HU205772B - Process for producing graf-analogs affecting hypophysis of mammals and pharmaceutical compositions comprising same - Google Patents

Process for producing graf-analogs affecting hypophysis of mammals and pharmaceutical compositions comprising same Download PDF

Info

Publication number
HU205772B
HU205772B HU886436A HU643688A HU205772B HU 205772 B HU205772 B HU 205772B HU 886436 A HU886436 A HU 886436A HU 643688 A HU643688 A HU 643688A HU 205772 B HU205772 B HU 205772B
Authority
HU
Hungary
Prior art keywords
leu
ala
ser
gln
tyr
Prior art date
Application number
HU886436A
Other languages
German (de)
English (en)
Other versions
HUT48908A (en
Inventor
Gerhard Breipohl
Stephan Henke
Jochen Knolle
Juergen Kurt Sandow
Original Assignee
Hoechst Ag
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Hoechst Ag filed Critical Hoechst Ag
Publication of HUT48908A publication Critical patent/HUT48908A/hu
Publication of HU205772B publication Critical patent/HU205772B/hu

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
    • C07K14/575—Hormones
    • C07K14/60—Growth hormone-releasing factor [GH-RF], i.e. somatoliberin
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Gastroenterology & Hepatology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Endocrinology (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Toxicology (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Peptides Or Proteins (AREA)

