FI84557B - Foerfarande foer isolering och rening av podofyllotoxin. - Google Patents
Foerfarande foer isolering och rening av podofyllotoxin. Download PDFInfo
- Publication number
- FI84557B FI84557B FI853690A FI853690A FI84557B FI 84557 B FI84557 B FI 84557B FI 853690 A FI853690 A FI 853690A FI 853690 A FI853690 A FI 853690A FI 84557 B FI84557 B FI 84557B
- Authority
- FI
- Finland
- Prior art keywords
- podophyllotoxin
- complex
- solution
- water
- purified
- Prior art date
Links
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
- C07D493/00—Heterocyclic compounds containing oxygen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system
- C07D493/02—Heterocyclic compounds containing oxygen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system in which the condensed system contains two hetero rings
- C07D493/04—Ortho-condensed systems
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Heterocyclic Carbon Compounds Containing A Hetero Ring Having Oxygen Or Sulfur (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Nitrogen And Oxygen Or Sulfur-Condensed Heterocyclic Ring Systems (AREA)
- Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)
- Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)
Description
1 84557
Menetelmä podofyllotoksiinin eristämistä ja puhdistamista varten
Keksintö koskee uutta menetelmää, jonka avulla voidaan eristää ja puhdistaa podofyllotoksiinia sen suhteellisen epäpuhtaista lähteistä erityisesti kasviuutteista, esimerkiksi Podophyllum-sukuun kuuluvista kasveista uuttamalla saaduista hartseista.
Podofyllotoksiini on biologisesti erittäin voimakkaasti vaikuttava aine, jota voidaan käyttää erityisesti lääkkeenä condyloma-ta acuminatan hoidossa (suippo visvasyylä) /G. Gabriel ja R.N.T. Thin, Br.J. Vener, Dis., 59, 124-126 (1983), ja sillä on myös sytostaattisia /G. von Krogh ja H.I. Maibach, Dermato-logica, 167, 70-77 (1983j_/ ja viruksia hävittäviä ominaisuuksia _/T. Markkanen, M.L. Mäkinen, J. Miettinen, E. Maunuksela, T. Laijoki ja J. Paranko, Drugs Exp. Clin. Res. 9, 1-7 (1983)^/.
Podofyllotoksiinia on aikaisemmin eristetty edellä mainituista hartseista erilaisilla laboratoriomenetelmillä, joihin kaikkiin kuuluu uuttaminen liuottimen, tavallisesti kloroformin, avulla, jota seuraa jatkokäsittely. Alan kaikkein luotettavimman uudemman kirjallisuuden mukaan /W.M. Hearson ja W.S. MacGregor,
Chem. Rev., 55, 1002 (1955); J.L. Hartwell ja W.E. Detty, J. Am. Chem. Soc., 246-253 (1950J_/, kromatografinen puhdistaminen on ollut välttämätöntä, jotta saataisiin podofyllotoksiinia. Useissa tapauksissa on käytetty bentseeniä puhdistusmenetelmissä huolimatta tunnetuista terveysvaaroista, mitä se aiheuttaa. Aikaisemmin on myös pidetty kromatografiaa ehdottoman tärkeänä podofyllotoksiinin saamiseksi, so. sellaisessa puhtausasteessa, että podofyllotoksiini on vain hieman niiden lukuisten sukulaisaineiden saastuttamaa, joita on kasvimateriaalissa. Tästä on ollut tuloksena se, että puhdas podofyllotoksiini on harvinaista ja kallista ainetta, jota on vaikeata saada suuria määriä .
Viime aikoina on esiintynyt podofyllotoksiinin lisääntynyttä tarvetta sekä raakamateriaalina useiksi farmakolgisiksi vaikuttaviksi johdannaisiksi muuttamista varten että kliinisiin toimenpiteisiin itse podofyllotoksiinia. Kummassakin tapauk sessa on erittäin toivottavaa käyttää niin puhdasta tuotetta kuin mahdollista.
2 84557
Erään aspektin mukaisesti kyseessä oleva keksintö tarjoaa menetelmän, jonka avulla voidaan saada puhdistettua podofyllotoksiinia sen liuoksesta, siten että muodostetaan podofyllotoksii-nin ja jonkin aromaattisen tai heteroaromaattisen yhdisteen, joka ei ole bentseeni, kiinteä kompleksi ja erotetaan kiinteä kompleksi liuoksesta.
Keksinnön mukainen menetelmä, erään aspektin mukaisesti, soveltuu hyvin podofyllotoksiinin suurten määrien puhdistukseen, sen ansiosta voidaan välttää voimakkaasti karsinogeenisen bentseenin käyttäminen liuottimena ja se antaa hyvin korkean tuotoksen puhdasta podofyllotoksiinia.
Keksinnön mukainen menetelmä perustuu podofyllotoksiinin aikaisemmin tuntemattomaan kykyyn muodostaa komplekseja suuren joukon kanssa aromaattisia ja heteroaromaattisia yhdisteitä, kuten fenoli, tolueeni, klooribentseeni, anisoli, o-, m- ja p-ksyleenit ja nitrobentseeni, ja emäksisten yhdisteiden kuten aniliinin ja pyridiinin sekä näiden homologien, kuten nafta-leenin, kinoliinin ja isokinoliinin kanssa. Lisäksi sen avulla vältetään raakahartsin puhdistamisen tarve liuotinuuttamisen avulla.
Kyseessä oleva keksintö tarjoaa myös menetelmän puhdistetun podofyllotoksiinin saamiseksi sen liuoksesta siten, että (a) muodostetaan podofyllotoksiinin ja aromaattisen tai heteroaromaattisen yhdisteen kiinteä kompleksi, (b) erotetaan kompleksi liuoksesta, (c) muodostetaan liuos, joka sisältää mainitusta erotetusta kompleksista saatavaa podofyllotoksiinia, (d) muodostetaan kiinteä kompleksi vaiheen (c) liuoksesta saatavasta podofyllotoksiinista ja aromaattisesta tai hetero-aromaattisesta yhdisteestä, ja (e) erotetaan vaiheessa (d) muodostunut kiinteä kompleksi liuoksesta, J 84557 ja vaiheissa (a) ja (d) käyLelyl. aromaa t i j se l lal hel.eroaro-maattisel yhdisteet oval erilaisia.
