidiosztatikumokat, vagy hormonkészítményeket, azaz anabolikus hatású anyagokat, vagy a növekedést elősegítő, a vágásra szánt állatok húsminőségére hatást gyakorló vagy a szervezet számára más módon hasznos anyagokat is tartalmazhatnak. Ha a készítményt vagy az (I) képletü hatóanyagokat a takarmányhoz vagy az itató vízhez adjuk, akkor a takarmányban vagy az elkészített itatóvízben a hatóanyag koncentrációja előnyösen kb. 0,0005 és 0,02 tömeg% (5-200 ppm) között változik.

A találmány szerinti készítményt a kezelendő állatnak orálisan, parenterálisan vagy szubkután adagolhatjuk oldat, emulzió, szuszpenzió, por, tabletta bólusz és kapszula formájában.

A találmány szerinti antelmintikus készítmény általában 0,1 és 99 tömeg%, előnyösen 0,1 és 95 tömeg% között változó mennyiségű (I) , (la) képletü vegyületet vagy a vegyületek keverékét tartalmazza, előnyösen 99,9 és 1 tömeg%, előnyösen 99,8 és 5 tömeg% közötti mennyiségű szilárd vagy folyékony adjuvánssal, ezen belül 0 és 25 tömeg%, előnyösen 0,1 és 25 tömeg% felületaktív anyaggal együtt.

Míg a kereskedelmi termékek előnyösen koncentrátumokként kerülnek forgalomba, a végfelhasználó általában híg készítményeket alkalmaz.

A készítmények további segédanyagokat, így stabilizátorokat, habzásgátlókat, viszkozitásszabályzókat, kötőanyagokat, tapadást növelő szereket, valamint más, speciális hatások eléréséhez szükséges komponenseket is tartalmazhatnak.

A jelen találmány olyan antelmintikus készítményekre is vonatkozik, amelyeket a végfelhasználók alkalmaznak.

A találmány szerinti kártevőirtásra alkalmas minden eljárásban és a találmány szerinti minden peszticid készítményben az (I) általános képletű vegyület bármely szerkezeti konfigurációjában, ezek elegyeként vagy sói alakjában használható.

A találmány kiterjed a melegvérű állatok, különösen a haszonállatok, házi és kedvenc állatok élősködő férgekkel szembeni megelőző védelmére alkalmas eljárásra is, amely abban áll, hogy az (I) általános képletű vegyületet vagy a vegyületet hatóanyagként tartalmazó készítményeket takarmány- vagy itatóvízadalék formájában, vagy szilárd vagy folyékony formában orálisan, injekció alakjában vagy parenterálisan beadjuk. A találmány tárgyát képezi a találmány szerinti (I) képletű vegyületek valamely fenti eljárásban való alkalmazása is.

Az alábbi példák csupán a találmány szemléltetésére szolgálnak, annak korlátozása nélkül.

Előnyös készítmények különösen az alábbi összetételűek (tömeg%-ban megadva):

•· ···« ··»· «·« «·*

- 30 Emulqeálható koncentrátumok: tiangazol előnyösen 5-20% felületaktív anyag:

előnyösen 10-20% folyékony hordozó:

előnyösen 70-85%

1-90%,

1-30%,

5-94%,

Porozószerek:

tiangazol előnyösen 0,1-1% szilárd hordozó:

0,1-10%,

99,9-90%, előnyösen 99,9-99%

Szuszpenziókoncentrátumok:

tiangazol előnyösen 10-50% víz:

előnyösen 88-30% felületaktív anyag:

előnyösen 2-30%

5-75%,

94-24%,

1-40%,

Nedvesíthető porok: tiangazol előnyösen 1-80% felületaktív anyag: előnyösen 1-15%

0,5-90%,

0,5-20%, szilárd hordozó 5-95%, előnyösen 15-90%

Granulátum:

tiangazol 0,5-30%, előnyösen 3-15% szilárd hordozó 99,5-70%, előnyösen 97-85%.

A készítmények további adalékanyagként stabilizátorokat, például növényi olajokat, epoxidált növényi olajokat (epoxidált kókuszdióolajat, repceolajat vagy szójaolajat), habzásgátlókat, például szilikonolajat, konzerválószereket, viszkozitásszabályzókat, kötőanyagokat, tapadást elősegítő anyagokat, valamint tápanyagokat vagy más, speciális célok eléréséhez szükséges hatóanyagokat tartalmazhatnak.

