FR3069773B1 - Composition aromatherapeutique comprenant une association de bioactifs aromatiques regulant l’equilibre des microbiotes intestinal et cutane - Google Patents

Abstract

La présente invention concerne le domaine de l'aromathérapie. En particulier, la présente invention concerne une composition comprenant l'association d'au moins deux bioactifs aromatiques issus d'un extrait végétal, en particulier d'un extrait de Citrus paradisi, dont l'un au moins est le limonène et qui est caractérisée en ce qu'elle comprend de plus de 0% à 70% en poids de limonène par rapport au poids total des bioactifs aromatiques dans ladite composition. La présente invention concerne également le procédé de préparation et l'utilisation, de préférence comme agent aromathérapeutique, de la composition de l'invention.

Description

COMPOSITION AROMATHÉRAPEUTIQUE COMPRENANT UNEASSOCIATION DE BIOACTIFS AROMATIQUES RÉGULANT L’ÉQUILIBREDES MICROBIOTES INTESTINAL ET CUTANÉ

DOMAINE DE L’INVENTION

La présente invention concerne le domaine de l’aromathérapie. En particulier, la présenteinvention concerne une composition comprenant l’association d’au moins deux bioactifsaromatiques issus d’un extrait végétal, en particulier d’un extrait de Citrus paradisi, dontl’un au moins est le limonène et qui est caractérisée en ce qu’elle comprend de plus de0% à 70% en poids de limonène par rapport au poids total des bioactifs aromatiques dansladite composition. La présente invention concerne également le procédé de préparationet l’utilisation, de préférence comme agent aromathérapeutique, de la composition del’invention.

ÉTAT DE LA TECHNIQUE L’aromathérapie désigne toute utilisation d’essences aromatiques ou d’huile(s)essentielle(s) végétales à des fins thérapeutiques ; une huile essentielle étant une essencearomatique volatile extraite de plantes par distillation. L’aromathérapie couvre de nombreux domaines d’application. La plupart du temps, ellea pour but d’améliorer le bien-être d’un individu en l’apaisant et le relaxant. Cependant,l’aromathérapie peut également être employée dans le domaine médical (par exemple,désinfection, cicatrisation).

Bien que les voies d’administrations des huiles essentielles à un individu soient variées,les huiles essentielles sont souvent mal tolérées après une application topique. En effet,la concentration importante en bioactifs aromatiques dans ces huiles provoque desirritations et/ou des allergies. Il existe donc un besoin de développer une compositionaromathérapeutique pouvant être administrée par diffusion ou par inhalation. A ce jour, l’aromathérapie reste une science méconnue et son potentiel reste encoreinexploité.

De nombreuses huiles essentielles sont dotées de propriétés pharmaceutiques telles quepar exemple des propriétés anti-infectieuses, antibactériennes et/ou anti-inflammatoires.

La Demanderesse s’est donc intéressée à certaines huiles essentielles et plusparticulièrement, à leurs effets sur les microbiotes de l’organisme.

Le microbiote (également appelé flore) désigne chez un individu, l’ensemble desmicroorganismes (bactéries, levures, champignons, ou virus) vivant dans unenvironnement spécifique appelé microbiome. L’être humain possède de nombreuxmicrobiotes dont le microbiote intestinal et le microbiote cutané. Chaque microbiotecomprend un écosystème à l’équilibre entre des bactéries pathogènes et des bactériesbénéfiques. Cette biodiversité est un paramètre essentiel. En effet, la coexistence denombreuses espèces limite le développement d’une espèce par rapport à l’autre. Cetteorganisation permet ainsi de prévenir toute colonisation de bactéries pathogènes etconstitue une protection contre les infections. Il est donc important de maintenir un bonéquilibre du microbiote chez un individu.

De nombreuses maladies sont liées à des déséquilibres du microbiote (appelé dysbiose) :par exemple, l’obésité, le diabète, les allergies, la dépression, les troublescardiovasculaires et certaines affections dégénératives comme la maladie d’Alzheimer etde Parkinson.

Les causes de dysbiose sont diverses : infections virales, bactériennes ou parasitaires,l’exposition à un environnement pollué, un changement brutal d’environnement oud’alimentation, un déficit immunitaire, l’effet de certains médicaments sur l’organismetels que la prise d’antibiotiques. Le microbiote cutané en particulier peut être déséquilibrésuite à l’exposition quotidienne d’un individu à des produits nettoyants et/ou détergents.Ainsi, malgré sa capacité à se rééquilibrer après un léger déséquilibre, le microbiotecutané ne peut faire face à des agressions prolongées ayant pour conséquence ledéveloppement d’infections.

Des compositions visant à traiter ou à prévenir la dysbiose ont déjà été développées. Parexemple dans le cas de la peau, des traitements ont été proposés contenant des agentsantibactériens ciblant les niches bactériennes cutanées (WO2011/005756). Dans le cas dumicrobiote intestinal, les compositions utilisées communément contiennent desprobiotiques (ZA201009288) ou des prébiotiques (US2016/100617). Ces traitements sontdes traitements de fond visant à lutter contre une dysbiose déjà installée.

Au-delà des traitements curatifs, il est également fondamental de protégerquotidiennement et de manière préventif les microbiotes du dysbiose afin d’apporter soitun bien être durable à un individu en bonne santé, soit un complément aux traitementsmédicaux chez un individu souffrant d’une infection. L’utilisation de l’aromathérapie pour la protection des microbiotes constitue une voieprometteuse à explorer car elle peut être utilisée facilement au quotidien tout au long dela journée et sous différentes formes.

Citrus paradisi est un agrume hybride issu du croisement entre Citrus sinensis et Citrusmaxima. Citrusparadisi est communément nommé pomelo et faussement pamplemoussepar confusion avec son espèce parente Citrus maxima. Il existe plusieurs variétés deCitrusparadisi notamment les espèces d’apparence blanche et rose. L’extrait de pamplemousse est connu pour ses propriétés antimicrobiennes puissantescomme le montre les compositions décrites dans US5425944. Bien que celles-cipréviennent efficacement des infections, ces compositions possèdent des propriétésantibactériennes non sélectives qui détruisent les bactéries nécessaires au bonfonctionnement de l’organisme (bactéries bénéfiques). L’utilisation d’huile essentielle de pamplemousse rose est également connue enaromathérapie. Elle a par exemple été utilisée comme ingrédient antioxydant dans descompositions de parfum d’ambiance (JP2007297552). Ces compositions sontintéressantes pour lutter contre les problèmes de pollution de l’air mais ne visent pas àfournir une solution adéquate pour lutter contre la dysbiose chez un individu.

Il existe donc un besoin de fournir des compositions capables d’agir sélectivement sur ladiversité bactérienne.

De manière surprenante, la Demanderesse a mis en évidence que l’association de bioactifsaromatiques sélectionnés à partir d’un extrait d’écorce de Citrus paradisi, de préférencede Citrusparadisi rose , comprenant du limonène était capable de moduler favorablementl’équilibre des microbiotes intestinal et cutané.

Le limonène est un hydrocarbure terpénique possédant un puissant effet antibactérien surde nombreuses bactéries pathogènes. Cependant, à haute concentration son effetantibactérien atteint également les bactéries bénéfiques pour l’organisme de typelactobacille et bifidobactérie ce qui n’est pas souhaitable pour éviter les dysbiose.

Par ailleurs, il est connu que le limonène possède des effets secondaires allergènes. Dansune huile essentielle classique de Citrus paradisi rose la concentration en limonène peutattendre jusqu’à 98%.

Il existe donc un besoin de fournir des compositions aromathérapeutiques permettant deprévenir ou traiter une dysbiose tout en s’affranchissant d’effets secondaires tels que ceuxmentionnées précédemment.

La Demanderesse a mis en évidence de manière inattendue, que les effets allergènes dulimonène deviennent inexistants lorsque celui-ci est présent à moins de 70% en poidsdans un mélange de bioactifs aromatiques. RÉSUMÉ L’invention concerne donc une composition comprenant au moins deux bioactifsaromatiques issus d’un extrait d’écorce de Citrus paradisi, dont l’un au moins est lelimonène, ladite composition étant caractérisée en ce qu’elle comprend de plus de 0% à70% en poids de limonène par rapport au poids total de bioactifs aromatiques dans laditecomposition.

Selon un mode de réalisation, le ou les autre(s) bioactif(s) aromatique(s) sont choisisparmi : myrcène, famesol, diméthylanthranilate, citronellal, carveol, nootkatone, linalool,α-terpinène, a-pinène, a-farnésène, caryophyllène, β-sinensal et leurs mélanges.

Selon un mode de réalisation, la composition est sous la forme liquide, solide ou pâteux,de préférence sous la forme d’une huile, d’huile essentielle, d’une solution hydro-alcoolique telle qu’une teinture mère, de macérât, d’une émulsion, d’un gel, d’une crème,ou d’une lotion. L’invention concerne également un procédé de préparation de la composition del’invention caractérisé en ce qu’il comprend : (i) au moins une étape d’extraction, de préférence une étape d’extraction à froid,d’écorce de Citrusparadisi conduisant à l’obtention d’un extrait d’écorce de Citrusparadisi \ (ii) une étape de fractionnement des bioactifs aromatiques contenus dans leditextrait d’écorce de Citrusparadisi obtenu à l’étape (i) ; et (iii) une étape de mélange d’au moins deux bioactifs aromatiques obtenus à l’étape(ii), dont l’un au moins est le limonène.

Selon un mode de réalisation, l’étape de fractionnement est mise en œuvre parchromatographie liquide, de préférence par chromatographie liquide couplée à unappareil de détection, plus préférentiellement par chromatographie liquide couplée à unspectrophotomètre à détection UV. L’invention concerne également une composition de l’invention pour son utilisationcomme agent aromathérapeutique.

Selon un mode de réalisation, la composition de l’invention est utile dans le traitement oula prévention de la dysbiose, de préférence de la dysbiose intestinale et/ou cutanée.

Selon un mode de réalisation, la composition de l’invention est utile dans le traitementet/ou la prévention de troubles du système intestinal, de préférence pour traiter et/ouprévenir les troubles de la digestion, les maux de ventre, les ballonnements, laconstipation et/ou les crampes d’estomac.

Selon un mode de réalisation, la composition de l’invention est utile dans le traitementet/ou la prévention de troubles dermatologiques, de préférence pour traiter et/ou prévenirles infections de la peau, l’acné, les pellicules, les démangeaisons, les rougeurs et/ou lasécheresse de la peau. L’invention concerne également un dispositif comprenant la composition de l’invention,de préférence sous la forme d’un diffuseur, d’un parfum, d’un aérosol (spray), d’unmasque, d’un shampoing, d’une lingette, d’un savon solide ou liquide, d’une crème, d’ungel, d’une eau micellaire, d’un roll-on ou d’un patch.

