HU200658B - Process for extermination of cotton-seed weevil, colorado beetle, lucerne-leaf weevil and maize gall nematode by using bacillus thuringiensis towin - Google Patents

Process for extermination of cotton-seed weevil, colorado beetle, lucerne-leaf weevil and maize gall nematode by using bacillus thuringiensis towin Download PDF

Info

Publication number
HU200658B
HU200658B HU871268A HU126887A HU200658B HU 200658 B HU200658 B HU 200658B HU 871268 A HU871268 A HU 871268A HU 126887 A HU126887 A HU 126887A HU 200658 B HU200658 B HU 200658B
Authority
HU
Hungary
Prior art keywords
strain
bacillus thuringiensis
spores
san diego
cotton
Prior art date
Application number
HU871268A
Other languages
English (en)
Other versions
HUT42920A (en
Inventor
Corinna Herrnstadt
George G Soares
Original Assignee
Mycogen Corp
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Mycogen Corp filed Critical Mycogen Corp
Publication of HUT42920A publication Critical patent/HUT42920A/hu
Publication of HU200658B publication Critical patent/HU200658B/hu

Links

Classifications

    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C12BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12NMICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N1/00Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
    • C12N1/20Bacteria; Culture media therefor
    • C12N1/205Bacterial isolates
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A01AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
    • A01NPRESERVATION OF BODIES OF HUMANS OR ANIMALS OR PLANTS OR PARTS THEREOF; BIOCIDES, e.g. AS DISINFECTANTS, AS PESTICIDES OR AS HERBICIDES; PEST REPELLANTS OR ATTRACTANTS; PLANT GROWTH REGULATORS
    • A01N63/00Biocides, pest repellants or attractants, or plant growth regulators containing microorganisms, viruses, microbial fungi, animals or substances produced by, or obtained from, microorganisms, viruses, microbial fungi or animals, e.g. enzymes or fermentates
    • A01N63/20Bacteria; Substances produced thereby or obtained therefrom
    • A01N63/22Bacillus
    • A01N63/23B. thuringiensis
    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C07ORGANIC CHEMISTRY
    • C07KPEPTIDES
    • C07K14/00Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • C07K14/195Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from bacteria
    • C07K14/32Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from bacteria from Bacillus (G)
    • C07K14/325Bacillus thuringiensis crystal peptides, i.e. delta-endotoxins
    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C12BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12RINDEXING SCHEME ASSOCIATED WITH SUBCLASSES C12C - C12Q, RELATING TO MICROORGANISMS
    • C12R2001/00Microorganisms ; Processes using microorganisms
    • C12R2001/01Bacteria or Actinomycetales ; using bacteria or Actinomycetales
    • C12R2001/07Bacillus
    • C12R2001/075Bacillus thuringiensis
    • YGENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
    • Y10STECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10S435/00Chemistry: molecular biology and microbiology
    • Y10S435/8215Microorganisms
    • Y10S435/822Microorganisms using bacteria or actinomycetales
    • Y10S435/832Bacillus

Landscapes

  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • Gastroenterology & Hepatology (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Crystallography & Structural Chemistry (AREA)
  • Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
  • Agronomy & Crop Science (AREA)
  • Pest Control & Pesticides (AREA)
  • Plant Pathology (AREA)
  • Dentistry (AREA)
  • Environmental Sciences (AREA)
  • Agricultural Chemicals And Associated Chemicals (AREA)
  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
  • Peptides Or Proteins (AREA)