A következő példák a találmány bemutatására szolgálnak. A találmányt nem korlátozzák.

D. A biológiai hatás előzetes vizsgálata

Az antibiotikus hatást agar diffúziós vizsgálattal határoztuk meg a gátolt terület átmérője, vagy sorozathígításos vizsgálatban a tenyészet sűrűsége alapján. A tiangazol néhány gomba, például a Mucor hiemalis, Botrytis cinerea, Gibberella fujikuroi, Rhizopus arrhizus és Pythium debaryanum növekedését gátolja. Az Ustilago maydis esetében a MIC (minimális gátló koncentráció) 3,2 mikrog/ml. A szar vas szív szubmitochondriális részecskéiben a tiangazol gátolja a NADH oxidációt. Differenciál-spektroszkópiai vizsgálatok szerint a tiangazol hatásának helye az eukarióta légzési lánc I komplexe (NADH₂: ubikinon-oxidoreduktáz).

E. Formálási példák

E.1.Emulgeálható koncentrátumok	a)	b)	c)
(la) képletű vegyület	25%	40%	50%
kalcium-dodecil-benzolszulfonát	5%	8%	6%
ricinusolaj-polietilénglikol-éter
(36 mól etilén-oxid)	5%	-	-
tributil-fenol-polietilénglikol-éter
(30 mól etilén-oxid)	-	12%	4%
ciklohexanon	-	15%	20%
xilolelegy	65%	25%	20%

Az ilyen koncentrátumból vízzel való hígítással bármilyen koncentrációjú emulzió előállítható.

E.2. Emulgeálható koncentrátumok	a)	b)	c)
(la) képletű vegyület	10%	8%	60%
oktil-fenil-polietilénglikol-éter
(4-5 mól etilén-oxid)	3%	3%	2%
kalcium-dodecil-benzolszulfonát	3%	4%	4%

ricinusolaj-polietilénglikol-éter

(35 mól etilén-oxid)	4%	5%	4%
ciklohexanon	30%	40%	15%
xilolelegy	50%	40%	15%
Az ilyen koncentrátumból	vízzel való hígítással	bármi-

lyen kívánt koncentrációjú emulzió előállítható.

E.3. Szuszpenziőkoncentrátum (la) képletű vegyület 40% etilénglikol 10% nonil-fenol-polietilénglikol-éter (15 mól etilén-oxid) 6% nátrium-ligninszulfonát 10% karboxi-metil-cellulóz 1%

37%-os vizes formaldehidoldat 0,2% szilikonolaj 75%-os vizes emulzió formáj ában 0,8% víz 32%

A finomra őrölt hatóanyagot az adjuvánsokkal bensőségesen összekeverjük, így olyan szuszpenziókoncentrátumot kapunk, amelyből vízzel való hígítással bármilyen kívánt koncentrációjú szuszpenzió előállítható.

E.4. Vízben diszpergálható porkeverékek	a)	b)	c)
(la) képletű vegyület	25%	50%	75%
nátrium-ligninszulfonát	5%	5%	-
olaj sav	3%	-	5%
nátrium-diizobutil-naftalinszulfonát	-	6%	10%
oktil-fenol-polietilénglikol-éter
(7-8 mól etilén-oxid)	-	2%	-
nagydiszperzitású kovasav	5%	10%	10%
kaolin	62%	27%	-

A hatóanyagot az adjuvánsokkal bensőségesen összekeverjük és a keveréket alkalmas malomban alaposan megőröljük, így olyan nedvesíthető port kapunk, amelyből vízzel való hígítással bármilyen kívánt koncentrációjú szuszpenzió előállítható.

E.5. Porozószerek	a)	b)
(la) képletű vegyület	2%	5%
nagydiszperzitású kovasav	1%	5%
talkum	97%	-
kaolin	-	90%
A hordozókat és a hatóanyagot	bensőségesen	öss:
jük, a keveréket megőröljük, így	felhasználásra
porozószereket kapunk.
E.6.Granulátum	a)	b)
(la) képletű vegyület	5%	10%
kaolin	94%	-
nagydiszperzitású kovasav	1%	-
attapulgit	-	90%

alkalmas zekeverA hatóanyagokat metilén-dikloridban oldjuk, az oldatot a hordozóra permetezzük, és aztán az oldószert vákuumban lepároljuk. Ezt a granulátumot állati takarmánnyal keverhetjük .