DÉFINITIONS

Dans la présente invention, les termes ci-dessous sont définis de la manière suivante : « Agent aromathérapeutique » : concerne toute substance aromatique extraite deplantes capable de produire un effet thérapeutique chez un individu. Selon la présenteinvention, les termes « agent aromathérapeutique » comprennent les huilesessentielles végétales ou d’essences aromatiques. « α-farnésène » : concerne le 3,7,11-triméthyl-l,3,6,10-dodécatétraène. « α-pinène » : concerne le triméthyl-2,6,6-bicyclo[3.1.1]hept-2-ène. « α-terpinène » : concerne le 4-méthyl-l-(l-méthyléthyl)-l,3-cyclohexadiène. « Bioactif aromatique » : concerne tout composé volatile extrait de plantes quipossède à la fois des propriétés olfactives et thérapeutiques. « β-sinensal » : concerne le 2,6-diméthyl-10-méthylène-2,6,l 1-dodécatriènal. « Carveol » : concerne le 2-méthyl-5-(l-méthyléthènyl)-2-cyclohexen-l-ol. « Caryophyllène » : concerne le (1R,4E,9S)-4,11,1 l-triméthyl-8- méthylidènebicyclo[7.2.0]undéc-4-ène. « Chromatographie liquide » : concerne une technique d'analyse quantitative,qualitative et séparative de composés chimiques. Cette technique est basée sur la différence de polarité des composés chimiques à séparer, qui sont entraînés par unephase mobile liquide au travers d’une phase stationnaire. « Citronellal » : concerne le 3,7-diméthyloct-6-èn-l-al. « Citrus paradisi » : concerne un arbre fruitier communément nommé Pomeloappartenant au règne Planiae, au sous-règne Tracheobionta, à la divisionMagnoliophyta, à la classe Magnoliopsida, à la sous-classe Rosidae, à l’ordreSapindales, à la famille Rutaceae et au genre Citrus. « Crème » : concerne une émulsion cosmétique plus ou moins épaisse, parfumée etdestinée aux soins de la peau. « Diméthylanthranilate » : concerne le 2-(méthylamino) benzoate de méthyle. « Dysbiose » : concerne tout déséquilibre d’un mirobiote. «Ecorce» : concerne l’enveloppe épaisse de certains fruits telle que la peau desagrumes par exemple. « Emulsion » : concerne une préparation formée de deux phases liquides dont l'une,insoluble dans l'autre, y est dispersée sous forme de gouttes. « Extraction » : concerne un procédé de séparation chimique d’un ou plusieurscomposés d'un mélange initial, sur la base de propriétés chimiques ou physiques. « Extraction à froid » : concerne un procédé mécanique réalisé à températureambiante visant à récupérer l’huile essentielle d’une substance végétale, telle que parexemple l’huile essentielle d’écorce d’agrumes. Selon un mode de réalisation, leprocédé mécanique est une presse hydraulique. « Extrait » : concerne toute composition ou tout produit issue d’une extraction telleque décrite précédemment. « Farnesol » : concerne le (2E,6E)-3,7,1 l-triméthyldodéca-2,6,10-trién-l-ol. « Fractionnement » : concerne un procédé de séparation des constituants d'unmélange en plusieurs fractions. - « Gel » : concerne une composition de nature colloïdale homogène, translucide et de consistance molle. Un gel est une forme sous laquelle peuvent se présenter lesproduits cosmétiques ou pharmaceutiques. « Huile » : concerne une préparation dont l’élément principal est une substancegrasse, liquide à la température ambiante et insoluble dans l'eau. « Huile essentielle » : concerne tout liquide concentré en composés aromatiques, issude l‘extraction ou de la distillation de molécules volatiles d’une plante. « Limonène » : concerne le l-méthyl-4-prop-l-èn-2-yl-cyclohexène. « Linalol » ou « Linalool » : concerne le 3,7-diméthylocta-l,6-dién-3-ol. « Lotion » : concerne une préparation liquide, pharmaceutique ou cosmétique,obtenue par dissolution ou dispersion de principes actifs dans de l'eau pure oualcoolisée, destinée à être appliquée sur la peau. « Macérât » : concerne tout produit issu d’une macération. « Microbiote » : concerne chez un individu (de préférence humain), tout écosystèmeconstitué d’un ensemble de micro-organismes (bactéries, levures, champignons,virus) peuplant un enviornnement spécifique (microbiome). En particulier, les termes« microbiote intestinal » désignent la flore intestinale et « microbiote cutanée »désignent la microflore de la peau humaine. « Myrcène » : concerne le 7-méthyl-3-méthylène-l,6-octadiène. « Nootkatone » : concerne le 4-a,5-Dimethyl-l,2,3,4,4a,5,6,7-octahydro-7-keto-3-i sopropeny lnaphthal ene. « Solution hydro-alcoolique » : concerne une préparation liquide dont les élémentsprincipaux sont l’eau et l’alcool. « Spectrophotomètre » : désigne tout appareil permettant de mesurer la capacitéd'une substance ou d'un milieu à absorber la lumière qui la traverse. « Spectrophotomètre à détection UV » : désigne tout appareil permettant demesurer l’absorbance d’une substance dans le domaine de l’ultraviolet (i.e. deslongueurs d’onde comprise dans une gamme de 100 nm à 400 nm). « Teinture mère » : concerne une solution hydro-alcoolique issue d'un mélange deplantes fraîches macéré dans l’alcool pendant plusieurs semaines.

DESCRIPTION DÉTAILLÉE

La présente invention concerne une composition comprenant ou étant constituée d’aumoins un bioactif aromatique. Dans la présente invention, la composition de l’inventionest appelée composition Aromaflora.

Selon un mode de réalisation, la composition de l’invention ne comprend pas de phtalate.Selon un mode de réalisation, la composition de l’invention ne comprend pas d’additifs.Selon un mode de réalisation, la composition de l’invention ne comprend pas depolymère.

Selon un mode de réalisation, la composition de l’invention comprend des bioactifsaromatiques de faible poids moléculaire. Selon un mode de réalisation, les bioactifsaromatiques sont sélectionnés tel que le poids moléculaire moyen du mélange de bioactifsaromatiques soit compris dans une gamme allant de 100 à 200 Daltons, de préférence de120 à 150 Daltons, plus préférentiellement le poids moléculaire moyen du mélange debioactifs aromatiques est environ égal à 144,6 Daltons. Dans la présente invention, lepoids moléculaire moyen du mélange de bioactifs aromatiques est déterminé parspectrométrie de masse. Selon un mode de réalisation, les bioactifs aromatiques sontsélectionnés tel que le poids moléculaire moyen du mélange de bioactifs aromatiques estde 100, 110, 120, 130, 140, 150, 160, 170, 180, 190 ou 200 Daltons. Selon un mode deréalisation, les bioactifs aromatiques sont sélectionnés tel que le poids moléculaire moyendu mélange de bioactifs aromatiques est de 120, 125, 130, 135, 140, 145 ou 150 Daltons.

Avantageusement, le faible poids moléculaire des bioactifs aromatiques de lacomposition permet à ces composés de plus facilement pénétrer la barrière cutanée puisle système sanguin. Selon un mode de réalisation, les bioactifs aromatiques de lacomposition de l’invention sont administrées par voie transépidermale.

Selon un mode de réalisation, de 50% à 90%, de préférence de 60% à 80%, pluspréférentiellement 68% des bioactifs aromatiques contenus dans la composition del’invention pénètrent dans le sang. Selon un mode de réalisation, de 50% à 90%, depréférence de 60% à 80%, plus préférentiellement 68% des bioactifs aromatiquescontenus dans la composition de l’invention pénètrent dans le sang lorsque la compositionde l’invention est administrée par inhalation. Selon un mode de réalisation, 50%, 55%,60%, 65%, 70%, 75%, 80%, 85% ou 90% des bioactifs aromatiques contenus dans lacomposition de l’invention pénètrent dans le sang.

Selon un mode de réalisation, les bioactifs aromatiques contenus dans la composition del’invention atteignent le système digestif par le biais du système sanguin.

Selon un mode de réalisation, tout ou partie des bioactifs aromatiques contenus dans lacomposition de l’invention est véhiculée dans l’organisme d’un individu par le biais deson système respiratoire et/ou sa circulation sanguine.

Selon un mode de réalisation, l’un au moins des bioactifs aromatiques est le limonène.Selon un mode de réalisation, le bioactif aromatique est le limonène.

En particulier, la présente invention concerne une composition comprenant ou étantconstituée par au moins deux bioactifs aromatiques.

Selon un mode de réalisation, le bioactif aromatique est un extrait. Selon un mode deréalisation, le bioactif aromatique est extrait d’un végétal, de préférence extraitd’agrumes, de préférence extrait de Citrus, plus préférentiellement extrait de Citrusparadisi. Selon un mode de réalisation, le bioactif aromatique est extrait de Citrusparadisi rose.

Selon un mode de réalisation, le(s) bioactif(s) aromatique(s) dans la composition sontextraits uniquement de Citrus paradisi, de préférence de Citrus paradisi rose. Selon unmode de réalisation, le(s) bioactif(s) aromatique(s) dans le mélange de bioactifs sontextraits uniquement de Citrus paradisi, de préférence de Citrus paradisi rose.

Selon un mode de réalisation, la composition de l’invention ne comprend pas d’extraitsde plantes autres que ceux de Citrusparadisi, de préférence de Citrusparadisi rose. Selon un mode de réalisation, la composition de l’invention ou le mélange de bioactifsaromatiques ne comprend pas d’huiles essentielles de plantes autres que celles de Citrusparadisi, de préférence de Citrus paradisi rose.

Selon un mode de réalisation, le végétal est issu d’une culture biologique ou n’utilisantpas de pesticide. Selon un mode de réalisation, les fruits de Citrus paradisi sont issusd’une culture biologique ou n’utilisant pas de pesticide.

Selon un mode de réalisation, le(s) bioactif(s) aromatique(s) est (sont) choisi(s) parmimyrcène, farnesol, diméthylanthranilate, citronellal, carveol, nootkatone, linalool, a-terpinène, a-pinène, a-farnésène, caryophyllène, β-sinensal et leurs mélanges.

Selon un mode de réalisation, la composition de l’invention comprend ou est constituéd’un mélange de limonène, myrcène, farnesol, diméthylanthranilate, citronellal, carveol,nootkatone, linalool, α-terpinène, a-pinène, a-farnésène, caryophyllène et β-sinensal.

Selon un mode de réalisation, la composition de l’invention comprend de plus de 0% à70%, de préférence 5% à 65%, de préférence 10% à 65%, de préférence 15% à 65%, depréférence 20% à 65%, de préférence 25% à 65%, de préférence 30% à 65%, depréférence 35% à 65%, de préférence 40% à 65%, de préférence 45% à 65%, depréférence 50% à 65%, de préférence 5% à 70%, de préférence 10% à 70%, de préférence15% à 70%, de préférence 20% à 70%, de préférence 25% à 70%, de préférence 30% à70%, de préférence 35% à 70%, de préférence 40% à 70%, de préférence 45% à 70%, depréférence 50% à 70%, en poids de limonène par rapport au poids total de bioactifsaromatiques dans ladite composition. Selon un mode de réalisation, la composition del’invention comprend de 0,1% à 70% en poids de de limonène par rapport au poids totalde bioactifs aromatiques dans ladite composition. Selon un mode de réalisation, lacomposition de l’invention comprend 0,1%, 1%, 5%, 10%, 15%, 20%, 25%, 30%, 35%,40%, 45%, 50%, 55%, 60%, 65% ou 70% en poids de de limonène par rapport au poidstotal de bioactifs aromatiques dans ladite composition.

Selon un mode de réalisation, lorsque la composition est constituée d’un mélange debioactifs aromatiques, la composition comprend de plus de 0% à 70% en poids delimonène par rapport au poids total de ladite composition. Selon un mode de réalisation, lorsque la composition est constituée d’un mélange de bioactifs aromatiques, lacomposition comprend de 0,1% à 70% en poids de limonène par rapport au poids total deladite composition.

