FI73974C - N-(2-halogenetyl) -n-nitrosokarbamoylfoerening. - Google Patents

Description

1 73974 N- (2-halogoonielyyl 1 ) - N-n 11 rosokarbjmoyyj i yhdi ste (Jakamalla erotettu hakemuksesta 77 16 6 to)

Lukuisten kokeellisten ja kliinisten kasvainten käsittelemiseksi käytetään menestyksellisesti muutamia l-(2-kloorietyyli)- 1-nitrosovirtsa-aineita, varsinkin 1,3-bis-(2-kloorietyyli)-l-nitrosovircsa-ainetta (BCNU) kemoterapeuttisina aineina (ks. Adv. in Cancer Res. 16, sivut 237 - 332 (1972)). On suoritettu lukuisia tutkimuksia näiden yhdisteiden vaikutusmekanismin ja kemote-rapeuttisen tehokkuuden tutkimiseksi, jolloin on tultu siihen käsitykseen, että myrkyllisyyteen vaikuttaa todennäköisesti eniten jakautumistuotteiden karbamoyloiva vaikutus (Wheeler et ai, Cancer Res. 3^, sivut 19*J - 200 (197*0)· Kuitenkin perusmolekyylin hajotessa in vivo ja in vitro syntyvien alkyloimis- ja karbamoyloimisaineiden biologisia vaikutuksia tunnetaan vielä hyvin vähän.

Sen mukaisesti suurimoana taroeena on tunnettujen nitrosovirtsa-aineiden suhteen analogisten yhdisteiden valmistus, jotta vaikutettaisiin niiden kemoterapeuttiseen tehokkuuteen, esimerkiksi toksisuuteen tai itse kasvannaista ehkäisevään vaikutukseen, mutta ... nij.den.

i myöskin jotta muutettaisiin/liukoisuutta veteen tai kudosnesteeseen. Valmistettaessa epäsymmetrisiä 1,3-disubstituoituj a N-nitrosovirtsa- • · aineita on kuitenkin virtsa-aineen tietyn typpiatomin valikoivalla nitrosoimisella ratkaiseva merkitys, esimerkiksi typpiatomin, joka TI liittyy 2-kloorietyyliryhmään BNCU:n epäsymmetrisesti substituoitujen ' ' homologien tapauksessa. On todettu, että nitrosointi laimentamattomas- sa muurahaishapossa (Johnston et ai, J.Med. Chem. 9, sivut 892 - 911, 1966), on osoittanut, että l-(2-kloorietyyli)-l-nitrosoyhdisteiden muodostaminen on edullista vain niissä tapauksissa, joissa substituent-: *·· tien sijainti sallii asemassa 3 steerisen kontrollin ja ohjaa : : * nitrosoryhmän vaadittavaan asemaan. Kuitenkin valikoiva nitrosointi ; *·. epäonnistuu, jos ei ole olemassa mitään tällaisia steerisiä kontrolleja t # · « « * · ·...· Nyt on keksitty patenttivaatimuksen 1 mukaiset N-( 2-halogeenietyyli) - .:. N-nitrosokarbamoyyliatsLöit, joita käyttäen N-(2-halogeenietyyli)- N-nitrosovirtsa-aineita, joissa on eri tavoin substituoituja alkyyli-radikaaleja, voidaan valmistaa yksinkertaisella tavalla korkea!!· 2 73974 saannolla ja puhtaudella.

Keksittyjen yhdisteiden voidaan erityisesti antaa reagoida diamii-nien tai aminoalkoholien kanssa, joissa.on 2-6 hiiliatomia, tai aminohappojen tai aminohappojohdannaisten, kuten esterien, amidien tai metallisuolojen kanssa, joissa on 1-5 hiiliatomia. Sen jälkeen mahdollisesti HO-radikaaleja sisältävät yhdisteet voidaan muuttaa alkyylisulfonyylihappoestereiksi.

Keksinnön mukaiset N-(2-halogeenietyyli)-N-nitrosokarbamoyyli-atsidit saadaan valmistettua erityisen edullisesti siten, että esim. isosyanaattien reaktiolla natriumatsidin kanssa saatuja vastaavia karbamoyyliatsideja nitrosoidaan typpitetroksidilla. Vastaavia nitrosoyhdisteitä syntyy silloin korkeilla saannoilla, ja reaktiolla on muihin nitrosointimenetelmiin verrattuna se etu, että saatua reaktioliuosta voidaan käyttää yksinkertaisen pesun avulla tapahtuvan neutralisoinnin jälkeen suoraan seuraavassa reaktiossa.