E.7 Granulátum

(la) képletű vegyület	10%
nátrium-ligninszulfonát	2%
karboxi-metil-cellulóz	1%
kaolin	87%

A hatóanyagot az adjuvánsokkal összekeverjük és megőröljük. A keveréket vízzel nedvesítjük, majd extrudáljuk, végül levegőáramban szárítjuk.

E.8. Granulátum

(la) képletű vegyület	3%
polietilénglikol (móltömeg 200)	3%
kaolin	94%
A finoman elporított hatóanyagot	a polietilénglikollal

nedvesített kaolinra egyenletesen felvisszük. Ily módon pormentes bevont granulátumot kapunk.

E.9. Tabletták vagy bóluszok

I. (la) képletű vegyület	33,0%
metil-cellulóz	0,80%
nagydiszperzitású kovasav	0,80%
kukoricakeményítő	8,40%
II.kristályos laktóz	22,50%
kukoricakeményítő	17,00%
mikrokristályos cellulóz	16,50%
magnézium-sztearát	1,00%

I. A metil-cellulózt vízzel elkeverjük, és duzzadni hagyjuk; ezután a kovasavat belekeverve homogén szuszpenziót állítunk elő. A hatóanyagot és a kukoricakeményítőt öszszekeverjűk, a vizes szuszpenziót ehhez a keverékhez adjuk, és az egészet összegyúrjuk. Az így kapott masszát 12M-es szitán granuláljuk, majd szárítjuk.

II. A négy segédanyagot alaposan összekeverjük.

III. Az I és II lépésben kapott előkeverékeket összekeverjük, és tablettákká vagy bóluszokká préseljük.

E.10, Injektálható készítmények alfa. Olajos vivőanvaqgal (lassú hatóanvagfelszabadulás) (la) képletű vegyület 0,1-1,0 g földimogyoróolajjal kiegészítve 100 ml-re (la) képletű vegyület 0,1-1,0 g szézámolajjal kiegészítve 100 ml-re

Előállítás: A hatóanyagot az olaj egy részében keverés, és szükség esetén gyenge melegítés közben feloldjuk. Hűtés után az oldatot a kívánt térfogatra egészítjük ki, és egy alkalmas, 0,22 mikrométeres membránszűrőn sterilre szűrjük.

béta: Vízzel elegyedő oldószerrel (közepes sebességű hatóanvaqfelszabadulás)

(la) képletű vegyület

0,1-1,0 g

4-(hidroxi-metil)-1,3-dioxolán

(glicerin-formai)	40 g
1,2-propán-diollal kiegészítve	100 ml-re
(la) képletű vegyület	0,1-1,0 g
glicerin-dimetil-ketál	40 g
1,2-propán-diollal kiegészítve	100 ml-re

Előállítás: A hatóanyagot az oldószer egy részében keverés közben feloldjuk, majd az oldatot a kívánt térfogatra feltöltjük, és alkalmas, 0,22 mikrométeres membránszűrőn át sterilre szűrjük.

gamma. Vizes oldható készítmény (gyors hatóanvaqfelszabadulás) (la) képletű vegyület

0,1-1,0 polietoxilezett ricinusolaj (40 etilén-oxid egység)

1,2-propán-diol benzil-alkohol injekciós vízzel kiegészítve

100 ml-re (la) képletű vegyület

0,1-1,0 g polietoxilezett szorbitánmonooleát (20 etilén-oxid egység)

4-(hidroxi-metil)-1,3-dioxolán (glicerin-formai) benzil-alkohol injekciós vízzel kiegészítve g

100 ml-re

Előállítás: A hatóanyagot az oldószerben és felületaktív anyagban feloldjuk, vízzel a kívánt térfogatra kiegészítjük, majd egy alkalmas, 0,22 mikrométer pórusátmérőjű membránszűrőn sterilre szűrjük.

A vizes rendszereket előnyösen orális és/vagy intraruminális adagolásra is használhatjuk.

F.Biológiai példák

Az antelmintikus hatást az alábbi vizsgálatokkal mutatjuk ki:

F.l. Vizsgálatok a Haemonchus contortus és Trichostronavlus colubriformis falhoz tartozó fonálférgekkel fertőzött juhokkal

A tiangazolt szuszpenzió formájában gyomorszonda segítségével vagy intraruminálisan injektálva adjuk be a juhoknak, amelyeket korábban mesterségesen fonálférgekkel, így Haemonchus contortus-szal és Trichostrongylus colubriformis-szal fertőztünk. Minden vizsgálatban dózisonként 1-3 állatot használtunk. Minden juhot csak egyszer, egyetlen dózissal kezeltünk.

