HU192401B - Process for preparing macrolide antibiotics - Google Patents

Process for preparing macrolide antibiotics Download PDF

Info

Publication number
HU192401B
HU192401B HU841252A HU125284A HU192401B HU 192401 B HU192401 B HU 192401B HU 841252 A HU841252 A HU 841252A HU 125284 A HU125284 A HU 125284A HU 192401 B HU192401 B HU 192401B
Authority
HU
Hungary
Prior art keywords
ptl
formula
assumed
molecular weight
elemental analysis
Prior art date
Application number
HU841252A
Other languages
English (en)
Other versions
HUT37656A (en
Inventor
Omura Satoshi
Original Assignee
Omura Satoshi
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Omura Satoshi filed Critical Omura Satoshi
Publication of HUT37656A publication Critical patent/HUT37656A/hu
Publication of HU192401B publication Critical patent/HU192401B/hu

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07H—SUGARS; DERIVATIVES THEREOF; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; NUCLEIC ACIDS
    • C07H17/00—Compounds containing heterocyclic radicals directly attached to hetero atoms of saccharide radicals
    • C07H17/04—Heterocyclic radicals containing only oxygen as ring hetero atoms
    • C07H17/08—Hetero rings containing eight or more ring members, e.g. erythromycins
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/70—Carbohydrates; Sugars; Derivatives thereof
    • A61K31/7042—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings
    • A61K31/7048—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings having oxygen as a ring hetero atom, e.g. leucoglucosan, hesperidin, erythromycin, nystatin, digitoxin or digoxin
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K35/00—Medicinal preparations containing materials or reaction products thereof with undetermined constitution
    • A61K35/66—Microorganisms or materials therefrom
    • A61K35/74—Bacteria
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/04—Antibacterial agents
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07G—COMPOUNDS OF UNKNOWN CONSTITUTION
    • C07G11/00—Antibiotics
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
    • C12N1/20—Bacteria; Culture media therefor
    • C12N1/205—Bacterial isolates
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
    • C12P19/00—Preparation of compounds containing saccharide radicals
    • C12P19/44—Preparation of O-glycosides, e.g. glucosides
    • C12P19/60—Preparation of O-glycosides, e.g. glucosides having an oxygen of the saccharide radical directly bound to a non-saccharide heterocyclic ring or a condensed ring system containing a non-saccharide heterocyclic ring, e.g. coumermycin, novobiocin
    • C12P19/62—Preparation of O-glycosides, e.g. glucosides having an oxygen of the saccharide radical directly bound to a non-saccharide heterocyclic ring or a condensed ring system containing a non-saccharide heterocyclic ring, e.g. coumermycin, novobiocin the hetero ring having eight or more ring members and only oxygen as ring hetero atoms, e.g. erythromycin, spiramycin, nystatin
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12R—INDEXING SCHEME ASSOCIATED WITH SUBCLASSES C12C - C12Q, RELATING TO MICROORGANISMS
    • C12R2001/00—Microorganisms ; Processes using microorganisms
    • C12R2001/01—Bacteria or Actinomycetales ; using bacteria or Actinomycetales
    • C12R2001/465—Streptomyces

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Communicable Diseases (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Saccharide Compounds (AREA)
  • Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
  • Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
  • Nitrogen And Oxygen Or Sulfur-Condensed Heterocyclic Ring Systems (AREA)
  • Steroid Compounds (AREA)
  • Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)
  • Compounds Of Unknown Constitution (AREA)
  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)

