FR2680115A1 - Appareil et procede de chargement et de dechargement d'un lit de colonne de chromatographie. - Google Patents

Abstract

Colonne de chromatographie (10) comprenant une source d'alimentation en milieu, un assemblage d'entrée de produit/tampon, une section de dispersion (14), un assemblage de sortie, une section de captation (16), et du liquide tampon et pour décharger un milieu usé liquéfié. L'assemblage d'entrée comprend un logement (58) ayant un passage (62) de produit et de tampon comprenant une buse (68) d'alimentation. La section de captation comprend une tige creuse s'étendant à travers un conduit de décharge à travers lequel s'écoule le milieu usé. La tige comporte une sonde et une pointe située au bout de la sonde. Le milieu usé peut être retiré de la colonne et cette dernière peut être rechargée en milieu frais sans que son démontage ne soit nécessaire.

Description

APPAREIL ET PROCEDE DE CHARGEMENT ET DE DECHARGEMENT

D'UN LIT DE COLONNE DE CHROMATOGRAPHIE

La présente invention se rapporte à une colonne de chromatographie en phase liquide, et plus particulièrement au retrait du lit de milieu usé d'une colonne de chromatographie, et au chargement d'un lit de milieu frais

dans celle-ci, sans démontage de la colonne.

La chromatographie est un procédé de séparation des constituants d'un mélange de substances chimiques La séparation se produit par la percolation d'un fluide à travers un corps ou un lit de matière rigide poreuse ou finement broyée, les divers constituants étant partagés par leur retardement sélectif lors de leur transport à travers le lit par un fluide ou tampon mobile Une solution des substances à séparer devient la phase mobile du système passant à travers les interstices de la phase stationnaire ou continue se composant de particules finement divisées se présentant sous la forme d'un gel ou d'un coulis Les substances de la phase mobile sont versées dans la partie supérieure d'une colonne de chromatographie remplie de matière finement divisée, c'est-à-dire le milieu, apte à absorber différentiellement les substances à séparer La matière particulière utilisée pour constituer le milieu varie considérablement en fonction des substances qu'il s'agit de séparer A mesure que la solution descend par percolation à travers la colonne, les constituants sont séparés du fluide tampon, qui est généralement recyclé par pompage vers le haut de la colonne pour descendre de nouveau à travers le lit en tant que fluide porteur Les différentes substances, lors de leur descente à travers la colonne suivant des vitesses différentes, forment des bandes de substances différentes qui

sont recueillies individuellement au niveau de la sortie.

Comme déjà dit, le milieu de la phase continue présente initialement la forme d'un gel ou d'un coulis à très fines particules, mais après avoir été utilisé pendant un certain temps, il se durcit, perd son efficacité et se transforme en masse dense Il faut alors retirer ce milieu usé de la colonne et garnir cette dernière de milieu frais, autrement

dit, la colonne doit être rechargée.

Une colonne de chromatographie comprend une enceinte cylindrique creuse disposée verticalement comprenant une section de distribution de liquide située à son extrémité supérieure et à travers laquelle le tampon et les substances à séparer sont fournis au lit de milieu, ainsi qu'une section de captation de liquide située au niveau de l'extrémité inférieure et servant à recueillir les substances et le tampon individuellement Le milieu ou lit à travers lequel a lieu la percolation du fluide tampon et du mélange à séparer et à purifier se situe entre ces sections La section de distribution de liquide et la section de captation de liquide comprennent chacune une plaque respective, et au moins l'une des plaques, et généralement les deux, est raccordée dans un assemblage avec un corps formant plongeur positionné à l'intérieur de l'enceinte au niveau de l'extrémité respective Après que la colonne ait été chargée du milieu de lit, les corps sont soumis à une force l'un par rapport à l'autre pour comprimer et mettre sous pression le lit de

milieu qui a été versé dans la colonne.

