HU212926B - Microbiological method for the preparation of 20-methyl-5,7-pregnadiene-3 beta, 21-diol derivatives - Google Patents

Microbiological method for the preparation of 20-methyl-5,7-pregnadiene-3 beta, 21-diol derivatives Download PDF

Info

Publication number
HU212926B
HU212926B HU9201647A HU164792A HU212926B HU 212926 B HU212926 B HU 212926B HU 9201647 A HU9201647 A HU 9201647A HU 164792 A HU164792 A HU 164792A HU 212926 B HU212926 B HU 212926B
Authority
HU
Hungary
Prior art keywords
methyl
pregnadiene
nrrl
mycobacterium
beta
Prior art date
Application number
HU9201647A
Other languages
English (en)
Other versions
HU9201647D0 (en
HUT64556A (en
Inventor
Mario Kennekke
Guenter Neef
Alfred Weber
Original Assignee
Schering Ag
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Schering Ag filed Critical Schering Ag
Publication of HU9201647D0 publication Critical patent/HU9201647D0/hu
Publication of HUT64556A publication Critical patent/HUT64556A/hu
Publication of HU212926B publication Critical patent/HU212926B/hu

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
    • C12P33/00—Preparation of steroids
    • C12P33/005—Degradation of the lateral chains at position 17
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07J—STEROIDS
    • C07J17/00—Normal steroids containing carbon, hydrogen, halogen or oxygen, having an oxygen-containing hetero ring not condensed with the cyclopenta(a)hydrophenanthrene skeleton
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07J—STEROIDS
    • C07J9/00—Normal steroids containing carbon, hydrogen, halogen or oxygen substituted in position 17 beta by a chain of more than two carbon atoms, e.g. cholane, cholestane, coprostane

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
  • Steroid Compounds (AREA)
  • Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)
  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
  • Polyesters Or Polycarbonates (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Reinforced Plastic Materials (AREA)
  • Paints Or Removers (AREA)
  • Silicon Compounds (AREA)
  • Developing Agents For Electrophotography (AREA)
  • Iron Core Of Rotating Electric Machines (AREA)

