FR2946057A1

FR2946057A1 - Dispositif d'approvisionnement d'un automate d'ensemencement et procede utilisant un tel automate.

Info

Publication number: FR2946057A1
Application number: FR0902644A
Authority: FR
Inventors: Emmanuel Jalenques
Original assignee: INTERLAB
Current assignee: INTERLAB
Priority date: 2009-06-02
Filing date: 2009-06-02
Publication date: 2010-12-03
Anticipated expiration: 2029-06-02
Also published as: GB201009001D0; US20100304466A1; CN101892149A; JP2011069810A; GB2470820A8; FR2946057B1; CN101892149B; GB2470820B; GB2470820A

Abstract

La présente invention se rapporte à un dispositif d'approvisionnement d'un automate d'ensemencement pour un échantillon sur un substrat, caractérisé en ce qu'il comprend une tourelle (13) mobile en rotation, de préférence autour d'un axe (X13) sensiblement vertical, et un bras (14) mobile en rotation, de préférence autour d'un axe (X14) sensiblement horizontal, porté par la tourelle, une extrémité distale (16) du bras comprenant des moyens pour y fixer un stylet (18), et, des moyens (71, 72) pour lever ou baisser le bras.

Description

io La présente invention se rapporte au domaine des automates permettant l'ensemencement d'un substrat de culture avec un échantillon à analyser, généralement un échantillon sensiblement liquide. Elle se rapporte plus particulièrement à un dispositif pour prélever et ensemencer l'échantillon, par exemple sur un substrat dans une boîte de Pétri. 15 Dans un automate d'ensemencement, chaque échantillon est prélevé par l'automate dans un bac d'échantillon, à l'aide d'un stylet, puis réparti à la surface du substrat à l'aide du même stylet. Entre chaque ensemencement, il convient de nettoyer le stylet afin de ne pas contaminer l'échantillon suivant. Pour le nettoyage du stylet, dans les automates de l'art antérieur le 20 stylet est plongé dans plusieurs bacs le premier contenant un désinfectant, les deux suivant contenant de l'eau stérile pour le rinçage du désinfectant. Un tel procédé est décrit dans le document USB 5,547,872. Le stylet doit donc pouvoir être déplacé depuis une zone de prélèvement de l'échantillon dans le bac correspondant, vers une zone 25 d'ensemencement, dans laquelle l'échantillon doit être réparti, généralement selon un motif en spirale, puis à chaque poste de nettoyage, puis jusque dans chaque bac de nettoyage. Dans tous les cas, le déplacement du stylet se fait linéairement, par exemple grâce à un entraînement par crémaillère. A chaque position, le stylet doit être abaissé ou relevé, par exemple 30 pour plonger dans le bac d'échantillon, ou dans un bac de liquide nettoyant. 1 - 2 Les dispositifs de l'art antérieur sont d'un entretien délicat. En outre, ils ne présentent pas une fiabilité satisfaisante pour la réalisation du motif de l'ensemencement. L'invention a pour but de proposer un dispositif qui puisse répondre aux inconvénients précédemment évoqués, particulièrement un dispositif simple et peu couteux, permettant une manipulation aisée, fiable et efficace de l'échantillon et éventuellement des produits de nettoyage. Selon l'invention, un tel dispositif d'approvisionnement d'un automate d'ensemencement pour un échantillon sur un substrat est caractérisé en ce qu'il to comprend une tourelle mobile en rotation, de préférence autour d'un axe sensiblement vertical, et un bras mobile en rotation, de préférence autour d'un axe sensiblement horizontal, porté par ladite tourelle, une extrémité distale dudit bras comprenant des moyens pour y fixer un stylet, et, des moyens pour lever ou baisser ledit bras. Les moyens pour lever ou baisser ledit bras 15 comprennent un piston mobile, de bas en haut et inversement, ledit piston étant disposé, de préférence à proximité de l'axe, de sorte que le bras vient en appui sur une extrémité supérieure dudit piston. Les moyens pour fixer le stylet sont de préférence des moyens de fixation sans outillage. Ils peuvent avantageusement comprendre: 20 - une bague prévue pour être fixée, de préférence collée, sur le stylet ; - des moyens de positionnement axial et transversal de la bague relativement à l'extrémité distale du bras; et, - des moyens de maintien de la bague sur l'extrémité distale du bras. Les moyens de positionnement axial et transversal peuvent 25 comprendre une surface conique sur la bague, et une surface conique d'un logement ménagé dans l'extrémité distale, lesdites surfaces coniques ayant sensiblement le même angle, et de préférence prévues pour se coincer l'une dans l'autre. 