Selon un mode de réalisation, la composition comprend ou est constituée d’au moins deuxbioactifs aromatiques issus d’un extrait d’écorce de Citrus paradisi, dont l’un au moinsest le limonène, ladite composition étant caractérisée en ce qu’elle comprend de plus de0% à 70% en poids de limonène par rapport au poids total de bioactifs aromatiques dansladite composition. Selon un mode de réalisation, la composition comprend ou estconstituée d’au moins deux bioactifs aromatiques issus d’un extrait d’écorce de Citrusparadisi, dont l’un au moins est le limonène, ladite composition étant caractérisée en cequ’elle comprend de 0,1% à 70% en poids de limonène par rapport au poids total debioactifs aromatiques dans ladite composition.

Selon un mode de réalisation, la composition de l’invention comprend ou est constituéd’un mélange de limonène, myrcène, farnesol, diméthylanthranilate, citronellal, carveol,nootkatone, linalool, α-terpinène, a-pinène, a-farnésène, caryophyllène et β-sinensal, etla concentration en poids en limonène dans le mélange de bioactifs aromatiques est aumaximum égale à 70%.

Selon un mode de réalisation, la composition de l’invention comprend en outre dumyrcène. Selon un mode de réalisation, la composition de l’invention comprend de 0,1%à 30% de myrcène, de préférence de 1% à 20%, de préférence de 1% à 15%, de préférencede 5% à 20%, de préférence de 5% à 10%, en poids par rapport au poids total de bioactifsaromatiques dans ladite composition. Selon un mode de réalisation, la composition del’invention comprend 1%, 2%, 3%, 4%, 5%, 6%, 7%, 8%, 9%, 10%, 11%, 12%, 13%,14%, 15%, 16%, 17%, 18%, 19%, 20%, 21%, 22%, 23%, 24%, 25%, 26%, 27%, 28%,29% ou 30% en poids de myrcène par rapport au poids total de bioactifs aromatiques dansladite composition. Selon un mode de réalisation, la composition de l’invention comprendde 2% à 15% en poids de myrcène par rapport au poids total de bioactifs aromatiquesdans ladite composition. Selon un mode de réalisation, la composition de l’inventioncomprend de 7% à 10% en poids de myrcène par rapport au poids total de bioactifsaromatiques dans ladite composition.

Selon un mode de réalisation, la composition de l’invention comprend en outre dufarnesol. Selon un mode de réalisation, la composition de l’invention comprend de 0,1%à 30% de farnesol, de préférence de 1% à 20%, de préférence de 1% à 15%, de préférencede 5% à 20%, de préférence de 5% à 10%, en poids par rapport au poids total de bioactifsaromatiques dans ladite composition. Selon un mode de réalisation, la composition del’invention comprend 1% ; 2% ; 3% ; 4% ; 5% ; 6% ; 7% ; 8% ; 9% ; 10% ; 11% ; 12% ;13% ; 14% ; 15% ; 16% ; 17% ; 18% ; 19% ; 20% ; 21% ; 22% ; 23% ; 24% ; 25% ;26% ; 27% ; 28% ; 29% ou 30% en poids de farnesol par rapport au poids total debioactifs aromatiques dans ladite composition. Selon un mode de réalisation, lacomposition de l’invention comprend de 2% à 15% en poids de farnesol par rapport aupoids total de bioactifs aromatiques dans ladite composition. Selon un mode deréalisation, la composition de l’invention comprend de 3% à 12% en poids de farnesolpar rapport au poids total de bioactifs aromatiques dans ladite composition.

Selon un mode de réalisation, la composition de l’invention comprend en outre dudiméthylanthranilate. Selon un mode de réalisation, la composition de l’inventioncomprend de 0,1% à 30% de diméthylanthranilate, de préférence de 1% à 20%, depréférence de 1% à 15%, de préférence de 5% à 20%, de préférence de 5% à 10%, enpoids par rapport au poids total de bioactifs aromatiques dans ladite composition. Selonun mode de réalisation, la composition de l’invention comprend 1% ; 2% ; 3% ; 4% ; 5% ;6% ; 7% ; 8% ; 9% ; 10% ; 11% ; 12% ; 13% ; 14% ; 15% ; 16% ; 17% ; 18% ; 19% ;20% ; 21% ; 22% ; 23% ; 24% ; 25% ; 26% ; 27% ; 28% ; 29% ou 30% en poids dediméthylanthranilate par rapport au poids total de bioactifs aromatiques dans laditecomposition. Selon un mode de réalisation, la composition de l’invention comprend de2% à 15% en poids de diméthylanthranilate par rapport au poids total de bioactifsaromatiques dans ladite composition. Selon un mode de réalisation, la composition del’invention comprend de 2% à 10% en poids de diméthylanthranilate par rapport au poidstotal de bioactifs aromatiques dans ladite composition.

Selon un mode de réalisation, la composition de l’invention comprend en outre ducitronellal. Selon un mode de réalisation, la composition de l’invention comprend de0,1% à 30% de citronellal, de préférence de 0,1% à 10%, plus préférentiellement de 0,1% à 5%, en poids par rapport au poids total de bioactifs aromatiques dans ladite composition.Selon un mode de réalisation, la composition de l’invention comprend 0,1% ; 0,2% ;0,3% ; 0,4% ; 0,5% ; 0,6% ; 0,7% ; 0,8% ; 0,9% ; 1%, 5% ; 10% ; 15% ; 20% ; 25% ou30% en poids de citronellal par rapport au poids total de bioactifs aromatiques dans laditecomposition. Selon un mode de réalisation, la composition de l’invention comprend de0,5% à 5% en poids de citronellal par rapport au poids total de bioactifs aromatiques dansladite composition. Selon un mode de réalisation, la composition de l’invention comprendde 1% à 4% en poids de citronellal par rapport au poids total de bioactifs aromatiquesdans ladite composition. Selon un mode de réalisation, la composition de l’inventioncomprend 1%, 2%, 3% ou 4% en poids de citronellal par rapport au poids total de bioactifsaromatiques dans ladite composition.

Selon un mode de réalisation, la composition de l’invention comprend en outre ducarveol. Selon un mode de réalisation, la composition de l’invention comprend de 0,1%à 30% de carveol, de préférence de 0,1% à 10%, plus préférentiellement de 0,1% à 5%,en poids par rapport au poids total de bioactifs aromatiques dans ladite composition. Selonun mode de réalisation, la composition de l’invention comprend 0,1% ; 0,2% ; 0,3% ;0,4% ; 0,5% ; 0,6% ; 0,7% ; 0,8% ; 0,9% ; 1%, 5% ; 10% ; 15% ; 20% ; 25% ou 30% enpoids de carveol par rapport au poids total de bioactifs aromatiques dans laditecomposition. Selon un mode de réalisation, la composition de l’invention comprend de0,5% à 5% en poids de carveol par rapport au poids total de bioactifs aromatiques dansladite composition. Selon un mode de réalisation, la composition de l’invention comprendde 1% à 4%, de préférence de 1% à 3% en poids de carveol par rapport au poids total debioactifs aromatiques dans ladite composition. Selon un mode de réalisation, lacomposition de l’invention comprend 1%, 2%, 3% ou 4% en poids de carveol par rapportau poids total de bioactifs aromatiques dans ladite composition.

Selon un mode de réalisation, la composition de l’invention comprend en outre dunootkatone. Selon un mode de réalisation, la composition de l’invention comprend de0,1% à 30% de nootkatone, de préférence de 0,1% à 15%, plus préférentiellement de 0,1%à 10%, en poids par rapport au poids total de bioactifs aromatiques dans laditecomposition. Selon un mode de réalisation, la composition de l’invention comprend 0,1% ; 0,2% ; 0,3% ; 0,4% ; 0,5% ; 0,6% ; 0,7% ; 0,8% ; 0,9% ; 1%, 5% ; 10% ; 15% ;20% ; 25% ou 30% en poids de nootkatone par rapport au poids total de bioactifsaromatiques dans ladite composition. Selon un mode de réalisation, la composition del’invention comprend de 0,5% à 15%, de préférence de 0,5% à 10% en poids denootkatone par rapport au poids total de bioactifs aromatiques dans ladite composition.Selon un mode de réalisation, la composition de l’invention comprend de 5% à 10% enpoids de nootkatone par rapport au poids total de bioactifs aromatiques dans laditecomposition. Selon un mode de réalisation, la composition de l’invention comprend 5%,6%, 7%, 8%, 9% ou 10% en poids de nootkatone par rapport au poids total de bioactifsaromatiques dans ladite composition.

Selon un mode de réalisation, la composition de l’invention comprend en outre dulinalool. Selon un mode de réalisation, la composition de l’invention comprend de 0,1%à 30% de linalool, de préférence de 0,1% à 15%, de préférence de 0,1% à 10%, depréférence de 0,1% à 5%, de préférence de 0,5% à 10%, de préférence de 0,5% à 5%, depréférence de 0,5% à 2%, en poids par rapport au poids total de bioactifs aromatiquesdans ladite composition. Selon un mode de réalisation, la composition de l’inventioncomprend 0,1% ; 0,2% ; 0,3% ; 0,4% ; 0,5% ; 0,6% ; 0,7% ; 0,8% ; 0,9% ; 1%, 5% ;10% ; 15% ; 20% ; 25% ou 30% en poids de linalool par rapport au poids total de bioactifsaromatiques dans ladite composition. Selon un mode de réalisation, la composition del’invention comprend de 0,1% à 5%, de préférence de 0,1% à 2% en poids de linalool parrapport au poids total de bioactifs aromatiques dans ladite composition. Selon un modede réalisation, la composition de l’invention comprend 1%, 2%, 3%, 4% ou 5% en poidsde linalool par rapport au poids total de bioactifs aromatiques dans ladite composition.

Selon un mode de réalisation, la composition de l’invention comprend en outre de l’a-terpinène. Selon un mode de réalisation, la composition de l’invention comprend de 0,1%à 30% d’a-terpinène, de préférence de 0,1% à 10%, plus préférentiellement de 0,1% à5%, en poids par rapport au poids total de bioactifs aromatiques dans ladite composition.Selon un mode de réalisation, la composition de l’invention comprend 0,1% ; 0,2% ;0,3% ; 0,4% ; 0,5% ; 0,6% ; 0,7% ; 0,8% ; 0,9% ; 1%, 5% ; 10% ; 15% ; 20% ; 25% ou30% en poids d’a-terpinène par rapport au poids total de bioactifs aromatiques dans ladite composition. Selon un mode de réalisation, la composition de l’invention comprend de0,5% à 5% en poids d’a-terpinène par rapport au poids total de bioactifs aromatiques dansladite composition. Selon un mode de réalisation, la composition de l’invention comprendde 1% à 4%, de préférence de 2% à 3%, en poids d’a-terpinène par rapport au poids totalde bioactifs aromatiques dans ladite composition. Selon un mode de réalisation, lacomposition de l’invention comprend 1%, 2%, 3% ou 4% en poids d’a-terpinène parrapport au poids total de bioactifs aromatiques dans ladite composition.

