FR2915379A1

FR2915379A1 - Use of an active ingredient obtained from hydrolyzed rice, in a cosmetic composition or for preparing pharmaceutical composition comprising active ingredient or composition to activate aconitase and protect mitochondria

Info

Publication number: FR2915379A1
Application number: FR0703051A
Authority: FR
Inventors: Farra Claude Dal; Nouha Domloge; Jean Marie Botto
Original assignee: Vincience SA
Current assignee: Vincience SA
Priority date: 2007-04-27
Filing date: 2007-04-27
Publication date: 2008-10-31
Anticipated expiration: 2027-04-27
Also published as: FR2915379B1

Abstract

Use of an active ingredient (I) obtained from hydrolyzed rice ( Oryza sativa L.), in a cosmetic composition or for preparing a pharmaceutical composition comprising (I) or composition to activate aconitase and protect mitochondria, is claimed. ACTIVITY : Dermatological; Muscular-Gen; Neuroprotective; Cardiant; Antidiabetic; Nootropic. MECHANISM OF ACTION : Aconitase activator. The ability of (I) to activate acotinase enzyme was tested in human fibroblasts. The result showed that (I) exhibited increased activity of 55%.

Description

-1- La présente invention se situe dans le domaine cosmétique etThe present invention is in the field of cosmetics and

pharmaceutique, et plus particulièrement dans le domaine de la dermatologie. La présente invention concerne l'utilisation dans une composition cosmétique ou pour la préparation d'une composition pharmaceutique, d'une quantité efficace de principe actif issu du riz (Oryza sativa L.) ; le principe actif, ou la composition le contenant, étant destiné à protéger les mitochondries et à activer l'aconitase. De préférence, le principe actif provient de l'hydrolyse de protéines de riz et contient principalement des polypeptides et des peptides. Il peut être utilisé seul ou en association avec au moins un autre principe actif. L'invention porte encore sur un procédé de traitement cosmétique destiné à protéger la peau et les phanères des agressions extérieures et à lutter contre le vieillissement cutané. Ledit principe actif, protecteur des mitochondries et activateur de l'aconitase, peut également être utilisé pour préparer des compositions pharmaceutiques destinées à prévenir ou lutter contre les pathologies liées à des dysfonctionnements mitochondriaux ; par exemple certaines dégénérescences neuromusculaires ou cardiaques, le diabète de type II ou encore certaines pathologies du vieillissement. Le terme phanères selon l'invention englobe l'ensemble des annexes kératiniques présentes à la surface du corps, en particulier les poils, les cils, les sourcils, les ongles et les cheveux. Les mitochondries sont les organites des cellules eucaryotes spécialisées dans la production d'énergie. Elles sont dotées de leur propre ADN (ADNmt). L'énergie produite par la chaîne respiratoire est stockée sous forme d'ATP. Dans certaines conditions de stress cellulaire, les électrons, libérés par la chaîne respiratoire de phosphorylation oxydative, produisent des radicaux libres qui peuvent endommager les structures mitochondriales. Ces facteurs de stress peuvent être intrinsèques ou d'origine extérieure. Parmi ces derniers, on peut citer : les rayonnements UV, les toxines, les radiations, les oxydants alimentaires. Ainsi, on a pu montrer un déclin progressif des fonctions mitochondriales avec l'âge, probablement lié à l'accumulation de mutations sur l'ADNmt (K. Singh, Ann. N.Y. Acad. Sci. 1019, 2004). Ces mutations de l'ADNmt peuvent être induites par des expositions répétées aux rayonnements UV, et seraient même un témoin du photo-vieillissement (M. Berneburg et al., J. of Invest. Dermatol. 122(5), 2004). Les mitochondries jouent également un rôle central dans l'apoptose. Les dégradations mitochondriales peuvent ainsi être un facteur déclenchant de la cascade réactionnelle -2- conduisant à l'apoptose dans de nombreux types cellulaires (G. Kroemer et al., FASEB J. 9:1277-87, 1995). Dans les mitochondries, des mécanismes naturels de réparation ont été identifiés. L'aconitase (aconitate hydratase ou Iron Regulatory Protein ; EC 4.2.1.3) s'est ainsi révélée être indispensable au maintien de l'intégrité de l'ADNmt, indépendamment de son activité catalytique. L'aconitase a tout d'abord été identifiée comme une enzyme mitochondriale impliquée dans le cycle de Krebs ; elle catalyse la conversion stéréospécifique du citrate en isocitrate et participe ainsi à la production d'énergie de la cellule. Elle possède un site actif comportant un agrégat fer-soufre (4Fe-4S) à géométrie pseudocubique. Récemment, l'équipe du Dr Butow (X. J. Chen et al., Science 307, 2005) a pu montrer que l'aconitase jouait un rôle clé dans la préservation de l'intégrité de l'ADN mitochondrial. Elle interagirait avec l'ADN à l'intérieur de régions régulatrices suggérant un rôle dans le compactage du génome mitochondrial à la manière d'une protéine de la famille de HSP 70. Le passage de la forme liant l'ADN à la forme active de l'enzyme serait basé sur l'assemblage ou le désassemblage du cluster fer-soufre. Grâce à sa double fonctionnalité, l'aconitase établit un lien direct entre l'activité génératrice d'énergie de la mitochondrie et la conservation de l'ADNmt. L'aconitase pourrait ainsi constituer une cible thérapeutique pour prévenir ou lutter contre les pathologies liées à des dysfonctionnements mitochondriaux, par exemple, le diabète de type II, certaines affections neuromusculaires, certaines pathologies du vieillissement. La recherche de composés pouvant stimuler ou protéger les mitochondries est une préoccupation de la recherche médicale et de la cosmétique. Concernant la peau, ces nouveaux composés pourraient être utiles pour prévenir ou lutter contre les signes du vieillissement cutané, mais aussi pour protéger ou réparer la peau après des brûlures, des expositions à des rayonnements UV ou des radiations, ou des expositions à des toxines ou à des polluants. Afin de protéger les mitochondries et de lutter contre les pathologies associées ou les effets du vieillissement cutané, il a été proposé des solutions telles que l'apport de substances impliquées dans le métabolisme énergétique, et plus particulièrement d'intermédiaires ou de cofacteurs du cycle de Krebs tels que le fumarate, le L-malate, l'acétyl CoA (WO 02064129) ou encore le traitement de la peau par des substances capables de diminuer les radicaux libres, telles que la vitamine C (US 2004/0086526) ou la L-ergothionéine (WO 9836748). Mais, à la connaissance de la demanderesse, l'usage de principes actifs issus de l'hydrolyse du riz, -3- capables d'activer l'aconitase, dans le but de protéger les mitochondries et de lutter contre les pathologies associées et/ou les effets du vieillissement cutané, n'a jamais été décrit. La présente invention a pour principal objectif l'utilisation d'un principe actif issu de l'hydrolyse du riz, capable de protéger la peau des agressions extérieures et de lutter contre le vieillissement cutané. Ledit principe actif pourra être utilisé seul ou en association avec au moins un autre principe actif. Les inventeurs ont en effet mis en évidence une activité thérapeutique, et plus particulièrement dermatologique et cosmétique, d'un principe actif de nature peptidique, issu de l'hydrolyse du riz, capable d'activer l'aconitase. Il a notamment été mis en évidence que ce principe actif, lorsqu'il est appliqué sur la peau, favorise de façon importante l'activité mitochondriale, démontrée par une activité accrue de l'enzyme. Les propriétés nouvellement identifiées de ce principe actif protecteur des mitochondries permet ainsi d'ouvrir de nouvelles perspectives thérapeutiques et cosmétiques. On entend par principe actif protecteur des mitochondries ou capable de protéger les mitochondries , toute substance d'origine végétale, et plus particulièrement issue du riz (Oryza sativa L.), capable de limiter les altérations fonctionnelles ou structurales des mitochondries de cellules ou de tissus soumis à un stress physico-chimique ou environnemental. On entend par principe actif capable d'activer l'aconitase , toute substance d'origine végétale, et plus particulièrement issue du riz (Oryza saliva L.), capable d'augmenter l'aconitase cytoplasmique ou mitochondriale, soit par l'activation de la synthèse protéique de l'aconitase (par modulation directe ou indirecte de l'expression génique de l'aconitase), soit par l'augmentation de l'activité enzymatique de l'aconitase, soit par d'autres processus biologiques tels que la stabilisation de la protéine aconitase ou encore la stabilisation des transcrits d'ARN messager. pharmaceutical, and more particularly in the field of dermatology. The present invention relates to the use in a cosmetic composition or for the preparation of a pharmaceutical composition, of an effective amount of active principle derived from rice (Oryza sativa L.); the active ingredient, or the composition containing it, being intended to protect mitochondria and to activate aconitase. Preferably, the active ingredient is derived from the hydrolysis of rice proteins and contains mainly polypeptides and peptides. It can be used alone or in combination with at least one other active ingredient. The invention also relates to a cosmetic treatment method intended to protect the skin and the integuments from external aggressions and to fight against skin aging. Said active ingredient, mitochondrial protector and activator of aconitase, can also be used to prepare pharmaceutical compositions intended to prevent or fight against pathologies related to mitochondrial dysfunctions; for example certain neuromuscular or cardiac degenerations, type II diabetes or certain pathologies of aging. The term dander according to the invention encompasses all the keratinous appendages present on the surface of the body, in particular the hairs, the eyelashes, the eyebrows, the nails and the hair. Mitochondria are the organelles of eukaryotic cells specialized in the production of energy. They have their own DNA (mtDNA). The energy produced by the respiratory chain is stored as ATP. Under certain cellular stress conditions, electrons, released by the oxidative phosphorylation respiratory chain, produce free radicals that can damage mitochondrial structures. These stressors can be intrinsic or external. Among these are: UV radiation, toxins, radiation, food oxidants. Thus, it has been possible to show a progressive decline in mitochondrial functions with age, probably related to the accumulation of mutations on mtDNA (Singh, K., N.Y. Acad Sci, 1019, 2004). These mutations in mtDNA can be induced by repeated UV radiation exposures, and would even be a control of photo-aging (M. Bernburg et al., J. of Invest Dermatol 122 (5), 2004). Mitochondria also play a central role in apoptosis. Mitochondrial degradations can thus be a triggering factor of the reaction cascade -2 leading to apoptosis in many cell types (G. Kroemer et al., FASEB J. 9: 1277-87, 1995). In mitochondria, natural mechanisms of repair have been identified. Aconitase (aconitate hydratase or Iron Regulatory Protein, EC 4.2.1.3) has thus been shown to be essential for maintaining the integrity of mtDNA, regardless of its catalytic activity. Aconitase was first identified as a mitochondrial enzyme involved in the Krebs cycle; it catalyzes the stereospecific conversion of citrate to isocitrate and thus participates in the energy production of the cell. It has an active site with an iron-sulfur (4Fe-4S) cluster with pseudocubic geometry. Recently, Dr. Butow's team (X.J. Chen et al., Science 307, 2005) has shown that aconitase plays a key role in preserving the integrity of mitochondrial DNA. It would interact with the DNA within regulatory regions suggesting a role in compaction of the mitochondrial genome in the manner of a protein of the HSP 70 family. The transition from the DNA binding form to the active form of the enzyme would be based on the assembly or disassembly of the iron-sulfur cluster. Due to its dual functionality, aconitase establishes a direct link between the mitochondrial energy-generating activity and the conservation of mtDNA. Aconitase could thus constitute a therapeutic target to prevent or fight against pathologies related to mitochondrial dysfunctions, for example, type II diabetes, certain neuromuscular disorders, certain pathologies of aging. The search for compounds that can stimulate or protect mitochondria is a concern of medical research and cosmetics. With regard to the skin, these new compounds could be useful to prevent or fight against the signs of skin aging, but also to protect or repair the skin after burns, exposure to UV radiation or radiation, or exposure to toxins or to pollutants. In order to protect the mitochondria and to fight against the associated pathologies or the effects of skin aging, solutions have been proposed such as the supply of substances involved in energy metabolism, and more particularly intermediates or cofactors of the skin cycle. Krebs such as fumarate, L-malate, acetyl CoA (WO 02064129) or the treatment of the skin with substances capable of reducing free radicals, such as vitamin C (US 2004/0086526) or L -ergothioneine (WO 9836748). But, to the knowledge of the applicant, the use of active ingredients from the hydrolysis of rice, -3- capable of activating aconitase, in order to protect mitochondria and fight against associated pathologies and / or the effects of skin aging, has never been described. The present invention has for main objective the use of an active principle derived from the hydrolysis of rice, able to protect the skin from external aggressions and fight against skin aging. Said active ingredient may be used alone or in combination with at least one other active ingredient. The inventors have in fact demonstrated a therapeutic activity, and more particularly a dermatological and cosmetic activity, of an active principle of a peptide nature, derived from the hydrolysis of rice, capable of activating aconitase. In particular, it has been demonstrated that this active ingredient, when applied to the skin, significantly promotes the mitochondrial activity, demonstrated by an increased activity of the enzyme. The newly identified properties of this mitochondrial protective active ingredient thus open up new therapeutic and cosmetic perspectives. Protective active ingredient is understood to mean mitochondria or capable of protecting mitochondria, any substance of vegetable origin, and more particularly derived from rice (Oryza sativa L.), capable of limiting the functional or structural alterations of cell or tissue mitochondria. subject to physico-chemical or environmental stress. The term "active ingredient capable of activating aconitase" means any substance of vegetable origin, and more particularly derived from rice (Oryza saliva L.), capable of increasing cytoplasmic or mitochondrial aconitase, or by the activation of the protein synthesis of aconitase (by direct or indirect modulation of the gene expression of aconitase), either by increasing the enzymatic activity of aconitase or by other biological processes such as stabilization of the aconitase protein or the stabilization of the messenger RNA transcripts.

