FR3097128A1 - Cosmetic use of a vegetable gold extract (SYNGONANTHUS NITENS Ruhland) - Google Patents
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Abstract
La présente invention se rapporte à une composition cosmétique ou dermatologique comprenant au moins un extrait d’or végétal (Syngonanthus nitens Ruhland) et au moins un véhicule cosmétiquement et/ou dermatologiquement acceptable. La présente invention se rapporte également à un dispositif se présentant sous une forme choisie parmi un pot, un flacon-pompe, une lingette, un masque, un dispositif transdermique, un patch, un spray, ce dispositif comprenant une composition cosmétique ou dermatologique telle que définie précédemment. La présente invention se rapporte en outre à un procédé de soin cosmétique non-thérapeutique, comprenant l’application sur la peau ou les muqueuses d’une composition cosmétique telle que définie précédemment, ainsi qu’à une utilisation d’un extrait d’or végétal (Syngonanthus nitens Ruhland) en tant qu’actif cosmétique.The present invention relates to a cosmetic or dermatological composition comprising at least one plant gold extract (Syngonanthus nitens Ruhland) and at least one cosmetically and / or dermatologically acceptable vehicle. The present invention also relates to a device in a form chosen from a pot, a pump-dispenser, a wipe, a mask, a transdermal device, a patch, a spray, this device comprising a cosmetic or dermatological composition such as previously defined. The present invention also relates to a non-therapeutic cosmetic care process, comprising the application to the skin or the mucous membranes of a cosmetic composition as defined above, as well as to a use of a gold extract. plant (Syngonanthus nitens Ruhland) as a cosmetic active.
Description
La présente invention se rapporte à une composition cosmétique ou dermatologique comprenant un extrait végétal, à un dispositif comprenant cette composition cosmétique ou dermatologique, ainsi qu’à un procédé de soin cosmétique non-thérapeutique, comprenant l’application sur la peau ou les muqueuses da la composition cosmétique et à une utilisation de l’extrait végétal en tant qu’actif cosmétique.The present invention relates to a cosmetic or dermatological composition comprising a plant extract, to a device comprising this cosmetic or dermatological composition, as well as to a non-therapeutic cosmetic care process, comprising the application to the skin or the mucous membranes of the cosmetic composition and to a use of the plant extract as a cosmetic active ingredient.
La présente invention trouve une application dans le domaine de la cosmétique et de la dermatologie, plus particulièrement de la cosmétique cutanée.The present invention finds an application in the field of cosmetics and dermatology, more particularly skin cosmetics.
Dans la description ci-dessous, les références entre crochets ([ ]) renvoient à la liste des références présentée à la fin du texte.In the description below, references in square brackets ([ ]) refer to the list of references presented at the end of the text.
Etat de la techniqueState of the art
La peau est un organe vital à part entière qui se compose de trois tissus distincts, assumant chacun différents rôles grâce à différents types cellulaires et différentes structures.The skin is a vital organ in its own right that is made up of three distinct tissues, each performing different roles thanks to different cell types and different structures.
Le tissu le plus en surface et donc le plus exposé est l'épiderme. Cet épithélium pluristratifié (Malpighien) et kératinisé, se compose de différentes cellules associées à de nombreuses fonctions de barrière et de protection. Les cellules majoritaires sont les kératinocytes qui se divisent dans la couche basale et entament leur différenciation jusqu’à la couche cornée (couche la plus externe) puis sont éliminés par desquamation, en 21 à 28 jours, en moyenne. L’épiderme comprend également des mélanocytes, cellules responsables de la pigmentation de la peau. Ces derniers présentent des dendrites, ramification permettant le transport de la mélanine vers les kératinocytes environnants. Un mélanocyte est en contact avec une quarantaine de kératinocytes en moyenne, ce qui forme une unité pigmentaire. Le rôle majeur de l'épiderme est d'apporter à la peau, et donc au corps humain, une première ligne de protection contre les agressions extérieures, comme les agressions physiques, chimiques, hydriques et bactériologiques. Cette protection est notamment assurée par les couches les plus différenciées et la couche cornée connue pour ses propriétés hydrophobes, son aspect compacte et étanche. Une bonne différenciation des kératinocytes et donc une bonne desquamation sont essentielles pour une surface lisse, homogène et régulière. Or, les stress extérieurs et l’âge ralentissent ce processus qui peut alors devenir plus long et plus irrégulier. La desquamation devenant irrégulière et/ou anarchique, des défauts de lissage et d’homogénéité de surface de la peau s’installent. De plus, lors du vieillissement, des tâches pigmentaires peuvent apparaître en raison de la désorganisation de la mélanine, ce qui implique des irrégularités de couleur et de teint du visage.The most surface tissue and therefore the most exposed is the epidermis. This pluristratified (Malpighian) and keratinized epithelium is made up of different cells associated with numerous barrier and protective functions. The majority cells are the keratinocytes which divide in the basal layer and begin their differentiation up to the stratum corneum (outermost layer) then are eliminated by desquamation, in 21 to 28 days, on average. The epidermis also includes melanocytes, cells responsible for skin pigmentation. The latter have dendrites, branching allowing the transport of melanin to the surrounding keratinocytes. A melanocyte is in contact with about forty keratinocytes on average, which forms a pigmentary unit. The major role of the epidermis is to provide the skin, and therefore the human body, with a first line of protection against external attacks, such as physical, chemical, water and bacteriological attacks. This protection is notably ensured by the most differentiated layers and the stratum corneum known for its hydrophobic properties, its compact and waterproof appearance. Good keratinocyte differentiation and therefore good desquamation are essential for a smooth, homogeneous and regular surface. However, external stresses and age slow down this process, which can then become longer and more irregular. As desquamation becomes irregular and/or anarchic, defects in smoothness and surface homogeneity of the skin set in. In addition, during aging, pigment spots may appear due to the disorganization of melanin, which implies irregularities in the color and complexion of the face.
En position intermédiaire, le derme est un tissu conjonctif investi majoritairement de fibroblastes et de protéines matricielles donnant à la peau ses qualités de compressibilité et d'élasticité connues. Les modifications de sa texture et de sa composition sont largement responsables des altérations de la peau qui surviennent au cours du vieillissement. Le relief de la couche cornée est, par ailleurs, directement conditionné par la qualité et la densité du derme qui la sous-tend.In an intermediate position, the dermis is a connective tissue invested mainly with fibroblasts and matrix proteins giving the skin its known qualities of compressibility and elasticity. Changes in its texture and composition are largely responsible for the skin changes that occur during aging. The relief of the stratum corneum is, moreover, directly conditioned by the quality and density of the dermis which underlies it.
Au sein de la trame conjonctive, s'intercalent aussi d’autres cellules et structures, tel un important réseau circulatoire et nutritif, constitué des vaisseaux sanguins et des capillaires lymphatiques, ainsi que les annexes épidermiques : cheveux, poils, ongles, glandes pilosébacées et glandes sudoripares, qui prennent naissance dans le derme profond.Within the connective tissue, other cells and structures are also inserted, such as an important circulatory and nutritive network, made up of blood vessels and lymphatic capillaries, as well as the epidermal appendages: hair, hairs, nails, pilosebaceous glands and sweat glands, which originate in the deep dermis.