Keksinnön mukaisien menetelmien suoritusolosuhteel eivät ole ehdottoman tarkkaan määrätyt ja niitä voidaan muuttaa melko paljon, mutta yleisen periaatteen mukaan liuoLel.aan epäpuhdasta podofyllotoksii ni a esimerkiksi podophyllum-harLsia sopivaan liuottimeen mieluimmin liuottimeen, johon koko liartsi liukenee, esimerkiksi C^_^-alempaan alifaaitiseen alkoholiin tai C^_^-alempaan alkyy 1 i ka rboksyy 1 i linppoe s to r i i n . Liuokseen lisätään sitten kompleksia muodostava aromaattinen yhdiste, ja mikäli tarvitaan, eri suuruisia määriä vettä. Tämä aiheuttaa sen, että yleensä hyvin kiteytyvät kompleksit saostuvat ja ne voidaan eristää, ja kun kompleksia muodostava aine on poistettu, voidaan saada noin 90 %:sesli puhdasta podofyllotoksiinia runsaana tuotoksena. Kun tämä menetelmä toistetaan käyttäen erilaisia komplekseja muodostavia aineita voidaan saada 92-95 %:sesti puhdasta podofyllotoksiinia. Usein on huomattu, että useat sen sukulaisaineista jäävät itsepäisinä epäpuhtauksina jäljelle, jopa niin useiden kuin 5-8 uudelleen-kiteytyksen jälkeen, joissa on käytetty eri liuottimia ja kompleksoivia aineita, ja vielä korkeamman puhtausasteen aikaansaamiseksi voidaan käyttää vielä erästä menetelmän vaihetta (joka itse muodostaa tämän keksinnön 1isäaspektin).
Keksinnön mukaan voidaan siis sen parhaana pidetyn toteutus-muodon mukaisesti, joka tekee mahdolliseksi erityisen korkean puhtausasteen omaavan podofyllotoksiinin saamisen, suorittaa "absoluuttinen" puhdistus hyvin yllättävällä ja odottamattomalla tavalla, nimittäin uuttamalla epäpuhtaan podofyllotok-siinin liuos veteen sekoittumattomassa liuottimessa, esimerkiksi kloroformissa, vettä sisältävän emäksen avulla. Tämä tulos on yllättävä, koska kirjallisuuden mukaan podofyllotok-siini on hyvin labiilia emäksisissä olosuhteissa, muuttuen epimeerikseen, pikropodofylliiniksi kun sitä käsitellään alkalin kanssa /W. Borsche ja J. Niemann, Liebigs Ann. Chem. 494, 126-142 (19322.7
Seuraavat esimerkit valaisevat keksinnön mukaista menetelmää.
4 84557
Esimerkki 1 A. Podofylliiniä (643 g) liuotetaan etanoliin (1,5 litraa) hieman sekoittaen. Kuumaan liuokseen lisätään tolueenia (643 ml), ja sen jälkeen vettä (129 ml). Liuos jäähdytetään jää-vesiseok-sella ja saostunut kiteinen aine eristetään suodattamalla ja pestään eetterillä 2 litraa). Tuotos: 342,8 g.
Tämä aine on podofyllotoksiinin, tolueenin ja veden kompleksia ja HPLC:n avulla on osoitettu sen sisältävän noin 13 % sukulaisaineita lignaneita.
Kompleksi liuotetaan uudelleen etanoliin (1,0 litraa) hieman kuumentaen, lisätään pyridiiniä (140 ml) ja sen jälkeen vettä (470 ml) ja liuos jäähdytetään jää-vesiseoksella. Saostunut kiteinen aine eristetään suodattamalla ja pestään eetterillä (250 ml). Tuotos: 292 g.
Tämä aine on podofyllotoksiini-pyridiini-vesi-kompleksia, ja kuten on osoitettu HPLC:n avulla, sisältää noin 7 % muita suku-laisliqnaneita. Aine uudelleenkiteytetään etanolin (1,0 litraa) ja veden (430 ml) seoksesta, jolloin saadaan 239 g pyridiini-vesi-kompleksia.
B. Kompleksi (119 g) liuotetaan kloroformiin (1,2 litraa) ja sitä käsitellään käyttäen: i) 0,8 N HCl (500 ml), ii) 0,4 N NaOH (500 ml), iii) 0,01 N HCl (450 ml), iv) vettä (450 ml) ja v) kyllästettyä natriumkloridin vesiliuosta (500 ml).
Kloroformiliuos kuivataan kiteisen magnesiumsulfaatin päällä, kloroformi poistetaan vakuumissa ja jäljellä oleva siirappimainen aine uudelleenkiteytetään etyyliasetaatista (450 ml), jolloin saadaan podofyllotoksiinia, aq. (50 g). Tämän aineen on osoitettu HPLC:n avulla sisältävän <0,4 % muita lignaneita. Näyte kuivattiin vakuumissa (100°C:ssa) ja saatiin analyyttisesti puhdasta podofyllotoksiinia.
Analyysi: saatiin (laskettiin) C 63,62 (63,76), H 5,39 (5,35). Sen IR-,^iNMR-ja NMR-spektrit ovat identtiset kirjalli suudessa mainittujen kanssa.
Il 5 84557
Esimerkki 2 A. Podofylliiniä (1 kg) liuotettiin etanoliin (3 litraa) hieman lämmittäen. Niin pian kun liuos oli homogeeninen, lisättiin tolueenia (1,0 litraa) ja vettä (200 ml) ja seos jäähdytettiin jää-vesiseoksella. Saostunut kiteinen aine suodatettiin erilleen, pestiin eetterillä (1,0 litraa). Uudelleenkiteytet-tiin etanolista (2 litraa), tolueenista (650 ml) ja vedestä (130 ml). Eristettiin kiteinen aine ja liuotettiin uudelleen etanoliin (1,5 litraa), lisättiin pyridiiniä (210 ml) ja vettä (630 ml) ja liuos jäähdytettiin jää-vesiseoksella. Saostunut kiteinen kompleksi erotettiin, pestiin eetterillä (1,0 litraa) ja kuivattiin, jolloin saatiin 478 g ainetta.
