HU213612B

HU213612B - Process for producing 2-spirocyclopropyl-cephalosporin derivatives and pharmaceutical compositions containing them

Info

Publication number: HU213612B
Application number: HU9201149A
Authority: HU
Inventors: Kazuo Adachi; David Czajkowski; Samarendra N Maiti; Ronald George Micetich; Paul Spevak
Original assignee: Synphar Lab Inc
Priority date: 1989-10-06
Filing date: 1990-10-05
Publication date: 1997-08-28
Also published as: HU9201149D0; FI921507A; EP0494914A1; US5264430A; JPH05503290A; AU6513190A; NZ235589A; FI921507A0; EP0494914B1; ATE174919T1; DE69032857T2; ZA907976B; HUT61769A; KR927003605A; AU661453B2; WO1991004977A1; CA2067803A1; DE69032857D1

Description

A találmány tárgya eljárás új 2-spiro-ciklopropil-cefalosporin származékok és e vegyületeket hatóanyagként tartalmazó, gyulladáscsökkentő hatású és degeneratív állapotok kezelésére alkalmas gyógyászati készítmények előállítására.

Az emfizéma a bronchilusok (kishörgők) közötti légtér krónikus gyulladás által előidézett abnormális és irreverzíbilis megnagyobbodása. Az emfizémára jellemző továbbá a tüdő alveoláris falainak sorvadása. Az alveoláris falak károsodásával párhuzamosan a tüdők elvesztik rugalmasságukat. A betegség előrehaladásának tünetei például: a légzés gyorsulása a legkisebb fizikai megterhelés következtében is; gyakori légúti fertőzések és krónikus köhögés. Az emfizémát a krónikus tüdőbetegségek egyikének tekintik.

Jelenleg úgy vélik, hogy a tüdőemfizéma oka a humán leukocita-elasztáz (az alábbiakban rövidítve: HLE) enzimnek az elasztinra, mint kötőszöveti komponensre kifejtett hidrolitikus hatása. Hasonlóan más szerin-proteázokhoz, az elasztáz inaktiválható olyan gátló anyagokkal, amelyek az enzim aktív helyét szoros kötődéssel blokkolják. Normális körülmények között ezeknek az enzimeknek a károsító hatását megelőzi egy természetes gátló anyagnak, az a i -antitripszinnek a hatása; ez utóbbi anyag az emberi szérumban jelenlévő glikoprotein.

Úgy látszik, hogy a cigarettafüst által előidézett gyulladás nagy mennyiségű leukocita-elasztáz felszabadulását váltja ki, és ennek következtében a két enzim közötti egyensúly megbomlik. Ebben az esetben a jelenlévő a i-antitripszin mennyisége már nem elegendő ahhoz, hogy a leukocita-elasztáz enzimet megfelelően gátolja. Ennek következtében a feleslegben lévő elasztáz a tüdőben lévő elasztinrostok felületére kezd tapadni, és ez esetleg az emfizémára jellemző tüdőkárosodáshoz vezethet.

Úgy vélik továbbá, hogy a cigarettafüst hatására az a |-antitripszin a hatékonyságát elveszíti. Az a j-antitripszín hiányát továbbá öröklési tényezők is okozhatják.

A cefalosporin típusú gyógyszerhatóanyagokat (hatóanyagokat) széles körben alkalmazzák kórokozó baktériumok által előidézett különböző fertőző betegségek kezelésére és megelőzésére.

A 4 547 371 számú egyesült államokbeli szabadalmi leírás kinyilvánítja, hogy egyes szubsztituált cefalosporin-szulfon-származékok jelentős elasztáz-gátló hatást mutatnak. A 4 711 886 számú egyesült államokbeli szabadalmi leírás szerint β -laktám-származékok hatásosan gátolják az elasztázt. A 2 198 640 számú publikált nagybritanniai szabadalmi bejelentésben olyan penicillinszármazékokat írnak le, amelyek gyulladásgátló és antidegeneratív hatásokkal rendelkeznek. J. B. Doherty és munkatársai [Natúré 322, július 10. (1986)] közlik, hogy cefalosporin-antibiotikumok úgy módosíthatók, hogy gátolják az emberi leukocita-elasztázt. J. Pitlik és munkatársai „Cefalosporin-vegyületek cikloaddíciós reakciói, XI.” című közleményükben [J. Heterocyclin Chem. 26, 461 (1989) (angolul)] ismertetik vizsgálataikat cefalosporinszármazékok 1,3-dipoláris cikloaddíciós reakciói területén.

Mindezek alapján a jelen találmány elasztáz elleni hatással rendelkező, új 2-spiro-ciklopropil-cefalosporin-szulfon-származékokra vonatkozik. E származékok - mint elasztáz-gátlók - gyulladásos állapotok, különösen a reumás ízületi gyulladás, csontízületi gyulladás, cisztás fibrózis és az emfizéma megelőzésére, megszüntetésére, és kezelésére alkalmazhatók.

Közelebbről a találmány az (I) általános képletű

2-spiro-ciklopropil-cefalosporin-szulfon-származékok ra és azok előállítására vonatkozik. Az (I) képletben Rí jelentése 1-6 szénatomos alkoxiesoport, 1-3 halogénatommal vagy 1-2 fenilcsoporttal helyettesített 1-6 szénatomos alkoxiesoport vagy -NR₇R₈ általános képletű csoport, ahol R₇ és R₈ a velük kapcsolódó nitrogénatommal együtt egy 4 vagy 5 szénatomot tartalmazó telített N-heterociklusos gyűrűt képez;

R₂ jelentése 1-4 szénatomos alkilcsoport vagy acetoxi-metil-csoport;

R₃ és R₄ jelentése egymástól függetlenül fenil-, halogén-fenil-, 1-3 szénatomos alkil- vagy -CO-O-(l-6 szénatomos alkil)-csoport, vagy egyikük hidrogénatom is lehet;

Rj jelentése hidrogén- vagy halogénatom vagy 1-3 szénatomos alkoxiesoport;

m értéke 2.

Megjegyezzük továbbá, hogy abban az esetben, ha az (I) általános képletben R₃ és R4 jelentése különböző, akkor e vegyületek optikai izomerek alakjában-például L-, D- vagy DL-alakban lehetnek.

A találmány szerint előállítható új (I) általános képletű vegyületek előnyös példáiként az alábbiakat említjük:

7a -klór2-spiro[2',2'-difenil-ciklopropil]-3-metil-3cefem-4-karbonsav-1,1 -dioxid-benzhidril-észter,

7a -bróm-2-spiro[2',2’-difenil-ciklopropil]-3-metil-3-cefem-4-karbonsav-1,1 -dioxid-benzhidril-észter, 7,7-dihidro-2-spiro[2',2'-difenil-ciklopropil]-3-metil-3-cefem-4-karbonsav-1,1 -dioxid-benzhidril-észter, 7a -bróm-2-spiro[2',2'-difenil-ciklopropil]-3-metil-3-cefem-4-karbonsav-1,1 -dioxid-terc-butil-észter,

7a -bróm-2-spiro[2',2'-(4',4'-diklór)-difenil-ciklopropil]-3-metil-3-cefem-4-karbonsav-1,1 -dioxid-benzhidril-észter,

7a -bróm-2-spiro[2',2'(4',4'-difluor)-difenil-ciklopropil]-3-metil-3-cefem-4-karbonsav-l,l-dioxid-benzhidril-észter,

7a -klór-2-spiro[2',2'-dífenil-ciklopropil]-3-(acetoxi-metil)-3-cefem-4-karbonsav-l,l-dioxid-terc-butil-észter,

7a -bróm-2-spiro[2 -(etoxi-karbonil)-ciklopropil]-3-metil-3-cefem-4-karbonsav-1,1 -dioxid-benzhidril-észter,

7a -bróm-2-spiro[2',-fenil-2'-metil-ciklopropil]-3-metil-3-cefem-4-karbonsav-1,1 -dioxid-benzhidril-észter,

7a -bróm-2-spiro[2'-fenil-ciklopropil]-3-metil-3-cefem-4-karbonsav-1,1 -dioxid-benzhidril-észter,

7a -metoxi-2-spiro[2',2'-difenil-ciklopropil]-3-metil-3-cefem-4-karbonsav-1,1 -dioxid-benzhidril-észter,

7a -metoxi-2-spiro[2',2'-difenil-ciklopropil]-3-metil-3-cefem-4-karbonsav-1,1 -dioxid-(2,2,2-triklór-etil)-észter,

HU213 612Β α 4netoxi-2-spiro[2',2'-difenil-ciklopropil]-3-metil-3-c efem-4-(pirrolidin-karboxamid)-1,1 -dioxid,

7a-metoxi-2-spiro[2’,2'-difenil-cikloporpil]-3-metil-3-cefem-4-(piperidin-karboxamid)-l ,1 -dioxid,

7a -etoxi-2-spiro[2’,2'-difenil-ciklopropil]-3-metil-3-cefem-4-karbonsav-1,1 -dioxid-(2,2,2-triklór-etil)-észter,

7a-bróm-2-spiro[2',2'-difenil-ciklopropil]-3-metil-3-cefem-4-(pirrolidin-karboxamid)-1,1 -dioxid,

7a -metoxi-2-spiro[2',2'-difenil-ciklopropil]-3-metil-3-cefem^f-[2-(S)-terc-butoxi-karbonil-pirrolidin-karboxamid]-1,1,-dioxid, valamint

7a -metoxi-2-spiro[2',2'-difenil-ciklopropil]-3-metil-3-cefem-4-(N-metil-piperazin-karboxamid)-1,1 -dioxid.

A találmány az (I) általános képletü vegyületek előállítására vonatkozik. A találmány szerint a 7-helyzetben halogénatomot tartalmazó (I) általános képletü vegyületeket az alábbi lépésekben állítjuk elő (lásd az A) reakcióvázlatot):

- valamely (II) általános képletü 7-amino-cefem-4karbonsav-származékot - ahol R₂ jelentése a fenti a szabadkarboxilcsoport észterezése vagy amidálása útján a megfelelő (III) általános képletü 7-amino-cefem-4-karbonsav-észterré vagy amiddá - ahol R, és R₂ jelentése a fenti -- alakítjuk;

- a kapott (III) általános képletü észtert vagy amidot halogénezés útján a 7-helyzetben halogénatomot tartalmazó (IV) általános képletü cefem-4-karbonsav-észterré vagy amiddá - ahol R₅ jelentése halogénatom, Rí és R₂ jelentése a fenti - alakítjuk;

- a kapott (IV) általános képletü vegyületet oxidáció útján a megfelelő (V) általános képletü dioxiddá ahol m értéke 2, R₅ jelentése halogénatom, R| és R₂jelentése a fenti - alakítjuk,

- a kapott (V) általános képletü vegyületet amino-metilezés, előnyösen Mannich reakció útján a 2-helyzetben metiléncsoportot tartalmazó (VI) általános képletü cefem-származékká-ahol R5 jelentése halogénatom, m, R| és R₂ jelentése a fenti - alakítjuk;

- a kapott (VI) általános képletü vegyületet cikloaddíciós reakció útján alakítjuk a megfelelő 2helyzetben egy, a fentiek szerint helyettesített ciklopropilcsoportot tartalmazó (I) általános képletü vegyületté.

A 7a -szubsztituált Rí jelentésében metilcsoportot és

R₅ jelentésében 1-3 szénatomos alkoxicsoportot tartalmazó cefalosporinszármazékokat egy más módon eljárva a B) reakcióvázlat szerint is előállíthatjuk. Ez utóbbi eljárás a következő lépésekből áll:

- egy (VII) általános képletü diazo-penicillinátot valamely 1-3 szénatomos alifás alkohollal reagáltatva a megfelelő, R5 helyén 1-3 szénatomos alkoxicsoportot tartalmazó (VIII) általános képletü vegyületté - ahol R| jelentése a fenti - alakítunk;

- a kapott (VIII) általános képletü vegyületet alkalmas oxidálószerrel, előnyösen m-klór-peroxi-benzoesavval oxidálva, a megfelelő (IX) általános képletü szulfoxiddá - ahol R| jelentése a fenti, R5 jelentése 1-3 szénatomos alkoxicsoport - alakítjuk;

- a kapott (IX) általános képletü vegyületet (1) vagy közvetlenül, szerves oldószerben, előnyösen dimetil-formamidban ecetsavanhidriddel való kezelés útján, (2) vagy a (IX) általános képletü szubsztituált penicillánsav-oxidból egy R|₃-SH merkaptánnal kapott (X) általános képletü 2-ditio-3-izopropenil-4-oxo-azetidin-származékon, majd az ebből gyürüzáró halogénezéssel előállított (XI) általános képletü vegyületen (ahol X az alkalmazott halogénezöszer, előnyösen klór vagy bróm maradéka) keresztül, az utóbbinak szerves bázissal való kezelése útján a megfelelő (XII) általános képletü 7a -helyettesített

3-metil-3-cefem-4-karbonsavészter-származékká - ahol R5 jelentése 1-3 szénatomos alkoxicsoport - alakítjuk;

- a kapott (XII) általános képletü vegyületet oxidáció útján a megfelelő, a 7-helyzetben a -konfigurációjú szubsztituens tartalmazó (V) általános képletü dioxiddá - ahol m értéke 2, R₅ jelentése 1-3 szénatomos alkoxicsoport, R, jelentése egyezik a fent megadottal és R₂ jelentése metilcsoport - alakítjuk;

- a kapott (V) általános képletü vegyületet a fenti a) eljárásban megadott módon reagáltatjuk tovább a megfelelő, a 7-helyzetben a -konfigurációjú szubsztituens tartalmazó (I) általános képletü vegyületté.

A találmány szerinti eljárás további változata szerint az (I) általános képletnek megfelelő, a 7-helyzetben adott esetben a -konfigurációjú szubsztituenst tartalmazó 2-spiro-ciklopropil-cefalosporin-származékok - ahol Rí, R₂, R₃, R4, R5 és m jelentése egyezik a tárgyi körben megadottal - előállíthatók oly módon is, hogy

- valamely (IV) vagy (XII) általános képletü cefem-4-karbonsavészter-származékot - ahol Rí, R₂ és R5 jelentése a fenti - oxidáció útján a megfelelő (V) általános képletü dioxiddá - ahol R,, R₂, R5 és m jelentése megegyezik a fent megadottal - alakítunk; majd

- a kapott (V) általános képletü vegyületet amino-metilezés, előnyösen Mannich-reakció útján a 2-helyzetben metiléncsoportot tartalmazó (VI) általános képletü cefem-származékká-ahol R,, R₂, R5 és m jelentése egyezik a fent megadottal - alakítjuk;

- a kapott (VI) általános képletü vegyületet cikloaddíciós reakció útján alakítjuk a megfelelő, a 2-helyzetben egy, a tárgyi kör szerint helyettesített ciklopropilcsoportot tartalmazó (I) általános képletü vegyületté.