Description

A találmány tárgya új eljárás az (I) általános képletű ismert 20-metil-5,7-pregnadién-3 β,21 -diol-származékok előállítására mikrobiológiai úton, ahol a képletben Rí jelentése hidrogénatom vagy rövidszénláncú alkilcsoport,
R2 jelentése rövidszénláncú alkilcsoport vagy
Rt és R2 együtt egy tetrametiléncsoportot vagy egy pentametiléncsoportot képez.
A találmány szerinti eljárást az jellemzi, hogy egy (Π) általános képletű ergoszterin-származékot, ahol R] és R2 jelentése a fenti,
Mycobacterium spec. NRRL B-3683, Mycobacterium spec. NRRL B-3805, Mycobacterium phlei NRRL B8154 vagy Mycobacterium fortuitum NRRL B-8153 törzs baktériumtenyészetével fermentálunk.
R| és R2 alkilcsoportok alatt 1-6 szénatomot tartalmazó, előnyösen egyenesláncú alkilcsoportot értünk. Alkalmas Rj és R2 alkilcsoport például a propil-, butil-, izobutil-, szek-butil-, hexil- vagy mindenekelőtt a metil- vagy etilcsoport.
A szakember számára rendkívül meglepő, hogy a találmány szerinti eljárás során az (I) képletű 20-metil5,7-pregnadién-3P,21 -diol-származékok képződnek, mivel a 4 179 336 számú amerikai egyesült államokbeli szabadalmi leírásból ismert, hogy ilyen feltételek között más szterin-3-acetil-származékok 17-oxo-szteroidokká bomlanak le.
A találmány szerinti eljárást ugyanazon fermentálást feltételek mellett végezzük, mint amelyeket a vegyületek ismert mikrobiológiai átalakítása során ezeknél a baktériumtenyészeteknél alkalmazunk.
Ezeket a baktériumkultúrákat a szokásosan alkalmazott feltételek mellett tenyésztjük, megfelelő táptalajban és a süllyesztett tenyészet levegőztetésével. Ezt követően a tenyészethez hozzáadjuk a vegyületet (megfelelő oldószerben oldva vagy emulgeált alakban) és fermentáljuk addig, amíg a vegyület maximális átalakulását el nem érjük.
Kiindulási anyagok megfelelő oldószere például a metanol, az etanol, a glikol-monometil-éter, dimetilformamid vagy a dimetil-szulfoxid.
Kiindulási vegyületek emulgeálását például úgy érhetjük el, he ezeket mikronízált alakban vízzel elegyedő oldószerben oldva adjuk hozzá (metanolban, etanolban, acetonban, glikol-monometil-éterbenj dimetil-formamidban vagy dimetil-szulfoxidban) erőteljes keverés közben (előnyösen kalcium-karbonát mentesített vízben, amelyhez a szokásos emulgeáló segédanyagokat hozzáadjuk. Megfelelő emulziós segédanyagok a nemionogén emulgeátorok, mint például az etilénoxid-adduktumok vagy a poliglikolok zsírsavészterei. Megfelelő emulgeátorok még a kereskedelemben TeginR, TweenR és SpanR elnevezéssel forgalmazott nedvesítőszerek. Gyártó: Goldschmidt, illetve Atlas.
Az optimális kiindulási anyagkoncentráció, a kiindulási anyagok hozzáadásának időpontja és a fermentáció időtartama az alkalmazott kiindulási anyagtól, a mikroorganizmustól és a fermentálás körülményeitől függ. Ezeket a faktorokat előkísérletek alapján kell meghatározni, amely minden szteroid mikrobiológiai átalakításakor általában szükséges és ami a szakember számára ismert.
A találmány szerinti eljárással előállított (I) általános képletű 20-metil-5,7-pregnadién^,21-dioI-származékok előnyösen a D3-vitamin és származékai szintézisének értékes köztitermékeiként alkalmazhatók.
így például ezeket a vegyületeket 21-tozilát-származékokká lehet észterezni és ezeket Fürst, A. és munkatársai által ismertetett reakciókörülmények között reagáltatni [Helv. Chim. Acta 65, (1982) 1499-1521]. így (III) általános képletű vegyületeket kapunk, amelynek acetálcsoportja lehasítható. Az így kapott 25-hidroxi-koleszterin fotokémiai átrendeződését D3-vitamin 25-hidroxi-származékává szintén Fürst, A. és munkatársai által ismertetett eljárással végezhetjük el.
A találmány szerinti eljáráshoz szükséges kiindulási vegyületeket a 4 179 336 számú amerikai egyesült államokbeli szabadalmi leírásban valamint a 179 344, 182 681, 182 789 és 182 790 lajstromszámú magyar szabadalmi leírásokban ismertetett reakciókörülmények szerint állíthatjuk elő.
