FR2992647A1 - Derives de glycosides, leur preparation et leur utilisation comme groupes prosthetiques - Google Patents

Abstract

La présente invention concerne des composés dérivés de glycosides, leurs procédés de préparation, et leur utilisation comme groupes prosthétiques pour le radiomarquage de biomolécules. Ces composés sont des omega-azido-alkyl 6-deoxy -6-[ F]-fluoro-glycosides de formule (I) : où : - k est égal à 2 ou 3 ; - n est un nombre entier compris entre 1 et 5 ; - R est indépendamment H, un groupe alkyle en C - C , m étant un nombre entier compris entre 0 et 2 si k=2 et m compris entre 0 et 3 si k=3; et - X est choisi parmi le groupe comprenant O, S, CH , NR' où R' est indépendamment un groupe alkyle en C - C , un groupe aryle, y compris tous leurs stéréoisomères.

Description

99264 7 1 La présente invention concerne des nouveaux composés à base de sucres, et plus particulièrement dérivés de glycosides, leurs procédés de préparation, et leur utilisation comme groupes prosthétiques pour le radiomarquage de biomolécules.

Le suivi et l'évolution de molécules dans l'organisme grâce à l'imagerie TEP (topographie par émission de positons) nécessite de disposer de la molécule marquée par un atome émetteur de positons comme le fluor-18 (18F). Le marquage au 18F de biomolécules (protéines, peptides ou oligonucléotides) est utilisé depuis plusieurs années. En effet selon leur nature les biomolécules sont sélectives de cibles précises qui permettent un diagnostic pointu. Cependant la fragilité de ces macromolécules ne permet pas leur radiomarquage par incorporation directe de 18F. La solution est de recourir à un groupe prosthétique, petite molécule facilement radiomarquable, lié ensuite à la biomolécule. Il existe actuellement plusieurs groupes prosthétiques utilisés qui diffèrent par leur nature et par leur méthode d'accrochage. Plusieurs types de groupes prosthétiques sont décrits dans la littérature, comme par exemple le [18F]FSB (N-succinimidyl-4-[18F]- fluorobenzoate) ou le [18F]FpyMe (143-2(2418F]fluoropyridin-3- yloxy)propyl]pyrrole-2,5-dione). Une contrainte importante dans ce domaine demeure la faible durée de vie de l'atome de 18F qui impose des réactions et des purifications très rapides. L'utilisation de plus en plus importante de ces biomolécules radiomarquées nécessite de proposer de nouveaux groupes prosthétiques plus simples et d'accès très rapide afin de radiomarquer efficacement au fluor-18 ces biomolécules. La publication « A series of 2-O-trifluoromethylsulfonyl-D-mannopyranosides as precursors for concomitant 18F-labeling and glycosylation by click chemistry » de Simone Maschauer, Olaf Prante ; Carbohydrate Research 344 (2009) 753-761 décrit des groupes prosthétiques à base de sucre, et plus particulièrement des sucres fluorés en position 2 et azidés en position anomère, utilisant une réaction de « click chemistry » pour le couplage à une biomolécule. Toutefois, il est nécessaire d'utiliser des précurseurs mannosyles pour obtenir une molécule de glucose fluorée en position 2. De plus, les résultats de marquage par le fluor 18 ne sont concluants que pour un seul type de molécule proposée (précurseur 213). Il est donc nécessaire de proposer de nouvelles molécules à base de sucres pouvant être utilisées comme groupes prosthétiques simples et permettant d'obtenir des rendements d'incorporation de fluor 18 très élevés indépendamment de la géométrie du sucre, tout en conservant la stéréochimie dudit sucre. Un autre but de la présente invention est de proposer de nouvelles molécules à base de sucres pouvant être utilisées comme groupes prosthétiques simples permettant un radiomarquage plus aisé des biomolécules et d'obtenir une meilleure biodisponibilité des biomolécules radiomarquées, de manière à faciliter et améliorer le diagnostic. A cet effet, et conformément à la présente invention, il est proposé de nouveaux composés w-azido-alkyl 6-deoxy-6[18F]-fluoro-glycosides de formule (I) 18F (OR), ( 1-12 X (\n N3 (I) où : - k est égal à 2 ou 3 ; - n est un nombre entier compris entre 1 et 5 ; - R est indépendamment H, un groupe alkyle en Ci - C5, m étant un nombre entier compris entre 0 et 2 si k=2 et m compris entre 0 et 3 si k=3; et - X est choisi parmi le groupe comprenant O, S, CH2, NR' où R' est indépendamment un groupe alkyle en Ci - C5, un groupe aryle, y compris tous ses stéréoisomères.

Plus particulièrement, les composés selon l'invention peuvent être à base de pentofuranose et répondent à la formule (la) : 18F X (\ri (OR)m N3 (la) où n, R, X et m sont définis ci-dessus, y compris tous ses stéréoisomères. D'autres composés selon l'invention peuvent être à base de hexopyranose et répondent à la formule (lb) : 18F O x (r.1 (OR)m N3 (lb) où n, R, X et m sont définis ci-dessus, y compris tous ses stéréoisomères. Parmi ces composés, des composés préférés selon l'invention sont les composés de formule (Il) : 0\ N, (Il) OH y compris tous ses stéréoisomères, et plus particulièrement les composés : - à base de glucose a et 13 (lla) 18F OH 0\ N, (lla) HO HO - à base de mannose (11b) 18F HO HO 0 N3 \ V (11b) - à base de galactose a et 13 (Iic) 0 N, \ y .., (IIC) OH OH La présente invention concerne également un procédé de synthèse d'un composé tel que défini ci-dessus, ledit procédé comprenant : - la formation, en position anomère, sur un composé à base d'hexopyranose ou de pentofuranose, d'un bras espaceur alkyle en C2-06 terminé par un groupe azide ; - l'introduction d'un groupe partant en position 6 et de groupes protecteurs sur les autres positions ; - l'incorporation de fluor en position 6 ; et - la déprotection des autres positions. Avantageusement, l'introduction d'un groupe partant en position 6 et de groupes protecteurs sur les autres positions comprend l'introduction d'un premier groupe protecteur en position 6 et d'un second groupe protecteur sur les autres positions, la déprotection du premier groupe protecteur en position 6 par un groupe hydroxyle, et l'introduction du groupe partant en position 6. De préférence, le premier groupe protecteur est un éther de trityle et le second groupe protecteur est un acétate. Avantageusement, le groupe partant est choisi parmi le groupe comprenant le tosylate et le triflate.

Le groupe partant tosylate peut être introduit directement en position 6, sans étape intermédiaire de protection de la position 6 par un groupe trityle.

De préférence, le groupe partant est le triflate. Selon différentes variantes de réalisation, le composé à base d'hexopyranose ou de pentofuranose est choisi parmi les hexopyranoses, les pentofuranoses, et leurs acétates anomères.

Ainsi, les réactifs de départ peuvent être les hexopyranoses et les pentofuranoses sur lesquels on applique la glycosylation de Fischer, ou les glycosylation à partir des acétates anomères en présence d'acides de Lewis , choisis par exemple parmi le groupe comprenant BF3-Et20, le triflate de trimethylsilyle, les sels de lanthanides (Yb, La, Yt, etc.), et plus particulièrement les triflates ou halogénures de lanthanides. La présente invention concerne également les molécules intermédiaires de formule (III) : où : - Y est indépendamment un premier groupe protecteur différent de l'acétate, un groupe partant, F, 18F, OH ; - R" est choisi de sorte que OR" forme un second groupe protecteur; - k est égal à 2 ou 3 ; - n est un nombre entier compris entre 1 et 5 ; - m est un nombre entier compris entre 0 et 2 si k=2 et compris entre 0 et 3 si k=3; y compris tous ses stéréoisomères. Parmi ces composés, des molécules intermédiaires préférées selon l'invention sont les molécules intermédiaires de formule (IV) : Y (OR"),' ( 1-12 k 2 99264 7 6 R"Q R '0 0 Nhk \ y ., OR" (IV) où : - R" est un groupe acétyle - Y est indépendamment un premier groupe protecteur différent de 5 l'acétate, un groupe partant, F, 18F, OH y compris tous ses stéréoisomères. De préférence, le premier groupe protecteur est un éther de trityle. De préférence, le second groupe protecteur est un acétate. De préférence, le groupe partant est choisi parmi le groupe comprenant le 10 tosylate et le triflate. La présente invention concerne les composés de formule I, la, lb, Il, Ila, Ilb, Ilc, pour une utilisation comme groupe prosthétique destiné à être couplé à une biomolécule par cycloaddition de son groupe azide avec un groupe alcyne terminal prévu sur ladite biomolécule, selon une réaction de couplage 15 par « click chemistry ». De telles réactions, de type Huisgen, sont connues de l'homme du métier et ne seront pas décrites ici en détails. La présente invention concerne également l'utilisation d'un composé de formule I, la, lb, Il, Ila, Ilb, Ilc, pour le radiomarquage d'une biomolécule sur laquelle est prévu un groupe alcyne terminal. 20 De telles biomolécules sont par exemple des protéines, peptides ou oligonucléotides, qui peuvent être modifiées pour introduire une fonction alcyne terminale. Plus particulièrement, de telles biomolécules peuvent être les peptides comportant la séquence Arginine-Glycine-Acide Aspartique ou la bombésine pour la détection de cancers, des peptides impliqués dans 25 l'inflammation tels que décrits dans la demande WO 2005/071408, ou des chaînes d'anticorps. Il est bien entendu que la présente invention englobe tous les stéréo-isomères et les isomères optiques de toutes les formules représentées, purs ou en mélanges.

