FR3015524A1 - Signature moleculaire du lentigo actinique specifique des peaux asiatiques - Google Patents

Abstract

La présente invention concerne une signature moléculaire du lentigo actinique spécifique des peaux asiatiques, comprenant les gènes LCE3D, SPRR2B, SPRR2G et SPRR3, et diverses applications de cette signature. L'invention concerne notamment une méthode de caractérisation d'une tache pigmentaire apparente chez un être humain présentant une peau asiatique, comprenant la comparaison des niveaux d'expression, dans des échantillons de peau issue de ladite tache et de peau adjacente non lésée, des gènes. L'invention concerne également des méthodes d'évaluation de l'efficacité d'un traitement spécifique du lentigo actinique présent sur une peau asiatique, des méthodes cosmétiques de traitement du lentigo actinique présent sur une peau asiatique, ainsi que divers modulateurs desdits gènes et leur utilisation.

Description

La présente invention est dans le domaine cosmétique, elle est relative à la peau asiatique. Elle s'inscrit plus généralement dans le cadre de la caractérisation des taches pigmentaires de la peau asiatique et du traitement du lentigo actinique. La couleur de la peau est principalement due à la présence d'un pigment, la mélanine, dans l'épiderme. La mélanine est synthétisée par des cellules dendritiques spécifiques localisées dans la couche basale de l'épiderme, les mélanocytes. La mélanogénèse prend place dans des organelles, les mélanosomes qui, chargés de mélanine, sont transférés aux cellules voisines épidermiques, les kératinocytes, via les dendrites. La couleur de la peau, ou pigmentation constitutive varie selon les individus en fonction de la quantité de mélanine produite ainsi que de la nature chimique des mélanines. Les mélanines sont des macromolécules formées à partir de tyrosine (eumélanine) ou de tyrosine et de cystéine (pheomélanine). Les mécanismes de synthèse mettent en jeu des enzymes dont les principales sont la tyrosinase et la protéine associée à la tyrosinase (Tyrp-1). Naturellement, la pigmentation de la peau est stimulée par l'exposition au soleil, c'est le phénomène de bronzage. Il existe cependant des situations où le processus de pigmentation est altéré, et qui peuvent aboutir à des défauts de pigmentation, hypopigmentations (vitiligo, albinisme) ou à l'inverse à un excès de pigmentation, hyperpigmentations. Parmi les désordres hyperpigmentaires bénins, caractérisés par une accumulation anormale (hors bronzage) de mélanine, on peut citer le lentigo actinique, le mélasma, les séquelles pigmentaires d'acné, la pigmentation post-inflammatoires, la dermite des prés, la pigmentation liée à la plante poison ivy ou encore les dychromies bénignes du visage. Le lentigo actinique, également dénommé lentigo sénile ou solaire, tache sénile, tache de vieillesse, ou encore communément dénommé "crasse sénile", "marguerites de cimetière" ou "fleurs de cimetière", est de loin la plus fréquente des lésions pigmentaires. Ce type de lésions apparaît sur des zones de la peau qui ont été photoexposées, telles que le visage, le dos des mains, les membres supérieurs et notamment la face dorsale des avant-bras, le dos, et en particulier le haut du dos. Les taches hyperpigmentaires sont l'un des principaux signes du vieillissement dans la population asiatique et apparaissent généralement avant les rides (Goh SH, br j dermatol 1990). La prévalence des taches pigmentaires est plus élevée dans la population asiatique que dans la population caucasienne chez les femmes de plus de 40 ans (Nouveau-Richard et al. J dermatol sci 2005).

Ainsi, il existe un besoin de disposer de marqueurs biologiques permettant de caractériser précisément et spécifiquement un lentigo actinique ou solaire dans la peau asiatique. A ce jour, on ne dispose que de peu de marqueurs biologiques permettant de déterminer efficacement et précisément l'état d'un épiderme, et notamment de relier l'apparition du lentigo actinique ou solaire à un dysfonctionnement de ses fonctions physiologiques. Il existe également un besoin de disposer d'un marqueur biologique qui puisse être utilisé de manière fiable dans un procédé de diagnostic du lentigo actinique ou solaire afin de le distinguer des autres pathologies. Les traitements actuels : Les troubles pigmentaires cutanés bénins sont généralement considérés comme inesthétiques. Du fait de l'association avérée entre l'apparition des lentigos actiniques et l'exposition chronique au soleil, la prévention de leur apparition passe en général par l'application topique de produits dits photoprotecteurs comme les écrans solaires. Dans le cas de traitements «curatifs», de nombreux procédés, principalement à visées cosmétiques, ont donc été développés afin de tenter de les éliminer ou de réduire leur présence. L'élimination ou la réduction de la présence de ces troubles repose, d'ordinaire, sur l'application de traitements dépigmentants, basés sur la réduction de l'activité de synthèse de la mélanine dans les mélanocytes. Les molécules dépigmentantes interfèrent avec une ou des étapes de la mélanogénèse. L'une des voies des principaux produits utilisés à ce jour repose sur l'inhibition de la tyrosinase, une des enzymes clés du processus de mélanogénèse. Le but de ces traitements est de diminuer voire de stopper la synthèse de pigment.

Les principales substances dépigmentantes connues sont l'hydroquinone et ses dérivés, l'acide kojique, l'arbutine, les iminophénoles, l'acide ascorbique et ses dérivés, l'association de carnitine et de quinone, les dérivés d'amino-phénol, et les dérivés de benzothiazole, des extraits naturels, des corticoïdes. On trouve souvent aussi associés à ces actifs des exfoliants permettant d'augmenter la desquamation, et ainsi d'éliminer plus facilement la mélanine présente dans le stratum cornéum. Une autre méthode de traitement non cosmétique consiste à détruire les lésions par des moyens physiques ou chimiques en utilisant les lasers ou les peelings. Cependant, ce sont des procédures assez lourdes qui ne s'attaquent pas à l'étiologie du désordre.

Il existe des inconvénients majeurs aux traitements existants. Les substances dépigmentantes peuvent présenter une certaine instabilité, une faible efficacité à faible concentration, une activité biologique touchant d'autres fonctions, des propriétés toxiques ou allergisantes. Il existe en plus une grande hétérogénéité de réponse aux différents traitements dépigmentants. Par ailleurs, les peaux asiatiques sont considérées comme les peaux les plus sensibles et réactives aux agressions extérieures et nécessitent donc des soins adaptés. Généralement, on constate, sur les peaux asiatiques, l'apparition de taches pigmentaires au niveau des pommettes, où la peau est fragile et réactive mais sur des zones très facilement irritables notamment au niveau péri-oculaire. La localisation des taches sur les peaux asiatiques laisse donc peu de possibilités de traitement car ce sont souvent des zones sensibles et très réactives. Les peaux asiatiques supportent, par conséquent, peu de produits dépigmentant. Il existe donc également un besoin d'identification, de nouvelles cibles cosmétiques ou thérapeutiques spécifique des peaux asiatiques.

