FR3054441A1

FR3054441A1 - Utilisation de metabolites issues de la fermentation de lactobacillus afin de restaurer l'equilibre du microbiote cutane et intestinal

Info

Publication number: FR3054441A1
Application number: FR1601163A
Authority: FR
Inventors: Bejit Ideas; Etienne Soudant
Original assignee: Actina
Current assignee: Actina
Priority date: 2016-07-28
Filing date: 2016-07-28
Publication date: 2018-02-02
Anticipated expiration: 2036-07-28
Also published as: FR3054441B1

Abstract

Composition dermocosmétique destinée à être utilisée par voie topique pour restaurer l'équilibre des microbiotes cutané et intestinale caractérisée en ce qu'elle contient au moins 150 métabolites différents provenant de la fermentation lente d'un mélange de plusieurs plantes par une association de lactobactéries contenant au moins une souche de bactéries issue de la plante d'Olea europaea millénaire et particulièrement ses feuilles.

Description

054 441

01163 ® RÉPUBLIQUE FRANÇAISE

INSTITUT NATIONAL DE LA PROPRIÉTÉ INDUSTRIELLE © N° de publication :

(à n’utiliser que pour les commandes de reproduction)

©) N° d’enregistrement national

COURBEVOIE © Int Cl⁸ : A 61 K 36/60 (2017.01), A 61 K36/63, 9/107, 9/113, A 61 P 17/00, 3/00, 37/00, 31/04, C 12 R 1/225

DEMANDE DE BREVET D'INVENTION A1

©) Date de dépôt : 28.07.16. (© Priorité :	©) Demandeur(s) : ACTINA — ES.
	@ Inventeur(s) : IDEAS BEJIT et SOUDANT ETIENNE.
©) Date de mise à la disposition du public de la demande : 02.02.18 Bulletin 18/05.
©) Liste des documents cités dans le rapport de recherche préliminaire : Se reporter à la fin du présent fascicule
(© Références à d’autres documents nationaux apparentés :	©) Titulaire(s) : ACTINA.
©) Demande(s) d’extension :	(© Mandataire(s) : ACTINA.

UTILISATION DE METABOLITES ISSUES DE LA FERMENTATION DE LACTOBACILLUS AFIN DE RESTAURER L'EQUILIBRE DU MICROBIOTE CUTANE ET INTESTINAL.

FR 3 054 441 - A1

Composition dermocosmétique destinée à être utilisée par voie topique pour restaurer l'équilibre des microbiotes cutané et intestinale caractérisée en ce qu'elle contient au moins 150 métabolites différents provenant de la fermentation lente d'un mélange de plusieurs plantes par une association de lactobactéries contenant au moins une souche de bactéries issue de la plante d'OIea europaea millénaire et particulièrement ses feuilles.

La présente invention a pour objet une composition dermocosmétique destinée à être utilisée par voie topique pour restaurer l'équilibre des microbiotes cutanés et intestinal caractérisée en ce qu'elle contient au moins 150 métabolites différents provenant de la fermentation lente d'un mélange de plusieurs plantes par une association de lactobactéries contenant au moins une souche de bactéries issue de la plante d'Olea europaea millénaire et particulièrement ses feuilles.