Kohdan 2A aine liuotettiin kloroformiin (5 litraa) ja käsiteltiin käyttäen: (i) 0,4 N HC1 (2 litraa), (ii) 0,2 N NaOH
(2 litraa), (iii) 0,03 N HC1 (1,4 litraa), (iv) kyllästettyä natriumkloridin vesiliuosta (700 ml) ja (v) kuivattiin magnesiumsulfaatin päällä. Kloroformi poistettiin vakuumissa ja jäljelle jäävä siirappimainen aine uudelleenkiteytettiin eta-noli-vesiseoksesta (1,4 litraa - 0,9 litraa). Näin saatiin podo-fyllotoksiinia, 2 1^0 (419 g, ~ 39 %), joka sisälsi <0,6 % pikropodofyliiiniä ja <0,1 % muita sukulaisiignaneitä.
Analyysi: Saatiin (laskettuna) C 58,63 (58,67), H 5,53 (5,77). Identifiointi IR:n ja NMF.-spektroskopian avulla. Pieni näyte kuivattiin vakuumissa (100°C:ssa, jolloin saatiin analyyttisesti puhdasta näytettä. Analyysi: C 63,75 (63,76), H 5,41 (5,35).
Esimerkki 3 A. Podofylliiniä (500 g) liuotettiin etanoliin (1,5 litraa) hieman lämmittäen, lisättiin tolueenia (0,5 litraa) ja vettä (100 ml), liuos jäähdytettiin ja saostunut kiteinen aine eristettiin suodattamalla ja pestiin etanoli-tolueeni-vedellä (15:5:1, 200 ml). Tämä liuotettiin välittömästi uudelleen etanoliin (1,0 litraa), tolueeniin (330 ml) ja veteen (66 ml) ja liuos jäähdytettiin jää-vesiseoksella. Sakka erotettiin kuten edellä on selostettu ja kuivattiin, jolloin saatiin 211 g.
Tämä liuotettiin uudelleen kiehuvaan metanoliin (500 ml) ja 6 84557 kuuma liuos suodatettiin, lisätttiin vettä (368 ml) ja liuos jäähdytettiin jää-vesiseoksella, jolloin saatiin suodattamalla ja kuivaamalla vakuumissa I^SO^in päällä ja ympäristön paineessa 100°C:ssa 192 g podofyllotoksiinia ja muita sukulais-lignaneita suhteessa 9:1.
B. Edellä oleva epäpuhdas podofyllotoksiini (5 g) liuotettiin kloroformiin (50 ml) ja sitä käsiteltiin peräkkäin käyttäen: (i) 0,4 N NaOH (50 ml), (ii) 0,02 N HC1 (50 ml), (iii) vesi (50 ml), (iv) kyllästetty natriumkloridiliuos (50 ml), kloroformi poistettiin sen jälkeen vakuumissa ja jäännöksenä oleva aine kiteytettiin uudelleen etanoli-vesiseoksesta (1:1, 20 ml). Näin saatiin podofyllotoksiinia, aq, joka tunnistettiin IR-spektroskopian avulla ja sisälsi <1,4 % muita lignaneita.
Esimerkki 4 A. Podofylliiniä (50 g) liuotettiin etanoliin (150 ml) kuumentaen, mitä seurasi klooribentseenin (50 ml) ja veden lisääminen (10 ml). Jäähdytettiin, sakka eristettiin suodattamalla ja pestiin eetterillä (20 ml). Tuotos podofylliini-klooribent-seeni-vesi-kompleksia: 19,5 g, jonka osoitettiin sisältävän noin 13 % muita lignaneita.
Edellä oleva aine (5 g) liuotettiin uudelleen etanoliin (15 ml), lisättiin fenolia (5 g) ja vettä (2 ml), liuos jäähdytettiin ja saostunut aine poistettiin suodattamalla ja pestiin eetterillä (10 ml). Tuotos podofyllotoksiini-fenoli-vesikompleksia: 4,2 g.
B. Tämä liuotettiin etyyliasetaattiin (20 ml) ja liuosta käsiteltiin käyttäen 2 N NaOH (20 ml). Orgaaninen faasi erotettiin ja konsentroitiin vakuumissa. Tuloksena oleva aine kiteytettiin uudelleen etanoli-vesiseoksesta (1:1, 20 ml) ja saatiin kuivaamisen jälkeen vakuumissa H2SO^:n päällä: 3,75 g >98,5- prosenttisesti puhdasta podofyllotoksiinia, aq, joka määrät- 1 .13 tiin HPLC:n avulla ja tunnistettiin IR-, H NMR- ja C NMR-spektroskopian avulla, J_ q_7^ = -118,5°.
Il 7 84557
Seuraava esimerkki valaisee tuloksia, joita saafaan käytettäessä useita yhdistelmiä kompleksoivia aineita vaiheessa A.
Esimerkki 5
Yleinen menettelytapa: podofylliiniä (60 g) liuotettiin hieman lämmittäen sopivaan liuottimeen (180 ml). Joissakin tapauksissa jäi jäljelle jäännös, ja siinä tapauksessa dekantoitiin liuos erilleen. Tätä seurasi aromaattisen kompleksoivan aineen lisääminen (60 ml tai 60 g, mikäli se oli kiinteä aine), minkä jälkeen seurasi eri suuruisten vesimäärien lisääminen. Jäähdyttyä eristettiin saostunut kompleksi ja menettely uudistettiin saman tai muun liuottimen ja saman tai muun kompleksia muodostavan aineen kanssa. Eristetty aine mahdollisesti kiteytettiin uudelleen ja kompleksia muodostavat aineet poistettiin ja kussakin tapauksessa aine identifioitiin IR-spektroskopian ja/tai HPLC-analyysin avulla. Tulokset on esitetty taulukossa 1.
