FR2808193A1

FR2808193A1 - Utilisation de l'il-2 et de vecteurs synthetiques dans le traitement des cancers

Info

Publication number: FR2808193A1
Application number: FR0005295A
Authority: FR
Inventors: Mir Samir El; Frederic Trieble; Didier Betbeder; Anne Casanova
Original assignee: Biovector Therapeutics SA
Current assignee: Biovector Therapeutics SA
Priority date: 2000-04-26
Filing date: 2000-04-26
Publication date: 2001-11-02
Anticipated expiration: 2020-04-26
Also published as: FR2808193B1

Abstract

La présente invention se rapporte à l'utilisation de vecteurs particulaires incorporant de l'interleukine 2 pour la préparation de médicaments destinés au traitement des cancers. Elle se rapporte également à une composition pharmaceutique contenant lesdits vecteurs.

Description

La présente invention se rapporte à l'utilisation de vecteurs particulaires incorporant de l'interleukine 2 pour la préparation de médicaments destinés traitement des cancers. Elle se rapporte également à une composition pharmaceutique contenant lesdits vecteurs.

Le cancer est une maladie caractérisée par une prolifération incontrôlée certaines cellules, qui échappent à la surveillance du système immunitaire. En effet le rôle du système immunitaire est non seulement de rejeter les corps étrangers (virus, bactéries, parasites...) pathogènes qui peuvent pénétrer dans le corps humain, mais aussi d'éliminer les cellules présentant des caractéristiques anormales. Il est parfois possible que les cellules cancéreuses échappent à la vigilance système immunitaire, par exemple en diminuant l'expression de certains antigènes spécifiques de la tumeur, ou de molécules impliquées dans la reconnaissance par le système immunitaire (protéines du complexe majeur d'histocompatibilité). Dans d'autres cas, bien que les tumeurs soient fortement immunogéniques, le système immunitaire ne peut les combattre, les lymphocytes étant dans un état anergique à proximité des amas cancéreux.

Une nouvelle stratégie développée dans les dernières années consiste à stimuler le système immunitaire par l'injection de protéines d'intérêt thérapeutique, ayant un rôle dans la régulation du système immunitaire. Parmi ces protéines, on peut citer bien sûr les cytokines, mais aussi d'autres agents comme les chémokines. En particulier, on peut mettre l'accent sur les interleukines, les interférons, les TNF (facteurs nécrosants de tumeurs), les TGF (facteurs transformants de croissance), les facteurs de croissance hématopoïétique tels que les M-CSF et GM-CSF, mais aussi des facteurs d'attraction de cellules immunitaires, tels que le MIF ou RANTES.

Une cytokine particulièrement intéressante dans la stimulation du système immunitaire est l'interleukine 2 (IL-2). Elle est synthétisée majoritairement par les lymphocytes T helper de type 1 (Thl) en réponse à une stimulation par l'antigène présenté par des cellules appropriées. Elle est impliquée dans le développement de réponses immunitaires spécifiques et non spécifiques, en ce qu'elle interagit avec de nombreuses cellules (lymphocytes B, T, cellules tueurs naturels NK) pour les activer et induire leur différentiation et/ou leur prolifération. Ainsi, il a ' ' montré que l'IL-2 possède des propriétés antitumorales, en ce qu'elle peut induire une régression de différentes tumeurs solides, de mélanomes, de leucémies ou de lymphomes, etc...

Toutefois, l'utilisation de l'IL-2 en chimiothérapie se heurte à de nombreux problèmes. Pour obtenir l'effet recherché, il est souvent nécessaire d'administrer des doses importantes de protéine, ce qui peut provoquer des effets secondaires gênants (fièvre, érythème, oedème). Par ailleurs, la purification de cette protéine est difficile, elle est en général produite par génie génétique, et est donc couteuse. Par ailleurs, les cytokines sont souvent instables en solution, même à 4 C, ce qui pose un problème de conservation. De plus, les procédés de préparation des solutions comprenant de l'IL-2 contiennent une étape d'ajout de protéine stabilisatrice, souvent l'albumine, ce qui devient difficilement acceptable pour les agences de régulation, en raison des risques posés par l'utilisation de l'albumine.

