FI75598B - Foerfarande foer framstaellning av en monoklonal antikropp mot en maensklig tymocytantigen medelst en ny hybridcellinje. - Google Patents

Claims (3)

1. Förfarande för framställning av en monoklonal an-tikropp, som 5 a) reagerar med cirka 70 % av människans normala ty- mocyter, men inte med människans normala perifera T-celler, B-celler, nollceller eller benmärgsceller, b) reagerar med cirka 65 % av obehandlade tymocyter, med 10 % av tymocyter, som pä förhand behandlats med en med- 10 elst hybridcellinjen ATCC CRL 8002 framställd monoklonal antikropp och med komplement, med 82 % av tymocyter, som pä förhand behandlats med en medelst hybridcellinjen ATTCC CRL 8001 framställd monoklonal antikropp och med komplement, och med 13 % av tymocyter, som pä förhand be-15 handlats med en medelst hybridcellinjen ATCC CRL 8014 framställd monoklonal antikropp och med komplement, c) reagerar med ALL-T-celler i stadium II, men inte med ALL-T-celler i stadium I eller III, d) reagerar med cellinjer CEM och MOLT-4, men inte 20 med cellinjen HSB-2, och e) definierar en T-cell-population, som förekommer i mindre halter än normalt vid primär levercirros, multipel skleros och hyper-IgE, och i större halter än normalt vid en akut transplantationsreaktion och som saknas totalt vid 25 myasthenia gravis, akut infektiös mononukleos, i samtliga stadier av Hodgkins sjukdom och psoriasis, kännetecknat därav, att förfarandet omfattar de följande stegen: man A) framställer hybridoma ATCC CRL 8020 genom 30 i) immunisering av möss med människans normala tymo cyter, ii) avlägsning av mjältarna frän nämnda möss och framställning av en mjältcellsuspension, iii) fusionering av nämnda mjältceller med musmye-35 lomceller i närvaro av en fusionskatalysator, iv) utspädning och odling av de fusionerade cellerna i separata brunnar i ett medium, där fria myelomceller inte växer, fj 3i 755 9 8 v) evaluering av supernatanten i olika brunnar som innehäller ett hybridoma med avseende pA närvaro av en antikropp mot E-rosett-positiva, renade T-celler eller människans tymocyter, 5 vi) väljning och kloning av hybridoma ATCCCRL 8020, som producerar antikropp, vilken reagerar med cirka 70 % av människans normala tymocyter, men inte med människans perifera T-celler, B-celler, nollceller eller benmärgs-celler, och

10 B) framställer den monoklonala antikroppen genom vii) odling av hybridoma ATCC CRL 8020 i ett lämp-ligt medium, och viii) tillvaratagande av antikroppen frAn supernatanten över nämnda hybridoma. 15 2. Förfarande för framställning av en monoklonal antikropp, som a) reagerar med cirka 70 % av människans normala tymocyter, men inte med människans normala perifera T-celler, B-celler, nollceller eller benmärgsceller, 20 b) reagerar med cirka 65 % av obehandlade tymocyter, med 10 % av tymocyter, som pA förhand behandlats med en med-elst hybridcellinjen ATCC CRL 8002 framställd monoklonal antikropp och med komplement, med 82 % av tymocyter, som pA förhand behandlats med en medelst hybridcellinjen

25 ATTCC CRL 8001 framställd monoklonal antikropp och med komplement, och med 13 % av tymocyter, som pA förhand behandlats med en medelst hybridcellinjen ATCC CRL 8014 framställd monoklonal antikropp och med komplement, c) reagerar med ALL-T-celler i stadium II, men inte 30 med ALL-T-celler i stadium I eller III, d) reagerar med cellinjer CEM och MOLT-4, men inte med cellinjen HSB-2, och e) definierar en T-cell-population, som förekommer i mindre halter än normalt vid primär levercirros, multipel 35 skleros och hyper-IgE, och i större halter än normalt vid en akut transplantationsreaktion och som saknas. totalt vid myasthenia gravis, akut infektiös mononukleos, i samtliga stadier av Hodgkins sjukdom och psoriasis,