Selon un mode de réalisation, la composition de l’invention comprend en outre de l’a-pinène. Selon un mode de réalisation, la composition de l’invention comprend de 0,1% à30% d’a-pinène, de préférence de 0,1% à 10%, plus préférentiellement de 0,1% à 5%, enpoids par rapport au poids total de bioactifs aromatiques dans ladite composition. Selonun mode de réalisation, la composition de l’invention comprend 0,1% ; 0,2% ; 0,3% ;0,4% ; 0,5% ; 0,6% ; 0,7% ; 0,8% ; 0,9% ; 1%, 5% ; 10% ; 15% ; 20% ; 25% ou 30% enpoids d’a-pinène par rapport au poids total de bioactifs aromatiques dans laditecomposition. Selon un mode de réalisation, la composition de l’invention comprend de0,5% à 5%, de préférence de 0,2% à 4%, en poids d’a-pinène par rapport au poids totalde bioactifs aromatiques dans ladite composition. Selon un mode de réalisation, lacomposition de l’invention comprend de 1% à 4%, de préférence de 1% à 3%, en poidsd’a-pinène par rapport au poids total de bioactifs aromatiques dans ladite composition.Selon un mode de réalisation, la composition de l’invention comprend 1%, 1,5%, 2%,2,5%, 3%, 3,5% ou 4% en poids d’a-pinène par rapport au poids total de bioactifsaromatiques dans ladite composition.

Selon un mode de réalisation, la composition de l’invention comprend en outre de l’a-farnésène. Selon un mode de réalisation, la composition de l’invention comprend de 0,1%à 30% d’a- famésène, de préférence de 0,1% à 10%, plus préférentiellement de 0,1% à5%, en poids par rapport au poids total de bioactifs aromatiques dans ladite composition.Selon un mode de réalisation, la composition de l’invention comprend 0,1% ; 0,2% ;0,3% ; 0,4% ; 0,5% ; 0,6% ; 0,7% ; 0,8% ; 0,9% ; 1%, 5% ; 10% ; 15% ; 20% ; 25% ou30% en poids d’a- farnésène par rapport au poids total de bioactifs aromatiques dansladite composition. Selon un mode de réalisation, la composition de l’invention comprend de 0,1% à 5%, de préférence de 0,1% à 2%, de préférence de 0,5% à 1%, en poids d’a-farnésène par rapport au poids total de bioactifs aromatiques dans ladite composition.Selon un mode de réalisation, la composition de l’invention comprend de 1% à 4%, depréférence de 1% à 3%, en poids d’a- farnésène par rapport au poids total de bioactifsaromatiques dans ladite composition. Selon un mode de réalisation, la composition del’invention comprend 1%, 1,5%, 2%, 2,5%, 3%, 3,5% ou 4% en poids d’a- farnésène parrapport au poids total de bioactifs aromatiques dans ladite composition.

Selon un mode de réalisation, la composition de l’invention comprend en outre decaryophyllène. Selon un mode de réalisation, la composition de l’invention comprend de0,1% à 30% de caryophyllène, de préférence de 0,1% à 10%, plus préférentiellement de0,1% à 5%, en poids par rapport au poids total de bioactifs aromatiques dans laditecomposition. Selon un mode de réalisation, la composition de l’invention comprend0,1% ; 0,2% ; 0,3% ; 0,4% ; 0,5% ; 0,6% ; 0,7% ; 0,8% ; 0,9% ; 1%, 5% ; 10% ; 15% ;20% ; 25% ou 30% en poids de caryophyllène par rapport au poids total de bioactifsaromatiques dans ladite composition. Selon un mode de réalisation, la composition del’invention comprend de 0,1% à 5%, de préférence de 0,1% à 2%, de préférence de 0,5%à l%,en poids de caryophyllène par rapport au poids total de bioactifs aromatiques dansladite composition. Selon un mode de réalisation, la composition de l’invention comprendde 1% à 4%, de préférence de 1% à 3%, en poids de caryophyllène par rapport au poidstotal de bioactifs aromatiques dans ladite composition. Selon un mode de réalisation, lacomposition de l’invention comprend 1%, 1,5%, 2%, 2,5%, 3%, 3,5% ou 4% en poids decaryophyllène par rapport au poids total de bioactifs aromatiques dans ladite composition.

Selon un mode de réalisation, la composition de l’invention comprend en outre de β-sinensal. Selon un mode de réalisation, la composition de l’invention comprend de 0,1%à 30% de β-sinensal, de préférence de 0,1% à 10%, plus préférentiellement de 0,1% à 5%,en poids par rapport au poids total de bioactifs aromatiques dans ladite composition. Selonun mode de réalisation, la composition de l’invention comprend 0,1% ; 0,2% ; 0,3% ;0,4% ; 0,5% ; 0,6% ; 0,7% ; 0,8% ; 0,9% ; 1%, 5% ; 10% ; 15% ; 20% ; 25% ou 30% enpoids de β-sinensal par rapport au poids total de bioactifs aromatiques dans laditecomposition. Selon un mode de réalisation, la composition de l’invention comprend de 0,1% à 5%, de préférence de 0,1% à 4%, de préférence de 0,5% à 2%,en poids de β-sinensal par rapport au poids total de bioactifs aromatiques dans ladite composition. Selonun mode de réalisation, la composition de l’invention comprend de 1% à 4%, depréférence de 1% à 3%, en poids de β-sinensal par rapport au poids total de bioactifsaromatiques dans ladite composition. Selon un mode de réalisation, la composition del’invention comprend 1%, 1,5%, 2%, 2,5%, 3%, 3,5% ou 4% en poids de β-sinensal parrapport au poids total de bioactifs aromatiques dans ladite composition.

Selon un mode de réalisation, la composition de l’invention comprend ou est constituéed’un mélange de 50% à 70% de limonène, de 2% à 15% de myrcène, de 2% à 15% defarnesol, de 2% à 15% de diméthylanthranilate, de 0,5% à 5% de citronellal, de 0,5% à5% de carveol, de 0,5% à 15% de nootkatone, de 0,1% à 5% de linalool, 0,5% de 5% deα-terpinène, de 0,2% à 4% de α-pinène, de 0,1% à 2% d’a-famésène, de 0,1% à 5% decaryophyllène et de 0,1% à 4% de β-sinensal

Selon un mode de réalisation, la composition de l’invention comprend ou est constituéed’un mélange de 50% à 70% de limonène, de 2% à 15% de myrcène, de 2% à 15% defarnesol, de 2% à 15% de diméthylanthranilate, de 0,5% à 5% de citronellal, de 0,5% à5% de carveol, de 0,5% à 10% de nootkatone, de 0,5% à 5% de linalool, 0,5% de 5% deα-terpinène, de 0,2% à 4% de α-pinène, de 0,1% à 2% d’a-famésène, de 0,1% à 2% decaryophyllène et de 0,1% à 4% de β-sinensal.

Selon un mode de réalisation, la composition de l’invention comprend ou est constituéed’un mélange de 60% à 65% de limonène, de 7% à 10% de myrcène, de 3% à 12% defarnesol, de 2% à 10% de diméthylanthranilate, de 1% à 4% de citronellal, de 1% à 3%de carveol, de 5% à 10% de nootkatone, de 0,5% à 2% de linalool, 2% de 3% de a-terpinène, de 1% à 2,5% de α-pinène, de 0,5% à 1% d’α-farnésène, de 1% à 2% decaryophyllène et de 0,5% à 2% de β-sinensal.

Selon un mode de réalisation, la composition est sous une forme : liquide, solide oupâteux, de préférence sous la forme d’une huile, d’une huile essentielle, d’une solutionhydro-alcoolique telle qu’une teinture mère, d’un macérât, d’une émulsion, d’un gel,d’une crème ou d’une lotion.

Selon un mode de réalisation, la composition comprend un solvant, de préférence unsolvant non-toxique pour l’organisme humain. Selon un mode de réalisation, lacomposition comprend de l’eau. Selon un mode de réalisation, la composition comprendune solution hydro-alcoolique. Selon un mode de réalisation, la composition comprendun alcool ; de préférence de l’éthanol. Avantageusement, l’éthanol s’évapore facilementde sorte que lorsque la composition de l’invention est administrée à un individu, seuls lesbioactifs aromatifs pénètrent dans l’organisme.

Selon un mode de réalisation, la composition comprend de 50% à 95%, de préférence de60% à 95%, de préférence de 80% à 95%, de préférence de 80 à 90% de solvant parrapport au poids total de la composition. Selon un mode de réalisation, la compositioncomprend 92% de solvant, de préférence d’alcool, plus préférentiellement d’éthanol, enpoids par rapport au poids totale de la composition. Selon un mode de réalisation, lacomposition comprend 50%, 55%, 60%, 65 %, 70%, 75%, 80%, 85%, 90% ou 95% desolvant par rapport au poids total de la composition. Selon un mode de réalisation, lacomposition comprend 50%, 55%, 60%, 65 %, 70%, 75%, 80%, 85%, 90% ou 95%d’alcool, de préférence d’éthanol, par rapport au poids total de la composition. Selon unmode de réalisation, la composition comprend 80%, 81%, 82%, 83 %, 84%, 85%, 86%,87%, 88%, 89% ou 90% de solvant par rapport au poids total de la composition. Selon unmode de réalisation, la composition comprend 80%, 81%, 82%, 83 %, 84%, 85%, 86%,87%, 88%, 89% ou 90% d’alcool, de préférence d’éthanol, par rapport au poids total dela composition.

Selon un mode de réalisation, la composition comprend en outre un actif cosmétique,dermocosmétique et/ou nutraceutique.

Selon un mode de réalisation, la composition comprend en outre un excipient. Selon unmode de réalisation, la composition comprend en outre un excipient cosmétiquementacceptable. Selon un mode de réalisation, la composition comprend en outre un excipientdermocosmétiquement acceptable. Selon un mode de réalisation, la compositioncomprend en outre un excipient pharmaceutiquement acceptable.

Les excipients acceptables et leurs quantités sont ceux classiquement utilisés dans lesdomaines considérées et bien connus de l’homme du métier.

Selon un mode de réalisation, la composition comprend en outre au moins un adjuvanthabituel dans le domaine de la cosmétique ou de la dermocosmétique tels que parexemple, un gélifiant, un épaississant, un conservateur, un solvant, un parfum, un agentchélateur, un absorbeur d’odeur, un filtre chimique ou minéral, un pigment minéral, untensioactif, un polymère et une matière colorante. Les quantités de ces différentsadjuvants sont celles classiquement utilisées dans les domaines considérés.

Selon un mode de réalisation, la composition de l’invention comprend ou est constituéde : de 2 à 10% d’un mélange de bioactifs aromatiques extraits de Citrus paradisi,ledit mélange comprenant de plus de 0% à 70% en poids de limonène ; de 30 à 60% d’éthanol ; et de 40% à 60% d’eau.

Selon un mode de réalisation, la composition de l’invention comprend ou est constituéde : de 2 à 10% d’un mélange de limonène, myrcène, farnesol, diméthylanthranilate,citronellal, carveol, nootkatone, linalool, α-terpinène, a-pinène, a-farnésène,caryophyllène et β-sinensal, ledit mélange comprenant de plus de 0% à 70% enpoids de limonène ; de 30 à 60% d’éthanol ; et de 40% à 60% d’eau.

Selon un mode de réalisation, la composition de l’invention comprend ou est constituéde : de 5 à 30% d’un mélange de bioactifs aromatiques extraits de Citrus paradisi,ledit mélange comprenant de plus de 0% à 70% en poids de limonène ; etde 70 à 95% d’éthanol.

Selon un mode de réalisation, la composition de l’invention comprend ou est constituéde : de 5 à 30% d’un mélange de limonène, myrcène, farnesol, diméthylanthranilate,citronellal, carveol, nootkatone, linalool, α-terpinène, a-pinène, a-farnésène,caryophyllène et β-sinensal, ledit mélange comprenant de plus de 0% à 70% enpoids de limonène ; et de 70 à 95% d’éthanol.