Julkaisussa Helv. Chim. Acta, Voi. 52, 8 (1969), no. 255 ja Voi.

57, 8, (197*0» no. 289 on kuvattu N-nitrosokarbamoyyliatsidien synteesiä, joissa on substituoimattomia alkyyliradikaaleja lisä-substituentteina, jolloin kaksivaiheisessa reaktiossa saatuja alkyylikarbamoyyliatsideja nitrosoidaan pyridiini/etikkahappoanhyd-ridissä käyttäen NOCl:a. Tässä menetelmässä täytyy jatkoreaktiota varten seurata nitrosointiin käytetyn liuottimen vaihto eetteriin, koska pyridiinin läsnäolo estää seuraavat reaktiot. Nitrosoiduis-ta karbamoyyliatsideista saaduilla nitrosovirtsa-aineyhdisteillä ei ollut mitään erityisen silmiinpistäviä fysiologisia vaikutuksia.

Verrattuna muihin menetelmiin 1,3-disubstituoitujen nitrosovirtsa-aineiden valmistamiseksi, joissa ensin saadaan aikaan virtsa-aine-rakenne ja nitrosointi suoritetaan reaktion loppuvaiheessa, takaa N-(2-halogeenietyyli)-N-nitrosokarbamoyyliatsidien käyttö sen, et-tä nitrosoryhmä sitoutuu vain siihen N-atomiin, jossa on myös 2-halogeenietyyliryhmä, jolloin saadaan yhdisteitä, jotka ovat vapaita isomeereistä. Näin saadaan lisäksi valmistettua useita N-nitrosoureidoyhdisteitä, joita tunnetuilla menetelmillä ei voida valmistaa tai voidaan valmistaa vain huomattavin saantohäviöin.

3 73974 Tätä keksintöä selitetään seuraavassa viitaten esimerkkien avulla. Esimerkeissä käytetyt kemikaalit ja liuottimet olivat synteettistä laatua eli kemiallisesti puhtaita. Typpitetroksidia käytettiin kaupan saatavissa olevassa muodossa (valmistaja BASF, Ludwigshafen).

Ilmaisu alkyyli ja alkyleeni tarkoittavat sopivimmin suoraketjuista tai haarautunutta C2 “ Cg ja se tarkoittaa myöskin alempaa alkyyliä tai sykloalkyyliä, joka mahdollisesti voi olla substituoitu alemmalla alkyylillä (C^ - C^). Viimeksi mainitussa merkityksessä ovat erityisen edullisia sykloheksyyli ja 4-metyylisykloheksyyli.

Esimerkki 1 2-kloorietyylikarbamoyyliatsidin valmistus 2-kloorietyyli-isosyanaatin (0,2 moolia) liuosta 100 ml:ssa bentseenlä lisättiin hitaasti aktivoidun natriumatsidin (0,2 moolia) 100 ml:ssa suolahappoa (13 %) olevaan sekoitettuun liuokseen, joka pidettiin lämpötilassa 0°C. Kaksifaasista reaktioseosta sekoitettiin 4 tuntia 0°C:ssa ja sitten vesipitoinen faasi poistettiin. 2-kloorietyyli-i karbamoyyliatsidi kiteytettiin bentseeni/petroolieetteristä valkoi- : sinä neulamaisina kiteinä.

/ Saanto: 88 %, sul.p.: 49,6 - 50,2°C, NMR (CDCl-j - TMS): "" δ = 3,4 - 3,9 ppm (ei-liuenn. 4H,CH2-CH2-C1); 6,12 ppm (br,s,lH,NH).

MS (14 ev): m/e 148 (M+), m/e 106 (M-N3)+, m/e 105 (M-HN3)+ = perushuippu. Intensiteettisuhde m/e 143/m/e 150 on tyypillinen monoklooratulle yhdisteelle.

