FI67389C - Framstaellning av saosom 5alfa-reduktas-inhibitorer anvaendbara 4-aza-17-substituerad-5alfa-androstan-3-oner - Google Patents

Description

R3?71 Γβΐ fl1^UULUTUSJULKAISU ^77 QQ

JNTa lBJ ^ UTLÄGCNINGSSKRIFT θ/όθ9 pt) Kuilla} c 07 J 73/00 SUOMI—FINLAND (mj hwei^-hiwoMito^ 791193 Q2) HtfciwhpihH—Aimaknlmfitt 11.0A.79 /aei\. ' ' v' (23) AMmp«M—GlMgMadaf 11.0A.79 (41) TmNik JulklNksI — Blhrtt oHwcllg 1 A. 10.79

Patentti· ja rekisterihallitut NihcMM^mon μ ku^uUaUw prm.-

Pitenfr och registerstyralssn ' 7 AmNcm uthgd odi ucUkrifMn publlcararf 3 0.1 1 .8 A

(32)(33)(31) «moUwo»—Bsflrd prtortcac 13.0A.78 USA(US) 896120 (71) Merck S Co., Inc., 126 E. Lincoln Avenue, Rahway, New Jersey, USA(US) (72) David Bruce Randolph Johnston, Warren, New Jersey, Gary Henry Rasmusson, Watchung, New Jersey, Donald Floyd Reinhold, North Plainfield, New Jersey, Torleif Utne, Warren, New Jersey, Ronald Bradford Jobson,

East Brunswick, New,Jersey, USA(US) (7A) Oy Koister Ab (5A) 5'vreduktaasi-inhibi it toreina käyttökelpoisten A-atsa-17"subst i tuoi tu--5°^androstan-3"Onien valmistus - Framstälining av säsom 5Qf-reduktas--inhi bi torer användbara A-aza-17-substi tuerad-5o^androstan-3-oner Tämä keksintö koskee menetelmiä testosteroni-5-reduktaasi-inhibiittoreina käyttökelpoisten uusien 4-atsa-17-substituoitu-5oC-androstan-3-onien valmistamiseksi.

Alan asiantuntijat ovat hyvin selvillä siitä, että tietyt ei toivotut fysiologiset ilmiöt kuten tavallinen näppyläisyys, ta-linvuoto, naisen liikakarvaisuus, ja maskuliininen kaljuus sekä hyvänlaatuinen eturauhasen liikakasvu ovat seurausta hyperandrogeeni-sesta stimulaatiosta, jonka aiheuttajana on testosteronin tai samankaltaisten androgeenisten hormonien liiallinen kasautuminen aineen-vaihduntasysteemiin. Aikaisemmat yritykset saada ke m ©terapeuttinen aine vastustamaan ei-toivottuja hyperandrogeenisuuden seuraus-ilmiöitä johtivat useiden steroidaalisten antiandrogeenien löytymiseen, joilla itsellään on ei-toivottuja hormonaalisia vaikutuksia.

2 67389

Estrogeeneilla, esimerkiksi, ei ole ainoastaan androgeenien vaikutusta vastustava vaikutus, vaan niillä on myös naismaisuutta lisäävä vaikutus. On kehitetty myös ei-steroidaalisia antiandrosgeeneja, esimerkkinä 4'-nitro-3'-trifluorimetyyli-isobutyylianilidi. Katso Neri ym., Endo., Voi. 91, no. 2 (1972). Näillä tuotteilla, vaikka niiltä puuttuvatkin hormonaaliset vaikutukset, on kuitenkin perifeerinen vaikutus, joka kilpailee luonnossa esiintyvien androgeenien kanssa reseptori-kohdista, ja sen vuoksi niillä on taipumus muuttaa miespuolinen isäntä tai naispuolinen isännän miespuolinen sikiö naismaiseksi.

Hiljattain alan asiantuntijain tietoon on tullut, että pääasiallisena andrgoneenisen aktiivisuuden välittäjänä eräissä kohde-elimissä on 5 οώ-dihydrotestosteroni, ja että sitä muodostuu paikallisesti kohde-elimessä testosteroni-5 06-reduktaasin vaikutuksesta. Sen vuoksi on oletettu ja esitetty, että testosteroni-5 <X-reduktaa-sin inhibiittorit ehkäisevät tai vähentävät hyperandrogeenisen stimuloinnin oireita. Nayfeh ym., Steroids, 14, 269 (1969), osoittivat in vitro, että metyyli-4-androsten-3-oni-17 y<?-karboksylaatti oli testosteroni-5ού-reduktaasi-inhibiittori. Sitten Voigt ja Hsia, Endocrinology, 92, 1216 (1973), CA-patenttijulkaisu 970 692, esittivät, että edellä mainittu esteri ja vastaava happo, 4-androsten- 3-oni-17ö-karboksyylihappo ovat molemmat aktiivisia testosteroni-5 r^C-reduktaasin inhibiittoreita in vitro. He osoittivat lisäksi, että testosteronin tai 5o0-dihydrotestosteronin paikallinen käyttö aiheutti naarashamsterin kuve-elinten suurenemisen ja muuttumisen androgeenista johtuen talimaiseksi. Kuitenkin käyttämällä samanaikaisesti 4-androsten-3-oni-17/3 -karboksyylihappoa tai sen metyy-liesteriä testosteronin aiheuttama reaktio estyi, mutta 5 <?6-di-hydrotestosteronin aiheuttama reaktio ei estynyt. Näiden tulosten tulkittiin osoittavan, että yhdisteet olivat antiandrogeenisia johtuen niiden kyvystä ehkäistä testosteroni-5<s6-reduktaasia.

Keksinnön mukaisesti valmistetut uudet yhdisteet ehkäisevät spesifisesti testosteroni-5Λ-reduktaasia ja ovat siten tehokkaita antiandrogeeneja.

Aikaisemmin ei ole ollut tunnettua, että 4-atsa-17-substi-tuoitu-5o6-androstan-3-oneja käytetään hyperandrogeenisten tilojen hoitamiseen, vaikkakin BE-patenttijulkaisussa 775 919 on kuvattu 67389 sellainen yhdiste, ja useita muita yhdisteitä, joissa on lisäksi yksi- tai useampia karbonitriili-substituentteja, ja joiden ilmoitetaan olevan katatoksisia aineita ja käyttökelpoisia hoidettaessa mm. eturauhasen liikakasvua.

Tunnetaan monia 4-atsa-steroidi-yhdisteitä. Katso esimerkiksi US-patenttijulkaisuja 2 227 876; 3 239 417; 3 264 301; ja 3 285 918; FR-patenttijulkaisua 1 465 544; Doorenbos ja Solomons, J. Pharm. Sei. 62, 4, sivut 638-640 (1973) ja Doorenbos ja Brown, J. Pharm. Sei., 60, 6, sivut 1234-1235 (1971). Kuitenkaan mitkään näistä tunnetuista yhdisteistä eivät viittaa tämän keksinnön 4-at-sa-yhdisteisiin tai niiden käyttöön hyperandrogeenisten tilojen hoitamiseen.