Az első értékelést az alapján végeztük, hogy összehasonlítottuk a féreg petéinek számát a juh kezelés előtti és kezelés utáni ürülékében.

A kezelés után 7-10 nappal a juhot leöltük, és felboncoltuk. Az értékelés oly módon történt, hogy megszámoltuk a kezelés után a bélben maradó férgeket. Egyidőben és hasonló módon fertőzött, de nem kezelt juhot használtunk kontrollként vagy összehasonlításhoz.

A fonálféreggel történt fertőzés nagy mértékben csökkent a tiangazol hatására ebben a vizsgálatban. Például 20 mg hatóanyag/kg testtömeg dózis alkalmazásakor lényegében teljesen megszűnt a fonálférges fertőzés.

F.2. Vizsgálat Moniezia benedeni faihoz tartozó galandféreggel fertőzött juhokkal

A hatóanyagot szuszpenzió formájában, gyomorszonda segítségével vagy intraruminálisan injektálva adjuk be a juhoknak, amelyeket korábban mesterségesen galandféreggel, így Moniezia benedeni-vel fertőztünk. Minden vizsgálatban dózisonként 1-3 állatot használtunk. Minden juhot csak egyszer, egyetlen dózissal kezeltünk. A kezelés után 7-10 nappal a juhot leöltük, és felboncoltuk. Az értékelés oly módon történt, hogy megszámoltuk a kezelés után a bélben maradó férgeket. Egyidőben és hasonló módon fertőzött, de nem kezelt juhot használtunk kontrollként vagy összehasonlításhoz. Ebben a vizsgálatban a tiangazol 20 mg/kg testtömeg-nél kisebb dózisban a galandféreg-fertőzést megközelítőleg 90%-kal csökkentette.

F.3.Dermanvssus gallinae elleni hatás

2-3 ml, 100 ppm vizsgálandó vegyületet és megközelítő leg 200 darab, különböző fejlődési stádiumban lévő atkát egy tetején nyitott üvegtartályba helyeztünk.

vattacsomóval bedugtuk, 10 percig ráztuk,

Az edényt egy amíg az atkák teljesen átnedvesedtek, és aztán egy rövid időre felfordítottuk, hogy a megmaradt vizsgálandó oldatot a vatta felszívja. 3 nap eltelte után az élettelen egyedeket megszá moltuk, és az atkák pusztulásának százalékos értékét meghatároztuk. A tiangazol jó hatást fejtett ki a Dermanyssus gallinae ellen ebben a vizsgálatban.

F.4. Lucilia sericata elleni hatás

A Lucilia sericata fajhoz tartozó döglégy által frissen rakott petékből kis adagokat (30-50 petét) olyan kémcsövekbe helyeztünk, amelyekben előzőleg 4 ml tápközeget 1 ml, a végkoncentrációhoz szükséges közbenső hígítású vizsgálandó oldattal kevertünk. A táptalaj beoltása után a kémcsöveket egy vattacsomóval lezártuk, és inkubátorban, 30°C-on 4 napon át inkubáltuk. Ezalatt az idő alatt a lárvák megközelítőleg 1 cm hosszúra nőttek (3. állapot) abban a tápközegben, amelyet összehasonlítás céljából nem kezeltünk. Ha egy vegyület hatásos, a lárvák erre az időre vagy elpusztulnak vagy a végüket járják és láthatóan visszamaradottak. A vizsgálatot egyidejűleg 10 és 0,01 ppm közötti koncentrációkban végeztük. A hatást a legkisebb teljesen hatásos koncentrációnál mértük (LC 100). A vizsgálat kiterjed olyan « ·

vegyületekre, amelyek érintkezés révén hatásosak, és olyanokra, amelyek mint szervezetbe kerülő mérgek hatnak. A repellánsokat is figyelembe vesszük, mivel a lárvák a közegből elvándorolnak és éheznek. A tiangazol még alacsony koncentrációkban is teljes hatású ebben a vizsgálatban.

