HU214742B - Eljárás immunogén peptidek, továbbá az azokat tartalmazó gyógyszerkészítmények előállítására - Google Patents

Eljárás immunogén peptidek, továbbá az azokat tartalmazó gyógyszerkészítmények előállítására Download PDF

Info

Publication number
HU214742B
HU214742B HU902930A HU293090A HU214742B HU 214742 B HU214742 B HU 214742B HU 902930 A HU902930 A HU 902930A HU 293090 A HU293090 A HU 293090A HU 214742 B HU214742 B HU 214742B
Authority
HU
Hungary
Prior art keywords
gly
trp
lhrh
animals
leu
Prior art date
Application number
HU902930A
Other languages
English (en)
Other versions
HU902930D0 (en
HUT62916A (en
Inventor
Robert Hans Meloen
Cornelis Johannes Gerardus Wensing
Original Assignee
Stichting Centraal Diergeneeskundig Instituut
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Stichting Centraal Diergeneeskundig Instituut filed Critical Stichting Centraal Diergeneeskundig Instituut
Publication of HU902930D0 publication Critical patent/HU902930D0/hu
Publication of HUT62916A publication Critical patent/HUT62916A/hu
Publication of HU214742B publication Critical patent/HU214742B/hu

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K7/00—Peptides having 5 to 20 amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C07K7/04—Linear peptides containing only normal peptide links
    • C07K7/23—Luteinising hormone-releasing hormone [LHRH]; Related peptides
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/0005—Vertebrate antigens
    • A61K39/0006—Contraceptive vaccins; Vaccines against sex hormones
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/555—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characterised by a specific combination antigen/adjuvant
    • A61K2039/55511—Organic adjuvants
    • A61K2039/55566—Emulsions, e.g. Freund's adjuvant, MF59
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/60—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characteristics by the carrier linked to the antigen
    • A61K2039/6031—Proteins
    • A61K2039/6081—Albumin; Keyhole limpet haemocyanin [KLH]
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/62—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characterised by the link between antigen and carrier
    • A61K2039/627—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characterised by the link between antigen and carrier characterised by the linker
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/64—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characterised by the architecture of the carrier-antigen complex, e.g. repetition of carrier-antigen units

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Endocrinology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Reproductive Health (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
  • Peptides Or Proteins (AREA)
  • Nitrogen And Oxygen Or Sulfur-Condensed Heterocyclic Ring Systems (AREA)
  • Medicinal Preparation (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)

Abstract

A találmány tárgya eljárás pGlű-His-Trp1-Ser-Tyr-Gly-Leű-Arg-Prő-Gly- -Gln-His-Try2-Ser-Tyr-Gly-Leű-Arg-Prő-Gly-Cys-Nh2vagy pGlű-His-Trp1-Ser-Tyr-Gly-Leű-Arg-Prő-Gly- -Gln-Hi -Trp2-Ser-Tyr-Gly-Leű-Arg-Prő-Gly-NH2 általánős képletű peptidek – a képletben Trp1 és Trp2 jelentése Trpvagy N-főrmil-Trp – előállítására, amelyre jellemző, hőgy a megfelelővédett aminősavakat vagy azőkból felépített sz kvenciákat a kívántsőrrendben ismert módőn összekapcsőlják, majd a védőcsőpőrtőkateltávőlítják. ŕ

