FI80960C - Foerfarande foer stabilisering av daeggdjurserytrocyter foer anvaendning som kontroll vid blodgas-hemoglobin-analys och kontrollprodukt foer blodgas-hemoglobin-analys. - Google Patents
Foerfarande foer stabilisering av daeggdjurserytrocyter foer anvaendning som kontroll vid blodgas-hemoglobin-analys och kontrollprodukt foer blodgas-hemoglobin-analys. Download PDFInfo
- Publication number
- FI80960C FI80960C FI854328A FI854328A FI80960C FI 80960 C FI80960 C FI 80960C FI 854328 A FI854328 A FI 854328A FI 854328 A FI854328 A FI 854328A FI 80960 C FI80960 C FI 80960C
- Authority
- FI
- Finland
- Prior art keywords
- erythrocytes
- hemoglobin
- gas
- blood
- blood gas
- Prior art date
Links
- 210000003743 erythrocyte Anatomy 0.000 title claims abstract description 69
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 title claims abstract description 55
- 239000008280 blood Substances 0.000 title claims abstract description 55
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 title claims abstract description 7
- 108010054147 Hemoglobins Proteins 0.000 title claims description 43
- 102000001554 Hemoglobins Human genes 0.000 title claims description 43
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims description 25
- 230000000087 stabilizing effect Effects 0.000 title claims description 11
- 239000007789 gas Substances 0.000 claims abstract description 49
- 239000000725 suspension Substances 0.000 claims abstract description 21
- UGFAIRIUMAVXCW-UHFFFAOYSA-N Carbon monoxide Chemical compound [O+]#[C-] UGFAIRIUMAVXCW-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 11
- 229910002091 carbon monoxide Inorganic materials 0.000 claims abstract description 11
- 150000002463 imidates Chemical class 0.000 claims abstract description 7
- ZLFRJHOBQVVTOJ-UHFFFAOYSA-N dimethyl hexanediimidate Chemical compound COC(=N)CCCCC(=N)OC ZLFRJHOBQVVTOJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 29
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims description 21
- QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N atomic oxygen Chemical compound [O] QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 19
- 239000001301 oxygen Substances 0.000 claims description 19
- 229910052760 oxygen Inorganic materials 0.000 claims description 19
- 239000000243 solution Substances 0.000 claims description 17
- 108010064719 Oxyhemoglobins Proteins 0.000 claims description 16
- 238000003556 assay Methods 0.000 claims description 15
- 239000003708 ampul Substances 0.000 claims description 13
- 230000008569 process Effects 0.000 claims description 5
- FRTGEIHSCHXMTI-UHFFFAOYSA-N dimethyl octanediimidate Chemical compound COC(=N)CCCCCCC(=N)OC FRTGEIHSCHXMTI-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- 230000035484 reaction time Effects 0.000 claims description 4
- 239000011261 inert gas Substances 0.000 claims description 3
- 239000012062 aqueous buffer Substances 0.000 claims 2
- AEELXMHQIJJMKP-DMTCNVIQSA-N (2r,3s)-3-sulfanylbutane-1,2,4-triol Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](S)CO AEELXMHQIJJMKP-DMTCNVIQSA-N 0.000 claims 1
- 150000002148 esters Chemical class 0.000 claims 1
- 238000004806 packaging method and process Methods 0.000 claims 1
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 abstract description 17
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 abstract description 17
- 239000003431 cross linking reagent Substances 0.000 abstract description 6
- MYMOFIZGZYHOMD-UHFFFAOYSA-N Dioxygen Chemical compound O=O MYMOFIZGZYHOMD-UHFFFAOYSA-N 0.000 abstract description 3
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 36
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 25
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 22
- 239000013074 reference sample Substances 0.000 description 21
- 108010003320 Carboxyhemoglobin Proteins 0.000 description 18
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 17
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 15
- UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-M Sodium bicarbonate Chemical compound [Na+].OC([O-])=O UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 12
- JKMHFZQWWAIEOD-UHFFFAOYSA-N 2-[4-(2-hydroxyethyl)piperazin-1-yl]ethanesulfonic acid Chemical compound OCC[NH+]1CCN(CCS([O-])(=O)=O)CC1 JKMHFZQWWAIEOD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 11
- CURLTUGMZLYLDI-UHFFFAOYSA-N Carbon dioxide Chemical compound O=C=O CURLTUGMZLYLDI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 10
- CDBYLPFSWZWCQE-UHFFFAOYSA-L sodium carbonate Substances [Na+].[Na+].[O-]C([O-])=O CDBYLPFSWZWCQE-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 10
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 9
- 239000007995 HEPES buffer Substances 0.000 description 8
- XEEYBQQBJWHFJM-UHFFFAOYSA-N Iron Chemical compound [Fe] XEEYBQQBJWHFJM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- 238000006358 imidation reaction Methods 0.000 description 8
- VHJLVAABSRFDPM-ZXZARUISSA-N dithioerythritol Chemical compound SC[C@H](O)[C@H](O)CS VHJLVAABSRFDPM-ZXZARUISSA-N 0.000 description 7
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 7
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 7
- WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N Formaldehyde Chemical compound O=C WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 6
- 239000006172 buffering agent Substances 0.000 description 6
- 239000006285 cell suspension Substances 0.000 description 6
- 239000013068 control sample Substances 0.000 description 6
- 239000000834 fixative Substances 0.000 description 6
- 239000004615 ingredient Substances 0.000 description 6
- 239000000047 product Substances 0.000 description 6
- 235000017557 sodium bicarbonate Nutrition 0.000 description 6
- 229910000030 sodium bicarbonate Inorganic materials 0.000 description 6
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Chemical compound O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- BVKZGUZCCUSVTD-UHFFFAOYSA-M Bicarbonate Chemical compound OC([O-])=O BVKZGUZCCUSVTD-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 5
- 108091003079 Bovine Serum Albumin Proteins 0.000 description 5
- 229940098773 bovine serum albumin Drugs 0.000 description 5
- 229910002092 carbon dioxide Inorganic materials 0.000 description 5
- 229960005091 chloramphenicol Drugs 0.000 description 5
- WIIZWVCIJKGZOK-RKDXNWHRSA-N chloramphenicol Chemical compound ClC(Cl)C(=O)N[C@H](CO)[C@H](O)C1=CC=C([N+]([O-])=O)C=C1 WIIZWVCIJKGZOK-RKDXNWHRSA-N 0.000 description 5
- 239000008367 deionised water Substances 0.000 description 5
- 229910021641 deionized water Inorganic materials 0.000 description 5
- 239000006194 liquid suspension Substances 0.000 description 5
- 229910000029 sodium carbonate Inorganic materials 0.000 description 5
- 238000003860 storage Methods 0.000 description 5
- 208000010444 Acidosis Diseases 0.000 description 4
- 102000004506 Blood Proteins Human genes 0.000 description 4
- 108010017384 Blood Proteins Proteins 0.000 description 4
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 4
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 4
- 206010018910 Haemolysis Diseases 0.000 description 4
- 230000007950 acidosis Effects 0.000 description 4
- 208000026545 acidosis disease Diseases 0.000 description 4
- 239000003963 antioxidant agent Substances 0.000 description 4
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 4
- 239000008366 buffered solution Substances 0.000 description 4
- HVYWMOMLDIMFJA-DPAQBDIFSA-N cholesterol Chemical compound C1C=C2C[C@@H](O)CC[C@]2(C)[C@@H]2[C@@H]1[C@@H]1CC[C@H]([C@H](C)CCCC(C)C)[C@@]1(C)CC2 HVYWMOMLDIMFJA-DPAQBDIFSA-N 0.000 description 4
- 238000004132 cross linking Methods 0.000 description 4
- 210000003617 erythrocyte membrane Anatomy 0.000 description 4
- FOXRXJCUDMEHNK-UHFFFAOYSA-N ethoxyethane;formic acid Chemical compound OC=O.CCOCC FOXRXJCUDMEHNK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 230000008588 hemolysis Effects 0.000 description 4
- 230000003647 oxidation Effects 0.000 description 4
- 238000007254 oxidation reaction Methods 0.000 description 4
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 4
- 239000013558 reference substance Substances 0.000 description 4
- 239000000523 sample Substances 0.000 description 4
- 230000006641 stabilisation Effects 0.000 description 4
- 238000011105 stabilization Methods 0.000 description 4
- 102000009027 Albumins Human genes 0.000 description 3
- 108010088751 Albumins Proteins 0.000 description 3
- 208000005223 Alkalosis Diseases 0.000 description 3
- BVKZGUZCCUSVTD-UHFFFAOYSA-L Carbonate Chemical compound [O-]C([O-])=O BVKZGUZCCUSVTD-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 3
- OAKJQQAXSVQMHS-UHFFFAOYSA-N Hydrazine Chemical compound NN OAKJQQAXSVQMHS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 125000003277 amino group Chemical group 0.000 description 3
- 210000000601 blood cell Anatomy 0.000 description 3
- 239000012503 blood component Substances 0.000 description 3
- 239000007853 buffer solution Substances 0.000 description 3
- 230000003139 buffering effect Effects 0.000 description 3
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 3
- QEWYKACRFQMRMB-UHFFFAOYSA-N fluoroacetic acid Chemical compound OC(=O)CF QEWYKACRFQMRMB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- PGBHMTALBVVCIT-VCIWKGPPSA-N framycetin Chemical compound N[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](CN)O[C@@H]1O[C@H]1[C@@H](O)[C@H](O[C@H]2[C@@H]([C@@H](N)C[C@@H](N)[C@@H]2O)O[C@@H]2[C@@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CN)O2)N)O[C@@H]1CO PGBHMTALBVVCIT-VCIWKGPPSA-N 0.000 description 3
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 3
- 229910052742 iron Inorganic materials 0.000 description 3
- 239000000463 material Substances 0.000 description 3
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 3
- HAEPBEMBOAIUPN-UHFFFAOYSA-L sodium tetrathionate Chemical compound O.O.[Na+].[Na+].[O-]S(=O)(=O)SSS([O-])(=O)=O HAEPBEMBOAIUPN-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 3
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 3
- -1 tris-hydroxymethyl Chemical group 0.000 description 3
- 239000011800 void material Substances 0.000 description 3
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 3
- BDOYKFSQFYNPKF-UHFFFAOYSA-N 2-[2-[bis(carboxymethyl)amino]ethyl-(carboxymethyl)amino]acetic acid;sodium Chemical compound [Na].[Na].OC(=O)CN(CC(O)=O)CCN(CC(O)=O)CC(O)=O BDOYKFSQFYNPKF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N EDTA Chemical compound OC(=O)CN(CC(O)=O)CCN(CC(O)=O)CC(O)=O KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108010061951 Methemoglobin Proteins 0.000 description 2
- 102000004316 Oxidoreductases Human genes 0.000 description 2
- 108090000854 Oxidoreductases Proteins 0.000 description 2
- 108010071390 Serum Albumin Proteins 0.000 description 2
- 102000007562 Serum Albumin Human genes 0.000 description 2
- UIIMBOGNXHQVGW-DEQYMQKBSA-M Sodium bicarbonate-14C Chemical compound [Na+].O[14C]([O-])=O UIIMBOGNXHQVGW-DEQYMQKBSA-M 0.000 description 2
- TVXBFESIOXBWNM-UHFFFAOYSA-N Xylitol Natural products OCCC(O)C(O)C(O)CCO TVXBFESIOXBWNM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000002411 adverse Effects 0.000 description 2
- 150000001299 aldehydes Chemical class 0.000 description 2
- 230000002340 alkalosis Effects 0.000 description 2
- 150000001412 amines Chemical class 0.000 description 2
- 230000000844 anti-bacterial effect Effects 0.000 description 2
- 230000003078 antioxidant effect Effects 0.000 description 2
- 229940124574 antisickling agent Drugs 0.000 description 2
- 239000003899 bactericide agent Substances 0.000 description 2
- 239000001569 carbon dioxide Substances 0.000 description 2
- 230000006037 cell lysis Effects 0.000 description 2
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 2
- 235000012000 cholesterol Nutrition 0.000 description 2
- 239000011248 coating agent Substances 0.000 description 2
- 238000000576 coating method Methods 0.000 description 2
- 230000000052 comparative effect Effects 0.000 description 2
- 239000000306 component Substances 0.000 description 2
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 2
- VHJLVAABSRFDPM-QWWZWVQMSA-N dithiothreitol Chemical compound SC[C@@H](O)[C@H](O)CS VHJLVAABSRFDPM-QWWZWVQMSA-N 0.000 description 2