F.5.Lucilia cuprina elleni hatás

A Lucilia cuprina fajhoz tartozó döglégy frissen rakott petéiből kis adagokat (30-50 petét) kémcsőbe amelyben előzőleg 4 ml tápközeget 1 ml, 16 ppm helyeztünk, vizsgálandó vegyületet tartalmazó oldattal kevertünk össze.

A tápközeg beoltása után a kémcsöveket vattacsomóval lezártuk, és inkubátorban 30°C-on, 4 napon át inkubáltuk. A kezeletlen közegben erre az időre a lárvák kb. 1 cm hosszúságúra (3.

állapot) növekedtek. Amennyiben egy vegyület hatásos, a lárvák ekkorra már vagy elpusztulnak vagy láthatóan visszamaradottak. Az eredményt 96 óra eltelte után értékeltük. A tiangazol nagyon jó hatást fejt ki a Lucilia cuprina-val szemben.

F.6. Vizsgálatok Fasciola hepatica-val fertőzött juhokkal

A hatóanyagot szuszpenzió formájában gyomorszonda segítségével vagy intraruminális injekcióval adtuk be a az előzőleg Gasciola hepatica-val fertőzött juhnak. Minden vizsgálatban dózisonként 1-3 állatot alkalmaztunk. Minden állatot csak egy alkalommal, egyetlen dózissal kezeltünk.

• » «

A kezelés után 3-4 héttel a juhot leöltük, és felboncoltuk. Az értékelés oly módon történt, hogy megszámoltuk a kezelés után az epehólyag-vezetékben maradó májmételyeket. Egyidőben és hasonló módon fertőzött, de nem kezelt juhot használtunk kontrollként vagy összehasonlításhoz. A két csoportban talált májmételyek számában levő különbség adja meg a vizsgálandó vegyület hatásosságának mértékét.

A tiangazol 50 mg hatóanyag/kg testtömeg-nél kisebb dózisban jó hatást fejtett ki a Fasciola hepatica-val szemben ebben a vizsgálatban.

F.7. Ovicid/lárvicid hatás Heliothis virescens-szel szemben

A Heliothis virescens vattára rakott petéit 400 ppm vizsgálandó vegyületet tartalmazó vizes emulzióval lepermeteztük. 8 nappal később a kikelt peték százalékát és a lepkék túlélési arányát a kezeletlen kontrollokhoz viszonyítva (a populáció %-os csökkenése) értékeltük. Ebben a vizsgálatban a tiangazol jó hatást fejtett ki a Heliothis virescens-szel szemben.

F.8. Aphis craccivora elleni hatás

Borsópalántákat Aphis craccivora-val fertőztünk, majd

400 ppm vizsgálandó vegyületet tartalmazó keverékkel lepermeteztünk és 20°C-on inkubáltunk. 3 és 6 nap elmúltával

értékeltük az eredményt. A populációban bekövetkezett %-os csökkenést (%-os hatást) a kezelt növényen elpusztult tetvek száma és a kezeletlen növényeken levő tetvek száma alapján határozzuk meg. A tiangazol ebben a vizsgálatban jó hatást fejtett ki az Aphis craccivora fajhoz tartozó levéltetvekkel szemben.

F.9. Tetranvchus urticae elleni hatás

Fiatal babnövényekre kevert Tetranychus urticae populációt telepítettünk, amelyet egy nappal később 400 ppm vizsgálandó anyagot tartalmazó vizes emulzióval permeteztünk le. A növényeket ezután 6 napon át 25°C-on inkubáltuk, majd az eredményt értékeltük. A populációban bekövetkező %-os csökkenést (%-os aktivitást) a kezelt és kezeletlen növényen számának elpusztult peték, lárvák és felnőtt állatok összehasonlításával határoztuk meg. A tiangazol ebben a vizsgálatban jó hatást fejtett ki a Tetranychus urticae-vel szemben.

F.10, Heliothis virescens hernyók elleni hatás

Fiatal szójabab növényeket 400 ppm vizsgálandó anyagot tartalmazó vizes emulzióval permeteztünk le. Miután a permetbevonat megszáradt, a szójanövényekre 10 első állapotú Heliothis virescenc hernyót telepítettünk, majd a növényeket műanyag tartályokba helyeztük. A kezelt és kezeletlen növényeken a populáció vagy a bekövetkezett rágási kár %-os csökkenését úgy határoztuk meg, hogy a kezelt és kezeletlen növényen levő elpusztult hernyók számát vagy a * · • «

rágási kárt hasonlítottuk össze. A tiangazol nagyon jó hatást fejtett ki a Heliothis virescens hernyókkal szemben.