Az eljárások egyes lépéseinek részletesebb leírása Eszterezés és amidálás

A (II) általános képletü vegyületek karboxilcsoportját a cefalosporinok és penicillinek irodalmában leírt, általánosan alkalmazott módszerek útján láthatjuk el védőcsoporttal. Eljárhatunk például úgy, hogy a (II) általános képletü vegyület alkalmas sóját valamilyen alkil-halogeniddel - így benzil-bromiddal, 4-nitro-benzil-bromiddal, metil-jodiddal vagy allil-bromiddal - reagáltatjuk. A (II) általános képletü vegyületek e reakcióban alkalmazott sói lehetnek szervetlen bázisokkal alkotott sók - például alkálifémsók, így nátrium- vagy káliumsók, vagy alkálifoldfémsók, például kalcium- vagy

HU213 612Β magnéziumsók vagy azok hidroxidjai, karbonátjai vagy hidrogénkarbonátjai - vagy szerves bázissal alkotott sók, például trimetil-aminnal, trietil-aminnal, piridinnel, Ν,Ν-dialkil-aminnal, 1,5-diaza-biciklo [4.3.0]non-5-énnel, 1,4-diaza-biciklo [2.2.2] oktánnal vagy 1,8-diaza-biciklo[5.4.0]undec-7-én-nel képezett sók.

A (II) általános képletű vegyületek karboxilcsoportját más alkilező módszerekkel is átalakíthatjuk észterekké, például úgy, hogy a karbonsavat diazo-metánnal vagy difenil-diazometánnal kezeljük.

A karboxilcsoport úgy is átalakítható észterré, hogy a karbonsavat rövidszénláncú alkohollal - például metanollal vagy etanollal - kezeljük valamilyen katalizátor jelenlétében. E célra alkalmazható katalizátor például a sósav, bróm-hidrogénsav, kénsav, foszforsav, triklór-ecetsav, trifluor-ecetsav, p-toluolszulfonsav vagy egy Lewis-féle sav. Lewis-sav minőségében alkalmazható például valamilyen bór-halogenid (például bór-triklorid, bór-trifluorid), titán-halogenid (például titán-klorid vagy titán-bromid), ón(IV)-halogenid, alumínium-halogenid, cink-klorid és vas(III)-klorid.

A karboxilcsoport védelmének egy másik, előnyös módszere abban áll, hogy a karbonsavat alkalmas savas katalizátor (például kénsav) jelenlétében rövid szénláncú alkénnel (például izobutilénnel) kezeljük.

Az észterezést valamely szokásos kondenzálószer például Ν,Ν-diciklohexil-karbodiimid, N,N-dietil-karbodiimid, Ν,Ν-diizopropil-karbodiimid vagy N,N-karbonil-diimidazol - jelenlétében is megvalósíthatjuk.

Az észterezés egy másik módszere (amely egyszersmind amidálásra is alkalmazható) abban áll, hogy a karboxilcsoportot előbb reakcióképes származékává alakítjuk, s ez utóbbit a megfelelő alkohollal (vagy aminnal) reagáltatjuk. E célra alkalmas, reakcióképes karbonsavszármazék például az acil-halogenid, s szimmetrikus vagy vegyes anhidrid, vagy valamilyen aktivált amid. Eljárhatunk például úgy, hogy egy savkloridot vagy savbromidot állítunk elő a savból valamilyen halogénezőszerrel, például tionil-kloriddal, foszfor-pentakloriddal vagy foszfor-oxikloriddal.

E reakciókat általában a szokásos oldószerekben - például acetonban, dioxánban, acetonitrilben, kloroformban, diklór-metánban, diklór-etánban, tetrahidrofüránban, etil-acetátban, Ν,Ν-dimetil-formamidban - valósítjuk meg; alkalmazhatunk azonban bármely más szerves oldószert is, amely a reakciót károsan nem befolyásolja.

Halogénezés

Megjegyezzük, hogy - amennyiben ez célszerű előbb a (II) általános képletű vegyületet halogénezhetjük, és az így kapott terméket vethetjük alá az észterezési reakciónak a fentebb leírt módon.

A (IV) általános képletű vegyületeket - ahol Rj halogénatomot jelent - úgy állíthatjuk elő, hogy egy (II) általános képletű vegyület aminocsoportját a szokásos módon, hidrogén-halogenid vagy fém-halogenid jelenlétében diazotálási reakcióba viszünk. Hidrogén-halogenidként e reakcióban például hidrogén-kloridot, hidrogén-bromidot vagy hidrogén-jodidot alkalmazhatunk; fém-halogenidként például nátrium-bromidot, káliumbromidot vagy réz(II)-kloridot használhatunk. E reakciót előnyösen enyhe körülmények között, például hűtés közben, környezeti vagy kissé magasabb hőmérsékleten valósítjuk meg.

Oxidáció

Az (V) általános képletű vegyületek a jelen találmány szerint a (IV) általános képletű vegyületek oxidációja útján állíthatók elő. Ezt az oxidációt olyan körülmények között játszhatjuk le, hogy az -S- csoport szulfoxiddá vagy szulfonná, legelőnyösebben szulfonná alakuljon. E célra oxidálószerekként általában például fenil-jód-dikloridot, ózont, izocianuroilsavat, perhangyasavat, perecetsavat, trifluor-perecetsavat vagy hidrogén-peroxidot használhatunk.

Az oxidációs reakciót általában valamilyen oldószer - például kloroform, diklór-metán, dioxán, benzol, etil-acetát vagy más, a reakciót károsan nem befolyásoló oldószer jelenlétében, általában szobahőmérsékleten vagy hűtés közben hajtjuk végre.

Aminometilezés (Mannich-reakció)

Az (V) általános képletű vegyületek 2-helyzetében az exociklikus (gyűrűn kívüli) kettős kötés bevezetését az irodalomban részletesen ismertetett módszerrel végezhetjük [I. G. Wright és munkatársai: J. Med. Chem. 14, 420 (1971)]. E reakciót általában valamilyen oldószerben, például alkoholban (így terc-butanolban) vagy diklór-metánban, kloroformban, szén-tetrakloridban vagy ezek keverékében, vagy bármely, az adott reakciót károsan nem befolyásoló oldószerben valósítjuk meg.

E reakciónak különleges hőmérsékleti tartománya nincsen, ezért szobahőmérséklet és körülbelül 150 °C körüli hőmérséklet-tartományban dolgozhatunk visszafolyató hütő alatti forralással vagy anélkül, a reakció teljes végbemeneteléig.

Cikloaddíció

A 2-spiro[ciklopropil]-csoport (amely alkalmas szubsztituenseket is hordozhat) bevezetése céljából egy (VI) általános képletű vegyületet R3R4CN7 általános képletű vegyülettel - amelyben R₃ és R₄ azonosak vagy különbözők, és jelentésük a fentiekben meghatározott reagáltatunk. E reakciót általában valamilyen oldószerben - például diklór-metánban, kloroformban, szén-tetrakloridban, benzolban, éterben, etil-acetátban vagy bármely más, az adott reakciót károsan nem befolyásoló oldószerben - valósítjuk meg. Általában hűtés közben vagy környezeti hőmérsékleten dolgozunk.

A biológiai hatás kimutatása

Az (I) általános képletű vegyületek elasztáz elleni hatására vonatkozó in vitro vizsgálati adatokat az alábbi I. táblázatban foglaltuk össze.

1. táblázat

Az (1) általános képletű 2-spirociklopropil-cefalosporin-származékok hatása az emberi leukocita-elasztázra

Rs	Rí	r₂	r₃ (vagy R₄)	r₄ (vagy Rj)	IC50 (pg/ml)
Cl	OCHPh?	ch₃	Ph	Ph	0,0029

HU 213 612 Β

Rs	Rí	R₂	r₃ (vagy R4)	R4 (vagy Rr)	1C50 (gg/ml)
Br	-OCHPh:	ch₃	Ph	Ph	0,0022
H	-OCHPt	ch₃	Ph	Ph	0,086
Br	-OBut	ch₃	Ph	Ph	0,0027
Br	-0CHPh₂ CH3	_P ClCdl.,	P-OC6H4	0,0073
Br	-OCHPhi	ch₃	p-FC<5H₄	pCFCetU	0,0035
Cl	-OBut	CH₂OAc	Ph	Ph	0,051
Br	-OCHPh₂	ch₃	H	COOEt	0,037
Br	-OCHPH2	ch₃	Ph	ch₃	0,0028
Br	-OCHPh:	ch₃	Ph	H	0,0038
Br	(C)	ch₃	Ph	Ph	0,0058
CH₃O	<0	ch₃	Ph	Ph	0,022
EtO	-OCH2CC13	CH3	Ph	Ph	0,0032
CH₃O	-OCHPhj	ch₃	Ph	Ph	0,0022
ch₃o	-OCH2CCI3	ch₃	Ph	Ph	0,0025
ch₃o	(d)	ch₃	Ph	Ph	0,0054

Az alábbi vegyületeket vizsgáltuk:

7cx -klór-2-spiro[2',2'-difenil-ciklopropil]-3-metil-3-cefem-4-karbonsav-1,1 -dioxid-benzhidril-észter,

7a -bróm-2-spiro[2',2’-difenil-ciklopropil]-3-metil-3-cefem-4-karbonsav-1,1 -dioxid-benzhidril-észter,

7,7 -dihidro-2-spiro[2',2'-difenil-ciklopropil]-3-metil-3-cefem-4-karbonsav-1,1 -dioxid-benzhidril-észter,

7a -bróm-2-spiro[2',2'-difenil-ciklopropil]-3-metil-3-cefem-4-karbonsav-1,1 -dioxid-terc-butil-észter,

7a -bróm-2-spiro[2',2'-(4',4'-diklór)-difenil-cíklopropil]-3-metil-3-cefem-4-karbonsav-l,l-dioxid-benzhidril-észter,

7a -bróm-2-spiro[2',2’-(4',4'-difluor)-difenil-ciklopropil]-3-metil-3-cefem-4-karbonsav-1,1 -dioxid-benzhidril-észter,

7a -klór-2-spiro[2',2'-difenil-ciklopropil]-3-(acetoxi-metil)-3-cefem-4-karbonsav-1,1 -dioxid-terc-butil-észter,

7a -bróm-2-spiro[2'-(etoxi-karbonil)-ciklopropil]-3-metil-3-cefem-4-karbonsav-l,l-dioxid-benzhidril-észter,

7a -bróm-2-spiro[2',-fenil-2'-metil-ciklopropil]-3 -metil-3-cefem-4-karbonsav-1,1-dioxid-benzhidril-észter,

7a -bróm-2-spiro[2’-fenil-2’-ciklopropil]-3-metil-3-cefem-4-karbonsav-1,1 -dioxid-benzhidril-észter,

7a -bróm-2-spiro[2’,2'-difenil-ciklopropil]-3-metil-3-cefem-4-(pirrolidín-karboxamid)-1,1 -dioxid,

7a -metoxi-2-spiro[2',2'-difenil-ciklopropil]-3-metoxi-3-cefem-4-(pirrolidin-karboxamid)-1,1 -dioxid,

7a -etoxi-2-spiro[2',2'-difenil-ciklopropil]-3-metil-3-cefem-4-karbonsav-1,1 -dioxid-(2,2,2-triklór-etil)-észter,

7a -metoxi-2-spiro[2',2’-difenil-ciklopropil]-3-metil-3-cefem-4-karbonsav-1,1 -dioxid-benzhidril-észter,

7a -metoxi-2-spiro[2',2'-difenil-ciklopropil]-3-metil-3-cefem-4-karbonsav-1,1 -dioxid,-(2,2,2-triklór-etil)-észter,

7a -metoxi-2-spiro[2',2'-difenil-ciklopropil]-3-metil-3-cefem-4-(piperidin-karboxamid)-1,1 -dioxid,

7a -bróm-2-spiro[2',2'-difenil-ciklopropil]-3-(klór-metil)-3-cefem-4-karbonsav, 1,1 -dioxid-(p-metoxi-benzil-észter, valamint

7a -bróm-2-spiro[2',2'-(4',4'-diklór-difenil)-ciklopropil]-3-[(5-metil-l,3,4-tiadiazol-2-il)-tio-metil]-3-cefem-4-karbonsav-1 -oxid-benzhidril-észter.

Vizsgálati eljárások

Az emberi leukocita-elasztázra (HLE-ra) kifejtett gátló hatás vizsgálata

E kísérleteinkben emberi fehérvérsejtekből származó, tisztított elasztáz enzimet alkalmaztunk.

Az enzim szubsztrátuma:

MeO-szukcinil-L-alalnil-L-alanil-L-prolil-L-valin-(p-nitro-anilid) (NA)

A reakcióelegy összetétele:

mM foszfát-puffer (pH 7,6)

500 mM konyhasó

10% diometil-szulfoxid (a továbbiakban: DMSO)

0,35 mM szubsztrátum

Az enzimaktivitást úgy határoztuk meg, hogy 410 nm hullámhosszon mértük az abszorbancia növekvését, amely a kromogén szubsztrátumok hidrolízisének a következménye. A fentebb felsorolt vegyületek enzimre kifejtett gátló hatását úgy határoztuk meg, hogy előbb 10 percig előinkubálást végeztünk az enzimmel egy szubsztrátumot nem tartalmazó reakcióelegyben, majd az enzimreakciót a szubsztrátum hozzáadásával megindítottuk. A mérés céljára az emberi leukocita-elasztázt 100 nM koncentrációban alkalmaztuk.

Abból a célból, hogy igazoljuk az (I) általános képletű vegyületek specifikus hatását az emberi leukocita-elasztázra, a fenti vegyületek közül egyeseknek különböző proteázokra kifejtett hatását tovább vizsgáltuk. Az így kapott ICjo-értékeket az alábbi II. táblázat mutatja be.

Az (I) általános képletű 2-spiro-ciklopropil-cefalosporin-szulfon-származékok (ahol az (I) képletben m értéke 2) hatása különböző proteázokra

IC₅₀ értékben (pg/ml)

HU 213 612 Β

II. táblázat

r₅	R\|	r₃ (vagy R₄)	R4 (vagy R₃)	TRY	THR	PLM	CTC	APM	CTG	CTD	PPE
Br	-OCHPh-	Ph	Ph	26,2	26,2	2,1	26,2	2,62	10,6	32,7	0,012
Cl	-OCHPh;	Ph	Ph	36,6	24,4	2,2	36,6	36,6	12,2	30,5	0,020
Br	-OBu’	Ph	Ph	21,8	21,8	3,0	21,8	21,8	21,8	27,2	0,051
Br	-OCHPh₂	H	COOEt	0,333	23	6,32	23	23	7,47	28,7	0,018
Br	OCHPh;	P-CIC6H4	p-ClCötL	40	40	1,6	40	40	14,0	33,4	0,17
Br	-OCHPh;	P-FC6H4	p-FC6H₄	27,6	27,6	2,2	27,6	27,6	13,1	34,5	0,044
Br	-OCHPhz	Ph	CH3	0,089	23,7	3,26	23,7	23,7	23,7	29,6	0.033
Br	(c)	Ph	Ph	21,1	21,1	21,1	5,29	5,29	21,1	5,29	0,11
CH₃O	(c)	Ph	Ph	19,7	19,7	19,7	4,92	19,7	15,2	4,92	0,047
EtO	-OCH2CCI5	Ph	Ph	5,85	5,85	5,85	5,85	5,85	0,187	5,85	0,0094
CH₃O	-OCHPh;	Ph	Ph	6,06	6,06	5,33	6,06	6,06	6,06	6,06	0,035
ch₃o	OCH₂CC1₃	Ph	Ph	0,37	5,70	0,742	5,70	5,70	0,23	5,70	0,013
ch₃o	(d)	Ph	Ph	5,07	20,2	5,07	5,07	5,07	5,07	5,07	0,016

Magyarázat a táblázathoz:

A HLE, CTG, PPE és CTD enzimekkel 30 °C hőmérsékleten a többi enzimmel 22 °C-on végeztük a vizsgálatokat.