L'hypoderme, situé en profondeur et constitué en majeure partie de lobules graisseux (adipocytes), assure une fonction de support primaire, de protection mécanique et thermique et joue aussi un rôle de stockage des réserves énergétiques rapidement mobilisables pour tous les besoins biologiques, comme par exemple le renouvellement cellulaire, la défense de l’organisme ou la contraction musculaire.The hypodermis, located in depth and consisting mainly of fatty lobules (adipocytes), provides a primary support function, mechanical and thermal protection and also plays a role in storing energy reserves that can be quickly mobilized for all biological needs, such as for example cell renewal, body defense or muscle contraction.
Les attentes en termes de cosmétiques s’orientent de plus en plus vers des produits naturels, efficaces et éco-conçus. Les réponses cosmétiques à la problématique du vieillissement cutané s’orientent fréquemment vers les alpha-hydroxyacides (acide glycolique, malique, citrique et tartrique) qui présentent une action immédiate due à l’effet exfoliant. Mais ils peuvent entraîner des dégradations de l’épiderme, des inflammations et peuvent amplifier les dégâts induits par les UV. De plus, il s’agit souvent d’une action limitée en surface et limitée dans le temps ; laquelle peut occasionner un effet rebond.Expectations in terms of cosmetics are increasingly moving towards natural, effective and eco-designed products. Cosmetic responses to the problem of skin aging frequently focus on alpha-hydroxy acids (glycolic, malic, citric and tartaric acid) which have an immediate action due to the exfoliating effect. But they can cause degradation of the epidermis, inflammation and can amplify the damage induced by UV rays. Moreover, it is often an action limited in surface and limited in time; which can cause a rebound effect.
Il existe donc un réel besoin de trouver de nouvelles compositions et/ou composés permettant d'assurer de façon effective, complète, durable et sûre, un effet d’amélioration des qualités de surface de la peau. En particulier, il existe un réel besoin de trouver des composés naturels qui permettent une amélioration et une protection des propriétés de surface, de douceur, d’éclat, de lissage et d’homogénéité du teint de la peau, un effet hydratant et un effet nourrissant.There is therefore a real need to find new compositions and/or compounds making it possible to provide an effect of improving the surface qualities of the skin in an effective, complete, lasting and safe manner. In particular, there is a real need to find natural compounds which allow improvement and protection of the surface properties, softness, radiance, smoothing and homogeneity of the complexion of the skin, a moisturizing effect and an feeding.
Description de l’inventionDescription of the invention
La présente invention a précisément pour but de répondre à ces besoins et inconvénients de l’art antérieur.The purpose of the present invention is precisely to meet these needs and disadvantages of the prior art.
Les inventeurs sont les tout premiers à utiliser un extrait d’Or végétal permettant précisément de répondre efficacement aux besoins précités.The inventors are the very first to use an extract of vegetable Gold which precisely makes it possible to effectively meet the aforementioned needs.
Les inventeurs sont les tous premiers à avoir découvert que cet extrait d’Or végétal possède de manière inattendue un effet anti-âge.The inventors are the very first to have discovered that this vegetable gold extract unexpectedly has an anti-aging effect.
En effet, les inventeurs ont notamment mis en évidence un effet de cet extrait sur la différenciation des kératinocytes épidermiques, l’inhibition de la synthèse de mélanine, la stimulation du transfert de la mélanine des mélanocytes aux kératinocytes environnants, mais également un effet sur l’angiogenèse.Indeed, the inventors have in particular demonstrated an effect of this extract on the differentiation of epidermal keratinocytes, the inhibition of melanin synthesis, the stimulation of the transfer of melanin from melanocytes to surrounding keratinocytes, but also an effect on the angiogenesis.
Ainsi, les inventeurs sont les premiers à proposer cet extrait en tant qu’agent cosmétique permettant d’améliorer et de protéger l’aspect de la peau, notamment en apportant un effet de lissage et/ou douceur et/ ou d’amélioration de l’éclat, un effet hydratant et un effet nourrissant. Avantageusement, cet extrait permet également d’uniformiser le teint et de limiter les tâches pigmentées de la peau, notamment par l’inhibition de la synthèse de mélanine, l’homogénéisation du transfert de la mélanine dans les kératinocytes, ceci afin d’obtenir une meilleure répartition de la coloration.Thus, the inventors are the first to propose this extract as a cosmetic agent making it possible to improve and protect the appearance of the skin, in particular by providing a smoothing and/or softness and/or skin-improving effect. radiance, a moisturizing effect and a nourishing effect. Advantageously, this extract also makes it possible to standardize the complexion and to limit the pigmented spots of the skin, in particular by the inhibition of the synthesis of melanin, the homogenization of the transfer of melanin in the keratinocytes, this in order to obtain a better color distribution.
Ainsi, un premier objet de l’invention se rapporte à une composition cosmétique ou dermatologique comprenant au moins un extrait d’or végétal (Syngonanthus nitens Ruhland) et au moins un véhicule cosmétiquement et/ou dermatologiquement acceptable.Thus, a first object of the invention relates to a cosmetic or dermatological composition comprising at least one vegetable gold extract ( Syngonanthus nitens Ruhland ) and at least one cosmetically and/or dermatologically acceptable vehicle.
Syngonanthus nitens Ruhland, également appeléeEriocaulon nitens Bong., golden grass en anglais, Capim dourado en portugais, communément appelée « or végétal » en français ou encore herbe dorée, est une herbacée endémique du Brésil. Elle pousse dans les régions humides (marais) du Jalapão à l’Est de l’état du Tocantins. Le Jalopão fait partie du Cerrado, un écosystème précieux du Brésil dans lequel on trouve plus de 11 000 espèces végétales et 3 biotypes. Syngonanthus nitens Ruhland , also called Eriocaulon nitens Bong ., golden grass in English, Capim dourado in Portuguese, commonly called “vegetable gold” in French or golden grass, is an endemic herbaceous plant from Brazil. It grows in the humid regions (swamps) of Jalapão in the east of the state of Tocantins. The Jalopão is part of the Cerrado, a precious ecosystem in Brazil in which there are more than 11,000 plant species and 3 biotypes.
Syngonanthus nitensest une herbe polycarpique pérenne avec des feuilles arrangées en spirale dans une rosette basale de 4cm de diamètre. La plante peut annuellement produire 1 à 10 tiges, chaque tige présentant un capitule floral en son sommet. La floraison commence en juillet et les graines sont produites de septembre à octobre. Chaque capitule contient environ 60+/-14 graines mesurant de 0,7 à 1,0mm de long et 0,2 à 0,35mm de large. Les graines sont dispersées naturellement par le vent ou la main de l’homme, permettant sa reproduction. La tige est recouverte d’une gaine basale. Entre septembre et octobre, les tiges prennent une couleur dorée et se détachent facilement de la rosette basale. La tige mesure entre 30 et 70cm de long et 5mm de large, selon les variétés. L’or végétal pousse près de cours d’eau, notamment des marais. Dans cette région, la tige fleurie est récoltée pour l’artisanat local, pour fabriquer notamment des bijoux ou des sacs. La récolte de l’or végétal a lieu exclusivement du 20 septembre au 20 novembre et les tiges fleuries après récolte doivent être tapées pour disséminer les graines dans la nature. Syngonanthus nitens is a perennial polycarpic herb with spirally arranged leaves in a basal rosette 4cm in diameter. The plant can annually produce 1 to 10 stems, each stem having a flower head at the top. Flowering begins in July and seeds are produced from September to October. Each flower head contains about 60+/-14 seeds measuring 0.7-1.0mm long and 0.2-0.35mm wide. The seeds are dispersed naturally by the wind or the hand of man, allowing its reproduction. The stem is covered with a basal sheath. Between September and October, the stems take on a golden color and easily detach from the basal rosette. The stem measures between 30 and 70cm long and 5mm wide, depending on the variety. Vegetable gold grows near waterways, especially marshes. In this region, the flowering stem is harvested for local crafts, in particular to make jewelry or bags. The harvest of vegetable gold takes place exclusively from September 20 to November 20 and the flowering stems after harvest must be tapped to disseminate the seeds in nature.
