HU219855B - Eljárás heteroaromás karbonsavak mikrobiológiai előállítására Alcaligenes nemzetségbe tartozó mikroorganizmusok segítségével - Google Patents
Eljárás heteroaromás karbonsavak mikrobiológiai előállítására Alcaligenes nemzetségbe tartozó mikroorganizmusok segítségével Download PDFInfo
- Publication number
- HU219855B HU219855B HU9601582A HUP9601582A HU219855B HU 219855 B HU219855 B HU 219855B HU 9601582 A HU9601582 A HU 9601582A HU P9601582 A HUP9601582 A HU P9601582A HU 219855 B HU219855 B HU 219855B
- Authority
- HU
- Hungary
- Prior art keywords
- acid
- cyanopyridine
- preparation
- biotransformation
- microorganisms
- Prior art date
Links
- 244000005700 microbiome Species 0.000 title claims abstract description 22
- -1 heteroaromatic carbonic acids Chemical class 0.000 title claims abstract description 20
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 title claims abstract description 15
- 241000588986 Alcaligenes Species 0.000 title claims description 6
- 230000007483 microbial process Effects 0.000 title 1
- FFNVQNRYTPFDDP-UHFFFAOYSA-N 2-cyanopyridine Chemical compound N#CC1=CC=CC=N1 FFNVQNRYTPFDDP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 27
- 238000000034 method Methods 0.000 claims abstract description 19
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 claims abstract description 18
- 239000000758 substrate Substances 0.000 claims abstract description 12
- OFOBLEOULBTSOW-UHFFFAOYSA-N Malonic acid Chemical compound OC(=O)CC(O)=O OFOBLEOULBTSOW-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 8
- 150000001720 carbohydrates Chemical class 0.000 claims abstract description 8
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 claims abstract description 5
- UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N Hydrogen Chemical compound [H][H] UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 3
- 229910052736 halogen Inorganic materials 0.000 claims abstract description 3
- 150000002367 halogens Chemical class 0.000 claims abstract description 3
- 239000001257 hydrogen Substances 0.000 claims abstract description 3
- 229910052739 hydrogen Inorganic materials 0.000 claims abstract description 3
- 150000003627 tricarboxylic acid derivatives Chemical class 0.000 claims abstract 3
- SIOXPEMLGUPBBT-UHFFFAOYSA-N picolinic acid Chemical compound OC(=O)C1=CC=CC=N1 SIOXPEMLGUPBBT-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 36
- 230000036983 biotransformation Effects 0.000 claims description 20
- 229940081066 picolinic acid Drugs 0.000 claims description 18
- VRCWSYYXUCKEED-UHFFFAOYSA-N 6-Hydroxypicolinic acid Chemical compound OC(=O)C1=CC=CC(=O)N1 VRCWSYYXUCKEED-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 14
- 241000588813 Alcaligenes faecalis Species 0.000 claims description 8
- 229940005347 alcaligenes faecalis Drugs 0.000 claims description 8
- 150000001735 carboxylic acids Chemical class 0.000 claims description 4
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 claims description 4
- 125000004433 nitrogen atom Chemical group N* 0.000 claims 1
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N nitrogen Substances N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 abstract description 6
- 150000002825 nitriles Chemical class 0.000 abstract description 4
- QJGQUHMNIGDVPM-UHFFFAOYSA-N nitrogen group Chemical group [N] QJGQUHMNIGDVPM-UHFFFAOYSA-N 0.000 abstract description 3
- 238000012258 culturing Methods 0.000 abstract 1
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 12
- PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N Glycerine Chemical compound OCC(O)CO PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical compound [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- VZCYOOQTPOCHFL-OWOJBTEDSA-N Fumaric acid Chemical compound OC(=O)\C=C\C(O)=O VZCYOOQTPOCHFL-OWOJBTEDSA-N 0.000 description 8
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 description 8
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- PMSVVUSIPKHUMT-UHFFFAOYSA-N cyanopyrazine Chemical compound N#CC1=CN=CC=N1 PMSVVUSIPKHUMT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- MSJMDZAOKORVFC-SEPHDYHBSA-L disodium fumarate Chemical compound [Na+].[Na+].[O-]C(=O)\C=C\C([O-])=O MSJMDZAOKORVFC-SEPHDYHBSA-L 0.000 description 7
- 235000014633 carbohydrates Nutrition 0.000 description 5
- 150000001732 carboxylic acid derivatives Chemical class 0.000 description 5
- 230000002906 microbiologic effect Effects 0.000 description 5
- VZCYOOQTPOCHFL-UHFFFAOYSA-N trans-butenedioic acid Natural products OC(=O)C=CC(O)=O VZCYOOQTPOCHFL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 150000003628 tricarboxylic acids Chemical class 0.000 description 5
- PVNIIMVLHYAWGP-UHFFFAOYSA-N Niacin Chemical compound OC(=O)C1=CC=CN=C1 PVNIIMVLHYAWGP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 4
- 239000001744 Sodium fumarate Substances 0.000 description 4
- QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N atomic oxygen Chemical compound [O] QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 4
- OSGAYBCDTDRGGQ-UHFFFAOYSA-L calcium sulfate Chemical compound [Ca+2].[O-]S([O-])(=O)=O OSGAYBCDTDRGGQ-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 4
- 239000011521 glass Substances 0.000 description 4
- 239000001301 oxygen Substances 0.000 description 4
- 229910052760 oxygen Inorganic materials 0.000 description 4
- 229940005573 sodium fumarate Drugs 0.000 description 4
- 235000019294 sodium fumarate Nutrition 0.000 description 4
- LHXIGTYJDLGWRO-UHFFFAOYSA-N 6-oxo-1h-pyrazine-2-carboxylic acid Chemical compound OC(=O)C1=CN=CC(O)=N1 LHXIGTYJDLGWRO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- QXNVGIXVLWOKEQ-UHFFFAOYSA-N Disodium Chemical class [Na][Na] QXNVGIXVLWOKEQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N citric acid Chemical compound OC(=O)CC(O)(C(O)=O)CC(O)=O KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 3
- 239000001530 fumaric acid Substances 0.000 description 3
- 239000000543 intermediate Substances 0.000 description 3
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 3