Description

A találmány tárgya eljárás új makrolidok előállítására, melyek alkalmasak antimikrobiális szerekként való használatra.
A szakirodalomban számos hivatkozás található a jól ismert tilozin antibiotikumhoz hasonló makrolid származékokra. A 4 362 881 és 4 366 247 számú amerikai egyesült államokbeli szabadalmi leírásban találjuk az (1) képletű profilonolid (tilakton-ként is ismert) leírását. Ennek származékait például az 5-0-mikaminozil-protilonolidot,a 20-hidroxi-5-0-mikaminozil-protilonolidot és 20-oxo-5-0-mikaminozil protilonolidot a következő cikkekben írják le:
CHem. Pharm, Bull., 29. 1963 (1980), Antimicrob. Agents Chemother., 20. 214 (1981), Chem. Pharm, Bull. 30, 97 (1982( és Biochem. Biophys. Rés. Commun., 107. 554 (1982).
A találmány alapját az képezi, hogy a továbbiakban PTL-448 származékként említendő makrolid antibiotikumok, melyeket Streptomyces ambofaciens ATCC 15154 tözset asszimilálható szénforrást, nitrogénforrást és szervetlen sókat tartalmazó tápfolyadékban, egy vagy több,, a protilonolid 5-0-mikaminozíl-protÚonolid, 20-hidroxi-5-0-mikaminozil-protilonolid és a 20-oxo-$-0-mikanunozil-protilonolid közül választott makrolid intermedier jelenlétében, tenyésztve állítunk elő, hasznos baktérium-ellenes tulajdonságokkal rendelkeznek.
A fermentáció során közvetlenül két terméket kaunk, a PTL-448-A és -B-t, valamint ezekről a terméekről hidrolitikusan lehasítva a mikaróz cukrot, kapjuk a PTL-448-C-t és -D-t. Ezek a demikarozil termé1 5 kék különösen aktívak.
A találmány szerinti eljárással készült termékek stabil fehér porok, fizikai-kémiai tulajdonságaikat az 1. és 2. táblázatban mutatjuk be.
1. táblázat
Az A, B, C és D antibiotikumok fizikai-kémiai tulajdonságai
(a) Elemanalízis: PTL-448-A PTL-448-B PTL-448-C, PTL^48-D
C (%): 63,73 62,45 64,78 63,82
H(%): 9,85 9,18 9,24 9,26
N(%): 2,92 3,25 3,57 3,97
(b) Olvadáspont (°C) 108-110 114-115 91-93 98-100
(c) összeg-képlet: CígHejNjOn Cr«Hg0N2Oi 3 c4 ,N70N2 Oj ! C3 9H43N20i
(d) Molekulasúly: 910 868 766 724
(e) Optikai forgatás [α]β2: (c= 1, CHC13) +40,0° (e=l,CHCl3) *14,4° (c=0,5, CHCls) -15,9° (c=0,5, CHC13 +23,2°
(f) UV spektrum (metanolban) 1. ábra 4. ábra 7. ábra 8. ábra
(g) IR spektrum (KBr módszer) 2. ábra 5. ábra -
(K) 3H-NMR spektrum (CDCP-ban): 3. ábra 6. ábra - -
(i)13 C-NMR spektrum 2(A) táblázat 2(B) táblázat _
(CDCl3-ban):
192 401
ΓΓΟ
ΝΟ
CO in o\
Γ* rí
Γθ r* ’Ί’ η
cn cn .2 λ
&<
<η t-·''
0) Oldhatóság:
Oldódik: metanol·, etanol-, aceton-, etil-acetát-, kloroform-, benzolban
Ό
XJ
Ό ?ή ο
£
Γ->
σν m
ο oo
η 8 ο. «“W τί· oc NC Γ-Ί 8 Ό I Μ; Os Γ- ο„ 00 C0 \ο σΤ
4>
τΓ ND Ο\ Ο rí Tj- co 00 νο rf 00 ο Os CO η
«ι· τ3 •W
Ο >Λ οο η
\ο σ\ r-~ ο
ό'
ΓΝ
Ο
ΟΛ ,-Η ''fr r-γ <ν $
ο. φ - S Ό.
CO σΓ Τ—1 X Os
C0 •4 ΝΟ η 1 Λ Π
2
Ο\ ^4 C3 ο
ιη α m co
co γ- Π co
γ* σι «Η γ<» ’fr* co sO
Os η
Ο\ οό s
£ S < ·
Λ
Γ*· γο rιη co σ\
NO
00^
Γθ
CO
Ο\ ηa £
'5 §
η
S
Γ4
00, eη.
t8
Ή,
Ο cn
192.401
A PTL-448 A,B,C és 1> antibiotikumok feltételezett szerkezet a (11) általános képletnek felel meg:
PTL448- Rt Rj
A -COCH3 mikarozil (III) általános képletű csoport
B H mikarozil
C -COCHj H
D H H
A fenti (II) általános képletben nem mutatjuk a térszerkezetet, de valószínű, hogy a molekula különböző alkotó-elemeinek térszerkezete megegyezik a firotjjonolidéval (középponti lakion), a forózaminéval balra-forgató lakton) és a mikaminozéval (jobbraforgató cukor). A protilonolid-forózamin kapcsolat térszerkezete valószínűleg 9-α-Ο-β- forózaminil.
A szakember azonnal rájön, hogy a (II) általános képletű vegyületben található amino-funkció azt jelenti, hogy a szabad bázisok képesek sav-addiciós sókat létrehozni. Ezek a sók mindaddig amíg a melegvérű állatok kemoterápiájában való alkalmazáshoz megfelelő alacsony toxicitással rendelkeznek, mint gyógyászatílag elfogadható sók, a találmány szerinti hasznos antibiotikumok.
