FI72727C - Foerfarande foer framstaellning av cefalosporansyraderivat innehaollande en 7-/d- -amino-(p-hydroxifenyl)-acetamido/-grupp. - Google Patents

Description

7 2 7 2 7

Menetelmä 7-[D-a-amino-(p-hydroksifenyyli)-asetamido]-ryhmän sisältävien kefalosporaanihappojohdannaisten valmistamiseksi-Förfarande för framställning av cefalosporansyraderivat in-nehallande en 7-[D-a-amino-(p-hydroxifenyl)-acetamido]-grupp 5 (Jakamalla erotettu pat.hak. 78 2719 - pat.julk. 70714)

Esillä oleva keksintö koskee menetelmää 7-[D-n-amino-(p-hydroksifenyyli)-asetamido]-ryhmän sisältävien kefalosporaanihappo johdannaisten valmistamiseksi, ja tarkemmin sanoen 7-[D-a-amino-(p-hydroksifenyyli)-asetamido]-3-metyyli-3-ke-10 fem-4-karboksyylihapon (nimitetään tavallisesti kefadroksii- liksi, 7-[D-a-amino-(p-hydroksifenyyli)-asetamido]-3-asetok-simetyyli-3-kefem-4-karboksyylihapon, 7-[D-a-amino-(p-hydroksif enyyli )-asetamido]-3-[(1H)-1,2,3-triatsol-5-yyli-tiometyy-li]-3-kefem-4-karboksyylihapon (nimitetään tavallisesti ke-15 fatritsiiniksi) ja senkaltaisten kefalosporaanihappojohdan naisten valmistamiseksi - joissa (1H)-1,2,3-triatsol-5-yyli-ryhmän sijasta - on muita heterosyklisiä tähteitä, jotka voivat olla mahdollisesti substituoituja alempialkyyliryhmällä, ja näiden myrkyttömien, farmaseuttisesti hyväksyttävien suo-20 lojen valmistamiseksi.

Keksintö koskee menetelmää 7-[D-a-amino-(p-hydroksife-nyyli)-asetamido]-ryhmän sisältävien kefalosporaanihappojohdannaisten valmistamiseksi asyloimalla 7-aminokefalosporaa-nihapon johdannaisia, joissa 3-asetoksimetyylijäännös on mah-25 dollisesti korvattu muilla substituenteilla, sellaisella asyloimisaineella, joka on johdettu p-hydroksifenyyliglysii-nistä. Keksintö koskee tarkemmin sanoen menetelmää kefadrok-siilin, kefatritsiinin ja senkaltaisten johdannaisten valmistamiseksi siten, että 30 a) 7-aminokefalosporaanihappojohdannainen tai sen 3-me- tyylimuunnos saatetaan reagoimaan kuivassa, inertissä, orgaanisessa liuottimessa trialkyylisilyyliryhmiä luovuttavan aineen kanssa, jota on n. 2 ekvivalenttia suhteessa 7-ADCA:han tai 7-ACA:han ja n. 3 ekvivalenttia suhteessa sen 3-metyyli-35 muunnoksiin, b) saatu reaktioseos, joka sisältää 7-aminokefalosporaanihappo johdannaisen tai sen 3-metyylimuunnoksen, jonka kaava on 2 72727 Η,Ν - CH-CB CH,

I I I

-N\o^C " CH2~ X

0 I

I ^ R1 m COO - Si- R2 ^R3 ja/tai

p - S

R1 V \

R-, —^Si - NH - CH-CH PH

r3-^ I I I 2 yc-N^c<iC-CH2-X <”>

V I

COO - Si ^R3 joissa kaavoissa kukin ryhmistä Ri, R2 ja R3 tarkoittaa samaa tai erilaista, 1—3 hiiliatomia sisältävää alkyyliryhmää, ja kukin edullisesti tarkoittaa metyyliryhmää, ja X tarkoittaa tähdettä, joka on vety, asetoksi tai viisijäseninen he-5 terosyklinen tiorengas, jossa on yksi tai useampia heteroato-meita, joko typpi, happi ja/tai rikki, ja joka mahdollisesti on substituoitu 1-3 hiiliatomia sisältävällä alkyylillä, jäähdytetään ja sekoitetaan sitten nopeasti vedettömissä olosuhteissa, veteen sekoittumattomassa, inertissä, orgaanisessa 10 pääliuottimessa ainakin ekvimolaarisen määrän seka-anhydri-diä sisältävän liuoksen kanssa, jonka seka-anhydridin yleinen kaava on

O O

H° \ Cv V CH - C - O - C - R? UH) '-' N - H^ • Ό C «

/ ^ C - C

R5 R6 jossa R7 tarkoittaa 1-2 hiiliatomia sisältävää alkoksiryh-mää, R6 tarkoittaa 1-3 hiiliatomia sisältävää alkoksiryhmää, 3 72727 R5 tarkoittaa 1-3 hiiliatomia sisältävää alkyyliryhmää tai vetyatomia ja R4 tarkoittaa 1-3 hiiliatomia sisältävää al-kyyliryhmää, joka seka-anhydridiliuos on ennakolta valmistettu saattamalla vastaava Dane-suola reagoimaan alkyyliklo-5 roformaatin kanssa vedettömissä olosuhteissa inertissä, orgaanisessa pääliuottimessa, käyttämällä mukana katalyyttistä määrää tertiääristä amiinia, c) asylointireaktiota jatketaan, minkä jälkeen haluttu yhdiste otetaan talteen sinänsä tunnetuilla menetelmillä.

10 Eräs menetelmä 6-[D-a-amino-p-(hydroksifenyyli)-asetami- do]-penisillaanihapon valmistamiseksi on yleisesti tunnettu esimerkiksi brittiläisestä patenttijulkaisusta n:o 1 339 605, jossa on esitetty tällaisen yhdisteen valmistus esimerkeissä 1-5, mutta taloudellisesti huonolla saannolla (esimerkki 1: 15 43%, puhtaus 80%; esimerkki 3: 20%, puhtaus 16%; esimerkki 4: 37%, puhtaus 93%, kun taas esimerkkein 2 ja 5 loppuosassa on ainoastan esitetty yhdisteen läsnäolo).

Tosaalta menetelmä, joka käsittää kaavan I ja/tai II mukaisen aikaisemmin silyloidun kefalosporaanihappojohdannai-20 sen asyloimisen yleisen kaavan III mukaisella seka-anhydri-dillä, on yleisesti tunnettu esim. hollantilaisesta patenttihakemuksesta NL 6912811, brittiläsiestä patenttijulkaisusta 1 973 530 ja erikoisesti brittiläsiestä patenttijulkaisusta 1 460 914.

25 Kuitenkaan ei erikoisesti viimemainitun patenttijulkai sun esimerkeistä 3 ja 13 alan asiantuntija voi riittävällä selvyydellä vetää sellaista johtopäätöstä, että esim. 7-ami-no-3-[(1H)-1,2,3-triatsol-5-yyli]-tiometyyli-3-kefem-4-kar-boksyylihapon tai sen trimetyylisilyylijohdannaisen asyloimi-30 nen, esimerkiksi etoksikarbonyyli-D-a-( 1-karboksimetoksi-pro-pen-2-yyli)-amino-p-hydroksifenyyliasetaatin avulla, voitaisiin suorittaa taloudellisesti edullisilla saannoilla.

Erikoisesti esimerkissä 13, sivu 21, käsiteltäessä 0,02 moolia 7-amino-3-(l,2,3-triatsol-5-yyli)-tiometyyli~3-kefem-35 4-karboksyylihappoa, jota aikaisemmin on käsitelty 0,06 moolilla trimetyylikloorisilaania, 0,06 moolin sellaista seosta läsnäollessa, jossa on suhteessa n. 2:1 trietyyliamiinia ja Ν,Ν-dimetyylianiliinia, sellaisella reaktioseoksella, joka on valmistettu tavalliseen tapaan asetonitriilissä 0,05 72727 4 moolista Dane-suolaa ja etyylikloroformaatista, näyttää aikaansaavan ainoastaan erittäin epätyydyttäviä saantoja (katso esimerkiksi sivu 21, rivi 38, sekä saman sivun rivit 5-10).

Myös muussa patenttikirjallisuudessa, joka koskee tämän 5 tyyppisten kefalosporaanihappojohdannaisten valmistamista, on esitetty ainoastaan epätaloudellisia menetelmiä esimerkiksi US-patenttijulkaisussa B 516 047, esimerkki 1, sarake 7, rivi 44; esimerkki 5A, rivi 52 ja esimerkki 6, sekä US-patentti julkaisussa 3 946 003 esimerkki 1 (sarake 11, rivi 65) 10 ja esimerkki 3 (sarake 12, rivi 62).

Lisäksi sarakkeen 4 rivit 1-5 ja esimerkin 1 (sarake 10) perusteella näyttää välttämättömältä ensin silyloida fenoli-p-hydroksi-ryhmä käytännön tulosten aikaansaamiseksi mikä ilmenee myös saksalaisen patenttihakemuksen DT-2600880 esimer-15 kistä 1 sivuilla 13 ja 14, sekä saksalaisen patenttihakemuksen DT-2626280 esimerkeistä 1-5.

Tämän johdosta alan asiantuntijoille oli vähemmän houkut-televaa kehittää esim. brittiläisessä patenttijulkaisussa 1 339 605 kuvattu menetelmä tai samanlaisia menetelmiä sel-20 laisten kefalosporaanihappojen valmistamiseksi, joissa on sama p-hydroksi-fenyyliglysyylitähde, kuin käyttää vaihtoehtoisia asyloimismenetelmiä etsiessään uutta ja parannettua menetelmää haluttujen yhdisteiden valmistamiseksi taloudellisesti edullisella saannolla ja siten, että puhtaus on suh-25 teellisen suuri. Keksinnön mukaisen menetelmän eräänä nykyaikaisena vaatimuksena on lisäksi, jotta sitä voitaisiin käyttää teknisessä mittakaavassa, että pakostakin esiintyvät epäpuhtaudet voidaan poistaa halvalla ja yksinkertaisella tavalla sellaisen puhtauden aikaansaamiseksi, jonka ter-30 veysviranomaiset voivat hyväksyä.