Keksinnön kohteena on menetelmä terapeuttisesti käyttökelpoisen 4-atsa-17-substituoitu-5-androstan-3-onijohdannaisten valmistamiseksi , jonka kaava on

-rtS

frr

R

jossa A on -CH2~CH2- tai -CH=CH-, R on vety, metyyli tai etyyli, R' on vety tai metyyli, R" on vety tai β -metyyli, Z on (1) okso, (2) vety ja hydroksi, (3) vety ja (Y)nQt jossa n on 0 tai 1, Y on alempi alkyleeni, ja Q on -CON(alempi—alkyyli)2, -CONH(alempi-alkyyli), -COOH tai vastaava suola tai esteri, -OH, -NH2, -N(alempi-alkyyli) 2· ~NH(alempi-alkyyli), <4> l (5) vety ja syaani, ja sen farmaseuttisesti hyväksyttävien suolojen valmistamiseksi.

4 67389

Ellei muuta mainita, sekä oC :11a että β :llä takoitetaan eri substituenttien stereo-konfiguraatioita.

Tyypillisiä tämän keksinnön mukaisilla menetelmillä valmistettuja yhdisteitä ovat seuraavat: 17 fi -N,N-dietyylikarbamoyyli-4-metyyli-4-atsa-5‘*: -androstan-3-oni 17 fb -N ,N-dietyylikarbamoyyli-4-atsa-5 -androstan-3-oni 17 fi> -N,N-dietyylikarbamoyyli-4-amino-4-atsa-5 <^-androstan-3-oni Π -asetoksi-4-atsa-5 ^-androstan-S-oni 4-atsa-20-spiroks-5 c^-an-3-oni 4-metyyli-4-atsa-5o<- -20-spiroksan-3-oni 17/^ -N-etyylikarbamoyyli-4-metyyli-4-atsa-5o£ -androst-3-oni 4-etyyli-4-atsa-5^ -20-spiroksan-3-oni 17/& -karbometoksi^-metyyli^-atsa-S** -androstan-3-oni.

Keksinnön mukaiselle menetelmälle on tunnusomaista, että (a) yhdiste, jonka kaava on crr o R" jossa A, R', R" ja Z merkitsevät samaa kuin edellä, (1) hapetaan vastaavaksi 5-okso-3,5-seko-androstaani-3-karboksyylihappo-yhdisteeksi, (2) vaiheen (1) tuotetta käsitellään kaavan RNi^ mukaisella amiinilla, jolloin saadaan vastaava 4-atsa-5-androstan-3-oni-yh-diste, jonka 4-asemassa on substituentti R, ja (3) vaiheen (2) tuote hydrataan katalyyttisesti kaavan I mukaiseksi yhdisteeksi, tai (b) sellaisen kaavan I mukaisen yhdisteen valmistamiseksi, jossa A on -CH=CH-, (1) edellä saatua 1,2-tyydyttynyttä yhdistettä käsitellään litium-di-isopropyyliamidilla vastaavaksi enolaatiksi, (2) enolaatti saatetaan reagoimaan difenyylidisulfidin kanssa sa, jolloin saadaan vastaava fenyylitio-yhdiste, 67389 (3) vaiheen (2) tuote hapetetaan vastaavaksi sulfoksidi-yhdisteeksi, ja (4) vaiheen (3) sulfoksidi-yhdistettä kuumennetaan, jolloin saadaan haluttu kaavan I mukainen yhdiste, jossa A on -CH=CH-, ja haluttaessa saatu kaavan I mukainen yhdiste muutetaan farmaseuttisesti hyväksyttäväksi suolaksi.

Edellä mainitut kohdan fe) reaktiot on esitetty yksityiskohtaisesti esimerkeissä 1-8, ja kaavamaisesti seuraavassa diagrammissa: ^ V R" (II) ( 10,82 t111’

V

z z

pi Λτΐ . R' I I

jJij—I ^ —

cr « \ E I

R H R ovi (VI)

Kohdan (b) tyyppinen menetelmä on kuvattu esimerkissä 14.

Edulliseen menetelmään, jolla valmistetaan erityisen edullista 17/3 -N,N-di-etyylikarbamoyyli-4-metyyli-4-atsa-5 i>6-androstan- 3-onia, sisältyvät seuraavat vaiheet: (a) pregnenolonia (VIII), joka on kaupallinen tuote, käsitellään King*in haloformi-reaktion mukaisesti jodin ja pyridiinin seoksella, jolloin muodostuu pregnelono-nin pyridiniumjodidi-johdannaista (IX); (b) pyridiniumjodidi-johdannainen (IX) metanolysoidaan 17-karboksi-androstenolin metyyli-esteriksi (X) natriurametylastilla ja metanolilla, esterimuodon ollessa suositeltava suoritettaessa seuraavaksi Oppenauer-reaktio; (c) 17-karboksi-adrostenolin metyyliesteriä (X) käsitellään alu- 6 67389 miniumsopropoksidilla ja sykloheksanonilla sopivassa liuottimessa kuten tolueenissa, jolloin saadaan metyyli-4-androsten-3-oni-17-karboksylaattia (XI); (d) näin muodostettu metyyli-4-androsten- 3-oni-17-karboksylaatti (XI) hydrolysoidaan 17-hapoksi (XII) hap-pamissa olosuhteissa metanoli-vesiseoksessa (4:1); (e) 17-happoa (XII) käsitellään sitten oksalyylikloridi-pyridiini-kompleksilla (suhde noin 1:1) tolueenissa tai muussa sopivassa liuottimessa, esim. ksyleenissä, jolloin muodostuu 17-happokloridia (XIII); (f) 17-happokloridia (XIII) käsitellään sitten in situ dietyyli-amiini-ylimäärän kanssa, jolloin muodostuu 17/3 -N,N-dietyylikarba-moyyli-4-androsten-3-onia (XIV); (g) näin muodostettu 4-androsten- 3- oni (XIV) hapetaaan natriumperjodaatilla ja kaliumpermanganaatilla käyttäen liuotinsysteeminä tert.butanoli-vesi-seosta, vastaavaksi 5-okso-3-,5-seko-androstaani-3-karboksyylihapoksi (XV); (h) seko-androstaanikarboksyylihappo (XV) muutetaan sitten vastaavaksi 4-atsa-yhdisteeksi (XIV) käsittelemällä sitä metyyliamiinil-la etyleeniglykolissa noin tunnin ajan, jona aikana reaktioseok-sen lämpötila kohotetaan välille 140-180°C, jossa se pidetään 0,5-5 minuutin ajan; (i) saatu 17/3 -n,N-dietyylikarbamoyyli-4-raetyyli- 4- atsa-5-androsten-3-oni (XVI) hydrataan sitten vedyllä lämpötilan ollessa huoneen lämpötilan ja 60°C:n välillä tai tätä korkeampi, käyttämällä katalyyttinä platinaoksidia, jolloin muodostuu 17/*- N ,N-dietyylikarbamoyyli-4-metyyli-4-atsa-5i<S -androstan-3-oni (XVII) -lopputuotetta, joka eristetään ja puhdistetaan.