On sait le microbiote est l'ensemble des microorganismes notamment bactéries, levures, champignons ou virus vivant dans un environnement spécifique appelé le microbiome chez un hôte. L'humain possède de nombreux microbiotes, parmi eux le microbiote intestinal également appelé flore intestinale et le microbiote cutané sont les plus important. Par exemple, le microbiote intestinal est constitué de l'ensemble des microorganismes vivant dans l'intestin soit chez l'Humain environ 100 000 milliards. Le génome d'un microbiote se dénomme métagénome. L'origine de notre microbiote est notamment la microbiote maternel et particulièrement la microbiote vaginal maternel qui va dès la naissance coloniser la peau tout comme la microbiote présent dans le lait maternel va coloniser nos intestins. Le microbiote fonctionne sur un principe de mutualisme c'est à dire coopération entre différentes sortes d'organismes impliquant un avantage pour chacun. De manière générale, la biodiversité bactérienne du microbiote limite le risque de colonisation de la peau par une bactérie pathogène, et constitue une protection contre l'inflammation de la peau. Le microbiote a été découvert il y a 15 ans. Avant cela les bactéries étaient considérées par la majorité comme exclusivement néfastes ou pathogènes. Le microbiote peut être considéré comme un écosystème possédant un équilibre entre bactéries bénéfiques et bactéries néfastes. Pourtant sans le microbiote nous serions incapables d'assimiler certains aliments que seules les bactéries savent dégrader. Il a été révélé que celui-ci se montre même capable de réguler l'expression de certains de nos gènes. De nombreuses maladies sont liées à des déséquilibres dans la diversité bactérienne telle que dans l'obésité, le diabète, les allergies, la dépression, les troubles cardiovasculaires et même les affections dégénératives comme la maladie d'Alzheimer et de parkinson. En effet, l'équilibre du microbiote est fragile. On appelle dysbiose un déséquilibre du microbiote, elle a des conséquences néfastes pour l'hôte. Les causes de la dysbiose sont diverses et notamment des infections virales, bactériennes ou parasitaires, un changement brutal d'environnement ou d'alimentation, un déficit immunitaire, certains médicaments et en premier lieu les antibiotiques. Les conséquences de la dysbiose sur la santé peuvent être importantes. Ainsi une dysbiose peut être observée en association à une pathologies digestives ou aux maladies citées précédemment.

On s'intéresse plus particulièrement au microbiote cutané. En effet, la peau est l'organe du corps humain à la fois le plus étendu et le plus lourd avec en moyenne 6 kilos chez l'adulte, et près de 2 m² de surface. Etant en contact direct avec l'environnement extérieur, la peau constitue une barrière entre l'organisme et l'extérieur. Mais pas seulement, elle abrite également de nombreux microorganismes. Certains d'entre eux sont néfastes, dans ce cas la peau protège l'organisme contre leur pénétration et régule leur prolifération grâce à son propre système immunitaire qui détecte et combat les infections. Le microbiote cutané contient également de nombreux microorganismes bénéfiques qui jouent un rôle dans les fonctions de la peau comme l'activation du système immunitaire. La peau peut schématiquement être divisée en 3 couches : l'épiderme, le derme et l'hypoderme. C'est l'épiderme qui est en contact avec l'environnement extérieur, il est principalement composé de couches de kératinocytes, cellules synthétisant la kératine et contenant les neurotransmetteurs. Le derme quant à lui est constitué majoritairement de fibroblastes en ce qui concerne la population des cellules résidentes et de matrice extracellulaire. Le derme est traversé par un réseau ramifié de vaisseaux sanguins, de vaisseaux lymphatiques et de nerfs qui mettent en relation la peau avec le reste de l'organisme. Enfin, l'hypoderme est la partie la plus profonde de la peau et est une zone majeure de dépôts graisseux. L'hypoderme sépare la peau des tissus sous-jacents. La surface de la peau n'est pas homogène, elle contient de nombreux plis et aspérités qui sont le lieux de niches microbiennes. La population cutanée de la microbiote varie donc selon l'emplacement et en particulier selon l'humidité. L'équilibre du microbiote est fondamentale pour l'organisme par exemple Candida albicans est l'un des nombreux champignons qui peut naturellement se développer dans le microbiote, ils contribuent à la digestion, il est donc bénéfique mais est pathogène s'il se surdéveloppe ou colonise d'autres organes. Dans le cas du microbiote cutané, son équilibre est mis à mal quotidiennement avec l'utilisation de produits nettoyant. Leur utilisation débarrasse la peau de toute sorte d'organisme présent à sa surface sans distinction. Après leur utilisation, la diversité du microbiote est considérablement réduite et la peau est exposée à une nouvelle colonisation extérieure potentiellement néfaste.

On sait que l'état de la peau est intimement lié à notre état nerveux. Cependant la réciproque est vraie : l'état de la peau peut influencer sur l'état nerveux. En effet, le cerveau et la peau possède une connexion grâce au système nerveux. La peau remplit un rôle de récepteur des excitations périphériques et de transmetteur des excitations au cerveau grâce à ses éléments nerveux dont l'importance et le nombre font qu'elle se révèle être une immense terminaison nerveuse étalée. La peau transmet au cerveau des informations par les neuromédiateurs. Par exemple, la peau est capable d'activer le système immunitaire en cas d'agression. Le microbiote est intimement lié à ces phénomènes, de nombreuses souches de bactéries possèdent des propriétés antidépresseur.