Az ilyen típusú sók közé tartoznak azok, melyek standard reakcióban keletkeznek vagy szerves vagy szervetlen savakkal, például kénsav, sósav, foszforsav, ecetsav, borostyánkősav, citromsav, tejsav, maleinsav, fumársav, palmitinsav, kólsav, pamoesav, nyálkasav, D-glutaminsav, d-kámforsav, glutársav, glikolsav, ftálsav, borkősav, hangyasav, laurínsav, sztearinsav, szalicilsav, metánszulfonsav, benzolszulfonsav, szorbinsav, pikrinsav, benzoesav és fahéjsav.
A PTL-448 makrolid antibiotikumokat úgy állíthatjuk elő, hogy a Streptomyces ambofaciens törzset a fenti makrolid vegyületek jelenlétében tenyésztjük.
A tenyészléhez adott makrolid-vegyületeket használhatjuk külön-külön, vagy kombinációban. Előnyösen 10-500 pg/ml koncentrációban vannak jelen a tenyészlében.
A termék mennyiségét enzim-inhibitorral például ceruleninnel megnövelhetjük (lásd Methods in Enzymology, 72, 520 /1981/). Az enzim-inhibitor, például a cerulenin előnyös koncentrációja a tenyészlében 10—200 pg/ml.
A jelen találmány szerinti tenyésztő táptalaj lehet minden olyan szokásos, folyékony vagy szilárd formájú, szintetikus és természetes táptalaj, melyen a használt törzs nő, és a PTL-448 jelű anyag keletkezik protilonolidból és a rokon vegyületekből. Azok a megfelelő táptalajok, melyeket az Actinomycese, úgymint Streptomycese alkalmazásával antibiotikumok fermentációs úton történő előállítására használnak. Szénforrásra példaként megemlíthetjük a glükózt, maltózt, szacharózt, keményítőt, dextrint, glicerint, állati zsiradékokat és növényi olajokat. A nitrogén-forrásra példaként megemlíthetjük a különböző nitrogén-tartalmú anyagokat, úgymint az élesztő-kivonatot, hús-kivonatot, peptont, szójalisztet, száraz élesztőt, ammóniát és karbamidot. Ezeken felül szükség esetén szervetlen sókat, úgymint foszfátokat, fémsókat, például a mangán, magnézium-kálium, nátrium, vas, kobalt stb. sóit használhatjuk.
A mikroorganizmusokat aerob körülmények között tenyésztjük, úgymint rázott tenyészetet vagy kevertetett-levegőztetett tenyészetet használva. A tenyésztés hőmérséklete általában 20 és 40 °C között lehet.
A PTL-448 származék megtermelt mennyiségét megnövelhetjük úgy is, hogy aPLT-448 molekulában levő cukor-egységeket külön állítjuk elő és a tenyészléhez adjuk. Ezeket a cukrokat a spjramicin és tolizin jq kémiai lebontásával állítjuk elő, A tenyésztés ideje υ 1-10 nap, ez alatt az idő alatt jönnek létre a PTL-448 származékok és összegyűlnek a micéliumon belül és kívül. A tenyésztés befejezése után a PTL-448 származékokat a bázikus zsíroldékony anyagoknál általánosan használt módszerekkel nyerjük ki a tenyészlébői.
J5 Például a micéljumot elválasztjuk a szűrlettől, majd a szűrletből szerves oldószerrel, például etil-acetáttal, benzollal és hasonlóval extraháljuk a PTL-448 származékot, majd az oldatot besűrítjük. Hasonlóképpen, vizes acetonnal vagy vizes metanollal vagy hasonlóval extraháljuk a PTL-448 származékot a micéliumból, és az oldatot besűrítjük.
A PTL-448 származékot ezután jól ismert tisztítási eljárásokkal, például szilikagél vagy alumínium-oxid oszlopkromatográfiával, vékonyréteg kromatográfiával és hasonlókkal tisztíthatjuk.
A fermentáció közvetlen termékeit, a PTL-448-A és PTL-448-B jelű anyagokat savas hidrolízissel átalakíthatjuk demikarozil analógjaikká, azaz PTL-448-C és PTL-448-D jelű vegyületekké. A PTL-448-C és -D vegyületeket például úgy állíthatjuk elő, hogy PTL-448-A és -B egyikét vagy mindkettőt szerves oldó-iq szerben oldjuk, majd savas pH-η kevertetve kapjuk a PTL-448-C és -D származékokat, melyek kinyerhetők a reakció-elegyből. A PTL-448-C és -D származékokat természetesen, közvetlenül is előállíthatjuk a tenyésztés során, a fermentációs körülmények változtatásával. Így ha olyan mikroorganizmust használunk, mely35 bői hiányzik a mikaróz-szintetizáló képesség vagy a mikaróz makrolid típusú aglikonokhoz való kötésének képessége, a PTL-448-C és-D származékok közvetlen keletkezését figyelhetjük meg. A savas hidrolízis végrehajtására használt sav lehet erős ásványi sav, például sósav vagy kénsav, vagy szerves sav, például hangyasav. A hidrolízis során a pH értékét előnyösen 1 és 3 között tartjuk.
