FR2611903A1 - Chambre de centrifugation pour l'examen cytologique de suspension de cellules - Google Patents

Abstract

CETTE CHAMBRE DE CENTRIFUGATION EST COMPOSEE D'UNE CHAMBRE A ECHANTILLON QUI RECOIT LA SUSPENSION DE CELLULES ET SUR LE FOND DE LAQUELLE EST DISPOSE UN PORTE-OBJET 3, TANDIS QUE, A PROXIMITE DE CE PORTE-OBJET, LA CHAMBRE PRESENTE DES OUVERTURES 16 A TRAVERS LESQUELLES LA SUSPENSION EST TRANSFEREE A UN COMPARTIMENT COLLECTEUR 35 PENDANT LA CENTRIFUGATION A GRANDE VITESSE. LA CHAMBRE EST CONSTITUEE PAR UN TUBE A ESSAIS DANS LEQUEL LA CHAMBRE A ECHANTILLON 2, 4 EST EMBOITEE POUR DIVISER LE TUBE EN UN COMPARTIMENT SUPERIEUR 34 ET UN COMPARTIMENT INFERIEUR 35.

Description

Chambre de centrifugation pour l'examen cytologique de

suspension de cellules.

L'invention concerne une chambre de centrifuga-

tion pour l'examen cytologique de suspensions de cellu-

les,composée d'une chambre à échantillon, qui reçoit la suspension de cellules, au niveau de la surface de fond de laquelle est disposé un porte-objet et cette chambre de centrifugation présentant des ouvertures, ménagées

dans la chambre à échantillon, à proximité du porte-ob-

jet et à travers lesquelles la suspension de cellules

est envoyée à un récipient collecteur pendant la centri-

fugation. Une telle chambre de centrifugation est déjà

connue par plusieurs inventions de la demanderesse.

L'objet de ces inventions consiste en ce que, pendant le processus de centrifugation, une partie de la suspension échantillon (plus précisément, la partie proximale) est

introduite dans une chambre voisine sans arrêter la cen-

trifugeuse. L'introduction se produisait dans ce cas à l'aide d'air comprimé, ce qui entraîne un accroissement

de la complication.

L'invention se donne donc pour but de perfec-

tionner une chambre de centrifugation du genre cité au

début de telle manière qu'avec une construction plus sim-

ple, on réussisse à transférer au moins une partie du li-

quide échantillon pendant le processus de centrifuga-

tion. Pour résoudre le problème posé, l'invention est

caractérisée par le fait que la chambre de centrifuga-

tion est constituée par un tube à essais dans lequel la

chambre à échantillon est emboîtée et forme de cette fa-

çon un compartiment récepteur supérieur et un comparti-

ment récepteur inférieur dans le tube à essais, que la chambre à échantillon est composée d'une partie fond de

chambre sur la paroi de fond de laquelle le porte-

objet est disposé et par le fait que, dans la région de la surface supérieure du porte-objet, sont aménagés des

éléments d'arrêt de l'écoulement qui arrêtent l'écoule-

ment de la suspension de cellules vers le compartiment récepteur inférieur, et qui ne laissent la suspension de cellules s'écouler du compartiment récepteur supérieur vers le compartiment récepteur inférieur en passant sur le porte-objet qu'à de grandes vitesses de rotation de

la centrifugeuse.

Une caractéristique essentielle consiste en ce

qu'un tube à essais est divisé en un compartiment récep-

teur inférieur et un compartiment récepteur supérieur par l'emboîtement d'une chambre à échantillon. Ici, la chambre à échantillon est disposée dans le compartiment récepteur supérieur et est remplie de la suspension de cellules à examiner. La chambre de centrifugation ainsi

composée est ensuite mise en place dans une centrifugeu-

se et centrifugée. Sous l'effet de la force centrifuge, les particules lourdes de la suspension échantillon se déplacent vers le porte-objet qui se trouve sur la paroi de fond de la chambre à échantillon. Il se produit alors

une sédimentation des cellules à examiner sur le porte-

objet. Selon l'invention, les éléments d'arrêt de

l'écoulement sont agencés entre le compartiment récep-

teur supérieur et le compartiment récepteur inférieur du

tube à essais, ces éléments étant de préférence suffisam-

ment étanches, jusqu'à une force centrifuge d'environ 50

g, pour que le liquide ne puisse pas s'échapper du com-

partiment récepteur supérieur vers le compartiment récep-

teur inférieur dans cette gamme de valeurs d'accéléra-

tion de la centrifugeuse, les cellules de la suspension

de cellules se déposent donc sur le porte-objet.

