HU217211B - Eljárás EHV-4 glikoprotein vakcina előállítására - Google Patents
Eljárás EHV-4 glikoprotein vakcina előállítására Download PDFInfo
- Publication number
- HU217211B HU217211B HU9300009A HU993A HU217211B HU 217211 B HU217211 B HU 217211B HU 9300009 A HU9300009 A HU 9300009A HU 993 A HU993 A HU 993A HU 217211 B HU217211 B HU 217211B
- Authority
- HU
- Hungary
- Prior art keywords
- nucleic acid
- ehv
- ser
- leu
- polypeptide
- Prior art date
Links
- 229960005486 vaccine Drugs 0.000 title claims abstract description 24
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 22
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 title claims abstract description 7
- 230000008569 process Effects 0.000 title claims abstract description 5
- 102000003886 Glycoproteins Human genes 0.000 title description 10
- 108090000288 Glycoproteins Proteins 0.000 title description 10
- 241000701089 Equid alphaherpesvirus 4 Species 0.000 claims abstract description 77
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 claims abstract description 65
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 claims abstract description 63
- 150000007523 nucleic acids Chemical group 0.000 claims abstract description 50
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 claims abstract description 7
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 claims abstract 2
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 claims description 60
- 108091028043 Nucleic acid sequence Proteins 0.000 claims description 31
- 239000012634 fragment Substances 0.000 claims description 23
- FWMNVWWHGCHHJJ-SKKKGAJSSA-N 4-amino-1-[(2r)-6-amino-2-[[(2r)-2-[[(2r)-2-[[(2r)-2-amino-3-phenylpropanoyl]amino]-3-phenylpropanoyl]amino]-4-methylpentanoyl]amino]hexanoyl]piperidine-4-carboxylic acid Chemical compound C([C@H](C(=O)N[C@H](CC(C)C)C(=O)N[C@H](CCCCN)C(=O)N1CCC(N)(CC1)C(O)=O)NC(=O)[C@H](N)CC=1C=CC=CC=1)C1=CC=CC=C1 FWMNVWWHGCHHJJ-SKKKGAJSSA-N 0.000 claims description 10
- 230000003053 immunization Effects 0.000 claims description 10
- 108020004707 nucleic acids Proteins 0.000 claims description 10
- 102000039446 nucleic acids Human genes 0.000 claims description 10
- 125000003275 alpha amino acid group Chemical group 0.000 claims description 9
- 239000000427 antigen Substances 0.000 claims description 9
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 claims description 9
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 claims description 9
- 241000283086 Equidae Species 0.000 claims description 8
- 239000002773 nucleotide Substances 0.000 claims description 8
- 125000003729 nucleotide group Chemical group 0.000 claims description 8
- 238000002649 immunization Methods 0.000 claims description 5
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 claims description 4
- 239000002253 acid Substances 0.000 claims description 3
- 238000012258 culturing Methods 0.000 claims description 3
- 238000002955 isolation Methods 0.000 claims description 3
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 claims description 3
- 239000000463 material Substances 0.000 claims description 2
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 claims description 2
- 239000013603 viral vector Substances 0.000 claims 5
- 230000001419 dependent effect Effects 0.000 claims 2
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 claims 2
- 108091026890 Coding region Proteins 0.000 claims 1
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 claims 1
- 229940031626 subunit vaccine Drugs 0.000 abstract description 5
- 230000009385 viral infection Effects 0.000 abstract description 2
- 208000036142 Viral infection Diseases 0.000 abstract 1
- 229940126580 vector vaccine Drugs 0.000 abstract 1
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 37
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 26
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 26
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 26
- 108020004414 DNA Proteins 0.000 description 25
- 241000700605 Viruses Species 0.000 description 19
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 description 15
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 15
- 241001529453 unidentified herpesvirus Species 0.000 description 14
- WHUUTDBJXJRKMK-UHFFFAOYSA-N Glutamic acid Natural products OC(=O)C(N)CCC(O)=O WHUUTDBJXJRKMK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- 239000013612 plasmid Substances 0.000 description 11
- 241000701093 Suid alphaherpesvirus 1 Species 0.000 description 9
- HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N Chloroform Chemical compound ClC(Cl)Cl HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- 241000283073 Equus caballus Species 0.000 description 8
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- 241000700588 Human alphaherpesvirus 1 Species 0.000 description 8
- 239000013598 vector Substances 0.000 description 8
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 7
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 description 6
- 108010026333 seryl-proline Proteins 0.000 description 6
- 102000053602 DNA Human genes 0.000 description 5
- 241000701081 Equid alphaherpesvirus 1 Species 0.000 description 5
- 241000588724 Escherichia coli Species 0.000 description 5
- 108020004511 Recombinant DNA Proteins 0.000 description 5
- 125000000151 cysteine group Chemical group N[C@@H](CS)C(=O)* 0.000 description 5
- 230000001086 cytosolic effect Effects 0.000 description 5
- 101150055782 gH gene Proteins 0.000 description 5
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 5
- 244000052769 pathogen Species 0.000 description 5
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 4
- 241000238631 Hexapoda Species 0.000 description 4
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 4
- 230000002238 attenuated effect Effects 0.000 description 4
- 101150002378 gC gene Proteins 0.000 description 4
- 230000013595 glycosylation Effects 0.000 description 4
- 238000006206 glycosylation reaction Methods 0.000 description 4
- 108010089804 glycyl-threonine Proteins 0.000 description 4
- 230000028993 immune response Effects 0.000 description 4
- 230000002163 immunogen Effects 0.000 description 4
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 4
- 108010057821 leucylproline Proteins 0.000 description 4
- 244000005700 microbiome Species 0.000 description 4
- 239000000047 product Substances 0.000 description 4
- 108010061238 threonyl-glycine Proteins 0.000 description 4
- SONUFGRSSMFHFN-IMJSIDKUSA-N Asn-Ser Chemical compound NC(=O)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O SONUFGRSSMFHFN-IMJSIDKUSA-N 0.000 description 3
- 108020004705 Codon Proteins 0.000 description 3
- 241000701085 Human alphaherpesvirus 3 Species 0.000 description 3
- VTJUNIYRYIAIHF-IUCAKERBSA-N Leu-Pro Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)N1CCC[C@H]1C(O)=O VTJUNIYRYIAIHF-IUCAKERBSA-N 0.000 description 3
- XGDCYUQSFDQISZ-BQBZGAKWSA-N Leu-Ser Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O XGDCYUQSFDQISZ-BQBZGAKWSA-N 0.000 description 3
- YBAFDPFAUTYYRW-UHFFFAOYSA-N N-L-alpha-glutamyl-L-leucine Natural products CC(C)CC(C(O)=O)NC(=O)C(N)CCC(O)=O YBAFDPFAUTYYRW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 230000004988 N-glycosylation Effects 0.000 description 3
- ISWSIDIOOBJBQZ-UHFFFAOYSA-N Phenol Chemical compound OC1=CC=CC=C1 ISWSIDIOOBJBQZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 108010076504 Protein Sorting Signals Proteins 0.000 description 3
- 240000004808 Saccharomyces cerevisiae Species 0.000 description 3
- 235000014680 Saccharomyces cerevisiae Nutrition 0.000 description 3
- WBAXJMCUFIXCNI-WDSKDSINSA-N Ser-Pro Chemical compound OC[C@H](N)C(=O)N1CCC[C@H]1C(O)=O WBAXJMCUFIXCNI-WDSKDSINSA-N 0.000 description 3
- XZKQVQKUZMAADP-IMJSIDKUSA-N Ser-Ser Chemical compound OC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O XZKQVQKUZMAADP-IMJSIDKUSA-N 0.000 description 3
- NHUHCSRWZMLRLA-UHFFFAOYSA-N Sulfisoxazole Chemical compound CC1=NOC(NS(=O)(=O)C=2C=CC(N)=CC=2)=C1C NHUHCSRWZMLRLA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 210000004899 c-terminal region Anatomy 0.000 description 3
- 230000001413 cellular effect Effects 0.000 description 3
- 238000012512 characterization method Methods 0.000 description 3
- 238000003776 cleavage reaction Methods 0.000 description 3
- 238000010367 cloning Methods 0.000 description 3
- 235000018417 cysteine Nutrition 0.000 description 3
- 108010050848 glycylleucine Proteins 0.000 description 3
- 229940031551 inactivated vaccine Drugs 0.000 description 3
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 3
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 3
- 108010031719 prolyl-serine Proteins 0.000 description 3
- 108010029020 prolylglycine Proteins 0.000 description 3
- 230000007017 scission Effects 0.000 description 3
- 230000003612 virological effect Effects 0.000 description 3
- HNXWVVHIGTZTBO-LKXGYXEUSA-N Asn-Ser-Thr Chemical compound C[C@@H](O)[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@@H](N)CC(N)=O HNXWVVHIGTZTBO-LKXGYXEUSA-N 0.000 description 2
- 235000014469 Bacillus subtilis Nutrition 0.000 description 2
- YBTCBQBIJKGSJP-BQBZGAKWSA-N Glu-Pro Chemical compound OC(=O)CC[C@H](N)C(=O)N1CCC[C@H]1C(O)=O YBTCBQBIJKGSJP-BQBZGAKWSA-N 0.000 description 2
- BCCRXDTUTZHDEU-VKHMYHEASA-N Gly-Ser Chemical compound NCC(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O BCCRXDTUTZHDEU-VKHMYHEASA-N 0.000 description 2
- OLIFSFOFKGKIRH-WUJLRWPWSA-N Gly-Thr Chemical compound C[C@@H](O)[C@@H](C(O)=O)NC(=O)CN OLIFSFOFKGKIRH-WUJLRWPWSA-N 0.000 description 2
- LESXFEZIFXFIQR-LURJTMIESA-N Leu-Gly Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)NCC(O)=O LESXFEZIFXFIQR-LURJTMIESA-N 0.000 description 2
- KZNQNBZMBZJQJO-UHFFFAOYSA-N N-glycyl-L-proline Natural products NCC(=O)N1CCCC1C(O)=O KZNQNBZMBZJQJO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108091034117 Oligonucleotide Proteins 0.000 description 2
- WEQJQNWXCSUVMA-RYUDHWBXSA-N Phe-Pro Chemical compound C([C@H]([NH3+])C(=O)N1[C@@H](CCC1)C([O-])=O)C1=CC=CC=C1 WEQJQNWXCSUVMA-RYUDHWBXSA-N 0.000 description 2
- ZKQOUHVVXABNDG-IUCAKERBSA-N Pro-Leu Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@@H]1CCCN1 ZKQOUHVVXABNDG-IUCAKERBSA-N 0.000 description 2
- LNICFEXCAHIJOR-DCAQKATOSA-N Pro-Ser-Leu Chemical compound [H]N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O LNICFEXCAHIJOR-DCAQKATOSA-N 0.000 description 2
- NFDYGNFETJVMSE-BQBZGAKWSA-N Ser-Leu Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@@H](N)CO NFDYGNFETJVMSE-BQBZGAKWSA-N 0.000 description 2
- 241000700584 Simplexvirus Species 0.000 description 2
- 230000024932 T cell mediated immunity Effects 0.000 description 2
- UQTNIFUCMBFWEJ-IWGUZYHVSA-N Thr-Asn Chemical compound C[C@@H](O)[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC(N)=O UQTNIFUCMBFWEJ-IWGUZYHVSA-N 0.000 description 2
- BIYXEUAFGLTAEM-WUJLRWPWSA-N Thr-Gly Chemical compound C[C@@H](O)[C@H](N)C(=O)NCC(O)=O BIYXEUAFGLTAEM-WUJLRWPWSA-N 0.000 description 2
- BQBCIBCLXBKYHW-CSMHCCOUSA-N Thr-Leu Chemical compound CC(C)C[C@@H](C([O-])=O)NC(=O)[C@@H]([NH3+])[C@@H](C)O BQBCIBCLXBKYHW-CSMHCCOUSA-N 0.000 description 2
- GVMXJJAJLIEASL-ZJDVBMNYSA-N Thr-Pro-Thr Chemical compound C[C@@H](O)[C@H](N)C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(O)=O GVMXJJAJLIEASL-ZJDVBMNYSA-N 0.000 description 2
- WPSKTVVMQCXPRO-BWBBJGPYSA-N Thr-Ser-Ser Chemical compound [H]N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O WPSKTVVMQCXPRO-BWBBJGPYSA-N 0.000 description 2
- MQGGXGKQSVEQHR-KKUMJFAQSA-N Tyr-Ser-Leu Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=C(O)C=C1 MQGGXGKQSVEQHR-KKUMJFAQSA-N 0.000 description 2
- JLCPHMBAVCMARE-UHFFFAOYSA-N [3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[5-(2-amino-6-oxo-1H-purin-9-yl)-3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[5-(2-amino-6-oxo-1H-purin-9-yl)-3-[[5-(2-amino-6-oxo-1H-purin-9-yl)-3-hydroxyoxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxyoxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxyoxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methyl [5-(6-aminopurin-9-yl)-2-(hydroxymethyl)oxolan-3-yl] hydrogen phosphate Polymers Cc1cn(C2CC(OP(O)(=O)OCC3OC(CC3OP(O)(=O)OCC3OC(CC3O)n3cnc4c3nc(N)[nH]c4=O)n3cnc4c3nc(N)[nH]c4=O)C(COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3CO)n3cnc4c(N)ncnc34)n3ccc(N)nc3=O)n3cnc4c(N)ncnc34)n3ccc(N)nc3=O)n3ccc(N)nc3=O)n3ccc(N)nc3=O)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cc(C)c(=O)[nH]c3=O)n3cc(C)c(=O)[nH]c3=O)n3ccc(N)nc3=O)n3cc(C)c(=O)[nH]c3=O)n3cnc4c3nc(N)[nH]c4=O)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c(N)ncnc34)O2)c(=O)[nH]c1=O JLCPHMBAVCMARE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 150000007513 acids Chemical class 0.000 description 2
- KOSRFJWDECSPRO-UHFFFAOYSA-N alpha-L-glutamyl-L-glutamic acid Natural products OC(=O)CCC(N)C(=O)NC(CCC(O)=O)C(O)=O KOSRFJWDECSPRO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 125000000539 amino acid group Chemical group 0.000 description 2
- AVKUERGKIZMTKX-NJBDSQKTSA-N ampicillin Chemical compound C1([C@@H](N)C(=O)N[C@H]2[C@H]3SC([C@@H](N3C2=O)C(O)=O)(C)C)=CC=CC=C1 AVKUERGKIZMTKX-NJBDSQKTSA-N 0.000 description 2
- 229960000723 ampicillin Drugs 0.000 description 2
- 230000003302 anti-idiotype Effects 0.000 description 2
- 230000000890 antigenic effect Effects 0.000 description 2
- 108010038633 aspartylglutamate Proteins 0.000 description 2
- 108010005774 beta-Galactosidase Proteins 0.000 description 2
- 102000005936 beta-Galactosidase Human genes 0.000 description 2
- AIYUHDOJVYHVIT-UHFFFAOYSA-M caesium chloride Chemical compound [Cl-].[Cs+] AIYUHDOJVYHVIT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 2
- 238000010276 construction Methods 0.000 description 2
- XUJNEKJLAYXESH-UHFFFAOYSA-N cysteine Natural products SCC(N)C(O)=O XUJNEKJLAYXESH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000029087 digestion Effects 0.000 description 2
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 2
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 2
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 2
- 230000002708 enhancing effect Effects 0.000 description 2
- 238000000605 extraction Methods 0.000 description 2
- 230000004927 fusion Effects 0.000 description 2
- 230000002068 genetic effect Effects 0.000 description 2
- 230000002209 hydrophobic effect Effects 0.000 description 2
- 210000000987 immune system Anatomy 0.000 description 2
- 230000002458 infectious effect Effects 0.000 description 2
- 239000004615 ingredient Substances 0.000 description 2
- 238000003780 insertion Methods 0.000 description 2
- 230000037431 insertion Effects 0.000 description 2
- 230000003834 intracellular effect Effects 0.000 description 2
- 230000004807 localization Effects 0.000 description 2
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 2
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 2
- 238000010369 molecular cloning Methods 0.000 description 2
- 239000008188 pellet Substances 0.000 description 2
- 108010012581 phenylalanylglutamate Proteins 0.000 description 2
- 239000013600 plasmid vector Substances 0.000 description 2
- 229920000642 polymer Polymers 0.000 description 2
- 108010087846 prolyl-prolyl-glycine Proteins 0.000 description 2
- 108010079317 prolyl-tyrosine Proteins 0.000 description 2
- 108010090894 prolylleucine Proteins 0.000 description 2
- 230000010076 replication Effects 0.000 description 2
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 2
- 229930182490 saponin Natural products 0.000 description 2
- 150000007949 saponins Chemical class 0.000 description 2
- 235000017709 saponins Nutrition 0.000 description 2
- 238000012163 sequencing technique Methods 0.000 description 2
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 2
- UCSJYZPVAKXKNQ-HZYVHMACSA-N streptomycin Chemical compound CN[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@](C=O)(O)[C@H](C)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](NC(N)=N)[C@H](O)[C@@H](NC(N)=N)[C@H](O)[C@H]1O UCSJYZPVAKXKNQ-HZYVHMACSA-N 0.000 description 2
- 230000009466 transformation Effects 0.000 description 2
- 241001515965 unidentified phage Species 0.000 description 2
- 230000001018 virulence Effects 0.000 description 2
