FR2978915A1 - Macerat antioxydant comprenant un melange d'algue gelidium sesquipedale et de solvant a base d'eau de mer - Google Patents

Abstract

La présente invention est relative à un macérât utilisé notamment pour ses propriétés antioxydantes, comprenant un mélange (i) de l'algue gelidium sesquipedale et (ii) d'un solvant à base d'eau de mer. La présente invention concerne également l'utilisation cosmétique et/ou thérapeutique dudit macérât ainsi que son procédé d'obtention.

Description

1 La présente invention se rapporte à la préparation de macérâts ou compositions comprenant un mélange d'algue et de solvant à base d'eau de mer. La présente invention se rapporte également aux utilisations cosmétiques et ou thérapeutiques des dits macérâts ou compositions ainsi qu'à leur procédé d'obtention.

Dans certaines conditions physiologiques (vieillissement, etc.) et environnementales (exposition solaire, etc.) des radicaux libres ou espèces réactives de l'oxygène (EROs) sont produits au niveau des cellules de l'organisme. Les radicaux libres, lorsqu'ils sont non contrôlés, peuvent rapidement réagir avec des molécules de leur entourage et donner naissance à des composés toxiques, qui peuvent interférer avec les processus physiologiques normaux. Ces composés toxiques, lorsqu'ils sont présents en trop grande quantité dans l'organisme, provoquent des dégâts cellulaires importants, souvent irréversibles, tels que la cassure et la mutation de l'ADN, l'inactivation des protéines et des enzymes, l'oxydation de sucres ou encore la péroxydation lipidique au sein d'acides gras poly-insaturés. Le stress oxydant est défini en ce sens comme un déséquilibre en faveur d'un excès de molécules pro-oxydantes aux conséquences néfastes sur l'organisme. Pour lutter efficacement contre les dommages oxydants, l'organisme est équipé de plusieurs systèmes de défense comme les systèmes de réparation (enzymes réparatrices de l'ADN) ou d'élimination de molécules endommagées par les EROs. Les systèmes dits de prévention empêchent la formation de radicaux libres, notamment par chélation des métaux de transition.

Des protéines telles que l'albumine, la céruloplasmine ou la ferritine, ainsi que des hormones (oestrogène ou mélatonine) participent également, de façon indirecte, à la lutte contre le stress oxydant. Enfin, une grande variété de molécules, désignées sous le terme d'antioxydants, assure une protection efficace des sites biologiques par élimination directe des molécules pro-oxydantes. Un antioxydant peut être défini comme une substance qui, présente à de faibles concentrations comparées à celles des substrats oxydables, prévient significativement ou retarde l'initiation du processus d'oxydation (B. Halliwell, Antioxidant characterization: Methodology and mechanism; Biochem. Pharmacol., 49 (1995) 1341-1348). Selon leur type, les antioxydants peuvent agir en réduisant ou en dismutant les EROs, ou encore en les piégeant pour former un composé stable, en séquestrant les métaux de transition libres ou en générant du glutathion (GSH). Les antioxydants sont donc des régulateurs du taux de pro-oxydants dans l'organisme. Par conséquent, la définition du stress oxydant peut être étendue à un déséquilibre, suite à une production excessive d'EROs et/ou une diminution du taux d'antioxydants dans l'organisme. La peau est exposée au stress oxydant par des facteurs exogènes, comme les gaz atmosphériques, la pollution, les produits chimiques ou encore les irradiations. Elle subit également les effets de facteurs endogènes, comme l'action biologique de certaines enzymes ou cellules telles que les neutrophiles ou lors de processus pathologiques et de maladies telles que les cancers, psoriasis ou autres inflammations cutanées. Il existe dans les couches 2 épidermiques de nombreuses cibles potentielles (lipides, protéines, ADN), dont la dégradation due au stress oxydant cause des pathologies diverses : altération de l'élasticité des tissus, vieillissement précoce, inflammation ou encore cancers cutanés. Les réactions chimiques ayant lieu entre les EROs et les cellules cibles sont nombreuses. Elles peuvent conduire à des processus de péroxydation sur les lipides ou les protéines. Les EROs provoquent l'inactivation directe de certaines enzymes, induisant la dégradation des protéines associées. Sous l'influence du stress oxydant, des dégâts sur l'ADN tels que la perte de bases nucléotidiques ou des mutations de bases, aux conséquences dramatiques (cancers), sont observés. De façon générale, le stress oxydant au niveau cutané est induit particulièrement dans deux conditions, l'exposition au soleil et le vieillissement. Le soleil est indispensable au corps humain (par exemple pour la synthèse de la vitamine D), néanmoins une exposition prolongée et intense à ses rayons, sans précaution, peut entraîner des érythèmes (coups de soleil) ou des lésions plus profondes, conduisant au photo-vieillissement des tissus et/ou au développement de cancers cutanés. Les rayons ultraviolets (UV), particulièrement énergétiques, sont capables d'induire la formation de radicaux libres. Ils sont donc indirectement responsables de l'oxydation des molécules constitutives de la cellule (acides nucléiques, lipides, protéines, glucides). Les UV B, absorbés par l'ADN, créent des lésions directes du matériel génétique tels que des mutations, des formations de dimères de thymines, des ruptures de liaisons ; ils provoquent également une altération du processus de transcription. Lorsque les lésions causées sont trop importantes et que le système de réparation se trouve dans l'incapacité de régénérer l'ensemble des cellules endommagées, celles-ci peuvent alors évoluer vers un état cancérogène (M. Ichihashi et al, UV-induced skin damage; Toxicology, 189 (2003) 21-39; C.S. Sander et al., Role of oxidative stress and the antioxidant network in cutaneous carcinogenesis; Int. J. Dermatol., 43 (2004) 326-335).

Le vieillissement se caractérise par une diminution des capacités d'adaptation à l'effort et/ou au stress, ainsi que par la détérioration progressive des processus métaboliques et physiologiques. Dès l'âge de trente ans, les tissus perdent progressivement leur élasticité et leur pouvoir de réguler la diffusion gazeuse. Le vieillissement cutané, et de manière générale le vieillissement cellulaire et moléculaire, sont causés par des facteurs intrinsèques, inscrits dans le programme génétique, et des facteurs extrinsèques, ayant une influence certaine sur le vieillissement ou plus précisément sur la vitesse du processus de vieillissement. Les radicaux libres et les dommages oxydatifs qu'ils engendrent, jouent en effet un rôle prépondérant dans le processus de vieillissement des tissus et la mort cellulaire (D.Harman, Aging, a theory based on free radical and radical chemistry; J. Gerontol., 11 (1956) 298-300). En 1956, un lien est établi, pour la première fois, entre le vieillissement, les radiations ionisantes, la mutagénèse, les cancers et les dommages cellulaires. Depuis, les travaux portant sur le stress oxydant et ses conséquences sur le vieillissement ont fait l'objet de nombreuses publications (R. Sohal et al. Mechanisms of aging: an appraisal of the oxidative stress hypothesis, Free Rad. Biol. Med., 33 3 (2002) 575-586; K. B. Becckam et B. N. Ames, The free radical theory of aging matures, Physiol. Rev., 78 (1998) 547-581; R. Kohen, Skin antioxidants: their role in aging and in oxidative stress - New approaches for their evaluation, Biomed. & Pharmacother., 53 (1999) 181-192; E.R. Stadtman, Importance of individuality in oxidative stress and aging, Free Rad.