- 238000005187 foaming Methods 0.000 description 2
- 102000018146 globin Human genes 0.000 description 2
- 108060003196 globin Proteins 0.000 description 2
- 230000007062 hydrolysis Effects 0.000 description 2
- 238000006460 hydrolysis reaction Methods 0.000 description 2
- 230000003834 intracellular effect Effects 0.000 description 2
- JDNTWHVOXJZDSN-UHFFFAOYSA-N iodoacetic acid Chemical compound OC(=O)CI JDNTWHVOXJZDSN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-N lactic acid Chemical compound CC(O)C(O)=O JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- HEBKCHPVOIAQTA-UHFFFAOYSA-N meso ribitol Natural products OCC(O)C(O)C(O)CO HEBKCHPVOIAQTA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 2
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 2
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 2
- 238000007789 sealing Methods 0.000 description 2
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 2
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 2
- PUZPDOWCWNUUKD-UHFFFAOYSA-M sodium fluoride Chemical compound [F-].[Na+] PUZPDOWCWNUUKD-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 239000003381 stabilizer Substances 0.000 description 2
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 2
- 239000000811 xylitol Substances 0.000 description 2
- HEBKCHPVOIAQTA-SCDXWVJYSA-N xylitol Chemical compound OC[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)CO HEBKCHPVOIAQTA-SCDXWVJYSA-N 0.000 description 2
- 229960002675 xylitol Drugs 0.000 description 2
- 235000010447 xylitol Nutrition 0.000 description 2
- IEUUDEWWMRQUDS-UHFFFAOYSA-N (6-azaniumylidene-1,6-dimethoxyhexylidene)azanium;dichloride Chemical compound Cl.Cl.COC(=N)CCCCC(=N)OC IEUUDEWWMRQUDS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- FJFWTROADHZFDY-UHFFFAOYSA-N 1-(trihydroxymethylamino)propane-2-sulfonic acid Chemical compound OS(=O)(=O)C(C)CNC(O)(O)O FJFWTROADHZFDY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 1
- XFXPMWWXUTWYJX-UHFFFAOYSA-N Cyanide Chemical compound N#[C-] XFXPMWWXUTWYJX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000002756 Erythrina berteroana Nutrition 0.000 description 1
- 244000088811 Erythrina rubrinervia Species 0.000 description 1
- 235000002753 Erythrina rubrinervia Nutrition 0.000 description 1
- 102000009123 Fibrin Human genes 0.000 description 1
- 108010073385 Fibrin Proteins 0.000 description 1
- BWGVNKXGVNDBDI-UHFFFAOYSA-N Fibrin monomer Chemical compound CNC(=O)CNC(=O)CN BWGVNKXGVNDBDI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- VZCYOOQTPOCHFL-OWOJBTEDSA-N Fumaric acid Chemical compound OC(=O)\C=C\C(O)=O VZCYOOQTPOCHFL-OWOJBTEDSA-N 0.000 description 1
- 108010010803 Gelatin Proteins 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 1
- SXRSQZLOMIGNAQ-UHFFFAOYSA-N Glutaraldehyde Chemical compound O=CCCCC=O SXRSQZLOMIGNAQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108091006905 Human Serum Albumin Proteins 0.000 description 1
- 102000008100 Human Serum Albumin Human genes 0.000 description 1
- JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-M Lactate Chemical compound CC(O)C([O-])=O JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N Lactose Natural products OC[C@H]1O[C@@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)C(O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N 0.000 description 1
- 108010052285 Membrane Proteins Proteins 0.000 description 1
- 229930193140 Neomycin Natural products 0.000 description 1
- 239000001744 Sodium fumarate Substances 0.000 description 1
- 244000269722 Thea sinensis Species 0.000 description 1
- 239000007983 Tris buffer Substances 0.000 description 1
- 230000002159 abnormal effect Effects 0.000 description 1
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 1
- 230000004520 agglutination Effects 0.000 description 1
- 230000000843 anti-fungal effect Effects 0.000 description 1
- 230000002869 anti-sickling effect Effects 0.000 description 1
- 239000003939 antisickling agent Substances 0.000 description 1
- 230000008033 biological extinction Effects 0.000 description 1
- 230000019522 cellular metabolic process Effects 0.000 description 1
- 229940107161 cholesterol Drugs 0.000 description 1
- 150000001860 citric acid derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 238000011109 contamination Methods 0.000 description 1
- 238000012937 correction Methods 0.000 description 1
- 239000002537 cosmetic Substances 0.000 description 1
- 230000009089 cytolysis Effects 0.000 description 1
- 230000006866 deterioration Effects 0.000 description 1
- 238000009792 diffusion process Methods 0.000 description 1
- 125000000118 dimethyl group Chemical group [H]C([H])([H])* 0.000 description 1
- JKNIOHXBRYZCTM-UHFFFAOYSA-N dimethyl hexanediimidate;hydrochloride Chemical compound Cl.COC(=N)CCCCC(=N)OC JKNIOHXBRYZCTM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- MSJMDZAOKORVFC-SEPHDYHBSA-L disodium fumarate Chemical compound [Na+].[Na+].[O-]C(=O)\C=C\C([O-])=O MSJMDZAOKORVFC-SEPHDYHBSA-L 0.000 description 1
- 230000002349 favourable effect Effects 0.000 description 1
- 229950003499 fibrin Drugs 0.000 description 1
- 238000011049 filling Methods 0.000 description 1
- 150000004673 fluoride salts Chemical class 0.000 description 1
- 229940050411 fumarate Drugs 0.000 description 1
- 230000002538 fungal effect Effects 0.000 description 1
- 238000002309 gasification Methods 0.000 description 1
- 229920000159 gelatin Polymers 0.000 description 1
- 239000008273 gelatin Substances 0.000 description 1
- 235000019322 gelatine Nutrition 0.000 description 1
- 235000011852 gelatine desserts Nutrition 0.000 description 1
- 238000001879 gelation Methods 0.000 description 1
- 239000011521 glass Substances 0.000 description 1
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 1
- 229960001031 glucose Drugs 0.000 description 1
- 108010036302 hemoglobin AS Proteins 0.000 description 1
- 150000003840 hydrochlorides Chemical class 0.000 description 1
- 150000007529 inorganic bases Chemical class 0.000 description 1
- 239000000644 isotonic solution Substances 0.000 description 1
- 239000004310 lactic acid Substances 0.000 description 1
- 235000014655 lactic acid Nutrition 0.000 description 1
- 229960000448 lactic acid Drugs 0.000 description 1
- 239000008101 lactose Substances 0.000 description 1
- 230000004199 lung function Effects 0.000 description 1
- 230000014759 maintenance of location Effects 0.000 description 1
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 1
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 1
- 230000002503 metabolic effect Effects 0.000 description 1
- 229910052751 metal Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000002184 metal Substances 0.000 description 1
- WSFSSNUMVMOOMR-NJFSPNSNSA-N methanone Chemical compound O=[14CH2] WSFSSNUMVMOOMR-NJFSPNSNSA-N 0.000 description 1
- 230000000813 microbial effect Effects 0.000 description 1
- 230000003278 mimic effect Effects 0.000 description 1
- 229960004927 neomycin Drugs 0.000 description 1
- 229940053050 neomycin sulfate Drugs 0.000 description 1
- 150000002825 nitriles Chemical class 0.000 description 1
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 description 1
- 229960000988 nystatin Drugs 0.000 description 1
- VQOXZBDYSJBXMA-NQTDYLQESA-N nystatin A1 Chemical compound O[C@H]1[C@@H](N)[C@H](O)[C@@H](C)O[C@H]1O[C@H]1/C=C/C=C/C=C/C=C/CC/C=C/C=C/[C@H](C)[C@@H](O)[C@@H](C)[C@H](C)OC(=O)C[C@H](O)C[C@H](O)C[C@H](O)CC[C@@H](O)[C@H](O)C[C@](O)(C[C@H](O)[C@H]2C(O)=O)O[C@H]2C1 VQOXZBDYSJBXMA-NQTDYLQESA-N 0.000 description 1
- 230000003287 optical effect Effects 0.000 description 1
- 239000007800 oxidant agent Substances 0.000 description 1
- 238000010979 pH adjustment Methods 0.000 description 1
- 238000001139 pH measurement Methods 0.000 description 1
- 230000037361 pathway Effects 0.000 description 1
- 230000004962 physiological condition Effects 0.000 description 1
- 239000002504 physiological saline solution Substances 0.000 description 1
- 230000003389 potentiating effect Effects 0.000 description 1
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 description 1
- 239000012460 protein solution Substances 0.000 description 1
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 description 1
- 230000000241 respiratory effect Effects 0.000 description 1
- 239000012723 sample buffer Substances 0.000 description 1
- 238000007086 side reaction Methods 0.000 description 1
- 239000001509 sodium citrate Substances 0.000 description 1
- NLJMYIDDQXHKNR-UHFFFAOYSA-K sodium citrate Chemical compound O.O.[Na+].[Na+].[Na+].[O-]C(=O)CC(O)(CC([O-])=O)C([O-])=O NLJMYIDDQXHKNR-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 239000011775 sodium fluoride Substances 0.000 description 1
- 235000013024 sodium fluoride Nutrition 0.000 description 1
- 229940005573 sodium fumarate Drugs 0.000 description 1
- 235000019294 sodium fumarate Nutrition 0.000 description 1
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 1
- 230000002269 spontaneous effect Effects 0.000 description 1
- XOAAWQZATWQOTB-UHFFFAOYSA-N taurine Chemical compound NCCS(O)(=O)=O XOAAWQZATWQOTB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- VZCYOOQTPOCHFL-UHFFFAOYSA-N trans-butenedioic acid Natural products OC(=O)C=CC(O)=O VZCYOOQTPOCHFL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N tris Chemical compound OCC(N)(CO)CO LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000011534 wash buffer Substances 0.000 description 1
Classifications
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/72—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving blood pigments, e.g. haemoglobin, bilirubin or other porphyrins; involving occult blood
- G01N33/721—Haemoglobin
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/80—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving blood groups or blood types or red blood cells
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/96—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving blood or serum control standard
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N2333/00—Assays involving biological materials from specific organisms or of a specific nature
- G01N2333/435—Assays involving biological materials from specific organisms or of a specific nature from animals; from humans
- G01N2333/76—Assays involving albumins other than in routine use for blocking surfaces or for anchoring haptens during immunisation
- G01N2333/765—Serum albumin, e.g. HSA
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N2333/00—Assays involving biological materials from specific organisms or of a specific nature
- G01N2333/795—Porphyrin- or corrin-ring-containing peptides
- G01N2333/805—Haemoglobins; Myoglobins
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N2496/00—Reference solutions for assays of biological material
- G01N2496/05—Reference solutions for assays of biological material containing blood cells or plasma
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N2496/00—Reference solutions for assays of biological material
- G01N2496/70—Blood gas control solutios containing dissolved oxygen, bicarbonate and the like
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
- Y10T—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER US CLASSIFICATION
- Y10T436/00—Chemistry: analytical and immunological testing
- Y10T436/10—Composition for standardization, calibration, simulation, stabilization, preparation or preservation; processes of use in preparation for chemical testing
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
- Y10T—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER US CLASSIFICATION
- Y10T436/00—Chemistry: analytical and immunological testing
- Y10T436/10—Composition for standardization, calibration, simulation, stabilization, preparation or preservation; processes of use in preparation for chemical testing
- Y10T436/102499—Blood gas standard or control
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
- Y10T—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER US CLASSIFICATION
- Y10T436/00—Chemistry: analytical and immunological testing
- Y10T436/10—Composition for standardization, calibration, simulation, stabilization, preparation or preservation; processes of use in preparation for chemical testing
- Y10T436/105831—Protein or peptide standard or control [e.g., hemoglobin, etc.]