A következő kiviteli példák a találmány közelebbi bemutatására szolgálnak.
í. példa
3$-Metoxi-metoxi-20-metil-5,7-pregnadién-2J -ol
a) 400 g ergoszterint 6 liter formaldehid-dimetilacetálban oldunk és szobahőmérsékleten keverés közben 400 g kovasavgéllel és részletekben 200 g foszforpentoxiddal elegyítjük, majd 2 órán keresztül szobahőmérsékleten keverünk. A nem oldódó részeket kiszűrjük, formaldehid-dimetil-acetáttal mossuk és az oldószert vákuumban ledesztilláljuk. Nátrium-hidrogénkarbonát-oldatot adunk hozzá, majd a szilárd nyersterméket kiszűrjük, vízzel mossuk. Szárítás után 440 g 3β-πιβΙοχϊ-ηιεΙοχϊ-5,7,22-β^θ5ΖΙηΙπέηΙ kapunk. Olvadáspont: 124-127 ’C (bomlik).
b) 2 literes Erlenmeyer lombikban lévő 500 ml steril táptalajnak, amely a következőket tartalmazza:
1% élesztőkivonat
0,45% Na2HPO4
0,34% KH2PO4
0,2% Tween 80 pH-értéket 6,7-re állítjuk be, és a táptalajt Mycobacterium spec. NRRL B-3805 (lásd US-A 3 759 791 számú, 1973. 09. 18-án megadott szabadalom) törzs tenyészetével beoltjuk és 3 napon keresztül 30 ’C hőmérsékleten rázatj uk (180 fordulat percenként).
c) 22,5 g 3p-metoxi-metoxi-ergoszta-5,7,22-triént 4,4 g TerginR-rel és 430 ml 95 ’C-on Ultra-Turrax készülékben (Janke és Kunkel cég, Staufen, Németország) 25 percen keresztül emulgeálunk és ezt követően 1000 g vízzel feltöltjük. Az emulziót 20 percen keresztül sterilezzük 102 ’C hőmérsékleten.
d) 500 ml-es Erlenmeyer-lombikban lévő 100 ml steril táptalajnak, amely a következőket tartalmazza: 2,5% kukoricalekvár
0,25% szójaliszt
HU 212 926 Β
0,3% (NH4)2HPO4
0,25% Tween 80 pH értékét 6,5-re állítjuk be, a fenti Mycobacterium faj törzstenyészetének 5 ml-ével beoltunk. Ezt követően 13,3 ml a b) szerint előállított emulziót (ez 0,3 g 3βmetoxi-metoxi-ergoszta,5,7,22-triénnek felel meg) adunk hozzá és 120 órán keresztül 30 °C hőmérsékleten rázás közben fermentáljuk (220 fordulat percenként).
A fermentálást követően a tenyészeteket 100100 ml metil-izobutil-ketonnal kétszer extraháljuk. Az egyesített extraktumokat 11 g aktív szénnel elegyítjük és hajtogatott szűrőpapíron át szűrjük. A szűrletet ezt követően 50 °C hőmérsékleten forgó bepárlóban betöményítjük és kromatográfiás eljárással tisztítjuk alumínium-oxidon. Az elvégzett kromatográfiás eljárás után 48 mg 3β-metoxi-metoxi-20-metil-5,7-pregnadién-21olt kapunk, amelyet nagynyomású folyadékkromatográfiás eljárással megvizsgálva a hiteles mintával azonos értékeket kapunk.
NMR-adatok (deuterált kloroformban), protonok eltolódása ppm-ben (integrál): 0,65 s (3H), 0,96 s (3H), 1,09 d, J = 7 Hz (3H), 1,20-1,80 m (11H), 1,852,05 m (5H), 2,05-2,12 (1H), 2,26-2,30 m (1H), 2,50-2,59 m (1H), 3,30-3,70 m (3H), 4,65-4,80 m (2H), 5,40 m (1H), 5,57 m (1H).
2. példa
3$-Metoxi-metoxi-20-metil-5,7-pregnadién-21-ol Az 1. példa reakciókörülményei között, de Mycobacterium spec. NRRL B-3683 (US-A 3 684 657 sz. szabadalmi leírás, a szabadalmat 1972. 08. 15-én adták meg) alkalmazásával 0,3 g 3β-ιηεΐοχΐ-ιηεΐοχϊ-ε^θ5ζta-5,7,22-triénből 45 mg 33-metoxi-metoxi-20-metil5,7-pregnadién-21-olt állítunk elő.
3. példa
3$-Metoxi-metoxi-20-metil-5,7-pregnadién-21-ol
Az 1. példa reakciókörülményei között, de Mycobacterium fortuitum NRRL B-8153 (US—A 4 293 645 sz. szabadalmi leírás, a szabadalmat 1981. 10. 06-án adták meg) alkalmazásával 0,3 g 3β-ΓηεΙοχί-ιηειοχί-εΓgoszta-5,7,22-triénből 48 mg 33-metoxi-metoxi-20metil-5,7-pregnadién-21-olt állítunk elő.
4. példa
3$-Metoxi-metoxi-20-metil-5,7-pregnadién-2J-ol
Az 1. példa reakciókörülményei között, de Mycobacterium phlei NRRL B-8154 (US-A 4 293 645 sz. szabadalmi leírás, a szabadalmat 1981. 10. 06-án adták meg) alkalmazásával 0,3 g Ββ-ιηείοχϊ-πιεΙοχΐ-ε^οβζta-5,7,22-triénből 45 mg 3β-Γηεΐοχϊ-ηιεΙοχί-20-πιεύ15,7-pregnadién-21-olt állítunk elő.