- SBKVPJHMSUXZTA-MEJXFZFPSA-N (2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-1-[(2S)-5-amino-2-[[2-[[(2S)-1-[(2S)-6-amino-2-[[(2S)-2-[[(2S)-5-amino-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-amino-3-(1H-indol-3-yl)propanoyl]amino]-3-(1H-imidazol-4-yl)propanoyl]amino]-3-(1H-indol-3-yl)propanoyl]amino]-4-methylpentanoyl]amino]-5-oxopentanoyl]amino]-4-methylpentanoyl]amino]hexanoyl]pyrrolidine-2-carbonyl]amino]acetyl]amino]-5-oxopentanoyl]pyrrolidine-2-carbonyl]amino]-4-methylsulfanylbutanoyl]amino]-3-(4-hydroxyphenyl)propanoic acid Chemical compound C([C@@H](C(=O)N[C@@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)C(O)=O)NC(=O)[C@@H](N)CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)C1=CNC=N1 SBKVPJHMSUXZTA-MEJXFZFPSA-N 0.000 description 1
- 108091032973 (ribonucleotides)n+m Proteins 0.000 description 1
- 102000040650 (ribonucleotides)n+m Human genes 0.000 description 1
- QKNYBSVHEMOAJP-UHFFFAOYSA-N 2-amino-2-(hydroxymethyl)propane-1,3-diol;hydron;chloride Chemical compound Cl.OCC(N)(CO)CO QKNYBSVHEMOAJP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010042708 Acetylmuramyl-Alanyl-Isoglutamine Proteins 0.000 description 1
- 108010088751 Albumins Proteins 0.000 description 1
- 102000009027 Albumins Human genes 0.000 description 1
- JVMKBJNSRZWDBO-FXQIFTODSA-N Arg-Cys-Ser Chemical compound [H]N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O JVMKBJNSRZWDBO-FXQIFTODSA-N 0.000 description 1
- JAYIQMNQDMOBFY-KKUMJFAQSA-N Arg-Glu-Tyr Chemical compound [H]N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(O)=O JAYIQMNQDMOBFY-KKUMJFAQSA-N 0.000 description 1
- OTZMRMHZCMZOJZ-SRVKXCTJSA-N Arg-Leu-Glu Chemical compound [H]N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O OTZMRMHZCMZOJZ-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 1
- NMRHDSAOIURTNT-RWMBFGLXSA-N Arg-Leu-Pro Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(=O)N1CCC[C@@H]1C(=O)O)NC(=O)[C@H](CCCN=C(N)N)N NMRHDSAOIURTNT-RWMBFGLXSA-N 0.000 description 1
- COXMUHNBYCVVRG-DCAQKATOSA-N Arg-Leu-Ser Chemical compound [H]N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O COXMUHNBYCVVRG-DCAQKATOSA-N 0.000 description 1
- NGYHSXDNNOFHNE-AVGNSLFASA-N Arg-Pro-Leu Chemical compound [H]N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O NGYHSXDNNOFHNE-AVGNSLFASA-N 0.000 description 1
- IJYZHIOOBGIINM-WDSKDSINSA-N Arg-Ser Chemical compound OC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@@H](N)CCCN=C(N)N IJYZHIOOBGIINM-WDSKDSINSA-N 0.000 description 1
- FRBAHXABMQXSJQ-FXQIFTODSA-N Arg-Ser-Ser Chemical compound [H]N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O FRBAHXABMQXSJQ-FXQIFTODSA-N 0.000 description 1
- XNSKSTRGQIPTSE-ACZMJKKPSA-N Arg-Thr Chemical compound C[C@@H]([C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CCCN=C(N)N)N)O XNSKSTRGQIPTSE-ACZMJKKPSA-N 0.000 description 1
- VKCOHFFSTKCXEQ-OLHMAJIHSA-N Asn-Asn-Thr Chemical compound [H]N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(O)=O VKCOHFFSTKCXEQ-OLHMAJIHSA-N 0.000 description 1
- SPIPSJXLZVTXJL-ZLUOBGJFSA-N Asn-Cys-Ser Chemical compound NC(=O)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O SPIPSJXLZVTXJL-ZLUOBGJFSA-N 0.000 description 1
- OPEPUCYIGFEGSW-WDSKDSINSA-N Asn-Gly-Glu Chemical compound [H]N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O OPEPUCYIGFEGSW-WDSKDSINSA-N 0.000 description 1
- NLRJGXZWTKXRHP-DCAQKATOSA-N Asn-Leu-Arg Chemical compound [H]N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(O)=O NLRJGXZWTKXRHP-DCAQKATOSA-N 0.000 description 1
- VBKIFHUVGLOJKT-FKZODXBYSA-N Asn-Thr Chemical compound C[C@@H]([C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC(=O)N)N)O VBKIFHUVGLOJKT-FKZODXBYSA-N 0.000 description 1
- WUQXMTITJLFXAU-JIOCBJNQSA-N Asn-Thr-Pro Chemical compound C[C@H]([C@@H](C(=O)N1CCC[C@@H]1C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC(=O)N)N)O WUQXMTITJLFXAU-JIOCBJNQSA-N 0.000 description 1
- FYRVDDJMNISIKJ-UWVGGRQHSA-N Asn-Tyr Chemical compound NC(=O)C[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CC=C(O)C=C1 FYRVDDJMNISIKJ-UWVGGRQHSA-N 0.000 description 1
- CKAJHWFHHFSCDT-WHFBIAKZSA-N Asp-Glu Chemical compound OC(=O)C[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CCC(O)=O CKAJHWFHHFSCDT-WHFBIAKZSA-N 0.000 description 1
- YZQCXOFQZKCETR-UWVGGRQHSA-N Asp-Phe Chemical compound OC(=O)C[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CC=CC=C1 YZQCXOFQZKCETR-UWVGGRQHSA-N 0.000 description 1
- USNJAPJZSGTTPX-XVSYOHENSA-N Asp-Phe-Thr Chemical compound [H]N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(O)=O USNJAPJZSGTTPX-XVSYOHENSA-N 0.000 description 1
- PDIYGFYAMZZFCW-JIOCBJNQSA-N Asp-Thr-Pro Chemical compound C[C@H]([C@@H](C(=O)N1CCC[C@@H]1C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC(=O)O)N)O PDIYGFYAMZZFCW-JIOCBJNQSA-N 0.000 description 1
- YODBPLSWNJMZOJ-BPUTZDHNSA-N Asp-Trp-Arg Chemical compound C1=CC=C2C(=C1)C(=CN2)C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCCN=C(N)N)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC(=O)O)N YODBPLSWNJMZOJ-BPUTZDHNSA-N 0.000 description 1
- 108010071023 Bacterial Outer Membrane Proteins Proteins 0.000 description 1
- 108091003079 Bovine Serum Albumin Proteins 0.000 description 1
- 101100505076 Caenorhabditis elegans gly-2 gene Proteins 0.000 description 1
- 235000014653 Carica parviflora Nutrition 0.000 description 1
- 241000243321 Cnidaria Species 0.000 description 1
- 102000012410 DNA Ligases Human genes 0.000 description 1
- 108010061982 DNA Ligases Proteins 0.000 description 1
- 238000001712 DNA sequencing Methods 0.000 description 1
- 102000016911 Deoxyribonucleases Human genes 0.000 description 1
- 108010053770 Deoxyribonucleases Proteins 0.000 description 1
- KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N EDTA Chemical compound OC(=O)CN(CC(O)=O)CCN(CC(O)=O)CC(O)=O KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010067770 Endopeptidase K Proteins 0.000 description 1
- 101000686824 Enterobacteria phage N4 Virion DNA-directed RNA polymerase Proteins 0.000 description 1
- 101000644628 Escherichia phage Mu Tail fiber assembly protein U Proteins 0.000 description 1
- 241000206602 Eukaryota Species 0.000 description 1
- 108010074860 Factor Xa Proteins 0.000 description 1
- CVPXINNKRTZBMO-CIUDSAMLSA-N Glu-Arg-Asn Chemical compound C(C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(=O)N)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CCC(=O)O)N)CN=C(N)N CVPXINNKRTZBMO-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 1
- WOSRKEJQESVHGA-CIUDSAMLSA-N Glu-Arg-Ser Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O WOSRKEJQESVHGA-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 1
- YYOBUPFZLKQUAX-FXQIFTODSA-N Glu-Asn-Glu Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O YYOBUPFZLKQUAX-FXQIFTODSA-N 0.000 description 1
- ZJICFHQSPWFBKP-AVGNSLFASA-N Glu-Asn-Tyr Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(O)=O ZJICFHQSPWFBKP-AVGNSLFASA-N 0.000 description 1
- FYYSIASRLDJUNP-WHFBIAKZSA-N Glu-Asp Chemical compound OC(=O)CC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(O)=O FYYSIASRLDJUNP-WHFBIAKZSA-N 0.000 description 1
- FKGNJUCQKXQNRA-NRPADANISA-N Glu-Cys-Val Chemical compound CC(C)[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](CS)NC(=O)[C@@H](N)CCC(O)=O FKGNJUCQKXQNRA-NRPADANISA-N 0.000 description 1
- BUZMZDDKFCSKOT-CIUDSAMLSA-N Glu-Glu-Glu Chemical compound OC(=O)CC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O BUZMZDDKFCSKOT-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 1
- YBAFDPFAUTYYRW-YUMQZZPRSA-N Glu-Leu Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@@H](N)CCC(O)=O YBAFDPFAUTYYRW-YUMQZZPRSA-N 0.000 description 1
- FBEJIDRSQCGFJI-GUBZILKMSA-N Glu-Leu-Ser Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O FBEJIDRSQCGFJI-GUBZILKMSA-N 0.000 description 1
- LPHGXOWFAXFCPX-KKUMJFAQSA-N Glu-Pro-Phe Chemical compound C1C[C@H](N(C1)C(=O)[C@H](CCC(=O)O)N)C(=O)N[C@@H](CC2=CC=CC=C2)C(=O)O LPHGXOWFAXFCPX-KKUMJFAQSA-N 0.000 description 1
- LLEUXCDZPQOJMY-AAEUAGOBSA-N Glu-Trp Chemical compound C1=CC=C2C(C[C@H](NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)N)C(O)=O)=CNC2=C1 LLEUXCDZPQOJMY-AAEUAGOBSA-N 0.000 description 1
- KXRORHJIRAOQPG-SOUVJXGZSA-N Glu-Tyr-Pro Chemical compound C1C[C@@H](N(C1)C(=O)[C@H](CC2=CC=C(C=C2)O)NC(=O)[C@H](CCC(=O)O)N)C(=O)O KXRORHJIRAOQPG-SOUVJXGZSA-N 0.000 description 1
- GGEJHJIXRBTJPD-BYPYZUCNSA-N Gly-Asn-Gly Chemical compound NCC(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)NCC(O)=O GGEJHJIXRBTJPD-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 1
- XRTDOIOIBMAXCT-NKWVEPMBSA-N Gly-Asn-Pro Chemical compound C1C[C@@H](N(C1)C(=O)[C@H](CC(=O)N)NC(=O)CN)C(=O)O XRTDOIOIBMAXCT-NKWVEPMBSA-N 0.000 description 1
- XTQFHTHIAKKCTM-YFKPBYRVSA-N Gly-Glu-Gly Chemical compound NCC(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)NCC(O)=O XTQFHTHIAKKCTM-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 1
- XPJBQTCXPJNIFE-ZETCQYMHSA-N Gly-Gly-Leu Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(O)=O)NC(=O)CNC(=O)CN XPJBQTCXPJNIFE-ZETCQYMHSA-N 0.000 description 1
- UQJNXZSSGQIPIQ-FBCQKBJTSA-N Gly-Gly-Thr Chemical compound C[C@@H](O)[C@@H](C(O)=O)NC(=O)CNC(=O)CN UQJNXZSSGQIPIQ-FBCQKBJTSA-N 0.000 description 1
- DKEXFJVMVGETOO-LURJTMIESA-N Gly-Leu Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(O)=O)NC(=O)CN DKEXFJVMVGETOO-LURJTMIESA-N 0.000 description 1
- ULZCYBYDTUMHNF-IUCAKERBSA-N Gly-Leu-Glu Chemical compound NCC(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O ULZCYBYDTUMHNF-IUCAKERBSA-N 0.000 description 1
- UUYBFNKHOCJCHT-VHSXEESVSA-N Gly-Leu-Pro Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(=O)N1CCC[C@@H]1C(=O)O)NC(=O)CN UUYBFNKHOCJCHT-VHSXEESVSA-N 0.000 description 1
- LHYJCVCQPWRMKZ-WEDXCCLWSA-N Gly-Leu-Thr Chemical compound [H]NCC(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(O)=O LHYJCVCQPWRMKZ-WEDXCCLWSA-N 0.000 description 1
- MIIVFRCYJABHTQ-ONGXEEELSA-N Gly-Leu-Val Chemical compound [H]NCC(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(O)=O MIIVFRCYJABHTQ-ONGXEEELSA-N 0.000 description 1
- JBCLFWXMTIKCCB-VIFPVBQESA-N Gly-Phe Chemical compound NCC(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CC=CC=C1 JBCLFWXMTIKCCB-VIFPVBQESA-N 0.000 description 1
- MYXNLWDWWOTERK-BHNWBGBOSA-N Gly-Thr-Pro Chemical compound C[C@H]([C@@H](C(=O)N1CCC[C@@H]1C(=O)O)NC(=O)CN)O MYXNLWDWWOTERK-BHNWBGBOSA-N 0.000 description 1
- TVTZEOHWHUVYCG-KYNKHSRBSA-N Gly-Thr-Thr Chemical compound [H]NCC(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(O)=O TVTZEOHWHUVYCG-KYNKHSRBSA-N 0.000 description 1
- BNMRSWQOHIQTFL-JSGCOSHPSA-N Gly-Val-Phe Chemical compound NCC(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CC=CC=C1 BNMRSWQOHIQTFL-JSGCOSHPSA-N 0.000 description 1
- JBCLFWXMTIKCCB-UHFFFAOYSA-N H-Gly-Phe-OH Natural products NCC(=O)NC(C(O)=O)CC1=CC=CC=C1 JBCLFWXMTIKCCB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000701044 Human gammaherpesvirus 4 Species 0.000 description 1
- HFKJBCPRWWGPEY-BQBZGAKWSA-N L-arginyl-L-glutamic acid Chemical compound NC(=N)NCCC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O HFKJBCPRWWGPEY-BQBZGAKWSA-N 0.000 description 1
- LHSGPCFBGJHPCY-UHFFFAOYSA-N L-leucine-L-tyrosine Natural products CC(C)CC(N)C(=O)NC(C(O)=O)CC1=CC=C(O)C=C1 LHSGPCFBGJHPCY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- KFKWRHQBZQICHA-STQMWFEESA-N L-leucyl-L-phenylalanine Natural products CC(C)C[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CC=CC=C1 KFKWRHQBZQICHA-STQMWFEESA-N 0.000 description 1
- RNKSNIBMTUYWSH-YFKPBYRVSA-N L-prolylglycine Chemical compound [O-]C(=O)CNC(=O)[C@@H]1CCC[NH2+]1 RNKSNIBMTUYWSH-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 1
- TYYLDKGBCJGJGW-UHFFFAOYSA-N L-tryptophan-L-tyrosine Natural products C=1NC2=CC=CC=C2C=1CC(N)C(=O)NC(C(O)=O)CC1=CC=C(O)C=C1 TYYLDKGBCJGJGW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- WGNOPSQMIQERPK-GARJFASQSA-N Leu-Asn-Pro Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(=O)N)C(=O)N1CCC[C@@H]1C(=O)O)N WGNOPSQMIQERPK-GARJFASQSA-N 0.000 description 1
- WGNOPSQMIQERPK-UHFFFAOYSA-N Leu-Asn-Pro Natural products CC(C)CC(N)C(=O)NC(CC(=O)N)C(=O)N1CCCC1C(=O)O WGNOPSQMIQERPK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OGCQGUIWMSBHRZ-CIUDSAMLSA-N Leu-Asn-Ser Chemical compound [H]N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O OGCQGUIWMSBHRZ-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 1
- IASQBRJGRVXNJI-YUMQZZPRSA-N Leu-Cys-Gly Chemical compound [H]N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)NCC(O)=O IASQBRJGRVXNJI-YUMQZZPRSA-N 0.000 description 1
- NFNVDJGXRFEYTK-YUMQZZPRSA-N Leu-Glu Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CCC(O)=O NFNVDJGXRFEYTK-YUMQZZPRSA-N 0.000 description 1
- WIDZHJTYKYBLSR-DCAQKATOSA-N Leu-Glu-Glu Chemical compound [H]N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O WIDZHJTYKYBLSR-DCAQKATOSA-N 0.000 description 1
- IAJFFZORSWOZPQ-SRVKXCTJSA-N Leu-Leu-Asn Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(O)=O IAJFFZORSWOZPQ-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 1
- QNBVTHNJGCOVFA-AVGNSLFASA-N Leu-Leu-Glu Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CCC(O)=O QNBVTHNJGCOVFA-AVGNSLFASA-N 0.000 description 1
- RXGLHDWAZQECBI-SRVKXCTJSA-N Leu-Leu-Ser Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O RXGLHDWAZQECBI-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 1
- VCHVSKNMTXWIIP-SRVKXCTJSA-N Leu-Lys-Ser Chemical compound [H]N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O VCHVSKNMTXWIIP-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 1
- PTRKPHUGYULXPU-KKUMJFAQSA-N Leu-Phe-Ser Chemical compound [H]N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O PTRKPHUGYULXPU-KKUMJFAQSA-N 0.000 description 1
- UCBPDSYUVAAHCD-UWVGGRQHSA-N Leu-Pro-Gly Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)NCC(O)=O UCBPDSYUVAAHCD-UWVGGRQHSA-N 0.000 description 1
- KWLWZYMNUZJKMZ-IHRRRGAJSA-N Leu-Pro-Leu Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O KWLWZYMNUZJKMZ-IHRRRGAJSA-N 0.000 description 1
- XOWMDXHFSBCAKQ-SRVKXCTJSA-N Leu-Ser-Leu Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC(C)C XOWMDXHFSBCAKQ-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 1
- SBANPBVRHYIMRR-GARJFASQSA-N Leu-Ser-Pro Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N1CCC[C@@H]1C(=O)O)N SBANPBVRHYIMRR-GARJFASQSA-N 0.000 description 1
- SBANPBVRHYIMRR-UHFFFAOYSA-N Leu-Ser-Pro Natural products CC(C)CC(N)C(=O)NC(CO)C(=O)N1CCCC1C(O)=O SBANPBVRHYIMRR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- LRKCBIUDWAXNEG-CSMHCCOUSA-N Leu-Thr Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(O)=O LRKCBIUDWAXNEG-CSMHCCOUSA-N 0.000 description 1
- ZDJQVSIPFLMNOX-RHYQMDGZSA-N Leu-Thr-Arg Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CCCN=C(N)N ZDJQVSIPFLMNOX-RHYQMDGZSA-N 0.000 description 1
- LHSGPCFBGJHPCY-STQMWFEESA-N Leu-Tyr Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CC=C(O)C=C1 LHSGPCFBGJHPCY-STQMWFEESA-N 0.000 description 1
- BGGTYDNTOYRTTR-MEYUZBJRSA-N Leu-Tyr-Thr Chemical compound C[C@H]([C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC1=CC=C(C=C1)O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)N)O BGGTYDNTOYRTTR-MEYUZBJRSA-N 0.000 description 1
- HQVDJTYKCMIWJP-YUMQZZPRSA-N Lys-Asn-Gly Chemical compound [H]N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)NCC(O)=O HQVDJTYKCMIWJP-YUMQZZPRSA-N 0.000 description 1
- ULUQBUKAPDUKOC-GVXVVHGQSA-N Lys-Glu-Val Chemical compound [H]N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(O)=O ULUQBUKAPDUKOC-GVXVVHGQSA-N 0.000 description 1
- LCMWVZLBCUVDAZ-IUCAKERBSA-N Lys-Gly-Glu Chemical compound [NH3+]CCCC[C@H]([NH3+])C(=O)NCC(=O)N[C@H](C([O-])=O)CCC([O-])=O LCMWVZLBCUVDAZ-IUCAKERBSA-N 0.000 description 1
- OVAOHZIOUBEQCJ-IHRRRGAJSA-N Lys-Leu-Arg Chemical compound [H]N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(O)=O OVAOHZIOUBEQCJ-IHRRRGAJSA-N 0.000 description 1
- 108010038049 Mating Factor Proteins 0.000 description 1
- JQHYVIKEFYETEW-IHRRRGAJSA-N Met-Phe-Ser Chemical compound CSCC[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O)CC1=CC=CC=C1 JQHYVIKEFYETEW-IHRRRGAJSA-N 0.000 description 1
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 1
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 1
- SITLTJHOQZFJGG-UHFFFAOYSA-N N-L-alpha-glutamyl-L-valine Natural products CC(C)C(C(O)=O)NC(=O)C(N)CCC(O)=O SITLTJHOQZFJGG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- BQVUABVGYYSDCJ-UHFFFAOYSA-N Nalpha-L-Leucyl-L-tryptophan Natural products C1=CC=C2C(CC(NC(=O)C(N)CC(C)C)C(O)=O)=CNC2=C1 BQVUABVGYYSDCJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108700020497 Nucleopolyhedrovirus polyhedrin Proteins 0.000 description 1
- 108010038807 Oligopeptides Proteins 0.000 description 1
- 102000015636 Oligopeptides Human genes 0.000 description 1
- 108700026244 Open Reading Frames Proteins 0.000 description 1
- 101710116435 Outer membrane protein Proteins 0.000 description 1
