JP2007537723A - オルニトバクテリウムライノトラキアルサブユニットワクチン - Google Patents
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Abstract
Description
Tm=[81.5℃+16.6(logM)+0.41(%GC)−0.61(%ホルムアミド)−500/L]−1℃/1%ミスマッチ
に従う。
(実施例)
異なるサブユニットワクチン(併用ワクチンA、B、C、D、E、及び単独ワクチンOr77)により誘導される抗体応答の交差防御能を評価するために、動物実験を実施した。SPFブロイラーに上記のように2週齢でワクチンを接種した。5週齢でニワトリをエアゾール噴霧によりND LaSota(用量:1羽当たり1*106E.I.D.)でプライミングした。6週齢でニワトリをOrnithobacterium rhinotracheale血清型A株B3263/91で攻撃した(異種攻撃)。攻撃はTHB1ml当たり8.5*108コロニー形成単位(CFU)を含有する新鮮な細菌培養液のエアゾール噴霧により実施した。エアゾール攻撃中に約1.5m3のアイソレーターで商業用塗料吹き付け器を使用して細菌培養液を微細スプレーとしてニワトリに投与した。アイソレーター内で発生したミストを空気循環の遮断により少なくとも10分間維持した。攻撃対照群とNDプライミング群も試験に加えた。攻撃から1週間後に7週齢でニワトリを屠殺し、呼吸器疾患に関する以下のOrnithobacterium rhinotrachealeスコアリングシステムを使用して臓器病変を肉眼採点した。胸部気嚢について、0=異状なし、1=一方の気嚢が重度線維素性気嚢炎を発症又は両方の気嚢に線維素性浸出液の限定的帽針頭大病巣、2=両方の気嚢が重度線維素性気嚢炎を発症;腹部気嚢について、0=異状なし、1=線維素性浸出液の帽針頭大病巣又は軽度びまん性線維素性気嚢炎、2=重度線維素性気嚢炎。気嚢炎スコアは両方のスコアの和とする。肺について、0=異状なし、1=片側肺炎、2=両側肺炎。平均群スコアは可能な最高スコアの百分率とする。Kruskal−Wallisノンパラメトリック一元配置ANOVAを使用して統計分析を実施した。図4は5種の異なるサブユニットワクチンA〜Eの交差防御能を示す。攻撃対照群はワクチン接種せず、プライミングと攻撃を行なったものであり、最高スコアを示した。ワクチンE(全8種の抗原を含有)を接種したニワトリはワクチン接種と攻撃を行わずにニューカッスル病ウイルスでプライミングした群の結果と同等のほぼ完全な防御を示した。ワクチンA、B及びCを接種したニワトリでは程度は多少劣るが、依然として有意な交差防御(P<0.05)を観察することができた。併用ワクチンDは有意性の低い(p=0.19)の交差防御を示した。未処置ニワトリは臓器病変を示さなかった。
Claims (52)
- 59.8kD Ornithobacterium rhinotracheale蛋白質をコードする核酸又は前記蛋白質の免疫原性フラグメントをコードする前記核酸の一部(前記核酸又は前記その一部は配列番号1に記載のOrnithobacterium rhinotracheale蛋白質遺伝子の核酸に対して少なくとも80%の相同度をもつ。)。
- 配列が配列番号1に記載のOrnithobacterium rhinotracheale蛋白質遺伝子の核酸に対して少なくとも85%、好ましくは90%、より好ましくは95%の相同度をもつことを特徴とする請求項1に記載の核酸又はその一部。
- 58.2kD Ornithobacterium rhinotracheale蛋白質をコードする核酸又は前記蛋白質の免疫原性フラグメントをコードする前記核酸の一部(前記核酸又は前記その一部は配列番号3に記載のOrnithobacterium rhinotracheale蛋白質遺伝子の核酸に対して少なくとも80%の相同度をもつ。)。
- 配列が配列番号3に記載のOrnithobacterium rhinotracheale蛋白質遺伝子の核酸に対して少なくとも85%、好ましくは90%、より好ましくは95%の相同度をもつことを特徴とする請求項3に記載の核酸又はその一部。
- 46.0kD Ornithobacterium rhinotracheale蛋白質をコードする核酸又は前記蛋白質の免疫原性フラグメントをコードする前記核酸の一部(前記核酸又は前記その一部は配列番号5に記載のOrnithobacterium rhinotracheale蛋白質遺伝子の核酸に対して少なくとも80%の相同度をもつ。)。