A hidrolízist végrehajthatjuk a tenyészlében, vagy tenyészlébői izolált PTL-448-A és -B származékokon. A hidrolízist mindkét esetben 10 és 80 °C közötti hőmérsékleten hajtjuk végre. A hidrolízis végrehajtásába hoz szükséges idő normális körülmények között 10 perc és 10 óra között változik, de figyelembe kell venni a PTL-448 származékok stabilitását.
A találmány illusztrálására a következő, nem-korIátozó példákat mutatjuk be. cn 1 · példa
Oltóanyagként Streptomyces amgovaciens ATCC 15 154 (NRRL 2420) törzset használunk. Az említett törzset 500 ml-es Sakaguchi lombikban levő 100 ml inukulum-táptalajba oltjuk (glükóz 2.0%, hús kivonat 0,5%, pepton 0.5%, száraz élesztő 0.3%, nátrium55 -klorid 0.5%, kalcium-karbonát Ó,3%, pH 7.0), majd 48 órán át 27 °C-on rázatjuk. Az így nyert oltóanyag 1%-nyi mennyiségével oltunk 500 ml-es Sakaguchi lombikban levő 100 ml fermentációs táptalajt (10% glükóz, 1.0% száraz élesztő, 0.5% nátrium-klorid, 1.9% kálcium-kloríd, 0.1% nátrium-nitrát pH 7.5), majd 27 °C-on folytatjuk a tenyésztést. A tenyésztés elején, majd 24 és 48 órával később minden egyes lombikhoz 4 mg cerulenint adunk az adalékanyagot kevés etanolban oldva. A tenyésztés 24. órájában ezenkívül minden egyes lombikhoz 10 mg protüonolidot adunk, kevés etanolban oldva az anyagot. A tenyésztést 72 órán át folytatjuk, miközben a pH értékét nem szabályozzuk.
100 Sakaguchi lombikban levő fermentléből kiszűrjük a cspadékot és a sejttömeget, igy 8.5 liter szűrletet kapunk. A szűrlet pH-ját 6 N nátrium-hidroxid oldattal 8.5-re állítjuk, majd kétszer extraháljuk azonos mennyiségű benzollal. A benzolos fázist szárazra párolva 1.3 g sárga port kapunk. Ezt a port kloroformban szuszpendáljuk, majd szilikagéllel (Merck 7734) töltött oszlopra visszük és kloroform/metanol/tömény vizes ammónia 10/1/0.05 arányú eleggyel eluáljuk. 20 ml-es frakciókat szedünk, és mindegyik frakciót szilikagél vékonyréteg kromatográfiával (Merck 5554, kifejlesztő oldószerikloroform/metanol/tömény vizes ammónia 15/1/0.05 arányú elegye) vizsgálva azonosítjuk a körülbelül Rf= =0.26 értékkel rendelkező anyagot tartalmazó frakciókat. Ezeket a frakciókat egyesítjük, majd csökkentett nyomáson bepárolva 96 mg keveréket kapunk a PTL448-A és PTL-448-B jelű vegyületekből, fehér por formájában. Ezeknek az anyagoknak az elválasztására alumínium-oxid vékonyréteg kromatográfiai végezünk (Merck 5550,kifejlesztő oldószer etilacetát/benzol 6/1 arányú elegye). A 0,6 és 0.4 Rf értékű sávokat összegyűjtjük, etilacetáttal kioldjuk, majd bepároljuk, így 37 mg PTL-448-A Rf 0,6, illetve 45 mg PTL-448B (Rf 0,4) anyagot kapunk, fehér por formájában. A PTL-448 anyagok fizikai kémiai tulajdonságait az 1., valamint 2(A) és 2(B) táblázatban mutatjuk be.
2—4. példák
Az 1. példában leírt eljárást ismételjük meg, azzal a különbséggel, hogy protilonolid, a tenyésztés első napja után adagolandó kiindulási anyag helyett 5-0-mikaminazolil-protilonolidot, 20-hidroxi-5-0-mikaminazil-protilonoüdot vagy 20-oxo-5-0-mikaminozil-protilonolidot adagolunk, mindegyik anyagot 15 mg/lombik mennyiségben. A tenyésztés megkezdése után három nappal PTL-448-A és -B keletkezik és halmozódik fel a tenyészlében, a 3. táblázat-ban bemutatott mennyiségben. A mennyiség meghatározását úgy végezzük, hogy a tenyészlevet benzollal extraháljuk, akívánatot bepároljuk, a maradékot metanolban oldjuk, majd az 1. példa alapján a maradékot vékonyréteg kromatografiával választjuk szét és tisztítjuk, alumíniumoxid/szilikagél-en, páasztázó UV-vel 232 nm-en.
3. táblázat
Példa Kiindulási anyag PTL-448 mennyi-
sége A (pm/n^J)
2. 5-o-Mikamifiozil- protilonolid 10 11
3. 20-Hidroxi-5-0-mika- minozil-protilonolid 5 8
4. 20-oxo-5 -0-mikaminozil-protilonolid 19 20.
5. példa