Edellä esitettyjä reaktioita on selostettu yksityiskohtaisesti esimerkissä 13, ja ne on esitetty kaavamaisesti seuraavassa kaaviossa:

CH2 - \_J IU

CO 00 I --->> l JL J OLCJNa pyridilia^ ^ "> (VIII) iIX) 67389 7 _ COOCH, COOCH. 1 3 rrS Π-\ l ^ NaOH/H ® £) .o o ch3oh/h2o^ (X> (XI) COOH C0C1 tolueeni (i^V^ (XII) fXIII) CONEt, ?°NEt2 1 2 i^n^v^iL, 0/yV^ v ΛΑχ1 KMn0< 1 mv) (XV) 8 67389 CON Et 2 I CONEt2

JyO XT

°ΐ> (XVI) (XVII) Tämän keksinnön kaavan I mukaisia uusia yhdisteitä voidaan valmistaa myös menetelmällä, jonka viimeisessä vaiheessa A-renkaan typpiatomi substituoidaan metyyliryhmällä, johon menetelmään sisältyvät vaiheet (1), jossa 5-okso-3,5-seko-androstaani-3-karboksyyli-happo-yhdistettä käsitellään ammoniakilla, jolloin muodostuu vastaavaa 4-atsa-5-androsten-3-oni-yhdistettä; (2) vaiheen (1) tuote hydrataan vedyllä katalyyttisissä olosuhteissa, jolloin muodostuu 4-atsa-5'x:-androstan~3-oni-yhdistettä; ja (3) vaiheen (2) tuotetta käsitellään metylointiaineella, esim. natriumhydridillä ja metyyli-jodidilla, jolloin muodostuu 4-metyyli-4-atsa-5-androstan-3-oni-lopputuotetta.

Edellä esitetty menetelmä soveltuu lT/'-NfN-dietyylikarba-moyyli-4-metyyli-4-atsa-5 <*i-androstan-3-onin, tämän keksinnön erityisen edullisen yhdisteen valmistamiseen, jonka lähtöaineena on 17 6 -N,N-dietyy1ikarbamoyy1i-5-okso-3,5-seko-androstaani-3-karb-oksyylihappo.

Edellä olevia reaktioita on selostettu yksityiskohtaisemmin esimerkissä 10, ja ne on esitetty kaavamaisesti seuraavassa kaaviossa: 9 67389

. pÄ r-A

J J A ^ R' Γ ] --A -.. N"3 ·, I ] j VPt ...

Ο υ R” 0 XN - \ „ OH ‘ (XVIII) (XIX) z z Λ R· f R· ] 1 v T , r s-^v O' R” ^ I Ö R”

H H CHR

(XX) (XXI)

Kaavan I mukaisia yhdisteitä voidaan valmistaa myös menetelmällä, jonka viimeisenä vaiheena on renkaan sulkeminen, jolloin muodostuu typpipitoinen A-rengas, johon menetelmään sisältyvät vaiheet: (1) 5-okso-3,5-seko-androstaani-3-karboksyylihappo-yhdis-tettä käsitellään metyyliamiinilla, jolloin muodostuu vastaava 5-metyyliamiini-3,5-seko-androstaani-3-karboksyylihappo-yhdiste; (2) vaiheen (1) tuote pelkistetään katalyyttisesti, jolloin muodostuu vastaava 5-vety-yhdiste; ja (3) vaiheen (2) tuotetta kuumennetaan renkaan sulkemiseksi, jolloin saadaan 4-metyyli-4-atsa-5A-androstan-3-oni lopputuote.

Edellä esitetty menetelmä soveltuu 17/^-N,N-dietyylikarba-moyyli-4-metyyli-4-atsa-5 X-androstan-3-onin, tämän keksinnön erityisen edullisen yhdisteen valmistamiseen, jonka lähtöaineena on 17 -N,N-dietyylikarbamoyyli-5-okso-3,5-seko-androstaani-3-karb-oksyylihappo.

Edellä olevia reaktioita on selostettu yksityiskohtaisemmin esimerkissä 11, ja ne on esitetty kaavamaisesti seuraavassa kaaviossa: 67389 10 z r^lA Γ i A R' I I f λ|Λ

pi ] ch3mh2 , A| A /........I

<f O^' N . H /Pt Jh j J

R 2 o !n^/\

0H OH^ H R

(XXII) 3 (XXIII) z

Kuumennus ^ A^R'!

Ca o A ; R"

CHjH

(XXIV) 17 -N,N-dietyylikarbamoyyli-4-metyyli-4-atsa-5 oC-androstan- 3- onia, voidaan valmistaa menetelmällä, jonka viimeisenä vaiheena on 17/*-aseman dietyyliamidi-sivuketjun liittäminen, johon menetelmään sisältyvät vaiheet: (1) 17/^ -karboksi-4-androsten-3-onin käsittely hapettavalla aineella, esim. natriummetaperjodaatilla, jolloin muodostuu 5-okso-3,5-seko-androstaani-3,17-karboksyylihap-poa; (2) vaiheen (1) tuotteen käsittely metyyliamiinilla, jolloin muodostuu 17β -karboksi-4-metyyli-4-atsa-5-androsten-3-onia; (3) vaiheen (2) tuotteen hydraus katalyyttisesti, jolloin muodostuu 17/5-karboksi-4-metyyli-4-atsa-5:>c -androsten-3-onia; (4) vaiheen (3) tuotteen natriumsuolan muodostaminen ja sen käsittely oksal-yylikloridilla, jolloin muodostuu 17/^ -karbonyyli-kloori-4-metyyli- 4- atsa-5 ^-androstan-3-onia; ja (5) vaiheen (4) tuotteen käsittely dietyyliamiinilla, jolloin muodostuu 17/*-N,Ν-dietyylikarbamo-yyli - 4-metyyli-4-atsa-5 -androstan-3-onia.

li 67389

Edellä olevia reaktioita on selostettu yksityiskohtaisemmin esimerkissä 12, ja ne on esitetty kaavamaisesti seuraavassa kaaviossa:

?'0H (H-OH

^ T CH^KH0 o? ‘ ^

ÖH

OCXV) (XXVI)

S

C-OH C-°H

/s. L/\ /—--H^/Pt fjj ~-> f T J LCOCI); ^ 0h3 ch3 (XXVII) (XXVIII) f s C-Cl i-N'C2H5»2 ί^Υγ N(C H ) - HP —“iiu

CH3H

(XXXIX) (XXX) 12 6 7 3 8 9 17 /3 -N,N-dietyylikarbamoyyli-4-metyyli~4-atsa-5 x-androstan- 3-onia, voidaan valmistaa myös menetelmällä, jonka viimeisenä vaiheena on vastaavan 17/3-Karbamoyyli-yhdisteen dietylointi, tai menetelmällä, jonka viimeisenä vaiheena on vastaavan 17 /’-etyylikarba-moyyli-yhdisteen monoetylointi. Näihin kahteen menetelmään sisältyvät seuraavat vaiheet: (1) 17 f1 -karboksi-4-metyyli-4-atsa-5 x-androstan-3-onia käsitellään oksalyylikloridilla, jolloin muodostuu 17/-'-karbonyyli-kloori-4-metyyli-4-atsa-5,i androstan-3-onia; (2) vaiheen (1) tuotetta käsitellään ammoniakilla, jolloin muodostuu 17/3 -karbamoyyli-4-metyyli-4-atsa-5 x-androstan-3-onia;ja (3) vaiheen (2) tuotetta käsitellään etylointiaineella kuten etyylibromidilla tai dietyylisulfaatilla ekvimolaarisen natrium-hydridi- tai vastaavasti natriummetylaatti-määrän läsnäollessa, jolloin muodostuu haluttua lopputuotetta; vaihtoehtoisesti (2a) vaiheen (1) tuotetta käsitellään monoetyyliamiinilla, jolloin muodostuu vastaavaa 17 3-N-et.yylikarbamoyyli-yhdistettä; ja (3a) vaiheen (2a) tuotetta käsitellään monoetylointiaineel-la kuten etyylibromidilla ja natriumhydridillä, jolloin muodostuu haluttua lopputuotetta.