TRY: tripszin; THR: trombin; PLM: plazmin; CTC: katepszin C; APM: aminopeptidáz M; CTG: katepszin G; CTD: katepszin D; PPE: sertéshasnyálirigyből származó elasztáz.

Sertéshasnyálmirigyből eredő elasztázra (PPE-ra) kifejtett gátló hatás vizsgálata

E kísérletünkben sertés hasnyálmirigyéből származó, tisztított elasztáz enzimet alkalmaztunk.

Az enzim szubsztrátuma:

MeO-szukcinil-L-alanil-1 -alanil-L-prolil-L-valin-(p-nitro-anilid)

A reakcióelegy összetétele:

mM trisz(hidroxi-metil)-amino-metán.HCl (Trisz) puffer (pH 8,9)

500 mM konyhasó

10% DMSO

1,4 mM szubsztrátum

Katepszin G (CTC) enzimre kifejtett gátló hatás vizsgálata

E kísérletünkben emberi fehérvérsejtekből származó, tisztított katepszin G enzimet alkalmaztunk.

Az enzim szubsztrátuma:

N-Szukcinil-L-alanil-L-alanil-L-fenil-alanil-L-fenil-alanil-(p-nitro-anilid)

A reakcióelegy összetétele:

mM foszfát-puffer (pH 7,5)

500 mM NaCl

10% DMSO

2,0 mM szubsztrátum

Tripszinre (TRY) kifejtett gátló hatás vizsgálata

E kísérletünkben szarvasmarha-hasnyálmirigyből eredő tisztított tripszint alkalmaztunk.

Szubsztrátum: Bz-L-arginin-(p-nitro-anilid)

A reakcióelegy összetétele:

mM N-trisz(hidroxi-metil)-metil-glicin (tricin)-NaOH puffer (pH 8,8)

150 mM NaCl 10% DMSO 1,0 mM szubsztrátum

Trombinra (THR) kifejtett gátló hatás vizsgálata E kísérletünkben emberi plazmából származó, tisztított trombint alkalmaztunk.

Szubsztrátum:

Tozil-glicil-L-prolil-L-arginin-(p-nitro-anilid)-acet át

A reakcióelegy összetétele:

mM tricin-NaOH puffer (pH 8,6)

500 mM NaCl

0,1% polietilénglikol 8000

10% DMSO

0,5 mM szubsztrátum

Plazmin (PLM) enzimre kifejtett hatás vizsgálata E kísérletünkben emberi plazmából származó, tisztított plazmint alkalmaztunk.

Az enzim szubsztrátuma: Tozil-glicil-L-prolil-L-lizin-(p-nitro-anilid)-acetát A reakcióelegy összetétele:

mM Trisz-HCl puffer (pH 8,9)

500 mM NaCl 5% DMSO

0,5 mM szubsztrátum

Katepszin C (CTC) enzimre kifejtett gátló hatás vizsgálata

E kísérletünkben szarvasmarha lépéből eredő, tisztított katepszin C enzimet alkalmaztunk.

Az enzim szubsztrátuma: Glicil-L-fenil-alanin-(p-nitro-anilid)

A reakcióelegy összetétele:

mM citrát-puffer (pH 5,4)

HU213 612Β mM β-merkapto-etanol

150 mM NaCl

10% DMSO mM szubsztrátum

Aminopeptidáz Μ (APM) enzimre kifejtett gátló hatás vizsgálata

E kísérletünkben sertésveséből származó, tisztított aminopeptidáz M enzimet alkalmaztunk.

Az enzim szubsztrátuma: L-Leucin-(p-nitro-anilid)

A reakcióelegy összetétel:

mM tricin-puffer (pH 7,5)

500 mM NaCl

10% DMSO

2,0 mM szubsztrátum

A katepszin D (CTD) enzimre kifejtett gátló hatás vizsgálata

E kísérletünkben szarvasmarha lépéből származó, tisztított katepszin D enzimet alkalmaztunk.

Szubsztrátum: szarvasmarhából eredő hemoglobin

A reakcióelegy összetétele:

250 mM glicin-puffer (pH 3,2)

10% DMSO

A katepszin D enzimmel végzett vizsgálat kivételével az enzimaktivitásokat úgy határoztuk meg, hogy mértük a kromogén szubsztrátumok által előidézett abszorbancianövekedést 410 nm hullámhosszon. A katepszin D aktivitását úgy határoztuk meg, hogy az 5%-os triklór-ecetsavban oldott anyag abszorbanciáját 280 nm-en mértük.

A fentebb leírt vegyületek enzimekre kifejtett gátló hatását úgy határoztuk meg, hogy előbb az enzimekkel a szubsztrátumot nem tartalmazó reakcióelegyekben 10 percig előinkubálást végeztünk, majd az enzimreakciókat a szubsztrátumok hozzáadásával megindítottuk. Kísérleteink során a sertéshasnyálmirigyből származó elasztázt 240 nM koncentrációban, az emberi katepszin G enzimet 50 nM koncentrációban alkalmaztuk. A katepszin D-t abban a koncentrációban alkalmaztuk, amely standard körülmények között 280 nm hullámhosszon 20 perc alatt az optikai sűrűséget megközelítőleg 0,15 értékkel növelte. Az összes többi proteázokat olyan koncentrációkban mértük, amelyek standard körülmények között 410 nm-en percenként 0,1 egységgel változtatták az optikai sűrűségűket.

Azon vegyületeket, amelyek IC50 értéke a HLE enzimmel szmben 0,104 M-nál kisebbnek adódott, megvizsgáltuk szerin-proteázokkal (hasnyálmirigy-elasztázzal, leukocitából származó katepszin G-vel, tripszinnel, trombinnal és plazminnal) szemben, valamint cisztein-proteázzal (katepszin C-vel), metalloproteázzal (aminopeptidáz M-vel) és aszparagil-proteázzal (katepszin D-vel) szemben. Eredményeink világosan mutatják, hogy e vegyületek az emberi leukocita-elasztázt igen szelektíven gátolják. A vegyületek specificitása arra utal, hogy kevés olyan mellékhatást okoznak, amely a HLE-től eltérő proteázok nemspecifikus gátlásából ered, ha e vegyületeket olyan betegségek kezelésében használják fel, amelyek lényeges oki tényezője az emberi leukocita-elasztáz enzim.

Terápiás adagolás céljára az (I) általános képletű vegyületeket a szokásos gyógyászati készítmények alakjában alkalmazzuk, amelyek a találmány szerinti vegyületeket hatóanyagként gyógyászati szempontból elfogadható vivőanyaggal - így szerves vagy szervetlen, szilárd vagy folyékony hígítószerrel összekeverve - tartalmazzák, amely orális, parenterális vagy külső adagolásra alkalmas. E gyógyászati készítmények lehetnek szilárdak, amilyen például a kapszula, tabletta és a kenőcs; vagy lehetnek folyékonyak, amilyen például az oldat, szuszpenzió vagy emulzió. A gyógyászati készítményhez segédanyagokat, így stabilizálószereket, nedvesítő- és emulgeálószereket, pufferanyagokat és más, általánosan alkalmazott segédanyagokat adhatunk.

A betegnek a találmány szerinti hatóanyagot általában naponta 0,2 és 150 mg/testtömeg-kg, vagy még ennél is magasabb mennyiségben adagolhatjuk. Ez a dózisszint azonban változhat, és többféle tényezőtől, így az adott hatóanyag aktivitásától, a beteg korától, nemétől, testtömegétől, étrendjétől, az adagolás időpontjától és módjától függhet.

A találmányt az alábbi, nemkorlátozó jellegű példákban részletesen ismertetjük. E példákkal a találmány gyakorlati megvalósíthatóságát kívánjuk bemutatni. Az előállított vegyületek szerkezetét egyrészt a szintézis módjával, másrészt infravörös spektroszkópiai adatokkal, valamint mágneses mag rezonancia-szinképi adatokkal és röntgen-analízissel igazoltuk.

1. példa

7a -Klór-2-spiro[2',2'-difenil-ciklopropil]-3-metil-3-cefem-4-karbonsav-1,1 -dioxid-benzhidril-észter előállítása

A. lépés:

7a -Klór-3-metil-3-cefem-4-karbonsav előállítása g (0,117 mól) 7-amino-3-metil-3-cefem-4-karbonsav, 700 ml etanol, 163 ml víz és 163 ml tömény sósav keverékét 5 °C-ra hűtjük, apró részletekben 25 perc alatt keverés közben 11,5 g (0,167 mól) nátrium-nitritet adagolunk hozzá, s utána a reakcióelegyet 3,5 órán át 0 -5 °C hőmérsékleten keverjük, majd 300 ml konyhasóoldatot adunk hozzá, és diklór-metánnal extraháljuk. A szerves kivonatot vízzel, majd konyhasóoldattal mossuk, vízmentes nátrium-szulfáton szárítjuk, és bepároljuk. így 16,1 g (58,9%) nyers savat kapunk, amelyet közvetlenül, tisztítás nélkül használunk fel a következő lépésben.

B. lépés:

7a -Klór-3 -metil-3-cefem-4-karbonsav-benzidril-észter előállítása

10,0 g (0,0428 mól) 7a-klór-3-metil-3-cefem-4-karbonsavat 200 ml diklór-metánban (a továbbiakban: DKM) oldunk, és 30 perc alatt 50 ml DKM-ben oldott 10,8 g (0,0557 mól) difenil-diazo-metánt csepegtetünk hozzá. Ezután a reakcióelegyet szobahőmérsékleten 2 órán át keveijük, majd az oldószert vákuumban eltávolítjuk, és a terméket szilikagéloszlopon kromatografálva tisztítjuk. Eluálószerként hexán és etil-acetát elegyét alkalmazva a B. lépés cím szerinti termékét

7,8 g (45,6%) hozammal kapjuk. 1H ‘H-NMR (CDClj) δ: 2,1 (s, 3H, CH₃), 3,25 (széles s, 2H, H-2), 4,70 (széles s, 1H), 4,75 (széles s, 1H), 7,0 (s, 1H, CHPh₂), 7,3-7,7 (m, 10H, aromás).

HU 213 612 Β

C. lépés:

7a -Klór-3-metil-3-cefem-4-karbonsav-1,1 -dioxid-benzhidril-észter előállítása

7,6 g (0,019 mól) 7a -klór-3-metil-3-cefem-4-karbonsav-benzhidril-észter 50 ml DKM-ben oldunk, és ehhez az oldathoz 13,0 g (0,171 mól) perecetsavat csepegtetünk 15-20 perc alatt, jéghütés közben. A reakcióelegyet 72 órán szobahőmérsékleten keverjük, majd sorrendben többször vízzel, utána telített nátrium-hidrogénkarbonát-oldattal, és ismét vízzel mossuk, és a szerves fázist vízmentes nátrium-szulfáton szárítjuk. A szárítószer kiszűrése után az oldószert vákuumban lepároljuk, és a maradékot kisméretű szilikagéloszlopon szűrjük. Eluálószerként DKM-t alkalmazva fehér, habszerü termékként 9,3 g hozammal kapjuk a C. lépés cím szerinti termékét.

'H-NMR (CDC1₃) δ: 2,1 (s, 3H, CH₃), 3,8 (széles s, 2H, H-2), 4,75 (széles s, 1H), 5,3 (széles s, 1H), 7,0 (s, 1H, CHPh₂), 7,4 (széles s, 10H, aromás).

D. lépés:

7a -Klór-2-metilén-3 -metil-3 -cefem-4-karbonsav-1,1-dioxid-benzhidril-észter előállítása

9,3 g (0,0215 mól) 7a -klór-3-metil-3-cefem-4-karbonsav-l,l-dioxid-benzhidril-észter és 35 ml DKM oldatához 4,9 g (0,0645 mól) dimetil-amin-hidrokloridot, 2,25 g (0,075 mól) formaldehid oldatot és 300 ml terc-butanolt adunk, és az így kapott elegyet 4 órán át 9 5‘’Con visszafolyató hűtő alatt melegítjük, majd az oldószert vákuumban lepároljuk. A maradékot ismét DKM-ban oldjuk, vízzel mossuk, vízmentes nátrium-szulfáton szárítjuk, bepároljuk. A maradékot szilikagéloszlopon kromatografálva tisztítjuk, eluálószerként hexán és etilacetát elegyét alkalmazzuk. így a D. lépés cím szerinti vegyületét 3,6 g (40%) hozammal fehér, habszerü termékként kapjuk.

IR színkép (nujol, v_max): 1723, 1800 cm '.

'H-NMR (CDCb) §: 2,01 (s, 3H, CH), 4,82 (d, 1H, J= 1,5 Hz), 5,3 (d, 1H, J= 1,5 Hz), 6,12 (d, 1H, exometilén, J=2,0 Hz), 6,62 (d, 1H, exometilén, J=2,0 Hz), 6,93 (s, 1H, CHPh₂), 7,25-7,39 (m, 10H, aromás).

E. lépés:

7a -Klór-2-spiro[2',2'-difenil-ciklopropil]-3-metíl-3-cefem-4-karbonsav-1,1 -dioxid-benzhidril-észter előállítása

1,0 g (0,0025 mól) 7a -klór-2-metilén-3-metil-3-cefem-4-karbonsav-1,1 -dioxid-benzhidril-észter 70 ml DKM-ban oldunk, és -15°C-ra hütjük, hozzáadunk 0,44 g (0,00225 mól) difenil-diazo-metánt, és a reakcióelegyet szobahőmérsékleten 2 órán át keverjük, majd az oldószert vákuumban eltávolítjuk. A nyers maradékot szilikagéloszlopon tisztítjuk, eluálószerként gradiens arányban etil-acetátot tartalmazó hexánt alkalmazunk.

IR (nujol, v_max): 1726, 1791 cm’¹.

Ή-NMR (CDCb) δ: 1,02 (s, 3H, CH₃), 2,37 (d, 1H, ciklopropíl, J=7 Hz), 2,97 (d, 1H, ciklopropíl, J=7 Hz), 5,01 (d, 1H, J=l,8 Hz), 5,22 (d, 1H, J=l,8 Hz), 7,0 (s, 1H, CHPh?), 7,28-7,48 (m, 20H, aromás).