- 241001631646 Papillomaviridae Species 0.000 description 1
- 229930182555 Penicillin Natural products 0.000 description 1
- JGSARLDLIJGVTE-MBNYWOFBSA-N Penicillin G Chemical compound N([C@H]1[C@H]2SC([C@@H](N2C1=O)C(O)=O)(C)C)C(=O)CC1=CC=CC=C1 JGSARLDLIJGVTE-MBNYWOFBSA-N 0.000 description 1
- ZWJKVFAYPLPCQB-UNQGMJICSA-N Phe-Arg-Thr Chemical compound C[C@@H](O)[C@H](NC(=O)[C@H](CCCN=C(N)N)NC(=O)[C@@H](N)Cc1ccccc1)C(O)=O ZWJKVFAYPLPCQB-UNQGMJICSA-N 0.000 description 1
- MECSIDWUTYRHRJ-KKUMJFAQSA-N Phe-Asn-Leu Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O MECSIDWUTYRHRJ-KKUMJFAQSA-N 0.000 description 1
- JXWLMUIXUXLIJR-QWRGUYRKSA-N Phe-Glu Chemical compound OC(=O)CC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=CC=C1 JXWLMUIXUXLIJR-QWRGUYRKSA-N 0.000 description 1
- YCCUXNNKXDGMAM-KKUMJFAQSA-N Phe-Leu-Ser Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O YCCUXNNKXDGMAM-KKUMJFAQSA-N 0.000 description 1
- UNBFGVQVQGXXCK-KKUMJFAQSA-N Phe-Ser-Leu Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O UNBFGVQVQGXXCK-KKUMJFAQSA-N 0.000 description 1
- QSWKNJAPHQDAAS-MELADBBJSA-N Phe-Ser-Pro Chemical compound C1C[C@@H](N(C1)C(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CC2=CC=CC=C2)N)C(=O)O QSWKNJAPHQDAAS-MELADBBJSA-N 0.000 description 1
- NYQBYASWHVRESG-MIMYLULJSA-N Phe-Thr Chemical compound C[C@@H](O)[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=CC=C1 NYQBYASWHVRESG-MIMYLULJSA-N 0.000 description 1
- SHUFSZDAIPLZLF-BEAPCOKYSA-N Phe-Thr-Pro Chemical compound C[C@H]([C@@H](C(=O)N1CCC[C@@H]1C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC2=CC=CC=C2)N)O SHUFSZDAIPLZLF-BEAPCOKYSA-N 0.000 description 1
- ZYNBEWGJFXTBDU-ACRUOGEOSA-N Phe-Tyr-Leu Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC1=CC=C(C=C1)O)NC(=O)[C@H](CC2=CC=CC=C2)N ZYNBEWGJFXTBDU-ACRUOGEOSA-N 0.000 description 1
- 108010039918 Polylysine Proteins 0.000 description 1
- LNLNHXIQPGKRJQ-SRVKXCTJSA-N Pro-Arg-Arg Chemical compound NC(N)=NCCC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](CCCN=C(N)N)NC(=O)[C@@H]1CCCN1 LNLNHXIQPGKRJQ-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 1
- BNBBNGZZKQUWCD-IUCAKERBSA-N Pro-Arg-Gly Chemical compound NC(N)=NCCC[C@@H](C(=O)NCC(O)=O)NC(=O)[C@@H]1CCCN1 BNBBNGZZKQUWCD-IUCAKERBSA-N 0.000 description 1
- ZSKJPKFTPQCPIH-RCWTZXSCSA-N Pro-Arg-Thr Chemical compound [H]N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(O)=O ZSKJPKFTPQCPIH-RCWTZXSCSA-N 0.000 description 1
- JQOHKCDMINQZRV-WDSKDSINSA-N Pro-Asn Chemical compound NC(=O)C[C@@H](C([O-])=O)NC(=O)[C@@H]1CCC[NH2+]1 JQOHKCDMINQZRV-WDSKDSINSA-N 0.000 description 1
- GLEOIKLQBZNKJZ-WDSKDSINSA-N Pro-Asp Chemical compound OC(=O)C[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@@H]1CCCN1 GLEOIKLQBZNKJZ-WDSKDSINSA-N 0.000 description 1
- VJLJGKQAOQJXJG-CIUDSAMLSA-N Pro-Asp-Glu Chemical compound [H]N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O VJLJGKQAOQJXJG-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 1
- FRKBNXCFJBPJOL-GUBZILKMSA-N Pro-Glu-Glu Chemical compound [H]N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O FRKBNXCFJBPJOL-GUBZILKMSA-N 0.000 description 1
- LGSANCBHSMDFDY-GARJFASQSA-N Pro-Glu-Pro Chemical compound C1C[C@H](NC1)C(=O)N[C@@H](CCC(=O)O)C(=O)N2CCC[C@@H]2C(=O)O LGSANCBHSMDFDY-GARJFASQSA-N 0.000 description 1
- ULIWFCCJIOEHMU-BQBZGAKWSA-N Pro-Gly-Asp Chemical compound OC(=O)C[C@@H](C(O)=O)NC(=O)CNC(=O)[C@@H]1CCCN1 ULIWFCCJIOEHMU-BQBZGAKWSA-N 0.000 description 1
- RUDOLGWDSKQQFF-DCAQKATOSA-N Pro-Leu-Asn Chemical compound [H]N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(O)=O RUDOLGWDSKQQFF-DCAQKATOSA-N 0.000 description 1
- MCWHYUWXVNRXFV-RWMBFGLXSA-N Pro-Leu-Pro Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(=O)N1CCC[C@@H]1C(=O)O)NC(=O)[C@@H]2CCCN2 MCWHYUWXVNRXFV-RWMBFGLXSA-N 0.000 description 1
- GFHXZNVJIKMAGO-IHRRRGAJSA-N Pro-Phe-Ser Chemical compound [H]N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O GFHXZNVJIKMAGO-IHRRRGAJSA-N 0.000 description 1
- RWCOTTLHDJWHRS-YUMQZZPRSA-N Pro-Pro Chemical compound OC(=O)[C@@H]1CCCN1C(=O)[C@H]1NCCC1 RWCOTTLHDJWHRS-YUMQZZPRSA-N 0.000 description 1
- JLMZKEQFMVORMA-SRVKXCTJSA-N Pro-Pro-Arg Chemical compound NC(N)=NCCC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@@H]1CCCN1C(=O)[C@H]1NCCC1 JLMZKEQFMVORMA-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 1
- LEIKGVHQTKHOLM-IUCAKERBSA-N Pro-Pro-Gly Chemical compound OC(=O)CNC(=O)[C@@H]1CCCN1C(=O)[C@H]1NCCC1 LEIKGVHQTKHOLM-IUCAKERBSA-N 0.000 description 1
- AFWBWPCXSWUCLB-WDSKDSINSA-N Pro-Ser Chemical compound OC[C@@H](C([O-])=O)NC(=O)[C@@H]1CCC[NH2+]1 AFWBWPCXSWUCLB-WDSKDSINSA-N 0.000 description 1
- OWQXAJQZLWHPBH-FXQIFTODSA-N Pro-Ser-Asn Chemical compound [H]N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(O)=O OWQXAJQZLWHPBH-FXQIFTODSA-N 0.000 description 1
- VVAWNPIOYXAMAL-KJEVXHAQSA-N Pro-Thr-Tyr Chemical compound [H]N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(O)=O VVAWNPIOYXAMAL-KJEVXHAQSA-N 0.000 description 1
- CXGLFEOYCJFKPR-RCWTZXSCSA-N Pro-Thr-Val Chemical compound [H]N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(O)=O CXGLFEOYCJFKPR-RCWTZXSCSA-N 0.000 description 1
- QDDJNKWPTJHROJ-UFYCRDLUSA-N Pro-Tyr-Tyr Chemical compound C([C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)NC(=O)[C@H]1NCCC1)C1=CC=C(O)C=C1 QDDJNKWPTJHROJ-UFYCRDLUSA-N 0.000 description 1
- KHRLUIPIMIQFGT-AVGNSLFASA-N Pro-Val-Leu Chemical compound [H]N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O KHRLUIPIMIQFGT-AVGNSLFASA-N 0.000 description 1
- 101710099276 Probable metalloendopeptidase Proteins 0.000 description 1
- 241000589516 Pseudomonas Species 0.000 description 1
- 102000006382 Ribonucleases Human genes 0.000 description 1
- 108010083644 Ribonucleases Proteins 0.000 description 1
- 241000702670 Rotavirus Species 0.000 description 1
- 241000607142 Salmonella Species 0.000 description 1
- NLQUOHDCLSFABG-GUBZILKMSA-N Ser-Arg-Arg Chemical compound NC(N)=NCCC[C@H](NC(=O)[C@H](CO)N)C(=O)N[C@@H](CCCN=C(N)N)C(O)=O NLQUOHDCLSFABG-GUBZILKMSA-N 0.000 description 1
- YUSRGTQIPCJNHQ-CIUDSAMLSA-N Ser-Arg-Glu Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O YUSRGTQIPCJNHQ-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 1
- OBXVZEAMXFSGPU-FXQIFTODSA-N Ser-Asn-Arg Chemical compound C(C[C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC(=O)N)NC(=O)[C@H](CO)N)CN=C(N)N OBXVZEAMXFSGPU-FXQIFTODSA-N 0.000 description 1
- OOKCGAYXSNJBGQ-ZLUOBGJFSA-N Ser-Asn-Asn Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(O)=O OOKCGAYXSNJBGQ-ZLUOBGJFSA-N 0.000 description 1
- UOLGINIHBRIECN-FXQIFTODSA-N Ser-Glu-Glu Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O UOLGINIHBRIECN-FXQIFTODSA-N 0.000 description 1
- UFKPDBLKLOBMRH-XHNCKOQMSA-N Ser-Glu-Pro Chemical compound C1C[C@@H](N(C1)C(=O)[C@H](CCC(=O)O)NC(=O)[C@H](CO)N)C(=O)O UFKPDBLKLOBMRH-XHNCKOQMSA-N 0.000 description 1
- WOUIMBGNEUWXQG-VKHMYHEASA-N Ser-Gly Chemical compound OC[C@H](N)C(=O)NCC(O)=O WOUIMBGNEUWXQG-VKHMYHEASA-N 0.000 description 1
- MLSQXWSRHURDMF-GARJFASQSA-N Ser-His-Pro Chemical compound C1C[C@@H](N(C1)C(=O)[C@H](CC2=CN=CN2)NC(=O)[C@H](CO)N)C(=O)O MLSQXWSRHURDMF-GARJFASQSA-N 0.000 description 1
- VMLONWHIORGALA-SRVKXCTJSA-N Ser-Leu-Leu Chemical compound CC(C)C[C@@H](C([O-])=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@@H]([NH3+])CO VMLONWHIORGALA-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 1
- VZQRNAYURWAEFE-KKUMJFAQSA-N Ser-Leu-Phe Chemical compound OC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CC=CC=C1 VZQRNAYURWAEFE-KKUMJFAQSA-N 0.000 description 1
- PTWIYDNFWPXQSD-GARJFASQSA-N Ser-Lys-Pro Chemical compound C1C[C@@H](N(C1)C(=O)[C@H](CCCCN)NC(=O)[C@H](CO)N)C(=O)O PTWIYDNFWPXQSD-GARJFASQSA-N 0.000 description 1
- PPQRSMGDOHLTBE-UWVGGRQHSA-N Ser-Phe Chemical compound OC[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CC=CC=C1 PPQRSMGDOHLTBE-UWVGGRQHSA-N 0.000 description 1
- MQUZANJDFOQOBX-SRVKXCTJSA-N Ser-Phe-Ser Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O MQUZANJDFOQOBX-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 1
- PYTKULIABVRXSC-BWBBJGPYSA-N Ser-Ser-Thr Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(O)=O PYTKULIABVRXSC-BWBBJGPYSA-N 0.000 description 1
- OLKICIBQRVSQMA-SRVKXCTJSA-N Ser-Ser-Tyr Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(O)=O OLKICIBQRVSQMA-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 1
- LDEBVRIURYMKQS-WISUUJSJSA-N Ser-Thr Chemical compound C[C@@H](O)[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@@H](N)CO LDEBVRIURYMKQS-WISUUJSJSA-N 0.000 description 1
- WUXCHQZLUHBSDJ-LKXGYXEUSA-N Ser-Thr-Asp Chemical compound OC[C@H](N)C(=O)N[C@@H]([C@H](O)C)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(O)=O WUXCHQZLUHBSDJ-LKXGYXEUSA-N 0.000 description 1
- SNXUIBACCONSOH-BWBBJGPYSA-N Ser-Thr-Ser Chemical compound OC[C@H](N)C(=O)N[C@@H]([C@H](O)C)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O SNXUIBACCONSOH-BWBBJGPYSA-N 0.000 description 1
- BDMWLJLPPUCLNV-XGEHTFHBSA-N Ser-Thr-Val Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(O)=O BDMWLJLPPUCLNV-XGEHTFHBSA-N 0.000 description 1
- FHXGMDRKJHKLKW-QWRGUYRKSA-N Ser-Tyr-Gly Chemical compound OC[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(=O)NCC(O)=O)CC1=CC=C(O)C=C1 FHXGMDRKJHKLKW-QWRGUYRKSA-N 0.000 description 1
- VVKVHAOOUGNDPJ-SRVKXCTJSA-N Ser-Tyr-Ser Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O VVKVHAOOUGNDPJ-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 1
- PCMZJFMUYWIERL-ZKWXMUAHSA-N Ser-Val-Asn Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(O)=O PCMZJFMUYWIERL-ZKWXMUAHSA-N 0.000 description 1
- HNDMFDBQXYZSRM-IHRRRGAJSA-N Ser-Val-Phe Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(O)=O HNDMFDBQXYZSRM-IHRRRGAJSA-N 0.000 description 1
- 108020004682 Single-Stranded DNA Proteins 0.000 description 1
- UIIMBOGNXHQVGW-DEQYMQKBSA-M Sodium bicarbonate-14C Chemical compound [Na+].O[14C]([O-])=O UIIMBOGNXHQVGW-DEQYMQKBSA-M 0.000 description 1
- 241000256251 Spodoptera frugiperda Species 0.000 description 1
- 241000194017 Streptococcus Species 0.000 description 1
- HYLXOQURIOCKIH-VQVTYTSYSA-N Thr-Arg Chemical compound C[C@@H](O)[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CCCNC(N)=N HYLXOQURIOCKIH-VQVTYTSYSA-N 0.000 description 1
- WFUAUEQXPVNAEF-ZJDVBMNYSA-N Thr-Arg-Thr Chemical compound C[C@@H](O)[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(O)=O)CCCN=C(N)N WFUAUEQXPVNAEF-ZJDVBMNYSA-N 0.000 description 1
- UNURFMVMXLENAZ-KJEVXHAQSA-N Thr-Arg-Tyr Chemical compound [H]N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(O)=O UNURFMVMXLENAZ-KJEVXHAQSA-N 0.000 description 1
- TZKPNGDGUVREEB-FOHZUACHSA-N Thr-Asn-Gly Chemical compound C[C@@H](O)[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)NCC(O)=O TZKPNGDGUVREEB-FOHZUACHSA-N 0.000 description 1
- JBHMLZSKIXMVFS-XVSYOHENSA-N Thr-Asn-Phe Chemical compound [H]N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(O)=O JBHMLZSKIXMVFS-XVSYOHENSA-N 0.000 description 1
- PQLXHSACXPGWPD-GSSVUCPTSA-N Thr-Asn-Thr Chemical compound [H]N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(O)=O PQLXHSACXPGWPD-GSSVUCPTSA-N 0.000 description 1
- UZJDBCHMIQXLOQ-HEIBUPTGSA-N Thr-Cys-Thr Chemical compound C[C@H]([C@@H](C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)O)N)O UZJDBCHMIQXLOQ-HEIBUPTGSA-N 0.000 description 1
- MEJHFIOYJHTWMK-VOAKCMCISA-N Thr-Leu-Leu Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@@H](N)[C@@H](C)O MEJHFIOYJHTWMK-VOAKCMCISA-N 0.000 description 1
- VRUFCJZQDACGLH-UVOCVTCTSA-N Thr-Leu-Thr Chemical compound [H]N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(O)=O VRUFCJZQDACGLH-UVOCVTCTSA-N 0.000 description 1
- ZSPQUTWLWGWTPS-HJGDQZAQSA-N Thr-Lys-Asp Chemical compound [H]N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(O)=O ZSPQUTWLWGWTPS-HJGDQZAQSA-N 0.000 description 1
- IQHUITKNHOKGFC-MIMYLULJSA-N Thr-Phe Chemical compound C[C@@H](O)[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CC=CC=C1 IQHUITKNHOKGFC-MIMYLULJSA-N 0.000 description 1
- VEIKMWOMUYMMMK-FCLVOEFKSA-N Thr-Phe-Phe Chemical compound C([C@H](NC(=O)[C@@H](N)[C@H](O)C)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC=CC=1)C(O)=O)C1=CC=CC=C1 VEIKMWOMUYMMMK-FCLVOEFKSA-N 0.000 description 1
- ABWNZPOIUJMNKT-IXOXFDKPSA-N Thr-Phe-Ser Chemical compound [H]N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O ABWNZPOIUJMNKT-IXOXFDKPSA-N 0.000 description 1
- GXDLGHLJTHMDII-WISUUJSJSA-N Thr-Ser Chemical compound C[C@@H](O)[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O GXDLGHLJTHMDII-WISUUJSJSA-N 0.000 description 1
- VBMOVTMNHWPZJR-SUSMZKCASA-N Thr-Thr-Glu Chemical compound [H]N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O VBMOVTMNHWPZJR-SUSMZKCASA-N 0.000 description 1
- QJIODPFLAASXJC-JHYOHUSXSA-N Thr-Thr-Phe Chemical compound C[C@H]([C@@H](C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(=O)O)N)O QJIODPFLAASXJC-JHYOHUSXSA-N 0.000 description 1
- ZMYCLHFLHRVOEA-HEIBUPTGSA-N Thr-Thr-Ser Chemical compound C[C@@H](O)[C@H](N)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O ZMYCLHFLHRVOEA-HEIBUPTGSA-N 0.000 description 1
- NJGMALCNYAMYCB-JRQIVUDYSA-N Thr-Tyr-Asn Chemical compound [H]N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(O)=O NJGMALCNYAMYCB-JRQIVUDYSA-N 0.000 description 1
- PELIQFPESHBTMA-WLTAIBSBSA-N Thr-Tyr-Gly Chemical compound C[C@@H](O)[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(=O)NCC(O)=O)CC1=CC=C(O)C=C1 PELIQFPESHBTMA-WLTAIBSBSA-N 0.000 description 1
- JAWUQFCGNVEDRN-MEYUZBJRSA-N Thr-Tyr-Leu Chemical compound C[C@H]([C@@H](C(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(C=C1)O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)O)N)O JAWUQFCGNVEDRN-MEYUZBJRSA-N 0.000 description 1
- BKVICMPZWRNWOC-RHYQMDGZSA-N Thr-Val-Leu Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](C(C)C)NC(=O)[C@@H](N)[C@@H](C)O BKVICMPZWRNWOC-RHYQMDGZSA-N 0.000 description 1
- 239000007983 Tris buffer Substances 0.000 description 1
- DXYQIGZZWYBXSD-JSGCOSHPSA-N Trp-Pro Chemical compound O=C([C@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)N)N1CCC[C@H]1C(O)=O DXYQIGZZWYBXSD-JSGCOSHPSA-N 0.000 description 1
- YXSSXUIBUJGHJY-SFJXLCSZSA-N Trp-Thr-Phe Chemical compound C([C@H](NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@@H](N)CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)[C@H](O)C)C(O)=O)C1=CC=CC=C1 YXSSXUIBUJGHJY-SFJXLCSZSA-N 0.000 description 1
- UPUNWAXSLPBMRK-XTWBLICNSA-N Trp-Thr-Thr Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CNC2=C1C=CC=C2)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(O)=O UPUNWAXSLPBMRK-XTWBLICNSA-N 0.000 description 1
- DVLHKUWLNKDINO-PMVMPFDFSA-N Trp-Tyr-Leu Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CNC2=C1C=CC=C2)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O DVLHKUWLNKDINO-PMVMPFDFSA-N 0.000 description 1
- MXKUGFHWYYKVDV-SZMVWBNQSA-N Trp-Val-Val Chemical compound CC(C)[C@H](NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@@H](N)Cc1c[nH]c2ccccc12)C(C)C)C(O)=O MXKUGFHWYYKVDV-SZMVWBNQSA-N 0.000 description 1
- MICSYKFECRFCTJ-IHRRRGAJSA-N Tyr-Arg-Asp Chemical compound C1=CC(=CC=C1C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCCN=C(N)N)C(=O)N[C@@H](CC(=O)O)C(=O)O)N)O MICSYKFECRFCTJ-IHRRRGAJSA-N 0.000 description 1
- ADBDQGBDNUTRDB-ULQDDVLXSA-N Tyr-Arg-Leu Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O ADBDQGBDNUTRDB-ULQDDVLXSA-N 0.000 description 1
- PZXUIGWOEWWFQM-SRVKXCTJSA-N Tyr-Asn-Asn Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(O)=O PZXUIGWOEWWFQM-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 1
- PDSLRCZINIDLMU-QWRGUYRKSA-N Tyr-Glu Chemical compound OC(=O)CC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=C(O)C=C1 PDSLRCZINIDLMU-QWRGUYRKSA-N 0.000 description 1
- PRONOHBTMLNXCZ-BZSNNMDCSA-N Tyr-Leu-Lys Chemical compound NCCCC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=C(O)C=C1 PRONOHBTMLNXCZ-BZSNNMDCSA-N 0.000 description 1
- XJPXTYLVMUZGNW-IHRRRGAJSA-N Tyr-Pro-Asp Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(O)=O XJPXTYLVMUZGNW-IHRRRGAJSA-N 0.000 description 1
- QKXAEWMHAAVVGS-KKUMJFAQSA-N Tyr-Pro-Glu Chemical compound N[C@@H](Cc1ccc(O)cc1)C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O QKXAEWMHAAVVGS-KKUMJFAQSA-N 0.000 description 1
- RWOKVQUCENPXGE-IHRRRGAJSA-N Tyr-Ser-Arg Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(O)=O RWOKVQUCENPXGE-IHRRRGAJSA-N 0.000 description 1
- AOIZTZRWMSPPAY-KAOXEZKKSA-N Tyr-Thr-Pro Chemical compound C[C@H]([C@@H](C(=O)N1CCC[C@@H]1C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC2=CC=C(C=C2)O)N)O AOIZTZRWMSPPAY-KAOXEZKKSA-N 0.000 description 1
- 108010064997 VPY tripeptide Proteins 0.000 description 1
