FR2879452A1 - Utilisation d'un extrait de bacterie filamenteuse non photosynthetique non fructifiante en tant qu'agent modulant l'adhesion de microorganismes cutanes - Google Patents

Abstract

La présente invention se rapporte à l'utilisation d'au moins un extrait de bactéries filamenteuses non fructifiantes non photosynthétiques comme agent modulant, de préférence, inhibant l'adhésion et/ou la prolifération sur la peau, le cuir chevelu et/ou les muqueuses de microorganismes cutanés.En particulier, l'utilisation de cet extrait permet de normaliser la flore microbienne de la peau, du cuir chevelu et/ou des muqueuses.L'invention se rapporte également à l'utilisation d'au moins un extrait de bactéries filamenteuses non fructifiantes non photosynthétiques en tant qu'agent stimulant la synthèse de défensines et pour la préparation de compositions destinées au traitement de désordres provoqués par la prolifération sur la peau, le cuir chevelu et/ou les muqueuses de microorganismes pathogènes cutanés.

Description

La présente invention se rapporte à l'utilisation d'au moins un extrait de

bactéries filamenteuses non fructifiantes non photosynthétiques comme agent modulant, de préférence, inhibant l'adhésion et/ou la prolifération sur la peau, le cuir chevelu et/ou les muqueuses de microorganismes cutanés.

En particulier, l'utilisation de cet extrait permet de normaliser la flore microbienne de la peau, du cuir chevelu et/ou des muqueuses.

L'invention se rapporte également à l'utilisation d'au moins un extrait de bactéries filamenteuses non fructifiantes non photosynthétiques en tant qu'agent stimulant la synthèse de défensines et pour la préparation de compositions destinées au traitement de désordres provoqués par la prolifération sur la peau, le cuir chevelu et/ou les muqueuses de microorganismes pathogènes cutanés.

La peau humaine est constituée de deux compartiments à savoir un compartiment superficiel, l'épiderme et un compartiment profond, le derme.

L'épiderme est composé principalement de trois types de cellules qui sont les kératinocytes (majoritaires), les mélanocytes et les cellules de Langerhans. Chacun de ces types cellulaires contribue par ses fonctions propres au rôle essentiel joué dans l'organisme par la peau, notamment le rôle de protection de l'organisme des agressions extérieures Le derme fournit à l'épiderme un support solide. C'est également son élément nourricier. II est principalement constitué de fibroblastes et d'une matrice extracellulaire composée elle-même principalement de collagène, d'élastine et d'une substance fondamentale. On y trouve aussi des leucocytes, des mastocytes et des macrophages tissulaires. Enfin, Le derme est traversé par des vaisseaux sanguins et des fibres nerveuses.

La peau constitue une barrière contre les agressions extérieures, notamment: chimiques, mécaniques et infectieuses, et à ce titre un certain nombre de réactions de défense contre les facteurs environnementaux (climat, rayons ultraviolets, tabac, pollutions, infections...) et/ou les xénobiotiques (comme par exemple certains médicaments) se produisent à son niveau.

La flore microbienne saprophyte ou écoflore cutanée représente un facteur majeur de protection immunitaire de la peau.

Tout déséquilibre dans la population de cette flore entraîne un déficit immunitaire fonctionnel et, bien souvent, l'occupation du territoire cutané par une flore pathogène.

La flore cutanée est estimée à 106 cellules/cm (Leyden JJ et coll., Soc Inves Dermatol 88: 65-69, 1987), et est principalement constituée par des corynebactéries (Corynebacterium, Brevibacterium et Propionibacterium) et des staphylocoques. Acinetobacteret des Micrococcus sont aussi retrouvés mais à un moindre degré, avec la flore fongique comprenant principalement le genre Malassezia (Noble WC, Micobiol Human Skin, London, ed Saunders Company Ltd, 1974; Leeming JP et coll., J Clin Microbiol 25: 2017-2019, 1987; Leeming JP et coll., J Applied Bacteriol 67: 47-52, 1989; Rudolf R et coll., J Am Acad Dermatol 1989).

Lorsque cette barrière écologique de microorganismes est défaillante (tel dans les eczémas atopiques), réduite (chez les nourrissons), voire détruite (comme après l'utilisation abusive de produits agressifs pour la peau), tout microorganisme indésirable est alors capable de proliférer sur la peau ou même de la traverser déclenchant ainsi des mécanismes de défenses non spécifiques.

La présence de l'écoflore permet donc d'assurer à la peau une ligne de défense écologique, en s'opposant à l'implantation de microorganismes pathogènes par un phénomène de compétition nutritionnelle et par la sécrétion de substances aux activités enzymatiques et bactéricides.

Il a récemment été montré que les microorganismes pathogènes expriment des récepteurs qui reconnaissent différentes protéines humaines extracellulaires. Ces récepteurs sont appelés composés de la surface microbienne reconnaissant des molécules de la matrice extracellulaire ou adhésines (Patti JM et coll. Annu Rev Microbiol 1994: 48: 585-617). Ces protéines à la surface des membranes des microbes se fixent spécifiquement sur des protéines de la matrice extracellulaire tels que la fibronectine, le collagène, mais aussi certaines protéines plasmatiques telles que le fibrinogène qui peuvent exsuder au niveau de certains sites inflammatoires (Forster TJ et coll. Trends Microbiol 1998: 6:484-488; Tompkins et coll. J Clin Invest 1990: 85:1248-1254).

Pour certains microorganismes pathogènes, la nature de l'adhésion a été mieux étudiée (Roll A, et coll. Curr Opin Allergy Clin Immunol 2004; 4: 373-378). II est connu que le S. aureus stimule l'hydrolyse des céramides du stratum corneum (Kita K et coll. Biochem J 2002; 362: 619- 626). De plus, les membranes cellulaires des S. aureus contiennent des adhésines pour la laminine et la fibronectine mises à nu au niveau de certaines lésions cutanées (Cho SH et colt, J Invest Dermatol 2001: 116: 658-663 et J Allergy Clin Immunol 2001: 108: 269-274; Akiyama H et coll, Br J Dermatol 2003; 148: 526-532). Par ailleurs, le phénomène d'adhésion peut également avoir une composante liée à des interactions physicochimiques (forces acido-basiques et des forces électrostatiques de Van der Walls) éventuellement combinées à des phénomènes mécaniques (dus à la rugosité des substrats) (Asther et coll. Biotech Bioengineering 1990: 35: 477-482; Boulangé-Petermann L et coll. J Adhesion Sci Technol 1993: 7: 221-230; Briandet R et coll. J Food Protection 1999: 62: 994-998) .

La prolifération de pathogènes tels que Staphylococcus aureus, Streptopyogenes ou Propionibacterium acnes, ou de certaines levures, peuvent entraîner une dysrégulation du système cutané voire des désordres plus graves au niveau de la peau, du cuir l0 chevelu et/ou des muqueuses tels qu'éczema, candidoses, dermites.