Cette plante n’est pas connue en usage alimentaire, ni en cosmétique, et n’a jamais été utilisée en tant que médicament.This plant is not known in food use, nor in cosmetics, and has never been used as a medicine.
L’extrait méthanolique de tiges a démontré des efficacités antifongiques et dans le traitement de candidose vulvovaginale (Marcelo Gonzaga et al. : « Evaluation of Syngonanthus nitens (Bong.) Ruhl. Extract as antifungal and in the treatment of vulvovaginal candidiasis”. Medical Mycology. 2013 Oct ; 51 : 673-682 ([1])). L’extrait méthanolique de tiges présente aussi des efficacités antioxydantes et antimicrobiennes (Felipe Hilário : « Estudo quimico e avaliacao da atividade antioxidante e antimicrobiana dos escapos de Syngonanthus nitens (Bong.) Ruhland. (Eriocaulacea) ». 2012 ([2])).The methanolic stem extract has demonstrated antifungal efficacy and in the treatment of vulvovaginal candidiasis (Marcelo Gonzaga et al.: “Evaluation of Syngonanthus nitens (Bong.) Ruhl. Extract as antifungal and in the treatment of vulvovaginal candidiasis”. Medical Mycology 2013 Oct;51:673-682 ([1])). The methanolic stem extract also exhibits antioxidant and antimicrobial properties (Felipe Hilário: “Estudo quimico e avaliacao da atividade antioxidante e antimicrobiana dos escapos de Syngonanthus nitens (Bong.) Ruhland. (Eriocaulacea)”. 2012 ([2])) .
On entend par extrait d’Or végétal tout extrait obtenu à partir de la planteSyngonanthus nitens Ruhland.By plant gold extract is meant any extract obtained from the Syngonanthus nitens Ruhland plant.
Selon l’invention, l’au moins un extrait d’or végétal peut être un extrait de tout ou partie des parties aériennes de la plante. Il peut notamment être choisi parmi un extrait de sommités fleuries, un extrait de tige, un extrait de gaine de tige, ou un de leurs mélanges. Avantageusement, l’extrait peut être un extrait de tiges et de gaines de la plante. Les tiges et les gaines peuvent être par exemple issues des co-produits de l’artisanat local.According to the invention, the at least one vegetable gold extract can be an extract of all or part of the aerial parts of the plant. It may in particular be chosen from an extract of flowering tops, a stem extract, a stem sheath extract, or one of their mixtures. Advantageously, the extract can be an extract of stems and sheaths of the plant. The rods and sheaths can, for example, come from by-products of local crafts.
L’extrait d’Or végétal utilisé dans l’invention peut être un extrait alcoolique, aqueux, ou hydro-alcoolique. Par exemple, la composition peut comprendre tout ou partie des composés hydrophiles et hydrosolubles qui sont présents dans la plante, en particulier dans les tiges et les gaines de la plante, et qui en sont extraits au moyen d’un solvant choisi parmi l’eau, ou un alcool ou un mélange de plusieurs alcools, ou un mélange d’eau et d’au moins un alcool.The plant gold extract used in the invention can be an alcoholic, aqueous, or hydro-alcoholic extract. For example, the composition may comprise all or part of the hydrophilic and water-soluble compounds which are present in the plant, in particular in the stems and sheaths of the plant, and which are extracted therefrom by means of a solvent chosen from water , or an alcohol or a mixture of several alcohols, or a mixture of water and at least one alcohol.
Le solvant d’extraction employé pour préparer l’extrait utilisé dans le cadre de la présente invention peut être choisi parmi les solvants connus de l’homme du métier, comme par exemple l’éthanol, le propylène glycol, le butylène glycol, le dipropylène glycol, le méthylpropanediol, le propane-1,3-diol, la glycérine, l'eau ou un mélange de ces solvants. Il peut s’agir par exemple d’un extrait obtenu à partir de tiges, notamment extraites par un mélange hydroéthanolique. Alternativement, l'extrait d’Or végétal peut-être obtenu par extraction hydroalcoolique, de préférence dans un mélange eau/éthanol ayant un rapport massique eau/alcool compris entre 90/10 et 10/90, par exemple de l'ordre de 70/30.The extraction solvent used to prepare the extract used in the context of the present invention can be chosen from solvents known to those skilled in the art, such as for example ethanol, propylene glycol, butylene glycol, dipropylene glycol, methylpropanediol, propane-1,3-diol, glycerine, water or a mixture of these solvents. It may be, for example, an extract obtained from stems, in particular extracted with a hydroethanolic mixture. Alternatively, the plant gold extract can be obtained by hydroalcoholic extraction, preferably in a water/ethanol mixture having a water/alcohol mass ratio of between 90/10 and 10/90, for example of the order of 70 /30.
L'extrait d’Or végétal peut être obtenu par tout procédé connu de l’homme du métier. Par exemple, l’extrait d’Or végétal peut être obtenu en broyant (ou non) une ou plusieurs parties de la plante, de préférence séchées et coupées au préalable, puis en mettant en contact le broyat avec un solvant tel que défini précédemment, préférentiellement un mélange eau/alcool ayant un rapport eau/alcool entre 90/10 et 10/90, par exemple un mélange eau/alcool ayant un rapport massique 70/30. L'extraction peut être conduite en mélangeant le broyat et le solvant et en soumettant ce mélange à une agitation de façon à optimiser les échanges entre le broyat et le solvant d'extraction. L'extraction peut être conduite à une température de 20 à 100°C. Par exemple, l’extraction peut être réalisée pendant une durée de l'ordre de 1/2 à 4 heures. La quantité de plante utilisée par rapport au solvant peut être par exemple de 0,5 à 20% en poids par rapport au poids total de plantes et de solvant, par exemple 1,0 à 15,0%, 2,0 à 15,0%, ou 3,0 à 12,0% ou 4,0 à 6,0%, par exemple environ 5,0%. Il est à noter que l'extrait employé dans la présente invention peut éventuellement être purifié préalablement à sa mise en œuvre dans la composition. Cette purification peut par exemple être effectuée par extraction liquide-liquide, par précipitation ou par chromatographie préparative. L’extrait employé dans la présente invention peut être dilué dans un solvant connu de l’homme du métier, comme par exemple le propylène glycol, le butylène glycol, le dipropylène glycol, le méthylpropanediol, le propane-1,3-diol, la glycérine, l'eau ou un mélange de ces solvants. Il peut s’agir par exemple d’un extrait obtenu à partir de tiges et/ou des gaines, notamment extraites par un mélange hydroéthanolique et dilué dans la glycérine.The vegetable gold extract can be obtained by any process known to those skilled in the art. For example, the plant gold extract can be obtained by grinding (or not) one or more parts of the plant, preferably dried and cut beforehand, then by bringing the ground material into contact with a solvent as defined above, preferably a water/alcohol mixture having a water/alcohol ratio between 90/10 and 10/90, for example a water/alcohol mixture having a mass ratio of 70/30. The extraction can be carried out by mixing the ground material and the solvent and by subjecting this mixture to stirring so as to optimize the exchanges between the ground material and the extraction solvent. The extraction can be carried out at a temperature of 20 to 100°C. For example, the extraction can be carried out for a period of the order of 1/2 to 4 hours. The amount of plant used relative to the solvent can be for example 0.5 to 20% by weight relative to the total weight of plants and solvent, for example 1.0 to 15.0%, 2.0 to 15, 0%, or 3.0 to 12.0% or 4.0 to 6.0%, for example about 5.0%. It should be noted that the extract used in the present invention may optionally be purified prior to its use in the composition. This purification can for example be carried out by liquid-liquid extraction, by precipitation or by preparative chromatography. The extract used in the present invention can be diluted in a solvent known to those skilled in the art, such as for example propylene glycol, butylene glycol, dipropylene glycol, methylpropanediol, propane-1,3-diol, glycerin, water or a mixture of these solvents. It may be, for example, an extract obtained from stems and/or sheaths, in particular extracted with a hydroethanolic mixture and diluted in glycerin.