Edellä esitettyjä reaktioita on selostettu yksityiskohtaisemmin seuraavissa esimerkeissä 14 ja 15, ja ne on esitetty kaavamaisesti seuraavassa kaaviossa: 13 67389 ?-0H ( 9 I e-ci

^VT/L J (cocd7. i 1 J

O f ,v^---_2V cr

I H I H

CH3 CH3 9 L_ ^ nh2

NH J

EtNH φ \ ^ \l ^'V!>2

L- . H ! H

I / CH3 ^ EtBr / 0 / O^Av/ ^ NaH C-N(C H ) /EtBr

j H I H / NaH

CH3 \ EtBr AlA’ /

VaH 1/ ^ jXt

O N 1 CH3H

14 67389

Keksinnön mukaisia yhdisteitä, jota ovat Z\ 1-yhdisteitä, so. yhdisteitä, joissa A on -CH=CH, ja joiden 4-typessä on muu substituentti kuin vety, voidaan valmistaa menetelmällä, joka on kuvattu esimerkissä 9.

Keksinnön mukaisesti valmistettujen 4-atsa-17-substituoitu-5 oi-androstan-3-onien 5 ού-reduktaasi-inhibiitio-aktiivisuus määritettiin inkuboimalla yhdessä erilaisia määriä koeyhdistettä (määrä ng:oina) ja entsyymiseosta (0,21 ml) käyttäen sisäisenä standardina progesteronia (taulukko I) ja keksinnön mukaista edullisinta yhdistettä 17/*-N,N-dietyylikarbamoyyli-4-metyyli-4-atsa-5'5C-androstan-3-onia (taulukko II). Inhibitio-% ilmoittaa estymisen radioaktiivisen testosteronin muuttumisessa dihydrotestoste-roniksi.

67389 15

Taulukko I

Kaavan I mukaisten yhdisteiden 5'X-reduktaasi-inhibitio-% kokeissa, joissa sisäisenä standardina oli progesteroni.

Z

R' f n . Nm ··' ' o y ^ R"

R H

- | f R R R" Z 5 -x-reduktaasi-inhibitio,% _______150 ng 50 ng__25 ng j

H CH3 H C0N(Et)2 95,95 | 81 I

CH3 CH3 H CON(Et)2 99,4 ,87,100 j 75 j H CH3 H COJte 95 i 98,72,5 54 |

^ ! I

CH3 CH3 h (£ ) 81,84 | 73 63 I

I I

/—\ ! s H CH-. H n 68 ! 62 48 ! , v" j j h ; ch3 | h co^ - - 58 : CH3 ! CH3 j H COMe 100 85 - j ! H i CH, H OCMe 100 i 92 - i ! 1 J ( ! j CH3 j ai3 H GONHEt 83 j j CH-, i H H OH 81 ) i 3 i i ! ί ΛΛ 1 | CH3 j CH3 j CH3 (^ > j 95,100,91 ! J-1-:-1-1-1---

Sisäisenä standardina käytetyllä progesteronilla vastaavat arvot (%) olivat: 150 ng/putki: 70, 90, 87, 100, 97, 76, 54, 63, 68,6, 68,5, 59, 64, 69, 78, 74 50 ng/putki: 39, 57, 38 16 67389

Taulukko II

Kaavan II mukaisten yhdisteiden 5 "ic—reduktaasi-inhibitio—% kokeissa, joissa sisäisenä standardina oli esimerkin 1 yhdiste.

Z

... P:ö r v j 11 0 -N H^' CH3 ~ " j ----.,. .......... ' | ____150 ng j 50 no1 25 ng 16 2/3n3 5 ng I 1 ng_0,2 na

I i I

CH(CHL)CCLMe i 86,75 61 i 45 34 4 i | 3 2 | i O 60,67 42 25 - CN 68 56 - 31 CH2C02Na 97 - 56,94 - 46,87 CH2C02Et 88 - | 77 52 - CH2C0N(Et)2 97 - 92,98,87 ! - 70,78,69 47,26 3 CH(CH3)CH2OH 100 - 84,84,79 - 46,46 13 CH(CH3)CCJN(Et)2 83 83 49 14 CH(CH3)C02Na 96 - 92,90 - 84,73,69 42,36 16,18 CH(CH3) (CH^CO^ 84 - 51,50 ! - 13,25 CH(CH3)(CH2)2C02Na 88 - 77,85 j - 57,72 jCO^ 95,2 - 61,59 j - 27,191-

iCH(CH^) (CHj-C0N(Et)o 100 - | 43,73 ' - ! 14,31 I

J £ £ έ I , i l | CCXjNa 91 j - I 63,64 1 - j 28,18 CON(Et)2(A=-CH2=CH2-) 66,63 j - j 22(30 ng) j - j 5 (6 ng) |CCMH(CH2)7Me 99 j - | 91 - ; 76,75 I 27 C0N(iPr)_ 100 i - ; 74 i - 51 ! - 2 ! i 'il CCN(Me2) 100 j - j 83,78 — i 35 j - ! C0NH2 j 91 | - ; 47 - 21 ! - jca^ 90 ; - i - : - - ! - ! - i —--i-L____;_!___

Sisäisenä standardina näytetyllä 17 β -N ,N-dietyylikarbamoyyli-4-metyyli-4-atsa-5 x—androstan—3-onilla (esimerkin 1 yhdiste) vastaavat arvot (%) olivat: 50 ng/putki: 88, 87, 89, 89, 88 25 ng/putki: 80, 77, 78, 83, 85, 77, 81, 74, 86, 58, 74, 91, 84 16 3/4 ng/putki: 66, 64 5,5 ng/putki: 53, 34, 63, 60, 54, 47, 39, 50, 40, 49, 36, 45 1,9 ng/putki: 23 17 67389

Keksinnön mukaisten yhdisteiden valmistusmenetelmiä kuvataan seuraavissa esimerkeissä.