Esimerkki 2 N-(2-kloorietyyli)-N-nitrosokarbamoyyliatsidin valmistus * *'"/ Typpitetroksidia (0,3 moolia) lisättiin hitaasti vedettömän natrium- '··- asetaatin (0,6 moolia) suspensioon 300 ml:ssa tetrakloorihiiltä lämpo- tilassa -10°C. Lämpötilaan 0°C lämmittämisen jälkeen lisättiin liuok-. seen hitaasti 2-kloorietyylikarbamoyyliatsidia (0,2 moolia) sekoittaen lastalla. Tällöin muodostui valkoinen sakka (AcOH). 15 minuutin kuluttua reaktioseos kaadettiin jääveteen. Erottunut orgaaninen faasi * 73974 uutettiin kahdesti 50 ml:lla NaHCO^:n (1-moolinen) kylmää liuosta ja pestiin sitten neutraaliksi 2 x 50 ml :11a .jääkylmää NaCl:llä kyllästettyä vettä. Se kuivattiin vedettömän natriumsulfaatin avulla.

Ei tehty mitään koetta N-(2-kloorietyyli)-N-nitrosokarbamoyvliatsidin eristämiseksi, koska se on helposti räjähtävää. CCl^-liuoksen NMR-spektroskooppinen tutkimus (standardi TMS) osoitti NH-merkkien täydellistä puuttumista ja kaavaa,.joka on tyypillinen nitrosoidun 2-kloorietyyliaminoryhmän AjBg-systeemille: δ = 3,50 ppm (t, 2H, -CH2-N-N0), 4,15 ppm (t, 2H, Cl-CHp-).

Liuos täytyy säilyttää mahdollisimman kylmänä, esimerkiksi syvä-jäähdytettynä, koska sen huonelämmössä seisoessa on todettu, että Upfield-pseudotripletti katoaa vähitellen ja samanaikaisesti syntyy uutta pseudotriplettiä, jonka keskiarvo δ = 4,37 ppm. Tämä spektrin muutos, joka oli päättynyt 48 tunnin kuluttua eräässä tapauksessa, voi mahdollisesti johtua yhdisteen termisesti indusoidusta atomi-siirrosta, joka todennäköisesti johtaa 1,3-asyylisiirron kautta atsidokarbonihapon diatsoesteriin. Kun liuos pidetään lämpötilassa -30°C, ei esiinny tätä ilmiötä.

Esimerkeissä 1 ja 2 selostetut reaktiot voidaan suorittaa myös 2-fluorietyyliyhdisteillä. Näin saatuja tuotteita voidaan käyttää jatkoreaktioihin samoin kuin 2-kloorietyyliyhdisteitä, ja ne antavat tällöin samanlaisia tuloksia.

Esimerkki 3 l,l*-(polymetyleeni)-bis-3-(2-kloorietyyli)-3-nitrosovirtsa-aineiden (yhdisteet 1-5 taulukossa I) valmistus - -¾

Noin 0,2 moolia N-(2-kloorietyyli)-N-nitrosokarbamoyyliatsidia CCl^rssä laimennettiin samalla tilavuudella (150 ml) kylmää (0°C) n-pentaania (N-nitrosokarbamoyyliatsidin saanto karbamoyyliatsidin nitrosoinnissa on ilmaistu kvantitatiivisesti). Diamiinia (0,2 moolia) liuotettuna kylmään CCl^/n-pentaaniin lisättiin tipoittain sekoittaen liuokseen jääkylvyssä. 3 tunnin kuluttua imettiin muodostunut keltainen sakka

K

7 3 9 7 4 ja pestiin useaan kertaan bentseeni/pentaani-seokselJa (J + J).

Se liuotettiin uudelleen asetoniin ja asetoniliuos kaadettiin kymmenkertaiseen tilavuuteen jääkylmää 0,1-n HjSO^. Sakka suodatettiin ja liuotettiin uudelleen asetoniin. Tämä asetoniliuos kaadettiin kymmenkertaiseen tilavuuteen vettä ja saatu sakka suodatettiin uudelleen. Tätä työvaihetta toistettiin siksi, kunnes pesuvedet tulivat neutraaleiksi. Tyhjöeksikkaattorissa CaC^in avulla suoritetun kuivaamisen jälkeen nitrosovirtsa-aineet kiteytettiin metyyliformaatti-isopropanolista (1 + 1).

Yhdisteiden fysikaaliset arvot on esitetty oheisessa taulukossa I merkittyinä numeroilla 1-5.