2946057 -3 Les moyens de maintien de la bague peuvent comprendre, une nervure périphérique sur la bague, et, un écrou, prévu pour être vissé sur l'extrémité et coopérant avec la nervure pour maintenir la bague en prise avec l'extrémité. Le stylet est avantageusement formé dans une extrémité d'un tube 5 souple. De préférence, ce tube est monté de sorte qu'il est entièrement accessible et montable et/ou démontable sans outillage. Afin de s'assurer que seul le tube puisse être souillé par l'échantillon, le tube a de préférence une longueur telle qu'il offre un volume intérieur suffisant pour y stocker un volume d'échantillon suffisant pour réaliser l'ensemencement. Afin que cette to longueur soit convenablement disposée dans l'automate, celui-ci peut comprendre un rouleau, pour y enrouler une portion du tube. En outre, le dispositif selon l'invention comprend avantageusement des moyens de pompage motorisés, de préférence comprenant une seringue, disposés en amont du tube, prévus pour au moins aspirer et rejeter l'échantillon 15 par le stylet. Il peut en outre comprendre des moyens de distribution disposés de sorte que les moyens de pompage peuvent en outre aspirer au moins un produit dans une réserve correspondante, puis de rejeter ledit produit par le stylet. De préférence, les moyens de distribution sont disposés de sorte que les moyens de pompage peuvent aspirer deux produits, indépendamment l'un de 20 l'autre, chaque produit ayant une réserve spécifique, puis de rejeter indépendamment chaque produit par le stylet. Avantageusement, l'un des produits est un produit désinfectant, de préférence un alcool, l'autre est un produit de rinçage, de préférence de l'eau distillée. Le dispositif comprend avantageusement des moyens pour y adapter 25 une boîte de Pétri prévue pour contenir le substrat. L'invention concerne aussi un procédé d'ensemencement d'une boîte de Pétri utilisant un dispositif selon l'invention. Plusieurs modes d'exécution de l'invention seront décrits ci-après, à titre d'exemples non limitatifs, en référence aux dessins annexés dans 30 lesquels : - 4 - la figure 1 illustre schématiquement le fonctionnement d'un automate d'ensemencement selon l'invention; la figure 2 est une coupe qui illustre schématiquement un dispositif selon l'invention pour l'approvisionnement de l'automate de la figure 1, ce dispositif comprenant un bras monté sur une tourelle rotative; - la figure 3 est une demi-coupe qui illustre des moyens pour fixer un stylet à l'extrémité du bras de la figure 2; - les figures 4 et 5 illustrent deux modes de mise en oeuvre d'un procédé d'ensemencement selon l'invention; I o la figure 6 est une vue en coupe d'une zone stockage et de prélèvement pour un produit à ensemencer, dans l'automate de la figure 1; la figure 7 est une vue en coupe de moyens de nettoyage pour le stylet de la figure 3; La figure 8 est une vue similaire à celles des figures 4 et 5, dans 15 laquelle la boite de Pétri est carrée et l'ensemencement a la forme de lignes droites parallèles entre elles; et, la figure 9 est une vue similaire à celle de la figure 8, dans laquelle l'ensemencement a la forme de carrés sensiblement homothétiques. La figure 1 illustre un système d'automate pour ensemencer un substrat 20 2 avec un échantillon 3 à tester. Dans l'exemple illustré, le substrat est contenu dans une boîte de Pétri 4, sous forme d'un gel, et le produit 3 est sensiblement liquide. Le système illustré comprend une zone d'approvisionnement 11 pour l'échantillon à tester et une zone d'ensemencement 12. Il comprend des moyens 25 10 pour prélever l'échantillon 3 dans la zone d'approvisionnement et le déposer, au moins en partie, à la surface du substrat 2. L'automate comprend un plateau 6, tournant autour d'un axe vertical X6. Le plateau 6 constitue un support pour la boite de Pétri 4. Il est au moins indirectement entraîné en rotation autour de son axe X6 par un moteur 7.