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
- Y10T—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER US CLASSIFICATION
- Y10T436/00—Chemistry: analytical and immunological testing
- Y10T436/10—Composition for standardization, calibration, simulation, stabilization, preparation or preservation; processes of use in preparation for chemical testing
- Y10T436/106664—Blood serum or blood plasma standard or control
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Hematology (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Immunology (AREA)
- Urology & Nephrology (AREA)
- Food Science & Technology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Cell Biology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Microbiology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- General Physics & Mathematics (AREA)
- Pathology (AREA)
- Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
- Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
- Housing For Livestock And Birds (AREA)
- Solid-Sorbent Or Filter-Aiding Compositions (AREA)
Description
1 80960
Menetelmä stabiloida nisäkkään erytrosyyttejä käytettäväksi verikaasu-homoglobiini-analyysissä vertailuaineena sekä verikaasu-hemoglobiini-analyysin vertailunäytetuote 5 Keksintö koskee menetelmää stabiloida nisäkkään erytrosyyttejä käytettäväksi verikaasu-hemoglobiini-analyysissä vertailuaineena sekä verikaasu-hemoglobiini-ana-lyysin vertailunäytetuotetta ja pakkausta.
Verikaasuanalyyseja tehdään useimmissa sairaalala-10 boratorioissa tarkoituksena diagnosoida ja hoitaa epänor maaleja keuhkojen toimintaa ja happo/emäs-tasapainoja. Mitattavat kolme parametria ovat veren pH, C02:n osapaine (pco2) hapen osapaine (Ρθ2). Lisäksi voidaan tehdä myös hemoglobiinitestejä. Nämä testit käsittävät kokonaisdeok-15 sihemoglobiinin, oksihemoglobiinin, karboksihemoglobiinin ja methemoglobiinin määrittäminen.
Tehtäessä pH-, Ρθ2~ ja P^ -analyysejä potilaasta otetaan verinäyte ja se johdetaan erikoislaitteeseen, jossa on mitattaville parametreille spesifiset elektrodit. 20 Koska veri pilaantuu nopeasti ja koska liuenneilla kaa suilla on taipumusta tulla ulos liuoksesta, näyte pitää analysoida välittömästi tai muutaman tunnin kuluessa, jos veri on ollut jäähdytettynä jäillä.
On tietysti itsestään selvää, että analyysitulokset 25 eivät voi olla parempia kuin käytetty laitteisto. Niinpä on välttämätöntä valvoa laitteen oikeaa kalibrointia ja toimintaa. Vaikka ulkopuolista kaasulähdettä voidaan käyttää standardoimaan veren kaasun mittauslaitetta, testeissä käytettävät elektrodit ovat herkkiä analyysiväliaineelle. 30 Kun esimerkiksi käytetään happea kaasumaisessa tilassa standardina, saadaan mittarin lukema, joka on erilainen kuin se, mikä saataisiin käytettäessä standardina nestettä, joka sisältää liuennutta happea. Tämä nesteen ja kaasun ero johtuu eroista hapen diffuusionopeuksissa läpi 35 kaasumaisen tai nestemäisen väliaineen, johon se on yhdistetty.
2 80960
Kun on pyritty lievittämään matemaattisten korjausten tarvetta tämän nesteen ja kaasun eron kompensoimiseksi on havaittu, että nestemäinen vertailuaine on suositeltavampi kuin kaasumainen vertailuaine. Edullisin neste 5 olisi tietysti veri, koska se sisältää kaikki ainekset, joille analyysilaitteisto joutuu alttiiksi. Veri kuitenkin pilaantuu nopeasti ja menettää liuenneet kaasut. Lisäksi solujen metabolian seurauksena kasvaa kun taas P0 ja 2 2 pH laskevat. Koska ei ole mitään tunnettua menetelmää es-10 tää näitä muutoksia, jotka tapahtuvat säilytettäessä koko-verta, se on hylätty vertailuaineena.
Ensimmäiset nestemäiset veren kaasujen vertailun-äytteet olivat puskuroituja vesiliuoksia, jotka sisälsivät liuenneita kaasuja. Vaikka näillä liuoksilla vältettiin 15 nesteiden ja kaasujen eron aiheuttamat ongelmat, niistä puuttui muita veren komponentteja, jotka vaikuttavat analyysilaitteiston herkkiin elektrodikomponentteihin.
Ensimmäisenä askeleena ratkaistaessa tätä ongelmaa valmistettiin vertailunäytteitä, jotka sisälsivät liukois-20 ta hemoglobiinia. Näistä vertailunäytteistä kuitenkin puuttui methemoglobiinin reduktaasientsyymi, joka verisoluissa pelkistää raudan Fe** -muotoon. Kun hemoglobiinin rauta on aina Fe++* -muodossa siitä seuraa, että hemoglobiini on methemoglobiinia. Niinpä näitä vertailunäytteitä 25 voidaan käyttää vain kokonaishemoglobiinin analyyseihin. Nyttemmin on kehitetty vertailunäytteitä, jotka läheisemmin muistuttavat kokoverta.
US-patenttijulkaisussa 3 859 049 kuvataan menetelmää stabiloida kokoverta ja kokoveren komponentteja käyt-30 täen fluorideja, sitraatteja, fluorietikkahappoa ja jodi-etikkahappoa. Tyypillisesti lisätään kokovereen natrium-fluoridia, natriumsitraattia ja fluorietikka- tai jodi-etikkahappoa. Seos jäähdytetään ja sen annetaan seistä riittävän pitkään, jotta Pco-, P0 - ja pH-tasot stabiloitu- 2 2 35 vat. Valitettavasti tuotteella on lyhyt elinikä, noin yksi
II
3 80960 kuukausi. Tuotteita, joilla on pitempi elinikä, on valmistettu käsittelemällä veren komponentteja aldehydillä.
US-patenttijulkaisussa 3 973 913 kuvataan menetelmä stabiloida punaisia verisoluja erottamalla ne kokoverestä 5 ja stabiloimalla ne käsittelemällä aldehydillä, esim. formaldehydillä tai glutaraldehydillä. Nämä stabiloidut solut lisätään puskuroituun liuokseen, joka sisältää glukoosia, neomysiiniä ja kloramfenikolia bakterisideina, ja suolaa aikaansaamaan isotoninen liuos, jolla on sama osmolaali-10 suus kuin verellä. Tämän tuotteen elinikä on kuitenkin vain kaksi kuukautta, ja solut menettävät nopeasti hemoglobiinin, joka hapettuu methemoglobiiniksi.
Se mitä tarvitaan on parempi stabilointitekniikka, jolla saadaan pysyvämpiä verikaasu- ja hemoglobiinianalyy-15 seihin tarkoitettuja vertailunäytteitä, jotka simuloivat kokoverta.
Tässä julkaisussa käytetyllä termillä "hemoglobii-nianalyysi" tarkoitetaan sellaisia hemoglobiinitestejä, jotka mittaavat kokonaishemoglobiinin ja oksihemoglobii-20 nin, karboksihemoglobiinin ja methemoglobiinin prosenttiosuuden. Muut parametrit kuten tilavuus-% 02 ja C02 voidaan laskea havaituista arvoista.
Dimetyyliadipimidaattia on esitetty ristisilloitta-vana aineena erytrosyyttimembraaneissa; katso Niehaus, 25 W.G., et ai. "Cross-Linking of Erythrocyte Membranes With
Dimethyl Adipimidate”, Biochem. Biophys. Acta 196: 170-175 (1970).
Muissa tutkimuksissa dimetyyliadipimidaattia (DMA) on kuvattu sirppiytymisen estoaineena punaisille veriso-30 luille; katso "Dimethyl Adipimidate: A New Antisickling Agent", Lubin, B.H., et al., Proc. Nat. Acad. Sci. USA, 72, (1): 43-46, (1975) ja "Antisickling Nature of Dimet hyl Adipimidate”, Waterman, M.R. et al. Biochem. Biophys. Res. Comm., 63 (3): 580-587 (1975).
35 Äskettäin DMA:n ristisilloittavien vaikutusten on 4 80960 osoitettu inhiboivan entsyymiaktiivisuutta; katso "The Effects of Crosslinking Reagents on Red-Cell Shape", Ment-zer, W.C. ja Lubin, B.H., Seminars in Hematology 16: 115- 127 (1979). Lisäksi DMA:n on osoitettu vaikuttavan ionire-5 tentioon erytrosyyteissä, Krinsky, N.I., et al.
"Retention of K* Gradients in Imidoester Crosslinked Erythrocyte Membranes" Arch. Biochem. Biophys., 160: 350-352 (1974).
DMA:n käyttöä erytrosyyttimembraanien ristisilloit-10 tamiseen verikaasujen vertailunäytteissä ei ole kuvattu aikaisemmin.
On yllättäen havaittu, että verikaasu-hemoglobiini-analyysin vertailunäyte voidaan valmistaa stabiloimalla punaisia verisoluja dimetyyliadipimidaatilla (DMA) ja sus-15 pendoimalla stabiloidut solut puskurointiväliaineeseen, joka sisältää proteiinia, joka simuloi plasman proteiinin vaikutusta verikaasun mittauksiin. Edullinen plasman proteiini on härän seerumin albumiini.