Description

A találmány tárgya emlősök hipofízisét befolyásoló új peptidek és ilyeneket tartalmazó gyógyszerkészítmények előállítására.
Anövekedési hormont felszabadító faktor (Growth Hormoné Releasing Factor, GRF) a hipotalamuszban képződik és a hipofízisben a növekedési hormon kiválasztását befolyásolja. Hyen típusú GRF(l-29)-NH2 peptideket úrnak le például a 4 626 523 számú amerikai egyesült államokbeli szabadalmi leírásban.
A találmány szerinti eljárással előállításra kerülő peptideket az © általános képlettel írjuk le:
1234567891011
X-A-B-Asp-Ala-He-Phe-E-Asn-G-Tyr-Arg1213141516171819202122
Lys-K-Leu-L-Gln-Leu-M-Ala-Arg-Lys-Leu23242526272829
Leu-Gln-Asp-He-R-T-U-Y amelyben
a) GRF 1-26 szekvencia esetén az aminosavak azonosak a természetes GRF-peptidek aminosavjaival, a 2. vagy 3. és 8. aminosav azonban D-konfigurációjú, X jelentése hidrogénatom és Y jelentése -NH-ÍCH^jj-NHj képletű csoport, ahol n értéke 4-10 közötti szám, és
b) GRF 1-27, 1-28 és 1-29 szekvenciák esetében legalább egy aminosav a természetes GRF-peptidékétól eltér, X jelentése hidrogénatom vagy 2azabiciído[3.3.0]oktán-3-karboniI-csoport, vagy ha A jelentése Tyr-től eltérő csoport, X hiányzik,
A jelentése Tyr, hidroxi-fenil-(2-5 szénatomos alkalnoil)- vagy hidroxi-fenoxi-(2-5 szénatomos alkanoil)-csoport vagy tetrahidroizokinolin-3-karbonilcsoport,
B jelentése Alá, D-Ala,
E jelentése Thr, Ser,
G jelentése Ser, Alá,
K jelentéseVal, He,
L jelentése Gly, Gin,
M jelentése Ser, Leu,
R jelentése Nle, Leu vagy vegyértékkö tés,
T jelentése Ser, Gin vagy vegyértékkötés,
U jelentése Arg vagy vegyértékkötés,
Y jelentése -NH2-csoport; vagy ha U vagy U és T vagy U, T és R jelentése vegyértékkötés, Y jelentése -NH(CH2)n-NH2-csoport - ahol n értéke 4-10 közötti szám - azzal a feltétellel, hogy ha Y jelentése -NH2 csoport Xjelentése 2-azabiciklo3.3.0]oktán-3-karbonil-csoportkellhogylegyen.
Az © általános képletű vegyületek sói lehetnek alkálifém-vagy alkáli föld fémsók, továbbá fiziológiásán elfogadható aminokkal, szervetlen vagy szerves savakkal, így például sósavval, hidrogén-bromiddal, kénsavval, foszforsavval, maleinsavval, fumársavval, citromsavval, borkősawal vagy ecetsavval képzett sók.
Amennyiben az aminosavak konfigurációját nem jelöljük külön, azok L-konfigurációjúak (Schröder, Lübke, The Peptides, I. kötet New York 1965, oldal ΧΧΗ-ΧΧΠΙ, Houben-Weyl, Methoden dér Organischen Chemie, XV/1-2. kötet Stuttgart 1974, melléklet, 1-2. oldal).
A találmány szerinti eljárással az © általános képletű peptideket és azok sóit úgy állítjuk elő, hogy
a) egy a C-terminálisonkarboxicsoportot vagy annak reakcióképes származékát tartalmazó fragmenst vagy az N-terminálison szabad aminocsoportot tartalmazó fragmenssel reagáltatunk, mimeilett az oldalláncban levő funkciós csoportok kívánt esetben védve vannak, vagy
b) a megfelelő aminosavakat - amelyek oldalláncbeli funkciós csoportjai kívánt esetben védve vannak az © általános képletnek megfelelő sorrendben kondenzáljuk, kívánt esetben valamely, a peptidkémiában szokásos hordozógyantához, majd adott esetben az a) vagy b) változat szerint nyert © általános képletű vegyületről a védőcsoportot vagy védőcsoportokat és/vagy a hordozógyantát eltávolítjuk és kívánt esetben a kapott © általános képletű vegyületet sóvá alakítjuk.
Az © általános képletű vegyületek sói előnyösen fiziológiásán elfogadható bázisokkal vagy savakkal képzett sók, amelyeket a szakterületen ismert eljárások szerint állítunk elő, például úgy, hogy egy © általános képletű vegyületet valamely szerves vagy szervetlen bázissal - pl. szerves aminokkal vagy alkálifém-vagy alkáliföldfém-hidroxidokkal - vagy savval - pl. sósavval, kénsavval, oxálsavval, ecetsawal - reagáltatunk, előnyösen inért szerves oldószer jelenlétében.
Az © általános képletű vegyületek előállítását a peptidkémiában általánosan ismert eljárások szerint végezzük (Houben-Weyl, Methoden dér organischen Chemie, 15/2 kötet), előnyösen szilárd fázisú reakciót alkalmazunk (B. Merrifield, J. Am. Chem. Soc. 85, 2149 (1963)vagy RC.Sheppard, Int. J. Peptide Protein Res.22, 118 (1983) vagy más egyéb módszer szerint járunk el. a-Amino-védőcsoportkénturetán-védŐcsoportot alkalmazunk, így például valamely következő csoportot: terc-butil-oxi-karbonil-csoport (Boc) vagy fluorenil-metil-oxi-karbonil-csoport (Fmoc).
Amennyiben a mellékreakciók meggátlása vagy speciális peptidek előállítása szükséges, az oldalláncok aminocsoport jait is védőcsoporttal látjuk el.
A szilárdfázisú reakció a C-terminálison kezdődik a védett aminocsoport megfelelő gyantához való kötésével. Az ilyen kiindulási anyagokat úgy állítjuk elő, hogy a védett aminosavat észter-, illetve amidkötéssel egy klór-metil-, hidroxi-metil-, benzhidril-amino(BHA)-, metil-benzihidril-amino(MBHA)-csoporttal módosított polísztirol- vagy poliakrilamid-gyantához kötjük.
Alkalmazhatunk továbbá speciális közvetítőcsoportokkal ellátott gyantákat is, mint amilyenek például a következő irodalmi helyeken vannakleírva:
264 802,287 882 számú európai szabadalmi leírások vagy Schally és munkatársai (Abstract of the lOth American Peptide Symposium). Általában BHA- és MBHA-, valamint a 287 882 számú európai szabadalmi leírásban ismertetett gyantákat alkalmazzuk, ha a peptidnek a C-terminálison szabad amidcsoportotkell tartalmaznia.
Miután a gyantához kötött aminosav védőcsoport2