Cette multiplication peut être renforcée par la diminution conjointe de production des défensines, protéines de défense spécifiques contre les infections qui résident dans la peau et les muqueuses. Ces défensines ont des peptides antimicrobiens actifs sur les bactéries, les champignons et les virus (Harder J et coll., Nature 387: 861, 1997; Frohm M et coll., J Biol Chem 272: 15258-15263, 1997; Gropp R et coll., Hum Gene Ther 10: 957-964, 1999). Ces peptides sont produits par les kératinocytes de la peau et certaines cellules des muqueuses, elles peuvent détruirent la membrane des microbes cibles et/ou pénétrer leur membrane, interférant alors avec les fonctions intracellulaires du microorganismes pathogènes. La (3-defensine 2 et la cathelicidine (LL-37) sont des défensines inductibles au niveau de la peau et leur augmentation est entraînée lors des inflammations ou des stress cutanés (Harder J et coll., Nature 387: 861, 1997; Frohm M et coll., J Biol Chem 272: 15258- 15263, 1997).

On connaît de nombreux moyens de traitement contre ces microbes pathogènes. Les 25 antibiotiques ou antibactériens chimiques sont les plus classiquement utilisés. Ce sont par exemple des compositions à base d'aldéhydes et dérivés.

Par exemple, la demande de brevet FR 2 740 039 décrit l'utilisation d'une substance choisie parmi les aldéhydes et les composés bi-fonctionnels, de préférence le glutaraldhéhyde, pour inhiber la fixation sur les kératinocytes et cornéocytes de souches de pathogènes tels que le Staphylococcus aureus.

L'hexachlorophène et ses dérivés, sont connus comme substances antibactériennes, en particulier contre Propionibacterium acnes.

Ces traitements présentent néanmoins des effets secondaires indésirables tels que dessèchement de la peau, irritations, lésions érosives, eczéma de contact allergique, photosensibilisation. De plus, ils sont nocifs pour l'environnement et contribuent à la résistance des microorganismes pathogènes.

L'invention se propose de trouver un nouvel agent capable de contrôler et réguler l'écosystème cutané sans être préjudiciable pour la santé et l'environnement.

La Demanderesse a maintenant identifié une nouvelle propriété d'un extrait de bactérie filamenteuse non photosynthétique non fructifiante qui est capable de moduler l'adhésion et la croissance de microorganismes cutanés.

Un premier objet de la présente invention se rapporte à l'utilisation d'au moins un extrait de bactérie filamenteuse non photosynthétique non fructifiante en tant qu'agent modulant l'adhésion sur la peau, le cuir chevelu et/ou les muqueuses de microorganismes cutanés.

Les extraits bactériens utilisables dans cette invention seront choisis parmi les bactéries filamenteuses non photosynthétiques et non fructifiantes telles que définies selon la classification du Bergey's Manual of Systemic Bacteriology, volume 3, section 23, Sème édition 1989.

Parmi les bactéries utilisables, on citera plus particulièrement les bactéries appartenant à l'ordre des Beggiatoales, et notamment les bactéries appartenant au genre Beggiotoa, telles que par exemple diverses souches de Beggiotoa alba suivant la définition de B. alba correspond aux anciennes appellations Beggiotoa arachnoidea, B. gigantea, B. leptomiformis, B. minima, B. mirabilis du Bergey's manual, Sème édition. On peut citer par ailleurs les bactéries appartenant au genre Vitreoscilla, dont on sait qu'il est proche et souvent difficilement discernable du genre Beggiatoa. Les bactéries qui viennent d'être définies, et dont plusieurs ont été décrites, ont généralement un habitat aquatique, et peuvent être trouvées notamment dans les sources d'eau thermale.

Parmi les bactéries utilisables, on peut citer par exemple, Vitreoscilla beggiatoïdes (ATCC 43181) et Beggiatoa alba (ATCC33555).

Et préférentiellement selon l'invention, l'utilisation de l'extrait de Vitreoscilla filiformis, en particulier, la souche ATCC 15551, ses métabolites et ses fractions sont revendiquées.

D'autre part, il est connu que la culture des bactéries filamenteuses non photosynthétiques et non fructifiantes est relativement difficile, de même que l'obtention de cultures pures. On utilisera préférentiellement la culture décrite dans la demande de Par extrait de bactéries filamenteuses non photosynthétiques et non fructifiantes, on entend aussi bien le surnageant de culture, la biomasse obtenue après culture des dites bactéries, les enveloppes ou fractions d'enveloppes, ou les extraits de la biomasse obtenus par traitement de cette biomasse.

Pour préparer l'extrait selon l'invention, on peut cultiver lesdites bactéries puis les séparer de la biomasse obtenue par exemple par filtration, centrifugation, coagulation et/ou lyophilisation.

On peut notamment préparer les extraits utilisables selon le procédé décrit dans la demande de brevet WO-A-93/00741. Ainsi, après culture, les bactéries sont concentrées par centrifugation. La biomasse obtenue est autoclavée. Cette biomasse peut-être lyophilisée pour constituer ce que l'on appelle l'extrait lyophilisé. Toute méthode de lyophilisation connue de l'homme du métier est utilisable pour préparer cet extrait. La fraction surnageante de cette biomasse peut également être filtrée dans un récipient stérile pour éliminer les particules en suspension.

On appelle ici enveloppes ou fractions d'enveloppes, la paroi bactérienne et éventuellement les membranes sous jacentes.

L'extrait bactérien peut-être utilisé sous forme de poudre lyophilisée de 0,001%,à 5% et de préférence de 0,05% à 3% dans des compositions liquides et jusqu'à 10% dans des compositions pulvérulentes.

Par microorganisme cutané, on entend tout microorganisme, qu'il s'agisse d'une bactérie ou d'une levure, présent sur la peau, le cuir chevelu et/ou les muqueuses. Le terme cutané revêt ici un sens large puisqu'il peut se rapporter aussi bien à la peau de toute la surface du corps, qu'elle soit ou non recouverte de poils, au cuir chevelu et aux muqueuses, notamment, buccale et vaginale.

Certains microorganismes peuvent rompre l'équilibre de la flore cutanée, on parle alors de microorganisme pathogène cutané. Il s'agit d'un microorganisme qui, même s'il peut être présent sur la peau sans créer de désordre, présente un caractère pathogène, 3o c'est-à-dire qu'il peut, dans des conditions particulières, proliférer anormalement et créer des désordres cutanés chez l'hôte qu'il colonise.

Préférentiellement, l'invention se rapporte à l'utilisation d'au moins un extrait de bactérie filamenteuse non photosynthétique non fructifiante en tant qu'agent diminuant l'adhésion sur la peau, le cuir chevelu et/ou les muqueuses de microorganismes cutanés, en particulier, des microorganismes pathogènes cutanés.

