FI86417C - Foerfarande foer framstaellning av acetyldikarnitin. - Google Patents

Description

8641 7 ASETYYLIDIKARNITIININ VALMISTUSMENETELMÄ

Kyseessä oleva keksintö koskee dikarnitiinin molekyylien välistä esteriä, jolla on terapeuttista vaikutusta.

Erityisesti kyseessä oleva keksintö koskee asetyylidi-karnitiinin dikloridia, jolla on seuraava yleinen kaava:

CH

I 3 , CH 0^-CH -CH-CH -COOH CH 2 Cl" 3 | 2/ 1 * I©

CH 0-C-CH -CH-CH-N-CH

3 II 2 I 2 fcH 3 I

O O-C-CH 3 l 3

Kyseessä olevan keksinnön lisäkohteena on asetyylikarni-tiinidikloridin valmistusmenetelmä.

Kyseessä olevan keksinnön mukaisesti, kaavaa I vastaavan [···’ :·.· asetyylidikarnitiinidikloridin valmistus perustuu pää-·*·: : : #* asiallisesti kahteen vaihtoehtoiseen reaktioon. Ensiksi : .·mainitussa reaktiossa asetyylikarnitiinikloridi muutetaan : ' vastaavaksi asyylikloridiksi käsittelemällä sitä tionyyli- : kloridilla ja sekä esteröimällä se edelleen karnitiini- kloridin avulla, yhdessä ainoassa vaiheessa.

.·:·/” Vaihtoehtoisen reaktion mukaisesti lähtöyhdiste on m/m dikarnitiinin dikloridi, karnitiinin molekyylien välinen : ·*.·.· esteri, joka saadaan yhdessä vaiheessa käsittelmällä karnitiinikloridia tionyylikloridilla sekä asetyloimalla E*. edelleen, tunnetulla tavalla, sekundaarinen, vapaa alkoholi- .·. ryhmä etikkahappoanhydridin tai asetyylikloridin avulla, 2 86417 joka toimii asylointiaineena.

Tionyylikloridin käyttö happokatalysaattorina ja veden poistajana on kirjallisuudessa tunnettua.

Karboksyyli-ryhmän transformaatio vastaavaksi asyyli-halogenidiksi sekä sitä seuraava helpompi esteröinti reaktioseoksessa läsnä olevalla alkoholisubstraatilla, on hyvin luonteenomainen ja tärkeä synteesi, joka voi edistää karnitiinin kahden molekyylin kondensaatiota ja saadun dikarnitiinin asetylointia, joka suoritetaan lisäämällä edelleen etikkahappoanhydridiä tai asetyylikloridla.

Reaktio saatetaan suorittaa yhdessä ainoassa vaiheessa, käyttämällä lähtöaineena karnitiinikloridia tai asetyyli-karnitiinla, eristämättä näin saatuja välivaiheyhdisteitä.

Kyseessä olevan keksinnön tärkeänä kohteena on löytää kyseessä olevan keksinnön mukaisen menetelmän luonteenomaiset olosuhteet. Niin muodoin näiden olosuhteiden optimi kontrolli on erittäin tärkeää Ja tarkkaa. Edelleen on - havaittu, että pidennetty kuumennus tai korkea lämpötila aiheuttavat veden poistumista ^-trimetyyliaminokrotoni-haposta.

Ennen kaikkea, kyseessä olevan keksinnön mukaisella menetelmällä saatu yhdiste on jokseenkin kestämätön, Ja se hydrolysoituu helposti happamessa väliaineessa, niin että sen erottaminen reaktioseoksesta on erittäin tarkkaa. On havaittu, että eristäminen suoritetaan mieluummin välittömästi Ja hyvin täsmällisesti. Toisaalta, myös kirjallisuudessa tunnetut menetelmät edellyttävät erityistä täsmällisyyttä.

Kyseessä olevan keksinnön mukainen asetyylldikarnitiini- 3 86417 dikloridin valmistus suoritetaan lähtemällä asetyylikarni-tiinikloridin Ja juuri tislatun tionyylikloridin seoksesta, molekyylisuhteessa 1:1,5·

Seosta sekoitetaan huoneenlämpötilassa 0,5-2 tunnin ajan. Näin saatu asetyylikarnitiinin asyyliklorldi, metyleeni-kloridiin liuotettuna, lisätään ekvivalentin määrän kanssa karnitiinikloridia, ja sen annetaan seisoa 18 - 36 tunnin ajan 38° - ii2°C:ssa. Näin saatu raaka tuote erotetaan Ja puhdistetaan tunnetulla tavalla.

