FI88310C - Foerfarande och medel foer bestaemning av urea - Google Patents
Foerfarande och medel foer bestaemning av urea Download PDFInfo
- Publication number
- FI88310C FI88310C FI905949A FI905949A FI88310C FI 88310 C FI88310 C FI 88310C FI 905949 A FI905949 A FI 905949A FI 905949 A FI905949 A FI 905949A FI 88310 C FI88310 C FI 88310C
- Authority
- FI
- Finland
- Prior art keywords
- indicator
- urea
- buffer
- milk
- base
- Prior art date
Links
- XSQUKJJJFZCRTK-UHFFFAOYSA-N Urea Chemical compound NC(N)=O XSQUKJJJFZCRTK-UHFFFAOYSA-N 0.000 title claims description 42
- 239000004202 carbamide Substances 0.000 title claims description 42
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims description 28
- 239000008267 milk Substances 0.000 claims description 27
- 210000004080 milk Anatomy 0.000 claims description 27
- 235000013336 milk Nutrition 0.000 claims description 27
- 239000000872 buffer Substances 0.000 claims description 19
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims description 19
- 108010046334 Urease Proteins 0.000 claims description 13
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 claims description 12
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 claims description 10
- 239000008363 phosphate buffer Substances 0.000 claims description 6
- 159000000000 sodium salts Chemical class 0.000 claims description 4
- ZPLCXHWYPWVJDL-UHFFFAOYSA-N 4-[(4-hydroxyphenyl)methyl]-1,3-oxazolidin-2-one Chemical compound C1=CC(O)=CC=C1CC1NC(=O)OC1 ZPLCXHWYPWVJDL-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- 239000007787 solid Substances 0.000 claims description 3
- BELBBZDIHDAJOR-UHFFFAOYSA-N Phenolsulfonephthalein Chemical compound C1=CC(O)=CC=C1C1(C=2C=CC(O)=CC=2)C2=CC=CC=C2S(=O)(=O)O1 BELBBZDIHDAJOR-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 238000003556 assay Methods 0.000 claims description 2
- 229960003531 phenolsulfonphthalein Drugs 0.000 claims description 2
- QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-N Ammonia Chemical compound N QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 6
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 4
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 4
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 4
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 4
- 238000007430 reference method Methods 0.000 description 4
- FHVDTGUDJYJELY-UHFFFAOYSA-N 6-{[2-carboxy-4,5-dihydroxy-6-(phosphanyloxy)oxan-3-yl]oxy}-4,5-dihydroxy-3-phosphanyloxane-2-carboxylic acid Chemical compound O1C(C(O)=O)C(P)C(O)C(O)C1OC1C(C(O)=O)OC(OP)C(O)C1O FHVDTGUDJYJELY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 241000283690 Bos taurus Species 0.000 description 3
- 239000004809 Teflon Substances 0.000 description 3
- 229920006362 Teflon® Polymers 0.000 description 3
- 229940072056 alginate Drugs 0.000 description 3
- 235000010443 alginic acid Nutrition 0.000 description 3
- 229920000615 alginic acid Polymers 0.000 description 3
- 229910021529 ammonia Inorganic materials 0.000 description 3
- 229910000403 monosodium phosphate Inorganic materials 0.000 description 3
- 235000019799 monosodium phosphate Nutrition 0.000 description 3
- AJPJDKMHJJGVTQ-UHFFFAOYSA-M sodium dihydrogen phosphate Chemical compound [Na+].OP(O)([O-])=O AJPJDKMHJJGVTQ-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- 239000003086 colorant Substances 0.000 description 2
- WQYVRQLZKVEZGA-UHFFFAOYSA-N hypochlorite Chemical compound Cl[O-] WQYVRQLZKVEZGA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000007654 immersion Methods 0.000 description 2
- 239000011148 porous material Substances 0.000 description 2
- 229940096055 prax Drugs 0.000 description 2
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 2
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 2
- 210000004767 rumen Anatomy 0.000 description 2
- 210000002700 urine Anatomy 0.000 description 2