Un traitement a été proposé visant le microbiote cutané (US2012171193) mais ne fait pas de distinction entre les bactéries bénéfiques et les autres. D'autres traitements plus spécifiques ont été proposé contenant par exemple des agents antibactériens ciblant les niches bactériennes (W02011005756). Ce dernier cible les bactéries néfastes étant plus localisées dans les niches et est intéressant dans le cas d'infections localisés mais ne rétablie pas un déséquilibre du microbiote. La transplantation de bactéries vivantes extérieur au microbiote a été étudié (EP2337569). Cette méthode rétablie des manques dans le microbiote mais les bactéries apportées étant extérieures cela peut présenter des risques qui sont encore méconnus.

C'est en développant de nouvelles formulations de savons pour la peau que la demanderesse a découvert de manière tout à fait inattendue que ces problèmes peuvent être facilement résolus par l'utilisation d'une composition dermocosmétique contenant au moins

150 métabolites différents provenant de la fermentation lente d'un mélange de plusieurs plantes par une association de lactobactéries contenant au moins une souche de bactérie issue de la plante d'Olea europaea millénaire et particulièrement ses feuilles.

La demanderesse décrit ci-dessous des compositions dermocosmétiques permettant de restaurer l'équilibre des microbiotes cutanés et intestinal. La dermocosmétique est née de la rencontre entre la cosmétique et la dermatologie. Un produit dermocosmétique agit en profondeur en corrigeant les problèmes existants ou en protégeant l'intégrité des tissus de la peau. La dermocosmétique représente le trait d'union entre la beauté et la santé. Pour ce faire la demanderesse utilise un mélange de plantes fermentées lentement par une association de lactobactéries. L'association de lactobactéries est préalablement préparée par inoculation dans un même milieu d'un minimum de deux et sans limitation de nombre d'espèces de bactéries différents et dont au moins une souche de bactéries récoltée à partir de la plante d'Olea europaea millénaire et particulièrement ses feuilles. En effet les études de la demanderesse ont démontrées la présence de souches de bactéries particulières chez les éspèces d'Olivier millénaires comparé aux éspèces jeunes. Ces souches de bactéries se sont révélées posséder des propriétés intéressantes.

Les autres lactobactéries utilisées peuvent être, sans que cela ne soit limitatifs : Lactobacillus acidophilus, Lactobacillus brevis, Lactobacillus Jensenii, Lactobacillus paracasei subsp. Paracasei, Lactobacillus gasseri, Lactobacillus delbrueckii subsp. Bulgaricus, Lactobacillus helbeticus, Lactococcus lactis, Lactobacillus casei subsp. Casei, Lactobacillus rfiamnosus, ou encore Lactobacillus delbrueckii subsp. Delbrueckii. Un mélange de plantes est mis en culture avec une association de lactobactéries comme précédemment décrite pendant 3 jours à température comprise entre 35°C à 45°C. Le résultat ainsi obtenu est stérilisé à haute température afin d'éliminer les bactéries de la culture. Le produit final du traitement est obtenu après filtration et séchage à 40°C pendant 20h. Ce dernier contient au moins 150 métabolites différents et est utilisé par voie topique. L'objet de la présente invention concerne donc une composition dermocosmétique destinée à être utilisée par voie topique pour restaurer l'équilibre des microbiotes cutanés et intestinal caractérisée en ce qu'elle contient au moins 150 métabolites différents provenant de la fermentation lente d'un mélange de plusieurs plantes par une association de lactobactéries contenant au moins une souche de bactéries issue de la plante d'Olea europaea millénaire et particulièrement ses feuilles.

Dans les exemples qui vont suivre, on verra que dans les essais qui ont été réalisés par la demanderesse les plantes les plus efficaces pour restaurer l'équilibre des microbiotes sont Ficus carica et Olea europaea et en particulier leurs fruits et leurs feuilles.

Pour la clarté des explications qui suivent nous décidons d'appeler Bioflora système une composition dermocosmétique d'un mélange de Ficus carica et Olea europaea fermenté comme décrit dans la présente invention.

