EP3007718A2 - Utilisation de la dermicidine pour le traitement de la peau a tendance acneique, grasse ou pour la prevention d'apparition d'imperfections - Google Patents

Utilisation de la dermicidine pour le traitement de la peau a tendance acneique, grasse ou pour la prevention d'apparition d'imperfections

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EP3007718A2
EP3007718A2 EP14752353.4A EP14752353A EP3007718A2 EP 3007718 A2 EP3007718 A2 EP 3007718A2 EP 14752353 A EP14752353 A EP 14752353A EP 3007718 A2 EP3007718 A2 EP 3007718A2
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EP
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seq
acid sequence
skin
amino acid
acne
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Withdrawn
Application number
EP14752353.4A
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Audrey Gueniche
Dominique Bernard
Mark Donovan
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LOreal SA
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LOreal SA
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    • G01N2800/20—Dermatological disorders

Definitions

  • the present invention relates to the use of an amino acid sequence of Dermicidin, an analogue or a fragment thereof to prevent the appearance of imperfections or for the treatment and / or prevention and / or diagnosis of acne-prone or acne-prone skin, oily skin and / or aesthetic skin disorders associated therewith.
  • It also relates to a cosmetic treatment method for the prevention and treatment of oily skin and / or the associated cutaneous aesthetic disorders.
  • the present invention also relates to the use of a biomarker for the diagnosis of acne skin, oily skin or acne-prone skin or oily skin.
  • Acne vulgaris is a multifactorial disease (face, scapular region, arms and intertriginous regions). It is the main cause of the most frequent dermatoses. It is important not to trivialize this disease and to treat it properly, because it can have disabling psychosocial consequences, in particular because of the formation of scars.
  • Acne is a disease of the follicle of the sebaceous gland.
  • the following pathogenic factors play a determining role in the constitution of acne:
  • Retention lesions may be open or closed comedo (microcyst, micro comedo, white head). Inflammatory lesions derived from retention lesions may be papules, pustules, with indurated nodules, abscesses, fistulas, scarring.
  • the clinical severity of acne was determined using the ECLA semi-quantitative rating grid.
  • This grid consists of three factors: The hyperséborré or overproduction of sebum is very common and results in a skin with a bold, shiny appearance and enlarged pores. But it is also very sensitive to environmental factors such as temperature, humidity or diet. Furthermore, it has been demonstrated that Propionibacterium acnes is directly involved in the stimulation of the IGF-1 / IGF-IRcutaneous axis, which is a receptor found on the surface of the skin, and therefore induces a hyper seborrhea and an abnormal proliferation and differentiation of keratinocytes (Isard et al., 2011).
  • Oily skin most commonly leads to shiny shiny skin and / or skin imperfections such as enlarged pores, thick skin texture and / or lack of blemish.
  • Benzole peroxide is likely to cause skin irritation, bleaching of the hair as well as photo-allergic reactions, so it has a significant toxicity (Research in humans of toxic photo power of 5% henzoyl peroxide M Jeanmougin, J Pedreiro, J Bouchet, J Civate - Dermatology, 1983. Drug-induced photoallergic and phototoxic reactions July 2007, Vol 6, No. 4, Pages 431-443 Kevin Stein & Stephen S Scheinfeld Clindamycin, erythromycin and sodium sulphonamide in the form of salts are sensitizing substances that can cause allergies and cause resistance (D Sasseville - Progress in Dermato-Allergology Volume XVI: France 2010
  • the inventors have discovered that one of the peptides derived from the cleavage of dermicidine, the antimicrobial peptide DCD-1L known to be present at the level of sweat, was active on the growth of P. acnes and could therefore be used in a cosmetic composition, in particular as an active agent for preventing and / or treating oily skin as well as the associated cutaneous aesthetic disorders.
  • the subject of the invention is therefore the use of a cosmetic composition containing at least one amino acid sequence of Dermicidine, an analogue or a fragment of the latter to prevent and / or treat acne skin and / or oily skin and the associated cutaneous aesthetic disorders.
  • the invention also relates to a cosmetic treatment method, in which a cosmetic composition comprising an amino acid sequence of Dermicidine, an analogue or a fragment thereof as defined below is applied to the skin.
  • Another aspect of the invention is the use of Dermicidin or an amino acid sequence derived therefrom, an analog or fragment thereof, or a nucleic acid sequence encoding a DNA sequence. amino acid according to the invention, especially as a biomarker for the diagnosis of oily skin.
  • the term "skin" means the whole epidemic of the human body. More particularly, the skin considered in the present invention is preferably the skin of the face, Vietnameselleté, back, and preferably the skin of the face.
  • the term "acne-prone skin” means a skin presenting an acne with an ECLA score of less than 10, preferably between 1 and 9.
  • acne skin within the meaning of the invention, means skin with acne with an ECLA score between 10 and 36.
  • greasy skin is intended to mean a skin having a hyperseborrhoea characterized by an excessive secretion and excretion of sebum.
  • a sebum level greater than 150/200 ⁇ g / cm 2 is considered to be characteristic of such oily skin.
  • imperfections within the meaning of the invention is meant skin marks or temporary or permanent scars due to acne lesions that are perceived by the subject as unsightly.
  • the term “prevent” means reducing the risk of occurrence or slowing down the occurrence of a given phenomenon, namely in the present invention, cutaneous marks and scars induced by pimples.
  • open or closed comedon-like retention lesions (microcysts, micro comedones, white heads), inflammatory lesions derived from retention lesions such as papules, pustules, with indurated nodules, abscesses, fistulas, scarred states glossy shiny skin and / or cutaneous imperfections such as dilated pores, thick skin texture and / or flaking defect.
  • the invention also relates to a cosmetic treatment method for the treatment of acne-prone skin and / or oily skin and the prevention of imperfections, in which a cosmetic composition comprising an acid sequence is applied to the skin.
  • a cosmetic composition comprising an acid sequence is applied to the skin.
  • the invention relates to a pharmaceutical treatment method, especially a dermatological method, in which a pharmaceutical composition comprising Dermicidin, an analogue or a fragment thereof or at least one amino acid sequence according to the invention is applied to the skin, at least one nucleic acid sequence coding for an amino acid sequence according to the invention, or at least one agent that modulates the expression or the activity, in particular the biological activity, of said amino acid sequence.
  • Another aspect of the invention is the use of Dermicidin or an amino acid sequence derived therefrom, an analog or fragment thereof, or a nucleic acid sequence encoding a DNA sequence.
  • amino acid according to the invention in particular as a biomarker for the diagnosis of acne-prone or acne-prone skin or oily skin.
  • DCD / PIF Dermicidin / Protease Inducing Factor
  • the protein precursor After proteolytic post-translational processing (mainly by cathepsin D) in sweat (Baechle, Flad et al., 2006), the protein precursor gives rise to many peptides ranging in length from 25 to 48 aa (Flad et al. Bogumil et al., 2002). Some of these peptides, such as LL37, show antimicrobial activities against S. aureus, E. coli, Enterococcus faecalis, Candida albicans and P. acnes microorganisms. The antimicrobial peptides are derived from the C-terminal portion of the protein.
  • the activity of these peptides is independent of their charge (Steffen, Rieg et al., 2006) and would go through a step of interaction with bacterial phospholipids (Li, Rigby et al., 2009).
  • the N-terminal part of the protein consists of a bio-logically active factor promoting cell survival (Cunningham, Hodge et al., 1998).
  • the decrease in DCD observed in atopic sweat may partly explain the microbial susceptibilities of this type of skin (Rieg, Steffen et al., 2005).
  • DCD has been shown to associate with bacterial phospholipids and self-organize by forming ion channels in the bacterial membrane (Paulmann, Arnold et al., 2012).
  • DCD Dermicidin associated with its signal peptide is a protein of 1 10 amino acids (SEQ ID NO: 11) comprising a signal peptide of 19 amino acids (SEQ ID NO: 14) whose gene is located on chromosome 12, locus 12ql3.1. Two isoforms of this protein are listed, one shorter, isoform 1 (SEQ ID NO: 12), the other longer, isoform 2 (SEQ ID NO: 13).
  • DCD Dermicidin
  • Cathepsin D which takes place in sweat (Baechle, Flad et al., 2006), this protein precursor gives rise to DCD-1 (SEQ ID NO: 19) and DCD-IL (SEQ ID NO: 20) as well as many peptides ranging in length from 25 to 48 aa (Flad, Bogumil et al., 2002).
  • Dermicidin is intended to mean in this application the amino acid sequences represented by SEQ ID NO: 11, SEQ ID NO: 12, SEQ ID NO: 13, SEQ ID NO: 16, SEQ ID NO: 19 and SEQ ID NO: 20, whether or not undergoing post-translational processing.
  • the term “Dermicidine” denotes the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 16.
  • the term “Dermicidine” is intended more particularly to denote the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 20.
  • the N-terminal part of the protein (SEQ ID NO: 15) consists of a bio-logically active factor promoting cell survival (Cunningham, Hodge et al., 1998).
  • analogue of an amino acid sequence is meant any amino acid sequence having a sequence identity of at least 85%, preferably at least 90%, and more. preferably at least 95%, and even more preferably at least 99% with said sequence, and a biological activity of the same kind.
  • biological activity of the same nature with respect to an amino acid sequence according to the invention is meant the antimicrobial or stimulation properties of the survival and / or cell proliferation usually attributed to Dermicidine.
  • sequence identity can be determined by visual comparison or by any computer tool generally used in the field, such as BLAST programs available at www.ncbi.nlm.nih.gov and used with the default settings.
  • An analogue according to the invention may be a peptidomimetic agent.
  • An analogue of an amino acid sequence of the invention may result from modifications resulting from mutation or variation in the sequences of the peptides according to the invention either from the deletion or from the insertion of one or more amino acids either the substitution of one or more amino acids or alternatively splicing. Many of these changes can be combined.
  • an analogue of an amino acid sequence of the invention may comprise conservative substitutions with respect to this amino acid sequence.
  • hydropathic index is an index attributed to amino acids as a function of their hydrophobicity and charge (Kyte et al (1982), J. Mol Biol, 157: 105).
  • amino acid sequence or an analogue thereof targeted by the present invention may be an amino acid sequence having undergone one or more post-translational processing (s).
  • post-translational processing is intended to encompass all the modifications that an amino acid sequence is likely to undergo at the end of its synthesis in a cell, such as, for example, a or phosphorylation (s), thiolation (s), acetylation (s), glycosylation (s), lipidation (s), such as farnesylation or palmitoylation, rearrangement Disulfide-type and / or cleavage-type structural bonding within the peptide sequence.
  • An analogue of an amino acid sequence has, moreover, substantially the same biological activity as this amino acid sequence.
  • a primary amino acid sequence may comprise sites specifically recognized by protease-type enzymes, such as trypsin, which once recognition of these sites effective will induce cleavage of the sequence by proteolysis.
  • protease-type enzymes such as trypsin
  • the invention also extends to fragments of Dermicidin, possibly resulting from its proteolysis.
  • fragment of an amino acid sequence any portion of the amino acid sequence according to the invention comprising from 3 to 48 consecutive amino acids of said sequence.
  • an amino acid sequence that is suitable for the invention may be an amino acid sequence represented by a sequence chosen from SEQ ID NO: 11 to 20, in particular from SEQ ID NO: 16, SEQ ID NO : 20, an analogue, or a fragment thereof.
  • an amino acid sequence that is suitable for the invention may be an amino acid sequence represented by a sequence chosen from SEQ ID NO: 14, SEQ ID NO: 15, SEQ ID NO: 16, SEQ ID NO: 17, SEQ ID NO: 18, SEQ ID NO: 19, SEQ ID NO: 20, an analogue, or a fragment thereof.
  • an amino acid sequence suitable for the invention may be an amino acid sequence represented by the sequence SEQ ID NO: 20, an analogue or a fragment thereof.
  • a polypeptide that is suitable for the invention may also be a natural or synthetic amino acid sequence, which may optionally be obtained after enzymatic or chemical hydrolysis of Dermicidine or by chemical or biological synthesis, or by extraction from a biological tissue, such as the skin, naturally expressing this amino acid sequence or after transfection thereof, as well as the various post-translational forms thereof, or any natural or synthetic amino acids whose sequence completely or partially comprises a aforementioned amino acid sequence, for example variants and analogs.
  • the present invention also relates to nucleic acid sequences SEQ ID NO: 1 to SEQ ID NO: 10 coding respectively for the amino acid sequences SEQ ID NO: 11 to SEQ ID NO: 20 of the invention. invention and their implementation in the various uses and methods according to the invention.
  • nucleic acid sequence fragment means a nucleic acid sequence encoding an amino acid sequence having a biological activity of the same nature as the amino acid sequence encoded by said sequence.
  • nucleic acid sequence analogue means a nucleic acid sequence having a sequence identity of at least 85%, preferably at least 90%, and more. preferably at least 95%, and even more preferably at least 99% with said sequence, and coding for an amino acid sequence having a biological activity of the same nature as the amino acid sequence encoded by said sequence.
  • analog of a nucleic acid sequence is meant a nucleic acid sequence, possibly resulting from the degeneracy of the nucleic acid code, and coding for an amino acid sequence according to the invention, in particular as defined above.