A titre d'exemple de microorganismes pathogènes cutanés, on peut citer les bactéries pathogènes telles que Staphylococcus aureus, Streptococcus pyogenes, Pseudomonas aeruginosa, Escherichia coli, Clostridium pefringens, Clostridium difficile, Gardnerella vaginalis, Propionibacterium acnes, Aspergillus species, Klebsiella species, Pityrosporum ovale, Streptopyogenes ou les champignons pathogènes tels que Candida albicans, Trichophyton mentagrophytes, Trichophyton interdigitale, Trichophyton rubrum, Trichophyton yaoundei, Tinea capitis, Tinea corporis, Pityriasis versicolor.

l0 L'objet de la présente invention se rapporte également à l'utilisation d'au moins un extrait de bactérie filamenteuse non photosynthétique non fructifiante en tant qu'agent inhibant la prolifération sur la peau, le cuir chevelu et/ou les muqueuses de microorganismes cutanés, en particulier des microorganismes pathogènes.

Selon un autre aspect, la présente invention peut encore se rapporter à l'utilisation d'au moins un extrait de bactérie filamenteuse non photosynthétique non fructifiante en tant qu'agent normalisant la flore cutanée.

Par normaliser la flore cutanée, on entend maintenir ou restaurer un profil normal de population de microorganismes cutanés sur la peau, le cuir chevelu et/ou les muqueuses, c'est-à-dire une population de microorganismes correspondant à celle présente sur une peau saine, un cuir chevelu sain ou une muqueuse saine.

En particulier, l'utilisation selon l'invention pourra être destinée: - à prévenir et/ou limiter les états pelliculaires ou séborrhéiques. A titre d'exemple, l'extrait selon l'invention pourra alors être formulé dans une composition telle qu'un shampooing, une lotion ou un tonique capillaire, un masque à laisser poser sur le cuir chevelu.

- à la préparation de composition destinée à l'hygiène buccale. A titre d'exemple, l'extrait selon l'invention pourra alors être formulé dans une composition telle qu'une pâte dentifrice, une pâte à mâcher, une solution buccale de rinçage de la bouche.

- à prévenir et/ou limiter la prolifération de microorganismes pathogènes cutanés qui entretiennent le phénomène de peaux et/ou de cuir chevelu gras. A titre d'exemple, l'extrait selon l'invention pourra alors être formulé dans des crèmes de soin telles que des crèmes astringentes pour peaux grasses, des compositions nettoyantes pour le corps, le visage, les cheveux, telles que des shampooings anti-séborrhéiques.

- à la préparation de composition destinée à l'hygiène corporelle, en particulier intime, ou capillaire. A titre d'exemple, l'extrait selon l'invention pourra alors être formulé dans des compositions nettoyantes pour la toilette intime ou pour le corps, le visage, les cheveux tels que des savons, gels douches, gels intimes, gels nettoyant visage, dans des produits de soin tels que des gels antibactériens après rasage, lait pour le visage ou le corps.

- à prévenir et/ou limiter les mauvaises odeurs liées à la prolifération de microorganismes cutanés dans les zones confinées du corps comme par exemple, la zone axillaire ou les pieds. Pour ce type d'application, l'extrait selon l'invention pourra alors être formulé dans des compositions déodorantes.

Selon un autre de ses aspects, la présente invention se rapporte à l'utilisation d'au moins un extrait de bactérie filamenteuse non photosynthétique non fructifiante en tant qu'agent stimulant la synthèse de défensines dans la peau, le cuir chevelu et/ou les muqueuses.

La présente invention se rapporte aussi à l'utilisation d'au moins un extrait de bactérie filamenteuse non photosynthétique non fructifiante pour la préparation d'une composition comprenant un milieu physiologiquement acceptable, caractérisée en ce que la composition est destinée au traitement des désordres provoqués par la prolifération sur la peau, le cuir chevelu et/ou les muqueuses de microorganismes pathogènes cutanés.

En particulier, la composition selon l'invention sera destinée à traiter les désordres liés au développement sur la peau, le cuir chevelu et/ou les muqueuses de Staphylococcus aureus, Streptococcus pyogenes, Pseudomonas aeruginosa, Escherichia coli, Clostridium pefringens, Clostridium difficile, Gardnerella vaginalis, Propionibacterium acnes, Aspergillus species, Klebsiella species, Pityrosporum ovale, Streptopyogenes, Candida albicans, Trichophyton mentagrophytes, Trichophyton interdigitale, Trichophyton rubrum, Trichophyton yaoundei, Tinea capitis, Tinea corporis, Pityriasis versicolor.

Plus particulièrement, la composition sera destinée au traitement: - des complications infectieuses de désordres dermatologiques telles que dermatites 35 atopiques surinfectées, eczéma impétiginisé, acné inflammatoire surinfecté, herpes surinfecté ; - des complications infectieuses pendant la cicatrisation telles que les ulcères, plaies, brûlures; - des dermatophytoses telles que la teigne du cuir chevelu, la teigne du corps, pied d'athlète, eczéma marginé de Hebra, herpès circiné ; - des candidoses telles que les candidoses des muqueuses, en particulier vaginales, interdigitales, liées à des professions à risques ou au diabète; - des vaginoses; - des onychomycoses; - des désordres cutanés liés à des thérapeutiques avec des antibiotiques ou des antimycosiques ou entraînés par des dysrégulations hormonales; - des polydermites telles que l'impétigo, les folliculites superficielles; - des érysipèles; - des dermites séborrhéiques.

Dans un mode de réalisation particulier, la composition selon l'invention sera destinée à un usage vétérinaire pour le traitement et/ou la prévention des désordres liés à des infections staphylococciques (à S. aureus; S. intermedians), streptococciques (à S. pyogenes) et mycosiques (candidoses à C. albicans et pityrosporoses à P. canis).

L'objet de l'invention se rapporte enfin à un procédé de traitement cosmétique des états pelliculaires du cuir chevelu et des peaux et/ou des cuirs chevelus gras dont le caractère gras est entretenu par le développement de microorganismes pathogènes cutanés, comprenant l'application, respectivement, sur le cuir chevelu ou sur la peau et/ou le cuir chevelu, d'une composition renfermant dans un milieu physiologiquement acceptable au moins un extrait de bactérie filamenteuse non photosynthétique non fructifiante.

Les compositions utilisées selon l'invention peuvent se présenter sous toutes les formes envisageables dans le domaine cosmétique et pharmaceutique, en particulier, dermatologique.

Pour toutes les utilisations selon la présente invention, l'extrait de bactérie filamenteuse non photosynthétique non fructifiante sera de préférence appliqué topiquement sur la peau, le cuir chevelu et/ou les muqueuses.

Dans le cas particulier de l'utilisation d'un extrait de bactérie filamenteuse non photosynthétique non fructifiante dans une composition appliquée sur les ongles et leur contours pour le traitement d'onychomycose, la composition pourra par exemple se présenter sous la forme d'un vernis ou d'un gel ou d'une crème de massage pour les ongles et leur contour.