Il existe également un besoin de disposer de nouveaux outils de criblage de molécules susceptibles d'exercer une action cosmétique ou thérapeutique adapté au lentigo actinique ou solaire présent sur les peaux asiatique.

La présente invention a pour objet de satisfaire à l'ensemble de ces besoins. En effet, les inventeurs ont mis en évidence grâce à une étude comparative des peaux française et Japonaise une signature moléculaire spécifique des peaux asiatiques représentative des différences d'expression génique existant entre la peau issue de tache pigmentaire et la peau saine adjacente, et aux différentes applications et méthodes faisant usage de la connaissance de cette signature, notamment pour moduler la pigmentation de la peau, dans le traitement cosmétique des taches pigmentaires ou pour uniformiser le teint ou homogénéiser la couleur de la peau. Cette signature est constituée des 4 gènes suivants : LCE3D (Late cornified envelope 3D), SPRR2B (small proline-rich protein 2B), SPRR2G (small proline-rich protein 2G), SPRR3 (small proline-rich protein 3), et s'avère spécifique des peaux asiatiques. Les inventeurs ont en effet mis en évidence la modulation significative et spécifique de ces gènes dans la tache pigmentaire asiatique avec un niveau d'expression supérieur et reproductible de ces gènes dans la peau asiatique issue de tache pigmentaire par rapport à la peau asiatique non lésée correspondante. Lesdits gènes s'entendent des gènes humains dénommés ainsi. Les taches pigmentaires dont il est question sont préférentiellement des taches pigmentaires de la peau humaine.

Par « peau », au sens de la présente on entend peau asiatique. La présente invention concerne notamment selon un premier aspect un procédé de sélection d'un composé utile et son utilisation dans la prévention et/ou le traitement du lentigo actinique des peaux asiatiques. Selon un second aspect, l'invention concerne une méthode d'évaluation de l'efficacité d'un traitement du lentigo actinique chez un individu présentant une peau asiatique.

Selon un troisième aspect, l'invention concerne une méthode de caractérisation d'une tache pigmentaire cutanée spécifique des peaux asiatiques.

Selon un quatrième aspect, la présente invention concerne une méthode de prédiction d'apparition d'un lentigo actinique sur une peau asiatique. Procédé de sélection d'un composé utile dans la prévention et/ou le traitement du lentigo actinique.

Les présents inventeurs ont montré le rôle important des gènes de l'invention au niveau du lentigo actinique présent sur les peaux asiatiques, et notamment le lien entre dérégulation du niveau d'expression de ces gènes et présence du lentigo actinique. De ce fait, suspendre ou diminuer la modulation de ces gènes peut permettre de diminuer ou abolir les dérégulations observées et ainsi permettre de restaurer une situation compatible. avec l'absence de lentigo actinique, avec donc un teint uniforme et une couleur de peau homogène. L'invention consiste donc notamment en un procédé de sélection d'un composé utile dans la prévention et/ou le traitement du lentigo actinique présent sur les peaux asiatiques, 10 comprenant les étapes consistant à-: a) Mesurer dans un échantillon de peau et/ou un modèle cellulaire représentatif de la peau le niveau d'expression ou de l'activité du produit d'expression d'au moins un gène parmi la liste constituée des gènes LCE3D, SPRR2B, SPRR2G et SPRR3 b) Mettre ledit composé à sélectionner en contact avec ledit échantillon de peau et/ou 15 ledit modèle cellulaire représentatif de la peau c) Mesurer le niveau d'expression ou de l'activité du produit d'expression d'au moins un gène choisi parmi la liste constituée des gènes LCE3D, SPRR2B, SPRR2G et SPRR3, d) Comparer les mesures des étapes a) et c) 20 e) Sélectionner en tant que composé utile dans la prévention et/ou le traitement du lentigo, un composé capable de diminuer le niveau d'expression ou l'activité du produit d'expression d'au moins un gène choisi parmi LCE3D, SPRR2B, SPRR2G et SPRR3. 25 Elle consiste à évaluer des composés sur leur pouvoir d'inhibition de l'expression des gènes cités et/ou de l'expression ou l'activité des produits protéiques desdits gènes et à sélectionner en tant que facteurs permettant de prévenir, ou traiter le lentigo actinique présent sur les peaux asiatiques. La vérification de l'efficacité des composés peut être réalisés sur des modèles cellulaires mono où co cultures, ou des modèles tri dimensionnels de peau 30 reconstruite, ou de la peau ex vivo. Dans un tel cas, la modulation recherchée dans les méthodes cosmétiques selon l'invention est une inhibition, totale, partielle ou temporaire, de l'expression d'au moins un gène choisi parmi les gènes LCE3D, SPRR2B, SPRR2G et SPRR3. De préférence, l'inhibition n'est pas une inhibition totale, mais partielle, tendant à diminuer le niveau d'expression du gène choisi sans pour autant inhiber entièrement son expression. Par diminution du niveau d'expression, il est inclus la diminution du niveau de transcription desdits gènes, et/ou la diminution du niveau de traduction du produit desdits gènes, ainsi que la diminution de l'activité des protéines issues de la traduction des transcrits issus ces gènes. Un procédé selon la présente invention comprend donc l'application d'un produit, notamment molécule chimique, extrait naturel, actif, acides nucléiques, peptides, ou d'un traitement modulant le niveau d'expression ou l'activité du produit d'expression d'au moins un des gènes de l'invention. S'il s'agit d'un produit, il est de préférence appliqué de façon topique. Par peau asiatique au sens de l'invention, on entend une peau de personne d'un des pays du continent d'Asie et de préférence une peau de personne japonaise.

Utilisation d'un modulateur La présente invention concerne également l'utilisation d'un modulateur du niveau d'expression ou de l'activité du produit d'expression d'au moins un gène choisi parmi la liste constituée des gènes LCE3D, SPRR2B, SPRR2G et SPRR3, pour une application cosmétique dans le traitement de du lentigo actinique présent sur les peaux asiatiques. Pour le traitement du lentigo actinique présent sur les peaux asiatiques, le modulateur dont il est fait usage est un inhibiteur d'au moins un gène choisi parmi LCE3D, SPRR2B, SPRR2G et SPRR3. De préférence, l'inhibiteur est un inhibiteur partiel conduisant à la diminution du niveau d'expression ou à la diminution de l'activité du produit d'expression dudit gène, sans pour autant abolir entièrement l'expression ou l'activité de ce gène. Lorsque l'agent modulateur est « inhibiteur », ledit agent modulateur peut aussi être un anticorps monoclonal ou polyclonal, en particulier un anticorps bloquant, un aptamère, un oligonucléotide antisens (ADN), un ARN interférent, en particulier siRNA, shRNA, ARN interférent, dsRNA. Un oligonucléotide anti-sens ou un ARN interférent peut être aisément préparé par l'homme du métier. En effet, ces acides nucléiques sont ou comprennent une séquence complémentaire de l'ARNm du gène dont l'expression doit être inhibée, et ils empêchent la traduction de l'ARNm ou induisent sa dégradation spécifique. Les modulateurs peuvent être utilisés en association avec d'autres produits, actifs ou excipients. De préférence, ils sont conditionnés sous une forme adaptée à une application topique, par exemple sous forme de pommade, de crème ou d'onguent. Les diverses mises en oeuvre détaillées dans la section relative aux méthodes cosmétiques selon l'invention sont applicables aux utilisations pour les applications cosmétiques décrites ci-dessus.