Les composés selon l'invention permettent : - d'utiliser les procédés, voire les automates, déjà utilisés pour la préparation du [18F]fluorodeoxyglucose (FDG) composé fabriqué en routine dans tous les centres d'imagerie TEP. - de tirer parti de l'amélioration des paramètres pharmacologiques du radiotraceur par la présence du sucre (augmentation de l'hydrophilie, réduction de la liaison aux protéines plasmatiques, réduction de la captation hépatique et des captations spécifiques, meilleure captation tumorale et excrétion rénale, etc.).

Le procédé selon l'invention présente l'avantage de pouvoir être applicable à tous les hexopyranoses et pentofuranoses, et notamment à un hexopyranose courant comme le glucose, et de pouvoir conserver la stéréochimie dudit sucre. De plus, le procédé selon l'invention permet d'obtenir des rendements d'incorporation de fluor 18 très élevés indépendamment de la géométrie du sucre, ce qui est primordial lors des radiosynthèses. Plus particulièrement, les rendements d'incorporation de fluor 18 sont élevés et similaires, que ce soit sur du mannose, du glucose en position a ou p ou du galactose en position a ou R.

L'utilisation de groupes prosthétiques à base de sucres présente l'avantage d'augmenter la biodisponibilité de la biomolécule radiomarquée et de permettre ainsi une meilleure distribution et l'obtention d'images TEP plus performantes. De plus la méthode de couplage par « click chemistry » permet de réaliser les réactions de couplage dans un temps très court avec de très bons rendements, ce qui est primordial en radiochimie. Ainsi, toutes les étapes de synthèse et de radiosynthèse du procédé de l'invention et de couplage sur la biomolécule permettent d'obtenir des rendements élevés comparables à ceux obtenus avec des groupes prosthétiques standards.

Les exemples suivants illustrent la présente invention sans toutefois en limiter la portée.

I : Synthèse des groupes prosthétiques Le schéma ci-dessous indique la synthèse générale des dérivés 2'- azidoéthy1-6-fluoro-glycopyranosides, par glycosylation via l'acétate anomère : AcO AcO Ac0 O Br-CH2CH2OH AcO Ac0 OAc . Ac0 0 Br BF3-Et20 OAc \__/ 1 2 3 4 AcOH H20 (CF3S0)20 ... H2O N3 0 N3 \__/ Me0H OAc HO HO Me0Na HO HO 1) TrCI, DMAP Pyridine, TA 2) Ac20 OAc NaN3 DMF AcO 0 N 3 \__/ Me0H Me0Na 7 X = CF3SO2O 8 X = 4MePhSO2O 9 X = F X = 18F 5 6 HO 11 X = F 12 X = 18F Selon une autre variante, le composé 2 peut être obtenu à partir du sucre 10 correspondant par glycosylation de Fischer selon un exemple ci-dessous : Ac0 1) BrCH2CH2OH, H+ Ac0 OH AcO \__/ 0 Br OH 2 Ac20, pyridine OAc 13 2 Dans les exemples de synthèse indiqués ci-dessous, il est donné, pour chaque étape, un mode opératoire général d'un composé référencé X, ce mode opératoire étant valable pour l'ensemble des stéréoisomères correspondants obtenus référencés Xa, Xb, Xc, les stéréoisomères étant ensuite décrits séparément. Mode opératoire général pour la synthèse des composés 2 1) Glycosylation via les acétates anomères A une solution de composé 1, (7,8 g, 20 mmol) dans 210 mL de dichlorométhane sec dans un ballon de 500 mL, parcouru par un courant d'azote et refroidie à 0°C, sont ajoutés du 2-bromo-ethanol, (2 équivalents, 5g) puis goutte à goutte de l'étherate de trifluorure de bore (4 équivalents, 11,4 mL) sous forte agitation. La solution est réchauffée lentement à température ambiante en 3h. L'analyse en chromatographie sur couche mince (ccm) éluée par un mélange toluène-acétate d'éthyle 2/1 montre que la réaction est complète. De la triéthylamine est ajoutée goutte à goutte au milieu jusqu'à décoloration du mélange. Celui-ci est dilué par du dichlorométhane (300 mL). La phase organique est lavée à l'eau (2x 50 mL) puis séchée sur sulfate de magnésium. Le résidu obtenu après évaporation du solvant est purifié sur colonne de silice (éluant cyclohexane- acétate d'éthyle 7/3) pour donner le composé 2.

On obtient ainsi les composés: 2'-bromoéthy1-2,3,4,6-tetra-0-acétyl-13-D-glucopyranoside (2a) (7,75 g, 85%); 2'-bromoéthyl-2,3,4,6-tetra-O-acétyl-a-D-mannopyranoside (2b) (4,92 g 54%) 2'-bromoéthy1-2,3,4,6-tetra-0-acétyl-13-D-galactopyranoside (2c-I3) (4,55 g 50%). 2) Glycosylation de Fischer A une solution de composé glucose ou galactose (5 g, 27.7 mmol) dans 50 mL de 2-bromo-éthanol dans un ballon de 100 mL, parcouru par un courant d'azote, sont ajoutés 5 g d'amberlite IR-120 sous forte agitation. La solution est chauffée à 70°C pendant 24h. La solution est alors refroidie à température ambiante puis filtrée et rincée à l'éthanol. Le mélange réactionnel est ensuite évaporé sous pression réduite. Le résidu obtenu est purifié par flash chromatographie (éluant de 100% acétate d'éthyle à acétate d'éthyle-méthanol 80/20) afin d'éliminer le sucre n'ayant pas réagi. Le mélange a/8 est obtenu avec un rendement de 60% en série gluco ou 52% en série galacto. A une solution du composé précédent (4.1 g, 14.3 mmol) dans 200 mL de pyridine sous courant d'azote sont introduits 0,1 équivalent (eq) (430 mg, 3,5 mmol) de N,N-diméthylamino-4 pyridine (DMAP) et de l'anhydride acétique (50 mL). La solution est agitée pendant 1h à température ambiante. Le mélange réactionnel est ensuite concentré sous pression réduite et coévaporé au toluène. Le résidu est repris dans du dichlorométhane (300 mL) lavée à l'eau (50 mL) puis séchée sur sulfate de magnésium et évaporée. Le produit brut est purifié sur colonne de silice (cyclohexane/acétate d'éthyle : 60/40) pour donner le composé 2.