Les méthodes connues de l'art antérieur utilisées pour charger les lits de colonnes de faible diamètre utilisées dans des applications de recherche et de développement, leur diamètre n'étant, par exemple, que de quelques centimètres, sont décrites de façon détaillée dans le brevet US No 5 021 162 délivré au nom de Sakamoto et al en date du 4 juin 1991 Selon la méthode d'écoulement de liquide classique applicable aux colonnes de plus grand diamètre utilisées dans l'élaboration de produits utiles tels que l'insuline synthétique, par exemple d'environ 60 centimètres de diamètre, le coulis constituant le milieu de lit est versé dans un réservoir qui a été branché temporairement sur l'extrémité supérieure de la colonne de chromatographie La partie supérieure du réservoir est alors fermée et du liquide

est pompé sous pression à travers le réservoir et la colonne.

L'excédent de liquide éventuel subsistant au-dessus du lit est déchargé du réservoir par pompage et le réservoir est alors retiré Il subsiste alors une partie du lit qui déborde par-dessus le haut de la colonne, et cette dernière est fermée un fois éliminé cet excédent de milieu de lit Selon cette méthode, comme dans le cas de la plupart des autres solutions proposées par l'art antérieur traitées par le brevet précité, il est nécessaire de déconnecter la haut de la colonne afin de charger ou garnir le lit, puis de le

remonter une fois terminée cette opération.

Comme déjà constaté, lorsque la colonne a été en service pendant un certain temps, le coulis de fines particules se durcit progressivement pour former une masse dense Lorsque cela se produit, le lit perd son efficacité et doit être retiré ensuite de la colonne Pour retirer le coulis usé selon l'art antérieur, il est nécessaire d'ouvrir le fond de la colonne et de déconnecter de l'enceinte cylindrique les assemblages formant plongeurs Ensuite, la masse dense de coulis durci doit être fragmentée, hachée par exemple, puis retirée de la colonne Le temps requis pour retirer ce coulis usé, le remontage de l'assemblage formant plongeur inférieur sur l'enceinte, le rechargement de l'enceinte et le remontage de l'assemblage formant plongeur supérieur est relativement long Il peut arriver, en effet, que la durée de vie du lit, lors des opérations de séparation et de purification, ne soit pas supérieure au temps d'entretien requis pour le retrait du lit usé et le rechargement de la colonne Il est évident que les coûts de la production pourraient être sensiblement réduits si moins de temps était requis pour le retrait du

coulis usé et le rechargement de la colonne.

La présente invention a donc pour objet premier de proposer un procédé et un appareil destinés à réduire sensiblement le temps nécessaire au chargement du milieu de lit d'une colonne de chromatographie et au retrait du milieu

une fois que ce dernier est usé.

La présente invention a également pour objet de proposer un procédé et un appareil permettant le retrait de coulis usé ou milieu de lit d'une colonne de chromatographie et le rechargement de la colonne en coulis frais sans démontage de

la colonne.

La présente invention a encore pour objet de proposer une colonne de chromatographie dotée d'un assemblage à soupape de garnissage ayant pour fonction de charger la colonne de milieu de lit, et d'un assemblage à soupape de décharge ayant pour fonction de retirer le milieu de lit usé,

sans qu'il ne soit nécessaire de démonter la colonne.

En conséquence, la présente invention prévoit une colonne de chromatographie ayant un assemblage d'entrée de milieu et de produit positionné au niveau de l'entrée de l'assemblage formant un plongeur à la partie supérieure de la colonne, l'assemblage d'entrée de milieu et de produit comprenant une enceinte comportant un passage d'entrée de produit/tampon, et un assemblage à soupape de décharge au niveau de l'assemblage formant plongeur à la partie inférieure de la colonne, l'assemblage à soupape de décharge comprenant une tige creuse s'étendant concentriquement à travers un conduit de décharge à travers lequel peut s'écouler le milieu usé, la tige pouvant être déplacée sélectivement à travers la section de collection comprenant la plaque de collection et de façon à pénétrer dans la colonne, et présentant une sonde à l'extrémité supérieure

ayant pour fonction de percer et fragmenter le milieu durci.