Esimerkki U

1-(ω-hydroksialkyyli)-3-(2-kloorietyyli)-3-nitrosovirtsa-aineiden (yhdisteet 6-3 taulukossa I) valmistus

Noin 0,2 moolia N-(2-kloorietyyli)-nitrosokarbaraoyyliatsidin liuosta edessä laimennettiin 100 ml:11a kylmää isopropanolia ja poistettiin CCl^ tyhjössä lämpötilassa 0°C. Sen jälkeen lisättiin sopivaa aminoalkoholia (0,3 moolia) liuotettuna 50 ml:ssa isopropanolia tipoit- r.r : tain isopropanoliliuokseen sekoittaen lämpötilassa -5°C. Reaktion : : : annettiin tapahtua siksi, kunnes mitään reagoimatonta N-(2-kloori- etyyli)-N-nitrosokarbamoyyliatsidia ei ollut enää todettavissa (TLCrllä). Tämä vaati 4 tuntia l-(2-hydroksietyyli)-3-(2-kloorietyyli)-3-nitroso-virtsa-aineella (6) ja aina noin 12 tuntiin saakka 1-(3-hydroksipropyy-li)-3-(2-kloorietyyli)-3~nitrosovirtsa-aineella (7). Reaktion päättymisen jälkeen lisättiin sama tilavuus kylmää 1-n ja hapan liuos uutettiin etyyliformaatilla. Etyyliformaattifaasi pestiin vedellä neutraaliseksi ja pesuvesi uutettiin uudelleen. Yhdistetyt orgaaniset faasit kuivattiin NagSO^rn avulla ja väkevöitiin. Puhdas yhdiste 6 : " kiteytettiin vaalean keltaisten neulamaisten kiteiden muodossa etyyli- formaatti/n-pentaanista syväjäähdytyskaapissa ja kuivattiin sen ^ : .·. jälkeen tyhjössä. Muuta kahta hydroksialkyylinitrosovirtsa-ainetta (7, 8) ei voitu kiteyttää. Ne puhdistettiin pylväskromatografiällä ’·* piigeelillä (liuotin: asetoni/n-pentaani/bentseeni 1:1:). Liuottimen ...: tyhjössä lämpötilassa 0°C poistamisen jälkeen nämä nestemäiset nitroso- f, 73974 virtsa-aineet jäähdytyskuivattiin lämpötilassa -10°C (2^ tuntia). Esimerkki 5

Metaanisulfonihappoestereiden valmistus l-(<*)-hydroksialkyyli)-3-(2-kloorietyyli)-3-nitrosovirtsa-aineista, esimerkiksi l-(2-metaani-sulfonyylioksietyyli)-3-(2-kloorietyyli)-3-nitrosovirtsa-aineesta (taulukon I yhdiste 9) 0,05 moolia 1-(2-hydroksietyyli )-3-(2-kloorietyyli)-3-nitrosovirtsa-ainetta liuotettiin 50 ml:aan juuri K0H:n kanssa tislattua pyridiiniä. Lämpötilassa -5°C'tiputettiin 0,13 moolia metaanisulfonyylikloridia 40 ml:aan pyridiiniä 3 tunnin aikana. Seoksen annettiin seisoa yön yli lämpötilassa 0°C. Sen jälkeen se laimennettiin jäähdyttäen 60 mlrlla jäävettä, jäähdytettiin lämpötilaan -10°C ja seos hapotettiin hitaasti väkevällä HCltllä. Sitten suoritettiin ravistus etyyliformiaatin kanssa ja etyyliformiaattifaasi kuivattiin Na2S0^:n avulla,väkevöi-tiin ja siihen lisättiin noin sama tilavuus n-pentaania. Metaani-sulfonihappoesteri kiteytettiin syväjäähdytyskaapissa (-13°C) ja kiteytettiin uudelleen etyyliformiaatti/n-pentaanista. Aine oli ohut-kerroskromatograafisesti tasa-aineista, alkuaineanalyysin tulokset olivat välillä * 0,4 % teoreettisesta. Molaarinen absorptio UV:ssä, tyypilliset infrapuna-absorptiot ja NMR-spektri vahvistavat tasa-aineisuuden ja rakenteen.

Saanto: 73 %, sul'.p.,59 - 6l°C.

Tämä yhdiste oli erittäin mielenkiintoinen, koska se koostuu kahdesta kliinisesti sopivasta solun· kasvua ehkäisevästä molekyylin puoliskosta, nimittäin BCNU:sta ja 1,4-bis-[metaanisulfonyylioksi]-butaanista, jonka kaava on [CHj-SOg-O-CHg-CH^ 2 ("Myleran" ).

Eläinkoetulokset osoittavat erinomaisen vaikutuksen alkukantaisessa -•y.

