GR1004300B - Νεα, ανοσοαναλυτικη, μεθοδος προσδιορισμου της φερομονης του δακου της ελιας - Google Patents

Abstract

παρούσα εφεύρεση αναφέρεται σε μια νέα ανοσοαναλυτική μέθοδο προσδιορισμού της φερομόνης του δάκου της ελιάς, υψηλής ευαισθησίας, επαναληψιμότητας και ακρίβειας, ικανής να αναλύει σε μικρό χρονικόδιάστημα μεγάλο αριθμό δειγμάτων, η οποία βασίζεταιστη χρήση ειδικών αντισωμάτων, που αναγνωρίζουν τη φυσική φερομόνη του εντόμου και έχουν αναπτυχθεί εναντίον ειδικών παραγώγων της φερομόνης. Τα παράγωγα αυτά φέρουν ενεργοποιμένα πλάγια αλυσίδα, κατάλληλη για πρόσδεση του μορίου της φερομόνης σε ανοσογονικό φορέα, πχ. πρωτεϊνη, ο οποίος φορέας είναι απαραίτητος για την ενεργοποίηση του ανοσοποιητικού συστήματος ζώων, προς παραγωγή αντισωμάτων μετά από ανοσοποίηση. Κατά τη νέα ανοσοαναλυτική μέθοδο χρησιμοποιείται επίσης βιοτινυλιωμένο παράγωγοτης φερομόνης του δάκου, το οποίο με τη σειρά του είναι προσδεδεμένο σε αβιδίνη (ή στρεπταβιδίνη ή κατάλληλο παράγωγο των παραπάνω), φυσικής φερομόνης, που βρίσκεται στα πρότυπα διαλύματα της ανοσοαναλυτικής μεθόδου ή στα προς ανάλυση δείγματα, με το βιοτινυλιωμένο παράγωγο της φερομόνης, για την κατάληψη περιορισμένου αριθμού θέσεων σύνδεσης του ειδικού αντισώματος της ανοσοαναλυτικής μεθόδου. Κατά τη διαδικασία χρησιμοποιείται επίσης κατάλληλα επισημασμένο δεύτερο αντίσωμα, π.χ. με ένζυμο, ραδιοϊσότοπο, φθορίζουσα ουσία, ή άλλο τρόπο, το οποίο συνδέεται με το ειδικό αντίσωμα της ανοσοαναλυτικής μεθόδου, οπότε προκύπτει σήμα, οπτικό, ή ραδιενεργό, η φθορίζον ή άλλο, εξαρτώμενο από τη συγκέντρωση της φυσικής φερομόνης. Σε εναλλακτικές εκδοχές της περιγραφείσας ανοσοαναλυτικής μεθόδου μπορούν να χρησιμοποιηθούν συναφή με τα παραπάνω αντιδραστήρια, πχ ραδιοεπισημασμένα ή ενζυμικώς επισημασμένα ή φθορίζοντα, κλπ, παράγωγα της φερομόνης. Επίσης, μπορεί να αποφευχθεί ή χρήση αντιδραστήριων ακινητοποιημένων σε στερεή επιφάνεια και ο διαχωρισμός των φάσεων της ανοσοαναλυτικής μεθόδου (δεσμευμένης από ελεύθερη) να γίνεται με τη βοήθεια ειδικού κατακρημνιστικού αντιδραστηρίου.ΰ