Description

Jelen találmány olyan peptid előállítására vonatkozik, amely képes enteinizáló hormonfelszabadító hormon (LHRH) ellen hatékony szérumkomponens felszabadítására (LHRH)=luteinising hormoné releasing hormon, más néven GnRH=gonadotropin releasing hormon).
A találmány vonatkozik továbbá ilyen pepiidre alapozott immunválaszt kiváltó készítményre és oltóanyagra vagy orvosi készítményre (oltóanyagok és gyógyászati készítmények) és ezen vakcinák és orvosi készítmények felhasználásával az emlősök LHRH elleni immunizálására és a sertéshús minőségének javítására.
Az LHRH hormon egy kis peptid, 10 aminosavból álló lánc (azaz dekapeptid) és a következő szerkezeti képlet szerinti aminosav sorrenddel rendelkezik (szokásos módon az amino végű aminosav balra és a karboxi végű aminosav jobbra van feltüntetve): pGlu-His-TrpSer-Tyr-Gly-Leu-Arg-Pro-Gly-NH2
Fent az aminosavakat a hárombetűs kód szerint jeleztük, vagy jelezhetjük az aminosavakat az egybetűs kód szerint is, ahol #E pyroglutaminsav és G 9 glicinamid.
#EHWSYGLRPG0
Ismert, hogy az LHRH, ha vivő proteinnel párosul, felhasználható emlősök beoltására. Ilyen beoltást különböző célból hajthatunk végre, amelyek mind összefüggésben állnak az LHRH természetes funkciójával. A hypothalamusban képződő LHRH az LH (luteinizáló hormon) és az FSH (follikulus stimulálóhormon) nemi hormonok képződését szabályozza a hypofízisben. Tudvalevőleg az LH és FSH vérszintjének drasztikus csökkenése a hím állatokban az androgének termelődését és a spermiogenezist a herékben gátolja, a nőstény állatokban a progesztrogének és ösztrogének termelését és a follikulus érését gátolja a petefészekben.
Az androgének, progesztogének és ösztrogének vérszintjének csökkenése arra a szintre, ami megfelel a kasztrációval vagy petefészek-eltávolítással nyerhető szintnek, elérhető az állat LHRH elleni hatékony immunizálásával.
Az állatorvoslás területén a 100%-ig hatékony immunizálás használható lenne sterilizálásra például kis háziállatok, mint például hím és nőstény macska esetén vagy hím kutyák agresszivitásának kezelésére olyan drasztikus sebészi beavatkozás helyett, mint a kasztráció vagy a petefészek-eltávolítás. Más elképzelhető alkalmazási területe az LHRH elleni immunizálásnak kutyáknál a tüzelés, ökörhízlalóban a nyugtalanság megelőzése. A humán gyógyászatban az LHRH elleni immunizálás prosztata- és emlőrák kezelésére, szükség esetén a hypofízis karcinoma egyes formáinak kezelésére használható fel.
Az LHRH elleni szérum továbbá felhasználható az állattenyésztés területén, nevezetesen a levágásra szánt sertések hizlalására. A hím, nemileg érett sertés húsának jellegzetes szaga van. A nemileg érett sertés heréjében számos szteroid termelődik, amelyek a zsírszövetben raktározódnak. Ezek a szteroidok (Cl9 16 szteroidok) felelősek a nemkívánatos, vizelethez hasonló szagért, ami a hús sütésekor szabadul fel [Brooks és munkatársai, J. Amin. Sci. 62, 1279 (1986)]. E nemkívánatos „kanszagnak” köszönhetően a nemileg érett hímsertés húsa alig - ha egyáltalán - alkalmas fogyasztásra. Minthogy a kan sertéseknek körülbelül 10%-a már nemileg érett a levágás ideje előtt, ez a lehetőség nagy veszteséget okoz a sertéstenyésztők számára. E veszteség megelőzése céljából minden kansertést fiatal korában kasztrálnak - érzéstelenítés nélkül.
Eltekintve attól, hogy az állatok szempontjából egy ilyen kasztráció kellemetlen beavatkozás, a kasztrálás a növekedés gátlását is okozza, és a hús minősége alábbmarad a sértetlen állatokénál (amíg a sértetlen állat a nemi kifejlettségét még nem érte el).
Egy állatbarát alternatívát (ami ráadásul javítja a hús minőségét) szolgáltat a fiatal állatok LHRH elleni immunizálása, minek következtében csökken az LHRH koncentrációja a fiatal állat hipofízisében.