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 description 3
- NIPZZXUFJPQHNH-UHFFFAOYSA-N pyrazine-2-carboxylic acid Chemical compound OC(=O)C1=CN=CC=N1 NIPZZXUFJPQHNH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 3
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 3
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 3
- BRARRAHGNDUELT-UHFFFAOYSA-N 3-hydroxypicolinic acid Chemical compound OC(=O)C1=NC=CC=C1O BRARRAHGNDUELT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- CZPOFSDHJNNWQL-UHFFFAOYSA-N 6-chloropyrazine-2-carbonitrile Chemical compound ClC1=CN=CC(C#N)=N1 CZPOFSDHJNNWQL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- PGZHSVWXFKKCNR-UHFFFAOYSA-N 6-chloropyridine-2-carbonitrile Chemical compound ClC1=CC=CC(C#N)=N1 PGZHSVWXFKKCNR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-O Ammonium Chemical compound [NH4+] QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-O 0.000 description 2
- HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N Chloroform Chemical compound ClC(Cl)Cl HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- OFOBLEOULBTSOW-UHFFFAOYSA-L Malonate Chemical compound [O-]C(=O)CC([O-])=O OFOBLEOULBTSOW-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 2
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 2
- 239000006285 cell suspension Substances 0.000 description 2
- 239000011651 chromium Substances 0.000 description 2
- 150000001991 dicarboxylic acids Chemical class 0.000 description 2
- 150000002148 esters Chemical class 0.000 description 2
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 2
- 229940050411 fumarate Drugs 0.000 description 2
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 2
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 2
- 229910052500 inorganic mineral Inorganic materials 0.000 description 2
- TWBYWOBDOCUKOW-UHFFFAOYSA-N isonicotinic acid Chemical compound OC(=O)C1=CC=NC=C1 TWBYWOBDOCUKOW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 2
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 2
- 239000011707 mineral Substances 0.000 description 2
- 235000001968 nicotinic acid Nutrition 0.000 description 2
- 229960003512 nicotinic acid Drugs 0.000 description 2
- 239000011664 nicotinic acid Substances 0.000 description 2
- 230000003287 optical effect Effects 0.000 description 2
- 150000007524 organic acids Chemical class 0.000 description 2
- 235000005985 organic acids Nutrition 0.000 description 2
- 239000002002 slurry Substances 0.000 description 2
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 2
- KDYFGRWQOYBRFD-UHFFFAOYSA-L succinate(2-) Chemical compound [O-]C(=O)CCC([O-])=O KDYFGRWQOYBRFD-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N sulfuric acid Substances OS(O)(=O)=O QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- HDTRYLNUVZCQOY-UHFFFAOYSA-N α-D-glucopyranosyl-α-D-glucopyranoside Natural products OC1C(O)C(O)C(CO)OC1OC1C(O)C(O)C(O)C(CO)O1 HDTRYLNUVZCQOY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- BJEPYKJPYRNKOW-REOHCLBHSA-N (S)-malic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](O)CC(O)=O BJEPYKJPYRNKOW-REOHCLBHSA-N 0.000 description 1
- RTBFRGCFXZNCOE-UHFFFAOYSA-N 1-methylsulfonylpiperidin-4-one Chemical compound CS(=O)(=O)N1CCC(=O)CC1 RTBFRGCFXZNCOE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OWEGMIWEEQEYGQ-UHFFFAOYSA-N 100676-05-9 Natural products OC1C(O)C(O)C(CO)OC1OCC1C(O)C(O)C(O)C(OC2C(OC(O)C(O)C2O)CO)O1 OWEGMIWEEQEYGQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- KPGXRSRHYNQIFN-UHFFFAOYSA-N 2-oxoglutaric acid Chemical compound OC(=O)CCC(=O)C(O)=O KPGXRSRHYNQIFN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- PDRSZXQBFCYYKZ-UHFFFAOYSA-N 5,6-dichloropyridine-2-carbonitrile Chemical compound ClC1=CC=C(C#N)N=C1Cl PDRSZXQBFCYYKZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- JJBZLBWDCGBCON-UHFFFAOYSA-N 5-bromo-6-chloropyrazine-2-carbonitrile Chemical compound ClC1=NC(C#N)=CN=C1Br JJBZLBWDCGBCON-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ZLKMOIHCHCMSFW-UHFFFAOYSA-N 6-chloropyridine-2-carboxylic acid Chemical compound OC(=O)C1=CC=CC(Cl)=N1 ZLKMOIHCHCMSFW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ZCYVEMRRCGMTRW-UHFFFAOYSA-N 7553-56-2 Chemical compound [I] ZCYVEMRRCGMTRW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000173529 Aconitum napellus Species 0.000 description 1
- 108700023418 Amidases Proteins 0.000 description 1
- 241000193830 Bacillus <bacterium> Species 0.000 description 1
- 239000002028 Biomass Substances 0.000 description 1
- 241000186146 Brevibacterium Species 0.000 description 1
- WKBOTKDWSSQWDR-UHFFFAOYSA-N Bromine atom Chemical compound [Br] WKBOTKDWSSQWDR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N Calcium Chemical compound [Ca] OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ZAMOUSCENKQFHK-UHFFFAOYSA-N Chlorine atom Chemical compound [Cl] ZAMOUSCENKQFHK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- VYZAMTAEIAYCRO-UHFFFAOYSA-N Chromium Chemical compound [Cr] VYZAMTAEIAYCRO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-K Citrate Chemical compound [O-]C(=O)CC(O)(CC([O-])=O)C([O-])=O KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 241000186216 Corynebacterium Species 0.000 description 1
- KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N EDTA Chemical compound OC(=O)CN(CC(O)=O)CCN(CC(O)=O)CC(O)=O KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 1
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 1
- PXGOKWXKJXAPGV-UHFFFAOYSA-N Fluorine Chemical compound FF PXGOKWXKJXAPGV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-PICCSMPSSA-N Maltose Natural products O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@@H](CO)OC(O)[C@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-PICCSMPSSA-N 0.000 description 1
- 241000192041 Micrococcus Species 0.000 description 1
- GXCLVBGFBYZDAG-UHFFFAOYSA-N N-[2-(1H-indol-3-yl)ethyl]-N-methylprop-2-en-1-amine Chemical compound CN(CCC1=CNC2=C1C=CC=C2)CC=C GXCLVBGFBYZDAG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010033272 Nitrilase Proteins 0.000 description 1
- 241000187654 Nocardia Species 0.000 description 1