HU 205772 Β ját a megfelelő reagens, így például metilén-kloridos trifluor-ecetsav (Boc esetében) vagy 20% piperidint tartalmazó dimetil-formamid oldat (Fmoc esetében) alkalmazásával lehasítottuk, további védett aminosavakat a kívánt sorrendben kapcsoljuk. Az in termeid ierként képződött N-terminálison védett peptidgyantát a következő amínosav-származékok kapcsolása előtt a megfelelő reagens alkalmazásával hasítjuk.
Kapcsoló-reagensként bármely, a peptidkémiában erre a célra ismert aktiváló-szer alkalmazható (Houben-Weyl, Methoden dér organischen Chemie, kötet: 15/2), előnyösen például a következőket használjuk: karbodiimidek, így például N,N’-diciklohexÍl-karbodiimid, N,N‘-diizopropil-karbodiimid vagy N-etil-N’(3-dimetil-amino-propÍl)-karbodiimid. A gyantához való kötést végezhetjük úgy, hogy az aminosav-származékot az aktiválószerrel és adott esetben a racemízálódást visszaszorító anyaggal (l-hidroxi-benzotriazol (HOBt) (W. König, R. Geiger, Chem. Bér, 103,788 (1970)) vagy 3-hidroxi-4-oxo-3,4-dihidrobenzotriazin (HOOBt) (W. König, R. Geiger, Chem. Bér. 103, 2034 (1970)) közvetlenül a gyantához adagoljuk, vagy eljárhatunk úgy is, hogy az aminosav-származékot szimmetrikus anhidrid vagy HOBt-, illetve HOOBtészter formájában külön aktiváljuk, majd alkalmas oldószerben oldva adagoljuk a kapcsolóképes peptidgyantához. A szintézishez elválasztott HOOBt-észtert is alkalmazhatunk (247 573 számú európai szabadalmileírás).
Az amínosav-származékok kapcsolását, illetve aktiválását a fentiekben említett aktiválószerekkel például dimetil-formamidban, N-metil-pirrolidonban, metilén-kloridban vagy ezen anyagok keverékében végezhetjük. Az aminosav-származékot általában 1,5— 4-szeres feleslegben alkalmazzuk. Ha a kapcsolás nem ment kielégítően végbe, a reakciót megismételjük, anélkül, hogy előzőleg a következő aminosav kapcsolásához szükséges α-amínosav-deblokkolást a peptidgyantán elvégeznénk. A reakció megfelelő végbemenetét ninhidrin -reakcióval ellenőrizzük (E. Kaiser és munkatársai, Anal. Bioche. 34 595 (1970)).
A szintézist automatizált formában is végezhetjük, például Peptide Synthsizer, Modell 430A (gyártó: Applied Biosystems) alkalmazásával akár a gyártó által megadott szintézis-program, akár a felhasználó által készített program alkalmazásával. Ez utóbbira elsősorban Fmoc-védőcsoportok alkalmazása esetében kerül sor.
A szintézis befejezése után a kapott pepiidet a gyantáról például folyékony hidrogén-fluoriddal, trifluor-ecetsawal Vagy trifliior-metánszulfonsav és trifluor-ecetsav keverékével hasítjuk le. Ezek az anyagok általában nemcsak a pepiidet hasítják le a gyantáról, hanem az amínosav-származékok oldalláncain jelenlevő további védőcsoportokat is. Ilyen esetben a felhasznált gyantától függően a pepiidet amid-f ormában nyerjük. A fentiekben említett savak alkalmazása esetében kation-megkötő anyagokat is alkalmazunk, így például fenolt, krezolt, tiokrezolt, tioanizolt, dimetilszulfidot, etil-metil-szulfidot vagy két vagy több említett anyag keverékét. A trifluor-ecetsavat alkalmas oldószerben, így például metilén-kloridban oldva, oldat formájában is alkalmazhatjuk.
Az (I) általános képletű peptideket előnyösen szilárdfázisú eljárással állítjuk elő, és az a-aminosavak átmeneti védelmére Fmoc-védőcsoportot alkalmazunk.
Az aminosav-származékok HOBt- vágy HOOBtészter formájában való aktivitását közvetlenül a készülékhez tartozó tölteten végezzük, úgy hogy feladjuk rá a diizopropil-karbodiimid dimetil-formamidos oldatát miután beadagoltuk a kimért aminosav-származék keveréket, a HöBt-t, illetve a HOOBt-t. Ha előre elkészített HOOBt-észtert alkalmazunk, azt bemérjük a hordozóba, dimetil-formamidban (DMF) vagy N-metil-pirrolidonban (NMP) oldjuk, majd a reakcióedénybe tesszük.
Az Fmoc védőcsoportok hasítását DMF-ben oldott 20%-os piperidínnel végezzük a reakcióedényben. Az aminosav-származékot 1,5-2,5 mól ekvivalens feleslegben alkalmazzuk. Amennyiben a kapcsolás nem ment teljesen végbe, a reakciót megismételjük, mielőtt a védőcsoportot lehasítanánk.
Egy előnyös szintézis-ciklus például a következő:
1) az Fmoc-csoport hasítása 20%-os DMF-os piperidin oldattal (kétszer 8-8 ml 10 percenként),
2) mosás DMF-el (hatszor, 8-8 ml DMF, illetve
NMP)
3) a töltésre HOBt- vagy HOOBt-észter formájában beadagolt előaktivált aminosav-származékok, illetve DMF-ben oldott HÓOBt-észter kapcsolása (25-45 perc), esetleges ismétléssel,
4) mosás DMF-el vagy NMP-vel (hatszor 8-8 ml)
A szintézis befejezése után először lehasítjuk a peptid-gyantáről a Fmoc-védőcsoportokat 20%-os piperidin oldattal (DMF-ben), majd a gyantát DMF-el jól átmossuk és izopropanollal és metil-terc-butil-éterrel való kezeléssel zsugorítjuk. Nagy-vákuumban való szárítás után a pepiidet trifluor-ecetsav/metilén-klorid/fenol 70-30:5 arányú elegyével 4 órán át szobahőmérsékleten kezeljük, a gyantáról való eltávolítás érdekében. Egy trifluor-ecetsav/fenol/dimetil-szulfid (90:5:5) eleggyel való utókezelés során az esetlegesen fentmaradt védőcsoportok is lehasadnak. Ezután a gyantát leszűrjük, trifluor-ecetsav/fenol/dimetil-szulfid eleggyel mossuk és a szűrletet nagy-vákuumban betöményítjük.
Ecetsav-észterrel végzett többszöri átmosással a kation-megkötő anyagot eltávolítjuk, a peptidet nagyvákuumban szárítjuk és 1 n ecetsavval Sephadex G25 superfine gyantán a még esetlegesen jelenlevő kationmegkötőt elválasztjuk. A pepiid tartalmú frakciókat fagyasztva szárítjuk és tovább feldolgozzuk. További tisztítást preparatív HPLC-módszerrel végzünk.