Biol. Med., 33 (2002) 597-604; J.J. Thiele et al., Antioxidant defense systems in skin, J. Toxicol. Cut. & Ocular Toxicol., 21 (2002) 119-160). Le vieillissement cutané se manifeste également par un certain nombre de modifications biochimiques au sein de l'épiderme et du derme. Du fait d'un renouvellement moins rapide des kératinocytes et d'une accumulation des cornéocytes, l'épiderme s'amincit au profit d'un épaississement de la couche cornée, faisant apparaître rides et rugosités. La consistance du film hydrolipidique de surface est également modifiée, la peau devenant sèche et perdant sa souplesse. Des irrégularités pigmentaires (tâches brunes) peuvent apparaître en raison d'une perturbation du système mélanocytaire. Elles ont pour conséquence une moins bonne protection aux UV, ce qui augmente les risques de carcinogénèse. Enfin, le nombre de cellules de Langerhans diminue, ce qui entraîne une perte d'efficacité du système immunitaire. Le derme est également aminci suite à des diminutions du nombre de fibroblastes et de la production de collagène, causant l'apparition de rides profondes. L'altération des fibres d'élastine provoque une perte d'élasticité et de souplesse. Enfin, une vascularisation anormale du derme entraîne une perturbation du système de thermorégulation.

Le vieillissement cutané se manifeste de manière très hétérogène selon les parties du corps. Les zones exposées aux facteurs extrinsèques (sources de stress oxydant) subissent un vieillissement accéléré par rapport aux zones soumises uniquement aux effets des facteurs intrinsèques où la peau reste plus souple, plus fine, moins ridée. Ainsi, la production supplémentaire ou excessive de ERO suite à des expositions pro-oxydantes néfastes entraîne une accélération du vieillissement cutané (H.Chang et al., The role of H2O2 as a mediator of UVB induced apoptosis in keratinocytes, Free Rad. Res. Comms., 37 (2003) 655-663). Il existe plusieurs antioxydants, capables de prévenir des dommages oxydatifs. Les antioxydants piégeurs de radicaux libres (scavengers en anglais) possèdent un avantage considérable par rapport aux antioxydants enzymatiques. Du fait de leur petite taille, ils peuvent en effet pénétrer facilement au coeur des cellules et se localiser à proximité des cibles biologiques. Ils regroupent un grand nombre des molécules hydrophiles ou lipophiles et sont en partie produits par l'organisme au cours de processus biosynthétiques. Le taux d'antioxydants dans l'organisme est essentiellement assuré par un apport alimentaire. Parmi les antioxydants naturels les plus connus, on peut citer les caroténoïdes, les flavonoïdes, la vitamine C ou acide ascorbique (AA), les tocophérols (dont la Vitamine E), la vitamine A, les thiols, les polyphénols, le zinc ou encore le sélénium, co-facteur de la glutathion peroxydase. On a décrit dans l'art antérieur que de nombreuses algues, par exemple les algues rouges appartenant au genre Porphyra et composés les contenant possèdent des propriétés 4 antioxydantes. Des extraits méthanoliques, notamment de Porphyra tenera, Porphyra yezoensis et Porphyra umbilicalis, ont été décrits (EP 1 443898). L'algue Gelidium sesquipedale est une algue rouge qui contient également des molécules possédant un pouvoir antioxydant. En effet, les algues rouges et notamment celles du genre Gelidium sont riches en caroténoïdes (un des pigments qui confère la couleur rouge). Les caroténoïdes semblent capables de prévenir et d'interrompre les procédés de péroxydation en neutralisant l'oxygène singulet et les radicaux libres. Les caroténoïdes neutralisent l'oxygène singulet en captant son énergie d'activation sans modification chimique. Une molécule de bétacarotène semble capable d'inactiver plusieurs centaines de molécules d'oxygène singulet.