Un procédé d'ensemencement selon l'invention sera plus particulièrement décrit en référence aux figures 4 et 5. Les moyens de prélèvement comprennent une tourelle 13, mobile en rotation autour d'un axe vertical X13, sous l'action d'un moteur 15. La tourelle est munie d'un bras 14. Le bras 14 est mobile dans un plan vertical, relativement à la tourelle 13, en rotation autour d'un axe X14 sensiblement horizontal porté par la tourelle 13. Une extrémité distale 16 du bras 14 porte un tube 17, souple, dont une extrémité 18, s'étendant vers le bas depuis le bras 16, forme un stylet 18. La tourelle sera décrite plus en détails en référence aux 1 o figures 2 et 3. De préférence, le tube est réalisé en un matériau peu adhérant, par exemple du polytétrafluoroéthylène (PTFE). Cette disposition est particulièrement avantageuse en ce qu'elle limite les adhérences, notamment lorsqu'un échantillon a une consistance relativement épaisse et collante. L'automate de la figure 1 comprend en outre des moyens de nettoyage 15 20 pour le stylet. Dans l'exemple illustré, les moyens de nettoyage 20 comprennent un bac à déversement 21, des moyens de vidange 22, pour l'évacuation des effluents de nettoyage depuis le bac à déversement 21 et un vase de rétention 23 pour les effluents ainsi évacués par pompage. Dans l'exemple illustré, les moyens de vidange 22 comprennent une pompe à 20 membrane. Le vase de rétention est fermé par un bouchon 24. Le bouchon est percé d'un évent 25, ayant la forme d'un tube. Ce tube 25 est muni d'un filtre 26 de 0,2 m, de sorte que l'atmosphère est protégée de toute éventuelle contamination microbienne. Le bac à déversement 21 et son utilisation seront plus particulièrement décrits en référence à la figure 7. 25 L'automate de la figure 4 comprend aussi des réserves 31 et 32 prévues pour contenir des liquides pour le nettoyage du stylet 18. De préférence chacune de ces réserves est amovible et peut être remplacée par une pleine, chaque fois que nécessaire. Chaque réserve 31,32 a la forme d'une bouteille fermée par un bouchon 33 muni d'une prise d'air 34 pour maintenir 30 l'intérieur de la bouteille à la pression atmosphérique à mesure du prélèvement 2946057 -6 du liquide qu'elle contient. Chaque prise d'air 34 est munie d'un filtre 35, par exemple d'un filtre 0,2 m, afin d'assurer la stérilité du liquide contenue dans la réserve correspondante. Une première réserve 31, parmi les deux réserves contient un produit désinfectant 36, de l'alcool 36 dans l'exemple illustré. La 5 deuxième réserve 37 contient un liquide de rinçage 37, de l'eau distillée 37 dans l'exemple illustré. L'automate comprend en outre des moyens de pompage 40 et des moyens de distribution 41 pour les différents fluides 3, 36, 37 manipulés par l'automate 1. Dans l'exemple illustré, les moyens de pompage comprennent Io une seringue 40 formée d'un cylindre 42 dans lequel coulisse un piston 43. Le piston est entrainé par un moteur 44, de préférence un moteur pas à pas. Les moyens de distribution sont ici schématisés par trois vannes 50, 51. Une première vanne 50 parmi les trois vannes comprend deux positions, la première position, illustrée à la figure, permet d'aspirer ou de rejeter un fluide 15 au travers du tube 17. La deuxième position de la première vanne 50 permet de mettre en prise la seringue 40 avec une conduite 52 d'approvisionnement en liquide de nettoyage 36,37. La conduite 52 comprend deux branches 521 et 522, chacune en prise avec une réserve respective 31,32 de liquide de nettoyage. 20 Chacune des deuxième et troisième vannes 51 est affectée à une réserve respective 31,32 de liquide de nettoyage 36,37. Dans une première position ouverte 51A chaque vanne 51 permet l'écoulement du liquide respectif dans la conduite 52. Dans une deuxième position fermée 51B, illustrée à la figure 1, chaque vanne 51 empêche l'écoulement du liquide 25 respectif dans la conduite 52. Un capteur 55 est disposé sur chacune des branches 521,522. Le capteur 55 est prévu pour détecter l'absence ou la présence du liquide correspondant dans la branche. L'absence de liquide dans l'une des branches impose l'arrêt de l'automate 1 et le remplacement ou le remplissage de la 30 réserve correspondante. 