Selon un mode de réalisation, on utilise comme extrait d’Or végétal, l'extrait brut obtenu qui est issu de l'extraction décrite ci-dessus. Il peut donc s’agir du milieu tel qu'il est obtenu directement à l'issue de l'extraction par un des solvants précités, cet extrait brut étant éventuellement filtré préalablement avant son emploi dans la composition de l'invention. Dans ce mode de réalisation, l'extrait employé se présente sous la forme d'une dispersion ou d'une solution dans un milieu liquide incluant le solvant précité.According to one embodiment, the crude extract obtained which is derived from the extraction described above is used as plant gold extract. It may therefore be the medium as it is obtained directly at the end of the extraction with one of the aforementioned solvents, this crude extract possibly being filtered beforehand before its use in the composition of the invention. In this embodiment, the extract used is in the form of a dispersion or a solution in a liquid medium including the aforementioned solvent.
Selon un autre mode de réalisation, on utilise un extrait séché obtenu en soumettant l'extrait brut précité, de préférence filtré, à une étape ultérieure de séchage, typiquement par atomisation ou par lyophilisation, selon des techniques connues, permettant de préserver l'intégrité des composés présents dans l'extrait. L'extrait obtenu selon ce mode de mise en œuvre se présente généralement sous la forme d'une poudre qui peut être employée telle qu'elle ou reprise dans un solvant ou un dispersant pour formuler la composition de la présente invention.According to another embodiment, a dried extract obtained by subjecting the aforementioned raw extract, preferably filtered, to a subsequent drying step, typically by atomization or by freeze-drying, according to known techniques, making it possible to preserve the integrity compounds present in the extract. The extract obtained according to this embodiment is generally in the form of a powder which can be used as it is or taken up in a solvent or a dispersant to formulate the composition of the present invention.
Un extrait selon l’invention est susceptible d’être préparé selon le procédé comprenant les étapes suivantes :
a) Mise en contact de tout ou partie de la plante avec un solvant de type hydroalcoolique,
b) Extraction,
c) Eventuellement concentration du produit obtenu à l’étape b),
d) Filtration du produit obtenu,
e) Eventuellement, dilution dans un solvant approprié ou ajout de toute substance permettant de finaliser l’extrait.An extract according to the invention can be prepared according to the process comprising the following steps:
a) Bringing all or part of the plant into contact with a hydroalcoholic type solvent,
b) Extraction,
c) Optionally concentration of the product obtained in step b),
d) Filtration of the product obtained,
e) Optionally, dilution in an appropriate solvent or addition of any substance making it possible to finalize the extract.
Les procédés et méthodes décrites ci-avant permettent ainsi d’obtenir un extrait final avec les métabolites d’intérêt.The processes and methods described above thus make it possible to obtain a final extract with the metabolites of interest.
Les « métabolites », au sens de la présente invention, sont des composés ou molécules produits par des cellules d’une plante. Il peut s’agir de métabolites primaires, par exemples des sucres, protéines/acides aminés et/ou des lipides. Alternativement ou complémentairement, il peut s’agir de métabolites secondaires comme par exemple des polyphénols. Parmi les polyphénols, l’extrait de l’invention peut contenir avantageusement des flavonoïdes. La composition de l’invention peut ainsi comprendre au moins un flavonoïde choisi parmi l’orientine, l’homorientine, la lutéoline et leurs dérivés, la swertiajaponine, un flavones et un flavanone.“Metabolites”, within the meaning of the present invention, are compounds or molecules produced by cells of a plant. These may be primary metabolites, for example sugars, proteins/amino acids and/or lipids. Alternatively or additionally, they may be secondary metabolites such as polyphenols, for example. Among the polyphenols, the extract of the invention may advantageously contain flavonoids. The composition of the invention may thus comprise at least one flavonoid chosen from orientin, homoorientin, luteolin and their derivatives, swertiajaponin, a flavone and a flavanone.
On entend par « composition cosmétique », dans la présente invention, toute composition à visée cosmétique, c’est à dire esthétique, une composition pouvant être mise en contact avec les parties superficielles du corps humain, par exemple l'épiderme, les systèmes pileux et capillaires. Avantageusement, une composition cosmétique permet, exclusivement ou principalement de les protéger, parfumer, maintenir en bon état, modifier leur aspect ou en corriger les défauts superficiels.The term "cosmetic composition", in the present invention, means any composition for cosmetic purposes, that is to say aesthetic, a composition that can be brought into contact with the superficial parts of the human body, for example the epidermis, the hair systems and capillaries. Advantageously, a cosmetic composition makes it possible, exclusively or mainly, to protect them, perfume them, maintain them in good condition, modify their appearance or correct their superficial defects.
Dans la présente, on entend par « composition dermatologique » toute composition à visée dermatologique, c’est à dire une composition pouvant être mise en contact avec les parties superficielles du corps humain, pour un traitement de la peau, des muqueuses, et des phanères, comme les ongles, les cheveux, ou les poils.In the present, the term "dermatological composition" means any composition for dermatological purposes, that is to say a composition that can be brought into contact with the superficial parts of the human body, for a treatment of the skin, mucous membranes, and appendages. , such as fingernails, hair, or body hair.
Par « véhicule cosmétiquement ou dermatologiquement acceptable », on entend un véhicule adapté pour une utilisation en contact avec des cellules humaines et animales cutanées, en particulier les cellules de l’épiderme, sans toxicité, irritation, réponse allergique indue et similaire, et proportionné à un rapport avantage/risque raisonnable.By "cosmetically or dermatologically acceptable vehicle" is meant a vehicle suitable for use in contact with human and animal skin cells, in particular cells of the epidermis, without toxicity, irritation, undue allergic response and the like, and proportionate to a reasonable benefit/risk ratio.
Le véhicule cosmétiquement acceptable peut être choisi parmi l’eau, l’allantoïne, la glycérine, le méthylpropanediol ; cette liste n’étant pas limitative.The cosmetically acceptable vehicle can be chosen from water, allantoin, glycerin, methylpropanediol; this list is not exhaustive.