- NYLGITXFVVEBLZ-UHFFFAOYSA-N 1-methylindazol-3-amine Chemical compound C1=CC=C2N(C)N=C(N)C2=C1 NYLGITXFVVEBLZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ATRRKUHOCOJYRX-UHFFFAOYSA-N Ammonium bicarbonate Chemical compound [NH4+].OC([O-])=O ATRRKUHOCOJYRX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 1
- DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M Ilexoside XXIX Chemical compound C[C@@H]1CC[C@@]2(CC[C@@]3(C(=CC[C@H]4[C@]3(CC[C@@H]5[C@@]4(CC[C@@H](C5(C)C)OS(=O)(=O)[O-])C)C)[C@@H]2[C@]1(C)O)C)C(=O)O[C@H]6[C@@H]([C@H]([C@@H]([C@H](O6)CO)O)O)O.[Na+] DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M 0.000 description 1
- ISWSIDIOOBJBQZ-UHFFFAOYSA-N Phenol Chemical compound OC1=CC=CC=C1 ISWSIDIOOBJBQZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000282849 Ruminantia Species 0.000 description 1
- 239000001099 ammonium carbonate Substances 0.000 description 1
- 235000012501 ammonium carbonate Nutrition 0.000 description 1
- -1 ammonium ions Chemical class 0.000 description 1
- PPBAJDRXASKAGH-UHFFFAOYSA-N azane;urea Chemical class N.NC(N)=O PPBAJDRXASKAGH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000002585 base Substances 0.000 description 1
- 235000019577 caloric intake Nutrition 0.000 description 1
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 1
- 238000001035 drying Methods 0.000 description 1
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 1
- 210000003953 foreskin Anatomy 0.000 description 1
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 1
- 230000007062 hydrolysis Effects 0.000 description 1
- 238000006460 hydrolysis reaction Methods 0.000 description 1
- 238000005470 impregnation Methods 0.000 description 1
- 244000144972 livestock Species 0.000 description 1
- 230000004060 metabolic process Effects 0.000 description 1
- 230000000813 microbial effect Effects 0.000 description 1
- 238000012544 monitoring process Methods 0.000 description 1
- 238000005192 partition Methods 0.000 description 1
- 239000007793 ph indicator Substances 0.000 description 1
- 210000002381 plasma Anatomy 0.000 description 1
- 235000021075 protein intake Nutrition 0.000 description 1
- 230000035484 reaction time Effects 0.000 description 1
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 1
- 229910052708 sodium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 1
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 1
- 239000004094 surface-active agent Substances 0.000 description 1
- 239000012085 test solution Substances 0.000 description 1
Classifications
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/02—Food
- G01N33/04—Dairy products
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
- C12Q1/00—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
- C12Q1/58—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving urea or urease
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Food Science & Technology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Immunology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Zoology (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Biophysics (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- General Physics & Mathematics (AREA)
- Pathology (AREA)
- Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
- Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
- Investigating Or Analysing Materials By The Use Of Chemical Reactions (AREA)
Description
1 883:0
Menetelmä ja testiväline urean määrittämiseksi
Keksinnön kohteena on menetelmä ja testiväline urean määrittämiseksi näytteestä ureaasin, emäksen ja in-5 dikaattorin avulla. Menetelmä soveltuu erityisesti maidon ureapitoisuuden pikamääritykseen.
Märehtijän, kuten lehmän, aineenvaihduntaan vaikuttavat oleellisesti pötsin ja etumahojen toiminnat. Rehujen hyväksikäyttöön vaikuttaa pötsin mikrobien energian ja 10 valkuaisaineiden saanti. Jos energian ja valkuaisaineiden saannit eivät ole tasapainossa, rehuvalkuaisten hyväksikäyttö huononee. Tämä näkyy mm. veren ureatason nousuna ruokinnan jälkeen.