  • a nucleic acid sequence of the invention may be represented by at least one sequence selected from SEQ ID NO: 6 or SEQ ID NO: 10 and more preferably SEQ ID NO: 10 .
  • a nucleic acid sequence of the invention may be of any possible origin, namely either animal, in particular mammalian and even more particularly human, either plant, or micro-organisms, such as for example viruses, phages, or bacteria, among others, or fungi, without prejudging the fact that they are naturally present or not in said original organism.
  • the invention also relates to the isolated and purified nucleic acid sequences coding for an amino acid sequence considered according to the invention, as well as to their analogs and fragments.
  • a nucleic acid sequence according to the invention may comprise a sense, antisense or interferential sequence corresponding to a sequence coding for a polypeptide according to the invention.
  • the present invention also relates to cometic compositions comprising, in a cosmetically acceptable medium, an effective amount of at least one amino acid sequence of the invention.
  • a composition of the invention may contain adjuvants customary in the field under consideration, such as hydrophilic or lipophilic gelling agents, preservatives, antioxidants, solvents, perfumes, fillers, filters, odor absorbers and materials. dyes, oils, water waxes and polyols.
  • adjuvants customary in the field under consideration such as hydrophilic or lipophilic gelling agents, preservatives, antioxidants, solvents, perfumes, fillers, filters, odor absorbers and materials. dyes, oils, water waxes and polyols.
  • compositions according to the invention are those conventionally used in the fields under consideration.
  • the amount of amino acid sequence, or nucleic acid sequence of the invention, or active agent according to the invention contained in a composition of the invention also called “effective amount” is, of course depending on the nature of the asset and the effect sought and may therefore vary to a large extent.
  • a composition may contain an amino acid sequence, or a nucleic acid sequence, or an active agent according to the invention in an amount representing from 0.00001% to 2.5% of the total weight of the composition, in particular in an amount representing from 0.001% to 2% of the total weight of the composition, and more particularly in an amount representing from 0.1% to 1% of the total weight of the composition.
  • the term "effective amount" of a compound of the invention a sufficient and necessary amount of this compound to obtain a desired effect, and more particularly a cosmetic effect or care with regard to of the acne skin.
  • the said at least one amino acid sequence represents 0.01% of the composition.
  • the present invention also relates to pharmaceutical compositions, especially dermatological compositions comprising, in a physiologically acceptable medium, an effective amount of at least one amino acid sequence according to the invention, or at least one nucleic acid sequence conforming to the invention, or at least one active agent capable of modulating the activity, the expression or the maturation of said amino acid sequence or of said nucleic acid sequence.
  • the term “modulating agent” or “active agent capable of modulating the expression, the processing or the activity of an amino acid sequence or nucleic acid sequence conforming to the invention "any compound capable of acting, directly or indirectly, on at least one amino acid sequence or a nucleic acid sequence in accordance with the invention, or on an element of an intracellular signaling pathway or extracellular, or a metabolic pathway, or transcriptional and / or translational regulation involving said amino acid sequence or said nucleic acid sequence.
  • physiologically acceptable medium is intended to mean a medium which is suitable for the administration of a composition topically to the skin, the scalp or the lips, orally or via parenteral route such as the intradermal or subcutaneous route.
  • compositions according to the invention are those conventionally used in the fields under consideration.
  • the amount of amino acid sequence, or nucleic acid sequence of the invention, or active agent according to the invention contained in a composition of the invention also known as "effective amount" is, of course, a function of the nature of the asset and the effect sought and can therefore vary to a large extent.
  • a composition may contain an amino acid sequence, or a nucleic acid sequence, or an active agent according to the invention in an amount representing from 0.00001% to 5% of the total weight of the composition, in particular in an amount representing from 0.001% to 5% of the total weight of the composition, preferentially from 0.1 to 5 and more particularly in an amount representing from 0.5% to 5% of the total weight of the composition and even more preferably 2.5% to 5%.
  • composition at least one additional active therapeutic agent.
  • the present invention relates to the cosmetic use of an effective amount of at least one amino acid or nucleic acid sequence or as an active agent for preventing and / or treating acne skin and / or oily skin and / or the appearance of the associated cutaneous aesthetic disorders.
  • the present invention relates to a cosmetic, non-therapeutic method for preventing and / or treating acne-prone skin and / or oily skin and / or the appearance of associated cutaneous aesthetic disorders in an individual. in need.
  • the method comprising at least one step of administering to said individual, at least one composition comprising as active agent (i) at least one amino acid sequence of the invention, in particular as defined above.
  • a method or a use of the invention makes it possible to prevent and / or treat oily skin and / or the appearance of the cutaneous aesthetic disorders associated therewith.
  • a method or a use of the invention makes it possible to confer and / or to find a healthy skin.
  • a method of the invention may comprise the application topically to at least a portion of the skin of an individual in need thereof, in particular on the skin of the face, back and / or Vietnameselleté, scalp, at least one layer of a topical composition of the invention.
  • a cosmetic process according to the invention can be implemented daily, for example for a single application per day, or a divided administration in two or three times a day, for example once in the morning and once. the evening.
  • a cosmetic process according to the invention can be implemented over a period of time varying from one week to several weeks, or even several months, this period being able to be repeated after periods of non-treatment for several months, or even years. .
  • a cosmetic process according to the invention can be provided for applying a cosmetic composition of the invention, for example, at a rate of 1, 2 or 3 times per day, or more, and generally on a extended duration of at least 4 weeks, or even 4 to 15 weeks, with one or more periods of interruption where applicable.
  • the present invention relates to the field of biomarkers of the skin, and more particularly of oily, hyperseborrheic skin, and to their use as targets or as cosmetic active agents.
  • the present invention relates to the therapeutic use of an effective amount of at least one amino acid or nucleic acid sequence of the invention or at least one agent modulating the activity, expression or maturation of said amino acid sequence or said nucleic acid sequence, and in particular a modulating agent as defined above, as active agent to prevent the appearance of imperfections and / or prevent and / or treat acne skin.
  • the present invention relates to a therapeutic method, for preventing the appearance of imperfections and / or preventing and / or treating acne skin in an individual in need thereof, the method comprising at least one step of administering to said at least one composition comprising as active agent (i) at least one amino acid sequence of the invention or (ii) at least one nucleic acid sequence of the invention, or (iii) at least one less a modulating agent for the activity, expression or maturation of said sequences of the invention, in particular as defined above.
  • a method or a use of the invention allows to find a healthy skin, manifested by a smooth skin without imperfections.
  • a method or a use of the invention makes it possible to prevent and / or reduce the presence of a microrelief of the skin.
  • a method of the invention may comprise the application topically to at least a portion of the skin of an individual in need thereof, in particular on the skin of the face, back and / or Vietnameselleté, at least one layer of a topical composition of the invention.
  • a topically therapeutic method according to the invention may advantageously comprise the application of a composition of the invention, in combination simultaneously, sequentially or separately in time with an additional cosmetic or dermatological composition distinct from the composition of the invention. invention and intended for the care of the skin.
  • a pharmaceutical process according to the invention may be carried out daily, for example on the basis of a single application per day, or a divided administration in two or three times a day, for example once in the morning and in the morning. times in the evening.
  • a pharmaceutical process according to the invention can be implemented over a period of time ranging from one week to several weeks, or even several months, this period being able to be repeated after periods of non-treatment for several months, or even years. .
  • a pharmaceutical method according to the invention may provide for an application of a composition of the invention, for example, at a rate of 1, 2 or 3 times per day, or more, and generally over a period of time. extended by at least 4 weeks, or even 4 to 15 weeks, with one or more periods of interruption if necessary.
  • the present invention relates to the field of biomarkers of the skin, and more particularly to acne skin, and to their use as targets or cosmetic active agents.
  • this cutaneous surface antimicrobial protein has never been classified as varying from acne and / or fat skin and even less as one of the most relevant biomarkers emerging from this type of study.
  • the inventors have observed that the level of expression of Dermicidine, and more particularly peptides derived from Dermicidine and identified by the sequences SEQ ID NO: 1 1 to SEQ ID NO: 20 and in particular SEQ ID NO: 20 were systematically decreased in oily skin compared to healthy skin, especially with a ratio of 0.32 on average obtained with 3 independent experiments.
  • this cutaneous surface antimicrobial protein has never been classified as varying from oily skin and even less as one of the most relevant biomarkers emerging from this type of study.
  • the present invention relates to the use of at least one amino acid sequence of the invention, or at least one nucleic acid sequence of the invention, as a biomarker of a skin condition.
  • the present invention relates to the use of at least one amino acid sequence of the invention, or at least one nucleic acid sequence of the invention, as a biomarker of a skin condition.
  • a use according to the invention makes it possible to characterize a state of the skin such as acne and / or oily skin.
  • the present invention relates to an in vitro or ex vivo method for characterizing an acne and / or fat state of the skin of a subject comprising at least the steps of:
  • a) performing, in an isolated sample of a skin of a subject, a qualitative or quantitative measure of the expression, the maturation or the activity of the biomarker, and b) comparing said measurement made in step a) with a reference measurement.
  • c) Conclude that a decrease in the activity, expression or maturation of said biomarker with respect to said reference measurement is indicative of an acne and / or oily or acne-prone and / or oily skin in the subject.
  • biomarker means a molecule or the activity of a molecule, the presence, content or degree of activity of which is characteristic of a biological, physiological or pathological process, or the impact or effect of administering an active agent on such a process.
  • Dermicidine or an amino acid sequence derived from this protein, or an analogue or a fragment thereof or a nucleic acid sequence encoding an acid sequence amine according to the invention, especially as a biomarker for the evaluation of a state of the epidermis, which may be one of the causes of "abnormal" proliferation such as P. acnes.
  • a decrease in the activity, expression or maturation of said biomarker may be indicative of an acne and / or oily or acne-prone and / or oily skin.
  • an increase in the activity, expression or maturation of said biomarker may be indicative of an effective cosmetic treatment to exert a beneficial effect on the skin and more preferably an effect with respect to acne and / or oily or acne-prone and / or oily skin.
  • a decrease or an increase of the activity, the expression or the maturation of said biomarker can be determined by comparison with a reference measurement obtained according to any method known to man of the 'art.
  • a "reference measurement” for a given parameter is a qualitative or quantitative measure of this parameter carried out under so-called “control” or "normal” conditions, for example determined in a reference sample, or determined in a sample in the absence of a treatment alleged to have an effect on the parameter.
  • a reference measurement for an amino acid sequence or a nucleic acid sequence according to the invention may be a quantitative or qualitative value relating to the expression, the maturation or the activity of said sequences determined in a skin sample physio logically healthy, or determined in a skin sample, including acne skin, before a cosmetic or therapeutic treatment.
  • a reference measurement is a statistical measurement, that is to say having been repeated on different samples so as to obtain an average.
  • the reference measurement can be performed in parallel or sequentially with the test measurement.
  • Such information may subsequently be used to determine the healthy or acne-prone and / or acne-like nature of a skin.
  • the invention relates to a method, in particular in vitro or ex vivo, for characterizing a state of acneic and / or oily or acne-prone and / or oily skin.
  • the qualitative or quantitative measurement of the expression, the maturation or the activity of a nucleic acid sequence of the invention can be determined by any method known to those skilled in the art.
  • methods that are suitable for the invention, mention may be made of the polymerase chain reaction (PCR), quantitative (Q-PCR) or not, in the presence or absence of reverse transcriptase (RT-PCR or Q-RT-PCR), Northern-blot, ribonuclease protection assay, microarray methods, transcriptomic chip methods, oligonucleotide microarray methods, hybridization methods if you.
  • agents suitable for the detection of a nucleic acid sequence of the invention and in particular of an mRNA sequence, mention may be made of labeled nucleic acid probes which can be hybridizing to a nucleic acid sequence of the invention.
  • Such a nucleic acid probe can be easily obtained by any method known to those skilled in the art.
  • nucleic acid sequences according to the invention can be used to produce sense and / or antisense oligonucleotide primers, which hybridize under conditions of high stringency to at least one of the sequences SEQ ID NO: 1 , SEQ ID NO: 2, SEQ ID NO: 3, SEQ ID NO: 4, SEQ ID NO: 5, SEQ ID NO: 6, SEQ ID NO: 7, SEQ ID NO: 8, SEQ ID NO: 9, SEQ ID NO: 10, an analogue or fragment thereof.
  • nucleic acid sequence may also be determined, indirectly, by determining the expression of the amino acid sequence encoded by said sequence, by means of any technique known in the art, such as Western blot, ELISA, BRADFORD or LOWRY method, or as indicated below.
  • the qualitative or quantitative measurement, expression, maturation, or activity of an amino acid sequence of the invention may be performed by any method known to those skilled in the art.