Ces compositions selon l'invention peuvent contenir l'extrait de bactérie filamenteuse non fructifiante, non photosynthétique sous forme de dispersion dans un véhicule approprié tel que, par exemple, l'eau, les solvants organiques, les corps gras y compris les huiles, et leurs mélanges, notamment des émulsions.

Pour l'application par voie topique, on préfère des compositions ayant une forme adaptée à l'application sur la peau, le cuir chevelu et/ou des muqueuses.

Ces compositions par voie topique peuvent se présenter sous toutes les formes galéniques normalement utilisées pour ce type d'application soit sous forme anhydre, soit sous forme aqueuse selon l'indication retenue, ou encore sous forme d'une solution aqueuse ou huileuse, d'une émulsion huile-dans-eau ou eau-dans-huile ou multiple, d'une émulsion siliconée, d'une microémulsion ou nanoémulsion, d'un gel aqueux ou huileux ou d'un produit anhydre liquide, pâteux ou solide.

Cette composition peut être plus ou moins fluide et avoir l'aspect de crème blanche ou colorée, d'une pommade, de lait, de lotion, de sérum, de pâte, de mousse, de gel, d'onguent, de poudres, de tampons imbibés, de solutions, de sprays, ou de suspensions. Elle peut également se présenter sous forme de microsphères ou nanosphères ou de vésicules lipidiques ou polymériques ou de patchs polymériques et d'hydrogels permettant une libération contrôlée. Elle peut éventuellement être appliquée sur la peau sous forme d'aérosol.

Elle peut également se présenter sous forme solide, et par exemple sous forme de stick. Elle peut être utilisée comme produit de soin et/ou comme produit de maquillage de la 30 peau.

II peut même s'agir, dans les applications assimilées à la balnéothérapie, d'un extrait brut.

Dans les compositions selon l'invention, l'extrait de bactérie filamenteuse non fructifiante, non photosynthétique peut être combiné avec des rétinoïdes ou des corticostéroïdes, ou associé avec des anti- radicaux libres, avec des alpha-hydroxy ou alpha-céto acides ou leurs dérivés, ou encore des bloqueurs de canaux ioniques.

Les compositions selon l'invention peuvent, en outre, contenir des additifs inertes ou même pharmacodynamiquement ou cosmétiquement actifs ou des combinaisons des ces additifs et notamment: des agents mouillants, des agents dépigmentant tels que l'hydroquinone, l'acide azelaïque, l'acide caféïque ou l'acide kojique; des émollients; des agents hydratants comme le glycérol, le PEG-400, l'urée; des agents antiséborrhéiques ou antiacnéiques, tels que la S-carboxyméthylcystéine, la S-benzylcystéamine, leurs sels et leurs dérivés, ou le peroxyle de benzoyle; des antibiotiques comme l'érythromycine et ses esters, la néomycine, la clindamycine et ses esters, les tétracyclines; des agents antifongiques tels que le kétoconazole ou les polyméthylène-4,5 isothiazolinones-3; des agents favorisant la repousse des cheveux, comme le Minoxidil (2,4-diamino-6-pipéridino-pyrimidine-3-oxyde) et ses dérivés, le Diazoxide (7- chloro 3-methyl 1,2,4-benzothiadiazine 1,1-dioxyde) et le Phénytoïne (5,4-diphénylimidazoline 2,4-dione) ; des agents anti- inflammatoires non stéroïdiens, des carotenoïdes et, notamment le f3 carotène; des agents anti-psoriasiques tels que l'anthraline et ses dérivés et enfin, les eicosa-5,8,11,14-tétraénoïque et eicosa-5,8,11- trynoïque, leurs esters et les amides.

La composition selon l'invention peut également contenir des agents conservateurs, tels que des esters de l'acide parahydroxybenzoïque, des agents stabilisants, des agents régulateur d'humidité, des agents émulsionnants, des filtres UVA et UVB, des antioxydants, tels que l'alphatocophérol, le butylhydroxyanisole ou le butylhydroxytoluène.

De façon connue, la composition de l'invention peut contenir également les adjuvants habituels dans les domaines cosmétique et dermatologique, tels que les gélifiants hydrophiles ou lipophiles, les conservateurs, les antioxydants, les solvants, les parfums, les charges, les pigments, les absorbeurs d'odeur et les matières colorantes. Les quantités de ces différents adjuvants sont celles classiquement utilisées dans les domaines considérés, et par exemple de 0,01 à 20 % du poids total de la composition. Ces adjuvants, selon leur nature, peuvent être introduits dans la phase grasse ou dans la phase aqueuse. Ces adjuvants, ainsi que leurs concentrations, doivent être tels qu'ils ne nuisent pas aux propriétés avantageuses de l'extrait de bactérie filamenteuse non photosynthétique non fructifiante.

Comme huiles utilisables dans la composition de l'invention, on peut citer par exemple: - les huiles hydrocarbonées d'origine animale, telles que le perhydrosqualène; - les huiles hydrocarbonées d'origine végétale, telles que les triglycérides liquides d'acides gras comportant de 4 à 10 atomes de carbone et la fraction liquide du beurre de karité ; - les esters et les éthers de synthèse, notamment d'acides gras, comme les huiles de formules R'COOR2 et R'OR2 dans laquelle R' représente le reste d'un acide gras comportant de 8 à 29 atomes de carbone, et R2 représente une chaîne hydrocarbonée, ramifiée ou non, contenant de 3 à 30 atomes de carbone, comme par exemple l'huile de Purcellin, l'isononanoate d'isononyle, le myristate d'isopropyle, le palmitate d'éthyl-2- hexyle, le stéarate d'octyl-2-dodécyle, l'érucate d'octyl-2-dodécyle, l'isostéarate d'isostéaryle; les esters hydroxylés comme l'isostéaryl lactate, l'octylhydroxystéarate, l'hydroxystéarate d'octyldodécyle, le diisostéaryl-malate, le citrate de triisocétyle, les heptanoates, octanoates, décanoates d'alcools gras; les esters de polyol, comme le dioctanoate de propylène glycol, le diheptanoate de néopentylglycol et le diisononanoate de diéthylèneglycol; et les esters du pentaérythritol comme le tétraisostéarate de pentaérythrityle; - les hydrocarbures linéaires ou ramifiés, d'origine minérale ou synthétique, tels que les huiles de paraffine, volatiles ou non, et leurs dérivés, la vaseline, les polydécènes, le polyisobutène hydrogéné tel que l'huile de parléam; - les alcools gras ayant de 8 à 26 atomes de carbone, comme l'alcool cétylique, l'alcool stéarylique et leur mélange (alcool cétylstéarylique), l'octyldodécanol, le 2-butyloctanol, le 2-hexyldécanol, le 2undécylpentadécanol, l'alcool oléique ou l'alcool linoléique; - les huiles fluorées partiellement hydrocarbonées et/ou siliconées comme celles décrites dans le document JP-A-2-295912; - les huiles de silicone comme les polyméthylsiloxanes (PDMS) volatiles ou non à chaîne siliconée linéaire ou cyclique, liquides ou pâteux à température ambiante, notamment les cyclopolydiméthylsiloxanes (cyclométhicones) telles que la cyclohexasiloxane; les polydiméthylsiloxanes comportant des groupements alkyle, alcoxy ou phényle, pendant ou en bout de chaîne siliconée, groupements ayant de 2 à 24 atomes de carbone; les silicones phénylées comme les phényltriméthicones, les phényldiméthicones, les phényltriméthylsiloxydiphényl-siloxanes, les diphényl-diméthicones, les diphénylméthyldiphényl trisiloxanes, les 2-phényléthyltriméthylsiloxysilicates, et les polyméthylphénylsiloxanes; - leurs mélanges.