2946057 -7 Il est préférable que l'échantillon prélevé dans le tube soit maintenu suffisamment en aval de la seringue 40, de sorte que celle-ci ne puisse être contaminée par l'échantillon. Ainsi, le tube est prévu d'une longueur suffisante pour que son volume intérieur puisse contenir un échantillon suffisant pour 5 l'ensemencement. Pour permettre l'arrangement de cette longueur de tube à l'intérieur de l'automate 1, celui-ci comprend un rouleau 57 autour duquel est enroulée une portion 17A du tube 17. De préférence, le rouleau 57 comprend une forme en pas de vis le long de laquelle la portion 17A de tube est disposée, et, de préférence fixée par encliquetage à l'intérieur du pas de vis. to Ainsi disposé, le tube (17) est apparent et accessible sur toute sa longueur. Il est monté par emboitement et encliquetage, de sorte qu'il est démontable sans outillage. Dans l'exemple illustré, l'automate comprend un corps en tôle inoxydable, sur laquelle sont montés les différents éléments qui le composent. 15 Le corps n'est pas représenté à la figure 1. Le corps comprend notamment une plateforme sensiblement horizontale 62, notamment visible aux figures 2, 6, 7 et 8. On va maintenant décrire, de façon générale un cycle d'ensemencement. 20 Un échantillon est d'abord approvisionné dans la zone d'approvisionnement, par exemple dans un récipient 60. Le bras 14 est amené dans une position de prélèvement 14A de sorte que le stylet 18 soit au-dessus du récipient 60. Le bras 14 est ensuite abaissé pour que le stylet plonge d'une profondeur PA dans l'échantillon. La vanne 50 25 étant dans la position 50A, une partie suffisante de l'échantillon est aspirée dans le tube à l'aide de la seringue 40. Le bras est ensuite relevé, puis amené dans une position 14B par une rotation de la tourelle 13 autour de son axe X13, particulièrement illustrée à la figure 1, pour l'ensemencement du substrat 2. Le bras 14 est rabaissé de sorte 30 que la pointe du stylet soit suffisamment proche du substrat pour y déposer l'échantillon avec la précision souhaitée. Par une combinaison de mouvements rotatifs de la tourelle 13 autour de son axe X13 et du plateau 6 autour de son axe X6, l'échantillon est automatiquement déposé selon un motif préalablement défini. Le motif peut être une spirale ou une combinaison de points et/ou de cercles ou d'arcs de cercle concentriques, tel que cela est illustré en référence aux figures 4 et 5. Une fois l'ensemencement terminé, le bras est relevé, puis amené dans une position de nettoyage 14C par une rotation de la tourelle 13 autour de son axe X13, pour le nettoyage du stylet. Le surplus d'échantillon encore présent ~o dans le tube en est expulsé dans le bac à déversement 21, à l'aide de la seringue 40, la première vanne 50 étant toujours dans la position 50A. On abaisse le bras 14, de sorte que le stylet 18 plonge dans le bac à déversement. La vanne 50 est mise dans la position 50 B, la troisième vanne 51 est maintenue fermée, en position 51B, la deuxième vanne 51 est mise dans la 15 position 51A, et la seringue est actionnée de sorte qu'elle se remplit d'alcool 36. Ensuite, les positions de la première vanne 50 et de la deuxième vanne 51 sont inversées, et le piston 43 est repoussé à l'intérieur du cylindre 42, de sorte que l'alcool 36 est expulsé dans le bac 21, en parcourant toute la longueur du tube 17. L'intérieur du tube 17 est ainsi entièrement désinfecté. L'extérieur du 20 tube, à l'endroit du stylet est lui-même désinfecté à mesure où le bac 21 se remplit d'alcool. La vanne 50 est remise dans la position 50 B, la deuxième vanne 51 est maintenue fermée, en position 51B, la troisième vanne 51 est mise dans la position 51A, et la seringue est actionnée de sorte qu'elle se remplit d'eau 25 distillée 37. Ensuite, les positions de la première vanne 50 et de la troisième vanne 51 sont inversées, et le piston 43 est repoussé à l'intérieur du cylindre 42, de sorte que l'eau distillée est expulsé dans le bac 21, en parcourant toute la longueur du tube 17. L'intérieur du tube 17 est ainsi entièrement rincé. L'extérieur du tube, à l'endroit du stylet est lui-même rincé à mesure où le bac 30 21 se remplit d'eau distillée 37.