Bioflora système possède des propriétés antibactériennes ciblant les bactéries néfastes sur la peau. Bioflora système appliqué par voie topique pénètre profondément la peau pour limiter la prolifération de bactéries néfastes. On sait que la peau est intimement liée aux organes internes de l'organisme par les vaisseaux lymphatiques. Les vaisseaux lymphatiques ont pour rôle de transporter la lymphe dans les tissus. La lymphe est capable d'emporter une partie des microorganismes habitant les microbiotes de la peau. Les microorganismes sont donc capables en profondeur de migrer au travers de la lymphe vers l'intestin. Il existe donc un lien étroit entre les populations des microbiotes cutanés et intestinal. La prolifération des bactéries néfastes est donc limité pour le microbiote intestinal également. L'objet de la présente invention est donc décrite en plus comme une composition dermocosmétique caractérisée en ce qu'elle limite la prolifération de bactéries néfastes sur la peau et dans l'intestin.

La bonne santé de l'organisme est liée aux microbiotes et repose notamment sur la diversité des espèces qui s'y développent. En effet, plus la population des microbiotes est variés plus ses propriétés sont riches. De plus, une biodiversité équilibrée limite la prolifération d'espèces en particulier pouvant être néfaste.

Bioflora système protège les bactéries des microbiotes et enrichie la biodiversité des microbiotes. L'équilibre des microbiotes est rétablie et l'organisme est protéger contre un potentiel dysbiose pouvant être causé notamment par l'utilisation de savons et produits détergents. Bioflora système est décrit comme une composition cosmétique caractérisée en ce qu'elle auqmente la biodiversité des bactéries bénéfiques des microbiotes cutanés et intestinal.

La peau possède son propre système immunitaire qui protège l'organisme contre les infections extérieures. Le système immunitaire cutané est capable de développer des réponses immunes de 2 types, innée et adaptative. Le système immunitaire cutané peut être modulé par différents facteurs tels que le vieillissement, les ultraviolets, des médicaments topiques mais est également fortement influencé par le microbiote. De nombreuses espèces présentent dans le microbiote apporte des fonctions vitales à l'organisme dont le génome humain seul n'est pas capable d'assurer. L'une de ces fonctions est de moduler la réponse du système immunitaire. Les bactéries bénéfiques du microbiote cutané éduquent les lymphocytes T de la peau à amorcer une réponse en cas de surprésence de leurs semblables pathogènes. Un système immunitaire cutané normal est donc capable de discriminer les microorganismes et d'adapter sa réponse. Bioflora système est capable d'améliorer la réponse du système immunitaire. L'objet de la présente invention est donc décrite comme une composition cosmétique caractérisée en ce qu'elle améliore la réponse du système immunitaire.

Les bactériocines sont une famille protéines synthétisés naturellement par certaines bactéries. Les bactériocines possèdent des propriétés antibiotiques elles peuvent être à la fois bactériocides, c'est-à-dire éliminer certains micro-organismes. Mais également elles peuvent être bactériostatiques, c'est-à-dire inhiber la croissance de certains micro-organismes. L'activité bactéricide ou bactériostatique sont régulées selon la souche productrice. Elles jouent donc un rôle important dans la régulation du microbiote. Leur production semble stimulée par la présence de nombreuses bactéries dans le milieu de croissance. Les peptides antimicrobiens (AMP) sont des protéines d'origine naturellement présente sur la peau sécrétée par les kératinocytes. Les AMP possèdent des propriétés antibiotiques pour agir comme défenses contre les maladies provoquées par divers microorganismes et sont actifs contre certaines bactéries, champignons et virus. Les chimiokines sont une famille de petites protéines qui contrôle l'état d'activation des cellules du système immunitaire. Bioflora système a pour propriétés de moduler l'expression des bactériocine, des peptides antimicrobiens et des chimiokines, trois familles de protéines impliquées dans la réponse immunitaire et dans la régulation de la population bactérienne. Les compositions dermocosmétique de type Bioflora système sont donc caractérisée en ce qu'elle module le taux des protéines responsables de l'équilibre bactérienne du microbiote comme les bactériocine, les peptides antimicrobiens ou encore les chimiokines.