L'algue Gelidium sesquipedale comprend également des flavonoïdes, connus pour capter les radicaux libres engendrés par l'inflammation. Les flavonoïdes renforcent la stabilité du collagène. Ils potentialisent l'action d'enzymes cellulaires. Ils protègent le tissu conjonctif. Ils sont également diurétiques. Ainsi les flavonoïdes permettent d'augmenter la circulation sanguine. D'autres composants connus de Gelidium sesquipedale sont le sélénium, dont les propriétés anti-oxydantes sont importantes, le manganèse et le zinc. Le manganèse joue également un rôle majeur dans plusieurs processus physiologiques comme constituant ou activateur d'enzymes. Le zinc possède des fonctions métaboliques, immunologiques et anti-inflammatoires. C'est un composant essentiel de nombreux systèmes enzymatiques. Il a également été décrit dans l'art antérieur, notamment dans la demande de brevet WO 2007,026037, l'utilisation d'acides aminés de type mycosporine (MAAs, mycosporine-like amino acids) dans des applications cosmétiques ou thérapeutiques, en vertu de leur potentiel antioxydant. De tels acides aminés sont notamment isolés à partir de l'algue Gelidium sesquipedale par extraction alcoolique. Une telle méthode d'extraction utilise des solvants organiques tels que le méthanol. Or, le méthanol est un solvant pouvant être toxique par absorption en raison de ses propriétés de dépresseur du système nerveux central, ou en raison des sous produits issus de son métabolisme dans le foie. Ces sous produits sont en effet à l'origine d'acidose métabolique, de cécité par destruction du nerf optique, etc. Les tissus foetaux sont également très sensibles aux effets du méthanol. La dose dangereuse est rapidement atteinte si une personne est régulièrement exposée à des vapeurs ou manipule des liquides sans protection cutanée. De façon générale, un tel procédé d'extraction de molécules antioxydantes ne peut donc pas satisfaire à des exigences de certifications biologiques (comme par exemple la certification ECOCERT). Par ailleurs, l'extrait obtenu dans la demande de brevet WO2007/026037 est seulement concentré en deux molécules du Gelidium sesquipedale. Il s'agit de deux aminoacides de type mycosporine (astérine 330 + palythine). Il existe donc un besoin pour des procédés alternatifs de préparation de produits antioxydants à base de ressources naturelles marine comme les algues, garantissant une grande innocuité (humaine et environnementale) des produits ou compositions obtenus à partir des dits procédés. Il existe également un besoin pour des procédés améliorés permettant d'extraire le maximum de molécules d'intérêt, sans se limiter à certaines molécules spécifiques, afin d'obtenir des compositions à base d'extraits d'algue présentant des capacités antioxydantes importantes. 5 La présente invention se rapporte à un macérât comprenant un mélange (i) d'algue Gelidium sesquipedale et (ii) d'un solvant comprenant de l'eau de mer. En effet les inventeurs ont démontré que de façon tout à fait surprenante l'utilisation d'un solvant à base d'eau de mer permet non seulement d'obtenir des compositions d'une grande innocuité pour des applications thérapeutiques ou cosmétiques, mais aussi d'extraire une quantité maximale de molécules d'intérêt (particulièrement les molécules possédant des propriétés antioxydantes) à partir d'extraits d'algues comme Gelidium sesquipedale. Les compositions obtenues à partir d'un procédé impliquant des solvants à base d'eau de mer et particulièrement à partir d'extrait d'algue Gelidium sesquipedale présentent ainsi des capacités antioxydantes particulièrement importantes vis-à-vis des compositions d'extrait d'algues connues dans l'art antérieur. De façon préférée, le macérât selon la présente invention est caractérisé en ce que l'eau de mer, base du solvant, a un pH ajusté entre 9 et 12. Suivant certains modes de réalisations de la présente invention, la macérât peut comporter en outre un ou plusieurs adjuvants, choisis parmi les gélifiants hydrophiles ou lipophiles, les actifs hydrophiles ou lipophiles, les conservateurs, par exemple l'acide citrique, le benzoate de sodium ou encore le sorbate de potassium, les parfums, les charges, les filtres, les bactéricides, les absorbeurs d'odeur et les matières colorantes. De façon préférée encore, le macérât est caractérisé en ce que l'algue est broyée et/ou 25 tamisée. Selon un mode de réalisation, le mélange d'algue et de solvant à base d'eau de mer est réalisé suivant un rapport massique algue/solvant compris entre 5/95 et 55/45. Selon des modes de réalisation particuliers, le macérât est également caractérisé en ce que le solvant à base d'eau de mer comprend un mélange (i) d'eau de mer et (ii) au moins un acide 30 gras, ladite eau de mer étant présente selon un rapport eau de mer/acide gras compris entre 10/90 et 90/10. Selon certain modes de réalisation, le macérât possède un pouvoir anti-oxydant d'au moins 25 pmoles d'équivalents acide 6-hydroxy-2,5,7,8-tetramethylchroman-2-carboxylique (TroloxTM) /g de macérât. 35 La présente invention se rapporte également à un macérât, tel que précédemment défini, pour son utilisation en tant que composition antioxydante, pour prévenir, retarder ou traiter les dommages cellulaires induits par les radicaux libres. 6 L'invention concerne également l'utilisation cosmétique, non thérapeutique, du macérât tel que précédemment défini, dans une composition cosmétique destinée à réduire ou prévenir le vieillissement de la peau et particulièrement le vieillissement induit par le rayonnement UV. L'invention concerne enfin un procédé d'obtention d'un macérât tel que défini ci-dessus, caractérisé en ce qu'il comporte les étapes suivantes : 1- Obtenir et sécher l'algue Gelidium sesquipedale 2- Réaliser un macérât, par mélange de l'algue résultant de l'étape 1 dans un solvant, ledit solvant comprenant de l'eau de mer, dont le pH a été ajusté entre 9 et 12. Selon un mode de réalisation particulièrement préféré du procédé, ledit solvant comprend un mélange (i) d'eau de mer et (ii) d'au moins un acide gras. Selon un mode de réalisation préféré, le procédé selon l'invention est caractérisé en ce que, préalablement à la réalisation du macérât (étape 2), l'algue est broyée et/ou tamisée. Selon une variante de réalisation du procédé selon l'invention, l'eau de mer est préalablement filtrée avant ajustement du pH, ladite filtration étant réalisée de façon à éliminer les particules de tailles supérieures à 0,2 pm. L'invention sera décrite plus en détail en référence aux dessins annexés, dans lesquels : La figure 1 représente un histogramme illustrant les valeurs ORAC (en pmoles d'équivalents TroloxTM /g d'un macérât en fonction du type de séchage (ledit macérât étant réalisé, à l'exception de ce paramètre, suivant le protocole détaillé en exemple) de l'algue Gelidium sesquipedale. La figure 2 représente un histogramme illustrant les valeurs ORAC (en pmoles d'équivalents TroloxTM /g d'un macérât (réalisé suivant le protocole détaillé en exemple) en fonction du type de broyage de l'algue Gelidium sesquipedale. La figure 3 représente un histogramme illustrant les valeurs ORAC (en pmoles d'équivalents TroloxTM /g de macérât en fonction de la taille du tamis employé pour le tamisage de l'algue Gelidium sesquipedale (ledit macérât étant réalisé, à l'exception de ce paramètre, suivant le protocole détaillé en exemple). La figure 4 : histogramme illustrant les valeurs ORAC (en pmoles d'équivalents TroloxTM /g d'un macérât en fonction du pH de l'eau de mer employée pour la réalisation du solvant de macération de l'algue Gelidium sesquipedale (ledit macérât étant réalisé, à l'exception de ce paramètre, suivant le protocole détaillé en exemple). La figure 5 illustre des tests de développement bactérien (figure 5A) et de levure (figure 5B) dans de l'eau distillée et dans de l'eau de mer. Les valeur en ordonné représentent le dénombrement bactérien ou de levure en UFC (unité formant une colonie)/g.

La figure 6 représente un histogramme illustrant les valeurs ORAC (en pmoles d'équivalents TroloxTM /g d'un macérât en fonction du temps de macération de l'algue Gelidium sesquipedale dans le solvant à base d'eau de mer (ledit macérât étant réalisé, à l'exception de ce paramètre, suivant le protocole détaillé en exemple). 7 La figure 7 représente un histogramme illustrant les valeurs ORAC (en pmoles d'équivalents TroloxTM /g d'un macérât en fonction de la température de macération de l'algue Gelidium sesquipedale dans le solvant à base d'eau de mer (ledit macérât étant réalisé, à l'exception de ce paramètre, suivant le protocole détaillé en exemple).

La figure 8 illustre l'évaluation du potentiel antioxydant (valeurs ORAC en pmoles d'équivalents TroloxTM /g de macérât) en fonction des rapports algue/solvant du macérât et eau de mer/acide gras du solvant (ledit macérât étant réalisé, à l'exception de ces paramètres, suivant le protocole détaillé en exemple).

La demanderesse a mis au point un procédé permettant l'obtention d'une composition ou d'un macérât, comprenant un mélange (i) d'un ou plusieurs végétaux, de préférence des algues et plus particulièrement de l'algue Gelidium sesquipedale et (ii) d'un solvant à base d'eau de mer. La composition ou le macérât selon la présente invention possède un pouvoir antioxydant particulièrement important.