- 241000700618 Vaccinia virus Species 0.000 description 1
- UDNYEPLJTRDMEJ-RCOVLWMOSA-N Val-Asn-Gly Chemical compound CC(C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(=O)N)C(=O)NCC(=O)O)N UDNYEPLJTRDMEJ-RCOVLWMOSA-N 0.000 description 1
- SRWWRLKBEJZFPW-IHRRRGAJSA-N Val-Cys-Phe Chemical compound CC(C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(=O)O)N SRWWRLKBEJZFPW-IHRRRGAJSA-N 0.000 description 1
- HIZMLPKDJAXDRG-FXQIFTODSA-N Val-Cys-Ser Chemical compound CC(C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)O)N HIZMLPKDJAXDRG-FXQIFTODSA-N 0.000 description 1
- IRLYZKKNBFPQBW-XGEHTFHBSA-N Val-Cys-Thr Chemical compound C[C@H]([C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CS)NC(=O)[C@H](C(C)C)N)O IRLYZKKNBFPQBW-XGEHTFHBSA-N 0.000 description 1
- JKHXYJKMNSSFFL-IUCAKERBSA-N Val-Lys Chemical compound CC(C)[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CCCCN JKHXYJKMNSSFFL-IUCAKERBSA-N 0.000 description 1
- SSYBNWFXCFNRFN-GUBZILKMSA-N Val-Pro-Ser Chemical compound CC(C)[C@H](N)C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O SSYBNWFXCFNRFN-GUBZILKMSA-N 0.000 description 1
- QWCZXKIFPWPQHR-JYJNAYRXSA-N Val-Pro-Tyr Chemical compound CC(C)[C@H](N)C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CC=C(O)C=C1 QWCZXKIFPWPQHR-JYJNAYRXSA-N 0.000 description 1
- BZDGLJPROOOUOZ-XGEHTFHBSA-N Val-Thr-Cys Chemical compound C[C@H]([C@@H](C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)O)NC(=O)[C@H](C(C)C)N)O BZDGLJPROOOUOZ-XGEHTFHBSA-N 0.000 description 1
- 230000005856 abnormality Effects 0.000 description 1
- 239000000654 additive Substances 0.000 description 1
- 239000002671 adjuvant Substances 0.000 description 1
- 239000011543 agarose gel Substances 0.000 description 1
- 102000004139 alpha-Amylases Human genes 0.000 description 1
- 108090000637 alpha-Amylases Proteins 0.000 description 1
- 229940024171 alpha-amylase Drugs 0.000 description 1
- 108010050025 alpha-glutamyltryptophan Proteins 0.000 description 1
- WNROFYMDJYEPJX-UHFFFAOYSA-K aluminium hydroxide Chemical compound [OH-].[OH-].[OH-].[Al+3] WNROFYMDJYEPJX-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 230000009435 amidation Effects 0.000 description 1
- 238000007112 amidation reaction Methods 0.000 description 1
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 1
- 208000007502 anemia Diseases 0.000 description 1
- 230000005875 antibody response Effects 0.000 description 1
- 210000000628 antibody-producing cell Anatomy 0.000 description 1
- 239000012736 aqueous medium Substances 0.000 description 1
- 239000007900 aqueous suspension Substances 0.000 description 1
- 108010013835 arginine glutamate Proteins 0.000 description 1
- 108010069205 aspartyl-phenylalanine Proteins 0.000 description 1
- 108010047857 aspartylglycine Proteins 0.000 description 1
- 210000003719 b-lymphocyte Anatomy 0.000 description 1
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 description 1
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 1
- 238000009395 breeding Methods 0.000 description 1
- 230000001488 breeding effect Effects 0.000 description 1
- 230000021523 carboxylation Effects 0.000 description 1
- 238000006473 carboxylation reaction Methods 0.000 description 1
- 239000000969 carrier Substances 0.000 description 1
- 239000005018 casein Substances 0.000 description 1
- BECPQYXYKAMYBN-UHFFFAOYSA-N casein, tech. Chemical compound NCCCCC(C(O)=O)N=C(O)C(CC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CC(C)C)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(CC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(C(C)O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(COP(O)(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(N)CC1=CC=CC=C1 BECPQYXYKAMYBN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000021240 caseins Nutrition 0.000 description 1
- 239000013592 cell lysate Substances 0.000 description 1
- 108091092356 cellular DNA Proteins 0.000 description 1
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 1
- 210000004978 chinese hamster ovary cell Anatomy 0.000 description 1
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 description 1
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 1
- 108010016616 cysteinylglycine Proteins 0.000 description 1
- 230000009089 cytolysis Effects 0.000 description 1
- 238000012217 deletion Methods 0.000 description 1
- 230000037430 deletion Effects 0.000 description 1
- VHJLVAABSRFDPM-QWWZWVQMSA-N dithiothreitol Chemical compound SC[C@@H](O)[C@H](O)CS VHJLVAABSRFDPM-QWWZWVQMSA-N 0.000 description 1
- 239000003937 drug carrier Substances 0.000 description 1
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 1
- 239000003995 emulsifying agent Substances 0.000 description 1
- 206010014599 encephalitis Diseases 0.000 description 1
- 239000003797 essential amino acid Substances 0.000 description 1
- 235000020776 essential amino acid Nutrition 0.000 description 1
- 210000003527 eukaryotic cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000002349 favourable effect Effects 0.000 description 1
- 239000012091 fetal bovine serum Substances 0.000 description 1
- 238000005194 fractionation Methods 0.000 description 1
- 108020001507 fusion proteins Proteins 0.000 description 1
- 102000037865 fusion proteins Human genes 0.000 description 1
- 108010063718 gamma-glutamylaspartic acid Proteins 0.000 description 1
- 238000001502 gel electrophoresis Methods 0.000 description 1
- 235000013922 glutamic acid Nutrition 0.000 description 1
- 239000004220 glutamic acid Substances 0.000 description 1
- ZDXPYRJPNDTMRX-UHFFFAOYSA-N glutamine Natural products OC(=O)C(N)CCC(N)=O ZDXPYRJPNDTMRX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010055341 glutamyl-glutamic acid Proteins 0.000 description 1
- 108010019832 glycyl-asparaginyl-glycine Proteins 0.000 description 1
- 108010026364 glycyl-glycyl-leucine Proteins 0.000 description 1
- YMAWOPBAYDPSLA-UHFFFAOYSA-N glycylglycine Chemical compound [NH3+]CC(=O)NCC([O-])=O YMAWOPBAYDPSLA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010081551 glycylphenylalanine Proteins 0.000 description 1
- 108010077515 glycylproline Proteins 0.000 description 1
- 108010037850 glycylvaline Proteins 0.000 description 1
- 108060003552 hemocyanin Proteins 0.000 description 1
- 230000028996 humoral immune response Effects 0.000 description 1
- 210000004408 hybridoma Anatomy 0.000 description 1
- 230000036039 immunity Effects 0.000 description 1
- 230000005847 immunogenicity Effects 0.000 description 1
- 230000002779 inactivation Effects 0.000 description 1
- 239000000411 inducer Substances 0.000 description 1
- 230000001939 inductive effect Effects 0.000 description 1
- 230000003993 interaction Effects 0.000 description 1
- 230000016507 interphase Effects 0.000 description 1
- 238000007918 intramuscular administration Methods 0.000 description 1
- 238000001990 intravenous administration Methods 0.000 description 1
- 108010077158 leucinyl-arginyl-tryptophan Proteins 0.000 description 1
- 108010034529 leucyl-lysine Proteins 0.000 description 1
- 108010044056 leucyl-phenylalanine Proteins 0.000 description 1
- 108010073472 leucyl-prolyl-proline Proteins 0.000 description 1
- 108010012058 leucyltyrosine Proteins 0.000 description 1
- 229940124590 live attenuated vaccine Drugs 0.000 description 1
- 229940023832 live vector-vaccine Drugs 0.000 description 1
- 229940023012 live-attenuated vaccine Drugs 0.000 description 1
- 230000002934 lysing effect Effects 0.000 description 1
- 229920002521 macromolecule Polymers 0.000 description 1
- 210000004962 mammalian cell Anatomy 0.000 description 1
- 239000000693 micelle Substances 0.000 description 1
- 239000007758 minimum essential medium Substances 0.000 description 1
- 230000035772 mutation Effects 0.000 description 1
- 210000004897 n-terminal region Anatomy 0.000 description 1
- 229920005615 natural polymer Polymers 0.000 description 1
- 238000006386 neutralization reaction Methods 0.000 description 1
- 239000003921 oil Substances 0.000 description 1
- 231100000590 oncogenic Toxicity 0.000 description 1
- 230000002246 oncogenic effect Effects 0.000 description 1
- 239000006174 pH buffer Substances 0.000 description 1
- 230000001717 pathogenic effect Effects 0.000 description 1
- 230000007918 pathogenicity Effects 0.000 description 1
- 230000035515 penetration Effects 0.000 description 1
- 229940049954 penicillin Drugs 0.000 description 1
- 230000026731 phosphorylation Effects 0.000 description 1
- 238000006366 phosphorylation reaction Methods 0.000 description 1
- 229920001308 poly(aminoacid) Polymers 0.000 description 1
- 108010054442 polyalanine Proteins 0.000 description 1
- 229920000447 polyanionic polymer Polymers 0.000 description 1
- 229920000656 polylysine Polymers 0.000 description 1
- 238000004321 preservation Methods 0.000 description 1
- 230000002265 prevention Effects 0.000 description 1
- 108700042769 prolyl-leucyl-glycine Proteins 0.000 description 1
- 108010077112 prolyl-proline Proteins 0.000 description 1
- 108010070643 prolylglutamic acid Proteins 0.000 description 1
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 1
- 239000001397 quillaja saponaria molina bark Substances 0.000 description 1
- 239000011541 reaction mixture Substances 0.000 description 1
- 208000023504 respiratory system disease Diseases 0.000 description 1
- 108091008146 restriction endonucleases Proteins 0.000 description 1
- 229920002477 rna polymer Polymers 0.000 description 1
- 230000035939 shock Effects 0.000 description 1
- 235000020183 skimmed milk Nutrition 0.000 description 1
- 210000004927 skin cell Anatomy 0.000 description 1
- 210000004989 spleen cell Anatomy 0.000 description 1
- 239000003381 stabilizer Substances 0.000 description 1
- 238000010561 standard procedure Methods 0.000 description 1
- 230000004936 stimulating effect Effects 0.000 description 1
- 229960005322 streptomycin Drugs 0.000 description 1
- 238000007920 subcutaneous administration Methods 0.000 description 1
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 description 1
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 1
- 229920001059 synthetic polymer Polymers 0.000 description 1
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 1
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 1
- 239000003053 toxin Substances 0.000 description 1
- 231100000765 toxin Toxicity 0.000 description 1
- 108700012359 toxins Proteins 0.000 description 1
- 238000010361 transduction Methods 0.000 description 1
- 230000026683 transduction Effects 0.000 description 1
- 238000001890 transfection Methods 0.000 description 1
- 238000013519 translation Methods 0.000 description 1
- LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N tris Chemical compound OCC(N)(CO)CO LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010084932 tryptophyl-proline Proteins 0.000 description 1
- 241000701161 unidentified adenovirus Species 0.000 description 1
- 241000712461 unidentified influenza virus Species 0.000 description 1
- 108010073969 valyllysine Proteins 0.000 description 1
- 229960004854 viral vaccine Drugs 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/005—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from viruses
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
- A61P31/12—Antivirals
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
- A61P31/12—Antivirals
- A61P31/20—Antivirals for DNA viruses
- A61P31/22—Antivirals for DNA viruses for herpes viruses
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
- C07K16/08—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from viruses
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2710/00—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA dsDNA viruses
- C12N2710/00011—Details
- C12N2710/16011—Herpesviridae
- C12N2710/16711—Varicellovirus, e.g. human herpesvirus 3, Varicella Zoster, pseudorabies
- C12N2710/16722—New viral proteins or individual genes, new structural or functional aspects of known viral proteins or genes
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2710/00—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA dsDNA viruses
- C12N2710/00011—Details
- C12N2710/16011—Herpesviridae
- C12N2710/16711—Varicellovirus, e.g. human herpesvirus 3, Varicella Zoster, pseudorabies
- C12N2710/16734—Use of virus or viral component as vaccine, e.g. live-attenuated or inactivated virus, VLP, viral protein
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2710/00—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA dsDNA viruses
- C12N2710/00011—Details
- C12N2710/16011—Herpesviridae
- C12N2710/16711—Varicellovirus, e.g. human herpesvirus 3, Varicella Zoster, pseudorabies
- C12N2710/16741—Use of virus, viral particle or viral elements as a vector
- C12N2710/16743—Use of virus, viral particle or viral elements as a vector viral genome or elements thereof as genetic vector
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Virology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Communicable Diseases (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Public Health (AREA)
- Gastroenterology & Hepatology (AREA)
- Oncology (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Immunology (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Saccharide Compounds (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
Abstract
A találmány EHV–4 gH és gC pőlipeptidek előállítására vőnatkőzik,amelyek alkalmazhatók lővaknál EHV–4 vírűs őkőzta fertőzések ellenivakcinák hatóanyagaként. A találmány vőnatkőzik tővábbá ezenpőlipeptideket kódőló nűkleinsavszekvenciák előállítására is, amelyekfelhasználhatók alegység- vagy vektőrvakcinák előállítására. Atalálmány őltalmi körébe tartőzik tővábbá az EHV–4 vakcinákelőállítási eljárása is. ŕ
Description
A találmány tárgya eljárás lóherpeszvírus-4 polipeptidet kódoló nukleinsavszekvencia, ilyen nukleinsavszekvenciát tartalmazó nukleinsavmolekula, az említett nukleinsavszekvenciát tartalmazó vektorvírus vagy gazdasejt, egy EHV-4 polipeptid, ezzel a polipeptiddel immunoreaktív antitestek, az EHV-4-fertőzéssel szembeni vakcina előállítására.
A lóherpeszvírus-4 (a továbbiakban EHV-4 vagy lóherpeszvírus-4) hasonlóan a lóherpeszvírus- 1-hez, egy alfa-herpeszvírus, amely igen jelentős gazdasági veszteségekért felelős a lótenyésztésben. Az EHV-4 elsősorban légzőszervi megbetegedésekkel kapcsolatos, bár az EHV-4 által okozott vetélésekről is beszámolnak esetenként.
Az EHV-4 genomját kétszálú DNS-ként jellemezték, amely két, kovalens módon kötődő szegmenst tartalmaz (L, 109 kbp, S, 35 kbp), ez utóbbi invertált, ismétlődő egységekkel végződik.
A herpeszvírusok glikoproteinjei lényeges virális funkciókat közvetítenek, így például celluláris kapcsolódást, a sejtbe való penetrációt és patogenitást. Továbbá a herpeszvírus-glikoproteinek kritikus komponensei a vírus és a gazdaimmunrendszer közötti kölcsönhatásnak. Számos tanulmány, különösen a herpesz szimplex vírus (HSV) jól definiált glikoproteinjével kapcsolatosak, kimutatta a herpeszvírus glikoproteinek fontosságát mind az antitest, mind a celluláris immunválasszal kapcsolatban.
Bár a herpeszvírus glikoproteinek szerkezetében és működésében igen jelentős eltérések vannak, bizonyos hasonlóságokat a DNS- és proteinszekvenciákban kimutattak. Ennek alapján a különböző herpeszvírus-proteineket különböző csoportokba osztályozták, amelyek mindegyike homológ proteineket tartalmaz, amelyek specifikus konzervált szakasz jelenlétével vannak kapcsolatban. Ilyen homológ csoportok például a következők: Herpes Simplex vírus-1 (HSV-1) gB; Pseudorabies vírus (PRV) gll; Bovin herpeszvírus (BHV) gl, HSV-1, gD, PRV gp50, BHV glV; EHV-1, gpl4, PRV gl, Varicella-zoster vírus (VZV) gll. A Herpes Simplex vírus-1, a Varicella-zoster vírus és a Pseudorabies vírus (PRV) gH proteinjeit térképezték és szekvenálták, és kimutatták, hogy részt vesznek a vírus elleni védelemben (Gompels, U. és A. Minson (1986), Virology 153, 230; Keller P. M. és munkatársai (1987), Virology 157, 526; WO 89/10965 közzétételi számú szabadalmi bejelentés). Több herpeszvírus gC-típusú glikoproteinjének szekvenciáját publikálták (például HSV-1, PRV, EHV-1, Frink R. J. és munkatársai, (1983), J. Virol. 45, 634; Robbins A. K. és munkatársai, (1986), J. Virol. 58, 339; Allén G. P. és Coogle L. D. (1988), J. Virol. 62, 2850). Azonban egyik publikációban sem ismertetik az EHV-4 gH vagy gC homológok jellemzését vagy pontos elhelyezkedését az EHV genomban, se nem adnak kitanítást ezen proteinek vagy ezen proteineket kódoló gének felhasználására az EHV-4 fertőzések elleni vakcinák előállításánál.