Le manteau acide de la peau est une fine pellicule huileuse composée de sébum, de sueur et de cellules mortes. Le pH de peaux normales est naturellement acide avec une valeur moyenne de 5,5. Le manteau acide permet de protéger la peau des attaques extérieur et notamment de la perte d'hydratation, des bactéries et de la pollution. Les produits nettoyants dont l'eau seule peuvent faire varier le pH cutané. Une peau ayant subi un lavage mettra entre 30 minutes et plusieurs heures à retrouver son pH initial, temps pendant lequel la peau est vulnérable. Les bactéries pathogènes du microbiote vont alors proliférer plus rapidement sans contrôle, ce qui peut mener à un déséquilibre et à des irritations. L'utilisation de Bioflora système rétablie le pH de la peau et en complément d'un nettoyant classique limite sa modification en formant une barrière protectrice. Une composition dermocosmétique de type Bioflora système sont donc caractérisée en ce qu'elle rétablie le pH initial de la peau et restaure son manteau acide.

Grâce à la protection du manteau acide et de l'équilibre du microbiote, Bioflora système protège les conditions optimales de la peau. En particulier, une composition dermocosmétique de type Bioflora système est caractérisée en ce qu'elle améliore la santé global de la peau en augmentant son hydratation, en réduisant les inflammations et en prévenant les infections.

Les bactéries présentent dans le microbiote possèdent une forte influence sur notre cerveau en modulant notamment les émotions, l'humeur et les processus de mémorisation. En effet, certaines bactéries sécrètent des métabolites capables d'affecter le comportement. Ces métabolites ainsi que leur effet varient selon les souches de bactéries. Bioflora système est décrit comme une composition dermocosmétique caractérisée en ce qu'elle diminue l'état de stress et d'anxiété du cerveau, améliore les fonctions cognitives et prévient des symptômes de la dépression.

La composition pharmaceutique contenant l'association PSP se présente sous la forme d'une émulsion eau dans huile (E/H) ou huile dans eau (H/E) ou d'émulsion multiple (H/E/H, E/H/E), de microémulsion, d'émulsion à phase gémellaires, d'émulsion PIT, de nano-émulsion, de pseudo-émulsion (dispersion stable de deux phases non miscibles au moyen de gélifiant), de gel aqueux, de gel gras, de gel hydro-alcoolique, de phase grasse, de suspension, de solution moussante ou non, de poudre, de gel ou d'émulsion lyophilisée et pouvant se présenter sans que cela soit limitatif en gels, liquides, crèmes, pâtes, lotions, émulsions, solides, huiles, inhalation, masques, stick, sprays, aérosol, gélules, poudres, comprimés effervescents.

La demanderesse va maintenant donner à titre d'exemple les études qui ont permis de sélectionner ces substances ainsi que des compositions sans que ces exemples ne soient limitatifs. Rappelons que pour la clarté des explications qui suivent nous décidons d'appeler Bioflora Système une composition dermocosmétique d'un mélange de Ficus carica et Olea europaea fermenté comme décrit dans la présente invention.

Exemple 1 : Restauration du pH optimal de la peau

Une étude a été réalisée afin d'évaluer l'effet de l'application de Bioflora système sur la modification du pH de la peau induit par un nettoyage. Cette étude est réalisée avec 40 volontaires sans aucune maladie de la peau connues, d'âge compris entre 20 et 45 ans. Les participants ont reçu deux échantillons de savon, le premier étant un savon classique et le deuxième le même savon enrichie de Bioflora système décrit dans la présente invention. Il a été demandé aux participants de prendre une douche sans modification de leurs habitudes avec les deux échantillons différents -à une journée d'intervalle. Le pH de la peau est mesuré au niveau du ventre des patients avant et après le lavage pour les deux échantillons grâce à un pH mètre équipé d'une électrode pH spécialement conçu avec un capteur plat pour une mesure de précision de la peau et des cheveux. Les résultats moyens sont montrés dans le tableau suivant :

pH	Avant lavage	Après lavage
Savon	5,64±0,16	6,7210,24
Bioflora système	5,5910,21	5,6810,13

On observe que le pH augmente significativement après le lavage lors de l'utilisation du savon seul se rapprochant d'un pH neutre en particulier il varie de plus d'une unité de pH. Alors que l'on observe après le lavage avec Bioflora système une légère augmentation du pH qui n'est pas significative. Ces résultats montrent que l'utilisation de Bioflora système conserve le pH de la peau après un lavage et donc protège son manteau acide et ses caractéristiques.