  • ELISA Enzyme Linked Immuno-Sorbent Assay
  • proteomics or glycomic methods staining polypeptides in a silver dye-based polyacrylamide gel, Coomassie blue, or SYPRO
  • immunofluorescence, UV absorption of immunohistochemical methods in conventional electron or confocal microscopy
  • FRET fluorescence resonance energy transfer
  • TR-FRET methods time resolved FRET / FRET in time resolution
  • FSPIM methods fluorescence spectral imaging microscopy
  • FRAP fluorescence recovery after photobleaching / fluorescence recovery after photobleaching
  • reporter gene methods atomic force microscopy (AFM) methods, surface plasmon resonance methods, microcalorimetry methods, flow cytometry methods
  • immunoenzymatic assay methods from more quantitative and sensitive protein solutions can in particular be used.
  • These ELISA methods combine couples of capture antibodies and specific detection of the targeted antigen.
  • Specifically developed commercial or polyclonal, monoclonal or recombinant antibodies can be used.
  • High capacity multiplexed ELISA techniques can also be implemented. It is thus possible to mention the Luminex antibody-type multiplexed approach (for example Bioplex from Bio-Rad), of the antibody-on-flat surface type ("antibodies-arrays”) (for example, an approach proposed by MesoScale Discovery).
  • an antibody may be advantageous to detect the expression of an amino acid sequence of the invention by means of an antibody, where appropriate in a labeled form.
  • an antibody can be labeled with a directly detectable or detectable substance by reaction with another reagent.
  • antibodies is generally meant monoclonal or polyclonal antibodies, as well as immunoglobulin fragments capable of binding an antigen and which may be produced by any genetic engineering technique known to those skilled in the art. by enzymatic or chemical cleavage of intact antibody.
  • An antibody that can be used as a tool for evaluating a state of an epidemic can be obtained by any method known to those skilled in the art, as described in "Antibodies: A Laboratory Manual” , Cold Spring Harbor Laboratory Press, Cold Spring Harbor, NY (1990).
  • iTRAQ differential proteomic method
  • the term "activity" with respect to an amino acid sequence of the invention means an antimicrobial activity, an activity for stimulating cell survival, an activity for stimulating cell proliferation, or a activity of reducing or preventing aged skin and / or skin signs of aging, as indicated above.
  • Such activity can be determined by any method known to those skilled in the art, such as, for example, by evaluating the proliferation or survival of epidermal cells in cultures, such as keratinocytes, or by evaluating the activity. antimicrobial on cultured bacteria, such as Staphylococcus aureus, Escherichia coli or P. acnes.
  • the determination of a state of the skin or the characterization of the effectiveness of a cosmetic treatment of the skin can be carried out by measuring the variation of the expression of an amino acid sequence of the skin.
  • invention and preferably represented by a sequence selected from SEQ ID NO: 16, SEQ ID NO: 17, SEQ ID NO: 18, SEQ ID NO: 19 or SEQ ID NO: 20, an analogue or a fragment thereof. this.
  • the methods of the invention are particularly advantageous insofar as their implementation does not require the use of an invasive technique.
  • a The epidemic sample can thus be obtained by so-called "stripping" techniques and directly analyzed by a conventional analysis technique known to those skilled in the art.
  • strippings are tacky surfaces applied to the surface of the epidemic such as Blenderm ® 3M, D 'squam (commercial adhesive CuDERM), cyanoacrylate glue or the method of "stripping” varnish. Thanks to these "strippings", adherent corneocytes and the contents of their intercellular spaces can be removed and subsequently subjected to an extraction allowing access to the protein content.
  • Sampling of a sample suitable for a process of the invention may also be carried out more directly by "washing" the skin surface, for example by means of turbine-type propellers such as spiral cells. as described in patent FR 2,667,778 associated with a fluid circuit, or simply by adding / removing a drop of buffer on the surface of the skin.
  • one of the markers of the invention can be used for the purpose of preclinical, more effective and more rigorous selection of individuals, with a view to evaluating the efficacy of treatment or of a cosmetic active ingredient for the care of the patient. the skin.
  • a biomarker of the invention may advantageously be used as indicated above to evaluate the efficacy of an active agent, in vitro, ex vivo or in vivo.
  • a biomarker of the invention can be implemented to establish a personalized advice of a cosmetic treatment for an individual according to its expression profile of cutaneous biomarkers.
  • the present invention relates to the use (i) of at least one amino acid sequence of the invention, or (ii) a nucleic acid sequence of the invention, for screening for active agents capable of modulating the activity, expression or processing of said amino acid sequence or said nucleic acid sequence.
  • the term "expression" with respect to an amino acid sequence for example a protein or a peptide, or a nucleic acid sequence, for example an mRNA, its content or the variation of its content with respect to a reference.
  • the term “maturation” with respect to an amino acid sequence for example a protein or a peptide, or a nucleic acid sequence, for example an mRNA, the modifications who follow their synthesis in a cellular environment.
  • “maturation” is understood to mean post-translational modifications, such as the glycosylation or the farnesylation of certain amino acids, or the proteolytic steps leading to the elimination of sequences. so-called “signal” or “secretory” or the release of sequences with particular biological properties.
  • the term “maturation” is understood to mean, for example, the alternative splicing of an mRNA.
  • the term “activity” refers to a nucleic acid sequence, for example an mRNA, its translation.
  • the present invention relates to the use (i) of at least one amino acid sequence of the invention, or (ii) at least one nucleic acid sequence of the invention , to characterize the effectiveness of an acne and / or oily or acne-prone and / or oily skin treatment.
  • the present invention makes it possible to propose new active agents that are suitable for the prevention and / or treatment of acne and / or oily or acne-prone and / or oily skin. Screening
  • the object of the present invention is to satisfy these needs.
  • the present invention relates to the use of an amino acid sequence, of nucleic acids of the invention, for screening or in a screening method, in particular in vitro or ex vivo, of active agents, particularly suitable for skin care.
  • the screened active agents may in particular be suitable for caring for acne-prone and / or oily skin, and / or for the prevention and / or treatment of acne, oily skin and imperfections.
  • a use or a method of the invention may comprise comparing a measurement of the activity, expression or processing of an amino acid sequence or nucleic acid sequence according to the invention. invention to a reference measurement.
  • a reference measurement may be as previously defined.
  • a reference measurement may be a quantitative or qualitative value relating to the expression, the maturation or the activity of said sequences determined in a sample in the absence of tested active agent.
  • a reference measurement can be obtained by repeating the steps of a method of the invention, and in particular steps a), b) and c) of a method of the invention as defined above, in the absence of biological or chemical compounds to test.
  • the screening of an active agent capable of modulating the activity of an amino acid sequence of the invention can be done by measuring the activity or the expression of a target molecule. belonging to the signaling or metabolism pathways in which said amino acid sequence may be involved, such as, for example, a reporter gene system.
  • a method of the invention can be implemented in a cell-free system, i.e. in a system not comprising cells but reproducing cellular functions, or in an isolated cell sample.
  • a method according to the invention can be carried out on an isolated cell sample, an acellular sample, an isolated amino acid sequence or an isolated nucleic acid sequence of the invention, obtained by cutaneous biopsy, from cells in culture, in particular from an epidermal model, or a non-invasive skin surface sample, in particular by stratum corneum tape-stripping or by simple washing, as previously described.
  • a cellular sample that is suitable for the invention, there may be mentioned a sample of keratinocytes or any other cell type of the skin expressing an amino acid sequence of the invention.
  • the screening of an active agent can be carried out by measuring the variation of the expression, in the presence and in the absence of the screened active agent, of an amino acid sequence of the invention, and preferably represented by a sequence selected from SEQ ID NO: 16, SEQ ID NO: 17, or SEQ ID NO: 18, an analogue or a fragment thereof.
  • an active agent of the invention may be a stimulating agent for the activity, expression or maturation of an amino acid sequence of the invention.
  • modulating agent that can be screened according to a use or a process in accordance with the invention, mention may also be made of antibodies or interfering RNAs.
  • the principle of the assay is based on the contact of decreasing concentrations of antimicrobial peptide (DCD-1L) with an identical P.acnes inoculum in culture medium suitable for P. acnes growth. After incubation of the 48h microplate with the P. acnes strain, the Optical Density of the sample (620 nm) is measured and the results are expressed as a percentage of calculated growth relative to a growth control without antimicrobial peptide (negative control). .
  • DCD-1L antimicrobial peptide
  • the minimum inhibitory concentration or MIC is the smallest concentration of antibiotic sufficient to inhibit, in the laboratory that is to say in vitro, the growth of a strain of bacteria (bacterial colony).
  • the range of concentrations chosen ranged from 5 to 100 ⁇ g / mL.
  • the inhibitory activity of the peptides was evaluated on the following germ: - P. acnes with TCC 6919 (Gram + bacterium)
  • a cosmetic composition comprising the following ingredients (% by weight):
  • a therapeutic composition comprising the following ingredients (% by weight):
  • a cosmetic composition comprising the following ingredients (% by weight):

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Abstract

La présente invention a, notamment, pour objet l'utilisation d'une composition cosmétique et/ou thérapeutique, notamment dermatologique contenant au moins une séquence d'acides aminés de la Dermicidine, d'un analogue ou d'un fragment de celle-ci, ou d'au moins une séquence d'acides nucléiques codant cette séquence, pour prévenir l'apparition d'imperfections, ainsi que pour le traitement et/ou la prévention et/ou le diagnostic de la peau acnéique et/ou grasse ou à tendance acnéique et/ou grasse. Elle concerne également un procédé d'application de la composition cosmétique précitée pour la prévention d'apparition d'imperfections et le traitement de la peau à tendance acnéique et/ou grasse. Elle concerne, en outre, un procédé de traitement d'une peau acnéique comprenant l'application topique sur ladite peau de la composition pharmaceutique pour le traitement de la peau acnéique et/ou grasse. La présente invention a, également, pour objet l'utilisation d'un biomarqueur pour le diagnostic des peaux acnéique et/ou grasse ou à tendance acnéiques et/ou grasse.

Description

UTILISATION COSMÉTIQUE DE LA DERMICIDINE, ANALOGUES OU FRAGMENTS DE CELLE-CI POUR LA PRÉVENTION ET/OU LE TRAITEMENT ET LE DIAGNOSTIC DE LA PEAU GRASSE ET DES DÉSORDRES ESTHÉTIQUES CUTANÉS QUI Y SONT ASSOCIÉS
La présente invention a pour objet l'utilisation d'une séquence d'acides aminés de la Dermicidine, d'un analogue ou d'un fragment de celle-ci pour prévenir l'apparition d'imperfections ou pour le traitement et/ou la prévention et/ou le diagnostic de la peau acnéique ou à tendance acnéique, des peaux grasses et/ou des désordres esthétiques cutanés qui lui sont associés.
Elle concerne également un procédé de traitement cosmétique pour la prévention et le traitement des peaux grasses et/ou les désordres esthétiques cutanés qui lui sont associés.
La présente invention a, également, pour objet l'utilisation d'un biomarqueur pour le diagnostic des peaux acnéiques, des peaux grasses ou des peaux à tendance acnéique ou grasse.
L'acné vulgaire est une maladie multifactorielle (visage, région scapulaire, bras et régions intertrigineuses). Elle est la principale cause des dermatoses les plus fréquentes. Il est important de ne pas banaliser cette maladie et de la traiter correctement, car elle peut avoir des conséquences psychosociales invalidantes notamment du fait de la formation de cicatrices.
Sous la forme la plus légère, elle concerne presque chaque être humain. Sa fréquence est maximale à l'âge de la puberté, mais elle peut se manifester pour la première fois dès l'âge de 7 à 9 ans et jusqu'à des âges dépassant 40 ans. Il est fréquent de souffrir d'acné encore après 25 ans.
L'acné est une maladie du follicule de la glande sébacée. Les facteurs pathogéniques suivants jouent un rôle déterminant dans la constitution de l'acné :
- prédisposition génétique
androgène La kératinisation anormalement augmentée (trouble de la kératinisation) au niveau de la portion infundibulaire du follicule pileux. En effet, dans les parties les plus profondes de l'infundibulum, on constate la formation d'une quantité de kératinocytes supérieure à la normale. Ces cellules se différencient en cellules cornées qui obstruent progressivement la lumière du canal folliculaire. Le processus physiologique de desquamation continue de l'acro-infundibulum vers la surface est perturbé par l'adhérence augmentée des cellules cornées produites. Il se forme un bouchon hyperkératosique constituant le comédon, lésion initiale de l'acné.
Les infections bactériennes responsables de l'hydrolyse des acides gras libres et des phénomènes inflammatoires (papules et pustules).
Les trois germes locaux prédominants, le Staphyloccus epidermidis, le Malassezia furfur et le Propionibacterium acnés trouvent au niveau du follicule sébacé un milieu nutritif idéal.
Les manifestations cliniques sont caractérisées par un tableau polymorphe. Nous nous intéresserons ici aux formes d'acné les plus fréquentes à savoir les acnés comédonniennes (acné juvénile), papulo-pustuleuses et/ou nodulaires.
Les lésions de rétention peuvent être de type comédon ouvert ou fermé (microkyste, micro comédon, tête blanche). Les lésions inflammatoires dérivées des lésions de rétention peuvent être de type papules, pustules, avec des nodules indurés, des abcès, des fistules, des états cicatriciels.
ÉVALUATION PAR LA GRILLE ECLA
La sévérité clinique de l'acné a été déterminée à l'aide de la grille semi-quantitative de cotation ECLA.