Description

A találmány tárgya eljárás gyapotmag-ormányos, burgonyabogár, lucemaormányos és kukorica gyökérféreg irtására, Bacillus thuringiensis toxin alkalmazásával.
A Bacillus thuringiensis (Bt) faj egy rovarokra ható méreganyagot, úgynevezett delta-endotoxint termel. A delta-endotoxint a Bt spórázó telepei bioszintetizálják. Miután a kristályos alakban levő toxint az erre érzékeny rovarlárvák elfogyasztják, a méreganyag a rovar bélnedveiben található proteázok közreműködésével biológiailag hatásos vegyületekké alakul. A hatás elsődleges célpontjai a rovar bél-epitéliumának sejtjei, melyek a toxin hatására gyorsan elpusztulnak.
A korábbi leírások szerint a Bt hatásköre a Lepidoptera rendbe tartozó rovarfajokra terjed ki, ezek között igen sok mezőgazdasági és erdészeti kártevő akad. Az aktivitási spektrum kiterjed a Diptera rovarrendre is, ahová a szúnyogok és a tripszek tartoznak. Lásd még: Couch (1980), Mosquito Pathogeninicity of Bacillus thuringiensis var. israelensis, Developments in Industrial Microbiology, 22, 61-76; továbbá Beegle, 1978, „Use of Entomogenous Bacteria in Agroecosystems”, Developments in Industrial Microbiology, 20, 97-104. Lásd még: Krieg és munkatársai közleményét [Z. ang. Ént., 96, 500-580., 1983], akik leírják azt a Bt izolátumot, amelyet Bacillus thuringiensis var. tenebrionis-nak neveztek el, és amely a beszámoló szerint két, a Coleoptera rendbe tartozó bogarak ellen hatásosnak bizonyult. E két faj a burgonyabogár, a Leptinotarsa decemlineata és az Agelastica alni.
A jelen leírás előzményeiben, a 714,790 számú szabadalmi leírásban leírtunk egy, a Coleoptera rendbe tartozó rovarokkal szemben hatásos új, Bt izolátumot.
Nem közöltük azonban a gyapotmag-ormányos (Anthonomus grandis), a burgonybogár (Leptinotarsa decemlineata), a lucemaormányos (Hypera postica), vagy a kukorica gyökérféreg (Diabrotica longicomis) elleni hatékonyságát. A későbbiekben megállapítottuk azt is, hogy ez a Bt izolátum nem minden vizsgált Coleoptera ellen hatékony. Lásd még a későbbi, I. táblázatot is.
A gyapotmag-ormányos vizsgálata
A gyapotmag-ormányos egyike a legközismertebb mezőgazdasági rovarkártevőknek a világon. Előfordul Közép- és Dél-Amerika, valamint az Egyesült Államok valamennyi fontosabb gyapottermelő körzetében, Kalifornia egyes részeinek kivételével. Ahol jelen van, ott ez a gyapot fő rovarkártevője. A kárt a kifejlett állatok és a lárvák okozzák. A kifejlett rovarok megrágják, illetve megszúrják a bimbót és a magot, és hosszú, vékony ormányuk segítségével táplálkoznak a belső szövetekből. Petéiket az így létrejött üregekbe helyezik, a kikelő lárvák pedig belefúrják magukat a magba illetve a bimbóba, a bimbó lehullását vagy a növényen való elhervadását, elszáradását okozva. Táplálkozásuk vagy közvetlenül a virág elpusztulását, vagy a termés gyapotszál-tartalmának csökkenését eredményezi. A veszteségek akár meghatározó méretűek is lehetnek. A kár összegét az Egyesült Államokban 1982-ben 429 millió dollárra becsülték. Ez a szám várhatóan növekedni fog.
Jelenleg kémiai inszekticidekkel és a termesztési módszerek megváltoztatásával próbálják megfékezni a gyapotmag-ormányost. E módszerek azonban problémákkal társulnak, és nem is teljesen hatékonyak. Határozott igény mutatkozik olyan alternatív anyagokra, melyeket a jelenlegi eljárások kiegészítőjeként lehetne alkalmazni, illetve helyettesíthetnék a rezisztencia vagy más tényezők miatt hatékonyságukat vesztett szabályozószereket.
A kolorádói burgonyabogár vizsgálata
A burgonyabogár vagy kolorádóbogár (Colorado potato beetle, CPB) világszerte a burgonya legfontosabb rovar levélkártevője, különösen nagy jelentőségű az Egyesült Államok északkeleti részén, Európában és a Szovjetunióban. Az Egyesült Államok valamennyi fontosabb burgonyatermelő vidékén, Kalifornia kivételével a kolorádóbogár a burgonya legfontosabb kártevője. E burgonyatermő terület mintegy 435 ezer hektár kiterjedésű. Ez a faj a padlizsánnak, a paradicsomnak és a borsnak is komoly kártevője.
Mind a kifejlett állatok, mind a lárvák a levélzetből táplálkoznak. A legtöbb területen 2-3 generációjuk jelenik meg minden évben. Ha ellenőrizetlenül marad, e kártevő igen komolyan lepusztítja a növényt, gyakran annak teljes föld feletti részét elfogyasztja.
Kémiai peszticideket használnak e kártevő viszszaszorítására, ám e stratégia alkalmazásának egyik legnagyobb problémája, hogy a bogár igen gyorsan rezisztenciát fejleszt a kémiai inszekticidekkel szemben. Általában 2-10-szer alkalmazzák az inszekticideket a kolorádóbogár visszaszorítására, az inszekticid rezisztenciától, a populáció sűrűségétől és az évenkénti generáció-számtől függően. Néhány körzetben, nevezetesen a New York állambeli Long fslandon lényegében valamennyi elérhető inszekticiddel szemben rezisztenciát mutattak ki. Ez gyakorlatilag lehetetlenné tette a burgonyatermesztést e körzetekben. Mindezek jelzik, hogy sürgősen új hatóanyagokat kellene találni a kolorádóbogár visszaszorítására, elsősorban pedig olyanokat, amelyek hatásmódja igen különböző a jelenleg használt hagyományos inszekticidek hatásától.
Az itt leírt Bt törzs egy ilyen hatóanyagot termel. Hatását tekintve fehérje természetű, a gyomor-bél rendszerre ható méreg, ellentétben a kontakt idegmérgekkel. Az olyan új inszekticid hatású anyagok, mint az itt leírt baktérium törzs, lehető leggyorsabb kifejlesztését elkerülhetetlenné teszi a burgonyabogár jelentősége, valamint az a sürgető szükségszerűség, mely szerint olyan inszekticideket kell találnunk, amelyekre ez a kártevő nem rezisztens.