Un liquide, tel que le liquide tampon, peut être pompé à travers la partie creuse de la tige et déchargé à travers des ouvertures de la sonde pour déloger et liquéfier le milieu usé, qui s'écoule par la suite à travers le conduit de décharge De préférence, le conduit de décharge de milieu est disposé concentriquement à l'intérieur du passage de décharge de produit et de tampon au niveau de la sortie de la plaque

de collection.

Selon au autre aspect de l'invention, il est prévu une buse mobile d'alimentation en milieu S 'étendant à travers l'enceinte en relation étanche avec le passage d'entrée de produit/tampon, en relation étanche avec le passage d'entrée de produit/tampon, la buse étant positionnée sélectivement à travers la section de dispersion, y compris la plaque de dispersion, pour permettre l'introduction du coulis dans la colonne par pulvérisation, et étant retirée une fois que le lit est garni. Les caractéristiques et avantages particuliers de l'invention, ainsi que d'autres objets, ressortiront de la

description qui suit, prise en référence aux dessins annexés,

dans lesquels: La figure 1 est une vue en élévation, en coupe partielle, d'une colonne de chromatographie comprenant l'appareil construit conformément à la présente invention; La figure 2 est une vue en coupe fragmentaire agrandie de la section de dispersion de la colonne de chromatographie illustrée sur la figure 1; et La figure 3 est une vue en coupe fragmentaire agrandie de la section de captation de la colonne représentée sur la

figure 1.

On se réfère maintenant aux dessins, dans lesquels la figure 1 représente une colonne de chromatographie 10 comprenant un appareil construit conformément aux principes de la présente invention La colonne 10 comporte une enceinte cylindrique creux allongée 12 présentant, à sa partie supérieure, une section de dispersion 14 et, à sa partie inférieure, une section de captation 16, l'enceinte étant réalisée de préférence en acier inoxydable La section de dispersion 14 comprend un tambour allongé cylindrique creux 18 à l'extrémité inférieure duquel est formée une tête formant plongeur cylindrique supérieure 20 et à la partie supérieure duquel est formée une bride 22, la tête 20 étant disposée normalement à l'intérieur de la partie supérieure de l'enceinte 12 Le tambour 18, le plongeur 20 et la bride 22 sont également réalisés de préférence en acier inoxydable, et la tête formant plongeur et la bride sont, de préférence, soudées au tambour central 18 De manière analogue, la section de captation 16 comporte un tambour cylindrique creux 24 auquel sont soudées une tête formant plongeur cylindrique inférieure 26 et une bride 28, la tête formant plongeur 26 étant disposée à l'intérieur de la partie inférieure de l'enceinte L'enceinte 12 de la colonne comprend une bague ou bride supérieure 30 et une bague ou bride inférieure 32, soudées respectivement à ladite enceinte, les brides 22, 28, et 32 présentant une série d'alésages, tels que 33, alignés et espacés les uns des autres circonférentiellement, destinés à recevoir une série de tiges de fixation 34, dont une seule est illustrée Sur les tiges 34 sont vissés, au niveau des surfaces supérieure et inférieure éloignées des brides 22 et 28 des éléments de serrage, tels que des écrous ou organes analogues 36, pour solliciter les brides 30 et 32 vers la colonne et faire pénétrer ainsi les têtes formant plongeur dans l'enceinte Une autre bride, 37, peut également être soudée sur l'enceinte de la colonne, cette bride présentant des alésages 35 à travers lesquels les tiges 36 sont également reçues D'autres organes formant tige 38 aptes à être reçus dans certains des alésages peuvent servir de pieds aux tambours 18, 24 des sections de distribution et de collection lorsque ceux-ci sont démontés de la colonne, et assurer la fonction de tiges de guidage lorsque les tambours doivent être assemblés à la colonne Trois ou plusieurs pieds , dont un seul est représenté, sont soudés à la bride 32 pour permettre de positionner la colonne au- dessus du sol sur

lequel elle est montée.