Az 1. példában leírt eljárást ismételjük meg, azzal a különbséggel, hogy a Streptomyces ambofaciens STCC 23877 törzset használjuk oltóanyagként. Ennek eredményeképpen úgy találtuk, hogy 1.2 pg/ml PTL-448-A és 3.5 jug/ml PTL-448-B keletkezik és halmozódik fel a tenyészlében. Az 1. példában szereplő törzset hasonló kísérletben alkalmazva 15 pg/ml PTL-448-A és 21 Mg/ml PTL448-B keletkezik.
6. példa
100 milligram PTL-448-A vegyületet oldunk 5 ml sósavval savanyított metanolban (pH 2) majd 2 órán át 42 °C-on kevertetjük. A reakció-elegy pH-ját 9-re növeljük nátrium-hidroxiddal, majd az oldatot benzollal extraháljuk. A maradékot kevés metanolban, oldjuk, majd vékonyréteg-kromatográfiát végzünk vele (szilikagél, kifejlesztő keverék a kloroform/metanol/tömény vizes ammónia 10/1/0.05 arányú elegye). A körübelül 0,4-es Rf értékkel rendelkező terméket kinyerjük, majd besűrítjük, így 45 mg PTL448-C vegyületet kapunk fehér por formájában. Ennek az anyagnak a fizikai-kémiai tulajdonságait az 1. táblázatban mutatjuk be.
7. példa milliméter, 20 mg PTL-448-A vegyületet tartalmazó, 0.1 N sósav/metanol 1/3 elegyet szobahőmérsékleten éjszakán át kevertetjük. Benzollal való extrahálás után, a 6. példában szereplő eljárást alkalmazva 8.4 mg PTL-448-C vegyületet kapunk.
8. példa
A 6. példában szereplő eljárást ismételjük meg, azzal a különbséggel, hogy 100 mg PTL-448-B vegyületet oldunk 15 ml, sósavval ρΗ-2-re savanyított metanolban. Így 41 mg fehér por formájú PTL-448-D vegyületet kapunk. Ennek az anyagnak a fizikai-kémiai tulajdonságait az 1. táblázatban mutatjuk be.
A kísérő rajzok között az 1. ábra mutatja a PTL-448-A UV elnyelési spektrumát (metanolban), a 2. ábra a PTL-448-A infravörös elnyelési spektrumát (kálium-bromidban), a 3. ábra a PTL-448-A proton mag-mágneses rezonancia spektrumát (CDCl3-ban), a
4. ábra a PTL-448-B UV elnyelési spektrumát metanolban), az 5. ábra a PTL-448-B infravörös elnyelési spektrumát (kálium-bromid módszer), a 6. ábra a PTL-448-B protonmágneses rezonancia spektrumát (CDCl3-ban), a 7. ábra a PTL-448-C UV elnyelési spektrumát (metanolban), és a 8. ábra mutatja a PTL448-D UV elnyelési spektrumát (metanolban).
A találmány szerinti PTL-448 származékok mikroba-ellenes hatását a következő, 4. táblázatban mutatjuk be, mely számos, különböző tipikus baktériumokkal szemben meghatározott minimális gátló koncentrációt (MIC) -vizsgáló kísérlet eredményeit összegzi Spiramicin I-gyel és III-mal (SPM I és SPM III) kapott összehasonlító eredményeket is megadunk. A vizsgálatokat szív-infúziós agar táptalajon végeztük (pH 7,37 °C, körülbelül 20 óra inkubálás).
192.401 η
CM
Η.
ο 'Ί
CM
V) Ό
CM νχ
Ν© «Η
CM
Γ·* Τζ co θ' \Ο κο <ο \Ο η ό. π.
ΤΗ ^1 Τ“« ** . Ο \Ο SO SO η η ο η ·*.
*·< *“t CJ
CM CM 00 sO
«H r-4 r* Άι -
<O CO & mH
rt„ ο
υο *λ \ö cm
CM CM «Ο »-(
ΝΟ
Ί·
Ο
Pm
00
cn
m
só I—<
υ CO
α o\
Η < Os u ©
3 F>“i CM
I
CO
co
Ο &
rt ο
SO ιη rt ο
rt„
Ο rt
G) rt
Ο m
rt - ο
Ο Q ιη ιη rt
Ο
C* ©
Α ν\ ζ <ο so g*
Ε
W cn <π
I
Ζ a
NJX: Nincs meghatá
192.401
Ezenkívül a Mycoplasma-ellenes hatást is vizsgáltuk a szokásos módszerekkel (8 mm átmérőjű papírkorong, 37 °C, körülbelül 48 óra), az eredményeket 5 az alábbiakban közöljük:
5. táblázat 1J
Teszt mikroorganizmus A gátlás! zóna ámérője(mm) PTL-448-A -B-C -D
Mycoplasma gallisep- 15 ticumKP-13 29.2 30.1 - Acholeplasma laidlawii,
PG-8 * 32.6 31.4 33.1 32.0
Ezek szerint a találmány szerinti vegyületek használhatók melegvérű állatok és emberek bakteriális 20 vagy Mycoplasma fertőzésének kezelésében.
Ezekre a célokra a találmány szerinti új aktív adalékanyagokat a gyógyászatban és állategészségügyben általánosan használt kötő- és hordozó-anyagokkal formulázzuk. Ezek a hordozók és kötőanyagok lehetnek a spiramicinnél vagy tilozinnál használthoz hasonlók. 25 Az adagolási határok szintén hasonlóak lehetnek a fenti antibiotikumoknál használtakhoz.
A találmány szerinti PTL448 származékok alacsony toxicitását egereken végzett vizsgálatokkal illusztráljuk, mely szerint az A, B, C és D vegyületek- _ kel 100 mg/kg dózisban intraperitonálisan kezelt álla- 30 tok között nem volt elhullás.