A lucernaormányos vizsgálata
A lucemaormányos (Hypera postica), valamint a közeli rokon egyiptomi lucemaormányos (Hypera brunneipennis) az Amerikai Egyesült Államokban termesztett lucerna legjelentősebb rovarkártevői, ezek 1984-ben közel 1,8 millió hektár nagyságú területet árasztottak el. Évente 15 millió dollárt költenek e kártevő visszaszorítására. A túlsúlyban levő faj az egyiptomi lucemaormányos, az Egyesült Államok délnyugati részén, ahol e rovar a forró nyári hónapokban aestivatio-val (nyári álommal, azaz hibemációval) vészeli át. Minden egyéb szempontból azonban azonos a lucemaormányossal, amely utóbbi az Egyesült Államok más részein van túlsúlyban.
HU 200658 Β
Életciklusa során az ormányos a lárva stádiumban okozza a legtöbb kárt. A lucerna növény növekedési csúcsaiból táplálkozva a lárvák elpusztítják a leveleket, satnyulást, csökkent növekedést, végül is a hozam csökkenését okozzák. A súlyos rovarfertőzések az egész táblát is tönkretehetik. A kifejlett állatok szintén levelekkel táplálkoznak, bár ezek kevésbé lényeges károkat okoznak.
A kémiai inszekticidek játszák a legnagyobb szerepet a lucemaormányos elleni hatékony védekezésben. Több probléma merül fel azonban ezek használatával, éspedig:
1. Akut toxieitás az emlősökre nézve: a lucemaormányos elleni védekezésben használt leghatékonyabb inszekticidek közül néhány erősen toxikus az emberre és más emlősre, így sok államban csak bizonyos korlátozásokkal forgalmazható. Az állatállomány takarmányozására forgalomba hozott lucernánál pedig a toxikus bomlástermékek további problémát jelentenek.
2. Toxieitás a háziméhekre: a lucemaormányos visszaszorítására használt inszekticidek egy részére a háziméhek is érzékenyek. Mivel az Egyesült Államokban az üzleti célból tartott méhcsaládok legfontosabb nektárforrása a lucerna, a méhekre toxikus inszekticidek alkalmazása összeegyeztethetetlen a méztermelők igényeivel.
3. A természetes ellenfelekkel szembeni toxieitás: a rovarok élősködői és a rovarokkal táplálkozó élőlények, melyek rendesen segítenek a kisebb jelentőségű lucemakártevők (levéltetvek, levélbolhák, hernyók) populációinak fékentartásában, különösen érzékenyek valamennyi, a lucemaormányos ellen jelenleg használt inszekticidre. A hasznos rovarok számának csökkenése e kisebb jelentőségű kártevők populációinak növekedését eredményezheti, és további inszekticidek alkalmazását teheti szükségessé.
A kukorica gyökérféreg vizsgálata
Az Egyesült Államokban mintegy 5,2 millió hektár területű kukoricatermő-területen pusztít a kukorica gyökérféreg fajkomplex, vagyis az északi kukorica gyökérféreg (Diabrotica longicomis), a déli kukorica gyökérféreg (D. undecimpunctata) és a nyugati kukorica gyökérféreg (D. virgifera). E Diabrotica fajok talajlakó lárvái a kukorica gyökerével táplálkoznak, és a kukorica növény megdőlését okozzák
Ez végül is hozamcsökkenéshez, vagy a növény pusztulásához vezet. A kifejlett rovarok a kukoricahajból táplálkozva csökkentik a beporzást; ez egy növényre eső kukoricahozamban is megmutatkozik. A déli kukorica gyökérféreg lárvái és kifejlett egyedei, melyek foltos uborkabogár néven is ismertek, megtámadják a tökféléket is (az uborkát, tököt, dinnyét, stb.) és sok zöldség- és szántóföldi növényt a nagyüzemi termelésben és a házikertekben egyaránt.
A kukorica gyökérféreg elleni védekezésben részben különféle termesztési módszereket, mint például vetésforgót, továbbá a mellékgyökér-rendszer növekedését elősegítő magas nitrogén-koncentrációt alkalmazzák. Mégis, leginkább a kémiai inszekticidekre támaszkodnak a kívánt méretű kontroll biztosítása érdekében. Az inszekticideket sávokban juttatják a talajra, vagy pedig a talajba. A kezelt rovarpopulációkban fellépő rezisztencia jelenti a legfőbb gondot a kemikáliák használatakor.
Az alábbiakban röviden összefoglaljuk a találmány szerinti eljárást
A találmány tárgya az általunk leírt Bacillus thuringiensis izolátum felhasználása a gyapotmag-ormányos (Anthonomus grandis), a kolorádói burgonyabogár (Leptinotarsa decemlineata), a lucemaormányos (Hypera postica) és a kukorica gyökérféreg (Diabrotica longicomis) elleni védekezésben. Ez az eredetileg Μ-7-teI jelölt B. thuringiensis izolátum a B. thuringiensis san diego (B.t.sd) törzs nevet kapta.
Mivel a gyapotmag-ormányos és a burgonyabogár nem őshonos Kaliforniában, ezért egy, a szilfa levélbogarat (Pyrrhalta luteola) felhasználó biológiai vizsgálatot fejlesztettünk ki. E faj felnőtt egyedei és lárvái egyaránt 90 %-nál nagyobb mortalitást mutatnak, amikor levélfelület-négyzetcentiméterenként 104 spórával egyenértékű B.t.sd. spóra- vagy kristály-preparátummal kezelt gazdanövény-leveleken tartjuk azokat. Ezzel ellentétben, amikor ezeket a rovarokat a Lepidoptera-specifikus Bacillus thuringiensis HD-1 törzs 10° spóraekvivalens/cm2 dózisával kezeljük, úgy 5 %-nál kisebb mortalitást kapunk.
A B.t.sd. jelentős mértékű aktivitást mutat az egyiptomi lucemaormányos és a déli kukorica gyökérféreg lárváival szemben.
Az alábbiakban részletesen ismertetjük a találmány szerinti eljárást.
A jelen találmányban használt B.t.sd.-vel jelölt Bacillus thuringiensis izolátum szokatlan tulajdonsága, hogy sejtjei egy, a maga nemében egyedülálló paraspóra-testecskét (kristályt) tartalmaznak, amely fáziskontraszt-mikroszkópban sötét és lapos, négyzetes alakú.
A Bacillus thuringiensis san diego törzs egy tenyészetét 1985. február 27-én letétbe helyeztük a Northern Régiónál Research Laboratory, U.S. Department of Agriculture, Peoria, Illinois, USA, állandó törzsgyűjteményében. A törzs az NRRL B-15939 sorszámot kapta a gyűjteményben.