Les modulateurs selon l'invention peuvent être utilisés notamment dans des applications cosmétiques en vue d'uniformiser le teint, d'homogénéiser la couleur de la peau ou de lutter contre les dyschromies. Des modulateurs peuvent être associés à d'autres produits, actifs ou excipients. De préférence, ils sont conditionnés sous une forme adaptée à une application topique, par 15 exemple sous forme de pommade, de crème ou d'onguent. Méthodes d'évaluation de l'efficacité d'un traitement sur les peaux asiatiques. La présente invention concerne également, selon un second aspect, une méthode d'évaluation de l'efficacité d'un traitement du lentigo actinique sur une peau asiatique, 20 utilisant la signature mise en évidence par les inventeurs. Le traitement évalué peut être un traitement visant l'atténuation du lentigo actinique ou toute autre modulation de la pigmentation, pour notamment uniformiser le teint ou homogénéiser la couleur de la peau. Selon une première mise en oeuvre, cette méthode d'évaluation comprend une étape de comparaison des niveaux d'expression dans la peau asiatique issue du lentigo actinique, des 25 gènes LCE3D, SPRR2B, SPRR2G et SPRR3 avant et après traitement Il est important de noter également que la méthode selon l'invention implique la comparaison des niveaux d'expression d'au moins l'un des gènes de l'invention avant et après traitement. De ce fait, il peut être suffisant d'évaluer quantitativement ou qualitativement la différence entre les deux niveaux d'expression, sans pour autant évaluer et 30 quantifier individuellement chacun des niveaux d'expression.

Selon cette méthode d'évaluation, la comparaison des niveaux d'expression du ou des gènes choisis est réalisée au sein de la peau asiatique issue du lentigo actinique et la peau non lésée ou de manière préférée la comparaison des niveaux d'expression du ou des gènes choisis est réalisée au sein de la peau asiatique issue du lentigo actinique, ou bien au sein d'un échantillon correspondant, avant et après traitement. Il n'y a donc pas de comparaison à un niveau d'expression au sein de peau saine non lésée. Les niveaux d'expression sont avantageusement normalisés à l'aide des niveaux d'expression des gènes codant pour la protéine ribosomale L13a (RPL13A), la beta-2- microglobuline (B2M), la protéine ribosomale S9 (RPS9), la protéine ribosomale S28 10 (RPS28) et la Glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogénase (GAPDH). Par la méthode d'évaluation telle que décrite, un traitement donné est considéré comme efficace pour le traitement du lentigo actinique présent sur une peau asiatique si le niveau d'expression des gènes LCE3D, SPRR2B, SPRR2G et SPRR3 est inférieur d'au moins 20% après traitement par rapport au niveau d'expression avant traitement. 15 Selon une autre mise en oeuvre, la méthode d'évaluation de l'efficacité d'un traitement du lentigo actinique comprend la caractérisation d'une tache ou irrégularité pigmentaire selon la méthode de l'invention décrite ci-dessous, avant et après traitement, et la comparaison des 20 différences de niveaux d'expression observées entre la peau lésée de la tache ou irrégularité pigmentaire et la peau adjacente non lésée. Selon cette mise en oeuvre de l'évaluation de l'efficacité d'un traitement, le traitement est considéré comme efficace si la différence entre les niveaux d'expression des gènes dans la peau lésée issue de la tache et dans la peau non lésée est moindre après traitement par 25 rapport à ce qu'elle était avant le traitement, c'est-à-dire si le rapport entre les niveaux d'expression des gènes dans la peau lésée issue de la tache et dans la peau non lésée est significativement inférieur après traitement par rapport à ce qu'il était avant traitement. Par « significativement inférieur » au sens de l'invention, on entend une diminution d'au moins 20%, et de préférence de 50%, de manière encore plus préférée de 70 % et 30 préférentiellement de 100% de la surexpression du gène ou de la surexpression du produit du gène.

Un traitement sera considéré comme sans effet si les niveaux d'expression du gène choisi, avant et après traitement, sont sensiblement identiques, ou bien si les différences observées ne sont pas significatives. Quand il est comparé les niveaux d'expression de plus d'un gène, le traitement est considéré comme efficace pour le traitement du lentigo actinique présent sur une peau asiatique si, pour la majorité des gènes testés, et de préférence pour l'ensemble des gènes testés, pris individuellement, le traitement est considéré comme efficace. Pour les autres gènes choisis, le traitement doit de préférence être sans effet, mais non avoir l'effet inverse.

Quand il est comparé les niveaux d'expression de plus d'un gène, il est de préférence conclu à l'efficacité du traitement quand pour la majorité des gènes choisis, et de préférence pour l'ensemble des gènes choisis, pris individuellement, on peut conclure à un traitement efficace.

Le traitement considéré, évalué par la méthode de l'invention, n'est pas limité à un type particulier de traitement. Il peut s'agit d'un traitement par une molécule chimique, un actif, un extrait naturel, notamment une huile essentielle, un acide nucléique, notamment un ARN interférent, un complexe protéique ou tout autre molécule ou combinaison de molécules. Il s'agit de préférence d'un traitement topique.

Le traitement testé peut viser à atténuer ou faire disparaitre une tache cutanée, à moduler la pigmentation de la peau, à uniformiser le teint, à homogénéiser la couleur de la peau ou à atténuer les dyschromies. Des traitements particulièrement préférés dans le cadre de cette invention sont des traitements cosmétiques, plus particulièrement des traitements topiques cosmétiques.

Par les méthodes de l'invention, il est également possible d'évaluer l'efficacité de la combinaison de plusieurs traitements. Il est en effet possible d'évaluer des combinaisons permettant au mieux de restaurer les niveaux d'expression d'un, de plusieurs ou de tous les gènes de l'invention, tels qu'ils sont exprimés au sein de peau non lésée.

L'échantillon de peau provient de préférence d'un être humain de type asiatique, de préférence âgé d'au moins quarante ans, de préférence d'au moins cinquante ans, voire au moins soixante ans.

La méthode d'évaluation de l'efficacité d'un traitement selon la présente invention est de préférence mise en oeuvre in vitro ou ex vivo. Elle peut également être mise en oeuvre in vivo.