On obtient par exemple le composé 2'-bromoéthyl-2,3,4,6-tetra-O-acétyl-a- D-galactopyranoside (2c-a) (70%) et le composé 2'-bromoéthy1-2,3,4,6-tetra0-acéty1- 3-D-galactopyranoside (2c-8) (30%). Mode opératoire général pour la synthèse des composés 3 A une solution de composé 2, (7 g, 15.4 mmol) dans 200 mL de diméthylformamide dans un ballon de 500 mL, parcouru par un courant d'azote est ajouté de l'azidure de sodium, (3 équivalents, 3g) sous forte agitation. La solution est chauffée à 90°C durant 1h. L'analyse en chromatographie sur couche mince (ccm) éluée par un mélange toluène - acétate d'éthyle 3/1 montre que la réaction est complète. Le mélange est concentré sous vide et le résidu repris par du dichlorométhane (300 mL). La phase organique est lavée à l'eau (50 mL) puis lavée par une solution d'HCI 3M (5m1) puis à l'eau (2x 50mL), séchée sur sulfate de magnésium. Le résidu obtenu après évaporation du solvant est purifié sur colonne de silice (éluant cyclohexane- acétate d'éthyle 7/3) pour donner le composé 3. On obtient ainsi les composés: 2 99264 7 11 2'-azidoéthy1-2,3,4,6-tetra-0-acétyl-13-D-glucopyranoside (3a) (4,8 g, 69%); 2'-azidoéthyl-2,3,4,6-tetra-O-acétyl-a-D-mannopyranoside (3b) (4,5 g 67%); 2'-azidoéthy1-2,3,4,6-tetra-0-acétyl-13-D-galactopyranoside (3c-I3) (3,5 g 51%); 5 2'-azidoéthy1-2,3,4,6-tetra-0-acétyl-a-D-galactopyranoside (3c-a) (5,4 g 78%). Mode opératoire général pour la synthèse des composés 4 A une solution du composé 3 (7.76 g, 18.6 mmol) dans 110 mL de méthanol 10 anhydre sont ajoutés 2,5 mL d'une solution de méthylate de sodium 1M. Le milieu est agité à température ambiante pendant 2 heures, puis neutralisé par addition de résine (Amberlite IR-120), filtré et évaporé. Les produits sont utilisés directement dans l'étape suivante. 2'-azidoéthy1-13-D-glucopyranoside (4a) (rendement: 98%, huile limpide) ; 15 2'-azidoéthyl-a-D-mannopyranoside (4b) (rendement: 95%, solution jaune pale) ; 2'-azidoéthy1-13-D-galactopyranoside (4c-I3) (rendement: 99%, huile limpide) ; 2'-azidoéthyl-a-D-galactopyranoside (4c-a) (rendement: 99%, huile limpide). 20 Mode opératoire général pour la synthèse des composés 5 A une solution de composé 4 (8,6 g, 35 mmol) dans 200 mL de pyridine sous courant d'azote sont introduits 1,8 équivalents (17.61 g, 63 mmol,) de chlorure de trityle et 0,1 eq (430mg, 3,5 mmol) de DMAP. Le mélange est agité à température ambiante et la réaction suivie par ccm. Lorsque la 25 réaction est terminée, de l'anhydride acétique est ajouté (45 mL) et la solution est agitée pendant 3h. Le mélange réactionnel est ensuite concentré sous pression réduite et coévaporé au toluène. Le résidu est repris dans du dichlorométhane (300 mL) puis lavé à l'eau (50 mL). La phase organique est lavée avec une solution HCI 1M (5 mL), de l'eau (2x 50 mL), de soude 3M 30 (5mL), de l'eau (2x 50 mL) puis séchée sur sulfate de magnésium et évaporée. Le produit brut est purifié sur colonne de silice (hexane/acétate d'éthyle : 4/6). 2 99264 7 12 On obtient les composés: 2'-azidoéthy1-6-0-trity1-2,3,4-tri-O-acétyl-13-D-glucopyranoside 5a Rendement : 64%; Rf 0.45 (Hexane/AcOEt 60/40) ; solide blanc ; pf = 68°C ; 5 [a]p = +9.8 (1, CH2Cl2) ; IR : film (v, cm-1) : 2881, 2104, 1757, 1219. ; RMN1H, (CDCI3, 400 MHz) ô (ppm) : 1.75 (s, 3H, OAc), 2.00 (s, 3H, OAc), 2.07 (s, 3H, OAc), 3.12 (dd, 1H, J6,5 = 4.8 Hz, J6.6' = 10.5 Hz, H6), 3.28 (dd, 1H, J6',5 = 2.3 Hz, H6'), 3.30-3.35 (m, 1H, H8), 3.50-3.62 (m, 2H, H5, H8'), 3.78 (ddd, 1H, J7,5' = 3.0 Hz, J7,3 = 7.9 Hz, J7,7' = 10.9 Hz, H7), 4.05-4.15 (m, 1H, H7'), 10 4.61 (d, 1H, J1,2 = 7.5 Hz, H1), 5.05-5.22 (m, 3H, H2, H3, H4), 7.20-7.34 (m, 10H, H-Ar), 7.42-7.48 (m, 5H, H-Ar) ; RMN13C, (CDCI3, 100 MHz) ô (ppm) : 20.4 (OAc), 20.6 (OAc), 20.7 (OAc), 50.6 (C-8), 61.9 (C-6), 68.2 (C-7), 68.7 (C-4), 71.3 (C-2), 73.1 (C-5), 73.5 (C-3), 86.6 (Cq Tr), 100.8 (C-1), 127.1 (3C-Ar), 127.8 (6C-Ar), 128.7 (6C-Ar), 143.5 (3Cq-Ar), 168.9 (C=0), 169.5 15 (C=0), 170.4 (C=0) ; S.M. (ESI), 640 (M+Na)+; Analyse. calculé pour C33H35N309: C : 64.17 ; H : 5.71 ; N : 6.80. trouvé : C : 64.29 ; H : 5.80 ; N : 6.61. 2'-azidoéthy1-6-0-trity1-2,3,4-tri-0-acétyl-a-D-mannopyranoside 5b 20 Rendement : 67% ; Rf 0.4 (Cyclohex/AcOEt 60/40) ; solide blanc ; pf = 58°C ; [a]c) = +49.3 (1, CHCI3) ; IR : film (v, cm-1) : 3059, 2932, 2105, 1748, 1371 ; RMN1H, (CDCI3, 400 MHz) ô (ppm) : 1.76 (s, 3H, OAc), 1.99 (s, 3H, OAc), 2.16 (s, 3H, OAc), 3.19 (dd, 1H, J6,6' = 10.5 Hz, J5,6 = 5.3 Hz, H6), 3.23 (dd, 1H, J5,6' = 2.4 Hz, H6'), 3.41-3.55 (m, 2H, H8), 3.72 (ddd, 1H, J7,7' = 10.3 Hz, 25 J7,8 = 6.3 Hz, J7,3 = 3.9 Hz, H7), 3.95-4.00 (m, 2H, H5, H7'), 4.94 (d, 1H, J1,2= 1.5 Hz, H1), 5.27-5.37 (m, 3H, H2, H3, H4), 7.21-7.35 (m, 9H, H-Ar), 7.46 (dd, 6H, J = 8.5 Hz, J = 1.1 Hz, H-Ar) ; RMN13C, (CDCI3, 100 MHz) ô (ppm) : 21.0 (OAc), 21.1 (OAc), 21.3 (OAc), 50.8 (C-8), 62.8 (C-6), 66.8 (C-4), 67.1 (C-7), 69.6 (C-3 ou C-2), 70.1 (C-3 ou C-2), 71.0 (C-5), 87.0 (Cq Tr), 97.9 (C- 30 1), 127.4 (3C-Ar), 128.2 (6C-Ar), 129.1 (6C-Ar), 144.1 (Cq-Ar), 169.8 (C=0), 170.4 (C=0), 170.5 (C=0) ; S.M. (HR-ESI) calculé pour C33H35N3O9Na [M+Na]-' 640.2271, trouvé : 640.2336 ; Analyse. calculé pour C33H35N309: C : 64.17; H : 5.71 ; N: 6.80. trouvé : C : 64.30 ; H : 5.74 ; N : 6.69. 2'-azidoéthy1-6-0-trity1-2,3,4-tri-0-acétyl-a-D-galactopyranoside 5ca Rendement : 58%; Rf 0.4 (Cyclohexane/AcOEt 60/40) ; solide blanc ; RMN1H, (CDCI3, 400 MHz) ô (ppm) : 1.99 (s, 3H, OAc), 2.05 (s, 3H, OAc), 2.08 (s, 3H, OAc), 2.15 (s, 3H, OAc), 3.39 (ddd, 1H, J8,8' = 13.5 Hz, J7',8 = 6.0 Hz, J7,8 = 3.5 Hz, H8), 3.49 (ddd, 1H, J7,8' = 7.0 Hz, J7',8' = 3.5 Hz, H8'), 3.63 (ddd, 1H, J7,7' = 11.0 Hz, H7), 3.87 (ddd, 1H, H7'), 4.10 (app d, 2H, J5,6 = J6,6' = 6.5 Hz, H6), 4.10 (app dt, 1H, J4,5 = 1.0 Hz, H5), 5.14 (dd, 1H, J2,3 = 10.5Hz, J1,2 = 4.0 Hz, H2), 5.17 (d, 1H, H1), 5.37 (dd, 1H, J3,4 = 3.5 Hz, H3), 5.48 (dd, 1H, H4) ; RMN13C, (CDCI3, 62.9 MHz) ô (ppm) : 20.8 (2OAc), 20.8 (OAc), 20.9 (OAc), 50.6 (C-8), 61.9 (C-6), 66.7 (C-5), 67.5 (C-7), 67.6 (C-3), 68.0 (C-2), 68.2 (C-2), 96.7 (C-1), 170.1 (C=0), 170.3 (C=0), 170.5 (C=0), 170.7 (C=0) 2'-azidoéthy1-6-0-trity1-2,3,4-tri-O-acétyl-13-D-galactopyranoside 513 Rendement : 64%; Rf 0.45 (Cyclohexane/AcOEt 60/40) ; solide blanc ; [a]c) = +56.3 (1, CH2Cl2) ; IR : film (v, cm-1) : 2933, 2099, 1747, 1222; RMN1H, (CDCI3, 400 MHz) ô (ppm) : 1.90 (s, 3H, OAc), 1.99 (s, 3H, OAc), 2.06 (s, 3H, OAc), 3.11 (app t, 1H, J6,6'= 8.5 Hz, J5,6' = 8.0 Hz , H6'), 3.26 (ddd, 1H, J8,8' = 13.5 Hz, J7',8 = 4.5 Hz, J7,8 = 3.5 Hz, H8), 3.39 (dd, 1H, J5,6 = 6.0 Hz, H6), 3.45 (ddd, 1H, J7,8' = 8.5 Hz, J7',8'= 3.5 Hz, H8'), 3.64 (ddd, 1H, J7,7' = 10.5 Hz, H7), 3.82 (ddd, 1H, J4,5 = 0.5 Hz, H5), 4.01 (ddd, 1H, H7'), 4.53 (d, 1H, J1,2 = 8.0 Hz, H1), 5.06 (dd, 1H, J2,3= 10.5 Hz, J3,4= 3.5 Hz, H3), 5.18 (dd, 1H, H2), 5.57 (dd, 1H, H4), 7.26 (bt, 3H, J = 7.5 Hz, H-Ar), 7.30 (bt, 6H, J = 7.5 Hz, H-Ar), 7.37 (bd, 6H, J = 7.5 Hz, H-Ar) ; RMN13C, (CDCI3, 100 MHz) ô (ppm) : 20.7 (OAc), 20.8 (OAc), 20.9 (OAc), 50.7 (C-8), 60.9 (C-6), 67.4 (C- 4), 68.4 (C-7), 70.0 (C-2), 71.3 (C-3), 72.4 (C-5), 87.0 (Cq Tr), 101.2 (C-1), 127.3 (3C-Ar), 128.0 (6C-Ar), 128.7 (6C-Ar), 143.4 (3Cq-Ar), 169.7 (C=0), 170.0 (C=0), 170.3 (C=0) 2 99264 7 14 Mode opératoire général pour la synthèse des composés 6 Une solution de 25 mmol (15.38 g) du composé 5 dans 250 mL d'un mélange AcOH/ H2O (3:1) est chauffée à 80°C pendant 1h30. A la fin de la réaction suivie par ccm, le mélange réactionnel est concentré sous pression 5 réduite puis co-évaporé 4 fois avec 10 mL de toluène. Le produit brut est purifié sur colonne de silice (hexane/acétate d'éthyle 50/50 puis 30/70). On obtient les composés : 2'-azidoéthy1-2,3,4-tri-O-acétyl-13-D-glucopyranoside 6a 10 Rendement : 54% ; Rf 0.2 (Hex/AcOEt 60/40) ; solide blanc ; pf = 112°C ; [a]c) = -42.0 (1, CH2012) ; IR : film (v, cm-1) : 3457, 2924, 2105, 1755, 1218 ; RMN1H, (CDC13, 400 MHz) ô (ppm) : 2.01 (s, 3H, OAc), 2.05 (s, 6H, 2OAc), 3.29 (ddd, 1H, J3,7 = 3.4 Hz, J8,7 = 5.1 Hz, J8,8' = 13.4 Hz, H8), 3.40-3.78 (m, 5H, H5, 2H6, H7, H8'), 4.04 (ddd, 1H, J7',8' = 3.4 Hz, J7',7 = 10.6 Hz, H7'), 4.63 15 (d, 1H, J1,2= 7.9 Hz, H1), 4.97-5.09 (m, 2H, H4, H2), 5.27 (app t, 1H, J2,3= J3,4 = 9.5 Hz, H3) ; RMN13C, (CDC13, 100 MHz) ô (ppm) : 20.5 (OAc), 20.6 (OAc), 20.6 (OAc), 50.5 (C-8), 61.2 (C-6), 68.4 (C-7), 68.6 (C-4), 71.2 (C-2), 72.7 (C-5), 74.2 (C-3), 100.6 (C-1), 169.4 (C=0), 170.1 (C=0), 170.2 (C=0) ; S.M. ESI, 398 (M+Na)+ ; Analyse. calculé pour C14H21N309 : C : 44.80 ; H : 20 5.63 ; N : 11.19. trouvé : C : 45.19 ; H : 5.75 ; N : 10.88. 2'-azidoéthy1-2,3,4-tri-0-acétyl-a-D-mannopyranoside 6b Rendement : 75% ; Rf 0.15 (Hex/AcOEt 50/50) ; huile ; [a]c) = +44.8 (1, CHC13) ; IR : film (v, cm-1) : 3469, 2107, 1752, 1639, 1371 ; RMN1H, (CDC13, 25 400 MHz) ô (ppm) : 1.99 (s, 3H, OAc), 2.08 (s, 3H, OAc), 2.14 (s, 3H, OAc), 3.35-3.55 (m, 2H, H8), 3.60-3.70 (m, 3H, 2H6, 1H7), 3.80-3.95 (m, 2H, H5, H7'), 4.89 (d, 1H, J1,2 = 1.6 Hz, H1), 5.25 (app t, 1H, J4,5 = 10.2 Hz, H4), 5.28 (dd, 1H, J2,3 = 3.4 Hz, H2), 5.40 (dd, 1H, H3).; RMN13C, (CDC13, 100 MHz) ô (ppm) : 21.1 (OAc), 21.1 (OAc), 21.2 (OAc), 50.7 (C-8), 61.6 (C-6), 66.7 (C- 30 4), 67.3 (C-7), 69.0 (C-3), 69.8 (C-2), 71.4 (C-5), 98.1 (C-1), 170.2 (C=0), 170.4 (C=0), 171.3 (C=0) ; S.M. ESI, 398 (M+Na)+ ; Analyse. calculé pour C14H21N309: C : 44.80 ; H : 5.63 ; N : 11.19. trouvé : C : 44.02 ; H : 5.64 ; N : 10.71. 2'-azidoéthy1-2,3,4-tri-0-acétyl-a-D-galactopyranoside 6ca Rendement : 71%; Rf 0.18 (Cyclohexane/AcOEt 50/50) ; huile incolore ; [a]c) =-6.6 (1, CH2012); IR : film (v, cm-1) : 3483, 2937, 2109, 1747, 1230 ; RMN1H, (Acétone-D6, 400 MHz) ô (ppm) : 1.92 (s, 3H, OAc), 2.03 (s, 3H, OAc), 2.11 (s, 3H, OAc), 3.48 (ddd, 1H, J8,8' = 13.5 Hz, J7',8 = 6.0 Hz, J7,8 = 3.5 Hz, H8), 3.52-3.65 (m, 3H, 2H6 et H8'), 3.69 (ddd, 1H, J7,7' = 11.0 Hz, J7,8' = 7.0 Hz, H7), 3.92 (dd, 1H, J6,0H = 5.0 Hz et J6',0H = 7.0 Hz, OH), 3.96 (ddd, 1H, J7',8 = 3.5 Hz, H7'), 4.15 (app dt, 1H, J5,6 = 7.0 Hz, J4,5 = 1.0 Hz, H5), 5.08 (dd, 1H, J2,3 = 11.0 Hz, J1,2 = 3.5 Hz, H2), 5.16 (d, 1H, H1), 5.32 (dd, 1H, J3,4 = 3.5 Hz, H3), 5.51 (dd, 1H, H4) ; RMN13C, (Acétone-D6, 100 MHz) ô (ppm) : 20.6 (OAc), 20.7 (OAc), 20.7 (OAc), 51.2 (C-8), 60.9 (C-6), 68.0 (C-7), 68.7 (C-3), 68.9 (C-2), 69.1 (C-4), 70.3 (C-5), 97.2 (C-1), 170.3 (0=0), 170.8 (0=0), 170.8 (0=0) 2'-azidoéthy1-2,3,4-tri-O-acétyl-8-D-galactopyranoside 6c3 Rendement : 72%; Rf 0.20 (Cyclohexane/AcOEt 50/50) ; solide blanc ; [a]c) =+134.4(1, CH20I2) ; IR : film (v, cm-1) : 3440, 2924, 2099, 1747, 1222 ; RMN1H, (Acétone-D6, 400 MHz) ô (ppm) : 1.91 (s, 3H, OAc), 2.01 (s, 3H, OAc), 2.11 (s, 3H, OAc), 3.39 (ddd, 1H, J8,8' = 13.5 Hz, J7',8 = 5.5 Hz, J7,8 = 3.5 Hz, H8), 3.50 (ddd, 1H, J7,8' = 8.0 Hz, J7',8' = 3.5 Hz, H8'), 3.56 (app dt, 1H, J6,6' = 11.0 Hz, J5,6 = 7.0 Hz, J6,0H = 7.0 Hz, H6), 3.67 (ddd, 1H, J5,6'= 7.0 Hz, J6',OH = 5.0 Hz, H6'), 3.75 (ddd, 1H, J7,7' = 11.0 Hz, H7), 3.95 (dd, 1H, OH), 3.96 (app dt, 1H, J4,5 = 1.0 Hz, H5), 4.03 (ddd, 1H, H7'), 4.76 (d, 1H, J1,2 = 8.0 Hz, H1), 5.08 (dd, 1H, J2,3= 10.5 Hz, J3,4= 3.5 Hz, H3), 5.15 (dd, 1H, H2), 5.44 (dd, 1H, H4); RMN13C, (Acétone-D6, 100 MHz) ô (ppm) : 20.6 (OAc), 20.6 (OAc), 20.8 (OAc), 51.4 (C-8), 60.8 (C-6), 68.5 (C-4), 69.0 (C-7), 69.8 (C-2), 72.2 (C-3), 74.6 (C-5), 101.8 (C-1), 169.8 (C=0), 170.3 (0=0), 170.9 (0=0) Mode opératoire général pour la synthèse des composés 7 avec un triflate comme groupe partant A une solution de 0.47 mmol (150 mg) de composé 6 dans 2 mL de pyridine refroidie à -25°C sont ajoutés goutte à goutte 1eq (83 pL, 0.47 mmol,) d'anhydride triflique. La solution est agitée 10 min à -25°C puis ramenée à température ambiante pendant 10 min. Le mélange réactionnel est hydrolysé, puis extrait par CH2Cl2 (100 mL) lavé avec une solution aqueuse saturée de NaHCO3 (2 x 5 mL) puis avec de l'eau (10 mL). La phase organique est séchée sur MgSO4 puis évaporée sous pression réduite. Le produit brut est purifié sur colonne de silice (hexane/acétate d'éthyle 60/40). On obtient les composés : 2'-azidoéthy1-6-0-triflate-2,3,4-tri-O-acétyl-13-D-glucopyranoside 7a Rendement : 74% ; Rf 0.45 (Hex/AcOEt 60/40) ; solide blanc, pf = 101°C ; [a]p = -42.7 (1, CHCI3) ; IR : film (v, cm-1) : 2945, 2107, 1759, 1417, 1376, 1215 ; RMN1H, (CDCI3, 400 MHz) ô (ppm) : 2.02 (s, 3H, OAc), 2.06 (s, 3H, OAc), 2.07 (s, 3H, OAc), 3.30 (ddd, 1H, J8,8 = 13.4 Hz, J8,7' = 4.7 Hz, J3,7 = 3.2 Hz, H8), 3.51 (ddd, 1H, J8',7 = 8.5 Hz, J8',7' = 3.2 Hz, H8'), 3.70 (ddd, 1H, J7,7' = 10.7 Hz, H7), 3.87 (ddd, 1H, J5,4 = 9.4 Hz, J5,6' = 6.4 Hz, J5,6 = 2.7 Hz, H5), 4.05 (ddd, 1H, H7'), 4.50 (dd, 1H, J6,6' = 11.4 Hz, H6), 4.57 (dd, 1H, J6',6 = 11.4 Hz, J6',5 = 6.4 Hz, H6'), 4.65 (d, 1H, J1,2 = 8.0 Hz, H1), 4.98 (app t, 1H, J3,4 = 9.4 Hz, H4), 5.03 (dd, 1H, J2,3 = 9.4 Hz, H2), 5.26 (app t, 1H, H3); RMN13C, (CDCI3, 100 MHz) ô (ppm) : 20.9 (OAc), 20.9 (OAc), 21.0 (OAc), 50.9 (C-8), 68.8 (C-4 ou C-7), 69.1 (C-4 ou C-7), 71.2 (C-2), 71.9 (C-5), 72.6 (C-3), 73.9 (C-6), 100.9 (C-1), 118.9 (q, JC,F = 320.0 Hz, C-Tf), 169.7 (C=0), 170.0 (C=0), 170.5 (C=0) ; RMN19F, (CDCI3, 235 MHz) ô (ppm) : -74.7 ; S.M. (HR-ESI) calculé pour C15H20N3011F3SNa [M+Na]-' 530.0668, trouvé : 530.0660. 2'-azidoéthy1-6-0-triflate-2,3,4-tri-0-acétyl-a-D-mannopyranoside 7b Rendement : 70% ; Rf 0.32 (Hex/AcOEt 60/40) ; huile ; [a]c) = +42.9 (1, CHC13) ; IR : film (v, cm-1) : 2939, 2107, 1755, 1416, 1372, 1218 ; RMN1H, (CDCI3, 400 MHz) ô (ppm) : 1.99 (s, 3H, OAc), 2.08 (s, 3H, OAc), 2.15 (s, 3H, OAc), 3.44 (ddd, 1H, J8,8 = 13.4 Hz, J8,7 = 5.8 Hz, J8,7' = 3.3 Hz, H8), 3.50 (ddd, 1H, J8,7' = 7.0 Hz, J8',7 = 3.3 Hz, H8'), 3.68 (ddd, 1H, J7,7' = 10.5 Hz, H7), 3.87 (ddd, 1H, H7'), 4.15 (ddd, 1H, J5,4 = 10.0 Hz, J5,6' = 6.0 Hz, J5,6 = 2.4 Hz, H5), 4.51 (dd, 1H, J6,6' = 11.3 Hz, H6), 4.58 (dd, 1H, H6'), 4.88 (d, 1H, J1,2 = 1.5 Hz, H1), 5.22 (app t, 1H, J 3,4= 10.0 Hz, H4), 5.26 (dd, 1H, J2,3 = 3.4 Hz, H2), 5.38 (dd, 1H, H3) ; RMN13C, (CDCI3, 100 MHz) ô (ppm) : 21.0 (2C, OAc), 21.2 (OAc), 50.7 (C-8), 66.2 (C-4), 67.7 (C-7), 68.8 (C-3), 68.9 (C-5), 69.5 (C-2), 74.3 (C-6), 98.0 (C-1), 119.0 (q, ,Jc,F = 320.0 Hz, C-Tf), 170.0 (C=0), 170.3 (C=0), 170.4 (C=0) ; RMN19F, (CDCI3, 235 MHz) ô (ppm) : 74.6 ; S.M. (HR-ESI) calculé pour 015H20N3011F3SNa [M+Na]-' 530.0668, trouvé : 530.0659.