Az LHRH-koncentráció ezen csökkenése a hipofízisben a biológiailag aktív LH és FSH vérbeni koncentrációjának csökkenéséhez vezet, ami pedig azt eredményezi, hogy a növésben lévő állatban a herék fejlődését megakadályozzuk vagy késleltetjük, és kevesebb szteroid termelődik. A hatásos LHRH elleni beoltással ezért elkerülhetjük, hogy a nemkívánatos kanszag kifejlődjék a sertésekben a levágás ideje előtt.
Mostanában kezd a gyakorlatban elterjedni, hogy a hím állatokban a herék fejlődését késleltethetjük vagy megállíthatjuk vivő proteinhez kapcsolt LHRH beoltásával. Mindazonáltal az eredmények változóak az ismert szérumpreparátumok, mint például magán az LHRH-n vagy egy analógján, például [Dtrp6] LHRH-n alapuló készítmény alkalmazásakor. [Chaffaux és munkatársai, Recueil de Médecine Vétérinaire 16], 133-145 (1985)]. Például vannak olyan beoltott állatok, amelyek alig vagy egyáltalán nem reagálnak a szérumra. Fiatal kansertéseknél való felhasználás esetén a kanszag kifejlődésének megelőzésére a jó szérumtól megkívántatik, hogy a herék kifejlődése oly mértékben késsen, hogy egyelten esetben sem (születés után 35 hétig) fejlődjön ki kanszag, még igen nagy sertéspopulációban sem. Az ismert szérumpreparátumok nem felelnek meg ennek a követelménynek.
Ez vonatkozik a 4 608251 számú amerikai egyesült államokbeli szabadalmi leírásban ismertetett immunogén LHRH szérumra is. Az ott ajánlott szérum egy nonavagy dekapeptiden alapul, amelynek szerkezeti képlete: (C) KW SYGLRPGö, vagy dekapeptidek dimeijén, ami az amino végű ciszteinek kapcsolódása útján jöhet létre, és megfelel az alábbi szerkezeti képletnek: CKWSYGLRPG3
CKWSYGLRPG0
Ez a dimer nem mutatkozik hatékonyabbnak a monomerpeptideknél.
A WO 88/05308 számon publikált nemzetközi szabadalmi bejelentés olyan LHRH szérumokat ajánl, amelyek az LHRH részpeptidjein alapulnak és 5, 6 vagy 7 aminosav hosszúságúak, különös tekintettel azon peptidekre, amelyek mind az amino végű pGlu-t, mind a karboxi végű Gly-NH2-t tartalmazzák. Ilyen részpeptidekre példa (egybetűs kóddal megadva):
HU 214 742 Β #EH W S Y,#EH W S YG, #EHWSYGL, HWSYGLR, WSYGLR, SY GLRPGS,ésY G L RP G 9. Mindazonáltal az ezen részpeptideken alapuló szérumok is az előbb említett hátrányos tulajdonságokat mutatják.
Meglepő módon azt találtuk, hogy jobb és főként megbízhatóbb szérumot nyerünk, ha az kettős LHRH szerkezetű peptiden alapul, azaz a peptid legalább két egymás után következő LHRH szekvenciát tartalmaz.
A találmány tárgya tehát eljárás pGlu-His-Trp'-Ser-Tyr-Gly-Leu-Arg-Pro-Gly-Gln-His-Trp2-Ser-Tyr-Gly-Leu-Arg-Pro-GlyCys-NH2 vagy pGlu-His-Trp'-Ser-Tyr-Gly-Leu-Arg-Pro-Gly-Gln-His-Trp2-Ser-Tyr-Gly-Leu-Arg-Pro-Gly-NH2 általános képletű peptidek - a képletben Trp1 és Trp2 jelentése Trp vagy N-formil-Trp - előállítására, azzal jellemezve, hogy a megfelelő védett aminosavakat, vagy azokból felépített szekvenciákat a kívánt sorrendben ismert módon összekapcsoljuk, majd a védőcsoportokat eltávolítjuk.
A találmány vonatkozik olyan készítmény előállítására is, amely a találmány szerinti peptidet immunogénné tett változatban tartalmazza. A szakemberek által ismert módon különböző eljárások léteznek arra, hogy önmagukban nem immunogén anyagokat immunogénné tegyünk. Az első számú lehetőség szerint összekötjük a találmány szerinti peptidet megfelelő vivőproteinnel. A kémiai kötődésre a C vagy az N vég megfelelően használható lehet. Az e téren képzettek pontosan tudják, hogy melyik kapcsolómódszer és mely vivőfehérjék a megfelelőek. Ezzel összefüggésben lásd például a fent idézett 4608251 számú amerikai egyesült államokbeli szabadalmi leírást és a WO 88/05308 számú publikációt. Jelen találmány szerint előnyös az a vegyület, ami azzal jellemezhető, hogy egy fehéije és a találmány szerinti peptid immunogén konjugátumát tartalmazza. Egyéb lehetőség a peptid megváltoztatására az, ha keresztkötésekkel egy nagyobb komplexhez kapcsoljuk, vagy ha a peptidet rekombináns DNS molekula segítségével állítjuk elő egy nagyobb fehérje részeként. A találmány vonatkozik tehát olyan vegyiiletre is, amely inununogén komplexet tartalmaz, és immunogén rekombináns proteinre is, amihez egy - a találmány szerinti - peptid tartozik.