La composition de l’invention peut être obtenue par tout procédé approprié connu de l’homme du métier pour la fabrication d’une composition cosmétique. Il peut s’agir, par exemple d’un simple mélange. Il peut s’agir alternativement, par exemple, d’un procédé comprenant une étape d’incorporation d’une phase interne dans une phase externe au moyen d'un émulseur, par exemple d'une turbine de type rotor-stator. Il peut s’agir également par exemple d’un procédé utilisant la Température d'Inversion de Phase (TIP), ce procédé étant classiquement utilisé par l'homme de l'art pour obtenir des émulsions huile dans eau dont les gouttelettes dispersées sont particulièrement fines, par exemple avec un diamètre de 0,1 à 1 µm.The composition of the invention can be obtained by any suitable process known to those skilled in the art for the manufacture of a cosmetic composition. It can be, for example, a simple mixture. It may alternatively be, for example, a process comprising a step of incorporating an internal phase into an external phase by means of an emulsifier, for example a turbine of the rotor-stator type. It may also be, for example, a process using the Phase Inversion Temperature (PIT), this process being conventionally used by those skilled in the art to obtain oil-in-water emulsions whose dispersed droplets are particularly fine, for example with a diameter of 0.1 to 1 µm.
Selon l’invention, la composition cosmétique ou dermatologique peut comprendre 0,00001 à 10 % en poids dudit extrait d’Or végétal par rapport au poids total de la composition. Ladite composition peut comprendre par exemple de 0,0001 à 10,0 % en poids, ou de 0,001 à 10,0 % en poids, ou de 0,01 à 10,0 % en poids ou de 0,1 à 10,0 % en poids, ou de 1,0 à 10,0 % en poids, ou de 1,0 à 9,0 %, ou de 2,0 à 9,0 %, par exemple 0,5% à 7,0% en poids dudit extrait d’Or végétal par rapport au poids total de la composition.According to the invention, the cosmetic or dermatological composition may comprise 0.00001 to 10% by weight of said plant gold extract relative to the total weight of the composition. Said composition may comprise for example from 0.0001 to 10.0% by weight, or from 0.001 to 10.0% by weight, or from 0.01 to 10.0% by weight or from 0.1 to 10.0 % by weight, or from 1.0 to 10.0% by weight, or from 1.0 to 9.0%, or from 2.0 to 9.0%, for example 0.5% to 7.0% by weight of said plant gold extract relative to the total weight of the composition.
La composition cosmétique ou dermatologique de la présente invention peut se trouver sous toute forme appropriée pour une application cosmétique ou dermatologique. Avantageusement, la composition est une composition à usage topique.The cosmetic or dermatological composition of the present invention may be in any form suitable for cosmetic or dermatological application. Advantageously, the composition is a composition for topical use.
Il peut s’agir par exemple d’une composition sous une forme choisie dans le groupe comprenant une émulsion huile dans eau ou eau dans huile ou un mélange de ces émulsions.It may be, for example, a composition in a form chosen from the group comprising an oil-in-water or water-in-oil emulsion or a mixture of these emulsions.
Selon l’invention, la composition cosmétique ou dermatologique peut par exemple se trouver sous une forme choisie dans le groupe comprenant un gel aqueux ou hydroalcoolique, une crème aqueuse ou hydroalcoolique et une lotion aqueuse ou hydroalcoolique. Ces formulations utilisables pour la mise en œuvre de la présente invention sont connues dans l’état de la technique par les formulateurs. Dans ces exemples de composition, il suffit d’ajouter l’extrait d’or végétal de la présente invention pour obtenir une composition conforme à la présente invention.According to the invention, the cosmetic or dermatological composition may, for example, be in a form chosen from the group comprising an aqueous or hydroalcoholic gel, an aqueous or hydroalcoholic cream and an aqueous or hydroalcoholic lotion. These formulations which can be used for the implementation of the present invention are known in the state of the art by the formulators. In these composition examples, it suffices to add the vegetable gold extract of the present invention to obtain a composition in accordance with the present invention.
Selon l’invention, la composition peut être sous une forme choisie parmi un onguent, une crème, une huile, un lait, une pommade, une poudre, un tampon imbibé, une solution, un gel, un sérum, un baume, un beurre, une lotion, une suspension, un savon et une émulsion.According to the invention, the composition can be in a form chosen from an ointment, a cream, an oil, a milk, an ointment, a powder, an impregnated pad, a solution, a gel, a serum, a balm, a butter , a lotion, a suspension, a soap and an emulsion.
L’extrait de la présente invention peut être utilisé dans une composition cosmétique ou dermatologique seul ou en combinaison avec d’autres substances ou ingrédients actifs ou inactifs cosmétiquement ou dermatologiquement. Les substances ou ingrédients inactifs sont ceux qui n’agissent pas cosmétiquement ou dermatologiquement. Il s’agit des éléments de la composition permettant notamment d’accompagner l’extrait, de constituer une formulation particulière, de conserver l’extrait actif dans le temps, cette liste n’étant pas limitative. Il peut s’agir en d’autres termes de tout produit de base pouvant se trouver dans les compositions cosmétiques ou dermatologiques classiques. Par opposition, les substances ou ingrédients actifs sont ceux qui dans l’application cosmétique ou dermatologique visée ont une action esthétique et/ou médicale.The extract of the present invention can be used in a cosmetic or dermatological composition alone or in combination with other cosmetically or dermatologically active or inactive substances or ingredients. Inactive substances or ingredients are those that do not act cosmetically or dermatologically. These are the elements of the composition allowing in particular to accompany the extract, to constitute a particular formulation, to preserve the active extract over time, this list not being exhaustive. In other words, it can be any base product that can be found in conventional cosmetic or dermatological compositions. In contrast, active substances or ingredients are those which, in the targeted cosmetic or dermatological application, have an aesthetic and/or medical action.
Ainsi, l’extrait d’or végétal de la présente invention, peut-être la seule substance ou ingrédient actif d’une composition, ou il peut être associé à d’autres substances ou ingrédients actifs d’une composition cosmétique ou dermatologique.Thus, the vegetable gold extract of the present invention may be the only substance or active ingredient of a composition, or it may be associated with other substances or active ingredients of a cosmetic or dermatological composition.
Un autre objet de l’invention se rapporte à un dispositif pouvant se présenter sous une forme choisie parmi un pot, un flacon-pompe, une lingette, un masque, un dispositif transdermique, un patch, un spray, ledit dispositif comprenant un extrait d’or végétal ou une composition selon l’invention.Another object of the invention relates to a device which may be in a form chosen from a pot, a pump bottle, a wipe, a mask, a transdermal device, a patch, a spray, said device comprising an extract of vegetable gold or a composition according to the invention.
Un autre objet de l’invention se rapporte à un procédé de soin cosmétique non-thérapeutique, ou dermatologique, comprenant l’application sur la peau ou les muqueuses d’une composition cosmétique selon l’invention ou d’un extrait d’or végétal. Avantageusement, ce procédé de soin permet d’apporter notamment un effet d’amélioration des qualités de surface de la peau, par exemple d’au moins un effet choisi parmi l’homogénéisation de la couleur de la peau, l’amélioration du teint, la diminution des tâches pigmentées de la peau, la régénération de la peau, l’amélioration de l’éclat de la peau, l’amélioration du lissage, l’augmentation de la douceur de la peau, l’amélioration de l’aspect général de la peau, l’amélioration de l’hydratation et l’amélioration de la nutrition de la peau et/ou des muqueuses.Another object of the invention relates to a non-therapeutic or dermatological cosmetic care process, comprising the application to the skin or the mucous membranes of a cosmetic composition according to the invention or of a plant gold extract. . Advantageously, this care process makes it possible in particular to provide an effect of improving the surface qualities of the skin, for example of at least one effect chosen from homogenization of the color of the skin, improvement of the complexion, the reduction of pigmented spots on the skin, the regeneration of the skin, the improvement of the radiance of the skin, the improvement of smoothing, the increase in the softness of the skin, the improvement of the general appearance of the skin, improving the hydration and improving the nutrition of the skin and/or the mucous membranes.