Useissa tutkimuksissa maidossa olevan urean määrän 15 on todettu noudattavan ureamäärän vaihteluja veressä (esim. Oltner & Wiktorsson 1983, Livestock Prod.Sei. 10:457, Refsdal 1983, Acta Vet.Scand. 24:518). Ureamäärän vaihtelu veressä ja myöskin maidossa aiheutuu suurelta osin ruokinnan muutoksista (esim. Refsdal ja Oltner & 20 Wiktorsson, yllä). Tästä syystä maidon ureapitoisuutta on käytetty ruokinnan seurannassa ruokinnan onnistumisen indikaattorina. Normiruokinnalle urea-alueeksi on todettu 20-30 mg ureaa 100 ml:ssa maitoa (Setälä ym. 1987, Karjatalous 10:52 ja 11:54).
25 Urea voidaan määrittää menetelmällä, jossa urea hajotetaan ureaasilla ammoniumkarbonaatiksi ja ammoniumio-nit saatetaan reagoimaan fenolin ja hypokloriitin kanssa spektrofotometrisesti määritettävän sinisen yhdisteen saamiseksi (Fawcett & Scott 1960, J. Clin. Path. 13:156). 30 Menetelmää on myös sovellettu maidolle (esim. Rajamäki & Rauramaa 1984, Finnish Chemical Letters 2:47-48).
Kun ureamäärityksestä halutaan hyötyä mahdollisimman tehokkaasti, ureamääritys tulisi suorittaa lehmien luona navetassa ns. "cow side "-pikatestinä. Siihen yllä 35 mainittu menetelmä ei sovi, koska se on suoritettava labo-
2 38 3 iQ
ratoriossa.
Urea voidaan myös määrittää siten, että ureaa sisältävä näyte saatetaan reagoimaan ureaasin kanssa ja hyd-rolyysituotteen aiheuttama pH:n muutos havaitaan sopivalla 5 indikaattorilla. Menetelmää käytetään esim. veren, plasman ja virtsan ureapitoisuuden määrittämiseksi (GB-patentti-julkaisu 922 665). Tähän perustuvaa liuskatestiä maidolle on esitetty julkaisussa Tierärtzl. Prax. 1985, 13:559.
Liuskatestien haittana on yleisesti se, että ne 10 pystyvät analysoimaan vain äärimmäisen pienen näytemäärän, jolloin saatu tulos jää usein epäluotettavaksi. Tulos vaihtelee pienestä näytemäärästä johtuen ja testin tekijän tavasta pipetoida näyte liuskalle tai kastaa liuska tutkittavaan liuokseen. Tämä ongelma pahenee vielä siitä, 15 että kun testiliuska kastetaan maitoon, maito sinänsä häiritsee värimuutoksen tarkkaa tulkintaa liuskasta. Maidon häiritsevän vaikutuksen poistamiseksi on kehitetty liuskoja, joissa reaktiovyöhyke, joka tulee kosketukseen maidon kanssa, on sijoitettu indikaattorivyöhykkeen viereen 20 (FI-hakemusjulkaisu 891920). Reaktiovyöhyke sisältää ureaasia, emästä, glukoosia ja tensidiä. Liuskaa pidetään vain toisesta päästä suljetussa putkessa kunnes reaktio-vyöhykkestä vapautunut ammoniakki on diffundoitunut indi-kaattorivyöhykkeeseen, mikä on hidasta. Liuskat luetaan 25 edullisesti vasta kahden tunnin päästä.
Nyt on keksitty urean määritysmenetelmä, joka on luotettavampi kuin maitoon upotettavat liuskat ja nopeampi kuin liuska, jossa indikaattorivyöhyke on sijoitettu maitoon upotettavan reaktiovyöhykkeen viereen ja jota reak-30 tioaikana pidetään toisesta päästä suljetussa putkessa.