Selon un mode de réalisation, la composition de l’invention comprend ou est constituéde : de 70 à 100% d’un mélange de bioactifs aromatiques extraits de Citrus paradisi,ledit mélange comprenant de plus de 0% à 70% en poids de limonène ; etde 0 à 30% d’éthanol.

Selon un mode de réalisation, la composition de l’invention comprend ou est constituéde : de 70 à 100% d’un mélange de limonène, myrcène, farnesol,diméthylanthranilate, citronellal, carveol, nootkatone, linalool, α-terpinène, a-pinène, a-farnésène, caryophyllène et β-sinensal, ledit mélange comprenant deplus de 0% à 70% en poids de limonène ; et de 0 à 30% d’éthanol. L’invention concerne également un procédé de préparation d’une composition del’invention telle que décrite précédemment.

En particulier, l’invention concerne un procédé de préparation d’une composition del’invention telle que décrite précédemment, caractérisé en ce qu’il comprend au moinsune étape d’extraction à partir d’un végétal (notée (i)) d’au moins un bioactif aromatique.

Selon un mode de réalisation, le végétal est une plante du genre Citrus, de préférence uneplante du genre Citrus paradisi, plus préférentiellement du genre Citrus paradisi rose.

Selon un mode de réalisation, le procédé de l’invention comprend en outre une étape defractionnement (notée (ii)) des bioactifs aromatiques obtenus à l’étape d’extraction (i).

Selon un mode de réalisation, le procédé de l’invention comprend en outre une étape demélange d’au moins deux bioactifs aromatiques obtenu à l’étape (ii).

Selon un mode de réalisation, le procédé de l’invention concerne un procédé depréparation d’une composition de l’invention, caractérisé en ce qu’il comprend : (i) au moins une étape d’extraction, de préférence une étape d’extraction à froid,d’un végétal conduisant à l’obtention d’un extrait dudit végétal ; (ii) une étape de fractionnement des bioactifs aromatiques contenus dans leditextrait dudit végétal obtenu à l’étape (i) conduisant à l’obtention de fractionscomprenant chacune un bioactif aromatique ; et (iii) une étape de mélange d’au moins deux bioactifs aromatiques obtenus à l’étape(ii), dont l’un au moins est le limonène.

Selon un mode de réalisation préféré, le procédé de l’invention concerne un procédé depréparation d’une composition de l’invention, caractérisé en ce qu’il comprend : (i) au moins une étape d’extraction, de préférence une étape d’extraction à froid,d’écorce de Citrusparadisi conduisant à l’obtention d’un extrait d’écorce de Citrusparadisi \ (ii) une étape de fractionnement des bioactifs aromatiques contenus dans leditextrait d’écorce de Citrus paradisi obtenu à l’étape (i) conduisant à l’obtention defractions comprenant chacune un bioactif aromatique ; et (iii) une étape de mélange d’au moins deux bioactifs aromatiques obtenus à l’étape(ii), dont l’un au moins est le limonène.

Etape (i)

Selon un mode de réalisation, l’extraction peut être réalisée par toute méthoded’extraction connue de l’homme du métier telle que, mais non limitée à, l’extraction àfroid, l’extraction par solvant, l’extraction solide-liquide, l’extraction liquide-liquide,l’extraction par hydrodistillation et l’extraction par distillation.

Selon un mode de réalisation préférée, l’étape (i) est une étape d’extraction à froid.

Selon un mode de réalisation, l’étape d’extraction (i) est réalisée à une températurecomprise de plus de 0°C à 50°C, de préférence de 10°C à 30°C, plus préférentiellement à25°C.

Selon un mode de réalisation, l’étape d’extraction (i) est réalisée à pressionatmosphérique.

Selon un mode de réalisation, l’étape d’extraction (i) comprend en outre une étapepréliminaire de broyage et/ou de macération. Selon un mode de réalisation, l’étape debroyage et/ou de macération est menée sur tout ou partie du végétal dont le bioactifaromatique est extrait. Selon un mode de réalisation, l’étape de broyage et/ou demacération est menée sur tout ou partie de Citrus, de préférence de Citrus paradisi, dontle bioactif aromatique est extrait. Selon un mode de réalisation, l’extraction est réalisée àpartir de l’écorce du végétal. Selon un mode de réalisation, le procédé de l’inventioncomprend une étape préliminaire de lavage des fruits de Citrus paradisi.

Selon un mode de réalisation, le broyage est réalisé dans des cuves métalliques à l’aided’ustensiles pourvus de pointes en métal. Selon un mode de réalisation, le broyage estréalisé dans des cuves métalliques. Selon un mode de réalisation, le broyage est réalisé àl’aide d’ustensiles pourvus de pointes en métal. Avantageusement, les ustensiles pourvusde pointes permettent de rompre les sacs oléifères qui contiennent les bioactifs parfrottement. Ainsi, cette méthode permet une extraction optimale des bioactifs tout enévitant le recours à des techniques d’extraction par chauffage conduisant à unedégradation de ces bioactifs.

Selon un mode de réalisation, l’étape d’extraction (i) permet l’obtention d’un extrait d’unvégétal, de préférence d’un extrait de Citrus, plus préférentiellement d’un extrait deCitrus paradisi.

Selon un mode de réalisation, l’extrait est liquide, de préférence est un liquide organique.

Selon un mode de réalisation, l’étape d’extraction (i) comprend en outre une étape decentrifugation de l’extrait.

Selon un mode de réalisation, l’extrait obtenu à l’étape (i) comprend ou est constitué d’aumoins un bioactifs aromatiques. Selon un mode de réalisation, l’extrait obtenue à l’étape(i) comprend ou est constitué d’au moins un bioactifs aromatiques dont l’un est dulimonène. Selon un mode de réalisation, l’extrait obtenue à l’étape (i) comprend ou estconstitué de limonène et d’au moins un bioactif aromatique choisi parmi : myrcène,farnesol, diméthylanthranilate, citronellal, carveol, nootkatone, linalool, α-terpinène, a-pinène, a-famésène, caryophyllène, β-sinensal et leurs mélanges.

Selon un mode de réalisation, l’extrait obtenu à l’étape (i) est une huile essentielle, depréférence une huile essentielle de Citrus paradisi. Selon un mode de réalisation, l’huileessentielle est obtenue à partir de l’extraction de l’écorce du fruit d’un végétal, depréférence à partir de l’écorce de fruit de Citrusparadisi.

Etape (ii)

Selon l’invention, l’étape de fractionnement (ii) peut être réalisée par les techniques deséparation chimique et/ou physique connues par l’homme du métier.

Selon un mode de réalisation, l’étape de fractionnement (ii) est réalisée parchromatographie, de préférence par chromatographique liquide, plus préférentiellementpar chromatographie liquide couplée à un appareil de détection des bioactifs aromatiquestelles qu’un appareil de détection UV. Selon un mode de réalisation, l’appareil dedétection UV est spectrophotomètre à détection UV. Selon un mode de réalisation, laphase mobile utilisée lors de la chromatographie est un alcool. Selon un mode deréalisation préférée, la phase mobile utilisée lors de la chromatographie est l’éthanol. Eneffet, l’éthanol est un solvant non nocif à faible dose et est le solvant le plus courammentutilisé dans les compositions aromatiques. Sa présence résiduelle dans les compositionsde l’invention ne pose donc aucun problème. Par ailleurs, il peut être facilement employépour l’utilisation de la composition par diffusion.

Selon un mode de réalisation, l’appareil de détection des bioactifs aromatiques est unspectrophotomètre tel que par exemple, un spectrophotomètre de masse, unspectrophotomètre infrarouge ou un spectrophotomètre UV-visible.

Selon un mode de réalisation, l’étape de fractionnement (ii) est réalisée à une températurecomprise de plus de 0°C à 50°C, de préférence de 10°C à 30°C, plus préférentiellement à25°C.

Selon un mode de réalisation, l’étape de fractionnement (ii) est réalisée à pressionatmosphérique.

Avantageusement, l’étape de fractionnement permet de séparer en fractions, les bioactifsaromatiques extraits du végétal, de préférence du Citrus, plus préférentiellement duCitrus paradisi, lesdites fractions comprenant chacune un seul bioactif aromatique.

Selon un mode de réalisation, l’étape de fractionnement (ii) comprend en outre une étapede caractérisation de la fraction. Selon un mode de réalisation, l’étape de fractionnement(ii) comprend en outre une étape de caractérisation du bioactif aromatique contenu dansla fraction.

Etape (iii)

Selon un mode de réalisation, l’étape de mélange (iii) est réalisée à une températurecomprise de plus de 0°C à 50°C, de préférence de 10°C à 30°C, plus préférentiellement à25°C.

Selon un mode de réalisation, l’étape de mélange (iii) est réalisée à pressionatmosphérique.

Selon un mode de réalisation, l’étape de mélange (iii) vise à fournir des compositionscomprenant de plus de 0% à 70%, de de préférence 5% à 65%, de préférence 10% à 65%,de préférence 15% à 65%, de préférence 20% à 65%, de préférence 25% à 65%, depréférence 30% à 65%, de préférence 35% à 65%, de préférence 40% à 65%, depréférence 45% à 65%, de préférence 50% à 65%, de préférence 5% à 70%, de préférence10% à 70%, de préférence 15% à 70%, de préférence 20% à 70%, de préférence 25% à70%, de préférence 30% à 70%, de préférence 35% à 70%, de préférence 40% à 70%, depréférence 45% à 70%, de préférence 50% à 70%, en poids de limonène par rapport aupoids total de bioactifs aromatiques dans ladite composition.

Selon un mode de réalisation, l’étape de mélange (iii) vise à fournir des compositionscomprenant au maximum 70% de limonène en poids par rapport au poids total de bioactifsaromatiques dans ladite composition.

Selon un mode de réalisation, la composition de l’invention est obtenue à l’issue del’étape (iii) par le mélange de bioactifs aromatiques extraits de Citrus paradisi, séparéspar chromatographie liquide, ledit mélange comprenant de 50% à, 70% de limonène, de2% à 15% de myrcène, de 2% à 15% de farnesol, de 2% à 15% de diméthylanthranilate,de 0,5% à 5% de citronellal, de 0,5% à 5% de carveol, de 0,5% à 10% de nootkatone, de0,5% à 5% de linalool, 0,5% de 5% de α-terpinène, de 0,2% à 4% de α-pinène, de 0,1%à 2% d’a-famésène, de 0,1% à 2% de caryophyllène et de 0,1% à 4% de β-sinensal.

Selon un mode de réalisation, la composition de l’invention est obtenue à l’issue del’étape (iii) par le mélange de bioactifs aromatiques extraits de Citrus paradisi, séparéspar chromatographie liquide, ledit mélange comprenant de 60% à 65% de limonène, de7% à 10% de myrcène, de 3% à 12% de farnesol, de 2% à 10% de diméthylanthranilate,de 1% à 4% de citronellal, de 1% à 3% de carveol, de 5% à 10% de nootkatone, de 0,5%à 2% de linalool, 2% de 3% de α-terpinène, de 1% à 2,5% de α-pinène, de 0,5% à 1%d’a-farnésène, de 1% à 2% de caryophyllène et de 0,5% à 2% de β-sinensal.

Selon un mode de réalisation, le procédé de l’invention comprend en outre une étape dedilution du mélange de bioactifs aromatiques obtenus selon les étapes (i), (ii) et (iii) duprocédé de l’invention. Selon un mode de réalisation, le procédé de l’invention comprendl’ajout d’un solvant dans le mélange de bioactifs aromatiques obtenus selon les étapes (i),(ii) et (iii) du procédé de l’invention. Selon un mode de réalisation, le solvant est choisiparmi l’eau, un alcool ou une solution hydro-alcoolique.