A törzs lapos, négyzetalakú paraspóra-zárványokat (kristályos) képez. Szerotípusa 8a 8b. Hatásspektruma: hatásos a Coleoptera rendbe tartozó rovarokkal szemben, nem aktív a Lepidoptera és Diptera rend képviselői ellen.
A B. thuringiensis san diego, NRRL B-15939 törzset standard, az idevonatkozó szakirodalomban leírt táptalajokon és fermentációs technikák felhasználásával tenyészthetjük. A fermentációs ciklus befejeztével a baktériumokat először a Bt spóráknak és a kristályoknak a fermentléből való elválasztásával lehet összegyűjteni, a szakirodalomból ismert módszereket használva. A kinyert Bt spórákból és kristályokból vízben oldható port, folyékony koncentrátumot, granulátumokat állíthatunk elő, vagy felületaktív anyagok, diszpergálószerek, semleges hordozóanyagok és más komponensek hozzáadásával segíthetjük elő a készítmény kezelését és felhasználását adott kártevő ellen. Ezek a kiszerelési és felhasználási módszerek jól ismertek a szakirodalomból, sőt a Lepidoptera-k, például a hernyók ellen hatékony ipari B. thuringiensis (HD-1) törzsek esetén már alkalmazásra is kerültek.
A kiszerelt terméket permetként vagy más formában a levélzetre juttatva alkalmazhatjuk a növényevő 3
HU 200658 Β rovarok ellen, vagy pedig csalogatóanyagot, valamint
B.t.sd. spórákat és kristályokat tartalmazó csalétek-szemcséket juttathatunk a talajra. A B.t.sd. készítményeket a magvak beburkolására, gyökérkezelésre vagy a termőciklus későbbi szakaszaiban teljes növény kezelésére is felhasználhatjuk
Az alábbiakban a találmány szerinti eljárás kivitelezését példákkal szemléltetjük, ideértve a legjobb módszert is. E példák azonban nem értelmezhetők a találmány oltalmi körét korlátozó jellegűeknek.
A leírás során a %-ban megadott összes érték tömeg%-ot jelent, az oldatok keverékaránya térfogatra vonatkozik, ha csak azt másképp nem jelezzük.
1. példa
A B. thuringiensis san diego NRRL B-15939 törzs tenyésztése
A B. thuringiensis san diego NRRL B-15939 törzs egy tenyészetével oltjuk az alábbi összetételű, LB jellel jelölt táptalajt:
Tripton 10 g élesztőkivonat 5 g nátrium-klorid 5 g normál nátrium-hidroxid 0,6 ml víz 1000 ml.
Az ismert mikrobiológiai módszereknek megfelelően, a fenti táptalajt oltás előtt sterilezzük, és az oltást steril körülmények között végezzük.
Egy jó eredményeket adó módszert vázolunk az alábbiakban.
Egy sorozat PWYE táptalajt készítünk. Ennek összetétele a következő:
pepton 5,0 tömeg% élesztőkivonat 0,1 tömeg% nátrium-klorid 0,5 tömeg%
Az 1 1 vízzel készült oldat pH-ját 7,5-re állítjuk be, majd 150 ml-es Erlenmeyer-lombikokban sterilezzük, és beoltjuk a B. thuringiensis M-7 NRRL B-15939 törzs petri csészén nőtt tenyészetével. A lombikokat 30 °C hőmérsékleten, kör mentén mozgó rázógépen (200 fordulat/perc) egy éjszakán át inkubáljuk. Ezzel az inokulummal oltunk 300 ml 2 1 térfogatú lombikokban levő LB táptalajt. Az oltáshoz
7,5 ml inokulumot használunk. Az LB táptalajt tartalmazó lombikokat az előtenyészettel azonos körülmények között inkubáljuk, és a tenyészeteket négy nap múlva összegyűjtjük.
A fenti módszert a szakirodalomból jól ismert módszerek felhasználásával nagy térfogatú fermentorokra is kiterjeszthetjük.
A fermentáció során nyert Bt spórákat és kristályokat az irodalomból jól ismert módszerek segítségével különítjük el. Gyakran használt módszer az összegyűjtött fermentlé elválasztási technikákkal, például centrifugálással történő feldolgozása.
2. példa
A B. thuringiensis san diego NRRL B-15939 törzs spóráinak és kristályainak vizsgálata
A B. thuringiensis san diego NRRL-15939 törzs előzőekben megadott módon nyert spóráit és kristályait a következő eljárásokat alkalmazva, különböző rovarokkal szemben vizsgáljuk.
A Diabrotica undecimpunctata-val, a Leptinotarsa decemlineata-val és a Pyrrhalta luteola-val szembeni vizsgálatok során a spóra- vagy kristálypreparátumokat, illetve a tisztított kristályokat permet alakjában a megfelelő gazdanövényből származó levélkorongokra juttatjuk. Az Aedes aegypti-vel szembeni vizsgálat során a spóra- vagy kristálypreparátumot vízben adjuk a lárváknak. Valamennyi egyéb vizsgálat során a spóra- vagy kristálypreparátumot, vagy a tisztított kristályokat egy megfelelő standard táplálékkal vegyítjük.
Részletesebben szólva, a burgonyabogárral és a gyapotmag-ormányossal szembeni vizsgálatot a következőképpen végezzük:
A) A különböző koncentráicójú B.t.sd. spóra- vagy kristálypreparátumokat készítünk az 1. példa szerint eljárva, majd burgonyleveleket merítünk ezek vizes oldatába, a leveleket 1 órán át levegőn szárítjuk, majd második lárvaállapotú kolorádói burgonyabogár-lárváknak adjuk. Minden dózist 20 lárvával szemben vizsgálunk, és a vizsgálatot még egyszer megismételjük. A mortalitást 48 óra után határozzuk meg. Az LC-50 értéket probit analízissel határozzuk meg. E módszer 7,6 x 106 spóra/oldat ml LC-50 értéket eredményez. Az LC-50 érték azt a letális koncentrációt jelöli, amely a lárvák 50 %-ának pusztulását okozza.
B) Különböző koncentrációjú B.t.sd. spóra- vagy kristálypreparátumokat készítünk, az 1. példában leírtak szerint kapott termék vizes oldásával és ezeket a gyapotmag-ormányos standard tápjába keverjük. Második lárvaállapotú gyapotmag-ormányos-lárváknak adjuk a tápkeveréket, és a mortalitást 48 óra elteltével becsüljük fel. A B.t.sd. minden dózisát 20 lárvával szemben vizsgáljuk, és a vizsgálatot még egyszer ismételjük. Az LC-50 értéket propit analízissel határozzuk meg (Finney, Probit Analysis, 3. kiadás, Cambridge University Press, Cambridge, 1971).