La présente invention se propose de résoudre ces différents problèmes, en mettant en oeuvre une nouvelle façon de formuler les compositions contenant de VIL-2, qui permet d'obtenir des solutions ayant une activité, en particulier anti- tumorale, plus importante que les formulations usuelles. Cette nouvelle formulation permet également d'augmenter la stabilité de l'IL-2. De plus, l'invention peut-être utilisée pour la fabrication d'un médicament qui peut être administré par voie intranasale ou orale, un système de délivrance de principe actif présentant une amélioration très importante par rapport aux systèmes précédemment décrits. Enfin, une formulation selon l'invention permet de s'affranchir de la présence d'albumine dans les compositions comprenant de l'IL-2, destinées à une administration sous forme injectable.

II est donc un des objets de la présente invention que de revendiquer l'utilisation d'un vecteur comportant a) un noyau hydrophile non liquide, constitué d'une matrice de polysaccharides ou d'oligosaccharides naturellement ou chimiquement réticulés, sur lequel sont greffés des ligands ioniques, b) une couche externe constituée au moins en partie de composés amphiphiles, associée au noyau par des interactions hydrophobes et/ou des liaisons ioniques et c) incorporant de l'interleukine 2 pour la préparation d'un médicament destiné au traitement des cancers.

Une telle composition pharmaceutique, contenant un vecteur comportant a) un noyau hydrophile liquide, constitué d'une matrice de polysaccharides ou d'oligosaccharides naturellement ou chimiquement réticulés, lequel sont greffés des ligands ioniques, b) une couche externe constituée au moins en partie de composés amphiphiles, associée noyau par des interactions hydrophobes et/ou des liaisons ioniques c) incorporant de l'interleukine 2 fait également partie de l'invention.

Les vecteurs particulaires possédant un noyau hydrophile non liquide et une couche externe constituée de composés amphiphiles ont déjà été décrits, en particulier dans la demande de brevet W094/20078.

De façon préférée, le rapport massique (protéine d'intérêt) / (noyau hydrophile + couche externe lipidique) dans les vecteurs des compositions selon l'invention est de 1 contre 10.

Le noyau hydrophile peut être obtenu par différentes méthodes déjà décrites précédemment (ainsi les brevets EP344040, W092/21329, W094/20078), et les procédés de réticulation sont connus l'homme du métier, le polysaccharide peut être chargé positivement ou négativement, par la greffe de groupements ioniques, cationiques ou anioniques, aux sucres composant le polymère. Ces groupements peuvent être choisis parmi des fonctions ammoniums quaternaires ou carboxyméthyles. Les procédés ont éte décrits dans W092/21329 et les brevets cités précédemment. La charge du coeur polysaccharidique des vecteurs des compositions selon l'invention est en général de 'férence une charge positive. Toutefois les vecteurs dont les coeurs contiennent charges négatives peuvent parfois être préférés, en particulier dans une composition pour une utilisation sous forme injectable.

Les brevets précédemment cités décrivent également les protocoles que l'homme du métier peut utiliser pour l'incorporation de la couche externe lipidique. Celle-ci est de préférence composée de DPPC-like , c'est à dire de DPPC (dipalmitoyl phosphatidyl choline) ou de tout autre composé possédant les mêmes propriétés que ce produit, dans lequel est ajouté du cholestérol. Toutefois, d'autres composés lipidiques peuvent être utilisés en particulier des phospholipides ou des céramides, auxquels on peut additionner d'autres constituants, par exemple des constituants des membranes biologiques. De façon préférée, le rapport massique DPPC/Cholestérol est de 70l30.