Claims (2)

  1. Szabadalmi igénypontok
    1. Eljárás a következő fizikai kémiai tulajdonságokkal rendelkező PTL-448-A
    a) elem-analízis (közelítő értékek)
    C(%): 63,73
    H (%): 9,85
    N(%):2,92 40
    b) olvadáspont: 108-110 °C,
    c) összegképlet: C4 8 H8 2 N2 014,
    d) molekulasúly: 910,
    e) optikai forgatás [a] p = 40,0° (c = 1, CHC13),
    f) 13C-NMR-spektrum (CDC13-bán): kémiai eltolódási értékek (ppm). 202,3, 171,1, 170,8, 137,1, 45
    135,9, 133,0, 128,8, 104,2, 101,1,96,4, 80,5, 79,1,
    76.4, 74,8, 73,8, 73,3, 71,7, 70,1,69,4, 68,8, 66,1,
    44,0, 42,0, 41,0, 40,7, 38,9, 37,8, 34,3, 31,3, 30,7,
    25.4, 25,0,21,4, 19,1, 19,0, 19,0, 18,5, 18,3, 16,8, 15,9,12,7,10,0,9,5, melynek feltételezett szerkezete az (II) általános kép- Ö J letnek felel meg, ahol Rj acetilcsoport és R2 mikarozilcsoportj — a következő fizikai kémiai tulajdonságokkal rendelkező PTL448-B
    a) elem-analízis (közelítő értékek)
    C(%): 62,45
    H(%):9,18
    N (%):3,25, _
    b) olvadáspont: 114-115 C, .
    c) összegképletC41 Ηβ 0 N2 013,
    d) molekulasúly: 868, ,,
    e) optikai forgatás: [a]D 1 : + 14,4°(c= 1,CHC13),
    f) *3C-NMR- spektrum (CuCl3 -bán): kémiai eltolódás! értékek (ppm): 202,7, 174,9, 135,1, 134,8, 133,9, 129,5, 105,0, 102,4, 96,3, 82,6, 79,4, 76,5, 74,6, 73,8, 71,4, 69,4, 69,0,66,0,64,8,44,1,42,0, 41,0, 40,7, 39,0, 38,0, 37,3, 33,2, 31,2, 30,5, 25,4, 24,8, 19,3, 19,1, 18,5, 18,3, 16,7, 16,6, 12,9, 9,6, 8,3, melynek feltételezett szerkezete a (II) általános képletnek felel meg, ahol Rí hidrogénatom és R2 míkarozilcsoport, a következő fizikai kémiai tulajdonságokkal rendekező PTL-448-C
    a) elem-analízis (közelítő értékek)
    C(%) :64,78
    H(%) :9,24
    N(%)3,57,
    b) olvadáspont:91—93 °C,
    c) összegképlet:C41íÍ7oN20U)
    d) molekulasúly: 766.
    e) optikai forgatás [α]ρ =-15,9° (c =0,5,CHC13) melynek feltételezett szerkezete (II) általános képletnek felel meg, ahol Rj acetilcsoport és R2 hidrogénatom, valamint — a következő fizikai kémiai tulajdonságokkal rendelkező PTL-448-D
    a) elem-analízis (közelítő értékek)
    C(%) :63,82
    H(%):9,26
    N(%) :3,97
    b) olvadáspont: 98—100 °C,
    c) összegképlet:C39H6eN2Oio,
    d) molekulasúly: 724,
    e) optikai forgatás: [a] D = +23,2° (c=0,5 CHC13), melynek feltételezett szerkezete a (II) általános képletnek felel meg, ahol R, és R2 hidrogénatom, előállítására, azzal jellemezve, hogy a Streptomyces amgofaciens ATCC 15154 mikroorganizmust vagy annak mutánsát levegőztetve tenyésztjük emészthető szén- és nitrogénforrást, valamint szervetlen sókat tartalmazó tenyésztő táptalajba, a protilonolid, 5-0-mikaminozil-protilonolid, 20-hidroxi-5-0-mikaminozil-protilonolid és 20-oxo-5-0-mikaminozil-protilonolid makrolid intermedierek közül egynek vagy többnek a jelenlétében, kívánt esetben a keletkezett faktorokat a tenyészléből kinyeqük és elválasztjuk, és kívánt esetben a PTL-449-C és/vagy PTL448-D faktor előállítására a keletkezett PTL-448-A és/vagy PTL-448-B faktort savas hidrolízisnek vetjük alá.
  2. 2. Az 1 . igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve , hogy a tenyésztő táptalajba ceruíenin enzim-inhibitort adunk.
HU841252A 1983-03-30 1984-03-29 Process for preparing macrolide antibiotics HU192401B (en)