Ez a módszer 4,65 x 105 spóra/tápkeverék ml LC-50 értéket eredményez.
3. példa
A B.t.sd. lucernaormányos-ellenes hatása
Különböző koncentrációjú B.t.sd. spóra- illetve kristálypreparátumokat állítunk elő, az 1. példában megadottak szerint. Lucemahajtás-darabokat mártunk ezek vizes oldatába, majd 15 percen át levegőn szárítjuk. A hajtásdarabokat ezután egy kis fiolányi vízbe állítjuk, lucemaormányos lárvákat helyezünk a levelekre, majd az így összeállított kísérleti rendszert zárt tenyésztőkamraba helyezzük. Minden hatóanyag-dózist 20, második lárvaállapotú lárvával szemben vizsgálunk, és a kísérletet háromszor ismételjük. A legnagyobb vizsgált dózist 7,6 x 107 spóra/oldat ml, 96 óra elteltével 80 %-os mortalitást eredményez. A túlélő lucemaormányos-lárvák fejletlenek, és nem táplálkoznak. Az alacsonyabb koncentrációk csak minimális mértékű pusztulást eredményeznek, ám jelentős mértékű táplálkozás-gátlást okoznak. Valószínű, hogy ezek a táplálkozásukban gátolt lárvák a mezőn természetes környezetükben - még a kifejlett rovar-állapotuk elérése előtt elpusztulnának.
HU 200658 Β
4. példa
A B.t.sd. déli gyökétféreg-ellenes hatása
Különböző koncentrációjú B.t.sd. spóra- illetve kristálypreparátumokat állítunk elő az 1. példában leírtak szerint eljárva. 5
Kicsírázott kukoricaszemeket mártunk ezek oldatába, majd levegőn 15 percen át szárítjuk. Minden egyes kukoricaszemet egy vékony réteg steril, nedves homokot tartalmazó petri csészébe teszünk, és 10, második lárvaállapotú gyökérféreg-lárvát helyezünk mindegyik szem mellé. Minden koncentrációt 20, második lárvaállapotú lárvával szemben vizsgálunk, és a kísérleteket háromszor ismételjük. A legnagyobb dózissal (1 x 10*° spóra/oldat ml) kezelt lárvák 50 %-a 96 óra után elpusztul, a túlélők pedig tovább nem táplálkoznak.
7. TÁBLÁZAT
Különböző rovarfajok érzékenysége a Bacillus thuringiensis san diego törzsre
Rend Család Faj Magyar név Vizsgált fejlődési állapot Hatás
Coleoptera Chrysomelidae Diabrotica nyugati foltos A
undecimpunctata undecimpunctata Haltica tóm- uborka-bogár L ++
bacina Leptinotarsa kolorádói búr- A,L +++
decemlineata gonyabogár L +++
Pyrrhalta szilfalevél
luteola bogár A,L ++++
Curculionidae Anthonomus gyapotmas-ormányos A +++
grandis Otiorhynchus feketeszőlő gyalog- L ++++
sulcatus ormányos L ++
Hypera egyiptomi lucerna-
brunneipennis ormányos L +++
Dermestidae Attagenus megatoma fekete szőnyegbogár L
Ptinidae Gibbium psylloides A
Tenebrionidae Tenebrio molitor lisztbogár L ++
Tribolium castaneum kukoricabogár A.L
Diptera Culicidae Aedes aegypti sárgaláz szúnyog L
Lepidoptera Noctuidae Spodoptera exigua - L -
Trichoplusia ni L
A Diabrotica undecimpunctata undecimpunctata-val, a Leptinotarsa decemlineata-val és a Pyrrhalta Iuteola-val szembeni vizsgálatok során a spóra- illetve kristálypreparátumokat, vagy a tisztított kristályokat permet alakjában juttatjuk a megfelelő gazdanövényből származó levélkorongokra. Az Aedes aegypti-vel 60 szembeni vizsgálatok során a spóra- illetve kristálypreparátumokat vízben oldva adjuk a lárváknak.
A többi vizsgálatot úgy végezzük, hogy a spóra55 illetve kristálypreparátumokat, vagy a tisztított kristályokat a megfelelő tápkeverékbe adagoljuk.
A fentiekben az inszekticid hatást önkényesen osztályozzuk gyengétől (+) igen erősig (++++).
A: kifejlett rovar L: lárva.
Az alábbiakban a B. thuringiensis var san diego törzs koncentráció-függő hatását szemléltetjük:
-5t
II. TÁBLÁZAT
Bacillus thuringiensis var san diego hatása gyapotmag-ormányos lárvákra, mesterséges táplálék mellett
B.t. tartalom 24 óra %-os mortalitás, utólagos kezelés
mg por/ml táplálék spóra egyenérték X10E7/ml táplálék 48 óra 72 óra 96 óra
kezeletlen 0 0 15 18 25
0,01 0,28 7 18 35 42
0,1 2.8 12 22 33 50
10 282 55 87 95 100
20 564 70 95 100 100
///. TÁBLÁZAT
Bacillus thuringiensis var san diego hatása gyapotmag-ormányos lárvákra, mesterséges táplálék mellett B.t. tartalom %-os mortalitás, utólagos kezelés
mg por/ml táplálék spóra egyenérték X10E7/ml táplálék 24 óra 48 óra 72 óra 96 óra 120 óra
kontroll 3,8 d 5 e 6,3 e 12,5 ef 15 ef
0,01 0,28 5 d 6,3 e 7,5 e 8,8 f 11,3 f
0,03 0,85 3,8 d 5 e 6,3 e 10 ef 12,5 ef
0,1 2,8 11,3 cd 15 de 16,3 d 20 de 21,3 de
0,3 8,5 15 c 18,8 d 22,5 d 26,3 d 30 d
1 28,2 31,2 b 36,3 c 40 c 50 c 51,3 c
3 84,6 38,8 b 53,8 b 62,5 b 72,3 b 75 b
9 253,8 57,5 a 68,8 a 88,8 a 95 a 96,3 a
Az egyes oszlopokban a különböző betűkkel jelölt értékek a Duncan-analízis szerint szignifikánsan eltérnek (P < 0,05).
IV. TÁBLÁZAT
Bacillus thuringiensis var. san diego hatása gyapotmag-ormányosra mesterséges táplálékon B.t. tartalom %-os mortalitás, utólagos kezelés
mg por/ml táplálék spóra egyenérték X10E7/ml táplálék 24 óra 48 óra 72 óra 96 óra 120 óra
kontroll 0 1,3 c 2,5 b 2,5 d 6,3 cd 13,8 d
0,01 0,28 1,3 c 2,5 b 2,5 d 5 d 15 d
0,03 0,85 1,3 c 3,8 b 3,8 d 3,8 d 11,3 d
0,1 2,8 0 c 1,3 b 1,3 d 2,5 d 12,5 d
0,3 8,5 1,3 c 1,3 b 2,5 d 3,8 d 12,5 d
1 28,2 3,8 c 8,8 b 11,3 c 13,8 c 28,8 c
3 84,6 18,8 b 28,8 a 33,8 b 36,3 b 52,3 b
9 253,8 33,8 a 35 a 71,3 a 91,3 a 97,5 a
Az egyes oszlopokban a különböző betűkkel jelölt értékek a Duncan-analízis szerint szignifikánsan eltérnek (p < 0,05).
HU 200658 Β
V. TÁBLÁZAT
Bacillus thuringiensis var. san diego (Btsd) hatása Diabrotica undecimpunctata lárvák (L2) ellen
Kezelés Mennyiség1 Spóraegyenérték/ml szuszpenzió %-os mortalitás
5 nap 6 nap
kontroll 0 5 8
Btsd 108 28 28
Btsd 1 — A „„íz·. 10’ 38 63
SZABADALMI IGÉNYPONTOK