La présente invention concerne également une méthode in vitro ou ex vivo d'évaluation de l'efficacité d'un traitement du lentigo actinique sur une peau asiatique ; une telle méthode comprend la comparaison, avant et après traitement, du niveau d'expression dans un modèle cellulaire représentatif de la peau, des gènes LCE3D, SPRR2B, SPRR2G et SPRR3. Le modèle cellulaire peut être de tout type considéré comme approprié par l'homme du métier. Il peut s'agir notamment de modèles cellulaires mono ou co-cultures, ou bien de modèles tridimensionnels de peau reconstruite, ou bien de peau cultivée ex-vivo. Il existe également des modèles cellulaires représentatifs de taches pigmentaires, plus particulièrement de lentigos actiniques, qui peuvent être utilisés dans le cadre de cette méthode. De tels modèles cellulaires n'ont pas besoin de mimer le lentigo actinique dans leur globalité mais doivent mimer des évènements biologiques, des caractéristiques morphologiques ou pigmentaires observés dans le lentigo. De tels modèles in vitro sont bien connus de l'homme du métier. Par ailleurs, au moyen de ces méthodes d'évaluation, il est possible de promouvoir un traitement auprès de consommateurs, en mettant en avant les résultats obtenus avec ce traitement dans les méthodes d'évaluation de l'efficacité décrites dans la présente invention. La présente invention fournit donc également une méthode permettant de recommander un produit en signalant son effet dans un protocole de test constitué par une méthode d'évaluation de l'efficacité telle que décrite précédemment. L'invention a donc également pour objet une méthode pour la promotion d'un produit cosmétique ou traitement cosmétique consistant à faire état d'une efficacité, action ou propriété dudit produit ou traitement, démontrée par au moins une méthode opérée telle que décrite précédemment. Par ailleurs, une méthode cosmétique selon l'invention est avantageusement mise en oeuvre après la caractérisation de la tache pigmentaire que l'on souhaite traiter par une méthode selon l'invention. En effet, cette première étape permet de caractériser la tache et donc de détecter les gènes dont le niveau d'expression est fortement modulé entre la zone de la tache et une zone non lésée, de préférence adjacente. Il est ensuite possible d'adapter un traitement qui permette d'agir sur le ou les gènes de l'invention qui sont modulés différentiellement au sein de cette tache, en appliquant spécifiquement des modulateurs pour lesdits gènes.

Méthode de caractérisation d'une tache pigmentaire et méthode pour la prédiction de la formation de lentigo actinique, sénile ou solaire. La méthode comprend la comparaison des niveaux d'expression au sein d'une peau asiatique issue de ladite tache et au sein de la peau asiatique non lésée, de préférence adjacente, du même individu, des gènes suivants LCE3D, SPRR2B, SPRR2G et SPRR3. En effet, les présents inventeurs ont mise en évidence la surexpression significative des gènes dans la peau asiatique issue d'un lentigo actinique, par rapport au niveau d'expression dans la peau asiatique adjacente non lésée.

Une telle méthode permet entre autres de confirmer de manière fiable la nature de la tache pigmentaire sur une peau asiatique dans le cas où cette dernière est déjà apparente, par exemple visuellement à l'oeil nu. La présente invention concerne donc notamment une méthode in vitro ou ex vivo de caractérisation d'une tache pigmentaire cutanée chez un individu présentant une peau asiatique, ladite méthode comprenant les étapes consistant à : a) mesurer le niveau d'expression ou d'activité du produit d'expression des gènes LCE3D, SPRR2B, SPRR2G et SPRR3 dans des échantillons provenant d'une peau asiatique issue de ladite tache b) mesurer le niveau d'expression ou d'activité du produit d'expression desdits gènes dans des échantillons de peau asiatique adjacente non lésée, c) comparer les niveaux d'expression ou d'activité du produit d'expression desdits gènes mesurés aux étapes a) et b) d) en déduire que ledit individu présente un lentigo actinique quand le rapport entre le niveau d'expression ou d'activité du produit d'expression desdits gènes dans l'échantillon de peau issue de la tache mesuré à l'étape a), et le niveau d'expression ou d'activité du produit d'expression desdits gènes dans l'échantillon de peau adjacente non lésée mesuré à l'étape supérieur à 1,5. Les niveaux d'expression des gènes de l'invention sont mesurés au niveau de la peau issue de tache avérée et au niveau de la peau adjacente non lésée. Par « peau adjacente », au sens de l'invention, on entend une zone aussi proche que possible de la tache mais à une distance suffisante pour que l'échantillon prélevé ne contienne aucune cellule susceptible d'appartenir à la tache pigmentaire.

Par « non lésée », on entend une zone qui ne possède pas de tache pigmentaire, ni d'irrégularité pigmentaire, de préférence une zone homogène en terme de pigmentation. Du fait que la zone non lésée sert de référence, elle doit dans tous les cas être aussi comparable que possible que la zone de la tache, mais dépourvue de défaut pigmentaire.

De préférence, la zone adjacente non lésée est une zone ayant une exposition à la lumière et au soleil comparable à la zone de la tache pigmentaire. Alternativement, la zone non lésée peut provenir d'une zone symétrique sur l'autre partie du sujet, ayant un emplacement parfaitement identique ; par exemple dans le cas d'une tache sur la main gauche, la zone non lésée peut être la zone correspondante sur la main droite. Dans ce cas, la zone non lésée n'est pas à proprement parler une zone adjacente. Par « niveau d'expression d'un gène », on entend préférentiellement, dans la présente description, le niveau de transcription dudit gène. Cependant, son niveau d'expression peut également se traduire par son niveau de traduction, à supposer toutefois qu'il s'agisse d'un gène codant pour une protéine. Tel est le cas pour les gènes de l'invention.

Par « supérieur », on entend une différence de niveaux d'expression qui est statistiquement significative et reproductible. Par exemple, le rapport entre le niveau d'expression d'un gène de l'invention dans la peau lésée et le niveau d'expression dans la peau non lésée est supérieur à 1,5 pour un gène surexprimé dans la peau lésionnelle.

L'invention concerne également une méthode qui permet de prédire l'apparition d'un lentigo actinique, quand ce dernier n'est pas encore observé, ou bien de conclure qu'une peau est encline à la formation d'un lentigo actinique, ou sujette à des défauts de pigmentation. L'invention concerne également une méthode de prédiction d'un risque d'apparition d'un lentigo actinique chez un individu, ladite méthode comprenant les étapes consistant à : a) mesurer le niveau d'expression ou d'activité du produit d'expression des gènes LCE3D, SPRR2B, SPRR2G et SPRR3 dans des échantillons provenant d'une peau prédisposée b) comparer le niveau de d'expression des gènes mesurés à l'étape a) avec le niveau d'expression desdits gènes dans des échantillons de peau non prédisposée, et c) Prédire que ledit individu présente un risque d'apparition d'un lentigo quand le rapport entre le niveau d'expression des gènes dans les échantillons provenant d'une peau prédisposée et le niveau d'expression dans les échantillons provenant d'une peau non prédisposée est supérieur à 1,2.

Selon cette mise en oeuvre, le niveau d'expression des gènes de l'invention est comparé dans un échantillon de peau prédisposé, à son niveau d'expression dans la peau non prédisposé.