L'étanchéité de l'élément d'arrêt de l'écoule-

ment est donc directement fonction de la force centrifu-

ce. Il est préférable que l'élément d'arrêt de l'écoule-

ment soit constitué par une simple portée de fond en cou-

ronne de cercle de la partie supérieure de la chambre, qui est en appui par toute sa surface et exactement sur la surface du porte-objet. Une caractéristique importan- te consiste en ce que la pression d'application de la portée de fond en couronne de cercle dépend directement de la force centrifuge, c'est-à-dire que la portée de fond est pressée plus ou moins fortement sur la surface du porte-objet en fonction de la force centrifuge. Aux faibles forces centrifuges, dans le domaine d'environ g (g = accélération de la pesanteur), la pression du

liquide de la suspension qui se trouve dans le comparti-

ment récepteur supérieur n'est pas suffisante pour trou-

ver un passage suffisant entre la portée de fond en cou-

ronne de cercle de la partie supérieure de la chambre et

la surface du porte-objet qui lui correspond.

Au contraire, si l'on élève la force centrifuge

à environ 1500 g, la pression du liquide de la suspen-

sion de cellules qui se trouve dans le compartiment ré-

cepteur supérieur devient suffisamment forte pour que le

liquide migre sous la portée de fond en couronne de cer-

cle dans la direction radiale vers l'extérieur, vers le

bord du porte-objet et, pour que, de là, il soit transfé-

ré dans le compartiment récepteur inférieur du tube à es-

sais en passant par des canaux de liquide prévus (fentes

et rainures).

Après la fin de l'opération de centrifugation,

le liquide de l'échantillon est donc pratiquement entiè-

rement éjecté du compartiment récepteur supérieur et il

se trouve dans le compartiment récepteur inférieur tan-

dis que le porte-objet est recouvert des cellules à exa-

miner. Le porte-objet peut maintenant être aussitôt extrait et on peut procéder à une nouvel examen, ou bien, selon un perfectionnement de l'invention, il est

possible, après cette opération de sédimentation, d'arrê-

ter la centrifugeuse et d'introduire dans le comparti-

ment récepteur supérieur, qui est maintenant vidé, une cartouche de colorant qui contient un liquide colorant

approprié. Après la remise en marche de la centrifugeu-

se, le liquide s'échappe du récipient de colorant et pas-

se sur le porte-objet et colore l'ensemble de cellules

déposées sur ce porte-objet par la sédimentation.

Dans la présente invention, on revendique la protection pour deux formes de réalisation différentes de la chambre de centrifugation, à savoir, pour ce qu'on

appelle la "centrifugation sèche" et pour ce qu'on appel-

le la "centrifugation humide".

La "centrifugation sèche" consiste en ce qu'on fait en sorte que la suspension de cellules disposée dans le compartiment récepteur supérieur et qu'il s'agit d'examiner s'écoule entièrement et sans résidu dans le compartiment récepteur inférieur du tube à essais, de

sorte qu'après l'achèvement de l'opération de centrifuga-

tion, on obtient un porte-objet sec, sur lequel l'ensem-

ble de cellules à examiner s'est déposé par sédimenta-

tion.

Dans la deuxième forme de réalisation revendi-

quée, consistant dans la "centrifugation humide", on fait en sorte qu'il reste sur le porte-objet une couche

de liquide déterminée, de quelques dixièmes de millimè-

tres, qui ne peut pas s'écouler. On obtient de cette fa-

çon que le porte-objet est recouvert d'une couche humide

de l'ensemble de cellules à examiner.