8 84557 co
o lOfOr^OOC^»—11—» r-l <t CO CN u~) i—It—ICNOO
u dO*·'·'*****·'·'·*****·1***
0 m^^t^Ln^rfnrocorof^cnroco^f^-vffO
0 h ; 3 •p4 3 co pH^j-mi-iooinOor^oooO'-Hor z r ^ G β I—I I—I i—I i—1 t—I i—I -—I t—H iNI i—I i—I CSJ p—1 f—1 C-l 3-1
> G
en -1-1 >s
4J
>-. G G
G *H > u οι id
r4 Ji 4J
^ II 01 I—1
r—4 o e I I I I I I I I I I I I I I I I I I
en &Ό 41
CO B O C
8 O 3 -H
•—1 Ni E CO
O
r^LOvor^ csr'-.m m 1 i—I r—I i—1 —1 (-—I Γ4 r4 C4 Q p p p p p P p λ 3C SC c: = asccS= = = S3i: = = •W *r^ J u = : 0)0)0) 0) s s s a 2
•H LH
CO r-t 00 CN
0) aiiiiil ~= = r = r *= = - = = > O r-i
CO CO CO
*. r\ rv
'sOvO'X) cO'*3'<r-d' 'O vO
*s >> *c I fT) j ne.ru |
Cd CO VO ·Η ·!-< ·Η 4-1 *νΓ ·ι-Ι ·γ-4 *Η ·» 4J lO| »H *ι-Ι ·Η 4-) -η > * g g c g *cöe^Gro*cecv£>c: ζΛ CO Cd *r-i Φ φ Φ * Φ ·Η 0) 0) 0) ** 0) Λ*Γ«ί 0) 0/ 0) * φ
^ 4J C 0) 0) 1) ·Η ,Ο VO C 0) 0) 0) ·Η ^ νί C 0) 0) φ ·ιΗ .fl sO
φ ζ/) r—i 0) 1—1 r—4 r-t ι-^ ·γ^ Λ Φ i—4 i-H i-^ i-^ **· Φ r-“4 ι~~4 t“*4 λ ICQ >,,-10 g 0) ϊοίο^Ο^-Ηφ ίοίο?>>ο^·Ηφ >, >> >Λ Q u ·*
4-) φ Ο-'ϋΦ 3 co co co co O G D co co co co o G G co co co coOG
CO u & o G ι-Η^^^·ΗΟΟ)«-Η^^^·ΗΟΦπ-4^^^·ΗΟΟ) •Η ·Η o G OI I I Cr-ίφΟΙ I I G r~i φ o \ I I G 1“· <1> G J«! Srf B G H O e ft c M t4 O E Cft <3 fti en H O B <ft < Siä en
•H
•h e
.—I Cl) O UI
1—I cc I en esi
>4 ·γ4 O
u-i o 3 G ,-ι za z z z z z = - s -
O E-* ·γ4 Ή SO O
Ό pj 4J 4-1 4-> o ω w o, •r4 C ui pucNJrrrErrrrzrrcirrr (U 0) a
C > O
• H r-4 O
BO * f—I
JCQ f—I · r4 **
ti en I | ♦> G -H
co >> O eO ·-* 0) fi
•H *J <U 3 > G G G
>4 i—t 3 G r-4 G ·—! G
G go. 4->Gao)c - z z z ^~,zzzzz<-izzzzz 4-1 B G eo G 3 g >4 G -rl o -rl o ·η r-l co
•H j*i en T3 G O I M
G H O I
•H G S
•p4 G
en G O un jd *ri i en esi o O :g o » * en 4-igGG p-4*: = r: = ^= = : = = -= = = = =
O S -rl -rl BO O SC
p-l -H pj JJ 4-1 u O
>-( m W W 4-i
Pn G W
u-ι ω i ·η o o I G en Ό G rl -h o z - - z - *.zzzzz<o-zzzz O O ίη·Γ4 ÖO r-1 00 r-4
CLi ft 44 H
r-4 III
O G CO G
O !—i ·ρ4 ee) G
J»i P-I C UI G -K
J<i >.·γ4 GOGcnstocncNr^r^oooo •i^inr-iinenmr^uo 3 H-I.HGftUl-r-rr-rr-B «««««««►
r-4 OG4JO,WOr-lrJCSIOr-ICslCNm .CSJeNCNl-leNr-ICSIrsI
3 3^3 r40404CTlCT>CJ404CJ4Cj4eTlGCJ4040404<J4<3\CTlG'
G O O 3 G G
H Pu 4-1 CL 4J 4-1 il 9 84 557
CO
0 u"iu~if^O'<r^O'iOO~3't''r''r^O'r^>—^ir^OvOm X> Ö0------------------ 2 <r-i<rro<rrH<ricno"ioo<ncMcncMc--icMc''") 3
H
i 1 ^0=: = = = = = :: = ::-- = - I 1
CQ
u >% cd m <υ ·η > Ä -u (Λ Cd Q -H ^
^ I I I I I I I I I I I I I I I I I I
-HO E
O cfl CX Ο 0) m .2, a § a -5 S_, »—1> S dJ y_| o o »in cm . CM 33
1 U
2- 33= = = = = = = = = = = = = : = = cm
2 g . O =C
1-1 -3 0) CJ
i-J ^ S 23 --1 u o
05 -3 -= = = = = = = = = = = = = = = = I
a) g ^ > ιΛιΛίΛ incOLPi 1Λ1Λ --- I ---1 --1 ™ 2 ΙΛ ·Η -ι-t ·Η 1J ΙΛ ‘.-I ·Χ -X XI ιΛ ·Χ -X Xl -CÖCu-iC - CCCmG - G G m G «ceca ·χ oi <u <u -ο) ·χ ο> α> ω -a) ·χ a> oi -cu ,, _, C <u Φ oiTAjamC a> ω <u -r-ι ,η m G <u « ·πί m . . ^ ” e CJ f—< 1—< i—H i—t ·ρ4 1 φ I—I rH i-H rH 1H Λ φ rH rH ·Η 1
·"} S <D ►» ►. >» O (-1 ·Η <U >,>,>, O h -r-4 0) >ι O X -X I
2 2 a i= 3 co co co co O C 3 co en oi co O C3 3 co co co O G
2 ti g 2 5 r-4^Jl!AjT-IO0)rHJÄ^dJÄ-HOa»r-l Jd -X O CU
x 2 3 e '« οι I I ÖH (1) O I I I G·—10)0 1 I BH Hl • 5 "1 » B ™ H O s CX <| iid 0) H O a (X C td co H O CX <3 bd co
• x G
-M OJ 0 --) e I % tx -X O .