2. példa

Benzhidril-7a -bróm-2-spiro(2',2’-difenil)-ciklopro

-pil-3-metil-3-cefem-4-karboxilát-1,1 -dioxid

A. lépés:

7a -Bróm-3-metil-3-cefem-4-karbonsav előállítása

10,0 g (0,4667 mól) 7-amino-3-metil-3-cefem-4-karbonsav, 270 ml etanol, 83 ml víz és 56,7 ml 48%os brómhidrogénsav jéggel hütött elegyéhez kis részletekben 25 perc alatt 4,67 g (0,6769 mól) nátrium-nitritet adagolunk, és utána a reakcióelegyet jéghütés közben 2,5 órán át keverjük. Az etanolt vákuumban lepároljuk, a maradékot DKM-nal hígítjuk, és vízzel mossuk. A vizes mosófolyadékokat konyhasóval telítjük, és ismét DKM-nal extraháljuk. Az egyesített szerves fázist konyhasóoldattal mossuk, vízmentes nátrium-szulfáton szárítjuk, bepároljuk. így 9,8 g (75,5%) hozammal kapjuk az A. lépés cím szerinti nyers termékét, amelyet további tisztítás nélkül alkalmazunk a következő lépésben.

B. lépés:

7a -Bróm-3-metil-3-cefem-4-karbonsav-benzhidril-észter előállítása

9,8 g (0,0353 mól) 7a -bróm-3-metil-3-cefem-4-karbonsav és 50 ml száraz DKM oldatához 50 ml DKM-ban oldott 8,21 g (0,04228 mól) difenil-diazo-metánt csepegtetünk, a reakcióelegyet szobahőmérsékleten 3 órán át keverjük, majd előbb nátrium-hidrogén-karbonát-oldattal, utána vízzel, végül konyhasóoldattal mossuk, és bepároljuk. így habszerü, bamaszínü nyers termékként 11,91 g (76%) hozammal jutunk a B. lépés cím szerinti termékéhez.

Az így kapott nyersterméket szilikagéloszlopon kromatografálva tisztítjuk. Eluálószerként hexán és etil-acetát 85 : 15 arányú elegyét alkalmazva 8,02 g (51,2%) hozammal kapjuk a B. lépés tiszta termékét.

Ή-NMR (CDC1₃) δ: 2,15 (s, 3H, CH₃), 3,29 (széles s, 2H, H2), 4,72 (d, 1H), 4,87a (d), 1H), 6,99 (s, 1H, CHPh₂), 7,25-7,55 (m, 10H, aromás).

C. lépés:

7a -Bróm-3-metil-3-cefem-4-karbonsav-1,1 -dioxid-benzhidril-észter előállítása

16,0 g (0,036 mól) 7a -bróm-3-metil-3-cefem-4-karbonsav-benzhidril-észter és 75 ml DKM oldtához lassú ütemben 24,6 g (0,324 mól) perecetsavat adagolunk, a reakcióelegyet 72 órán át szobahőmérsékleten keveijük, utána sorrendben vízzel, majd nátrium-hidrogén-karbonát-oldattal, végül ismét vízzel mossuk. A szerves fázist vízmentes nátrium-szulfáton szárítjuk, szűrjük, az oldószert vákuumban eltávolítjuk, és a maradékot szilikagéloszlopon kromatografáljuk. Eluálószerként DKM-et alkalmazva a C. lépés cím szerinti vegyületét halványsárga hab alakjában 6,7 g (40%) hozammal kapjuk.

'H-NMR (CDCb) δ: 2,1 (s, 3H, CH₃), 3,8 (széles s, 2H, H-2), 4,8 (széles s, 1H), 5,25 (széles s, 1H), 6,95 (s, 1H, CHPh₂), 7,2-7,6 (m, 10H, aromás).

HU 213 612 Β

D. lépés:

7a -Bróm-2-metilén-3-metil-3-cefem-4-karbonsav-1,1 -dioxid-benzhidril-észter előállítása

2,8 g (0,0059 mól) 7a -bróm-3-metil-3-cefem-4-karbonsav-1,1-dioxid-benzhidril-észter és 12 ml DKM oldatához 1,44 g (0,0176 mól) dimetil-amin-hidrokloridot, 0,61 g (0,020 mól) formaldehidet és lOOmlterc-butanolt adunk, és a reakcióelegyet 95 °C hőmérsékleten 3 órán át visszafolyató hűtő alatt forraljuk, majd az oldószert vákuumban lepároljuk. A maradékot ismét DKM-ban oldjuk, előbb vízzel mossuk, majd vízmentes nátrium-szulfáton szárítjuk, és szárazra pároljuk. A maradékot oszlopkromatográfiával tisztítjuk, eluálószerként gradiens arányban 10%-tól 25%-ig terjedő mennyiségben etil-acetátot tartalmazó hexánt alkalmazunk, és így fehér habszerű termékként 2,0 g (69,5%) hozammal kapjuk a D. lépés cím szerinti vegyületét.

IR (nujol, v_max): 1720, 1800 cm'¹.

'H-NMR (CDC1₃) §: 2,10 (s, 3H, CH₃), 4,93 (d, 1H, J=l,5 Hz), 5,33 (d, 1H, J=l,5 Hz), 6,20 (d, 1H, exometilén, J=2 Hz), 6,70 (d, 1H, exometilén, J=2 Hz), 6,98 (s, 1H, CHPh₂), 7,30-7,45 (m, 10H, aromás).

E. lépés:

7a-Bróm-2-spiro[2',2'-difenil-ciklopropil]-3-metil-3-cefem -4-karbonsav-1,1 -dioxid-benzhidril-észter előállítása

0,6 g (0,00123 mól) 7a -bróm-2-metilén-3-metil-3-cefem-4-karbonsav-1,1 -dioxid-benzhidril-észter és 50 ml DKM oldatát -15 °C-ra hütjük, és 0,263 g (0,00135 mól) difenil-diazo-metánt adagolunk hozzá, majd a reakcióelegyet szobahőmérsékleten 3 órán át keverjük, utána az oldószert vákuumban lepároljuk. Az enyhén rózsaszínű, habszerü maradékot oszlopkromatográfiával tisztítjuk. Eluálószerként gradiensen

10-30% etil-acetátot tartalmazó hexánt alkalmazunk, s így az E. lépés cím szerinti vegyületét kapjuk.

IR (nujol, V_max): 1728, 1790 cm¹.

‘H-NMR (CDC1₃) δ: 1,03 (s, 3H, CH₃), 2,38 (d, 1H, ciklopropil, J=7 Hz), 2,96 (d, 1H, ciklopropil, J=7 Hz), 5,04(d, lH,J=l,8Hz),520(d, lH,J=l,8Hz),7,0(s, 1H, CHPh₂), 7,22-7,47 (m, 20H, aromás).

3. példa

7a -Bróm-2-spiro[2',2’-difenil-ciklopropil]-3-metil-3-cefem-4-karbonsav-1,1 -dioxid-(terc-butil)-észter előállítása

A. lépés:

7a -Amino-3-metil-3-cefem-4-karbonsav-(terc-butil-észter) előállítása

10,0 g (0,0467 mól) 7-amino-3-metil-3-cefem-4-karbonsav, 80 ml etilénglikol-dimetil-éter 6,0 ml tömény kénsav és 36,0 g (0,6416 mól) izobutilén elegyét nyomásálló edényben szobahőmérsékleten 32 órán át keverjük, majd az oldószert vákuumban eltávolítjuk. A maradékot DKM-ban oldjuk, előbb vízzel, majd nátrium-hidrogén-karbonát-oldattal, végül konyhasóoldattal mossuk, vízmentes nátrium-szulfáton szárítjuk, és bepároljuk. így 4,18 g hozammal kapjuk az A. lépés cím szerinti termékét.

‘H-NMR (CDC1₃) δ: 1,55 (s, 9H, terc-butil), 2,07 (s,

3H), 2,25 (széles s, 2H, D₂O-val kicserélhető), 3,12 (d,

1H, J=18,0 Hz), 3,59 (d, 1H, >18,0 Hz), 4,70 (d, 1H, >4,0 Hz), 4,95 (d, 1H, J=4,0 Hz).

B. lépés

7a -Bróm-3-metil-3-cefem-4-karbonsav-(terc-butil)-észter előállítása

1,3 g (0,0048 ol) 7a -amino-3-metil-3-cefem-4-karbonsav-(terc-butil-észter), 30 ml etanol, 8,5 ml víz és

5.83 ml 48%-os brómhidrogénsav jéggel hütött elegyéhez 15 perc alatt 0,48 g (0,00696 mól) nátrium-nitritet adagolunk, majd a reakcióelegyet -5 °C hőmérsékleten 3 órán át keverjük. Ekkor a reakcióelegyet nátrium-kloriddal telítjük, és etil-acetáttal háromszor extraháljuk. Az egyesített etil-acetátos kivontatot előbb vízzel, majd konyhasóoldattal mossuk, szárítjuk, bepároljuk. így 800 ml (50%) hozammal kapjuk a B. lépés cím szerinti tiszta vegyületét.

'H-NMR (CDC1₃) δ: 1,54 (s, 9H, terc-butil), 2,10 (s, 3H), 3,20 (d, 1H, J=18,0 Hz), 3,60 (d, 1H, >18,0 Hz), 4,71 (d, 1H), 4,85 (d, 1H).

C. lépés:

7a -Bróm-3-metil-3-cefem-4-karbonsav-l,l-dioxid (terc-butil)-észter előállítása

800 mg (2,39 mmol) 7a-bróm-3-metil-3-cefem-4-karbonsav-(terc-butil)-észter és 3 ml DKM elegyéhez 5,12 ml 32%-os perecetsavat adagolunk, utána a reakcióelegyet 48 órán át szobahőmérsékleten keverjük, majd DKM-nal hígítjuk, előbb vízzel, utána konyhasóoldattal mossuk, szárítjuk, bepároljuk. így 700 mg (80%) hozammal kapjuk a C. lépés cím szerinti termékét, amelyet a következő lépésben közvetlenül felhasználunk.

'H-NMR (CDCb) δ: 1,55 (s, 9H, terc-butil), 2,10 (s, 3H), 3,63 (d, 1H, >18,0 Hz), 3,98 (d, 1H, >18,0 Hz),

4.83 (d, IH), 5,33 (d, 1H).

D. lépés:

7a -Bróm-2-metilén-3-metil-3-cefem-4-karbonsav -1,1 -dioxid-(terc-butil)-észter előállítása

700 mg (1,9 mmol) 7a-bróm-3-metil-3-cefem-4-karbonsav-l,l-dioxid-(terc-butil)-észter, 460 mg (5,7 mmol) dimetil-amin-hidroklorid 3 ml DKM, 50 ml terc-butanol és 0,57 g (37 tömeg/térf.%-os) formalinoldat elegyét 80-90 °C hőmérsékleten 20 órán át visszafolyató hütő alatt forraljuk. Utána a terc-butanolt vákuumban eltávolítjuk, a maradékot DKM-ban oldjuk, előbb vízzel, majd konyhasóoldattal mossuk, szárítjuk és bepároljuk. így 200 mg nyers terméket kapunk, amelyet szilikagélen kromatografálva tisztítunk. Eluálószerként DKM-t alkalmazva a cím szerinti tiszta vegyületet 40 mg hozammal kapjuk.

'H-NMR (CDC1₃) δ: 1,55 (s, 9H, terc-butil), 2,15 (s, 3H), 4,95 (d, 1H), 5,32 (d, 1H), 6,21 (d, 1H), 6,70 (d, 1H).

E. lépés:

7a -Bróm-2-spiro[2',2'-difenil-ciklopropil]-3-metil-3-cefem-4-karbonsav-1,1 -dioxid-(terc-butil)-észter előállítása mg 7a -bróm-2-metilén-3-metil-3-cefem-4-karbonsav-1 ,l-dioxid-(terc-butil)-észterés 7 ml DKM olda9

HU213 612Β tához 23 mg difenil-diazo-metánt teszünk, és a reakcióelegyet jéghütés közben 3 órán át keverjük, majd az oldószert eltávolítjuk, és az így kapott nyersterméket preparatív vékonyréteg-kromatográfiával tisztítjuk. így 30 mg hozammal, tiszta alakban kapjuk az E. lépés, azaz a 3. példa cím szerinti vegyületét.

'H-NMR (CDC1₃) δ: 1,10 (s, 3H, CH₃), 155 (s, 9H, terc-butil), 2,37 (d, 1H, J=7 Hz), 2,96 (d, 1H, J=7 Hz), 5,03 (d, 1H, J=2 Hz), 5,18 (d, 1H, J=2 Hz), 7,23-7,48 (m, 10H, aromás).

4. példa

7a -Klór-2-spiro[2',2'-difenil-ciklopropil]3-(acetoxi-metil)-3-cefem-4-karbonsav-1,1 -dioxid-(terc-butil)-észter előállítása

A. lépés

7a -Amino-3-(acetoxi-metil)-3-cefem-4-karbonsav-(terc-butil)-észter előállítása

10,9 g tömény kénsav, 10,9 g 7-amino-3-(acetoximetil)-cefem-4-karbonsav és 50 ml izobutilén elegyéhez jéghűtés közben 100 ml, aktivált alumínium-oxiddal peroxidmentesített dioxánt adunk. Az elegyet nyomásálló edénybe zárva 30 °C hőmérsékleten 2 órán át keverjük, majd feleslegben vett, jéghideg nátrium-hidrogénkarbonát-oldatba öntjük. Az oldatot etil-acetáttal extraháljuk, egyesítés után az etil-acetátos kivonatot konyhasóval mossuk, vízmentes nátrium-szulfáton szárítjuk, szűrjük és bepároljuk.

Az enyhén barnás, habszerü maradék az A. lépés cím szerinti terméke, hozama 8,3 g (63%).

'H-NMR (CDC1₃) δ: 1,5 (s, 9H, terc-butil), 1,8 (széles s, 2H, NH₂), 2,1 (s, 3H, OCOCH₃), 3,45 (ABq, 2H, H-2, J=18 Hz), 4,7-5,2 (m, 4H, H-6+H-7+CH2OCOCH3).

B. lépés:

7a -Klór-3-(acetoxi-metil)-3-cefem-4-karbonsav-(terc-butil)-észter előállítása

4,0 g (0,0122 mól) 7a -amino-3-(acetoxi-metil)-3-cefem-4-karbonsav-(terc-butil)-észter, 75 ml etanol,

16,7 ml víz és 16,7 ml tömény sósav elegyéhez 15-20 perc alatt 1,18 g (0,017 mól) nátrium-nitritet adagolunk, a reakcióelegyet 0-5 °C hőmérsékleten 2,5 órán át keverjük, majd nátrium-kloriddal telítjük, DKM-nal extraháljuk, a szerves fázist előbb vízzel, majd konyhasóoldattal mossuk, vízmentes nátrium-szulfáton szárítjuk, és bepároljuk. így 3,1 g (73%) hozammal kapjuk a

B. lépés cím szerinti termékét.

'H-NMR (CDC1₃) δ: 1,55 (s, 9H, terc-butil), 2,1 (s, 3H, OCOCH₃), 3,5 (ABq, 2H, H-2, >18 Hz), 4,6-5,1 (m, 4H, H-6+H-7+CH₂OCOCH₃).