Pour les deux procédés de centrifugation sèche et de centrifugation humide, il est possible d'utiliser

les cartouches de colorant décrites. En outre, pour com-

plèter les cartouches de colorant décrites, on peut éga-

lement utiliser d'une façon analogue des cartouches de

fixage ou équivalents.

Pour faciliter le montage de la chambre à échan-

tillon, qui est essentiellement composée d'une partie su-

périeure et d'une partie inférieure, il est prévu que la partie supérieure est constituée par une partie cylindri-

que creuse, en forme de gobelet, qui présente à son ex-

trémité supérieure une collerette annulaire de diamètre agrandi destinée à prendre appui sur le bord supérieur

du tube à essais.

La partie inférieure de la partie supérieure

est constituée par un collet de diamètre réduit, de sor-

te que la partie fond de la chambre peut être poussée de

bas en haut contre ce collet de diamètre réduit, la sur-

face latérale de la partie fond étant emboîtée sur le

collet de diamètre réduit de la partie supérieure.

Pour que l'emboîtement se produise avec blocage par friction et sans jeu, il est prévu que des fentes axiales soient pratiquées dans la surface latérale de la partie fond, à travers la paroi latérale, de sorte que

la paroi latérale subit une certaine modification de dia-

mètre lorsqu'on l'emboite sur la partie inférieure de la

partie supérieure de la chambre.

Pour obtenir une surface sèche sur le porte-ob-

jet, il est essentiel que la surface du porte-objet se trouve à peu près 0,2 mm au-dessus du bord correspondant

de la surface supérieure du fond, de manière que le li-

quide puisse s'écouler librement du porte-objet dans le

compartiment récepteur inférieur en passant par des fen-

tes et rainures ménagées dans la partie fond en présence

de forces centrifuges supérieures à 1500 g.

Dans le cas de la centrifugation humide, les fentes commencent à une hauteur de 1,2 mm au-dessus de la paroi de fond de la partie fond sur laquelle le

porte-objet est disposé. On obtient de cette façon, se-

lon l'épaisseur tolérée du porte-objet mis en place, une digue d'arrêt de l'écoulement d'une hauteur de 0,1 à 0,3 mm au-dessus de la surface du porte-objet. Ceci garantit que,dans la centrifugation humide, il restera une couche

de liquide sur le porte-objet.

Il est important par ailleurs que, sur la face inférieure de la partie fond, soit disposées des fentes radiales réparties sur la circonférence, qui présentent une profondeur d'environ 0,1 mm avec une largeur de 0,2 mm, afin d'éviter un arrêt trop rapide de l'écoulement de la suspension échantillon du compartiment récepteur

supérieur en direction du compartiment récepteur infé-

rieur à l'intérieur du tube à essais.

Une autre forme de réalisation d'un élément

d'arrêt de l'écoulement est constituée par une lèvre an-

nulaire, Dossédant l'élasticité du caoutchouc, qui entou-

re le collet inférieur de la partie supérieure de la

chambre, en formant un cercle fermé et qui ferme le dé-

bouché de fentes radiales qui sont disposées dans la cir-

conférence intérieure du collet inférieur de la partie supérieure de la chambre, et forme un passage de liquide

allant du compartiment récepteur supérieur au comparti-

ment récepteur inférieur de la chambre à échantillon.

Cette lèvre annulaire élastique sert donc de partie d'arrêt de l'écoulement, parce que la suspension de cellules qui est logée dans le compartiment récepteur supérieur est soumise du fait de la force centrifuge, à une haute pression de liquide dans les fentes radiales

décrites de la partie supérieure de la chambre, et exer-

ce une pression dirigée radialement vers l'extérieur sur

la lèvre annulaire.

Aux grandes forces centrifuges, cette lèvre

élastique se déplace radialement vers l'extérieur et li-

bère ainsi le débouché des fentes radiales en direction du compartiment récepteur inférieur de la chambre à

échantillon.