Selon l'invention, un tel procédé comprend les étapes suivantes : - Etape 1 : Obtention et séchage d'au moins un végétal, de façon préférée d'au moins une algue et de façon plus particulièrement préférée de l'algue Gelidium sesquipedale. Une telle étape permet d'obtenir un extrait d'algue selon la présente invention. L'algue étant récoltée en bord mer, elle peut contenir une proportion d'eau variable en fonction de l'humidité atmosphérique. L'algue comme tout organisme vivant contient de nombreuses enzymes. Ces enzymes, à la mort de la plante et s'ils sont maintenus en milieu aqueux, entraînent de nombreuses réactions de dégradation qui ne sont plus compensées par des synthèses au sein de la cellule végétale et provoquent une détérioration rapide du contenu cellulaire et par conséquence des principes actifs qui s'y trouvent. L'eau contenue dans la plante permettant l'activation des systèmes enzymatiques, il convient donc de les stopper en diminuant la teneur en eau de l'algue. Il est donc préférable selon l'invention que l'algue soit parfaitement séchée avant tout traitement. Toutes les méthodes permettant une déshydratation de l'algue sont compatibles avec la présente invention. La demanderesse a démontré que les méthodes de séchages comme le séchage à l'air libre, le séchage au four, ou le séchage au soleil, donnaient des résultats satisfaisants, (figure 1) néanmoins le séchage à l'air libre fournit des résultats améliorés. Selon certains modes de réalisation, l'algue séchée peut ensuite être broyée. Le broyage vise à diviser la taille de la matière pour diminuer la granulométrie et obtenir notamment de fines particules afin d'augmenter la surface d'échange entre le solide et le solvant d'extraction et faciliter l'extraction de l'intérieur des tissus végétaux par cassure des tissus et des parois cellulaires. La division mécanique d'une particule solide peut être réalisée suivant différents procédés; par compression, percussion ou choc, abrasion ou encore par frottement, cisaillement, arrachement. Cependant, le broyage peut, dans certains cas, en raison de 8 l'abrasion ou le frottement, entraîner une augmentation de température capable de détruire ou de dénaturer les molécules actives. La présente invention a montré que toutes les méthodes de broyage permettaient d'obtenir une extraction efficace des molécules du gelidium, avec cependant, un maximum d'efficacité lors d'un broyage par cisaillement (broyeur à hélice) qui à moins d'impact sur l'intégrité des molécules (figure 2). Suivant certains modes de réalisation, le procédé selon l'invention comporte également une étape de tamisage de l'algue. En effet, la granulométrie est également un paramètre important. Même quand il est réalisé à un degré très fin, le broyage n'implique aucune rupture conséquente des parois cellulaires ; il permet préférentiellement de favoriser les échanges grâce à la surface d'échange qui va être considérablement augmenté. Dans la présente invention, des mesures ont été réalisées à différentes granulométries (2 mm, 1 mm, 500 pm et 224 pm). A toutes les granulométries, les particules d'algues obtenues se sont révélés efficaces pour l'extraction du gelidium, toutefois, l'algue broyée, tamisée à l'aide d'un tamis de 500 pm permet d'obtenir la meilleure caractéristique de l'extrait (figure 3). De façon préférée, le tamisage est réalisé avec des tamis inférieurs ou égaux à 3 mm, préférentiellement inférieurs ou égaux à 1,5 mm, préférentiellement encore, inférieurs ou égaux à 750 pm et plus particulièrement inférieurs ou égaux à 500 pm. Selon des modes de réalisation préférés, le tamisage est réalisé avec des tamis compris entre 500 pm et 3 mm. - Etape 2 : Réalisation d'un macérât par mélange de l'algue, obtenue selon l'un des modes de réalisation précédemment décrit, dans un milieu solvant comprenant de l'eau de mer dont le pH a été éventuellement ajusté entre 9 et 12. L'eau de mer est l'eau salée des mers et des océans de la Terre. « salée » désigne le fait qu'elle contient des substances dissoutes, les sels, constitués d'ions principalement des ions halogénures comme l'ion chlorure et des ions alcalins comme l'ion sodium. L'eau de mer est constituée d'environ 96,5 % d'eau pure et 3,5 % d'autres substances comme les sels, les gaz dissous, les substances organiques et des particules solides. La salinité est un des paramètres les plus importants de l'eau de mer, et désigne la teneur en sels dissous. La salinité moyenne des océans est de 35 g/L, et reste généralement comprise entre 30 g/L et 40 g/L. La présence de sel dans l'eau modifie certaines propriétés (densité, compressibilité, point de congélation, température du maximum de densité). D'autres (viscosité, absorption de la lumière) ne sont pas influencées de manière significative. Enfin certaines sont essentiellement déterminées par la quantité de sel dans l'eau (conductivité, pression osmotique). La grande particularité de l'eau de mer est que les proportions relatives de ses constituants sont sensiblement constantes (c'est-à-dire indépendantes de la salinité) ; cette propriété permet de considérer l'eau de mer comme une solution de onze constituants majeurs dans de l'eau pure, à savoir, par ordre décroissant d'importance, le chlorure, l'ion sodium, l'ion magnésium, le sulfate, l'ion calcium, l'ion potassium, le bicarbonate, le bromure, l'acide borique, le carbonate et le fluorure. La loi de Dittmar permet ainsi de déterminer la salinité de l'eau de mer par une seule 9 mesure : de la concentration d'un de ces constituants (par exemple, Cl-) ou d'une des propriétés physiques de l'eau de mer à une température donnée (comme la densité relative, l'indice de réfraction ou la conductivité). Le pH de l'eau de mer est voisin de 8,2 (légèrement alcalin). Les deux principaux sels sont Na' et Cl-, qui en s'associant forment le chlorure de sodium Les gaz dissous comprennent environ 64 % d'azote, 34 % d'oxygène et 1,8 % de dioxyde de carbone. Les concentrations diminuent quand la température et la salinité augmentent. La proportion de CO2 est 60 plus forte dans la mer que dans l'air (1,8% au lieu de 0,03%). L'eau de mer contient également du plancton, qui est l'ensemble des petits organismes vivant dans les eaux douces, saumâtres et salées: gamètes, larves, animaux inaptes à lutter contre le courant (petits crustacés planctoniques et méduses), végétaux et algues microscopiques. Le plancton est constitué d'organismes pélagiques incapables de maintenir une distribution spatiale indépendante de celle des masses d'eau qui les contiennent. Le plancton constitue l'ensemble des organismes dont l'amplitude des mouvements horizontaux propres est inférieure à celle des mouvements de la mer. Ceci implique que la distribution des espèces planctoniques sera conditionnée par les conditions physico-chimiques qui règnent au sein de la masse d'eau (e.g. température, salinité, oxygène) mais aussi par les mouvements de celle-ci (e.g. advection, diffusion). Selon des modes de réalisation, l'eau de mer servant de base à la réalisation du milieu solvant est susceptible d'être filtrée. La filtration est une opération qui a pour but de séparer les contaminants particulaires ou microbiens d'un liquide ou d'un gaz à l'aide d'un milieu filtrant poreux. Le plus important dans cette invention étant de déterminer le système de filtration permettant de garantir la stabilité sanitaire de l'eau de mer. Parmi les techniques séparatives à membrane, on distingue plusieurs domaines liés à la dimension des contaminants à retenir: - la filtration: permettant d'arrêter des contaminants de 10 à 450 pm. -la microfiltration: permettant d'arrêter des contaminants de 0,01 pm à 10 pm. C'est le procédé le plus largement utilisé, notamment dans l'industrie pharmaceutique. De façon générale, la microfiltration consiste à faire passer un mélange solide-liquide à travers un milieu poreux qui retient les particules de taille supérieure à la taille des pores en surface, ou les piège en profondeur. L'efficacité de rétention dépend de la géométrie et de la morphologie du milieu filtrant. On distingue la microfiltration frontale de la microfiltration tangentielle selon que le liquide est amené perpendiculairement à la membrane ou tangentiellement. Dans ce dernier cas, on limite ainsi l'accumulation de matière à la surface de la membrane. - L'ultrafiltration: permettant d'arrêter des contaminants de 0,001 pm à 0,01 pm (10A à 100A). - L'osmose inverse: permettant d'arrêter des contaminants de 0,0001 pm à 0,001 pm (1A à 10A). De préférence, l'eau de mer est filtrée de façon à d'obtenir la stabilité sanitaire de l'eau de mer tout en conservant les sels. De façon préférée encore l'eau de mer est microfiltrée, et plus 10 particulièrement l'eau de mer est microfiltrée de façon à éliminer les particules dont la taille est supérieure à 0,2 pm. Il est également possible, suivant la présente invention d'utiliser de l'eau de mer artificielle, notamment préparée à partir d'eau pure ou distillée alcalinisée et de sels disponibles dans le commerce. Par alcalinisé, il est entendu que le pH de la préparation d'eau de mer artificielle est ajusté à un pH proche de l'eau de mer naturelle, soit entre 7,8 et 8,5 ; ledit pH pouvant être par la suite réajusté selon les modes de réalisation de la présente invention. La demanderesse a également montré que, dans le cadre de l'invention, l'augmentation du pH de l'eau de mer naturelle ou artificielle, dans une gamme comprise entre 9 et 12 permettait de favoriser l'extraction des composés antioxydants, notamment hydrophiles, de l'algue Gelidium sesquipedale avec un maximum à pH 10 (figure 4). Selon des modes de réalisation particuliers, le pH de l'eau de mer est ajusté entre 9,5 et 11,5, préférentiellement encore entre 9,5 et 10,5. De façon préférée encore l'ajustement du pH de l'eau de mer est réalisé par ajout d'une base, de préférence un hydroxyde métallique, de préférence encore un hydroxyde métallique alcalin, comme par exemple NaOH ou KOH, de préférence encore NaOH. Eventuellement l'ajout d'une base, telle que précédemment mentionnée, est susceptible de former un précipité, par exemple un précipité Mg(OH)2, pouvant être dissout par exemple par ajout de chlorure d'ammonium. L'ajout de chlorure d'ammonium est susceptible de former du chlorure de magnésium et d'ammoniac. Ces deux éléments ont avoir un impact sur le potentiel antioxydant du macérât selon l'invention. Il est aujourd'hui prouvé que le magnésium est présent dans tous les tissus et organes et qu'il participe à la bonne marche de toutes les grandes fonctions de l'organisme sans exception, notamment le chlorure de magnésium au niveau cutané est capable de protéger des radicaux libres et de favoriser les défenses cutanées : - le vieillissement : la teneur de l'organisme en magnésium diminue avec l'âge. Il est connu qu'un supplément régulier en magnésium freine le vieillissement des cellules et protège des radicaux libres. - l'oxydation des tissus et des cellules : la vitamine C n'est active qu'en présence d'ions magnésium. Les fonctions anti-oxydantes de la vitamine C seront largement potentialisées voire subordonnées à la présence d'ions magnésium. - la réaction aux blessures : lors de plaies l'organisme réagit immédiatement en mobilisant sur place des anticorps, des leucocytes, des microphages qui s'attaquent aux microbes, des macrophages qui s'attaquent aux éventuels corps étrangers, tandis que les thrombocytes colmatent la plaie. Le pouvoir phagocytaire des leucocytes, activé par le chlorure de magnésium est augmenté jusqu'à 300%. L'ammoniac réagit avec les molécules d'eau pour former de l'hydroxyde d'ammonium selon la réaction suivante: NH3 + H2O ->NH4OH. Certaines études ont montrées que la qualité pigmentaire d'un extrait est améliorée avec l'ajout d'hydroxyde d'ammonium. Notamment avec 11 une augmentation de 40 à 50 % pour le carotène et une augmentation de 20 % pour la lutéine par rapport à un témoin sans ajout d'hydroxyde d'ammonium. L'ammoniac formé grâce à l'ajout de chlorure d'ammonium va donc permettre de favoriser l'extraction des pigments et des molécules anti-oxydantes du gelidium.