Préférentiellement, le principe actif capable d'activer l'aconitase selon l'invention est un extrait de nature peptidique et provient de l'hydrolyse des protéines du riz (Oryza sativa L.). On entend par de nature peptidique , un mélange de composés majoritairement représentés par des peptides ou des polypeptides. Le terme peptide désigne un enchaînement de deux ou plusieurs acides aminés liés entre eux par des liaisons peptidiques ou par des liaisons peptidiques modifiées ; le terme polypeptide désignant un peptide de taille plus importante. Par l'expression biologiquement actif , on entend qui possède une activité in vivo ou in vitro caractéristique de l'activité du principe actif selon l'invention . -4- Le terme "hydrolysat ou issu de l'hydrolyse" désigne toute substance ou mélange de substances, ou préparation isolée, obtenue après hydrolyse de matière végétale. Preferably, the active ingredient capable of activating the aconitase according to the invention is an extract of a peptidic nature and comes from the hydrolysis of rice proteins (Oryza sativa L.). By peptide nature is meant a mixture of compounds predominantly represented by peptides or polypeptides. The term peptide denotes a sequence of two or more amino acids linked together by peptide bonds or by modified peptide bonds; the term polypeptide designating a peptide of larger size. By biologically active expression is meant that has an activity in vivo or in vitro characteristic of the activity of the active ingredient according to the invention. The term "hydrolyzate or derived from hydrolysis" refers to any substance or mixture of substances, or isolated preparation, obtained after hydrolysis of plant material.

Le principe actif selon l'invention peut être obtenu par extraction de protéines d'origine végétale, suivie d'une hydrolyse contrôlée qui libère des fragments peptidiques biologiquement actifs. De très nombreuses protéines trouvées dans les plantes sont susceptibles de contenir des fragments peptidiques biologiquement actifs au sein de leur structure. L'hydrolyse ménagée permet de dégager ces fragments peptidiques. Il est possible, mais non nécessaire pour réaliser l'invention, d'extraire soit les protéines concernées d'abord et de les hydrolyser ensuite, soit d'effectuer l'hydrolyse d'abord sur un extrait brut et de purifier les fragments peptidiques ensuite. Il est également possible d'utiliser certains extraits hydrolysés sans en purifier les fragments peptidiques correspondant aux peptides biologiquement actifs selon l'invention, mais en s'assurant toutefois de la présence desdits fragments par des moyens analytiques appropriés. Pour réaliser l'extraction, on peut utiliser la plante entière, ou une partie spécifique de la plante (feuille, grain, etc.). Plus particulièrement selon l'invention, on utilise une des nombreuses plantes de la famille des poacées, du genre Oryza (riz) et préférentiellement l'espèce Oryza sativa L. Selon l'invention, le matériel végétal utilisé sera le grain et préférentiellement le grain débarrassé de son enveloppe par une étape de décorticage. Dans une première étape, la plante est broyée à l'aide d'un broyeur à plantes. La poudre ainsi obtenue peut ultérieurement être "délipidée" à l'aide d'un solvant organique classique (comme par exemple un alcool, l'hexane ou de l'acétone). The active ingredient according to the invention can be obtained by extraction of proteins of plant origin, followed by controlled hydrolysis which releases biologically active peptide fragments. Many proteins found in plants are likely to contain biologically active peptide fragments within their structure. The controlled hydrolysis makes it possible to release these peptide fragments. It is possible, but not necessary to carry out the invention, to extract either the proteins concerned first and then hydrolyze them, or to carry out the hydrolysis first on a crude extract and then to purify the peptide fragments. . It is also possible to use certain hydrolysed extracts without purifying the peptide fragments corresponding to the biologically active peptides according to the invention, but nevertheless ensuring the presence of said fragments by appropriate analytical means. To carry out the extraction, one can use the whole plant, or a specific part of the plant (leaf, grain, etc.). More particularly according to the invention, one of the many plants of the family Poaceae, of the genus Oryza (rice) and preferentially the species Oryza sativa L. According to the invention, the plant material used will be the grain and preferably the grain removed from its envelope by a dehulling step. In a first step, the plant is ground using a plant grinder. The powder thus obtained may subsequently be "delipidated" with the aid of a conventional organic solvent (for example an alcohol, hexane or acetone).

On réalise ensuite l'extraction des protéines de la plante suivant le procédé classique (Osborne, 1924) modifié; le broyat de plante est mis en suspension dans une solution alcaline contenant un produit adsorbant de type polyvinylpolypyrrolidone (PVPP) insoluble (0.01 - 20 a/o) ; en effet il a été observé que les opérations d'hydrolyses et de purifications ultérieures étaient facilitées par ce moyen. La concentration des substances de type phénoliques interagissant avec les protéines se trouve ainsi réduite. La fraction soluble est recueillie après des étapes de centrifugation et de filtration, cette solution brute constituant alors une première forme de l'extrait contenant les protéines, les glucides et éventuellement des lipides. -5- Les protéines sont ensuite précipitées en faisant varier la force ionique en acidifiant le milieu, ce qui permet d'éliminer les composants solubles et les acides nucléiques. Le précipité est ensuite lavé à l'aide d'un solvant organique tel que, par exemple, l'éthanol ou le méthanol puis le solvant est évaporé par séchage sous vide. Le précipité riche en protéines est remis en solution dans l'eau ou un autre solvant et constitue alors une forme plus purifiée de l'hydrolysat. L'extraction peut également être réalisée en milieu neutre ou acide toujours en présence de polyvinylpolypyrrolidone. Après une étape de filtration, l'étape de précipitation s'effectue alors à l'aide d'un agent classique de précipitation tel que les sels (chlorure de sodium, sulfate d'ammonium) ou un solvant organique (alcool, acétone). Le précipité obtenu peut être séparé des agents de précipitation par dialyse après remise en solution dans de l'eau ou un autre solvant. La fraction protéique isolée selon l'invention est ensuite hydrolysée dans des conditions ménagées pour générer des polypeptides et des peptides solubles. L'hydrolyse se définit comme étant une réaction chimique impliquant le clivage d'une molécule par de l'eau, cette réaction pouvant se faire en milieu neutre, acide ou basique. Selon l'invention, l'hydrolyse est réalisée par voie chimique et/ou de façon avantageuse par des enzymes protéolytiques. On peut alors citer l'utilisation des endoprotéases d'origine végétale (papaïne, bromelaïne, ficine) et de micro-organismes (Aspergillus, Rhizopus, Bacillus, etc.). The proteins of the plant are then extracted according to the conventional method (Osborne, 1924) modified; the plant meal is suspended in an alkaline solution containing an insoluble polyvinylpolypyrrolidone (PVPP) adsorbent product (0.01 - 20 a / o); in fact, it has been observed that the hydrolysis and subsequent purification operations are facilitated by this means. The concentration of phenolic-type substances interacting with the proteins is thus reduced. The soluble fraction is collected after centrifugation and filtration steps, this crude solution then constituting a first form of the extract containing the proteins, carbohydrates and optionally lipids. The proteins are then precipitated by varying the ionic strength by acidifying the medium, thereby eliminating soluble components and nucleic acids. The precipitate is then washed with an organic solvent such as, for example, ethanol or methanol and the solvent is evaporated by drying in vacuo. The protein-rich precipitate is dissolved in water or other solvent and is then a more purified form of the hydrolyzate. The extraction can also be carried out in neutral or acidic medium always in the presence of polyvinylpolypyrrolidone. After a filtration step, the precipitation step is then carried out using a conventional precipitation agent such as salts (sodium chloride, ammonium sulfate) or an organic solvent (alcohol, acetone). The precipitate obtained can be separated from the precipitating agents by dialysis after redissolving in water or another solvent. The isolated protein fraction according to the invention is then hydrolyzed under mild conditions to generate polypeptides and soluble peptides. Hydrolysis is defined as a chemical reaction involving the cleavage of a molecule by water, this reaction being possible in a neutral, acidic or basic medium. According to the invention, the hydrolysis is carried out chemically and / or advantageously by proteolytic enzymes. We can then mention the use of endoproteases of plant origin (papain, bromelain, ficin) and microorganisms (Aspergillus, Rhizopus, Bacillus, etc.).