Comme émulsionnants et coémulsionnants utilisables dans l'invention, on peut citer par exemple les émulsionnants H/E tels que les esters d'acide gras et de polyéthylène glycol, notamment le stéarate de PEG-100, et les esters d'acide gras et de glycérine tels que le stéarate de glycéryle, ainsi que les émulsionnants E/H tels que le poly(méthylcétyl)(diméthyl)méthylsiloxane oxyéthyléné disponible sous la dénomination commerciale ABIL WE09 auprès de la société Degussa Goldschmidt ou le mélange de stéarate d'éthylène glycol acétyle et de tristéarate de glycéryle commercialisé par la société Guardian sous la dénomination commerciale UNITWIX.

Comme gélifiants hydrophiles, on peut citer en particulier les polymèrescarboxyvinyliques (carbomer), les copolymères acryliques tels que les copolymères d'acrylates/alkylacrylates, les polyacrylamides, les polysaccharides, les gommes naturelles et les argiles, et, comme gélifiants lipophiles, on peut citer les argiles modifiées comme les bentones, les sels métalliques d'acides gras, la silice hydrophobe et les polyéthylènes.

Comme charges qui peuvent être utilisées dans la composition de l'invention, on peut citer par exemple, outre les pigments, la poudre de silice; le talc; l'amidon réticulé par l'anhydride octénylsuccinique commercialisé par la société National Starch sous la dénomination DRY FLO PLUS (28-1160) ; les particules de polyamide et notamment celles vendues sous la dénomination ORGASOL par la société Atochem; les poudres de polyéthylène; les micro-sphères à base de copolymères acryliques, telles que celles en copolymère diméthacrylate d'éthylène glycol/ methacrylate de lauryle vendues par la société Dow Corning sous la dénomination de POLYTRAP; les poudres expansées telles que les microsphères creuses et notamment, les microsphères commercialisées sous la dénomination EXPANCEL par la société Kemanord Plast ou sous la dénomination MICROPEARL F 80 ED par la société Matsumoto; les microbilles de résine de silicone telles que celles commercialisées sous la dénomination TOSPEARL par la société Toshiba Silicone; et leurs mélanges. Ces charges peuvent être présentes dans des quantités allant de 0 à 20 % en poids et de préférence de 1 à 10 % en poids par rapport au poids total de la composition ou de la préparation selon l'invention.

Exemple 1: Adhésion de l'extrait de Vitreoscilla filiformis.

Dans le cadre de la présente invention, l'adhésion d'un extrait de Vitreoscilla filiformis à des cellules de peau a été étudiée, ces cellules de peau sont notamment une lignée de kératinocytes, SV40 T-Ag: la lignée de cellules DK7 (telle que décrits dans la demande de brevet WO99/02347).

1- Préparation des kératinocytes Ces cellules sont mises en culture à raison de 5x105 cellules/cm2, ensemencées dans des boites de 6 puits côtés (Becton Dickinson, Lincoln Park, NJ) avec un milieu de culture DK7-NR (Biofluids, Rockville, MD). La solution de coting est constituée de milieu basal supplémenté avec 10 g/ml de fibronectine humaine (Becton Dickinson), 31 gg/ml de collagène bovin I (Vitrogen, Collagen Corporation, Fremont CA) et 0,1 mg/ml de BSA (Biofluids, Rockville, MD).

Après 6 jours, les cultures de cellules forment une monocouche confluente.

Le milieu de culture est ensuite remplacé par du milieu de culture à concentration en calcium plus importante pendant 4 jours (à 1,5mM en Ca2+) afin d'induire la différenciation cellulaire.

Pour les tests d'adhésion, les cultures de cellules sont lavées 3 fois avec du tampon HBSS avec calcium (1,0 mM).

Il- Préparation de l'extrait de Vitreoscilla filiformis a- Radiomarquage Les souches de bactéries sont marquées pendant une nuit par addition de 100 11Ci/10 ml de 2-3H-adénine (Amersham) dans le milieu de culture.

Des fractions (la biomasse, le surnageant et la fraction lipopolysaccharidique) d'extrait bactérien sont incubées dans un milieu sans 3H-adénine. Le surnageant non marqué est mis de côté et servira lors de l'essai d'adhésion.

b- préparation de l'extrait Les extraits de bactéries de Vitreoscilla filiformis sont centrifugés pendant 10 minutes à 4000 trs/min. Avant l'ajustement de la densité optique (DO), les culots sont lavés 2 fois dans du HBSS. La DO est mesurée afin d'ajuster la concentration en extrait bactérien.

III- Essai d'adhésion Le milieu pour les essais d'adhésion est un mélange 1:1 de milieu de culture des SV40-DK7, et du surnageant non marqué.

Pour analyser les propriétés d'adhésion des extraits bactériens sur un substrat sans SV40-DK7, les suspensions d'extraits bactériens sont incubées sur des plaques de 35 plastiques et des plaques de plastiques cotés sans cellules.

Après lavage des cultures 3 fois avec de l'HBSS avec calcium (1 mM) , les extraits bactériens associés aux kératinocytes sont lysés dans une solution de NaOH 1 N pendant 30 minutes à température ambiante. La solution est transférée dans des fioles à scintillation avec 1 ml d'hydroxyde de benzethonium (Sigma, St LOUIS, USA).

Après 1h à 60 C, l'activité 3H des fractions biomasse, surnageant et LPS marquées est mesurées par comptage à scintillation liquide (dpm) L'indice d'adhésion (IA) est calculé en activité 3H (dpm/puit) en pourcentage total de l'activité 3H (dpm/ml) de la suspension d'extrait de Vitreoscilla filiformis.

Io Ainsi, les résultats montrent un indice d'adhésion important pour l'extrait de Vitreoscilla filiformis.