Selon un mode de réalisation, le procédé de l’invention comprend en outre une étape dedilution du mélange de bioactifs aromatiques obtenus selon les étapes (i), (ii) et (iii) duprocédé de l’invention, afin d’obtenir de 0% à 70% de limonène en poids par rapport aupoids total de la composition finale. L’invention concerne également l’utilisation de la composition de l’invention telle quedécrite précédemment. En particulier, l’invention concerne la composition de l’inventionpour son utilisation dans le domaine de l’aromathérapie, de préférence comme agentaromathérapeutique.

Selon un mode de réalisation, la composition de l’invention est utile dans le traitementet/ou la prévention de la dysbiose, de préférence de la dysbiose intestinal et/ou cutanée.

Selon un mode de réalisation, la composition de l’invention est utile dans le traitementet/ou la prévention de troubles du système intestinal.

Selon un mode de réalisation, la composition de l’invention est utile dans le traitementet/ou la prévention de troubles dermatologiques.

Selon un mode de réalisation, les troubles dermatologiques sont choisis parmi lesinfections de la peau, l’acné, les pellicules, les démangeaisons, les rougeurs et/ou lasécheresse de la peau.

Selon un mode de réalisation, la composition de l’invention est utile dans le traitementet/ou la prévention des infections, de préférence des infections causées par un fungus et/ouune bactérie pathogène.

Selon un mode de réalisation, la composition de l’invention permet de moduler l’équilibredes microbiotes cutané et intestinal chez un individu. Selon un mode de réalisation, lacomposition de l’invention permet de moduler l’équilibre des microbiotes chez unindividu, de préférence humain. Selon un mode de réalisation, la composition del’invention permet de moduler l’équilibre des microbiotes chez un individu de manièresélective. Selon un mode de réalisation, la composition de l’invention permet derééquilibrer le microbiote d’un individu. Selon un mode de réalisation, la composition del’invention permet de sélectivement diminuer l’action des bactéries pathogènes chez unindividu. Selon un mode de réalisation, la composition de l’invention permet de maintenirl’équilibre de la diversité bactérienne du microbiote intestinal et/ou cutané, de préférencechez un individu en bonne santé.

Avantageusement, la composition de l’invention n’altère pas l’action des bactériesbénéfiques du microbiote d’un individu. Avantageusement, la composition de l’inventionpermet d’intensifier la production de biofilm, de préférence la production de biofilm desbactéries non pathogènes des microbiotes cutané et intestinal. Avantageusement, lacomposition de l’invention inhibe sélectivement la formation de biofilm de bactériespathogènes. Au sens de la présente invention, le terme « biofilm » désigne unecommunauté multicellulaire de micro-organismes (i.e. bactéries, champignons, algues ouprotozoaires) adhérant entre eux et à une surface, noyées dans une matrice auto-sécrétée,adhésive et protectrice. Selon un mode de réalisation, la composition de l’inventionrenforce le biofilm intestinal. Ce renforcement permet à la fois de protéger la paroi del’intestin contre les infections d’agents pathogènes et de protéger l’organisme del’individu.

Avantageusement, la composition de l’invention permet d’amplifier la communicationentre le microbiote et les cellules de l’individu.

Selon un mode de réalisation, la composition de l’invention favorise la croissance desbactéries bénéfiques pour le microbiote intestinal et/ou cutané tout en inhibant l’actiondes bactéries pathogènes du microbiote intestinal et/ou cutané. Selon un mode deréalisation, la composition de l’invention maintient l’équilibre normal des microbiotes.Selon un mode de réalisation, la composition de l’invention protège l’hôte des infectionscausées par des micro-organismes de type fungus et des bactéries pathogènes. Selon unmode de réalisation, la composition de l’invention limite la croissance des bactériespathogènes sans les éliminer totalement. En effet, la présence des bactéries pathogènescontribue à l’équilibre du microbiote et présente des bénéfices quand leur nombre estlimité.

Selon un mode de réalisation, la composition de l’invention n’a pas d’effet antibactérienvis-à-vis des bactéries bénéfiques pour l’organisme. Selon un mode de réalisation, lacomposition de l’invention agit sur au moins l’une des bactéries bénéfiques choisiesparmi : Lactobacillus reuleri, Bifidobacterium longum, Bifidobacterium breve,Corynebacterium spp, Acinetobacter johnsonii et Mycobacterium vaccae. Selon un modede réalisation, la composition de l’invention contribue à la croissance d’au moins l’une des bactéries bénéfiques choisies parmi : Lactobacillus reuteri, Bifidobacterium longum,Bifidobacterium breve, Corynebacterium spp, Acinetobacter johnsonii et Mycobacteriumvaccae.

La détection du quorum correspond aux mécanismes régulateurs qui contrôlentl’expression coordonnée de certains gènes chez une population bactérienne en fonctionde la densité de cette population. En détectant la présence de molécules auto-inductricesproduites par les micro-organismes (signaux moléculaires), chaque micro-organismeconnaît la densité de population de sa propre espèce ou d'autres espèces environnantes.Ces micro-organismes adaptent alors leur comportement afin de moduler leur population.En particulier, lorsque leur densité est insuffisante, les micro-organismes sont capablesd’accroître leur prolifération.

Selon un mode de réalisation, la composition de l’invention perturbe la détection duquorum des micro-organismes, de préférence de certains micro-organismes, pluspréférentiellement des micro-organismes pathogènes. Selon un mode de réalisation, lacomposition de l’invention perturbe la détection du quorum des micro-organismespathogènes de sorte que la production de biofilm est limitée. Selon un mode de réalisation,la composition de l’invention perturbe la détection du quorum des micro-organismespathogènes de sorte que leur prolifération est limitée dans les microbiotes cutané et/ouintestinal.

Selon un mode de réalisation, la composition de l’invention agit sur au moins l’une desles bactéries suivantes : Staphylococcus epidermidis, Pseudomonas aeruginosa,Salmonella enlerica, Escherichia coli, Staphylococcus aureus, Streptococcus pyogèneset Propionibacterium acnés.

Selon un mode de réalisation, la composition de l’invention inhibe au moins l’une des lesbactéries suivantes : Staphylococcus epidermidis, Pseudomonas aeruginosa, Salmonellaenterica, Escherichia coli, Staphylococcus aureus, Streptococcus pyogènes etPropionibacterium acnés.

Selon un mode de réalisation, la composition de l’invention inhibe la croissance deschampignons (fungus), de préférence la composition de l’invention inhibe CandidaAlbican.

Le déséquilibre du mircobiote intestinal peut également avoir des conséquences néfastessur la digestion et provoquer des troubles abdominaux. Selon un mode de réalisation, lacomposition de l’invention permet de prévenir, de limiter ou de lutter contre les troublesabdominaux. Selon un mode de réalisation, la composition de l’invention permet deprévenir, de limiter ou de lutter contre les troubles du transit intestinal. Selon un mode deréalisation, la composition de l’invention permet de faciliter la digestion. Selon un modede réalisation, la composition de l’invention permet de limiter les sensations d’inconfortintestinal chez un individu, en particulier causées par une dysbiose. Avantageusement, lacomposition permet à un individu de se sentir mieux dans son corps. L’invention concerne également l’utilisation de la composition de l’invention commeagent d’aromathérapie non-thérapeutique. Dans la présente invention, on entend par« agent d’aromathérapie non-thérapeutique », un composé ayant des propriétéspermettant d’accroître le bien-être d’un individu. L’expression « agent d’aromathérapienon-thérapeutique » inclue les agents cosmétiques, dermocosmétiques et/ounutraceutiques. Selon un mode de réalisation, la composition de l’invention peut êtreutilisée comme agent d’aromathérapie non-thérapeutique en combinaison avec untraitement médical.

Selon un mode de réalisation, la composition de l’invention a des propriétés relaxanteslorsqu’elle est appliquée chez un individu, de préférence humain.

Selon un mode de réalisation, la composition de l’invention a des propriétésantibactériennes, de préférence des propriétés antibactériennes sélectives vis-à-vis desbactéries pathogènes du microbiote d’un individu. Selon un mode de réalisation, lacomposition de l’invention perturbe la communication des bactéries pathogènes entreelles.

Selon un mode de réalisation, la composition de l’invention est administrée topiquementsur le visage et/ou le corps de l’individu. Selon un mode de réalisation, la composition de l’invention est avantageusement appliquée sur la peau du visage, c’est-à-dire la peau dela face, du cou, du décolleté et/ou du contour des yeux et sur la peau des mains. Selon unautre mode de réalisation, la composition de l’invention est avantageusement appliquéesur la peau du corps, en particulier de l’abdomen, des cuisses, des hanches, des fesses,des seins, des bras.

Selon un mode de réalisation, la composition de l’invention est administrée oralementchez l’individu. Selon un mode de réalisation, la composition de l’invention estadministrée sous la forme d’une boisson, de poudre, comprimé sécable ou non, pelliculéou non, de granule, de capsule, de gélule ou d’ampoule.

Selon un mode de réalisation, la composition de l’invention est administrée par diffusionou inhalation. Selon un mode de réalisation, la composition de l’invention est administréesous la forme d’un gaz ou d’un liquide vaporisée. L’environnement d’un individu peut être pollué par des agents agressifs pour la peau.Selon un mode de réalisation, la composition de l’invention administrée par diffusion,permet de purifier l’air ambiant. Selon un mode de réalisation, la composition del’invention administrée par diffusion, rend l’air ambiant moins agressif pour la peau.Selon un mode de réalisation, la composition de l’invention diminue la perte d’eautransépidermale. Selon un mode de réalisation, la composition de l’invention favorisel’hydratation de la peau. Selon un mode de réalisation, la composition de l’inventionréduit la sécheresse cutanée. Selon un mode de réalisation, la composition de l’inventioninhibe la bactérie Propioniibacterium acnés. Selon un mode de réalisation, la compositionde l’invention inhibe la bactérie Propioniibacterium acnés ce qui permet de diminuerl’apparition de l’acné sur la peau et/ou des pellicules dans le cuir chevelu d’un individu.

Selon un mode de réalisation, la composition de l’invention limite la sécheresse de lapeau. Selon un mode de réalisation, la composition de l’invention prévient ou lutte contreles infections de la peau. Selon un mode de réalisation, la composition de l’inventionprévient ou lutte contre l’apparition de l’acné. Selon un mode de réalisation, lacomposition de l’invention prévient ou lutte contre la formation des pellicules du cuirchevelu.

Selon un mode de réalisation préférée, la composition de l’invention est administrée pardiffusion. Avantageusement, la diffusion de la composition de l’invention est un moded’administration simple à mettre en œuvre, permettant une exposition quotidienne à lacomposition de l’invention sans que l’individu n’ait besoin de réaliser une actionsupplémentaire. De plus, une administration de la composition par diffusion permet uneaction globale, plus efficace, sur le maintien de l’équilibre des microbiotes.

Selon un mode de réalisation préférée, la diffusion de la composition de l’invention estmenée dans un espace restreint, tel que des pièces de vie, une chambre ou un bureau parexemple. Selon un mode de réalisation préférée, la diffusion de la composition del’invention est menée dans un espace ouvert (i.e. un espace urbain non occupée par desconstructions).