- 配列が配列番号5に記載のOrnithobacterium rhinotracheale蛋白質遺伝子の核酸に対して少なくとも85%、好ましくは90%、より好ましくは95%の相同度をもつことを特徴とする請求項5に記載の核酸又はその一部。
- 37.2kD Ornithobacterium rhinotracheale蛋白質をコードする核酸又は前記蛋白質の免疫原性フラグメントをコードする前記核酸の一部(前記核酸又は前記その一部は配列番号7に記載のOrnithobacterium rhinotracheale蛋白質遺伝子の核酸に対して少なくとも80%の相同度をもつ。)。
- 配列が配列番号7に記載のOrnithobacterium rhinotracheale蛋白質遺伝子の核酸に対して少なくとも85%、好ましくは90%、より好ましくは95%の相同度をもつことを特徴とする請求項7に記載の核酸又はその一部。
- 45.6kD Ornithobacterium rhinotracheale蛋白質をコードする核酸又は前記蛋白質の免疫原性フラグメントをコードする前記核酸の一部(前記核酸又は前記その一部は配列番号9に記載のOrnithobacterium rhinotracheale蛋白質遺伝子の核酸に対して少なくとも80%の相同度をもつ。)。
- 配列が配列番号9に記載のOrnithobacterium rhinotracheale蛋白質遺伝子の核酸に対して少なくとも85%、好ましくは90%、より好ましくは95%の相同度をもつことを特徴とする請求項9に記載の核酸又はその一部。
- 42.2kD Ornithobacterium rhinotracheale蛋白質をコードする核酸又は前記蛋白質の免疫原性フラグメントをコードする前記核酸の一部(前記核酸又は前記その一部は配列番号11に記載のOrnithobacterium rhinotracheale蛋白質遺伝子の核酸に対して少なくとも80%の相同度をもつ。)。
- 配列が配列番号11に記載のOrnithobacterium rhinotracheale蛋白質遺伝子の核酸に対して少なくとも85%、好ましくは90%、より好ましくは95%の相同度をもつことを特徴とする請求項11に記載の核酸又はその一部。
- 34.0kD Ornithobacterium rhinotracheale蛋白質をコードする核酸又は前記蛋白質の免疫原性フラグメントをコードする前記核酸の一部(前記核酸又は前記その一部は配列番号13に記載のOrnithobacterium rhinotracheale蛋白質遺伝子の核酸に対して少なくとも80%の相同度をもつ。)。
- 配列が配列番号13に記載のOrnithobacterium rhinotracheale蛋白質遺伝子の核酸に対して少なくとも85%、好ましくは90%、より好ましくは95%の相同度をもつことを特徴とする請求項13に記載の核酸又はその一部。
- 32.9kD Ornithobacterium rhinotracheale蛋白質をコードする核酸又は前記蛋白質の免疫原性フラグメントをコードする前記核酸の一部(前記核酸又は前記その一部は配列番号15に記載のOrnithobacterium rhinotracheale蛋白質遺伝子の核酸に対して少なくとも80%の相同度をもつ。)。
- 配列が配列番号15に記載のOrnithobacterium rhinotracheale蛋白質遺伝子の核酸に対して少なくとも85%、好ましくは90%、より好ましくは95%の相同度をもつことを特徴とする請求項15に記載の核酸又はその一部。
- 請求項1から16に記載の核酸を含むDNAフラグメント。
- 機能的に連結されたプロモーターの制御下に請求項1から16に記載の核酸又は請求項17に記載のDNAフラグメントを含む組換えDNA分子。
- 請求項1から16に記載の核酸、請求項17に記載のDNAフラグメント又は請求項18に記載の組換えDNA分子を含む生きた組換えキャリヤー。
- 請求項1から16に記載の核酸、請求項17に記載のDNAフラグメント、請求項18に記載の組換えDNA分子又は請求項19に記載の生きた組換えキャリヤーを含む宿主細胞。
- 配列番号2に記載のアミノ酸配列に対して少なくとも80%のアミノ酸配列相同度をもつ59.8kD Ornithobacterium rhinotracheale蛋白質又は前記蛋白質の免疫原性フラグメント。