Akuutti toksisuus: Kyseessä olevan keksinnön mukainen asetyylidlkarnitiinln dikloridi on käytännöllisesti katsoen myrkytön yhdiste.

On todettu, että suun kautta annettaessa LD^q on suurempi kuin 20 g/kg (kehon painoa) hiirillä, ja rotilla se on suurempi kuin 15 g/kg. Annettaessa laskimonsisäisesti, LD^q on suurempi kuin 0,75 g/kg hiirillä, suurempi kuin 1 g/kg rotilla ja suurempi kuin 2,5 g/kg koirilla.

Farmakodynamiikka [y/ Annettaessa suun kautta asetyylidikarnitiinin dikloridia • ·’ hiirille sekä vanhoille rotille 100 mg/kg (kehon painoa) : suuruisena annoksena, havaittiin uteliaisuuden sekä reaktio- : kyvyn lisääntymistä ja liikkeiden koordinaation parantu mista.

Farmakologisten kokeiden perusteella, joita suoritettiin kyseessä olevan keksinnön mukaisen tuotteen farmakokineet-: tisten ominaisuuksien toteamiseksi Ja sen metabolian tutki- miseksi, on havaittu, että asetyylidikarnitiinikloridi pilkkoutuu organismissa L-asetyyli-karnltilniksi Ja f L-karnitiiniksi.

>1 8641 7

Niin muodoin, kyseessä olevan keksinnön mukaisella yhdisteellä L-karnitiinin farmakologisten ominaisuuksien lisäksi, jotka, kuten tunnettua, aktivoivat proteiinien metaboliaa ja stimuloivat ruoansulatusta edistävää eritystä, vaikuttaen anabolisesti ja ruokahaluttomuutta estävästi, on joitakin uusia ja odottamattomia ominaisuuksia.

Aivan erityisesti, kyseessä olevan keksinnön mukainen yhdiste on erityisen aktiivinen hoidettaessa etiologialtaan primaarisia tai sekundaarisia (verenkiertosairaudet), vanhuuteen liittyviä ja vanhuutta edeltävien aivojen surkastumisolreita sekä vanhanpuoleisten ihmisten muistin Ja tarkkaavaisuuden muutosten ollessa kysymyksessä.

Kyseessä olevan keksinnön mukainen yhdiste on aktiivinen myös sydäntautien hoidossa, kuten esimerkiksi akuutissa ja kroonisessa sydänlihaksen paikallisessa verettömyydessä, sydänkouristuksessa sekä piilevässä että selvässä sydämen toimintavajauksessa ja rytmihäiriöissä.

L-asetyylidikarnitiinilla on myös sydäntä suojaavaa vaikutusta kasvaimienvastaisten antrasykliini-lääkkeiden käytön sydämelle aiheuttavia vaurioita vastaan.

Edelleen, mitä suotuisimmasta farmakokinetiikasta Johtuen, tuoteella on suurempi biologinen hyväksikäytettävyys, Jonka tuloksena vaikutus on parempi muihin, saatavissa oleviin lääkkeisiin verrattuna.

Kyseessä olevan keksinnnön piiriin kuuluvat edelleen farmaseuttiset koostumukset, jotka sisältävät asetyylidi-: karnitiinln diklorldia.

Farmaseuttiset koostumukset, jotka on annettavissa suun kautta tai parenteraalista tietä, ovat aktiivisia terapeuttisia aineita hoidettaessa etiologialtaan primaarisia 5 86417 tai sekundaarisia, vanhuuteen liittyviä tai vanhuutta edeltäviä aivojen surkastumisoireita, hoidettaessa muistin ja tarkkavalsuuden muuttumista vanhanpuoleisilla potilailla sekä verisuonisairauksia. Farmaseuttiset koostumukset käsittävät terapeuttisesti tehokkaan· määrän asetyylldikarni-tiinin dikloridia sekä farmaseuttisesti hyväksyttävää kantaja-ainetta ja/tai laimennusainetta suun kautta tai lihakseen suoritettavaa antamista varten.

Ehdotettu määrä asetyylidikarnitiinin dikloridia ihmispotl-laille on 0,5:n ja 2,0 g:n välillä annosta kohti.

Seuraavat esimerkit, joiden tarkoituksena ei ole rajoittaa keksintöä, valaisevat sitä.