L'objet de la Drésente invention n'est pas seu-

lement constitué oar l'objet des revendications considé-

rées isolément mais il résulte également de la combinai-

son des différentes revendications.

Toutes les indications et caractéristiques dé- crites dans le document - y compris dans l'abrégé - en

particulier la configuration tridimensionnelle représen-

tée sur les dessins, sont revendiquées comme essentiel-

les pour l'invention, dans la mesure o elles sont nou-

velles comparativement à l'état de la technique, soit

isolément, soit en combinaison.

Dans la suite, l'invention est exposée de façon

plus détaillée en regard de dessins qui reDrésentent plu-

sieurs modes de réalisation. D'autres caractéristiques essentielles de l'invention ainsi que d'autres avantages

de l'invention ressortent des dessins et de leur descrip-

tion.

La figure 1 est une coupe d'une chambre de cen-

trifugation selon l'invention, dans sa configuration pré-

vue pour la centrifugation sèche;

la figure 2 est une coupe de la partie supérieu-

re de la chambre; la figure 3 est une vue de dessus de la partie supérieure de la chambre; la figure 4 est une vue de côté de la partie fond de la chambre; la figure 5 est une vue de dessus de la partie fond selon la figure 4; la figure 6 est une coupe de la partie fond, prise selon la ligne VI-VI; la figure 7 est une coupe de la même chambre de centrifugation que celle représentée sur la figure 1, avec la cartouche de colorant mise en place; la figure 8 est une coupe d'une variante de la chambre de centrifugation dans sa configuration prévue

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pour la centrifugation humide; la figure 9 est une coupe d'une troisième forme de réalisation d'une chambre de centrifugation munie d'une cartouche de colorant; la figure 10 représente la même chambre de cen-

trifugation que sur la figure 9, d'o la cartouche de co-

lorant a été extraite, et qui montre d'autres détails;

la figure 11 représente en coupe la partie supé-

rieure de la chambre de la forme de réalisation selon les figures 9 et 10; la figure 12 est une vue de dessus de la partie supérieure de la chambre selon la fiqure 11; la figure 13 est une vue de côté de la partie fond de la chambre selon les figures 9 et 10; la figure 14 est une vue de dessus de la partie fond de la chambre selon la figure 13; la figure 15 est une coupe prise selon la ligne XV-XV de la figure 14, et qui montre la partie fond de

la chambre.

La chambre de centrifugation selon l'invention est constituée par un tube à essais 1 qui constitue un

élément du type gobelet, de forme allongée et qui présen-

te un épaulement intérieur 7 qui sert à retenir la cham-

bre à échantillon selon l'invention. La chambre à échan-

tillon est constituée par une partie fond de chambre 2 qui est emboîtée sur une partie supérieure de chambre

4, un porte-objet 3 étant disposé entre les deux par-

ties. Selon la figure 2, la partie supérieure 4 de la chambre est constituée par un élément cylindrique creux

en forme de gobelet, qui présente une ouverture supérieu-

re définie sur tout le tour par une collerette annulaire

circonférentielle 12 de diamètre agrandi. La partie supé-

rieure 4 de la chambre est appuyée par cette collerette annulaire 12 sur le bord supérieur du tube à essais 1 comme indiqué sur la figure 1. Sur le côté inférieur de

la partie supérieure 4, est prévu un collet 13 de diamè-

tre réduit qui se termine par une ouverture de fond infé-

rieure 36.

Comme on le voit sur les figures 2 et 3, la par-

tie supérieure 4 est appuyée sur le porte-objet 3 au ni-

veau de son collet 13, par une -Dortée de fond annulaire 41. La partie supérieure 4 n'est donc pas suspendue au

tube à essais 1 par la collerette annulaire 12. La por-

tée de fond 41 forme alors, avec la surface de portée correspondante située sur le porte-objet 3, une section

de passage qui ne laisse passer le liquide qu'aux gran-

des vitesses de rotation de la centrifugeuse.

La partie fond 2 représentée sur les figures 4

à 6 est elle aussi constituée par un élément cylindri-

que, en forme de gobelet, qui présente une ouverture su-

périeure 38 définie par une paroi latérale annulaire 39

de la partie fond 2.