Esimerkki 1 17,/3-N ,N-dietyylikarbamoyyli-4-metyyli-4-atsa-5X,-androstan- 3-oni A. 3-okso-N,N-dietyyli-4-eteeniamidi

Kaksikymmentä grammaa natrium-3-okso~4-etenaattia suspen-doitiin 360 ml:aan kuivaa bentseeniä ja 0,13 ml:aan pyridiiniä ja jäähdytettiin 14°C:seen. Suspensioon lisättiin 20 ml oksalyyliklo-ridia ja sekoitettiin 15°C:ssa 15-20 minuuttia. Suspensio haihdutettiin kuiviin ja lietettiin sitten, suspensiona, 125 ml:aan kuivaa tetrahydrofuraania. Tämä suspensio lisättiin sitten liuokseen, jossa oli 25 ml dietyyliamiinia 125 mlrssa tetrahydrofuraania ja sekoitettiin huoneen lämpötilassa tunnin ajan, minkä jälkeen seos kaadettiin 4 litraan jäävettä. Muodostui puolikiteinen sakka, joka uutettiin etyyliasetaatilla, pestiin vedellä ja sitten kyllästetyllä suolaliuoksella, ja kuivattiin ja haihdutettiin 25,7 grammaksi tuotetta. Tuote kiteytettiin uudelleen etyylieetteristä; ensimmäisen 10,0 gramman erän sp. oli 127-129°C ja toisen 3,1 gramman erän sp. oli 114-119°C.

B. 17 -N,N-dietyylikarbainoyyli-5-okso-3,5-seko-androstaani- 3-karboksyylihappo

Viisitoista grammaan vaiheen A tuotetta liuotettiin 150 ml:aan dikloorimetaania ja 75 ml:aan metanolia ja jäähdytettiin -78°C:seen, minkä jälkeen liuoksen läpi johdettiin otsonia kunnes liuos pysyi sinisenä. Reaktioliuos lämmitettiin sitten huoneen lämpötilaan ja huuhdeltiin typellä, minkä jälkeen se haihdutettiin kuiviin 35°C:ssa. Jäännös liuotettiin bentseeniin ja uutettiin kolme kertaa 2,5-norm. NaOH:lla. Emäksiset pesunesteet yhdistettiin ja tehtiin happameksi väkevällä HCl:llä, uutettiin bentseenillä, pestiin, kuivattiin ja haihdutettiin 11,5 grammaksi valkeata, kiteistä, kiinteätä ainetta. Tuote kiteytettiin uudelleen etyyliasetaatista ja sen sulamispisteeksi todettiin 205-208°C.

C. 17/fl -N,N-dietyylikarbamoyyli-4 -atsa^- 4-metyyli-5-andros-ten-3-oni 190 ml:aan etanolia lisättiin 26,3 g vaiheen B tuotetta, jolloin muodostui liuos. Liuos jäähdytettiin jäähauteessa ja kyl- 18 67389 lästettiin metyyliamiinilla, ja sen jälkeen lämmitettiin 180°C:ssa 8 tuntia. Reaktioseos jäähdytettiin sitten huoneen lämpötilaan ja haihdutettiin kuiviin, jolloin saatiin 22,3 g kellertävää kiinteätä ainetta. Kromatografoinnin ja etyylieetteristä suoritetun uusin-takiteytyksen jälkeen lopullisen tuotteen sulamispisteeksi todettiin 120-122°C.

D. 17/3 -N,N-dietyylikarbamoyyll-4-metyyli-4-atsa-5 X-androstan-3-oni

Litraan jääetikkahappoa lisättiin 36,5 g vaiheen C tuotetta, jolloin syntyi liuos. Liuosta käsiteltiin sitten 3,5 gramman kanssa platinaoksidi-katalyyttiä ja hydrattiin 276 kPa:n paineessa huoneen lämpötilassa 8 tuntia. Sitten reaktioseos suodatettiin ja haihdutettiin kuiviin. Jäännös liuotettiin kloroformiin ja pestiin nat-riumvetykarbonaattiliuoksella, suolaliuoksella, ja sen jälkeen kuivattiin ja haihdutettiin kuiviin. Tuote kiteytettiin uudelleen etyylieetteristä, jolloin saatiin 30,65 g valkeata, kiinteätä lopputuotetta, jonka sulamispiste oli 168-170°C.

Esimerkit 2-8

Noudattamalla edellä esimerkissä 1 selostettuja menetelmiä, mutta korvaamalla vaiheen A 3-okso-4-etenaatti ekvimoolimäärällä muita saatavissa olevia tai helposti valmistettavia olevia 3-okso-Δ* -yhdisteitä, tai korvaamalla dietyyliamiini ekvimoolimäärällä muuta sopivaa amiinia valmistettiin seuraavassa taulukossa luetellut kaavan I mukaiset yhdisteet.

67389 19

Taulukko R3

il H

Esim.____Sp. (°C)_ 2 H CON(CH2CH3)2 263-265 3 H £ | 283-285 4 CH3 I-----1 138-140

O

5 H C0CH3 272-275 6 CH3 C0CH3 218-220 7 CH3 CONHCH2CH3 249-251 8 H C00CH3 300-302 20 67389

Esimerkki 9 17 Λ -N ,N-dietyylikarbamoyyli-4-metyyli-4-atsa-5LX/ -androst- l-en-3-oni

Liuosta, jossa on 0,20 g kuivaa di-isopropyyliamiinia 5,0 ml:ssa kuivaa tetrahydrofuraania käsitellään -78°C:ssa typen suojaamana 0,9 ml:n kanssa 2,2-mol. butyylilltiumia. 20 minuutin kuluttua reaktioseokseen lisätään -78°C:ssa tiputtamalla liuos, jossa on 388 mg 17^ -N,N-dietyylikarbamoyyli-4-atsa-5 ^-androstan-3-onia 3 ml:ssa tetrahydrofuraania.

Kun seosta on sekoitettu -78°C:ssa 30 minuuttia, reaktio-seokseen lisätään hitaasti liuos, jossa on 440 mg fenyylidisulfi-dia 1 ml:ssa tetrahydrofuraania. Kun reaktioseosta on sekoitettu 10 minuuttia -78°c:ssa, sen annetaan lämmetä huoneen lämpötilaan. Sitten seos lisätään veteen, ja tuote uutetaan etyyliasetaattiin. Orgaaninen kerros pestään laimealla natriumhydroksidiliuoksella, sitten vedellä, sitten laimealla suolahapolla, ja lopuksi kyllästetyllä natriumkloridiliuoksella. Liuos kuivataan kalsiumsulfaatin päällä ja konsentroidaan sitten kiinteäksi raakatuotteeksi. Elu-oitaessa 30 g:n silikageeli-erän läpi käyttämällä lisääntyvin määrin etyyliasetaattia heksaanissa saadaan 2-fenyylitiöjohdannaista ilmeisesti kahden isomeerin seoksena. Tätä ainetta, suspendoituna 5 ml:aan 20-prosenttista metanolin vesiliuosta käsitellään liuoksen kanssa, jossa on 225 mg natriumraetaperjodaattia 2 ml:ssa vettä. Kun reaktioseosta on sekoitettu 16 tuntia, se laimennetaan vedellä ja uutetaan raetyleenikloridilla. Orgaaninen kerros pestään vedellä, kuivataan ja konsentroidaan, jolloin jäljelle jää raakaa sulfoksidia. Liuosta, jossa tämä aine on 5 ml:ssa tolueenia, kiehutetaan 30 minuuttia. Liuotin poistetaan ja jäännös kromatografoidaan 20 grammalla piigeeliä eluoimalla etyyliasetaatin ja eetterin seoksella, jonka etyyliasetaattiosuus jatkuvasti lisääntyy. Lopullinen tuote kiteytyy trituroitaessa eetterin kanssa.