Un nouveau cycle peut alors être entamé. L'échantillon étant maintenu en aval de la seringue, celle-ci et la partie amont du tube ne contiennent alternativement que de l'alcool 36 ou de l'eau 37. C'est l'eau résiduelle qui sert de piston liquide entre le piston 43 de la seringue 40 et l'échantillon, lorsque l'échantillon est manipulé, d'abord pour le prélever et ensuite pour l'ensemencer. On va maintenant décrire la tourelle 13 en référence à la figure 2. La tourelle comprend une base 61 sensiblement en forme de disque et équipée d'une jupe 610 périphérique. La plateforme 62 comprend un orifice circulaire 63. Un relevé 64 est formé dans la plateforme 62 en périphérie de l'orifice 63. La jupe 610 est prévue pour venir en recouvrement du relevé 63, de sorte qu'ils contribuent ensemble à éviter la pénétration de liquide et/ou de solide, à l'intérieur 65 du corps de l'automate 1. Des moyens d'entrainement 66 s'étendent sous la base vers l'intérieur du corps. Ils sont liés, au moins indirectement, au moteur 15 de la tourelle 13. La base porte en outre une chape 67 définissant l'axe horizontal X14 de basculement du bras 14, et portant le bras. A l'opposé de son extrémité distale 16, relativement à l'axe X14, l'arbre comprend une extrémité proximale 68 sur laquelle est fixé un contrepoids 69, de sorte que le basculement du bras se fait sensiblement sans effort. L'extrémité proximale 68 et le contrepoids 69 sont à l'aplomb de la base 61. Un vérin 71 s'étend verticalement vers le haut depuis la base 61. Le vérin est disposé à proximité de la chape 67, entre la chape et l'extrémité distale 16. Le bras repose par son propre poids sur l'extrémité supérieure 72, mobile verticalement, du vérin 71. Ainsi, le bras 14 est mobile dans un plan vertical porté par la tourelle 13. L'extrémité distale 16 du bras 14 se relève ou s'abaisse avec l'extrémité 72 du vérin 71. Un capot hémisphérique 73 vient recouvrir et protéger l'intérieur de la tourelle 73. 2946057 -10- La figure 3 décrit un montage particulier pour fixer le tube à l'extrémité 16 du bras 14. Ce montage comprend les éléments suivants, chacun sensiblement de révolution, et montés coaxialement les uns aux autres: - un logement 75 traversant de haut en bas l'extrémité 16; 5 - une bague 76 prévue pour être collée, sur le tube, la partie du tube dépassant en aval de la bague formant le stylet 18; - un écrou 77 pour maintenir la bague dans le logement. Le logement 75 comprend, de bas en haut, une portion cylindrique 81 de petit diamètre, suffisant pour y passer le stylet 12, puis une portion conique to allant en s'élargissant 82, et une portion cylindrique de grand diamètre 84 formant avec la portion conique un épaulement 85. L'intérieur de la portion 85 est taraudé. La bague 76 comprend, d'aval en amont, une portion conique 81 allant en s'élargissant progressivement selon un angle identique à la portion 82 du 15 logement 75. Les portions coniques sont prévues pour coopérer entre elles afin de positionner transversalement et longitudinalement la bague dans le logement 75, donc le stylet relativement à l'extrémité 16 du bras 14. Le plus grand diamètre de la portion 91 est supérieur au plus grand diamètre de la portion 82, de sorte que la portion 91 s'étende au-delà de la portion 82, à 20 l'intérieur de la portion cylindrique 84. Au-delà de la portion conique 91, la bague comprend une nervure annulaire 92 s'étendant radialement au-delà de la portion conique, puis une portion cylindrique 93, radialement en retrait de la nervure 92. L'écrou 77 comprend un percement cylindrique axial 96, prévu pour le 25 passage de la portion cylindrique 94 de la bague 76, et une face antérieure 97 prévue pour venir en appui sur la nervure 93 de la bague. Ainsi, lorsque le montage est réalisé, l'écrou étant en prise avec le taraudage du logement 75, la face antérieure de l'écrou vient en appui contre la nervure et maintient la bague en position dans le logement. De ce fait, le stylet est alors maintenu dans une position fixe et définie relativement à l'extrémité 16 du bras. 2946057 -11- On va maintenant décrire des motifs améliorés pour l'ensemencement d'une boîte de Pétri 4. Dans les automates de l'art antérieur l'échantillon est ensemencé selon un motif formant une spirale sur le substrat. Le motif est réalisé en déplaçant 5 radialement le stylet à vitesse linéaire constante, alors que la boite de Pétri tourne sur elle-même à vitesse angulaire constante. Une telle méthode est particulièrement avantageuse en ce qu'elle permet de faire diminuer progressivement la densité surfacique en échantillon à mesure ou l'on s'éloigne du centre de la boîte. Cependant, l'interprétation des résultats est compliquée et to nécessite des abaques particuliers à l'ensemenceur utilisé. Les risques d'erreur d'interprétation sont importants. Il est proposé selon l'invention de réaliser des motifs sous forme de cercles concentriques 99. La densité varie selon la distance au centre de la boîte, comme pour les spirales de l'art antérieur, mais elle reste constante sur 15 un même cercle, l'interprétation est simplifiée, puisqu'elle ne dépend plus de l'angle sous lequel est regardé le résultat de la culture. Dans l'exemple illustré à la figure 4, le motif comprend trois groupes de trois cercles rapprochés. Les cercles de chaque groupe étant très rapprochés, ils ont une densité très proche. Ainsi, chaque groupe correspond sensiblement à une concentration donnée.