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
JP58054677A JPS59181294A (ja) 1983-03-30 1983-03-30 抗生物質ｐｔｌ−４４８とその誘導体およびそれらの製造方法

Publications (2)

Publication Number Publication Date
HUT37656A HUT37656A (en) 1986-01-23
HU192401B true HU192401B (en) 1987-06-29

Family

ID=12977414

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
HU841252A HU192401B (en) 1983-03-30 1984-03-29 Process for preparing macrolide antibiotics

Country Status (23)

Country Link
US (1) US4609645A (hu)
EP (1) EP0121408B1 (hu)
JP (1) JPS59181294A (hu)
KR (1) KR860000602B1 (hu)
AT (1) ATE41011T1 (hu)
AU (1) AU562464B2 (hu)
BG (1) BG40817A3 (hu)
CA (1) CA1213546A (hu)
DE (1) DE3476883D1 (hu)
DK (1) DK148184A (hu)
EG (1) EG16889A (hu)
ES (1) ES531043A0 (hu)
FI (1) FI841240A (hu)
GB (1) GB2137204B (hu)
GR (1) GR81465B (hu)
HU (1) HU192401B (hu)
IE (1) IE57140B1 (hu)
IL (1) IL71407A (hu)
NZ (1) NZ207673A (hu)
PL (1) PL144886B1 (hu)
PT (1) PT78325B (hu)
SU (1) SU1344248A3 (hu)
ZA (1) ZA842349B (hu)

Families Citing this family (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5026832A (en) * 1988-12-26 1991-06-25 Toyo Jozo Co., Ltd. 9-dihydro-9-O-alkyldesmycosin derivatives
DE69324434T2 (de) * 1992-10-29 1999-12-23 Meiji Seika Kaisha Ltd., Tokio/Tokyo 16-Gliederige Makrolid-Derivate und Verfahren zu deren Herstellung