L'eau de mer modifiée telle que précédemment décrite possède un effet sur la biocharge et constitue un atout supplémentaire dans le développement d'un extrait selon la présente invention. Comme illustré dans la figure 5B, l'eau de mer permet, par rapport à l'eau distillée de s'opposer au développement de champignons (levure) et est ainsi susceptible de prévenir la survenue de mycose.

Selon certains modes de réalisation, le milieu solvant comprend (i) de l'eau de mer éventuellement modifiée par une base, comme mentionné précédemment, et (ii) au moins un acide gras. Selon des modes de réalisations particuliers, le rapport massique eau de mer /acide gras est compris entre 10/90 et 90/10, par exemple entre 10/90 et 70/30, entre 10/90 et 60/40, entre 10/90 et 55/45, entre 10/90 et 45/55, préférentiellement entre 20/80 et 40/60, préférentiellement encore entre 25/75 et 35/65. Les acides gras selon l'invention sont des acides gras insaturés au moins partiellement hydrogénés, comme par exemple, l'acide palmitoléique, l'acide oléique, l'acide érucique, l'acide nervonique, l'acide linoléique , l'acide a-linolénique, l'acide y-linolénique, l'acide di-homo-ylinolénique, l'acide arachidonique, l'acide éicosapentaénoïque, l'acide docosahexaénoïque, ou encore des acides gras totalement hydrogénés, comme par exemple, l'acide butyrique, l'acide valérique, acide caproïque, l'acide caprylique, l'acide pélargonique, l'acide caprique, l'acide undécylique, l'acide laurique, l'acide tridécylique, l'acide myristique, l'acide pentadécylique, l'acide palmitique, l'acide margarique, l'acide stéarique, l'acide nonadécylique, l'acide arachidique ou l'acide béhénique.