0-IO3G -333= = = - = = = = = = = = = = = = l o H -rt -rt S§
•a J u VJ
O W
ex w •rl C Ö) r-1-,·.-··-.--··--·- — ~ z z CU 4) gCS------------ 5 > o e V 3 co I I -g s i 2 t t j 3 x “ ·--< οι o ·η
^aip- .uaje^.....o 1 1 5 ^ S
d tl n .2 o S ” w >-< -x 41 •rjAiidCOT)rtt g gg 2 .5 - ex < <u o
• x S td W H
co G O
Λ! -x I S
O :cc) O
x> g 3 C —x -i-i — — — — — — — — — — — — — — — — — O E -x -x gg----------------- .-t ·Χ -J XI 2 e ω CM W I ·Χ
o O I G
T> Ό -Ί -X r-\ — — — — — — — — — — — — — — — — — O O tX-X J^XJ-----------------
PX X AI H
* III
O G CO e O rH 1rl <d Φ
HJj ^.g ^QjgOomcTvooaNcnr^ijvOcO'—ir-cooo-xOcM
2 11/1 m n rt p-11—IcncMr-Cr-CCMCM-'d’ CO CM CO O PM CO CM CO CO
3 ^ jjj J3 “1.2 »IJiOCOcOiOcCJilJcOcOcOcOcONCJiiJiOciJiO' 0 O O 3 0) 0) H ex -u ex -u xl 84557 10 en 2 ^LncNo^oo^oor^vocr.oui ^ η<Τι—i<N<fmro<NmrOi—i H ; 3 3 •r-l ·* 4_j Ϊ 'iiiiiiilinrsi co .3 13 r-l ·-">
n) w Q
j* u ™
2 >- eo co S
0) -rt > S
3> 4J en rt S
w ·Η ,Οί 4-1 ·* •^ ,2j g 'e11 i i i i i i i i i e
CO O. TJ Oi "E
to e o e .5
6 o 3 -rt .T
7ί ^ ε λ iio -rt o: o o (N rt M o e e O m
I CO 03 cd ·*-< uo r—< CD
' * en CL, r-4 r-H * XJ
S - U ^ O OO Olli * r = Ä
.o .2 . <ί 0) CO >~ico C Π3 O C
ιΠ e O ,Π * O- * nj O j-icö *-*** e 4j | | ,H 4j CU W> tlJ t—I r-4 CNJ i-< 3 • *·^ S 'e i i i i i i i i i i °* *2 > e o -* 60 >, LT| <0 -rt - CN - Q) rt rt 1—1 00 - I · rt rt .2 2 - - -rtrtoocrt» tn oi rt -rt -rt esi C 3 Oi -rt
5 S J C C . -rt 0) N di M
rtrttn >>- Oi O M-rt -rt 3 -rt Λ •rt -rt n p 1 1 1 1 <U IO)g-rt-dO ·-!>-,*! '2 ω a-S oi S 3 3 o ---I >j e tn tn rt P n e ^ rrtinCi-irtairtito .rt .ti n rt .5 o o --I to >, -rt a; i to C 1 Λ H Hcofrt 0< Z tn g rt •rt rt .rt rt Oi
JrtS moOLO o en
^Jrt l rt (N M rt CN
li.rt o - - - - -to tiortrt __i 3dKndK:=P3rt
Q frt -rt -rt p I I I I O O O O OO
OHrtrt e rtOJrtrt rt -n WSWW W'-' a
•rH
C en --I __________ to <o g0-1- - - -- -- -- - e > M ° ^
rt tn I I O _T
« ^ J< O to T
•rt rt to 3 > g g rtSrt^rtgtO-rtg Ϊ
Qit0CUrtC0gS____.____ ~ rt g to tn 3 % - - ------- -rt C -rt o -rt O -rt 3 •rt^^tn-oeo-g * •S e H i •-η a) °
tn C
-rt |
O :co O S
rt g 3 e -I c^ og-rt-rt e^r.........
-rt -rt _! rt ——e tn 2 trt ω i -rt w o ote T) TJ-rt-rt O O I to ° - --------- CU CU 0-1 -rt -rt
-rt III
O e en e O -rt -rt CO Oi sti i—i e en en _ 2 aoco ΐΛΟυο o>omcoouom<r
-2 o M 2 a M ^ ^ rt" o rt ei m CO
3 ΐ ,ϊ 5 .h ^ co oo ^<3>cr»crv<^a\a>o> co o o 3 <u <u H Pm 4J Cu u u
II
11 84557 tfl
R kftr-(^cooOO CNjONO<r<}- rsjrn O to co oJ
*-» 00^************ *, * #s ^ coosico<o<rOO<tcOcNC\iCNicNi m «—* <—<
H
♦H
S ^ O I I I I I I I I I I I I I I I
> E ^ to _ >.