- MUPFEKGTMRGPLJ-RMMQSMQOSA-N Raffinose Natural products O(C[C@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O[C@@]2(CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O2)O1)[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O1 MUPFEKGTMRGPLJ-RMMQSMQOSA-N 0.000 description 1
- 241000316848 Rhodococcus <scale insect> Species 0.000 description 1
- 241000187693 Rhodococcus rhodochrous Species 0.000 description 1
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- KDYFGRWQOYBRFD-UHFFFAOYSA-N Succinic acid Natural products OC(=O)CCC(O)=O KDYFGRWQOYBRFD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 description 1
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 description 1
- HDTRYLNUVZCQOY-WSWWMNSNSA-N Trehalose Natural products O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O1 HDTRYLNUVZCQOY-WSWWMNSNSA-N 0.000 description 1
- MUPFEKGTMRGPLJ-UHFFFAOYSA-N UNPD196149 Natural products OC1C(O)C(CO)OC1(CO)OC1C(O)C(O)C(O)C(COC2C(C(O)C(O)C(CO)O2)O)O1 MUPFEKGTMRGPLJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000002835 absorbance Methods 0.000 description 1
- 150000007513 acids Chemical class 0.000 description 1
- 229940023019 aconite Drugs 0.000 description 1
- HDTRYLNUVZCQOY-LIZSDCNHSA-N alpha,alpha-trehalose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 HDTRYLNUVZCQOY-LIZSDCNHSA-N 0.000 description 1
- BJEPYKJPYRNKOW-UHFFFAOYSA-N alpha-hydroxysuccinic acid Natural products OC(=O)C(O)CC(O)=O BJEPYKJPYRNKOW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000005922 amidase Human genes 0.000 description 1
- JFCQEDHGNNZCLN-UHFFFAOYSA-N anhydrous glutaric acid Natural products OC(=O)CCCC(O)=O JFCQEDHGNNZCLN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000003242 anti bacterial agent Substances 0.000 description 1
- 229940088710 antibiotic agent Drugs 0.000 description 1
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 1
- DYVKGOVCCLREIY-UHFFFAOYSA-N azanium;pyridine-2-carboxylate Chemical compound [NH4+].[O-]C(=O)C1=CC=CC=N1 DYVKGOVCCLREIY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N beta-D-glucose Chemical compound OC[C@H]1O[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-QUYVBRFLSA-N beta-maltose Chemical compound OC[C@H]1O[C@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QUYVBRFLSA-N 0.000 description 1
- 239000012267 brine Substances 0.000 description 1
- GDTBXPJZTBHREO-UHFFFAOYSA-N bromine Substances BrBr GDTBXPJZTBHREO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910052794 bromium Inorganic materials 0.000 description 1
- KDYFGRWQOYBRFD-NUQCWPJISA-N butanedioic acid Chemical compound O[14C](=O)CC[14C](O)=O KDYFGRWQOYBRFD-NUQCWPJISA-N 0.000 description 1
- 239000011575 calcium Substances 0.000 description 1
- 229910052791 calcium Inorganic materials 0.000 description 1
- PDEKDNMUYVDZCL-UHFFFAOYSA-N calcium;pyridine-2-carboxylic acid Chemical compound [Ca].OC(=O)C1=CC=CC=N1 PDEKDNMUYVDZCL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940041514 candida albicans extract Drugs 0.000 description 1
- 239000000460 chlorine Substances 0.000 description 1
- 229910052801 chlorine Inorganic materials 0.000 description 1
- 150000001844 chromium Chemical class 0.000 description 1
- 229910052804 chromium Inorganic materials 0.000 description 1
- 229940046374 chromium picolinate Drugs 0.000 description 1
- LJAOOBNHPFKCDR-UHFFFAOYSA-K chromium(3+) trichloride hexahydrate Chemical compound O.O.O.O.O.O.[Cl-].[Cl-].[Cl-].[Cr+3] LJAOOBNHPFKCDR-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- GJYSUGXFENSLOO-UHFFFAOYSA-N chromium;pyridine-2-carboxylic acid Chemical compound [Cr].OC(=O)C1=CC=CC=N1.OC(=O)C1=CC=CC=N1.OC(=O)C1=CC=CC=N1 GJYSUGXFENSLOO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000012043 crude product Substances 0.000 description 1
- 239000013078 crystal Substances 0.000 description 1
- 229910001873 dinitrogen Inorganic materials 0.000 description 1
- 150000002016 disaccharides Chemical class 0.000 description 1
- 230000007613 environmental effect Effects 0.000 description 1
- 238000000855 fermentation Methods 0.000 description 1
- 230000004151 fermentation Effects 0.000 description 1
- 239000012065 filter cake Substances 0.000 description 1
- 229910052731 fluorine Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011737 fluorine Substances 0.000 description 1
- 239000007789 gas Substances 0.000 description 1
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 1
- 125000005843 halogen group Chemical group 0.000 description 1
- 230000002363 herbicidal effect Effects 0.000 description 1
- 239000004009 herbicide Substances 0.000 description 1
- 125000004435 hydrogen atom Chemical group [H]* 0.000 description 1
- 239000000411 inducer Substances 0.000 description 1
- 230000006698 induction Effects 0.000 description 1
- 239000011630 iodine Substances 0.000 description 1
- 229910052740 iodine Inorganic materials 0.000 description 1
- ODBLHEXUDAPZAU-UHFFFAOYSA-N isocitric acid Chemical compound OC(=O)C(O)C(C(O)=O)CC(O)=O ODBLHEXUDAPZAU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 150000003951 lactams Chemical class 0.000 description 1
- 239000001630 malic acid Substances 0.000 description 1
- 235000011090 malic acid Nutrition 0.000 description 1
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 1
- 150000002772 monosaccharides Chemical class 0.000 description 1
- 239000012452 mother liquor Substances 0.000 description 1
- KHPXUQMNIQBQEV-UHFFFAOYSA-L oxaloacetate(2-) Chemical compound [O-]C(=O)CC(=O)C([O-])=O KHPXUQMNIQBQEV-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 230000020477 pH reduction Effects 0.000 description 1
- 239000008177 pharmaceutical agent Substances 0.000 description 1
- 239000008363 phosphate buffer Substances 0.000 description 1
- IBBMAWULFFBRKK-UHFFFAOYSA-N picolinamide Chemical compound NC(=O)C1=CC=CC=N1 IBBMAWULFFBRKK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OXNIZHLAWKMVMX-UHFFFAOYSA-N picric acid Chemical compound OC1=C([N+]([O-])=O)C=C([N+]([O-])=O)C=C1[N+]([O-])=O OXNIZHLAWKMVMX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000000047 product Substances 0.000 description 1