Au sens de l'invention par « peau prédisposée », on entend la peau ayant une forte exposition à la lumière et au soleil telle que la peau des mains, du visage, du dessus des bras et particulièrement la peau des mains et du visage. Au sens de l'invention « par peau non prédisposée », on entend la peau dans une zone corporelle notoirement dépourvue de taches ou bien des zones peu enclines à la formation de taches pigmentaires et/ou ayant une faible exposition à la lumière et au soleil telle que la peau du dessous des bras, la peau des fesses, la peau du creux poplité. Une modulation significative du niveau d'expression par rapport à la peau n'ayant pas été exposée au soleil permet de conclure que la peau du sujet testé est encline à la formation de de lentigo actinique. Echantillons : Les échantillons sont par exemple prélevés via des méthodes de biopsie ou de stripping. Ces strippings sont des surfaces collantes appliquées à la surface de l'épiderme comme le Blenderm® de 3M, le D'squam (adhésif commercial de CuDERM), la colle cyanoacrylate ou la méthode du « stripping » vernis. Grâce à ces « strippings », les cornéocytes adhérents et le contenu de leurs espaces intercellulaires peuvent être prélevés et soumis par la suite à une extraction permettant d'avoir accès au contenu cellulaire. Le prélèvement d'un échantillon convenant à un procédé de l'invention peut aussi être effectué de façon plus directe par « lavage » de la surface cutanée, au moyen par exemple d'accessoires de type turbine à ailette, associée à un circuit fluidique, ou simplement par ajout/prélèvement d'une goutte de tampon à la surface de la peau. A titre indicatif, d'autres méthodes de prélèvement adaptées à la mise en oeuvre de l'invention peuvent être mentionnées, telles que des méthodes par grattage de la partie supérieure du stratum corneum au moyen d'un système bilames. Cette technique permet de recueillir des squames qui peuvent ensuite être directement analysés.

La méthode selon l'invention est de préférence pratiquée in vitro ou bien ex vivo.

Mesure de l'expression des gènes ou de l'expression et/ou de l'activité du produit desdits gènes : Par niveau d'expression d'un gène, on entend préférentiellement, dans la présente description, le niveau de transcription dudit gène. Cependant, son niveau d'expression peut également se traduire par son niveau de traduction, à supposer toutefois qu'il s'agisse d'un gène codant pour une protéine. Tel est le cas pour les gènes de l'invention. Concernant l'évaluation du niveau de transcription du gène choisi, elle peut être réalisée par différentes manières bien connues de l'homme du métier, directement ou bien après transcription inverse. Le niveau de transcription peut notamment être évalué par l'utilisation de puces à ARN ou puces à ADN vendues dans le commerce à cet effet. Une méthode d'évaluation possible est décrite dans la partie expérimentale. Concernant l'évaluation du niveau de transcription du gène choisi, elle peut être réalisée par différentes manières bien connues de l'homme du métier, directement ou bien après transcription inverse. Le niveau de transcription peut notamment être évalué par l'utilisation 20 de puces à ARN ou puces à ADN vendues dans le commerce à cet effet. A titre d'exemple de méthodes convenant à l'invention, il peut être fait mention de la réaction de polymérisation en chaîne (PCR), quantitative (Q-PCR) ou non, en présence ou non de transcriptase inverse (RT-PCR ou Q-RT-PCR), du Northern-blot, des méthodes d'hybridation in situ. 25 A titre d'exemple d'agents convenant à la détection d'une séquence d'acides nucléiques de l'invention, et en particulier d'une séquence d'ARNm, il peut être fait mention de sondes d'acides nucléiques marquées pouvant s'hybrider à une séquence d'acides nucléiques de l'invention. Une telle sonde d'acide nucléique peut être aisément obtenue par toute méthode 30 connue de l'homme de l'art. La mesure qualitative ou quantitative du produit de l'expression du gène, de la maturation ou de l'activité d'une séquence d'acides nucléiques, de la protéine, de l'invention peut être déterminée par toute méthode connue de l'homme de l'art.

L'expression d'une séquence d'acide nucléique peut également être déterminée, de manière indirecte, par la détermination de l'expression de la séquence d'acides aminées codée par ladite séquence, au moyen de toute technique connue dans le domaine, telle que le Western-Blot, l'ELISA, la méthode de BRADFORD ou de LOWRY, ou comme indiqué ci- après. La mesure qualitative ou quantitative, de l'expression, de la maturation, ou de l'activité d'une séquence d'acides aminés de l'invention peut être effectuée au moyen de toute méthode connue de l'homme de l'art. A titre de méthodes de détection de l'expression du produit des gènes, plus particulièrement de l'expression des protéines traduites à partir du transcrit des gènes, de la maturation, ou de l'activité d'une séquence d'acides aminés, il peut être fait mention du Western-blot, du Slot-blot, du Dot-blot, des méthodes ELISA (Enzyme Linked ImmunoSorbent Assay), de l'immunofluorescence, de méthodes immunohistochimiques en microscopie classique, électronique ou confocale, de FRET (fluorescence resonance energy transfer/transfert d'énergie par résonance de fluorescence), des méthodes de TR-FRET (time resolved FRET/FRET en résolution de temps), des méthodes de FLIM (fluorescence lifetime imaging microscopy/imagerie par microscopie en temps de fluorescence), des méthodes de FSPIM (fluorescence spectral imaging microscopy/imagerie par microscopie en spectre de fluorescence), des méthodes de FRAP (fluorescence recovery after photobleaching/recouvrement de fluorescence après photoblanchiment), des méthodes par gène rapporteur, des méthodes d'AFM (atomic force microscopy/microscopie par force atomique), des méthodes de résonance plasmonique de surface, des méthodes de microcalorimétrie, des méthodes de cytométrie en flux, des méthodes de biosenseurs, des méthodes de radioimmuno-essais (RIA), des méthodes de focalisation isoélectrique, et des tests enzymatiques, des méthodes mettant en oeuvre des puces à peptides, des puces à sucre, des puces d'anticorps, des méthodes de spectrométrie de masse, des méthodes de spectrométrie de type SELDI-TOF (Ciphergen). De façon plus générale, des méthodes de dosage immunoenzymatiques à partir de solutions de protéines, plus quantitatives et sensibles peuvent en particulier être utilisées.

Ces méthodes de type ELISA associent des couples d'anticorps de capture et de détection spécifique de l'antigène ciblé. Des anticorps commerciaux ou des anticorps polyclonaux, monoclonaux ou recombinants développés spécifiquement peuvent être utilisés. Des techniques ELISA multiplexes de grande capacité peuvent également être mises en oeuvre. On peut ainsi citer l'approche multiplexe de type anticorps sur billes Luminex (par exemple Bioplex de Bio-Rad), de type anticorps sur surface plane (« antibodies-arrays ») (par exemple approche proposée par la société MesoScale Discovery). On peut aussi citer la technologie sur cartouche microfluidique mise au point par la société Coréenne NanoEntek. Dans une approche récente une technique nouvelle basée sur des anticorps appelés « Quenchbodies » proposés par la société japonaise Ushio permet de n'utiliser qu'un anticorps. En particulier, il peut être avantageux de détecter l'expression d'une séquence d'acides aminés de l'invention au moyen d'un anticorps, le cas échéant sous une forme marquée. Un tel anticorps peut être marqué au moyen d'une substance détectable directement ou détectable par réaction avec un autre réactif. Par « anticorps », on entend désigner de manière générale des anticorps monoclonaux ou polyclonaux, ainsi que des fragments d'immunoglobuline susceptibles de lier un antigène et qui peuvent être produits par toute technique de génie génétique connue de l'homme de l'art ou par coupure enzymatique ou chimique d'anticorps intact.