DMBA:n aiheuttamassa rotan Mamma-karsinoomassa,joka vaikutus selvästi ylitti kliinisesti paljon käytetyn kemoterapeuttisen aineen "Adriamycinin" (suojattu tavaramerkki) vaikutuksen.

7

Esimerkki 6 73974 N-(2-kloorietyyli)-N-nitrosokarbamoyyliaminohappoamidien, esimerkiksi 3-(2-kloorietyyli)-3-nitrosovirtsa-ainejohdannaisen (CNU-johdannaisen), 2-[3-(2-kloorietyyli)]-3-nitrosoureidoasetamidin (taulukon I yhdiste 10) valmistaminen 0,3 moolin glysiiniamidi-kloorivedyn liuos säädettiin K0H:lla pH-arvoon 9 ja tiputettiin jääkylmään sekoitettuun liuokseen, jossa oli 0,2 moolia N-(2-kloorietyyli)-N-nitrosokarbamoyyliatsidia 150 ml:ssa isopropanolia. Reaktio tapahtui nopeasti (noin 1 tunti). Heti kun mitään reagoimatonta N-(2-kloorietyyli)-N-nitrosokarbamoyyliatsidia ei enää ollut todettavissa (ohutkerroskromatografia), säädettiin happamaksi 1-n H2S0^:llä ja uutettiin etyyliformiaatilla. Orgaaninen faasi pestiin neutraaliseksi ja kuivattiin Na2SO^:n avulla. Nitroso-virtsa-aine erotettiin sivutuotteista moninkertaisella fraktioidulla toistokiteytyksellä etyyliformiaatista ja kiteytettiin lopuksi etanolista. Aine oli ohutkerroskromatograafisesti tasa-aineinen. Ydin-resonanssispektristä ja alkuaineanalyysistä voitiin todeta 1/2 moolin kideveden läsnäolo. UV- ja IR-spektroskooppiset arvot vahvistavat tasa-aineisuuden ja rakenteen.

Saanto: 40 %, sul.p. 114,2 - 114,5°C.

: Eläinkoetulokset osoittivat samanlaista vaikutusta kuin BCNU:11a saatu nk. Walker-karsinosarkoomaa vastaan, mutta aine on paremman vesiliukoi-suutensa johdosta käytettävissä vedessä päinvastoin kuin BCNU. Alku-kantaisessa DMBA:n aiheuttamassa rotan Mamma-karsinoomassa tällä aineella on parempi vaikutus kuin "Adriamycinillä” ja BCNU:11a.

Lisäksi sillä,päinvastoin kuin BCNU:lla,ei ole mitään jälkitoksisia vaikutuksia.

Kemiallisten reaktiovaiheiden kulku - mukaanlukien edulliset reaktiot .. «| '* lähtöaineen saamiseksi - voidaan esittää kaaviollisesti seuraavasti: : !·. (I) C1-CH2-CH2-NC0 + HN^ -*· Cl-CH2-CH2-NHCON3 (II) Cl-CH2-CH2-NHCON5 + N20^ -*> Cl-CH2-CH2-N(NO)CON3 e 73974 (III) C1-CH2-CH2-IJ(N0)C0N5 * R-NH2 - R-NH-CO-N(NO)CH2CH2C] 4 Hi', R tarkoittaa bis-yhdisteiden 1-5 tapauksessa polymetyylieteeniryhmää, jossa on sopivimmin 2-6 hiiliatomia, yhdisteissä 6-3 ω-hydroksi-alkyyliradikaalia, jossa on 2 - 4 hiiliatomia, yhdisteessä 9 2-metaanisulfonyylioksietyyliradikaalia ja yhdisteessä 10 asetamidi-radikaalia.

Fysikaaliset arvot on esitetty oheisessa taulukossa I merkittyinä numeroilla 6-10.

Kaikki .syntetisoidut yhdisteet olivat homogeenisia määrättynä ohutkerroskromatografialla (TLC)-analyysi (piigeelilevyt, liuotin asetoni/n-pentaani/bentseeni 1:1:1).