- 配列番号2に記載のアミノ酸配列に対して少なくとも85%、好ましくは90%、より好ましくは95%のアミノ酸配列相同度をもつ請求項21に記載のOrnithobacterium rhinotracheale蛋白質又は前記蛋白質の免疫原性フラグメント。
- 請求項1又は2に記載の核酸によりコードされることを特徴とする59.8kD Ornithobacterium rhinotracheale蛋白質又はその免疫原性フラグメント。
- 配列番号4に記載のアミノ酸配列に対して少なくとも80%のアミノ酸配列相同度をもつ58.2kD Ornithobacterium rhinotracheale蛋白質又は前記蛋白質の免疫原性フラグメント。
- 配列番号4に記載のアミノ酸配列に対して少なくとも85%、好ましくは90%、より好ましくは95%のアミノ酸配列相同度をもつ請求項24に記載のOrnithobacterium rhinotracheale蛋白質又は前記蛋白質の免疫原性フラグメント。
- 請求項3又は4に記載の核酸によりコードされることを特徴とする58.2kD Ornithobacterium rhinotracheale蛋白質又はその免疫原性フラグメント。
- 配列番号6に記載のアミノ酸配列に対して少なくとも80%のアミノ酸配列相同度をもつ46.0kD Ornithobacterium rhinotracheale蛋白質又は前記蛋白質の免疫原性フラグメント。
- 配列番号6に記載のアミノ酸配列に対して少なくとも85%、好ましくは90%、より好ましくは95%のアミノ酸配列相同度をもつ請求項27に記載のOrnithobacterium rhinotracheale蛋白質又は前記蛋白質の免疫原性フラグメント。
- 請求項5又は6に記載の核酸によりコードされることを特徴とする46.0kD Ornithobacterium rhinotracheale蛋白質又はその免疫原性フラグメント。
- 配列番号8に記載のアミノ酸配列に対して少なくとも80%のアミノ酸配列相同度をもつ37.2kD Ornithobacterium rhinotracheale蛋白質又は前記蛋白質の免疫原性フラグメント。
- 配列番号8に記載のアミノ酸配列に対して少なくとも85%、好ましくは90%、より好ましくは95%のアミノ酸配列相同度をもつ請求項30に記載のOrnithobacterium rhinotracheale蛋白質又は前記蛋白質の免疫原性フラグメント。
- 請求項7又は8に記載の核酸によりコードされることを特徴とする37.2kD Ornithobacterium rhinotracheale蛋白質又はその免疫原性フラグメント。
- 配列番号10に記載のアミノ酸配列に対して少なくとも80%のアミノ酸配列相同度をもつ45.6kD Ornithobacterium rhinotracheale蛋白質又は前記蛋白質の免疫原性フラグメント。
- 配列番号10に記載のアミノ酸配列に対して少なくとも85%、好ましくは90%、より好ましくは95%のアミノ酸配列相同度をもつ請求項33に記載のOrnithobacterium rhinotracheale蛋白質又は前記蛋白質の免疫原性フラグメント。
- 請求項9又は10に記載の核酸によりコードされることを特徴とする45.6kD Ornithobacterium rhinotracheale蛋白質又はその免疫原性フラグメント。
- 配列番号12に記載のアミノ酸配列に対して少なくとも80%のアミノ酸配列相同度をもつ42.2kD Ornithobacterium rhinotracheale蛋白質又は前記蛋白質の免疫原性フラグメント。
- 配列番号12に記載のアミノ酸配列に対して少なくとも85%、好ましくは90%、より好ましくは95%のアミノ酸配列相同度をもつ請求項36に記載のOrnithobacterium rhinotracheale蛋白質又は前記蛋白質の免疫原性フラグメント。
- 請求項11又は12に記載の核酸によりコードされることを特徴とする42.2kD Ornithobacterium rhinotracheale蛋白質又はその免疫原性フラグメント。
- 配列番号14に記載のアミノ酸配列に対して少なくとも80%のアミノ酸配列相同度をもつ34.0kD Ornithobacterium rhinotracheale蛋白質又は前記蛋白質の免疫原性フラグメント。