C. lépés:

7a -Klór-3-(acetoxi-metil)-3 -cefem-4-karbonsav-1,1-dioxid-(terc-butil)-észter előállítása

3,1 g 7a -klór-3-(acetoxi-metil)-3-cefem-4-karbonsav-(terc-butil)-észter és 50 ml DKM oldatához 22 ml perecetsavat csepegtetünk, majd a reakcióelegyet másnapig szobahőmérsékleten állni hagyjuk. Ekkor a reakcióelegyet előbb vízzel, majd nátrium-hidrogén-karbonát-oldattal, konyhasóoldattal mossuk, vízmentes nátrium-szulfáton szárítjuk, bepároljuk, és az így kapott nyersterméket szilikagéloszlopon kromatografálva tisztítjuk. Eluálószerként 3 : 1 arányú hexán/etil-acetát elegyet alkalmazunk, s így 1,9 g (48%) hozammal tiszta formában kapjuk a C. lépés cím szerinti vegyületét.

'H-NMR (CDC1₃) δ: 1,55 (s, 9H, terc-butil), 2,1 (s, 3H, OCOCH₃), 3,9 (ABq, 2H, H-2, J=18 Hz), 4,8 (széles s, IH), 4,95 (ABq, 2H, CH₂OCOCH₃, >14 Hz), 5,3 (széles s, 1H).

D. lépés:

7a -Klór-2-metilén-3-(acetoxi-metil)-3-cefem-4-karbonsav-1,1 -dioxid-(terc-butil)-észter előállítása

1,9 g 7a -klór-3-(acetoxi-metil)-3-cefem-4-karbonsav-l,l-dioxid-(terc-butil)-észter, 3ml DKM, 0,817 g dimetil-amin hidroklorid, 80 ml terc-butanol és 1,10 ml (37 tömeg térf.%-os vizes) formaldehidoldat elegyét visszafolyós hűtő alatt 90 °C hőmérsékleten 3 órán át forraljuk, utána az oldószert vákuumban eltávolítjuk. A maradékot DKM-ban oldjuk, előbb vízzel, majd konyhasóoldattal mossuk, szárítjuk, és bepároljuk. így 1,6 g (81,6%) hozammal kapjuk a D. lépés cím szerinti termékét, op.: 148-149 °C.

E terméket további tisztítás nélkül alkalmazzuk a következő lépésben.

E. lépés:

200 mg (0,51 mmol) 7a -klór-2-metilén-3-(acetoxi-metil)-3-cefem-4-karbonsav-1,1 -dioxid-(terc-butil)-észter 15 ml DKM-nal készült oldatához 109 mg difenil-diazo-metán 5 ml DKM-nal készült oldatát adjuk, és a reakcióelegyet szobahőmérsékleten 2 órán át keverjük. Az oldószer eltávolítása után kapott nyers terméket preparatív vékonyréteg-kromatográfiával tisztítva 113 mg (40%) hozammal kapjuk az E. lépés, azaz a 4. példa cím szerinti vegyületét, op.: 163-165 °C.

‘H-NMR (CDC1₃) δ: 1,55 (s, 9H, terc-butil), 2,01 (s, 3H, OCOCH₃), 2,37 (d, 1H, >7 Hz), 3,03 (d, 1H, >7 Hz), 3,12 és 4,08 (dd, 2H, CH₂OCOCH₃, >13 Hz), 5,01 (d, 1H, >2 Hz), 5,26 (d, 1H, J=2 Hz), 7,22-7,48 (m, 10H, aromás).

5. példa

7,7-Dihidro-2-spiro[2',2'-difenil-ciklopropil]-3-metil-3-cefem-4-karbonsav-l,1-dioxid-benzhidril-észter előállítása

Lényegében az 1. példa E. lépésében leírt eljárást követve 0,6 g 7,7-dihidro-2-metilén-3metil-3-cefem-4-karbonsav-l,l-dioxid-benzhidril-észter és 50 ml DKM oldatát difenil-diazo-metánnal kezelve 0,340 g (39,4%) hozammal jutunk az 5. példa cím szerinti vegyületéhez.

IR (nujol, v_max): 1735, 1786 cm-'.

'H-NMR (CDCI3) δ: 1,02 (s, 3H, CH₃), 2,34 (d, 1H, ciklopropil, J=7 Hz), 2,94 (d, 1H, ciklopropil, >7 Hz), 3,48 (ABX, 2H, H-7, >2,5, 5,0 16.0 Hz, 5,03 (dd, 1H,

HU 213 612 Β

H-6, J=2,5, 5,0 Hz), 7,0 (s, 1H, CHPh₂), 7,2-7,48 (m, 2OH, aromás).

6. példa a -Bróm-2-spiro[2',2'-difenil-ciklopropil]-3-metil-3-cefem-4-(pirrolidin-karboxamid)-1,1 -dioxid előállítása

A. lépés:

7a -Bróm-2-metilén-3 -metil-3-cefem-4-karbonsav-1,1-dioxid előállítása 1,0 g (2,047 mmol) 2. példa D. lépésében előállított 7a -bróm-2-metilén-3-metil-3-cefem-4-karbonsav-l ,1-dioxid-benzhidril-észter jéggel hűtött, 10 ml száraz anizollal készült oldatához keverés közben 4,0 ml trifluor-ecetsavat adunk, és a reakcióelegyet a jégflirdő hőmérsékletén 1 órán át keverjük, majd az oldószert vákuumban eltávolítjuk. A sárga olajszerű maradékhoz azonnal hexánt adunk, és a kicsapódó fehér, szilárd anyagot szűrjük. így 0,549 g (83%) hozammal kapjuk az A. lépés cím szerinti vegyületét.

'H-NMR (CDCl₃+DMSO-d₆) δ: 2,19 (s, 3H, CH₃), 5,13 (d, 1H), 5,4 (d, 1H), 6,27 (d, 1H), 6,69 (d, 1H).

B. lépés:

7a -Bróm-2-metilén-3-metil-3-cefem-4-(pirrolidin-karboxamid)-1,1 -dioxid előállítása

440 mg (1,36 mmol) 7a -bróm-2-metilén-3-metil-3-cefem-4-karbonsav-l,l-dioxidot 5 ml DKM-ban oldva -20 °C-ra hütünk és 10 perc alatt 0,133 ml (1,434 mmol) foszfor-oxikloridot adunk hozzá, majd a reakcióelegyet 30 percig -20 °C hőmérsékleten keverjük. Ekkor 0,456 ml (5,464 mmol) pirrolidint teszünk az elegyhez, és a reakcióelegyet -20 °C hőmérsékleten 2 órán át keverjük. Ekkor az elegyhez jeges vizet adunk, 15 percig keverjük, a DKM réteget elkülönítjük, és a vizes réteget ismét DKM-nal extraháljuk. Az egyesített DKM-os réteget előbb vízzel, majd citromsavval, végül konyhasóoldattal mossuk, vízmentes nátrium-szulfáton szárítjuk, és bepároljuk. így 400 mg (78%) bama, szilárd anyagot kapunk, amelyet szilikagéloszlopon, etil-acetát és acetonitril 9 : 1 arányú elegyével eluálunk. így fehér termékként 89 mg (17,4%) tiszta terméket izolálunk.

'H-NMR (CDC1₃) δ: 1,92 (s, 3H, CH₃), 1,85-2,1 (m, 4H, pirrolidin), 3,42-3,73 (m, 4H, pirrolidin), 4,98 (d, 1H, J=l,6 Hz), 5,37 (d, 1H, J=l,6 Hz), 6,0 (d, 1H, J=l,8 Hz), 6,54 (d, 1H, J=l,8 Hz).

C. lépés:

7a -Bróm-2-spiro[2',2'-difenil-ciklopropil]-3-metil-3-cefem-4-(pirrolidin-karboxamid)-1,1 -dioxid előállítása mg (0,1599 mmol) 7a-bróm-2-metilén-3-metil-3-cefem-4-(pirrolidin-karboxamid)-1,1,-dioxid 3 ml DKM-nal készült oldatához 31 mg (0,1599 mól) difenil-diazo-metánt adunk 3 ml metilén-kloridban oldva. A reakcióelegyet a jégfürdő hőmérsékletén 90 percig keverjük, utána bepároljuk. így 80 mg hozammal nyers terméket kapunk, amelyet szilikagélen preparatív vékonyréteg-kromatográfiával tisztítunk. így 30 mg (35%) hozammal kapjuk a C. lépés, azaz a 6. példa cím szerinti termékét.

Ή-NMR (CDC1₃) δ: 0,93 (s, 3H, CH₃), 1,86-2,0 (m, 4H, pirrolidin), 2,275 (d, 1H, J=7,0 Hz, ciklopropil), 2,94 (d, 1H, J=7,0 Hz, ciklopropil), 3,42-3,68 (m, 4H, pirrolidin), 5,03 (d, 1H, J=l,6 Hz), 5,20 (d, 1H, J=l,6 Hz), 7,18-7,49 (m, 10H, aromás).

7. példa

7a -Etoxi-2-spiro[2',2'-difenil-ciklopropil]-3-metil-3-cefem-4-karbonsav-1,1 -dioxid-(2,2,2-triklór-etil)-észter előállítása

A. lépés:

6a -Etoxi-2,2-dimetil-penicillinsav-(2,2,2-trifluor-etil)-észter előállítása

5,0 g (0,01395 mól) 6-diazo-penicillinát 10 ml etanollal és 20 ml DKM-nal készült, jéggel hűtött oldatához 4 csepp bór-trifluorid-éterátot adunk, a reakcióelegyet jéggel hütve 3 órán át keverjük, majd előbb vízzel, utána konyhasóoldattal mossuk, szárítjuk, és bepároljuk. így 4,56 g (87%) nyers terméket kapunk, amelyet szilikagéloszlopon kromatografálva tisztítunk. Eluálószerként hexán és etil-acetát 4:1 arányú elegyét alkalmazva 3,4 g (54,1%) hozammal kapjuk az A. lépés cím szerinti vegyületét.

'H-NMR (CDC1₃) δ: 1,25 (t, 3H), 1,55 (s, 3H), 1,6 (s, 3H), 3,75 (q, 2H), 4,65 (s, 2H), 4,8 (s, 2H), 5,30 (s, 1H).

B. lépés:

6a -Etoxi-2,2-dimetil-penicillinsav-1 -oxid-(2,2,2-triklór-etil)-észter előállítása

3,4 g (9,026 mmol) 6a -etoxi-2,2-dimetil-penicillinsav-(2,2,2-triklór-etil)-észter és 40 ml DKM jéggel hűtött oldatához 30 perc alatt 1,95 g (9,026 mmol) m-klór-perbenzoesavat adagolunk, és a reakcióelegyet jéggel hűtve addig keverjük, amíg vékonyréteg-kromatogrammos vizsgálat szerint valamennyi kiinduló anyag el nem fogy. Ekkor a reakcióelegyet előbb nátrium-hidrogén-karbonát-odattal, utána vízzel, végül konyhasóoldattal mossuk, szárítjuk, és bepároljuk. Az így kapott 4,0 g nyers terméket szilikagéloszlopon tisztítjuk, eluálásra DKM-t alkalmazunk, és így 3,0 g (84%) hozammal jutunk a B. lépés cím szerinti vegyületéhez.

Ή-NMR (CDC1₃) δ: 1,3 (t,3H), 1,34 (s, 3H), 1,80 (s, 3H), 2,85 (q, 2H), 4,65 (s, 1H), 4,80 (s, 1H), 5,02 (s, 3H).

C. lépés:

7a -Etoxi-3-metil-3-cefem-4-karbonsav-(2,2,2-triklór-etil)-észter előállítása

1,0 g (2,546 mmol) 6a -etoxi-2,2,-dimetil-penicillinsav-l-oxid-(2,2,2-triklór-etil)-észter, 10 ml dimetil-formamid (DMF) és 0,659 ml ecetsavanhidrid oldatát 125-130 °C hőmérsékleten 90 percig visszafolyató hűtő alatt forraljuk, majd az oldószert vákuumban lepároljuk, a visszamaradó sötét, olajszerü terméket DKM-ben oldjuk, és előbb vízzel, majd nátrium-hidrogén-karbonátodattal, végül konyhasóoldattal mossuk, szárítjuk, bepároljuk. Az így kapott 910 mg nyersterméket szilikagéloszlopon tisztítjuk, eluálószerként DKM-t alkalmazzuk, s így 400 mg (42%) hozammal kapjuk a C. lépés cím szerinti vegyületét.

HU213 612Β

Ή-NMR (CDC1₃) δ: 1,28 (t, 3H), 2,165 (s, 3H), 3,2'5 (d, 1H, J=17,3 Hz), 3,51 (d, 1H, J=17,3 Hz), 3,62-3,88 (m, 2H), 4,57 (d, 1H, J=1,4 Hz), 4,72 (d, 1H, J=1,4 Hz), 4,80 (d, 1H, J=12 Hz), 5,06 (d, 1H, J=12 Hz).

D. lépés:

7cc -Etoxi-3-metil-3-cefem-4-karbonsav-1,1 ,-dioxid-(2,2,2-triklór-etil)-észter előállítása

340 mg (0,9075 mmol) 7a -etoxi-3-metil-3-cefem-4-karbonsav-(2,2,2-triklór-etil)-észter és 14 DKM jéggel hűtött elegyéhez 1,94 ml (32%-os) perecetsavat csepegtetünk, és a reakcióelegyet 24 órán át szobahőmérsékleten keverjük, majd jéghideg vizet teszünk hozzá, és a szerves fázist elkülönítjük. A vizes oldatot szilárd nátrium-kloriddal telítjük, és ismételten DKM-nal extraháljuk. Az egyesített szerves fázist nátrium-hidrogén-karbonát-oldattal, utána vízzel, végül konyhasóoldattal mossuk, vízmentes nátrium-szulfáton szárítjuk, és bepároljuk. így 370 mg nyersterméket kapunk, amelyet szilikagéloszlopon kromatografálva tisztítunk. Eluálószerként hexán és etil-acetát 4 : 1 arányú elegyét alkalmazva 300 mg (85%) hozammal tiszta állapotban kapjuk a D. lépés cím szerinti vegyületét.

'H-NMR (CDC1₃) δ: 1,29 (t, 3H), 2,16 (s, 3H), 3,68 (d, 1H, J=18,0Hz), 3,92 (d, 1H, J=18Hz), 3,67-3,96 (m, 2H), 4,67 (széles s, 1H), 4,83 (d, 1H, J=11,7 Hz), 5,035 (d, 1H, J=11,7 Hz), 5,22 (d, 1H, J=l,4 Hz).

E. lépés:

7a-Metoxi-2-metilén3-metil-3-cefem-4-karbonsav-1,1 -dioxid-(2,2,2-triklór-etil)-észter előállítása

290 mg (0,7131 mmol) 7a -etoxi-3-metil-3-cefem-4-karbonsav-l,l-dioxid-(2,2,2-triklór-etil)-észter és 5 ml DKM oldatához 168 mg (2,066 mmol) dimetil-amin hidrokloridot, 0,19 ml (2,375 mmol) 37 tömeg/térf.%-os formaldehidoldatot és 3,3 ml terc-butanolt adunk, 70-75 °C hőmérsékleten 90 percig visszafolyató hűtő alatt forraljuk, utána vákuumban lepároljuk az oldószert. A maradékot DKM-nal hígítjuk, és előbb vízzel, majd konyhasóoldattal mossuk, szárítjuk, bepároljuk. így 300 mg fehér, szilárd terméket kapunk, amelyet további tisztítás nélkül használunk fel a következő lépésben.