Un autre objet de l’invention se rapporte à l’utilisation d’un extrait d’or végétal (Syngonanthus nitens Ruhland) en tant qu’actif cosmétique.Another object of the invention relates to the use of a vegetable gold extract ( Sygonanthus nitens Ruhland ) as a cosmetic active ingredient.
On entend par « actif cosmétique », au sens de la présente invention un composé ayant un effet d’amélioration de l’aspect esthétique et de surface de la peau par une action hydratante, nourrissante et/ou anti-âge.The term “cosmetic active ingredient”, within the meaning of the present invention, means a compound having an effect of improving the aesthetic and surface appearance of the skin by a moisturizing, nourishing and/or anti-aging action.
On entend par « action hydratante », au sens de la présente invention une action visant à augmenter la teneur en eau de la peau, du derme ou de l’épiderme soit par renfort de l’irrigation sanguine dermique, en stimulant l’angiogenèse, soit en limitant les pertes insensibles en eau en renforçant la fonction barrière de l’épiderme.The term “hydrating action” is understood to mean, within the meaning of the present invention, an action aimed at increasing the water content of the skin, the dermis or the epidermis either by reinforcing the dermal blood supply, by stimulating angiogenesis, or by limiting transepidermal water loss by strengthening the barrier function of the epidermis.
On entend par « action nourrissante », au sens de la présente invention une action visant à augmenter la teneur en nutriment de la peau, du derme ou de l’épiderme soit par renfort de l’irrigation sanguine dermique, soit par renfort de synthèse de molécules hydrophobes en surface de l’épiderme par stimulation de la différenciation kératinocytaire.The term “nourishing action”, within the meaning of the present invention, means an action aimed at increasing the nutrient content of the skin, the dermis or the epidermis either by reinforcing the dermal blood supply, or by reinforcing the synthesis of hydrophobic molecules on the surface of the epidermis by stimulation of keratinocyte differentiation.
Avantageusement, l’extrait d’or végétal est utilisé en tant qu’actif cosmétique anti-âge.Advantageously, the plant gold extract is used as an anti-aging cosmetic active ingredient.
On entend par « action anti-âge », au sens de la présente invention une action de prévention / et ou de limitation des signes du vieillissement cutané, notamment du vieillissement accéléré (exogène) provoqué par les stress environnementaux, par exemple les ultraviolets, ou du vieillissement chronologique (endogène). L’action anti-âge peut passer par une action d’amélioration et/ou de protection de l’aspect de la peau notamment par le lissage, l’amélioration de la douceur, l’éclat, l’uniformisation du teint et l’atténuation des tâches pigmentées de la peau.The term “anti-aging action”, within the meaning of the present invention, means an action of preventing/and or limiting the signs of skin aging, in particular accelerated (exogenous) aging caused by environmental stresses, for example ultraviolet rays, or chronological (endogenous) aging. The anti-ageing action can go through an action to improve and/or protect the appearance of the skin, in particular by smoothing, improving softness, radiance, standardizing the complexion and attenuation of pigmented spots on the skin.
On entend par « annexes », au sens de la présente invention, les annexes épidermiques qui prennent naissance dans le derme profond, comprenant au moins un élément choisi parmi les poils, les ongles, les glandes pilosébacées et les glandes sudoripares.The term "appendages", within the meaning of the present invention, means the epidermal appendages which originate in the deep dermis, comprising at least one element chosen from hairs, nails, pilosebaceous glands and sweat glands.
On entend par « muqueuse », au sens de la présente invention, notamment les muqueuses externes comme les lèvres.The term "mucous membrane", within the meaning of the present invention, in particular the external mucous membranes such as the lips.
On entend par « améliorer l’aspect de la peau », au sens de la présente invention, tout effet permettant d’obtenir un avantage sur l’aspect de la peau par rapport à l’aspect de la peau avant utilisation de l’extrait selon l’invention.The term "improving the appearance of the skin", within the meaning of the present invention, means any effect making it possible to obtain an advantage on the appearance of the skin compared to the appearance of the skin before use of the extract according to the invention.
On entend par « lisser la surface de la peau », au sens de la présente invention, toute amélioration de la régularité de l’épaisseur et/ou de la peau en surface, notamment de l’épiderme via une stimulation de la différenciation des kératinocytes. Avantageusement, cette action permet que la surface soit plus lisse et/ou plus homogène et/ou plus régulière.The term “smoothing the surface of the skin”, within the meaning of the present invention, means any improvement in the regularity of the thickness and/or of the surface skin, in particular of the epidermis via stimulation of the differentiation of keratinocytes . Advantageously, this action allows the surface to be smoother and/or more homogeneous and/or more regular.
On entend par « adoucir la peau », au sens de la présente invention, l’obtention d’un effet plus soyeux de la peau au toucher après utilisation de l’extrait, et/ou une diminution de l’effet de rugosité de la peau au toucher.The term "softening the skin", within the meaning of the present invention, the obtaining of a silkier effect of the skin to the touch after use of the extract, and/or a reduction in the roughness effect of the skin to the touch.
On entend par « améliorer l’éclat de la peau », au sens de la présente invention, l’obtention d’une peau plus lumineuse, notamment via une stimulation de la différenciation des kératinocytes et/ou une stimulation de l’angiogenèse. Cet effet peut être observé qualitativement, par exemple visuellement, ou quantitativement, par exemple par des études de chromamétrie où les composantes L*a*b* sont mesurées.The term “improving the radiance of the skin”, within the meaning of the present invention, means obtaining more luminous skin, in particular via stimulation of the differentiation of keratinocytes and/or stimulation of angiogenesis. This effect can be observed qualitatively, for example visually, or quantitatively, for example by chromametry studies where the L*a*b* components are measured.
On entend par « améliorer l’homogénéité de la couleur de la peau », au sens de la présente invention, l’obtention d’une couleur plus homogène après utilisation de l’extrait sur la peau notamment via une meilleure répartition de la mélanine synthétisée par les mélanocytes vers les kératinocytes environnants.The term “improve the homogeneity of the color of the skin”, within the meaning of the present invention, the obtaining of a more homogeneous color after use of the extract on the skin in particular via a better distribution of the melanin synthesized by the melanocytes to the surrounding keratinocytes.
On entend par « limiter les tâches pigmentées de la peau », au sens de la présente invention, la diminution de la pigmentation des tâches de la peau après l’utilisation de l’extrait sur la peau notamment via une diminution de la synthèse de mélanine et un meilleur transfert de celle-ci vers les kératinocytes.The term "limit the pigmented spots of the skin", within the meaning of the present invention, the reduction in the pigmentation of the spots of the skin after the use of the extract on the skin in particular via a reduction in the synthesis of melanin and a better transfer thereof to the keratinocytes.
Dans le cadre des procédés cosmétiques ou dermatologiques selon l’invention, ou de l’utilisation selon l’invention, l’utilisation s’entend d’une utilisation non-thérapeutique, par exemple pour le traitement des peaux normales, c’est-à-dire des peaux ne présentant pas un état pathologique, à l’exclusion de toute utilisation thérapeutique.In the context of the cosmetic or dermatological processes according to the invention, or the use according to the invention, the use means a non-therapeutic use, for example for the treatment of normal skin, i.e. that is to say skins not presenting a pathological state, excluding any therapeutic use.
Ainsi, toute utilisation cosmétique et tout procédé cosmétique selon l’invention sont respectivement des utilisations cosmétiques non-thérapeutiques et procédés cosmétiques non-thérapeutiques.Thus, any cosmetic use and any cosmetic process according to the invention are respectively non-therapeutic cosmetic uses and non-therapeutic cosmetic processes.