Esimerkki 10 17 fr-N,N-dietyylikarbamoyyli-4-metyyli-4-atsa-5aC -androstan- 3-oni A. 17-N,N-dietyylikarbamoyyli-4-atsa-5-androsten-3-oni

Liuosta, jossa on 90 g 17/^-N,N-dietyylikarbamoyyli-5-okso- 3,5-seko-androstaani-3-karboksyylihappoa 600 ml:ssa kuivaa etanolia 21 67389 kyllästettynä ammoniakilla 0°C:ssa, lämmitetään pommiputkessa 180°C:ssa 8 tuntia. Jäähdyttämisen jälkeen hiukan ruskehtavan liuoksen annetaan haihtua ja väkevöivään kuiviin, jolloin saadaan kellertävää vaahtoa, josta trituroimalia sykloheksaanin kanssa saadaan 17 3 -N ,N-dietyylikarbamoyvli-4-atsa-5-androsten-3-onia.

B. 17 Λ -N ,N-dietyylikarbamoyyli-4-atsa-5 ;>ί'-androstan-3-oni

Liuosta, jossa on 25 g edellä vaiheessa A valmistettua yhdistettä 140 ml:ssa jääetikkahappoa, hydrataan 276 kPatn paineessa huoneen lämpötilassa, jolloin läsnä on 2,5 g platinaoksidia ja 0,1 ml perkloorihappoa. Kun teoreettisesti tarvittava vetymäärä on adsorboitunut, noin 6 tunnin kuluttua, jäännös suodatetaan erilleen ja suodos haihdutetaan kuiviin. Jäännös liuotetaan 100 ml:aan metyleenikloridia, pestään kahdesti 50 ml:11a kyllästettyä natriumkloridiliuosta ja sitten 50 ml:11a 5-prosenttista natriura-vetykarbonaattiliuosta. Magnesiumsulfaatilla kuivaamisen jälkeen liuos haihdutetaan kuiviin ja jäljelle jäänyt öljy liuotetaan etanoliin, suodatetaan aktiivipuuhiilen kera, ja liuokseen lisätään hitaasti vettä kunnes kiteytyminen alkaa. 5°C:een jäähdyttämisen jälkeen kiteinen tuote suodatetaan erilleen, pestään vedellä ja kuivataan.

C. 17 <4 -N,N-dietyylikarbamoyyli-4-metyyli-4-atsa-5oc - androstan-3-oni

Liuosta, jossa on 36 g edellä olevan vaiheen B tuotetta 700 ml:ssa tolueenia, käsitellään lietteen kanssa, jossa on 5,4 g 50-prosehttista natriumhydridiemulsiota 20 ml:ssa tolueenia, minkä jälkeen lisätään hitaasti 16 g metyylijodidia. Kun seosta on sekoitettu 3 tuntia huoneen lämpötilassa, reagoimaton natriumhydridi hajotetaan 5 ml:11a etanolia 25 ml:11a tolueenia, ja sen jälkeen litralla vettä. Tuote uutetaan kolme kertaa 500 ml:n tolueeni-erillä ja yhdistetyt uutteet pestään sitten kolme kertaa vedellä, kuivataan magnesiumsulfaatilla, ja suodos haihdutetaan kuiviin. Puhdasta 17 /’ -N ,N-dietyylikarbamoyyli-4-metyyli-4-atsa-5 jC~ androstan-3-onia saadaan kiteyttämällä etanolista ja vedestä.

Esimerkki 11 17/3 -N,N-dietyylikarbamoyyli-4-metyyli-4-atsa-5 06-androstan- 3-oni

Liete, jossa on 20 g 17/^-N,N-dietyylikarbamoyyli-5-okso- 22 6 7 3 8 9 3,5-seko-androstaani-3-karboksyylihappoa 120 mlrssa etanolia, kyllästetään metyyliamiini-kaasulla ja pannaan autoklaaviin, jossa on 2 g esipelkistettyä platinaoksidia 25 ml:ssa etanolia. Seosta pelkistetään sitten 6 tuntia 276 kPa:n paineessa 40°C:ssa. Sitten autoklaavin venttiili avataan, suljetaan uudelleen, ja yhdisteen renkaan sulkemiseksi lämmitetään 180°C:ssa 8 tuntia. Seos suodatetaan ja suodos haihdutetaan kuiviin vakuumissa. Jäännös kiteytetään eetteristä. Suodattamalla ja kuivaamalla saadaan olennaisesti puhdasta 17ib -N,N-dietyylikarbamoyyli-4-metyyli-5-atsa-5 ^-androstan- 3-onia.

Esimerkki 12 17 ^-N,N-dietyylikarbamoyyli-4-metyyli-4-atsa-5 ,^-androstan- 3-oni Ä. 5-okso-3,5-seko-androstaani-3,17-dikarboksyylihappo 31,6 g:aan (0,1 moolia) 17 karboksi-4-androstan-3-onia, joka on 1100 ml:ssa tert.-butanolia, lisätään liuos, jossa on 27,6 g kaliumkarbonaattia 150 mlrssa vettä. Valmistetaan liuos, jossa on 148 g natriummetaperjodaattia 925 mlrssa vettä ja yhtenä eränä lisätään 185 ml tätä liuosta, kun taas loput lisätään nopeudella 37 ml/minuutti. Osa 1,6-prosenttisesta kaliumpermanganaatin vesi-liuoksesta (18,5 ml) lisätään alkuperäisen perjodaattiliuoserän kanssa ja sitten sitä lisätään tarvittavin määrin reaktioseoksen pitämiseksi vaaleanpunaisena. Lisäyksen aikana lämpötila pidetään 35°C:ssa. Kun seosta on sekoitettu vielä 2 tuntia, se suodatetaan ja lisätään niin riittävästi natriumvetysulfiittia, että vaaleanpunainen väri katoaa. Sitten seos konsentroidaan puoleen tilavuudestaan, tehdään happameksi, ja uutetaan etyyliasetaattiin. Sitten liuos konsentroidaan, jolloin saadaan tuotetta, 5-okso-3,5-seko-androstaani-3,17/^-dikarboksyylihappoa riittävän puhtaana käytettäväksi seuraavassa vaiheessa.

B. 17-karboksi-4-metyyli-4-atsa-5-androsten-3-oni

Liete, jossa on 20 g edellä mainitun vaiheen A tuotetta 150 mlrssa etanolia, kyllästetään metyyliamiini-kaasulla ja seos siirretään autoklaaviin ja kuumennetaan 8 tuntia 180°C:ssa. Sitten seos jäähdytetään ja haihdutetaan kuiviin. Jäännös lietetään veteen, tehdään happameksi, ja suodatetaan, jolloin saadaan 17-karb-oksi-4-metyyli-4-atsa~5-androstan-3-onia.