Les cancers pouvant être traités par une composition selon l'invention peuvent être de toutes sortes. En particulier, on cite les cancers de la sphère ORL, de l'oesophage, de l'estomac, du colon, du rectum, de la prostate, du foie, du pancréas, du sein, du col ou du corps utérin, de l'ovaire, du rein, de la vessie, de l'os, ou de la thyroïde. On ajoute aussi les cancers broncho-pulmonaires, les mélanomes malins, les tumeurs cérébrales, les lymphomes (Hodgskiniens ou non), les leucémies (myéloïdes ou lymphoïdes), les cancers de localisation primitive inconnue. Ces cancers peuvent être primaires ou métastatiques. Ils peuvent être de type sarcome, adénome, carcinome, adénocarcinome, lymphome, myélome, gliome, blastome, glioblastome. Les cancers pouvant être traités par une composition selon l'invention peuvent être immunogéniques ou non. La Demanderesse a montré que les compositions selon l'invention sont particulièrement efficaces dans le traitement et le contrôle de cancers peu ou pas immunogéniques.

Les compositions et médicaments selon l'invention peuvent être administrés de diverses façons, en particulier par voie parentérale. On peut ainsi administrer les compositions selon l'invention par voie intraveineuse sous-cutanée, intramusculaire, ou intradermale. L'administration peut également être effectuée (et c'est un gros avantage de l'invention) par voie orale ou intranasale. Les compositions permettant une prise orale peuvent être des comprimés, des gélules, des poudres, des granules ou des suspensions ou solutions orales. Elles comprennent également les formes d'administration sublinguale et buccale.

On peut éventuellement rajouter certains excipients compositions pharmaceutiques selon l'invention. On peut ainsi utiliser toute sorte d'agents liant, tensioactif, d'enrobage, de dispersion, ou de mouillage.

La Demanderesse a montré que ces vecteurs sont capables fixer l'IL-2 de façon très efficace, que la protéine conserve son activité biologique, et que, de façon inattendue, cette activité est augmentée par rapport à la protéine non formulée. La Demanderesse a également montré qu'une formulation selon l'invention permet de stabiliser la protéine en solution, de la même manière qu'en présence d'albumine. Ainsi, l'utilisation d'un vecteur comportant (a) un noyau hydrophile non liquide constitué d'une matrice polysaccharidique ou d'oligosaccharides naturellement ou chimiquement réticulés, sur lequel sont greffés des ligands ioniques charge positive ou négative, (b) une couche externe constituée au moins en partie de composés amphiphiles associée au noyau par des interactions hydrophobes et/ou des liaisons ioniques et (c) incorporant l'IL-2 pour la préparation d'un médicament destiné à l'administration sous forme injectable de ladite protéine IL-2 en l'absence d'albumine fait également partie de l'invention.

De plus, la Demanderesse a montré que l'association vecteur-protéine reste stable (mesurée par un maintien de l'activité après plusieurs mois stockage), ce qui présente une amélioration par rapport à la technique précédente dans laquelle les préparations thérapeutiques d'IL-2 ne peuvent être conservées, ce qui en augmente d'autant plus le coût.

Enfin, la Demanderesse a montré que, de façon surprenante, l'IL-2 formulée selon l'invention, et administrée par la voie intranasale possède une activité similaire ou supérieure à l'IL-2 administrée par des voies plus classiques, telles la voie sous-cutanée.

L'utilisation d'un vecteur selon l'invention permet donc de s'affranchir de tous les différents problèmes précédemment posés lors de l'utilisation de FIL-2.

Un vecteur selon l'invention est donc utilisable pour la traitement des cancers où l'on recherche une potentiation de la réponse immunitaire.

Les exemples qui suivent sont destinés à illustrer l'invention, sans toutefois être limitatifs. En particulier les valeurs données ne le sont qu'à titre d'exemple et peuvent être optimisées lors d'une mise en oeuvre de la présente invention. DESCRIPTION DES FIGURES Figure 1 : Analyse ELISA des interactions BVSM-IL2, permettant en particulier de calculer le rapport massique optimal entre la protéine d'intérêt et le vecteur. Les valeurs sont données en Unités Arbitraires (UA).

Figure 2 : Analyse des BVSM-IL2 sur un appareil Biacoree. Comparaison de la réfraction entre une composition d'IL-2 libre et la composition BVSM-IL2. Les valeurs sont données en Unités de Réfraction (RU).