Mode opératoire général pour la synthèse des composés 8 avec un tosylate comme groupe partant A une solution de 0.27 mmol (100 mg) de composé 6 dans 2 mL de dichlorométhane sont ajouté 0.1 mL de triéthylamine et 2eq (105 mg, 0.54 mmol,) de chlorure de tosyle. La solution est agitée 3 heures à température ambiante. Le mélange réactionnel est évaporé sous pression réduite. Le produit brut est purifié sur colonne de silice (cyclohexane/acétate d'éthyle 60/40).

On obtient les composés : 2'-azidoéthy1-6-0-tosy1-2,3,4-tri-O-acétyl-13-D-glucopyranoside 8a Rendement : 78% Rf 0.5, Hexane/AcOEt 6:4. solide , pf = 114°C [a]D = -15.4 (1, CH2Cl2); IR : film (n, cm-1) : 2943, 2106 (N3), 1756, (C=0), 1218. RMN 1H, (CDCI3, 400 MHz) Ô (ppm) :1.97 (s, 3H, OAc), 1.98 (s, 3H, OAc), 2.02 (s, 3H, OAc), 2.45 (s, 3H, Me-Ts), 3.24 (ddd, 1H, J8,7' = 3.4 Hz, J8,7 = 4.9 Hz, J8,8' = 13.3 Hz, H8), 3.43 (ddd, 1H, J8',7 = 3.4 Hz, J8',7' = 8.1 Hz, J8',8 = 13.3 Hz, H8'), 3.64 (ddd, 1H, J7',8 = 3.4 Hz, J7',8 = 8.1 Hz, J7',7 = 10.9 Hz, H7'), 3.77 (ddd, 1H, J5,6 = 3.4 Hz, J5,6' = 5.4 Hz, J5,4 = 9.9 Hz, H5), 3.93 (ddd, 1H, J7,8' = 3.4 Hz, J7,8 = 4.9 Hz, J7,7' = 10.9 Hz, H7), 4.03-4.11 (m, 2H, H6), 4.54 (d, 1H, J1,2= 7.9 Hz, H1), 4.87-4.96 (m, 2H, H2, H4), 5.17 (app t, 1H, J = 9.4 Hz, H- 3), 7.35 (d, 2H, J = 8.3 Hz H-Ar), 7.75 (d, 2H, J = 8.1 Hz, H-Ar). RMN 130, (CDCI3, 100MHz) Ô (ppm) : 20.5 (OAc), 20.5 (OAc), 20.6 (OAc), 21.6 (Me- Ts), 50.4 (C-8), 67.6 (C-6), 68.5 (C-7), 68.5 (C-4), 70.8 (C-2), 71.6 (C-5), 72.4 (C-3), 100.4 (C-1), 127.9 (2C-Ar), 129.9 (2C-Ar), 132.3 (Cq-Ar), 145.2 (Cq-Ar), 169.2 (0=0), 169.4 (C=0), 170.1 (C=0). S.M. : ESI, 529.1366, 552 (M+Na)+. Analyse. calculé pour 0211-127N3011S: C : 47.63 ; H : 5.13 ; N: 7.93 ; X :S: 6.05. trouvé : C :48.26 ; H : 5.30 ; N : 7.80. 2'-azidoéthy1-6-0-tosy1-2,3,4-tri-0-acétyl-a-D-mannopyranoside 8b Rendement : 68% Rf 0.31, Hex/AcOEt 60/40. solide blanc, pf = 110-111°C, [a]D = +38.5, IR : film (n, cm-1) : 3433, 2954, 2102, 1750, 1374. RMN 1H, (CDCI3, 250 MHz) ô (ppm) :1.98 (s, 3H, OAc), 1.99 (s, 3H, OAc), 2.13 (s, 3H, OAc), 2.46 (s, 3H, Me-Ts), 3.39-3.47 (m, 2H, 2H8), 3.56-3.65 (m, 1H, H7), 3.78-3.86 (m, 1H, H7'), 4.02-4.14 (m, 3H, H5, H6), 4.80 (d, 1H, J1,2 = 1.8 Hz, H1), 5.16 (app t, 1H, J = 10.0 Hz, H4), 5.24 (dd, 1H, J2,3 = 3.6 Hz, J2,1 = 1.8 Hz, H2), 5.32 (dd, 1H, J3,4 = 10.0 Hz, J3,2 = 3.6 Hz, H3), 7.35 (d, 2H, J = 8.0 Hz, H-Ar), 7.79 (d, 2H, J = 8.0 Hz, H-Ar). RMN 130, (CDCI3, 62.9MHz) Ô (ppm) : 20.8 ( 20Ac), 21.0 (OAc), 21.8 (Me-Ts), 50.5 (C-8), 66.3 (C-4), 67.3 (C-7), 68.4 (C-6), 68.8 (C-3), 68.9 (C-5), 69.4 (C-2), 97.7 (C-1), 128.3 (20- Ar), 130.0 (2C-Ar), 132.9 (C-Ar), 145.2 (Cq-Ar), 169.9 (20=0), 170.2 (0=0). S.M. : ESI, 529.1366, 552 (M+Na)+. Analyse. calculé pour C21H27N3011S: C : 47.63; H : 5.13 ; N: 7.93 ; X :S: 6.05. trouvé : C :48.15 ; H : 5.26 ; N : 7.55 ; X : 5.70.30 2'-azidoéthy1-6-0-tosy1-2,3,4-tri-0-acétyl-a-D-galactopyranoside 8ca Rendement : 72% ; Rf 0.45 (Cyclohex/AcOEt 60/40) ; huile incolore ; IR : film (y, cm-1) : 2928, 2109, 1749, 1371, 1229 ; RMN1H, (CDCI3, 400 MHz) ô (ppm) : 1.96 (s, 3H, OAc), 2.06 (s, 3H, OAc), 2.07 (s, 3H, OAc), 2.45 (s, 3H, Me-Ts), 3.34 (ddd, 1H, J8,8' = 13.5 Hz, J7',8 = 6.0 Hz, J7,8 = 3.0 Hz, H8), 3.47 (ddd, 1H, J7,8' = 7.5 Hz, J7',8' = 3.0 Hz, H8'), 3.56 (ddd, 1H, J7,7' = 11.0 Hz, H7), 3.83 (ddd, 1H, H7'), 3.05 (dd, 1H, J6,6' = 10.5 Hz, = J5,6 = 7.0 Hz , H6), 3.30 (dd, 1H, J5,6, = 5.5 Hz, H6'), 4.25 (app dt, 1H, J5,6= J5,6' = 6.0 Hz, J4,5 = 1.0 Hz, H5), 5.08 (dd, 1H, J2,3 = 10.5 Hz, J1,2 = 3.5 Hz, H2), 5.12 (d, 1H, H1), 5.31 (dd, 1H, J3,4 = 3.5 Hz, H3), 5.58 (dd, 1H, H4), 7.35 (d, 2H, J = 8.0 Hz, H- Ar), 7.76 (d, 2H, J = 8.0 Hz, H-Ar) ; RMN13C, (CDCI3, 100 MHz) ô (ppm) : 20.6 (OAc), 20.7 (OAc), 20.9 (OAc), 21.8 (Me-Ts), 50.5 (C-8), 66.7 (C-5), 67.2 (C-6), 67.4 (C-3), 67.5 (C-7), 67.8 (C-2), 68.0 (C-4), 96.5 (C-1), 128.1 (2C-Ar), 130.1 (2C-Ar), 132.5 (Cq-Ar), 145.4 (Cq-Ar), 170.0 (C=0), 170.1 (C=0), 170.7 (C=0) 2'-azidoéthy1-6-0-tosy1-2,3,4-tri-O-acétyl-13-D-galactopyranoside 813 Rendement : 82% ; Rf 0.47 (Cyclohex/AcOEt 60/40) ; huile incolore; IR : film (y, cm-1) : 2933, 2099, 1744, 1435, 1371, 1220 ; RMN1H, (CDCI3, 400 MHz) ô (ppm) : 1.96 (s, 3H, OAc), 2.04 (s, 3H, OAc), 2.04 (s, 3H, OAc), 2.45 (s, 3H, Me-Ts), 3.27 (ddd, 1H, J8,8' = 13.5 Hz, J7',8 = 5.0 Hz, J7,8 = 3.5 Hz, H8), 3.48 (ddd, 1H, J7,8' = 8.5 Hz, J7',8' = 3.5 Hz, H8'), 3.65 (ddd, 1H, J7,7' = 11.0 Hz, H7), 3.96 (app dt, 1H, J5,6 = 6.0 Hz, J4,5 = 1.0 Hz, H5), 3.97 (m, 2H, H6 et H7'), 4.12 (dd, 1H, J6,6' = 10.0 Hz, H6'), 4.52 (d, 1H, J1,2 = 8.0 Hz, H1), 4.98 (dd, 1H, J2,3 = 10.5 Hz, J3,4 = 3.5 Hz, H3), 5.15 (dd, 1H, H2), 5.44 (dd, 1H, H4), 7.35 (d, 2H, J = 8.5 Hz, H-Ar), 7.76 (d, 2H, J = 8.5 Hz, H-Ar) ; RMN13C, (CDCI3, 100 MHz) ô (ppm) : 20.6 (2OAc), 20.9 (OAc), 21.8 (Me-Ts), 50.6 (C8), 66.6 (C-6), 67.0 (C-4), 68.5 (C-2), 68.7 (C-7), 70.8 (C-3), 70.9 (C-5), 101.2 (C-1), 128.1 (2C-Ar), 130.1 (2C-Ar), 132.4 (Cq-Ar), 145.5 (Cq-Ar), 169.6 (C=0), 170.1 (C=0), 170.1 (C=0) Mode opératoire général pour la synthèse des composés 9 A une