Kirjallisuudesta on tunnettua valmistaa penisillaani-happo- ja kefalosporaanihappojohdannaisia asyloimalla 6-APA tai 7-A(D)CA ja näiden johdannaisia 2-fenyyliglysiiniklori-din hydrokloridilla ja sen johdannaisilla, joissa on substi-35 tuoitu fenyyliryhmä, jolloin mainittu happokloridi saadaan 5 72727 saattamalla substituoitu fenyyliglysiini reagoimaan senkaltaisten reagenssien kuin fosforipentakloridin, tionyyliklo-ridin ja fosgeenin kanssa. Vaikkakin parannetut menetelmät D-(-)-2-(p-hydroksifenyyli)glysyylikloridi-hydrokloridin ja 5 sen kiteisen hemidioksaanisolvaatin valmistamiseksi ovat tunnetut brittiläisestä patenttijulkaisuista 1 460 915 ja 1 466 637, ei 6-APA:n tai 7A(D)CA:n tai sen 3-metyylijohdannaisten asyloiminen edellä mainitulla asyloimisaineella ole tähän asti johtanut toivottuihin tuloksiin pääasiallisesti 10 sen johdosta, että joko syntynyt tuote on ollut liian epäpuhdas, jolloin sen puhdistaminen sellaiseksi tuotteeksi, jolla on riittävän hyvä laatu, ei ole ollut mielekästä, tai vaaditun laadun (puhtauden) omaava lähtöaineena käytetty D- 2-(p-hydroksifenyyli)glysyylikloridi-hydrokloridi on voitu 15 valmistaa ainoastaan taloudellisesti epäedullisilla hinnoilla mikäli ollenkaan.

Todetut epäpuhtaudet käytettäessä kohtuullisen hinnan omaavaa happokloridi-hydrokloridia taloudellisesti välttämättömissä määrissä näyttävät vastaavan epäpuhtauksien mää-20 rää lopputuotteessa, ja alhaiset saaliit vastaavat samankaltaisia asyloimiskäsittelyjä käytettäessä 7-amino-kefalo-sporaanihappojohdannaisten D-(-)-2-(p-hydroksifenyyli)gly-syylikloridi-hydrokloridia brittiläisen patenttijulkaisun 1 460 916 mukaisesti (katso esimerkkejä 2, 4 ja 9, erikoi-25 sesti sivu 17, rivit 32-34, ja esimerkkiä 8, joka koskee halutun tuotteen edelleen puhdistamista) ja brittiläisen patenttijulkaisun n.O 1 460 914 mukaisesti (katso esimerkkejä 3, 5, 9 ja 10). Saksalaisessa patenttihakemuksessa DT 2 520 647 on tässä yhteydessä myös esitetty sivulla 2, 30 rivit 10-20, että yleisesti käytettyjä asyloimisaineita, kuten happohalideja, ei amoksisilliinin synteesissä todella voida käyttää. On totta, että menetelmä amoksisilliinitrihyd-raatin valmistamiseksi on myös tunnettu saksalaisesta patenttihakemuksesta DT 2 611 286, joka käsittää aikaisemmin si-35 lyloidun 6-APA:n asyloimisen D-(-)-2-p-hydroksifenyyligly-syylikloridihydrokloridin avulla, jolloin saadaan saantoja, 6 72727 jotka jossain määrin näyttävät lähentelevän nykyisiä käytännön vaatimuksia.

Tällaisen lähtöaineen valmistamisessa esim. brittiläisten patenttijulkaisujen 1 460 915 ja 1 466 637 mukaisesti 5 käytetään kuitenkin fosgeenia suhteellisen vaikeasti hallittavissa olevassa menetelmässä, jossa kiinteä aine saatetaan reagoimaan kaasun kanssa. Tällainen käyttö on erittäin kallista useissa sellaisissa maissa, joissa on hyvin ankarat turvallisuusmääräykset, mikäli käyttö on ollenkaan mahdol-10 lista.

Samasta syystä menetelmä, joka on kuvattu brittiläisissä patenttijulkaisuissa 1 268 536 ja 1 341 827 ja joka koskee 6-isosyanatopenisillaanihappo- ja 7-isosyanatokefalospo-raanihappojohdannaisten valmistusta 6-APA:sta ja 7-A(D)CA-15 estereistä fosgeenin avulla ja tämän jälkeen tapahtuvaa reaktiota penisilliineiksi tai kefalosporiineiksi, on jäänyt huomiotta valmistettaessa amoksisilliiniä ja kefalosporaani-happojohdannaisia, joissa vastaava sivuketju on 7-asemassa. Toisaalta esim. saksalainen patenttijulkaisu 2 520 647 20 koskee menetelmää α-aminoasyylipenisillaanihappojohdannaisten ja mm. amoksisilliinin valmistamiseksi, jossa menetelmässä 1) 6-APA saatetaan kosketuksiin ylimäärin käytetyn voimakkaan tertiäärisen amiiniemäksen kanssa (esim. trietyyliamii- 25 nin kanssa) inertissä, veteen liukenemattomassa orgaanisessa liuottimessa (esim. metyleenikloridissä tai kloroformissa), jolloin saadaan 6-APA:n suolan liuos emäksen kanssa mainitussa liuottimessa, 2) jäljelle jäänyt voimakas tertiäärinen amiiniemäs neut-30 raloidaan liuottimessa esimerkiksi lisäämällä N,N-dimetyyli- asetamidihydrokloridia, 3) saatu neutraloitu liuos saatetaan kosketuksiin liuoksen kanssa, joka sisältää lyhytketjuisen alkoksi-muurahaishapon ja D-2-amino-p-hydroksifenyyli-etikkahapon N-suojatun joh- 35 dannaisen seka-anhydridin, jossa N-suojaryhmä on labiili hapon suhteen, veteen liukenemattomassa inertissä orgaanisessa 7 72727 liuottimessa lämpötilassa välillä -50 ja +30°C, edullisesti välillä -30 ja 0°C, jolloin saadaan N-suojatun amoksisillii-nijohdannaisen liuos, 4) täten saatu liuos saatetaan kosketuksiin veden ja voi-5 makkaan hapon (kuten kloorivetyhapon tai p-tolueenisulfoni- hapon) kanssa huoneen lämpötilassa tai jäähdytetään esimerkiksi lämpötilaan 0°C happo-labiilin N-suojarvhmän poistamiseksi, ja 5) täten saatu amoksisilliini erotetaan vesipitoisesta jär-10 jestelmästä.

Vähemmän edullista mainitussa menetelmässä on mm. se, että käsittely suoritetaan alhaisessa väkevyydessä, että liuottimet sekoittuvat keskenään niin, että niiden talteenotto on vaikeata ja että lisättäessä dimetyyliasetamidihyd-15 rokloridia kiteytyvät joskus 6-APA, 7-A(D)CA ja 7-ACA ja niiden johdannaiset paikallisista korkeista väkevyyksistä johtuen niin, että vaaditaan erittäin tarkka annosteluohjelma.

Lisäksi eräissä patenttijulkaisuissa esitetään a-amino-asyylipenisillaanihappojohdannaisten valmistusmenetelmiä asy-20 leimalla 6-APA seka-anhydridillä, joka on johdettu D-2-amino-(p-hydroksifenyyli)-etikkahapon Dane-suoloista, kuten on esitetty esimerkiksi saksalaisissa patenttihakemuksissa 1 302 847, 2 020 133 ja 2 065 879 ja brittiläisissä patenttijulkaisuissa 1 327 270 ja 1 347 979.

25 Ne saannot, jotka saadaan käytettäessä tällaisia Dane- suoloja, näyttävät kuitenkin olevan epätyydyttäviä keksinnön tarkoituksissa ja lisäksi tällaisia Dane-suoloja ei ole kaupallisesti saatavissa.

Hollantilaisessa patenttihakemuksessa 6 401 841 on esi-30 tetty edelleen 6-APA:n, 7-ACA:n ja muiden aminohappojen kar-boksyyliryhmän suojaamista saattamalla se reagoimaan dihalo-geenisilaanijohdannaisten kanssa. Tällaisia bifunktionaali-sia silikoniyhdisteitä on saatavissa helpommin kuin mono-funktionaalisia trialkyylihalogeenisilaaneja ja niiden käyt-35 tö johtaa useissa tapauksissa parempiin saantoihin, kuten ilmenee esimerkiksi brittiläisestä patenttijulkaisusta 1 266 544, 8 72727 jossa on esitetty välituote-organosilaanipenisilliinien valmistus saattamalla 6-APA ja jokin tällainen bifunktionaa-linen silikoniyhdiste reagoimaan keskenään. Organosilaani-johdannaiset asyloidaan siten, että muodostuu esimerkiksi 5 ampisilliiniä. Asiantuntija voisi tämän patenttihakemuksen sisällön perusteella odottaa, että kuvattujen organosilaani-penisilliinien käyttö johtaisi mielenkiintoisiin saantoihin myös amoksisilliiniä valmistettaessa. Tätä olettamusta ei yllättävää kyllä voitu kuitenkaan vahvistaa alustavien kokei-10 den perusteella.

Myöhemmistä patenttijulkaisuista, esimerkiksi brittiläisistä patenttijulkaisuista 1 356 737, 1 404 846 ja 1 459 999 on tunnettua käyttää kolmiarvoisia fosforijohdannaisia edellä mainittujen silikonijohdannaisten sijasta. Näiden johdan-15 naisten haittana on luonnollisesti se, että niiden hinnat ovat 10-20 kertaa korkeammat ja tämä yhdistettynä di(alempi) alkyylifosforijohdannaisten myrkyllisyyteen ja helppoon syt-tyvyyteen, kuten aikakausjulkaisussa Inorganic Synthesis 15 (1974) sivut 191-193 on esitetty, tekee fosforiyhdisteistä 20 silikoniyhdisteiden huonon korvikkeen.