Claims (1)

  1. Eljárás az (I) általános képletű 20-metil-5.7-pregη30ίέη-3β,21 -di ol-származékok, ahol Rj jelentése hidrogénatom vagy rövidszénláncú alkilcsoport,
    R2 jelentése rövidszénláncú alkilcsoport vagy
    Rj és R2 együtt egy tetrametiléncsoportot vagy egy pentametiléncsoportot jelent, előállítására, azzal jellemezve, hogy egy (II) általános képletű ergoszterin-származékot, ahol
    Rj és R2 jelentése a fenti,
    Mycobacterium spec. NRRL B-3683, Mycobacterium spec. NRRL B—3805, Mycobacterium phlei NRRL B8154 vagy Mycobacterium fortuitum NRRL B-8153 törzs baktériumtenyészetével fermentálunk.
HU9201647A 1990-08-18 1991-08-01 Microbiological method for the preparation of 20-methyl-5,7-pregnadiene-3 beta, 21-diol derivatives HU212926B (en)

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
DE4026463 1990-08-18

Publications (3)

Publication Number Publication Date
HU9201647D0 HU9201647D0 (en) 1992-08-28
HUT64556A HUT64556A (en) 1994-01-28
HU212926B true HU212926B (en) 1996-12-30

Family

ID=6412644

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
HU9201647A HU212926B (en) 1990-08-18 1991-08-01 Microbiological method for the preparation of 20-methyl-5,7-pregnadiene-3 beta, 21-diol derivatives

Country Status (11)

Country Link
US (1) US5429934A (hu)
EP (1) EP0496854B1 (hu)
JP (1) JPH05503294A (hu)
AT (1) ATE190622T1 (hu)
CA (1) CA2069932A1 (hu)
CS (1) CS255091A3 (hu)
DE (1) DE59109185D1 (hu)
FI (1) FI102972B (hu)
HU (1) HU212926B (hu)
NO (1) NO300981B1 (hu)
WO (1) WO1992003465A1 (hu)

Family Cites Families (15)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US3095411A (en) * 1960-11-07 1963-06-25 British Drug Houses Ltd 3-enol ethers of 6-hydroxymethyl-3-oxo-delta4-steroids and process for their preparation
US3983111A (en) * 1972-05-05 1976-09-28 Glaxo Laboratories Limited Steroidal anaesthetics of the pregnane and 19-norpregnane series
DE2255058C3 (de) * 1972-11-10 1979-12-20 Bayer Ag, 5090 Leverkusen Basische Benzthiazolazofarbstoffe, Verfahren zu deren Herstellung und ihre Verwendung zum Färben und Bedrucken von Polymerisaten und Mischpolymerisaten des Acrylnitril und Dicyanäthylens, sowie sauer modifizierten Synthesefasern
GB1527161A (en) * 1976-02-19 1978-10-04 Leo A Enol esters of steroids
US4293645A (en) * 1976-03-01 1981-10-06 The Upjohn Company Process for preparing androsta-1,4-diene-3,17-dione and androst-4-ene-3,17-dione
US4214052A (en) * 1977-10-21 1980-07-22 The Upjohn Company Process for preparing 9α-OH BN alcohol
US4329432A (en) * 1978-02-13 1982-05-11 The Upjohn Company Mycobacterium fortuitum strain
AT362086B (de) * 1978-04-17 1981-04-27 Henkel Kgaa Verfahren zur herstellung von 17-c-steroid- -alpha-propionsaeureverbindungen durch mikro- biellen seitenkettenabbau an 17-c-seitenketten- -steroidsubstraten
JPS5735599A (en) * 1980-08-05 1982-02-26 Chugai Pharmaceut Co Ltd 24,25-dihydroxycholestane and its preparation
US4429041A (en) * 1981-05-11 1984-01-31 The Upjohn Company Process of producing 9-hydroxy-3-oxo-4,17(20)-pregnadiene-20-carboxylic acid
AU7752287A (en) * 1986-08-06 1988-02-24 Macdermid, Inc. Method for manufacture of printed circuit boards
EP0322081B1 (en) * 1987-12-23 1992-12-16 Roussel-Uclaf Microbiological preparation of 9-alpha-hydroxy-17-keto steroids
US5218109A (en) * 1988-07-05 1993-06-08 Kuraray Co., Ltd. Steroid compounds
JP2642190B2 (ja) * 1989-03-23 1997-08-20 株式会社クラレ ２３位に酸素官能基を有するステロイド誘導体
JP2642189B2 (ja) * 1989-03-23 1997-08-20 株式会社クラレ ステロイド誘導体及びその製造方法