De préférence, on utilise des acides gras saturés, naturels ou bien obtenus par hydrogénation d'acides gras insaturés. De tels acides gras peuvent par exemple être introduits via des huiles et graisses animales et/ou végétales. En outre, le solvant peut comprendre des solvants additionnels, de préférence non toxiques.

Les solvants suivants peuvent par exemple être utilisés : l'éthanol, le méthanol, le xylène, l'acétonitrile, l'acétone, etc. Selon des modes de réalisation particuliers, le mélange algue/milieu solvant pour la réalisation du macérât comprend un rapport massique algue/solvant compris entre 5/95 et 55/45, par exemple entre 10/90 et 45/55, entre 10/90 et 35/65, préférentiellement entre 15/85 et 35/65.

La composition obtenue selon l'un des modes de réalisation précédemment mentionné est laissée à macérer. Par macération, il est entendu selon la présente invention, une opération qui consiste à laisser tremper un corps solide, par exemple un végétal et particulièrement une 12 algue ou un extrait d'algue, dans un solvant hydrophile ou lipophile, par exemple un solvant à base d'eau de mer, afin d'en extraire les parties solubles. L'extraction étant extrêmement rapide, toutes les durées d'extractions à partir de 15 minutes sont compatibles avec la présente invention. Suivant les différents modes de réalisation du procédé de l'invention, la macération peut être effectuée pendant au moins 10 minutes, au moins 15 minutes, au moins 30 minutes, au moins une heure, selon certains mode de réalisation préférés au moins deux heure et de façon particulièrement préférée, au moins trois heures. La macération peut être réalisée à des température comprises entre 0 et 60 °C, de préférence, entre 2 et 50 °C, de préférence encore entre 4 et 40 °C ou entre 4 et 30°C. De façon particulièrement préférée la macération est réalisée à température ambiante (environ 22 °C) et particulièrement entre 10 et 25 °C. Selon certains mode de réalisation, le macérât obtenu peut éventuellement être filtré, par exemple avec un papier filtre, afin d'éliminer les composés résiduels non solubles de l'algue. Suivant des modes de réalisations alternatifs, le macérât obtenu par le procédé suivant la présente invention peut être supplémenté par un ou plusieurs adjuvant, sous réserve que lesdits adjuvants n'altèrent pas les capacités antioxydantes de la composition. De tels adjuvants peuvent par exemple être choisis parmi les gélifiants hydrophiles ou lipophiles, les actifs hydrophiles ou lipophiles, les conservateurs, par exemple l'acide citrique, le benzoate de sodium ou encore le sorbate de potassium, les parfums, les charges, les filtres, les bactéricides, les absorbeurs d'odeur et les matières colorantes. La mesure du potentiel antioxydant de composés ou produits est réalisée en évaluant leur aptitude à piéger des radicaux de modèles réactionnels. Il existe différentes méthodes pour déterminer le potentiel antioxydant de produits alimentaires, actifs, ingrédients, etc. Les antioxydants peuvent réduire les radicaux primaire par deux mécanismes: par transfert d'électron singulet ou par transfert d'atome d'hydrogène. Dans la méthode TEAC (TroloxTM Equivalent Antioxydant Capacity, ou méthode ABTS.+) l'activité antioxydante totale d'une molécule est déduite de sa capacité à inhiber un radical ABTS+ obtenu à partir de l'ABTS (sel d'ammonium de l'acide 2,2'-azinobis-(3-éthylbenzothiazoline-6-sulfonique) comparativement à un antioxydant de référence le TroloxTM(ou acide 6-hydroxy-2,5,7,8-tétraméthylchroman-2- carboxylique, analogue structural hydrosoluble de la vitamine E). l'obtention du radical cation résulte du contact de l'ABTS avec une enzyme de péroxydation en présence de H2O2 ou d'un oxydant. Le contact du radical ABTS+ avec un donneur de H' conduit à l' ABTS+ et à la décoloration à 734 nm de la solution. La méthodes ABTS.+ Decolorization Assay (ou TEAC et AAEC) joue sur le transfert d'électron singulet, alors que la méthode ORAC joue sur le transfert d'un atome d'hydrogène. 13 La méthode ORAC est plus récente et est applicable sur quasiment toutes les matrices (extraits végétaux, aliments, plasma sanguin, etc.) aussi bien sur des composés hydrophiles que lipophiles. Le test ORAC propose une mesure standardisée largement acceptée. Le pouvoir anti-oxydant de la présente invention est évalué au moyen de la méthode ORAC (Oxygen radical absorbance capacity), définie dans l'article de G. Cao, HM Alessio, RG Cuiter, Oxygen-radical absorbance capacity assay for antioxidants, Free Radic Biol Med., 14(3) (1993) 303-311). Cette méthode est basée sur la décroissance de la fluorescence d'une molécule fluorescente, comme la beta-phycoérythrine, en présence d'un oxydant chimique l'AAPH (2,2'-azobis(2-amidinopropane)dihydrochloride). Le produit à tester peut être capable de protéger la fluorescéine et réduire la vitesse de dégradation de la fluorescence. Il possède alors un pouvoir antioxydant. La méthode est réalisée en microplaque dans lesquelles sont mesurés en parallèle, le déclin de la fluorescéine au cours du temps en présence de concentrations croissantes d'une molécule de référence, le TroloxTM (ou acide 6-hydroxy-2,5,7,8-tétraméthylchroman-2-carboxylique, analogue structural hydrosoluble de la vitamine E), et des échantillons à tester à différentes concentrations. Le but est d'obtenir une réponse comparable à celle de la gamme. On peut ainsi après traitement des données, calculer l'équivalent TroloxTM La méthode faisant intervenir une cinétique, la mesure de la capacité se fait par l'intermédiaire du calcul des aires sous la courbe. C'est la seule méthode qui combine à la fois le pourcentage d'inhibition de la réaction d'oxydation et la longueur dans le temps de cette inhibition en une seule mesure. Elle donne une mesure globale de la capacité antioxydante. L'avantage majeur du test ORAC est de proposer une mesure standardisée et largement acceptée. La mesure des valeurs ORAC selon la présente invention est indiquée en pmole d'équivalent TroloxTM par gramme d'échantillon (ou macérât selon la présente invention). La capacité oxydante en équivalent TroloxTM correspond à la concentration (pmoles/g) de TroloxTM ayant la même activité que le produit à tester. De façon générale un macérât suivant la présente invention possède un pouvoir anti-oxydant d'au moins 25 pmoles d'équivalents acide 6-hydroxy-2,5,7,8-tetramethylchroman-2-carboxylique (TroloxTM) /g de macérât. Plus particulièrement, ledit pouvoir antioxydant est au moins de 30, au moins de 40 ou de 50 pmoles d'équivalents acide 6-hydroxy-2,5,7,8-tetramethylchroman-2-carboxylique (TroloxTM) /g de macérât.