Pour les mêmes raisons que précédemment lors de cette étape d'hydrolyse ménagée une quantité de polyvinylpolypyrrolidone est additionnée au milieu réactionnel. Après filtration la solution obtenue constitue l'hydrolysat actif. L'hydrolysat actif peut être encore purifié afin de sélectionner les poids moléculaires et la nature des peptides générés. Le fractionnement peut s'effectuer avantageusement par ultrafiltration et/ ou par une méthode de type chromatographique. L'une quelconque des formes plus ou moins purifiées de l'hydrolysat est alors solubilisée dans de l'eau ou dans tout mélange contenant de l'eau, puis stérilisée par ultrafiltration. L'hydrolysat végétal obtenu selon l'invention est analysé qualitativement et quantitativement pour ses caractéristiques physico-chimiques et sa teneur en composés de nature protéique et peptidiques. On entend par composés de nature peptidique, les fragments de protéines, les peptides et les acides aminés libres présents dans le mélange. Les peptides, acides aminés et fragments de protéines sont dosés selon les techniques classiques, bien connues de l'homme du métier. -6-Ainsi, selon un mode de réalisation avantageux de l'invention, l'hydrolysat végétal actif a un pH compris entre 4 et 7, et préférentiellement entre 5 et 6, un extrait sec titrant entre 1 à 8 g/1 et de manière préférée entre 2 et 5 g/1, sa teneur en composés de nature peptidique est comprise entre 0,1 et 5g/1 et préférentiellement entre 0,5 et 2 g/1 et sa teneur en sucres est de 0,5 à 2,5 g/1. For the same reasons as above during this hydrolysis step, a quantity of polyvinylpolypyrrolidone is added to the reaction medium. After filtration, the solution obtained constitutes the active hydrolyzate. The active hydrolyzate can be further purified in order to select the molecular weights and the nature of the peptides generated. The fractionation can advantageously be carried out by ultrafiltration and / or by a chromatographic type method. Any of the more or less purified forms of the hydrolyzate is then solubilized in water or in any mixture containing water, and then sterilized by ultrafiltration. The vegetable hydrolyzate obtained according to the invention is analyzed qualitatively and quantitatively for its physico-chemical characteristics and its content of protein and peptide compounds. Peptide-like compounds are understood to mean protein fragments, peptides and free amino acids present in the mixture. The peptides, amino acids and protein fragments are determined according to conventional techniques, which are well known to those skilled in the art. Thus, according to an advantageous embodiment of the invention, the active plant hydrolyzate has a pH of between 4 and 7, and preferably between 5 and 6, a solids content of between 1 and 8 g / l and preferred way between 2 and 5 g / 1, its content of peptide compounds is between 0.1 and 5 g / 1 and preferably between 0.5 and 2 g / 1 and its sugar content is 0.5 to 2 , 5 g / 1.

Selon un mode de réalisation avantageux de l'invention, le principe actif selon l'invention est préalablement solubilisé dans un ou plusieurs solvants cosmétiquement ou pharmaceutiquement acceptables, classiquement utilisés par l'homme de métier, comme l'eau, le glycérol, l'éthanol, le propylène glycol, le butylène glycol, le dipropylène glycol, les diglycols éthoxylés ou propoxylés, les polyols cycliques, la vaseline, une huile végétale ou tout mélange de ces solvants. Selon encore un autre mode de réalisation avantageux de l'invention, le principe actif selon l'invention est préalablement solubilisé dans un vecteur cosmétique ou pharmaceutique comme les liposomes ou adsorbés sur des polymères organiques poudreux, des supports minéraux comme les talcs et bentonites, et plus généralement solubilisé dans. ou fixé sur, tout vecteur cosmétiquement ou pharmaceutiquement acceptable. Il est bien entendu que le principe actif selon l'invention peut être utilisé seul ou bien en association avec au moins un autre principe actif, dans une composition cosmétique ou pour 20 la préparation d'une composition pharmaceutique et/ou dermatologique. Les compositions selon l'invention pourront être appliquées par toute voie appropriée, notamment orale, parentérale ou topique externe, et leur formulation sera adaptée par l'homme du métier, en particulier pour des compositions cosmétiques ou dermatologiques. Avantageusement, les compositions selon l'invention sont destinées à une administration par 25 voie topique cutanée. Ces compositions doivent donc contenir un milieu cosmétiquement et/ou dermatologiquement acceptable, c'est-à-dire compatible avec la peau et les phanères, et couvrent toutes les formes cosmétiques ou dermatologiques. Ces compositions pourront notamment être sous forme de crèmes, d'émulsions huile-dans-eau ou eau-dans-huile, d'émulsions multiples, de solutions, de suspensions, de gels, de laits, de lotions, de sticks ou 30 encore de poudres, adaptés à une application sur la peau, les lèvres et/ou les phanères. Ces compositions comprennent les excipients nécessaires à leur formulation, tels que solvants, épaississants, diluants, tensioactifs, anti-oxydants, colorants, conservateurs, parfums. -7- Bien entendu, l'homme de métier veillera à choisir les éventuels composés complémentaires, actifs ou non-actifs, et/ou leur quantité, de telle sorte que les propriétés avantageuses du mélange ne soient pas altérées par l'adjonction envisagée. La composition utilisable selon l'invention peut en particulier consister en une composition pour soins capillaires, et notamment un shampooing, un après-shampooing, une lotion de mise en plis, une lotion traitante, une crème ou un gel coiffant, une lotion restructurante pour les cheveux, un masque, etc. La composition cosmétique selon l'invention peut être utilisée notamment dans les traitements mettant en oeuvre une application qui est suivie ou non suivie d'un rinçage, ou encore sous forme de shampooing. According to an advantageous embodiment of the invention, the active principle according to the invention is solubilized beforehand in one or more cosmetically or pharmaceutically acceptable solvents, conventionally used by those skilled in the art, such as water, glycerol, ethanol, propylene glycol, butylene glycol, dipropylene glycol, ethoxylated or propoxylated diglycols, cyclic polyols, petroleum jelly, a vegetable oil or any mixture of these solvents. According to yet another advantageous embodiment of the invention, the active principle according to the invention is solubilized beforehand in a cosmetic or pharmaceutical vector such as liposomes or adsorbed on powdery organic polymers, mineral supports such as talcs and bentonites, and more generally solubilized in. or attached to any cosmetically or pharmaceutically acceptable carrier. It is understood that the active ingredient according to the invention may be used alone or in combination with at least one other active ingredient, in a cosmetic composition or for the preparation of a pharmaceutical and / or dermatological composition. The compositions according to the invention may be applied by any appropriate route, in particular oral, parenteral or external topical, and their formulation will be adapted by those skilled in the art, in particular for cosmetic or dermatological compositions. Advantageously, the compositions according to the invention are intended for topical administration to the skin. These compositions must therefore contain a cosmetically and / or dermatologically acceptable medium, that is to say compatible with the skin and superficial body growths, and cover all cosmetic or dermatological forms. These compositions may especially be in the form of creams, oil-in-water or water-in-oil emulsions, multiple emulsions, solutions, suspensions, gels, milks, lotions, sticks or even more. powders, suitable for application on the skin, lips and / or integuments. These compositions comprise the excipients necessary for their formulation, such as solvents, thickeners, diluents, surfactants, antioxidants, dyes, preservatives, perfumes. Of course, those skilled in the art will take care to choose any additional compounds, active or non-active, and / or their quantity, so that the advantageous properties of the mixture are not affected by the addition envisaged. The composition that may be used according to the invention may in particular consist of a composition for hair care, and in particular a shampoo, a conditioner, a setting lotion, a treatment lotion, a cream or a styling gel, a restructuring lotion for hair, a mask, etc. The cosmetic composition according to the invention can be used in particular in treatments using an application that is followed or not followed by rinsing, or in the form of shampoo.

Elle peut également se présenter sous forme de teinture ou de mascara à appliquer au pinceau ou au peigne, en particulier sur les cils, les sourcils ou les cheveux. It can also be in the form of dye or mascara to be applied with a brush or a comb, in particular on eyelashes, eyebrows or hair.

Avantageusement, les compositions utilisables selon l'invention contiennent en outre divers principes actifs destinés, notamment, à la prévention et/ou au traitement des désordres liés au photo-vieillissement. Ainsi, la composition selon l'invention peut associer, au principe actif capable d'activer l'aconitase selon l'invention, d'autres principes actifs favorisant son action. Par exemple, il peut être ajouté des principes actifs ayant une action anti-radicalaire ou antioxydante, choisis parmi la vitamine C, la vitamine E ou le coenzyme Q10 ou les extraits poly-phénoliques de plantes. Advantageously, the compositions that can be used according to the invention also contain various active principles intended, in particular, for the prevention and / or treatment of disorders associated with photoaging. Thus, the composition according to the invention can associate, with the active ingredient capable of activating the aconitase according to the invention, other active ingredients promoting its action. For example, it may be added active ingredients having an anti-radical or antioxidant action, selected from vitamin C, vitamin E or coenzyme Q10 or polyphenol extracts of plants.

Par principes actifs anti-radicalaires, on entend tout composé capable de piéger les radicaux libres. Ces principes actifs sont capables de bloquer les réactions en chaînes des radicaux libres avant les étapes ultimes de dégradation des constituants biologiques de la peau et ont de ce fait une activité antioxydante. La composition selon l'invention peut encore associer, au principe actif activateur de l'aconitase, des principes actifs stimulant les synthèses des macromolécules dermiques (laminine, fibronectine, collagène), par exemple le peptide de collagène commercialisé sous le nom Collaxyl par la société Vincience. La composition selon l'invention peut également associer, au principe actif activateur de l'aconitase, des principes actifs stimulant le métabolisme énergétique, comme le principe actif 30 commercialisé sous la dénomination GP4G par la société Vincience. Selon un autre aspect, la composition selon l'invention peut être une composition solaire, c'est-à-dire une composition aidant à la protection contre le rayonnement solaire. Ainsi, il -8- peut être avantageusement ajouté, à la composition selon l'invention, des actifs aidant à la protection solaire tel que, par exemple, des filtres solaires. Il est bien évident que l'invention s'adresse aux mammifères en général, et plus particulièrement aux êtres humains. By anti-radical active ingredients is meant any compound capable of trapping free radicals. These active principles are capable of blocking free radical chain reactions before the ultimate stages of degradation of the biological constituents of the skin and thus have an antioxidant activity. The composition according to the invention may also associate, with the active ingredient activator of aconitase, active ingredients stimulating the synthesis of dermal macromolecules (laminin, fibronectin, collagen), for example the collagen peptide sold under the name Collaxyl by the company Vincience. The composition according to the invention can also associate, with the active ingredient activator of aconitase, active principles stimulating the energy metabolism, such as the active ingredient marketed under the name GP4G by Vincience. According to another aspect, the composition according to the invention may be a solar composition, that is to say a composition helping to protect against solar radiation. Thus, it is advantageous to add, to the composition according to the invention, active agents that aid in solar protection such as, for example, sunscreens. It is obvious that the invention is directed to mammals in general, and more particularly to humans.