solution de 650 mg (1.7 mmol) de composé 6 sous d'azote dans 10 mL de diglyme, sont additionné 0.3 mL de DAST (trifluorure de diéthylaminosulfure). Le mélange est chauffé à 110°C pendant 45 minutes puis refroidi à 0°C et 5 mL de méthanol sont ensuite ajoutés lentement. Le mélange réactionnel est concentré sous pression réduite, dilué dans du CH2Cl2 (100 mL) lavé avec une solution aqueuse saturée de NaHCO3 (5 mL) puis avec de l'eau (10 mL). La phase organique est séchée sur MgSO4 puis évaporée sous pression réduite. Le produit brut est purifié sur colonne de silice (hexane/acétate d'éthyle : 70/30). On obtient les composés : 2'-azidoéthy1-6-deoxy-6-fluoro-2,3,4-tri-O-acétyl-13-D-glucopyranoside 9a Rendement : 70% ; Rf 0.4 (Hex/AcOEt 60/40) ; solide blanc, pf = 105°C ; [MD = -29.3 (1, CH2012) ; IR : film (v, cm-1) : 3488, 2944, 2106, 1756, 1219, 1038 ; RMN1H, (CDCI3, 400 MHz) ô (ppm) : 1.99 (s, 3H, OAc), 2.03 (s, 3H, OAc), 2.04 (s, 3H, OAc), 3.28 (ddd, 1H, J8,7 = 3.4 Hz, J8,7' = 4.8 Hz, J8,8' = 13.4 Hz, H8), 3.43-3.82 (m, 5H, H5, 2H6, H7, H8'), 4.05 (ddd, 1H, J7',8' = 3.4 Hz, J7',7 = 10.6 Hz, H7'), 4.62 (d, 1H, J1,2 = 7.9 Hz, H1), 5.00 (dd, 1H, J4,3 = 9.4 Hz, J4,5 = 5.2 Hz, H4), 5.02 (dd, 1H, J2,3 = 9.4 Hz, H2), 5.24 (app t, 1H, H3); RMN13C, (CDCI3, 100 MHz) ô (ppm) : 20.5 (20Ac) 20.6 (OAc), 50.5 (C-8), 68.0 (d, ,Jc,F = 6.9 Hz, C-4), 68.5 (C-7), 71.0 (C-2), 72.6 (C-3), 72.7 (d, ,Jc,F = 19.7 Hz, C5), 81.3 (d, ,Jc,F = 175.0 Hz, C-6), 100.5 (C-1), 169.3 (C=0), 169.4 (C=0), 170.2 (C=0) ; RMN19F, (CDCI3, 235 MHz) ô (ppm) : -231.2 ; S.M. (HR-ESI) calculé pour C14H20N308FNa [M+Na]-' 400.1132, trouvé : 400.1128. 2'-azidoéthy1-6-deoxy-6-fluoro-2,3,4-tri-0-acétyl-a-D-mannopyranoside 9b Rendement : 80% ; Rf 0.38 (Hex/AcOEt 60/40) ; huile, [a]c) = +42.9 (1, CHC13) ; IR : film (v, cm-1) : 2942, 2107, 1753, 1372, 1247, 1221; RMN1H, (CDCI3, 400 MHz) : ô (ppm) 2.02 (s, 3H, OAc), 2.09 (s, 3H, OAc), 2.17 (s, 3H, OAc), 3.45 (ddd, 1H, J8,7' = 3.8 Hz, J8,7 = 6.0 Hz, J8,8' = 13.2 Hz, H8), 3.52 (ddd, 1H, J8',7 = 3.8 Hz, J8',7 = 7.0 Hz, H8'), 3.65-3.73 (m, 1H, H7), 3.91 (ddd, 1H, J7,7' = 10.5 Hz, H7'), 4.00-4.12 (m, 1H, H5), 4.42-4.51 (ddl, 2H, JH,F = 47.0 Hz, J6,5 = 4.5 Hz, 2H6), 4,90 (d, 1H, J1,2= 1,5 Hz, H1), 5.30 (dd, 1H, J2,3 = 3.5 Hz, H2), 5.31 (app t, 1H, J3,4 = J4,5 = 10.0 Hz, H4), 5.38 (dd, 1H, H3); RMN13C, (CDCI3, 100MHz) Ô (ppm) : 21.1 (OAc), 21.1 (OAc), 21.3 (OAc), 50.7 (C-8), 65.9 (d, ,Jc,F = 6.3 Hz, C-4), 67.5 (C-7), 69.2 (C-3), 69.7 (C-2), 70.0 (d, ,Jc,F = 19.0 Hz, C-5), 81.9 (d, ,Jc,F = 176.0 Hz, C-6), 98.1 (C-1), 170.2 (C=0), 170.2 (C=0), 170.5 (C=0) ; RMN19F, (CDCI3, 235 MHz) Ô (ppm) : 231.6 ; S.M. (HR-ESI) calculé pour Ci4H20N308FNa [M+Na]-' 400.1132, trouvé : 400.1131. Mode opératoire général pour la synthèse des composés 11 La méthode est identique à celle utilisée pour la préparation des composés 4 On obtient les composés : 2'-azidoéthy1-6-deoxy-6-fluoro-13-D-glucopyranoside 11 a Rendement : 67% ; huile, [a]c) = -92.1 (0.76, H2O) ; IR : KBr (v, cm-1) : 3393, 2924, 2108, 1346, 1288 ; RMN1H, (D20, 400 MHz) Ô (ppm) 3.15-3.25 (m, 1H, H2), 3.38-3.58 (m, 5H, 2H8, H5, H4, H3), 3.71-3.78 (m, 1H, H7), 3.90- 3.97 (m, 1H, H7'), 4.44 (d, 1H, J1,2 = 7.6 Hz, H1), 4.62 (dd, 2H, JH,F = 47.5 Hz, J6,5 = 2.1 Hz, 2H6) ; RMN13C, (D20, 100 MHz) Ô (ppm) : 50.9 (C-8), 68.6 (d, ,Jc,F = 6.9 Hz, C-4), 69.0 (C-7), 73.3 (C-2), 74.8 (d, ,Jc,F = 17.4 Hz, C-5), 75.8 (C-3), 82.2 (d, ,Jc,F = 168.8 Hz, C-6), 102.8 (C-1) ; RMN19F (D4-MeOH, 235 MHz) Ô (ppm) : -235.5 ; S.M. (HR-ESI) calculé pour C8H14N305FNa [M+Na]-' 274.0815, trouvé : 274.0827. 2'-azidoéthyl-6-deoxy-6-fluoro-a-D-mannopyranoside 11 b Rendement : 83% ; huile, [a]c) = +46.6 (1, Me0H) ; IR : film (v, cm-1) : 3392, 2931, 2107, 1443, 1285 ; RMN1H, (D20, 400 MHz) Ô (ppm) : 3.49 (ddd, 1H, J8,7' = 3.5 Hz, J8,7 = 6.4 Hz, J8,8' = 13.5 Hz, H8), 3.55 (ddd, 1H, J8',7 = 3.1 Hz, J8',7' = 6.4 Hz, H8'), 3.72 (ddd, 1H, J7,7' = 10.8 Hz, H7'), 3.77-3.83 (m, 1H, 2 99264 7 22 H4), 3.79-3.88 (m, 1H, H5), 3.84-3.89 (m, 1H, H3), 3.91 (ddd, 1H, H7), 4.00 (dd, 1H, J2,3 = 3.2 Hz, J1,2= 1.5 Hz, H2), 4.61-4.84 (m, 2H, 2H6), 4.93 (d, 1H, H1) ; RMN13C, (D20, 100 MHz) ô (ppm) : 50.5 (C-8), 65.7 (d, ,Jc,F = 7.1 Hz, C-4), 68.9 (C-7), 70.2 (C-2), 70.6 (C-3), 71.9 (d, ,Jc,F = 17.3 Hz, C-5), 82.6 (d, 5 ,Jc,F = 168.0 Hz, C-6), 100.5 (C-1) ; RMN19F, (D20, 235 MHz) ô (ppm) : - 234.4 ; S.M. (HR-ESI) calculé pour C8H14N305FNa [M+Na]-' 274.0815, trouvé : 274.0804. Il: Marquage des groupes prosthétiques 10 A 7,3 mg de précurseur 7 (0,023mmol) dissout dans 400 pL de CH3CN sont additionnés 250 pL de [18F]F-[132EtH]+ (11,9mCi) et 15 pL de base de Barton. Le mélange réactionnel est chauffé à 120°C pendant 5 à 10 min (pour glucose et mannose respectivement). L'incorporation du [18F]F- est vérifiée 15 par une radio-CCM (pureté radiochimique : 66 à 71% pour mannose et glucose respectivement). Le rendement radiochimique corrigé de la décroissance est de 63 à 66 % (pour mannose et glucose respectivement), très supérieur aux rendements obtenus pour certains composés de l'art antérieur.