Exemple 2: Tests in vitro de l'inhibition de l'adhésion de Staphylococcus aureus et Streptococcus pyoqenes par un extrait de Vitreoscilla filiformis Préparation des bactéries pathogènes Les pathogènes Staphylococcus aureus et Streptococcus pyogenes sont cultivés en bouillon par repiquage à partir d'une culture. Avec Staphyloccus aureus (ATCC6538) cultivés en milieu TCS (AES, Combourg, ref AEB 141502), en aérobiose à 35 C pendant 24h et Streptococcus pyogenes (CIP5641T) cultivés en milieu BHI (Unipath SA, Dardilly, ref CM225), en Aérobiose à 35 C pendant 24h.

Une correspondance DO/densité bactérienne a été établie pour chacun des germes testés, sur la base de dilutions sériées et de dénombrements sur milieu gélosé.

Préparation des kératinocytes On utilisent de kératinocytes humains immortalisés de la lignée HaCaT (Boukamp P et coll., J Cell,Biol 106:761-771, 1988).

Les cellules HaCaT sont cultivées en milieu DMEM supplémenté par 10% de sérum de voeu foetal, à 37 C sous CO2, 5%.

Des boîtes de 6 puits (Becton Dickinson) sont ensemencés à raison de 104 cellules/m2 et après 4 à 5 jours les cellules atteignent la confluence. Les monocouches sont alors lavées 3 fois au PBS avant ces essais.

Radiomarquaqe Les bactéries sont marquées à la 2-3H-adénine (Amersham), à raison de 100 Ci/10ml. Les suspensions sont lavées 3 fois puis resuspendues en PBS. La densité cellulaire est ajustée dans ce même tampon.

Essai d'adhésion sur kératinocytes en culture 1 ml de suspension bactérienne radiomarquée est incubée pendant 1h à 35 C avec les kératinocytes. La monocouche est lavée 3 fois par du tampon PBS et lysées par addition de NaOH 1 N pendant 30minutes à température ambiante. Le lysat est transféré en fiole à scintillation et incubé 1h à 60 C avec 1 ml d'hyamine hydroxide (Carlo Erba).

L'adhésion est définie par le rapport entre radioactivité adhérée et radioactivité introduite multiplié par 100.

Essai d'inhibition d'adhésion Après lavage et resuspension en PBS, le pathogène radiomarqué et la souche de 15 bactérie froide sont incubés simultanément avec la monocouche. Les essais sont effectués en triple pour des densités en agent bactérien couvrant 3 log.

Staphylococcus aureus et Streptococcus pyogenes ainsi que l'extrait de Vitreoscilla filiformis ont été testés pour leur adhésion aux kératinocytes HaCaT en culture.

Les résultats montrent que Staphylococcus aureus et Streptococcus pyogenes adhérent aux kératinocytes.

En présence de l'extrait de Vitreoscilla filiformis, l'agent bactérien (Staphyloccus aureus ou Streptococcus pyogenes) est déplacé, c'est-à-dire n'est plus retrouvé sur les kératinocytes en culture, et ceci d'autant plus que la densité en agent bactérien augmente sur les kératinocytes.

Exemple 3: Inhibition par une extrait de Vitreoscilla filiformis sur l'adhésion de Staphylococcus epidermidis.

La peau utilisée pour le test provient d'une plastie abdominale. Après élimination de l'hypoderme, la peau a été congelée à -80 C avant utilisation.

A la décongélation, le fragment de peau (14x9cm) a été dialysé dans 3 bains de PBS, à 4 C pendant 3h (élimination des antibiotiques présents dans le milieu de survie de la peau). Juste avant l'expérience, la peau a été posée à plat sur une plaque de verre, recouverte d'une plaque de 96 puits sans fond puis clampée avec 4 pinces de façon à délimiter 96 puits étanches. Pour éviter le dessèchement toute l'expérience a eu lieu avec la peau immergée dans un bain de PBS. La plaque utilisée estt une plaque Multiscreen (Millipore) débarrassée de la membrane constituant le fond du puits et saturée préalablement dans un tampon TRIS 50mM, pH 7,5 contenant 1% albumine bovine (Tris / BSA, l h, 4 C).

La souche utilisée est Staphylococcus epidermidis (ATCC12228). les bactéries ont été isolées sur LB-agar (Sigma L7025) puis cultivés à 37 C en LB (Sigma) jusqu'à mi-log phase (DO640=0,4) Les bactéries ont ensuite été fixées en éthanol 70%, lavées et biotinylées selon une w procédure standard, à l'aide d'un kit de biotinylation de protéines (Amersham). Les bactéries partiellement biotinylées purifiées ont été aliquotées et congelées à -80 C, avant l'utilisation.

50111 de suspension bactérienne diluée (dans du PBS) ont été distribuées sur les fragments de peau dans les puits étanches. L'adhésion a été réalisée en 2h, à 20 C. les puits ont été lavés 3 fois en PBS pour éliminer les bactéries non adhérentes, puis 100 ml de solution contenant l'extrait de Vitreoscilla filiformis (ou PBS) ont été distribués et incubés à nouveau 1h, à 20 C. L'extrait de Vitreoscilla filiformis et de Staphylococcus epidermidis libre ont ensuite été prélevés et les puits ont été lavés 3 fois en PBS.

Les bactéries restant adhérées ont été décrochées de la peau par 100 l de tampon chaotropique (guanidine 4M, EDTA 5mM, dans Tris/Hcl 50mM, PH 8,0) Afin de visualiser et quantifier les bactéries adhérentes, une fraction (20 l) de chaque échantillon de bactéries adhérentes a été transférée sur nitrocellulose (HYBOND ECL, Amersham), à l'aide d'une matrice slot blot (Milliblot, Millipore) permettant une quantification densitométrique ultérieure.

Les membranes ont ensuite été saturées pendant 1 nuit, à 4 C, en PBS/0,05% Tween 20 5PBST), contenant 1% de lait écrémé. Après lavages en PBST, les bactéries biotinylées ont été marquées par un conjugué streptavidine peroxydase (Amersham), pendant l h à 20 C. Après lavage extensif, les biotines immobilisées ont été révélées par chemiluminescence (enhanced chemiluminescence, ECL, Amersham), sur film Kodak MP.

L'adhésion des bactéries (Staphylococcus epidermidis) fixées est significative; l'amplitude du signal est correcte, le contrôle guanidine a conduit à une réduction de 35 95% du signal.

L'extrait de Vitreoscilla filiformis pourrait être testé à 0,5 mg/ml et 1 mg/ml.

Exemple 4: Activité développement microbien d'un extrait de Vitreoscilla filiformis Des tests d'inhibition de développement ont été utilisés: contre les levures pathogènes de la famille des Trichophyton et du Candida albicans - contre les bactéries Pseudomonas aeruginosa et Staphylocccus aureus.

Les souches ont été obtenues dans la collection de l'American Type Collection (ATCC, Rockville, Maryland) pour les levures et dans la collection de l'US Food and Drug Administration pour les bactéries.