Dans la région de la paroi latérale 39, sont prévues des fentes axiales 16 qui se prolongent jusqu'à une petite distance au-dessus de la surface intérieure de la paroi de fond 37 et définissent à cet endroit un

collet 22 qui présente un bord supérieur 23.

D'une part, les fentes 16 servent à donner à la

paroi latérale 39 une certaine élasticité dans la direc-

tion radiale, afin qu'elle puisse être emmanchée sans

jeu sur le collet 13 de la partie supérieure 2 et, d'au-

tre part, les fentes 16 définissent le bord 23 du collet 22.

Dans la paroi de fond 37, est ménagée une ouver-

ture centrale 38 cependant que des fentes radiales 17,

qui partent de l'ouverture 18 et sont uniformément répar-

ties sur la circonférence, s'étendent vers l'extérieur

et débouchent au droit de la face externe de la paroi la-

térale 39.

Pour l'utilisation pratique, alors que la cham-

bre à échantillon est divisée en ses éléments, on pose tout d'abord un porte-objet 3, qui est constitué par un disque de verre, sur la surface intérieure de la paroi de fond 37 de la partie fond 2. Ensuite, on emmanche la paroi latérale 39 de la partie de fond 2 sur le collet 13 de la partie supérieure 4, l'épaulement 10 prévu sur

le bord supérieur de la partie fond 2 venant de cette fa-

çon en appui contre l'épaulement correspondant de la par-

tie supérieure 4 de la chambre et la portée de fond infé-

rieure 41 du collet 13 s'apDuyant de cette façon sans

jeu et à joint étanche sur la surface supérieure du por-

te-objet 3.

La chambre à échantillon composée de la partie fond 2 et de la partie supérieure 4 est ensuite mise en

place dans le tube à essais 1, comme indiqué sur la figu-

re 1, de sorte que la surface inférieure de la paroi de

fond 37 de la partie fond 2 vient s'appuyer sur l'épaule-

ment 7 du tube à essais 1.

A ce stade, l'appui sans jeu de la portée de fond 41 sur le porte-objet 3 évite que la suspension de cellules ne s'égoutte intemDestivement du compartiment

récepteur supérieur 34 du tube à essais 1 dans le compar-

timent récepteur inférieur 35. Ensuite, on centrifuge la chambre de centrifugation pendant une minute à environ g et, dans cette opération, les cellules à examiner

se déposent sur le porte-objet rond 3 sans que le liqui-

de ne s'échappe radialement vers l'extérieur entre la

portée de fond 41 et le porte-objet 3.

Lorsqu'on porte à 1500 g la force centrifuge (qui agit dans le sens des flèches 8), la pression du

liquide devient si forte que le liquide surnageant, pau-

vre en cellules, s'écoule radialement vers l'extérieur, dans la direction des flèches 19, entre la portée de fond 41 et la surface du porte-objet 3, puis est dévié axialement vers le bas puis, dans la partie de fond 2, s'écoule dans la région des fentes radiales 17 ménagées dans la face inférieure de la paroi de fond 37, o le

liquide échantillon s'écoule ensuite dans le comparti-

ment récepteur inférieur 35, dans le sens des flèches 20. Dans ce cas, il est important que le plan de la

portée de fond 41 situé à la face inférieure de la par-

tie supérieure 4 soit de niveau, au moins par son arête inférieure, avec le bord supérieur 23 du collet 22 de la

partie de fond 2, afin que la suspension échantillon con-

tenue dans le compartiment récepteur supérieur 34 s'écou-

le entièrement vers le bas, pour pénétrer dans le compar-

timent récepteur inférieur 35, pendant la centrifugation

(à grande vitesse de rotation). Ici, la surface du por-

te-objet 3 peut même être située à un niveau supérieur de 0,2 mm à celui du bord 23 de la partie fond 2 de la chambre, afin d'assurer un écoulement total du liquide

et d'obtenir par conséquent, une centrifugation sèche.