Természetesen a találmány vonatkozik szérumokra és gyógyászati készítményekre is, amelyek azzal jellemezhetők, hogy jelen találmány szerinti vegyületet tartalmaznak legalább egy immuno-adjuvánssal kombinálva. A megfelelő adjuvánsok a szakmabeliek által ismertek és például CFA-t (Complete Freund’s Adjuvants) vagy IFA-t (Incomplete Freund’s Adjuvants) tartalmaznak.
A találmány szerinti vegyületek, illetve az azokat tartalmazó készítmények emlősök LHRH elleni immunizálására alkalmazhatók, amely módszer azzal jellemezhető, hogy az emlősöket a találmány szerinti szérummal vagy gyógyászati készítménnyel oltjuk be. Ezen beoltás javallatait a fentiekben már tárgyaltuk, úgymint használatát a humán medicinában prosztata- és emlő karcinoma és a hipofízis karcinoma egyes formáinak kezelésére, különböző felhasználási területeit az állatgyógyászatban és különböző felhasználhatóságát az állattenyésztésben. Speciális felhasználási területe a sertéshús minőségének javítása, amire jellemző, hogy a sertéseket a találmány szerinti szérumpreparátummal oltjuk be.
A találmányt az alábbi példákon keresztül ismertetjük közelebbről.
1. példa pGlu-His-Trp’-Ser-Tyr-Gly-Leu-Arg-Pro-Gly-Gln-His-Trp2-Ser-Tyr-Gly-Leu-Arg-Pro-Gly-CysNH2
A felhasznált oldószerek és reagensek analitikai tisztaságnak voltak, és az NSZK-beli Merck cégtől (Darmstadt) kerültek beszerzésre, amelyeket nem vetettünk alá további tisztításnak. A diklór-metánt (DCM) aktivált bázikus alumínium-oxiddal töltött oszlopon tisztítottuk. A Boc-védett aminosavakat, a 4-metilbenzhidril-amin (MBHA) gyantát és a benzotriazol-l-iloxi-trisz (dimetil-amino)-foszfónium-hexafluor-foszfátot (BOP, Castro-féle reagens, (Le-Nguyen D., Heitz A. és Castro B. (1987) Renin substrates, 2. kötet, Rapid solid phase synthesis of the ratine sequence tetradecapeptide using BOP reagent, J. Chem. Soc. Perkin Trans. I., 1915-1919; Fournier A., WangC. T. és Félix A. M. (1988) Applications of BOP reagent in solid phase synthesis, Int. J. Peptide Protein Rés. 31, 86-97.) A Novabiochem cégtől szereztük be.
A szintézist 250 ml-es üvegedényben végeztük, melynek alján üvegszűrő volt. A mosásokat, BOCvédőcsoport-eltávolításokat és kapcsolásokat manuálisan hajtottuk végre. A kapcsolást BOP reagenssel és diizopropil-etil-amin (DIEA) felhasználásával végzett „in situ” semlegesítéssel (ide az 1. hív) hajtottuk végre.
Az előállítás során MBHA gyantát (1% divinilbenol, 0,75 meq/mg, 5,1 g) 24 órán át 50 térfogat%-os DMF/DCM oldatban duzzasztottunk, majd DCM-mel mostunk.
Ezután egymást követően a következő reagenseket kapcsoltuk össze az alábbiakban megadott kapcsolási lépéssorozat ismételt alkalmazásával: Boc-Cys(Mob), Boc-Gly, Boc-Pro, Boc-Arg(Tos), Boc-Leu, Boc-Gly, Boc-Tyr(2-BrZ), Boc-Ser(Bzl), Boc-Trp(For), BocHis(Tos), Boc-Gln, Boc-Gly, Boc-Pro, Boc-Arg(Tos), Boc-Leu, Boc-Gly, Boc-Tyr(2-BrZ), Boc-Ser(Bzl), Boc-Trp(For), Boc-His(Tos) és Boc-pGlu.
Kapcsolási lépéssorozat:
1. DCM-es mosás (kétszer 2 perc).
2. 50 térfogat%-os TFA/DCM oldattal mosás (egyszer 2 perc).
3. 50 térfogat%-os TFA/DCM oldatban nitrogén átbuborékoltatás (egyszer 20 perc).
4. DCM-es mosás (kétszer 2 perc).
5. Izopropanolos mosás (kétszer 2 perc).
6. Dimetil-formamidos mosás (kétszer 2 perc).