Figure 3: Prolifération de cellules mononucléaires périphériques stimulées préalablement stimulées par PHA, et par des BVSM-IL2 de diverses compositions. La prolifération est mesurée par incorporation de thymidine marquée au 3H et est proportionnelle au nombre de coups par minutes (cpm) relevés.

Figure 4: Effet de différentes formulations d'IL-2 sur l'implantation et la croissance d'une tumeur dans un modèle TS/A, après co-administration. symboles représentent : PBS, tampon de saline ; IL-2, interleukine 2 non formulée KY, vecteur à coeur cationique et couche DPPC / Cholestérol ; KY / IL-2, vecteur formulé avec IL-2.

Fizure 5: Effet de différentes formulations d'IL-2 sur l'implantation et croissance d'une tumeur dans un modèle TS/A, après administration dans le flanc contralatéral de souris BALB/c. Les symboles sont les mêmes que précédemment, valeurs numériques indiquées correspondent aux valeurs UI de l' IL-2.

Figure 6 : A. Propriétés de rejet d'une tumeur TS/A implantée par administration sous cutanée de KY / IL-2 dans le flanc contralatéral de souris BALB/c à un ou cinq site(s), six jours après implantation. Les symboles sont les mêmes que précédemment, les valeurs numériques indiquées correspondent aux valeurs UI -2. B. protection de souris guéries après ré-injection de cellules tumorales TS/A. Dans les deux figures, le nombre de souris présentant des tumeurs est indiqué entre parenthèses.

Figure 7 : A. Propriétés de rejet d'une tumeur TS/A implantée par administration intranasale de KY / IL-2 dans le flanc contralatéral de souris BALB/c une ou deux fois par jour, pendant cinq jours, six jours après implantation. Les symboles sont meures que précédemment, les valeurs numériques indiquées correspondent aux valeurs UI de VIL-2. B. protection de souris guéries après ré-injection de cellules tumorales TS/A. Dans les deux figures, le nombre de souris présentant des tumeurs est indiqué entre parenthèses. Figure 8 : activité CTL antitumorale chez les souris ayant rejeté les cellules TS/A après administration de KY / IL-2. A. Souris ayant reçu une administration sous cutanée. B. Souris ayant reçu une administration intranasale.

EXEMPLES Exemple 1 : Caractérisation des particules chargées en IL-2 A. Préparation des vecteurs chargés en IL-2 Les vecteurs utilisés (BVSM) dans cet exemple ont été décrits précédemment. I1 s'agit de vecteurs cationiques possédant couche lipidique en DPPC-Cholestérol.

L'interleukine 2 (IL-2) utilisée provient de chez Chiron. Elle se présente sous forme d'IL-2 recombinante lyophilisée, telle que 18. UI = 1,1 mg de protéine lyophilisée.

Une composition selon l'invention est obtenue par la liaison BVSM-IL2 par simple mélange des deux composés, dans un rapport en poids 10/1, et dans une solution de saline tamponnée (PBS).

B. Détermination du rapport optimal BVSM-IL2 Le rapport massique optimal de BVSM par rapport à la protéine est déterminé analyse par ELISA, selon une méthode bien connue de l'homme du métier.

Brievement, on couvre les puits avec un anticorps anti- , et on sature avec de la BSA (albumine de sérum bovine). On ajoute la préparation d'IL-2 à tester, puis on ajoute un second anticorps anti-IL2, biotinylé. L'ajout streptavidine liée à une peroxydase suivi de l'addition d'un substrat de ladite peroxydase permet de déterminer quantité d'IL-2 présente dans la solution, par colorimétrie. Les valeurs obtenues sont exprimées en Unités Arbitraires, une valeur étant d'autant plus élevée qu'il y a -2 présente dans la solution testée.

Les préparations testées sont des préparations dans lesquelles une même quantité -2 a été introduite, en présence de vecteurs dans des proportions diverses, ou en leur absence, avec ou sans BSA en tant que stabilisateur des protéines. Les résultats sont exprimés dans la figure 1. On observe que l'on obtient environ même taux d'IL-2 disponible dans les préparations contenant de la BSA ou un taux de vecteurs particulaires tel que le rapport massique BVSM/IL-2 soit 10I1. Lorsque VIL-2 est seule dans le PBS ou que le rapport massique est inférieur il y a moins d'IL-2 disponible en solution.

résultats montrent donc que les vecteurs sont aussi efficaces que l'albumine pour stabiliser VIL-2 et empêcher une baisse de la concentration efficace.