- 230000005855 radiation Effects 0.000 description 1
- MUPFEKGTMRGPLJ-ZQSKZDJDSA-N raffinose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO[C@@H]2[C@@H]([C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O2)O)O1 MUPFEKGTMRGPLJ-ZQSKZDJDSA-N 0.000 description 1
- 230000035484 reaction time Effects 0.000 description 1
- PRWXGRGLHYDWPS-UHFFFAOYSA-L sodium malonate Chemical compound [Na+].[Na+].[O-]C(=O)CC([O-])=O PRWXGRGLHYDWPS-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- HPALAKNZSZLMCH-UHFFFAOYSA-M sodium;chloride;hydrate Chemical compound O.[Na+].[Cl-] HPALAKNZSZLMCH-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 239000007858 starting material Substances 0.000 description 1
- VNOYUJKHFWYWIR-ITIYDSSPSA-N succinyl-CoA Chemical compound O[C@@H]1[C@H](OP(O)(O)=O)[C@@H](COP(O)(=O)OP(O)(=O)OCC(C)(C)[C@@H](O)C(=O)NCCC(=O)NCCSC(=O)CCC(O)=O)O[C@H]1N1C2=NC=NC(N)=C2N=C1 VNOYUJKHFWYWIR-ITIYDSSPSA-N 0.000 description 1
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 description 1
- 150000005846 sugar alcohols Chemical class 0.000 description 1
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 1
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 1
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 1
- 238000004448 titration Methods 0.000 description 1
- 150000004043 trisaccharides Chemical class 0.000 description 1
- 239000012138 yeast extract Substances 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
- C12P17/00—Preparation of heterocyclic carbon compounds with only O, N, S, Se or Te as ring hetero atoms
- C12P17/10—Nitrogen as only ring hetero atom
- C12P17/12—Nitrogen as only ring hetero atom containing a six-membered hetero ring
Landscapes
- Organic Chemistry (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Zoology (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Microbiology (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Pyridine Compounds (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
Abstract
A találmány tárgya eljárás az (I) vagy (II) általános képletűheteroaromás karbonsavak és fiziológiailag elfogadható sóikelőállítására – az (I) és (II) általános képletben R1 és R2 azonosvagy eltérő jelentésű és hidrogénatom vagy halogénatom lehet, míg Xjelentése nitrogénatom vagy –CH–. Az eljárásra jellemző, hogyszubsztrátumként (III) vagy (IV) általános képletű heteroaromásnitrilt alkalmaznak, mely képletekben X, R1 és R2 jelentése a fenti,és a nitrilt 2-ciano-piridint hasznosítani képes, az Alcaligenesnemzetséghez tartozó, a biotranszformáció előtt dikarbonsav,trikarbonsav vagy szénhidrát jelenlétében tenyésztettmikroorganizmusokkal (I) vagy (II) általános képletű heteroaromáskarbonsavvá alakíttatják, majd a heteroaromás karbonsavat kívántesetben fiziológiailag elfogadható sójává alakítják. ŕ
Description
A találmány tárgya új mikrobiológiai eljárás az (I) vagy (II) általános képletű heteroaromás karbonsavak és fiziológiailag elfogadható sóik előállítására. Az (I) és (II) általános képletben R1 és R2 azonos vagy eltérő jelentésű és hidrogénatom vagy halogénatom lehet, míg X jelentése nitrogénatom vagy -CH- csoport.
A heteroaromás karbonsavak, például a 6-hidroxipikolinsav értékes közbenső termékek gyógyászati hatóanyagok, például 2-oxipirimidin előállításában (Berichte dér Deutschen Chemischen Gesellschaft 1912, 45, 2456-2467. oldal) vagy herbicid hatóanyag szintézisében (EP-A 0 447 004).
Általánosan ismert, hogy nitril-hidratázt és amidázt vagy nitrilázt tartalmazó mikroorganizmusok nitrileket a megfelelő karbonsavvá alakítanak. Az EP-A 0 187 680 számú szabadalmi leírás például mikrobiológiai eljárást ismertet szerves savak, így nikotinsav előállítására a Corynebacterium, Nocardia, Bacillus, Bacteridium, Micrococcus és Brevibacterium nemzetségébe tartozó mikroorganizmusok segítségével. A reakció csak fényenergia jelenlétében működik. Az EP-A 0 444 640 számú szabadalmi leírás mikrobiológiai eljárást ismertet szerves savak, például nikotinsav előállítására Rhodococcus nemzetségű mikroorganizmusok segítségével. Az átalakítást kötelezően laktám jelenlétében végzik.
Ismert továbbá, hogy a Rhodococcus rhodochrous J1 törzs alkalmazásával például 2-ciano-pirazint pirazinkarbonsavvá alakítanak (Kobayashi és munkatársai, J. of Antibiotics, 43. kötet, 10., 1990, 1316-1320. oldal). Arra azonban nem képesek ezek a mikroorganizmusok, hogy 2-ciano-piridint pikolinsavvá alakítsanak (Mathew és munkatársai, Appl. Environmental Microbiology, 54. kötet, 4., 1988,1030-1032. oldal).
Ismert az is, hogy az Alcaligenes nemzetséghez tartozó, 2-ciano-piridin hasznosítására képes mikroorganizmusok 6-hidroxi-pikolinsavat termelnek a 2-cianopiridinből (EP-A 0 504 818). Az eljárás hátránya, hogy 6-hidroxi-pikolinsav-hozama gyenge.
A jelen találmány feladata heteroaromás karbonsavak, így pirazinkarbonsav, pikolinsav, és fiziológiailag elfogadható sóik, így króm-pikolinát előállítására irányuló, gazdaságos mikrobiológiai eljárás kidolgozása volt, amely során Alcaligenes mikroorganizmusokat alkalmazunk dolgozik és a kívánt savakat, illetve fiziológiailag elfogadható sóikat jó hozammal szolgáltatják.
A fenti feladatot az 1. igénypont szerinti eljárással oldottuk meg.
A találmány értelmében szubsztrátumként (III) vagy (IV) általános képletű heteroaromás nitrilt alkalmazunk, mely képletekben X, R1 és R2 jelentése a fenti, és a nitrilt 2-ciano-piridint hasznosítani képes, az Alcaligenes nemzetséghez tartozó, a biotranszformáció előtt dikarbonsav, trikarbonsav vagy szénhidrát jelenlétében tenyésztett mikroorganizmusokkal (I) vagy (II) általános képletű heteroaromás karbonsavvá alakíttatjuk. Utána a heteroaromás karbonsavat kívánt esetben fiziológiailag elfogadható sójává alakítjuk. Az említett karbonsav fiziológiailag elfogadható sója lehet például krómmal, kalciummal vagy ammóniummal képzett só.
A tulajdonképpeni biotranszformáció (mikrobiológiai eljárás) előtt az Alcaligenes nemzetségű mikroorganizmusokat tenyésztjük, hatásos enzimjeiket célszerűen 2-ciano-piridinnel indukáljuk. A tenyésztés és indukálás során a 2-ciano-piridin koncentrációja például 0,01-20 tömeg%, előnyösen 0,1-1 tömeg%.