A találmány szerinti eljárással nyert (I) általános képletű peptidek elősegítik a növekedésihormon kiválasztását a hipofízisben. E peptidek ezért diagnosztikai célra is alkalmasak annak kimutatására, hogy a növekedési hormon felszabadult-e. Ezen túlmenően az (I) általános képletű peptidek alkalmasak növeke3
HU 205772 Β dési zavarok kezelésére, gyermekek és fiatalok növekedésének fokozására. Az (I) általános képletű peptidek alkalmasak továbbá különböző, felnőtteknél előforduló betegségek kezelésére, például: elősegítik a seb- és csonttörések gyógyulását és fehérje-építőként hatnak erős fehérje-fogyasztással járó folyamatoknál.
A találmány szerinti eljárással nyert (I) általános képletű vegyületek az állatgyógyászat, illetve állattenyésztés területén is alkalmazhatók, például növekedést gyorsító és tejhozamot növelő szerként.
A találmány szerinti eljárással nyert (I) általános képletű vegyületek a szervezetben GRF-hatással, azaz növekedési hormont felszabadító hatással rendelkeznek, amely kvantitatív szempontból teljesen azonos a természetes GRF, illetve analógjainak hatásával. A humán- és állatgyógyászat területén felhasználásra kerülő dózis ílymódon megfelel a GRF-ek, illetve azok analógjainál, a vegyületek specifikus biológiai hatásának megfelelően megállapított dózisnak.
A GRF-peptidek biológiai aktiválásának meghatározását például L. Frohman és J. Jansson ismertették (Endocrine Reviews, 7,223 /1986/). Az in-vivo vizsgálatok során hím patkányok hipofízisét a vizsgálandó peptidet különböző koncentrációban tartalmazó peptidek oldatával inkubáljuk. A hipofízis és a vizsgálandó anyag növekedési hormon-tartalmát radioimmunvizsgálattal határozzák meg (D.S. Schalch, S. Reichlin, Endocrinology79,275/1966/). Az in-vivo vizsgálatok során az uretánnal elaltatott hím patkányoknak különböző koncentrációjú vizsgálandó peptidet adnak i.v. injekció formájában, majd a plazmában radioimmun vizsgálattal meghatározzák a növekedési hormon koncentrációját.
A találmány szerinti eljárással előállított (f) általános képletű peptideket gyógyszerkészítmények formájában adagoljuk, ennek megfelelően ezek előállítása is a találmány oltalmi körébe tartozik. A találmány szerinti eljárással nyert gyógyszerkészítmények előnyösen parenterális készítmények. Az intranazális készítmények előállításánál az aktív hatóanyagot a szokásos adalékanyagokkal és hordozóanyagokkal, stabilizátorokkal vagy inért hígítóanyagokkal elkeverjük és a kívánt, adagolásra alkalmas formára hozzuk. Ezek lehetnek tabletták, pasztillák, vizes vagy olajos oldatok vagy szuszpenziók. Inért hordozóként például gumi arábíkumot, magnézium-oxidot, magnéziumkarbonátot, tejcukrot, glükózt, keményítőt, különösen kukorica-keményítőt alkalmazunk. A készítményeket előállíthatjuk száraz vagy nedves granulátumok formájában is. Olajos hordozóanyagként például növényi-vagy állati eredetű olajokat, így például napraforgóolajatvagy csukamájolajat alkalmazunk.
Szubkután vagy intravénás adagolásra alkalmas készítmények a hatóanyagon kívül még a szokásos anyagokat tartalmazzák, így például oldásközvetítő-, emulgeáló anyagokat, amelyek az oldatok, szuszpenziók, emulziók előállításához szükségesek. Oldószerként például valamely következő anyag alkalmazható: víz, fiziológiás konyhasó oldat, alkoholok, így például etanol, propándiol vagy glicerin, továbbá cukoroldatok, így például glükóz vagy mannit oldat vagy ezen anyagok keveréke. Különösen előnyös a pulzatív alkalmazási mód, amelyet például egy pumpa segítségével végzünk 3 órás szünetekkel. A készítményeket előállíthatjuk Iassú-felszabadulású készítmények formájában is, amelyek lehetnek például rudak vagy mikrokapszulák. A biológiai úton lebomlani képes, lassú feíszabadulású készítmények hordozóanyagai például a következők lehetnek: glikolsav. tejsaV vagy poli-3-hidroxi-vajsav polimerizátumok vagy kopolimerizátumok.
Az aminosavak megnevezésénél alkalmazott rövidítések megfelenek a peptidkémiában szokásosan alkalmazott három-betűs kódoknak (Europ. J. Biochem., 138 9 /1984/). Az ezeken kívül alkalmazott rövidítések jelentése a következő:
Aad a-amino-adipinsav yAbu γ-Aminovajsav Acactil-csoport
Aoc cisz, endo-2-azabicikIo[3.3.0]oktán-3-S-karbonil-csoport
BHA benzil-hidrilamino-csoport
Boc terc-butiloxi-karbonil-csopor t
DMF dimetil-formamid
Fmoc 9-fluoreniI-metÍl-oxikarboniI-csoport hArg homoarginin
HOBt 1-hidroxi-benzotriazol
HOOBt3-hidroxi-4-oxo-3,4-dihidrobenzotriazin
MBHA metil-benzhidrilamino-csoport
Mtr 4-metoxi-2,3,6-trimetil-fenil-szulfoniI-csoport
Nlenorleucin
NMP N-metil-pirrolidon
IFA trifluor-ecetsav
Tic l,2,3,4-tetrahidroizokinolin-3-karbonil-csoport
A következő példákkal a találmány szerinti eljárást közelebbről illusztráljuk.
1. példa (D-Ala2,NIe27)-GRF(l-28)-6-amino-hexilamid
1234567891011 1213
H-Tyr-D-Ala-Asp-AIa-Ile-Phe-Thr-Asn-Ser-Tyr
-Arg-Lys-Val1415161718 19 20 2122 23 24 25 2627
Leu-GIy-Gln-Leu-Ser-Ala-Arg-Lys-Leu-LeuGln-Asp-Be-NIe28
Ser-NH-(CH2(6-NH2
A peptid előállítását 1 g amino-metil-gyantán végezzük, amely egy a 264 802 számú európai szabadalmi leírásban ismertetett következő képletű kapcsolócsoporttal módosított:
C=C
Fmoc-NH-(CH2)6-NH-C0-0-CH2-C C-O-CH2COC-C
A szintézisnél Fmoc-aminosav-OObt-észtert alkalmazunk és a kapcsolást Peptide Snythesizer, Modell 430 A (Biosystems) segítségével végezzük, általunk
Ϊ HU 205 772 Β
I ί
módosított szintézis-program szerint: a gyártócég által szállított töltetre bemérünk 1 nr nól mennyiségben Fmoc-Arg(Mtr)-OH, Fmoc-Asn-C>H és Fmoc-GlnOH, valamint 0,95 mmól HOObt kiindulási anyagokat.