20 Pour améliorer la précision des résultats, l'automate comprend avantageusement des moyens pour faire varier la vitesse de rotation de la boîte de Pétri, de sorte que la densité est sensiblement identique pour les cercles d'un même groupe. Dans le mode de réalisation de la figure 5, représentée à une échelle 25 réduite, les cercles ont été limités à des arcs de cercles 99. Ce motif produit des résultats similaires. Cependant, il permet d'éviter de déposer de l'échantillon sur une partie déjà ensemencée, lors de la fermeture d'un cercle. On va maintenant décrire la zone de prélèvement 11, en référence à la coupe de la figure 6. La zone 11 comprend un orifice circulaire 101 dans la 30 plateforme 62, le bord périphérique de l'orifice a la forme d'un relevé 102. Un 2946057 - 12 - récipient cylindrique 103 est disposé dans l'orifice 101. Une jupe 104 s'étend depuis le bord supérieur 105 du récipient et vient reposer sur la plateforme 62, autour du relevé 102. La jupe 104 vient en recouvrement du relevé 102, de sorte qu'ils contribuent ensemble à éviter la pénétration de liquide et/ou de 5 solide, à l'intérieur 65 du corps de l'automate 1. Le produit à ensemencer, c'est-à-dire l'échantillon 3 est contenu dans un gobelet 106 dont le bord supérieur 107 repose sur le bord supérieur 105 du récipient 103. Ainsi, un échantillon 3 peut être approvisionné ou retiré de l'automate sans risque de renversement dans le corps de l'appareil qui reste to protégé par le récipient 103. En outre, si du produit 3 se renverse dans le récipient, ce dernier est amovible et peut être retiré pour être nettoyé. Lors du prélèvement de l'échantillon, le stylet 18 est prévu pour s'enfoncer de la profondeur PA, mesurée sous le bord 107 du gobelet 106. On va maintenant décrire le fonctionnement du bac à déversement, et 15 le procédé de nettoyage, en référence à la figure 7. Le bac à déversement 21 a sensiblement une forme de révolution autour d'un axe vertical. Il comprend deux bols 111,112 coaxiaux, ayant une base commune 113. Le bol intérieur 111 est destiné plus particulièrement à recevoir le stylet 18 et les liquides de nettoyage 36,37. Il est de forme étroite, 20 de sorte qu'il y offre radialement, une place suffisante, mais sans excès, pour y loger le stylet et permettre un écoulement des liquides 36,37 autour du stylet. Le bol extérieur 112 est destiné à récupérer les liquides qui se déversent du bol intérieur 11 lorsque celui-ci déborde. Les deux bols 35,36 comprennent des conduites de vidange 114,115 respectives, formées dans la base 113, et qui s'y 25 rejoignent pour n'en former qu'une 116, reliée à la pompe de vidange 22. Comme la tourelle 13 et le récipient 103, le bac à déversement 21 est inséré dans un orifice 117 de la plateforme 62. Le bac 21 comprend une jupe 119 qui s'étend depuis un bord supérieur 121 du bol extérieur 112 et vient en recouvrement d'un relevé périphérique 118 de l'orifice 117. Cette disposition 30 comme expliqué précédemment pour le récipient 103, protège l'intérieur 65 et 2946057 - 13 - permet de rendre le bac 21 aisément amovible, notamment en vue de son nettoyage. Lorsque l'ensemencement du substrat 2 est terminé, comme précédemment expliqué, l'extrémité du bras 14 est amenée dans une position 5 14C dans laquelle le stylet 18 est au-dessus du bac 21, de préférence au-dessus du bol extérieur 112, pour que le tube 17 y soit purgé du reste d'échantillon qui n'aurait pas été utilisé pour l'ensemencement. Ensuite, le bras est déplacé dans une position 14C1, dans laquelle le stylet 18 est enfoncé d'une