Laajan tutkimus- ja kehitystoiminnan tuloksena olemme nyt kehittäneet parannetun menetelmän 7-[D-a-amino-(p-hydrok-sifenyyli)-asetamido]-ryhmän sisältävien kefalosporaanihap-pojohdannaisten valmistamiseksi, jossa menetelmässä on edel-25 lä esitetyt vaiheet a)-c). Tälle menetelmälle on tunnusomaista se, että vaiheessa a) mahdollisesti läsnäolevat määrät vapaata trialkyylihalosilaania, joka sisältää 1-3 hiiliatomia alkyylitähteissä, ja tertiääristä amiinia on keskenään tasapainotettu reaktion lopussa säätämällä jäljempänä määri-30 tellyllä tavalla empiirisesti määritettyyn signaaliarvoon, että vaiheessa b) käytetty seka-anhydridiä sisältävä liuos on valmistettu saattamalla vastaava Dane-suola reagoimaan al-kyylikloroformaatin kanssa veteen sekoittumattomassa pääliuot-timessa, johon on lisätty 0-25 tilavuus-% inerttiä lisäliuo-35 tinta, ja että asylointireaktio vaiheessa c) suoritetaan alle 0 °C:n lämpötilassa.

9 72727

Reaktiota jatketaan lämpötilassa -10°C tai tämän alapuolella ja edullisesti välillä -20°C - -30°C, 1/4-3 tunnin kuluessa ja edullisesti 1 - 2,5 tunnissa, ja reaktioseos kaadetaan 5 veteen ja pH säädetään arvoon alle 2,5. Edullisesti pH säädetään arvoon välillä 0,8 - 1,2.

Silyloimisreaktiossa käytetty kuiva, inertti orgaaninen liuotin on mieluiten veteen sekoittumaton liuotin. Edullinen kuiva, inertti, veteen sekoittumaton liuotin on metylee-10 nikloridi, ja silyloimisaine on edullisesti trimetyylikloori-silaani (TMCS) tertiäärisen amiinin läsnäollessa. Hyviä tuloksia voidaan myös saada käytettäessä trimetyylisilyyliasetami-dia, bis(trimetyylisilyyli)asetamidia, bis(trimetyylisilyyli) ureaa ja heksametyylidisilatsaania.

15 Sanonta "keskenään tasapainotettu" vaiheessa a) edellä voidaan selventää seuraavalla tavalla:

On todettu, että optimaalisia saantoja voidaan saada toistuvalla tavalla vain käyttämällä hyvin tarkasti tasapainotettuja määriä aineita silyloidun välituotteen valmistami-20 seksi, erityisesti optimaaliseen muutokseen nähden valmistetun Dane-seka-anhydridin liuoksen kanssa. Mitä tulee niihin pääsyihin jotka aikaansaavat poikkeamia tästä ideaalitasapai-nosta todettakoon että asiantuntijalle on selvää, että käytännössä on mahdotonta välttää pieniä virheitä mitattaessa 25 tilavuuksia tai punnittaessa ainemääriä, erityisesti hyvin pienessä mittakaavassa suoritettavissa kokeissa (muutamia millimooleja) tai suuressa teollisuusmittakaavavalmistukses-sa. Tällöin tarvitaan siis "väline" tai "työkalu" jolla tämä tasapaino voidaan tarkistaa in situ ja tarpeen vaatiessa pa-30 lauttaa silyloinnin jälkeen. Tämän "keskinäisen tasapainon" mittaaminen ja sen mahdollinen palauttaminen on yleinen, 7-ADCA:n ja vastaavien yhdisteiden silylointimenetelmiin liittyvä piirre, mutta se on erittäin tärkeä suoritettaessa si-lylointi taloudellisimmalla aineyhdistelmällä, esim. trimetyy-35 likloorisilaanilla ja trietyyliamiinilla, koska tämä yhdistelmä - päinvastoin kuin eräät muut silyloimisaineet kuten ,0 72727 N,O-bis(trimetyylisilyyli)-asetamidi - ei itsestään aikaansaa sisäistä keskinäistä tasapainoa.

Etsittäessä sopivaa ja samalla yksinkertaista menetelmää, jolla tämä tasapaino voitaisiin määrittää ja tarvittaes-5 sa korjata in situ teknisissä olosuhteissa,todettiin yllättäen että esimerkiksi hyvälaatuisen pH-mittarin käyttö tyydytti nämä ehdot. Käytettäessä esimerkiksi Radiometer pH-mittaria tyyppiä TTT2C yhdessä Radiometer GK 2401C-elektro-din tai Ingold-, nk. kylmäelektrodin kanssa lämpötilassa 10 15-25°C, tulisi silylointireaktion lopussa pH-asteikkoarvon olla empiirisellä välillä 5,5 - 7,5, ja erityisesti välillä 6,0 - 7,2. Mikäli näin ei ole asianlaita, lisätään pieni määrä trimetyylikloorisilaania tai esimerkiksi trimetyyli-amiinia paremman keskinäisen tasapainon aikaansaamiseksi.

15 On todettu samantekeväksi vastaako edellä mainittu op timaalinen pH-asteikkoväli itse asiassa samaa suuruusluokkaa olevaa todellista pH-arvoa (6,0 - 7,2), joka mitataan sily-lointiseoksen veteen liuottamisen jälkeen, koska muilla sopivilla pH-mittareilla saadut asteikkovälilukemat voidaan 20 säätää mainitulla pH-mittarityypillä saatuun. Tämän keksinnön eräs piirre on näin ollen oivallus, jonka mukaan silylointi-reaktiossa käytettyjen aineiden keskinäistä tasapainoa on säädettävä, samoinkuin yksinkertainen ohje tämän fundamentaalisen ongelman ratkaisemiseksi in situ.

25 Silylointi suoritetaan mieluiten kuivassa metyleeni- kloridissa, joka sisältää 2-3 ekvivalenttia tertiääristä amiinia kuten trietyyliamiinia ja ekvivalenttisen määrän TMCS:a (n. 2 ekvivalenttia esim. kefadroksiilille ja n. 3 ekvivalenttia esim. kefatritsiinille).

30 Kuiva veteen liukenematon pääliuotin, jota käytetään valmistettaessa ns. Dane-anhydridiä, voi olla kuiva mety-leenikloridi, johon on lisätty dimetyyliformamidia, sulfolaa-nia, tetrahydrofuraania, N-metyylipyrröIidonia, 1,4-dioksaa-nia, asetonitriiliä, dimetyyliasetamidia tai tetrametyyli-35 ureaa tai näiden seosta lisäliuottimeksi korkeintaan 25 tilavuus-%, tai metyyli-isobutyyliketonia pääliuottimeksi, 11 72727 johon voidaan lisätä yhtä tai useampaa mainittua lisäliuo-tinta aina 25 tilavuus-%. Tällöin saatetaan edullisesti kalium- tai natrium-D-α-(1-karbometoksi-propen-2-yyli)-ami-no-p-hydroksi-fenyyliasetaatti reagoimaan edullisesti metyy-5 likloroformaatin kanssa vastakohtana aikaisemmin hyväksyttyihin mielipiteisiin, kuten Houben-Weyl on esittänyt kirjassa Methoden der Organischen Chemie, 4. painos (1974), Volume XV/2, Synthese von Peptiden, osa II, sivu 172. Katalyyttinä käytetään edullisesti N-metyyli-morfoliinia.

10 Kloroformaatti lisätään edullisesti Dane-suolaan, kun reaktio toteutetaan edullisesti lämpötilassa -10°C tai sen alapuolella, edullisesti lämpötilassa välillä -10 ja -35°C. Metyleenikloridin ja esitettyjen lisäliuottimien seoksia, joissa on enintään noin 20 tilavuus-% ja edullisesti 15 enintään 10 tilavuus-% lisäliuotinta lähtöaineseoksesta laskettuna, ovat optimiliuottimia Dane-seka-anhydridiä valmistettaessa. Lisäliuottimien väkevyydet valitaan edullisesti siten, että vältetään liuotinten sekoittuminen keskenään.

Lisäliuottimena käytetään edullisesti tetrahydrofuraa-20 nia, N,N-dimetyyliasetamidia, N,N-dimetyyliformamidia, N-metyylipyrrolidonia ja N,N,N',N'-tetrametyyliureaa.

Erään toisen edullisen toteuttamismuodon mukaisesti jäähdytetään anhydridiliuos lämpötilaan -15°C tai sen alapuolelle, ja tähän lisätään nopeasti tehokkaasti sekoittaen 25 silyloidun 7-ACA:n tai sen 3-metyylimuunnoksen jäähdytetty liuos niin, että saavutetaan lämpötila, joka on välillä -15 ja -30°C, jonka jälkeen reaktioseosta sekoitetaan vielä 1/2-3 tuntia. Tällöin käytetään edullisesti pientä ylimäärää kaavan III mukaista yhdistettä, jolloin tämän ylimäärän suu-30 ruus riippuu kefalosporaaniytimen 3-metyyliryhmän substituen-tin luonteesta.

Esimerkiksi kefatritsiinin valmistamiseksi aluksi valmistettu yhdiste erotetaan edullisesti reaktioseoksesta vastaavan metanolaatin tai propyleeniglykolaatin muodossa.

35 Kefatritsiinin solvaatit voidaan muuttaa myrkyttömiksi, farmaseuttisiksi hyväksyttäviksi suoloiksi tunnetuilla mene- 72727 telmillä.