Les détails de la réalisation de la section de

dispersion pourront être compris en référence à la figure 2.

Une plaque de dispersion 42 est ainsi supportée, à partir de la tête formant plongeur supérieure 20, par l'intermédiaire d'une multiplicité de boulons ou organes de vissage ou éléments analogues 41, cette plaque étant réalisée de préférence en polypropylène ou en une matière similaire La plaque de dispersion 42 comporte un disque présentant une multiplicité de nervures (non représentées) espacées s'étendant radialement disposées sur la surface éloignée de la tête formant plongeur 20, c'est-à-dire la surface inférieure, et elle comprend un alésage central 44 qui est aligné avec un alésage central 46 de la tête formant plongeur Plusieurs trous 48, au nombre d'environ 12, sont disposés dans la plaque 42 entre les nervures et espacés radialement par rapport à l'alésage 44, tandis qu'une série similaire de trous 50 sont disposés dans la tête formant plongeur 20, ces trous étant espacés radialement par rapport à l'alésage 46 et alignés avec les trous 48 Au côté inférieur de la plaque de dispersion est assujetti une grille de support en matière plastique perforée 52 qui supporte un filtre en polyéthylène fritté 54, la grille de support 52 et le filtre 54 étant portés par la plaque de dispersion à l'aide de vis 53 vissées

dans les nervures espacées de la plaque de dispersion 42.

Ainsi, comme il est connu de l'art, le produit et le liquide tampon fournis à la tête formant plongeur supérieure 20 s'écoulent à travers les trous 50 et 48 pour pénétrer dans les passages de la plaque de dispersion entre les nervures, et ils sont dispersés de façon sensiblement uniforme sur la grille 52, puis sur le filtre 54, o ils sont filtrés, et ils s'écoulent vers le bas dans le milieu 55 contenu dans l'enceinte 12 La grille 52 et le filtre 54 présentent chacun un alésage central aligné avec l'alésage 44 de la plaque 42, et un écrou annulaire en matière plastique 56, présentant un alésage central 57, est reçu à travers lesdits alésages et est vissé dans la tête formant plongeur 20, une tête de grandes dimensions 59 de l'écrou portant contre le filtre 54

pour aider à fixer les éléments.

Conformément à un aspect de la présente invention, un logement de collecteur d'admission 58, comportant un assemblage coulé ou soudé comprenant une cavité 60 en forme de coupe inversée ayant un conduit d'entrée de produit et de tampon 62 s'étendant suivant un angle par rapport à la cavité et débouchant dans celle-ci, est assujetti à la surface supérieure de la tête formant plongeur 20 à l'aide de vis 63 ou éléments analogues Le logement de collecteur d'admission 58 comprend un tube de réception de buse 64 disposé en son centre et ayant un alésage interne 66 aligné avec l'alésage 46 de la tête formant plongeur 20 et débouchant sur ledit alésage 46 A l'intérieur de l'alésage 66 du tube 64 est disposé un corps de buse de pulvérisation creux allongé 68 ayant une tête de buse 70 au niveau de l'extrémité inférieure 71 comportant une multiplicité d'ouvertures 72 de forme ovale disposées sur la périphérie et dont l'extrémité inférieure est fermée, l'extrémité supérieure 74 du corps de buse étant raccordée à une ligne d'alimentation en milieu sous forme de

coulis (non représentée).