A dikarbonsav kifejezésen az alábbi vegyületeket értjük: fumársav, borostyánkősav, almasav, glutársav, malonsav, valamint e vegyületek sói és származékai, például észterei.
A trikarbonsavak kifejezésen itt a citromsavat és az izonikotinsavat, illetve azok sóit és származékait, például észtereit értjük. Az említett dikarbonsavak és trikarbonsavak sói és származékai lehetnek fumarát, malát, malonát, oxálacetát, citrát, akonitát, izocitrát, 2-oxoglutarát, szukcinát vagy szukcinil-CoA. A fumarátot, malonátot és szukcinátot előnyben részesítjük.
A szénhidrát kifejezésen itt az alábbiakat értjük: monoszacharidok, például glükóz, diszacharidok, így szacharóz, trehalóz vagy maltóz, triszacharidok, például raffinóz, továbbá cukoralkoholok, így glicerin. Szénhidrátként előnyösen glicerint alkalmazunk.
A dikarbonsav, trikarbonsav vagy szénhidrát koncentrációja célszerűen 0,1-20 tömeg%, előnyösen 0,5-5 tömeg%.
A mikroorganizmusok tenyésztéséhez a szakmában szokásosan alkalmazott közegek jöhetnek számításba, például a Kulla és munkatársai szerinti ásványisó-közeg (Arch. Microbiol., 135,1-7, 1983), híg foszfátpuffer vagy az 1. táblázat szerinti közeg. Az utóbbit előnyben részesítjük.
Az előzetes tenyésztés után, de a tulajdonképpeni szubsztrátumadagolás előtt a mikroorganizmusokat a szokásos izolálási eljárások valamelyikével elkülönítjük. Eljárhatunk úgy is, hogy a szubsztrátumot elkülönítés nélkül adagoljuk a mikroorganizmusok tenyészetéhez.
A biotranszformáció szubsztrátumaként alkalmazott vegyületek, azaz a (III) vagy (IV) általános képletű heteroaromás nitrilek, például a 2-ciano-piridin a kereskedelmi forgalomban kapható vegyületek.
Az (I), (II), (III) és (IV) általános képletekben X jelentése nitrogénatom vagy -CH- csoport. Az R1 és R2 csoportok azonosak vagy különbözőek, és hidrogénatom vagy halogénatom, így fluor-, klór-, bróm- vagy jódatom lehetnek. Ennélfogva az alábbi vegyületek lehetnek például szubsztrátumok: 2-ciano-piridin, 6-klór2-ciano-piridin, 5,6-diklór-2-ciano-piridin, 2-ciano-pirazin, 6-klór-2-ciano-pirazin, 5-bróm-6-klór-2-ciano-pirazin. Szubsztrátumként a 2-ciano-piridint, a 2-ciano-pirazint és a 6-klór-2-ciano-pirazint részesítjük előnyben.
A biotranszformáció megvalósítása során a szubsztrátumot egyetlenegy adagban, vagy folyamatosan adagoljuk. Előnyösen a szubsztrátumot úgy adagoljuk, hogy mindenkori koncentrációja a közegben ne haladja meg a 20%-ot, előnyösen ne haladja meg a 10%-ot.
A szokásosan nyugvósejtekkel végzett biotranszformációhoz előnyösen az EP-A 0 504 818 számú szabadalmi leírásból ismert, 2-ciano-piridint hasznosítani képes Alcaligenes faecalis DSM 6335 számú mikroorganizmust, valamint funkcionálisan ekvivalens varián2
HU 219 855 Β sait is mutánsait alkalmazzuk. Ezeket a mikroorganizmusokat 1991. 01. 03-án a Mikroorganizmusok Német Gyűjteményénél (Deutsche Sammlung von Mikroorganismen und Zellkulturen GmbH, Mascheroder Weg lb, D-38124 Braunschweig) a Budapesti Szerződés értelmében letétbe helyeztük.
A „fünkcionálisan ekvivalens variánsok és mutánsok” kitételen itt olyan mikroorganizmusokat értünk, amelyek lényegében ugyanazokkal a tulajdonságokkal rendelkeznek, mint az eredeti mikroorganizmus. Az ilyen mutánsok és variánsok véletlenül, például UV sugárzás behatása révén keletkezhetnek.
A biotranszformációhoz (termelőtenyészethez) ugyanazokat a közegeket alkalmazhatjuk, mint a mikroorganizmusok szaporításához. A biotranszformáció a fent említett dikarbonsavak, trikarbonsavak, illetve szénhidrátok jelenlétében vagy távollétében történhet.
A pH-érték célszerűen 4 és 10 közé, különösen előnyösen 5 és 9 közé eshet. A biotranszformáció hőmérséklete 10-50 °C, előnyösen 20-40 °C.
A szokásos módon 6-100 órán át tartó reakcióidő leteltével az (I) vagy (II) általános képletű karbonsavakat a szokásos feldolgozómódszerekkel, például savanyítással elkülönítjük. A karbonsavakat továbbá sók, például ammónium- vagy krómsó alakjában izolálhatjuk.
Amennyiben heteroaromás karbonsavként 6-os helyzetben hidroxilezett karbonsavat, azaz (II) általános képletű karbonsavat óhajtunk előállítani, a biotranszformációt előnyösen aerob körülmények között végezzük. Amennyiben az előállítani kívánt karbonsav nem hidroxilezett, mint amilyen például a pikrinsav, a biotranszformációt előnyösen anaerob körülmények között valósítjuk meg.
Példák
1. példa
6-Hidroxi-pikolinsav előállítása
A 6-hidroxi-pikolinsav Alcaligenes faecalis DSM 6335 törzzsel történő előállítására az alábbi körülményeket választjuk: 7,5 literes fermentort alkalmazunk, amelynek hasznos térfogata 5 liter. Az Alcaligenes faecalis DSM 6335 törzset az 1. táblázatban megadott összetételű ásványisó-közegben tenyésztünk, amelyben a nátrium-fümarát az egyetlen szén- és energiaforrás, a 2-ciano-piridin az induktor. A hőmérséklet 30 °C, a pH 7,0, a fordulatszám 600 perc1. A nátrium-fümarát adagolását az oxigén parciális nyomásával szabályozzuk, pO2>30% megy az adagolás. 20%-os nátrium-fumarátoldatot alkalmazunk, amely 0,5% 2-ciano-piridint tartalmaz. 23 óra elteltével a tenyészet 650 nm-nél mért optikai sűrűsége (OD650) eléri a 16-ot. Eddig körülbelül 160 g nátrium-fümarát fogyott el 20%-os oldat alakjában (körülbelül 800 ml). Utána a biotranszformáció kezdődik.