Cette grille se compose de trois facteurs : L'hyperséborré ou surproduction de sébum est très courante et se traduit par une peau à l'aspect gras, brillant et des pores élargis. Mais elle est également très sensible aux facteurs environnementaux tels que la température, l'humidité ou l'alimentation. Par ailleurs il a été démontré que Propionibacterium acnés est directement impliqué dans la stimulation de l'axe IGF-l/IGF-IRcutané, qui est un récepteur que l'on retrouve à la surface de la peau, et induit, par conséquent, une hyper séborrhée ainsi qu'une prolifération et une différenciation anormale des kératinocytes (Isard et al., 2011). Sur un plan clinique, des travaux démontrent une corrélation directe entre le taux sérique d'IGF-1 et la quantité de sébum sécrétée au niveau du visage (Aizawa and Niimura, 1995;Cappel et al, 2005;Vora et al, 2008). De plus Linuma et al ont pu mettre en évidence, in vitro, une augmentation intracellulaire de la formation de gouttes lipidiques au sein des sébocytes, une augmentation de la synthèse des triacylglycérols ainsi qu'une augmentation de l'accumulation de sébum dans les glandes et conduits sébacés après avoir exposé des cultures de sébocytes à un milieu de culture contenant les souches P. acnés. Ils ont, en outre, confirmé ces résultats in vivo en exposant des oreilles de hamsters pendant 4 semaines à la souche P. acnés, démontrant une augmentation de l'accumulation de sébum dans les glandes et conduits sébacés. La présence de P. acnés sur la peau serait donc à l'origine d'une surproduction de sébum et de la peau grasse ainsi que des désordres cutanés qui y sont associés.
Une peau grasse conduit le plus généralement à une peau luisante brillante et/ou à des imperfections cutanées telles que des pores dilatés, un grain de peau épais et/ou un défaut de désquamation.
En conséquence, l'hyper-séborrhée du à la présence de P. acnés à la surface de la peau est manifestement un phénomène qu'il apparaît important de contrôler efficacement pour prévenir la manifestation des désordres esthétique cutanés associés. Pour lutter contre les agents pathogènes tels que Propionibacterium acnés, on utilise couramment des actifs tels le que les rétinoïdes, l'acide azélaïque, le peroxyde de benzole, la Clindamycine, l'érythromycine et le sulfacétamide de sodium. Mais l'utilisation de ces actifs n'est pas dénuée d'effets secondaires. Ainsi, les rétinoïdes et l'acide azélique ne sont utilisés que dans le cas d'acné légère car ils sont peu efficaces sur les lésions inflammatoires et peuvent induire une sécheresse de la peau. Le peroxyde de benzole est susceptible de provoquer des irritations de la peau, le blanchiment des cheveux ainsi que des réactions photo-allergiques, il présente donc une toxicité non négligeable (Recherche chez l'homme du pouvoir photo toxique du peroxyde de henzoyle à 5%. M Jeanmougin, J Pedreiro, J Bouchet, J Civatte - Dermatology, 1983. , Drug-induced photoallergic and phototoxic reactions. July 2007, Vol. 6, No. 4 , Pages 431-443 Kevin R Stein & Noah S ScheinfeldLa Clindamycine, l'érythromycine et le sulfamide de sodium sous forme de sels sont des substances sensibilisantes, susceptibles de provoquer des allergies, et entraînant des résistances (D Sasseville - Progrès en Dermato-Allergologie Tome XVI: Strasbourg 2010
Il subsiste donc le besoin d'actifs d'application topique ayant un effet sur les germes du genre Propionibacterium, et particulièrement Propionibacterium acnés tout en ne présentant pas les inconvénients des composés connus pour cette utilisation.
Par ailleurs le développement de résistance contre certains de ces antimicrobiens révèle le besoin d'identifier de nouvelles molécules afin de maintenir dans le temps une action efficace sur l'inhibition de croissance de P. acnés.
Or, la Demanderesse a découvert que la Dermicidine, antimicrobien naturel, permet d'atteindre ce but. Ce composé naturel présente, de façon inattendue, une inhibition de croissance de P. acnés.
En particulier, les inventeurs ont découvert qu'un des peptides issus du clivage de la dermicidine, le peptide antimicrobien DCD-1L connu pour être présent au niveau de la sueur était actif sur la croissance de P. acnés et pouvaient donc être utilisés dans une composition cosmétique, en particulier en tant qu'actif permettant de prévenir et/ou traiter la peau grasse ainsi que les désordres esthétiques cutané qui y sont associés.
L'invention a donc pour objet l'utilisation d'une composition cosmétique contenant au moins une séquence d'acides aminés de la Dermicidine, d'un analogue ou d'un fragment de celle-ci pour prévenir et/ou traiter la peau acnéique et/ou la peau grasse et les désordres esthétique cutanés qui y sont associés.
L'invention concerne également un procédé de traitement cosmétique, dans lequel on applique sur la peau, une composition cosmétique comprenant une séquence d'acide aminé de la Dermicidine, un analogue ou un fragment de celle-ci tel que défini ci-après.
Un autre aspect de l'invention est l'utilisation de la Dermicidine ou d'une séquence d'acide aminé dérivée de cette protéine, un analogue ou un fragment de celle-ci ou une séquence d'acides nucléiques codant pour une séquence d'acide aminé conforme à l'invention, notamment à titre de biomarqueur pour le diagnostic de la peau grasse.
Au sens de l'invention, on entend désigner par « peau » l'ensemble de l'épidémie du corps humain. Plus particulièrement, la peau considérée dans la présente invention est de préférence la peau du visage, du décolleté, du dos, et de manière préférée, la peau du visage.
Par « peau à tendance acnéique » au sens de l'invention, on entend une peau présentant une acné avec un score ECLA inférieur à 10, de préférence compris entre 1 et 9. Par « peau acnéique » au sens de l'invention, on entend une peau présentant une acné avec un score ECLA compris entre 10 inclus et 36.
Par « peau grasse » au sens de l'invention, on entend une peau présentant une hyperseborrhé caractérisée par une sécrétion et une excrétion exagérées de sébum. Classiquement, un taux de sébum supérieur à 150/200 μg/cm2 est considéré comme caractéristique d'une telle peau grasse.
Par « imperfections » au sens de l'invention, on entend les marques cutanées ou cicatrices temporaires ou définitives dues aux lésions acnéique qui sont perçues par le sujet comme inesthétique. Au sens de l'invention, on entend par « prévenir », le fait de réduire le risque de survenue ou de ralentir la survenue d'un phénomène donné, à savoir dans la présente invention, les marques cutanées et les cicatrices induites par les boutons, les lésions de rétention de type comédon ouvert ou fermé (microkyste, micro comédon, tête blanche), les lésions inflammatoires dérivées des lésions de rétention de type papules, pustules, avec des nodules indurés, des abcès, des fistules, des états cicatriciels une peau luisante brillante et/ou à des imperfections cutanées telles que des pores dilatés, un grain de peau épais et/ou un défaut de desquamation.
L'invention concerne également un procédé de traitement cosmétique du traitement de la peau à tendance acnéique et/ou de la peau grasse et de la prévention d'imperfections, dans lequel on applique sur la peau, une composition cosmétique comprenant une séquence d'acide aminé de la Dermicidine, un analogue ou un fragment de celle-ci tel que défini ci- après.
L'invention concerne un procédé de traitement pharmaceutique, notamment dermatologique dans lequel on applique sur la peau une composition pharmaceutique comprenant la Dermicidine, un analogue ou un fragment de celle-ci ou au moins une séquence d'acide aminé conforme à l'invention, au moins une séquence d'acides nucléiques codant pour une séquence d'acides aminés conforme à l'invention, ou au moins un agent modulateur de l'expression ou de l'activité, notamment biologique, de ladite séquence d'acide aminé.
Un autre aspect de l'invention est l'utilisation de la Dermicidine ou d'une séquence d'acide aminé dérivée de cette protéine, un analogue ou un fragment de celle-ci ou une séquence d'acides nucléiques codant pour une séquence d'acide aminé conforme à l'invention, notamment à titre de biomarqueur pour le diagnostic d'une peau acnéique ou à tendance acnéique ou des peaux grasses. Dermicidine
La Dermicidine/Protease Inducing Factor (DCD/PIF) est une protéine de 110 acides aminés (aa) comportant un peptide signal de 19aa dont le gène est localisé sur le chromosome 12, locus 12ql3.1 et qui est exprimée de façon constitutive dans la glande sudoripare (Rieg, Garbe et al. 2004). De plus, deux iso formes sont recensées dans la base UniProt l'une plus courte (isoforme 1) l'autre plus longue isoforme 2. Elle est sécrétée dans la sueur (Schittek, Hipfel et al. 2001). Après un processing post-traductionnel protéolytique (essentiellement par la cathepsine D) qui a lieu dans la sueur (Baechle, Flad et al. 2006), le précurseur protéique donne naissance à de nombreux peptides dont la longueur varie de 25 à 48 aa (Flad, Bogumil et al. 2002). Certains de ces peptides, tel que LL37 montrent des activités antimicrobiennes contre des microorganismes de type S. aureus, E. coli, Enterococcus faecalis, Candida albicans et P. acnés. Les peptides antimicrobiens sont dérivés de la partie C-terminale de la protéine. L'activité de ces peptides est indépendante de leur charge (Steffen, Rieg et al. 2006) et passerait par une étape d'interaction avec les phospholipides bactériens (Li, Rigby et al. 2009). La partie N- terminale de la protéine est constituée d'un facteur bio logiquement actif favorisant la survie cellulaire (Cunningham, Hodge et al. 1998). La diminution de la DCD observée dans la sueur des atopiques peut expliquer en partie les susceptibilités microbiennes de ce type de peaux (Rieg, Steffen et al. 2005). Une publication récente fait état de l'utilisation de la DCD comme un marqueur spécifique particulièrement sensible de la présence de traces de sueur par RT-PCR ou par ELISA utilisable dans le domaine médico-légal (Sakurada, Akutsu et al. 2009). Il a été démontré que la DCD s'associait aux phospholipides bactériens et s 'auto organisait en formant des canaux ioniques dans la membrane bactérienne (Paulmann, Arnold et al. 2012).
Séquences d'acides aminés et d'acides nucléiques
La Dermicidine (DCD) associée à son peptide signal est une protéine de 1 10 acides aminés (SEQ ID NO: 11) comportant un peptide signal de 19 acides aminés (SEQ ID NO: 14) dont le gène est localisé sur le chromosome 12, locus 12ql3.1. Deux isoformes de cette protéine sont recensées, l'une plus courte, isoforme 1 (SEQ ID NO: 12), l'autre plus longue, isoforme 2 (SEQ ID NO: 13).
Après clivage du peptide signal, la Dermicidine (DCD) est une protéine de 90 acides aminés selon la séquence SEQ ID NO : 16.
Après une maturation post-traductionnelle protéolytique, essentiellement par la
Cathepsine D, qui a lieu dans la sueur (Baechle, Flad et al., 2006), ce précurseur protéique donne naissance à la DCD-1 (SEQ ID NO: 19) et à la DCD- IL (SEQ ID NO :20) ainsi qu'à de nombreux peptides dont la longueur varie de 25 à 48 aa (Flad, Bogumil et al., 2002).
Sauf indication contraire, le terme « Dermicidine » vise à désigner dans la présente demande les séquences d'acides aminés représentées par SEQ ID NO: 11 , SEQ ID NO: 12, SEQ ID NO: 13, SEQ ID NO: 16, SEQ ID NO: 19 et SEQ ID NO: 20, ayant ou non subi une maturation post-traductionnelle.
Selon un mode de réalisation préféré, on entend désigner par Dermicidine la séquence d'acides aminés représentée par SEQ ID NO: 16.
Selon un mode de réalisation encore préféré, on entend, désigner par Dermicidine plus particulièrement la séquence d'acides aminés représentée par SEQ ID NO : 20.
La partie N-terminale de la protéine (SEQ ID NO: 15) est constituée d'un facteur bio logiquement actif favorisant la survie cellulaire (Cunningham, Hodge et al. 1998).
Par « analogue d'une séquence d'acides aminés » conforme à l'invention, on entend désigner toute séquence d'acides aminés ayant une identité de séquence d'au moins 85 %, de préférence d'au moins 90 %, et plus préférentiellement d'au moins 95 %, et de manière encore plus préférée d'au moins 99% avec ladite séquence, et une activité biologique de même nature.
Par « activité biologique de même nature » à l'égard d'une séquence d'acides aminés selon l'invention, on entend les propriétés antimicrobiennes ou de stimulation de la survie et/ou de la prolifération cellulaire habituellement attribuées à la Dermicidine.
L'identité de séquence peut être déterminée par comparaison visuelle ou au moyen de tout outil informatique généralement utilisé dans le domaine, tel que les programmes BLAST disponibles sur www.ncbi.nlm.nih.gov et utilisés avec les paramètres configurés par défaut.
Un analogue conforme à l'invention peut être un agent peptidomimétique.