'H-NMR (CDC1₃) δ: 1,30 (t, 3H), 2,19 (s, 3H), 3,67-3,89 (m, 2H), 4,805 (d, 1H, J=11,8 Hz), 5,12 (d, 1H, J=11,8 Hz), 4,86 (d, 1H), 5,32 (d, 1H), 6,17 (d, 1H, J=2,0 Hz), 6,68 (d, 1H, J=2,0 Hz).

F. lépés:

7a -Etoxi-2-spiro[2',2’-difenil-ciklopropil]-3-metil-3-cefem-4-karbonsav-l,l-dioxid-(2,2,2-triklór-etil)-észter előállítása

100 mg (0,2388 mmol) 7a -etoxi-2-metilén-3-metil-3-cefem-4-karbonsav-1,1 ,-dioxid-(2,2,2-triklór-etil)-észter és 5 ml DKM jéggel hütött oldatához 56 mg (0,2866 mmol) difenil-diazo-metánt adagolunk, majd a reakcióelegyet jéggel hütve 2 órán át keverjük. Az oldószert vákuumban lepároljuk, és a nyers maradékot szilikagéloszlopon kromatografálva tisztítjuk. Eluálószerként DKM alkalmazásával 68 mg hozammal kapjuk az F. lépés, azaz a 7. példa cím szerinti vegyületét.

'H-NMR(CDC1₃)Ő: 1,16 (s, 3H, CH₃), 1-22 (t,3H), 2,38 (d, 1H, J=7,0 Hz, ciklopropil), 2,98 (d, 1H, J=7,0 Hz, ciklopropil), 3,46-3,82 (m, 2H), 4,67 (d, 1H, J=ll,7 Hz), 5,02 (d, 1H), 5,11 (d, 1H), 5,24 (d, 1H, J=11,7 Hz), 7,17-7,50 (m, 10H, aromás).

8. példa

7a -Metoxi-2-spiro[2',2'-difenil-ciklopropil]-3-metil-3-cefem-4-karbonsav-1 ,l-dioxid-(2,2,2-triklór-etil)-észter előállítása

A. lépés:

6a -Metoxi-2,2-dimetil-penicillinsav-(2,2,2-triklór-etil)-észter előállítása

5,0 g (0,01395 mól) 6-diazo-penicillinát, 25 ml metanol és 25 ml DKM jéggel hütött oldatához 4-5 csepp bór-trifluorid-éterátot adunk, majd a reakcióelegyet jégben hűtve 2 órán át keverjük, utána vízzel, majd konyhasóoldattal mossuk, szárítjuk, bepároljuk. Az így kapott

3,4 g nyersterméket szilikagéloszlopon kromatografálva tisztítjuk. Eluálószerként hexán és etil-acetát 3 : 2 arányú elegyét alkalmazva 2,3 g A. lépés címe szerinti tiszta terméket kapunk.

'H-NMR (CDCI3) δ: 1,55 (s, 3H), 1,61 (s, 3H), 3-55 (s, 3H, OCH₃), 4-625 (színgulettel átfedett dublett 2H), 4,79 (d, 2H), 5-35 (d, 1H).

B. lépés:

6a -Metoxi-2,2-dimetil-penicillinsav-1 -oxid-(2,2,2-triklór-etil)-észter előállítása

35,6 g (0,09816 mól) 6a -metoxi-2,2-dimetil-penicillinsav-(2,2,2-triklór-etil)-észter és 350 ml DKM oldatához cseppenként 15,4 ml 32%-os perecetsavat adunk. Az elegyet jéghűtés közben 1 órán át keverjük, majd előbb vízzel, utána nátrium-hidrogén-karbonát-oldattal, végül konyhasóoldattal mossuk, vízmentes nátriumszulfáton szárítjuk, bepároljuk. így 26,0 hozammal jutunk a B. lépés cím szerinti vegyületéhez.

‘H-NMR (CDC1₃) δ: 1,34 (s, 3H), 1,75 (s, 3H), 3,58 (s, 3H, OCH₃), 4-61 (s, 1H), 4,96 (s, 2H), 4,63 (d, 1H, J=12,0 Hz), 5,03 (d, 1H, J=12,0 Hz).

C. lépés:

2-(Benzotiazol-2’-il-ditio)-a -izopropenil-4-oxo-3-metoxi-azetidin-1 -ecetsav-(2,2,2-triklór-etil)-észter előállítása

15,0 g (0,0396 mól) 6a -metoxi-2,2-dimetil-penicillinsav-l-oxid-(2,2,2-triklór-etil)-észter 7,44 g (0,04357 mól) 2-merkapto-benztiazol és 250 ml száraz toluol keverékét 2 órán át Dean-Stark feltéttel ellátott készülékben visszafolyó hütő alatt forraljuk, majd az oldószert vákuumban lepároljuk. A barna, olajszerü maradékot DKM-ban oldjuk, és jéghütés közben, hexán hozzáadásával kicsapjuk, így 18,4 g (86%) hozammal kapjuk a szilárd csapadék alakjában a C. lépés cím szerinti vegyületét, amelyet a következő lépésben ilyen alakban használunk fel.

D. lépés:

6a -Metoxi-2P -(bróm-metil)-2-metil-penicillinsav-(2,2,2-triklór-etil)-észter előállítása

HU 213 612 Β

7,4 g (0,01408 mól) 2-(benztiazol-2'-il-ditio)-a -izopropenil-3-oxi-3a-metoxi-azetidin-l-ecetsav-(2,2,2-triklór-etil)-észter és 100 ml DKM oldatát -30 °C-ra hütjük, 0,431 ml (0,0084 mól) bróm DKM-os oldatát csepegtetjük az előbbi oldathoz, majd a reakcióelegyet 40 percig -30°C-on keverjük, és utána a kivált csapadékot celitrétegen át szűrjük. A szürletet vákuumban bepároljuk, a maradékot éterben oldjuk, és hűtjük. A közben kivált csapadékot leszűrjük, A szürlet bepárlása után 6,0 g hozammal, habszerű termék alakjában kapjuk a D. lépés cím szerinti termékét, amelyet ebben az alakjában viszünk tovább a következő lépésbe.

'H-NMR (CDClj) δ: 1,67 (s, 3H), 355 (s, 5H, OCH₃+ + CH₂Br), 4,67 (s, 1H), 4,80 (s, 2H), 5,30 (s, 1H), 5,45 (s, 1H).

E. lépés:

7ct -Metoxi-3-metil-3-cefem-4-karbonsav-(2,2,2-triklór-etil)-észter előállítása

Az előző D. lépésből származó, 6,0 g tömegű nyers masszát 100 ml DMSO és 9,0 ml piridin elegyében oldjuk, majd a reakcióelegyet szobahőmérsékleten 20 órán át keverjük, s utána az oldószert vákuumban lepároljuk. A tapadós tömeget DKM-ban oldjuk, és sorrendben vízzel, híg sósavoldattal, konyhasóoldattal mossuk, szárítjuk és bepároljuk. így 5,0 g félszilárd termékként kapjuk az E. lépés cím szerinti vegyületét.

’H-NMR (CDC1₃) δ: 2,15 (s, 3H), 3,37 (d, 2H), 3,55 (s, 3H), 4,58 (s, 1H), 4,77 (s, 2H), 4,90 (s, 1H).

F. lépés:

a-Metoxi-3 -metil-3-cefem-4-karbonsav-1,1 -dioxid-(2,2,2-triklór-etil)-észter előállítása

8,7 g (24,12 mmol) 7-metoxi-3-metil-3-cefem-4-karbonsav-(2,2,2-triklór-etil)-észter és 100 ml DKM oldatához 51,6 ml perecetsavat csepegtetünk, majd a reakcióelegyet szobahőmérsékleten 18 órán át keverjük. A reakció lejátszódása után a reakcióelegyet előbb vízzel, majd nátrium-hidrogén-karbonát-oldattal, végül konyhasóoldattal mossuk, szárítjuk, és bepároljuk. így ragacsos, szilárd anyagot kapunk. Ehhez jéghűtés közben 1 : 1 arányú éter-hexán elegyet adunk. A kivált szilárd csapadékot szűrjük, s így az F. lépés cím szerinti vegyületét 9,33 g (98,5%) hozammal kapjuk.

’H-NMR (CDC1₃) δ: 2,17 (s, 3H), 3,57 (s, 3H), 4,13 (d, 2H), 4,93 (s, IH), 5,15 (d, 1H), 5,20 (s, 1H), 5,96 (d, 1H).

G. lépés:

7a-Metoxi-2-metilén-3-metil-3-cefem-4-karbonsav-1,1 -dioxid-(2,2,2-triklór-etil)-észter előállítása

2,0 g (5,094 mmol) 7a -metoxi-3-metil-3-cefem-4-karbonsav-l,l-dioxid-(2,2,2-triklór-etil)-észter, 1,24 g (15,28 mmol) dimetil-amin hidroklorid, 24 ml terc-butanol, 5 ml DKM és 1,43 ml 37 tömeg/térf.%-os vizes formaldehidoldat elegyét 80 °C hőmérsékleten visszafolyató hütő alatt 90 percig melegítjük, majd az oldószert vákuumban lepároljuk, a maradékot DKM-ban oldjuk, és vízzel mossuk, szárítjuk, betöményítjük. így 1,78 g (86,4%) hozammal tiszta alakban, fehér, szilárd termékként kapjuk a G. lépés cím szerinti vegyületét.

Ή-NMR (CDC1₃) δ: 2,20 (s, 3H), 3,60 (s, 3H), 4,80 (d, IH, J=14 Hz), 4,90 (széles s, IH), 5,20 (d, IH,

J=14 Hz), 5,30 (széles s, IH), 623 (d, IH), 6,75 (d, IH).

H. lépés:

7a-Metoxi-2-spiro[2',2'-difenil-ciklopropil]-3-metil-3-cefem-4-karbonsav-l,l-dioxid-(2,2,2-triklór-etil)-észter előállítása

I, 78 g (4,399 mmol) 7a -metoxi-2metiln-3-metil-3-cefem-4-karbonsav-1,1 -dioxid-(2,2,2,-triklór-etil)-észter és 70 ml DKM oldatához 0,940 g (4,839 mmol) difenil-diazo-metánt adunk, és a reakcióelegyet szobahőmérsékleten 3 órán át melegítjük keverés közben. Az oldószer eltávolítása után kapott rózsaszín, habszerű terméket szilikagélen kromatografálva tisztítjuk. Eluálásra DKM-t használva a H. lépés, azaz a 8. példa cím szerinti vegyületét 900 mg (35,8%) hozammal kapjuk.

'H-NMR (CDCI3) δ: 21,6 (s, 3H), 2,40 (d, IH, J=7,0 Hz), 3,0 (d, IH, J=7,0 Hz), 3,47 (s, 3 H), 4,68 (d, IH, J=12 Hz), 5,02 (d, IH), 5,07 (d, IH), 5,23 (d, IH, J=12 Hz).

9. példa

7a-Metoxi-2-spiro[2',2'-difenil-ciklopropil]-3-metil-3-cefem-4-karbonsav-1,1 -dioxid-benzhidril-észter előállítása

A. lépés:

7a-Metoxi-2-spiro[2’,2’-difenil-ciklopropil]-3-metil-3-cefem-4-karbonsav-1,1 -dioxid előállítása

2,39 g (4,187 mmol) 8. példa H. lépése szerint előállított 7a -metoxi-2-spiro[2',2'-difenil-ciklopropil]-3-metil-3-cefem-4-karbonsav-1,1 -dioxid-(2,2-triklór-etil)-észter és 50 ml jégecet oldatához 7,0 cinkport adunk, a keveréket szobahőmérsékleten 1 órán át keverjük, s utána a cinkpor feleslegét celitrétegen szűrve eltávolítjuk. A szűrletet vákuumban bepároljuk, a maradékot etil-acetátban oldjuk, vízzel, utána konyhasóoldattal mossuk, szárítjuk, és bepároljuk. így 1,5 g (83%) hozammal kapjuk a cím szerinti tiszta savterméket.

’H-NMR (CDCI3) δ: 1,23 (s, 3H), 2,38 (d, IH, J=6,8 Hz), 2,94 (d, IH, J=6,8 Hz), 3,47 (s, 3H), 5,026 (széles s, IH), 5,054 (széles s, IH), 7,24-7,49 (m, 10H, aromás).

B. lépés:

7a-Metoxi-2-spiro[2',2’-difenil-ciklopropil]-3-metil-3-cefem-4-karbonsav-l,l-dioxid-benzhidril-észter előállítása

830 mg (1,889 mmol) 7a -metoxi-2-spiro[2',2'-difenil-ciklopropil]-3-metil-3-cefem-4-karbonsav-l,l -dioxid és 20 ml DKM oldatához keverés közben 367 mg (1,889 mmol) difenil-diazo-metánt adunk, és utána a reakcióelegyet szobahőmérsékleten 3 órán át keverjük, majd híg nátrium-hidrogén-karbonát-oldattal, s utána konyhasóoldattal mossuk, szárítjuk, és bepároljuk. így 1,3 g nyers terméket kapunk, amelyet szilikagéloszlopon kromatografálva tisztítunk. Eluálószerként DKM-t alkalmazva 362 mg hozammal kapjuk a B. lépés, azaz a 9. példa cím szerinti vegyületét.

HU 213 612 Β

Ή-NMR (CDC1₃) δ: 0,96 (s, 3H), 2,31 (d, 1H, J=6,9 Hz), 2,92 (d, 1H, J=6,9 Hz), 3,44 (s, 3H), 4,95 (d, 1H, J=l,5 Hz), 5,05 (d, 1H, >1,5 Hz), 7,01 (s, 1H), 7,2-5,47 (m, 20H, aromás).

10. példa

7a-Metoxi-2-spiro[2',2'-difenil-ciklopropil]-3-metil-3 -cefem-4-(pirrolidin-karboxamid)-1,1 ,-dioxid előállítása 1,84 g (4,187 mmol) 7-metoxi-2-spiro[2’,2'-difenilciklopropil]-3-metil-3-cefem-4-karbonsav-1,1 -di- oxid (a 9. példa A. lépése szerint előállított vegyület) és 45 ml DKM oldatához 797 mg (6,280 mmol) oxalil-kloridot csepegtetünk, majd egy csepp DMF-ot adunk hozzá. Az elegyet szobahőmérsékleten 1 órán át keverjük, utána az oldószert vákuumban lepároljuk, és a világosbarna, szilárd maradékot igen jó vákuumban kiszárítjuk.