La quantité efficace de principe actif selon l'invention correspond à la quantité nécessaire permettant d'obtenir le résultat recherché, à savoir : activer l'aconitase, protéger les mitochondries et ainsi protéger la peau des agressions extérieures et lutter contre le vieillissement cutané. Selon un mode de réalisation avantageux de l'invention, le principe actif issu du riz est présent dans les compositions de l'invention à une concentration comprise entre 0,0001 % à 20 % environ, et préférentiellement à une concentration comprise entre 0,05 % et 5 % environ par rapport au poids total de la composition finale. Ces compositions pourront notamment se présenter sous forme d'une solution aqueuse, hydroalcoolique ou huileuse ; d'une émulsion huile-dans-eau, eau-dans-huile ou émulsions multiples ; elles peuvent aussi se présenter sous forme de crèmes, de suspensions, ou encore de poudres, adaptées à une application sur la peau, les muqueuses, les lèvres et/ou les phanères. Ces compositions peuvent être plus ou moins fluides et avoir l'aspect d'une crème, d'une lotion, d'un lait, d'un sérum, d'une pommade, d'un gel, d'une pâte ou d'une mousse. Elles peuvent aussi se présenter sous forme solide, comme un stick, ou être appliquées sur la peau sous forme d'aérosol. Elles peuvent être utilisées comme produit de soin et/ou comme produit de maquillage de la peau. Ces compositions comprennent, en outre, tout additif communément utilisé dans le domaine d'application envisagé ainsi que les adjuvants nécessaires à leur formulation, tels que des solvants, des épaississants, des diluants, des anti-oxydants, des colorants, des filtres solaires, des principes auto-bronzants, des pigments, des charges, des conservateurs, des parfums, des absorbeurs d'odeur, des actifs cosmétiques ou pharmaceutiques, des huiles essentielles, des vitamines, des acides gras essentiels, des tensioactifs, des polymères filmogènes, etc. Dans tous les cas, l'homme du métier veillera à ce que ces adjuvants ainsi que leurs proportions soient choisis de telle manière à ne pas nuire aux propriétés avantageuses recherchées de la composition selon l'invention. Ces adjuvants peuvent, par exemple, correspondre à 0,01 à 20 % du poids total de la composition. Lorsque la composition de l'invention est une émulsion, la phase grasse peut représenter de 5 à 80 % en poids et de -9- préférence de 5 à 50 % en poids par rapport au poids total de la composition. Les émulsionnants et co-émulsionnants utilisés dans la composition seront choisis parmi ceux classiquement utilisés dans le domaine considéré. Par exemple, ils peuvent être utilisés en une proportion allant de 0,3 à 30 % en poids, par rapport au poids total de la composition. The effective amount of active ingredient according to the invention corresponds to the amount necessary to obtain the desired result, namely: activate aconitase, protect mitochondria and thus protect the skin from external aggression and fight against skin aging. According to an advantageous embodiment of the invention, the active principle derived from rice is present in the compositions of the invention at a concentration of between about 0.0001% and about 20%, and preferably at a concentration between 0.05 and approximately 5% and 5% relative to the total weight of the final composition. These compositions may especially be in the form of an aqueous solution, hydroalcoholic or oily; an oil-in-water, water-in-oil emulsion or multiple emulsions; they may also be in the form of creams, suspensions or powders, suitable for application to the skin, mucous membranes, lips and / or integuments. These compositions may be more or less fluid and have the appearance of a cream, lotion, milk, serum, ointment, gel, paste or paste. a foam. They can also be in solid form, as a stick, or be applied to the skin in the form of an aerosol. They can be used as a care product and / or as a make-up product for the skin. These compositions additionally comprise any additive commonly used in the field of application envisaged as well as the adjuvants necessary for their formulation, such as solvents, thickeners, diluents, antioxidants, dyes, sunscreens, self-tanning principles, pigments, fillers, preservatives, perfumes, odor absorbers, cosmetic or pharmaceutical active ingredients, essential oils, vitamins, essential fatty acids, surfactants, film-forming polymers, etc. . In all cases, those skilled in the art will ensure that these adjuvants and their proportions are chosen in such a way as not to harm the desirable advantageous properties of the composition according to the invention. These adjuvants may, for example, correspond to 0.01 to 20% of the total weight of the composition. When the composition of the invention is an emulsion, the fatty phase may represent from 5 to 80% by weight and preferably from 5 to 50% by weight relative to the total weight of the composition. The emulsifiers and co-emulsifiers used in the composition will be chosen from those conventionally used in the field under consideration. For example, they can be used in a proportion ranging from 0.3 to 30% by weight, relative to the total weight of the composition.

Par ses activités particulières, le principe actif selon l'invention pourra être utilisé avantageusement dans une composition cosmétique ou pour la préparation d'une composition pharmaceutique. En particulier, le principe actif selon l'invention pourra être utilisé avantageusement dans une composition cosmétique destinée à lutter de manière préventive et/ou curative contre les manifestations du vieillissement cutané et, plus spécifiquement, afin de lutter contre et/ou de prévenir le vieillissement photo-induit (photo-vieillissement). Par manifestations cutanées du vieillissement, on entend toutes modifications de l'aspect extérieur de la peau dues au vieillissement comme, par exemple, les rides et ridules, la peau flétrie, la peau molle, la peau amincie, le manque d'élasticité et/ou de tonus de la peau, la peau terne et sans éclat ou les taches de pigmentation de la peau, mais également toute modification interne de la peau qui ne se traduit pas systématiquement par un aspect extérieur modifié comme, par exemple, toute dégradation interne de la peau consécutive à une exposition aux rayonnements ultraviolets (UV). Le principe actif selon l'invention, ou la composition le contenant, permettra de lutter, en particulier, contre la perte d'élasticité et de fermeté de la peau. By its particular activities, the active ingredient according to the invention can be used advantageously in a cosmetic composition or for the preparation of a pharmaceutical composition. In particular, the active ingredient according to the invention may advantageously be used in a cosmetic composition intended to fight in a preventive and / or curative manner against the manifestations of skin aging and, more specifically, in order to fight against and / or prevent aging. photo-induced (photo-aging). Skin manifestations of aging means any changes in the external appearance of the skin due to aging such as, for example, wrinkles and fine lines, wilted skin, soft skin, thinned skin, lack of elasticity and / or or skin tone, dull and lackluster skin or skin pigmentation spots, but also any internal changes in the skin that do not systematically result in a modified external appearance such as, for example, any internal degradation of the skin. skin following exposure to ultraviolet (UV) radiation. The active ingredient according to the invention, or the composition containing it, will make it possible, in particular, to combat the loss of elasticity and firmness of the skin.

Le principe actif selon l'invention permet de protéger la peau et les phanères contre tous types d'agressions extérieures. L'utilisation du principe actif, ou d'une composition le contenant, va permettre à la peau et aux phanères d'être protégés et de mieux résister aux stress environnementaux. On entend, par l'expression agression extérieure , les agressions que peut produire l'environnement. A titre d'exemple, on peut citer des agressions telles que la pollution, les UV, ou encore les produits à caractère irritant tels que les tensioactifs, les conservateurs ou les parfums. Par pollution, on entend aussi bien la pollution extérieure , due par exemple aux particules de diesel, à l'ozone ou aux métaux lourds, que la pollution intérieure qui peut être due notamment aux émissions de solvants de peintures, de colles, ou de papier-peints (tels que toluène, styrène, xylène ou benzaldehyde), ou bien encore la fumée de cigarette. Le principe actif selon l'invention peut être avantageusement utilisé dans une composition cosmétique ou pour la préparation d'une composition pharmaceutique, en tant que principe actif photo-protecteur et, plus particulièrement, en tant que principe actif photo-protecteur dit -10- secondaire . On distingue, en effet, les principes actifs photo-protecteurs primaires des principes actifs photo-protecteurs secondaires. Les principes actifs photo-protecteurs primaires sont des substances qui exercent un pouvoir physique : ils sont en mesure d'absorber les rayonnements UV et de les restituer sous forme de chaleur afin de protéger la peau. Les principes actifs photo-protecteurs secondaires sont des substances qui ont généralement un effet biologique ; ce sont, par exemple, les principes actifs capables de limiter les dommages causés à l'ADN et aux membranes par la pénétration des rayonnements UV dans la peau. L'invention a également pour objet l'utilisation dans une composition cosmétique, ou pour la préparation d'une composition pharmaceutique, d'une quantité efficace de principe actif tel que décrit précédemment, le principe actif, ou la composition le contenant, étant destiné à prévenir les dommages causés à la peau par une exposition au soleil ou une exposition à des rayonnements ionisants lors de radiothérapies. L'invention a également pour objet l'utilisation dans une composition cosmétique, ou pour la préparation d'une composition pharmaceutique, d'une quantité efficace de principe actif tel que décrit précédemment, le principe actif, ou la composition le contenant, étant destiné à protéger les mitochondries, en particulier sur les zones du corps exposées aux rayonnements UV. L'invention se rapporte encore à l'utilisation dans une composition cosmétique, ou pour la préparation d'une composition pharmaceutique, d'une quantité efficace de principe actif tel que décrit précédemment, le principe actif, ou la composition le contenant, étant destiné à protéger la peau des dommages causés par les radicaux libres. L'invention consiste encore en une composition pharmaceutique caractérisée en ce que le principe actif selon l'invention est formulé pour atténuer une pathologie liée à des dysfonctionnements mitochondriaux, par exemple, certaines dégénérescences neuro- musculaires ou cardiaques, le diabète de type II, certaines pathologies du vieillissement. The active ingredient according to the invention makes it possible to protect the skin and integuments against all types of external aggressions. The use of the active ingredient, or a composition containing it, will allow the skin and integuments to be protected and to better withstand environmental stresses. By the term external aggression, we mean the aggressions that the environment can produce. By way of example, mention may be made of aggressions such as pollution, UV, or irritating products such as surfactants, preservatives or perfumes. Pollution is understood to mean both external pollution, eg due to diesel particles, ozone or heavy metals, as well as internal pollution which may be due to solvent emissions from paints, adhesives or paper. (such as toluene, styrene, xylene or benzaldehyde), or even cigarette smoke. The active ingredient according to the invention can be advantageously used in a cosmetic composition or for the preparation of a pharmaceutical composition, as a photo-protective active ingredient and, more particularly, as a photo-protective active ingredient said -10- Secondary. In fact, the primary photoprotective active principles are distinguished from the secondary photoprotective active ingredients. Primary photoprotective active ingredients are substances that exercise physical power: they are able to absorb UV radiation and return it as heat to protect the skin. Secondary photoprotective active ingredients are substances that usually have a biological effect; these are, for example, the active ingredients capable of limiting damage to DNA and membranes by the penetration of UV radiation into the skin. The subject of the invention is also the use in a cosmetic composition, or for the preparation of a pharmaceutical composition, of an effective quantity of active principle as described above, the active ingredient, or the composition containing it, being intended to to prevent damage to the skin caused by exposure to the sun or exposure to ionizing radiation during radiation therapy. The subject of the invention is also the use in a cosmetic composition, or for the preparation of a pharmaceutical composition, of an effective quantity of active principle as described above, the active ingredient, or the composition containing it, being intended to to protect mitochondria, especially on areas of the body exposed to UV radiation. The invention also relates to the use in a cosmetic composition, or for the preparation of a pharmaceutical composition, of an effective amount of active ingredient as described above, the active ingredient, or the composition containing it, being intended to to protect the skin from damage caused by free radicals. The invention also consists in a pharmaceutical composition characterized in that the active principle according to the invention is formulated to attenuate a pathology related to mitochondrial dysfunctions, for example certain neuromuscular or cardiac degenerations, type II diabetes, certain pathologies of aging.