Dans le cas de la centrifugation humide selon la figure 8, le collet 24 est plus haut et forme un bord qui se trouve au-dessus du plan de la portée de fond 41, de sorte que ce collet 24 forme une résistance à

l'écoulement qui a Dour effet que, pendant la centrifuga-

* tion, le liquide de l'échantillon qui s'accumule sur le porte-objet 3 ne s'écoule pas entièrement. Ceci signifie que, en raison de la distance 26 entre le bord 25 et le plan de la portée de fond 41, il se forme une couche de liquide échantillon sur le porte-objet 3. La surface du

porte-objet 3 reste donc recouverte par cette couche.

Dans les deux formes de réalisation des figures 1, 8 et 9, il est prévu que l'on puisse introduire dans la chambre à échantillon une cartouche de colorant 5 qui présente un couvercle supérieur 28 et qui est remplie

d'un liquide colorant approprié. La cartouche de colo-

rant est de configuration cylindrique creuse et présente un fond 29 de configuration conique qui débouche dans une ouverture de sortie centrale 30 dont l'orifice est situé dans la région d'une fente annulaire 33, à petite distance au-dessus du porte-objet 3.

Pour réaliser des économies de poids et de ma-

tière, des évidements radiaux et latéraux 31 sont ména-

gés dans le fond de la cartouche de colorant 5.

La cartouche de colorant 5 est appuyée sur la collerette annulaire 12 de la partie supérieure 4 par

une collerette annulaire circonférentielle 32 de diamè-

tre agrandi et, ici encore, il se produit un appui sans

jeu entre les épaulements 10 et 11 de la partie supérieu-

re 4 et de la partie fond 2.

Dans la paroi latérale de la partie fond, on a donc pratiqué des fentes 27 plus courtes que les fentes 16 décrites plus haut, pour donner naissance à un collet

24 de plus grande hauteur.

Sur les figures 9 à 15, on a représenté une au-

tre forme de réalisation d'une chambre de centrifugation dont la différence essentielle, qui la distingue des exemples de réalisation précédents, réside dans le fait que l'élément d'arrêt de l'écoulement est constitué par

une lèvre annulaire 45 présentant l'élasticité du caout-

chouc et qui entoure le collet inférieur 13 de la partie supérieure 40 de la chambre, sans interruption sur sa circonférence. Les éléments représentés dans les exemples de

réalisation décrits plus haut sont désignés par les mê-

mes numéros de référence que pour la forme de réalisa-

tion selon les figures 9 à 15. Alors que la figure 9 mon-

tre la chambre de centrifugation avec la cartouche de co-

lorant 5 en place, la cartouche de colorant 5 est reti-

rée sur la figure 10.

Les figures 10 à 15 montrent d'autres détails

de la chambre de centrifugation.

La partie supérieure 40 de la chambre présente, à la jonction entre sa partie latérale supérieure 49 de grand diamètre et le collet 13, de plus petit diamètre, un épaulement 48 dans la région duquel sont disposées des dents de verrouillage 43 qui font saillie axialement vers le bas. Ces dents de verrouillage sont engagées dans des fentes axiales 46 correspondantes de la partie fond 42 de la chambre et facilitent ainsf l'assemblage en bonne position entre la partie supérieure 40 de la

chambre et la partie fond 42 de cette chambre.

En remDlacement d'une portée de fond 41 en for-

me de couronne de cercle, telle que celle qui a été dé-

crite dans les exemples de réalisation précédents, il est prévu ici une Dortée de fond 50 (figure 12) qui est

interrompue sur sa circonférence par des fentes 44 orien-

tées radialement. Les fentes 44 sont ici uniformément ré-

parties sur la circonférence de la portée de fond 50.

Contre la circonférence extérieure du collet

13, est appuyée une lèvre annulaire 45 possédant l'élas-

ticité du caoutchouc et qui ferme le débouché radiale-

ment extérieur des fentes 44.

Comme le montre la figure 10, la suspension de

cellules contenue dans le compartiment récepteur supé-

rieur 34 est également présente dans les fentes 44 et

l'écoulement de la suspension de cellules vers le compar-

timent récepteur inférieur 39 n'est.empêché que par la

lèvre annulaire élastique 45.