La présente invention concerne également un macérât tel que défini dans la présente description pour son utilisation thérapeutique en tant que composition antioxydante, dermatologique ou non, pour prévenir, retarder ou traiter les dommages cellulaires au niveau cutané et/ou le vieillissement cutané, induits par les radicaux libres ou les stress oxydant. La présente invention concerne également l'utilisation d'un macérât tel que défini dans la présente description pour la fabrication d'un médicament destiné à prévenir, retarder ou traiter les dommages cellulaires au niveau cutané et/ou le vieillissement cutané, induits par les radicaux libres ou les stress oxydant. La présente invention concerne aussi une méthode pour traiter le 14 photo-vieillissement comprenant l'administration d'une composition comprenant un macérât tel que défini par l'invention. La présente invention se rapporte également à l'utilisation cosmétique non thérapeutique d'un macérât tel que défini dans la présente description dans une composition destinée à réduire ou prévenir le vieillissement. Une telle composition vise par exemple à protéger la peau contre les effets du rayonnement ultraviolet et/ou le vieillissement photoinduit et peut être utilisée comme agent anti-âge pour améliorer les qualités et l'apparence de la peau avant, pendant ou après l'exposition aux rayonnements ultraviolets. Les compositions cosmétiques et/ou dermatologiques selon la présente invention peuvent également se présenter sous une forme permettant une application topique sur la peau, sous toute forme connue de l'homme du métier dans le domaine de la cosmétologie et de la dermatologie sans autre restriction galénique que l'application sur la peau du visage ou du corps. De façon avantageuse, les compositions selon l'invention se présentent sous la forme d'un gel, d'une crème, d'une émulsion, d'un lait, d'un spray, etc.

Ces compostions peuvent également comprendre un ou plusieurs agents de formulations ou additifs d'usage connu et classique dans les compositions dermatologiques et cosmétiques, tels que, à titre d'exemple et de façon non limitative, des adoucissants, des colorants, des actifs filmogènes, des tensioactifs, des parfums, des conservateurs, des émulsionnants, des huiles, des glycols, des agents absorbeurs de sébum, des vitamines, etc.

Les exemples suivants présentent des modes préférés de réalisation sans pour autant constituer en une quelconque façon une limitation de l'invention.

a- préparation de l'algue Gelidium sesquipedale : Le protocole ci-dessous décrit la préparation de 100g d'algue Gelidium sesquipedale (afin d'obtenir les caractéristiques maximales de l'extrait). 1]-Peser 150g d'algue sèche 2]-Sécher 150g d'algue à l'air libre au soleil. 2]-Broyer l'algue au broyer à couteaux pendant 2 minutes à vitesse maximale (650W). 3]-Passer au tamis de 500pm l'algue précédemment broyée. 4]-Peser 100g de l'algue broyée tamisée.

b- Préparation de l'eau de mer : Le protocole ci-dessous concerne la préparation d' 1 litre d'eau de mer (afin d'obtenir les caractéristiques maximales de l'extrait). 1- Pomper l'eau de mer 2- Filtrer à 0,2 pm 15 Les étapes 1 et 2 peuvent être évitées en prenant de l'eau de mer filtrée à 0,2 pm auprès d'un fournisseur. 3-Prélever 1 litre de cette eau de mer filtrée 4-Ajuster le pH à 10, à l'aide de NaOH en homogénéisant le milieu (il se forme un précipité). 5-Ajouter progressivement du chlorure d'ammonium jusqu'à dissolution complète du précipité. Bien mélanger durant cette étape (réaliser cette étape rapidement après l'étape 4. L'eau de mer modifiée de la présente invention possède un effet sur la biocharge et en fait en atout supplémentaire dans le développement d'un extrait. Un test d'ensemencement dans de l'eau de mer et de l'eau distillée a permis d'obtenir les résultats suivants en terme de bactéries et de levures (figures 5 et 6). L'utilisation de cette eau de mer va permettre (par rapport à de l'eau distillée) de maîtriser la biocharge de l'extrait, en s'opposant au développement de champignons et empêcher la survenue de mycoses.

c- choix des conditions d'extraction : L'extraction de l'algue Gelidium sesquipedale est réalisée par macération de l'algue dans un solvant. La durée de macération et la température sont des paramètres qui peuvent influer les caractéristiques de l'extrait (figure 6). Dans la présente invention, à partir de 1 heure de macération, l'extrait est déjà riche en molécules extraites. On arrive à un plateau dès 3 heures de macération.

En ce qui concerne la température, on observe un maximum d'extraction à 22°C (figure 7). La proportion d'algue et de solvant ainsi que la composition du solvant ont également une influence majeure sur l'extraction de l'algue. Des essais ont été réalisés avec les caractéristiques suivantes : Le solvant d'extraction est préparé à partir de l'eau de mer (EDM) précédemment obtenu et d'acide gras (AG), lesdits acides gras étant au moins partiellement hydrogénés. Par ailleurs, les AG ayant obtenus la certification ECOCERT sont privilégiés dans la présente invention. Neuf compositions différentes (%) du mélange ont été réalisées. - 10 EDM/90 AG - 20 EDM/80 AG -30EDM/70 AG - 40 EDM/60 AG - 50 EDM / 50 AG - 60 EDM / 40 AG - 70 EDM / 30 AG -80 EDM / 20 AG - 90 EDM /10 AG Pour chaque composition de solvant, plusieurs rapports algue/solvant ont été étudiés: - 10 algue / 90 solvant 16 - 20 algue / 80 solvant - 30 algue / 70 solvant - 40 algue / 60 solvant - 50 algue / 50 solvant Si on place un seuil à 10% de l'effet maximum, on détermine une fenêtre dans laquelle les conditions de macération (solvant et algue) sont compatibles avec l'invention (figure 8) : - Avec 10 % d'algue / 90 % de solvant un effet significatif est observé entre 10 et 71 % d'eau de mer. - Avec 20 % d'algue / 80 % de solvant un effet significatif est observé entre 10 et 69 % d'eau de mer. - Avec 30 % d'algue / 70 % de solvant un effet significatif est observé entre 10 et 56 % d'eau de mer. - Avec 40 % d'algue / 60 % de solvant un effet significatif est observé entre 10 et 54 % d'eau de mer. - Avec 50 % d'algue / 50 % de solvant un effet significatif est observé entre 11 et 43 % d'eau de mer.