Des modes particuliers de réalisation de ce procédé de traitement cosmétique résultent également de la description précédente. D'autres avantages et caractéristiques de l'invention apparaîtront mieux à la lecture des exemples donnés à titre illustratif et non limitatif. -11-Exemple 1 : Préparation de principe actif à partir de riz (Oryza sativa L.) Le principe actif est obtenu à partir d'un extrait de plantes de l'espèce Oryza sativa L. Bien entendu l'extrait peut être préparé à partir de plantes d'au moins l'une quelconque des nombreuses variétés et espèces appartenant au genre Oryza. Particular embodiments of this cosmetic treatment method also result from the foregoing description. Other advantages and characteristics of the invention will appear better on reading the examples given by way of illustration and not limitation. Example 1 Preparation of active ingredient from rice (Oryza sativa L.) The active principle is obtained from an extract of plants of the species Oryza sativa L. Of course the extract can be prepared at from plants of at least one of the many varieties and species belonging to the genus Oryza.

Dans une première étape, 1 kg de grains de riz décortiqués riz sont broyés dans un broyeur à céréale. La farine obtenue est délipidée par l'action d'un solvant organique, l'hexane. Après filtration et séchage sous vide, la poudre obtenue est mise en suspension dans une solution aqueuse alcaline (dilution au 1/10) pH 10. contenant 1 % de polyvinylpolypyrrolidone ( Polyclar V ISP). Ce mélange est maintenu sous agitation pendant un temps suffisamment long pour permettre la solubilisation des fractions solubles. La température d'extraction est variable (comprise entre 4 et 80 C) ; préférentiellement l'opération sera réalisée à froid. Après cette phase d'extraction le milieu est clarifié par centrifugation puis filtré sur filtre à plaque. Ce filtrat qui contient les fractions solubles du riz est ensuite soumis à une précipitation des protéines en faisant varier la force ionique en milieuneutre ou acide, ce qui permet d'éliminer les composants glucidiques solubles, les lipides et les acides nucléiques le milieu est amené à pH 3,5. Le surnageant est éliminé et le précipité est ensuite lavé à l'aide d'un solvant tel que, par exemple, l'éthanol ou le méthanol puis le solvant est évaporé par séchage sous vide. A ce stade, on obtient environ 50 grammes de poudre de couleur jaune clair d'extrait protéique brut contenant : - Protéines : 75 % - Glucides : 20 % - Lipides : 5 % In a first step, 1 kg of rice husked rice grains are ground in a cereal mill. The flour obtained is delipidated by the action of an organic solvent, hexane. After filtration and drying under vacuum, the powder obtained is suspended in an aqueous alkaline solution (dilution 1/10) pH 10. containing 1% polyvinylpolypyrrolidone (Polyclar V ISP). This mixture is stirred for a time long enough to allow the solubilization of the soluble fractions. The extraction temperature is variable (between 4 and 80 C); preferably the operation will be performed cold. After this extraction phase, the medium is clarified by centrifugation and then filtered through a plate filter. This filtrate, which contains the soluble fractions of the rice, is then subjected to precipitation of the proteins by varying the ionic strength in neutral medium or acid, which makes it possible to eliminate the soluble carbohydrate components, the lipids and the nucleic acids. pH 3.5. The supernatant is removed and the precipitate is then washed with a solvent such as, for example, ethanol or methanol and the solvent is evaporated by drying in vacuo. At this stage, about 50 grams of light yellow powder of crude protein extract are obtained containing: - Proteins: 75% - Carbohydrates: 20% - Lipids: 5%

Le précipité riche en protéines est remis en solution dans l'eau ou un autre solvant. The protein-rich precipitate is dissolved in water or another solvent.

L'extrait protéique brut est alors soumis à une série d'hydrolyses ménagées et sélectives consistant en des hydrolyses chimiques et enzymatiques en présence de 0,5 % de PVPP (Polyclar V) et d'endopeptidases à cystéine (papaïne, ficine). Après réaction l'hydrolysat est filtré sur plaque puis sur cartouche stérilisante (0,21am). On obtient alors un hydrolysat de couleur claire titrant de 15 à 30 g/1 d'extrait sec qui est alors dilué de telle sorte que la concentration en composés de nature peptidique déterminée par la méthode de Lowry, soit comprise entre 0,1 et 5g/1 et préférentiellement entre 0,5 et 2 g/1. L'analyse physico-chimique de l'hydrolysat végétal, qui constitue le principe actif, montre que son pH est compris entre 4 et 7, et préférentiellement entre 5 et 6. l'extrait sec titre -12- de 1 à 8 g/1 et de manière préférée entre 2 et 5 g/1, sa teneur en composés de nature peptidique est comprise entre 0,1 et 5g/1 et préférentiellement entre 0,5 à 2 g/1 et sa teneur en sucres entre 0,5 à 2,5 g/1. The crude protein extract is then subjected to a series of gentle and selective hydrolyses consisting of chemical and enzymatic hydrolyses in the presence of 0.5% PVPP (Polyclar V) and cysteine endopeptidases (papain, ficin). After reaction, the hydrolyzate is filtered on a plate and then on a sterilizing cartridge (0.21am). A light-colored hydrolyzate titrant of 15 to 30 g / l of dry extract is then obtained, which is then diluted so that the concentration of peptides determined by the method of Lowry is between 0.1 and 5 g. / 1 and preferably between 0.5 and 2 g / l. The physicochemical analysis of the vegetable hydrolyzate, which constitutes the active principle, shows that its pH is between 4 and 7, and preferably between 5 and 6. the solids content of 1-8 g / 1 and preferably between 2 and 5 g / 1, its content of peptide compounds is between 0.1 and 5g / 1 and preferably between 0.5 to 2 g / 1 and its sugar content between 0.5 at 2.5 g / 1.

Exemple 2 : Préparation de principe actif à partir de riz (Oryza saliva L.) Une variante du protocole de l'exemple 1 consiste à réaliser la même séquence d'hydrolyses enzymatiques ménagées et sélectives mais en présence de 0,5 % de PVPP. On obtient alors un hydrolysat de couleur claire titrant de 15 à 30 g/1 d'extrait sec après filtration stérilisante On procède ensuite à une ultrafiltration de la solution sur une cartouche de filtration Millipore Helicon (cut off 1 kDa). Les hauts poids moléculaires contenus dans le retentât sont écartés, le filtrat est conservé. La concentration en composés de nature peptidique est déterminée par la méthode de Lowry, soit comprise entre 0,1 et 5g/l et préférentiellement entre 0,5 et 2 g/l. L'analyse physico-chimique de l'hydrolysat végétal, qui constitue le principe actif, montre que son pH est compris entre 4 et 7, et préférentiellement entre 5 et 6, l'extrait sec titre entre 1 à 8 g/1 et de manière préférée entre 2 et 5 g/l, sa teneur en composés de nature peptidique est comprise entre 0,1 et 5g/1 et préférentiellement entre 0,5 à 2 g/1 et sa teneur en sucres entre 0,5 à 2,5 g/l. EXAMPLE 2 Preparation of active principle from rice (Oryza saliva L.) A variant of the protocol of Example 1 consists in carrying out the same sequence of controlled and selective enzyme hydrolyses but in the presence of 0.5% of PVPP. A light-colored hydrolyzate of 15 to 30 g / l of dry extract is then obtained after sterilizing filtration. The solution is then ultrafiltered on a Millipore Helicon filtration cartridge (cut off 1 kDa). The high molecular weights contained in the retentate are removed, the filtrate is preserved. The concentration of compounds of peptide nature is determined by the method of Lowry, between 0.1 and 5 g / l and preferably between 0.5 and 2 g / l. The physicochemical analysis of the vegetable hydrolyzate, which constitutes the active ingredient, shows that its pH is between 4 and 7, and preferably between 5 and 6, the dry extract is between 1 to 8 g / l and preferred way between 2 and 5 g / l, its content of peptide compounds is between 0.1 and 5g / 1 and preferably between 0.5 to 2 g / 1 and its sugar content between 0.5 to 2, 5 g / l.

Une autre variante consiste à effectuer une purification du principe actif, obtenu selon l'exemple 1 ou 2, par chromatographie d'échange d'ions, sur une colonne TSK gel (TosoHaas) avec un tampon phosphate pH 7. Another variant consists in carrying out a purification of the active principle, obtained according to Example 1 or 2, by ion exchange chromatography, on a TSK gel column (TosoHaas) with a pH 7 phosphate buffer.

Un exemple de composition en acides aminés de l'extrait est donné dans le tableau suivant (% pour 100 g de matières sèches) : Acides aminés % Alanine 3,74 Arginine 5,67 Acide aspartique 5,87 Cystéine 1,16 Acide glutamique 12,47 Glycine 2, 81 Histidine 1,51 -13- Isoleucine 3,26 Leucine 6,81 Lysine 2,39 Méthionine 1,85 Phénylalanine 4,06 Proline 2,58 Sérine 3,52 Thréonine 2,47 Tryptophane 0,54 Tyrosine 3,54 Valine 3,73 Exemple 3 : Mise en évidence de l'effet activateur du principe actif selon l'exemple 1 sur l'activité enzymatique de l'aconitase Le but de cette étude est de déterminer l'influence du principe actif selon l'exemple 1 sur l'activité enzymatique de l'aconitase. Pour cela l'activité enzymatique totale (cytoplasmique et mitochondriale) et l'activité enzymatique mitochondriale de l'aconitase ont été mesurées. Protocole : Des fibroblastes humains normaux sont traités avec une solution à 1 %, du principe actif selon l'exemple 1, pendant 48 heures, puis soumis à une irradiation par des UVB à 100mJ/cm2. Après l'irradiation, les cellules sont traitées dans les mêmes conditions pendant encore 24 heures. Des contrôles négatifs sont réalisés dans les mêmes conditions mais en l'absence de principe actif selon l'exemple 1. Pour évaluer l'activité enzymatique de l'aconitase, les fibroblastes sont ensuite récoltés et centrifugés dans du tampon PBS. Une partie des cellules est ensuite traitée pour réaliser le dosage de l'activité enzymatique totale, une autre partie est utilisée pour isoler la fraction mitochondriale selon le protocole suivant : Les cellules sont lysées à l'aide d'un homogénéisateur de type Dounce et l'homogénat est centrifugé à froid, à 10000 g pendant 10 minutes. Le culot, riche en mitochondries, est lavé avec du tampon TES (10 mM Tris, 1 mM EGTA, 0,25 M sucrose) et resuspendu dans du tampon 0,2 mM citrate trisodique avant d'être utilisé pour le dosage enzymatique. An example of the amino acid composition of the extract is given in the following table (% per 100 g of solids): Amino acids% Alanine 3.74 Arginine 5.67 Aspartic acid 5.87 Cysteine 1.16 Glutamic acid 12 , 47 Glycine 2, 81 Histidine 1.51 -13- Isoleucine 3.26 Leucine 6.81 Lysine 2.39 Methionine 1.85 Phenylalanine 4.06 Proline 2.58 Serine 3.52 Threonine 2.47 Tryptophan 0.54 Tyrosine 3.54 Valine 3.73 Example 3: Demonstration of the activating effect of the active principle according to Example 1 on the enzymatic activity of aconitase The purpose of this study is to determine the influence of the active ingredient according to Example 1 on the enzymatic activity of aconitase. For this, the total enzymatic activity (cytoplasmic and mitochondrial) and the mitochondrial enzymatic activity of aconitase were measured. Protocol: Normal human fibroblasts are treated with a 1% solution, of the active ingredient according to Example 1, for 48 hours, then subjected to irradiation with UVB at 100 mJ / cm 2. After irradiation, the cells are treated under the same conditions for another 24 hours. Negative controls are carried out under the same conditions but in the absence of active principle according to Example 1. To evaluate the enzymatic activity of aconitase, the fibroblasts are then harvested and centrifuged in PBS buffer. Part of the cells is then treated to perform the assay of the total enzyme activity, another part is used to isolate the mitochondrial fraction according to the following protocol: The cells are lysed using a Dounce type homogenizer and the The homogenate is centrifuged cold at 10,000 g for 10 minutes. The pellet, rich in mitochondria, is washed with TES buffer (10 mM Tris, 1 mM EGTA, 0.25 M sucrose) and resuspended in 0.2 mM trisodium citrate buffer before being used for enzymatic assay.