ESIMERKKI 1 L-asetyylin karnltllniklorldln valmistus

Kirjallisuudessa esitetyn menetelmän mukaisesti (Ziegler et ai. J. Org. Chem., 1967, s. 3989) 50 ml etikkahappoa -1- lisättiin 8 g:n kanssa asetyylikloridia ja sekoitettiin 3 .··. tunnin ajan 80°C:ssa. Sen jälkeen kun oli lisätty 9,9 g : - karnitiinia, reaktioseoksen annettiin sekoittua 1 tunnin ”V ajan 80°C:ssa. Tyhjössä suoritetun tislauksen avulla saatiin ; hyvin paksu liuos, Johon sitten lisättiin 40 ml kiehuvaa ; isopropanolia.

Reaktloseos suodatettiin reagoimattoman karnitiinin : ! poistamiseksi, ja otsikon mukainen tuote saostettiin hitaasti lisäämällä 50 ml asetonia. Saatiin valkoinen, kiteinen kiinteä aine. (saanto 98 %); sp. 180°-182°C.

Asetyylidikarnitiinin dlklorldl 0,15 moolia juuri tislattua tionyylikloridia lisättiin 0,1 6 86417 mooliin L-asetyylikarnitiinin kloridia.

Seosta sekoitettiin 1 tunnin ajan huoneenlämpötilassa.

Sen jälkeen kun ylimäärä tionyylikloridia oli poistettu tislaamalla vähennetyssä paineessa, saatiin vastaava asyylikloridi valkoisena, kuohkeana aineena, joka voidaan helposti hydrolysoida ilmassa.

Näin saatu asyylikloridi liuotettiin 30 ml:aan vedetöntä metyleenikloridia, ja sitten siihen lisättiin 0,105 moolia L-karnitilnin kloridia. Syntyvää seosta sekoitettiin 24 tunnin ajan 40°C:ssa. Reaktiota seurattiin ohutlevykromato-grafian avulla, kunnes L-asetyylikarnitiiniasyylikloridi hävisi täysin.

Vähennetyssä paineessa haihduttamalla suoritetun liuottimen poistamisen Jälkeen raakaa tuotetta pestiin monia kertoja pienillä määrillä metyleenikloridia.

Näin saatu, valkoinen, kuohkea, erittäin hygroskooppinen yhdiste liuotettiin vähimmäismäärään isopropanolia (noin 150 ml), Ja sitten se suodatettiin reagoimattoman karnitiinin Ja asetyylikarnitiinin poistamiseksi.

Lisäämällä asetonia (300 ml) tuote saostettiin suodoksesta valkoisen, erittäin hygroskooppisen, kiinteän aineen muodossa, joka pestiin useampia kertoja pienillä määrillä asetonitriiliä (noin 20 ml) kaikkien pienten esterlmäärien poistamiseksi.

Saatiin otsikon mukainen yhdiste (saanto 90 %): IR (DMSO) ^ maks 1740, 1715 cm IR (KBr) Jmaks 3550, 2995, 2950, 2900, 1730 cm"! MS (kenttädesorptio) 347, 305, 287, 204, 162 m/e 7 86417 Ή-NMR (200 MHz, DMSO-d6, 22°C) 2,02 (s, 3H, COCH3) 2.7- 2,8 (m, iiH; CH-CH2-COO-CH-CH2-COOH) OCOCH3 3,20 (s, 18H, 2 x N+ (CH3)3 ( 3.8- ^,1 (m, UH, N+ -CH2 -CH-CH2 -COOCH-CH2 -N+ OCOCH3 OCOCH3 5,^3 (m, 2H, -CH-CH2-COO-CH-CH2COOH) ESIMERKKI 2

Asetyylldlkarnltlinln diklorldl 19,7 g (0,1 moolia) karnitiinin kloridia sekä 35,7 g (0,3 moolia) tionyylikloridia sekoitettiin pullossa noin 8 tunnin ajan, 30°C:ssa.

Tionyyllkloridin ylimäärä poistettiin vähennetyssä paineessa. Sen Jälkeen kun vettä oli lisätty 10 ml, reaktio-seos haihduttettiin kuivaksi.

• - Raaka tuote otettiin isopropyylialkoholiin, suodatettiin Ja "V reagoimattoman karnitiinin Ja ^ -trimetyyliamino-krotoni- • ; hapon, jos niitä oli läsnä, poistamisen Jälkeen suodoksen annettiin kiteytyä.

Näin saatu saostuma liuotettiin sitten 10,2 g:aan (0,1 moolia) etlkkahappoanhydridiä, ja liuosta sekoitettiin noin : 12 tunnin ajan 40°C:ssa.