Esimerkiksi kefatritsiinin metanolaatin valmistamiseksi sekoitetaan aluksi saatu reaktioseos metanolin kanssa ja tämän jälkeen epäorgaanisen hapon kuten suolahapon laimean ve-5 siliuoksen kanssa siten, että lopuksi saavutetaan seoksen pH-arvo 1,0-1,5. Saadusta seoksesta valmistetaan metanolaat-ti tavanomaisella tavalla esimerkiksi säätämällä pH alueelle 1,7-2,4, väkevöimällä orgaaninen faasi ja lisäämällä inert-tiä orgaanista liuotinta erottamisen aikaansaamiseksi, uutta-10 maila orgaaninen kerros jäävedellä, väkevöimällä yhdistetyt vesikerrokset, lisäämällä orgaanista liuotinta, kuten etyyliasetaattia, väkevöimällä saatu liuos, lisäämällä suuri ylimäärä metanolia ja säätämällä pH arvoon 5,5, ottamalla talteen sakka ja pesemällä ja kuivaamalla se.

15 Esimerkiksi kefadroksiilin valmistamiseksi erotetaan tämä yhdiste edullisesti aluksi saadusta reaktioseoksesta, sekoittamalla se epäorgaanisen hapon vesiliuoksen kanssa siten, että lopullinen pH-arvo on noin 1, puhdistamalla, lisäämällä suuri ylimäärä N,N-dimetyyliformamidia, säätämällä 20 pH arvoon 5,5 lämpötilassa noin 10°C, ottamalla talteen sol-vaattikiteet, pesemällä DMF-vesiseoksilla ja kuivaamalla.

Kefadroksiili voidaan ottaa talteen näin saadusta sol-vaatista liuottamalla se veteen ja lisäämällä kefadroksiili-monohydraatin siemenkiteitä.

25 Kefadroksiili voidaan kuitenkin ottaa talteen yksinker taisemmin aluksi saadusta reaktioseoksesta lisäämällä kefa-droksiilimonohydraatin siemenkiteitä vesifaasiin, joka saadaan hydrolyysin ja puhdistusvaiheiden jälkeen.

Edullinen menetelmä kefadroksiilimonohydraatin valmista-30 miseksi, sen jälkeen kun kefadroksiili on lähes kvantitatiivisesti eristetty aluksi saadusta reaktioseoksesta, käsittää vaiheet, joissa kefadroksiili sekoitetaan epäorgaanisen hapon vesiliuoksen kanssa siten, että saavutetaan loppu-pH n. 1, tämän jälkeen puhdistetaan, lisätään suuri ylimäärä 35 Ν,Ν-dimetyyliformamidia, pH säädetään arvoon 5,5, kerätään 13 72727 kefadroksiili-N,N-dimetyyliformamidi-solvaattikiteet, pestään ne Ν,Ν-dimetyyliformamidi-vesi-seoksilla ja vaihtoehtoisesti muilla orgaanisilla liuottimilla, seuraavaksi mahdollisesti kuivataan, liuotetaan saadut solvaattikiteet ve-5 teen, lisätään kefadroksiilimonohydraatin siemenkiteitä, kerätään kiteinen saostuma suodattamalla, pestään ja kuivataan, ja lisätään ylimäärin Ν,Ν-dimetyyliformamidia konsentroituun emäliuokseen ja pesuliuoksiin, jolloin saadaan uudelleen ke-fadroksiili-N,N-dimetyyliformamidisolvaatti.

10 On huomattava, että keksinnön mukaisen asyloimismenetel- män tärkeimpiä etuja ovat seuraavat: - p-hydroksifenyyliglysiinin p-hydroksiryhmän edeltävä ja selektiivinen silylointi vältetään, - reaktio suoritetaan reagoivien aineiden väkevässä liuokses-15 sa. Tietyllä laitteiston koolla saadaan suurempi kilomääräi- nen tuotos, - p-hydroksifenyyliglysyylikloridi-hydrokloridin käyttö vältetään, jota voidaan valmistaa vain verrattain vaikeasti hallittavalla menetelmällä, joka lisäksi on suhteellisen kal- 20 lis useissa maissa johtuen hyvin ankarista varmuusmääräyksis-tä, mikäli ylipäänsä on sallittua valmistaa sitä, - vältetään muiden lisäkemikaalien suurten määrien käyttö, - haluttu lopputuote voidaan yllättäen valmistaa taloudellisesti edullisella saannolla ja sen laatuisena, joka vallit- 25 sevilla terveysmääräyksillä on tyydyttävä, samalla kun puh-distusvaiheita voidaan vähentää ja halutun yhdisteen häviöitä pienentää, - monissa tapauksissa liuotinten sekoituminen vähenee edullisesti, joten käytettyjen liuotinten talteenotto on verra- 30 ten yksinkertaista ja taloudellisesti edullista samalla kun lähtöliuotinjärjestelmää voidaan verrattain helposti kuivata, - ei-halutun ja haitallisen 7-ACA:n tai sen 3-metyylimuun-noksen kiteytyminen on käytännöllisesti katsoen nolla, jolloin on aikaansaatu luotettava ja yksinkertainen menetelmä.

35 On huomattava, että asiantuntijat tuntevat vähintään 1 4 72727 kaksi haitallista sivureaktiota suoritettaessa asylointi anhydridiseoksen avulla: 1) Asyloituminen, jolloin muodostuu alkoksikarbonyyliamino-kefalosporaanihappo-johdannaisia, 5 2) N-suojatun aminohapon osittainen rasemoituminen esimerkik si N-suojatun aminohapon tai sen suolan seka-anhydridiksi muuttumisen aikana.

Ensin mainitun sivureaktion välttämistä yksinkertaisilla keinoilla pidetään melkein mahdottomana, koska tällainen 10 sivureaktio usein on hyvin tavanomainen johtuen siitä, että seka-anhydridit ovat luonnostaan enemmän tai vähemmän labiileja ja niillä on taipumus disproportionoitua kahdeksi symmetriseksi anhvdridiksi. Tämän johdosta seka-anhydridin valmistus sekä anhydridin muuttaminen aminohappoa käyttäen suo-15 ritetaan aina alhaisissa lämpötiloissa.

Toinen haitallinen sivureaktio (rasemoituminen) voidaan välttää pääasiallisesti kokeilemalla ja ottamalla huomioon tapahtuneet erehdykset.

Kun kirjallisuuden mukaisesti etyylikloroformaatti ja 20 - kysymyksen ollessa rasemoitumisesta käytettäessä tätä reak- tanttia, jonkin verran pienemmässä määrin - isobutyylikloro-formaatti, pivaloyylikloridi ja bentsoyylikloridi on katsottu sopiviksi reaktanteiksi, eikä metyylikloroformaatin käyttöä pidetä edullisena, on halvan metyylikloroformaatin 25 käytön yllättäen voitu todeta johtavan huomattavasti parempiin tuloksiin.

Valmistettaessa seka-anhydridi ja asyloitaessa tämän jälkeen käytetään mieluiten sellaisia liuotinjärjestelmiä, jotka täyttävät taloudelliset (talteenotto, uudelleenkierrä-30 tys) ja/tai ekologiset vaatimukset.

Nämä ehdot voitiin yllättäen täyttää käyttämällä esitettyjä liuotinjärjestelmiä.

Esitettyjen liuotinjärjestelmien käyttö seka-anhydridin valmistuksen aikana aikaansai yllättäen seuraavat tulokset: 35 a) parannettu ja paremmin toistettavissa oleva ja luotettavampi seka-anhydridin muodostaminen ja tämän johdosta ha- 15 72727 lutun yhdisteen parempi saanto, b) halutun yhdisteen parempi saanto yhdessä väkevyyksien samanaikaisen kasvun kanssa edulliselle tasolle aikaisemmin aikaansaatuihin taloudellisiin tuloksiin verrattuna, 5 c) sangen odottamaton N,0-silyloidun 7-ACA:n tai sen johdannaisten käyttö reaktiossa seka-anhydridien kanssa mainituin saannoin, d) parannetut konversiosaannot kysymyksen ollessa amidi-tyyppisten lisäliuottimien käytöstä silyloitujen 7-ACA- 10 johdannaisten määrätyissä konversioissa, e) mahdollisuus toteuttaa sekä silyloimisreaktio että seka-anhydridin valmistus yhdessä ja samassa veteen sekoit-tumattomassa pääliuottimessa, tarkemmin sanoen dikloorime-taanissa, jonka johdosta nykyisin vaadittu liuotinten tal- 15 teenotto tulee huomattavasti yksinkertaisemmaksi.

Lisäksi todettiin, että seka-anhydridin valmistuksen aikana voidaan katalyyttinä käyttää N-metyylimorfoliinia tai muita samankaltaisia (syklo) alifaattisia tertiäärisiä amiineja. Katalyyttien läsnäolo voidaan välttää käyttämällä 20 huomattavia määriä, esimerkiksi 1/3 liuotintilavuuden kokonaismäärästä, amidityyppistä lisäliuotinta.

Koska teollisuusmittakaavassa täydellisesti kuivattujen liuotinten ja/tai erittäin puhtaiden Dane-suolojen käyttö on ihannetila, jota koskaan ei voi täysin toteuttaa, käy-25 tetään edullisesti vähäistä ylimäärää lähtöaineena käytettyjä Dane-suoloja ja (alempi)alkyylikloroformaatteja.

Seuraavat esimerkit kuvaavat keksinnön mukaista menetelmää, mutta eivät rajoita sitä.