Az aminosavak előaktiválását közvetlenül a tölteten δ végezzük, 4 ml DMF, majd 2 ml 0,55 mólos dimetilformainidos diizopropil-karbodiimid oldat adagolásával. A többi aminosav HOOBt-észterét 6 ml NMP-ben oldjuk és hasonlóképpen mint az in situ előaktivált arginin, aszparagin és glutamin aminosavaknál, az el- 10 őzőleg deblokkolt gyantához (20%-os piperidin DMFban) kapcsoljuk, amikoris az in situ aktivált aminosavak kétszeresen vannak kapcsolva. A szintézis befejezése után a peptid-6-amino-hexilamidot az oldalláncvédőcsoportok kation-megkötőanyagként tíonizolt és 1S m-krezolt tartalmazó trifluor-ecetsavval végzett egyidejű eltávolításával a gyantáról lehasítjuk. A trifluorecetsav eltávolítása után az anyagot ecetsav-etil-észterrel többször átmossuk, majd centrifugáljuk és a kapott nyers peptidet Sephadex G25 töltetű oszlopon In . 20 ecetsavval kromatografáljuk. A tiszta pepiidet tartalmazó frakciókat egyesítjük és fagyasztva szárítjuk.
2. példa
Aoc-(Ser7Ala9,IIe13,Gln15,Leu18,Leu27,Gin28)- 25 hGRF(l-29)-amid:
12345678910111213
H-Aoc-Tyr-Ala-Asp-Ala-Ile-Phe-Ser-Asn-AJaTyr-Arg-Lys-ile1415161718192021222324252627 30
Leu-GIn-Gln-Leu-Leu-AJa-Arg-Lys-Leu-LeuGln-Asp-Ile-Leu2829 ’ '
Gln-Arg-NH2
A cún szerinti peptidet 1 g MBHA-gyantán állítjuk 35 elő. Az első aminosavat (Fmoe-Arg(Mtr)-OH9) HOObt-észter formájában in situ előaktiválva kapcsoljuk a gyantához. . .
Apeptid-szintézíst az 1. példában leírtak szerint végezzük Fmoc-aminosav-OObt-észterek és az l. példa 40 szerinti szintetizátor és általunk módosított szintézis program Szerint: a töltetre bemérünk 1-1 mmól megfelelő. aminosav-származékot, Fmoc-Arg(Mtr)-OH, .· Fmoc-Asn-OH és Fmoc-Gln-OH kiindulási anyagot 0,95 mmól HOBt-vel együtt. Az aminosavak előakti- 45 válását 4 ml DMF és 2 ml 0,55 mólos dimetil-formamidos diizopropil-karbodiimid oldat adagolásával· kö^yetlenülaitölteten végezzük. A HOObt-észtert és a többi aminosavat 6 ml NMP-ben oldjuk és az in situ előaktivált arginin, aszparagin és glutamin aminosa- 50 vakhoz hasonlóan az előzőleg deblokkolt gyantához . kapcsoljuk. Az in situ aktivált aminosavakat kétszeresen kapcsoljuk. A szintézis befejezése után a peptidaminról először kation-megkötőként tioanizolt és mkrezolt tartalmazó trifluor-ecetsavval való kezeléssel 55 azoldallánc-védőcsoprtokat távolítjuk el, majd a peptidamint 10% trifluor-metánszulfonsavat és a fenti kajipo-naégkötő (anyagokat tartalmazó trifluor-ecetsavval először 0 °C-on, majd szobahőmérsékleten végzett kezeléssel a gyantáról lehasítjuk, majd a gyantát 60 jéghideg metil-terc-butil-éterrel elkeverjük, leszívatjuk, kevés THF-nal átmossuk és centrifugáljuk. A kapott csbadékot ismételten metil-terc-butil-éterrel kezeljük, centrifugáljuk és vákuumban az oldószermaradék 3t is eltávolítjuk. A kapott csapadékot vízben oldjuk és rögtön anioncserélőn acetát-formára alakítjuk. A kapott nyers peptidet ezutáp Sephadex G25 gyantán In ecetsavval kromatografáljuk, a tiszta peptidet tartalmazó frakciókat egyesítjük é$ fagyasztva szárítjuk
Az 1. példában leírtak szerint a következő peptideket állítottuk még elő:
3. példa (D-Ala2 Ala9,Ile13,Gin15,Leu18,Nle27)- GRF(118)-8-amino-oktilamid:
12345678910111213 H-Tyr-D-AIa-Asp-Ala-He-Pbe-Thr-Asn-Ala-Try
-Arg-Lys-Ile14 15 16171819 20212223 24252627 Leu-Gln-Gln-Lei-Lei-Ala-Arg-Lys-Leü-LeuGln-Asp-He-NIe28
Ser-NH-(CH2)8-NH2
A 2. példában leírtak szerint a következő peptideket állítjuk elő:
4. példa .
; Aoc-(D-Ala2,Ser7ÁJa 9,Iie13.Gln15,Leu18,Nle27( -hGRF(l-29j-ariud:
123456789101112
H-Aoc-Tyr-D-Ála-Asjj-Ala-Íle-Phe-Ser-Asn-Ala
-Tyr-Arg-Lys- ' :'
1314151617181920212223242526 Ile-Leu-Gbi-Glff-Leu-Leu-Ala-Afg-Lys-LeuLeu-Gln-Asp-He272829 . Nle-Ser-Arg-NH2
5. példa (Tic1,D-Ala2,Ser7Ala9Hel3Gln15,Leu18Jlíle27)hGRF(l-29)-amid:
12345678910111213
H-Tic-D-Ala-Asp-Ala-lle-Phe-Ser-Asn-Ala-Tyr
-Arg-Lys-Ile- . . , .
1415161718 19 20 212223 2425 2627 Leu-Gln-Gln-Leü-Leu-Ala-Árg-Lys-Leu-LeuGln-Asp-Ilé-Nle- j 2829
Ser-Arg-NH2
Az 1. példa szerint a következő peptideket állítjuk elő:
6. példa (D-Ala2,Gln15,Nle27Gln28)- GRF(l-18)-8-amino-oktilamid:
1234567891011121314
H-Tyr-D-Ala-Asp-Ala-fle-Phe-Tbr-Asn-Ser-Tyr
-Arg-Lys-Val-Leu1516171819202122232425262728
HC 205772 Β . Glii-Gln-Lfeu-Ser-AIa-Arg-Lys-Leu-Leu-GlnÁsp-né-Nle-Gín-NH(CH2)8-NH2
7. példa (D-AIa2,GIn15^íIe27,Gln28(- GRF(l-28)-6-amino-hexilamid:
12345678910111213
H-Tyr-D-Ala-Asp-AJa-Ile-Phe-Thr-Asn-Ser-Tyr
-Arg-Lys-Val14151617181920 2122 23 24 25 26 27 Leu-Gln-Gln-Leu-Ser-Ala-Arg-Lys-Leu-LeuGln-Asp-IIe-NIe28
Gln-NH-(CH2)6-NH2
Aoc-(D-Ala21GlnI5,Nle27Gln28)- GRF(l-28)-8amíno-oktilanud:
123456789101112
H-Aoc-Tyr-D-Ala-Asp-Ala-Ile-Phe-Thr-Asn-Ser
-Tyr-Arg-Lys13141516171819 20 2122 23 24 25 26 Val-Leu-GIn-Gln-Leu-Ser-Ala-Arg-Lys-LeuLeu-Gln-Asp-Ile2728 . Nle-GIn-NH-(CH2)8-NH2
9. példa
Aoc-(D-Ala2GIn15,NIe27(Gln28)- GRF(l-18)-6amino-hexilamid:
123456789101112
H-Aoc-Tyr-D-Ala-Asp-AJa-Ile-Phe-Thr-Asn-Ser
-Tyr-Arg-Lys.13141516171819 20 2122 23 24 2526 Val-Leu-Gln-Gln-Leu-Ser-Ala-Arg-Lys-LeuLeu-Gln-Asp-He2728
NIe431n-NH-(CH2)6-NH2
10. példa (D-Ala2J41e27)-GRF(l-27)-8-aminű-oktilamid:
123456789101112
H-Tyr-D-Ala-Asp-Ala-He-Phe-Thr-Asn-Ser-Tyr
-Arg-Lys131415161718 19 20 212223 2425 26 Val-Leu-Gly-Gln-Leü-Ser-Ala-Arg-Lys-LeuLeu-Gln-Asp-He
NIe-NH-(CH2)8-NH2
11. példa (4-hidroxi-fenoxi-acetil)1 -(D-Ala2, Nle27) GRF(l-28)-6-amino-hexilamid:
123456789101112
4-HPA-D-Ala-Asp-Ala-Ile-Phe-Thr-Asn-Ser-Tyr
-Arg-Lys13141516171819 20 2122 23 24 25 26 Val-Leu-Gly-Gln-Leu-Ser-Ala-Arg-Lys-LeuLeu-Gln-Asp-He2728