profondeur PB dans le bol intérieur 111. Le stylet 10 est maintenu dans cette position pendant l'opération de désinfection. Comme précédemment décrit, lors de cette opération, l'alcool 36 parcours le tube jusqu'à s'écouler du stylet 18. L'alcool remplit alors le bol intérieur jusqu'à déborder dans le bol extérieur, par-dessus son bord supérieur 120. Ainsi, le niveau de l'alcool dans le bol intérieur 111 est toujours le même, sensiblement 15 égal à celui du bord supérieur 120 du bol 11. La profondeur PB est choisie supérieure à la profondeur PA de prélèvement de l'échantillon dans le gobelet 106. Cette étape garantit que la désinfection extérieure du stylet 18, sur toute la hauteur susceptible d'avoir été souillée lors du prélèvement. Ensuite, le bras est déplacé dans une position 14C2, dans laquelle le 20 stylet 18 est enfoncé d'une profondeur PC dans le bol intérieur 111. Le stylet est maintenu dans cette position pendant l'opération de rinçage. Comme précédemment décrit, lors de cette opération, l'eau 37 parcourt le tube jusqu'à s'écouler du stylet 18. L'eau remplit alors le bol intérieur jusqu'à déborder dans le bol extérieur, par-dessus son bord supérieur 120. Ainsi, le niveau de l'eau 25 dans le bol intérieur 111 est toujours le même, sensiblement égal à celui du bord supérieur 120 du bol 11. La profondeur PC est choisie supérieure à la profondeur PB précédemment utilisée pour la désinfection. Ce procédé garantit que l'alcool précédemment utilisée pour le nettoyage extérieur du stylet 18, est entièrement rincé et ne risque pas de stériliser accidentellement 30 un futur ensemencement. 2946057 - 14 - Les figures 8 et 9 illustrent deux autres modes de mise en oeuvre pour un procédé d'ensemencement selon l'invention. Dans ces exemples, les boîtes de Pétri 4 sont carrées. Dans l'exemple illustré à la figure 8, l'ensemencement est réalisé sous 5 une forme de lignes droites 131 parallèles entre elles, ayant sensiblement la même longueur. Les lignes 131 sont regroupées en trois groupes de trois lignes. Les lignes d'un même groupe ont une densité sensiblement identique entre elles. Le groupe représenté le plus à gauche comprend trois lignes de forte densité, le groupe le plus à droite comprend trois lignes de faible densité, to et, le groupe du milieu comprend trois lignes de densité intermédiaire. Dans l'exemple illustré à la figure 9, l'ensemencement est réalisé sous une forme de lignes droites regroupées en carrés 132. Les carrés sont homothétiques entre eux autour de même centre. Les carrés 132 sont regroupés en trois groupes de deux carrés. Les lignes de tous les carrés d'un même 15 groupe ont une densité sensiblement identique entre elles. Le groupe représenté le plus à l'intérieur comprend des lignes de forte densité, le groupe le plus à l'extérieur comprend des lignes de faible densité, et, le groupe intermédiaire comprend des lignes de densité intermédiaire. Bien sûr, l'invention n'est pas limitée aux exemples qui viennent d'être 20 décrits. Ainsi, au lieu d'être prévu amovible, le bac à déversement, ou le récipient de la zone de prélèvement peuvent être prévus fixes et formés par emboutissage directement dans la plateforme de l'automate. Le bac de déversement, comme schématiquement illustré à la figure 1, 25 peut avoir une forme parallélépipédique, et comprendre deux compartiments séparés par une paroi pour le déversement d'un compartiment vers l'autre. Au lieu de motifs uniquement circulaires, il peut en outre être prévu des motifs ayant notamment des formes de points plus ou moins épais.