Toutefois, sous l'action d'une grande force cen-

trifuge, la pression du liquide s'accroit suffisamment dans le compartiment récepteur supérieur 34 pour que la

lèvre élastique 45 se déforme radialement vers l'exté-

rieur, cette lèvre se disposant alors dans un espace an-

nulaire libre 51 (figure 10). De cette façon, la lèvre 45 démasque le débouché radialement extérieur des fentes 44 et le liquide peut ainsi s'écouler librement, par les fentes 46 et les rainures 47 de la partie fond 42 de la chambre vers le compartiment récepteur inférieur 35

(voir figures 13 à 15).

L'exemDle de réalisation représenté sur les fi-

gures 9 et 10 montre la forme de réalisation d'une cham-

bre de centrifugation destinée à la centrifugation sèche et, là, il est visible que la surface du porte-objet 3 -se trouve au-dessus du niveau du bord 23 de la partie

fond 42 de la chambre.

Il est également prévu une centrifugation humi-

de pour cet exemple de réalisation. Pour cela, il suffit de faire en sorte, grâce à des mesures de construction, que le bord 23 de la partie fond 42 de la chambre se trouve à un niveau supérieur à celui de la surface du porte-objet 3 et, en même temps, que la lèvre élastique puisse se déformer radialement vers l'extérieur sans

être gênée par le bord 23 de la partie fond qui se trou-

ve maintenant à un niveau plus élevé.

Avec la chambre de centrifugation décrite, on

peut donc procéder à l'enduction d'un porte-objet, éven-

tuellement à une coloration et à un fixage d'un échantil-

lon de cellules déposé en suspension sur le porte-objet, le tout dans un mode de travail rapide et propre, sans grands frais et avec une réduction considérable du poids.

R E V E N D I C ATIONS

1 - Chambre de centrifugation pour l'examen cy-

tologique de suspensions de cellules, composée d'une

chambre à échantillon qui reçoit la suspension de cellu-

les, au niveau de la surface de fond de laquelle est dis-

posé un porte-objet, cette chambre de centrifugation pré-

sentant des ouvertures, ménagées dans la chambre à échan-

tillon dans le voisinage du porte-objet et à travers les-

quelles la suspension de cellules est envoyée à un réci-

pient collecteur pendant la centrifugation, caractérisée en ce que la chambre de centrifugation est constituée

par un tube à essais (1) dans lequel la chambre à échan-

tillon (2, 4, 6, 40, 42) est emboîtée et forme de cette

façon un compartiment récepteur supérieur (34) et un com-

partiment récepteur inférieur (35) dans le tube à es-

sais, en ce que la chambre à échantillon (2, 4, 6, 40, 42) est constituée par une partie fond de chambre (2, 6, 42) sur la paroi de fond de laquelle le porte-objet (3)

est disposé, et en ce que, dans le voisinage de la surfa-

ce du porte-objet (3), sont disposés des éléments d'ar-

rêt de l'écoulement (41, 45) qui arrêtent l'écoulement

de la suspension de cellules vers le compartiment récep- teur inférieur (35) et qui ne laissent la suspension de cellules s'écouler

du compartiment récepteur supérieur (34) vers le compartiment inférieur (35) en passant sur le porte-objet qu'à de grandes vitesses de rotation de

la centrifugeuse.

2 - Chambre de centrifugation selon la revendi-

cation 1, caractérisée en ce que le passage du liquide du compartiment supérieur (34) au compartiment récepteur

inférieur (35), à travers les éléments d'arrêt de l'écou-

lement (41, 45),ne se produit qu'à partir d'une accéléra-

tion centrifuge d'environ 1500 g.

3 - Chambre de centrifugation selon la revendi-

cation 1 ou 2, caractérisée en ce que l'élément d'arr.êt de l'écoulement est constitué par une portée de fond en couronne de cercle (41) de la partie supérieure (4) de la chambre qui s'appuie sur la surface du porteobjet (3) par toute sa surface et avec un poids renforcé par

la force centrifuge (figures 1-8).