Esimerkki I

30 7-(D-a-amino-(p-hydroksifenyyli)-asetamido)-3-((1 H)-1,2,3- triatsol-5-yyli-tiometyyli)-3-kefem-4-karboksyylihappo-me- tanolaatin valmistus_ a) Ο,Ν-silyloidun 7-amino-3-((1H)-1,2,3-triatsol-5-yyli-tiometyyli)-3-kefem-4-karboksyylihapon valmistus_ 16 72727

Suspensioon, jossa oli 4,173 g (13,33 mmoolia) 7-ami-no-3-((1H)-1, 2,3-triätsol-5-yyli-tiometyyli)-3-kefem-4-kar-boksyylihappoa, joka oli valmistettu muuntamalla 7-ACA käyttäen vähäistä ylimäärää natrium-(1H)-1,2,3-triatsol-5-tiolaat-5 tia vedessä korotetussa lämpötilassa, ja jota seurasi uudel-leenkiteyttäminen vedestä 50 ml:ssa kuivaa asetonitriiliä, joka oli puhdistettu tislaamalla ja varastoitu heikossa happamassa aluminiumoksidissa (vesipitoisuus < 0,25 g/litra), lisättiin 5,617 ml (40,29 mmoolia) trietyyliamiinia lämpöti-10 lassa 3-5°C. Samalla jatkuvasti johtaen typpeä sekoitetun seoksen pinnalle lisättiin lämpötilassa hieman alle 5°C 5,179 ml (40,99 mmoolia) trimetyylikloorisilaania. Jäähdytys-haude poistettiin ja sekoittamista jatkettiin 20 tuntia huoneen lämpötilassa (noin 20°C) ja tämän jälkeen 3-4 tuntia 15 lämpötilassa noin 30°C. Seos jäähdytettiin lämpötilaan -20°C.

b) Metoksikarbonyyli-D-a-(1-karbometoksipropen-2-yyli)- amino-p-hydroksifenyyli-asetaatin valmistus_

Sekoitettuun ja jäähdytettyyn (0°C) suspensioon, jossa oli 11,478 g (37,88 mmoolia) kalium-D-α-(l-(karbometoksipro-20 pen-2-yyli)-2-aminoj-fenyyliasetaattia seoksessa, jossa oli 50 ml ("Redal") tislattua tetrahydrofuraania ja 12 ml tetra-metyyliureaa, lisättiin 6 tippaa (Pasteur-pipetti) N-metyyli-morfoliinia. Samalla kun typpeä johdettiin jatkuvasti reak-tioseoksen pinnan ylitse, jäähdytettiin liete lämpötilaan 25 välille -10 ja -12°C, jonka jälkeen lisättiin tipoittain liuos, jossa oli 3 ml (38,8 mmoolia) metyylikloroformaattia, jonka puhtaus oli 97%, 7 ml:ssa tislattua tetrahydrofuraania samalla kun reaktiolämpötila pidettiin arvossa välillä -10 ja -12°C. Saatua seosta sekoitettiin vielä 30 minuuttia lämpö-30 tilassa välillä -10 ja -12°C. Tämän jälkeen seos jäähdytettiin lämpötilaan -20°C.

c) 7- (D-a-amino-p-hydroksifenyyliasetamido)-3-((1H)-1,2,3-triatsol-5-yyli-tiometyyli)-3-kefem-4-karboksyylihappometano- laatin valmistus__ 35 Typpikehässä lisättiin nopeasti sellainen seos, joka si- 17 72727 saisi seka-anhydridin ja joka oli valmistettu in situ kohdan b) mukaisesti,lämpötilassa -20°C kohdan a) mukaisesti valmistettuun reaktioseokseen. Saatua seosta sekoitettiin vielä 3 tuntia lämpötilassa -20°C ja sitä varastoitiin tämän jälkeen 5 yli yön lämpötilassa -18°C. Samalla sekoittaen seos sai vähitellen lämmetä lämpötilaan 20°C noin 45 minuutin kuluessa. Tämän jälkeen seos suodatettiin G-3 lasisuodattimen lävitse ja talteenotettu sakka pestiin toistuvasti kaikkiaan 50 ml: 11a kuivaa metyyli-isobutyyliketonia. Tämän jälkeen lisät-10 tiin 5 ml absoluuttista metanolia samalla jään avulla jäähdyttäen ja sekoittaen. Yhdistetty suodos kaadettiin 40 ml:aan voimakkaasti sekoitettua jäävettä. Samalla jäähdyttäen ja sekoittaen lisättiin 4 N HC1 siksi, kunnes seoksen pH oli 1,5. Jääkylmää seosta sekoitettiin vielä 30 minuuttia, jonka 15 jälkeen pH nostettiin arvoon 2,3 trietyyliamiinia lisäämällä. Ennen faasien erottamista poistettiin orgaanisen liuottimen pääosa haihduttamalla tyhjössä ja lisäämällä tämän jälkeen metyyli-isobutyyliketonia siksi, kunnes oli saatu kirkas kaksikerroksinen järjestelmä. Nämä kerroksen erotettiin toi-20 sistaan. Alempaa kerrosta varastoitiin jään avulla ja ylempi kerros uutettiin kahdesti 25 ml:n tilavuuksilla jäävettä. Molemmat pesunesteet yhdistettiin aikaisemmin saadun alakerroksen kanssa ja väkevöitiin tyhjössä pieneen tilavuuteen lämpötilassa alle 20°C. 150 ml etyyliasetaattia lisättiin 25 sitten jäännökseen ja tämän jälkeen tapahtui melkein täydellinen haihduttaminen tyhjössä lämpötilassa alle 20°C. Samalla kun lämpötila pidettiin arvossa alle 20°C, liuotettiin jäännös, joka oli vielä jonkin verran kosteata öljyä, 100 ml: aan kuivaa metanolia (noin 99 %:sta) ja tämän jälkeen lisät-30 tiin hitaasti trietyyliamiinia siksi,kunnes saavutettiin vakio pH-arvo 5,5. Halutun kefatritsiinimetanolaatin saostuminen alkoi pH-arvossa 4. Seosta sekoitettiin tämän jälkeen vielä tunnin ajan samalla jäähdyttäen. Sakka otettiin talteen suodattamalla, pestiin kuivalla ja kylmällä metanolilla ja 35 kuivattiin tyhjössä. Saanto 4,640 g.

18 72727

Tuotteen PMR-spektri osoitti, että kefatritsiinin ja metanolin välinen suhde oli tarkoin 1:1, kun taas kefatrit-siinin metanolaatin raakasaanto oli 73,0 %.

Laskettaessa huolellisesti erilaisten protoni-absorp-5 tiosignaalien integraalit raakatuotteen dideuterio-muurahais-happoliuoksen PMR-spektristä todettiin, että trietyyliamii-nin kloorivetyhapposuolaa oli läsnä noin 1,0 paino-% ja tet-rametyyliureaa noin 0,6 %. Koska raakatuote ei sisältänyt huomattavia määriä p-hydroksifenyyliglysiiniä eikä lähtöai-10 neena käytettyä ACA-johdannaista, näytti raakatuotteen puhtaus olevan vähintään 98,4 paino-%.

Hieman kellertävä raakatuote voitiin muuttaa helposti käytännöllisesti katsoen puhtaaksi ja pysyväksi kefatritsii-nin solvaatiksi, kuten seskvihydraatiksi.

15 Esimerkki II

7-(D-a-amino-(p-hydroksifenyyli)asetamido]-3-{(1H)-1,2,3-triatsol-5-yyli-tiometyyli)-3-kefem-4-karboksyylihappometa-nolaatin valmistus_ a) Ο,Ν-silyloidun 7-amino-3-((1H)-1,2,3-triatsol-5-yy-20 li-tiometyyli)-3-kefem-4-karboksyylihapon valmistus

Suspensioon, jossa oli 20,865 g 7-amino-3-((1H)-1,2,3-triatsol-5-yyli-tiometyyli)-3-kefem-4-karboksyylihappoa 200 mlrssa asetonitriiliä, lisättiin 28,0 ml trietyyliamiinia lämpötilassa välillä -5 ja 0°C samalla kun typpeä johdettiin 25 jatkuvasti seoksen pinnan yläpuolelle. Lämpötilassa 0-7°C

lisättiin 26,0 ml trimetyylikloorisilaania ja reaktioseosta sekoitettiin 3 tuntia lämpötilassa noin 30°C.

pH-arvo mitattuna pH-mittarilla "Radiometer TTT2,C" käyttäen elektrodia "Radiometer GK 2401C" pidettiin vakiona 30 välillä 6,0 ja 6,5.

b) Metoksikarbonyyli-D-a-(1-karbometoksipropen-2-yyli)-amino-p-hydroksifenyyliasetaatin valmistus

57,390 g:aan kalium-D-α-(1-karbometoksi-propen-2-yyli)-amino-p-hydroksifenyyliasetaattia lisättiin 200 ml kuivaa 35 tetrahydrofuraania ja jäähdyttämisen jälkeen lämpötilaan 0°C

19 72727 lisättiin 50 ml N,Ν-dimetyyliasetamidia. Kun oli lisätty 30 tippaa N-metyylimorfoliinia Pasteur-pipetin avulla, jäähdytettiin seos lämpötilaan välille -10 ja -15°C ja lisättiin 15 ml metyylikloroformaattia. Reaktioseosta sekoitettiin 5 vielä lämpötilassa välillä -10 ja -15°C 30 minuuttia, jonka jälkeen seos jäähdytettiin lämpötilaan -20°C.

c) Kefatritsiinimetanolaatin valmistus.

Reaktioseos, joka oli saatu kohdasta b) ja joka sisälsi in situ valmistettua seka-anhydridiä, lisättiin typpikehässä 10 lämpötilassa -20°C yhdellä kertaa kohdassa a) saatuun seokseen, jonka lämpötila oli -20°C. Saatua seosta sekoitettiin sitten vielä tunnin ajan lämpötilassa -20°C ja sitä varastoitiin jääkaapissa lämpötilassa -5°C yli yön. Seos saatettiin samalla sekoittaen lämpötilaan 20°C 45 minuutin kuluessa.