Le dosage de l'activité enzymatique de l'aconitase est réalisé à l'aide du Kit OXIS Bioxytech Aconitase-340 assay (Oxys International), selon le principe suivant : l'aconitase -14- provoque l'isomérisation du citrate en isocitrate. L'isocitrate est ensuite transformé en alphaketoglutarate par l'enzyme isocitrate déshydrogénase. Cette deuxième réaction s'accompagne de la transformation de NADP+ en NADPH. C'est la formation de NADPH qui est quantifiée par spectrophotométrie à 340 nm. Dans les conditions expérimentales choisies, la vitesse de formation du NADPH est proportionnelle à la quantité d'aconitase. L'analyse de la cinétique d'apparition du NADPH permet de calculer la concentration en aconitase de l'échantillon (en mU/ml). Résultats : Les dosages de l'activité enzymatique totale de l'aconitase montrent une augmentation de plus de 55 % de l'activité dans les cellules traitées par le principe actif selon l'exemple 1 comparées aux cellules contrôle non traitées. Lorsque les cellules sont irradiées par les UVB, on observe au contraire une diminution de plus de 30 % de cette activité. Le traitement, préalable et postérieur à l'irradiation UVB, par le principe actif selon l'exemple 1, permet de limiter la diminution observée dans les cellules contrôle non traitées. Les dosages de l'activité enzymatique de l'aconitase mitochondriale montrent des résultats comparables. Conclusions : Le principe actif selon l'exemple 1 stimule fortement l'activité enzymatique des aconitases cytoplasmiques et mitochondriales des cellules cutanées. L'action du principe actif selon l'exemple 1 protège les cellules et les mitochondries vis à vis d'un stress par les UVB. The determination of the enzymatic activity of aconitase is carried out using the OXIS Bioxytech Aconitase-340 assay Kit (Oxys International), according to the following principle: the aconitase causes the isomerization of citrate to isocitrate. The isocitrate is then converted to alphaketoglutarate by the enzyme isocitrate dehydrogenase. This second reaction is accompanied by the transformation of NADP + into NADPH. It is the formation of NADPH which is quantified by spectrophotometry at 340 nm. Under the chosen experimental conditions, the rate of formation of NADPH is proportional to the amount of aconitase. Analysis of the appearance kinetics of NADPH makes it possible to calculate the aconitase concentration of the sample (in mU / ml). Results The assays of the total enzymatic activity of aconitase show an increase of more than 55% of the activity in the cells treated with the active principle according to Example 1 compared to the untreated control cells. When the cells are irradiated with UVB, on the contrary, a decrease of more than 30% of this activity is observed. The treatment, before and after the UVB irradiation, with the active principle according to Example 1, makes it possible to limit the decrease observed in the untreated control cells. Assays of enzymatic activity of mitochondrial aconitase show comparable results. Conclusions: The active ingredient according to Example 1 strongly stimulates the enzymatic activity of cytoplasmic and mitochondrial aconitases of cutaneous cells. The action of the active ingredient according to Example 1 protects cells and mitochondria against stress by UVB.

Exemple 4 : Evaluation de l'effet protecteur du principe actif selon l'exemple 1 sur les cellules cutanées soumises à des rayonnements ultraviolets (UVB) Le but de cette étude est de déterminer l'effet protecteur du principe actif selon l'exemple 1 vis-à-vis de fibroblastes dermiques soumis à un stress par des rayonnements UVB. Pour cela, des tests de viabilité cellulaire ont été réalisés par la technique au MTT. EXAMPLE 4 Evaluation of the Protective Effect of the Active Principle According to Example 1 on Cutaneous Cells Subject to Ultraviolet Radiation (UVB) The aim of this study is to determine the protective effect of the active ingredient according to Example 1 to dermal fibroblasts subjected to stress by UVB radiation. For this, cell viability tests were performed by the MTT technique.

Protocole : Les fibroblastes dermiques humains sont traités avec une solution à 1 % du principe actif selon l'exemple 1, pendant 24 heures, irradiés par des UVB (de 25 à 100 mJ/cm2) puis cultivés encore 24 heures en présence de la même concentration de principe actif selon l'exemple 1. Des contrôles non traités et non irradiés et des contrôles non traités mais irradiés sont réalisés dans les mêmes conditions. A la fin de l'expérimentation, les cellules sont incubées dans une solution contenant 0,1 mg/ml de MTT (3-[4, 5-diméthylthiazol-2-yl]-2, 5-diphényltétrazolium, bromure). Ce composé est absorbé par les -15- cellules vivantes puis métabolisé par les enzymes mitochondriales en un composé bleu violet, le formazan, qui sera dosé par spectrophotométrie à 540 nm. La densité optique (D.O.) est alors directement proportionnelle à l'activité enzymatique mitochondriale ainsi qu'au nombre de cellules vivantes. Protocol: Human dermal fibroblasts are treated with a solution containing 1% of the active principle according to Example 1, for 24 hours, irradiated with UVB (from 25 to 100 mJ / cm 2) and then cultured for a further 24 hours in the presence of the same concentration of active principle according to Example 1. Untreated and non-irradiated controls and untreated but irradiated controls are carried out under the same conditions. At the end of the experiment, the cells are incubated in a solution containing 0.1 mg / ml of MTT (3- [4,5-dimethylthiazol-2-yl] -2,5-diphenyltetrazolium bromide). This compound is absorbed by living cells and then metabolized by the mitochondrial enzymes into a blue violet compound, formazan, which will be assayed spectrophotometrically at 540 nm. The optical density (OD) is then directly proportional to the mitochondrial enzymatic activity as well as to the number of living cells.

Résultats : L'évaluation de la viabilité cellulaire par la technique du MTT montre, d'une part, que le principe actif selon l'exemple 1, indépendamment de tout rayonnement UVB, augmente la viabilité cellulaire et d'autre part, que les irradiations par les UVB ont eu un effet cytotoxique dose-dépendant sur les fibroblastes humains, mais que cet effet cytotoxique ne se manifeste pas en présence de 1 % de principe actif selon l'exemple 1. Results: The evaluation of the cell viability by the MTT technique shows, on the one hand, that the active ingredient according to Example 1, independently of any UVB radiation, increases the cell viability and, on the other hand, that the irradiations by UVB have had a dose-dependent cytotoxic effect on human fibroblasts, but this cytotoxic effect is not manifested in the presence of 1% of active ingredient according to Example 1.

Conclusions : Le principe actif selon l'exemple 1 augmente la viabilité cellulaire et d'autre part, protège efficacement les cellules cutanées contre les effets cytotoxiques des rayonnements UVB. Conclusions: The active ingredient according to Example 1 increases the cell viability and on the other hand, effectively protects the skin cells against the cytotoxic effects of UVB radiation.

Exemple 5 : Evaluation de l'effet protecteur du principe actif selon l'exemple 1 sur les cellules cutanées soumises à un stress oxydatif EXAMPLE 5 Evaluation of the Protective Effect of the Active Principle According to Example 1 on Cutaneous Cells Under Oxidative Stress