Käsittelemällä punaiset solut erikseen hapella tai 20 hiilimonoksidilla DMA-ristisilloituksen aikana voidaan valmistaa vertailunäytteitä käytettäväksi hemoglobiinin määrityksissä. Puskuroitu punasolujen suspensio pakataan ampulleihin ja varastoidaan jäähdytettynä. Edullisia pus-kurointiaineita ovat N-(tris-hydroksimetyyli)metyyli-2-25 aminoetaanisulfonihappo (TES) tai N-2-hydroksietyylipipe- ratsiini-N-2-etaanisulfonihappo (HEPES).
Tämä keksintö kohdistuu vertailunäytteeseen, jota voidaan käyttää sekä verikaasujen että hemoglobiinin määrityksissä. Keksinnön mukaiselle verikaasu-hemoglobiini-30 analyysin vertailunäytetuotteelle on tunnusomaista, että se sisältää: (a) puskuroidun suspensioväliaineen, joka koostuu pusku-rointiaineen vesiliuoksesta, kyseisen väliaineen pH:n ollessa välillä noin 6,8 - 8,0; ja 35 (b) stabiloituja erytrosyyttejä, jotka on valmistettu pa-
II
s 80960 tenttivaatimuksessa 1 esitetyn menetelmän mukaisesti, jolloin kyseisten erytrosyyttien määrä suspensiovällaineessa on sellainen, että suspensioväliaineen kokonaishemoglobiinin konsentraatio on noin 3-24 g/dl; kyseisen hemoglobii-5 nin sisältäessä noin 60-100 % oksihemoglobiinia ja noin 0-35 % karboksihemoglobiinia. Käytännössä voidaan tässä keksinnössä käyttää mitä tahansa nisäkkäältä peräisin olevia erytrosyyttejä, edullisten erytrosyyttien ollessa ihmisen erytrosyyttej ä.
10 Tämän keksinnön mukaista vertailunäytettä voidaan valmistaa erilaisina pitoisuuksina kunkin kokeellisesti mitattavan parametrin suhteen, näitä ovat pH, PQ , Pco , ko- 2 2 konaishemoglobiinipitoisuus (THb), oksihemoglobiininpro-senttiosuus (02Hb), karboksihemoglobiinin prosenttiosuus 15 (COHb) ja methemoglobiinin prosenttiosuus (MetHb). Niinpä kukin näistä parametreista voidaan valita simuloimaan kliinistä asidoosia, normaalitilannetta ja laktoosia joko metabolisella tai respiratorisella perusteella. Parametrien vaihteluvälit, jonka sisällä vertailunäyte voidaan 20 valmistaa, ovat:
Erittäin edullinen Edullinen vaihtelu- 25 Para- Vaihte- vaihtelu- väli metri luväli väli_ _ pH 6,6-8,0 6,8-7,8 7,0-7,7 Ρθ2 mmHg 20-200 30-180 40-150
Pco2 mmHg 10-150 15-75 15-65 30 THb, g/dl 3-24 5-21 9-17 %02Hb,% 0-100 50-100 60-98 %C0Hb,% 0-100 0-50 0-35 %MetHb,% 0-30 0-10 <3
Tyypillinen vaihteluväli parametrien konsentraa- 35 tioissa on pH:11a noin 6,8-8,0; konaishemoglobiinilla noin 3-24 g/dl; oksihemoglobiinilla noin 60-100 %, karboksihe- 6 80960 moglobiinilla noin 0-35 % ja methemoglobiinilla alle 3 %. Nämä vaihteluvälit on valittu, koska ne kuvaavat näiden parametrien fysiolgoisesti tavattuja vaihteluvälejä.
Erytrosyyttejä juuri otetusta verestä samoin kuin 5 erytrosyyttejä seisseestä verestä, esim. verisoluja, joita on seisotettu aina 11 viikkoa, voidaan käyttää. Suurempi stabiilisuus voidaan saavuttaa käyttämällä seisotettuja soluja. Edullisesti verisoluja seisotetaan ainakin kuusi viikkoa, edullisimmin ainakin 10 viikkoa.
10 Valmistettaessa tämän keksinnön mukaista ver- tailunäytettä erytrosyytit stabilidaan reaktiolla DMA: n kanssa ja suspendoidaan puskurointiväliaineeseen. Neljä kriteeriä määrää sopivan puskurin valinnan käytettäväksi esillä olevassa keksinnössä: 15 1. Puskurilla täytyy olla riittävä puskurointikapasiteetti halutulla pH-välillä.
2. Puskurilla täytyy olla pH vastaan lämpötila-kerroin, joka riittävän hyvin simuloi tuoreen kokoveren vastaavaa kerrointa.
20 3. Puskuria täytyy voida käyttää konsentraationa, joka on riittävä takaamaan pH:n stabiilisuuden ja kuitenkin on riittävän herkkä havaitsemaan virhelähteet pH-mittaussys-teemissä.
4. Puskuri ei saa vaikuttaa haitallisesti erytrosyyt- 25 teihin.
Alan ammattimiehille on selvää, että suuri joukko puskureita täyttää nämä vaatimukset. Tässä julkaisussa käytetyllä termillä "puskurointiaine" tarkoitetaan pus- kuriyhdistettä, joka täyttää edellä esitetyt vaatimukset.
30 Havainnollistavina, ei rajoittavina esimerkkeinä puskureista, joita voidaan käyttää tässä keksinnössä, ovat N-(tris-hydroksimetyyli)metyyli-2-aminoetaanisulfonihappo (TES) ja N-2-hydroksietyylipiperatsiini-N-2-etaanisulfoni-happo (HEPES). Puskuria käytetään konsentraationa välillä 35 noin 0,01 - 0,10 M; edullisesti noin 0,025 - 0,09 M; edul- 7 80960 lisemmin noin 0,035 - 0,08 M; edullisimmin noin 0,05 0,07 M.
pH-mittarin ja verikaasulaitteiston oikea toiminta vaatii lämpötilan, jossa mittaukset suoritetaan, tarkkaa 5 säätöä. Koska tarkoituksena on simuloida kokoveren käyttäytymistä termostoidussa systeemissä, on toivottavaa, että vertailunäytteellä on sama pH vastaan lämpötila-kerroin kuin kokoverellä (-0,015 pH-yksikköä/eC). Niinpä tämän keksinnön mukaisen vertailunäytteen pH vastaan lämpötila-10 kerroin on edullisesti ainakin -0,015 pH-yksikköä/eC.
Vertailunäytteen, jossa käytetään HEPES:a pus-kurointiaineena konsentraationa noin 0,05 - 0,07 M, pH vastaan lämpötila-kerroin on -0,015 pH/eC.
Valmistettaessa tämän keksinnön mukaista vertailu-15 näytettä stabiloidut erytrosyytit suspendoidaan nestemäiseen puskurointiväliaineeseen, joka voi olla puskurointi-aineen deionisoituun veteen muodostettu liuos. Verikaasu-jen mittauksissa plasman proteiinit voivat kuitenkin vaikuttaa määrityksiin seurauksena siitä, että ne muodostavat 20 päällysteen elektrodeille. Tätä vaikutusta voidaan simuloida lisäämällä puskuroituun nestemäiseen suspensioväli-aineeseen proteiinia, joka el (1) muodosta saostumaa, (2) muodosta fibriinihyytyrniä tai (3) aiheuta erytrosyyttien agglutinaatioita. Proteiinissa ei saa olla epäpuhtautena 25 jäännösentsyymejä, jotka voisivat vaikuttaa vertailunäytteen stabiilisuuteen.
Ihmisen plasman proteiinikonsentraatio on noin 4,0 - 6,0 % (paino/tilavuus). Sopiva standardi voidaan valmistaa käyttäen proteiinikonsentraatiota noin 0,4 - 8,0 30 % (paino/tilavuus). Alle 0,4 %:n konsentraatiolla ei oleellista päällystysvaikutusta havaita, kun taas yli 8,0 %:n konsentraatio on suurempi kuin mitä voidaan tavallisesti odottaa ihmisen verinäytteen sisältävän. Proteiinikonsentraatio, jota käytetään valmistettaessa tämän kek-35 sinnön mukaisia vertailunäytteitä, on edullisesti noin 2- 8 80960 7 % (paino/tilavuus); edullisemmin noin 3 - 6,5 % (pai-no/tilavuus); edullisimmin 4,0 - 6,0 % (paino/tilavuus). Mitä tahansa inerttiä veteen liukenevaa proteiinia voidaan käyttää proteiinin lähteenä tämän keksinnön mukaisissa 5 vertailunäytteissä. Näiden proteiinien yhteydessä käytettynä termillä "inertti" tarkoitetaan sitä, että proteiinit eivät hajota erytrosyyttejä tai muuten aiheuta niiden huonontumista. Täten entsyymit eivät yleensä ole sopivia proteiinien lähteitä.
10 Vaikkakin nisäkkäiden seerumialbumiinit yleensä ovat sopivia proteiinin lähteitä tämän keksinnön mukaisiin vertailunäytteisiin, edullisimmat seerumialbumiinit ovat ihmisen seerumialbumiini ja härän seerumialbumiini. Härän seerumialbumiini on edullisin, koska sitä on helpos-15 ti saatavissa puhdistetussa muodossa kohtuulliseen hintaan. Vaihtoehtoisesti voidaan myös gelatiinia käyttää proteiinina.
Alan ammattimiehille on ilmeistä, että mitä tahansa aikaisemmin tunnettua verikaasun vertailunäytettä voidaan 20 parantaa ja tehdä enemmän kokoverta muistuttavaksi lisäämällä näihin nestemäisiin vertailunäytteisiin nisäkkään albumiinia edellä esitetyn mukaisesti.
Verikaasun vertailunäytteen täytyy sisältää sopivat 02- ja C02-konsentraatiot, jotta analyysilaitteisto saadaan 25 standardoitua näiden kaasujen suhteen. Halutut P0- ja Pc0 - 2 2 pitoisuudet saavutetaan levittämällä kaasuseosta puskuroidulle nestemäiselle väliaineelle. Edullisesti kaasu levitetään tämän keksinnön mukaiselle vertailunäytteelle juuri ennen kuin nestemäinen suspensio suljetaan ampulleihin tai 30 muihin sopiviin säiliöihin.
Riippuen liuoksen pH:sta ja lämpötilasta hiilidioksidi voi olla joko liuenneen kaasun muodossa tai muodostaa hydrattuja muotoja läsnä olevien bikarbonaatti- ja karbo-naatti-anionien kanssa.
35 Koska kaasun kokonaispaine suljetussa vertailunäyt-
II
9 80960 teessä pitää voida säilyttää tiettyjen käytännön rajojen sisällä, on välttämätöntä lisätä bikarbonaatti-ioneja, edullisesti natriumbikarbonaatin muodossa, jolloin varmistetaan riittävä PgQ -pitoisuus. Suljetut vertailunäytteet 2 5 muodostavat suljetun systeemin saatavissa olevan C02:n kokonaismäärän suhteen. Tästä syystä pH ja edustavat ta- 2 sapainoa solususpension päälle levitetyssä kaasuseoksessa olevan C02:n määrän, puskuroituun liuokseen lisättyjen bi-karbonaatti- ja karbonaatti-ionien konsentraation ja ei-10 karbonaatti-pohjaisten protonien ja hydroksyyli-ionien puskuroidun liuoksen pH:hon myötävaikutuksen välillä.