Claims (5)

1. Eljárás mezőgazdaságilag értékes termények, így a gyapot, a burgonya, a lucerna és a kukorica rovarfertőzéseinek elpusztítására, ahol az adott rovarfertőzést a gyapotmag-ormányos, a kolorádói burgonyabogár, a lucemaoraiányos vagy a kukorica gyökérféreg okozza, azzal jellemezve, hogy közvetlenül a nevezett rovarkártevőt vagy a nevezett rovarkártevő környezetét az NRRL B-15939 törzs azonosító jegyeivel rendelkező Bacillus thuringiensis san diego törzzsel, vagy e törzs toxikus kristályaival vagy spóráival kezeljük.
2. Az 1. igénypont szerinti eljárás a gyapotmag-ormányos elpusztítására, azzal jellemezve, hogy a nevezett gyapotmag-ormányos gazdanövényét az NRRL B-15939 törzs azonosító jegyeivel rendelkező Bacillus thuringiensis san diego törzzsel vagy a nevezett törzs toxikus kristályaival vagy spóráival kezeljük.
3. Az 1. igénypont szerinti eljárás a kolorádói burgonyabogár elpusztítására, azzal jellemezve, hogy a nevezett burgonyabogár gazdanövényét az NRRL B-15939 törzs azonosító jegyeivel rendelkező Bacillus thuringiensis san diego törzzsel, vagy a nevezett törzs toxikus kristályaival vagy spóráival kezeljük.
4. Az 1. igénypont szerinti eljárás a lucernaormányos elpusztítására, azzal jellemezve, hogy a nevezett lucemaormányos gazdanövényét az NRRL B-15939 törzs azonosító jegyeivel rendelkező Bacillus thuringiensis san diego törzzsel, vagy a nevezett törzs toxikus kristályaival vagy spóráival kezeljük.
5. Az 1. igénypont szerinti eljárás a kukorica gyökérféreg elpusztítására, azzal jellemezve, hogy a nevezett kukorica gyökérféreg talaj-környezetébe az NRRL B-15939 törzs azonosító jegyeivel rendelkező Bacillus thuringiensis san diego törzzsel, vagy a nevezett törzs toxikus kristályaival vagy spóráival kezeljük.
HU871268A 1986-03-21 1987-03-20 Process for extermination of cotton-seed weevil, colorado beetle, lucerne-leaf weevil and maize gall nematode by using bacillus thuringiensis towin HU200658B (en)