4 - Chambre de centrifugation selon une des re-

vendications 2 et 3, caractérisée en ce que la partie su-

périeure (4) de la chambre est constituée par un élément cylindrique creux en forme de gobelet qui présente, à son extrémité supérieure une collerette annulaire (12)

de diamètre agrandi destinée à s'appuyer sur le bord su-

périeur du tube à essais (1), en ce que la partie infé-

rieure de la partie supérieure (4) de la chambre est constituée par un collet (13) de diamètre réduit et dont la face inférieure forme la portée de fond en couronne

de cercle (41) qui s'aDouie sur le porte-objet (3).

- Chambre de centrifugation selon une des re- vendications 2 et 3, caractérisée en ce que la partie

fond (2) de la chambre est constituée par un élément cy-

lindrique creux en forme de gobelet, qui présente sur son côté supérieur une première ouverture (38) qui est disposée à l'opposé d'une paroi de fond (37) munie d'une

deuxième ouverture centrale (18) ménagée dans cette pa-

roi de fond et en ce que, dans la face inférieure de la paroi de fond (37) sont ménagées des fentes radiales

(17) qui, d'une part, débouchent dans la deuxième ouver-

ture (18) et, d'autre part, traversent la surface latéra-

le de la partie fond (2).

6 - Chambre de centrifugation selon la revendi-

cation 5, caractérisée en ce que, dans la paroi latérale (39) de la partie fond (22), sont ménagées des fentes axiales (16) qui traversent la paroi latérale (39), de sorte que la paroi latérale (39) peut être emboîtée sur

le collet (13) de la partie supérieure (4) de la cham-

bre.

7 - Chambre de centrifugation selon une des re-

vendications 1 à 6, caractérisée en ce que les fentes ra-

diales (17) prévues dans la face inférieure de la paroi de fond (37) de la partie fond (2) présentent une profon-

deur d'environ 0,1 mm avec une largeur de 0,2 mm.

8 - Chambre de centrifugation selon la revendi-

cation 1, caractérisée en ce que l'élément d'arrêt de l'écoulement est constitué par une lèvre annulaire (45) possédant l'élasticité du caoutchouc et qui entoure le collet inférieur (13) de la partie supérieure (40) de la

chambre en formant un cercle fermé.

9 - Chambre de centrifugation selon la revendi-

cation 8, caractérisée en ce que la lèvre annulaire (45)

ferme le débouché des fentes radiales (44) qui sont pré-

vues dans la périphérie intérieure du collet inférieur

(13) de la partie supérieure (40) de la chambre et for-

ment un passage de liquide menant du compartiment supé-

rieur (34) de la chambre à échantillon au compartiment

inférieur (35) de cette chambre.

- Chambre de centrifugation selon une des re-

vendications 1 à 9, caractérisée en ce que, pour obtenir

une sédimentation sèche de l'échantillon sur le porte-ob-

jet (3), la portée de fond (41) prévue à la face infé-

rieure de la partie supérieure (4, 40) est situé à un ni-

veau supérieur ou égal à celui du bord supérieur (23) du

collet (22) de la partie fond (2).

11 - Chambre de centrifugation selon une des re-

vendications 1 à 10, caractérisée en ce que, pour obte-

nir une sédimentation humide de l'échantillon sur le por-

te-objet (3), la portée de fond (41) située à la face in-

férieure de la partie supérieure (4, 40) est située à un niveau inférieur (par exemple de 0,3 mm) à celui du bord

supérieur (25) du collet (24) de la partie fond (6).

12 - Chambre de centrifugation selon une des re-

vendications 10 et 11, caractérisée en ce que, dans la

partie supérieure (4, 40), on peut emboîter une cartou-

che de colorant (5) qui contient un liquide colorant et

qui pDrésente une ou plusieurs ouverture(s) de sortie ca-

librée(s) (30) qui débouche(nt) à une certaine. distance

au-dessus du porte-objet (3).