Keksinnön mukaiselle menetelmälle ja testivälineel-le on tunnusomaista se, mitä patenttivaatimuksissa esitetään. Menetelmässä näyte saatetaan reagoimaan ureaasin ja emäksen kanssa ja ainakin reaktio emäksen kanssa suorite-35 taan suljetussa tilassa, johon indikaattorijärjestelmä on 3 88310 sijoitettu siten, ettei se ole muiden reagenssien kanssa kosketuksessa. Näyte voidaan ensin saattaa reagoimaan ureaasin kanssa ja sitten vasta emäksen kanssa, jolloin ainakin viimeksi mainittu reaktio suoritetaan mainitussa 5 suljetussa tilassa. Jos näyte sen sijaan saatetaan reagoimaan ureaasin ja emäksen kanssa yhtaikaa koko reaktio suoritetaan suljetussa tilassa. Testiväline käsittää suljetun tilan, jossa ainakin reaktio emäksen kanssa suoritetaan ja jossa indikaattorijärjestelmä sijaitsee siten, et-10 tei se ole kosketuksessa muiden reagenssien kanssa.
Reaktioreagenssit käsittävät ureaasia ja emästä. Ureaasi pilkkoo tutkittavan näytteen urean ammoniumsuo-loiksi ja emäs vapauttaa ammoniakin suoloista. Ammoniakki imeytyy indikaattorijärjestelmään ja aiheuttaa pH-indi-15 kaattorin värinmuutoksen tietyn ajan kuluessa.
Indikaattorijärjestelmä käsittää yhden tai useamman pH-indikaattorin. Indikaattori liuotetaan yleensä sopivaan puskuriin. Voidaan myös käyttää useampia tällaisia puskuri/indikaattori-seoksia, jotka muuttavat väriä eri 20 pH-arvossa. Maidon ureapitoisuuden määritys suoritetaan edullisesti ns. kaksoistestinä. Ko. kaksoistestin pusku-ri/indikaattori-seokset ovat edullisesti sellaiset, että ureapltoisuus <20 mg/100 ml ei vielä aiheuta värinmuutosta kummassakaan puskuri/indikaattoriseoksessa, mutta pitoi-.25 suudella 20-30 mg/100 ml reagoi toinen puskuri/indikaatto-ri-seos ja kun ureaa on enemmän kuin 30 mg/100 ml reagoi kumpikin puskuri/indikaattori-seos.
Edullisesti puskuri/indikaattori-seokset sisältävät kumpikin fosfaattipuskuria, mutta eri pitoisuuksissa. Edulli-30 sesti fosfaattipuskurit sisältävät fenolipunan natriumsuo-laa ja bromtymolsinin natriumsuolaa esimerkiksi painosuhteessa 1:1. Toinen fosfaattipuskuri on edullisesti 0,00025M ja toinen 0,00230M natriumdivetyfosfaattipuskuri.
indikaattorijärjestelmä voi olla joko nestemäisessä 35 tai kiinteässä muodossa. Nestemäisessä muodossa oleva in- 4 88310 dikaattorijärjestelmä voidaan erottaa muista reagensseista kaasua läpäisevällä kalvolla. Kalvo voi olla esimerkiksi teflonputkiteippiä tai teflonsuodatinkalvoa, jonka huokoskoko on 0,5 pm. Indikaattorijärjestelmä voidaan edulli-5 sesti saattaa kiinteään muotoon alginaatin avulla ja/tai imeyttämällä suodatinpaperiin ja kuivaamalla.
Indikaattorijärjestelmä sijoitetaan edullisesti suljettavan astian kanteen. Kansi saattaa olla kaksiosainen, jolloin siihen sijoitetaan kaksi erilaista puskuri/-10 indikaattori-seosta. Astian pohjalle lisätään ureaasi, näyte ja emäs ja kansi suljetaan tiiviisti. Tietyn ajan päästä luetaan indikaattorijärjestelmän värit. Keksinnön mukainen menetelmä soveltuu erityisesti maidon ureapitoi-suuden määrittämiseksi, mutta myös muut näytteet kuten 15 virtsa voivat tulla kysymyksen.
Keksintöä havainnollistetaan seuraavien esimerkkien avulla.