C. Détermination du taux d'association de l'IL-2 aux BVSM On détermine le taux d'association de l'IL-2 aux vecteurs par la technique de résonance de surface du plasmon dans un appareil Biacore X, en suivant les instructions du fabricant. Cette méthode permet la détection des différences dans l'index réfraction d'une couche de surface d'une solution en contact avec la puce de détection, par illumination avec une lumière polarisée monochromatique.

protocole opératoire est le suivant # on adsorbe les BVSM (0,05 g/1) sur la surface de la puce de détection ; # on injecte PIL-2 libre (1-6 Iig/ml) afin de déterminer la courbe standard (exprimée comme unités de résonance, RU) qui est fonction de la concentration de protéine injectée ; # après régénération, on injecte une préparation telle que préparée dans l'exempleLA, dans laquelle sont présents les BVSM-IL2, ainsi que de l'IL-2 libre. Seule cette dernière peut s'associer aux BVSM fixés à surface de la puce de détection.

protocole permet de déterminer la concentration d'IL-2 libre dans formulation de l'exempleLA et d'en déduire le taux d'association BVSM-IL2. données de la figure 2 permettent de calculer que ledit taux d'association est de85 %.

Exemp 2: Analyse de l'activité biologique de PIL-2 associée à différents vecteurs exemple montre l'importance de la composition des noyaux et couches du vecteur sur l'activité biologique de FIL-2. On utilise quatre types différents de vecteurs # deux vecteurs possédant un coeur anionique avec une couche lipidique contenant a. un mélange Phospholipon / Cholestérol PLpon/Chol), ou b. un mélange DPPC / Cholestérol (P DPPC/Chol, ou PY) # deux vecteurs possédant un coeur cationique et une membrane contenant c. un mélange Phospholipon / Cholestérol (QAE PLpon/Chol), ou d. un mélange DPPC / Cholestérol (QAE DPPC/Chol, ou KY) L'IL-2 est ajoutée aux BVSM dans un rapport massique de 1/l0.

On évalue l'activité biologique de VIL-2 associée différents BVSM en mesurant la prolifération de cellules mononucléaires sanguines, calculée par incorporation de thymidine marquée à 1'3H. Ces cellules préalablement été stimulées par des composés (PHA) qui induisent l'expression du récepteur CD25, qui possède forte affinité pour VIL-2.

On observe (figure 3) que tous les BVSM permettent d'obtenir une activité équivalente celle de l'IL-2 contrôle non formuléein vitro, les BVSM QAE DPPC/Chol permettant même d'améliorer cette activité biologique.

Exemple 3 : Etude de la stabilité des préparations d'IL-2 Les préparations d'IL-2 en solution ne sont en général pas stables en solution à 4 l'IL-2 perdant son activité biologique.

La préparation BVSM-IL2 (QAE/DPPC/Chol) reste stable après deux mois de stockage à 4 C, 9 5% de l'activité biologique de VIL-2 fraîche étant maintenue, comme mesurée par incorporation de thymidine marquée à 3H dans les cellules murines CTLL-2.

Exemple 4 : Testsin vivo. Tumeur TS/A On a testé l'activité des BVSM-IL2 (KY / IL2, rapport massique 10/l) dans le modèle tumeur TS/A (adénocarcinome mammaire non différencié, non immunogénique), dans un modèle de rejet d'implantation tumorale, ou un modèle de traitement tumeurs préalablement implantées. A. Reiet de l'implantation tumorale A. 1. Coadministratïon dans le même f anc On co-administre 5.l04 cellules tumorales à des souris femelles BALB/c par voie sous cutanée (s.c.), ainsi que les BVSM-IL2 (KY/IL-2) correspondant à concentration en IL-2 indiquée sur la figure 4. En tant que contrôle, on administre également les vecteurs seuls ou l'IL-2 non formulée, ou du simple PBS. On mesure l'implantation et l'évolution de la taille des tumeurs.