La buse est reçue à travers l'alésage central 57 de l'écrou de fixation 56, et dans la position de garnissage en milieu, illustrée sur la figure 2, elle s'étend en dessous de la tête 59 pour pénétrer dans l'enceinte 12 Dans cette position, le corps de buse 68 est serré contre l'extrémité supérieure du tube de réception de buse 64 par un dispositif de serrage tel qu'un dispositif en forme de trou de serrure compressible ou dispositif analogue 76 Le milieu, se présentant sous la forme d'un coulis ou d'un gel, peut alors être pompé à travers la buse pour pénétrer dans l'enceinte 12 Avant l'opération de séparation et de purification, le dispositif de serrage 76 est desserré et le corps de buse 68 est tiré vers le haut jusqu'à ce que la surface de l'extrémité inférieure 71 du corps de buse se situe sensiblement au même niveau que l'ouverture de l'écrou 56 En cet emplacement, l'alésage 57 est scellé et le corps de buse est serré de nouveau L'opération de séparation et de purification peut alors commencer par l'envoi à travers le

conduit d'entrée 62 de liquide tampon et de produit.

La section de captation 16 est similaire à la section de dispersion 14, sauf que l'ordre des éléments est inversé La tête formant plongeur inférieure 26 supporte une plaque de collection 78 boulonnée à celle-ci, la plaque de collection étant sensiblement identique à la plaque de dispersion 42, et elle porte une grille de support 80 et un filtre 82, qui lui sont assujettis de la même façon que les éléments de la section de dispersion, la grille 80 et le filtre 82 étant sensiblement identiques aux éléments de la section de dispersion De plus, la section de captation comporte un collecteur de sortie 84 sensiblement identique au collecteur d'admission 58 comprenant un conduit de sortie 86 et un tube 88 disposé centralement ayant un alésage interne 90 aligné avec, et débouchant sur des alésages de la tête formant plongeur 26 et la plaque de collection 78 Ici, la matière séparée, qui a été séparée dans le milieu contenu dans l'enceinte 12 de la colonne s'écoule sur le filtre 82, a travers la grille 80 et sur la surface de la plaque de captation 78 Les nervures de la plaque guident la matière séparée et purifiée vers des trous 92 disposés radialement autour de l'alésage central et à travers des trous 94 prévus dans la tête formant plongeur 26 similaires aux trous 50 de

la tête formant plongeur 20 de la section de dispersion.

Cette matière s'écoule ensuite du conduit 86 vers une soupape à trois voies (non représentée) en direction de récipients de captation de produit ou éléments analogues Une fois retiré le produit, le liquide tampon emprunte le même chemin, sauf que la soupape à trois voies l'achemine vers une canalisation

en vue de le renvoyer vers le conduit d'entrée 62.

Un autre tube, 98, ayant un conduit de sortie 100 qui est disposé suivant un angle par rapport à celui-ci, est serré à l'aide de moyens de serrage 96 contre le tube 88, à l'extrémité inférieure de ce dernier L'intérieur de l'extrémité inférieure de la partie principale du tube 98 reçoit un corps de support de tige 102, des parties formant brides externes du tube 98 et du corps 102 étant serrées l'une contre l'autre par des moyens de serrage 104 Le corps de support de tige a un intérieur creux comprenant un alésage à filetage interne agrandi au niveau de l'extrémité inférieure destiné à recevoir par vissage un organe formant bouchon 106 à filetage externe, le bouchon 106 présentant un alésage central qui reçoit une tige allongée creuse 108 et qui est assujetti à cette dernière à l'aide d'une vis de blocage ou moyen analogue 109 L'intérieur creux de la tige 108 définit un passage d'écoulement 107, pour des raisons qui deviendront évidentes ci-après Une poignée apte à s'engager manuellement, 110, est également assujettie à l'organe formant bouchon 106 pour faire tourner l'organe 106 afin de le faire pénétrer davantage dans le corps de support de tige 102 ou de le faire sortir davantage de celui-ci Comme représenté, la tige 108 s'étend vers le haut à travers les tubes 98 et 88, ce dernier étant muni de préférence, à son intérieur, d'une bague de guidage 111, et elle comporte une sonde 112 dont l'extrémité supérieure présente un bout sensiblement pointu La sonde comprend plusieurs ouvertures de pulvérisation 114 communicant avec le passage d'écoulement 107 de l'intérieur de la tige 108 L'extrémité inférieure de la tige est reliée à des moyens formant soupape 116, ainsi qu'à une ligne d'alimentation 118, qui est raccordée par l'intermédiaire d'un système à débranchement rapide (non

représenté) à la pompe d'alimentation en liquide tampon 119.