Esimerkki 1.
Puskuri/indikaattori-seosta I, joka sisältää 25 mg 20 fenolipunan natriumsuolaa, 25 mg bromtymolsinin natrium-suolaa ja 3g alginaattia 100 ml:ssa 0,00025M natriumdive-tyfosfaattia imeytetään suodatinpaperiin. Puskuri/indi-kaattori-seosta II, joka on samanlainen kuin I paitsi, että natriumdivetyfosfaatin pitoisuus on 0,00230M imeyte-25 tään toiseen suodatinpaperiin. Paperit kuivataaan 90eC:ssa 60 min. ja sijoitetaan sitten 10 ml:n tiiviskannellisen astian kaksiosaiseen kanteen siten, että papereita erottaa kannessa oleva väliseinä. Astian pohjalle laitetaan ureaa-sia (noin 60 - 250 U) kiinteänä tai liuoksena. Astiaan li-30 sätään 1 ml maitoa ja 2,5 minuutin kuluttua 0,5 - 1 ml 0,1M NaOH ja suljetaan kansi. 2,5 minuutin kuluttua luetaan testiastian kanteen muodostuneet puskuri/indikaatto-ri-seosten I ja II värit. Tulokset verrataan värikarttaan ja tulkitaan seuraavasti: i 5 88319
Testiastian kannen Näytteen ureapitoisuus väriyhdistelmä mg/100 ml keltainen/keltainen < 20 5 oranssi-punainen/keltäinen 20 - 30 oranssi-punainen/oranssi-punainen > 30
Esimerkki 2 10 Ureapitoisuudet määritettiin 118 maitonäytteestä esimerkin 1 mukaisella menetelmällä ja spektrofotometri-sella referenssimenetelmällä ( Fawcett & Scott 1960, J. Clin. Path. 13:156). Tulokset on esitetty taulukossa 1.
15
Taulukko 1. Maitonäytteiden jakautuminen (kpl) eri ureapitoisuusluokkiin
Ureaa mg/100ml < 20 20-30 > 30 20 _ <20 17 3 20-30 2 34 3 > 30 - 8 51 • 25 Ref.menetelmä yht./kpl 19 45 54 118
Keksinnön mukaisella menetelmällä arvioitiin 86,4 30 % näytteistä oikeaan luokkaan referenssimenetelmään ver rattuna. Taulukossa 2 on esitetty vastaava näytejakautuma, kun huomioidaan referenssimenetelmän sisäinen hajonta (+ 5 %). Tällöin oikeaan luokkaan arvioitujen näytteiden osuus on 94,1 %.
/ 35 6 8 8 3' ι Ο
Taulukko 2. Maitonäytteiden jakautuminen (kpl) eri ureapitoisuusluokkiin
Ureaa mg/100ml < 20 20-30 > 30 5 _ < 20 18 1 20-30 1 40 1 > 30 - 4 53 10 Re f.menetelmä yht./kpl 19 45 54 118
Esimerkki 3.
15 Tilakäyttöön tarkoitetuilla testiliuskoilla (S)
Azostix (Tierärtzl. Prax. 1985, 13:559), yllä mainitulla referenssimenetelmällä sekä keksinnön mukaisella menetelmällä määritettiin ureapitoisuudet 64 maitonäytteestä. Tulokset on esitetty taulukoissa 3 ja 4.
20
Taulukko 3. Maitonäytteiden jakautuminen (kpl) eri ureapitoisuusluokkiin testiliuskalla 25 Ureaa mg/100ml < 20 20-30 > 30 <20 7 20-30 6 21 5 >30 - 1 24 30 _
Ref.menetelmä yht./kpl 13 22 29 64 35 Testiliuskalla arvioitiin 82,8 % näytteistä (53/64) 7 88310 oikeaan luokkaan.