Un anticorps susceptible d'être utilisé à titre d'outil d'évaluation d'un état d'un épiderme peut être obtenu par tout procédé connu de l'homme de l'art, tel que décrit dans « Antibodies: A Laboratory Manual », Cold Spring Harbor Laboratory Press, Cold Spring Harbor, N.Y. (1990). Selon un mode de réalisation préféré, il peut être avantageux de détecter l'expression d'une séquence d'acides aminés de l'invention au moyen d'une méthode protéomique différentiel « iTRAQ ». Une telle méthode est connue de l'homme de l'art et peut avantageusement être mise en oeuvre comme décrit dans les exemples ci-après.

Il est important de noter également que quand la méthode selon l'invention implique la comparaison des niveaux d'expression d'au moins l'un des gènes de l'invention, il peut être suffisant d'évaluer quantitativement ou qualitativement la différence entre les deux niveaux d'expression, sans pour autant évaluer et quantifier individuellement chacun des niveaux d'expression.

Les niveaux d'expression d'au moins l'un des gènes de l'invention peuvent être évalués par référence ou après normalisation avec le niveau d'expression d'autres gènes, dont le niveau d'expression est supposé sensiblement identique au sein de la tache et dans la zone de peau non lésée choisie. De tels gènes pour la normalisation sont bien connus de l'homme du métier et peuvent dépendre de la zone du corps où se trouve la tache. A titre d'exemple, les gènes suivants peuvent être cités comme susceptibles de servir à la normalisation des niveaux d'expression des gènes de l'invention, codant pour : La protéine ribosomale L13a (RPL13A), la beta-2-microglobuline (B2M), la protéine ribosomale S9 (RPS9), la protéine ribosomale S28 (RPS28) et la Glyceraldehyde-3- 5 phosphate dehydrogénase (GAPDH). 10 Exemples : Partie expérimentale : Matériel et méthodes 15 2 études indépendantes ont été réalisées : une étude sur des volontaires de type caucasien (étude France) et une étude sur des volontaires de type asiatique (étude Japon). Etude France : 15 volontaires, de sexe féminin, phototypes II à IV, âgées de 51 à 67 ans ont 20 été sélectionnées. Etude Japon : 12 volontaires, de sexe féminin, phototypes III à IV, âgées de 57 à 70 ans ont été sélectionnées. Les lentigos actiniques sont choisis sur le dos de la main, de taille minimum 3mm. Ils sont caractérisés par Epiluminescence. Cet examen permet : 25 1°) de vérifier le diagnostic clinique de la lésion (lentigo actinique exclusivement) selon les critères de pattern de la jonction dermo-épidermique (structure pigmentée en réseau, « fingerprint-like structure ») à différencier des éphélides (absence de structure pigmentée en réseau, pigmentation homogène et zones de « moth-eaten edges ») et des kératoses séborrhéiques planes (multiple milia-like cysts or pseudocysts, zones de « moth-eaten 30 edges », pseudofollicular openings et fingerprint-like pattern) [Menzies et al ; Stolz et al ; Marghoob et al] 2°) de délimiter des zones homogènes en terme de structure/pattern à l'intérieur de ces lésions où seront faites les biopsies cutanées, 3°) d'établir un score phénotypique basé sur une analyse d'image quantitative avec le logiciel spécifique qui a été développé sur Matlab® (logiciel SQA, CMLA, ENS Cachan, UM R CNRS 8536). Deux biopsies de 3mm de diamètres sont réalisées sur une des mains de chaque patient. Pour chaque volontaire, une des biopsies correspond à la lésion de lentigo actinique (LA) et l'autre à une zone adjacente de peau non lésionnelle (PN) (vérifiée également en épiluminescence). Les biopsies de 3mm sont placées, dès le prélèvement, dans une solution de stabilisation des ARN (RNAlater, Qiagen référence 76154) de 16 à 24h à 4°C. Le lendemain les échantillons sont placés à -20°C jusqu'aux étapes d'homogénéisation et d'extraction. Extraction des ARN A la décongélation, les échantillons sont découpés au scalpel pour faciliter l'homogénéisation, puis transférés dans le tampon de lyse (Qiagen lysis buffer, RLT + 10% 15 beta-Mercapthoethanol). Etude France : L'homogénéisation est réalisée dans un potter (Fisher Labosi ref A6391000) avec des pistons en polypropylène RNase free (Fisher Labosi ref A1419753). Etude Japon : L'homogénéisation est réalisée avec le TissueRuptor de Qiagen (ref 990890). 20 L'ARN a été extrait avec les kits RNeasy micro (Qiagen ref : 74004) en suivant les instructions du fournisseur. Etude France : La quantification des ARNs est réalisée par un dosage ribogreen (Molecular Probes réf R11490). Etude Japon : La quantification des ARNs est réalisée par spectrophotométrie (Nanodrop 25 8000). La qualité des ARN est validée avec un bio analyseur Agilent 2100 qui donne le ratio des intensités des ARNs ribosomaux 28S sur 18S ainsi qu'un RNA Integrity Number (RIN) qui tient compte de la dégradation des ARNs. Un ARN de bonne qualité a un ratio >1,5 et un RIN > 7. 30 Préparation des sondes et hybridation Une réaction de reverse transcriptase (RT) est réalisée pour obtenir les ADNc correspondants. Pour l'étude France une étape d'amplification des ADNc est réalisée.

Les ADNc sont ensuite marqués par des fluorochromes (Affymetrix labelling kit) et hybridés sur puces à ADN Affymétrix® permettant de révéler le niveau d'expression de l'ensemble des gènes du génome humain. (bio-puces à ADN de type Affymetrix U133A 2.0 contenant 54 000 sondes, permettant ainsi l'étude de l'expression de 47000 transcripts, incluant 38500 gènes caractérisés). Le logiciel Affymetrix RMA a été utilisé pour générer les fichiers bruts et pour effectuer les contrôles qualité des deux études avant une analyse des données. Après révélation des hybridations spécifiques et traitement des données brutes (extraction, soustraction du bruit de fond, normalisation), l'expression des gènes est comparée entre la peau saine et la peau lésée. Etude France : 2 puces Affymetrix HG U133 Plus 2 ont été hybridées par échantillons. Les patients ne sont retenus pour la suite de l'analyse que si les 2 puces Affymetrix ont une qualité d'hybridation correcte. 13 patients sur les 15 initiaux ont pu être analysés. L'analyse statistique a été réalisée sur la moyenne des duplicats.