La dimension de la périphérie de la sonde 112 est sensiblement la même que celle de l'alésage d'un écrou 120, qui est sensiblement identique à l'écrou 56 de la section de dispersion, l'écrou 120 s'étendant à travers la plaque de captation, la grille et le filtre et étant vissé dans la tête

formant plongeur 26.

Au cours de l'opération de séparation, comme déjà décrit, le produit et le liquide tampon sont retirés séparément à travers le tube de sortie 86 Pendant cette période, la sonde est scellée par une garniture 122 à l'intérieur de l'écrou de fixation 120 qui agit dans ce cas en tant qu'élément d'étanchéité de la sonde, de sorte que l'intégralité du produit et du tampon s'écoule à travers le filtre 82, et à travers les trous 94 de la plaque 78 pour sortir par le conduit 86 Après que le milieu 55 ait été utilisé pendant une certaine période de temps et qu'il est usé, le bouchon 106 est entraîné en rotation à l'aide de la poignée 110 pour entraîner la tige 108 vers le haut de manière à faire rentrer la sonde 112 dans l'enceinte 12 Si le milieu s'est solidifié, la sonde pointue va le percer et le fragmenter lorsqu'elle s'introduit à force dans l'enceinte La ligne d'alimentation 118 est raccordée alors à la source d'alimentation en tampon, ce tampon étant fourni il à partir de la pompe 119 sous pression élevée à travers le passage d'écoulement 107 de la tige 108 et introduit par pulvérisation dans l'enceinte 12 à travers les ouvertures 114 pour liquéfier le milieu durci Lorsque le milieu se liquéfie, il peut s'écouler à travers l'ouverture centrale de l'écrou 122, autour de la tige 108, et sortir par le conduit , étant donné que le corps de support de tige 102 l'empêche de s'écouler vers le bas dans la direction du bouchon 106 Une fois que le milieu a été retiré, la tige 108 est abaissée vers la position de fermeture de l'enceinte, représentée sur la figure 3, la ligne 118 étant débranchée par le système à débranchement rapide L'enceinte 12 est

alors prête à être rechargée en milieu frais.

La tige 108 peut présenter une multiplicité d'ouvertures à venturi, telles qu'illustrées en 124, en des emplacements espacés longitudinalement de sorte que lorsque le tampon s'écoule à travers la tige, une force d'aspiration est créée pour aider à acheminer le milieu usé liquéfie à travers les tubes 88 et 98 depuis l'enceinte 12 De plus, si cela est considéré nécessaire, des orifices d'entrée de tampon 126 peuvent être inclus dans les parties périphériques inférieures de l'enceinte 12 pour permettre d'introduire le tampon sous pression directement dans l'enceinte pour

faciliter le processus d'élimination du milieu.

La présente invention propose ainsi un appareil et un procédé destinés à éliminer le milieu usé de l'enceinte d'une colonne de chromatographie et à réapprovisionner la colonne

en milieu frais sans nécessiter le démontage de la colonne.

Lorsque du milieu frais est fourni à la colonne de chromatographie, les écrous 36, qui sont vissés sur les tiges de fixation 34 sont desserrés de sorte que la tête formant plongeur supérieure 20 et les éléments qui sont assujettis à cette dernière puissent flotter librement jusqu'à ce que le milieu ait atteint le niveau souhaité Puis les écrous 36 sont serrés de nouveau pour comprimer le coulis constituant le milieu, comme déjà décrit Cependant, aucun démontage de

la colonne de chromatographie n'est requis.

De nombreuses modifications de la structure décrite dans

ces présentes se présenteront à l'esprit d'un homme de l'art.