La figure 4 montre clairement qu'il y a implantation des cellules tumorales et croissance de la tumeur après administration des vecteurs seuls ou de 1'1L seule, alors que l' IL-2 formulée avec les vecteurs KY permet de retarder croissance tumorale.

A.2. Administration contralatérale On administre 5.104 cellules tumorales TS/A à des souris BALB/c, par voie s.c., ainsi que les KY / IL-2 correspondant aux concentrations en IL-2 indiquée sur la figure 5, dans le flanc contralatéral. On administre de VIL-2 non formulée ou du PBS en tant que contrôles.

La figure 5 montre que l'administration contralatérale de l'IL-2 complexée aux vecteurs permet la diminution de la croissance tumorale, un résultat non observé avec l'IL-2 non formulée, même utilisée à une dose 100 fois supérieure.

B. Effet thérapeutique et protecteur sur une tumeur implantée ; administration par voie sous-cutanée.

B.1. Effet thérapeutique Six jours après administration s.c. de 5.104 cellules TS/A à 10 souris/groupe, on administre les KY / IL-2, par voie s.c., dans le flanc contralatéral. On effectue l'administration à un site (5.l03 Unités d'IL-2) ou à cinq sites distincts, la dose injectée étant alors1.103 Unités par site.

Dans un tel modèle, la tumeur est implantée et est palpable (surface d'environ 40 mmz). On évalue l'augmentation de la taille de la tumeur. La figure 6.A. montre que l'IL-2 complexée aux vecteurs permet de ralentir la croissance tumorale, d'une façon plus importante que l'IL-2 seule. Par ailleurs, il semble que l'injections de petites doses à de multiples sites soit plus efficace que l'injection d'une dose plus forte à un site unique.

Trois animaux sur les 10 souris ayant reçu les KY / 1L-2 à un site unique ne présentent pas de tumeur détectable après 30 jours, alors que 6 souris sur 10 ayant reçu les KY/ 1L-2 à cinq sites d'administration sont également sans tumeur détectable. Ces neufs animaux ne redéveloppent pas de tumeurs plus tard.

B.2. Effet protecteur On réinjecte 25.10a cellules TS/A aux neuf souris décrites précédemment, qui ne présentent plus de tumeurs 46 jours après l'administration de l'IL-2. souris naïves sont utilisées comme contrôles.

La figure 6.13 montre que l'administration préalable de KY / 1L-2 permet protéger partiellement les animaux contre un nouveau challenge. En effet, quatre souris sur neuf ne développent pas de tumeurs, et le développement tumoral est ralenti chez les autres animaux, par rapport aux animaux naïfs.

C. Effet thérapeutique et protecteur sur une tumeur implantée ; administration par voie intranasale.

B. I. Effet thérapeutique commençant six jours après l'administration s.c. de 5.10a cellules TS/A à 10 souris/groupe, on administre les KY / 1L-2, par voie intranasale, pendant une période 5 jours. On effectue l'administration une ou deux fois par jour. contrôles utilisés sont 1'1L-2 seule (administrée deux fois par jour), les vecteurs seuls ou PBS.

Dans un tel modèle, la tumeur est implantée et est palpable (surface d'environmm'). On évalue l'augmentation de la taille de la tumeur. La figure 7.A. montre que FIL-2 complexée aux vecteurs permet de ralentir la croissance tumorale d'une façon plus importante que l'IL-2 seule. Il ne semble pas nombre d'administrations mène à des différences sur les résultats observés.

Quatre animaux sur les 10 souris ayant reçu les KY / 1L-2 voie intranasale, une fois par jour ne présentent pas de tumeur détectable après 35 jours, et 6 souris sur les 10 ayant reçu les KY / 1L-2 deux fois par jour sont également sans tumeur detectable. Ces dix animaux ne redéveloppent pas de tumeurs plus tard. B.2. Effet protecteur On réinjecte 25.104 cellules TS/A aux dix souris décrites précédemment, qui ne présentent plus de tumeurs 48 jours après l'administration de 2. Des souris naïves sont utilisées comme contrôles.