Un analogue d'une séquence d'acides aminés de l'invention peut résulter de modifications issues de mutation ou de variation dans les séquences des peptides selon l'invention provenant soit de la délétion ou de l'insertion d'un ou plusieurs acides aminés, soit de la substitution d'un ou plusieurs acides aminés, soit encore d'un épissage alternatif. Plusieurs de ces modifications peuvent être combinées.
Avantageusement, un analogue d'une séquence d'acides aminés de l'invention peut comprendre des substitutions conservatrices par rapport à cette séquence d'acides aminés.
A titre d'exemple de mutations que l'on peut considérer dans la présente invention, il peut être mentionné, de manière non exhaustive, le remplacement d'un ou plusieurs résidus d'acides aminés par des résidus d'acides aminés ayant un indice hydropathique similaire sans pour autant affecter de manière sensible les propriétés biologiques du polypeptide. L'indice hydropathique est un indice attribué aux acides aminés en fonction de leur hydrophobicité et de leur charge (Kyte et al. (1982), J. Mol. Biol, 157 : 105).
Une séquence d'acides aminés ou un analogue de celle-ci visé par la présente invention peut être une séquence d'acides aminés ayant subi une ou plusieurs maturation(s) post-traductionnelle(s) .
Par « maturation(s) post-traductionnelle(s) », on entend englober l'ensemble des modifications qu'une séquence d'acides aminés est susceptible de subir à l'issue de sa synthèse dans une cellule, telle que par exemple une ou des phosphorylation(s), une ou des thiolation(s), une ou des acétylation(s), une ou des glycosylation(s), une ou des lipidation(s), telles qu'une farnésylation ou une palmitoylation, un réarrangement structural de type formation de ponts disulfures et/ou de type clivage à l'intérieur de la séquence peptidique.
Un analogue d'une séquence d'acides aminés présente, par ailleurs, sensiblement la même activité biologique que cette séquence d'acides aminés.
Il est par ailleurs connu qu'une séquence primaire d'acides aminés, peut comprendre des sites spécifiquement reconnus par des enzymes de type protéase, telles que la trypsine, qui, une fois la reconnaissance de ces sites effective vont induire le clivage de la séquence par protéolyse. Cette protéolyse résulte en la génération de divers peptides, ou fragments de séquences d'acides aminés de l'invention.
En conséquence, l'invention s'étend également aux fragments de la Dermicidine, issus le cas échéant de sa protéolyse.
Au sens de l'invention, on entend par « fragment d'une séquence d'acides aminés » toute portion de la séquence d'acides aminés conforme à l'invention comprenant de 3 à 48 acides aminés consécutifs de ladite séquence.
Selon un mode de réalisation, une séquence d'acides aminés convenant à l'invention peut être une séquence d'acides aminés représentée par une séquence choisie parmi SEQ ID NO: 11 à 20, notamment parmi SEQ ID NO: 16, SEQ ID NO: 20, un analogue, ou un fragment de celle-ci.
Selon un mode de réalisation préférée, une séquence d'acides aminés convenant à l'invention peut être une séquence d'acides aminés représentée par une séquence choisie parmi SEQ ID NO: 14, SEQ ID NO: 15, SEQ ID NO: 16, SEQ ID NO: 17, SEQ ID NO: 18, SEQ ID NO : 19, SEQ ID NO : 20, un analogue, ou un fragment de celle-ci.
De manière encore préférée, une séquence d'acides aminés convenant à l'invention peut être une séquence d'acides aminés représentée par la séquence SEQ ID NO : 20, un analogue ou un fragment de celle-ci.
Selon un autre mode de réalisation, un polypeptide convenant à l'invention peut également être une séquence d'acides aminés naturelle ou synthétique, le cas échéant susceptible d'être obtenue après hydrolyse enzymatique ou chimique de la Dermicidine ou par synthèse chimique ou biologique ou par extraction à partir d'un tissu biologique, comme par exemple la peau, exprimant naturellement cette séquence d'acides aminés ou après transfection de celui-ci, ainsi que les différentes formes post-traductionnelles de celui-ci, ou encore toute séquence d'acides aminés naturelle ou synthétique dont la séquence comprend totalement ou partiellement une séquence d'acides aminés précitée, par exemple les variants et les analogues.
L'homme de l'art peut obtenir une séquence d'acides aminés conforme à l'invention au moyen de procédés à base d'ADN recombinant, comme par exemple, ceux décrits dans le manuel « Molecular Cloning - A Laboratory Manual » (2ème édition), Sambrook et al., 1989, Vol. I-III, Coldspring Harbor Laboratory, Coldspring Harbor Press, NY, (Sambrook). Selon un mode de réalisation, la présente invention concerne également des séquences d'acides nucléiques SEQ ID NO : 1 à SEQ ID NO : 10 codant respectivement pour les séquences d'acides aminés SEQ ID NO : 11 à SEQ ID NO :20 de l'invention et leur mise en œuvre dans les différentes utilisations et procédés conformes à l'invention.
Au sens de la présente invention, on entend par « fragment de séquence d'acides nucléiques », une séquence d'acides nucléiques codant pour une séquence d'acides aminés ayant une activité biologique de même nature que la séquence d'acides aminés codée par ladite séquence.
Au sens de la présente invention, on entend par « analogue d'une séquence d'acides nucléiques » une séquence d'acides nucléiques ayant une identité de séquence d'au moins 85 %, de préférence d'au moins 90 %, et plus préférentiellement d'au moins 95 %, et de manière encore plus préférée d'au moins 99% avec ladite séquence, et codant pour une séquence d'acides aminés ayant une activité biologique de même nature que la séquence d'acides aminés codée par ladite séquence.
Par « analogue d'une séquence d'acides nucléiques », on entend désigner une séquence d'acides nucléiques, éventuellement résultant de la dégénérescence du code des acides nucléiques, et codant pour une séquence d'acides aminés conforme à l'invention, notamment tel que défini précédemment.
Selon un mode de réalisation préféré, une séquence d'acides nucléiques de l'invention peut être représentée par au moins une séquence choisie parmi SEQ ID NO :6 ou SEQ ID NO : 10 et de manière encore préférée est la SEQ ID NO : 10.
Une séquence d'acides nucléiques de l'invention peut être de toutes origines possibles, à savoir soit animale, en particulier de mammifères et encore plus particulièrement humaine, soit végétale, soit de micro-organismes, tels que par exemple virus, phages, ou bactéries entre autres, ou encore de champignons, sans préjuger du fait qu'elles soient présentes de manière naturelle ou non dans ledit organisme d'origine. Selon un mode de réalisation, l'invention se rapporte également aux séquences d'acides nucléiques isolées et purifiées codant pour une séquence d'acides aminés considérés selon l'invention, ainsi qu'à leurs analogues et fragments.
Une séquence d'acides nucléiques conforme à l'invention peut comprendre une séquence sens, anti-sens ou interférentielle correspondant à une séquence codant pour un polypeptide conforme à l'invention.
Compositions
Composition cosmétique
La présente invention concerne également des compositions cométiques comprenant dans un milieu cosmétiquement acceptable une quantité efficace d'au moins une séquence d'acides aminés de l'invention.
Une composition de l'invention peut contenir des adjuvants habituels dans le domaine considéré, tels que des gélifiants hydrophiles ou lipophiles, des conservateurs, des antioxydants, des solvants, des parfums, des charges, des filtres, des absorbeurs d'odeurs et des matières colorantes, les huiles, les cires de l'eau et les polyols.
Les quantités des différents constituants des compositions selon l'invention sont celles classiquement utilisées dans les domaines considérés.
La quantité de séquence d'acides aminés, ou de séquence d'acides nucléiques de l'invention, ou d'agent actif conformes à l'invention contenue dans une composition de l'invention, encore dite « quantité efficace » est, bien entendu, fonction de la nature de l'actif et de l'effet recherché et peut donc varier dans une large mesure.
Pour donner un ordre de grandeur, une composition peut contenir une séquence d'acides aminés, ou une séquence d'acides nucléiques, ou un agent actif conformes à l'invention en une quantité représentant de 0,00001 % à 2,5 % du poids total de la composition, en particulier en une quantité représentant de 0,001 % à 2 % du poids total de la composition, et plus particulièrement en une quantité représentant de 0,1 % à 1 % du poids total de la composition.
Au sens de la présente invention, on entend par « quantité efficace » d'un composé de l'invention, une quantité suffisante et nécessaire de ce composé pour obtenir un effet recherché, et plus particulièrement un effet cosmétique ou de soin à l'égard de la peau acnéique. Ainsi, et sans que cela ne soit nullement limitatif au sens de la présente invention, l'homme du métier pourra se référer aux exemples ci-après où ladite au moins une séquence d'acides aminés représente 0,01 % de la composition.
Composition pharmaceutique
La présente invention concerne également des compositions pharmaceutiques, notamment dermatologique comprenant dans un milieu physio logiquement acceptable une quantité efficace d'au moins une séquence d'acides aminés conforme à l'invention, ou d'au moins une séquence d'acides nucléiques conforme à l'invention, ou d'au moins un agent actif apte à moduler l'activité, l'expression ou la maturation de ladite séquence d'acides aminés ou de ladite séquence d'acides nucléiques.
Au sens de la présente invention, on entend par « agent modulateur » ou « agent actif susceptible de moduler l'expression, la maturation ou l'activité d'une séquence d'acides aminées ou d'une séquence d'acides nucléiques conformes à l'invention », tout composé susceptible d'agir, directement ou indirectement, sur au moins une séquence d'acides aminées ou une séquence d'acides nucléiques conformes à l'invention, ou sur un élément d'une voie de signalisation intra ou extra-cellulaire, ou d'une voie métabolique, ou de régulation de la transcription et/ou de la traduction impliquant ladite séquence d'acides aminées ou ladite séquence d'acides nucléiques.
Au sens de l'invention, on entend par « moduler », au regard d'un effet donné, l'action de stimuler ou d'inhiber cet effet. Au sens de la présente invention, on entend désigner par « milieu physio logiquement acceptable », un milieu convenant à l'administration d'une composition par voie topique sur la peau, le cuir chevelu, ou les lèvres, ou par voie orale ou par voie parentérale telle que la voie intradermique ou sous-cutanée.
Les quantités des différents constituants des compositions selon l'invention sont celles classiquement utilisées dans les domaines considérés.
La quantité de séquence d'acides aminés, ou de séquence d'acides nucléiques de l'invention, ou d'agent actif conformes à l'invention contenue dans une composition de l'invention, encore dite « quantité efficace » est, bien entendu, fonction de la nature de l'actif et de l'effet recherché et peut donc varier dans une large mesure.
Pour donner un ordre de grandeur, une composition peut contenir une séquence d'acides aminés, ou une séquence d'acides nucléiques, ou un agent actif conformes à l'invention en une quantité représentant de 0,00001 % à 5 % du poids total de la composition, en particulier en une quantité représentant de 0,001 % à 5 % du poids total de la composition, préférentiellement 0 ,1 à 5 et plus particulièrement en une quantité représentant de 0,5 % à 5 % du poids total de la composition, et de manière encore plus préférée de 2,5% à 5%.
Selon un autre mode de réalisation, une composition au moins un agent actif thérapeutique additionnel.
Utilisation cosmétique
La présente invention concerne l'utilisation cosmétique d'une quantité efficace d'au moins une séquence d'acides aminés ou d'acide nucléique ou d' à titre d'agent actif pour prévenir et/ou traiter la peau acnéique et/ou la peau grasse et/ou l'apparition des désordres esthétiques cutanés qui y sont associées.
Selon un autre aspect, la présente invention concerne un procédé cosmétique, non thérapeutique, pour prévenir et/ou traiter la peau à tendance acnéique et/ou la peau grasse et/ou l'apparition des désordres esthétiques cutanés qui y sont associées chez un individu en ayant besoin. Le procédé comprenant au moins une étape consistant à administrer audit individu, au moins une composition comprenant à titre d'agent actif (i) au moins une séquence d'acides aminés de l'invention, notamment telle que définis ci-avant.
Un procédé ou une utilisation de l'invention permettent de prévenir et/ou traiter la peau grasse et/ou l'apparition des désordres esthétiques cutanés qui y sont associées.
Un procédé ou une utilisation de l'invention permettent de conférer et/ou de retrouver une peau saine.
Par « peau saine » au sens de l'invention, on entend une peau non luisante, non brillante et ne présentant pas, ou peu de désordres esthétiques cutanés tels que des pores dilatés, des comédons, des points noirs ou un microrelief épais. De manière préférée, un procédé de l'invention peut comprendre l'application par voie topique sur au moins une partie de la peau d'un individu en ayant besoin, en particulier sur la peau du visage, du dos et/ou du décolleté, du scalp, d'au moins une couche d'une composition topique de l'invention.
Un procédé cosmétique selon l'invention peut être mis en œuvre de façon journalière, par exemple à raison d'application unique par jour, ou d'une administration fractionnée en deux ou trois fois par jour, par exemple une fois le matin et une fois le soir.
Un procédé cosmétique selon l'invention peut être mis en œuvre sur une période de temps variant d'une semaine à plusieurs semaines, voire plusieurs mois, cette période pouvant par ailleurs être répétée après des périodes de non traitement pendant plusieurs mois, voire plusieurs années.