O -U
3 >· <0 to S 0) -H > *5 -U C/ϊ (¾ ^ ^ 4_j
2, ^ g 'g I I I I I I I I I I I I 1 I I I
^ id at) in to E 0 c
S o 3 -H
·—I si ε a 0 0 1 '"l
§c wllllllllllll I I I
•Η *H r—I 2 ^ w ε ä _, O OOOOO Ulvo r^-0000 “v ^ - I -----= = - - =
^ r—I rH CN ^ <T t—I O O O «—I O O
00 LO LO 00 *
OiO o * * * ro 1 m n τ-ι ·> o LO cm ro ro <r
2 ? -H * * - -H * * * ·> -H
fn '71 £ ·”* 'rA -H .H C -H C -H .H -H *H -H C
3 3 2 >. r—i c e -h c a> e cc cc ai ΓϊηιΤο . ο o) a> -π ·η a) a> tu a» <u ai ai -rn tr, c? ctnanai: o> ό -h tn oi :: ai ai = ai ai 3 l *2 m 'ο. -o (I) EWOC 3 ,-H Jj 3 CC 3 3 r-i
C/l 4-1 P O C Cc»;·—I r—l)-l*HC·—I —1 ·—1 i—Il—I O
.2 tj rt rt .5 «HO o >. C ai o OO OOH
G .5 £ E G PQ"3H H H <3 M H HH HHr_TON
"i - O I O I I O -
Jee OOOOu-1 LTileO CO *U H )| CSI-r-l
" ; . c-j cn cn cO ·—i r-ι o » oo « H H h O 33 C
'T 5 J, ------- «emo -m e e -ή u ai J? n 3 e . 33 0 33 33 33 = 33α)-ι<ί33^000·Ηθ<Τ cm 01 o >2 .3 .5 3¾ O <3 Ο O O oo-OOO-OJJr-ic-Hpc 3 ri'-' iIj e -uo ai ai -u -m e -r-i j-ι -u ·η τ-ι ai a) ·η o - o ·—'
rt 1-1 WUSSW WPQ-HWWQCMW-Hn-l-Hr-lr-IO
ω <<3ο^;εοΗΗ
•H
§ “ '^cNZir-Hc-irocmoacMcr = =
-3 > ^ O
3 O O rH o o :§ r-ι I rH « rH r-l
m 2, L ό tn -H C es -H C -h I O -H
‘S £311 - S 3H-S Ϊ S ° G S . , ! : s :se : :sis : ;:3ϊ; = ! : - 1 ti S.2 S.5 1-1 0-1 ai .—1 e ·—1 o-h h •5 v :2 M -rt rt O -HOJOOIO tn -e o
H Ci « tn -a rt H ZtnHPQH m -H H
^ O
:3 S o h co u MG 1 oi I O - r-l
Se. o 00 00 1 - -u o e cN-cai rt ·λ λ O roro C frt O to Ή -H ro o 33 C ci
ScCrt _ - to - ο to e e -uh o ai -n
rt E 3.e e 33 = = 3333 = = 4-130 -tnOOO-eOO r-l a) O
r-J.Soxj bO OO 3 to <! SjioUUH μιη 33 3 :t0 jer:1-1 ei ai ei -ο-οοσ-αιαι-πο-ο --i :a)
'Trt ω 2ω I -H 4J *J -rl -H tn tn -H ι-Η ·Η r-l o o E
-h r-ir-itJiyQcCCI-i^earrtH
o O I e ‘rt -d 3 h -h ______________ _ _ O O 3—. · H - - - e, H 0-1 r-l 1-1 " e -Η I I I rt O C tn e m O -H ->-1 n) ai ^
3 3 ° ° 0 e 3 θ ä e ä ä s s s E E
3 " »»θ' «I «θ' ω ^ D ® OI U 111 <D <U
to O O 3 0) 01 H C O C U u
Claims (3)
1. Menetelmä puhdistetun podofyllotoksiinin valmistamiseksi käsittäen podofyllotoksiinin kompleksien 2-vaiheisen kiteytyksen ja kompleksien hajoituksen puhdistetuksi podo-fyllotoksiiniksi, tunnettu siitä, että (1) liuokseen, jossa on epäpuhdasta podofyllotoksiinia ale-massa alkanolissa, alemmassa alkyyliasetaatissa, etikkaha-possa tai asetonissa ja mahdollisesti vettä, määrässä, joka on riittävä kompleksin muodostamiseksi podofyllotoksiinin kanssa, lisätään kompleksinmuodostajana tolueenia, o-, m-tai p-ksyleenia, anisolia, klooribentseeniä, aniliinia, pyridiinia, fenolia, nitrobentseeniä tai bentsyylialkoholia, jolloin muodostuu kompleksi kompleksinmuodostajan ja mahdollisesti veden kanssa, joka kompleksi erotetaan kiteyttämällä, (2) erotettu kompleksi liuotetaan samaan tai eri liuotinai-neosaan kuin se, jota käytettiin edellisessä vaiheessa, minkä jälkeen liuokseen lisätään sama tai eri kompleksinmuodostaja kuin se, joka on mainittu vaiheessa (1), ja mahdollisesti vettä, määrässä, joka on riittävä kompleksin muodostamiseksi, minkä jälkeen muodostunut kompleksi erotetaan kiteyttämällä, ja (3) edellisestä vaiheesta saatu kompleksi puhdistetaan pesemällä ja/tai uudelleenkiteyttämällä sinänsä tunnetulla tavalla kompleksin muuttuessa samanaikaisesti puhdistetuksi podofyllotoksiinituotteeksi, minkä jälkeen mahdollisesti suoritetaan lisäpuhdistuskäsittely joko uuttamalla puhdistetun tuotteen liuosta NaOH-liuoksella tai yhdistettynä käsittelyllä vesipitoisen NaOHrn ja/tai suolahapon ja/tai veden ja/tai vesipitoisen natriumkloridin kanssa, ja lisäpuhdis-tettu podofyllotoksiinituote eristetään.
2. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että kahdessa vaiheessa käytetään eri orgaanisia kompleksinmuodostaj a-aineosia. 13 84557
3. Patenttivaatimuksen 1 tai 2 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että puhdistaminen lisäpuhdistusvaiheessa suoritetaan siten, että liuosta, jossa on kompleksi toisesta kompleksin muodostusvaiheesta veteen sekoittumattomassa liuot-timessa, käsitellään natriumhydroksidilla ja puhdistettu podofyllotoksiini eristetään liuoksesta.