Tämän keksinnön mukaisen vertailunäytteen valmistuksessa käytettävä bikarbonaatti-ionien määrä vaihtelee välillä noin 0,005 - 0,2 M, jolloin varmistetaan, että Pco 2 15 on halutulla alueella. Edullisesti lisätyn bikarbonaatti- ionin konsentraatio vaihtelee välillä noin 0,01 - 0,12 M.
Samaan aikaan C02:n konsentraatio kaasuseoksessa on noin 2- 15 til/til-%; edullisesti noin 5-10 til/til-%, jolloin saadaan ylläpidettyä sopiva Pc0 suljetussa vertailunäyt- 2 20 teessä.
P0 :een vaikuttaa hapen konsentraatio kaasuseokses- 2 sa, hapen-liukoisuus puskurointiliuokseen ja vapaata happea sitovan pelkistetyn hemoglobiinin saatavuus. Sopiva hapen konsentraatio valmistettaessa tämän keksinnön mu-25 kaista vertailunäytettä on noin 2-30 til/til-%; edullises ti noin 7-20 til/til-%. Niinpä sopiva lisättävän kaasu-seoksen koostumus, esim. tämän keksinnön mukaisen vertailunäytteen puskuroidun liuoksen päällä olevassa vapaassa tilassa on noin 2-30 til/til-% happea ja noin 2-15 30 til/til-% hiilidioksidia, lopun ollessa typpeä tai muuta inerttiä kaasua.
Suspensiossa olevat stabiloimattomat erytrosyytit menettävät hemolyysin seurauksena hemoglobiinin nestemäiseen suspensiovällaineeseen. Koska tämä solusta vapaa he-35 moglobiini ei ole enää liittyneenä methemoglobiinireduk- 10 80960 taasientsyymiin, kuten se on solussa, se hapettuu nopeasti methemoglobiiniksi. Paitsi hemolyysiin liittyvää haitallista kosmeettista vaikutusta, hemoglobiinin hapettuminen methemoglobiiniksi aiheuttaa epästabiilisuutta hemoglobii-5 niparametreissa. Tämän ongelman voittamiseksi voidaan käyttää stabilisaattoreita.
Keksintö kohdistuu siten myös menetelmään stabiloida erytrosyyttejä käytettäväksi verikaasu-hemoglobiini-analyysissä vertailuaineena. Keksinnön mukaiselle menetel-10 mälle on tunnusomaista, että (a) suspendoidaan kyseiset erytrosyytit puskuroituun kiinni tysvällaineeseen, joka koostuu puskurointiaineen vesi-liuoksesta, väliaineen pH:n ollessa välillä noin 7,3 -11,3; 15 (b) saatetaan erytrosyytit kosketuksiin kaasun kanssa, jo ka kaasu on happea tai hiilimonoksidia, imidoesterin läsnäollessa lämpötilassa välillä noin 20°C - 30°C reaktio-ajan ollessa noin 15-60 minuuttia; ja (c) otetaan talteen stabiloidut erytrosyytit.
20 Edullinen imidoesteri erytrosyyttien stabilointiin käytettäväksi tämän keksinnön yhteydessä on dimetyyliadi-pimidaatti (DMA). DMA:n hydrokloridit, esim. dimetyyliadi-pimidaatin dihydrokloridi, ovat myös käyttökelpoisia.
Reaktio-olosuhteet DMA:n ja amiinien väliseen reak-25 tioon vesipitoisissa liuoksissa ovat hyvin tunnettuja.
Alhaisessa pH:ssa DMA hydrolysoituu. Niinpä tarvitaan suuri ylimäärä DMA:a, jotta reaktioon aminoryhmien kanssa olisi riittävästi DMA:a. Lisäksi useimmat aminoryhmät pro-tonoituvat alhaisessa pH:ssa. Tämä tekee ne vähemmän reak-30 tiivisiksi kuin ei-protonoidut aminoryhmät.
Korkeassa pH:ssa hydrolyysi estyy. Yleensä mitä korkeampi pH, sitä alhaisempi konsentraatio DMA:a tarvitaan imidoimaan proteiini, sitä nopeampi imidointireaktio ja sitä vähemmän DMA:n sivureaktioita, esim. hydrolyysiä. 35 Kuitenkin, mitä korkeampi on reaktion pH, sitä suu- li 80960 rempi on todennäköisyys, että erytrosyytit vahingoittuvat. Täten täytyy löytää tasapaino sen välillä, että käytetään korkeaa pH-tasoa edullisten reaktio-olosuhteiden takia ja että lasketaan pH-tasoa erytrosyyttien vahingoittumisen 5 estämiseksi.
Erytrosyyttien imidointiaste riippuu pH:sta, reak-tioajasta ja lämpötilasta. Ellei imidoinnin anneta edetä riittävän pitkälle, erytrosyytit eivät stabiloidu ja menettävät hemoglobiinin hemolyysin seurauksena. Toisaalta jos imidointia jatketaan liian kauan, erytrosyytit kovettuvat liikaa. Hemoglobiinitestejä tehtäessä solulyysin täytyy tapahtua analyysilaitteessa. Niinpä imidointia täytyy säädellä, jotta vältettäisiin sekä hemolyysille alttiiden heikkojen solujen tuotanto että kovettuneet solut, 15 joissa lyysiä ei enää voi tapahtua.
Tätä imidointitasapainoa säädellään asettamalla imidointireaktion olosuhteet seuraavasti: 1. DMA-konsentraatio pidetään välillä noin 0,77 - 8,00 g/1, edullisesti välillä noin 0,85 - 4,0 g/1, esim. 0,9 20 g/l:ssa.
2. Imidointiliuoksen pH pidetään välillä noin 7,3 - 11,3, edullisesti välillä 8-10, erittäin edullisesti välillä noin 8,5 - 10, edullisimmin välillä noin 8,5 - 9,5, esim. 9,2:ssa. pH-säätö suoritetaan parhaiten käyttämällä epäor- 25 gaanista emästä kuten natriumbikarbonaattia tai natrium- karbonaattia. Amiinipuskureita täytyy välttää, koska ne reagoivat DMA:n kanssa.
3. Reaktioaika voi vaihdella välillä 15-60 minuuttia, edullisesti välillä 18-40 minuuttia, erittäin edullisesti 30 välillä 20-30 minuuttia, esim. 25 minuuttia.
4. Imidointireaktio suoritetaan lämpötilassa, joka vaih-telee välillä noin 20-30“C, edullisesti välillä noin 22-28°C, erittäin edullisesti välillä noin 24-26eC, esim. 25°C.
35 Edellä esitetyissä olosuhteissa erytrosyyttien lu- 12 80960 kumäärä, joka voidaan tehokkaasti käsitellä, vaihtelee välillä noin lxlO4 - lxlO7 per μΐ. Niinpä erytrosyyttien määränä käytetään noin lxlO4 - lxlO7 per μΐ, ja edullisesti noin 5,8xl05 - 6,2xl05 per μΐ.
5 Tämän keksinnön mukainen menetelmä erytrosyyttien stabilolmiseksi voidaan yhteenvetona esittää seuraavasti: 1. Erytrosyytit, jotka on saatu vanhenneesta ihmisen verestä, pestään fysiologisella suolaliuoksella, sentrifu-goidaan ja suspendoidaan uudelleen kiinnittävään puskur- 10 iin, joka on 0,1 M natriumkarbonaatin ja natriumbikarbonaatin liuos, joka sisältää natriumkloridia; 2. Erytrosyyttien lukumäärä säädetään sopivaksi joko lisäämällä tai poistamalla kiinnittävää puskuria; 3. DMA lisätään ja reaktion annetaan tapahtua samalla se-15 koittaen; 4. Samalla kun reaktio on käynnissä, joko puhtaan hapen tai puhtaan hiilimonoksidin annetaan kuplia solususpension läpi. Tämän vaikutuksesta solunsisäiseen hemoglobiiniin kerääntyy sopivaa kaasua, jolloin sitä seuraava hemoglo- 20 biinin reaktio DMA:n kanssa kiinnittää hemoglobiinin happea tai hiilimonoksidia kantavaan muotoon, täten "lukiten" kaasun hemoglobiiniin ja lisäten 02Hb- ja COHb-parametrien stabiilisuutta; 5. Stabiloidut solut sentrifugoidaan sitovien reagenssien 25 poistamiseksi ja suspendoidaan uudelleen HEPES-bikarbo- naatti-suolaliuos-puskuriin, jonka pH on 7,13, pH:n alentamiseksi; 6. 02Hb- ja COHb-tyyppiset solupopulaatiot yhdistetään tilavuuden perusteella, jolloin saadaan haluttu vertailuta- 30 so; 7. Yhdistetyt solut sentrifugoidaan HEPES-bikarbonaatti-suolaliuos-puskurin poistamiseksi; 8. Sentrifugoidut solut suspendoidaan uudelleen lopulliseen puskuriliuokseen sellaisena tilavuutena, että haluttu 35 THb saavutetaan fysiologisella alueella olevassa pH:ssa.
Il 13 80960 pH:η, Ρθ2:η ja Pco2:n stabiilisuus riippuu siitä, estetäänkö erytrosyyttejä hengittämästä. Tähän päämäärään pääsemiseksi proteiiniin perustuvasta puskurista tehtiin sellainen, ettei se sisältänyt oleellista määrää ravin-5 teitä, ja erytrosyytit valittiin siten, että ne olivat niin vanhoja kuin mahdollista, jotta ne olisivat käyttäneet loppuun solunsisäiset ravinteet. Kuitenkin, kun solut on näin kulutettu loppuun, ne eivät pysty tehokkaasti pelkistämään methemoglobiinia, jota muodostuu soluissa hemo-10 globiinin spontaanin hapettumisen seurauksena, takaisin hemoglobiiniksi.
Vaikka tätä keksintöä käytettäessä suurin osa hemoglobiinista on stabiloitu oksi- tai karboksimuotoon stabiloituja erytrosyyttejä valmistettaessa, osa tästä hemo-15 globiinista menettää kaasunsa ajan myötä huolimatta DMA-käsittelystä, ja saatu hemoglobiini voi hapettua methemo-globiiniksi. Tätä hapettumisprosessia voidaan ehkäistä lisäämällä antioksidantteja, tai aineita, jotka itse helposti hapettuvat, stabiloiden täten vertailunäytesystee-20 min.
Antioksidanttiyhdisteille, jotka ovat sopivia käytettäväksi tämän keksinnön yhteydessä, on tyypillistä, että ne hapettuvat spontaanisti hitaalla nopeudella, niiden hapetuspotentiaali on riittävän korkea, jotta ne hel-25 posti pelkistävät biologisessa systeemissä, ja niillä on hyväksyttävät hajuominaisuudet. Havainnollistavia, ei rajoittavia esimerkkejä tällaisista antioksidanteista ovat ditioerytritoli (DTE) ja ditiotreitoli (DTT), DTE:n optinen isomeeri. Antioksidanttia käytetään noin 0,001 - 30 0,006 M laskettuna koko suspensioväliaineen määrästä, edullisesti noin 0,002 - 0,005 M, erittäin edullisesti noin 0,003 - 0,005 M.