A titre d'exemple, de procédé cosmétique selon l'invention on peut prévoir une application d'une composition cosmétique de l'invention, par exemple, à raison de 1, 2 ou 3 fois par jour, ou plus, et généralement sur une durée prolongé d'au moins 4 semaines, voire 4 à 15 semaines, avec le cas échéant une ou plusieurs périodes d'interruption.
Dans un deuxième mode de réalisation, la présente invention se rapporte au domaine des biomarqueurs de la peau, et plus particulièrement de la peau grasse, hyperséborrhéique, ainsi qu'à leur mise en œuvre à titre de cibles ou d'agents actifs cosmétiques.
Ces facteurs peuvent être utilisés à titre de biomarqueurs de la peau, comme cibles de criblage, voire comme actifs cosmétiques.
Il existe également un besoin de disposer de nouveaux biomarqueurs permettant de caractériser un état de la peau, et en particulier d'une peau à tendance acnéique d'une peau grasse, ou à imperfections afin d'obtenir des données quantitatives permettant d'évaluer objectivement cet état physiologique. Utilisation thérapeutique
La présente invention concerne l'utilisation thérapeutique d'une quantité efficace d'au moins une séquence d'acides aminés ou d'acides nucléiques de l'invention ou d'au moins un agent modulateur de l'activité, de l'expression ou de la maturation de ladite séquence d'acides aminés ou de ladite séquence d'acides nucléiques, et notamment un agent modulateur tel que défini précédemment, à titre d'agent actif pour prévenir l'apparition d'imperfections et/ou prévenir et/ou traiter la peau acnéique.
Selon un autre aspect, la présente invention concerne un procédé thérapeutique, pour prévenir l'apparition d'imperfections et/ou prévenir et/ou traiter une peau acnéique chez un individu en ayant besoin, le procédé comprenant au moins une étape consistant à administrer audit individu, au moins une composition comprenant à titre d'agent actif (i) au moins une séquence d'acides aminés de l'invention ou (ii) au moins une séquence d'acides nucléiques de l'invention, ou (iii) au moins un agent modulateur de l'activité, de l'expression ou de la maturation desdites séquences de l'invention, notamment tels que définis ci-avant.
Un procédé ou une utilisation de l'invention permettent de retrouver une peau saine, se manifestant par une peau lisse et sans imperfections.
Un procédé ou une utilisation de l'invention permettent de prévenir et/ou réduire la présence d'un microrelief de la peau.
De manière préférée, un procédé de l'invention peut comprendre l'application par voie topique sur au moins une partie de la peau d'un individu en ayant besoin, en particulier sur la peau du visage, du dos et/ou du décolleté, d'au moins une couche d'une composition topique de l'invention.
Un procédé thérapeutique par voie topique selon l'invention peut avantageusement comprendre l'application d'une composition de l'invention, en association de manière simultanée, successive ou séparée dans le temps avec une composition cosmétique ou dermatologique additionnelle distincte de la composition de l'invention et destinée au soin de la peau. Un procédé pharmaceutique selon l'invention peut être mis en œuvre de façon journalière, par exemple à raison d'une application unique par jour, ou d'une administration fractionnée en deux ou trois fois par jour, par exemple une fois le matin et une fois le soir.
Un procédé pharmaceutique selon l'invention peut être mis en œuvre sur une période de temps variant d'une semaine à plusieurs semaines, voire plusieurs mois, cette période pouvant par ailleurs être répétée après des périodes de non traitement pendant plusieurs mois, voire plusieurs années.
A titre d'exemple, de procédé pharmaceutique selon l'invention on peut prévoir une application d'une composition de l'invention, par exemple, à raison de 1, 2 ou 3 fois par jour, ou plus, et généralement sur une durée prolongé d'au moins 4 semaines, voire 4 à 15 semaines, avec le cas échéant une ou plusieurs périodes d'interruption.
Dans un deuxième mode de réalisation, la présente invention se rapporte au domaine des biomarqueurs de la peau, et plus particulièrement de la peau acnéique, ainsi qu'à leur mise en œuvre à titre de cibles ou d'agents actifs cosmétiques.
Ces facteurs peuvent être utilisés à titre de bio-marqueurs de la peau, comme cibles de criblage, voire comme actifs cosmétiques.
Il existe également un besoin de disposer de nouveaux biomarqueurs permettant de caractériser un état de la peau, et en particulier d'une peau acnéique ou à tendance acnéique., ou à imperfections
Biomarqueur
A la connaissance des inventeurs, cette protéine antimicrobienne de la surface cutanée n'a jamais été classée comme variant des peaux acnéiques et/ou grasses et encore moins comme l'un des biomarqueurs les plus pertinents ressortant de ce type d'études.
De manière inattendue, au cours d'une étude de protéomique différentielle par la technologie « iTRAQ », les inventeurs ont observé à partir de protéines extraites de strippings vernis prélevés chez 24 sujets hyperséborrhéiques et 24 sujets normo- séborrhéiques d'âge différent, que la Dermicidine (ou DCD) se révélait être un biomarqueur sensible et spécifique de la peau grasse.
Plus précisément, les inventeurs ont observé que le taux d'expression de la Dermicidine, et plus particulièrement de peptides issus de la Dermicidine et identifiés par les séquences SEQ ID NO: 1 1 à SEQ ID NO: 20 et notamment la SEQ ID NO : 20 étaient systématiquement diminués dans les peaux grasses par rapport aux peaux saines, notamment avec un ratio de 0,32 en moyenne obtenus avec 3 expériences indépendantes.
A la connaissance des inventeurs, cette protéine antimicrobienne de la surface cutanée n'a jamais été classée comme variant des peaux grasses et encore moins comme l'un des biomarqueurs les plus pertinents ressortant de ce type d'études.
Il est connu que la sudation diminue avec l'âge (Anderson and Kenney 1987 ; Kenney and Fowler 1988) et que la Dermicidine est une protéine sudoripare (Schittek, Hipfel et al., 2001). En revanche, les données expérimentales obtenues par les inventeurs montrent de façon inattendue qu'il existe un déficit spécifique d'expression et/ou de maturation de la DCD chez les peaux grasses car celle-ci est sous-exprimée dans les échantillons cutanés.
La présente invention concerne l'utilisation d'au moins une séquence d'acides aminés de l'invention, ou d'au moins une séquence d'acides nucléiques de l'invention, à titre de biomarqueur d'un état de la peau.
La présente invention concerne l'utilisation d'au moins une séquence d'acides aminés de l'invention, ou d'au moins une séquence d'acides nucléiques de l'invention, à titre de biomarqueur d'un état de la peau.
De manière préférée, une utilisation conforme à l'invention permet de caractériser un état de la peau tel que la peau acnéique et/ou grasse.
La présente invention concerne un procédé in vitro ou ex vivo pour caractériser un état acnéique et/ou gras de la peau d'un sujet comprenant au moins les étapes consistant à :
a) effectuer, dans un échantillon isolé d'une peau d'un sujet, une mesure qualitative ou quantitative de l'expression, de la maturation ou de l'activité du biomarqueur, et b) comparer ladite mesure effectuée à l'étape a) à une mesure de référence. c) Conclure qu'une diminution de l'activité, de l'expression ou de la maturation dudit biomarqueur par rapport à ladite mesure de référence est indicative d'une peau acnéique et/ou grasse ou à tendance acnéique et/ou grasse chez le sujet.
Au sens de l'invention, on entend par « biomarqueur », une molécule ou l'activité d'une molécule, dont la présence, la teneur ou le degré d'activité est caractéristique d'un processus biologique, physiologique ou pathologique, ou de l'impact ou de l'effet induit par l'administration d'un agent actif sur un tel processus.
De façon préférée, l'utilisation de la Dermicidine ou d'une séquence d'acide aminé dérivée de cette protéine, ou d'un analogue ou un fragment de celle-ci ou une séquence d'acides nucléiques codant pour une séquence d'acide aminé conforme à l'invention, notamment à titre de biomarqueur pour l'évaluation d'un état de l'épiderme, pouvant être une des causes de la prolifération « anormale » tels que P. acnés.
Selon un mode de réalisation, une diminution de l'activité, de l'expression ou de la maturation dudit biomarqueur peut être indicative d'une peau acnéique et/ou grasse ou à tendance acnéique et/ou grasse.
Selon un mode de réalisation, une augmentation de l'activité, de l'expression ou de la maturation dudit biomarqueur peut être indicative d'un traitement cosmétique efficace pour exercer un effet bénéfique sur la peau et plus préférentiellement un effet à l'égard de la peau acnéique et/ou grasse ou à tendance acnéique et/ou grasse.
Dans une utilisation conforme à l'invention, une diminution ou une augmentation de l'activité, de l'expression ou de la maturation dudit biomarqueur peut être déterminée par comparaison à une mesure de référence obtenue selon toute méthode connue de l'homme de l'art. Une « mesure de référence » au regard d'un paramètre donné, est une mesure qualitative ou quantitative de ce paramètre effectuée dans des conditions dites « contrôles » ou « normales », par exemple déterminée dans un échantillon de référence, ou déterminée dans un échantillon en l'absence d'un traitement présumé avoir un effet sur le paramètre.
Par exemple, une mesure de référence pour une séquence d'acides aminés ou une séquence d'acides nucléiques conforme à l'invention peut être une valeur quantitative ou qualitative relative à l'expression, la maturation ou l'activité desdites séquences déterminée dans un échantillon de peau physio logiquement saine, ou déterminée dans un échantillon de peau, notamment de peau acnéique, avant un traitement cosmétique ou thérapeutique.
De préférence, une mesure de référence est une mesure statistique, c'est à dire ayant été répétée sur différents échantillons de sorte à obtenir une moyenne.
La mesure de référence peut être effectuée parallèlement ou séquentiellement à la mesure test.
Elle peut également être une mesure « historique », c'est-à-dire effectuée antérieurement à la mesure test, et stockée, par exemple dans une base de données, en vue d'une utilisation ultérieure.
Une comparaison de la mesure test à une mesure de référence, et une observation d'une déviation ou d'une absence de déviation entre les deux mesures, permet de tirer une information quant au paramètre mesuré, par exemple la diminution ou l'augmentation l'expression, de la maturation ou de l'activité d'une séquence d'acides aminés ou d'une séquence d'acides nucléiques conformes à l'invention.
Une telle information peut être ultérieurement mise en œuvre pour déterminer le caractère sain ou à tendance acnéique et/ou acnéique d'une peau.
Selon un mode de réalisation, l'invention concerne un procédé, en particulier in vitro ou ex vivo, pour caractériser un état de la peau acnéique et/ou grasse ou à tendance acnéique et/ou grasse.
La mesure qualitative ou quantitative de l'expression, de la maturation ou de l'activité d'une séquence d'acides nucléiques de l'invention peut être déterminée par toute méthode connue de l'homme de l'art. A titre d'exemple de méthodes convenant à l'invention, il peut être fait mention de la réaction de polymérisation en chaîne (PCR), quantitative (Q-PCR) ou non, en présence ou non de transcriptase inverse (RT-PCR ou Q-RT-PCR), du Northern-blot, de la méthode « ribonuclease protection assay », des méthodes avec des puces à ADN, des méthodes avec des puces transcriptomiques, des méthodes avec des puces à oligonucléotides, des méthodes d'hybridation in situ.
A titre d'exemple d'agents convenant à la détection d'une séquence d'acides nucléiques de l'invention, et en particulier d'une séquence d'ARNm, il peut être fait mention de sondes d'acides nucléiques marquées pouvant s'hybrider à une séquence d'acides nucléiques de l'invention.
Une telle sonde d'acide nucléique peut être aisément obtenue par toute méthode connue de l'homme de l'art.
Ainsi, les séquences d'acides nucléiques conformes à l'invention peuvent être utilisées pour réaliser des amorces oligonucléotidiques sens et/ou anti-sens, qui s'hybrident dans des conditions de forte stringence à au moins une des séquences SEQ ID NO: 1, SEQ ID NO: 2, SEQ ID NO: 3, SEQ ID NO: 4, SEQ ID NO: 5, SEQ ID NO: 6, SEQ ID NO: 7, SEQ ID NO: 8, SEQ ID NO : 9, SEQ ID NO : 10, un analogue ou un fragment celle-ci.
L'expression d'une séquence d'acide nucléique peut également être déterminée, de manière indirecte, par la détermination de l'expression de la séquence d'acides aminées codée par ladite séquence, au moyen de toute technique connue dans le domaine, telle que le Western-Blot, l'ELISA, la méthode de BRADFORD ou de LOWRY, ou comme indiqué ci-après.
La mesure qualitative ou quantitative, de l'expression, de la maturation, ou de l'activité d'une séquence d'acides aminés de l'invention peut être effectuée au moyen de toute méthode connue de l'homme de l'art.