Pour les espèces de Trichophyton pathogènes testés, il pouvaient s'agir des T. mentagrophytes (ATCC 4808, ATCC9533, ATCC 28187) et de T. interdigitale (ATCC 9129) entraînant la teigne des pied (ou pied d'athlète), de la T. mentagrophytes (ATCC 36107) entraînant la teigne versicolor, de la T. mentagrophytes (ATCC 8125) entraînant la teigne de la barbe ou de la T. rubrum (ATCC 18753) entraînant des dermatophytoses. Le Candida albicans testés (ATCC 26555) entraînant des candidoses de la peau et des muqueuses.

Dans ces essais, des boites de pétri contenant du milieu de culture potato-dextrose (DIFCO, Detroit, MI) ont été préparés selon des conditions standard et ont été inoculées individuellement à confluence (à peu près 1,7 106cfu pour les levures et à 1,5 106 cfu pour les bactéries) avec les espèces de Tryhophyton ou le Candida albicans, le Pesudomonas aeruginosa et le Staphylococcus aureus. L'inhibition d'un extrait de Vitreoscilla filiformis a été testé en déposant sur les boites de culture une solution de l mg/ml de l'extrait dans 10 l de tampon. La taille de chaque test locus était mesurée pour les levures et pour les bactéries opportunistes testées et au minimum de 3 tests ont été réalisés.

Le contrôle négatif correspondait à 10 gl de solution saline déposée sur la culture de levures et le contrôle positif était réalisés par le dépôt de 10 l de 2% miconazole (1-(2-(2,4-dichlorophenyl)-2-((2,4dichlorophenyl)methoxy)ethyl)-1 H-imidazole.

Les plaques ont ensuite été incubées pendant environ 18h à 30 C et la zone d'inhibition 35 a été mesurée. On utilisera excellente inhibition si 10 mm de diamètre ou plus sont observées, bonne inhibition si la zone d'inhibition est de 2 mm ou plus mais moins que 10 mm.

Les résultats de ces tests in vitro montrent que pour tous les espèces testées, il n'y a pas de zone d'inhibition pour le contrôle négatif et une bonne inhibition pour le contrôle positif (environ 9 mm) et que l'extrait de Vitreoscilla filiformis testé à 1 mg/ml entraîne une bonne inhibition du développement des microorganismes.

Exemple 5: Rétablissement de l'écoflore cutanée de patients atteints de 10 dermatites atopiques léqères à modérées Les patients atteints de dermatite atopique légère à modérée possèdent une écoflore perturbée avec prédominance de Staphylococcus aureus par rapport à S. epidermidis au niveau de la peau. Cette prédominance est due à divers facteurs: perturbation de la fonction barrière de la peau avec défaut de synthèse de la voie aboutissant aux céramides, désorganisation du stratum corneum entraînant une augmentation de la capacité d'adhésion des microorganismes pathogènes, diminution de l'induction 13-defensine 2 et de la L-cathélicine, LL-37, sous l'action des stimuli inflammatoires, d'où moindre protection de la peau par les défensines naturelles préservant normalement des infections par des microorganismes (Ong PY et coll., N Engl J Med 347:1151-1160, 2002).

Ces Staphylococcus aureus de plus sécrètent des exotoxines (Superantigène) capables de stimuler les lymphocytes T, Th2, les macrophages (Bunikowski R et coll., J Allergy Clin Immunol 105: 814-819, 2000; Neuber K et coll., Hautarzt 44:135-142, 1993; Strickland I et coll., J Invest Dermatol 112:249-253, 1999) et d'inhiber les cellules T régulatrices (Ou LS et coll., J Allergy Clin Immunol 113: 756-763, 2004) renforçant d'autant la pathogénie de la maladie.

Nous avons donc testés l'activité d'un extrait de Vitreoscilla filiformis formulé dans une émulsion huile dans eau afin de mesurer l'activité de cette extrait à rétablir une écoflore cutanée dite normale et en particulier à diminuer la prédominance des germes pathogènes à la surface de la peau des patients.

De plus, la stimulation des défensines de la peau a aussi été étudiée (analyse par immunocytochimie avec des antigènes spécifiques de la 13-defensine 2 et de la cathelicidine sur des biopsies). Avec les anticorps anti-13-defensine 2 (Peptide Institute) à 1/50 et les anticorps anti-LL-37 (Peptide Institute) à 1/20 avec identification par un marquage à la peroxydase en utilisant le kit Vectastain Elite (ABC rabbit Kit, Vector Laboratories).

Afin de déterminer les germes présents au niveau de la peau et de déterminer leur quantité relative la méthode de Detergent Washing (Williamson-Kligmann scrub technique, 1965) a été utilisée.

Les microorganismes particulièrement visés dans cet exemple sont l'identification et la quantification de bactéries (S. aureus, S epidermidis, P. acnes, Streptococci, E. colt) et d'un champignon le Pityrosporum ovale.

Après avoir retiré tous poils de la surface cutanée à prélever, un cylindre stérile est appliqué et pressé sur la peau. A l'intérieur de ce cylindre est appliqué 1ml de 0,1% de Triton stérile X100 à 0,075 M dans un tampon phosphate (pH 7,9) avec une pipette stérile. La peau à l'intérieur du cylindre est alors légèrement abrasée avec une palette plastique. La solution résultante est retirée et est remplacée par 1ml d'une nouvelle solution stérile. Après une autre minute la solution est retirée. L'extrait de 2ml est alors diluée (1110).

Pour l'identification est la quantification des microorganismes 0, 1 ml de différentes solutions sont placées sur des géloses d'agar (avec blood agar pour les bacteries aerobies et TSY agar pour les bactéries anaérobies). L'identification des espèces de bactéries et des champignons est faites par l'observation de la morphologie des colonies, par des test immunologiques (test d'agglutination des cellules, détection des plasmakoagulases) et par le métabolisme des bactéries (test de DNAse, mannit test). Pour la quantification, les colonies sont comptées (CFU) (après 48h de culture pour les germes aérobies et 4 à 8 jours pour les germes anaérobies) et converties par rapport au 1cm2 de peau préalablement prélevé avec la formule = (Nb de colonies x dilution x20) / 3,8.

Cette exemple montre un rétablissement d'une écoflore équilibrée dès le jour 14 qui se prolonge jusqu'à la fin du traitement (J28) alors que les patients traités avec le placebo possède toujours à J28 une écoflore perturbée avec prédominance de germes pathogènes et moindre importance du S. epidermidis.

De plus, l'application d'un extrait de Vitreoscilla filiformis permet de stimuler les défenses innés de la peau et en particulier stimulent la a-défensine-2 et la LL-37 au niveau épidermique, renforçant d'autant l'activité sur l'écoflore cutanée.