NIe-Ser-NH-(CH2)6-NH2
12. példa (4-hidroxiI-fenil-propionil)1-(D-Ala2Jíle27)-GR
F(1 -28)-6-amíno-hexiIamid:
123456789101112
4-HPP-D-Ala-Asp-Ala-Ile-Phe-Thr-Asn-Ser-Tyr
-Arg-Lys1314151617181920212223242526
Val-Leu-Gly-Gln-Leu-Ser-Ala-Arg-Lys-LeuLeu-Gln-Asp-He2728
Nle-Ser-NH-(CH2)6-NH2
13. példa (D-Ala2,Nle27)-GRF(l-28)-4-amino-butilamid;
12345678910111213
H-Tyr-D-Ala-Asp-Ala-He-Phe-Thr-Asn-Ser-Tyr
-Arg-Lys-Val1415161718192021222324252627
Leu-Gly-GIn-Leu-Ser-Ala-Arg-Lys-Leu-LeuGln-Asp-He-NIe28
Ser-NH-(CH2)4)NH2
14. példa
Aoc-(D-Ala2,Nle27)- GRF(l-28)-6-amino-hexilamíd:
123456789101112
H-Aoc-Tyr-D-Ala-Asp-Ala-Be-Phe-Thr-Asn-Ser
-Tyr-Arg-Lys1314151617181920212223242526
Val-Leu-Gly-Gln-Leu-Ser-AIa-Arg-Lys-LeuLeu-Gln-Asp-Ile- 2728 .
Nle-Ser-NH-(0GT2)6-NH2 . · ; .
15. példa
D-Aoc-(D-AIa2Nle27)-GRF(l-28)-6-amino-hexilamid:
123456789101112 .· '
H-D-Aoc-Tyr-D-Ala-Asp-Ala-Hé-Phe-Thr-AsnSer-Tyr-Arg-Lys- - ;/·. 1314151617181920212223242526- ιπκVal-Leu-Gly-Gln-Leu-Ser-Ala+Arg-Lys-LeuLeu-Gln-Asp-HeNle-Ser-NH-(CH2)6-NH2
16. példa . ·.
(D-Ala2,Nle27)-GRF(l-27)-6-amino-héXilamid:-712345678910111213' imő tói?:
H-Tyr-D-Ala-Asp-AIa-He-Pbe-TíürjAsn-*Seiií’nyr'-u
-Arg-Lys-Val- .[, τη nsoiü® y, faa 14 15161718 19 20 212223 24252627 r Leu-Gly-Gln-Leu-Ser-Ala-Arg-Lys-Leu-LeuGln-Asp-Ile-NleNH-(CH2)6-NH2
17. példa /i-'íoyfirsi ίοίΐΐ&ί.·-Aoc-(D-Ala2,Nle27)mid: . «·. .íjü-íZ 0 í&aifc tsviir.
123456789101112 -’otójRí
HU 205772 Β
H-Aoc-Tyr-D-Ala-Asp-Ala-Ile-Phe-Thr-Asn-Ser
-Tyr-Arg-Lys1314151617181920212223242526 Val-Leu-Gly-Gln-Leu-Ser-Ala-Arg-Lys-LeuLeu-Gln-Asp-He- 5
Nle-NH-(CH2)8-NH2
18. példa (D-Ala2,Nle27)-GRF(l -27)-4-annno-butilamid: 12345678910111213 10
H-Tyr-D-Ala-Asp-Ala-Ile-Phe-Thr-Asn-Ser-Tyr
-Arg-Lys-Val141516171819 20 2122 23 24 25 26 27 Leu-Gly-Gln-Leu-Ser-Ala-Arg-Lys-Leu-LeuGln-Asp-He-NleNH-(CH2)4-NH2
19. példa (D-Ala2)-GRF(l-26) -8-amÍno-oktilamid: 12345678910111213 20
H-Tyr-D-Ala-Asp-Ala-He-Phe-Thr-Asn-Ser-Tyr
-Arg-Lys-Val
14151617181920212223242526
Leu-Gly-Gln-Leu-Ser-Ala-Arg-Lys-Leu-LeuGln-Asp-He-NH(CH2)8-NH2 példa (D-Asp3,D-Asn8)-GRF(l-26)-4-amino-butilainid:
12345678910111213
H-Tyr-Ala-D-Asp-Ala-Ile-Phe-Ihr~D-Asn-SerTyr-Arg-Lys-Val14151617181920212223242526
Leu-Gly-Gln-Leu-Ser-Ala-Arg-Lys-Leu-LeuGln-Asp-Ile-NH(CH2)4-NH2
Az előző 1-20. példák szerint előállított peptidek aminosav-analizisét, amelyet 120 ’C-on 6 n sósavval 12 órán át végzett hidrolízis után végeztünk, az alábbiakban adjuk meg %-os értékben kifejezve.
Példa
száma 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10
Asp 2,95 3,02 2,97 2,89 2,95 2,93 2,96 2,98 3,03 ,2,93
Thr 0,90 - 0,88 - - 0,92 0,85 0,91 0,89 0,90
Ser 2,65 0,91 0,86 1,81 1,78 1,81 1,78 1,81 1,79 1,78
Gin 2,01 3,96 2,98 3,01 2,98 4,01 3,96 4,02 3,98 2,01
Gly 0,98 - - - - - - - - 0,99
Alá 2,96 3,91 3,93 3,95 3,94 2,95 2,97 2,96 2,96 2,97
Val 0,97 - - - - 0,98 1,01 0,97 0,99 0,98
He 1,96 2,93 2,96 2,97 2,93 1,96 1,98 1,96 1,97 1,97
Leu 4,02 6,00 4,96 4,93 5,01 3,98 3,99 4,01 3,98 3,97
Nle 1,00 - 1,00 1,00 1,00 1,00 1,00 1,00 1,00 1,00
Tyr 1,72 1,68 1,71 1,69 0,85 1,76 1,68 1,74 1,75 1,72
Phe 0,98 0,95 0,97 0,97 0,98 0,98 0,98 0,96 0,98 0,97
Lys 1,98 1,96 1,97 2,01 1,98 1,98 1,96 1,97 1,98 2,02
Arg 1,99 2,98 1,98 2,97 2,98 . 1,99 2,01 1,97 1,99 1,98
Asp 3,02 2,98 2,97 2,97 2,98 2,96 2,95 2,98 2,99 2,97
Thr 0,88 0,87 0,85 0,87 0,90 0,88 0,89 0,89 0,90 0,88
Ser 2,66 2,68 2,65 2,71 2,71 1,72 1,73 1,69 1,72 1,69
Glu 1,99 2,01 2,01 1,99 1,98 1,98 1,97 1,99 2,01 1,99
Gly 0,99 0,98 0,98 0,98 0,999 0,97 0,98 0,99 0,98 0,98
Alá 2,96 2,97 2,96 2,98 2,98 2,95 2,98 2,98 2,97 2,97
Val 0,99 0,98 0,98 0,97 0,99 0,97 0,98 1,01 1,00 1,00
He 1,97 1,97 1,98 1,98 1,98 1,98 1,97 1,98 1,98 1,98
Leu 3,96 4,01 3,97 3,98 3,97 3,98 4,02 3,98 4,00 3,98
Nle 1,00 1,00 1,00 1,00 1,00 1,00 1,00 1,00 - -
Tyr 0,85 0,87 1,71 1,74 1,76 1,75 1,69 1,76 1,73 1,75
Phe 0,97 0,98 0,95 0,97 0,98 0,96 0,98 0,98 0,97 0,98
Lys 1,97 1,98 1,98 1,99 1,97 1,98 1,97 1,97 1,98 1,98
Arg 1,98 1,98 1,97 1,98 1,98 1,97 1,98 1,99 1,98 1,98
HU 205772 Β
Az 1-20. példák szerint előállított GRF-analógokat HPLC-el járással azonosítottuk, a kapott Rf értékek a kővetkezők:
Példa száma: HPLCvizsg. körülmények Rférték (perc)
1. A 33,8
2. B 22,0
3. C 13,9
4. D 18,2
5. C 13,4
6. C 13,7
7. E 19,7
8. E 20,7
9. E 20,6
10. A 32,3
11. A 33,5
12. A 33,8
13. A 32,4
14. A 31,9
15. A 33,2
16. D 17,9
17. A 33,6
18. A 32,6
19. C 13,6
20. A 32,3
HPLC vizsgálat körülményei:
A. oszlop: 10 m, 250 x 4 mmm, Vydac C4, áramási seb.: 1 ml/p, szobahőmérséklet, detektálás: 215 nm,
Aoldószer: 0,1%-os trifluor-ecetsav,
B oldószer: acetonitril/víz=4/1,
Oldószer gradiens: idő/p, %B
0 10
1 10
35 60
40 100
B: oszIop:10m,250 x4mm,VydacC4, áramlási seb.: 1 ml/p, 40 'C, detektálás: 215 nm, AoIdószer:0,1%-os trifluor-ecetsav, B oldószer: acetronitril/víz - 4/1, Oldószer gradiens: idő (p) %B
0 40
30 50
C: oszlop: 10 m, 250 x 4 mm, Vydac C4, áramlásiseb.: 1 ml/p, 40 ’C, detektálás: 215 nm, Aoldószer: 0,1%-os trifluor-ecetsav, B oldószer, acetronitril/víz=4/1, oldószer gradiens: idó φ) %B
0 40
30 80
D: oszlop: 10 m, 250 x4 mm, Vydac C4, áramlási seb.: 1 ml/p, 40 ’C, detektálás: 215 nm, A oldószer: 0,1%-os trifluor-ecetsav, B oldószer: acetronitril/víz=4/1, Oldószer gradiens: idő (p) %B
0 40
30 90
E: oszlop: 10 m, 250 x4mm,VydacC4, áramlási seb.: 1 ml/p, 40 ’C, detektálás: 215 nm,
Aoldószer: 0,1%-os trifluor-ecetsav, B oldószer: acetronitril/víz -4/1,
Oldószer gradiens: idő φ) %B
0 30
30 70