15 Tämän jälkeen seos suodatettiin G-3 lasisuodattimen avulla ja talteenotettu materiaali pestiin toistuvasti kuivalla metyyli-isobutyyliketonilla (noin 200 ml). Yhdistetyt suodok-set jäähdytettiin jäähauteen avulla typpikehässä ja niitä käsiteltiin tämän jälkeen kuivalla metanolilla (20 ml) ja 20 sekoitettiin 5 minuuttia. Sitten lisättiin jääkylmää vettä (20 ml) ja pH säädettiin arvoon 1,2 4 N HCl-liuoksen avulla ja seosta sekoitettiin 30 minuuttia jäähauteen avulla jäähdyttäen. Tämän jälkeen pH nostettiin arvoon 1,8 trietyyli-amiinilla ja reaktioseos väkevöitiin haihduttamalla tyhjös-25 sä 100-150 ml:ksi. Sitten lisättiin metyyli-isobutyyliketo-nia (150 ml) ja kerrokset erotettiin. Ylempi kerros uutettiin vedellä (2x5 ml) ja uutteet yhdistettiin alemman kerroksen kanssa (mikäli erottaminen aiheutti vaikeuksia lisättiin muutama millilitra asetonitriiliä erottumisen edis-30 tämiseksi). Yhdistetyt vesikerrokset lisättiin kylmään me- tanoliin siten, että lopullinen tilavuus oli 1 litra. Lisäämällä trietyyliamiinia säädettiin pH arvoon 5,5 jolloin välittömästi muodostui kiinteä sakka. Seosta sekoitettiin vielä 3 tuntia ja sitä varastoitiin yli yön jääkaapissa.

35 Seos suodatettiin, pestään metanolilla (95 %) ja kuivattiin 20 72727 Ρ2θ^:η päällä tyhjössä lämpötilassa 30°C, jolloin saannoksi saatiin 21,574 g (65,5 %) puhtauden ollessa vähintään 98 paino-%.

Esimerkki III

5 7-(D-g-amino-(p-hydroksifenyyli)asetamidoj-3-metyyli-3-kefem- 4-karboksyylihapon monohydraatin valmistus_ a) Silyloidun 7-amino-3-metyyli-3-kefem-4-karboksyyliha-pon (7-ADCA) valmistus 35.0 g:aan (163 mmoolia) 7-ADCA lisättiin peräkkäin 400 10 ml dikloorimetaania ja 19,8 g (123 mmoolia) heksametyylidi- silatsaania (HMDS). Kuumentamisen jälkeen lämpötilaan 38°C keitettiin seosta palautusjäähdyttäen kuivassa typpikehässä 7,5 tuntia. Tunnissa lisätty typpimäärä oli tällöin n. 20 1 (vakio-olosuhteissa). Reaktiopullon sisältö pidettiin va-15 kioarvossa lisäämällä pieniä määriä dikloorimetaania tarvittaessa. 7-ADCA liukeni täydellisesti ja titraamisen jälkeen 1N rikkihappoliuoksella reaktioastiaan kiinnitetyssä pesu-pullossa 98 % lähtöaineena käytetystä HMDSistä saatiin talteen ammoniakin muodossa.

20 b) Metoksikarbonyyli-D-a-(1-karbometoksipropen-2-yyli)- amino-p-hydroksifenyyliasetaatin valmistus 58.0 g kalium-D-α-(1-karbometoksi-propen-2-yyli)amino-p-hydroksifenyyliasetaattia lisättiin 200 ml:aan dikloorimetaania. Jäähdyttämisen jälkeen lämpötilaan -40°C lisättiin 25 20 ml dimetyyliasetamidia, jolloin lämpötila nousi arvoon -33°C. Kun oli lisätty 0,5 ml N-metyylimorfoliinia jäähdytettiin seos lämpötilaan -38°C ja lisättiin 16,0 ml metyy-likloroformaattia yhdellä kertaa. Lämpötila nousi arvoon noin -30°C ja reaktioseosta sekoitettiin tässä lämpötilassa 30 2 tuntia, jonka jälkeen seos jäähdytettiin lämpötilaan -35°C.

e) 7-fp-a-amino-(p-hydroksifenyyli)asetamido)-3-metyyli- 3-kefem-4-karboksyylihapon (kefadroksiili-DMF-solvaatti) valmistus

Kohdasta a) saatu reaktioseos jäähdytettiin lämpötilaan 35 -30°C ja lisättiin mahdollisimman nopeasti kohdasta b) saa- 21 72727 tuun seka-anhydridin liuokseen samalla sekoittaen ja jäähdyttäen, jolloin lämpötilaksi saatiin -25°C. Reaktioseosta sekoitettiin sitten tunnin ajan lämpötilassa välillä -25 ja -20°C. Tämän jälkeen lisättiin seos, jossa oli 200 ml tis-5 lattua vettä ja 17 ml väkevää kloorivetyhappoa siten, että lämpötilaksi saatiin 0°C. 90 minuutin pituisen sekoittamisen jälkeen lämpötilassa 0°C hydrolyysi näytti olevan täydellinen ja pH-arvo oli 1. Kerrokset erotettiin ja vesikerros pestiin 100 ml:11a dikloorimetaania. Orgaaninen kerros pestiin 10 50 ml:11a tislattua vettä ja pesuveden uuttamisen jälkeen dikloorimetaanipesuliuoksilla suodatettiin vesikerros ja suodatin pestiin saaduilla pesunesteillä. Sitten lisättiin samalla jäähdyttäen 1500 ml dimetyyliformamidia ja pH säädettiin arvoon 5,5 noin lämpötilassa 10°C lisäämällä 25%:sta ammo-15 niakkiliuosta, jonka jälkeen tapahtui kefadroksiili-DMF-sol-vaatin kiteytyminen. Suunnilleen tunnin kuluttua kiteytysmis-seos säädettiin pH-arvoon 7 ja jäähdytettiin lämpötilaan 0°C.

1 tunnin pituisen jäähdyttämisen jälkeen tässä lämpötilassa suodatettiin neulan muotoiset kiteet, pestiin 150 ml :11a 90%: 20 sta dimetyyliformamidi-vesi-seosta, pestiin 300 ml :11a etyyliasetaattia ja kuivattiin tyhjössä lämpötilassa noin 30°C. Saatiin 73,2 g valkoista tuotetta. Oletettu rakenne voitiin vahvistaa IR- ja PMR-spektrien avulla, jotka osoittivat kysymyksessä olevan oleellisesti puhtaan tuotteen. Saanto 88%.

25 d) Puhtaan kiteisen 7-(p-a-amino-p-hydroksifenyyliaset- amido)-3-metyyli-3-kefem-4-karboksyylihappomonohydraatin (kefadroksiilimonohydraatti) valmistus

Kohdassa c) saatu DMF-solvaatti lisättiin annoksittain samalla sekoittaen noin 10 minuutin kuluessa 175 ml:aan tis-30 lattua vettä huoneen lämpötilassa. Lisäämisen jälkeen ja kun 5 g solvaattia oli liuennut lisättiin 1 g kefadroksiili-mono-hydraatin siemenkiteitä. Lisäämisen päättymisen jälkeen jatkettiin sekoittamista 1 tunti. Saadut pyramidimaiset kiteet erotettiin suodattamalla ja pestiin vedellä, jonka lämpötila 35 oli 0°C, kuivattiin tyhjössä lämpötilassa noin 30°C, jolloin 22 _ _ Λ 72727 saatiin 35,4 g kiteistä valkoista tuotetta. Saadun yhdisteen rakenne voitiin todeta IR- ja PMR-spektrien avulla, jotka osoittivat, että saatu tuote oli erittäin puhdasta.

Emäliuos haihdutettiin 50 ml:ksi ja kun oli lisätty 5 600 ml DMF:ää otettiin talteen 21,3 g samaa solvaattia, jol loin kefadroksiilin saanto oli 78 % lähtöaineena käytetystä 7-ADCA:sta laskettuna.

Esimerkki IV

Tarkoin samalla tavoin kuin esimerkin III kohdissa a-c 10 on esitetty saatiin samanlainen vesikerros kuin mainitussa kohdassa c. Tämä vesikerros saatettiin kiteytymään ilman DMF:ää käyttäen 1 g kefadroksiili-monohydraatin siemenkitei-tä, pH 5. Saatiin 21,7 g haluttua yhdistettä. Emäliuoksen lisäkäsittelyn jälkeen saanto oli 78,3%.

15 Esimerkki V

a) Silyloidun 7-amino-3-metyyli-3-kefem-4-karboksyyli-hapon valmistus 35,0 g:aan 7-ADCA:ta (163 mmoolia) lisättiin 400 ml dikloorimetaania ja 45,3 ml (327 mmoolia) trietyyliamiinia. 20 Sitten lisättiin muutaman minuutin kuluessa tipoittain 41,5 ml (327 mmoolia) trimetyylikloorisilaania ilman jäähdyttämistä, jolloin lämpötila nousi arvoon 38°C. 1 tunnin pituisen refluksoinnin jälkeen lämpötilassa 38-40°C jäähdytettiin reaktioseos lämpötilaan -30°C. Tämän jälkeen saatiin 25 82,2 g kefadroksiili-DMF-solvaattia seurattaessa esimerkin III vaiheita b ja c saannon ollessa 98,8 %. Oletettu rakenne voitiin vahvistaa IR- ja PMR-spektrien avulla, jotka osoittivat saadun tuotteen suuren puhtauden. Tarkoin saman esimerkin III käsittelyvaiheen d) mukaisesti muutettiin saa-30 tu kefadroksiili-DMF-solvaatti 41,5 g:ksi kefadroksiili-mo-nohydraattia. Oletettu rakenne voitiin vahvistaa IR-PMR-spektrien avulla, jotka osoittivat myös saadun tuotteen suuren puhtauden. Karl-Fischer-kokeen perusteella kosteuspitoisuus näytti olevan 5,5 %. Emäliuoksesta voitiin saada vielä 35 23 g DMF-solvaattia, jolloin kokonaissaanto oli 89,5 % ke- fadroksiili-monohydraattia lähtöaineena käytetystä 7-ADCA: sta laskettuna.