Il est entendu, cependant, que la présente description se

rapporte au mode de réalisation préféré de l'invention, qui est décrit uniquement à titre d'illustration et qui ne doit pas être interprété comme imposant des limitations à l'invention Toutes ces modifications sont supposées être

comprises dans la portée des revendications annexées.

Claims (8)

REVENDICATIONS

1 Colonne de chromatographie ( 10) caractérisée en ce qu'elle comprend une enceinte creuse sensiblement cylindrique ( 12) destinée à retenir un lit de milieu ( 55) à travers lequel peuvent passer par percolation un mélange devant être séparé en substances constitutives et un liquide tampon, ladite enceinte ayant un axe longitudinal disposé sensiblement verticalement, une section de dispersion ( 14) située au niveau de la partie supérieure de ladite enceinte comprenant des moyens de dispersion ( 42, 52, 54) ayant pour fonction de recevoir et de disperser ledit mélange et ledit tampon de façon uniforme vers le bas dans ledit lit de milieu, et une section de captation ( 16), située au niveau de la partie inférieure de ladite enceinte, ladite section de captation comprenant une plaque de captation ( 78) présentant des moyens formant passage à travers lesquels lesdites substances constitutives et le liquide tampon peuvent s'écouler à partir de ladite enceinte, un collecteur de sortie ( 84) communiquant avec lesdits moyens formant passage pour recevoir lesdites substances constitutives et ledit liquide tampon, ledit collecteur ayant un orifice de sortie destiné à la décharge desdites substances constitutives et dudit tampon, un passage s'étendant à travers ladite plaque ( 78) et débouchant dans ladite enceinte ( 12), un conduit communiquant avec ledit passage pour recevoir du milieu usé lorsque ledit passage est ouvert, un orifice de sortie de milieu communiquant avec ledit conduit pour assurer la décharge dudit milieu de ladite colonne, une tige ( 108) présentant un passage d'écoulement interne ( 107) s'étendant à travers ledit conduit, une sonde ( 112) disposée sur une extrémité distale de ladite tige et présentant au moins une ouverture ( 114) communiquant avec ledit passage d'écoulement interne de ladite tige, ladite sonde étant disposée à l'intérieur dudit passage et étant configurée de façon à fermer ledit passage, des moyens ayant pour fonction de déplacer ladite tige par rapport audit conduit pour disposer ladite sonde en relation de fermeture avec ledit alésage et pour faire pénétrer ladite sonde dans ladite enceinte sélectivement, et des moyens ayant pour fonction d'envoyer du liquide à travers ledit passage d'écoulement interne et hors de ladite ouverture lorsque ladite sonde est disposée à l'intérieur de ladite enceinte de sorte que ledit liquide puisse déloger ledit milieu usé contenu à l'intérieur de ladite enceinte et porter ledit milieu à travers ledit alésage pour le faire pénétrer dans ledit conduit et sortir

par ledit orifice de sortie de milieu.

2 Colonne de chromatographie selon la revendication 1, caractérisée en ce que ladite section de captation ( 16) comprend une tête formant plongeur ( 26) apte à être reçu à coulissement à l'intérieur de ladite enceinte ( 12), des moyens de fixation ayant pour fonction de relier ladite plaque de captation à ladite tête en vue de sa mise en place à l'intérieur de ladite enceinte, ladite tête comprenant un passage communiquant avec lesdits moyens formant passage, des moyens ayant pour fonction d'assujettir ledit collecteur de sortie ( 84) à ladite tête formant plongeur, un alésage s'étendant à travers ladite tête formant plongeur communiquant avec ledit passage et ledit conduit, et ladite

tige ( 108) s'étendant à travers ledit alésage.

3 Colonne de chromatographie selon la revendication 1 ou 2, caractérisée en ce que ladite sonde ( 112) comprend une extrémité pointue éloignée de ladite tige pour à son contact

percer et fragmenter le milieu qui a pu se durcir.