67389 23 C. 17-karboksi-4-metyyll-4-atsa-5g</-androstan-3-oni Liuosta, jossa on 10,0 g edellä mainitun vaiheen B tuotetta 40 ml:ssa jääetikkahappoa ja 0,05 ml perkloorihappoa, hydrataan 276 kPa:n paineessa huoneen lämpötilassa käyttämällä katalyyttinä 1.0 platinaoksidia. Vedyn adsorboitumisen lakattua katalyytti suodatetaan pois ja suodos haihdutetaan lähes kuiviin. Jäännös liuotetaan laimeaan natriumvetykarbonaatin vesiliuokseen, lisätään 1.0 aktiivi-puuhiiltä, suodatetaan ja suodos tehdään happameksi. Tuote suodatetaan ja kuivataan.

D. 17 ^-N,N-dietyylikarbamoyyli-4-metyyli-4-atsa-5 -androstan-3-oni 5,0 grammma edellä mainittua vaiheen C tuotetta käsitellään ekvivalenttimäärän kanssa 1-norm. natriumhydroksidiliuosta. Seosta sekoitetaan yön ajan, minkä jälkeen se lyofilisoidaan ja kuivataan fosforipentoksidin päällä vakuumissa. Näin muodostunut 17-karboksi-yhdisteen natriumsuola suspendoida an 100 ml:aan kuivaa tolueenia. Liete jäähdytetään 15°C:seen ja tiputtamalla lisätään 15°C:ssa 3 ml oksalyylikloridia. Seosta sekoitetaan vielä kaksikymmentä minuuttia ja haihdutetaan sitten kuiviin. Sitten lisätään kolmekymmentä millilitraa tetrahydrofuraania ja tämä seos lisätään jäähdyttäen ja sekoittaen liuokseen, jossa on 6 ml dietyyliamiinia 30 mlsssa tetrahydrofuraania. Seosta sekoitetaan tunnin ajan ja kaadetaan litraan vettä. Tuote uutetaan kloroformiin, pestään peräkkäin laimealla natriumvetykarbonaattiliuoksella ja kyllästetyllä natriumkloridiliuoksella, ja sen jälkeen kuivataan magnesiumsulfaatilla. Kloroformiuute tislataan vakuumissa ja jäännös kiteytetään eetteristä, jolloin saadaan olennaisesti puhdasta 17y^ -N,N-dietyylikarbamoyyli-4-metyyli-4-atsa-5?C -androstan-3-onia. Esimerkki 13 17/l-N,N-dietyylikarbamoyyli-4-metyyli-4-atsa-5 Λ,-androstan- 3-oni A. (3/*1 -hydroksipregn-5-en-29-on-21-yyli) -pyridiniumjodidi 2 litraan pyridiiniä lisätään 1 kg (3,16 moolia) pregneno-lonia, ja seos lämmitetään kohtuullisesti sekoittaen 90-95°C:een, minkä jälkeen koko pregnenoloni-määrä liukeni. Seokseen lisättiin sitten varovaisesti kaikkiaan 866,1 g (3,41 moolia) jodia 15-20 minuutin aikana, ja reaktioseoksen lämpötilan todettiin kohoavan 24 67389 120°C:een. Seosta sekoitettiin tunnin ajan lämpötilan ollessa 100°C tai korkeampi, minkä jälkeen sen annettiin jäähtyä vähitellen tunnin kuluessa ja pantiin sitten jäähdytysvesihauteeseen huoneen lämpötilaan silikageelisuppiloon ja sen todettiin olevan kumimaista ja geelimäistä. Suodattumista avustettiin lisäämällä pyridiiniä, ja suodatettu tuote pestiin 6 kertaa 300 ml:11a pyridiiniä, ja sitten 6 kertaa 300 ml:11a eetteriä, minkä jälkeen ilmakuivattiin. Tuotetta, jonka sp. oli 228-230°C, saatiin 99 %:n saannoin (1635,8 g).

B. Metyyli-5-androsten-3/^ -oli-17/3 -karboksylaatti

Pulloon pantiin 2,7 kg (5,177 moolia) (3/3-hydroksipregn- 5-en-20-on-21-yyli)-pyridiniumjodidia, 13,5 1 etanolia ja 900 g natriummetylaattia. Seosta kiehutettiin tunnin ajan, minkä jälkeen sen annettiin jäähtyä noin 53°C:een, ja sitten jäähdytettiin lisäämällä 24 litraa jäitä ja 2 1 vettä siten, että reaktioseoksen lämpötilaksi saatiin 5°C. Sitten seos neutraloitiin lisäämällä 2100 ml seosta, jossa oli suhteessa 1:1 kloorivetyä ja vettä, jolloin pH saatiin välille 6-7. Seosta pidettiin paikoillaan 45 minuuttia ja pantiin sitten Lewis-suppiloon, minkä jälkeen sitä pestiin hyvin kylmällä vedellä kunnes suurin osa väristä oli huuhtoutunut pois. Tuote kuivattiin nopeasti suppilossa ja siirrettiin sitten kahdelle lasilevylle kuivumaan lämpökaappiin yön ajan 50°c:ssa. Tuotteen saanto oli 83,6 % (1440 g).

C. Metyyli-4-androsten-3-oni-17 -karboksylaatti f

Pulloon pantiin 160,0 g metyyli-5-androsten-3 -oli-17/* -karboksylaattia, 2,4 litraa suotimella kuivattua tolueenia, ja 680 ml sykloheksanonia. Seosta lämmitettiin kiehuttaen ja kaikki läsnäoleva vesi poistettiin atseotrooppisesti 15 minuutin kuluessa, so. kunnes tisle oli kirkasta. Sitten lisättiin lietteenä kerralla 88 g aluminiumisopropoksidia 320 ml:ssa kuivaa tolueenia. Reaktio-seosta kiehutettiin poistettaessa tunnin kuluessa noin 800 ml tolueenia. Sitten seos jäähdytettiin 25°C:een ja lisättiin 40 g piimaata, ja sen jälkeen 80 ml vettä. Seosta sekoitettiin 10 minuuttia ja suodatettiin piimään läpi, pestiin kolme kertaa 300 ml:lla tolueenia. Suodos konsentroitiin lähes kuiviin, minkä jälkeen jäähdytettiin jäähauteessa. Tuote kiteytyi erilleen, sitä pidettiin 0-5°C:ssa, se koottiin ja pestiin kylmällä heksaanilla, minkä jälkeen kuivattiin vakuumissa. Tuotteen saanto oli 83,6 % (133 g), sen sulamispiste oli 130-132°C.

6738 9 D. ^androsten-O-oni-lT/^-karboksyylihappo

Seokseen, jossa oli 2,462 g metyyli-4-androsten-3-oni- 17/k-karboksylaattia 24,6 litrassa metanolia lisättiin 1,23 g kali umhydrok s idia 4,9 litrassa vettä. Reaktioseosta kiehutettiin typen suojaamana 6 tuntia, ja sen annettiin sitten jäähtyä huoneen lämpötilaan yön aikana. Seos tehtiin happameksi 3200 ml:11a 6n suolahappoa. Suurin osa tuotteesta kiteytyi hienoina kiteinä.

Sitten lisättiin valuttamalla 14 litraa vettä 30 minuutin kuluessa, jolloin koko tuotemäärä saostui. Seosta pidettiin 4 tuntia sekoittaen 30°:ssa. Seos suodatettiin kannella varustetussa suppilossa ja pestiin vedellä kunnes pesuvesi osoittautui neutraaliksi. Tuotetta kuivattiin yön ajan uunissa 50°C:ssa. Tuotetta, jonka sp. oli 245-248°C, saatiin 98 %:n saannoin (2,313 g).