D’autres avantages pourront encore apparaître à l’homme du métier à la lecture des exemples ci-dessous, donnés à titre illustratif.Other advantages may also appear to those skilled in the art on reading the examples below, given by way of illustration.
EXEMPLESEXAMPLES
Exemple 1 : Préparation de l’extrait d’Or végétalExample 1: Preparation of the vegetable gold extract
Un extrait selon l’invention est préparé selon le procédé comprenant les étapes suivantes :
a) mise en contact de tiges d’Or végétal comprenant les résidus de tiges dorés et les résidus de gaines des tiges, avec un solvant hydroéthanolique, c’est-à-dire avec un mélange eau/ éthanol ayant un rapport massique 70/30. La quantité de plante utilisée par rapport au solvant est de 5% en poids par rapport au poids total de plantes et de solvant,
b) extraction pendant une durée de l'ordre de 1H30 min à 50°C,
c) filtration pour la séparation du résidu sec et du jus d’extraction et jusqu’à une filtration stérilisante,
d) ajout de glycérine pour finaliser l’extrait.An extract according to the invention is prepared according to the process comprising the following steps:
a) contacting rods of plant gold comprising the residues of golden rods and the residues of sheaths of the rods, with a hydroethanolic solvent, that is to say with a water/ethanol mixture having a mass ratio of 70/30 . The amount of plant used relative to the solvent is 5% by weight relative to the total weight of plants and solvent,
b) extraction for a period of the order of 1 hour 30 minutes at 50° C.,
c) filtration for the separation of the dry residue and the extraction juice and up to a sterilizing filtration,
d) addition of glycerin to finalize the extract.
Exemple 2 : Effet d’extrait d’Or végétal obtenu dans l’Exemple 1 sur le transfert de mélanine aux kératinocytes.Example 2: Effect of plant gold extract obtained in Example 1 on the transfer of melanin to keratinocytes.
Les études ont été réalisées sur des kératinocytes normaux humains et sur des mélanocytes humains normaux, obtenus à partir de plasties abdominales, ensemencés en monocouche dans les conditions de culture adéquates, à savoir dans un mélange de milieu kératinocyte-SFM (« serum-free medium ») et de milieu 254 (ref M254-500 de chez thermoficher scientific) complémenté (ratio 4 :1), à une température de 37°C, sous atmosphère à 5% de CO2 et saturée en humidité. Les cellules ont été traitées deux fois avec l’extrait d’Or végétal pendant 48h puis 72h à 1%. Les cellules sont ensuite récupérées, et le transfert de mélanine est évalué par co-marquage des kératinocytes avec l’anticorps CD49f (ref 217657 de chez Sigma Aldrich) et des mélanosomes avec un anticorps spécifique d’une protéine des mélanosomes (Pmel17, ref sc-377325 de chez santa cruz tech). Ce co-marquage associé à l’analyse en cytométrie en flux permet de quantifier spécifiquement les mélanosomes ayant effectivement été transférés dans les kératinocytes.The studies were carried out on normal human keratinocytes and on normal human melanocytes, obtained from abdominoplasty, inoculated in a monolayer under the appropriate culture conditions, namely in a mixture of keratinocyte-SFM medium (“serum-free medium ”) and medium 254 (ref M254-500 from thermoficher scientific) supplemented (ratio 4:1), at a temperature of 37° C., under an atmosphere of 5% CO2 and saturated with humidity. The cells were treated twice with the plant gold extract for 48 hours then 72 hours at 1%. The cells are then recovered, and the melanin transfer is evaluated by co-labeling the keratinocytes with the CD49f antibody (ref 217657 from Sigma Aldrich) and the melanosomes with an antibody specific for a melanosome protein (Pmel17, ref sc -377325 from santa cruz tech). This co-marking associated with flow cytometry analysis makes it possible to specifically quantify the melanosomes that have actually been transferred into the keratinocytes.
Le traitement avec l’extrait d’Or végétal permet de stimuler le transfert de mélanine de 39% à la concentration de 1%. Ces résultats montrent que l’extrait d’Or végétal améliore la répartition de la mélanine au sein des kératinocytes et favorise ainsi l’homogénéité du teint.Treatment with plant gold extract stimulates the transfer of melanin by 39% at a concentration of 1%. These results show that the plant gold extract improves the distribution of melanin within the keratinocytes and thus promotes the evenness of the complexion.
Exemple 3 : Effet d’extrait d’Or végétal obtenu dans l’Exemple 1 sur la synthèse de mélanine.Example 3: Effect of plant gold extract obtained in Example 1 on melanin synthesis.
L’étude a été réalisée sur une lignée de mélanocytes S91 (Clone M-3 [Cloudman S91 melanoma] (ATCC® CCL-53.1™), cultivés dans un milieu KBM-Gold supplémenté avec le FGF bullet kit (Lonza), du calcium, du PMA (phorbol myristate acétate), de l’alpha-MSH (Melanocyte Stimulating hormone) et du SVF (sérum de veau fœtal). Les cellules sont traitées pendant 72h avec 1mM de L-tyrosine pour activer la synthèse de mélanine et avec l’extrait d’Or Végétal à 0,06%. En parallèle, des cellules sont traitées avec de l’acide lipoïque à 5 µg/ml comme contrôle de l’inhibition de la synthèse de mélanine. La mélanine est dosée par solubilisation dans de la soude 1N durant 30 min à 60°C, puis mesurée par lecture de la DO à 405 nm.The study was carried out on a line of S91 melanocytes (Clone M-3 [Cloudman S91 melanoma] (ATCC® CCL-53.1™), cultured in a KBM-Gold medium supplemented with the FGF bullet kit (Lonza), calcium , PMA (phorbol myristate acetate), alpha-MSH (Melanocyte Stimulating hormone) and SVF (fetal calf serum) The cells are treated for 72 hours with 1 mM of L-tyrosine to activate the synthesis of melanin and with Plant Gold extract at 0.06%.In parallel, cells are treated with lipoic acid at 5 μg/ml as a control for the inhibition of melanin synthesis.The melanin is assayed by solubilization in 1N sodium hydroxide for 30 min at 60° C., then measured by reading the OD at 405 nm.
Le traitement avec l’extrait d’Or vétal permet d’inhiber la synthèse de mélanine jusqu’à 21% à la concentration de 0,06%. Ces résultats montrent que l’extrait d’Or végétal présente un effet anti-tâche pigmentaire.Treatment with vetal gold extract inhibits melanin synthesis by up to 21% at a concentration of 0.06%. These results show that the plant gold extract has an anti-pigmentation effect.
Exemple 4 : Effet de l’extrait d’Or végétal dans l’Exemple 1 sur la différenciation des kératinocytes.Example 4: Effect of the plant gold extract in Example 1 on the differentiation of keratinocytes.