Génération des listes de gènes différentiellement exprimés entre peau lésée et peau saine 1) Filtre sur le niveau d'expression : seuls les ProbeSets avec un niveau d'expression 26 (64) dans au moins une condition (PN ou LA) sont retenus. Après ce filtre 24393 ProbeSets sont retenus pour l'étude France et 26943 ProbeSets sont retenus pour l'étude Japon. 2) Analyse supervisée : Test t Un T-test linéaire a été appliqué aux données avec l'aide du logiciel ArrayStudio afin de comparer le profil d'expression génique du groupe des biopsies de lentigo actinique avec celui du groupe des biopsies de peau normale. Une liste de 1973 ProbeSets modulés de façon significative (p< 0.05) dans le lentigo actinique par rapport à la peau normale a ainsi été établie pour l'étude France et une liste de 3084 ProbeSets modulés de façon significative dans le lentigo actinique par rapport à la peau normale pour l'étude Japon. Filtre sur la modulation Pour les gènes surexprimés dans le lentigo actinique par rapport à la peau normale, sélection des ProbeSets ayant une moyenne géométrique des folds corrigés (FC = rapport LA/PN) sur l'ensemble des patients > 1.5 : liste de 82 ProbeSets surexprimés pour l'étude France et de 131 ProbeSets surexprimés pour l'étude Japon. Pour les gènes sous-exprimés dans le lentigo actinique par rapport à la peau normale, sélection des ProbeSets ayant une moyenne géométrique des folds corrigés FC sur l'ensemble des patients < 0.67 : liste de 138 ProbeSets sous-exprimés pour l'étude France et de 175 ProbeSets sous-exprimés pour l'étude Japon. 3) Analyse non supervisée : Suppression de l'effet patient : Afin de supprimer l'effet patient observé dans les résultats des analyses différentielles, l'algorithme suivant a été réalisé : pour chaque patient et chaque probeset, 1) soustraction de l'expression moyenne en log2 des deux conditions (lésionnelle, non lésionnelle), 2) addition de l'expression moyenne en log2 de l'ensemble des patients et des conditons Analyse différentielle : Une analyse NMF (Non Negative Matrix Factorisation) a permis d'identifier 3296 ProbeSets dans l'étude France et 3288 ProbeSets dans l'étude Japon qui permettent de différencier le groupe des biopsies de lentigo actinique du groupe des biopsies de peau normale (p<0,05).

Filtre sur la modulation : Pour les gènes surexprimés dans le lentigo actinique par rapport à la peau normale, sélection des ProbeSets ayant une moyenne géométrique des folds corrigés (FC) sur l'ensemble des patients > 1.5 : liste de 117 ProbeSets surexprimés pour l'étude France et de 153 ProbeSets surexprimés pour l'étude Japon. Pour les gènes sous-exprimés dans le lentigo actinique par rapport à la peau normale, sélection des ProbeSets ayant une moyenne géométrique des folds corrigés FC sur l'ensemble des patients < 0.67 : liste de 148 ProbeSets sous-exprimés pour l'étude France et de 170 ProbeSets sous-exprimés pour l'étude Japon. 3) Unification des listes Les deux listes obtenues grâce à l'analyse supervisée (test t) et l'analyse non supervisée (NMF) ont été unies afin de générer la liste finale des gènes exprimés différentiellement dans le lentigo actinique par rapport à la peau normale.

Ainsi 266 probeSets (201 gènes) sont exprimés différentiellement dans le lentigo actinique par rapport à la peau normale dans l'étude France (117 surexprimés, 149 sous-exprimés). 332 probeSets (245 gènes) sont exprimés différentiellement dans le lentigo actinique par rapport à la peau normale dans l'étude Japon (153 surexprimés, 179 sous-exprimés).

Comparaison des deux études Les listes de gènes exprimés différentiellement dans le lentigo actinique par rapport à la peau normale dans les deux études ont été comparées. 138 gènes sont communs aux deux études, c'est-à-dire que 138 gènes sont modulés dans le même sens dans le lentigo actinique par rapport à la peau saine à la fois dans l'étude France et dans l'étude Japon. Parmi ces 138 gènes, 60 gènes sont surexprimés dans le lentigo actinique par rapport à la peau saine dans les deux études (FC > 1,5, p<0,05) et 78 gènes sont sous-exprimés dans le lentigo actinique dans les deux études (FC < 0.67, p<0,05). Parmi les gènes non communs, 22 gènes sont significativement modulés dans le lentigo actinique japonais uniquement, c'est à dire que 22 gènes ont un FC > 1,5 ou <0,67 et une p-value < 0,05 dans le lentigo actinique par rapport à la peau non lésée dans la population japonaise et un FC < 1,5 ou >0,67 ou une pvalue > 0,05 dans le lentigo actinique par rapport à la peau non lésée dans la population caucasienne. De même 15 gènes sont significativement modulés dans le lentigo actinique caucasien uniquement, c'est à dire que 15 gènes ont un FC > 1,5 ou <0,67 et une p-value < 0,05 dans le lentigo actinique par rapport à la peau non lésée dans la population caucasienne et un FC < 1,5 ou >0,67 ou une pvalue > 0,05 dans le lentigo actinique par rapport à la peau non lésée dans la population japonaise.

Exemple 1 Parmi les 22 gènes significativement modulés dans le lentigo actinique japonais, 4 gènes du complexe de différenciation épidermique (chromosome 1q21) sont surexprimés dans le lentigo actinique par rapport à la peau non lésée adjacente dans la population japonaise et ne sont pas modulés de façon significative dans le lentigo dans la population caucasienne (tableau 1).

Modulation dans p-value le LA Japon France Japon France LCE3D NM_032563.1 Late cornified envelope 3D 1,55 1,1 0,0041 0,7834 SPRR2B NM_001017418.1 small proline-rich protein 2B 2,37 1,319 0,0006 0,5331 SPRR2G NM_001014291.3 small proline-rich protein 2G 1,58 0.80 0,01R-1 0,4127 SPRR3 NM_005416.2 small proline-rich protein 3 1,73 1,187 0,001 0,4816 Tableau 1 : Liste des 4 gènes surexprimés dans le lentigo actinique par rapport à la peau non lésée adjacente dans la population japonaise et n'étant pas modulés de façon significative dans la population caucasienne.

La première colonne indique le symbole du gène, la seconde colonne indique le numéro d'accession du gène, la 3ème colonne détaille le nom du gène. Les colonnes 4 et 5 indiquent le taux de modulation moyen (moyenne géométrique des taux de modulation individuels sur l'ensemble des patients de l'étude) dans le LA par rapport à la peau normale adjacente dans l'étude Japon et l'étude France, respectivement. Les colonnes 6 et 7 indiquent la p-value ajustée associée aux modulations dans l'étude Japon et l'étude France, respectivement. Seuls les gènes avec une p-value < 0,05 sont considérés comme significativement modulés dans le LA par rapport à la peau normale. Exemple 2 Il existe des composés connus pour moduler dans le sens recherché les gènes dérégulés dans le lentigo. Ces composés sont listés dans le tableau ci-dessous : Gène Modulateur et effet sur l'expression des gènes Références SPRR3 Isotretinoin results in decreased expression of SPRR3 mRNA Tavares TS, et al. Gene microarray analysis of human renal cell carcinoma: the effects of HDAC inhibition and retinoid treatment. Cancer Biol Ther.