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US06/842,529 US4797276A (en) 1985-03-22 1986-03-21 Control of cotton boll weevil, alfalfa weevil, and corn rootworm via contact with a strain of Bacillus thuringiensis

Publications (2)

Publication Number Publication Date
HUT42920A HUT42920A (en) 1987-09-28
HU200658B true HU200658B (en) 1990-08-28

Family

ID=25287551

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
HU871268A HU200658B (en) 1986-03-21 1987-03-20 Process for extermination of cotton-seed weevil, colorado beetle, lucerne-leaf weevil and maize gall nematode by using bacillus thuringiensis towin

Country Status (5)

Country Link
US (1) US4797276A (hu)
EP (1) EP0238311A3 (hu)
CA (1) CA1266824A (hu)
HU (1) HU200658B (hu)
PL (1) PL147471B1 (hu)

Families Citing this family (64)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4910016A (en) * 1987-08-03 1990-03-20 Mycogen Corporation Novel Bacillus thuringiensis isolate
US4849217A (en) * 1987-11-19 1989-07-18 Mycogen Corporation Novel isolates of bacilus thuringiensis having activity against the alfalfa weevil, hypera brunneipennis
GB8800652D0 (en) * 1988-01-13 1988-02-10 Ici Plc Bacterial strain
US4999192A (en) * 1988-02-12 1991-03-12 Mycogen Corporation Novel coleopteran-active bacillus thuringiensis isolate
US4966765A (en) * 1988-02-23 1990-10-30 Mycogen Corporation Novel coleopteran-active Bacillus thuringiensis isolate
US4996155A (en) * 1988-03-04 1991-02-26 Mycogen Corporation Bacillus thuringiensis gene encoding a coleopteran-active toxin
US5055293A (en) * 1988-03-09 1991-10-08 Purdue Research Foundation Biological pesticide
US5683691A (en) * 1989-02-15 1997-11-04 Plant Genetic Systems, N.V. Bacillus thuringiensis insecticidal toxins
US6063605A (en) * 1989-05-09 2000-05-16 Zeneca Limited Bacillus thuringiensis endotoxin genes and methods of use
GB8910624D0 (en) * 1989-05-09 1989-06-21 Ici Plc Bacterial strains
DK73890D0 (da) * 1990-03-22 1990-03-22 Novo Nordisk As Pesticid
DK141790D0 (da) * 1990-06-08 1990-06-08 Novo Nordisk As Middel
US5632987A (en) * 1992-12-31 1997-05-27 Mycogen Corporation Bacillus thuringiensis toxins active against corn rootworm larvae
US5686069A (en) * 1990-10-15 1997-11-11 Mycogen Corporation Protein toxins active against lepidopteran pests
GB9023735D0 (en) * 1990-11-01 1990-12-12 Ici Plc Bacterial strain
JPH06503965A (ja) * 1991-01-09 1994-05-12 ライト,ジェームズ・イー 生化学的殺虫剤と害虫の駆除
US5436002A (en) * 1991-01-29 1995-07-25 Mycogen Corporation Bacillus thuringiensisisolate PS201T6 toxin
US6689743B1 (en) 1991-01-29 2004-02-10 Mycogen Corporation Bacillus thuringiensis isolates and toxins
US5208017A (en) * 1991-02-21 1993-05-04 Mycogen Corporation Biologically active Bacillus thuringiensis isolates
CA2059898C (en) * 1991-02-21 2004-10-19 Gregory A. Bradfisch Biologically active bacillus thuringiensis isolates and gene encoding a coleopteran-active toxin
US5120540A (en) * 1991-03-29 1992-06-09 Scentry, Inc. Gustatory stimulant composition and methods of making and using the same
US5464618A (en) * 1991-03-29 1995-11-07 Ecogen Inc. Gustatory stimulant composition useful for corn rootworm control
US5596071A (en) * 1991-05-22 1997-01-21 Mycogen Corporation Bacillus thuringiensis toxins active against hymenopteran pests
US5350576A (en) * 1991-09-13 1994-09-27 Mycogen Corporation Bacillus thuringiensis isolates for controlling acarides
US6071511A (en) * 1991-10-04 2000-06-06 Mycogen Corporation Bacillus thuringiensis isolates, toxins, and genes selectively active against certain coleopteran pests
US5427786A (en) * 1991-10-04 1995-06-27 Mycogen Corporation Bacillus thuringiensis isolates selectively active against certain coleopteran pests
US5302387A (en) * 1991-11-06 1994-04-12 Mycogen Corporation Bacillus thuringiensis isolates active against cockroaches and genes encoding cockroach-active toxins
US5554534A (en) * 1991-12-16 1996-09-10 Mycogen Corporation Bacillus thuringiensis toxins active against scarab pests
US5743477A (en) * 1992-08-27 1998-04-28 Dowelanco Insecticidal proteins and method for plant protection
US5369027A (en) * 1993-07-12 1994-11-29 Plant Genetic Systems, N.V. Bacillus thuringiensis strains toxic to diabrotica species
WO1995002694A2 (en) * 1993-07-15 1995-01-26 Mycogen Corporation Materials and methods for the control of calliphoridae pests
US5593881A (en) * 1994-05-06 1997-01-14 Mycogen Corporation Bacillus thuringiensis delta-endotoxin
US5527883A (en) * 1994-05-06 1996-06-18 Mycogen Corporation Delta-endotoxin expression in pseudomonas fluorescens
US5508032A (en) * 1994-06-30 1996-04-16 Mycogen Corporation Bacillus thuringiensis isolates active against cockroaches
US5702703A (en) * 1994-11-16 1997-12-30 Mycogen Corporation Bacillus thuringiensis toxin enhancer
US5508264A (en) * 1994-12-06 1996-04-16 Mycogen Corporation Pesticidal compositions
US5707619A (en) 1995-03-06 1998-01-13 Mycogen Corporation Bacillus thuringiensis isolates active against weevils
US5723440A (en) * 1995-06-07 1998-03-03 Mycogen Corporation Controlling hemipteran insect pests with Bacillus thuringiensis
US5667993A (en) * 1995-10-06 1997-09-16 Mycogen Corporation Primers and probes for the identification of bacillus thuringiensis genes and isolates
US5670365A (en) * 1995-10-06 1997-09-23 Mycogen Corporation Identification of, and uses for, nematicidal bacillus thuringiensis genes, toxins, and isolates
BR9611000A (pt) * 1995-10-13 1999-12-28 Dow Agro Sciences Llc Seq³ência de nucleotídeos otimizada de plantas e de gene inseticida otimizada específica do milho, construção genética sintética capaz de expressão em células de plantas, planta transgênica, somente de plantas, processo de construção de uma seq³ência de gene inseticida otimizada específica de milho e promotor recombinante.
US6083499A (en) * 1996-04-19 2000-07-04 Mycogen Corporation Pesticidal toxins
US6372480B1 (en) 1996-04-19 2002-04-16 Mycogen Corporation Pesticidal proteins
KR20000022459A (ko) 1996-07-01 2000-04-25 칼튼 제이. 에이블 밤나방과 해충에 대해 활성적인 바실루스 츄린겐시스 독소
US6369213B1 (en) 1996-07-01 2002-04-09 Mycogen Corporation Toxins active against pests
US6603063B1 (en) * 1999-05-07 2003-08-05 Mycogen Corp. Plants and cells transformed with a nucleic acid from Bacillus thuringiensis strain KB59A4-6 encoding a novel SUP toxin
CA2267996A1 (en) 1996-10-30 1998-05-07 Mycogen Corporation Novel pesticidal toxins and nucleotide sequences which encode these toxins
US7129212B2 (en) * 1996-10-30 2006-10-31 Mycogen Corporation Polynucleotides, pesticidal proteins, and novel methods of using them
US6242669B1 (en) 1996-10-30 2001-06-05 Mycogen Corporation Pesticidal toxins and nucleotide sequences which encode these toxins
JP2001522233A (ja) * 1997-03-13 2001-11-13 マイコーゲン コーポレーション バチルス・チューリンギエンシス毒素
EP1003876A2 (en) * 1997-03-13 2000-05-31 Mycogen Corporation Pesticidal bacillus thuringiensis strains
US5874288A (en) 1997-07-31 1999-02-23 Mycogen Corporation Bacillus thuringiensis toxins with improved activity
CN1314911A (zh) 1998-05-01 2001-09-26 麦克西根股份有限公司 用dna改组优化害虫抗性基因
US5973231A (en) 1998-05-12 1999-10-26 Mycogen Corporation Bacillus thuringiensis isolates, toxins, and genes for controlling certain coleopteran pests
US6245551B1 (en) 1999-03-30 2001-06-12 Agraquest, Inc. Strain of Bacillus pumilus for controlling plant diseases caused by fungi
IL145291A0 (en) 1999-03-30 2002-06-30 Agraquest Inc A strain of bacillus pumilus for controlling plant diseases
US7053266B2 (en) * 2002-03-27 2006-05-30 Council Of Scientfic And Industrial Research Chimeric cry1E δendotoxin and methods of controlling insects
US7557186B2 (en) 2002-03-27 2009-07-07 Council Of Scientific & Industrial Research Chimeric CrylE δ endotoxin and methods of controlling insects
WO2006042404A1 (en) * 2004-10-19 2006-04-27 Her Majesty The Queen In Right Of Canada As Represented By The Minister Of Agriculture And Agri-Food Method for controlling insects of the order diptera using a bacillus thuringiensis strain
BRPI1007915B1 (pt) * 2009-02-05 2019-05-14 Athenix Corporation Genes de variante axmi-r1 delta-endotoxina, vetor, célula hospedeira microbiana, polipeptídeo recombinante e seu método de produção, composição, e métodos para controlar e matar uma população de peste de coleópteros, 5 e para protegeruma planta de uma peste
MD4196C1 (ro) * 2012-04-27 2013-09-30 Институт Зоологии Академии Наук Молдовы Tulpină de bacterii Bacillus thuringiensis subsp. kurstaki -bioinsecticid pentru combaterea coleopterelor curculionoide
CN102870612B (zh) * 2012-09-13 2014-03-26 中国农业科学院棉花研究所 转Bt基因棉花抗棉铃虫性评价方法
CN104388349B (zh) * 2014-11-21 2017-12-29 东北农业大学 苏云金芽胞杆菌分泌杀虫基因sip1A,表达蛋白及其应用
CN104673706B (zh) * 2014-12-20 2018-03-06 东北农业大学 苏云金芽胞杆菌fh21、杀虫基因,表达蛋白及其应用