Exemple 6: Exemple de Formulations: A- Lotion pour le corps qui stabilise etlou Huile minérale Isopropyle palmitate Polyglycéryl-3- diisostéarate Octyldodecanol Carbomère Extrait de Vitreoscilla filiformis Sodium cocoyglutamate Hydroxyde de sodium à 10% Conservateur Parfum Eau régule la flore pathogène de la 8,0% 5,0% 4,0% 4,0% 0,3% 2,0% 2,0% 1,2% 0, 5% 0,5% qsp 100% peau B- Shampoinq antipelliculaire Sodium Lauryl Sulphate 7,0% Cocamidopropylbetain 2,0% Sodium Lauryl sulphosuccinate 2, 0% Extrait de Vitreoscilla filiformis 4,0% Chlorure de sodium 1,0% Conservateurs 0,5% Parfum 0,5% Eau qsp 100% 25 C- Crème émolliente stabilisant la flore pathogène Arachidyl behenyl alcohol/arachidylglusoside 3,0% Isohexadecane 7,0% Huile d'amande douce 3, 0% Beurre de Karité 2,0% Glycérine 5,0% Extrait de Vitreoscilla filiformis 3,0% BHT 0,05% POB méthyle 0,1% POB propyle 0,05% Eau qsp 100% D- Crème pour peau acnéique Extrait de Vitreoscilla filiformis Glyceryl stearate et PEG 100 stéarate 5 Isohexadecane Beurre de Karité Glycérine Carbopol 981 0,2% Lubragel l0 Phenoxyéthanol Soude

BHT

Dc 1503 Eau 1,5% 5,0% 8,0% 5,0% 3,0% 0,2% 5,0% 1,0% qsp pH6 0,05% 1,0% qsp 100%

Claims (22)

REVENDICATIONS

1. Utilisation d'au moins un extrait de bactérie filamenteuse non photosynthétique non 5 fructifiante en tant qu'agent modulant l'adhésion sur la peau, le cuir chevelu et/ou les muqueuses de microorganismes cutanés.

2. Utilisation d'au moins un extrait de bactérie filamenteuse non photosynthétique non fructifiante en tant qu'agent stimulant la synthèse de défensines par la peau, le cuir 10 chevelu et/ou les muqueuses.

3. Utilisation d'au moins un extrait de bactérie filamenteuse non photosynthétique non fructifiante en tant qu'agent inhibant la prolifération sur la peau, le cuir chevelu et/ou les muqueuses de microorganismes cutanés.

4. Utilisation d'au moins un extrait de bactérie filamenteuse non photosynthétique non fructifiante en tant qu'agent normalisant la flore cutanée.

5. Utilisation selon l'une quelconque des revendications précédentes, caractérisée en 20 ce que ledit extrait est appliqué topiquement sur la peau, le cuir chevelu et/ou les muqueuses.

6. Utilisation selon l'une quelconque des revendications précédentes, pour prévenir et/ou limiter les états pelliculaires.

7. Utilisation selon l'une quelconque des revendications 1 à 5, pour la préparation d'une composition destinée à l'hygiène corporelle ou capillaire.

8. Utilisation selon l'une quelconque des revendications 1 à 5, pour la préparation 30 d'une composition destinée à l'hygiène buccale.

9. Utilisation selon l'une quelconque des revendications 1 à 5, prévenir et/ou lutter conter les mauvaises odeurs des zones confinées du corps.

10. Utilisation d'au moins un extrait de bactérie filamenteuse non photosynthétique non fructifiante pour la préparation d'une composition comprenant un milieu physiologiquement acceptable, caractérisée en ce que la composition est destinée au traitement des désordres provoqués par la prolifération sur la peau, le cuir chevelu et/ou les muqueuses de microorganismes pathogènes cutanés.

11. Utilisation selon la revendication 10, caractérisée en ce que ledit extrait est appliqué topiquement sur la peau, le cuir chevelu et/ou les muqueuses.

12. Utilisation selon la revendication 10 ou 11, caractérisée en ce que la composition est destinée au traitement des désordres liés au développement sur la to peau, le cuir chevelu et/ou les muqueuses de Staphylococcus aureus, Streptococcus pyogenes, Pseudomonas aeruginosa, Escherichia coli, Clostridium pefringens, Clostridium difficile, Gardnerella vaginalis, Propionibacterium acnes, Aspergillus species, Klebsiella species, Pityrosporum ovale, Streptopyogenes, Candida albicans, Trichophyton mentagrophytes, Trichophyton interdigitale, Trichophyton rubrum, Trichophyton yaoundei, Tinea capitis, Tinea corporis, Pityriasis versicolor.

13. Utilisation selon l'une quelconque des revendications 10 à 12, caractérisée en ce que lesdits désordres sont choisis parmi les complications infectieuses des désordres dermatologiques; des complications infectieuses pendant la cicatrisation; des dermatophytoses; des candidoses; des vaginoses; des onychomycoses; des teignes du cuir chevelu, du corps; des désordres cutanés liés à des thérapeutiques avec des antibiotiques ou des antimycosiques ou entraînés par des dysrégulations hormonales; des polydermites; des érysipèles; des dermites séborrhéiques.

14. Utilisation selon la revendication 13, caractérisée en ce que les complications infectieuses des désordres dermatologiques sont choisies parmi les dermatites atopiques surinfectées, l'eczéma impétiginisé, l'acné inflammatoire surinfecté, l'herpes surinfecté.

15. Utilisation selon la revendication 13, caractérisée en ce que les complications infectieuses pendant la cicatrisation sont choisies parmi les ulcères, les plaies, les brûlures.

16. Utilisation selon la revendication 13, caractérisée en ce que les dermatophytoses sont choisies parmi la teigne du cuir chevelu, la teigne du corps, le pied d'athlète, l'eczéma marginé de Hebra, l'herpès circiné.

17. Utilisation selon la revendication 13, caractérisée en ce que des candidoses sont choisies parmi les candidoses des muqueuses, les candidoses vaginales, les candidoses interdigitales, les candidoses liées à des professions à risques ou au diabète.

18. Utilisation selon la revendication 13, caractérisée en ce que les polydermites sont choisies parmi l'impétigo, les folliculites superficielles

19. Utilisation selon la revendication 10, caractérisée en ce que la composition est destinée à un usage vétérinaire pour le traitement et/ou la prévention des désordres liés à des infections staphylococciques, streptococciques et mycosiques.

20. Utilisation selon l'une quelconque des revendications précédentes, caractérisée en ce que ledit extrait de un extrait de bactérie filamenteuse non photosynthétique non fructifiante est un extrait de Vifreoscilla filiformis.

21. Procédé de traitement cosmétique des états pelliculaires du cuir chevelu comprenant l'application sur le cuir chevelu d'une composition renfermant dans un milieu physiologiquement acceptable au moins un extrait de bactérie filamenteuse non photosynthétique non fructifiante.

22. Procédé de traitement cosmétique des peaux et/ou des cuirs chevelus gras dont le caractère gras est entretenu par le développement de microorganismes pathogènes cutanés comprenant l'application sur la peau et/ou le cuir chevelu d'une composition renfermant dans un milieu physiologiquement acceptable au moins un extrait de bactérie filamenteuse non photosynthétique non fructifiante.