Taulukko 4. Maitonäytteiden jakautuminen eri ureapitoi- 5 suusluokkiin keksinnön mukaisella menetelmällä
Ureaa mg/100 ml < 20 20-30 > 30 <20 13 2 10 20-30 - 17 2 > 30 - 3 27
Ref.menetelmä yht. /kpl 13 22 29 64 15
Keksinnön mukaisella menetelmällä arvioitiin 89,1 % näytteistä (57/64) oikeaan luokkaan.
20
Esimerkki 4.
4 ml:n astiaan lisättiin 0,5 ml esimerkissä 1 mainittua puskuri/indikaattori-seosta I, joka oli nestemäisessä muodossa ts. se ei sisältänyt alginaattia. Astian 25 suu peitettiin teflonkalvolla, jonka huokoskoko oli 0,5 pm. Toiseen samanlaiseen astiaan lisättiin 0,2 ml maitoa ja noin 15 U ureaasia. 2,5 minuutin kuluttua siihen lisättiin 200 μΐ 0,1 M NaOH. Puskuri/indikaattori-seosta sisältävä astia ja näytteen ja muut reagenssit sisältävä astia 30 yhdistettiin suut vastakkain teipillä siten, että saatiin täysin suljettu tila, jossa kaasua läpäisevä kalvo erotti puskuri/indikaattori-seoksen muista reagensseista. Näin yhdistetyt astiat sekoitettiin 1 minuutti, minkä jälkeen indikaattoriseoksen väri luettiin. Tehtiin rinnakkaismää-35 ritys, jossa käytettiin nestemäistä esimerkissä 1 mainit- β 88310 tua puskuri/indikaattori-seosta II. Tulokset tulkittiin kuten esimerkissä 1. 24 maitonäytteen ureapitoisuudet määritettiin. Oikeaan luokkaan arvioitiin 87,5 % näytteistä. Tulokset on esitetty taulukossa 5.
5
Taulukko 5. Maitonäytteiden jakautuminen (kpl) eri ureapitoisuusluokkiin 10 Ureaa mg/100ml < 20 20-30 > 30 <20 6 20-30 18 1 >30 - 1 7 15
Ref.menetelmä yht./kpl 79 8 24
Claims (10)
- 9 8 8 3 i O
- 1. Menetelmä maidon ureapitoisuuden määrittämiseksi ureaasin, emäksen ja indikaattorin avulla, t u n - 5. e t t u siitä, että ainakin reaktio emäksen kanssa suoritetaan suljetussa tilassa, johon indikaattorijärjestelmä on sijoitettu siten, ettei se ole kosketuksessa muiden reagenssien kanssa.
- 2. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, 10 tunnettu siitä, että ainakin reaktio emäksen kanssa suoritetaan suljetussa astiassa, jonka kanteen indi-kaattorijärjestelmä on sijoitettu.
- 3. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että määritys suoritetaan kaksois- 15 testinä käyttäen indikaattorijärjestelmää, joka käsittää kaksi puskuri/indikaattori-seosta, jotka muuttavat väriä eri pH-arvossa.
- 4. Patenttivaatimuksen 3 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että toinen puskuri/indikaattori- 20 seos muuttaa väriä ureapitoisuuden ollessa vähintään 20 mg/100 ml ja toinen puskuri/indikaattori-seos muuttaa väriä ureapitoisuuden ylittäessä 30 mg/100 ml.
- 5. Patenttivaatimuksen 4 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että puskuri/indikaattori-seokset 25 sisältävät kahta eri pitoisuutta olevaa fosfaattipuskuria.
- 6. Patenttivaatimuksen 5 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että fosfaattipuskurit sisältävät fenolipunan natriumsuolaa ja bromtymolsinin natriumsuolaa painosuhteessa 1:1. . 30 7. Testiväline maidon ureapitoisuuden määrittämi seksi ureaasin, emäksen ja indikaattorin avulla, tunnettu siitä, että se käsittää suljetun tilan, jossa ainakin reaktio emäksen kanssa suoritetaan ja jossa indikaattori järjestelmä sijaitsee siten, ettei se ole koske- ·. 35 tuksissa muiden reagenssien kanssa. 10 8 8 3 Ί 0
- 8. Patenttivaatimuksen 7 mukainen testiväline, tunnettu siitä, että indikaattorijärjestelmä on kiinteässä muodossa.