Alkuaineanalyysin tulokset olivat välillä ± 0,JJ % teoreettisista arvoista, lukuunottamatta nestemäisiä yhdisteitä 7 ja 8, jotka olivat mahdollisesti alkuaineanalyysiä varten liian pysymättömiä. Kuitenkin myöskin tällöin molaariset absorptiot UV:ssä ja N-nitrosoureidoryhmän tyypillisissä infrapuna-absorptioissa olivat yhdenmukaiset niiden kanssa, jotka ovat tunnettuja muille nitrosovirtsa-aineille. Myöskin NMR-spektri vahvisti yhdisteen rakenteen ja puhtauden.

Käyttökelpoisuuden kokeilemiseksi verrattiin yhdistettä 6 BCNU:hun keraoterapeuttisen aktiivisuuden suhteen rottaleukemiaa L 5222 -ja nk. Walker-karsinosarkoomaa vastaan. Tulokset on esitetty oheisessa taulukossa II. Tällöin osoittautui,että yhdisteellä 6 on oleellisesti parempi aktiivisuus kuin BCNUjlla.

Esimerkki 7 N-(2-fluorietyyli)-N-nitroso-N’-(2-hydroksyetyyli) virtsa-aineen valmistus.

0,1 mol N-(2-fluorietyyli)-N-nitrosokarbamoyyliatsidia liuotettiin etanoliin, jäähdytettiin -5 °C:een. Liuokseen lisättiin hitaasti tiputtamalla 0,2 mol etanoliamiinia alkoholiin liuotettuna. Samalla seurattiin pH-ärvoa, eikä sen annettu nousta arvon 7 -yläpuolelle.

9 73974

Kun ohutlevyllä ei havaittu enää N-(2-fluorietyyli )-N-nitror,okarba-moyyliatsidia, sekoitettiin vielä 1/2 tuntia. Sitten liuos hapo-tettiin laimealla rikkihapolla ja uutettiin useaan kertaan etyyli-formiaatilla. Orgaaninen faasi kuivattiin natriumsulfaatilla ja haihdutettiin kuiviin.

Virtsa-ainejohdannainen kiteytettiin kylmässä pienestä määrästä n-pentaania, saanto 5,6 g (25 %)» sp. 33-34°C.

• · h · 1 ; *· ·«* 10 7 3 9 7 4

Taulukko I

2-kloorietyyli-N-nitrosovirtsa-aineiden fysikaaliset ominaisuudet

Yhdiste [CNU = -3-(2-kloori- Sul.p. (°C) ja ηβ Saanto (%)

etyyli)-3~nitrosovirtsa-aine, jonka kaava on -nhcon(no)ch2ch2ciJ

1) 1,1'-etyleeni-bis-CNU 129,9 - 130,9 (hajoaa) 35 cnu-(ch2)2-cnu 2) 1,1'-propyleeni-bis-CNU 69,2 - 72,1 (hajoaa) 35 cnu-(ch2)3-cnu 3) 1,1'- tetrametyleeni-bis-CNU 104,5 - 106,1 (hajoaa) 37

CNU-(CH2)l4-CNU

4) 1,1'- pentametyleeni -bis- CNU 96,0 - 98,0 (hajoaa) 39 cnu-(ch2)5-cnu 5) 1,1-heksametyleeni-bis-CNU 84,0 - 86,0 (hajoaa) 46 cnu-(ch2)6-cnu 6) 1-(2-hydroksietyyli)-CNU 56,0 - 58,0 (hajoaa) 49

CNU-CH2-CH2OH

2Ω 7) l-(3-hydroksipropyyli)-CNU n^ = 1,4655 47 cnu-(ch2)2-ch2oh ΡΠ 8) 1-(4-hydroksibutyyli)-CNU n^ = 1,4855 47 cnu-(ch2)3-ch2oh 9) 1-(2-metaanisulfonyyli- 59 - 61 73 oksietyyli)~3~(2-kloori- etyyli)-3-nitrosovirtsa- aine (cnu-ch2-ch2-oso2-ch3) 11 73974 10) 2-[3-(2-kloorietyyli)]- 114,2 - 114,5 40 3-nitrosoureido-asetamidi (cnu-ch2-co>;h2)

Taulukko II

l-(2-hydroksietyyli )-3-(2-kloorietyyli)-3-nitrosovirtsa-aineen kemoterapeuttinen aktiivisuus verrattuna BCNU:hun rottaleukemiaa L 3222 ja nk. Walker-karsinosarkoomaa vastaan.

i λ p) 4)

Aine ' L 5222 ‘ nk.Walker parantumiset"^ T.W.I.^ % BCNU · 70 83 3 75 77 6 90 35 1) Tällöin annettiin pistoksina 50 %\lle akuutista LD,-q.