Exemple 2 : Test d'anergie et réponse du système immunitaire Une étude a été réalisée afin d'évaluer l'effet de l'application de Bioflora système sur la réponse du système immunitaire cutanée. Cette étude est réalisée avec 40 volontaires sans aucune maladie de la peau connues, d'âge compris entre 25 et 45 ans. Les participants ont été répartis par randomisation en deux groupes de 20 personnes sans distinction de sexe. Il a été demandé aux participants du premier groupe d'appliquer Bioflora système décrit par la présente invention et au deuxième groupe d'appliquer un placebo une fois par jour pendant un mois sur la peau. Un test d'anergie par l'antigène candida albicans a été effectué chez les deux groupes une semaine avant le début et à la fin de l'étude. Une faible dose de l'antigène est injectée sous la peau de l'avant-bras des participants. Après 72h, la réaction immunitaire à l'antigène est observée. Les résultats sont exprimés par rapport à la taille de la zone d'inflammation. Une grande taille de la zone d'inflammation montre un système immunitaire performant. Les résultats moyens sont montrés dans le tableau suivant :

Taille inflammation (mm)	Mois 0	Mois 1
Placebo	4,510,2	4,610,1
Bioflora système	4,810,1	7,610,2

On observe que la taille de la zone d'inflammation augmente significativement après un mois dans le groupe Bioflora système en particulier elle augmente de 64,6%. Alors qu'aucune modification significative n'a été observée dans le groupe placebo. Ces résultats montrent que l'utilisation de Bioflora système améliore la réponse du système immunitaire cutané. Il est à noter qu'excepté les résultats attendus du test d'anergie aucun participant n'a ressentie d'effets secondaires indésirables tout au long de l'étude.

Exemple 3 : Diversité de la microbiote

Une étude a été réalisée afin d'évaluer l'effet de l'application de Bioflora système sur la biodiversité du microbiote cutané. Cette étude est réalisée avec 20 volontaires sans aucune maladie de la peau connues, d'âge compris entre 25 et 50 ans. Les participants ont été répartis par randomisation en deux groupes de 10 personnes sans distinction de sexe. Il a été demandé aux participants du premier groupe d'appliquer Bioflora système décrit par la présente invention et au deuxième groupe d'appliquer un placebo une fois par jour pendant un mois sur le visage. Un séquençage du gène codant pour l'ARNr 16S a été effectué chez les deux groupes une semaine avant le début et à la fin de l'étude afin d'évaluer le nombre de souches de bactérie cultivable présent dans le microbiote des patients. Le séquençage a été réalisé à partir d'échantillons prélevé sur le front des participants. Les résultats moyens sont montrés dans le tableau suivant :

Nombre de souche	Mois 0	Mois 1
Placebo	83,2±12,5	82,6±10,1
Bioflora système	81,8±9,2	93,6±7,3

Bien que le séquençage du gène codant pour l'ARNr 16S ne donne pas une liste exhaustive de la totalité des bactéries présente dans le microbiote, il montre efficacement la différence de biodiversité. On observe que la biodiversité du microbiote cutané augmente significativement après un mois dans le groupe Bioflora système en particulier elle augmente de 14,4%. Alors qu'aucune modification significative n'a été observée dans le groupe placebo. Ces résultats montrent que l'utilisation de Bioflora système augmente la biodiversité du microbiote. Il est à noter qu'aucun participant n'a ressentie d'effets secondaires indésirables tout au long de l'étude.