- 9. Patenttivaatimuksen 7 mukainen testiväline, 5 tunnettu siitä, että se käsittää suljettavan astian, jossa indikaattorijärjestelmä on kannessa ja muut reagenssit pohjassa.
- 10. Patenttivaatimuksen 7 mukainen testiväline, tunnettu siitä, että se käsittää kaksoistestiin 10 tarvittavat patenttivaatimuksessa 3, 4, 5 tai 6 mainitut reagenssit. i H 8831 0
Priority Applications (7)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| FI905949A FI88310C (fi) | 1990-12-03 | 1990-12-03 | Foerfarande och medel foer bestaemning av urea |
| IE392091A IE913920A1 (en) | 1990-12-03 | 1991-11-11 | A process and a test means for the determination of urea |
| SE9103370A SE512818C2 (sv) | 1990-12-03 | 1991-11-14 | Förfarande och testanordning för bestämning av urea |
| GB9125040A GB2250590A (en) | 1990-12-03 | 1991-11-26 | Determination of urea |
| NO914711A NO302387B1 (no) | 1990-12-03 | 1991-11-29 | Fremgangsmåte og pröveanordning for bestemmelse av urea |
| DK195091A DK195091A (da) | 1990-12-03 | 1991-12-02 | Assayfremgangsmaade og -anordning |
| EE9400033A EE02945B1 (et) | 1990-12-03 | 1994-07-11 | Meetod ja katseseade karbamiidi määramiseks |
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| FI905949 | 1990-12-03 | ||
| FI905949A FI88310C (fi) | 1990-12-03 | 1990-12-03 | Foerfarande och medel foer bestaemning av urea |
Publications (4)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| FI905949A0 FI905949A0 (fi) | 1990-12-03 |
| FI905949L FI905949L (fi) | 1992-06-04 |
| FI88310B FI88310B (fi) | 1993-01-15 |
| FI88310C true FI88310C (fi) | 1993-04-26 |
Family
ID=8531506
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| FI905949A FI88310C (fi) | 1990-12-03 | 1990-12-03 | Foerfarande och medel foer bestaemning av urea |
Country Status (7)
| Country | Link |
|---|---|
| DK (1) | DK195091A (fi) |
| EE (1) | EE02945B1 (fi) |
| FI (1) | FI88310C (fi) |
| GB (1) | GB2250590A (fi) |
| IE (1) | IE913920A1 (fi) |
| NO (1) | NO302387B1 (fi) |
| SE (1) | SE512818C2 (fi) |
Families Citing this family (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| FR2731276A1 (fr) * | 1995-03-03 | 1996-09-06 | D Aquitaine Comp Chimique | Bandelette, ensemble et procede de mesure pour estimer le niveau d'uree dans le lait, utilisation pour les ruminants |
| EP1754973B1 (de) * | 2005-07-26 | 2010-11-03 | Raudszus Electronic GmbH | Verfahren und Vorrichtung zur Probennahme und unmittelbaren Analyse fliessfähiger Sammelgutmengen, insbesondere von Milchlieferungen |
| CN102539421A (zh) * | 2010-12-21 | 2012-07-04 | 内蒙古蒙牛乳业（集团）股份有限公司 | 一种乳中尿素定性检测方法 |
Family Cites Families (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| DE2711634A1 (de) * | 1977-03-17 | 1978-09-21 | Riedel De Haen Ag | Testvorrichtung zur bestimmung von harnstoff in fluessigkeiten |
| EP0339331A3 (de) * | 1988-04-29 | 1990-09-19 | ARZNEIMITTELWERK DRESDEN GmbH | Teststreifen zur Bestimmung von Harnstoff und seine Anwendung |
-
1990
- 1990-12-03 FI FI905949A patent/FI88310C/fi not_active IP Right Cessation
-
1991
- 1991-11-11 IE IE392091A patent/IE913920A1/en not_active Application Discontinuation