A titre de méthodes de détection de l'expression, de la maturation, ou de l'activité d'une séquence d'acides aminés, il peut être fait mention du Western-blot, du Slot-blot, du Dot-blot, des méthodes ELISA (Enzyme Linked Immuno-Sorbent Assay) de type singleplex ou multiplex, des méthodes de protéomique ou de gly comique, de coloration de polypeptides dans un gel de polyacrylamide par un colorant à base d'Argent, par le bleu de Coomassie ou par le SYPRO, de l'immuno fluorescence, de l'absorption UV, de méthodes immunohistochimiques en microscopie classique, électronique ou confocale, de FRET (fluorescence résonance energy transfer/transfert d'énergie par résonance de fluorescence), des méthodes de TR-FRET (time resolved FRET/FRET en résolution de temps), des méthodes de FLIM (fluorescence lifetime imaging micro scopy/imagerie par microscopie en temps de fluorescence), des méthodes de FSPIM (fluorescence spectral imaging microscopy/imagerie par microscopie en spectre de fluorescence), des méthodes de FRAP (fluorescence recovery after photobleaching/recouvrement de fluorescence après photoblanchiment), des méthodes par gène rapporteur, des méthodes d'AFM (atomic force microscopy/microscopie par force atomique), des méthodes de résonance plasmonique de surface, des méthodes de microcalorimétrie, des méthodes de cytométrie en flux, des méthodes de biosenseurs, des méthodes de radioimmuno-essais (RIA), des méthodes de focalisation isoélectrique, et des tests enzymatiques, des méthodes mettant en œuvre des puces à peptides, des puces à sucre, des puces d'anticorps, des méthodes de spectrométrie de masse, des méthodes de spectrométrie de type SELDI-TOF (Ciphergen).
De façon plus générale, des méthodes de dosage immunoenzymatiques à partir de solutions de protéines, plus quantitatives et sensibles peuvent en particulier être utilisées. Ces méthodes de type ELISA associent des couples d'anticorps de capture et de détection spécifique de l'antigène ciblé. Des anticorps commerciaux ou des anticorps polyclonaux, monoclonaux ou recombinants développés spécifiquement peuvent être utilisés. Des techniques ELISA multiplexes de grande capacité peuvent également être mises en œuvre. On peut ainsi citer l'approche multiplexe de type anticorps sur billes Luminex (par exemple Bioplex de Bio-Rad), de type anticorps sur surface plane (« antibodies-arrays ») (par exemple approche proposée par la société MesoScale Discovery). On peut aussi citer la technologie sur cartouche micro fiuidique mise au point par la société Coréenne NanoEntek. Dans une approche récente une technique nouvelle basée sur des anticorps appelés « Quenchbodies » proposés par la société japonaise Ushio permet de n'utiliser qu'un anticorps.
En particulier, il peut être avantageux de détecter l'expression d'une séquence d'acides aminés de l'invention au moyen d'un anticorps, le cas échéant sous une forme marquée. Un tel anticorps peut être marqué au moyen d'une substance détectable directement ou détectable par réaction avec un autre réactif. Par « anticorps », on entend désigner de manière générale des anticorps monoclonaux ou polyclonaux, ainsi que des fragments d'immunoglobuline susceptibles de lier un antigène et qui peuvent être produits par toute technique de génie génétique connue de l'homme de l'art ou par coupure enzymatique ou chimique d'anticorps intact.
Un anticorps susceptible d'être utilisé à titre d'outil d'évaluation d'un état d'un épidémie peut être obtenu par tout procédé connu de l'homme de l'art, tel que décrit dans « Antibodies: A Laboratory Manual », Cold Spring Harbor Laboratory Press, Cold Spring Harbor, N.Y. (1990).
Selon un mode de réalisation préféré, il peut être avantageux de détecter l'expression d'une séquence d'acides aminés de l'invention au moyen d'une méthode protéomique différentiel « iTRAQ ».
Une telle méthode est connue de l'homme de l'art et peut avantageusement être mise en œuvre comme décrit dans les exemples ci-après.
De manière particulière, par « activité » à l'égard d'une séquence d'acides aminés de l'invention on entend une activité antimicrobienne, une activité de stimulation de la survie cellulaire, une activité de stimulation de la prolifération cellulaire, ou une activité de réduction ou de prévention de la peau âgée et/ou des signes cutanés du vieillissement, comme indiqué ci-dessus.
Une telle activité peut être déterminée par toute méthode connue de l'homme de l'art, comme par exemple, par évaluation de la prolifération ou de la survie de cellules épidermiques en cultures, telles que des kératinocytes, ou par évaluation de l'activité antimicrobienne sur des bactéries en culture, telles que Staphylococcus aureus , Escherichia coli ou P. acnes.
De manière préférée, la détermination d'un état de la peau ou la caractérisation de l'efficacité d'un traitement cosmétique de la peau peuvent être effectuées par mesure de la variation de l'expression d'une séquence d'acides aminées de l'invention, et de préférence représentée par une séquence choisie parmi SEQ ID NO: 16, SEQ ID NO: 17, SEQ ID NO: 18, SEQ ID NO : 19 ou SEQ ID NO : 20, un analogue ou un fragment de celle-ci.
Les procédés de l'invention sont particulièrement avantageux dans la mesure où leur mise en œuvre ne nécessite pas de recourir à une technique invasive. Un échantillon d' épidémie peut ainsi être obtenu par des techniques dites de « stripping » et directement analysé par une technique d'analyse conventionnelle connue de l'homme de l'art.
Ces strippings sont des surfaces collantes appliquées à la surface de l'épidémie comme le Blenderm® de 3M, le D' squam (adhésif commercial de CuDERM), la colle cyanoacrylate ou la méthode du « stripping » vernis. Grâce à ces « strippings », les cornéocytes adhérents et le contenu de leurs espaces intercellulaires peuvent être prélevés et soumis par la suite à une extraction permettant d'avoir accès au contenu protéique.
Le prélèvement d'un échantillon convenant à un procédé de l'invention peut aussi être effectué de façon plus directe par « lavages » de la surface cutanée, au moyen par exemple d'accessoires de type turbine à ailette, de type cellule à spirale telle que décrit dans le brevet FR 2 667 778 associée à un circuit fluidique, ou simplement par ajout/prélèvement d'une goutte de tampon à la surface de la peau.
A titre indicatif, d'autres méthodes de prélèvement adaptées à la mise en œuvre de l'invention peuvent être mentionnées, telles que des méthodes par grattage de la partie supérieure du stratum corneum au moyen d'un système bilames. Cette technique permet de recueillir des squames qui peuvent ensuite être directement analysés par différentes techniques pour déterminer les taux en minéraux, aminoacides ou lipides.
Avantageusement, un des marqueurs de l'invention peut être mise en œuvre à des fins de sélection préclinique, plus efficace et plus rigoureuse, d'individus, en vue d'évaluer l'efficacité de traitement ou d'actif cosmétique pour le soin de la peau.
Egalement, un biomarqueur de l'invention peut avantageusement être mis en œuvre comme indiqué précédemment pour évaluer l'efficacité d'un agent actif, in vitro, ex vivo ou in vivo.
Egalement, un biomarqueur de l'invention peut être mis en œuvre pour établir un conseil personnalisé d'un traitement cosmétique pour un individu en fonction de son profil d'expression de biomarqueurs cutanés. Selon encore un autre de ses objets, la présente invention concerne l'utilisation (i) d'au moins une séquence d'acides aminés de l'invention, ou (ii) d'une séquence d'acides nucléiques de l'invention, pour cribler des agents actifs susceptibles de moduler l'activité, l'expression ou la maturation de ladite séquence d'acides aminés ou de ladite séquence d'acides nucléiques.
Au sens de l'invention on entend par « expression » à l'égard d'une séquence d'acides aminés, par exemple une protéine ou un peptide, ou d'une séquence d'acides nucléiques, par exemple un ARNm, sa teneur ou la variation de sa teneur par rapport à une référence.
Au sens de l'invention on entend par « maturation » à l'égard d'une séquence d'acides aminés, par exemple une protéine ou un peptide, ou d'une séquence d'acides nucléiques, par exemple un ARNm, les modifications qui suivent leur synthèse dans un environnement cellulaire. Par exemple, dans le cas d'une séquence d'acides aminés, on entend par « maturation », les modifications post-traductionnelles, telle la glycosylation ou la farnésylation de certains acides aminés, ou les étapes protéolytiques conduisant à l'élimination de séquences dites « signal » ou « sécrétoire » ou à la libération de séquences présentant des propriétés biologiques particulières. Dans le cas d'une séquence d'acides nucléiques, on entend par « maturation », par exemple, l'épissage alternatif d'un ARNm.
Au sens de l'invention on entend par « activité », à l'égard d'une séquence d'acides aminés, par exemple une protéine ou un peptide, l'activité biologique de la séquence d'acides aminés, le cas échéant après maturation, telle qu'une activité enzymatique, une activité d'agoniste ou d'antagoniste vis-à-vis d'un récepteur, ou d'activateur ou d'inhibiteur d'une enzyme, une activité dite de « structure », ou une activité antimicrobienne .
Au sens de l'invention on entend par « activité », à l'égard d'une séquence d'acides nucléiques, par exemple un ARNm, sa traduction.
Selon un autre de ses objets, la présente invention concerne l'utilisation (i) d'au moins une séquence d'acides aminés de l'invention, ou (ii) d'au moins une séquence d'acides nucléiques de l'invention, pour caractériser l'efficacité d'un traitement de la peau acnéique et/ou grasse ou à tendance acnéique et/ou grasse. Egalement, selon un autre avantage, la présente invention permet de proposer de nouveaux agents actifs convenant à la prévention et/ou au traitement des peaux acnéique et/ou grasse ou à tendance acnéique et/ou grasse. Criblage
Il existe encore un besoin de disposer de nouveaux outils de criblage d'agents actifs convenant au soin de la peau, et plus particulièrement utiles pour prévenir et/ou traiter la peau acnéique et/ou grasse ou à tendance acnéique et/ou grasse.
La présente invention a pour objet de satisfaire à ces besoins.
Selon un de ses aspects, la présente invention concerne l'utilisation d'une séquence d'acides aminés, d'acides nucléiques de l'invention, pour cribler ou dans un procédé de criblage, en particulier in vitro ou ex vivo, d'agents actifs, convenant particulièrement au soin de la peau.
Les agents actifs criblés peuvent notamment convenir au soin de la peau à tendance acnéique et/ou grasse, et/ou à la prévention et/ou au traitement de l'acné, de la peau grasse et des imperfections.
Une utilisation ou un procédé de l'invention peuvent comprendre la comparaison d'une mesure de l'activité, de l'expression ou de la maturation d'une séquence d'acide aminés ou d'une séquence d'acides nucléiques conforme à l'invention à une mesure de référence.
Une mesure de référence peut être telle que définie précédemment.
En particulier une mesure de référence peut être une valeur quantitative ou qualitative relative à l'expression, la maturation ou l'activité desdites séquences déterminée dans un échantillon en l'absence d'agent actif testé.
Ainsi, une mesure de référence peut être obtenue en réitérant les étapes d'un procédé de l'invention, et notamment les étapes a), b) et c) d'un procédé de l'invention tel que défini précédemment, en l'absence de composés biologiques ou chimiques à tester.
Une comparaison de la mesure test à une mesure de référence, et une observation d'une déviation ou d'une absence de déviation entre les deux mesures, permet de tirer une information quant à l'effet de l'agent actif testé.
La détermination quantitative ou qualitative de l'expression, de la maturation ou de l'activité d'une séquence d'acides aminés ou d'une séquence d'acides nucléiques de l'invention peut être effectuée par toute méthode connue de l'homme de l'art, et notamment comme décrit précédemment.
Selon un mode de réalisation, le criblage d'un agent actif susceptible de moduler l'activité d'une séquence d'acides aminées de l'invention peut se faire par mesure de l'activité ou de l'expression d'une molécule cible appartenant aux voies de signalisation ou de métabolisme dans lesquelles peut être impliqué ladite d'une séquence d'acides aminées, tel que par exemple un système de gène reporteur.
Selon un mode de réalisation, un procédé de l'invention peut être mis en œuvre dans un système acellulaire, i.e. dans un système ne comprenant pas de cellules mais reproduisant des fonctions cellulaires, ou dans un échantillon cellulaire isolé.
Un procédé conforme à l'invention peut être effectué sur un échantillon cellulaire isolé, un échantillon acellulaire, sur une séquence d'acides aminés isolée ou sur une séquence d'acides nucléiques isolée de l'invention, obtenus par biopsie cutanée, à partir de cellules en culture, notamment à partir d'un modèle épidermique, ou d'un prélèvement de surface cutané non-invasif, notamment par adhésif (« tape-stripping ») de stratum corneum ou par simple lavage, comme décrit précédemment.
Avantageusement, à titre d'échantillon cellulaire convenant à l'invention, on peut mentionner un échantillon de kératinocytes ou tout autre type cellulaire de la peau exprimant une séquence d'acides aminés de l'invention.
De manière préférée, le criblage d'un agent actif peut être effectuée par mesure de la variation de l'expression, en présence et en absence de l'agent actif criblé, d'une séquence d'acides aminées de l'invention, et de préférence représentée par une séquence choisie parmi SEQ ID NO: 16, SEQ ID NO: 17, ou SEQ ID NO: 18, un analogue ou un fragment de celle-ci.