Exemple 4 : Augmentation de la concentration de bactériocine et d'AMP

Une étude a été réalisée afin d'évaluer l'effet de l'application de Bioflora système sur la concentration en bactériocine et peptide antibiotique (AMP) sur la peau. Cette étude est réalisée avec 30 volontaires sans aucune maladie de la peau connues, d'âge compris entre 20 et 50 ans. Les participants ont été répartis par randomisation en deux groupes de 15 personnes sans distinction de sexe. Il a été demandé aux participants du premier groupe d'appliquer Bioflora système décrit par la présente invention et au deuxième groupe d'appliquer un placebo une fois par jour pendant un mois sur le visage. La concentration en bactériocine et en Psoriasine, l'un des AMP majeur de la peau, ont été analysées au début et à la fin de l'étude à partir d'échantillon provenant du front des participants pour les deux groupes. Les résultats moyens sont montrés dans les tableaux suivant :

Bactériocine (ng/cm²)	Mois 0	Mois 1
Placebo	45,4±3,3	44,9+2,4
Bioflora système	46,7±1,2	53,6±3,1

Psoriasine(ng/cm²)	Mois 0	Mois 1
Placebo	29,112,3	28,411,1
Bioflora système	29,711,2	33,612,5

On observe que la concentration en bactériocine cutanée augmente significativement après un mois dans le groupe Bioflora système en particulier elle augmente de 14,8%. Alors qu'aucune modification significative n'a été observée dans le groupe placebo. On observe également que la concentration en Psoriasine cutanée augmente significativement après un mois dans le groupe Bioflora système en particulier elle augmente de 13,1%. Alors qu'aucune modification significative n'a été observée dans le groupe placebo. Ces résultats montrent que l'utilisation de Bioflora système augmente la concentration en bactériocine et peptide antibactériens présent à la surface de la peau. Il est à noter qu'aucun participant n'a ressentie d'effets secondaires indésirables tout au long de l'étude.

Exemple 5 : Augmentation de l'hydratation de la peau

Une étude a été réalisée afin d'évaluer l'effet de l'application de Bioflora système sur le niveau d'hydratation de la peau. Cette étude est réalisée avec 20 volontaires sans aucune maladie de la peau connues, d'âge compris entre 20 et 40 ans. Les participants ont été répartis par randomisation en deux groupes de 10 personnes sans distinction de sexe. Il a été demandé aux participant du premier groupe d'appliquer une Bioflora système décrit dans la présente invention et au deuxième groupe d'appliquer un placebo une fois par jour pendant un mois sur les mains. Le taux d'humidité est mesuré pour tous les participants au début et à la fin de l'étude. Les résultats sont montrés dans le tableau suivant :

%humidité	Mois 0	Mois 1
Bioflora système	32,6	41,3
Placebo	34,5	35,5

On observe que le taux d'hydratation augmente significativement dans le groupe Bioflora système, plus précisément il augmente de 8,7%. Alors qu'aucun changement significatif n'a été observé dans le groupe placebo. Ces résultats montrent que Bioflora système améliore efficacement l'hydratation de la peau.

Exemple 6 : Diminution du stress

Une étude a été réalisée afin d'évaluer l'effet de l'application de Bioflora système sur le stress et l'anxiété. Une topographie des ondes Thêta, Alphal et Alpha2 du cerveau a été réalisé avant et après lh de l'application de Bioflora système sur le visage. Les ondes alpha et thêta sont le témoin de la relaxation. Le résultat de la topographie se présente sous échelle de couleur avec en bleu : l'onde n'est pas exprimée, en vert : l'onde est faiblement exprimée et en rouge : l'onde est fortement exprimée. Au début de l'étude les topographies des trois ondes apparaissent en vert, ce qui signifie que le patient n'est pas relaxé. Après application de Bioflora système, les topographies de l'onde thêta et de l'onde alpha 1 apparaissent rouges et la topographie de l'onde alpha 2 apparait d'un vert moins prononcé, ce qui signifie que le patient est relaxé et concentré. Ces résultats montrent que l'utilisation de Bioflora système diminue le stress et l'anxiété et induit efficacement une meilleure concentration et mémorisation.

Exemple 7 : Emulsion gel anti-inflammatoire

- Carbopol 981............................................0,6 g

- Alcool éthylique.........................................10 g

- Huile de silicone volatile ...............................3 g

- Huile de purcellin........................ 3 g

- Bioflora système..........................................5 g

- Parfum..................................................0,4 g

- Triéthanolamine.........................................0,2 g

- Conservateurs ..........................................0,3 g

- Eau déminéralisée qsp...................................100 g

Cette émulsion gel est à appliquer une fois par jour. Les utilisateurs ont remarqué une diminution des inflammations et irritation de la peau.