Az EHV-4 gH-típusú és gC-típusú proteineket a következőkben EHV-4 gH, illetve EHV-4 gC-ként jelöljük.
Régóta fennáll az igény az EHV-4 fertőzések elleni vakcinák iránt.
A jelenlegi vakcinák kémiailag inaktivált vírusvakcinákat és módosított élő vírusvakcinákat tartalmaznak. Az inaktivált vakcinák azonban általában csak alacsony szintű immunitást indukálnak, ezáltal további immunizálás szükséges, előnytelenül további adalékokat kell alkalmazni és költséges az előállításuk. Továbbá bizonyos fertőző vírusrészecskék az inaktiválási folyamatot túlélhetik, és így az adagolás után betegséget válthatnak ki az állatnál. Általában a gyengített vírusvakcinák az előnyösek, ezek sokkal hosszabban tartó immunválaszt váltanak ki (mind Immorálist, mind cellulárist), és a gyártásuk is egyszerűbb. Mostanáig csupán élő, gyengített EHV-4 vakcinák voltak hozzáférhetők, amelyek élő EHV-4 vírusait szövettenyészetben virulens törzsek sorozatpasszálásával gyöngítették. Ezen kezelés következtében azonban ellenőrizhetetlen mutációk kerülnek be a virális genomba, ami a virulenciában és immunizáló tulajdonságokban heterogén vírusrészecskéket eredményez. Ismert továbbá, hogy ilyen tradicionális módon gyengített élő vírusvakcinák virulenssé visszaváltozhatnak, ami a kezelt állatok megbetegedését és a kórokozók más állatokra való esetleges átterjedését válthatja ki.
A csak a patogének elleni immunválaszt kiváltani képes, szükséges és releváns EHV-4 immunogén anyagot vagy ezt kódoló genetikai információt tartalmazó vakcinák nem mutatják a fentiekben az élő vagy inaktivált vakcinák hátrányait.
A találmány értelmében egy, az EHV-4 gH vagy gC polipeptidet kódoló nukleinsavszekvencia vagy annak antigénfragmense felhasználható lovak immunizálására EHV-4 vírusfertőzéssel szemben, és ez a vakcina nem rendelkezik a fentiekben az inaktivált vagy élő, gyengített vakcinákkal kapcsolatban említett hátrányokkal.
A „nukleinsavszekvencia” kifejezés tetszőleges hosszúságú, polimer nukleotidokra vonatkozik, ezek lehetnek akár ribonukleinsav- akár dezoxiribonukleinsav-szekvenciák. Elvileg ez a kifejezés a molekula primer szerkezetére utal. így a kifejezés magában foglalja mind az egyszálú és kétszálú DNS-t, mind az egy szálú és kétszálú RNS-t, és ezek módosításait.
A „polipeptid” kifejezés általánosságban biológiailag aktív aminosavmolekula-láncra vonatkozik, nem utal a termék egy adott hosszúságára, és kívánt esetben in vivő vagy in vitro módosítani lehet, így például glikozilálással, amidálással, karboxilezéssel vagy foszforilezéssel, így beletartoznak többek között például a peptidek, oligopeptidek és proteinek.
Az említett gH vagy gC polipeptidek homológok más herpeszvírusok gH vagy gC megfelelőjével, és a gH vagy gC polipeptidhomológok konzervált szakaszaival azonosíthatók vagy jellemezhetők.
Az EHV-4 gH polipeptidet kódoló gén a BamHI C fragmenshez kapcsolódik (1. ábra) és egy 855 aminosavból álló proteint kódol, amelynek becsült molekulatömege 94 000 D. Az aminosavszekvenciából (SEQ ID NO: 1) a következő szerkezeti jellemzők származtathatók a membrán-glikoproteinekre.
HU 217 211 Β
- A primer transzlációs tennék szélső N-terminális szakaszán belül egy hidrofób aminosavcsoportból álló területet tartalmazó szignálpeptid azonosítható. A hasítási hely körülbelül Ala19-nél van, a szignálpeptid hasítása után a gH becsült molekulatömege körülbelül 92 130 D.
- A 20-816 csoportok alkotják a hidrofil szélső domént, amely 11 N-kapcsolású glikozilálási helyet (N-X-S/T) tartalmaz.
- A körülbelül 20 aminosavcsoportot tartalmazó hidrofób transzmembrándomén a C-vég felé helyezkedik el, körülbelül a 837-855 helynél.
Az EHV-4 gH citoplazmikus doménje a 837-855 aminosavhelytől található.
Gompels és munkatársai, valamint Cranage és munkatársai (Gompels és munkatársai, J. Gén. Virol. 69, 2819, 1988 és Cranage és munkatársai, J. Virol. 62, 1416, 1988) összehasonlították az alfa-, béta- és gamma-herpeszvírusok gH proteinjeinek aminosavszekvenciáját, és rámutattak a gH proteinek néhány jellegzetességére, amelyek a herpeszvíruscsaládban mindenhol megvannak:
- egy szokatlanul rövid, 14 vagy 15 aminosavból álló citoplazmás dómén az alfa-herpeszvírusoknál és a 7 vagy 8 aminosavból álló a béta- és gammaherpeszvírusoknál,
- négy konzervált ciszteincsoport azonos helyen a feltételezett transzmembrándoménhez viszonyítva és a konzervált lokális szekvencián belül, és
- egy konzervált glikozilálási hely 13-18 aminosav NGTV szekvencia, N-terminálisan a transzmembrándoménhez.
Az EHV-4 rendelkezik a fenti összes jellemzőkkel, a javasolt citoplazmás dómén hosszúsága 20 aminosav, a négy konzervált cisztein az 556, 591, 663 és 716 helyeken található, és a C-terminális glikozilálási hely az NGTV szekvencián belül (796-799 aminosavak) helyezkedik el, amely 19 aminosavat helyez el N-terminálisan a feltételezett EHV-4 transzmembrándoménhez viszonyítva. A 737 és 740 ciszteincsoportok az EHV-4 gH-ban, a legtöbb herpeszvírus gH-ban, a ciszteinkonzerválási helyeken fordulnak elő, kivéve a HSV-1et. A ciszteincsoportok erős konzerválása az EHV-4 és HSV-1 gH-k között és a vizsgált alfa-, béta- és gammaherpeszvírusok esetén feltételezi bizonyos mértékű konzerválását ezen proteinek másodlagos és harmadlagos szerkezetének, feltehetően egy diszulfidkötést is magában foglalva (lásd az előző Gompels-hivatkozást).
Az EHV-4 gC polipetidet kódoló gén illeszkedik a BamHI G tfagmenshez (2. ábra), és kódol egy 485 aminosav hosszúságú peptidet, amelynek molekulatömege körülbelül 52 500 D. Az aminosavszekvenciából (SEQ ID NO: 2) a következő szerkezeti jellegzetességeket lehet a membrán-glikoproteinnel kapcsolatban levonni:
- a szignálpeptid az N-terminálison azonosítható, hossza 32 aminosav, a hasítás az Alá és Ser csoportoknál, a 32, illetve 33 helyeknél következik be,
- az EHV-4 gC külső doménje a 33 helytől a 444 helyig terjed, és 11 N-kapcsolású glikozilálási helyet tartalmaz (N-X-S/T).
- Az EHV—4 gC antigéndeterminánsa körülbelül a 409 csoportnál található [Hopp és Woods (1981), PNAS 78, 3824],
- A glikoprotein transzmembrándomént a 445-468 aminosavak alkotják.
- C-terminális citoplazmás dómén a 469 helytől a 485 helyig teljed, hidrofil és tiszta pozitív töltéssel rendelkezik, ennek értéke 2.
A gC homológok többek között a C-terminális részen konzervált aminosavakat tartalmaznak a hat ciszteinkonzerválási hely körül elhelyezkedve. Néhány N-kapcsolású glikozilálási hely hasonló helyeken van, de ezek szigorúan nem konzerváltak. Egy másik ismert jellegzetessége a gC proteineknek, hogy a C-terminális citoplazmás dómén rövid és pozitív töltésű [Fitzpatrick D. R. és munkatársai, (1989), Virology 173, 46; Allén G. P. és Coogle L. D., ibid].
Az EHV-4 gC más gC proteinekkel, a specifikusan konzervált jellemzők vonatkozásában, összehasonlításuk érdekében, egymás mellett vizsgáltuk az EHV-4 gC, BHV-1 glll, PRV glll, HSV-1 gC és MDV A antigénproteineket. Az EHV-4 gC ciszteincsoportot tartalmaz, mind a hat konzervált helyen a 256, 318, 357, 361, 390 és 416 aminosavhelyeknél. Kilenc feltételezett EHV-4 gC glikozilálási hely van konzerválva az EHV-1 gpl3 és három a PRV glll proteinekben.
A találmány oltalmi körébe tartoznak továbbá az EHV-4 gH vagy gC polipeptid antigénfragmensét kódoló nukleinsavszekvenciák, azaz olyan fragmensét, amelyek molekulakonfigurációja olyan, hogy képes bármilyen, humorális vagy celluláris, immunválaszt kiváltani az említett gH vagy gC polipeptidekkel szemben fogékony állatoknál, ha megfelelő formában van jelen. Továbbá, az említett fragmens jellemző az EHV-4 gH vagy gC polipeptidre.
A találmány szerinti nukleinsavszekvenciák különösen alkalmazhatók a SEQ ID NO: 1 vagy SEQ ID NO: 2 szekvenciájú EHV-4 polipeptidek vagy ezek származékainak kódolására.
Az EHV-4 gH és gC polipetideket kódoló gén az EHV-4 genomjában van lokalizálva, és nukleotidszekvenciáját a SEQ ID NO: 1, illetve SEQ ID NO: 2 szekvenciákkal írjuk le.
Ez az információ alkalmazható az említett gének ismert módon, rekombináns DNS-technikával végzett genetikai manipulációjához, valamint az általuk kódolt polipeptidek in vitro vagy in vivő expresszálásához. A fentiekben említett nukleinsavszekvenciákat előnyösen az EHV-4 gH vagy gC polipetidek expressziójához alkalmazzuk.
Nyilvánvaló, hogy egy adott EHV-4 gH vagy gC polipetidek számára természetes változatok létezhetnek az egyes EHV-4 vírusok és törzsek között. Ezeket a változatokat a szekvenciában mutatkozó különbséggel vagy különbségekkel, vagy a szekvenciában való delécióval, szubsztitúcióval, inszercióval, inverzióval vagy addícióval jellemezhetjük. Mindezen származékok szintén a találmány oltalmi körébe tartoznak. Továbbá lehetséges ezen különböző származékokat kódo3
HU217211 Β ló nukleinsavszekvenciák DNS rekombináns technikával való előállítása is.
A szakterületen ismert, hogy a genetikai kód degeneráltsága lehetővé teszi a kodonok bázisainak helyettesítését, ami egy másik kodont eredményez, amely azonban még mindig kódolja ugyanazt az aminosavat, így például a glutaminsav aminosavkodonja lehet GAT és GAA egyaránt. Ebből következően nyilvánvaló, hogy a SEQ ID NO: 1 vagy SEQ ID NO: 2 aminosavszekvenciákkal jellemzett polipetidek vagy fragmenseik expressziójához alkalmazható az olyan nukleinsavszekvencia-származék is, amelynek kodonösszetétele eltér az említett SEQ szekvenciákétól.
A találmány oltalmi körébe tartoznak továbbá az EHV-4 gH vagy gC polipeptidből, vagy a SEQ ID NO: 1, vagy SEQ NO: 2 aminosavszekvenciákból származtatott fragmensek, amelyek még mutatják az EHV-4 gH vagy gC antigén tulajdonságait, valamint az EHV-4 gH vagy gC polipeptideket, vagy ezekből származtatott, az említett SEQ ID szekvenciákkal leírt nukleotidszekvenciákat kódoló fragmensek is.
Minden ilyen említett módosítás, amely az EHV-4 gH vagy gC polipeptidek vagy gén származékait eredményezi, a találmány oltalmi körébe tartozik addig, amíg az EHV-4 gH vagy gC jellemzői lényegében változatlanok maradnak.
A találmány szerinti nukleotidszekvenciák különböző expresszi ót kiváltó DNS szekvenciákkal ligálhatók, amely szekvenciák adott esetben fuziósprotein-szekvenciákat, így például β-galaktozidázt kódoló DNS-részeket is tartalmaznak, és így olyan, úgynevezett rekombináns nukleinsavmolekulát eredményeznek, amely egy alkalmas gazda transzformálásához alkalmazható. Az ilyen hibrid DNS-molekulákat előnyösen például plazmidokból vagy a bakteriofágokban, vagy vírusokban jelen lévő nukleinsavszekvenciákból származtatjuk.
A találmány szerinti nukleinsavszekvenciák klónozásához alkalmas specifikus vektorok a szakterületen ismertek (például Rordriguez R. L. és D. T. Denhardt, kiadó, Vectors: A Survey of Molecular Cloning Vectors and their Uses, Butterworths, 1988).
A találmány szerinti rekombináns nukleinsavmolekula megalkotásához alkalmas eljárás a szakterületen jártas szakember számára szintén ismert, például a következő irodalmi helyről: Maniatis T. és munkatársai, Molecular Cloning: A Laboratory Manual, Cold Spring Harbor Laboratory, 1982.
A „transzformálás” kifejezés a találmány értelmében a gazdaszervezetbe való heterológ nukleinsavszekvencia bevezetésére utal, függetlenül az alkalmazott eljárástól, amely lehet például közvetlen felvétel vagy transzdukció. A heterológ nukleinsavszekvenciát fenntarthatjuk autonóm replikációval vagy a gazdagenomba is integrálhatjuk. A rekombináns DNS-molekulát előnyösen megfelelő kontrollszekvenciákkal látjuk el, amelyek kompatibilisek a megjelölt gazdaszervezettel, amely szabályozni képes a beépített nukleinsavszekvencia expresszióját.
Az alkalmas gazdasejt olyan sejt, amely transzformálható a polipeptidet kódoló nukleinsavszekvenciával vagy egy rekombináns nukleinsavmolekulával, amely egy ilyen nukleinsavszekvenciát tartalmaz, és amely az említett nukleinsavszekvenciával kódolt polipeptid expressziójához alkalmazható. A gazdasejt lehet prokarióta eredetű, így például baktérium, így például E. coli, B. subtilis és Pseudomonas eredetű, vagy eukarióta eredetű, így például élesztőkből, például Saccharomyces cerevisiae törzsből származik, vagy származhat magasabb eukarióta sejtekből is, így például rovar-, növényi vagy emlőssejtekből, beleértve a HeLa sejteket és a kínaihörcsögpetefészek-sejteket. A rovarsejtek közé tartozik a Spodoptera frugiperda Sf9 sejtvonala is. A találmány szerinti nukleinsavszekvenciák eukarióta rendszerekben való klónozására és expressziójára vonatkozó információk megtalálhatók például a következő irodalmi helyen: Esser K. és munkatársai, Plasmids of Eukaryotes, Springer-Verlag, 1986.
A találmány szerinti nukleinsavszekvenciák előnyösen működőképesen vannak kapcsolva expressziós szabályozószekvenciákhoz. Ezek a szekvenciák tartalmazhatnak promotereket, operátorokat, inducereket, riboszóma-kötéshelyeket stb.
Ha a gazdasejt baktérium, a példaképpeni, alkalmazható expressziós szabályozóvektorok trp promotert és operátort (Goeddel és munkatársai, Nucl. Acids Rés. 8, 4057, 1980); lac promotert és operátort (Chang és munkatársai, Natúré 275, 615, 1987); külső membránprotein-promotert és operátort (EMBO J. 1, 771 -775, 1982); bakteriofág promotereket és operátorokat (Nucl. Acids Rés. 11, 4677-4688, 1983); α-amiláz (B. subtilis) promotert és operátort, terminációs szekvenciákat és más, az expressziót fokozó kontrollszekvenciákat tartalmaznak, amelyek a választott gazdasejttel kompatibilisek. Ha a gazdasejt élesztő, a példaképpeni, alkalmas expressziós kontrollszekvenciák tartalmaznak például α-mating faktort. Rovarsejtek helyett alkalmazhatók a baculovírusok polihedrinpromoteijei (Mól. Cell. Bioi. 3, 2156-2165, 1983). Ha a gazdasejt rovar vagy emlős eredetű, a példaképpeni, alkalmazható expreszsziós kontrollszekvenciák közé tartoznak például az SV-40 promoter (Science 222, 524-527,1983), vagy a mettalotionein promoter (Natúré 296, 39-42, 1982) vagy a hősokkpromoter (Voellmy és munkatársai, Proc. Natl. Acad. Sci. USA 82, 4949-4953,1985).
Az EHV-4-ben jelen lévő szabályozóvektorok, különösen a gH és gC polipeptidek expresszióját szabályozók, szintén alkalmazhatók.
A találmány vonatkozik továbbá egy EHV-4 gH vagy gC polipeptidre vagy annak antigéntulajdonságú ffagmensére, amely lényegében mentes a teljes vírustól vagy más proteintől, amellyel általában kapcsolatban van.
Közelebbről, a találmány szerinti polipeptid tartalmazza a SEQ ID NO: 1 vagy SEQ ID NO: 2 aminosavszekvencia vagy fragmense legalább egy részét.
A találmány szerinti megoldás egy másik kiviteli formájánál egy fentiek szerinti nukleinsavszekvencia által kódolt polipeptidet alkalmazunk.
A lovak immunizálását EHV-4 vírussal szemben például úgy végezhetjük, hogy a lovaknak úgynevezett
HU217211 Β alegységvakcina formájában a találmány szerinti polipeptidet adagoljuk. Ez a találmány szerinti alegységvakcina tartalmazhatja a polipeptidet tiszta formában adott esetben gyógyszerészetileg elfogadható hordozóanyaggal együtt. A polipetid adott esetben kovalens kötéssel lehet kapcsolva egy nem rokon proteinhez, ami előnyös lehet például a fúziós termék tisztítása szempontjából. Ilyen protein például a β-galaktozidáz, protein A, prochimosin, véralvadásfaktor Xa stb.
Bizonyos esetekben a képesség, hogy ezen per se polipeptidekkel szembeni antitestek semlegesítése növekedjen, alacsony lehet. A kis fragmenseket előnyösen hordozó molekulákhoz kapcsoljuk, hogy immunogenitásuk növekedjen. Erre a célra alkalmas hordozók például a makromolekulák, így például természetes polimerek (proteinek, így például korallzátonytengericsiga-hemocianin, albumin, toxinok), szintetikus polimerek, így például poliaminosavak (polilizin, polialanin) vagy amfifíliás vegyületek, így például szaponinek micellái. Ezek a ffagmensek polimeijeik formájában is jelen lehetnek, előnyösen például mint lineáris polimerek.