Jatkuva ongelma valmistettaessa vertailunäytteitä, joilla on pitkä elinikä, on mikrobikontaminaatio. Neomy-35 siinin ja kloramfenikolin yhdistelmä suojaa riittävästi 14 80960 materiaalia bakteereja vastaan mutta ei sienten kasvua vastaan. Lisäämällä bakterisideihin dinatriumetyleenidi-amiinitetraetikkahappao (EDTA) saadaan sienten vastainen vaikutus.
5 Neomysiinisulfaattia käytetään noin 0,10-0,12 g/1, edullisesti noin 0,11 g/1, ja kloramfenikolia käytetään noin 0,10-0,72 g/1, edullisesti noin 0,15-0,66 g/1, erittäin edullisesti noin 0,3-0,4 g/1, esim. 0,33 g/1.
Tämän keksinnön mukaisena verikaasujen ver-10 tailunäytteenä käytettävän puskuroidun proteiiniliuoksen tyypilliset aineosien vaihteluvälit ovat:
Aineosa Määrä litraa kohti Härän seerumialbumiini 40-60 g 15 Hepes-puskuri 11,92-16,68 g
Natriumbikarbonaatti 0,84-10,08 g
Natriumkloridi 1,00-3,00 g
Ditioerytritoli 0,07-0,77 g
Neomysiinisulfaatti 0,10-0,12 g 20 Kloramfenikoli 0,32-0,34 g
Dinatriumetyleenidiamiini-tetraetikkahappo 0,37-3,72 g
Deionisoitu vesi Q.S.
25 Vaikkakin on edullista käyttää seerumialbumiinia valmisteessa, jotta vertailunäyte muistuttaisi kokoverta niin paljon kuin mahdollista, voidaan seerumialbumiini jättää pois, jos halutaan valmistaa halvempi vertailunäyte.
30 Jotta taattaisiin tämän keksinnön mukaisen verikaa- su-hemoglobiini-analyysin vertailunäytteen hyvä varastoin-tikestävyys, erytrosyyttien suspendoitinväliaineella on edullisesti oleellisesti sama osmolaalisuus kuin ihmisen kokoverellä, eli noin 280-350 m0Sm/kg, edullisesti 35 320 m0sm/kg ± 5 mOsm/kg. Liuoksen osmolaalisuutta säädel- is 80960 lään lisäämällä natriumkloridia vertialunäytteen pus-kurointivällaineeseen.
Vaikka DMA edellä olevassa kuvauksessa on esitetty edullisena imidoesterinä on kuvauksen perusteella il-5 meistä, että mitä tahansa sopivaa imidoesteriä voidaan käyttää proteiinia ristisilloittavana aineena, esim. dime-tyyllsuberimidaattia.
On tietysti välttämätöntä pakata vertailunäyte varastointia, kuljetusta ja käyttöä varten. Vaikka tässä ku-10 vauksessa viitataan "ampulleihin", on alan ammattimiehelle kuvauksen perusteella ilmeistä, että mikä tahansa nestettä läpäisemätön materiaali, joka sulkee kaasun tiiviisti, kelpaa. Esimerkiksi lasipullo, jossa on kuminen septumi ja joka on suljettu ilmatiiviisti, on sopiva säiliö. Kumisen 15 septumin täytyy olla suunniteltu siten, että se on helposti leikattavissa pois analyysitarkoituksiin. Tässä julkaisussa käytetyllä termillä "ampulli” on tavanomainen merkitys, mutta se pitää sisällään minkä tahansa vertailunäyt-teelle sopivan säiliön kuten edellä on kuvattu, esimerkik-20 si suljetut pullot, ohuet metallipussit jne.
Kun vertailunäyte pakataan ampulleihin, tulee jättää tyhjä tila kaasuseoksen lisäämiseksi, joka tuottaa edellä mainitut P0 - ja P^, -parametrit. Vaikkakaan vapaan 2 2 tyhjän tilan suhde nestemäisen suspension tilavuuteen ei 25 ole kriittinen, tyhjän tilan tilavuuden ja nesteen tilavuuden suhteita, jotka ovat yli 2, tulee välttää, koska pinta-ala ampullin sisällä tulee niin suureksi, ettei ole enää mahdollista sekoittaa ja käsitellä vertailunäytettä riittävän hyvin käytössä. Vastaavasti tämä suhde voi olla 30 nolla, jos solususpensio on esitasapainotettu kaasuseok-sella ennen ampullin sulkemista. On kuitenkin edullista, että kaasun ja nesteen tilavuussuhde on ainakin 0,75. Täten edullisena suoritusmuotona ampulli täytetään siten nesteellä, että kaasun ja nesteen tilavuussuhde on noin 35 0,75 - 2; edullisemmin noin 0,9 - 1,5, esim. 1,0.
ie 80960
Sen jälkeen kun haluttu määrä solususpensiota on lisätty ampulliin, sopivan koostumuksen omaava hap-pi/hiilimonoksidi/inertti kaasu-seos puhalletaan ampulliin korvaamaan ilma, joka jo täyttää tyhjän tilan. Kaasu tulee 5 levittää nestesuspension päälle niin, että vältetään suspension vaahtoaminen. Ilman annetaan korvautua riittävän ajan kuluessa, ja ampulli suljetaan normaalipaineessa.
Punaisten verisolujen määrä on tärkeä parametri kiinnitysprosessin aikana keksintöä käytettäessä, koska 10 määrä on perustana määritettäessä tarvittavan ristisil-loittavan aineen stökiömetrinen määrä.
Valmistettaessa tämän keksinnön mukaisia vertailu-näytteitä merkittävin parametri ei kuitenkaan ole solujen määrä vaan kokonaishemoglobiinin määrä soluissa esitettynä 15 grammoina desilitraa kohti.
Solujen hemoglobiinin määrä voidaan määrittää alan ammattimiehen tuntemalla menetelmällä. Suspension, jossa on tunnettu määrä punaisia verisoluja, annetaan esimerkiksi reagoida syanidin kanssa liuoksessa, joka sisältää ha-20 pettävää ainetta ja ainetta, joka aiheuttaa solujen lyy-sin. Hemoglobiinin syanidijohdannaisella on tunnettu eks-tinktiokerroin. Niinpä käyttäen laboratoriospektrometriä voidaan määrittää näytteen hemoglobiinipitoisuus.
Tämän keksinnön edut ovat helpommin ymmärrettävissä 25 seuraavien esimerkkien avulla. Kaikki kuvatut toimenpiteet suoritetaan aseptisesti steriileissä olosuhteissa.
Esimerkki I
Erytrosyyttien erotus kokoverestä
Annos vanhaa kokoverta pestiin kolmessa vaiheessa 30 0,9 % suolaliuoksella käyttäen IBM Model 2991-1 sentrifu- gia. Kussakin vaiheessa käytettiin noin yksi litra pesu-liuosta. Nahkamainen kalvo poistettiin ja pestyt punaiset verisolut suspendoitiin suolaliuokseen.
li 35 17 80 960
Esimerkki II
Steriilien verisolujen kiinnitys
Valmistettaessa oksihemoglobiini- ja karboksihemo-globiinisoluja tämän keksinnön mukaisesti valmistettiin 5 kiinnittävä puskuriliuos, jonka pH oli 9,2 käyttäen seu-raavaa koostumusta:
Taulukko I
Aineosat Määrä 5 litraa kohti 10 Natriumkarbonaatti 7,22 g
Natriumbikarbonaatti 1,48 g
Deionisoitu vesi Q,S.
Natriumkloridi Q,S.
Valmistettaessa kiinnittävää puskuria pH säädettiin 15 käyttäen 0,1 M natriumkarbonaatin ja natriumbikarbonaatin liuoksia, karbonaattia käytettiin nostamaan pH:a ja bikar-bonaattia laskemaan pH:a, tarpeen mukaan, jotta pH saatiin arvoon 9,2 ± 0,5. Natriumkloridia lisättiin säätämään liuoksen osmolaalisuus arvoon 320 mOsm/kg ± 5 mOsm/kg. 20 Natriumkloridia tarvitaan noin 5 g/1.
A. Oksihemoglobiinisolut
Pestyt punaiset verisolut (RBCs), jotka oli valmistettu esimerkissä I kuvatulla tavalla yhdestä yksiköstä kokoverta, suspendoitiin kiinnitettävään puskuriin ja so-25 lujen määrä säädettiin arvoon 6,0 x 105 ± 0,2 x 105 RBCs/μ- 1. Kiinnittävää puskuria tarvittiin suunnilleen kolme litraa. Kiinteää dimetyyliadipimidaatin hydrokloridia lisättiin niin, että sen konsentraatio oli 0,9 g/1. Välittömästi tämän jälkeen annettiin hapen kuplia suspension läpi 30 samalla seosta sekoittaen. Sekoitusta ja kaasutusta jatkettiin 25°C:ssa inkuboiden 25 minuuttia. Inkubointijakson jälkeen solut sentrifugoitiin ja pestiin puskurilla. Pesu-puskurin koostumus oli seuraava: 35 18 80960
Taulukko II
Aineosat: Määrä 2 litraa kohti HEPES 28,56 g
Natriumbikarbonaatti 3,38 g 5 Deionisoitu vesi Q.S.
Puskurin pH säädettiin arvoon 7,15 ± 0,4 5N NaOH:lla, ja osmolaalisuus säädettiin arvoon 320 mOsm/kg ± 5 mOsm/kg NaCl:lla (suunnilleen 6 g/1.). Pesuliuos suoda-10 tettiin steriilin 0,22 pm Millipore-suodattimen läpi. Pestyt solut kerättiin suureen pulloon.
B. Karboksihemoglobiinisolut
Menetelmä, jolla valmistettiin oksihemoglobiiniso-loja, toistettiin korvaamalla happi hiilimonoksidilla kar-15 boksihemoglobiinisolujen valmistamiseksi.
Esimerkki III
Verikaasu-hemoglobiini-analyysinvertailunäytteiden valmistus
Valmistettiin kolme verikaasu-hemoglobiini-analyy-20 sin vertailunäytettä kolmena pitoisuutena kuvaten veren fysiologisia tiloja: Pitoisuus I -asidoosi, pitoisuus II -normaali ja pitoisuus III - alkaloosi. Pitoisuudella II käytettiin vain oksihemoglobiinia sisältäviä soluja, kun taas pitoisuuksilla I ja III käytettiin oksihemoglohiini-25 solujen ja karboksihemoglobiinisolujen seosta. Kullekin pitoisuudelle käytetyn suspensioväliaineen kooostumus on esitetty taulukossa III.
30
II
35 19 80960
Taulukko III
MAära 1 litraa kohti Pltol- Pito!- Pitoi-
Aineosa suus I suus II toisuus III
5 Härän seerumialbumilni 60 g 60 g 60 g HEPES-puskurl 14,28 g 14,28 g 14,28 g
Ditioerytritoli 0,154 g 0,154 g 0,154 g
Neomysiinisulfaatti 0,110 g 0,110 g 0,110 g
Kloramfenikoli 0,330 g 0,330 g 0,330 g 10 EDTA 2,23 g 2,23 g 2,23 g
Natriublkarbonaattl 0,845 g 2,895 g 9,10 g
Deionisoitu vesi Q.S. Q.S. Q.S.