Exemple 8 : Gel douche protecteur

- Eau minérale....................... 32 g

Carraghénane................. 0,5 g

Urée........................................................2,6 g

- Sodium Lauroyl Sarcosinate...................................16 g

Parfum......................................................0,2 g

- Acide lactique liquide.....................................0,15 g

- Leucidal....................................................2,2 g

Bioflora système..............................................3 g

Ce gel douche est à utiliser quotidiennement. Il protège la peau des attaques extérieures.

Exemple 9 : Shampoing anti-infectieux

- Eau..........................................................50 g

- Sodium lauryl sulfate........................................26 g

- Cocoamidopropyl betaïne......................................10 g

Sodium Chloride...............................................8 g

Polyquaternium................................................3 g

- Methylparaben...............................................0,5 g

Propylparaben.............. 0,1 g

- EDTA........................................................0,1 g

- Acide citrique..............................................0,1 g

Parfum.....................................................0,15 g

Bioflora Système..............................................2 g

Shampoing à utilisation 2 à 3 fois par semaine. Les utilisateurs ont 15 notés une diminution de la fréquence d'infection du cuir chevelu.

Claims

REVENDICATIONS

1. ) Procédé de fermentation destiné à produire au moins 150 métabolites différents pour restaurer l'équilibre des microbiotes cutané et intestinal caractérisé en ce que les bactéries utilisées sont une association de lactobactéries contenant au moins une souche de bactéries issue de la plante d'Olea europaea millénaire et particulièrement de ses feuilles.
2. ) Procédé de fermentation selon la revendication 1 caractérisé en ce que les ingrédients utilisés pour la fermentation sont Ficus carica et Olea europaea en particulier leurs fruits et leurs feuilles.
3. ) Composition dermocosmétique pour l'application du procédé selon les revendications 1 et 2 contenant les métabolites issues de la fermentation pour son utilisation pour la protection des microbiotes cutané et intestinal contre les risques de dysbiose en augmentant leur biodiversité bactérienne.
4. ) Composition dermocosmétique pour l'application du procédé selon les revendications 1 et 2 contenant les métabolites issues de la fermentation pour son utilisation pour l'augmentation de l'intensité de la réponse du système immunitaire.
5. ) Composition cosmétique pour l'application du procédé selon les revendications 1 et 2 contenant les métabolites issues de la fermentation pour son utilisation pour la modulation du taux de protéines responsables de l'équilibre bactérienne du microbiote en augmentant le taux de bactériocine et du peptide antimicrobien Psoriasine.
6. ) Composition dermocosmétique pour l'application du procédé selon les revendications 1 et 2 contenant les métabolites issues de la fermentation pour son utilisation pour restaurer le manteau acide de la peau en rétablissant son pH optimal de 5,5.
7. ) Composition dermocosmétique pour l'application du procédé selon les revendications 1 et 2 contenant les métabolites issues de la fermentation pour son utilisation pour l'amélioration de la santé global de la peau en augmentant son pourcentage d'hydratation, en réduisant les inflammations, les irritations ressenties et en diminuant le taux d'infections.
8 . ) Composition dermocosmétique pour l'application du procédé selon les revendications 1 et 2 contenant les métabolites issues de la fermentation pour son utilisation pour le bien-être mental en diminuant les sentiments ressentis de stress, d'anxiété et de dépression et en améliorant la mémoire et la concentration.
9.) Composition dermocosmétique pour l'application du procédé selon les revendications 1 et 2 et pour son utilisation selon les revendications 3 à 9 caractérisée en ce qu'elle est utilisé par voie topique en se présentant sous la forme d'une émulsion eau dans huile (E/H) ou huile dans eau (H/E) ou d'émulsion multiple (H/E/H, E/H/E), de microémulsion, d'émulsion à phase gémellaires, d'émulsion PIT, de nano-émulsion, de pseudo-émulsion (dispersion stable de deux phases non miscibles au moyen de gélifiant), de gel aqueux, de gel gras, de gel hydro-alcoolique, de phase grasse, de suspension, de solution moussante ou non, de poudre, de gel ou d'émulsion lyophilisée et pouvant se présenter sans que cela soit limitatif en gels, liquides, crèmes, pâtes, lotions, émulsions, solides, huiles, inhalation, masques, stick, sprays, aérosol, gélules, poudres, comprimés effervescent.