7. Kapcsolási lépés nitrogén átbuborékoltatás mellett (90 perc).
8. DCM-es mosás (kétszer 2 perc).
A kapott peptid aminosav-analízise összhangban van az adagolásból következő összetétellel.
HU 214 742 Β
2. példa pGlu-H is-Trp1 -Ser-T yr-Gly-Leu-Arg-Pro-Gly-Gln-His-Trp2-Ser-Tyr-Gly-Leu-Arg-Pro-Gly-NH2
Az 1. példa szerint járunk el azzal az egy különbséggel, hogy a Boc-Cys(Mob) reagenst elhagytuk, vagyis az 1. kapcsolásnál Boc-Gly reagenst alkalmaztuk.
A kapott peptid aminosav-analízise összhangban van az adagolásból következő összetétellel.
Hatástani példa
Hím újszülött sertések három csoportját (5 állat csoportonként) oltottuk be LHRH szérummal születésük után (0. nap). A szérumok C terminális cisztein révén összekapcsolt peptidből és KLH (Keyhole Limpet Hemocyanine) vivő proteinből álltak. Ez a kapcsolódás MBS segítségével jött létre (m-malcimido-benzoil-Nhidroxi-szukcinimid-észter, 1. Geysen és munkatársai, PNAS 81, 3998-4002 (1984).
A használt fehérjék:
I. csoport: LHRH képlete: #EHWSYGLRPGCS
II. csoport: [D-Trp6]LHRH képlete: #E H W S Y [D-Trp] L R P G Cd
III. csoport: két LHRH egymás után, képlete:
ffiHWSYGLRPGQHWSYGLR PGC 9
A peptideket a KLH-val való kapcsolódás után (12 mg peptid 1 mg KLH-hoz) 1 ml CFA-ban emulgeáltuk (1 ml peptid-KLH oldat 1 ml CFA-ban). Az emulziót a 0. napon és 8 héttel később is intramuszkulárisan adtuk be. A második beoltás alkalmával IFA-t használtunk.
Egy kontrollcsoportot (IV. csoport) csak a vivő proteinnel (KLH) és az adjuvánssal oltottunk be.
A 0. napon és 4, 8 és 12 hét múlva a herék méretét megmértük. A 17-18. héten az állatokat levágtuk. Az első beoltást követő 12. héten a sertések szérumában megmértük a tesztoszteron mennyiségét. Az első beoltást követő 131. napon a herék és mellékherék és a vesicula seminalis (ondóhólyag) és a bulbourethralis mirigy tömegét megmértük az állatoknál.
A négy csoport eredményei a következők voltak: LHRH beoltása után (I. csoport) a külső vizsgálat azt mutatta, hogy az 5 közül három állatnak kisebb heréi voltak, mint a kontrollcsoportban (IV. csoport). A három kisebb heréjű állat közül kettőnél a herék oly mértékben megkisebbedtek, hogy külső vizsgálattal már nem voltak mérhetők.
A [D-Trp6] LHRH-val beoltott állatok közül (II. csoport) az 5 közül 2 állatnak lett nyilvánvalóan kisebb heréje, mint a kontrollállatoké, és egy állat esetében a herék már nem voltak többé mérhetők.
A két kapcsolódó LHRH-val beoltott 5 állat közül mindegyiknél kisebb lett a here a kontrollállatokéhoz viszonyítva, és 4 állat esetén a herék nem voltak többé mérhetők.
A szérumban jelenlévő átlagos tesztoszterontartalmak egyenként:
2,47 (1,21) pmol/ml (kontrollcsoport, 5 állat)
1,89 (2,24) pmol/ml (I. csoport, 5 állat)
2,72 (2,23) pmol/ml (II. csoport, 5 állat)
0,51 (0,08) pmol/ml (III. csoport, 5 állat).
Az átlagos here és mellékhere tömegek egyenként: 258 (50) g/55 (11) g (kontrollcsoport, 5 állat)
110 (123) g/21 (17) g (I. csoport, 5 állat)
221 (88) g/42 (12) g (II. csoport, 5 állat) (11) g/11 (2) g (III. csoport, 4 állat).
Az átlagos ondóhólyag és bulbourethrális mirigy tömegei egyenként:
135 (44) g/119 (24) g (kontrollcsoport, 5 állat) (80) g/37 (48) g (I. csoport, 5 állat)
137 (71) g/135 (52) g (II. csoport, 4 állat) (3) g/15 (5) g (III. csoport, 4 állat).
A zárójelben lévő értékek a standard deviációk.
Minthogy a herék késleltetett fejlődése vagy éppen visszafejlődése direkt összefüggésben állhat a sertés androgéntermelő képességének és következésképpen a nemkívánatos kanszag kifejlődésének csökkenésével, a kívánt teljes védelem a III. csoportnál realizálódott, ahol a találmány szerinti kettős LHRH szérumot alkalmaztuk, míg mindössze részleges védelmet észleltünk az I. és II. csoportnál, amelyeket összehasonlítás céljára használtunk.