23 72727

Esimerkki VI

7-((D-amino-(p-hydroksifenyyli)-asetamido]-3(1 H)-1,2,3-tri-atsol-5-yyli-tiometyyli -3-kefem-4-karboksyylihappo-metano- laatin valmistus__ 5 a) Ο,Ν-silyloidun 7-amino-3-f(1H)—1, 2 ,3-triatsol-5-yyli- tiometyyli)-3-kefem-4-karboksyylihapon valmistus

Suspensioon, jossa oli 8,346 g (26,66 mmoolia) 7-amino-3^ ((1H)-1,2,3-triatsol-5-yyli-tiometyyli)-3-kefem-4-karbok-syylihappoa (puhtaus n. 90%), joka oli valmistettu konvergoi-10 maila 7-ACA:ta pienellä ylimäärällä natrium-(1 H)-1,2,3-tri-atsol-5-tiolaattia 100 ml:ssa dikloorimetaania, lisättiin 11,2 ml (80,35 mmoolia) trietyyliamiinia lämpötilassa 0-5°C. Samalla jatkuvasti johtaen typpeä sekoitetun seoksen pinnalle lisättiin lämpötilassa hieman alle 5°C 10,4 ml (82,33 15 mmoolia) trimetyylikloorisilaania. Jäähdytyshaude poistettiin ja seosta refluksoitiin hiljaa 90 minuutin ajan. Näin saatavalla Ο,Ν-silyloidulla tuotteella, 7-amino-3((1H)-1,2,3-triatsol-5-yyli-tiometyyli)-3-kefem-4-karboksyylihapolla, joka on substituoitu ainakin useammalla kuin kahdella trimetyy-20 lisilyyliryhmällä, on pH-asteikkoarvo 6,5 mitattuna Radiometer pH-mittarilla 28 ja käyttäen Radiometer-elektrodia Ingold HA-401. Edelleen se jäähdytettiin -30°C:een vaihetta c) varten.

b) Metoksikarbonyyli-D-a-(1-karbometoksipropen-2-yyli-25 amino-p-hydroksifenyyli-asetaatin valmistus 75 ml dikloorimetaania lisättiin 22,956 g:aan kalium-D-α-(1-karbometoksi-propen-2-yyli)amino-p-hydroksifenyyli-asetaattia ja 0°C - -5°C:n lämpötilaan jäähdyttämisen jälkeen lisättiin 14 ml N-metyylipyrrolidonia ja 0,07 ml N-me-30 tyylimorfoliinia. Seos jäähdytettiin -38°C:seen ja lisättiin heti 6,1 ml metyylikloroformaattia. Seosta sekoitettiin 90 minuuttia lämpötilassa välillä -30°C - -35°C.

c) Kefatritsiinimetanolaatin valmistus r

Typpikehässä lisättiin vaiheesta a) saatu reaktioseos, 35 jonka lämpötila oli -30°C, heti vaiheesta b) saatuun seokseen, jota oli pidetty -30°C:ssa ja näin saatua seosta se- 72727 24 koitettiin tunnin ajan lämpötilassa välillä -30 - -35°C ja sen jälkeen vielä tunnin ajan -12 - -20°C:ssa. Jäähdytyshau-de poistettiin, ja sekoittamista jatkettiin kunnes lämpötila oli noussut 15°C:seen. Seos suodatettiin ja jäännös pestiin 5 dikloorimetaanilla. Yhdistetty suodos jäähdytettiin jää-vesi-hauteessa ja käsiteltiin 8 ml:11a metanolia. Samalla jäähdyttäen lisättiin 5 ml 4 N suolahappoa ja 10 ml vettä, sitten voimakkaasti sekoittaen reaktioseoksen pH säädettiin arvoon 1,2 4 N HCltlla ja sekoitusta jatkettiin 30 mini Uttia. Sitten ylem-10 pi kerros erotettiin ja alempi kerros uutettiin 5 ral:lla vettä.

Yhdistetyt uutteet (ylempi kerros + uutettu kerros) yhdistettiin ja lisäämällä kylmää metanolia kokonaistilavuudeksi saatiin 200 ml. Tämä kefatritsiinia sisältävä metanoli-liuos lisättiin hitaasti metanoliin, pidettiin vakio-pH:ssa 15 5,1 lisäämällä automaattisesti 10 % trietyyliamiinia metano- lissa. Seosta sekoitettiin edelleen tunnin ajan ja sitä pidettiin sitten yli yön n. -15°C:ssa. Kiteinen saostuma suodatettiin, pestiin peräkkäin 95% ja 99% metanolilla, ia kuivattiin vakuumissa vakiopainoon. Saanto oli 8,408 g 7-(d-ol-20 amino-p-hydroksifenyyliasetamido)-3-((1H)-1,2,3-triatsol-5-yyli-tiometyyli)-3-kefem-4-karboksyylihappometanolaattia. Tuotteen PMR-spektri osoitti, että kefatritsiinin ja metano-lin suhde oli tarkoin 1:1, kun taas kefatritsiinimetanolaa-tin raakasaanto oli 63,83%.

25 Laskettaessa huolellisesti erilaisten protoni-absorptio- signaalien integraalit raakatuotteen dideuterio-muurahais-happoliuoksen PMR-spektristä, todettiin, että trietyyliamii-nin kloorivetyhapposuolaa oli läsnä n. 0,84 paino-%. Ellei lähtöaineen epäpuhtautta oteta huomioon, todella läsnäolevan 30 kefatritsiinin saanto oli 63 %. Koska raakatuote ei sisältänyt havaittavia määriä p-hydroksifenyyliglysiiniä eikä lähtöaineena käytettyä 7-ACA-johdannaista, tämä tuote voitiin helposti muuttaa käytännöllisesti katsoen puhtaaksi ja stabiiliksi kefatritsiinin solvaatiksi kuten seskvihydraatiksi.

35 25 72727

Esimerkki VII

7-(D-g-amino-(p-hydroksifenyyli)-asetamido)-3-((1 H)-1,2,3-triatsol-5-yyli-tiometyyli)-3-kefem-4-karboksyylihappo-meta- nolaatin valmistus_ 5 a) Silyloidun 7-amino-3-((1H)-1,2 ,3-triatsol-5-yyli-tio- metyyli)-3-kefem-4-karboksyylihappometanolaatin valmistus Suspensioon, jossa oli 8,346 g 7-amino-3-((1H)-1,2,3-triatsol-5-yyli-tiometyyli)-3-kefem-4-karboksyylihappoa 100 ml:ssa dikloorimetaania, lisättiin 11,2 ml trietyyliamiinia 10 lämpötilassa välillä 0°C ja -5°C, samalla kun jatkuvasti johdettiin typpeä seoksen pinnan yläpuolelle. Trimetyyli-kloorisilaania (10,4 ml) lisättiin lämpötilassa 0-5°C ja reaktioseosta refluksoitiin 90 minuutin ajan. "pH"-arvo mitattuna Radiometer pH-mittarilla 28 oli 7,0.

15 b) Metoksikarbonyyli-D-a-(1-karbometoksipropen-2-yyli)- amino-p-hydroksifenyyliasetaatin valmistus 75 ml dikloorimetaania lisättiin 22,956 g:aan kalium-D-α-(1-karbometoksi-propen-2-yyli)-amino-p-hydroksifenyyli-asetaattia ja -10°C:seen jäähdyttämisen jälkeen lisättiin 20 14 ml 1,1,3,3-tetrametyyliureaa. Kun oli lisätty 0,07 ml N- metyylimorfoliinia, seos jäähdytettiin -38°C:seen ja siihen lisättiin 6,1 ml metyylikloroformaattia. Reaktioseosta sekoitettiin sitten 90 minuuttia lämpötilassa välillä -28 - -35°C, minkä jälkeen seos jäähdytettiin -30°C:seen.

25 c) 7-(p-a-amino-p-hydroksifenyyliasetamido)-3-((1H)— 1,2,3-triatsol-5—yyli-tiometyyli)-3-kefem-4-karboksyylihap-po-metanolaatin valmistus

Typpikehässä seka-anhydridin sisältävä seos, joka oli valmistettu vaiheessa b) in situ, lisättiin nopeasti vaihees-30 ta a) saatuun seokseen lämpötilassa -30°C. Näin saatua reaktioseosta sekoitettiin sitten tunnin ajan -30°C:ssa ja toisen tunnin -20°C:ssa ja se jätettiin sitten yön ajaksi -15°C:seen. Tämän jälkeen sekoittaen, seos saatettiin huoneenlämpötilaan, suodatettiin ja jäännös pestiin dikloorimetaanilla. Jäähdyt-35 täen jää-vesihauteella yhdistettyyn suodokseen lisättiin 8 ml metanolia, minkä jälkeen sekoitusta jatkettiin 10 minuuttia.

26 72727

Sitten lisättiin 15 ml vettä sekoittaen ja jäähdyttäen, ja näin saatavan seoksen pH säädettiin arvoon 1,2 lisäämällä 4 N suolahappoa. Pitäen pH 1,2:ssa seosta sekoitettiin 30 minuuttia. Alempi kerros erotettiin ja heitettiin pois. Pi-5 täen lämpötila 20°C:n alapuolella, paksu öljymäinen yläkerros liuotettiin 200 ml:aan kuivaa metanolia, minkä jälkeen lisättiin hitaasti trietyyliamiinia kunnes vakio-pH 5,1 oli saavutettu. Seosta sekoitettiin vielä 2 tuntia, minkä jälkeen saatu sakka kerättiin suodattamalla. Sen jälkeen seura-10 si pesu 95%:sella ja 99 %:sella metanolilla ja tuote kuivattiin vakuumissa vakiopainoon. Otsikon mukaisen yhdisteen saanto oli 62,4 %, kun on tehty korjaukset pienen läsnäolevan trietyyliamiinihydrokloridi-määrän suhteen.