‘..1 Etikkahappoanhydridin Ja etikkahapon ylimäärä poistettiin tislaamalla vähennetyssä paineessa, vesihauteella (40°C).

8 86417

Viskoosi jäännös liuotettiin kuumaan isopropyylialkoholiin, otsikon mukainen tuote erotettiin reaktioseoksesta tunnetulla tavalla, hygroskooppisen, valkoisen, kiinteän aineen muodossa.

ESIMERKKI 3

Injektoitavan, farmaseuttisen koostumuksen valmistus

Valmistus suoritetaan tavanomaisten menetelmien mukaisesti, jotka ovat tutkimustyöhön perehtyneiden tuntemia menetelmiä.

Injektoitavan muodon edullinen koostumus on seuraava: asetyylidikarnitiinin dikloridi 500 mg glyslinl 750 mg tislattu vesi 5 ml ESIMERKKI ^

Suun kautta annettavan, farmaseuttisen koostumuksen valmistus

Valmistus suoritetaan tavanomaisten menetelmien mukaisesti, Jotka ovat tutkimustyöhän perehtyneiden tuntemia menetelmiä.

Suun kautta annettavan muodon edullinen koostumus on seuraava (pullon koko noin 15 ml): asetyylidikarnitiinin dikloridi 1 g sorbitolin 70 !S:inen vesiliuos 5 g metyyli p-hydroksibentsoaatti 0,010 g aprikoosiesanssi 0,015 g appelsliniesanssi 0,025 g tislattu vesi täytetään 10 ml:ksi.

li

Claims (3)

9 86417 1. Analogiamenetelmä seuraavan yleisen kaavan mukaisen asetyyli-dikarnitiinidikloridin valmistamiseksi, joka on terapeuttisesti vaikuttava hoidettaessa vanhuuteen liittyvää ja vanhuutta edeltävää aivojen surkastumisoireyhtymää, hoidettaessa sydäntauteja, sekä vaikuttaa proteiinien aineenvaihdunnassa ja stimuloi ruoan-sulatusnesteiden eritystä, jolloin sillä on anabolinen ja anoreksian vastainen vaikutus, CH I 3 • CH θί-CH -CH-CH -COOH CH on" 3 I 2/1 2 Ift3 2 Cl I ; CH O-C-CH -CH-CH -N-CH 3. ii 2 I 2 3 O O-C-CH 3 l 3 tunnettu siitä, että asetyylikarnitiinikloridin ja juuri tislatun tionyylikloridin seoksen, jonka molekyylisuhde on 1:1,5, annetaan olla sekoituksessa 0,5-2 tunnin ajan huoneenlämmössä, ja kun ylimääräinen tionyylikloridi on poistettu, syntyvä asyylikloridi liuotetaan metyleenikloridiin, johon on lisätty ekvivalentti määrä karnitiinikloridia ja saatu seos pidetään 18-36 tuntia lämpötilassa 38e-42*C, jolloin saadaan epäpuhdas reaktiotuote, joka liuotetaan kuumaan isopropyylialkoholiin ja puhdas asetyylidikarnitiini saadaan kiteyttämällä. 10 8 0 41 7

1. Analogiförfarande för framställning av acetyldikarnitin dik-lorid med den allmänna formeln, vilken förening är terapeutiskt aktiv för behandling av senila och pre-senila cerebrala involutions syndrom och vid kardiopati samt är aktiv pä protein-metabolism, och stimulerar matsmältsekretioner, varvid den visar ana-bolisk och anti-anorexi verkan, Γ CH I 3 . CH θΐ-CH -CH-CH -C00H CH _. - 3 | 2; | 2 | 3

2 Cl I CH O-C-CH -CH-CH -N-CH 3. ii 2 I 2 bH

3 O O-C-CH 3 l 3 ..kännetecknat därav, att man omrör en blandning av acetylkarnitin klorid och nyligen destillerad tionylklorid, i . ' molekylförhällandet 1:1,5, i 0,5 - 2 timmars tid vid rumstempe-'. ratur och att man efter det att överskottet av tionylkloriden avlägsnats löser upp den acetylklorid som bildats i metylenklo-rid, i vilken man tillsatt en ekvivalent mängd karnitinklorid och läter den reaktionsblandning som uppstär stä i 18-36 timmars tid vid 38" - 42*C, varvid man erhäller en r& reaktionsprodukt som sedan upplöses i het isopropylalkohol och den rena acetyldikarnitin dikloriden erhälles genom utkristallisering. Il