2) Käsittely 6.päivänä 5 x 10^ solujen istutuksen jälkeen. Kussakin ryhmässä oli 20 BD IX rottaa.

3) Rotat, jotka 60 päivää käsittelyn jälkeen olivat elossa, katsottiin : parantuneiksi.

4) Käsittely 4.päivänä istutuksen jälkeen. Kussakin ryhmässä oli I 10 Sprague Dawley-rottaa.

' u‘ 5) T.W.I. vastaa kasvaimen painon ehkäisyä prosenteissa 8.päivänä laskettuna kaavasta ι,η„,·+.λΊ

*!· käsitelty χ 10(K

TI tarkistus • · ψ · • · · • · · • · • »

Claims (7)

1. 73974 1. l-(2-halogeenietyyli)-l-nitrosovirtsa-aineiden valmistuksessa käytettävä N-(2-halogeenietyyli)-N-nitrosokar-bamoyyliyhdiste, joka on N-(2-kloori- tai 2-fluori- 5 etyyli)-N-nitrosokarbamoyyliatsidi.
2. 2. Vaatimuksen 1 mukainen yhdiste, joka on N-(2-kloorietyyli)-N-nitrosokarbamoyyliatsidi.
3. 3· Vaatimuksen 1 mukaisen N-(2-halogeenietyyli)-N-nit-rosokarbamoyyliyhdisteen valmistusmenetelmä tunnet-10 t u siitä, että 2-kloori- tai 2-fluorietyylikarbamoyyli-atsidin annetaan reagoida typpitetroksidin kanssa. Vaatimuksen 3 mukainen menetelmä tunnettu siitä, että 2-kloori- tai 2-fluorietyylikarbamoyyliatsidi valmistetaan antamalla 2-kloori- tai 2-fluori-isosyanaatin 15 reagoida natriumatsidin kanssa.
4. 5. Menetelmä kaavan I NO I R - NH - CO - N - CH2CH2Hal mukaisen l-(2-halogeenietyyli)-l-nitrosovirtsa-aineen val-20 mistamiseksi, jossa kaavassa Hai on fluori- tai klooriatomi ja R on C2-Cg-alkyyliradikaali, joka on substituoitu hyd-roksyyli-, R'C^SO- tai toisella HalCH2-CH2-N(NO)-CO-NH -ryhmällä, tai R on C-^-C^ alkyyliryhmä, joka on substituoitu H00C-, RO0C-, H2N0C- tai MeCOO-ryhmällä, jolloin R' tar-25 koittaa orgaanista ryhmää esterin täydentämiseksi ja Me tar koittaa metallivalenssisuutta, tunnettu siitä, että N-(2-kloori- tai 2-fluorietyyli)-N-nitrosokarbamoyyli-atsidin annetaan reagoida kaavaa I vastaavan diamiinin, aminoalkoholin, aminohapon tai aminohappojohdannaisen kanssa 30 sillä edellytyksellä, että mikäli R on C2-Cg-radikaali, joka on substituoitu ROgSO-ryhmällä, N-(2-kloori- tai 2-fluori-etyyli)-N-nitrosokarbamoyyliatsidin annetaan reagoida kaavaa I vastaavan aminoalkoholin kanssa ja hydroksyyliryhmä saadussa hydroksyylijohdannaisessa muutetaan ROjSO-radikaalik-35 si.
5. 6. Vaatimuksen 5 mukainen menetelmä tunnettu siitä, että N-(2-kloori- tai 2-fluorietyyli)-N-nitrosokar- 73974 bamoyyliatsidin reaktio diamiinin, aminoalkoholin, aminohapon tai aminohappojohdannaisen kanssa, suoritetaan iner-tissä liuottimessa 0°C:ssa tai sen alapuolella.
6. 7. Vaatimuksen 5 tai 6 mukainen menetelmä t u n- 5. e t t u siitä, että aminohappojohdannaisena käytetään amidia.
7. 8. Jonkun vaatimuksen 5~7 mukainen menetelmä tunnettu siitä, että N-(2-kloori- tai 2-fluorietyyli)-N-nitrosokarbamoyyliatsidia lisätään suoraan reaktio- 10 liuoksena, joka on saatu nitrosoimalla N-(2-kloori- tai 2-fluorietyyli)-N-karbamoyyliatsidia typpitetroksidillä. s - * · 0 73974