20 La solution précédente [18F]10 est diluée avec 15 mL d'eau et le composé [18F]10 est fixé sur une cartouche Waters C18. Après fixation, une hydrolyse basique au moyen de NaOH 2N est réalisée pendant 7 min à température ambiante (25°C). L'activité est ensuite décrochée avec 2,5 ml d'eau puis 500 pL de NaOH 2N. L'efficacité de la déprotection est vérifiée par radio- 25 CCM (gel de silice, ACN/H20 : 90/10) la pureté radiochimique est supérieure à 97%. Le rendement de déprotection est de 75% et le rendement radiochimique total de [18F]12 corrigé de la décroissance est de 50%. On obtient les composés : 30 2'-azidoéthy1-6-deoxy-6418Fpluoro-13-D-glucopyranoside 12a 2'-azidoéthyl-6-deoxy-6-[18F]fluoro-a-D-mannopyranoside 12b 2 99264 7 23 III : Couplage des groupes prosthétiques avec des peptides modèles Préparation de S-propargyl-L-glutathion Ba(OH)2, EtOH, SH HOOCIN N COOH r11-12 H HOOCIN N COOH NH2 H 15h, TA 5 A une solution de L-glutathion 1.5 mmol (460 mg) dans 10 mL d'un mélange 1:1 méthanol-ammoniaque concentrée aqueux à 0°C sont ajoutés 1,6 mmol (195 mg) de bromure de propargyle dans 0.5 mL de méthanol. Après 1h d'agitation à 0°C le mélange est concentré sous vide à 40°C. Le résidu est 10 repris dans 5 mL d'eau et lyophilisé. Rendement : 81% ; solide blanc ; [a]p = -22.9 (1.5, H2O) ; RMN1H, (D20, 400 MHz) ô (ppm) : 2.07 (dd, 2H, J = 7.5 Hz, J = 15.0 Hz, H-F3 Glu), 2.45 (m, 2H, H-y Glu), 2.60 (dd, 1H, J = 2.5 Hz, H-alcyne), 2.92 (dd, 1H, J = 9.0 Hz, J = 15 14.5 Hz, H-F3 Cys), 3.18 (dd, 1H, J = 5.0 Hz, H13' Cys), 3.29 (m, 2H, H-y Cys), 3.70 (m, 3H, H-a Glu, H-a Gly), 4.65 (dd, 1H, H-a Cys) ; RMN13C, (D20, 100 MHz) ô (ppm) : 18.9 (C-y Cys), 26.2 (C13 Glu), 31.4 (C-y Glu), 32.7 (c-p Cys), 43.4 (C-a Gly), 52.8 (C-a Cys), 54.1 (C-a Glu), 72.5 (CH alcyne), 80.3 (C alcyne), 171.8 (C=0), 173.9 (C=0), 174.9 (C=0), 176.2 20 (C=0) ; S.M. (HR-ESI) calculé pour C13H18N306S [M-H]- 344.0922, trouvé : 344.0925. Préparation d'un glycopeptide marqué 18F Cu(OAc)2 HO HO eau, TA, 2h N3 ÷ OH peptide Na ascorbate OH 25 peptide L-glutathion-S4[142-[(6-deoxy-6418F]fluoro-13-D-glucopyranosyl)oxy]ethy1]- 1H-1,2,3-triazol-4-yl]methyl] [18M14 HO [18F]12a O HOOCL NH2 ON3 S propargyl glutathion N COOH 1-1 N H O 1/HCI 0.25M 2/Na ascorbate 0.6N, Cu(OAc)2 0.6N, 60°C, 12 min N, ' N O O HOOCLN [18F]14 NH2 H N COOH H O A la solution de [18F]12a préparée précédemment on additionne 230 pL d'une solution HCI 0.25M afin d'amener le pH à 8-9. On additionne ensuite 2 mg de peptide propargylé, 125 pL d'une solution de sodium ascorbate 0.6 M et 125 pL d'une solution de Cu(OAc)2 0.6 M, puis on chauffe 12 min à 60°C. L'efficacité du couplage est vérifiée par une radio-CCM, son rendement est de 44% et le rendement radiochimique total pour la radiosynthèse de [18F]14 corrigé de la décroissance est de 22%.