A 2-ciano-piridin 6-hidroxi-pikolinsavat eredményező biotranszformációját aerob módon végezzük nyugvósejtekkel, szén- és energiaforrás adagolása nélkül.
A 2-ciano-piridin adagolása határérték elérésekor ki-, illetve bekapcsolódó szivattyúval történik. A szivattyú „on-line” összeköttetésben áll HPLC-készülékkel, amely a közbenső termékként keletkező pikolinsav koncentrációját figyeli. A pikolinsav 2,5-szeresen gyorsabban keletkezik, mint belőle a 6-hidroxipikolinsav (10 g/1 és 4 g/1 óránként), ezért a pikolinsav koncentrációját <2 g/1 értéknél limitáljuk, máskülönben a pikolinsav—»6-hidroxi-pikolinsav-reakció gátolt lenne.
Tekintettel arra, hogy a 2-ciano-piridin szobahőmérsékleten szilárd halmazállapotú anyag, a tárolóedényt 50 °C-ra kell melegíteni, hogy a 2-ciano-piridint folyékony formában lehessen adagolni.
óra elteltével a hidroxi-pikolinsav koncentrációja eléri a 75 g/1 értéket. A közbenső termékként keletkező pikolinsavat a biotranszformáció vévén már nem mutatható ki.
A 6-hidroxi-pikolinsav elkülönítése céljából a sejteket szűréssel eltávolítjuk, utána a sejtmentes oldatot 60 °C-ra melegítjük és tömény kénsavat pH 2-2,5-re savanyítjuk. A 6-hidroxi-pikolinsav kiválik az oldatból. Az oldatot lassan 4 °C-ra hűtjük, szüljük és a maradékot sómentes vízzel mossuk, majd (ΙΟχΙΟ3 Pa, 55 °C) szárítjuk. Az anyalúgban 2 g/1 6-hidroxi-pikolinsav marad. A bevitt 2-ciano-piridinre számítva a hozam 87%.
1. táblázat
| Összetevő | Koncentráció, g/1 |
| fümársav-dinátriumsó | 10 |
| élesztőkivonat | 1 |
| MgCl2*6H2O | 0,8 |
| Na2SO4 | 0,25 |
| (NH4)2SO4 | 1,0 |
| nh4ci | 2,33 |
| NaCl | 0,2 |
| CaCl2*2H2O | 0,16 |
| MnSO4 | l,8*10-2 |
| H3BO3 | 3*10-2 |
| NiCl2 | 2*10-3 |
| NaMoO4 | 3*10 3 |
| FeSO4*7H2O | 0,3 |
| Na2EDTA*2H2O | 0,75 |
| 2-ciano-piridin | 1 |
| KH2PO4 | 0,4 |
| Na2HPO4 | 0,96 |
2. példa
Pikolinsav előállítása
A biomassza tenyésztése az 1. példa szerint történik. A pikolinsavat szigorúan anaerob körülmények között állítjuk elő.
A biotranszformáláshoz 500 ml-es üvegpalackban 400 ml tenyészetet alkalmazunk, amelynek optikai sűrűsége OD650=20. Az inkubálás hőmérséklete 30 °C.
A biotranszformálás kezdete előtt körülbelül 30 percen át tiszta nitrogént buborékoltatunk a folyadékon keresztül keverés közben, 5000 Pa túlnyomás mellett, hogy az oxigént kvantitatíve eltávolítsuk. A gázbevezetést a biotranszformálás alatt is fenntartjuk (körülbelül 1000 Pa túlnyomással), hogy reagálás közben vagy a
HU 219 855 Β
2-ciano-piridin adagolásakor az oxigén ne tudjon beoldódni.
A 2-ciano-piridint 12 adagban adjuk a tenyészethez, egy-egy óra után 10 g/1 mennyiségben. Az adagolás azonban folyamatos is lehet. Minden újabb adag hozzáadása előtt HPLC-vel ellenőrizzük, hogy az előző adag teljesen átalakult-e pikolinsawá. A biotranszformálás alatt pikolinsavamid nem mutatható ki.
Az eljárással sikerült 26 óra alatt körülbelül 150 g/1 pikolinsavat előállítani. 6-Hidroxi-pikolinsav nem keletkezett.
Elkülönítés céljából a sejtmentes pikolinsavoldatból kicsapjuk a terméket CaCl2/H2SO4 alkalmazásával. A fentiek szerint kapott pikolinsavoldatot háromszoros térfogatára hígítjuk, és keverés közben 1 ekvivalens pikolinsavra számítva 0,5 ekvivalens CaCl2-ot adagolunk az előzetesen 90 °C-ra melegített, sejtmentes fermentációs oldathoz. A keletkező kalcium-pikolinsav komplex azonnal kiválik. A szuszpenziót keverés közben 4 °C-ra hűtjük, 3-as üvegszűrőn át a csapadékot szűrjük és sómentes vízzel mossuk.
A szűrőlepényt sómentes vízzel szuszpendáljuk és tömény kénsavval pH 2,5-re savanyítjuk. Ennek során a pikolinsav kioldódik a komplexből, ugyanakkor oldhatatlan kalcium-szulfát képződik. Tekintettel arra, hogy a szabad pikolinsav vízben igen jól oldódik, a kalciumszulfátot szűréssel eltávolíthatjuk. A pikolinsavoldatot szárazra pároljuk, a maradékot elemezzük. A nyerstermék hozama mintegy 70%, titrálással meghatározott tisztasága 86%. A Karl-Fischer-módszerrel mért víztartalom 0,7%.
3. példa
Króm(III)-pikolinát előállítása
500 ml-es lombikban lévő ammónium-pikolinátoldathoz (271,4 g; 0,325 mól; 16,8%) 7,1 pH mellett 73 °C-on vizes króm-triklorid-hexahidrát-oldatot (23,95 g; 0,09 mól Cr 63 ml vízben) csepegtetünk 3,5 óra alatt. A kapott orgonaszínű oldatot még egy órán át keverjük, majd lassan 3 °C-ra hűtjük. Miután a keletkezett vörös, szilárd anyag leülepedett, a felülúszó részt dekantáljuk, a maradékot 100 ml vízben 30 percen át feliszapoljuk, majd újból dekantáljuk. A feliszapolást 50 ml vízzel ismételjük (30 perc), utána a szilárd anyagot leszívatjuk és 50 °C-on vákuumban szárítjuk. 33,64 g sötét kristályokat kapunk (90%-os hozam).