Family Cites Families (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US3086922A (en) * 1961-10-13 1963-04-23 Nutrilite Products Method for the production of microbial insecticides
DE3346138A1 (de) * 1983-12-21 1985-07-11 Boehringer Mannheim Gmbh, 6800 Mannheim Bacillus thuringiensis var. tenebrionis sowie ein insektizid wirkendes, hieraus erhaeltliches praeparat bzw. toxin sowie deren verwendung zur bekaempfung von coleoptera
US4764372A (en) * 1985-03-22 1988-08-16 Mycogen Corporation Compositions containing bacillus thuringiensis toxin toxic to beetles of the order coleoptera, and uses thereof

Also Published As

Publication number Publication date
EP0238311A3 (en) 1989-07-12
CA1266824A (en) 1990-03-20
EP0238311A2 (en) 1987-09-23
HUT42920A (en) 1987-09-28
PL264694A1 (en) 1988-03-31
US4797276A (en) 1989-01-10
PL147471B1 (en) 1989-06-30

Similar Documents

Publication Publication Date Title
HU200658B (en) Process for extermination of cotton-seed weevil, colorado beetle, lucerne-leaf weevil and maize gall nematode by using bacillus thuringiensis towin
US4910016A (en) Novel Bacillus thuringiensis isolate
Sarwar Microbial insecticides-an ecofriendly effective line of attack for insect pests management
KR102112380B1 (ko) 식물 해충, 특히 나비목 및 파리목에 대한 생물학적 방제제로서의, 신규한 브레비바실러스 라테로스포루스 균주
JPH05505591A (ja) 殺線虫菌剤
SU1637653A3 (ru) Способ борьбы с вредител ми сельскохоз йственных растений LерIDортеRа NостUIDеS
Gahukar et al. Present status of field pests of sorghum and millets in India
US4902507A (en) Toxic strains of the bacterium Bacillus thuringiensis for control of the bertha armyworm Mamestra configurata
Maniania Evaluation of three formulations of Beauveria bassiana (Bals.) Vuill. for control of the stem borer Chilo partellus (Swinhoe)(Lep., Pyralidae)
Gahukar Insect pests of millets and their management: a review
JPH10504451A (ja) 新規の双翅類活性化合物及びバチルス チューリングエンシス株
Dotaona et al. Sweetpotato weevil, Cylas formicarius (Fab.)(Coleoptera: Brentidae) avoids its host plant when a virulent Metarhizium anisopliae isolate is present
Ignoffo et al. Use of an Agar-Base Diet and House Fly Larvae to assay β-exotoxin Activity of Bacillus thuringiensis
Jaipal et al. IPM issues in zero-tillage system in rice-wheat cropping sequence
US4935236A (en) Control of elm leaf beetle via contact with a strain of Bacillus thuringiensis
EP0981277A1 (fr) Bionematicide a action ovicide efficace contre les nematodes phytoparasites
EP1384405B1 (en) Bactericidal, bacteriostatic and fungicidal composition comprising two or more live species of trichoderma
Salama Bacillus thuringiensis Berliner and its role as a biological control agent in Egypt 1
Odindo Management of cereal stem borers, especially Chilo partellus, using microsporidia
Salama Production and Application of Bacillus thuringiensis for Pest Control in Egypt
Navik et al. Field pests of wheat and their management.
Podgwaite Diseases of the gypsy moth: How they help to regulate populations
Abdel-Raheem et al. Biological Control of Sugar Beet Insect-Pests
Gopinathan Process development for the improved yield and cost effective production of Bacillus thuringiensis subspecies israelensis endotoxin based biopesticide
Kabole Evaluation Of Growth Characteristics And Efficacy Of Beauveria Bassiana Isolates Against Cowpea Bruchid (Callosobruchus Maculatus) Under In-Vitro Conditions