Claims

Revendications1. Dispositif d'approvisionnement d'un automate (1) d'ensemencement pour un échantillon (3) sur un substrat (2), caractérisé en ce qu'il comprend une tourelle (13) mobile en rotation, de préférence autour d'un axe (X13) sensiblement vertical, et un bras (14) mobile en rotation, de préférence autour d'un axe (X 14) sensiblement horizontal, porté par ladite tourelle, une extrémité distale (16) dudit bras comprenant des moyens (75-97) pour y fixer un stylet (18), et, des moyens (71,72) pour lever ou baisser 1 o ledit bras.
2. Dispositif selon la revendication 1, caractérisé en ce que les moyens pour lever ou baisser ledit bras comprennent un piston (72) mobile, de bas en haut et inversement, ledit piston (72) étant disposé, de préférence à 15 proximité de l'axe (X14), de sorte que le bras vient en appui sur une extrémité supérieure (72) dudit piston.
3. Dispositif selon l'une des revendications 1 ou 2, caractérisé en ce en ce que les moyens (75,97) pour fixer le stylet (18) sont des moyens de 20 fixation sans outillage.
4. Dispositif selon l'une des revendications 1 à 3, caractérisé en ce que les moyens (75,97) pour fixer le stylet (18) comprennent: une bague (76) prévue pour être fixée, de préférence collée, sur le stylet 25 (18); des moyens (82,91) de positionnement axial et transversal de la bague (76) relativement à l'extrémité distale (16) du bras (14), et, des moyens (77,93) de maintien de la bague (76) sur l'extrémité distale (16) du bras (14). 30 2946057 -16-
5. Dispositif selon la revendication 4, caractérisé en ce que les moyens de positionnement axial et transversal comprennent une surface conique (91) sur la bague (76), et une surface conique (82) d'un logement (75) ménagé dans l'extrémité distale (16), lesdites surfaces coniques (76,91) 5 ayant sensiblement le même angle, et de préférence prévues pour se coincer l'une (91) dans l'autre (82).
6. Dispositif selon la revendication 4 ou 5, caractérisé en ce que les moyens (77,93) de maintien de la bague comprennent sur la bague une nervure périphérique (93) et un écrou (77), prévu pour être vissé sur l'extrémité (16) et coopérant avec ladite nervure pour maintenir la bague en prise avec ladite extrémité (16)
7. Dispositif selon l'une des revendications 1 à 6, caractérisé en ce que le stylet (18) est une extrémité d'un tube (17) souple.
8. Dispositif selon la revendication 7, caractérisé en ce que le tube (17) est entièrement accessible et démontable sans outillage.
9. Dispositif selon la revendication 7 ou 8, caractérisé en ce que le tube a une longueur telle qu'il offre un volume intérieur suffisant pour y stocker un volume d'échantillon suffisant pour réaliser l'ensemencement.
10. Dispositif selon la revendication 9, caractérisé en ce qu'il comprend un rouleau (57), pour y enrouler une portion (17A) du tube.
11. Dispositif selon l'une des revendications 9 ou 10, caractérisé en ce qu'il comprend des moyens de pompage motorisés (40,44), de préférence comprenant une seringue (40), disposés en amont du tube, prévus pour au moins aspirer et rejeter l'échantillon par le stylet (18). 2946057 -17-
12. Dispositif selon la revendication 11, caractérisé en ce qu'il comprend en outre des moyens de distribution (50,51) disposés de sorte que les moyens de pompage (40,44) peuvent en outre aspirer au moins un produit (36,37) dans une réserve (31,32) correspondante, puis de rejeter 5 ledit produit par le stylet (18).
13. Dispositif selon la revendication 12, caractérisé en ce que les moyens de distribution (50,51) sont disposés de sorte que les moyens de pompage (40,44) peuvent aspirer deux produits (36,37), indépendamment l'un de to l'autre, chaque produit ayant une réserve (31,32) spécifique, puis de rejeter indépendamment chaque produit par le stylet (18).
14. Dispositif selon la revendication 13, caractérisé en ce que l'un des produits est un produit désinfectant (36), de préférence un alcool, et en 15 ce que l'autre est un produit de rinçage (37), de préférence de l'eau distillée.
15. Dispositif selon l'une des revendications 1 à 13, caractérisé en ce qu'il comprend des moyens (6) pour y adapter une boîte de Pétri, ladite boîte 20 de Pétri étant prévue pour contenir le substrat.
16. Procédé d'ensemencement d'une boîte de Pétri, caractérisé en ce que l'on utilise un dispositif selon l'une des revendications précédentes.