- 配列番号14に記載のアミノ酸配列に対して少なくとも85%、好ましくは90%、より好ましくは95%のアミノ酸配列相同度をもつ請求項39に記載のOrnithobacterium rhinotracheale蛋白質又は前記蛋白質の免疫原性フラグメント。
- 請求項13又は14に記載の核酸によりコードされることを特徴とする34.0kD Ornithobacterium rhinotracheale蛋白質又はその免疫原性フラグメント。
- 配列番号16に記載のアミノ酸配列に対して少なくとも80%のアミノ酸配列相同度をもつ32.9kD Ornithobacterium rhinotracheale蛋白質又は前記蛋白質の免疫原性フラグメント。
- 配列番号16に記載のアミノ酸配列に対して少なくとも85%、好ましくは90%、より好ましくは95%のアミノ酸配列相同度をもつ請求項42に記載のOrnithobacterium rhinotracheale蛋白質又は前記蛋白質の免疫原性フラグメント。
- 請求項15又は16に記載の核酸によりコードされることを特徴とする32.9kD Ornithobacterium rhinotracheale蛋白質又はその免疫原性フラグメント。
- ワクチン用としての請求項1から16に記載の核酸、請求項17に記載のDNAフラグメント、請求項18に記載の組換えDNA分子、請求項19に記載の生きた組換えキャリヤー、請求項20に記載の宿主細胞又は請求項21から44に記載の蛋白質もしくはその免疫原性フラグメント。
- Ornithobacterium rhinotracheale感染の防除用ワクチンの製造のための、請求項1から16に記載の核酸、請求項17に記載のDNAフラグメント、請求項18に記載の組換えDNA分子、請求項19に記載の生きた組換えキャリヤー、請求項20に記載の宿主細胞又は請求項21から44に記載の蛋白質もしくはその免疫原性フラグメントの使用。
- 請求項1から16に記載の核酸、請求項17に記載のDNAフラグメント、請求項18に記載の組換えDNA分子、請求項19に記載の生きた組換えキャリヤー、請求項20に記載の宿主細胞又は請求項21から44に記載の蛋白質もしくはその免疫原性フラグメントと、医薬的に許容可能なキャリヤーを含有することを特徴とするOrnithobacterium rhinotracheale感染の防除用ワクチン。
- 請求項21から44に記載の蛋白質又は前記蛋白質の免疫原性フラグメントに対する抗体と、医薬的に許容可能なキャリヤーを含有することを特徴とするOrnithobacterium rhinotracheale感染の防除用ワクチン。
- アジュバントを含有することを特徴とする請求項47に記載のワクチン。
- 家禽に対して病原性のウイルスもしくは微生物に由来する付加抗原、前記抗原に対する抗体又は前記抗原をコードする遺伝情報を含有することを特徴とする請求項47から49に記載のワクチン。
- ニワトリに対して病原性のウイルス又は微生物が鶏痘ウイルス、伝染性気管支炎ウイルス、伝染性ファブリキウス嚢病(ガンボロ病)ウイルス、マレック病ウイルス、ニワトリ貧血ウイルス、トリレオウイルス、Mycoplasma gallisepticum、シチメンチョウ鼻気管炎ウイルス、Haemophilus paragallinarum(コリーザ)、ニワトリポックスウイルス、トリ脳脊髄炎ウイルス、アヒルペストウイルス、ニューカッスル病ウイルス、産卵低下症候群ウイルス、伝染性喉頭気管炎ウイルス、シチメンチョウヘルペスウイルス、エイメリア種、Ornithobacterium rhinotracheale、Pasteurella multocida、Mycoplasma synoviae、サルモネラ種及び大腸菌から構成される群から選択されることを特徴とする請求項50に記載のワクチン。
- 請求項1から16に記載の核酸、請求項17に記載のDNAフラグメント、請求項18に記載の組換えDNA分子、請求項19に記載の生きた組換えキャリヤー、請求項20に記載の宿主細胞、請求項21から44に記載の蛋白質もしくはその免疫原性フラグメント、又は請求項21から44に記載の蛋白質に対する抗体と、医薬的に許容可能なキャリヤーを混合する段階を含む請求項47から51に記載のワクチンの製造方法。
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