Claims (7)

1. REVENDICATIONS1. Composé de formule (I) 18F (OR), ( I-12 k X (\n N3 (I) où : - k est égal à 2 ou 3 ; - n est un nombre entier compris entre 1 et 5 ; - R est indépendamment H, un groupe alkyle en Ci - C5, m étant un nombre 10 entier compris entre 0 et 2 si k=2 et m compris entre 0 et 3 si k=3; et - X est choisi parmi le groupe comprenant O, S, CH2, NR' où R' est indépendamment un groupe alkyle en Ci - C5, un groupe aryle, y compris tous ses stéréoisomères. 15
2. 2. Composé selon la revendication 1, de formule (II) : O\ N \ y ..-, , OH y compris tous ses stéréoisomères. 20
3. 3. Procédé de synthèse d'un composé selon la revendication 1 ou 2, caractérisé en ce qu'il comprend : - la formation sur un composé à base d'hexopyranose ou de pentofuranose, en position anomère, d'un bras espaceur alkyle en C2-C6 terminé par un groupe azide ; 25 - l'introduction d'un groupe partant en position 6 et de groupes protecteurs sur les autres positions ;- l'incorporation de fluor en position 6 ; et - la déprotection des autres positions.
4. 4. Procédé selon la revendication 3, caractérisé en ce que l'introduction d'un groupe partant en position 6 et de groupes protecteurs sur les autres positions comprend l'introduction d'un premier groupe protecteur en position 6 et d'un second groupe protecteur sur les autres positions, la déprotection du premier groupe protecteur en position 6 par un groupe hydroxyle, et l'introduction du groupe partant en position 6.
5. 5. Procédé selon la revendication 4, caractérisé en ce que le premier groupe protecteur est un éther de trityle et le second groupe protecteur est un acétate.
6. 6. Procédé selon l'une quelconque des revendications 3 à 5, caractérisé en ce que le groupe partant est choisi parmi le groupe comprenant le tosylate et le triflate.
7. 7. Procédé selon l'une quelconque des revendications précédentes, caractérisé en ce que le composé à base d'hexopyranose ou de pentofuranose est choisi parmi les hexopyranoses, les pentofuranoses, et leurs acétates anomères. où : 25 - Y est indépendamment un premier groupe protecteur différent de l'acétate, un groupe partant, F, 18F, OH ; - R" est choisi de sorte que OR" forme un second groupe protecteur; - k est égal à 2 ou 3 ; 10. Molécule intermédiaire de formule (III) : Y (OR ), .. ( 1-12)k 2 99264 7 27 - n est un nombre entier compris entre 1 et 5 ; - m est un nombre entier compris entre 0 et 2 si k=2 et compris entre 0 et 3 si k=3; y compris tous ses stéréoisomères. 5 9. Molécule intermédiaire, selon la revendication 8, de formule (IV) : R"Q R '0 0 N \ y ..-, , OR" (IV) où : 10 - R" est un groupe acétyle - Y est indépendamment un premier groupe protecteur différent de l'acétate, un groupe partant, F, 18F, OH, y compris tous ses stéréoisomères. 15 10. Composé selon l'une quelconque des revendications 1 et 2, pour une utilisation comme groupe prosthétique destiné à être couplé à une biomolécule par cycloaddition de son groupe azide avec un groupe alcyne terminal prévu sur ladite biomolécule. 20 11. Utilisation d'un composé selon l'une quelconque des revendications 1 et 2 pour le radiomarquage d'une biomolécule sur laquelle est prévu un groupe alcyne terminal.