A szilárd terméket ismételten 15 ml DKM-ban oldjuk, és jéghütés közben 596 mg (8,374 mól) pirrolidin 8 ml száraz DKM-nal készült oldatát csepegtetjük hozzá. A reakcióelegyet 1 órán át jéghütés közben keverjük, utána hideg vízzel, hideg sósavoldattal, majd vízzel, végül konyhasóoldattal mossuk, szárítjuk, bepároljuk. így 1,57 g nyers terméket kapunk, amelyet szilikagélen hexán és etil-acetát 1:1 arányú elegyével mint eluálószerrel tisztítunk. így 1,04 g (50,5%) hozammal jutunk a cím szerinti vegyülethez, amely éterből átkristályosítva halványságra, szilárd anyag, op.: 222 °C (bomlás közben).

’H-NMR (CDC1₃) δ: 0,92 (s, 3H), 1,71-2,04 (m, 4H, pirrolidin), 2,23 (d, 1H, J=6,7 Hz), 2,91 (d, 1H, >

6,7 Hz), 3,09-3,68 (m, 4H, pirrolidin), 3,46 (s, 3H), 4,94 (d, 1H, >1,5 Hz), 5,05 (d, 1H, >1,5 Hz), 7,17-7,51 (m, 10H, aromás).

11. példa

7a-Metoxi-2-spiro[2',2'-difenil-ciklopropil]-3-metil-3-cefem-4-(piperidin-karboxamid)-l ,1-dioxid előállítása 1,0 g (2,275 mmol) 9. példa A. lépése szerint előállított terméket 5 ml DKM-ban oldunk, és előbb 0,3 ml (3,413 mmol) oxalil-kloridot, majd 1 csepp DMF-ot teszünk hozzá, és a reakcióelegyet szobahőmérsékleten órán át keverjük. Az oldószert vákuumban eltávolítjuk, az enyhén bamásszínü, szilárd maradékot ismét feloldjuk 5 ml DKM-ban, és jéghütés közben 388 mg (4,551 mmol) piperidin és 5 ml száraz DKM elegyét csepegtetjük hozzá, majd a reakcióelegyet jéghűtés közben 2 órán át keverjük, utána vízzel, majd konyhasóoldattal mossuk, szárítjuk, bepároljuk. Az így kapott 980 mg nyers terméket szilikagéloszlopon kromatografálva tisztítjuk. Eluálószerként hexán és etil-acetát : 1 arányú elegyét alkalmazva 491 mg (42,6%) cím szerinti tiszta terméket kapunk.

’H-NMR (CDC1₃) Ö: 0,903 (s, 3H), 1,46-1,68 (m, 6H, piperidil), 2,23 (d, 1H, J=6,8 Hz), 2,91 (d, 1H, >6,8 Hz), 3,34-3,64 (m, 4H, piperidil), 3,459 (s, 3H, OCH₃), 4,95 (d, 1H, >1-5 Hz), 5,04 (d, 1H, >1,5 Hz), 7,20-7,50 (m, 10H, aromás).

12. példa

7a -Bróm-2-spiro[2',2'-(4',4'-diklór-difenil)-ciklopropil]-3-metil-3-cefem-4-karbonsav-l,l-dioxid-benzhidril-észter előállítása

A. lépés:

di(4-Klór-fenil)-diazo-metán előállítása

1,303 g 4,4'-diklór-benzofenon-hidrazon és 20 ml száraz DKM oldatához jéghűtés közben 390 mg magnézium-szulfátot és 1,96 g ezüst-oxidot adunk egyszerre, majd 30 mg kálium-karbonátot teszünk az elegyhez. A reakcióelegyet a jégfürdő hőmérsékletén 1 óra hosszat, majd szobahőmérsékleten további 1 óra hosszat keverjük, celiten szűrjük, és az így kapott bíborvörös oldatot közvetlenül használjuk fel a cikloaddíciós reakcióhoz.

B. lépés:

2,0 g 7a-bróm-2metilén-3-metil-3-cefem-4-karbonsav-1,1-dioxid-benzhidril-észter (a 2. példa D. lépése szerint készült vegyület) és 30 ml száraz DKM oldatához jéghűtés közben hozzáadjuk az A. lépésben készült di(4-klór-enil)-diazo-metánt, és a reakcióelegyet jégfürdő hőmérsékletén 1 órán át keveqük, majd az oldószert lepároljuk, és a maradékot szilikagéloszlopon kromatografálva tisztítjuk. Eluálószerként hexán és etil-acetát elegyét alkalmazva 1,2 g hozammal kapjuk a B. lépés, azaz a 12. példa cím szerinti termékét, op.: 202 °C (bomlás közben) ’H-NMR (CDC1₃) δ: 1,03 (s, 3H), 2,32 (d, 1H, >7 Hz), 2-90 (d, 1H, J=7 Hz), 4,94 (d, 1H, >1,5 Hz), 5,23 (d, 1H, >1,5 Hz), 7,03 (s, 1H, CHPh₂), 7,18-7,42 (m, 18H, aromás).

13. példa

7a -Bróm-2-spiro[2',2'-(4',4’-difluor-difenil)-ciklopropil]-3-metil-3-cefem-4-karbonsav-1,1 -dioxid-benzhidril-észter előállítása

A lépés:

di(4-Fluor-fenil)-diazo-metán előállítása

1,0 g (4,306 mmol) 4,4'-difluor-benzofenon és 9 ml diklór-metán oldtához 0,2 ml 1 tömeg/térf.%-os jódoldatot, továbbá 2,1 ml 1,1,3,3-tetra-metil-guanidint adunk, majd ehhez az oldathoz 0 °C hőmérsékleten 20 perc alatt 1,23 ml (6,459 mmol) perecetsavoldatot csepegtetünk. A reakcióelegyet 0 °C-on 1 órán át keveqük, majd addig mossuk vízzel, amíg a mosóoldatok pH-értéke a 6-ot el nem éri. Ekkor a DKM-réteget vízmentes nátrium-szulfáton szárítjuk, és bepároljuk. így 850 mg (83,7%) bíborvörös, olajszerű terméket kapunk, amelyet a követező lépésben ebben a formában használunk.

B. lépés:

7a -Bróm-2-spiro[2',2'-(4',4'-difluor-difenil)-ciklopropil]-3-metil-3-cefem-4-karbonsav-1,1 -dioxid-benzhidril-észter előállítása

1,6 g 2. példa D. lépése szerint előállított 7a -bróm-2-metilén-3-metil-3-cefem-4-karbonsav-1,1 -dioxid-benzhidril-észter és 20 ml száraz DKM oldatához jéghütés közben hozzáadjuk az előző A. lépésből származó

HU 213 612 Β di(4-fluor-fenil)-diazo-metánt, és az így kapott elegyet jéghűtés közben 1 órán át keverjük, majd az oldószert lepároljuk, és a maradékot szilikagéloszlopon kromatografálva tisztítjuk. Eluálószerként hexán és etilacetát elegyét alkalmazva 0,8 g hozammal kapjuk a B. lépés, azaz a 13. példa cím szerinti vegyületét tiszta formában.

'H-NMR (CDCb) δ: 1,04 (s, 3H), 2,33 (d, IH, J=7,2 Hz),2,92 (d, IH, J=7,2Hz),4,92 (d,IH, J= 1,5 Hz), 5,22 (d, IH, J=l-5 Hz), 6,88-7,44 (m, 18H, aromás).

A 13. példa B. lépésében leírt eljárást követve, azonban a megfelelő diazovegyületből kiindulva állítottuk elő a további ciklopropilszármazékokat:

(1) 7a -Bróm-2-spiro[2'-(etoxi-karbonil)-ciklopropil]-3-metil-3-cefem-4-karbonsav-1,1 -dioxid-benzihidril-észter

Ή-NMR (CDCb) δ; 1,23 (t, 3H, COOCH₂CH₃), 1,80 (s, 3H, CH₃), 2,18 (d, 2H, ciklopropil, J=8,5 Hz), 2,75 (t, IH, CHCOOCH₂CH₃, J=8,5 Hz), 4,17 (q, 2H, COOCH₂CH₃), 5,08 (d, IH, >1,5 Hz), 3,26 (d, IH, >1,5 Hz), 6,98 (s, IH, CHPh₂), 7,26-7,37 (m, 10H, aromás).

(2) 7a -Bróm-2-spiro[2'-fenil-2'-metil-ciklopropil]-3-metil-3-cefem-4-karbonsav-1,1 -dioxid-benzhidril-észter 'H-NMR (CDCb) δ: 0,92 (s, 3H, CH₃), 1,78 (s, 3H, CH₃), 2,23 (ABq, 2H, ciklopropil, J=7 Hz), 5,03 (d, IH, >1,7 Hz), 5,34 (d, IH, >1,7 Hz), 6,9 (s, IH, CHPh₂), 7,18-7,48 ((m, 15H, aromás).

(3) 7a-Bróm-2-spiro[2'-fenil-ciklopropil]-3-metil-3-cefem-4-karbonsav-1,1 -dioxid-benzhidril-észter

Ή-NMR (CDC1₃) δ: 1,07 (s, 3H, CH₃), 2,09 (dd, IH, ciklopropil, J=6,8 Hz és 8,0 Hz), 2,39 (dd, IH, ciklopropil, >6,8 Hz és 8,0 Hz), 3,29 (dd, IH, ciklopropil, J=8,0 Hz és 10,0 Hz),5,16(d, lH,J=l,4Hz), 5,45 (d, IH, J=1,4 Hz), 6,90 (s, IH, CHPh2), 7,22-7,36 (m, 15H, aromás).

Claims

SZABADALMI IGÉNYPONTOK

1. Eljárás az (I) általános képletű 2-spiro-ciklopropil-cefalosporin származékok - ebben a képletben Rí jelentése 1-6 szénatomos alkoxiesoport, 1-3 halogénatommal vagy 1-2 fenilcsoporttal helyettesített

1-6 szénatomos alkoxiesoport vagy -NR₇R₈ általános képletű csoport, ahol R- és Rg a velük kapcsolódó nitrogénatommal együtt egy 4 vagy 5 szénatomot tartalmazó telített N-heterociklusos gyűrűt képez;

R₂ jelentése 1-4 szénatomos alkilcsoport vagy acetoximetil-csoport;

R₃ és Rjj elentése egymástól függetlenül fenil-, halogén-fenil-, 1-3 szénatomos alkil- vagy -CO-O-(l-6 szénatomos alkil)-csoport, vagy egyikük hidrogénatom is lehet;

Rs jelentése hidrogén- vagy halogénatom vagy 1-3 szénatomos alkoxiesoport;

m értéke 2 előállítására, azzal jellemezve, hogy

a) a 7-helyzetben halogénatomot tartalmazó (I) általános képletű vegyületek előállítására

- valamely (II) általános képletű 7-amino-cefem-4-karbonsav-származékot - ahol R₂jelentése egyezik a tárgyi körben megadottal - a szabad karboxilcsöpört észterezése vagy amidálása útján a megfelelő (III) általános képletű 7-amino-cefem-4-karbonsav-észterré vagy amiddá - ahol Rí és R₂ jelentése egyezik a tárgyi körben megadottal - alakítjuk;

- a kapott (III) általános képletű észtert vagy amidot halogénezés útján a 7-helyzetben halogénatomot tartalmazó (IV) általános képletű cefem-4-karbonsav-észterré vagy amiddá - ahol R5 jelentése halogénatom, Rí és R₂ jelentése egyezik a tárgyi körben megadottal - alakítjuk;

- a kapott (IV) általános képletű vegyületet oxidáció útján a megfelelő (V) általános képletű dioxiddá - ahol m értéke 2, R₅ jelentése halogénatom, Rí és R₂jelentése egyezik a tárgyi körben megadottal - alakítjuk,

- a kapott (V) általános képletű vegyületet amino-metilezés, előnyösen Mannich reakció útján a 2-helyzetben metiléncsoportot tartalmazó (VI) általános képletű cefem-származékká - ahol R₅ jelentése halogénatom, m, R| és R₂ jelentése egyezik a tárgyi körben megadottal - alakítjuk;

- a kapott (VI) általános képletű vegyületet cikloaddíciós reakció útján alakítjuk a megfelelő ,a 2helyzetben egy, a tárgyi kör szerint helyettesített ciklopropilcsoportot tartalmazó (I) általános képletű vegyületté; vagy

b) a 7-helyzetben a -konfigurációjú szubsztituenst,

R₂ jelentésében metil-csoportot és R₅ jelentésében 1-3 szénatomos alkoxicsoportot tartalmazó (I) általános képletű vegyületek előállítására

- egy (VII) általános képletű diazo-penicillinátot valamely 1-3 szénatomos alkoxicsoportot tartalmazó (I) általános képletű vegyületek előállítására

- egy (VII) általános képletű diazo-penicillinátot valamely 1-3 szénatomos alifás alkohollal reagáltatva a megfelelő, R5 helyén 1-3 szénatomos alkoxicsoportot tartalmazó (VIII) általános képletű vegyületté - ahol Rí jelentése egyezik a tárgyi körben megadottal - alakítunk;

- a kapott (VIII) általános képletű vegyületet alkalmas oxidálószerrel, előnyösen m-klór-peroxi-benzoesavval oxidálva, a megfelelő (IX) általános képletű szulfoxiddá -ahol R, jelentése egyezik a tárgyi körben megadottal, R5 jelentése 1-3 szénatomos alkoxiesoport - alakítjuk;

- a kapott (IX) általános képletű vegyületet (1) vagy közvetlenül, szerves oldószerben, előnyösen dimetil-formamidban ecetsavanhidriddel való kezelés útján, (2) vagy a (IX) általános képletű szubsztituált penicillánsav-oxidból egy R,₃-SH merkaptánnal kapott (X) általános képletű 2-ditio-3-izopropenil-4-oxo-azetidin-származékon, majd az ebből gyűrűzáró halogénezéssel előállított (XI) általános képletű vegyületen (ahol X az alkalmazott halogénezőszer, előnyösen klór vagy bróm maradéka) keresztül, az utóbbinak szerves bázissal való kezelése útján

HU 213 612 Β a megfelelő (XII) általános képletű 7a-helyettesített

3 -metil-3 -cefem-4-karobnsavészter-származékká ahol R? jelentése 1-3 szénatomos alkoxicsoport alakítjuk;

- a kapott (XII) általános képletű vegyületet oxidáció útján a megfelelő, a 7-helyzetben a-konfigurációjú szubsztituenst tartalmazó (V) általános képletű dioxiddá - ahol m értéke 2, R₅ jelentése 1-3 szénatomos alkoxicsoport, R, jelentése egyezik a tárgyi körben megadottal és R₂ jelentése metilcsoport - alakítjuk;

- a kapott (V) általános képletű vegyületet a fenti a) eljárásban megadott módon reagáltatjuk tovább a megfelelő, a 7-helyzetben α-konfigurációjú szubsztituenst tartalmazó (I) általános képletű vegyületté;

c) az (I) általános képletnek megfelelő, a 7-helyzetben adott esetben α-konfigurációjú szubsztituenst tartalmazó 2-spiro-ciklopropil-cefalsporin-származékok - ahol R_bR₂, R3, R4, R5 és m jelentése egyezik a tárgyi körben megadottal - előállítására

- valamely (IV) vagy (XII) általános képletű cefem-4-karbonsavészter-származékot - ahol R_b R₂ és R₅jelentése egyezik a tárgyi körben vagy a szükebb körű b) eljárásban megadottal - oxidáció útján a megfelelő (V) általános képletű dioxiddá - ahol R_bR₂, R5 és m jelentése egyezik a fent megadottal alakítunk; majd

- a kapott (V) általános képletű vegyületet amino-metilezés, előnyösen Mannich-reakció útján a 2-helyzetben metiléncsoportot tartalmazó (VI) általános képletű cefem-származékká - ahol R_b R₂, R5 és m jelentése egyezik a fent megadottal - alakítjuk;

- a kapott (VI) általános képletű vegyületet cikloaddíciós reakció útján alakítjuk a megfelelő, a 2-helyzetben egy a tárgyi kör szerint helyettesített ciklopropilcsoportot tartalmazó (I) általános képletű vegyületté;

d) valamely Rí helyen hidroxilcsoportot vagy a tárgyi körben megadott szubsztituenst tartalmazó (I) általános képletű vegyületet - ahol R₂, R3, R4, R5 és m jelentése egyezik a tárgyi körben megadottal - észterezés, átészterezés vagy amidálás útján - a megfelelő, de Rj helyén valamely más, a tárgyi körben megadott szubsztituenst tartalmazó (I) általános képletű vegyületté alakítunk.