Claims (3)

  1. SZABADALMI IGÉNYPONTOK
    1. Eljárás pGlu-His-Trp’-Ser-Tyr-Gly-Leu-ArgPro-Gly-Gln-His-Trp2-Ser-Tyr-Gly-Leu-Arg-Pro-Gly-Cys
    -NH2 vagy pGlu-His-Trp'-Ser-Tyr-Gly-Leu-Arg-Pro-Gly-Gln-His-Trp2-Ser-Tyr-Gly-Leu-Arg-Pro-Gly-NH2 általános képletü peptidek - a képletben Trp1 és Trp2 jelentése Trp vagy N-formil-Trp - előállítására, azzal jellemezve, hogy a megfelelő védett aminosavakat vagy azokból felépített szekvenciákat a kívánt sorrendben ismert módon összekapcsoljuk, majd a védőcsoportokat eltávolítjuk.
  2. 2. Eljárás gyógyászati készítmény előállítására, azzal jellemezve, hogy egy 1. igénypont szerint előállított peptidet vagy immunogén formáját gyógyászati készítmények előállításánál szokásosan alkalmazott hordozó és/vagy vivőanyaggal összekeverve gyógyászati készítménnyé alakítunk.
  3. 3. A 2. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy hím emlősök immunokasztrálására alkalmas gyógyszerkészítményt állítunk elő.
HU902930A 1989-03-23 1990-03-22 Eljárás immunogén peptidek, továbbá az azokat tartalmazó gyógyszerkészítmények előállítására HU214742B (hu)

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
NL8900726A NL8900726A (nl) 1989-03-23 1989-03-23 Peptide, immunogene samenstelling en vaccin- of geneesmiddelpreparaat; werkwijze voor het immuniseren van een zoogdier tegen lhrh, en werkwijze voor het verbeteren van de vleeskwaliteit van varkens.