Also Published As

Publication number Publication date
ATE190622T1 (de) 2000-04-15
WO1992003465A1 (de) 1992-03-05
FI921696A0 (fi) 1992-04-15
CA2069932A1 (en) 1992-02-19
NO921482D0 (no) 1992-04-14
HU9201647D0 (en) 1992-08-28
CS255091A3 (en) 1992-02-19
EP0496854B1 (de) 2000-03-15
FI102972B1 (fi) 1999-03-31
NO300981B1 (no) 1997-08-25
JPH05503294A (ja) 1993-06-03
US5429934A (en) 1995-07-04
NO921482L (no) 1992-04-14
HUT64556A (en) 1994-01-28
FI102972B (fi) 1999-03-31
DE59109185D1 (de) 2000-04-20
EP0496854A1 (de) 1992-08-05

Similar Documents

Publication Publication Date Title
DE2632677C2 (hu)
JP2873143B2 (ja) 新規なアルキレンジアンモニウム ジクラブラネート誘導体、その製造方法並びにその使用
US4834919A (en) Stereoselective reduction of the keto group at 7-position of a bile keto acid
EP1534732B1 (en) 5 androsten-3-ol steroid intermediates and processes for their preparation
HU212926B (en) Microbiological method for the preparation of 20-methyl-5,7-pregnadiene-3 beta, 21-diol derivatives
HU204574B (en) Process for producing 4-androstene-3,17-dion and 1,4-androstadiene-3,17- - -dion with microbiological method
US4431732A (en) Process for the preparation of 11β,21-dihydroxy-2'-methyl-5'βH-1,4-pregnadieno(16,17-D)-oxazole-3,20-dione
GB1601168A (en) Hydroxylated 1a,2a-methylene-steroids
US3873529A (en) Novel antibiotic ascofuranone and process for the production thereof
RU2082762C1 (ru) Способ получения 17-оксостероидов
US3880895A (en) Hydroxylation of d-13-alkyl-17{60 -ethynyl-hydroxygon-4-en-3-one and derivatures thereof
EP0505514B1 (de) VERFAHREN ZUR HERSTELLUNG VON $g(b)-CARBOLIN-DERIVATEN
US20070066579A1 (en) 5-androsten-3beta-ol steroid intermediates and processs for their preparation
HU181505B (en) Process for preparing 21-hydroxy-20-methyl-pregnane derivates
EP0272201A1 (de) Stereospezifische Ketoreduktion von Bicyclooctandion-carbonsäureestern durch Mikroorganismen
US20020035260A1 (en) 4-aza-steroids
EP0261187A1 (de) VERFAHREN ZUR HERSTELLUNG VON 17a$g(a)-HYDROXY-D-HOMO-1,4-PREGNADIEN-3,20-DION
EP0212293A2 (de) Verfahren zur mikrobiellen Hydroxylierung von Forskolin und seinen Derivaten durch Neurospora crassa
US4394312A (en) Process for preparing rifamycin derivatives
US5250712A (en) 1β,15α-dihydroxy-1α-methyl-5α-androstane-3,17-dione, its production and use
JPH0789947B2 (ja) １５α―ヒドロキシ―プロスタグランジン中間体の製法
HU212769B (en) Process for producing 4-pregnene-3,20-dione and its derivatives
PL102801B1 (pl) Sposob otrzymywania a-nor-steroidow
CS200518B2 (cs) Způsob výroby androslanových derivátů

Legal Events

Date Code Title Description
HMM4 Cancellation of final prot. due to non-payment of fee