Selon un mode de réalisation préférée, la composition de l’invention est administrée à unindividu quotidiennement. Selon un mode de réalisation préférée, la composition del’invention est administrée à un individu plusieurs fois et régulièrement sur une journée.Selon un mode de réalisation préférée, la composition de l’invention est administrée à unindividu, en continu sur une journée.

Les récepteurs olfactifs présents dans le corps humain possèdent un seuil de détectionvariable selon le bioactif aromatique à détecter. Le seuil de détection pour ces moléculesest de l’ordre du nanogramme par litre (ng/L). Selon un mode de réalisation, la quantitéde bioactifs administrée est de l’ordre de ce seuil de détection afin d’induire une réponsede l’organisme de l’individu, sans que celui-ci en soit conscient. L’invention concerne également un dispositif comprenant la composition de l’inventiontelle que décrite précédemment.

Selon un mode de réalisation, le dispositif de l’invention est sous la forme d’un diffuseur,d’un masque, d’un aérosol (spray), d’une lingette, d’un savon, d’un shampoing, d’unparfum, d’un roll-on ou d’un patch.

Selon un mode de réalisation, le dispositif de l’invention est portable. Selon un mode deréalisation, le dispositif de l’invention est un diffuseur choisi parmi les diffuseurs parnébulisation, brumisation, chaleur douce, micro-diffusion, ultra-sons et ventilation.

Selon un mode de réalisation préférée, le dispositif de l’invention comprend un support.Selon un mode de réalisation préférée, le dispositif de l’invention comprend une partieutile à l’administration à un individu, par voie topique, de la composition de l’invention.

EXEMPLES

La présente invention se comprendra mieux à la lecture des exemples suivants quiillustrent non-limitativement l’invention.

Abréviations CO2 : dioxyde de carbone ; g/m2.h : gramme par mètre carré à l’heure ; h : heure ; H2: dihydrogène ; HPLC : High Performance Liquid Chromatograpy (Chromatographie liquide hauteperformance) ; mg/L : milligramme par litre ; mm : millimètre ; ng/L : nano-gramme par litre ; N2 : diazote ; pg/L : microgramme par litre ; TEWL : Transepidermal water loss (Perte d’eau transépidermique) ; UV : Ultra-violet ; YM : yeast mold (moule de levure).

Matériel et Méthodes

Chromatographie liquide couplée à un spectromètre à détection UV

Les bioactifs aromatiques de la composition Aromaflora ont été obtenus avec l’appareilde chromatographie liquide Reveleris® X2 Flash System. Le protocole général consisteà introduire dans une colonne de silice, un extrait de Citrus paradisi rose. Unechromatographie de partage est ensuite mise en œuvre avec pour phase mobile del’éthanol. Les bioactifs aromatiques sont ensuite séparés en fonction de leur polarité. Ladétection UV permet de les isoler selon leur longueur d’onde d’absorption.

Spectrométrie de masse

Les bioactifs aromatiques ont été caractérisés par spectrométrie de masse avec un appareilMicroTOF Bruker® équipé d’une source électrospray. Le protocole général consiste àvaporiser le bioactif aromatique sous la forme d’un gaz qui sera ensuite ionisé par unesource de type électrospray. Les fragments issus de cette ionisation sont déviés par tempsde vol et sont finalement analysés par ordinateur pour obtenir la masse exacte du bioactifaromatique.

Centrifugation

La centrifugation est utilisée afin de collecter la phase organique de l’extrait de Citrusparadisi et d’éliminer la phase aqueuse. La centrifugation est réalisée grâce à l’appareilRotanta 460® à température ambiante.

PARTIE CHIMIE

Exemple 1 : Exemples de compositions Aromaflora

Dans la présente invention, toute composition de l’invention est appelée « compositionAromaflora ».

Quelques exemples de compositions Aromaflora sont présentés dans le tableau suivant.

Exemple 2 : Procédé général de fabrication d’une composition Aromaflora

Les compositions de l’invention sont obtenues par le procédé général décrit ci-après.

Les fruits de Citrus paradisi sont lavés à l’eau, séchés et pelés. L’écorce est collectée etbroyée dans des cuves métalliques à l’aide d’ustensiles pourvus de pointes en métal. Laphase organique de l’extrait liquide obtenu est collectée par centrifugation, puisfractionnée par chromatographie liquide couplée à un spectromètre équipé d’un détecteurUV automatique. La phase mobile employée est préférentiellement de l’éthanol.

Dans un premier mode de réalisation, l’éthanol contenu dans les fractions obtenuesprécédemment est complètement évaporé afin d’obtenir des fractions huileuses contenantun seul bioactif parmi limonène, myrcène, farnesol, diméthylanthranilate, citronellal,carveol, nootkatone, linalool, α-terpinène, a-pinène, a-farnésène, caryophyllène, et β-sinensal. La composition finale est réalisée en mélangeant au moins deux fractionsobtenues précédemment. La teneur en bioactifs aromatiques dans la composition finaleest ajustée pour obtenir le pourcentage désiré de chaque bioactif.

Dans un second mode de réalisation, l’éthanol est évaporé jusqu’à ce que chaque fractioncontienne respectivement 8% de bioactif. La concentration en bioactif dans la fractioninitiale est évaluée par HPLC afin de déterminer la quantité d’éthanol à évaporer. Lacomposition finale est réalisée en mélangeant au moins deux fractions obtenuesprécédemment. La teneur en bioactifs aromatiques dans la composition finale est ajustéepour obtenir le pourcentage désiré de chaque bioactif.

PARTIE BIOLOGIE ET UTILISATIONS

Exemple 3 : Effet sur le microbiote intestinal L’effet de la composition de l’invention (nommée composition Aromaflora) a été évaluésur certaines bactéries peuplant le microbiote intestinal. L’objectif de cette étude est demontrer que la composition de l’invention est capable de prévenir le déséquilibre dumicrobiote intestinal et en particulier, de prévenir le développement potentiel de troublesintestinaux. Cette étude vise donc à démontrer que : - la composition de l’invention, Aromaflora, est capable d'inhiber la croissance debactéries intestinales pathogènes. Dans ce but, des expériences ont été menées àpartir de trois bactéries pathogènes (lot 1) : Salmonella enierica, Escherichia coli etStreptococcus epidermis \ et - la composition de l’invention, Aromaflora, stimule la croissance des bactériesintestinales associées à la bonne santé de l’individu (bactéries béénfiques). Dans cebut, des expériences ont été menées à partir de trois bactéries intestinales associées à la bonne santé (lot 2) : Lactobacillus reuleri, Bifidobacterium breve etBifidobacterium longum.

Les souches des diverses bactéries ont été isolées chez des individus humains par l’institutde Recherche Médical « S.S Institute of medical sciences and research center ».

Ces souches ont été mises en culture séparément à 4°C, pendant 16h, dans des milieuxappropriés figurant dans le tableau suivant :

Les cultures ont été réalisées en conditions anaérobiques (80% de N2 ; 10% de CO2 et 10%de H2).

La composition Aromaflora N°1 (telle que décrite précédemment) a été diluée dans del’éthanol afin d’ajuster leur concentration à 5 mg/L. L’échantillon témoin est constituéd’éthanol pur (lot contrôle).

Les bactéries sont inoculées dans une boite de Pétri selon deux conditions différentes pourchaque souche : (1) soit en présence de la composition Aromaflora N°1 diluée à 5 mg/L dans del’éthanol ; (2) soit en présence d’éthanol pur (échantillon témoin) en conditions anaérobiques(80% de N2, 10% de CO2 et 10% de H2) pendant 24h à 35°C.

Dans le cas des bactéries associées à la bonne santé (i.e. Lactobacillus reuieri,Bifidobacterium breve et Bifidobacterium longum), la composition de l’inventionAromaflora N°1 est ajoutée dans le milieu par la méthode des puits. Pour cela, des puitsde 6 mm de diamètre ont été fabriqués avec un foreur de liège stérile. 20 pL de l'échantillonà étudier ont été introduits dans les puits.

Dans le cas des bactéries pathogènes Salmonella enierica, Escherichia coli etStreptococcus epidermis la composition de l’invention Aromaflora N°1 est ajoutée dansle milieu par la méthode des disques. Pour cela, des disques de papier stériles de 5 mm ontété placés sur les boites de pétri et 15 μΐ de T échantillon à étudier ont été ajoutés auxdisques.

Lorsque l’échantillon testé inhibe la souche, une zone d'inhibition se forme autour du puitsou du disque. Cette zone d’inhibition doit être uniformément circulaire. Pour chaqueéchantillon testé, le diamètre de la zone d'inhibition est mesuré en millimètres.

Les résultats sont donnés dans le tableau suivant :

Les résultats montrent que la composition de l’invention inhibe efficacement les bactériespathogènes du microbiote intestinal mais n’inhibe pas les bactéries associées à la bonnesanté de ce même microbiote.

De plus, ces résultats sont représentatifs par rapport au lot contrôle qui n’a montré aucuneinfluence pour les espèces testées.

La mesure de l’inhibition montre donc que la composition de l’invention, Aromaflora,possède un effet antibactérien sélectif sur les bactéries pathogènes du microbiote intestinal.La composition de l’invention Aromaflora permet donc de maintenir l’équilibre de ladiversité bactérienne du microbiote intestinal.

Exemple 4 : Effet sur le microbiote cutané L’effet de la composition de l’invention, appelée Aromaflora, a été évalué par diffusionsur certaines bactéries peuplant le microbiote cutané. L’objectif de cette étude est demontrer que la composition de l’invention Aromaflora est capable de prévenir ledéséquilibre du microbiote cutané ; et en particulier, de prévenir le développementpotentiel de troubles de la peau. Cette étude vise donc à démontrer que : - la composition de l’invention, Aromaflora, est capable d’interagir avec lemicrobiote cutané par diffusion dans l’air ; et - la composition de l’invention, Aromaflora, est capable d'inhiber la formation debiofilm et la prolifération de bactéries cutanées pathogènes. Pour cela, desexpériences ont été menées à partir de trois bactéries pathogène (lot 1) :Staphylococcus aureus, Escherichia coli, Streptococcus pyogènes etPropionibacterium acnés ', - la composition de l’invention, Aromaflora, est capable d'induire une formation debiofilm et /ou de stimuler la croissance de bactéries cutanées associées à la bonnesanté de l’individu. Pour cela, des expériences ont été menées à partir de troisbactéries intestinales associées à la bonne santé de l’individu (lot 2) :Corynebacterium spp. Acinobacteri johnsonii, Bifidobacterium breve etMycobacterium vaccae.

Les souches ont été isolées chez des individus humains par l’institut de recherche médical«S.S Institute of Medical Sciences and Research Center ».

Les bactéries du microbiote de la peau associées à la bonne santé de l’individu et lesbactéries cutanées pathogènes ont été cultivées en présence de la composition AromafloraN°l.

La capacité de formation de biofilm par ces deux groupes de bactéries a été testée à partirde plaques de microtitrage à fond plat en polystyrène. Dans ces expériences, lacomposition de l’invention Aromaflora a été utilisée à une concentration environ égale à500 pg/L.

Sur la moitié gauche de la plaque de microtitrage à 96 puits, c'est-à-dire dans 48 puits,différentes bactéries du microbiote cutané ont été cultivées avec un milieu spécifique à laformation de biofilm (MSgg-medium). Chaque puit comprend 200 pL du milieu de cultured’une bactérie (une bactérie différente pour chaque ligne de la plaque de microtitrage) et100 pL de la composition de l’invention Aromaflora à une concentration de 500 pg/L.