2008 Oct;7(10):1607- 18. pirinixic acid results in decreased expression of SPRR3 mRNA Vallanat B, et al. Analysis of the heat shock response in mouse liver reveals transcriptional dependence on the nuclear receptor peroxisome proliferator-activated receptor alpha (PPARalpha). BMC Genomics. 2010;11:16. rétinol 50 p.M données internes SPRR2G phytosphingosine 0.0005% données internes

Claims (7)

1. REVENDICATIONS: 1. Procédé de sélection d'un composé utile dans la prévention et/ou le traitement'du lentigo actinique présent sur une peau asiatique, comprenant les étapes consistant à : a) Mesurer dans un échantillon de peau et/ou un modèle cellulaire représentative de la peau le niveau d'expression ou de l'activité du produit d'expression d'au moins un gène parmi la liste constituée des gènes LCE3D, SPRR2B, SPRR2G et SPRR3 b) Mettre ledit composé à sélectionner en contact avec ledit échantillon de peau et/ou ledit modèle cellulaire représentatif de la peau c) Mesurer le niveau d'expression ou de l'activité du produit d'expression d'au moins un gène choisi parmi la liste constituée des gènes LCE3D, SPRR2B, SPRR2G et SPRR3, d) Comparer les mesures des étapes a) et c) e) Sélectionner en tant que composé utile dans la prévention et/ou le traitement du lentigo, un composé capable de diminuer le niveau d'expression ou l'activité d'au moins un gène choisi parmi LCE3D, SPRR2B, SPRR2G et SPRR3.
2. 2. Procédé selon la revendication 1, où ladite peau asiatique est une peau japonaise. 25 30 ,
3. 3. Méthode d'évaluation de l'efficacité d'un traitement du lentigo actinique chez un individu présentant une peau asiatique comprenant les étapes consistant à : a) Mesurer les niveaux d'expression ou d'activité du produit d'expression dans un échantillon de peau issue dudit lentigo actinique d'au moins un gène parmi la liste constituée des gènes LCE3D, SPRR2B, SPRR2G et SPRR3 b) Appliquer le traitement sur l'échantillon de peau présentant ledit lentigo actinique c) Mesurer les niveaux d'expression ou d'activité du produit d'expression dans ledit échantillon de peau traité à l'étape b) d'au moins un gène parmi la liste constituée des gènes LCE3D, SPRR2B, SPRR2G et SPRR3 d) Comparer les niveaux d'expression ou d'activité d'expression dans ledit échantillon de peau présentant un lentigo d'au moins un gène parmi la liste constituée des gènes LCE3D, SPRR2B, SPRR2G et SPRR3 mesurés aux étapes a) avant traitement et c) après traitement, et e) En déduire que le traitement est efficace pour le traitement du lentigo actinique quand le niveau d'expression est significativement inférieur après traitement par rapport au niveau d'expression avant traitement, si le gène est choisi parmi LCE3D, SPRR2B, SPRR2G et SPRR3.
4. 4. Méthode selon la revendication 3 où ladite peau est une peau japonaise.
5. 5. Méthode in vitro d'évaluation de l'efficacité d'un traitement du lentigo actinique dans un modèle cellulaire représentatif de la peau asiatique comprenant les étapes consistant à : a) Mesurer les niveaux d'expression ou d'activité du produit d'expression dans un modèle cellulaire représentatif de la peau d'au moins un gène parmi la liste constituée des gènes LCE3D, SPRR2B, SPRR2G et SPRR3 b) Appliquer le traitement sur ledit modèle cellulaire représentatif de la peau.c) Mesurer les niveaux d'expression ou d'activité d'expression dans ledit modèle cellulaire représentatif de la peau traité à l'étape b) d'au moins un gène parmi la liste constituée des gènes LCE3D, SPRR2B, SPRR2G et SPRR3 d) Comparer les niveaux d'expression ou d'activité du produit d'expression dans ledit modèle cellulaire représentatif de la peau d'au moins un gène choisi parmi la liste constituée des gènes LCE3D, SPRR2B, SPRR2G et SPRR3 mesurés aux étapes a) avant traitement et c) après traitement, et e) En déduire que le traitement est efficace quand le niveau d'expression ou d'activité est significativement inférieur après traitement par rapport au niveau d'expression avant traitement, si le gène est choisi parmi LCE3D, SPRR2B, SPRR2G et SPRR3.
6. 6. Méthode selon la revendication 5 où ladite peau est une peau japonaise.
7. 7. Méthode in vitro ou ex vivo de caractérisation d'une tache pigmentaire cutanée chez un individu présentant une peau asiatique, ladite méthode comprenant les étapes consistant à : a) mesurer le niveau d'expression ou d'activité du produit d'expression des gènes LCE3D, SPRR2B, SPRR2G et SPRR3 b) dans des échantillons provenant d'une peau issue de ladite tache c) mesurer le niveau d'expression ou d'activité du produit d'expression desdits gènes dans des échantillons de peau adjacente non lésée, d) comparer les niveaux d'expression ou d'activité du produit d'expression desdits gènes mesurés aux étapes a) et b) e) en déduire que ledit individu présente un lentigo quand le rapport entre le niveau d'expression ou d'activité du produit d'expression desdits gènes dans l'échantillon de peau issue de la tache mesuré à l'étape a), et le niveau d'expression ou d'activité du produit d'expression desdits gènes dans l'échantillon de peau adjacente non lésée mesuré à l'étape b) est supérieur à 1,5 si le gène est choisi parmi LCE3D, SPRR2B, SPRR2G et SPRR3. -8. Méthode selon la revendication 7 où ladite peau est une peau japonaise.9. Méthode selon la revendication 7 ou 8,, où ladite tache pigmentaire cutanée est un lentigo actinique. 10. Méthode de prédiction d'un risque d'apparition d'un lentigo actinique chez un individu 5 présentant une peau asiatique, ladite méthode comprenant les étapes consistanra : a) mesurer le niveau d'expression ou d'activité du produit d'expression des gènes LCE3D, SPRR2B, SPRR2G et SPRR3 dans des échantillons provenant d'une peau prédisposée comparer le niveau de d'expression des gènes mesurés à l'étape a) avec le 10 niveau d'expression desdits gènes dans des échantillons de peau non prédisposée, et c) Prédire que ledit individu présente un risque d'apparition d'un lentigo quand le rapport entre le niveau d'expression des gènes dans les échantillons provenant d'une peau prédisposée et le niveau d'expression dans les échantillons provenant d'une peau 15 non prédisposée est supérieur à 1,2 si le gène est choisi parmi LCE3D, SPRR2B, SPRR2G et SPRR3. 11. Méthode selon la revendication 10 où ladite peau est une peau japonaise. 20