d- Protocole de l'extraction : Le mode opératoire de l'invention de l'extrait est donné pour obtenir 100 mL d'extrait avec les conditions optimales d'extraction. C'est-à-dire 20% d'algue et 80% de solvant (à 70% d'acides gras hydrolysés - 30 % d'eau de mer modifiée). Il est modulable pour tous les paramètres compatibles avec l'extraction. 1- Peser 40 g de poudre d'algue tamisée à 500pm 2- Placer l'algue dans un bécher de 250 mL 3- Prélever 160 mL d'eau de mer modifiée. 4- Ajouter cette eau de mer dans le bécher contenant l'algue. 5-Mélanger à l'aide d'une spatule en acier inox. 6-Laisser macérer pendant 3 heures à 22 °C. 7-Filtrer la macération à l'aide d'un papier filtre. 8-Peser 100 mL de l'extrait 9-Ajouter le système de conservation adéquat. Etant entendu que dans le cadre d'une certification bio, il s'agit par exemple d'acide citrique, de benzoate de sodium ou de sorbate de potassium. e-Tests comparatifs : Plusieurs extraits ont été réalisés, un extrait témoin, un extrait sur base d'eau distillée et un extrait sur base d'eau de mer. 17 L'extrait témoin correspond à un extrait de référence avec lequel aucune coloration n'a été obtenue après macération. Son pouvoir antioxydant est de 4,9 pmoles d'équivalents TroloxTM/ g d'extrait. L'extrait obtenu avec l'eau distillée présente une augmentation d'un facteur 9,02 par rapport à l'extrait témoin. Il est de 44,2 pmoles d'équivalents TroloxTM/ g d'extrait ou de macérât. L'extrait obtenu avec l'eau de mer présente des capacités antioxydantes encore plus élevées. Elle est de 65 pmoles d'équivalents TroloxTM/ g d'extrait. Cela signifie que l'on obtient une augmentation d'un facteur 13,27 par rapport à l'extrait témoin et une augmentation de 147 0/0 par rapport à l'extrait obtenu avec l'eau distillée en utilisant un solvant à base d'eau de mer.

Les différents modes de réalisation décrits dans la présente description peuvent être combinés entre eux sans limitation. La combinaison des différents modes de réalisation du procédé objet de l'invention, précédemment décrits, permet d'obtenir un macérât ayant des propriétés, notamment antioxydantes optimisées. Le tableau 1 ci-dessous illustre un exemple d'une telle combinaison.

Tableau 1 : Variantes de réalisation du procédé Avantage conférés au macérât obtenu d'obtention du macérât pH ajusté entre 9,5 et 10,5 Améliore le rendement d'extraction en molécule antioxydante Ajout de Chlorure de magnésium Entraîne la formation de MgCl2 : MgCl2 freine le vieillissement cellulaire et renforce l'immunité Ajout d'hydroxyde d'ammonium Entraîne la formation de NH4OH Améliore le rendement d'extraction en molécule antioxydante Broyage de l'algue La diminution de la granulométrie augmente les surfaces d'échanges et ainsi le rendement d'extraction Salinité (utilisation d'eau de mer) L'augmentation de la salinité (vis-à-vis de l'eau distillée) favorise les échanges osmotiques et ainsi le rendement d'extraction Sélection et stabilisation de la biocharge Favorise le développement de bactéries non (filtration et utilisation d'eau de mer) pathogènes et inhibe la croissance de levures et moisissures. Comme mentionné précédemment (figure 8), outre ces variantes de réalisation, il est encore possible d'ajuster le rapport eau de mer/acide gras du solvant ainsi que le rapport algue/solvant. Comme exemplifié ci-dessus, les valeurs ORAC les plus importantes ont été 18 obtenues par exemple pour des macérât réalisés à partir de mélanges comprenant au moins 80 % de solvant, ledit solvant à base d'eau de mer comprenant entre 10 et 75 % d'eau de mer et plus particulièrement entre 15 et 45 % d'eau de mer.

Les caractéristiques du macérât obtenu selon le protocole précédemment illustré et d'une manière générale au macérât suivant la présente invention peuvent être résumées de la manière suivante : ANALYSES SPECIFICATIONS Aspect Liquide Couleur Brun - rouge Odeur Spécifique Texture fluide Corps étranger Absence pH 7,2«8,8 viscosité 1,02< < 1,12 Valeur ORAC > 25 pmol d'eq Trolox / g

Claims (13)

1. REVENDICATIONS1- Macérât comprenant un mélange (i) d'algue Gelidium sesquipedale et (ii) de solvant à base d'eau de mer.
2. 2- Macérât selon la revendication 1, caractérisé en ce que ladite eau de mer a un pH ajusté entre 9 et 12.
3. 3- Macérât selon la revendication 1 ou 2, comprenant en outre un ou plusieurs adjuvants 10 choisi(s) parmi les gélifiants hydrophiles ou lipophiles, les actifs hydrophiles ou lipophiles, les conservateurs, par exemple l'acide citrique, le benzoate de sodium ou encore le sorbate de potassium, les parfums, les charges, les filtres, les bactéricides, les absorbeurs d'odeur et les matières colorantes. 15
4. 4- Macérât selon l'une des revendications précédentes, caractérisé en ce que l'algue est broyée et/ou tamisée.
5. 5- Macérât selon l'une des revendications précédentes, caractérisé en ce qu'il comprend un mélange d'algue et de solvant à base d'eau de mer suivant un rapport massique algue/solvant 20 compris entre 5/95 et 55/45.
6. 6- Macérât selon l'une des revendications précédentes caractérisé en ce que le solvant à base d'eau de mer comprend un mélange (i) d'eau de mer et (ii) d'au moins un acide gras, selon un rapport massique eau de mer/acide gras compris entre 10/90 et 90/10.
7. 7- Macérât selon l'une des revendications précédentes, caractérisé en ce qu'il possède un pouvoir anti-oxydant d'au moins 25 pmoles d'équivalents acide 6-hydroxy-2,5,7,8-tetramethylchroman-2-carboxylique (TroloxTM) /g de macérât. 30
8. 8- Macérât selon l'une quelconque des revendications 1 à 7, pour son utilisation en tant que composition antioxydante, pour prévenir, retarder ou traiter les dommages cellulaires induits par les radicaux libres.
9. 9- Utilisation cosmétique non thérapeutique du macérât selon l'une des revendications 1 à 7, 35 dans une composition cosmétique destinée à réduire ou prévenir le vieillissement de la peau et particulièrement le vieillissement induit par le rayonnement UV. 19 25 20
10. 10- Procédé d'obtention d'un macérât selon l'une des revendications 1 à 7, caractérisé en ce qu'il comporte les étapes suivantes : 1- obtenir et sécher l'algue Gelidium sesquipedale 2- réaliser un macérât, par mélange de l'algue résultant de l'étape 1 dans un solvant, ledit solvant comprenant de l'eau de mer, dont le pH a été ajusté entre 9 et 12.
11. 11- Procédé selon la revendication 10, caractérisé en ce que ledit solvant comprend un mélange (i) d'eau de mer et (ii) d'au moins un acide gras.
12. 12- Procédé selon l'une des revendications 10 ou 11, caractérisé en ce que l'algue Gelidium sesquipedale est broyée et/ou tamisée après séchage.
13. 13- Procédé l'une des revendication 10 à 12, caractérisé en ce que l'eau de mer est préalablement filtrée avant ajustement du pH, ladite filtration étant réalisée de façon à éliminer les particules de tailles supérieures à 0,2 pm.