F.11.Plutella xvlostella hernyók elleni hatás

Fiatal káposztanövényeket 400 ppm vizsgálandó vegyületet tartalmazó vizes emulzióval permeteztünk le. Miután a permetbevonat megszáradt, a káposztanövényekre 10 darab harmadik állapotú Plutella xylostella hernyót telepítettünk, és a növényt műanyag tartályba helyeztük. A kezelt és kezeletlen növényeken az elpusztult hernyók számát vagy a rágási kárt összehasonlítva határoztuk meg a populáció vagy a rágási kár %-os csökkenését (a %-os hatást). A tiangazol nagyon jó, 80%-ot meghaladó hatást fejtett ki ebben a vizsgálatban a Plutella xylostella ellen.

Claims

SZABADALMI IGÉNYPONTOK

1. (I) általános képletű vegyületek vagy gyógyászatilag elfogadható sóik.
2. Az 1. igénypont szerinti olyan (I) általános képletű vegyületek vagy gyógyászatilag elfogadható savaddíciós sóik, amelyek abszolút konfigurációja az (la) képletnek megfelelő.
3. Eljárás az 1-3. igénypontok bármelyike szerinti vegyületek előállítására, azzal jellemezve, hogy

Polyangium DSM 6267 törzset szénforrást, nitrogénforrást és ásványi sókat tartalmazó táptalajon tenyésztünk, az összegyűjtött sejttömeget acetonnal extraháljuk, az egyesített extraktumokat bepároljuk, a koncentrátumot dietil-éter és víz elegyében felvesszük, a vizes fázist elválasztjuk, és szükséges esetben dietiléterrel extraháljuk, az egyesített dietil-éteres fázist bepároljuk, a koncentrátumot metanol és heptán elegyében felvesszük, a metanolos fázist elválasztjuk, és szükséges esetben heptánnal extraháljuk, ezután bepároljuk, és terc-butil-metil-éterrel extraháljuk, a terc-butil-metil-éteres extraktumot Florisil adszorbensen átszűrjük, • · ·· 4 ···· ···«

- 46 a tiangazolt (vagy az antibiotikus és/vagy fungicid hatású anyagot) az extraktumból kikristályosítjuk, kívánt esetben a tiangazolt (vagy az antibiotikus és/vagy fungicid hatású anyagot) gyógyászatilag elfogadható savaddíciós sóvá alakítjuk.
4. Eljárás az 1.igénypont szerinti (I) képletű vegyület cisz-transz izomerjeinek előállítására, azzal jellemezve, hogy egy 2. igénypont szerinti (la) képletű vegyületet UV fénnyel kezelünk és a kapott izomereket kromatográfiásan elválasztjuk, és kívánt esetben gyógyászatilag elfogadható savaddíciós sókká alakítjuk.
5. Gyógyászati készítmények (a vírusos betegségekre hatók kivételével), amelyek az 1-3. igénypontok bármelyike szerinti vegyületből állnak vagy egy ilyen vegyületet vagy gyógyászatilag elfogadható savaddíciós sóját legalább egy szokásosan alkalmazott formálási adjuvánssal együtt tartalmazzák.
6. Az 5. igénypont szerinti gyógyászati készítmény Arthropoda vagy Acarina irtására és emberekben vagy állatokban paraziták által okozott betegségek kezelésére (a vírusok által okozottak kivételével).
7. A 6.igénypont szerinti gyógyászati készítmény férgek irtására.
8. Az 1-2. igénypontok bármelyike szerinti vegyület emberi vagy állati test gyógyászati kezelésére való alkalmazásra (a vírusos betegségek kezelésének kivételével).
9. Peszticidek mezőgazdasági, erdőgazdasági és/vagy kertészeti növények védelmére, amelyek az 1-2. igénypontok bármelyike szerinti vegyületet vagy savaddíciós sóját szokásos hordozóval együtt tartalmazzák.
10. Az 1-3. igénypontok bármelyike szerinti vegyület alkalmazása gyógyászati készítmények, kártevőírtószerek vagy növényvédelmi készítmények előállítására.
11. Az 1-2. igéynpontok bármelyike szerinti vegyület alkalmazása Arthropoda ellenes, előnyösen az Acarina osztályba tartozó rovarok vagy kártevők elleni készítmények előállítására.

./ΜΛ . '