Les études ont été réalisées sur des kératinocytes épidermiques humains normaux, obtenus à partir de plasties abdominales, ensemencés en monocouche dans les conditions de culture adéquates, à savoir dans un milieu kératinocyte-SFM complémenté avec du BPE (« Bovine Pituitary Extract ») à 50 µg/ml et l'EGF (« epidermal growth factor ») à 5 ng/ml, à une température de 37°C, sous atmosphère à 5% de CO2et saturée en humidité. Les cellules ont été traitées avec l’extrait d’Or végétal à 0,012 % en milieu de différenciation à savoir du milieu kératinocyte-SFM complémenté avec du BPE à 50 µg/ml, de l'EGF à 5 ng/ml, du butyrate de sodium à 1mM, du chlorure de calcium à 1,5 mM final et de la fluorescéine-cadavérine à 20 µM. En parallèle les cellules sont traitées avec du rétinol à 1 µM dans le même milieu, pour servir de contrôle d’inhibition de la transglutaminase. Les cellules sont retraitées 4 jours, 7 jours et 10 jours après le premier traitement. 10 et 12 jours après le 1ertraitement l'incorporation de fluoresceine-cadavérine lors de la formation des enveloppes cornées est mesurée par fluorescence (longueur d'onde d'excitation 485 nm ; longueur d'onde d'émission 530 nm).The studies were carried out on normal human epidermal keratinocytes, obtained from abdominoplasty, inoculated in a monolayer under the appropriate culture conditions, namely in a keratinocyte-SFM medium supplemented with BPE (“Bovine Pituitary Extract”) at 50 μg/ml and EGF (“epidermal growth factor”) at 5 ng/ml, at a temperature of 37° C., under an atmosphere of 5% CO 2 and saturated with humidity. The cells were treated with 0.012% plant gold extract in differentiation medium, namely keratinocyte-SFM medium supplemented with BPE at 50 μg/ml, EGF at 5 ng/ml, butyrate of sodium at 1 mM, calcium chloride at 1.5 mM final and fluorescein-cadaverine at 20 µM. In parallel, the cells are treated with 1 μM retinol in the same medium, to serve as a transglutaminase inhibition control. The cells are retreated 4 days, 7 days and 10 days after the first treatment. 10 and 12 days after the 1st treatment, the incorporation of fluorescein-cadaverine during the formation of the horny envelopes is measured by fluorescence (excitation wavelength 485 nm; emission wavelength 530 nm).
En parallèle, un test de mesure de la viabilité cellulaire (avec AlamarBlue®) ainsi qu'un dosage des protéines totales (avec Sulforhodamine B ou SRB) sont réalisés afin de s'assurer que l'incorporation de fluoresceine-cadavérine est bien due à une augmentation de l'activité de la transglutaminase.In parallel, a cell viability measurement test (with AlamarBlue®) as well as a total protein assay (with Sulforhodamine B or SRB) are carried out in order to ensure that the incorporation of fluorescein-cadaverine is indeed due to an increase in transglutaminase activity.
Le traitement avec l’extrait d’Or végétal permet de stimuler l’activité de la transglutaminase jusqu’à 70% à la concentration de 0,012% chez les kératinocytes. Ces résultats montrent que l’extrait d’Or végétal stimule la différenciation des kératinocytes.Treatment with plant gold extract stimulates transglutaminase activity by up to 70% at a concentration of 0.012% in keratinocytes. These results show that the plant gold extract stimulates the differentiation of keratinocytes.
Exemple 5 : Effet de l’extrait d’Or végétal obtenus dans l’Exemple 1 sur la formation de microtubules par les cellules endothéliales.Example 5: Effect of the plant gold extract obtained in Example 1 on the formation of microtubules by endothelial cells.
Dans cette expérience des cellules endothéliales microvasculaires dermiques humaines (HMVEC) sont cultivées avec des fibroblastes humains normaux dans un mélange de milieu Endothelial Cell Growth 2 supplémenté avec hEGF, hbFGF, R3 IGF, hydrocortisone, vitamine C et de milieu DMEM supplémenté avec 2 mM L-glutamine, 50 U/ml pénicilline, 50µg/ml streptomycine et 1% de sérum de veau fœtal au ratio 50/50. Les cellules en cococulture sont traitées ou non avec le VEGF à 100 ng/ml (référence) ou l’extrait d’Or végétal à 0,3% pendant 7 jours avec un renouvèlement des traitements après 72h. Après fixation et perméabilisation, les cellules endothéliales sont marquées avec un anticorps anti-vWF (von Willebrand Factor). Les noyaux sont également marqués avec une solution de Hoechst 33258. La surface totale des pseudotubes est mesurée via le logiciel Image J à partir des images de marquage anti-vWF.In this experiment human dermal microvascular endothelial cells (HMVEC) are cultured with normal human fibroblasts in a mixture of Endothelial Cell Growth 2 medium supplemented with hEGF, hbFGF, R3 IGF, hydrocortisone, vitamin C and DMEM medium supplemented with 2 mM L -glutamine, 50 U/ml penicillin, 50µg/ml streptomycin and 1% fetal calf serum at a 50/50 ratio. The cells in cococulture are treated or not with VEGF at 100 ng/ml (reference) or 0.3% vegetable gold extract for 7 days with a renewal of the treatments after 72 hours. After fixation and permeabilization, the endothelial cells are labeled with an anti-vWF antibody (von Willebrand Factor). The nuclei are also labeled with a solution of Hoechst 33258. The total surface of the pseudotubes is measured using the Image J software from the anti-vWF labeling images.
Le traitement avec l’Or végétal permet de stimuler la formation de pseudo tubes de 68% à une concentration de 0,3%. L’augmentation des ramifications des cellules endothéliales permet de stimuler l’apport de nutriment au niveau du derme et de l’epiderme.Treatment with plant gold stimulates the formation of pseudotubes by 68% at a concentration of 0.3%. The increase in endothelial cell ramifications stimulates the supply of nutrients to the dermis and epidermis.
Exemple 6 : Formulation de l'extrait d’Or végétal dans un soin de type sérumExample 6: Formulation of the plant gold extract in a serum-type treatment
Exemple 7 : Formulation de l'extrait d’Or végétal dans un soin de jourExample 7: Formulation of the plant gold extract in a day care
Exemple 8 : Formulation de l'extrait d’Or végétal dans un soin de nuitExample 8: Formulation of the plant gold extract in a night care
REFERENCES BIBLIOGRAPHIQUESBIBLIOGRAPHIC REFERENCES
1. Marcelo Gonzaga et al. : « Evaluation of Syngonanthus nitens (Bong.) Ruhl. Extract as antifungal and in the treatment of vulvovaginal candidiasis”. Medical Mycology. 2013 Oct ; 51 : 673-682.1. Marcelo Gonzaga et al. : “Evaluation of Syngonanthus nitens (Bong.) Ruhl. Extract as antifungal and in the treatment of vulvovaginal candidiasis”. Medical Mycology. 2013 Oct; 51: 673-682.
2. Felipe Hilário : « Estudo quimico e avaliacao da atividade antioxidante e antimicrobiana dos escapos de Syngonanthus nitens (Bong.) Ruhland. (Eriocaulacea) » ; 2012.2. Felipe Hilário: “Estudo quimico e avaliacao da atividade antioxidante e antimicrobiana dos escapos de Syngonanthus nitens (Bong.) Ruhland. (Eriocaulacea)”; 2012.
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Patent Citations (3)
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| FELIPE HILÂRIO, ESTUDO QUIMICO E AVALIACAO DA ATIVIDADE ANTIOXIDANTE E ANTIMI-CROBIANA DOS ESCAPOS DE SYNGONANTHUS NITENS (BONG.) RUHLAND. (ERIOCAULACEA, 2012 |
| MARCELO GONZAGA ET AL.: "Evaluation of Syngonanthus nitens (Bong.) Ruhl. Extract as antifungal and in the treatment of vulvovaginal candidiasis", MÉDICAL MYCOLOGY, vol. 51, October 2013 (2013-10-01), pages 673 - 682 |
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