Les agents actifs issus d'un criblage selon l'invention peuvent être avantageusement utilisés à des fins cosmétiques ou thérapeutique, notamment pour le soin de la peau à tendance acnéique et/ou grasse ou pour le traitement de la peau acnéique et/ou grasse. Selon un mode de réalisation, un agent actif de à l'invention peut être un agent stimulateur de l'activité, de l'expression ou de la maturation d'une séquence d'acides aminées de l'invention.
A titre d'agent modulateur susceptible d'être criblé selon une utilisation ou un procédé conforme à l'invention, on peut également mentionner les anticorps, ou les ARN interférents.
Au sens de la présente invention, « un » doit se comprendre, sauf indication contraire, au sens de « au moins un ».
Les exemples et figures ci-après sont présentés à titre illustratif et non limitatif de l'invention.
EXEMPLES
Exemple 1
Détermination de l'activité inhibitrice de la Dermicidine sur la croissance de P.acnes. Une microméthode a été développée en microplaque.
Le principe de l'essai repose sur la mise en contact de concentrations décroissantes de peptide antimicrobien (DCD-1L) avec un inoculum identique de P.acnes dans un milieu de culture propice à la croissance de P.acnes. Après incubation de la microplaque 48h avec la souche P. acnés, la Densité Optique de l'échantillon (620 nm) est mesurée et les résultats sont exprimés en pourcentage de croissance calculé par rapport à un témoin de croissance sans peptide antimicrobien (témoin négatif).
De plus on met aussi en contact avec du trichlosan afin d'avoir un témoin positif.
La concentration minimale inhibitrice ou CMI est la plus petite concentration d'antibiotique suffisante pour inhiber, au laboratoire c'est-à-dire in vitro, la croissance d'une souche de bactéries (colonie bactérienne).
La gamme de concentrations choisie allait de 5 à 100 μg/mL.
Chaque concentration a été testée en triplicat.
L'activité inhibitrice des peptides a été évaluée sur le germe suivant : - P. acnés A TCC 6919 (bactérie à Gram+)
On observe que la croissance de P. acnés est fortement inhibée en présence d'une concentration faible du peptide DCDIL.
Exemple 2 : composition cosmétique
On prépare une composition cosmétique comprenant les ingrédients suivants (% pondéraux) :
Dermcidin 1 antioxydant 0,05 isopropanol 40,0 conservateur 0,30 eau qsp 100 % Exemple 3 : composition pharmaceutique
On prépare une composition thérapeutique comprenant les ingrédients suivants (% pondéraux) :
Dermicidine 5,00 Isopropanol 40,00
Conservateur 0,30
Eau qsp 100 %
Exemple 4 : Crème pour le soin du visage
On prépare une composition cosmétique comprenant les ingrédients suivants (% pondéraux) :
Arachidyl behenyl alcohol/arachidylglusoside 2,0
Isohexadecane 7,0
Dermicidine 5,00
Glycérine 2,0
Eau qsp 100%
BIBLIOGRAPHIE
Anderson, R. K. and W. L. Kenney (1987). « Effect of age on heat-activated sweat gland density and flow during exercise in dry heat » J. Appl. Physiol. 63(3): 1089- 1094.
Baechle, D., T. Flad, et al. (2006). « Cathepsin D is présent in human eccrine sweat and involved in the postsecretory processing of the antimicrobial peptide DCD-1L » J. Biol. Chem. 281(9):5406-5415.
Cunningham, T. J., L. Hodge et al. (1998) « Identification of a survival- promoting peptide in médium conditioned by oxidatively stressed cell lines of nervous System origin » J. Neurosci 18(18):7047-7060.
Flad, T., R. Bogumil et al. (2002) « Détection of dermcidin-derived peptides in sweat by ProteinChip Technology. » J. Immunol. Methods 270(1): 53-62.
Kenney, W. L. and S. R. Fowler (1988) « Methylcholine-activated eccrine sweat gland density and output as a function of age » J. Appl. Physiol. 65(3): 1082-1086.
Kyte et al., (1982), J. Mol. Biol, 157: 105.
Mehul B. et al, (2000) « Identification and Cloning of a New Calmodulin-like Protein from Human Epidermis » J. Biol. Chem. 275(17): 12841-12847
Moreira, D. F, B. E. Strauss et al. (2008) « Gènes up- and down-regulated by dermcidin in breast cancer: a microarray analysis » Genêt. Mol. Res. 7(3): 925-932.
Niyonsaba, F. A. Suzuki et al. (2009) « The human antimicrobial peptide dermcidin activâtes normal human keratinocytes » Br. J. Dermatol. 160(2): 243-249.
Rieg, S.C., Garbe et al. (2004) « Dermcidin is constitutively produced by eccrine sweat gland and is not induced in epidermal cells under inflammatory skin conditions » Br. J. Dermatol. 151(3): 534-539.
Rieg S., II Steffen et al. (2005) « Defïciency of dermcidin-derived antimicrobial peptides in sweat of patients with atopic dermatitis correlates with an impaired innate défense of human skin in vivo » J. Immunol. 174(12):8003-8010.
Sakurada K., T. Akutsu, et al., (2009) « Détection of dermcidin for sweat identification by real-time RT-PCR and ELISA » Forensic. Sci. Int. 2010 Jan. 30;194(1- 3):80-4. Epub 2009 Nov. 13. Sambrook et al., 1989, Vol. I-III, Coldspring Harbor Laboratory, Coldspring Harbor Press, NY.
Schittek, B, R. Hipfel et al. (2001) : « Dermcidin: a novel human antibiotic peptide secreted by sweat glands » Nat. Immunol. 2(12): 1133-11137.
Watchorn, T. M. N. Dowidar et al. (2005) « The chachectic mediator proteolysis inducing factor activâtes NF-kappaB and STAT3 in human Kupffer cells and monocvtes » Int. J. Oncol. 27(4): 1105-1111.
Wiese et al., (2007) « Protein labeling by iTRAQ: A new tool for quantitative mass spectrometry in proteome research » Proteomics 7(3):340-350
Zieske et al. (2006) « A perspective on the use of iTRAQ reagent technology for protein complex and profïling studies » J. Exp. Bot. 57(7): 1051-1058.

Claims

REVENDICATIONS
1. Utilisation d'au moins une séquence d'acides aminés ou d'une composition la contenant choisie parmi SEQ ID NO 11 à SEQ ID 20, un analogue ou un fragment de celle-ci pour le traitement de la peau à tendance acnéique et/ou grasse et/ou la prévention d'apparition d'imperfections.
2. Utilisation (i) d'au moins une séquence d'acides aminés ou d'une composition la contenant choisie parmi SEQ ID NO 11 à SEQ ID NO 20 un analogue ou un fragment de celles-ci, ou (ii) d'au moins une séquence d'acides nucléiques choisie parmi SEQ ID NO 1 à SEQ ID NO 10, ou (iii) d'au moins un agent modulateur de l'activité, de l'expression ou de la maturation de ladite séquence d'acides aminés ou de ladite séquence d'acides nucléiques pour le traitement et/ou la prévention de la peau acnéique et/ou grasse ou la prévention d'apparition d'imperfections.
3. Utilisation selon la revendication 1 ou 2, dans laquelle ladite séquence d'acides aminés choisie parmi SEQ ID NO: 11 à SEQ ID NO: 20, un analogue ou un fragment de celles-ci est choisie parmi SEQ ID NO: 16, SEQ ID NO: 17, SEQ ID NO: 18, SEQ ID NO : 19, SEQ ID NO : 20, un analogue ou un fragment de celle-ci.
4. Utilisation selon l'une quelconque des revendications précédentes dans laquelle ladite séquence d'acides aminés choisie parmi SEQ ID NO: 16, SEQ ID NO: 17, SEQ ID NO: 18, SEQ ID NO : 19, SEQ ID NO : 20, un analogue ou un fragment de celle-ci, est la SEQ ID NO 20, un analogue ou un fragment de celle-ci.
5. Utilisation selon la revendication 2, caractérisée en ce que ladite séquence d'acide nucléique choisie parmi SEQ ID NO 1 à SEQ ID NO 10, un analogue ou un fragment de celles-ci, est de préférence choisie parmi SEQ ID NO: 6, SEQ ID NO: 7, SEQ ID NO: 8, SEQ ID NO : 9, SEQ ID NO : 10.
6. Utilisation selon la revendication 2 ou 5, caractérisée en ce que ladite séquence d'acide nucléique choisie parmi SEQ ID NO: 6, SEQ ID NO: 7, SEQ ID NO: 8, SEQ ID NO : 9, SEQ ID NO : 10, un analogue ou un fragment de celle-ci est la SEQ ID NO 10, un analogue ou un fragment de celle-ci.
7. Utilisation selon l'une quelconque des revendications précédentes, caractérisée en ce que ladite au moins une séquence d'acides aminés représente de 0,00001
% à 5 % du poids total de la composition, en particulier de 0,001 % à 5 % du poids total de la composition, et plus particulièrement en une quantité représentant de 0,001 % à 1 % du poids total de la composition.
8. Procédé pour prévenir l'apparition d'imperfections et/ou prévenir et/ou traiter une peau acnéique et/ou grasse et/ou à tendance acnéique et/ou grasse chez un individu en ayant besoin, comprenant au moins une étape consistant à administrer audit individu, au moins une composition comprenant à titre d'agent actif (i) au moins une séquence d'acides aminés telle que définie en revendications 1 à 7, ou (ii) au moins une séquence d'acides nucléiques telle que définie en revendications 2 à 7, ou (iii) au moins un agent modulateur de l'activité, de l'expression ou de la maturation desdites séquences.
9. Utilisation selon l'une quelconque des revendications précédentes caractérisée en ce que ladite composition est une composition cosmétique ou pharmaceutique, notamment dermatologique.
10. Utilisation (i) d'au moins une séquence d'acides aminés choisie parmi SEQ
ID NO 11 à SEQ ID NO 20 et de façon préférée est le SEQ ID NO 20, un analogue ou un fragment de celle-ci, ou d'au moins une séquence d'acides nucléiques choisie parmi SEQ ID NO 1 à SEQ ID NO 10 et de façon préférée est le SEQ ID NO 10, un analogue ou un fragment de celle-ci, à titre de biomarqueur d'une peau acnéique et/ou grasse ou à tendance acnéique et/ou grasse.
11. Procédé in vitro ou ex vivo pour caractériser un état acnéique et/ou gras de la peau d'un sujet comprenant au moins les étapes consistant à :
a) effectuer, dans un échantillon isolé d'une peau d'un sujet, une mesure qualitative ou quantitative de l'expression, de la maturation ou de l'activité du biomarqueur tel que défini dans la revendication 10, et b) comparer ladite mesure effectuée à l'étape a) à une mesure de référence. c) Conclure qu'une diminution de l'activité, de l'expression ou de la maturation dudit biomarqueur par rapport à ladite mesure de référence est indicative d'une peau acnéique et/ou grasse ou à tendance acnéique et/ou grasse chez le sujet.
12. Utilisation (i) d'au moins une séquence d'acides aminés telle que définie en revendications 1 à 4, ou (ii) d'au moins une séquence d'acides nucléiques tel que définie en revendications 2, 5 et 6, pour cribler des agents actifs susceptibles de moduler l'activité, l'expression ou la maturation de ladite séquence d'acides aminés ou de ladite séquence d'acides nucléiques, lesdits agents actifs étant alors des candidats pour le traitement et/ou la prévention de la peau acnéique et/ou grasse et/ou à tendance acnéique et/ou grasse ou la prévention d'apparition d'imperfections.
13. Procédé de criblage in vitro ou ex vivo d'agents actifs susceptibles de traiter et/ou de prévenir la peau acnéique et/ou grasse et/ou à tendance acnéique et/ou grasse et/ou prévenir l'apparition d'imperfections, moduler l'activité, l'expression ou la maturation d'une séquence d'acides aminés telle que définie en revendications 1 à 4, ou d'une séquence d'acides nucléiques telle que définie en revendications 2, 5 et 6, comprenant au moins les étapes consistant à :
a) disposer ladite séquence d'acides aminés ou ladite séquence d'acides nucléiques dans des conditions propices à l'activité, l'expression ou la maturation desdites séquences,
b) mettre en contact ladite séquence d'acides aminés ou ladite séquence d'acides nucléiques avec au moins un agent actif à tester,
c) effectuer une mesure qualitative ou quantitative de l'expression, de la maturation ou de l'activité de ladite séquence d'acides aminés ou de ladite séquence d'acides nucléiques, et d) comparer ladite mesure à une mesure de référence.
e) Conclure que l'augmentation de l'activité ou de l'expression ou de la maturation d'une séquence d'acide aminé conforme à l'invention est indicative de l'efficacité dudit agent actif pour prévenir ou traiter la peau à tendance acnéique ou acnéique ou prévenir l'apparition d'imperfections.
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US20120213764A1 (en) * 2009-09-25 2012-08-23 B.R.A.I.N. Biotechnology Research And Information Network Ag Novel method for the production of a antimicrobial peptide
EP2618808B1 (fr) * 2010-09-24 2016-09-21 L'Oréal Utilisation cosmétique de la dermcidine ou fragments de celle-ci

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