Applications Claiming Priority (2)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
GB8424269 | 1984-09-26 | ||
GB848424269A GB8424269D0 (en) | 1984-09-26 | 1984-09-26 | Isolation and purification of podophyllotoxin |
Publications (4)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
FI853690A0 FI853690A0 (fi) | 1985-09-25 |
FI853690L FI853690L (fi) | 1986-03-27 |
FI84557B true FI84557B (fi) | 1991-09-13 |
FI84557C FI84557C (fi) | 1991-12-27 |
Family
ID=10567263
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
FI853690A FI84557C (fi) | 1984-09-26 | 1985-09-25 | Foerfarande foer isolering och rening av podofyllotoxin. |
Country Status (13)
Country | Link |
---|---|
US (1) | US4680399A (fi) |
EP (1) | EP0197219B1 (fi) |
AT (1) | ATE48427T1 (fi) |
CA (2) | CA1268709A (fi) |
DE (2) | DE3574595D1 (fi) |
DK (1) | DK169385B1 (fi) |
ES (2) | ES8702395A1 (fi) |
FI (1) | FI84557C (fi) |
GB (1) | GB8424269D0 (fi) |
IS (1) | IS3039A7 (fi) |
NO (1) | NO164658C (fi) |
PL (1) | PL147999B1 (fi) |
PT (1) | PT81190B (fi) |
Families Citing this family (24)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JPH0720966B2 (ja) * | 1984-12-28 | 1995-03-08 | コンプハルム・エイビ− | 製薬学的に活性な化合物を含有する病気治療剤 |
US5057616A (en) * | 1989-09-29 | 1991-10-15 | Oclassen Pharmaceuticals, Inc. | Podophyllotoxin purification process |
US5315016A (en) * | 1992-10-13 | 1994-05-24 | Nycomed Dak A/S | Process for preparing pure podophyllotoxin |
US5589106A (en) * | 1995-02-14 | 1996-12-31 | Nalco Chemical Company | Carbon steel corrosion inhibitors |
US8414932B2 (en) | 1998-06-01 | 2013-04-09 | Albemarie Corporation | Active bromine containing biocidal compositions and their preparation |
US6068861A (en) | 1998-06-01 | 2000-05-30 | Albemarle Corporation | Concentrated aqueous bromine solutions and their preparation |
US7087251B2 (en) | 1998-06-01 | 2006-08-08 | Albemarle Corporation | Control of biofilm |
US8293795B1 (en) | 1998-06-01 | 2012-10-23 | Albemarle Corporation | Preparation of concentrated aqueous bromine solutions and biocidal applications thereof |
US6511682B1 (en) | 1998-06-01 | 2003-01-28 | Albemarle Corporation | Concentrated aqueous bromine solutions and their preparation |
US6299909B1 (en) | 1998-06-01 | 2001-10-09 | Albemarle Corporation | Concentrated aqueous bromine solutions and their preparation |
US6652889B2 (en) | 1998-06-01 | 2003-11-25 | Albemarle Corporation | Concentrated aqueous bromine solutions and their preparation and use |
US6352725B1 (en) | 1998-06-01 | 2002-03-05 | Albemarle Corporation | Continuous processes for preparing concentrated aqueous liquid biocidal composition |
US6348219B1 (en) | 1998-06-01 | 2002-02-19 | Albemarle Corporation | Processes for preparing concentrated aqueous liquid biocidal compositions |
US6506418B1 (en) | 1999-09-24 | 2003-01-14 | Albemarle Corporation | Concentrated aqueous bromine solutions and their preparation |
US6375991B1 (en) | 2000-09-08 | 2002-04-23 | Albemarle Corporation | Production of concentrated biocidal solutions |
US6919364B2 (en) | 2001-06-28 | 2005-07-19 | Solution Biosciences, Inc. | Microbiological control in animal processing |
WO2003011033A1 (en) * | 2001-06-28 | 2003-02-13 | Solution Biosciences, Inc. | Microbiological control in animal processing |
US6986910B2 (en) | 2001-06-28 | 2006-01-17 | Albemarle Corporation | Microbiological control in poultry processing |
US7901276B2 (en) * | 2003-06-24 | 2011-03-08 | Albemarle Corporation | Microbiocidal control in the processing of meat-producing four-legged animals |
EP1786266B1 (en) * | 2004-09-07 | 2014-12-03 | Albemarle Corporation | Concentrated aqueous bromine solutions and their preparation |
CN101115392B (zh) * | 2004-12-23 | 2011-05-11 | 雅宝公司 | 产肉四足动物加工中的杀微生物控制 |
BRPI0620851B1 (pt) | 2005-12-01 | 2016-08-23 | Albemarle Corp | método para controle microbiano no processo de produção de carne de animais quadrúpedes |
US20090130017A1 (en) * | 2007-11-19 | 2009-05-21 | Searete Llc | Targeted short-lived drug delivery |
CN104098583B (zh) * | 2013-04-09 | 2018-02-02 | 中国医学科学院药物研究所 | 鬼臼毒素晶x型物质及制备方法和其药物组合物与用途 |
Family Cites Families (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US2984674A (en) * | 1958-06-02 | 1961-05-16 | Sandoz Ag | Amides of podophyllic acid and picropodophyllic acid |
US4122092A (en) * | 1977-08-25 | 1978-10-24 | University Of Rochester | Total synthesis of (±)-picropodophyllone and (±)-4'-demethylpicropodophyllone |
-
1984
- 1984-09-26 GB GB848424269A patent/GB8424269D0/en active Pending
-
1985
- 1985-09-09 US US06/773,929 patent/US4680399A/en not_active Expired - Lifetime
- 1985-09-10 IS IS3039A patent/IS3039A7/is unknown
- 1985-09-24 ES ES547248A patent/ES8702395A1/es not_active Expired
- 1985-09-24 EP EP85306787A patent/EP0197219B1/en not_active Expired