Claims (5)

  1. SZABADALMIIGÉNYPONTOK
    1. Eljárás (I) általános képletnek megfelelő GRFanalógok és gyógyászatílag elfogadható sóik előállítására-aképletben
    1234567891011
    X-A-B-Asp-Ala-He-Phe-E-Asn-G-Tyr-Arg1213 141516171819202122
    Lys-K-Leu-L-GIn-Leu-M-Ala-Arg-Lys-Leu23242526272829
    Leu-Gln-Asp-He-R-T-U-Y
    i) GRF1-26 szekvencia esetén az aminosavak azonosak a természetes GRF-peptidek aminosavjaival, a 2. vagy 3. és 8. aminosav azonban D-konfigurációjú, X jelentése hidrogénatom és Y jelentése -NH-(CH2)n-NH2 képletű csoport, ahol n értéke 4-10 közötti szám, és ii) GRF 1-27, 1-28 és 1-29 szekvenciák esetében legalább egy aminosav a természetes GRF-peptidekétől eltér, X jelentése hidrogénatom vagy 2azabíciklo[3.3.0]oktán-3-karboniI-csoport, vagy ha A jelentése Tyr-től eltérő csoport, Xhiányzik,
    A jelentése Tyr, hidroxi-fenü-(2-5 szénatomos alkalnoil)- vagy hidroxi-fenoxi-(2-5 szénatomos alkanoil)-csoport vagy tetrahidroizokinolin-3-karboniI-csoport,
    B jelentése Alá, D-Ala,
    E jelentése Thr, Ser,
    G jelentése Ser, Alá,
    K jelentése Val, He,
    L jelentése Gly, Gin,
    M jelentése Ser, Leu,
    R jelen tése Nle, Leu vagy vegyértékkötés,
    T jelentése Ser, Gin vagy vegyértékkötés, UjelentéseArgvagyvegyértékkötés, ‘
    Y jelentése -NH2-csoport; vagy ha U vagy U és T vagy U, T és R jelentése vegyértékkötés, Y jelentése -NH(CH2)n-NH2-csoport - ahol n értéke 4-10 közötti szám - azzal a feltétellel, hogy ha Y jelentése -NH2 csoport X jelentése 2-azabiciklo3.3.0]oktán-3-karbonil-csopor t kell hogy legyen azzal jellemezve, hogy
    a) egy a C-terminálison karboxicsoportot vagy annak reakcióképes származékát tartalmazó fragmenst vagy az N-terminálison szabad aminocsoportot tartalmazó fragmenssel reagáltatunk, mimellett az oldalláncban levő funkciós csoportok kívánt esetben védve vannak, vagy
    b) a megfelelő aminosavakat - amelyek oldalláncbeli funkciós csoportjai kívánt esetben védve vannak az (I) általános képletnek megfelelő sorrendben
    HU 205772 Β kondenzáljuk, kívánt esetben valamely, a peptidkémiában szokásos hordozógyantához, majd adott esetben az a) vagy b) változat szerint nyert © általános képletű vegyületről a védőcsoportot vagy védőcsoportokat és/vagy a hordozógyantát eltávolítjuk és kívánt esetben a kapott © általános képletű vegyületet sóvá alakítjuk. (Elsőbbsége: 1988.12.15.)
  2. 2, Eljárás © általános képletnek megfelelő GRFanalógok gyógyászatílag elfogadható sóik előállítására -aképletben
    1234567891011
    X-A-B-Asp-Ala-Be-Phe-E-Asn-G-Tyr-Arg1213141516171819202122
    Lys-K-Leu-L-Gln-Leu-M-AIa-Arg-Lys-Leu23242526272829
    Leu-Gln-Asp-Ue-R-T-U-Y
    GRF1-27,1-28 és 1-29 szekvenciák esetében legalább egy aminosav a természetes GRP-peptidekétől eltér, X jelentése hidrogénatom vagy 2-azabiciklo[
  3. 3.3,0]oktán-3-karbonil-csoport, vagy ha A jelentése Tyr-től eltérő csoport, X hiányzik,
    A jelentése Tyr, hidroxi-fenil-(2-5 szénatomos alk&lnoil)- vagy hidroxi-fenoxi-(2-5 szénatomos alkanöil)-csoport vagy tetrahidroizokinolin-3-karboniI-csoport,
    B jelentése Alá, D-Ala,
    E jelentése Thr, Ser,
    G jelentése Ser, Alá,
    K jelentése Val, Ile,
    L jelentése Gly, Gin,
    M jelentése Ser, Leu,
    R jelentése Nle, Leu vagy vegyértékkötés,
    T jelentése Ser, Gin vagy vegyértékkötés,
    U jelentése Arg vagy vegyértékkötés,
    Y jelentese -NH2-csoport; vagy ha U vagy U és T vagy U, T és R jelentése vegyértékkötés, Y jelentése -NH(CH2)n-NH2-csoport - ahol n értéke 4-10 közötti szám - azzal a feltétellel, hogy ha Y jelentése -NH2 csoport X jelentése 2-azabiciklo3.3.0]oktán-3-karbonil-csoport kell hogy legyen azzaljellemezve, hogy
    a) egy a C-terminálison karboxicsoportot vagy annak reakcióképes származékát tartalmazó fragmenst vagy az N-terminálison szabad aminocsoportot tartalmazó fragmenssel reagáltatunk, mimellett az oldallánchan levő funkciós csoportok kívánt esetben védve vannak, vagy
    5 b) a megfelelő aminosavakat - amelyek oldalláncbeli funkciós csoportjai kívánt esetben védve vannak az © általános képletnek megfelelő sorrendben kondenzáljuk, kívánt esetben valamely, a peptidkémiában szokásos hordozógyantához,
    10 majd adott esetben az a) vagy b) változat szerint nyert © általános képletű vegyületről a védőcsoportot vagy védőcsoportokat és/vagy a hordozógyantát eltávolítjuk és kívánt esetben a kapott © általános képletű vegyületet sóvá alakítjuk. (Elsőbbsége: 1988.12,16.)
    15 3. A 2. igénypont szerinti eljárás a következő képletnek megfelelő GRF-peptid vagy gyógyászatílag elfogadható sója előállítására
    12345678910111213
    H-Aoc-Tyr-Ala-Asp-Ala-Ile-Phe-Ser-Asn-Ala20 Tyr-Arg-Lys-ile1415161718192021222324252627 Leu-Gln-Gln-Leu-Leu-Ala-Arg-Lys-Leu-LeuGln-Asp-Be-Leu2829
    25 Gln-Arg-NH3 azzal jellemezve, hogy a megfelelő kiindulási vegyületeket alkalmazzuk. (Elsőbbsége: 1987.12.16.)
  4. 4. Eljárás gyógyszerkészítmények előállítására, azzal jel lemezve, hogy valamely az 1. igénypont szerint 30 előállított © általános képletű vegyület vagy gyógyászatilag elfogadható sóját - a képletben X, A - Y jelentése az 1. igénypont szerinti - gyógyászatílag elfogadható hordozóanyaggal és/vagy egyéb segédanyaggal
    Összekeverjük és adagolásra alkalmas gyógyszerkészítménnyé alakítjuk. (Elsőbbsége: 1988.12.15.)
  5. 5, Eljárás gyógyszerkészítmények előállítására, azzal jellemezve, hogy valamely az 2. igénypont szerint előállított © általános képlet vagy gyógyászatílag elfogadható sóját - a képletben X, A - Y jelentése az 1. igénypont szerinti - gyógyászatílag elfogadható hordozóanyaggal és/vagy egyéb segédanyaggal összekeverjük és adagolásra alkalmas gyógyszerkészítménnyé alakítjuk. (Elsőbbsége: 1987.12.16.)
HU886436A 1987-12-16 1988-12-15 Process for producing graf-analogs affecting hypophysis of mammals and pharmaceutical compositions comprising same HU205772B (en)