Natriumkloridi Q.S. Q.S. Q.S.
pH 7,15±04 7,4±04 7,65±04 15
Kullakin pitoisuudella pH säädettiin käyttämällä 5 N Na0H:a. Liuoksen osmolaallsuus säädettiin arvoon 320 mOsm/kg ± 5 mOsm/kg suunnilleen 2 g/l:lla NaClra.
Vertailunäytteet valmistettiin 1000 ampullin erissä 20 testausta varten. Kukin 3 ml:n ampulli täytettiin 1,7 ml:11a materiaalia. Ampulleja valmistettaessa käytettiin taulukossa IV esitettyjä sekoituksia.
25 30 35 20 80 960
Taulukko IV
Verikaasun vertailunäyte-Aineosa ampullin valmistus__
I II III
5 Suspensioväliaine1 2,9 l3 3,4 l3 3,5 l3
Oksihemoglobiinisolut2 958 ml4 1,7 1 1303 ml4
Karboksihemoglobiini- solut2 217 ml - 1050 ml
Kaasuseos %02 - %C02, 10 tasapaino N2 20-5 12-5 7-10 ΡΜ2 mm Hg 20±7 35±7 60±7 P0 mm Hg 140±10 100±10 50±10 2
Kokonaishemoglobi i- ni (g/dl) 9±1 13±1 17±1 15 % Oksihemoglobiini 83±3 96±2 63±3 % Karboksihemoglobiini 15±2 <5 32±3 % Methemoglobiini <3 <3 <3 1. Taulukossa III kuvattu suspensioväliaine.
2. Valmistettu esimerkeissä Ha ja B kuvatulla ta- 20 valla.
3. Likimääräiset arvot.
4. Sekoitettu pesuliuoksessa olevien solujen suspensioista (taulukko II). Karboksihemoglobiinia sisältävien solujen määrä on valittu ja sopiva määrä oksihemoglo- 25 biinia sisältäviä soluja on lisätty.
Kolmen vertailuaineen pitoisuustason on tarkoitettu kattavan alueen, jolle testilaitteisto kalibroidaan, esim. kokonaishemoglobiini 6-20 % (paino/tilavuus). Kokonaishemoglobiinin normaalitaso on noin 12 %, kun taas alhainen 30 taso (pitoisuus I) on 8-9 % ja korkea taso (pitoisuus III) on noin 18-19 %.
Ampullit, joiden tilavuus oli 3 ml, täytettiin 1,7 ml:lla suspensiota. Ennen täyttämistä ampulleihin annettiin virrata sopivaa kaasuseosta ilman korvaamiseksi. 35 Kaasun annettiin levittyä nesteen pinnalle ilman että neste olisi vaahdonnut.
li 21 80960
Verikaasu-hemoglobiini-analyysin vertailunäytteet todettiin stabiileiksi noin 155-430 päivän ajan varastoitaessa 4°C:ssa. Vertailun vuoksi valmistettujen formaldehydillä stabiloitujen erytrosyyttien, valmistettu US-pa-5 tenttijulkaisussa 3 973 913 kuvatulla tavalla ja modifioi tu alla kuvatulla tavalla, stabiilisuus oli vähemmän kuin 60 päivää. Em. patenttijulkaisun menetelmää modifioitiin seuraavasti: (1) natriumkarbonaattia ei lisätty sen jälkeen, kun solut 10 oli kiinnitetty P^ -pitoisuuksien säätämiseksi,
(2) lopullinen puskuri oli 0,75 ml HEPES 0,075 M NaCl, pH
7,4, ja (3) pH:a ei enää säädetty ennen ampulleihin laittamista. Kaupallisesti saatavan tuotteen, joka oli valmistettu formaldehydillä kiinnitetyistä erytrosyyteistä, 15 eliniäksi todettiin noin 60 päivää.
Esimerkki IV
Proteiinia ristisilloittavien aineiden vertailu
Suoritettiin vertailevia tutkimuksia vertailunäyt-teillä, jotka oli valmistettu soluista, Jotka oli risti-20 silloitettu formaldehydillä, natriumtetrationaatilla, dia- midilla, dietyylioksidiformaatilla ja dimetyylisuberimi-daatilla. Formaldehydi oli tehokas kiinnittävä aine, mutta sillä ei saavutettu samaa stabiilisuutta kuin DMA:11a. Vaikka dimetyylisuberimidaatti oli tehokas ristisilloit-25 tava aine, siinä oli suurempia päivittäisiä ja ampullikoh-taisia vaihteluita kuin DMA:11a kiinnitetyillä soluilla.
Diamidilla ja natriumtetrationaatilla kiinnitys suoritettiin menetelmällä, jonka Haest, C.W.M., et ai. ovat kuvanneet, "Intra and Intermolecular Cross-Linking of 30 Membrane Proteins In Intact Erythrocytes and Ghosts by SH-Oxidizing Agents", Biochem. Biophys. Act. 469: 226-230 (1977), tiettyjä modifikaatioita lukuunottamatta. In-kubointiaika pidennettiin kolmeen tuntiin ja punaisten verisolujen pesu suoritettiin Haemonetics 15M solujen pe-35 susysteemillä, joka korvasi panospesuprosessin.
22 80 960
Erytrosyytit, jotka oli kiinnitetty diamidilla tai natriumtetrationaatilla, olivat äärimmäisen pysymättömiä, ja hajosivat täysin kolmen viikon säilytyksen jälkeen 4°C:ssa tai 25°C:ssa. Hajonneiden solujen jatkettu varas-5 tointi 25°C:ssa johti liuoksen geeliytyrniseen kahdessa kuukaudessa.
Valmistettaessa dietyylioksidiformaatilla stabiloituja soluja suolaliuosta sisältävä suspensioväliaine korvattiin 0,1 M NaCl - 0,5 M Tris-puskurilla pH:ssa 9,0. 10 0,4 ml dietyylioksidiformaattia lisättiin 125 ml:aan solu- suspensiota, ja seosta sekoitettiin kaksi tuntia 25eC:ssa.
Vertailunäytteet, jotka oli valmistettu dietyyli- oksidiformaatin avulla, olivat myös epätyydyttäviä. P0 oli 2 stabiili ainakin viisi kuukautta, kun suspensiota varas- 15 toitiin 4eC:ssa, mutta P^, :n päivittäiset ja ampullikoh- 2 täiset vaihtelut eivät olleet hyväksyttäviä.
Esimerkki V
Methemoglobiinin stabilointireagenssit Nystatiinin, maitohapon, kolesterolin, natriumfuma-20 raatin ja ksylitolin lisääminen ei parantanut hemoglobiinin stabiilisuutta verrattuna vertailunäytteisiin, jotka sisälsivät ditioerytritolia. Tulokset on esitetty taulukossa V.
Taulukko V
25 Methemoglobiinin stabilointi
Stabilisaattori alkuperäinen(1) 175 pälvää(1> % MetHb.l. Nystatiinl 0,1 4,0 2. Ksylitoli 0,2 4,8 3. Fumaraatti 0,3 5,8 30 4. Kolesteroli 1,4 3,4 5. Laktaatti 0,3 3,1 6. Vertailu 0,4 5,9 7. Ditioerytritoli 0,3 2,5<2) 35 (1) arvot ovat keskiarvoja kolmesta määrityksestä (2) arvot saatu 196 päivän jälkeen 11 23 80 960
Kuvauksen perusteella on alan ammattimiehelle ilmeistä, että tämän keksinnön mukaiset tuotteet kaikkein edullisimmin valmistetaan pakkauksen muotoon. Edullisesti pakkaus sisältää ainakin yhden ampullin kutakin pitoisuus-5 tasoa (asidoosi,normaali ja alkaloosi) edustavaa ver-tailunäytettä. Fysiologiset pH:n vaihteluvälit kullekin tasolle ovat: asidoosi -7,0 -7,3; normaali - 7,4 ± 0,1; alkaloosi - 7,6 ± 0,1.
Termeillä "stabiloidut oksihemoglobiinia sisältävät 10 erytrosyytit" ja "stabiloidut karboksihemoglobiinia sisältävät erytrosyytit" tarkoitetaan erytrosyyttejä, jotka on stabiloitu tämän keksinnön mukaisella menetelmällä, jossa kaasu, johon erytrosyytit ovat kosketuksissa stabiloinnin aikana, on vastaavasti happi ja hiilimonoksidi. On ymmär-15 rettävä, että kun tässä julkaisussa viitataan hemoglobiiniin, oksihemoglobiiniin ja karboksihemoglobiiniin, tarkoitetaan näitä sisältäviä erytrosyyttejä, ellei toisin ole mainittu.
Kun keksintö on näin kuvattu, on ilmeistä, että 20 sitä voidaan vaihdella monilla tavoilla. Tällaisia variaatioita ei tule pitää poikkeamisena keksinnön hengestä ja piiristä, ja kaikkien tällaisten modifikaatioiden katsotaan sisältyvän patenttivaatimusten piiriin.
Claims (10)
1. Menetelmä stabiloida nisäkkään erytrosyyttejä käytettäväksi verikaasu-hemoglobiini-analyysissä vertailu-5 aineena, tunnettu siitä, että: (a) suspendoidaan kyseiset erytrosyytit puskuroituun kiinni tysväliaineeseen, joka koostuu puskurointiaineen vesi-liuoksesta, väliaineen pH:n ollessa välillä noin 7,3 -11,3; 10 (b) saatetaan erytrosyytit kosketuksiin kaasun kanssa, jo ka kaasu on happea tai hiilimonoksidia, imidoesterin läsnäollessa lämpötilassa välillä noin 20°C - 30°C reak- tioajan ollessa noin 15-60 minuuttia; ja (c) otetaan talteen stabiloidut erytrosyytit.
2. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että erytrosyytti on ihmisen eryt-rosyytti.
3. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että imidoesteri on dimetyyliadipi- 20 midaatti tai dimetyylisuberimidaatti.
4. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että kaasu on happi.
5. Patenttivaatimuksessa 1 esitetyn menetelmän mukaisesti valmistettu stabiloitu erytrosyytti.
6. Verikaasu-hemoglobiini-analyysin vertailunäyte- tuote, tunnettu siitä, että se sisältää: (a) puskuroidun suspensioväliaineen, joka koostuu puskurointiaineen vesiliuoksesta, kyseisen väliaineen pH:n ollessa välillä noin 6,8 - 8,0; ja 30 (b) stabiloituja erytrosyyttejä, jotka on valmistettu pa tenttivaatimuksessa 1 esitetyn menetelmän mukaisesti, jolloin kyseisten erytrosyyttien määrä suspensiovällaineessa sellainen, että suspensioväliaineen kokonaishemoglobiinin konsentraatio on noin 3-24 g/dl; kyseisen hemoglobiinin 35 sisältäessä noin 60-100 % oksihemoglobiinia ja noin 0-35 % karboksihemoglobiinia. li 25 80960
7. Patenttivaatimuksen 6 mukainen tuote, tunnettu siitä, että suspensioväliaine sisältää ditio-erytritolia konsentraationa noin 0,07 - 0,77 grammaa sus-pensioväliaineen litraa kohti.
8. Patenttivaatimuksen 6 mukainen tuote, tun nettu siitä, että erytrosyytit ovat joko oksihemoglo-biinia sisältäviä erytrosyyttejä, karboksihemoglobiinia sisältäviä erytrosyyttejä tai näiden seoksia.