- 1991-11-14 SE SE9103370A patent/SE512818C2/sv not_active IP Right Cessation
- 1991-11-26 GB GB9125040A patent/GB2250590A/en not_active Withdrawn
- 1991-11-29 NO NO914711A patent/NO302387B1/no not_active IP Right Cessation
- 1991-12-02 DK DK195091A patent/DK195091A/da not_active Application Discontinuation
-
1994
- 1994-07-11 EE EE9400033A patent/EE02945B1/xx not_active IP Right Cessation
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| GB2250590A (en) | 1992-06-10 |
| IE913920A1 (en) | 1992-06-03 |
| FI905949L (fi) | 1992-06-04 |
| FI88310B (fi) | 1993-01-15 |
| SE9103370D0 (sv) | 1991-11-14 |
| NO914711L (no) | 1992-06-04 |
| SE9103370L (sv) | 1992-06-04 |
| EE02945B1 (et) | 1996-10-15 |
| DK195091D0 (da) | 1991-12-02 |
| GB9125040D0 (en) | 1992-01-22 |
| NO302387B1 (no) | 1998-02-23 |
| FI905949A0 (fi) | 1990-12-03 |
| NO914711D0 (no) | 1991-11-29 |
| DK195091A (da) | 1992-06-04 |
| SE512818C2 (sv) | 2000-05-22 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| EP0171150B1 (en) | Method and apparatus for assaying with optional reagent quality control | |
| CA1104928A (en) | Oxidizing phenolic compounds in enzymatic immunoassay | |
| CA1206878A (en) | Quantitative analysis apparatus and method | |
| Scott et al. | The presence of oxygen in rumen liquor and its effects on methanogenesis | |
| JPH0684970B2 (ja) | 糞便中の潜血検出方法 | |
| KR950019732A (ko) | 뇨 단백질 및 크레아티닌의 측정방법 | |
| KR900700883A (ko) | 식육의 질을 평가하기 위한 스카톨의 검출방법 | |
| CN103175965A (zh) | 一种大便隐血检测试剂盒及制备方法 | |
| RU2232991C1 (ru) | Способ определения функциональной активности фактора d комплемента человека | |
| FI88310C (fi) | Foerfarande och medel foer bestaemning av urea | |
| US3531254A (en) | Test article and method for the detection of urea | |
| FI875210A0 (fi) | Foerfarande och testanordning foer paovisning av ett aemne i ett prov. | |
| US3771964A (en) | Test composition and device for ascorbic acid determination | |
| US4141856A (en) | Reference material for establishing anion concentrations in analytical chemistry tests | |
| EP0632133A4 (en) | METHOD AND COMPOSITION FOR DETECTING WITH HIGH SENSITIVITY D-3-HYDROXYBUTYRIC ACID OR DIACETIC ACID. | |
| US3233974A (en) | Diagnostic compositions | |
| EP0124285A2 (en) | Method and device for detecting microorganisms | |
| US3778384A (en) | Diagnostic composition for the quantitative determination of glucose | |
| US3530040A (en) | Test composition,device and method for detecting urea in aqueous fluids | |
| FI98864C (fi) | Menetelmä ja testiväline asetonin määrittämiseksi | |
| US3293147A (en) | Measuring the presence of enzyme reactions | |
| US5552297A (en) | Lead detection method and reggents utilizing aminolevulinic acid dehydratase and tertiary phosphines | |
| FI97425B (fi) | Monikerroksinen diagnostinen koe-elementti | |
| CN216247993U (zh) | 一种莱克多巴胺快速检测卡 | |
| EP0806671B1 (en) | Automated urinalysis system for detecting blood in urine |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| BB | Publication of examined application | ||
| FG | Patent granted |
Owner name: VALIO MEIJERIEN KESKUOSUUSLIIKE |
|
| MA | Patent expired |