Esimerkki VIII

15 7{- D-a-amino-(p-hydroksifenyyli)-asetamido]-3((1H)-1,2,3- triatsol-5-yyli-tiometyyli)-3-kefem-4-karboksyylihappometa- nolaatin valmistus_.__ a) 0,N-silyloidun 7-amino-3-((1H)—1,2,3,-5-yyli-tiometyyli)- 3- kefem-4-karboksyylihapon valmistus 20 Suspensioon, jossa oli 8,346 g (26,66 moolia) raakaa 7-amino-3-((1H)-1,2,3-triatsol-5-yyli-tiometyyli)-3-kefem- 4- karboksyylihappoa, joka oli valmistettu konvergoimalla 7-ACA:a pienen ylimäärän kanssa natrium-(1H)-1,2,3-triatsol- 5- tiolaattia 100 ml:ssa dikloorimetaania, lisättiin 10,8 ml 25 trietyyliamiinia 0-5°C:ssa. Samalla kun typpeä johdettiin jatkuvasti seoksen pinnan yläpuolelle, ja lämpötilassa hieman alle 5°C, lisättiin 10,4 ml trimetyylikloorisilaania. Mittaamalla Radiometer pH-mittarilla, tyyppi TTT2,C, tämän seoksen "pH" säädettiin välille 6,2 - 6,4 lisäämällä trietyy-30 liamiinia. Reaktioseosta refluksoitiin sitten hiljaa 90 minuuttia. Näin valmistetun 0,N-silyloidun 7-amino-3-((1H)- 1,2,3-triatsol-5-yyli-tiometyyli)-3-kefem-4-karboksyylihapon pH-asteikkoarvo oli 6,2.

Vaihe b) ja vaihe c) suoritettiin tarkalleen kuten esimer-35 kissa VI.

Kuivan tuotteen laskettu saanto oli 64%.

Claims (12)

27 7 2 7 2 7

1. Menetelmä 7-[D-ct-amino-p-hydroksifenyyliasetamido]-ryhmän sisältävien kefalosporaanihappojohdannaisten valmistamiseksi, jonka mukaan a) 7-aminokefalosporaanihappojohdannainen tai sen 3-me-tyylimuunnos saatetaan reagoimaan kuivassa, inertissä, orgaanisessa liuottimessa trialkyylisilyyliryhmiä luovuttavan aineen kanssa, jota on n. 2 ekvivalenttia suhteessa 7-ADCA: hän tai 7-ACA:han ja n. 3 ekvivalenttia suhteessa sen 3-me-tyylimuunnoksiin, b) saatu reaktioseos, joka sisältää 7-aminokefalosporaanihappo johdannaisen tai sen 3-metyylimuunnoksen, jonka kaava on H2N - CH-CH CH9 I I I N\0^C " CH2~ *

0 I I ^ R1 (I> COO - Si- R0 \R2 R3 ja/tai R1\ /S\ Rp ——? Si - NH - CH-CH CH_ r3 l I I 2 c-n^c^c-ch2-x UI) I ^ Rt COO - Si—-R2 joissa kaavoissa kukin ryhmistä , R2 ja R3 tarkoittaa samaa tai erilaista, 1-3 hiiliatomia sisältävää alkyyliryhmää, ja kukin edullisesti tarkoittaa metyyliryhmää, ja X tarkoittaa tähdettä, joka on vety, asetoksi tai viisijäseninen he-terosyklinen tiorengas, jossa on yksi tai useampia heteroato- 28 72727 meitä, joko typpi, happi ja/tai rikki, ja joka mahdollisesti on substituoitu 1-3 hiiliatomia sisältävällä alkyylillä, jäähdytetään ja sekoitetaan sitten nopeasti vedettömissä olosuhteissa, veteen sekoittamattomassa, inertissä, orgaanisessa pääliuottimessa ainakin ekvimolaarisen määrän seka-anhydri-diä sisältävän liuoksen kanssa, jonka seka-anhydridin yleinen kaava on /rS\ ? H0 ) ?H c 0 - c - R7 (III) '-' N - IU 1 ''0 C ‘1 ^ c - C K4 . . R5 R6 jossa R7 tarkoittaa 1-2 hiiliatomia sisältävää alkoksiryh-mää, Rg tarkoittaa 1-3 hiiliatomia sisältävää alkoksiryhmää, R5 tarkoittaa 1-3 hiiliatomia sisältävää alkyyliryhmää tai vetyatomia ja R4 tarkoittaa 1-3 hiiliatomia sisältävää alkyyliryhmää, joka seka-anhydridiliuos on ennakolta valmistettu saattamalla vastaava Dane-suola reagoimaan alkyyliklo-roformaatin kanssa vedettömissä olosuhteissa inertissä, orgaanisessa pääliuottimessa, käyttämällä mukana katalyyttistä määrää tertiääristä amiinia, c) asylointireaktiota jatketaan, minkä jälkeen haluttu yhdiste otetaan talteen sinänsä tunnetuilla menetelmillä, tunnettu siitä, että vaiheessa a) mahdollisesti läsnäolevat määrät vapaata trialkyylihalosilaania, joka sisältää 1-3 hiiliatomia alkyylitähteissä, ja tertiääristä amiinia on keskenään tasapainotettu reaktion lopussa säätämällä selityksessä määritellyllä tavalla empiirisesti määritettyyn signaaliarvoon, että vaiheessa b) käytetty seka-anhydridiä sisältävä liuos on valmistettu saattamalla vastaava Dane-suola reagoimaan alkyylikloroformaatin kanssa veteen sekoit-tumattomassa pääliuottimessa, johon on lisätty 0-25 tila-vuus-% inerttiä lisäliuotinta, ja että asylointireaktio vai- 29 72727 heessa c) suoritetaan alle 0 °C:n lämpötilassa.

2. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, tunnet-t u siitä, että 7-aminokefalosporaanihappojohdannainen tai sen 3-metyylimuunnos saatetaan reagoimaan kuivassa metylee-nikloridissa trimetyylikloorisilaanin kanssa tertiäärisen amiinin läsnäollessa.

3. Patenttivaatimuksen 2 mukainen menetelmä, tunnet-t u siitä, että mahdollisesti läsnäolevat määrät vapaata trimetyylikloorisilaania ja tertiääristä amiinia on keskenään tarkoin tasapainotettu siten, että pH-elektrodilla rekisteröity signaali on säädetty reaktion lopussa "pH-asteik-koarvon" vakioarvoon välille 5,5 -7,5, lämpötilassa välillä 15 - 25 °C mitattuna Radiometer pH-mittarilla tyyppiä TTT2, ja Radiometer GK 240lC-elektrodilla tai Ingold kylmäelektro-dilla.

4. Patenttivaatimusten 1-3 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että seka-anhydridi valmistetaan ennakolta vastaavasta Dane-suolasta ja metyylikloroformaatista vedettömissä olosuhteissa, tertiäärisen amiinin, erityisesti N-metyylimorfoliinin läsnäollessa katalysaattorina, kuivassa metyleenikloridissa, johon on sekoitettu lisäliuotinta tai metyyli-isobutyyliketonissa, johon on mahdollisesti sekoitettu lisäliuotinta.

5. Patenttivaatimuksen 4 mukainen menetelmä, tunnet-t u siitä, että seka-anhydridi valmistetaan kuivassa metyleenikloridissa, johon on lisäliuottimeksi lisätty dimetyy-liformamidia, tetrahydrofuraania, N-metyylipyrrolidonia, ase-tonitriiliä, dimetyyliasetamidia tai tetrametyyliureaa tai näiden seosta, tai metyyli-isobutyyliketonissa, joka muodostaa pääliuottimen, johon on voitu lisätä yhtä tai useampaa edellä mainittua lisäliuotinta.

6. Patenttivaatimuksen 5 mukainen menetelmä, tunnet-t u siitä, että liuotin on kuiva metyleenikloridi, johon on lisätty dimetyyliformamidia, tetrahydrofuraania, N-metyylipyrrolidonia, dimetyyliasetamidia tai tetrametyyliureaa tai näiden seosta. ----------- ·· 1! 30 72727

7. Patenttivaatimuksen 6 mukainen menetelmä, tunnet-t u siitä, että lisäliuotinta lisätään korkeintaan 10 tila-vuus-%.

8. Jonkin patenttivaatimuksista 1-7 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että Dane-seka-anhydridin valmistus suoritetaan lämpötilassa välillä -10 ja -35 °C.

9. Jonkin patenttivaatimuksista 1-8 mukainen menetelmä Dane-seka-anhydridin valmistamiseksi, tunnettu siitä, että natrium- tai kalium-D-a-(l-karbometoksipropen-2-yyli) amino-p-hydroksifenyyliasetaatti saatetaan reagoimaan metyy-likloroformaatin kanssa.

10. Jonkin patenttivaatimuksista 1-9 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että valmistetaan kefadroksiilia.

11. Patenttivaatimusten 1-9 mukainen menetelmä kefadrok-siili-monohydraatin valmistamiseksi, tunnettu siitä, että kefadroksiili erotetaan melkein kvantitatiivisesti aluksi saadusta reaktioseoksesta sekoittamalla se epäorgaanisen hapon vesiliuoksen kanssa siten, että aikaansaadaan lopullinen pH-arvo noin 1, puhdistetaan, lisätään suuri ylimäärä Ν,Ν-dimetyyliformamidia, säädetään pH-arvoon 5,5, otetaan talteen kefadroksiili-Ν,Ν-dimetyyliformamidisolvaatti-kiteet, pestään ne Ν,Ν-dimetyyliformamidi-vesi-seoksella ja mahdollisesti muilla orgaanisilla liuottimilla, jota mahdollisesti seuraa kuivaaminen, saadut solvaattikiteet liuotetaan veteen ja lisätään siemenkiteinä kefadroksiilimonohydraattia, kiteinen sakka otetaan talteen suodattamalla, pestään ja kuivataan ja lisätään ylimäärin Ν,Ν-diroetyyliformamidia väkevään emäliuokseen ja pesunesteisiin kefadroksiili-N,N-dime-tyyliformamidisolvaatin talteenottamiseksi.

12. Jonkin patenttivaatimuksista 1-9 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että valmistetaan kefatritsiiniä. 3i 72727