- 1985-09-24 DE DE8585306787T patent/DE3574595D1/de not_active Expired - Fee Related
- 1985-09-24 DE DE8888120946T patent/DE3583043D1/de not_active Expired - Fee Related
- 1985-09-24 AT AT85306787T patent/ATE48427T1/de not_active IP Right Cessation
- 1985-09-24 NO NO853743A patent/NO164658C/no not_active IP Right Cessation
- 1985-09-25 FI FI853690A patent/FI84557C/fi not_active IP Right Cessation
- 1985-09-25 CA CA000491564A patent/CA1268709A/en not_active Expired - Lifetime
- 1985-09-25 PT PT81190A patent/PT81190B/pt not_active IP Right Cessation
- 1985-09-25 DK DK434085A patent/DK169385B1/da not_active IP Right Cessation
- 1985-09-26 PL PL1985255527A patent/PL147999B1/pl unknown
-
1986
- 1986-05-16 ES ES555039A patent/ES8900110A1/es not_active Expired
-
1989
- 1989-02-22 CA CA000591830A patent/CA1276110C/en not_active Expired - Lifetime
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
CA1276110C (en) | 1990-11-13 |
DE3583043D1 (de) | 1991-07-04 |
US4680399A (en) | 1987-07-14 |
FI84557C (fi) | 1991-12-27 |
NO164658C (no) | 1990-10-31 |
CA1268709A (en) | 1990-05-08 |
DK434085A (da) | 1986-03-27 |
EP0197219A1 (en) | 1986-10-15 |
ES547248A0 (es) | 1987-01-01 |
ES8702395A1 (es) | 1987-01-01 |
ES8900110A1 (es) | 1988-12-16 |
PL255527A1 (en) | 1986-07-15 |
IS3039A7 (is) | 1986-01-21 |
FI853690L (fi) | 1986-03-27 |
PL147999B1 (en) | 1989-09-30 |
DK169385B1 (da) | 1994-10-17 |
EP0197219B1 (en) | 1989-12-06 |
PT81190A (en) | 1985-10-01 |
GB8424269D0 (en) | 1984-10-31 |
DK434085D0 (da) | 1985-09-25 |
NO853743L (no) | 1986-04-01 |
ES555039A0 (es) | 1988-12-16 |
PT81190B (pt) | 1987-09-30 |
NO164658B (no) | 1990-07-23 |
ATE48427T1 (de) | 1989-12-15 |
FI853690A0 (fi) | 1985-09-25 |
DE3574595D1 (de) | 1990-01-11 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
FI84557B (fi) | Foerfarande foer isolering och rening av podofyllotoxin. | |
Jin | Amaryllidaceae and Sceletium alkaloids | |
Hudlicky et al. | Total Synthesis and Biological Evaluation of Amaryllidaceae Alkaloids: Narciclasine, e nt-7-Deoxypancratistatin, Regioisomer of 7-Deoxypancratistatin, 10b-e pi-Deoxypancratistatin, and Truncated Derivatives1 | |
McCullough | Synthetic methods for unsymmetrically-substituted 1, 2, 4, 5-tetroxanes and of 1, 2, 4, 5, 7-pentoxocanes | |
Molinski et al. | Varamines A and B, new cytotoxic thioalkaloids from Lissoclinum vareau | |
Kam et al. | Biologically active ibogan and vallesamine derivatives from Tabernaemontana divaricata | |
Shizuri et al. | The structures of evonine and neoevonine alkaloids obtained from Euonymus Sieboldiana blume | |
DK155518B (da) | Fremgangsmaade til optisk resolvering af racemisk 1,4-dimethoxy-6-hydroxy-6-acetyltetralin | |
Rao et al. | Chemistry of Saururus cernuus, V. sauristolactam and other nitrogenous constituents | |
Culvenor | The Alkaloids of Heliotropium europaeum L.. II. Isolation and structures of the third major alkaloid and two monor alkaloids, and isolation of the principal n-Oxides | |
US6346631B1 (en) | Process for the preparation of arteethers from dihydroartemisinin | |
Jian et al. | Structure-cardiac activity relationship of C19-diterpenoid alkaloids | |
Rao et al. | New cladiellane diterpenes from the soft coral Cladiella australis of the Andaman and Nicobar Islands | |
WO2009115333A1 (de) | Neue synthesen von praziquantel | |
Tulyaganov et al. | Alkaloids from plants of the Nitraria genus. Structure of sibiridine | |
Brecht et al. | Novel allocolchicinoids with an eight membered B-ring: Design, synthesis and inhibition of tubulin assembly | |
Blaja | Synthesis of new di-and tri-norlabdane compounds with 2-amino-1, 3-thiazole units | |
Patir et al. | Stereoselective total synthesis of (±)-dasycarpidol and (±)-dasycarpidone | |
Hasegawa et al. | 1, 3-Dimethyl-2-phenylbenzimidazoline (DMPBI)-Acetic Acid: An Effective Reagent System for Photoinduced Reductive Transformation of α, β-Epoxy Ketones to β-Hydroxy Ketones | |
Fujioka et al. | Synthetic Studies on Acochlearine: Construction of the A/B/C/E/F Ring System | |
Enders et al. | Asymmetric synthesis of synargentolide A and its 3-epimer using the RAMP-hydrazone methodology | |
Szumny et al. | Lactones, part 28: A new approach for the synthesis of α-methylene lactones from alkenes | |
Bloodworth et al. | A holegenocyclisation route to 1, 2, 4-trioxanes | |
Varlamov et al. | Efficient synthesis and spectroscopic analysis of 8-nitro spiro C-3-annulated 2-benzazepines and their N-oxides | |
Hoffmann et al. | Intramolecular [2+ 2] photocycloaddition of bichromophoric derivatives of 3, 5-dihydroxybenzoic acid and 3, 5-dihydroxybenzonitrile |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
PC | Transfer of assignment of patent |
Owner name: NYCOMED DANMARK A/S |
|
FG | Patent granted |
Owner name: NYCOMED DANMARK A/S |
|
MA | Patent expired |