Az alegységvakcinákban alkalmazásra kerülő polipeptideket a szakterületen ismert eljárásokkal állíthatjuk elő, így például a polipeptidek EHV-4-ből való izolálásával, rekombináns DNS-eljárással vagy kémiai szintézissel.
Ha szükséges, a vakcinákban felhasználásra kerülő, találmány szerinti polipeptideket in vitro vagy in vivő módosíthatjuk is, így például glikozilálhatók, amidálhatók, karboxilezhetők vagy foszforilezhetők.
Az alegységvakcinák változatai az élő vektorvakcinák. Egy találmány szerinti nukleinsavszekvenciát rekombináns DNS-eljárással bevezetünk egy mikroorganizmusba (például baktériumba vagy vírusba) oly módon, hogy a rekombináns mikroorganizmus még képes replikációra, és így expresszálja az inszertált nukleinsavszekvencia által kódolt polipeptidet. Ezután ez a rekombináns mikroorganizmus adagolható lovaknak immunizálás céljából, miután saját magát fenntartja bizonyos ideig, vagy éppen replikálódik az inokulált ló testében, in vivő expresszálja a találmány szerinti nukleinsavszekvencia által kódolt polipetidet, és így az inokulált ló immunrendszerének stimulálását eredményezi. A találmány szerinti nukleinsavszekvenciák beépítéséhez alkalmas vektorokat például vírusokból, például a következőkből származtathatjuk: EHV-1, adenovírus, vakciniavírus vagy más himlővírus, papillomavírus, vagy baktériumokból, így például E. coliból vagy specifikus Salmonella törzsekből. Az ilyen típusú rekombináns mikroorganizmusokkal a gazdasejtben szintetizált polipeptid mint felületi antigén szerepel. Ezzel összefüggésben elképzelhető az említett polipeptidek fúziója az OMP-proteinekkel vagy Escheria coli pilusproteinjeivel, vagy a szignál- és anchorszekvenciák szintetikus províziójával, amelyeket az organizmus felismer. Lehetséges az is, hogy az említett immunogén polipeptid, kívánt esetben egy nagy egész részeként, az immunizálni kívánt állat belsejében szabadul fel. Mindezen összes esetben lehetséges az is, hogy egy vagy több immunogén termék expresszálódik, ami különböző patogénekkel és/vagy egy adott patogén különböző antigénjeivel szemben indukál védelmet.
A találmány szerinti vakcinát úgy állítjuk elő, hogy a találmány szerinti nukleinsavszekvenciát tartalmazó gazdasejtet tenyésztjük, majd a termelődött sejteket és/vagy vektorvírusokat elválasztjuk, adott esetben tiszta formában, és vakcinává alakítjuk, adott esetben liofilizált formában.
A fentiek szerinti, a találmány szerinti nukleinsavszekvenciát tartalmazó gazdasejteket olyan körülmények között is tenyészthetjük, amelyek kedvezőek az említett nukleinsavszekvenciák által kódolt polipeptidek expreszsziójához. A vakcinákat készíthetjük a nyerstenyészet, a gazdasejtlizátum vagy a gazdasejtextraktum felhasználásával, de egy másik megvalósítási forma szerint a találmány szerinti tisztított polipeptideket alakítjuk vakcinává, a kívánt felhasználástól függően. A termelt polipeptid tisztítása érdekében a találmány szerinti nukleinsavszekvenciát tartalmazó gazdasejteket tenyésztjük megfelelő mennyiségben, majd a kapott polipeptidet a sejtektől vagy a közegtől elválasztjuk, ha a protein kiválasztódott. A közegbe kiválasztódott proteint ismert módon izoláljuk és tisztítjuk, így például sófrakcionálással, kromatografálással, centrifugálással, míg az intracelluláris polipetideket úgy választhatjuk el, hogy először az említett sejteket összegyűjtjük, a sejteket lizáljuk, majd a polipeptideket a többi intracelluláris komponenstől elválasztjuk, és a polipeptideket vakcinává alakítjuk.
Nyilvánvaló, hogy az EHV-4 vírussal már fertőzött lovakat az EHV-4 vírus elleni antitestekkel kezelhetjük. A találmány szerinti polipeptidekre karakterisztikus antiszérumok vagy antitestek alkalmazhatók az EHV-4 fertőzések terápiás kezelésére. Ezen antiszérumok vagy antitestek előállíthatok például az állatok hatásos mennyiségű EHV-4 gH vagy gC polipeptiddel végzett immunizálásával, hogy a megfelelő immunválaszt váltsuk ki. Ezután az állattól vért veszünk, és előállítjuk az antiszérumot.
A találmány szerinti polipeptidek elleni monoklonális antitestek szintén alkalmazhatók az EHV-4 vírussal fertőzött lovak kezelésére. A monoklonális antitesteket ismert módon állítjuk elő, például úgy, hogy egereket az említett polipeptidekkel immunizálunk, az egérlépsejteket immortalizáljuk, és a hasznos antitesteket termelő hibridómákat elválasztjuk. Immortális antitesttermelő sejtvonalak szintén előállíthatok a B limfociták onkogén DNS-sel végzett közvetlen transzformálásával vagy Epstein-Barr-vírussal végzett transzfekcióval.
A monoklonális antitestek különösen alkalmasak az antiidiotípus-antitestek fokozására, a szakterületen ismert módon. Ezen antiidiotípus-antitestek szintén alkalmasak lovaknál az EHV-4 fertőzések megelőzésére.
A fent említett antiszérum és monoklonális antitestek alkalmazhatók az EHV-4 vírussal fertőzött lovak diagnosztizálására.
A találmány szerinti vakcinákat az ismert aktív immunizációs módszer szerint adagolhatjuk: egyetlen vagy ismételt adagolással a dóziskészítménynek megfelelően és olyan mennyiségben, amely profdaktikusan
HU217211 Β és/vagy terápiásán hatásos és immunogén. Az adagolás lehet például intradermális, szubkután, intramuszkuláris, intravénás vagy intranazális.
A találmány szerinti vakcinák tartalmazhatnak vizes közeget vagy vizes szuszpenziót, gyakran más egyéb alkotókkal elkeverve, például az aktivitás és/vagy a tárolhatóság növelése érdekében. Ezek az alkotók lehetnek például sók, pH-pufferek, stabilizátorok például fölözött tej vagy kazeinhidrolizátum), emulgeátorok, adjuvánsok az immunválasz fokozására (például olajok, muramildipeptidek, alumínium-hidroxid, szaponin, polianionok és amfipatikus anyagok) és konzerválószerek.
Nyilvánvaló, hogy a találmány szerinti vakcinák tartalmazhatnak más, lovakkal kapcsolatos patogének elleni immunogéneket vagy ezen immunogéneket kódoló nukleinsavszekvenciákat, így például EHV-1 antigéneket, lóinfluenza-vírust, -rotavírust, fertőző anémiavírust, -enkefalitisz-vírust, ló-Boma betegség-vírust, ló-Beruevírust, E. colit vagy Streptococcus equit, így többhatású vakcinák nyerhetők.
1. példa
A gH gén izolálása és jellemzése
1. EHV-4 vírus tenyésztése
Hengeres fiolákban ló eredetű dermális sejtek (NBL-6; ATCC CCL-57) enyhén összefolyó monorétegeit, amelyeket kiegészített (0,2% nátrium-hidrogénkarbonát, 1% nem esszenciális aminosav, 1% glutamin, 100 egység/ml penicillin, 100 mg/ml sztreptomicin és 10% magzati borjúszérum) Earle-féle Minimum Essential Médium (Flow) közegben tenyésztettünk, EHV-41942 [Cullinane, A. A. és munkatársai: J. Gén. Virol. 69, 1575-1590 (1988)] törzshöz tartozó vírussal 0,003 m. o. i. mennyiségben megfertőzünk, és hagyjuk adszorbeálódni 60 percig 37 °C-on, majd 31 °C-on inkubáljuk, amíg extenzív c. p. e. evidenssé válik, és a sejtek túlnyomó többsége a lombik aljától elválik (2-6 nap). A fertőzött sejtközeget ezután 5000 f/perc mellett centrifugáljuk, a felülúszót 1200 f/perc mellett centrifugáljuk 2 órán át Sorvall GSA 6 x 200 ml-es rotorban. A pelleteket ezután 5 ml PBS-ben reszuszpendáljuk, ultrahanggal kezeljük, majd Sorvall SS34 rotorban 11 000 f/perc mellett centrifugáljuk 5 percen át a sejttörmelék elválasztására. A vírust ezután 18 000 f/perces centrifugálással pelletezzük Sorvall SS34 rotorban 1 órán át. A vírusrészecskék és plakk-képző egységek közötti arány körülbelül 1000 az 5000-hez.
2. EHV-4 DNS készítése
A pelletezett vírust 10 ml NTE-ben (NaCl/Tris/EDTA) reszuszpendáljuk, és rövid ideig ultrahanggal kezeljük. A szennyező celluláris DNS-t 10 pg/ml DNáz adagolásával megbontjuk, és 1 órán át 37 °C-on inkubáljuk. Ezután 2% végső koncentrációban SDS-t adagolunk, majd a készítményt körülbelül 3-szor fenollal kiegyensúlyozott NTE-vel extraháljuk, amíg tiszta interfázisokat nyerünk.
A kloroformos extrakciót követően a fentiek szerinti DNS-t etanollal kicsapjuk, a DNS-t pelletezzük, 70%-os etanollal mossuk, 10 ml 100 mmólos NaCl-oldatban reszuszpendáljuk, és 10 pg/ml RNáz jelenlétében egy éjszakán át szobahőmérsékleten állni hagyjuk. Ezután egy további tisztítást végzünk 1 mg/ml proteináz K-val való kezeléssel (2 óra, 31 °C). A DNS-t egyszer fenol: kloroform (1:1 térfogat) eleggyel, majd egyszer kloroformmal extraháljuk, etanollal kicsapjuk, jól leszívatjuk, és 0,1 X SSC-ben reszuszpendáljuk.
3. EHV-4 DNS klónozása
EHV-4 BamHI DNS-ffagmenseket pUC9 vektorba ligáljuk, ami egy olyan plazmid, amely tartalmazza a pBR322 ampicillinrezisztencia-génjét és az M13mp9 polilinkerszakaszát (Vieira J. és Messing J. (1982), Gene 19, 259). Külön 5 pg EHV-4 DNS-t és 5 pg pUC9 DNS-t emésztünk BamHI enzimmel.
A teljes emésztést a reakciókeverék alikvot részén végzett gélelektroforézissel igazoljuk, majd a DNS-t azonos térfogatú fenol:kloroform eleggyel kétszer extraháljuk, majd etanollal kicsapjuk. A ligálást lényegében Tanaka és Weisblum módszerével végezzük (J. Bact. 121, 354, 1975). Körülbelül 0,1 pg BamHI enzimmel emésztett pUC9 plazmidot elkeverünk 1 pg BamHI-emésztett DNS-sel, 50 mmol trisz-HCl-t, pH 7, 5, 8 mmól MgCl2-t, 10 mmol ditiotreitol-t 1 mmol ATP-t 40 pl végtérfogatban tartalmazó elegyben, majd hozzáadunk 2 egység T4 DNS-ligázt (0,5 pl), és a reakciókeveréket 4 °C-on 16 órán át inkubáljuk.
Kalciumsokkolt E. coli DHI-sejteket [Hanahan D. (1983)] a rekombináns plazmidokkal transzformáljuk (Cohen és munkatársai, Proc. Natl. Acad. Sci., USA 69, 2110, 1972). További kiónokat származtatunk a BamHI C fragmenst tartalmazó rekombináns plazmid restrikciós emésztésével (lásd 1. ábra), majd a specifikus EHV-4 restrikciós fragmensek kinyerésével és szubklónozásával (lásd Maniatis és munkatársai fenti hivatkozása) a Bluescript Ml3 plazmidvektor (Stratagene) többszörös klónozóhelyére, szekvenciaanalízis céljára.
A gH gént tartalmazó BamHI C fragmensszakasz nukleotidszekvenciájának meghatározását templátként egyszálú plazmid DNS és printerként Bluescript eredetű és szokásosan készített oligonukleotidok alkalmazásával végeztük Sanger didezoxiszekvenáló módszerrel (Sanger és munkatársai, Proc. Natl. Acad. Sci. 74, 5463, 1977), lásd 1. ábra. A pontos lokalizációt, a nukleinsavszekvenciát és a megfelelő aminosavszekvenciát a gH gén esetén a SEQ ID NO: 1 szekvencia mutatja.
2. példa
A gC gén izolálása és jellemzése
Az EHV-4 vírus tenyésztését, az EHV-4 DNS készítését és a BamHI könyvtár megalkotását pUC9 plazmidban az előző példa szerint végezzük.
A rekombináns plazmid pUC9: EHV-4 BamHI G-t restrikciós enzimmel emésztjük, így az EHV-4 BamHI G alfragmensét nyerjük, ezt 0,7%-os agarózgélen izoláljuk, majd ismert módon (lásd Maniatis fenti hivatkozása) Bluescript M13 plazmidvektorba Stratagene) klónozzuk. A rekombináns plazmidokat E. coli JM83 törzsben, ampicillinnel kiegészített (lOOpg/ml) L-broth tápközegben szaporítjuk. A plazmid DNS-t 500 ml baktériumtenyészetből extraháljuk alkalikus lízissel, és CsClgradiensen sávozással tisztítjuk.
HU 217 211 Β
A DNS-szekvenálást Sanger-didezoximódszerrel végeztük (lásd Sanger fenti hivatkozása), templátként denaturált rekombináns plazmid DNS-t és primerként Ml3 specifikus vagy közönséges oligonukleotidokat alkalmazva. 5
A gC gént tartalmazó BamHI G fragmens szakaszának nukleotidszekvenciáját a 2. ábrán bemutatott átlapolódó szekvenciák analízisével határoztuk meg.
A pontos lokalizációt, a gC gén nukleotidszekvenciáját és a megfelelő aminosav szekvenciát a SEQ ID 10 NO: 2 szekvencia ábrán mutatjuk be.
Az 1. ábrán látható:
a) az EHV-4 genom BamHI restrikciós térképe (Cullinane), A. A. és munkatársai, J. Gén. Virol. 69, 1575, 1988),
b) az EHV-4 gH gén szekvenálási eljárása és lokalizációja.
A 2. ábrán látható:
a) lásd 1. ábra,
b) a BamHI G restrikciós térképe, az Sáli, EcoRI, BglI ésBglII hasítási helyek jelölésével,
c) szekvenálási eljárás és a BamHI G fragmensen belüli nyitott leolvasási keret határai.
Szekvenciafelsorolás
SEQ ID NO:
Szekvencia típusa: Szekvencia hosszúsága: DNS-típus:
Toplógia:
Molekula típusa:
Eredeti forrásorganizmus: Közvetlen kísérleti forrás: Tulajdonságok:
1, nukleotid a megfelelő proteinnel, 2730 bázispár; 855 aminosav, egyszálú, lineáris, genom DNS, lóherpeszvírus-4, genom BamHI könyvtár, EHV-4 gH gén.