4. példa
Alcaligenes faecalis DSM 6335 tenyésztése különböző szénforrásokkal
Alcaligenes faecalis DSM 6335 tenyésztéséhez 300 ml-es Erlenmeyer-lombikokat használunk 100100 ml A+N közeggel (az 1. táblázat szerinti közeg fumársav-dinátriumsó nélkül). A közeghez azonkívül 2 g/1 2-ciano-piridint és 10 g/1 mennyiségben az alábbi szénforrásokat adjuk külön-külön:
fumársav-dinátriumsó glicerin malonsav-dinátriumsó borostyánkősav-dinátriumsó.
Az inkubálás rázógépen történik 30 °C-on. 16 órás növekedés után a sejteket lecentrifugáljuk és friss A+N közegben (szénforrás nélkül, de 10 g/1 ciano-piridint tartalmaz) szuszpendáljuk. A sejtszuszpenzió 650 nm-nél mért optikai sűrűsége (OD650) 10. Utána a sejtszuszpenziót (teljes térfogat 10-20 ml) újból inkubáljuk 30 °Con. A 6-hidroxi-pikolinsav képződését a sejtmentes oldat 308 nm-nél mérhető abszorpciója alapján követjük nyomon. A 6-hidroxi-pikolinsav képződésére az alábbi termelékenységet mértük:
Szénforrás Termelékenység (g/1 · óra) fumársav-dinátriumsó 2,4 glicerin 2,0 malonsav-dinátriumsó 4,2 borostyánkősav-dinátriumsó 0,14
5. példa
6-Hidroxi-pirazinsav előállítása
Az Alcaligenes faecalis (DSM 6335) tenyésztését a 4. példa szerint végezzük, szénforrásként fumársavat alkalmazva. A mosott sejteket A+N közegben (10 g/1 2ciano-pirazint tartalmaz) szuszpendáljuk (OD650=10) és 30 °C-on inkubáljuk. A 6-hidroxi-pirazin-karbonsav képződését spekrofotometriásan a sejtmentes oldat 320 nm-nél mérhető abszorpciója alapján követjük nyomon. A szubsztrátum, azaz a ciano-pirazin fogyását a 270 nm-es abszorpció alapján határozzuk meg. Hét óra elteltével a kiindulási 2-ciano-pirazin átalakult 6-hidroxi-pirazin-karbonsawá.
6. példa
6-Klór-pikolinsav és pirazin-karbonsav előállítása
Az Alcaligenes faecalis (DSM 6335) tenyésztését a 4. példa szerint végezzük, szénforrásként fumársavat alkalmazva. A mosott sejteket A+N közegben szuszpendáljuk (OD650=10) gumidugóval lezárható üveglombikokban, a gumidugón keresztül nitrogéngázt vezetünk be az oxigén eltávolítására. Utána a szuszpenziókhoz 2-ciano-pirazint, illetve 6-klór-2-ciano-piridint adunk szubsztrátumként, 10 g/1 végkoncentrációig. A tenyészeteket 30 °C-on inkubáljuk. Három óra elteltével a kiindulási anyagok kvantitatíve átalakultak a megfelelő savvá. [Ellenőrzés vékonyréteg-kromatográfiásan, fluoreszcencindikátoros Kieselgel 60, futtató: kloroform/etanol/NH4OH (25%)/víz=30:55:10:5.]
Claims (4)
- SZABADALMI IGÉNYPONTOK1. Eljárás az (I) vagy (II) általános képletű heteroaromás karbonsavak és fiziológiailag elfogadható sóik előállítására - az (I) és a (II) általános képletben R1 és R2 azonos vagy eltérő jelentésű és hidrogénatom vagy halogénatom lehet, míg X jelentése nitrogénatom vagy =CH- csoport - mely eljárás során (III) vagy (IV) általános képletű heteroaromás nitrileket az Alcaligenes nemzetséghez tartozó, 2-ciano-piridint hasznosító mikroorganizmusok segítségével a megfelelő karbonsavvá alakítunk, majd ezt adott esetben fiziológiailag elfogadható sóvá alakítjuk, azzal jellemezve, hogy a mikroorga4HU 219 855 Β nizmusokat a biotranszformáció előtt dikarbonsav, trikarbonsav vagy szénhidrát jelenlétében tenyésztjük, kivéve azt a 6-hidroxi-pikolinsav-előállítási eljárást, melyet 2-ciano-piridin olyan mikroorganizmusokkal történő átalakításával hajtunk végre, mely mikroorga- 5 nizmusokat egyedüli szénforrásként folsav jelenlétében tenyésztettünk.
- 2. Az 1. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy a biotranszformálást Alcaligenes faecalis DSM 6335 törzzsel vagy annak funkcionálisan ekvivalens va- 10 riánsaival vagy mutánsaival végezzük.
- 3. Az 1. vagy 2. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy a biotranszformálást 4 és 10 közötti pHérték mellett 10-50 °C-on végezzük.
- 4. Eljárás pikolinsav vagy fiziológiailag elviselhető sója előállítására, azzal jellemezve, hogy szubsztrátumként 2-ciano-piridint alkalmazunk, és ezt ciano-piridint hasznosítani képes, az Alcaligenes nemzetséghez tartozó, a biotranszformáció előtt dikarbonsav, trikarbonsav vagy szénhidrát jelenlétében tenyésztett mikroorganizmusokkal pikolinsawá alakíttatjuk, majd az utóbbit kívánt esetben fiziológiailag elfogadható sójává alakítjuk.