4 Colonne de chromatographie selon la revendication 3, caractérisée en ce que ladite tige comporte des ouvertures à venturi ( 124) s'étendant à travers celle-ci pour aider à

aspirer le milieu usé à travers ledit conduit.

Colonne de chromatographie selon l'une quelconque des

revendications précédentes, caractérisée en ce qu'elle

comprend un filtre ( 82) assujetti à ladite plaque à distance de ladite tête formant plongeur ( 26), ledit filtre comportant un orifice, un élément d'étanchéité de sonde annulaire disposé dans ledit orifice et ayant une voie servant à faire communiquer ledit passage avec l'intérieur de ladite enceinte et à recevoir ladite tige à travers elle, ladite sonde ( 112) étant apte à S 'engager de façon étanche avec ladite voie pour fermer ladite enceinte de manière à l'empêcher de communiquer

avec ledit passage.

6 Colonne de chromatographie selon l'une quelconque des

revendications précédentes, dans laquelle lesdits moyens de

dispersion comprennent une plaque de dispersion ( 42), une tête formant plongeur de dispersion ( 20) assujettie à une surface supérieure de ladite plaque et un filtre ( 54) assujetti à une surface inférieure de ladite plaque, des moyens formant passage définis à travers ladite plaque de dispersion et ladite tête formant plongeur de dispersion et débouchant sur ledit filtre, un collecteur d'entrée comprenant un orifice d'entrée pour mettre ledit mélange et ledit tampon en communication avec lesdits moyens formant passage, un organe de guidage s'étendant à travers ledit collecteur d'admission, un alésage de guidage de buse ( 57) formé à travers ladite tête formant plongeur de dispersion ( 20), ladite plaque de dispersion ( 42) et ledit filtre ( 54) et mettant ledit organe de guidage en communication avec l'intérieur dudit logement, un corps de buse allongé ( 68) disposé à coulissement à travers ledit organe de guidage et ayant une tête de buse ( 70) adaptée sélectivement pour pénétrer dans ladite enceinte, ladite tête présentant une multiplicité d'orifices de pulvérisation pour fournir du milieu frais à ladite enceinte lorsqu'elle est positionnée à

l'intérieur de ladite enceinte.

7 Colonne de chromatographie selon la revendication 6, caractérisée en ce que ladite tête de buse ( 70) comprend une extrémité fermée pour fermer sélectivement ledit alésage de

guidage vis-à-vis de l'intérieur de ladite enceinte.

8 Colonne de chromatographie selon la revendication 6 ou 7, dans laquelle ladite section de captation ( 16) comprend des moyens ayant pour fonction de liquéfier le milieu durci

et à éliminer ledit milieu liquéfié de ladite enceinte.

9 Procédé de remplacement du lit de milieu dans une colonne de chromatographie à travers laquelle un mélange devant être séparé en substances constitutives et un liquide tampon peuvent passer par percolation depuis une section de distribution vers une section de captation sans nécessiter le démontage de ladite colonne, ledit procédé étant caractérisé en ce qu'il consiste à ouvrir un orifice de la section de captation pour mettre l'intérieur de ladite colonne en communication avec un conduit de sortie de milieu, à entrainer une sonde mobile à travers ledit orifice et dans la colonne pour percer et fragmenter du milieu durci, à pomper du fluide à travers ladite sonde pour le faire pénétrer dans ladite colonne pour déloger et iiquéfier ledit milieu de manière à ce que ce dernier puisse s'écouler à travers ledit orifice vers ledit Conduit de' sortie, et à-remp Dlir ladite colonne de milieu frais au niveau de la section de

'dispersion.

Procédé selon la revendication 9, caractérisé en ce que l'opération de chargement dudit milieu consiste à ouvrir un orifice de la section de dispersion, à insérer une buse mobile à travers ledit orifice et dans ladite colonne, et à envoyer le milieu à travers ladite buse pour remplir ladite colonne.