Publications (3)

Publication Number Publication Date
HU902930D0 HU902930D0 (en) 1991-12-30
HUT62916A HUT62916A (en) 1993-06-28
HU214742B true HU214742B (hu) 1998-10-28

Family

ID=19854349

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
HU902930A HU214742B (hu) 1989-03-23 1990-03-22 Eljárás immunogén peptidek, továbbá az azokat tartalmazó gyógyszerkészítmények előállítására

Country Status (11)

Country Link
EP (1) EP0464124B1 (hu)
JP (1) JP3098771B2 (hu)
AT (1) ATE103297T1 (hu)
CA (1) CA2049325C (hu)
DE (1) DE69007616T2 (hu)
DK (1) DK0464124T3 (hu)
ES (1) ES2050435T3 (hu)
HU (1) HU214742B (hu)
NL (1) NL8900726A (hu)
RU (1) RU2078770C1 (hu)
WO (1) WO1990011298A1 (hu)

Families Citing this family (20)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
GB8713240D0 (en) * 1987-06-05 1987-07-08 Proteus Biotech Ltd Hormones
US5171835A (en) * 1988-10-21 1992-12-15 The Administrators Of The Tulane Educational Fund LHRH antagonists
US5324512A (en) * 1990-12-26 1994-06-28 The Population Council [Gln']-luteinizing hormone releasing hormone conjugate of tetanus vaccine and its uses
PL296623A1 (en) * 1991-03-01 1993-09-20 Rhone Merieux Method of improving organoleptic properties of male slaughter animal meat
US5723129A (en) * 1991-10-16 1998-03-03 University Of Saskatchewan GnRH-leukotoxin chimeras
US5837268A (en) 1991-10-16 1998-11-17 University Of Saskatchewan GnRH-leukotoxin chimeras
ZA934199B (en) * 1992-06-18 1994-01-10 Akzo Nv Carrier system against gnrh
US5759551A (en) * 1993-04-27 1998-06-02 United Biomedical, Inc. Immunogenic LHRH peptide constructs and synthetic universal immune stimulators for vaccines
US6761890B1 (en) 1995-06-07 2004-07-13 Pepscan Systems B.V. Peptide, immunogenic composition and vaccine or medical preparation, a method to immunize animals against the hormone LHRH, and analogs of the LHRH tandem repeat peptide and their use as vaccine
WO1996040755A1 (en) * 1995-06-07 1996-12-19 Dlo Instituut Voor Dierhouderij En Diergezondheid (Id-Dlo) An improved peptide, immunogenic composition and vaccine or medical preparation, a method to immunise animals against the hormone lhrh, and analogs of the lhrh tandem repeat peptide and their use as vaccine
US5885966A (en) * 1995-06-07 1999-03-23 Dlo Instituut Voor Dierhouderij En Diergezondheid Peptide, immunogenic composition and vaccine or medical preparation, a method to immunise animals against the hormone LHRH, and analogs of the LHRH tandem repeat peptide and their use as vaccine
BR9709993A (pt) * 1996-06-25 1999-08-10 Stichting Inst Dierhouderij Vacina preparação de vacina composição processo para produção de uma preparação imugênica e preparação imugênica
AUPO776897A0 (en) 1997-07-09 1997-07-31 Csl Limited A method of achieving production gains in livestock and agents useful for same
EP1098661A2 (en) * 1998-06-04 2001-05-16 Metamorphix, Inc. Gnrh vaccines for suppressing reproductive behavior in animals
US6838553B1 (en) * 1999-10-05 2005-01-04 Academia Sinica Peptide repeat immunogens
AU2004232314B2 (en) 2003-04-22 2007-11-22 Ipsen Pharma S.A.S. Peptide vectors
CU23739A1 (es) 2008-09-30 2011-12-28 Ct Ingenieria Genetica Biotech Composición farmacéutica utilizando combinaciones de variantes de la hormona liberadora de las gonadotropinas (gnrh) como inmunógeno
RU2521652C2 (ru) * 2010-12-27 2014-07-10 Общество с ограниченной ответственностью "Научно-внедренческое предприятие "Астрафарм" РЕКОМБИНАНТНАЯ ДНК, КОДИРУЮЩАЯ ГИБРИДНЫЙ ВАКЦИННЫЙ БЕЛОК GHbc ДЛЯ РЕГУЛЯЦИИ ПОЛОВОЙ ФУНКЦИИ У ЖИВОТНЫХ, СОСТОЯЩИЙ ИЗ НУКЛЕОКАПСИДНОГО БЕЛКА ВИРУСА ГЕПАТИТА В ЧЕЛОВЕКА СЛИТОГО С ГОНАДОЛИБЕРИНОМ
RU2529959C1 (ru) * 2013-10-09 2014-10-10 Общество с ограниченной ответственностью ООО "Нанолек" Иммунологический адъювант на основе наночастиц для вакцин против высокопатогенных штаммов вируса гриппа
CN107073086B (zh) * 2014-07-25 2021-07-27 美国联合生物医学公司 免疫性lhrh组合物及其在猪只中的应用