(Elsőbbség: 1990. 10.05.)
2. Az 1. igénypont szerinti eljárás

7a-klór2-spiro[2',2'-difenil-ciklopropil]-3-metil-3-cefem-4-karbonsav-1,1 -dioxid-benzhidril-észter,

7a-bróm-2-spiro[2’,2'-difenil-ciklopropil]-3-metil-3-cefem-4-karbonsav-1,1 -dioxid-benzhidril-észter,

7,7-dihidro-2-spiro[2',2'-difenil-ciklopropil]-3-metil-3-cefem-4-karbonsav-1,1 -dioxid-benzhidril-észter,

7a-bróm-2-spiro[2',2'-difenil-ciklopropil]-3-metil-3-cefem-4-karbonsav-1,1 -dioxid-benzhidril-észter,

7a-bróm-2-spiro[2',2'-(4’,4'-diklór)-difenil-ciklopropil]-3 -metil-3-cefem-4-karbonsav-1,1 -dioxid-benzhidril-észter,

7a-bróm-2-spiro[2',2'(4',4'-difluor)-difenil-ciklopropil]-3-metil-3-cefem-4-karbonsav-1,1 -dioxid-benzhidril-észter,

7a-klór-2-spiro[2',2'-difenil-ciklopropil]-3-(acetoxi-metil)-3-cefem-4-kaAonsav-1,1 -dioxid-benzhidril-észter, 7a-bróm-2-spiro[2'-etoxi-karbonil)-ciklopropil]-3-metil-3-cefem-4-karbonsav-1,1 -dioxid-benzhidril-észter, 7a-bróm-2-spiro[2'-fenil-2’-metil-ciklopropil]-3-metil-3-cefem-4-karbonsav-1,1 -dioxid-benzhidril-észter,

7a-bróm-2-spiro[2'-fenil-ciklopropil]-3-metil-3-cefem-4-karbonsav-1,1 -dioxid-benzhidril-észter, 7a-bróm-2-spiro[2',2'-difenil-ciklopropil]-3-metil-3-cefem-4-(pirrolidin-karboxamid)-1,1 -dioxid,

7a-metoxi-2-spiro[2',2'-difenil-ciklopropil]-3 -metil-3-cefem-4-(pirrolidin-karboxamid)-1,1 -dioxid, 7a-etoxi-2-spiro[2’,2’-difenil-ciklopropil]-3-metil-3-cefem-4-karbonsav-1,1 -dioxid-(2,2,2-triklór-etil)-észter,

7a-metoxi-2-spiro[2’,2'-difenil-ciklopropil]-3-metil-3-cefem-4-karbonsav-1,1 -dioxid-benzhidril-észter, 7a-metoxi-2-spiro[2',2'-difenil-ciklopropil]-3-metil-3-cefem-4-karbonsav-1,1 -dioxid-(2,2,2-triklór-etil)észter,

7a-metoxi-2-spiro[2',2'-difenil-ciklopropil]-3-metil-3-cefem-4-(piperidin-karboxamid)-1,1 -dioxid, előállítására, azzal jellemezve, hogy megfelelően helyettesített kiindulási vegyületeket alkalmazunk. (Elsőbbség: 1990. 10. 05.)
3. Eljárás gyógyászati készítmények előállítására, azzal jellemezve, hogy valamely, az 1. igénypont szerint előállított (I) általános képletű vegyületet - ahol R_b R₂, R₃, R4, R5 és m jelentése egyezik az 1. igénypontban megadottal - gyógyászati szempontból elfogadható vivőanyaggal, hígítószerrel és/vagy egyéb gyógyszerészeti segédanyaggal összekeverve gyógyászati készítménnyé alakítunk. (Elsőbbség: 1990. 10. 05.)
4. A 3. igénypont szerinti eljárás gyulladáscsökkentő hatású és degeneratív állapotok kezelésére alkalmas gyógyászati készítmények előállítására, azzal jellemezve, hogy valamely az 1. igénypont szerint előállított (I) általános képletű vegyületet - ahol R], R₂, R₃, R4, R₅ és m jelentése egyezik az 1. igénypontban megadottal gyógyászati szempontból elfogadható vivőanyaggal, hígítószerrel és/vagy egyéb gyógyszerészeti segédanyaggal összekeverve gyógyászati készítménnyé alakítunk. (Elsőbbség: 1990. 10. 05.)
5. A 3. igénypont szerinti eljárás az elasztáz enzim hatását gátló, illetőleg az elasztáz enzimmel közvetített (médiáit) kóros állapotok kezelésére alkalmas gyógyászati készítmények előállítására, azzal jellemezve, hogy valamely, az 1. igénypont szerint előállított (I) általános képletű vegyületet -ahol R|, R₂, R3, R4, R5 és m jelentése egyezik az 1. igénypontban megadottal - gyógyászati szempontból elfogadható vivőanyaggal, hígítószenei és/vagy egyéb gyógyszerészeti segédanyaggal összekeverve gyógyászati készítménnyé alakítunk.

(Elsőbbség: 1990. 10. 05.)
6. Eljárás az (I) általános képletű 2-spiro-ciklopropil-cefalosporin-származékok - ebben a képletben

Rt jelentése 1-6 szénatomos alkoxicsoport, 1-3 halogénatommal vagy 1-2 fenilcsoporttal helyettesített 1-6 szénatomos alkoxicsoport vagy -NR₇R₈ általános képletű csoport, ahol R₇ és R₈ a velük kapcsoló16

HU213 612Β dó nitrogénatommal együtt egy 4 vagy 5 szénatomot tartalmazó telített N-heterociklusos gyűrűt képez;

R₂ jelentése 1—4 szénatomos alkilcsoport vagy acetoxi-metil-csoport;

R₃ és R4 jelentése egymástól függetlenül fenil-, halogén-fenil-, 1-3 szénatomos alkil- vagy -CO-O-(l-6 szénatomos alkilj-csoport, vagy egyikük hidrogénatom is lehet;

R₅ jelentése hidrogén- vagy halogénatom vagy 1-3 szénatomos alkoxicsoport;

m értéke 2 előállítására, azzal jellemezve, hogy

a) a 7-helyzetben halogénatomot tartalmazó (I) általános képletű vegyületek előállítására

- valamely (II) általános képletű 7-amino-cefem-4-karbonsav-származékot - ahol R₂ jelentése egyezik a tárgyi körben megadottal - a szabad karboxilcsoport észterezése vagy amidálása útj án a megfelelő (III) általános képletű 7-amino-cefem4-karbonsav-észterré vagy amiddá - ahol R, és R? jelentése egyezik a tárgyi körben megadottal alakítjuk;

- a kapott (III) általános képletű észtert vagy amidot halogénezés útján a megfelelő, 7-helyzetben halogénatomot tartalmazó (IV) általános képletű cefem-4-karbonsav-észterré vagy amiddá - ahol R5 jelentése halogénatom, R| és R₂ jelentése egyezik a tárgyi körben megadottal - alakítjuk;

- a kapott (IV) általános képletű vegyületet oxidáció útján a megfelelő (V) általános képletű dioxiddá - ahol m értéke 2, R5 jelentése halogénatom, Rí és R₂ jelentése egyezik a tárgyi körben megadottal - alakítjuk,

- a kapott (V) általános képletű vegyületet amino-metilezés, előnyösen Mannich reakció útján a 2-helyzetben metiléncsoportot tartalmazó (VI) általános képletű cefem-származékká - ahol R5 jelentése halogénatom, m, R] és R₂ jelentése egyezik a tárgyi körben megadottal - alakítjuk;

- a kapott (VI) általános képletű vegyületet cikloaddíciós reakció útján alakítjuk a megfelelő, a 2-helyzetben egy a tárgyi kör szerint helyettesített ciklopropilcsoportot tartalmazó (I) általános képletű vegyületté; vagy

b) az (I) általános képletnek megfelelő, a 7-helyzetben adott esetben a-konfigurációjú szubsztituenst tartalmazó 2-spiro-ciklopropil-cefalosporin-származékok - ahol R_b R₂, R₃, R4, R₅ és m jelentése egyezik a tárgyi körben megadottal - előállítására

- valamely (IV) vagy (XII) általános képletű cefem-4-karbonsavészter-származékot - ahol R_b R? és R₅jelentése egyezik a tárgyi körben megadottal - oxidáció útján a megfelelő (V) általános képletű dioxiddá - ahol R_b R₂, R5 és m jelentése egyezik a fent megadottal - alakítunk; majd

- a kapott (V) általános képletű vegyületet amino-metilezés, előnyösen Mannich-reakció útján a 2-helyzetben metiléncsoportot tartalmazó (VI) általános képletű cefem-származékká - ahol R, R₂, R5 és m jelentése egyezik a fent megadottal - alakítjuk;

- a kapott (VI) általános képletű vegyületet cikloaddíciós reakció útján alakítjuk a megfelelő, a 2-helyzetben egy, a tárgyi kör szerint helyettesített ciklopropilcsoportot tartalmazó (I) általános képletű vegyületté. (Elsőbbség: 1989. 10. 06.)
7. A 6. igénypont szerinti eljárás

7a-klór2-spiro[2',2'-difenil-ciklopropil]-3-metil-3-cefem-4-karbonsav-1,1 -dioxid-benzhidril-észter,

7a-bróm-2-spiro[2',2’-difenil-ciklopropil]-3-metil-3-cefem-4-karbonsav-1,1 -dioxid-benzhidril-észter,

7,7-dihidro-2-spiro]2',2’-difenil-ciklopropil]-3-metil-3-cefem-4-karbonsav-1,1 -dioxid-benzhidril-észter,

7a-bróm-2-spiro[2',2'-difenil-ciklopropil]-3-metil-3 -cefem-4-karbonsav-1,1 -dioxid-terc-butil-észter,

7a-bróm-2-spiro[2',2'-(4',4'-diklór)-difenil-ciklopropil]-3-metil-3-cefem-4-karbonsav-1,1 -dioxid-benzhidril-észter,

7a-bróm-2-spiro[2',2'(4',4'-difluor)-difenil-ciklopropil]-3-metil-3-cefem-4-karbonsav-l,l-dioxid-benzhidril-észter,

7ct-klór-2-spiro[2',2'-difenil-ciklopropil]-3-(acetoxi-metil)-3-cefem-4-karbonsav-1,1-dioxid-terc-butil-észter,

7a-bróm-2-spiro[2'-(etoxi-karbonil)-ciklopropil]-3-metil-3-cefem-4-karbonsav-1,1 -dioxid-benzhidril-észter,

7a-bróm-2-spiro[2’,-fenil-2'-metil-ciklopropil]-3-metil-3-cefem-4-karbonsav-1,1 -dioxid-benzhidril-észter,

7a-bróm-2-spiro[2'-fenil-ciklopropil]-3-metil-3-cefem-4-karbonsav-1,1 -dioxid-benzhidril-észter,

7a-bróm-2-spiro[2',2'-difenil-ciklopropil]-3-metil-3-cefem-4-(pirrolidin-karboxamid)-1,1 -dioxid,

7a-metoxi-2-spiro[2',2'-difenil-ciklopropil]-3-metil-3-cefem-4-(pirrolidin-karboxamid)-1,1 -dioxid,

7a-etoxi-2-spiro[2’,2’-difenil-ciklopropil]-3-metil-3-cefem-4-karbonsav-1,1 -dioxid-(2,2,2-triklór-etil)-észter,

7a-metoxi-2-spiro[2’,2'-difenil-ciklopropil]-3-metil-3-cefem-4-karbonsav-1,1 -dioxid-benzhidril-észter,

7cc-metoxi-2-spiro[2',2'-difenil-ciklopropil]-3-metil-3-cefem-4-karbonsav-l,l-dioxid-(2,2,2-triklór-etil)-észter,

7a-metoxi-2-spiro[2',2'-difenil-cikloporpil]-3-metil-3 -cefem-4-(piperidin-karboxamid)-1,1 -dioxid, előállítására, azzaljellemezve, hogy megfelelően helyettesített kiindulási vegyületeket alkalmazunk. (Elsőbbség: 1989. 10. 06.)
8. Eljárás gyógyászati készítmények előállítására, azzal jellemezve, hogy valamely, a 6. igénypont szerint előállított (I) általános képletű vegyületet - ahol R, R₂, R₃, R₄, R5 és m jelentése egyezik a 6. igénypontban megadottal - gyógyászati szempontból elfogadható vivőanyaggal, hígítószerrel és/vagy egyéb gyógyszerészeti segédanyaggal összekeverve gyógyászati készítménnyé alakítunk. (Elsőbbség: 1989. 10. 06.)
9. A 8. igénypont szerinti eljárás gyulladáscsökkentő hatású és degeneratív állapotok kezelésére alkalmas gyógyászati készítmények előállítására, azzal jellemezve, hogy valamely a 6. igénypont szerint előállított (I) általános képletű vegyületet - ahol R_b R₂, R₃, R, R5 és m jelentése egyezik a 6. igénypontban megadottal gyógyászati szempontból elfogadható vivőanyaggal, hígítószerrel és/vagy egyéb gyógyszerészeti segédanyaggal összekeverve gyógyászati készítménnyé alakítunk. (Elsőbbség: 1989. 10. 06.)

HU213 612Β
10. A 8. igénypont szerinti eljárás az elasztáz enzim hatását gátló, illetőleg az elasztáz enzimmel közvetített (médiáit) kóros állapotok kezelésére alkalmas gyógyászati készítmények előállítására, azzal jellemezve, hogy valamely, a 6. igénypont szerint előállított (I) általános vegyü- 5 letet - ahol R,, R?, R3, R4, R5 és m jelentése egyezik a 6. igénypontban megadottal - gyógyászati szempontból elfogadható vivőanyaggal, hígítószerrel és/vagy egyéb gyógyszerészeti segédanyaggal összekeverve gyógyászati készítménnyé alakítunk. (Elsőbbség: 1989. 10. 06.)