9. Patenttivaatimuksen 6 mukainen tuote, t u n -10 n e t t u siitä, että se on suljettu ampulliin, ampullin ilmakehä koostuu hapesta, hiilimonoksidista ja inertistä kaasusta, hapen osapaine on noin 20-400 mmHg ja hiilimonoksidin osapaine on noin 10-75 mmHg.
10. Pakkaus, tunnettu siitä, että se sisäl-15 tää ainakin yhden ampullin patenttivaatimuksen 9 mukaista tuotetta. 26 80 960
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| US66794784 | 1984-11-05 | ||
| US06/667,947 US4711852A (en) | 1984-11-05 | 1984-11-05 | Control for blood gas analyzers and hemoglobin analysis |
Publications (4)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| FI854328A0 FI854328A0 (fi) | 1985-11-04 |
| FI854328L FI854328L (fi) | 1986-05-06 |
| FI80960B FI80960B (fi) | 1990-04-30 |
| FI80960C true FI80960C (fi) | 1990-08-10 |
Family
ID=24680329
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| FI854328A FI80960C (fi) | 1984-11-05 | 1985-11-04 | Foerfarande foer stabilisering av daeggdjurserytrocyter foer anvaendning som kontroll vid blodgas-hemoglobin-analys och kontrollprodukt foer blodgas-hemoglobin-analys. |
Country Status (9)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US4711852A (fi) |
| EP (1) | EP0181033B1 (fi) |
| JP (1) | JPS61114168A (fi) |
| AT (1) | ATE50460T1 (fi) |
| AU (1) | AU589582B2 (fi) |
| CA (1) | CA1246429A (fi) |
| DE (1) | DE3576084D1 (fi) |
| DK (1) | DK161859C (fi) |
| FI (1) | FI80960C (fi) |
Families Citing this family (21)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US5194590A (en) * | 1986-06-20 | 1993-03-16 | Northfield Laboratories, Inc. | Acellular red blood cell substitute |
| US5328848A (en) * | 1988-07-25 | 1994-07-12 | Abbott Laboratories | Method for hydrating and calibrating a sterilizable fiber-optic catheter |
| US5558985A (en) * | 1989-03-27 | 1996-09-24 | Bionostics Incorporated | Stable hemoglobin reference solution |
| US5045529A (en) * | 1989-03-27 | 1991-09-03 | Bionostics, Inc. | Tonometric fluid for blood gas and co-oximetry instruments |
| PL167340B1 (pl) * | 1990-11-29 | 1995-08-31 | Upjohn Co | Sposób wytwarzania usieciowanej hemoglobiny PL |
| US5270208A (en) * | 1991-05-09 | 1993-12-14 | Streck Laboratories, Inc. | White blood cell hematology control |
| ATE193603T1 (de) * | 1992-02-24 | 2000-06-15 | Coulter Corp | Suspensionsmedien für hämatoligische zusammensetzungen und methode für ihren gebrauch |
| US6436705B1 (en) | 1997-02-18 | 2002-08-20 | The United States Of America As Represented By The Secretary Of The Navy | Shape stabilized erythrocytes |
| US6358678B1 (en) | 1998-02-11 | 2002-03-19 | The United States Of America As Represented By The Secretary Of The Navy | Applications of reversible crosslinking and co-treatment in stabilization and viral inactivations of erythrocytes |
| ZA988662B (en) * | 1997-10-10 | 1999-03-31 | Baxter Int | Storage-stable hemoglobin compositions |
| US6200500B1 (en) | 1999-08-20 | 2001-03-13 | Streck Laboratories, Inc. | Hematology control and system for multi-parameter hematology measurements |
| US6221668B1 (en) | 1999-08-20 | 2001-04-24 | Streck Laboratories, Inc. | Hematology control and system for multi-parameter hematology measurements |
| US6723563B2 (en) | 2001-12-03 | 2004-04-20 | Streck Laboratories Inc. | Hematology reference control |
| US6653137B2 (en) | 2001-12-03 | 2003-11-25 | Streck Laboratories Inc. | Hematology reference control |
| CN100431602C (zh) * | 2003-01-29 | 2008-11-12 | 北原实验室有限公司 | 具有低量四聚体的聚合血红蛋白溶液及制备方法 |
| US7095492B2 (en) * | 2003-12-19 | 2006-08-22 | Beckman Coulter, Inc. | Method and apparatus for measuring cell-by-cell hemoglobin |
| US20090004159A1 (en) * | 2006-01-24 | 2009-01-01 | The Board Of Trustees Of The University Of Illinoi | Polymerized Hemoglobin Media and Its Use in Isolation and Transplantation of Islet Cells |
| JP2009524436A (ja) * | 2006-01-24 | 2009-07-02 | ノースフィールド ラボラトリーズ、インコーポレイテッド | 重合したヘモグロビンの培地、並びに島細胞の単離及び移植におけるその使用 |
| WO2016054033A1 (en) * | 2014-09-30 | 2016-04-07 | Siemens Healthcare Diagnostics Inc. | Processes, systems, and devices for hemolysis detection via measurement of methemoglobin |
| EP3237911B1 (en) | 2014-12-22 | 2019-07-03 | Eurotrol B.V. | Container comprising haemoglobin fractions |
| CN121186347B (zh) * | 2025-11-24 | 2026-02-24 | 国家心血管病中心 | 一种利用动脉血对目标物质进行免疫检测的方法和试剂盒 |
Family Cites Families (10)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US3859049A (en) * | 1973-09-14 | 1975-01-07 | Arnold G Ware | Blood reference standard and process for blood gas test |
| US3973913A (en) * | 1976-01-29 | 1976-08-10 | Louderback Allan Lee | Blood control standard |
| US4126575A (en) * | 1977-11-22 | 1978-11-21 | Louderback Allan Lee | Blood control standard |
| IT1098867B (it) * | 1978-09-20 | 1985-09-18 | Instrumentation Lab Spa | Soluzioni preparate con tampone fosfato ed equilibrate con gas,confezionate in fiale a tre differenti livelli di ph,pc02,e p02,destinate al controllo di qualita' degli emogasanalizzatori;formulazione di tali soluzioni e processo per la loro preparazione industriale |
| US4289648A (en) * | 1979-03-20 | 1981-09-15 | Ortho Diagnostics, Inc. | Blood gas controls composition, method and apparatus |
| US4279775A (en) * | 1979-12-31 | 1981-07-21 | Louderback Allan Lee | Blood gas control |
| US4521518A (en) * | 1980-06-16 | 1985-06-04 | Coulter Electronics, Inc. | Multi-purpose blood diluent and lysing agent for differential determination of lymphoid-myeloid population of leukocytes |
| US4405719A (en) * | 1981-05-29 | 1983-09-20 | Coulter Electronics, Inc. | Method of stabilizing platelets for determining multiple platelet parameters in reference control and calibrator compositions; diluents therefor; and combination stabilization procedures |
| US4485174A (en) * | 1982-09-29 | 1984-11-27 | Instrumentation Laboratory Inc. | Hemoglobin-based blood gas control |
| CA1226794A (en) * | 1983-06-06 | 1987-09-15 | Michael K. Hoskins | Stabilized multiparameter control product |
-
1984
- 1984-11-05 US US06/667,947 patent/US4711852A/en not_active Expired - Fee Related
-
1985
- 1985-10-31 AU AU49237/85A patent/AU589582B2/en not_active Ceased
- 1985-10-31 DE DE8585201766T patent/DE3576084D1/de not_active Expired - Lifetime
- 1985-10-31 AT AT85201766T patent/ATE50460T1/de not_active IP Right Cessation
- 1985-10-31 EP EP85201766A patent/EP0181033B1/en not_active Expired - Lifetime
- 1985-11-04 FI FI854328A patent/FI80960C/fi not_active IP Right Cessation
- 1985-11-04 DK DK508685A patent/DK161859C/da not_active IP Right Cessation
- 1985-11-04 CA CA000494490A patent/CA1246429A/en not_active Expired
- 1985-11-05 JP JP60247844A patent/JPS61114168A/ja active Pending
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| DK161859B (da) | 1991-08-19 |
| EP0181033B1 (en) | 1990-02-21 |
| AU4923785A (en) | 1986-05-15 |
| EP0181033A1 (en) | 1986-05-14 |
| CA1246429A (en) | 1988-12-13 |
| US4711852A (en) | 1987-12-08 |
| ATE50460T1 (de) | 1990-03-15 |
| FI854328A0 (fi) | 1985-11-04 |
| DK508685A (da) | 1986-05-06 |
| FI80960B (fi) | 1990-04-30 |
| DK161859C (da) | 1992-01-20 |
| AU589582B2 (en) | 1989-10-19 |
| DE3576084D1 (de) | 1990-03-29 |
| DK508685D0 (da) | 1985-11-04 |
| JPS61114168A (ja) | 1986-05-31 |
| FI854328L (fi) | 1986-05-06 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| FI80960C (fi) | Foerfarande foer stabilisering av daeggdjurserytrocyter foer anvaendning som kontroll vid blodgas-hemoglobin-analys och kontrollprodukt foer blodgas-hemoglobin-analys. | |
| US4753888A (en) | Multiple control standard for blood analysis | |
| EP0096703B1 (en) | Fresh blood (unfixed) hematology control | |
| JP2938566B2 (ja) | 安定なヘモグロビン基準溶液 | |
| US4001142A (en) | Blood gas control | |
| De Furia et al. | The effects of cyanate in vitro on red blood cell metabolism and function in sickle cell anemia | |
| US4279775A (en) | Blood gas control | |
| EP0419556B1 (en) | Control for blood gas/calcium analysis instrumentation | |
| US4126575A (en) | Blood control standard | |
| EP0482088A1 (en) | Improved stable coagulation controls | |
| US4843013A (en) | Multiple control standard for blood analysis | |
| US4469792A (en) | Blood gas calibration and control fluid utilizing stroma-free hemoglobin | |
| Portörő et al. | Towards a novel haemoglobin-based oxygen carrier: Euro-PEG-Hb, physico-chemical properties, vasoactivity and renal filtration | |
| Kon et al. | A method for studying oxygen diffusion barrier in erythrocytes: effects of haemoglobin content and membrane cholesterol. | |
| Morelli et al. | In vitro correction of erythrocyte glucose 6-phosphate dehydrogenase (G6PD) deficiency | |
| Kark et al. | Pyridoxal phosphate as an antisickling agent in vitro. | |
| US5558985A (en) | Stable hemoglobin reference solution | |
| McCann et al. | Study of a kindred with hereditary spherocytosis and glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase deficiency | |
| EP0185404B1 (en) | Stroma-free hemoglobin solution, process for the preparation thereof and its application | |
| Ekeke et al. | Sialic acid in sickle cell disease. | |
| GB2308444A (en) | Liquid controls useful in blood analysis | |
| CN110257475A (zh) | 纤维蛋白原检测试剂及其制备方法及检测试剂制品 | |
| Lo et al. | Hemolytic anemia associated with decreased concentration of reduced glutathione in red cells | |
| Matthiesen et al. | Influence of blood sampling techniques on ionized magnesium level | |
| Fey et al. | Hereditary leaky red cell syndrome in a Swiss family |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| MM | Patent lapsed | ||
| MM | Patent lapsed |
Owner name: AKZO N.V. |