Family Cites Families (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4608251A (en) * 1984-11-09 1986-08-26 Pitman-Moore, Inc. LHRH analogues useful in stimulating anti-LHRH antibodies and vaccines containing such analogues
WO1988005308A1 (en) * 1987-01-14 1988-07-28 Commonwealth Scientific And Industrial Research Or Anti reproductive hormone

Also Published As

Publication number Publication date
EP0464124B1 (en) 1994-03-23
JP3098771B2 (ja) 2000-10-16
HU902930D0 (en) 1991-12-30
WO1990011298A1 (en) 1990-10-04
NL8900726A (nl) 1990-10-16
DK0464124T3 (da) 1994-05-02
CA2049325C (en) 2000-07-25
EP0464124A1 (en) 1992-01-08
JPH04504256A (ja) 1992-07-30
ES2050435T3 (es) 1994-05-16
HUT62916A (en) 1993-06-28
DE69007616T2 (de) 1994-06-30
RU2078770C1 (ru) 1997-05-10
ATE103297T1 (de) 1994-04-15
DE69007616D1 (de) 1994-04-28
CA2049325A1 (en) 1990-09-24

Similar Documents

Publication Publication Date Title
HU214742B (hu) Eljárás immunogén peptidek, továbbá az azokat tartalmazó gyógyszerkészítmények előállítására
EP0181236B1 (en) Lhrh analogues useful in stimulating anti-lhrh antibodies and vaccines containing such analogues
JPH10500397A (ja) Ｇｎｒｈ拮抗剤
NO176440B (no) Syntetiske nonapeptid- og decapeptidanaloger av LHRH for anvendelse for regulering av fruktbarheten og forplantningssyklusen hos mennesker og husdyr
JPS60500057A (ja) ＧｎＲＨ作働薬
KR100335320B1 (ko) 황체호르몬방출호르몬에대한향상된펩티드,면역원성조성물및백신또는의학용제제,동물을면역시키는방법,및황체호르몬방출호르몬직렬반복펩티드의유사체및백신으로서이들의용도
USRE39048E1 (en) Peptide, immunogenic composition and vaccine or medical preparation, a method to immunise animals against the hormone LHRH, and analogs of the LHRH tandem repeat peptide and their use as vaccine
US5484592A (en) Peptide, immunogenic composition and vaccine or medicinal preparation: a method of immunising a mammal against LHRH, and a method of improving the meat quality of pigs
US4443368A (en) Peptides affecting gonadal function
US7361349B2 (en) Peptide, immunogenic composition and vaccine or medical preparation, a method to immunize animals against the hormone LHRH, and analogs of the LHRH tandem repeat peptide and their use as vaccine
AU2001294395B2 (en) Discrimination between GnRH-I and GnRH-II
US5508383A (en) Cyclic peptide LHRH antagonists
AU2001294395A1 (en) Discrimination between GnRH-I and GnRH-II
EP0959079A1 (en) Vaccine for the reversible immunocastration of mammals
NZ215999A (en) Vaccine for inducing antibodies to lhrh

Legal Events

Date Code Title Description
HPC4 Succession in title of patentee

Owner name: PEPSCAN SYSTEMS B.V., NL