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
DE19873742633 DE3742633A1 (de) 1987-12-16 1987-12-16 Peptide mit beeinflussender wirkung auf die hypophyse von saeugern

Publications (2)

Publication Number Publication Date
HUT48908A HUT48908A (en) 1989-07-28
HU205772B true HU205772B (en) 1992-06-29

Family

ID=6342736

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
HU886436A HU205772B (en) 1987-12-16 1988-12-15 Process for producing graf-analogs affecting hypophysis of mammals and pharmaceutical compositions comprising same

Country Status (11)

Country Link
EP (1) EP0320785A3 (hu)
JP (1) JPH01199997A (hu)
KR (1) KR890009977A (hu)
AU (1) AU619777B2 (hu)
DE (1) DE3742633A1 (hu)
DK (1) DK698188A (hu)
FI (1) FI885780A (hu)
HU (1) HU205772B (hu)
IL (1) IL88681A0 (hu)
NO (1) NO885580L (hu)
PT (1) PT89225A (hu)

Families Citing this family (7)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4962080A (en) * 1988-03-08 1990-10-09 Kanzaki Paper Mfg. Co., Ltd. Image-receiving sheet for thermal dye-transfer recording
US5028582A (en) * 1988-04-07 1991-07-02 Matsushita Electric Industrial Co., Ltd. Receiving sheets for dye transfer type thermal printing
DE68928372T2 (de) * 1988-11-10 1998-04-30 Dainippon Printing Co Ltd Bildempfangsschicht für Übertragung durch Wärme
DE69014115T2 (de) * 1989-06-16 1995-05-24 Upjohn Co Stabilisierte, starke grf-analoga.
US5756458A (en) * 1989-06-16 1998-05-26 Pharmacia & Upjohn Company Stabilized potent GRF analogs
EP0413839A1 (en) * 1989-08-22 1991-02-27 The Administrators of The Tulane Educational Fund GHRH analogs
ATE204881T1 (de) * 1995-05-26 2001-09-15 Theratechnologies Inc Chimäre lipidkörper-pro-grf analoge mit erhöheter biologischer potenz

Family Cites Families (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
AU575843B2 (en) * 1983-08-10 1988-08-11 The Administrators Of The Tulane Eductional Fund Growth hormone releasing peptides
US4528190A (en) * 1983-10-25 1985-07-09 The Salk Institute For Biological Studies GRF Analogs IV
US4659693A (en) * 1984-04-30 1987-04-21 Syntex (U.S.A.) Inc. N,N'-dialkyl substituted guanidino amino acyl residue substituted GRF-analog peptides
CA1271600A (en) * 1985-01-07 1990-07-10 David Howard Coy Growth hormone-releasing peptides and method of treating mammals therewith
US4689318A (en) * 1985-08-29 1987-08-25 The Salk Institute For Biological Studies GRF analogs
IL84758A (en) * 1987-01-13 1992-03-29 Salk Inst For Biological Studi Peptides stimulating the release of pituitary growth hormone in fish and amphibians,and pharmaceutical compositions containing them

Also Published As

Publication number Publication date
EP0320785A2 (de) 1989-06-21
DK698188D0 (da) 1988-12-15
FI885780A0 (fi) 1988-12-14
EP0320785A3 (de) 1990-07-11
AU619777B2 (en) 1992-02-06
HUT48908A (en) 1989-07-28
NO885580L (no) 1989-06-19
DK698188A (da) 1989-06-17
FI885780A (fi) 1989-06-17
AU2684388A (en) 1989-06-22
JPH01199997A (ja) 1989-08-11
IL88681A0 (en) 1989-07-31
DE3742633A1 (de) 1989-06-29
PT89225A (pt) 1989-12-29
KR890009977A (ko) 1989-08-05
NO885580D0 (no) 1988-12-15

Similar Documents

Publication Publication Date Title
JP2944669B2 (ja) ペプチド、その製造法、該ペプチドを含有する、ｌｈｒｈ拮抗剤
FI83660B (fi) Foerfarande foer framstaellning bukspottskoertelns grf hos maenniskan.
JPH07121956B2 (ja) ブラジキニンアンタゴニスト作用を有するペプチド
SK435783A3 (en) Synthetic peptides, biologically active fragment and non-toxic synthetic peptide salt
US8227421B2 (en) Fluorinated GHRH antagonists
CA2718146C (en) Novel n- and c-terminal substituted antagonistic analogs of gh-rh
EP0914340B1 (en) hGH-RH(1-29)NH2 ANALOGUES HAVING ANTAGONISTIC ACTIVITY
RU2335506C2 (ru) Пептидные аналоги gh-rh с антагонистическим действием, способ снижения уровня gh, способ снижения уровня igf-i и igf-ii, применение для ингибирования роста раковых клеток, фармакологически приемлемая композиция (варианты)
US7026281B1 (en) Antagonistic analogs of GH-RH inhibiting IGF-I and -II
KR20150005904A (ko) 강력한 작용제 효과를 지닌 신규한 ｇｈ-ｒｈ 유사체
WO1997042223A9 (en) hGH-RH(1-29)NH2 ANALOGUES HAVING ANTAGONISTIC ACTIVITY
DE3811193A1 (de) Neue peptide, verfahren zu ihrer herstellung und diese peptide enthaltende pharmazeutische zusammensetzungen
HU205772B (en) Process for producing graf-analogs affecting hypophysis of mammals and pharmaceutical compositions comprising same
FI79716C (fi) Daeggdjur-pgrf.
JPH01129000A (ja) 環式ペプチド
RU2083586C1 (ru) Пептиды или их физиологически приемлемые соли

Legal Events

Date Code Title Description
HMM4 Cancellation of final prot. due to non-payment of fee