Le but de cette étude est de déterminer l'effet protecteur du principe actif selon l'exemple 1 vis-à-vis de fibroblastes dermiques soumis à un stress oxydatif provoqué par de l'eau oxygénée (H2O2) à 4 mM ou 5 mM. Pour cela, des tests de viabilité cellulaire ont été réalisés par la technique au MTT. Protocole : Les fibroblastes dermiques humains sont traités avec une solution à 1 % du principe actif selon l'exemple 1, pendant 24 heures, soumis à un stress oxydatif provoqué par de l'H2O2 à 4 mM ou 5 mM, pendant 30 minutes puis cultivés encore 24 heures en présence de la même concentration de principe actif selon l'exemple 1. Des contrôles non traités par le principe actif ni par de l'H2O2 et des contrôles de traitement avec le principe actif seul sont réalisés dans les mêmes conditions. A la fin de l'expérimentation, les cellules sont incubées dans une solution contenant 0,1 mg/ml de MTT (3-[4, 5-diméthylthiazol-2-yl]-2, 5-diphényltétrazolium, bromure), selon le protocole décrit dans l'exemple 4. Résultats : L'évaluation de la viabilité cellulaire par la technique du MTT montre, d'une part, que le principe actif selon l'exemple 1, indépendamment d'un stress oxydatif, augmente la viabilité cellulaire, et d'autre part, qu'un stress oxydatif provoqué par de l'H2O2 à 4 mM ou 5 mM pendant 30 minutes, a eu un effet cytotoxique dose-dépendant sur les fibroblastes -16- humains, mais que cet effet cytotoxique ne se manifeste pas en présence de 1% de principe actif selon l'exemple 1. Conclusions : Le principe actif selon l'exemple 1 augmente la viabilité cellulaire et protège efficacement les cellules cutanées contre les effets cytotoxiques d'un stress oxydatif. 5 Exemple 6 : Evaluation de l'effet cytoprotecteur du principe actif selon l'exemple 1 sur les cellules cutanées soumises à des rayonnements ultraviolets (UVB) Une étude de l'effet cytoprotecteur du principe actif selon l'exemple 1 a été réalisée en évaluant les dommages provoqués au niveau de l'ADN. Cette étude a été réalisée grâce au test 10 des comètes (ou Single Cell Gel Electrophoresis ), une technique micro-électrophorétique courte et sensible qui permet de visualiser et de quantifier les cassures de l'ADN sur des cellules individuelles. Protocole : Des fibroblastes humains primaires sont ensemencés dans des boîtes de diamètres 100. Lorsque les cellules ont atteint 70 % de confluence, elles sont traitées avec une 15 solution à 1 % de principe actif selon l'exemple 1, pendant 24 heures. Les cellules sont ensuite soumises à une irradiation UVB à 100 mJ/cm2, puis cultivées en présence du principe actif pendant encore 24 heures. Des boîtes non traitées par le principe actif servent de contrôle. Une suspension cellulaire à 100 000 cellules/ml est ensuite réalisée, 500 l sont prélevés, inclus dans une solution d'agarose et coulés entre lame et lamelle. Les cellules sont 20 lysées à froid. L'ADN est ensuite dénaturé par un tampon alcalin puis soumis à une courte électrophorèse (250 mA pendant 30 minutes) et mis en évidence par une coloration à l'iodure de propidium. Les lames sont alors observées au microscope à fluorescence. Une cellule altérée voit son ADN s'étirer vers l'anode proportionnellement au nombre de cassures présentes dans l'ADN et forme une comète . L'ADN fortement dégradé se trouve dans la 25 queue de la comète. Une cellule intacte reste ronde et son ADN est alors compacté au niveau de la tête de la comète. L'évaluation des cassures de l'ADN s'effectue à l'aide d'un logiciel analyseur d'image qui permet de déterminer le pourcentage de dégradation de l'ADN, par l'évaluation quantitative du Tail Moment , un paramètre se définissant comme le produit de la longueur de la 30 comète par le pourcentage d'ADN dans sa partie distale. Résultats : Les résultats obtenus montrent que les cellules soumises à une irradiation UVB, en l'absence du principe actif selon l'exemple 1 (contrôle UVB), présentent le Tail -17- Moment le plus important, c'est-à-dire la condition où l'ADN est le plus endommagé. Au contraire, les cellules traitées avec le principe actif selon l'exemple 1, ont un Tail Moment , c'est à dire des dommages à l'ADN, diminué de 25 %. Conclusion : Le principe actif selon l'exemple 1 joue un rôle important dans la protection 5 de l'ADN des cellules cutanées soumises à une irradiation par les UVB. The purpose of this study is to determine the protective effect of the active ingredient according to Example 1 vis-à-vis dermal fibroblasts subjected to oxidative stress caused by hydrogen peroxide (H2O2) at 4 mM or 5 mM. For this, cell viability tests were performed by the MTT technique. Protocol: The human dermal fibroblasts are treated with a solution containing 1% of the active principle according to Example 1, for 24 hours, subjected to oxidative stress caused by H 2 O 2 at 4 mM or 5 mM, for 30 minutes and then cultured. another 24 hours in the presence of the same concentration of active principle according to Example 1. Controls not treated with the active ingredient or with H2O2 and treatment controls with the active principle alone are carried out under the same conditions. At the end of the experiment, the cells are incubated in a solution containing 0.1 mg / ml of MTT (3- [4,5-dimethylthiazol-2-yl] -2,5-diphenyltetrazolium, bromide), according to protocol described in Example 4. Results: The evaluation of cell viability by the MTT technique shows, firstly, that the active ingredient according to Example 1, independently of oxidative stress, increases the cell viability on the other hand, that oxidative stress caused by 4 mM or 5 mM H2O2 for 30 minutes had a dose-dependent cytotoxic effect on human fibroblasts, but that this cytotoxic effect does not occur. does not occur in the presence of 1% of active ingredient according to Example 1. Conclusions: The active ingredient according to Example 1 increases cell viability and effectively protects the skin cells against the cytotoxic effects of oxidative stress. EXAMPLE 6 Evaluation of the cytoprotective effect of the active principle according to Example 1 on cutaneous cells subjected to ultraviolet radiation (UVB) A study of the cytoprotective effect of the active principle according to Example 1 was carried out by evaluating damage caused at the DNA level. This study was carried out by means of the comet cell assay (or Single Cell Gel Electrophoresis), a short and sensitive microelectrophoretic technique which makes it possible to visualize and quantify the breaks of DNA on individual cells. Protocol: Primary human fibroblasts are inoculated into dishes of diameters 100. When the cells have reached 70% confluence, they are treated with a 1% solution of active principle according to Example 1 for 24 hours. The cells are then subjected to UVB irradiation at 100 mJ / cm 2 and then cultured in the presence of the active ingredient for a further 24 hours. Boxes not treated with the active ingredient serve as control. A cell suspension at 100,000 cells / ml is then performed, 500 l are taken, included in an agarose solution and cast between slide and coverslip. The cells are lysed cold. The DNA is then denatured with an alkaline buffer and then subjected to a short electrophoresis (250 mA for 30 minutes) and evidenced by propidium iodide staining. The slides are then observed under a fluorescence microscope. An altered cell sees its DNA stretch toward the anode in proportion to the number of breaks in the DNA and form a comet. The highly degraded DNA is in the tail of the comet. An intact cell remains round and its DNA is then compacted at the head of the comet. The evaluation of DNA breaks is carried out using an image analysis software which makes it possible to determine the percentage of degradation of the DNA, by the quantitative evaluation of the Tail Moment, a parameter that defines itself. as the product of the length of the comet by the percentage of DNA in its distal portion. Results: The results obtained show that the cells subjected to UVB irradiation, in the absence of the active ingredient according to Example 1 (UVB control), have the most important time Tail, that is to say the condition where DNA is most damaged. In contrast, the cells treated with the active ingredient according to Example 1, have a Tail Moment, that is to say, damage to the DNA, decreased by 25%. Conclusion: The active ingredient according to Example 1 plays an important role in protecting the DNA of cutaneous cells subjected to irradiation with UVB.

Exemple 7 : Préparation de compositions 1 - Crème protection solaire: Noms commerciaux J Noms INCI I % massique PHASE A Eau déminéralisée Aqua (Water) qsp Pemulen TRI Acrylates/C10-30 Alkyl Acrylate 0,40 Crosspolymer Glycerine Glycerin 3,00 Nipastat Sodium Sodium Methylparaben (and) Sodium 0,15 Ethylparaben (and) Sodium Butyl paraben (and) Sodium Propylparaben (and) Sodium Isobutylparaben PHASE B Parsol MCX Ethylhexyl Methoxycinnamate 7,50 Eusolex 4360 Benzophenone-3 3,00 Parsol 1789 Butyl Methoxydibenzoylmethane 2,00 Myritol 318 Caprylic/Capric Triglyceride 4,00 Emulgade SEV Hydrogenated Palm Glycerides (and) 5,00 Ceteareth-20 (and) Ceteareth- 1 2 (and) Cetearyl Alcohol Propylparaben Propylparaben 0,15 Nacol 16-98 Cetyl Alcohol 1,00 PHASE C TEA Triethanolamine 0,20 PHASE D Principe actif selon l'exemple 1 3 Parfum Parfum (Fragrance) qsp Colorant qsp -18- Les constituants de la phase A et de la phase B sont chauffés séparément entre 70 C et 75 C. La phase B est émulsionnée dans la phase A sous agitation. La phase C est ajoutée, à 45 C, en augmentant l'agitation. La phase D est ensuite additionnée lorsque la température se situe en dessous de 40 C. Le refroidissement est poursuivi jusqu'à 25 C sous vive agitation. 2 ûLait après-soleil : Noms commerciaux Noms INCI % massique PHASE A Montanov L C 14-22 Alcohols (and) C12-20 3,00 Alkyl Glucoside Waglinol 2559 Cetearyl Isononanoate 4,00 Tegosoft TN C12-15 Alkyl Benzoate 3,00 Huile de Noyaux d'Abricot Prunus Armeniaca (Apricot) Kernel 2,00 Oil Huile d'Avocat Persea Gratissima (Avocado) Oil 1,00 Abil 350 Dimethicone 1,00 PHASE B Eau déminéralisée Aqua (Water) qsp PHASE C Simulgel EG Sodium Acrylate/Acryloyldimethyl 0,4 Taurate Copolymer (and) Isohexadecane (and) Polysorbate 80 Copolymer (and) Polysorbate 80 PHASE D Phenonip Phenoxyethanol (and) 0,30 Methylparaben (and) Ethylparaben (and) Butylparaben (and) Propylparaben (and) Isobutylparaben Ethylparaben and Propylparaben and Buthylparaben -19- Noms commerciaux Noms INCI % massique Germall 115 Imidazolidinyl Urea 0,20 PHASE E Principe actif selon l'exemple 1 0,1 Préparer la phase A sous agitation. Incorporer la gomme xanthane progressivement, sous agitation défloculeuse. Les phases C et D seront incorporées une fois le gel terminé. La phase E, préparée préalablement jusqu'à parfaite dissolution de la DHA, sera rajoutée ensuite. Example 7 Preparation of compositions 1 - Sun protection cream: Trade names J INCI names I% by weight PHASE A Demineralized water Aqua (Water) qsp Pemulen TRI Acrylates / C10-30 Alkyl Acrylate 0.40 Crosspolymer Glycerine Glycerin 3.00 Nipastat Sodium Sodium Methylparaben (and) Sodium 0.15 Ethylparaben (and) Sodium Butyl paraben (and) Sodium Propylparaben (and) Sodium Isobutylparaben PHASE B Parsol MCX Ethylhexyl Methoxycinnamate 7.50 Eusolex 4360 Benzophenone-3 3.00 Parsol 1789 Butyl Methoxydibenzoylmethane 2.00 Myritol 318 Caprylic / Capric Triglyceride 4.00 Emulgade SEV Hydrogenated Palm Glycerides (and) 5.00 Ceteareth-20 (and) Ceteareth-1 2 (and) Cetearyl Alcohol Propylparaben Propylparaben 0.15 Nacol 16-98 Cetyl Alcohol 1.00 PHASE C TEA Triethanolamine 0.20 PHASE D Active principle according to Example 1 3 Perfume Perfume (Fragrance) qsp Colorant qsp -18- The constituents of phase A and phase B are heated separately between 70 ° C. and 75 ° C. Phase B is emulsified da phase A with stirring. Phase C is added at 45 ° C., increasing stirring. Phase D is then added when the temperature is below 40 C. Cooling is continued to 25 C with vigorous stirring. 2 After-sun milk: Trade names INCI names% by mass PHASE A Montanov LC 14-22 Alcohols (and) C12-20 3.00 Alkyl Glucoside Waglinol 2559 Cetearyl Isononanoate 4.00 Tegosoft TN C12-15 Alkyl Benzoate 3.00 Apricot Kernels Prunus Armeniaca (Apricot) Kernel 2.00 Oil Avocado Oil Persea Gratissima (Avocado) Oil 1.00 Abil 350 Dimethicone 1.00 PHASE B Demineralized Water Aqua (Water) qsp PHASE C Simulgel EG Sodium Acrylate / Acryloyldimethyl 0.4 Taurate Copolymer (and) Isohexadecane (and) Polysorbate 80 Copolymer (and) Polysorbate 80 PHASE D Phenonip Phenoxyethanol (and) 0.30 Methylparaben (and) Ethylparaben (and) Butylparaben (and) Propylparaben (and) Isobutylparaben Ethylparaben and Propylparaben and Buthylparaben -19- Trade names INCI names% by mass Germall 115 Imidazolidinyl Urea 0,20 PHASE E Active principle according to Example 1 0,1 Prepare phase A with stirring. Incorporate the xanthan gum gradually, with deflocculating stirring. Phases C and D will be incorporated once the gel is complete. Phase E, prepared before perfect dissolution of the DHA, will be added later.