Sur la moitié droite, c'est-à-dire dans 48 puits, chaque puit comprend 100 pL de lacomposition de l’invention Aromaflora à une concentration de 500 mg/L, complété par lemilieu MSgg.

Une deuxième plaque a été utilisée en tant que lot témoin. Cette plaque contient lesbactéries réparties de la même manière que sur la première plaque et 100 pL d’éthanol.

Les deux plaques ont été couvertes et incubées à 30° C pendant 48 heures. Aprèsincubation, chaque plaque a été séchée. Une comparaison des deux plaques telles quedécrites précédemment, a été effectuée.

Les résultats sont donnés dans le tableau suivant :

Les résultats montrent que la composition de l’invention Aromaflora inhibe efficacementla formation du biofilm des bactéries pathogènes du microbiote cutané. En revanche, lacomposition de l’invention Aromaflora n’inhibe pas la formation du biofilm des bactériesbénéfiques du microbiote cutané.

Ces résultats sont représentatifs par rapport au lot contrôle qui n’a montré d’influence pouraucune des espèces testées.

La mesure de l’inhibition montre donc que la composition de l’invention Aromaflora estsélective. En effet, elle possède la capacité d’inhiber la formation du biofilm des bactériespathogènes tout en permettant de la formation de biofilm par les bactéries associées à labonne santé de l’individu. Par conséquent, la composition de l’invention permet demoduler l’équilibre du microbiote cutané, notamment par diffusion atmosphérique.

Exemple 5 : Effet sur Candida albican L’effet de la composition de l’invention, appelée Aromaflora, a été évaluée sur deschampignons (fungus) peuplant les microbiotes intestinal et cutané. L’objectif de cetteétude est de montrer que la composition de l’invention est capable de prévenir à la fois ledéséquilibre des microbiotes intestinal et cutané.

Cette étude vise donc à montrer que la composition de l’invention Aromaflora est capabled'inhiber la croissance des champignons (fungus). Des expériences ont donc été menées àpartir du champignon Candida albican.

Les souches ont été isolées chez des individus humains par l’institut de recherche médical«S.S Institute of Medical Sciences and Research Center ».

La composition de l’invention Aromaflora N°1 telle que décrite précédemment, a étémélangée avec de l'éthanol pour obtenir un mélange de concentration environ égale à5 mg/L (échantillon Aromaflora).

La bactérie Candida albicans a été pré-cultivée dans de l'eau distillée pendant 2 heures à25°C en condition aérobique.

Sur une première plaque contenant un milieu constitué de gélose YM, a été introduit 1 mLde Candida albicans pré-cultivé à température ambiante. Puis, des disques de papierstériles de 5 mm ont été placés sur cette première plaque. Ensuite, 15 μΐ de l’échantillonAromaflora (5 mg/L) ont été ajoutés.

Une seconde plaque (plaque témoin) a été réalisée uniquement avec de l'éthanol.

Les plaques sont laissées 1 heure à température ambiante afin de permettre la diffusion del'échantillon jusqu’à la surface des disques. Les plaques ont été incubées à 25°C pendant48 heures.

Lorsque l’échantillon testé inhibe la souche, une zone d'inhibition se forme autour dudisque. Cette zone d’inhibition doit être uniformément circulaire. Pour chaque échantillontesté, le diamètre de la zone d'inhibition est mesuré en millimètres.

Les résultats sont donnés dans le tableau suivant :

Les résultats montrent que la composition de l’invention Aromaflora inhibe le champignonCandida albican de manière significative (p <0,05).

Ces résultats sont représentatifs par rapport aux résultats de la plaque contrôle; celle-ci neprésentant comme attendu, aucune inhibition pour Candida albican.

En conclusion, cette expérience montre que la composition de l’invention Aromaflorapossède un effet antifungique efficace et protège donc l’organisme contre les infections.

Exemple 6 : Diminution de la perte d’eau transépidermale

Une étude a été réalisée afin de montrer l’effet bénéfique de la diffusion de la compositionde l’invention Aromaflora la peau. L’objectif de cette étude vise donc de démontrer quela composition de l’invention Aromaflora est capable de prévenir les troubles de la peau,d’améliorer le confort de l’individu, et en particulier de limiter la perte d’eautransépidermale de la peau.

Cette étude a été réalisée avec 16 individus, âgés de 20 à 50 ans, ne présentant aucunemaladie. Les participants ont été répartis de manière aléatoire en deux groupes de8 personnes sans distinction de sexe.

Dans le premier groupe (Groupe 1), la composition de l’invention Aromaflora N°3 (telleque décrite précédemment) a été diffusée sur le lieu de travail de chacun des 8 participantsdu groupe 1. Ainsi, chaque individu de l’étude a été exposé pendant environ 8h par jourpendant 1 mois à la composition de l’invention.

Pour le deuxième groupe (groupe témoin), aucune exposition à la composition del’invention n’a été réalisée.

Il a été demandé aux individus des deux groupes de se présenter à des visites de contrôleau début et à la fin de l’étude afin de mesurer la perte d’eau transépidermale (taux TEWL).Pour cela, la mesure a été menée pendant lh par une sonde Tewamètre ® Triple TM 330Tchez tous les participants au niveau du front.

Les résultats sont montrés dans le tableau suivant :

Il a été observé que le taux TEWL diminue significativement dans le groupe 1, c’est-à-dire ayant été exposé à la diffusion quotidienne de la composition de l’inventionAromaflora. Concernant le groupe témoin, aucun changement significatif sur le tauxTEWL n’a été observé.

Ces résultats montrent que la composition de l’invention Aromaflora est capable dediminuer la perte d’eau transépidermale de la peau. La composition de l’invention permetdonc de prévenir et/ou de lutter contre les sécheresses cutanées et contribue à unemeilleure santé de la peau. Cette expérience montre également que l’administration de lacomposition de l’invention par diffusion est efficace.

Exemple 7 : Composition aromatique d’ambiance pour les troubles abdominaux

Des compositions aromatiques ont été préparées avec la formulation suivante :

Aromaflora N° 1 ouN°2................... 2- 10% ;

Ethanol.............................................. 30 - 60% ;

Eau.................................................... 40 - 60%. L’éthanol et l’eau sont ajoutés à Aromaflora dans des cuves de stockage. Le mélange estmacéré pendant 2 à 10 semaines. La composition finale est ensuite filtrée pour donnerune composition utile comme parfum d’ambiance.

La composition finale de l’invention (parfum d’ambiance) a été diffuséequotidiennement, de manière continue sur la journée. Les utilisateurs ont noté unediminution des troubles abdominaux, une amélioration de la digestion et du transitintestinal après une semaine d’utilisation.

Exemple 8 : Parfum pour la protection de la peau

Un parfum a été préparé à partir de la formulation suivante :

Aromaflora N°1 ou N°2.....................5 - 30% ;

Ethanol.............................................. 70 - 95%. L’éthanol est ajouté à Aromaflora dans des cuves de stockage. Le mélange est macérépendant 2 à 10 semaines. La composition finale est ensuite filtrée pour donner unecomposition utile comme parfum d’ambiance.

Ce parfum se présente soit sous la forme de spray, de roll-on, de patch ou d’aérosol. Il està utiliser quotidiennement jusqu’à 3 fois par jour. Les utilisateurs ont notés unediminution des infections de la peau et de l’apparition d’acné après une semained’utilisation.

Exemple 9 : Patch pour la protection local contre le dysbiose

Des patchs ont été fabriqués à partir de la formulation suivante :

Aromaflora N°1 ouN°2....................70% à 100% ;

Ethanol..............................................0 à 30%.

Une matrice de polymères adhésifs formant un film de grammage de 50 à 120 g/m2 estutilisée pour former un patch, de préférence une matrice formée de poly(acétate devinyle). Une quantité comprise entre 0,1 g et 1 g de la composition avec en plusd’éventuels additifs facilitant l’adhésion et la diffusion est déposée sur un film de lamatrice de polymères par coulée de solvant. Le patch est obtenu en thermo soudant lapériphérie d’un film de la matrice de polymère contenant la composition et d’un autrefilm de la même matrice de polymère.

Le patch peut être utilisé partout sur le corps comme système de diffusion portatif etlocalisé. Il permet de maintenir la population du microbiote en équilibre et de diminuerle risque d’apparition de dysbiose.

Claims (2)

1. REVENDICATIONS

   1. Composition comprenant au moins deux bioactifs aromatiques issus d’un extraitd’écorce de Citrus paradisi, dont l’un au moins est le limonène, ladite compositionétant caractérisée en ce qu’elle comprend de plus de 0% à 70% en poids de limonènepar rapport au poids total de bioactifs aromatiques dans ladite composition. 2. Composition selon la revendication 1, dans laquelle le ou les autre(s) bioactif(s)aromatique(s) sont choisis parmi : myrcène, famesol, diméthylanthranilate,citronellal, carveol, nootkatone, linalool, α-terpinène, a-pinène, a-farnésène,caryophyllène, β-sinensal et leurs mélanges. 3. Composition selon la revendication 1 ou la revendication 2, caractérisée en cequ’elle est sous la forme liquide, solide ou pâteux, de préférence sous la forme d’unehuile, d’huile essentielle, d’une solution hydro-alcoolique telle qu’une teinturemère, de macérât, d’une émulsion, d’un gel, d’une crème, ou d’une lotion. 4. Procédé de préparation d’une composition selon l’une quelconque desrevendications 1 à 3, caractérisé en ce qu’il comprend : (i) au moins une étape d’extraction, de préférence une étape d’extraction àfroid, d’écorce de Citrus paradisi conduisant à l’obtention d’un extraitd’écorce de Citrusparadisi \ (ii) une étape de fractionnement des bioactifs aromatiques contenus dans leditextrait d’écorce de Citrusparadisi obtenu à l’étape (i) ; et (iii) une étape de mélange d’au moins deux bioactifs aromatiques obtenus àl’étape (ii), dont l’un au moins est le limonène.
2. 5. Procédé selon la revendication 4, dans lequel l’étape de fractionnement est mise enœuvre par chromatographie liquide, de préférence par chromatographie liquidecouplée à un appareil de détection, plus préférentiellement par chromatographieliquide couplée à un spectrophotomètre à détection UV. 6. Composition selon l’une quelconque des revendications 1 à 3, pour son utilisationcomme agent aromathérapeutique. 7. Composition pour son utilisation selon la revendication 6, dans le traitement ou laprévention de la dysbiose, de préférence de la dysbiose intestinale et/ou cutanée. 8. Composition pour son utilisation selon la revendication 6 ou la revendication 7,pour son utilisation dans le traitement et/ou la prévention de troubles du systèmeintestinal, de préférence pour traiter et/ou prévenir les troubles de la digestion, lesmaux de ventre, les ballonnements, la constipation et/ou les crampes d’estomac. 9. Composition pour son utilisation selon la revendication 6, pour son utilisation dansle traitement et/ou la prévention de troubles dermatologiques, de préférence pourtraiter et/ou prévenir les infections de la peau, l’acné, les pellicules, lesdémangeaisons, les rougeurs et/ou la sécheresse de la peau. 10. Dispositif comprenant la composition selon l’une quelconque desrevendications 1 à 3, de préférence sous la forme d’un diffuseur, d’un parfum, d’unaérosol (spray), d’un masque, d’un shampoing, d’une lingette, d’un savon solide ouliquide, d’une crème, d’un gel, d’une eau micellaire, d’un roll-on ou d’un patch.