Family Cites Families (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4321361A (en) * 1980-06-12 1982-03-23 Eli Lilly And Company Demycinosyltylosin and process for its production
US4366247A (en) * 1980-07-02 1982-12-28 Eli Lilly And Company Process for preparing tylactone
US4362881A (en) * 1980-07-02 1982-12-07 Eli Lilly And Company Tylactone
EP0052361A1 (en) * 1980-11-18 1982-05-26 Sanraku-Ocean Co., Ltd. Novel 16-membered macrolide compounds
AU551142B2 (en) * 1981-07-09 1986-04-17 Zaidan Hojin Biseibutsu Kagaku Kenkyukai Tylosin derivatives
IL69666A (en) * 1982-09-13 1987-10-20 Lilly Co Eli 20-amino-20-deoxo-5-o-mycaminosyl-23-o-mycinosyltylonolide derivatives,their preparation and veterinary antibiotic use

Also Published As

Publication number Publication date
BG40817A3 (en) 1987-02-16
PL144886B1 (en) 1988-07-30
ZA842349B (en) 1984-11-28
GR81465B (hu) 1984-12-11
IL71407A (en) 1987-07-31
ATE41011T1 (de) 1989-03-15
EP0121408B1 (en) 1989-03-01
AU562464B2 (en) 1987-06-11
CA1213546A (en) 1986-11-04
IE840776L (en) 1984-09-30
PT78325A (en) 1984-04-01
IE57140B1 (en) 1992-05-06
GB2137204B (en) 1986-05-29
PT78325B (en) 1986-07-22
AU2617584A (en) 1984-10-04
EP0121408A2 (en) 1984-10-10
PL246903A1 (en) 1985-03-26
GB2137204A (en) 1984-10-03
SU1344248A3 (ru) 1987-10-07
EP0121408A3 (en) 1986-02-12
DE3476883D1 (en) 1989-04-06
HUT37656A (en) 1986-01-23
FI841240A (fi) 1984-10-01
ES8506043A1 (es) 1985-06-16
JPS59181294A (ja) 1984-10-15
ES531043A0 (es) 1985-06-16
EG16889A (en) 1991-12-30
KR860000602B1 (ko) 1986-05-22
IL71407A0 (en) 1984-06-29
KR840007884A (ko) 1984-12-11
US4609645A (en) 1986-09-02
DK148184D0 (da) 1984-02-29
DK148184A (da) 1984-10-01
GB8407990D0 (en) 1984-05-10
FI841240A0 (fi) 1984-03-28
NZ207673A (en) 1986-12-05
JPH0526797B2 (hu) 1993-04-19

Similar Documents

Publication Publication Date Title
AKANISHI et al. K-252b, c and d, potent inhibitors of protein kinase C from microbial origin
NZ197359A (en) 23-demycinosyltylosins and veterinary formulations; prepa ration of omt and dihydro-omt
US4559301A (en) Process for preparing macrocin derivatives
US4946941A (en) Novel glycopeptide antibiotics
CA2092045C (en) Erythromycin derivatives, preparation and use thereof
KR100659680B1 (ko) 항생 물질 카프라자마이신류 및 그 제조법
KR960012063B1 (ko) 글리콜펩티드 항생물질 pa-45052 및 그의 제조방법
CA1338085C (en) Antibiotics bu-3608d and bu-3608e from actinomadura
HU192401B (en) Process for preparing macrolide antibiotics
EP0245012B1 (en) Method for the preparation of 14-hydroxy-6-0-methyl-erythromycin a
US4247542A (en) A-40104 Antibiotics and process for production thereof
EP0121328B1 (en) Macrolide derivatives
EP0420552B1 (en) New antifungal antibiotic, and the production and uses of same
KR860001997B1 (ko) 데(미시노실옥시)틸로신 유도체의 제조방법
CA2047997C (en) Antibiotic, balhimycin, a process for its production and its use as pharmaceutical
EP0002589B1 (en) A-40104 antibiotics, their preparation, and formulations containing them
KR840001193B1 (ko) 마크로라이드 항생물질의 제조방법
HU224610B1 (hu) Vankoreszmicin, eljárás előállítására és gyógyszerként történő alkalmazása
US4656258A (en) Macrocin derivatives
NZ197360A (en) 23-(demycinosyloxy) tylosins and veterinary formulations; preparation of domt and dihydrodomt
US5096817A (en) Process for producing antibiotics BU-3608 D and BU-3608 E
US4728612A (en) Boxazomycin A and B, new antibiotics containing benzoxazole nucleus
KR820002138B1 (ko) A-40104 항생물질의 제조방법
AU713765B2 (en) Novel antitumor antibiotic compounds: hayumicins and analogs thereof
US20010018450A1 (en) Amycomycin, a process for its production and its use as a pharmaceutical

Legal Events

Date Code Title Description
HU90 Patent valid on 900628
HMM4 Cancellation of final prot. due to non-payment of fee