Ajuster le pH si nécessaire à 4 - 4,5. Colorer et parfumer. Adjust the pH if necessary to 4 - 4.5. Color and perfume.

3 ûCrème anti-âge : Noms commerciaux Noms INCI % massique Phase A Montanov 68 Cetearyl Alcohol (and) Cetearyl Glucoside 6,00 Squalane Squalane 3,00 Cetiol SB 45 Butyrospermum Parkii ( Shea Butter) 2,00 Waglinol 250 Cetearyl Ethylhexanoate 3,00 Amerchol L- 101 Minerai Oil (and) Lanolin Alcohol 2,00 Abil 350 Dimethicone 1,50 BHT BHT 0,01 Coenzyme Q10 Ubiquinone 0,10 • Phase B Huile d'Avocat Persea Gratissima (Avocado) Oil 1,25 Phenonip Phenoxyethanol (and) Methylparaben (and) 0,75 Ethylparaben (and) Butylparaben (and) Propylparaben (and) Isobutylparaben Phase C Eau déminéralisée Aqua (Water) qsp -20- Noms commerciaux Noms INCI % massique 1utylene Glycol Butylene Glycol 2,00 Glucam E10 Methyl Gluceth-10 1,00 Allantoin Allantoin 0,15 Carbopol Ultrez 10 Carbomer 0,20 Phase D TEA Triethanolamine 0,18 Phase E Principe actif selon l'exemple 1 0,5 GP4G Water (and) Artemia Extract 1,50 Collaxyl Water (and) Butylene Glycol (and) Hexapeptide- 3,00 9 Phase F Parfum Parfum (Fragrance) qsp Colorant qsp Préparer et fondre la phase A à 65-70 C. Chauffer la phase C à 65-70 C. La phase B est ajoutée à la phase A juste avant d'émulsionner A dans B. A environ 45 C, le carbomer est neutralisé par addition de la phase D. La phase E est ensuite additionnée sous légère agitation 5 et le refroidissement est poursuivi jusqu'à 25 C. La phase F est alors additionnée si souhaité. 3 - Anti-Aging Cream: Trade Names INCI Names% Massic Phase A Montanov 68 Cetearyl Alcohol (and) Cetearyl Glucoside 6.00 Squalane Squalane 3.00 Cetiol SB 45 Butyrospermum Parkii (Shea Butter) 2.00 Waglinol 250 Cetearyl Ethylhexanoate 3.00 Amerchol L- 101 Ore Oil (and) Lanolin Alcohol 2.00 Abil 350 Dimethicone 1.50 BHT BHT 0.01 Coenzyme Q10 Ubiquinone 0.10 • Phase B Avocado Oil Persea Gratissima (Avocado) Oil 1.25 Phenonip Phenoxyethanol ( and) Methylparaben (and) 0.75 Ethylparaben (and) Butylparaben (and) Propylparaben (and) Isobutylparaben Phase C Demineralized Water Aqua (Water) qsp -20- Trade Names INCI Names% by mass 1utylene Glycol Butylene Glycol 2.00 Glucam E10 Methyl Gluceth-10 1.00 Allantoin Allantoin 0.15 Carbopol Ultrez 10 Carbomer 0.20 Phase D TEA Triethanolamine 0.18 Phase E Active ingredient according to Example 1 0.5 GP4G Water (and) Artemia Extract 1.50 Collaxyl Water ( and) Butylene Glycol (and) Hexapeptide- 3.00 9 Phase F Perfume Perfume (Fragrance) qsp Co lorant qsp Prepare and melt phase A at 65-70 C. Heat phase C at 65-70 C. Phase B is added to phase A just before emulsifying A in B. At about 45 C, the carbomer is neutralized by addition of phase D. Phase E is then added with gentle stirring and cooling is continued to 25 ° C. Phase F is then added if desired.

4 ùCrème protectrice de jour : Noms commerciaux Noms INCI % massique Phase A Emulium Delta Cetyl alcohol (and) Glyceryl Stearate (and) 4,00 PEG-75 Stearate (and) Ceteth-20 (and) Steareth-20 Lanette O Cetearyl Alcohol 1,50 2915379 -21- D C 200 Fluid/100cs Dimethicone 1,00 :: 1 • • .• .• 1,00 .. • 3,00 ' . - .. .. 1,50 Cegesoft PS6 Vegetable Oil 1,00 Vitamine E Tocopherol 0,30 Phenonip Phenoxyethanol (and) Methylparaben (and) 0,70 Ethylparaben (and) Butylparahen (and) Propylparaben (and) Isobutylparaben Phase B Eau déminéralisée Aqua qsp 100 Glycerine Glycerin 2,00 Carbopol EDT 2020 Acrylates/C10-30A1kyl Acrylate 0,15 Crosspolymer Keltrol BT Xanthan Gum 0,30 Phase C Sodium Hydroxide (sol.à Sodium Hydroxide 0,30 10%) Phase D Eau déminéralisée Aqua 5,00 Stay-C 50 Sodium Ascorbyl Phosphate 0,50 Phase E Butylene Glycol Butylene Glycol 2,00 Dekaben CP Chlorphenesin 0,20 Phase F GP4G Water (and) Artemia Extract 1,00 Principe actif selon l'exemple 1 5 -22- Préparer la phase A et chauffer à 75 C sous agitation. Préparer la phase B en dispersant le carbopol, puis la gomme xanthane sous agitation. Laisser reposer. Chauffer à 75 C. A température, émulsionner A dans B sous agitation rotor-stator. Neutraliser avec la phase C sous agitation rapide. Après refroidissement à 40 C, additionner la phase D, puis la phase E. Le refroidissement est poursuivi sous agitation légère et la phase F rajoutée. 4 ùShield Day Cream: Trade Names INCI Names% by mass Phase A Emulium Delta Cetyl alcohol (and) Glyceryl Stearate (and) 4.00 PEG-75 Stearate (and) Ceteth-20 (and) Steareth-20 Lanette O Cetearyl Alcohol 1 , 50 2915379 -21- DC 200 Fluid / 100cms Dimethicone 1.00 :: 1 • • • • • 1.00 • • 3.00 '. - .. .. 1,50 Cegesoft PS6 Vegetable Oil 1,00 Vitamin E Tocopherol 0,30 Phenonip Phenoxyethanol (and) Methylparaben (and) 0,70 Ethylparaben (and) Butylparahen (and) Propylparaben (and) Isobutylparaben Phase B Demineralized water Aqua qs 100 Glycerin Glycerin 2.00 Carbopol EDT 2020 Acrylates / C10-30A1kyl Acrylate 0.15 Crosspolymer Keltrol BT Xanthan Gum 0.30 Phase C Sodium Hydroxide (Sodium Hydroxide Sodium 0.30 10%) Phase D Demineralized Aqua 5 , 00 Stay-C 50 Sodium Ascorbyl Phosphate 0.50 Phase E Butylene Glycol Butylene Glycol 2.00 Dekaben CP Chlorphenesin 0.20 Phase F GP4G Water (and) Artemia Extract 1.00 Active ingredient according to Example 1 5 -22- Prepare phase A and heat to 75 C with stirring. Prepare phase B by dispersing the carbopol, then the xanthan gum with stirring. Let rest. Heat to 75 C. At temperature, emulsify A in B with rotor-stator stirring. Neutralize with phase C with rapid stirring. After cooling to 40 ° C., add phase D and then phase E. Cooling is continued with gentle stirring and phase F added.

Claims

Use of an effective amount of at least one active principle, derived from the hydrolysis of rice (Oryza sativa L.), in a cosmetic composition or for the preparation of a pharmaceutical composition, characterized in that the principle active, or the composition containing it, is intended to activate aconitase and protect mitochondria.

2. Use according to claim 1, characterized in that the active principle is of peptide nature and comes from the hydrolysis of rice proteins (Oum sativa L.).

3. Use according to any one of the preceding claims, characterized in that the active ingredient contains at least 0.1 and 5 g / 1, and preferably at least 0.5 to 2 g / 1 of peptide-like compounds. .

4. Use according to any one of the preceding claims, characterized in that the active ingredient is used in an amount representing from 0.0001% to 20% of the total weight of the composition, and preferably in an amount representing 0.05 % to 5% of the total weight of the composition. 20

5. Use according to any one of the preceding claims, characterized in that the active ingredient is first solubilized in one or more cosmetically or pharmaceutically acceptable solvents, such as water, glycerol, ethanol, propylene glycol, butylene glycol, dipropylene glycol, ethoxylated or propoxylated diglycols, cyclic polyols, petrolatum, a vegetable oil or any mixture of these solvents.

6. Use according to any one of the preceding claims, characterized in that the composition is in a form suitable for topical application comprising a cosmetically or dermatologically acceptable medium.

7. Use according to any one of the preceding claims, characterized in that the composition additionally contains at least one antioxidant active principle and / or at least one active principle stimulating the synthesis of the extracellular matrix, and / or at least one active principle stimulating the energetic cellular metabolism.

8. Use of an effective amount of active ingredient, as defined in any one of claims 1 to 3, in a cosmetic composition or for the preparation of a pharmaceutical composition for protecting the skin and integuments against all types of external aggression.

9. Use of an effective amount of active ingredient, as defined in any one of claims 1 to 3, in a cosmetic composition or for the preparation of a pharmaceutical composition for protecting mitochondria.

10. Use of an effective amount of active ingredient, as defined in any one of claims 1 to 3, in a cosmetic composition or for the preparation of a pharmaceutical composition for preventing or treating damage to the skin. the skin and to the integuments by UV radiation.

11. Use of an effective amount of an active ingredient as defined in any one of claims 1 to 3 in a cosmetic composition or for the preparation of a pharmaceutical composition for preventing or treating damage to the skin. skin and skin appendages by free radicals.

12. Use of an effective amount of active ingredient, as defined in any one of claims 1 to 3, in a cosmetic composition or for the preparation of a pharmaceutical composition for preventing or treating cutaneous signs of the skin. aging and / or photo-aging.

13. Use of an effective amount of active ingredient, as defined in any one of claims 1 to 3, for preparing pharmaceutical compositions for preventing or combating mitochondrial dysfunction.

14. A cosmetic treatment method for stimulating defenses and protecting the skin and integuments of external aggressions, characterized in that it is applied topically on the skin or integuments to treat a composition as defined according to any one of claims 1 to 7.5