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CH166495 | 1995-06-07 | ||
| CH173395 | 1995-06-13 |
Publications (4)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| HU9601582D0 HU9601582D0 (en) | 1996-07-29 |
| HUP9601582A2 HUP9601582A2 (en) | 1997-03-28 |
| HUP9601582A3 HUP9601582A3 (en) | 2000-04-28 |
| HU219855B true HU219855B (hu) | 2001-08-28 |
Family
ID=25688320
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| HU9601582A HU219855B (hu) | 1995-06-07 | 1996-06-07 | Eljárás heteroaromás karbonsavak mikrobiológiai előállítására Alcaligenes nemzetségbe tartozó mikroorganizmusok segítségével |
Country Status (16)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US5702930A (hu) |
| EP (1) | EP0747486B1 (hu) |
| JP (1) | JP3810860B2 (hu) |
| KR (1) | KR100471703B1 (hu) |
| CN (1) | CN1127573C (hu) |
| AT (1) | ATE186328T1 (hu) |
| CA (1) | CA2177651C (hu) |
| CZ (1) | CZ288989B6 (hu) |
| DE (1) | DE59603534D1 (hu) |
| DK (1) | DK0747486T3 (hu) |
| ES (1) | ES2140757T3 (hu) |
| HU (1) | HU219855B (hu) |
| NO (1) | NO319146B1 (hu) |
| PT (1) | PT747486E (hu) |
| SK (1) | SK281873B6 (hu) |
| TW (1) | TW528803B (hu) |
Families Citing this family (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP5492876B2 (ja) * | 2009-04-30 | 2014-05-14 | 三井化学株式会社 | ３−メルカプトプロピオン酸またはその塩を製造する方法 |
| CN109251169B (zh) * | 2018-10-08 | 2022-08-16 | 盐城工学院 | 一种利用2-op精馏残渣制备吡啶-2-甲酸铬的方法 |
| CN111072558B (zh) * | 2019-11-05 | 2022-05-24 | 南京红太阳生物化学有限责任公司 | 一种2,3-二氯-6-氰基吡啶的制备方法 |
Family Cites Families (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS61162191A (ja) * | 1985-01-11 | 1986-07-22 | Nitto Chem Ind Co Ltd | 微生物による有機酸類の製造法 |
| JP3009421B2 (ja) * | 1990-02-28 | 2000-02-14 | 秀明 山田 | 有機酸の生物学的製造法 |
| GB9005965D0 (en) * | 1990-03-16 | 1990-05-09 | Shell Int Research | Herbicidal carboxamide derivatives |
| US5264361A (en) * | 1991-03-18 | 1993-11-23 | Lonza Ltd. | Microbiological process for the production of 6-hydroxypicolinic acid |
| US5270203A (en) * | 1992-03-13 | 1993-12-14 | Lonza Ltd. | Biologically pure culture of Alcaligenes faecalis DSM 6335 |
-
1996
- 1996-05-29 CA CA002177651A patent/CA2177651C/en not_active Expired - Fee Related
- 1996-06-04 SK SK716-96A patent/SK281873B6/sk not_active IP Right Cessation
- 1996-06-05 AT AT96109088T patent/ATE186328T1/de active
- 1996-06-05 DK DK96109088T patent/DK0747486T3/da active
- 1996-06-05 DE DE59603534T patent/DE59603534D1/de not_active Expired - Lifetime
- 1996-06-05 JP JP14271996A patent/JP3810860B2/ja not_active Expired - Fee Related
- 1996-06-05 ES ES96109088T patent/ES2140757T3/es not_active Expired - Lifetime
- 1996-06-05 CZ CZ19961636A patent/CZ288989B6/cs not_active IP Right Cessation
- 1996-06-05 EP EP96109088A patent/EP0747486B1/de not_active Expired - Lifetime
- 1996-06-05 PT PT96109088T patent/PT747486E/pt unknown
- 1996-06-06 US US08/659,362 patent/US5702930A/en not_active Expired - Lifetime
- 1996-06-06 NO NO19962389A patent/NO319146B1/no not_active IP Right Cessation
- 1996-06-07 CN CN96110476A patent/CN1127573C/zh not_active Expired - Fee Related
- 1996-06-07 KR KR1019960020328A patent/KR100471703B1/ko not_active IP Right Cessation
- 1996-06-07 HU HU9601582A patent/HU219855B/hu not_active IP Right Cessation
- 1996-06-12 TW TW085107071A patent/TW528803B/zh not_active IP Right Cessation
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| KR100471703B1 (ko) | 2005-06-20 |
| DK0747486T3 (da) | 2000-01-31 |
| NO962389D0 (no) | 1996-06-06 |
| CA2177651C (en) | 2008-01-22 |
| DE59603534D1 (de) | 1999-12-09 |
| HUP9601582A2 (en) | 1997-03-28 |
| HU9601582D0 (en) | 1996-07-29 |
| CZ288989B6 (cs) | 2001-10-17 |
| HUP9601582A3 (en) | 2000-04-28 |
| ATE186328T1 (de) | 1999-11-15 |
| US5702930A (en) | 1997-12-30 |
| EP0747486A1 (de) | 1996-12-11 |
| SK281873B6 (sk) | 2001-08-06 |
| CN1127573C (zh) | 2003-11-12 |
| CZ163696A3 (en) | 1997-01-15 |
| CN1145956A (zh) | 1997-03-26 |
| SK71696A3 (en) | 1997-01-08 |
| JP3810860B2 (ja) | 2006-08-16 |
| CA2177651A1 (en) | 1996-12-08 |
| NO962389L (no) | 1996-12-09 |
| PT747486E (pt) | 2000-04-28 |
| EP0747486B1 (de) | 1999-11-03 |
| KR970001546A (ko) | 1997-01-24 |
| NO319146B1 (no) | 2005-06-27 |
| ES2140757T3 (es) | 2000-03-01 |
| JPH08332094A (ja) | 1996-12-17 |
| TW528803B (en) | 2003-04-21 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| EP0046284B1 (en) | Method for preparing 2,5-diketo-d-gluconic acid and microorganisms for carrying out the method | |
| CZ279492B6 (cs) | Mikrobiologický způsob výroby kyseliny 6-hydroxypikolinové | |
| US5360731A (en) | Bacteria capable of stereospecifically hydrolyzing R-(-)-2,2-dimethylcyclopropanecarboxamide | |
| HU219855B (hu) | Eljárás heteroaromás karbonsavak mikrobiológiai előállítására Alcaligenes nemzetségbe tartozó mikroorganizmusok segítségével | |
| US20080286843A1 (en) | Process for Preparing 2-Hydroxy-Substituted Pyridines | |
| US5516661A (en) | Microbiological process for the production of aromatic hydroxy-heterocyclic carboxylic acids | |
| CA2093525A1 (en) | Microorganism and process for obtaining anthranilic acid | |
| US5238829A (en) | Microbiological process for the production of 6-hydroxypyrazinecarboxylic acid | |
| US5352592A (en) | Microbiological process for the production of 5-hydroxypyrazinecarboxylic acid | |
| US5338667A (en) | Microbiological process for the production of malonyl-7-amino-cephalosporanic acid derivatives using Sphingomonas sp. DSM 7007 | |
| US5270203A (en) | Biologically pure culture of Alcaligenes faecalis DSM 6335 | |
| CA2063225C (en) | Microbiological process for the production of 6-hydroxypicolinic acid | |
| CA2062667C (en) | Microbiological process for the production of 6-hydroxynicotinic acid | |
| PL184111B1 (pl) | Mikrobiologiczny sposób wytwarzania heteroaromatycznych kwasów karboksylowych | |
| US5234819A (en) | Method for preparing 2,5-diketo-D-gluconic acid | |
| CA2163602A1 (en) | Di-and trisubstituted pyridines and their preparation | |
| PT912751E (pt) | Processo para a producao de derivados de d-prolina por meio de microrganismos | |
| HU220465B1 (hu) | Mikrobiológiai eljárás 6-hidroxi-nikotinsav előállítására |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| MM4A | Lapse of definitive patent protection due to non-payment of fees |