La figure 7.B montre que l'administration préalable de KY IL-2 permet de protéger partiellement les animaux contre un nouveau challenge. En effet, quatre souris sur dix ne développent pas de tumeurs, et le développement tumoral est ralenti chez les autres animaux, par rapport aux animaux naïfs.

Exemple 5 : Induction de CTL On isole les splénocytes des quatre souris traitées par voie sous cutanée (après 75 jours) ou intranasale (après 79 jours), qui ont rejeté la tumeur implantée et n'ont redéveloppé de tumeurs après un nouveau challenge avec une dose plus importante (exemples 4.13 et 4.C).

splénocytes sont stimulésin vitro avec les cellules TS/A pendant 6 jours et 1 `activité CTL contre les cellules TS/A est étudiée.

observe que les souris ayant reçu les KY / IL-2 par voie sous-cutanée expriment une activité CTL spécifique des TS/A (figure 8.A), puisque les cellules syngéniques WEHI 164 ou les cellules YAC ne sont pas lysées.

On observe également une activité CTL spécifique chez les souris ayant reçu les KY / IL-2 par voie intranasale.

Claims

REVENDICATIONS

1) Utilisation d'un vecteur comportant a) un noyau hydrophile non liquide, constitué d'une matrice polysaccharides ou d'oligosaccharides naturellement ou chimiquement réticulés, sur lequel sont greffés des ligands ioniques, b) une couche externe constituée au moins en partie de composés amphiphiles, associée au noyau par des interactions hydrophobes et/ou des liaisons ioniques et c) incorporant de l'interleukine 2 pour la préparation d'un médicament destiné au traitement des cancers.

2) Utilisation d'un vecteur selon la revendication 1, caractérisée en ce que le rapport massique (protéine) / (noyau + couche externe) est de 1 contre 10.

3) Utilisation d'un vecteur selon la revendication 1 ou 2, caractérisée en ce que les ligands ioniques sont à charge positive.

4) Utilisation d'un vecteur selon la revendication 3, caractérisée en ce que ligands ioniques à charge positive sont des ammoniums quaternaires.

5) Utilisation d'un vecteur selon l'une des revendications 1 à 4, caractérisée que la couche externe est formée de dipalmitoyl phosphatidyl choline (DDPC) et de cholestérol.

6) Utilisation selon la revendication 5, caractérisée en ce que le rapport massique DPPC/cholestérol est de 70/30.

7) Utilisation d'un vecteur selon l'une des revendications 1 à 6, caractérisée que le cancer à traiter est de type non immunogénique ou faiblement immunogénique.

8) Utilisation d'un vecteur selon l'une des revendications 1 à 7, caractérisée que le médicament est destiné à l'administration par voie nasale ou orale.

9) Composition pharmaceutique, caractérisée en ce qu'elle comprend un vecteur constitué (a) un noyau hydrophile non liquide, constitué d'une matrice de polysaccharides ou d'oligosaccharides naturellement ou chimiquement réticulés, sur lequel sont greffés des ligands ioniques, (b) une couche externe constituée au moins en partie de composés DPPC like et de cholestérol et (c) incorporant l'IL-2.

10) Composition pharmaceutique selon la revendication 9, caractérisée en ce que rapport massique (protéine d'intérêt thérapeutique) / (noyau hydrophile + couche externe lipidique) est de 1 contre 10.

11) Composition pharmaceutique selon la revendication 9 ou 10, pour son utilisation dans la préparation d'un médicament destiné au traitement des cancers.

12) Utilisation d'un vecteur comportant (a) un noyau hydrophile non liquide constitué d'une matrice polysaccharidique ou d'oligosaccharides naturellement ou chimiquement réticulés, sur lequel sont greffés des ligands ioniques de charge positive ou negative et (b) une couche externe constituée au moins en partie de composés amphiphiles associée au noyau par des interactions hydrophobes et/ou des liaisons ioniques et (c) incorporant l'IL-2 pour la préparation d'un médicament destiné à l'administration sous forme injectable de ladite protéine IL-2 en l'absence d'albumine.