CAGCGCGGCC GAGATACTCG AGGTATCCAG TGGTTGTATA TTGGGAATAA ATACTGCTGC GATT ATG TCA CAA CCG TAT CTA AAA ATA GCT ATC TTA GTG GCC GCT ACT
Me t Ser Glu Pro Tyr Leu Lys I le Alá I le Leu Va1 Alá Alá Thr
109
5
| ATT | GTG | TCT | GCG | ATT | CCC | GTT | TGG | ACA | ACA | CCG | GTT | TCA | ACT | TCA | CCA | 157 |
| I le | Va 1 | Ser | A1 a | I le | Pro | Va 1 | Trp | Thr | Thr | Pro | Va 1 | Ser | Thr | Ser | Pro | 31 |
| CCC | CAA | CAA | ACA | AAA | TTG | CAC | TAT | GTG | GGA | AAT | GGT | ACC | TGG | GTA | CAC | 205 |
| Pro | Glu | Glu | Thr | Ly s | Leu | Hi s | Tyr | Va 1 | Gly | Asn | Gly | Thr | Trp | Va 1 | Hi s | 47 |
| AAC | AAT | ACA | TTC | AAC | GTA | ACC | AGG | TAT | GAC | AGG | ATA | ACC | ATG | GAA | CCA | 253 |
| Asn | Asn | Thr | Phe | As n | Va 1 | Thr | Arg | Tyr | As p | Arg | I 1 e | Thr | Me t | Glu | Pro | 63 |
| GTT | TAT | AAT | AAC | AAT | TTA | TCC | TCT | ACT | ACC | TTT | TTT | GTT | GCT | ATA | TCG | 301 |
| Va 1 | Tyr | Asn | Asn | Asn | Le u | Ser | Ser | Thr | Thr | Phe | Phe | Va 1 | A1 a | I 1 e | Ser | 79 |
| GAG | AGA | AAT | TTT | CGC | ACG | GTT | AAC | ACT | CCA | CTT | GGA | GCG | TCC | GTA | TTT | 349 |
| Glu | Arg | Asn | Phe | Arg | Thr | Va 1 | Asn | Thr | Pro | Leu | Gly | A1 a | Ser | Val | Phe | 95 |
| TGG | ATT | TTA | AAA | AGC | GCT | CTT | AAT | CCT | CCC | AAA | CAC | CAA | CCC | TGT | ATA | 397 |
| Trp | I le | Leu | Lys | Ser | A1 a | Leu | Asn | Pro | Pro | Ly s | Hi s | Glu | Pro | Cy s | I le | 1 1 1 |
| GCT | AAT | GTG | CCA | GAA | CCC | GGT | GAC | CCA | CGC | GGA | CCG | TGC | GTC | AAC | TCA | 445 |
| A1 a | As n | Va 1 | Pro | Glu | Pro | Gly | As p | Pro | Arg | Gly | Pro | Cy s | Va 1 | Asn | Ser | 127 |
| ACT | GTG | AGT | CTA | TTT | TTT | AAT | GAC | AAT | TTG | GAG | CCG | TTT | TTA | ATG | ACA | 493 |
| Thr | Va 1 | Ser | Leu | Phe | Phe | Asn | As p | As n | Leu | Glu | Pro | Phe | Leu | Me t | Thr | 143 |
| AAA | AAT | CTT | TTG | GAG | TTT | GAA | GTA | TTG | CCC | GAC | AAC | TAC | ATA | ACC | GGA | 541 |
| Ly s | As n | Leu | Leu | Glu | Ph e | Glu | Va 1 | Leu | Pro | As p | Asn | Tyr | I 1 e | Thr | Gly | 159 |
| TGG | ACG | TTT | GAG | CGG | TCT | AAA | ACT | GTG | GCT | ACG | AAA | GGC | AAC | CCG | GTT | 589 |
| Trp | Thr | Phe | Glu | Arg | Ser | Ly s | Thr | Va 1 | A1 a | Thr | Ly s | Gly | Asn | Pro | Va 1 | 175 |
| GGA | GTG | GTT | CTC | TCC | CCT | CCC | CGA | ACA | AGT | CCG | GAT | GTA | AAT | AAC | ACC | 637 |
| Gly | Va 1 | Va 1 | Leu | Ser | Pro | Pro | Arg | Thr | Ser | Pro | As p | Va 1 | Asn | As n | Thr | 191 |
| ATA | AGA | GAT | GAT | GGC | ACC | CCT | AAA | CAG | CAC | TTG | AGC | ATT | ATA | GAC | GAA | 685 |
| I le | Arg | As p | As p | Gly | Thr | Pro | Ly s | Glu | Hi s | Leu | Ser | I le | 11 e | Asp | Glu | 207 |
| CAT | ACT | ACG | TTC | GTG | CTC | GAC | CTG | CAA | AAT | TTT | ACA | AAA | ACT | TTA | ACT | 733 |
| Hi s | Thr | Thr | Phe | Va 1 | Leu | As p | Leu | Gin | As n | Phe | Thr | Ly s | Thr | Leu | Thr | 223 |
| TAT | ATA | AGC | CCA | TTT | GCT | GCG | GTG | TGG | CCA | ATA | ACA | GCC | TTT | CAT | GCC | 781 |
| Tyr | I le | Ser | Pro | Ph e | A1 a | A1 a | Va 1 | Trp | Pro | I 1 e | Thr | A1 a | Phe | Hi s | A1 a | 239 |
| GGA | ATT | ACA | GTA | ATG | GGG | TGT | GAC | ACA | ACT | CAG | GCG | ATT | GCG | TAC | CTC | 829 |
| Gly | I 1 e | Thr | Va 1 | Me t | Gly | Cy s | As p | Thr | Thr | Glu | A1 a | I 1 e | A1 a | Tyr | Leu | 255 |
| GGC | AAT | GGG | TTT | ATG | GGT | TTG | CAA | ATA | AGC | TCG | GTA | AAC | AAT | CCA | CCG | 877 |
| Gly | As n | Gly | Phe | Me t | Gly | Leu | Glu | I 1 e | Ser | Ser | Va 1 | Asn | As n | Pro | Pro | 271 |
| CTG | GAG | ATG | ATT | GTT | GCA | CCA | AAT | GAC | GTC | CGT | GCT | CGG | ATA | GTT | AAC | 925 |
| Leu | Glu | Me t | I 1 e | Va 1 | A1 a | Pro | As n | As p | Va 1 | Arg | A1 a | Arg | I 1 e | Va 1 | Asn | 287 |
HU 217 211 Β
| CGC | CTT | CCC | CCA | AGA | CGT | CGA | CTT | GAG | CCA | CCC | GGG | CCA | TAT | GCA | GGA | 973 |
| Arg | Leu | Pro | Pro | Arg | Arg | Arg | Leu | Glu | Pro | Pro | Gly | Pro | Tyr | Al a | Gly | 303 |
| CCT | ATC | TAC | AAG | GTG | TAC | GTA | CTC | AGT | GAT | GGA | AAT | TTT | TAC | TTG | GGT | 1021 |
| Pro | I 1 e | Ty r | Ly s | Va 1 | Ty r | Va 1 | Leu | Ser | As p | Gly | As n | Phe | Tyr | Leu | Gly | 319 |
| CAT | GGC | ATG | AGC | AAG | ATT | TCT | AGG | GAG | GTT | GCC | GCG | TAC | CCA | GAA | GAG | 1069 |
| Hi s | Gly | Me t | Ser | Ly s | I 1 e | Ser | Arg | Glu | Va 1 | Al a | Al a | Tyr | Pro | Glu | Glu | 335 |
| AGT | TTG | GAC | TAC | CGC | TAC | CAC | TTA | TCG | CTT | GCC | AAC | CTT | GAT | ACT | CTG | 1117 |
| Ser | Leu | As p | Ty r | Arg | Tyr | Hi s | Leu | Ser | Leu | Al a | As n | Leu | As p | Thr | Leu | 35 1 |
| GCT | ATG | TTG | GCA | GAA | CTT | TCT | TCC | GGT | AAG | AGC | AAG | GAT | GTG | AGC | TAT | 1 165 |
| Al a | Me t | Leu | Al a | Glu | Leu | Ser | Ser | Gly | Ly s | Ser | Ly s | As p | Va 1 | Ser | Tyr | 367 |
| TAC | TTG | TAT | CGC | ATA | ATT | GCG | AGG | CTG | GCC | GTA | GCA | ACG | TTT | TCC | CTT | 1213 |
| Ty r | Leu | Ty r | Arg | 1 1 e | I 1 e | Al a | Arg | Leu | Al a | Val | Al a | Thr | Phe | Ser | Le u | 383 |
| GCA | GAA | GTT | ATA | CGC | CTG | AGT | GAC | TAT | ATG | CTC | CTT | CAA | GAG | GCC | ATC | 1261 |
| Al a | G1 u | Va 1 | I 1 e | Arg | Leu | Ser | As p | Tyr | Me t | Leu | Le u | Gin | Glu | Al a | I 1 e | 399 |
| GAC | GTG | GAT | ATA | AAC | CTC | CGC | CTA | ATT | GTA | CCT | CTA | GTG | ATG | AAG | TAC | 1309 |
| As p | Va 1 | As p | I 1 e | Asn | Leu | Arg | Leu | I le | Va 1 | Pro | Leu | Va 1 | Me t | Ly s | Tyr | 415 |
| GCC | GCT | GGG | GGA | ACG | GCA | GAT | AGC | TCG | TAC | ACA | TCC | TCG | GAC | GTA | GCT | 1357 |
| Al a | Al a | Gly | Gly | Thr | Al a | As p | Ser | Ser | Tyr | Thr | Ser | Ser | As p | Va 1 | Al a | 43 1 |
| ATG | GAC | CAA | TTC | GAG | GTG | GCT | CAA | GCC | CAG | ATT | GAG | AAG | ATA | GTA | GCC | 1405 |
| Me t | As p | Gin | Phe | Glu | Va 1 | Al a | Gin | Al a | Gin | I 1 e | Glu | Ly s | I 1 e | Va 1 | Al a | 447 |
| GAT | ATA | AAT | ATC | GAA | AAT | GAA | TTG | CGC | AAA | CCT | ATG | TAC | GAG | CAC | CGC | 1453 |
| As p | I le | As n | I le | Glu | Asn | Glu | Leu | Arg | Ly s | Pro | Me t | Tyr | Glu | Hi s | Arg | 463 |
| TCA | TTA | TTG | AAA | AGC | GTG | TAC | GCT | TAT | TCT | AGA | AAG | CCG | CTA | CCA | AAC | 1501 |
| Ser | Leu | Leu | Ly s | Ser | Va 1 | Tyr | Al a | Tyr | Ser | Arg | Ly s | Pro | Leu | Pro | Asn | 479 |
| GCG | GTA | AGC | TTT | GCT | AAC | CGG | CTC | ATC | ACG | GCT | ATG | TAT | AAA | GAA | GCA | 1549 |
| Al a | Va 1 | Ser | Phe | Al a | As n | Arg | Leu | I 1 e | Thr | Al a | Me t | Tyr | Ly s | Glu | Al a | 495 |
| ATT | AAG | GAC | AGA | ATT | ACG | TGG | AAC | TCT | ACG | ATG | CGA | GAG | GTG | TTA | TTT | 1597 |
| I 1 e | Ly s | As p | Arg | I 1 e | Thr | Tr p | Asn | Ser | Thr | Me t | Arg | Glu | Va 1 | Leu | Phe | 5 1 1 |
| TTT | GCG | GTT | GGT | GCT | GCT | GCA | GGT | TCG | CAT | GTT | ATC | CTC | ACG | GAT | GGG | 1645 |
| Phe | Al a | Va 1 | Gly | Al a | Al a | Al a | Gly | Ser | Hi s | Va 1 | I le | Leu | Thr | As p | G1 y | 527 |
| CCA | GAT | CTC | GGT | TTA | CAT | GCC | CAC | AAA | GAT | TCT | TCG | ATG | TTT | CTA | TCT | 1693 |
| Pro | Asp | Leu | Gly | Le u | Hi s | Al a | Hi s | Ly s | As p | Ser | Ser | Me t | Phe | Leu | Ser | 543 |
| CTT | AAC | CGC | AAC | ATA | CTC | TTG | TTG | TGT | ACG | GCC | ATG | TGT | ACG | GCG | TCG | 1 741 |
| Leu | As n | Arg | As n | I 1 e | Leu | Leu | Leu | Cy s | Thr | Al a | Me t | Cy s | Thr | Al a | Ser | 559 |
| CAT | GCC | GTG | TCC | GCA | GGA | GTA | AAA | CTA | GAG | GAA | GTT | ATG | GCT | GGC | CTT | 1789 |
| Hi s | AI a | Va 1 | Ser | Al a | Gly | Val | Ly s | Leu | Glu | Glu | Va 1 | Me t | Al a | Gly | Leu | 575 |
| ATT | GCC | GGG | GGT | GTA | CAA | TTT | AGC | CTC | CTA | GAA | GTA | TTT | AGT | CCA | TGT | 1837 |
| I 1 e | Al a | Gly | Gly | Va 1 | Gin | Phe | Ser | Leu | Leu | Glu | Val | Phe | Ser | Pro | Cy s | 591 |
| ATG | GCG | TCT | GCT | CGA | TTT | GAC | CTG | GCC | GAA | GAA | GAG | CAT | GTG | CTA | GAT | 1885 |
| Me t | Al a | Ser | Al a | Arg | Phe | As p | Leu | Al a | Glu | Glu | Glu | Hi s | Va 1 | Leu | As p | 607 |
| CTA | CTG | TCC | GTT | ATC | CCA | CCT | CGC | CTG | TAC | ACC | GAC | TTA | AAC | ACT | GGC | 1933 |
| Leu | Leu | Ser | Va 1 | 11 e | Pro | Pro | Arg | Leu | Tyr | Thr | As p | Leu | As n | Thr | Gly | 623 |
| TTG | GAG | GAC | GAC | GGA | ACC | ACC | ATC | CAT | TCA | TAC | GGA | CGG | TCT | GCT | AAC | 1981 |
| Leu | G1 u | As p | As p | Gly | Thr | Thr | I 1 e | Hi s | Ser | Tyr | Gly | Arg | Ser | Al a | As n | 639 |
| GGA | ATT | TTA | AAC | TCT | CGA | ATC | GCA | TAT | AAC | TTT | GAT | GCT | GTT | CGT | GTA | 2029 |
| Gly | I 1 e | Leu | Asn | Ser | Arg | 11 e | Al a | Tyr | As n | Phe | As p | Al a | Va 1 | Arg | Va 1 | 655 |
| TTT | ACT | CCA | GAG | TTG | GCC | TCA | TGC | AGC | ACT | AAA | CTA | CCA | AAA | GTT | TTG | 2077 |
| Phe | Thr | Pro | Glu | Leu | Al a | Ser | Cy s | Ser | Thr | Ly s | Leu | Pro | Ly s | Va 1 | Leu | 671 |
| GTA | GTG | CTA | CCC | TTA | GCA | TCA | AAC | CGA | AGC | TAC | GTT | ATA | ACT | CGT | ACT | 2125 |
| Va 1 | Va 1 | Leu | Pro | Leu | Al a | Ser | Asn | Arg | Ser | Tyr | Va 1 | I le | Thr | Arg | Thr | 687 |
| GCG | ccc | AAT | ATA | GGT | TTA | ACT | TAC | TCT | CTT | GAT | GGG | GTA | AAT | ATA | GCA | 2173 |
| Al a | Pro | Asn | I le | Gly | Leu | Thr | Tyr | Ser | Leu | As p | Gly | Va 1 | As n | I le | Al a | 703 |
| AAG | CCT | ATA | GTC | ATC | AGT | TAC | ATC | ACT | TAT | GGA | AAT | TGT | CAA | GTT | TCG | 222 1 |
| Ly s | Pro | I 1 e | Va 1 | I 1 e | Ser | Tyr | I le | Thr | Tyr | Gly | As n | Cy s | Gin | Val | Ser | 719 |
| AGA | GCT | ACA | ATC | AGG | TCA | GTT | TAC | TTG | GAC | CAT | CCG | GGC | CAC | ACC | CAG | 2269 |
| Arg | Al a | Thr | I 1 e | Arg | Ser | Va 1 | Tyr | Leu | As p | Hi s | Pro | Gly | Hi s | Thr | Gin | 735 |
| TCG | TGC | GTA | TAT | TGC | GGG | AGT | GTG | TTT | ATG | CGG | TAT | ATG | GCA | TCC | GGA | 2317 |
| Ser | Cy s | Va 1 | Ty r | Cy s | Gly | Ser | Va 1 | Phe | Me t | Arg | Tyr | Me t | Al a | Ser | Gly | 75 1 |
| GCA | ATT | ATG | GAT | TTG | ATA | TAC | ATA | GAT | GAC | AAA | GAT | GTA | GAG | TTG | CAA | 2365 |
| Al a | I 1 e | Me t | As p | Leu | I 1 e | Tyr | I 1 e | Asp | As p | Ly s | As p | Va 1 | Glu | Leu | Gin | 767 |
HU 217 211 Β
| CTG | GTA | GCA | GGG GAA AAC | TCA | ACT | ATT CCA GCC | TTT | AAC | CCA | AAG | CTG | 2413 |
| Le u | Va 1 | Al a | Gly G1u Asn | Ser | Thr | I1e Pro Alá | Phe | As n | Pro | Ly s | Leu | 783 |
| TAT | ACG | CCC | AGC ATG AAT | GCT | CTT | TTA ATG TTT | CCA | AAC | GGA | ACA | GTA | 2461 |
| Tyr | Thr | Pro | Ser Me t Asn | Al a | Leu | Leu Me t Phe | Pro | As n | Gly | Thr | Va 1 | 799 |
| ACC | CTA | ATG | TCT GCA TTT | GCA | TCC | TAC TCA GCT | TTT | AAA | ATT | CCC | AGT | 2509 |
| Thr | Leu | Me t | Ser Alá Phe | Al a | Ser | Tyr Ser Alá | Phe | Ly s | I le | Pro | Ser | 815 |
| ACT | TAT | CTG | TGG GCT TCT | ATT | GGG | GGT TTG TTG | CTG | GCT | ATT | CTG | ATT | 2557 |
| Thr | Tyr | Leu | Trp Alá Ser | I 1 e | Gly | Gly Leu Leu | Leu | Al a | I le | Leu | I le | 83 1 |
| TTA | TAT | GTA | ATC GTT AAA | ATG | TTA | TGT GGT GGT | GTA | ATT | AAT | AAT | GAC | 2605 |
| Leu | Tyr | Va 1 | I1e Val Lys | Me t | Leu | Cys Gly Gly | Val | I le | As n | Asn | As p | 847 |
| TAT | AGT | TTG | TTA TTA AAC | TCT | GAG | TAA ACACAAACAA TGTCTAGTGT | 2652 | |||||
| Tyr | Ser | Leu | Leu Leu Asn | Ser | Glu | 855 | ||||||
| GTTGTATTGC GTGTAAACAG TATACGAGTG AACATTTATA | CGTAAAATGG TTAAATTTTA | 2712 | ||||||||||
| TTTTCGCTAT AAACGGGA | 2730 | |||||||||||
| SEQ ID NO: | 2 | |||||||||||
| Szekvencia típusa: nukleotid a megfelelő proteinnel, | ||||||||||||
| Szekvencia hosszúsága: 1560 bázispár; 485 amínosav, | ||||||||||||
| DNS-típus: | egyszálú, | |||||||||||
| Topológia: | lineáris, | |||||||||||
| Molekula típusa: genom DNS, | ||||||||||||
| Eredeti forrásorganizmus: lóherpeszvírus- | 4, | |||||||||||
| Közvetlen kísérleti forrás: genom BamHI könyvtár, | ||||||||||||
| Tulajdonságok: | EHV-4 gC gén | |||||||||||
| AAGAGTTATT ATTGTTCTTT GTGGAAAATC GCAAACATAT | AACCCACAGC A ATG GGT | 57 | ||||||||||
| Me 1 | : Gly | 2 | ||||||||||
| TTG | GTA | AAT | ATA ATG CGA | TTC | ATA | ACA TTT GCG | TAT | ATA | ATC | TGT | GGG | 105 |
| Leu | Va 1 | As n | I 1 e Me t Ar g | Phe | I 1 e | Thr Phe Alá | Tyr | 11 e | I 1 e | Cy s | Gly | 18 |
| GGG | TTT | ATA | TTA ACA CGC | ACG | TCT | GGG ACC AGT | GCT | AGC | GCC | AGT | CCA | 153 |
| Gly | Ph e | I le | Leu Thr Arg | Thr | Ser | G1 y Th r Ser | Al a | Ser | Al a | Ser | Pro | 34 |
| GCC | ACA | CCA | ACC ACA AAT | ACT | GGC | GAA GGC ACC | AGT | TCT | CCA | GTC | ACA | 201 |
| Al a | Thr | Pro | Thr Thr Asn | Thr | Gly | Glu Gly Thr | Ser | Ser | Pro | Va 1 | Thr | 50 |
| CCA | ACT | TAC | ACA ACC AGT | ACG | GAC | TCT AAT AAT | TCA | ACA | GCC | ACG | AAC | 249 |
| Pro | Thr | Tyr | Thr Thr Ser | Thr | As p | Ser Asn Asn | Ser | Thr | Al a | Thr | Asn | 66 |
| AAC | TCA | ACC | GAT GTA AAC | GGC | ACC | GAA GCT ACA | CCA | ACG | CCG | AGT | CAC | 297 |
| As n | Ser | Thr | Asp Val Asn | Gly | Thr | Glu Alá Thr | Pro | Thr | Pro | Ser | Hi s | 82 |
| CCA | CAT | TCA | CAT GAA AAT | ACA | ATT | ACA TGC ACA | AAT | AGT | CTC | ATA | TCG | 345 |
| Pro | Hi s | Ser | Hi s G1u Asn | Thr | I 1 e | Thr Cys Thr | As n | Ser | Leu | I 1 e | Ser | 98 |
| GTT | CCC | TAC | TAC ACA TCT | GTT | ACC | ATT AAC TGT | TCT | ACA | ACA | GTA | AGT | 393 |
| Va 1 | Pro | Tyr | Tyr Thr Ser | Va 1 | Thr | I1e Asn Cys | Ser | Thr | Thr | Va 1 | Ser | 1 14 |
| GTA | AAT | CAC | AGT GAA TAC | AGA | CTA | GAA ATT CAC | CTA | AAC | CAG | CGC | ACC | 441 |
| Va 1 | As n | Hi s | Ser G1u Tyr | Arg | Leu | Glu 11e Hi s | Leu | As n | Gin | Arg | Thr | 1 30 |
| CCA | TTT | TCA | GAC ACG CCT | CCT | GGT | GAC CAA GAA | AAC | TAT | GTT | AAC | CAC | 489 |
| Pro | Phe | Ser | Asp Thr Pro | Pro | Gly | Asp Gin Glu | Asn | Tyr | Va 1 | Asn | Hi s | 146 |
| AAC | GCT | ACC | AAA GAC CAA | ACC | CTG | CTG TTA TTT | TCA | ACC | GCA | CAT | TCT | 537 |
| As n | Al a | Thr | Lys Asp Gin | Thr | Leu | Leu Leu Phe | Ser | Thr | Al a | Hi s | Ser | 162 |
| AGC | GCG | AAA | TCT CGA AGG | GTT | GGC | CAG CTG GGC | GTT | ATT | CCA | GAC | AGG | 585 |
| Ser | Al a | Ly s | Ser Arg Arg | Va 1 | Gly | Gin Leu Gly | Va 1 | I 1 e | Pro | As p | Arg | 178 |
| CTA | CCT | AAG | CGT CAA CTG | TTC | AAC | CTC CCG GCC | CAC | ACG | AAC | GGT | GGT | 633 |
| Leu | Pro | Ly s | Arg Gin Leu | Phe | Asn | Leu Pro Alá | Hi s | Thr | Asn | Gly | Gly | 194 |
| ACA | AAT | TTT | CCA CTA AAC | ATA | AAA | TCT ATA GAC | TGG | CGT | ACC | GCG | GGA | 681 |
| Thr | Asn | Phe | Pro Leu Asn | I le | Ly s | Ser I1e Asp | Trp | Arg | Thr | Al a | Gly | 210 |
| GTT | TAT | GTG | TGG TAC TTG | TTT | GCC | AAA AAC GGC | TCA | CTC | ATT | AAC | AGT | 729 |
| Va 1 | Tyr | Va 1 | Trp Tyr Leu | Phe | Al a | Lys Asn Gly | Ser | Leu | I 1 e | Asn | Ser | 226 |
| ACC | AGC | GTT | ACC GTG TTA | ACG | TAC | AAC GCA CCC | CTA | ATG | GAC | CTC | TCC | 777 |
| Thr | Ser | Val | Thr Val Leu | Thr | Tyr | Asn Alá Pro | Leu | Me t | As p | Leu | Ser | 242 |
| GTT | CAC | CCA | AGT TTG AAG | GGT | GAA | AAC CAC AGA | GCC | GTG | TGC | GTA | GTT | 825 |
| Va 1 | Hi s | Pro | Ser Leu Lys | Gly | Glu | Asn Hi s Arg | Al a | Va 1 | Cy s | Va 1 | Va 1 | 258 |
| GCT | AGC | TAC | TTT CCC CAC | AAC | TCT | GTT AAG CTG | AGG | TGG | TAT | AAA | AAC | 873 |
| Al a | Ser | Tyr | Phe Pro Hi s | Asn | Ser | Va 1 Lys Leu | Arg | Trp | Tyr | Ly s | As n | 274 |
HU 217 211 Β
| GCC | AAA GAG GTT GAT | TTT | ACA AAG TAT GTT ACC AAT GCT | TCT | AGT | GTG | 921 |
| Al a | Lys Glu Val Asp | Phe | Thr Lys Tyr Yal Thr Asn Alá | Ser | Ser | Ya 1 | 290 |
| TGG | GTG GAT GGT CTC | ATC | ACT CGC ATC TCG ACT GTA TCA | ATC | CCA | GCT | 969 |
| Tr p | Val Asp G1y Leu | I 1 e | Thr Arg I le Ser Thr Val Ser | I le | Pro | Al a | 306 |
| GAC | CCC GAC GAA GAA | TAT | CCC CCC AGC CTC CGC TGT AGC | ATA | GAA | TGG | 1017 |
| As p | Pro Asp Glu Glu | Tyr | Pro Pro Ser Leu Arg Cys Ser | I le | Glu | Trp | 322 |
| TAC | AGA GAC GAG GTA | TCC | TTT TCT CGC ATG GCC AAA GCA | GGC | ACG | CCC | 1065 |
| Tyr | Arg Asp Glu Val | Ser | Phe Ser Arg Me t Alá Lys Alá | Gly | Thr | Pro | 338 |
| TCT | GTG TTC GTG GCC | CCA | ACC GTG TCC GTA AAC GTT GAA | GAT | GGT | GCA | 1113 |
| Ser | Val Phe Val Alá | Pro | Thr Val Ser Val Asn Val Glu | As p | Gly | Al a | 354 |
| GCA | GTT TGT ACG GCA | GAA | TGT GTA CCT AGC AAC GGA GTG | TTT | GTA | TCG | 1161 |
| Al a | Val Cys Thr Alá | Glu | Cys Val Pro Ser Asn Gly Val | Phe | Va 1 | Ser | 370 |
| TGG | GTC GTT AAC GAC | CAT | TTA CCG GGG GTC CCA TCA CAA | GAC | GTA | ACA | 1209 |
| Trp | Val Val Asn Asp | Hi s | Leu Pro Gly Val Pro Ser Gin | Asp | Va 1 | Thr | 386 |
| ACG | GGA GTT TGC TCA | AGC | CAC CCA GGA TTA GTC AAC ATG | CGG | AGT | AGC | 1257 |
| Thr | G1y Val Cys Ser | Ser | His Pro Gly Leu Val Asn Me t | Arg | Ser | Ser | 402 |
| AGG | CCC CTG TCG GAA | GAA | AAC GGA GAG CGA GAG TAT AAC | TGC | ATC | ATA | 1305 |
| Arg | Pro Leu Ser Glu | Glu | Asn Gly Glu Arg Glu Tyr Asn | Cy s | I le | I le | 418 |
| GAG | GGT TAC CCG GAC | GGC | CTT CCA ATG TTT TCT GAC AGC | GTT | GTA | TAT | 1353 |
| Glu | G1y Tyr Pro Asp | Gly | Leu Pro Met Phe Ser Asp Ser | Va 1 | Va 1 | Tyr | 434 |
| GAT | GCA TCC CCT ATT | GTT | GAG GAC ATG CCC GTT TTA ACT | GGC | ATC | ATC | 1401 |
| As p | Alá Ser Pro I1e | Va 1 | Glu Asp Me t Pro Val Leu Thr | Gly | I 1 e | I 1 e | 450 |
| GCC | GTT ACT TGC GGG | GCC | GCA GCG CTA GCG CTG GTT GTT | CTC | ATT | ACA | 1449 |
| Al a | Val Thr Cys Gly | Al a | Alá Alá Leu Alá Leu Val Val | Leu | I le | Thr | 466 |
| GCC | GTT TGT TTT TAC | TGC | TCA AAA CCC TCG CAG GTG CCG | TAC | AAG | AAA | 1497 |
| Al a | Val Cys Phe Tyr | Cy s | Ser Lys Pro Ser Gin Val Pro | Tyr | Ly s | Ly s | 482 |
| GCA | GAC TTC TAA GCTGGTCGTC AGTTTGAACA GCAGCTGGTT TTTTTAAATA | 1549 | |||||
| Al a | Asp Phe | 485 |
CAGTTCAAAC C 1560
Claims (13)
- SZABADALMI IGÉNYPONTOK1. Eljárás EHV-4 gH vagy gC polipeptidet vagy azok antigénsajátságú fragmensét kódoló nukleinsavszekvencia előállítására, azzal jellemezve, hogy a megfe- 35 lelő szekvenciát megklónozzuk, in vitro amplifikáljuk vagy kémiai szintézissel előállítjuk.
- 2. Az 1. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy a SEQ ID NO: 1 vagy SEQ ID NO: 2 szerinti aminosavszekvenciájú polipeptidet vagy annak szánna- 40 zékát kódoló szekvenciát állítunk elő.
- 3. A 2. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy a SEQ ID NO: 1 vagy SEQ ID NO: 2 szerinti dezoxinukleinsav-szekvenciáknak vagy azok származékainak megfelelő nukleinsavszekvenciát állítunk elő.
- 4. Eljárás az 1-3. igénypontok bármelyike szerint előállított nukleinsavszekvenciát expressziósan szabályozva tartalmazó rekombináns nukleinsavmolekula előállítására, azzal jellemezve, hogy egy, az 1-3. igénypontok bármelyike szerint előállított nukleinsavszekvenciát 50 működőképesen expressziós szabályozó rendszerhez kapcsolunk.
- 5. Eljárás a 4. igénypont szerinti rekombináns nukleinsavmolekulát tartalmazó vírusvektor előállítására, azzal jellemezve, hogy egy, a 4. igénypont szerint előál- 55 lított rekombináns nukleinsavmolekulát vírusvektorba építünk.
- 6. Eljárás az 1-3. igénypontok bármelyike szerinti nukleinsavszekvenciát, a 4. igénypont szerint előállított nukleinsavmolekulát vagy az 5. igénypont szerint előál- 60 lított vírusvektort tartalmazó gazdasejt előállítására, azzal jellemezve, hogy egy, az 1-3. igénypontok bármelyike szerint előállított nukleinsavszekvenciát, egy 4. igénypont szerint előállított nukleinsavmolekulát vagy egy 5. igénypont szerint előállított vírus vektort gazdasejtbe juttatunk.
- 7. Eljárás EHV-4 gH vagy gC polipeptid vagy antigénsajátságú fragmense előállítására, azzal jellemezve, hogy a megfelelő polipeptidet vagy fragmensét természetes forrásból izoláljuk, rekombináns eljárással expresszáltatjuk vagy szintetikusan előállítjuk.
- 8. A 7. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy a SEQ ID NO: 1 vagy SEQ ID NO: 2 szerinti aminosavszekvencia legalább egy részét tartalmazó poli45 peptidet vagy annak származékát állítjuk elő.
- 9. Eljárás az 1-3. igénypontok bármelyike szerint előállított nukleinsavszekvencia által kódolt EHV-4 polipeptid előállítására, azzal jellemezve, hogy egy, az 1-3. igénypontok bármelyike szerint előállított nukleinsavszekvenciát expresszáltatunk, vagy a kódolt szekvenciájú polipeptidet szintetikus úton előállítjuk.
- 10. Eljárás a 7-9. igénypontok bármelyike szerint előállított polipeptiddel immunreaktív antitest vagy antiszérum előállítására, azzal jellemezve, hogy egy gazdaszervezetet egy, a 7-9. igénypontok bármelyike szerint előállított polipeptiddel immunizálunk, majd a gazdaszervezetből specifikus antitesteket vagy antiszérumot izolálunk.
- 11. Eljárás lovak EHV-4 vírus okozta fertőzésekkel szembeni védelmére alkalmas vakcina előállításá10HU 217 211 Β ra, azzal jellemezve, hogy egy 1-3. igénypont szerint előállított nukleinsavszekvenciát, egy 4. igénypont szerint előállított rekombináns nukleinsavmolekulát, egy 5. igénypont szerint előállított vírusvektort, egy 6. igénypont szerint előállított gazdasejtet vagy egy7-9. igénypontok bármelyike szerint előállított polipeptidet mint hatóanyagot farmakológiailag elfogadható hordozó- és/vagy egyéb segédanyagokkal elegyítünk.
- 12. Eljárás EHV-4 vakcina előállítására, azzal jellemezve, hogy 6. igénypont szerint előállított gazdasejteket tenyésztünk, majd az EHV-4-tartalmú anyagot elválasztjuk, és immunizáló hatású gyógyászati készít5 ménnyé alakítjuk.
- 13. Eljárás EHV-4 vakcina előállítására, azzal jellemezve, hogy egy 7-9. igénypontok bármelyike szerinti polipeptidet immunizáló hatású gyógyászati készítménnyé alakítunk.
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| GB909014950A GB9014950D0 (en) | 1990-07-06 | 1990-07-06 | Ehv-4 glycoprotein vaccine |
Publications (3)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| HU9300009D0 HU9300009D0 (en) | 1993-04-28 |
| HUT69920A HUT69920A (en) | 1995-09-28 |
| HU217211B true HU217211B (hu) | 1999-12-28 |
Family
ID=10678729
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| HU9300009A HU217211B (hu) | 1990-07-06 | 1991-07-04 | Eljárás EHV-4 glikoprotein vakcina előállítására |
Country Status (15)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US6083511A (hu) |
| EP (1) | EP0538341B1 (hu) |
| JP (1) | JPH05509226A (hu) |
| AT (1) | ATE147100T1 (hu) |
| AU (1) | AU8200791A (hu) |
| CA (1) | CA2086739A1 (hu) |
| DE (1) | DE69123970T2 (hu) |
| DK (1) | DK0538341T3 (hu) |
| ES (1) | ES2099164T3 (hu) |
| GB (1) | GB9014950D0 (hu) |
| GR (1) | GR3023297T3 (hu) |
| HU (1) | HU217211B (hu) |
| NZ (1) | NZ238833A (hu) |
| WO (1) | WO1992001057A1 (hu) |
| ZA (1) | ZA915230B (hu) |
Families Citing this family (13)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US5731188A (en) * | 1986-11-20 | 1998-03-24 | Syntro Corporation | Recombinant equine herpesviruses |
| DE4110962A1 (de) * | 1991-04-05 | 1992-10-08 | Bayer Ag | Equine herpesviren (ehv), die fremd-dna enthalten, verfahren zu ihrer herstellung und ihre verwendung in impfstoffen |
| EP0655072B1 (en) * | 1992-06-01 | 2004-02-11 | The University Of Melbourne | Immunological method for the detection of antibodies to equine herpesvirus type 1 and 4 glycoprotein G |
| US6193983B1 (en) | 1992-06-01 | 2001-02-27 | The University Of Melbourne | Equine herpesvirus glycoproteins |
| US6225111B1 (en) | 1992-08-07 | 2001-05-01 | Schering Plough Veterinary Corp. | Recombinant equine herpesviruses |
| EP0734564A4 (en) * | 1993-04-14 | 1997-05-07 | Re Mark It Holdings Ltd | ERASABLE MARKING ARTICLE |
| US5807557A (en) * | 1994-07-25 | 1998-09-15 | The Trustees Of The University Of Pennsylvania | Soluble herpesvirus glycoprotein complex |
| US6156319A (en) * | 1994-07-25 | 2000-12-05 | The Trustees Of The University Of Pennsylvania | Soluble herpesvirus glycoprotein complex vaccine |
| EP1129722A1 (en) * | 2000-02-17 | 2001-09-05 | Boehringer Ingelheim Vetmedica Gmbh | gM-negative EHV-mutants |
| US6803041B2 (en) * | 2001-03-20 | 2004-10-12 | Boehringer Ingelheim Vetmedica, Inc. | Equine herpesvirus vaccine |
| AR040601A1 (es) * | 2002-07-19 | 2005-04-13 | Boehringer Ingelheim Vetmed | Mutantes ehv negativos de gm sin elementos heterologos |
| US7323178B1 (en) | 2004-01-16 | 2008-01-29 | The Ohio Department Of Agriculture | Method of identification of equine herpes virus type 1 causing neurological disease, method of producing a vaccine against neurological disease caused by equine herpes virus type 1, and vaccine against neurological disease caused by equine herpes virus type 1 |
| EP2072620B1 (en) | 2004-12-08 | 2013-05-08 | SunGene GmbH | Expression casstettes for vascular tissue-preferential expression in plants |
Family Cites Families (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US4769330A (en) * | 1981-12-24 | 1988-09-06 | Health Research, Incorporated | Modified vaccinia virus and methods for making and using the same |
| US5338683A (en) * | 1981-12-24 | 1994-08-16 | Health Research Incorporated | Vaccinia virus containing DNA sequences encoding herpesvirus glycoproteins |
| US4879213A (en) * | 1986-12-05 | 1989-11-07 | Scripps Clinic And Research Foundation | Synthetic polypeptides and antibodies related to Epstein-Barr virus early antigen-diffuse |
| WO1990001546A1 (en) * | 1988-08-05 | 1990-02-22 | Applied Biotechnology, Inc. | Equine herpesvirus-1 vaccine |
-
1990
- 1990-07-06 GB GB909014950A patent/GB9014950D0/en active Pending
-
1991
- 1991-07-04 HU HU9300009A patent/HU217211B/hu not_active IP Right Cessation
- 1991-07-04 EP EP91912865A patent/EP0538341B1/en not_active Expired - Lifetime
- 1991-07-04 DE DE69123970T patent/DE69123970T2/de not_active Expired - Fee Related
- 1991-07-04 ES ES91912865T patent/ES2099164T3/es not_active Expired - Lifetime
- 1991-07-04 WO PCT/GB1991/001091 patent/WO1992001057A1/en active IP Right Grant
- 1991-07-04 NZ NZ238833A patent/NZ238833A/xx unknown
- 1991-07-04 JP JP3512017A patent/JPH05509226A/ja active Pending
- 1991-07-04 DK DK91912865.2T patent/DK0538341T3/da active
- 1991-07-04 AT AT91912865T patent/ATE147100T1/de not_active IP Right Cessation
- 1991-07-04 CA CA002086739A patent/CA2086739A1/en not_active Abandoned
- 1991-07-04 AU AU82007/91A patent/AU8200791A/en not_active Abandoned
- 1991-07-05 ZA ZA915230A patent/ZA915230B/xx unknown
-
1997
- 1997-04-02 GR GR970400646T patent/GR3023297T3/el unknown
- 1997-08-29 US US08/920,562 patent/US6083511A/en not_active Expired - Fee Related
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| DE69123970T2 (de) | 1997-07-24 |
| HUT69920A (en) | 1995-09-28 |
| GR3023297T3 (en) | 1997-07-30 |
| GB9014950D0 (en) | 1990-08-29 |
| EP0538341B1 (en) | 1997-01-02 |
| CA2086739A1 (en) | 1992-01-07 |
| ES2099164T3 (es) | 1997-05-16 |
| WO1992001057A1 (en) | 1992-01-23 |
| ATE147100T1 (de) | 1997-01-15 |
| ZA915230B (en) | 1992-04-29 |
| EP0538341A1 (en) | 1993-04-28 |
| DK0538341T3 (da) | 1997-06-30 |
| HU9300009D0 (en) | 1993-04-28 |
| JPH05509226A (ja) | 1993-12-22 |
| US6083511A (en) | 2000-07-04 |
| AU8200791A (en) | 1992-02-04 |
| NZ238833A (en) | 1993-02-25 |
| DE69123970D1 (de) | 1997-02-13 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| US8114409B2 (en) | Structural proteins of fish pancreatic disease virus and uses thereof | |
| EP0538341B1 (en) | Ehv-4 glycoprotein vaccine | |
| EP0510773B1 (en) | Canine coronavirus subunit vaccine | |
| HU217213B (hu) | Eljárás lóherpeszvírus-4 TK- vakcina előállítására | |
| EP0759995B1 (en) | Fusion glycoprotein from hcmv and hsv | |
| WO1993015763A1 (en) | Vaccinal polypeptides | |
| RU2178807C2 (ru) | ВЫДЕЛЕННАЯ ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТЬ ДНК, ВЕКТОР, СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ГОМОГЕННОГО БЕЛКА gp350, ГОМОГЕННЫЙ БЕЛОК gp350, ФАРМАЦЕВТИЧЕСКАЯ КОМПОЗИЦИЯ ДЛЯ ЛЕЧЕНИЯ ЕВV-СВЯЗАННОГО ЗАБОЛЕВАНИЯ ИЛИ СОСТОЯНИЯ | |
| EP0513921B1 (en) | Recombinant vaccine against Marek's disease | |
| US5674499A (en) | Equine herpesvirus gene 15 mutants | |
| HU222367B1 (hu) | Pestivírusból származó T-sejt-stimuláló proteinek | |
| US5443831A (en) | Gene encoding glycoprotein B of Infectious Laryngotracheitis Virus | |
| US5674735A (en) | DNA encoding the EHV-4 gH or gC glycoprotein | |
| HUT56136A (en) | Process for producing vaccine against infectious bronchitis virus | |
| US6225111B1 (en) | Recombinant equine herpesviruses | |
| EP0668355A1 (en) | Vaccine for the protection of horses against equine herpesvirus infection | |
| US5738854A (en) | Pseudorabies virus vaccine | |
| WO1994000587A2 (en) | Attenuated equine herpesvirus-4 as live vaccine or recombinant vector | |
| US6312696B1 (en) | Antigenic protein originating in infectious laryngotracheitis virus | |
| CN117229370A (zh) | H5n6禽流感广谱性疫苗的开发及其应用 | |
| JP2007537723A (ja) | オルニトバクテリウムライノトラキアルサブユニットワクチン | |
| EP1721982A1 (en) | Chimeric lyssavirus nucleic acids and polypeptides |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| HMM4 | Cancellation of final prot. due to non-payment of fee |