E. 17 fb -N,N-dietyylikarbamoyyli-4-androsten-3-oni

Pulloon pantiin 700 g 4-androsten-3-oni-17, ;^-karboksyyli- happoa ja 11,6 litraa tolueenia, joka oli kuivattu atseotrooppi-sesti. Seokseen lisättiin 226 ml seulalla kuivattua pyridiiniä, minkä jälkeen siihen lisättiin 20 minuutin kuluessa varovaisesti 250 ml oksalyylikloridia 250 ml:ssa kuivattua tolueenia. Reaktio-seoksen annettiin olla paikoillaan tunnin ajan huoneen lämpötilassa, minkä jälkeen jäähdytettiin 10°C:een. Sitten lisättiin seulalla kuivattua dietyyliamiinia samassa tilavuusmäärässä kuivaa tolueenia niin paljon, että pH pysyi alkalisella puolella. Liuosta tarvittiin 2,4 litraa. Reaktioseosta pidettiin 30 minuuttia paikoillaan ja se jäähdytettiin sitten lisäämällä 16 litraa jäävettä. Muodostuneet kerrokset erotettiin ja vesikerros uutettiin kolme kertaa 4 litralla etyyliasetaattia. Yhdistetyt orgaaniset kerrokset pestiin 8 litralla vettä ja suolahapolla siten, että erä tuli happameksi (pH 3), ja sitten pelkästään 8 litralla vettä, ja lopuksi 8 litralla kyllästettyä natriumkloridiliuosta. Erä kuivattiin natriumsulfaatilla ja konsentroitiin sitten pienitilavuiseksi, 3-4 litraksi, suuressa pyörivässä haihduttimessa. Sitten erään lisättiin 4 1 heksaania ja sitä jäähdytettiin 0-5°C:ssa tunnin ajan. Tuote koottiin talteen ja pestiin kolme kertaa pienillä, kylmillä heksaanierillä, minkä jälkeen kuivattiin yön ajan ilmauunissa 40-50°C:ssa. Tuotetta, jonka sp. oli 119-121°C, saatiin 75 %:n saannoin (616,5 g).

26 67389 F. lT/^-t^N-dletyylikarbamoyyli-S-okso-SrS-seko-androstan- 3-karboksyylihappo

Pulloon pantiin 600 g 17 ^-N,N-dietyylikarbamoyyli-4-andros-ten-3-onia ja 18 litraa tert.-butanolia, johon se liukeni- Sitten lisättiin liuos, jossa oli 258 g natriumkarbonaattia 1200 mlrssa vettä. Seuraavaksi lisättiin 1,5 tunnin kuluessa liuos, jossa oli 2,4 kg natriumperjodaattia 18 litrassa vettä, lisäämällä saman ajan kuluessa 1340 ml 2-prosenttista kaliumpermanganaattia reaktioseok-sen värin pysyttämiseksi vaaleanpunaisena. Lämpötila pidettiin li-syksen aikana välillä 25-40°C. Seosta pidettiin paikoillaan 2 tuntia, se suodatettiin, ja suodatinkakku pestiin vedellä. Tert.-butanolia haihdutettiin pois kunnes jäljellä oli ainoastaan vesiliuosta, ja tämä jäähdytettiin 10°C:een ja tehtiin happameksi 110 ml:11a 50-prosenttista rikkihappoa (pH 3). Vesiliuos uutettiin 3 kertaa 6 litralla etyyliasetaattia. Yhdistetyt etyyliasetaattiuutteet pestiin 4 litralla 5-prosenttista natriumvetysulfaattiliuosta, sitten 4 litralla kyllästettyä natriumkloridiliuosta. Yhdistetyt uutteet kuivattiin natriumsulfaatilla ja konsentroitiin 1,5 litraksi, minkä jälkeen seos kuumennettiin kiehuvaksi ja pidettiin 2 tuntia 5-10°C:ssa. Erä suodatettiin ja suodatinkakku pestiin etyyliasetaatilla. Tuotetta saatiin 77 %:n saannolla, sen sulamispisteen ollessa 205-208°C.

G. 17 -N,N-dietyylikarbamoyyli-4-metyyli-4-atsa-5-andros-ten-3-oni

Asteikolla varustettuun, kuivajäähauteessa pidettyyn sylinteriin kondensoitiin 200 ml metyyliamiinia, joka lisättiin sitten sekoittaen 1250 ml:aan huoneen lämpöistä etyleeniglykolia. Tilavuuden todettiin lisääntyvän 16 %. Metyyliamiini/etyleeniglykoli-liuos lisättiin 250 grammaan 17/3-N,N-dietyylikarbamoyyli-5-okso- 3,5-seko-androstaani-3-karboksyylihappoa, joka oli 3 litran pullossa. Liukeneminen tapahtui muutamassa minuutissa. Reaktioseosta lämmitettiin 110°C:ssa 40 minuutin ajan, ja lämmittämistä jatkettiin nopeudella 2°/minuutti kunnes lämpötila oli kohonnut 180°C:een. Sitten lämmitys lopetettiin. Koko lämmitysaika oli 70 minuuttia. Reaktioseos jäähdytettiin kaatamalla 10 litraan vettä, muodostunut maitomainen liuos uutettiin 5 kertaa 2 litralla dikloorimetaania. Yhdistetyt orgaaniset uutteet pestiin 4 litralla vettä, joka oli 27 67389 tehty happameksi väkevällä suolahapolla, 4 litralla 5-prosenttis-ta natriumvetykarbonaattiliuosta, ja 3 kertaa 4 litralla vettä. Yhdistetyt orgaaniset uutteet kuivattiin sitten natriumsulfaatilla ja käsiteltiin sitten 50 gramman kanssa piidioksidia, minkä jälkeen haihdutettiin kuiviin. Jäännös liuotettiin liuokseen, jossa oli 750 mg sykloheksanonia 750 ml:ssa n-heksaania, ja sen jälkeen liuosta sekoitettiin huoneen lämpötilassa yön ajan. Tuote suodatettiin erilleen, pestiin n-heksaanilla, ja kuivattiin vakuumissa. Tuotteen lopullinen saanto oli 91 % (226 g), sp. 115-118°C.

H. 17 -N,N-dietyylikarbamoyyli-4-metyyli-4-atsa-5 oC-androstan-3-oni

Pulloon pantiin 150 g 17/3 -N,N-dietyylikarbamoyyli-4-metyy-li-4-atsa-5-androsten-3-onia ja 750 ml jääetikkahappoa, ja seosta lämmitettiin 60°C:ssa typen suojaamana 310 kPa:n paineen alaisena 4 tuntia. Tuote suodatettiin erilleen, suodatinkakku pestiin di-kloorimetaanilla, ja suodos haihdutettiin kuiviin. Jäännös liuotettiin 750 ml:aan dikloorimetaania ja pestiin kahdesti 500 ml:11a In rikkihappoa, kerran 500 ml:11a vettä, kerran 500 ml:11a kyllästettyä natriumvetykarbonaattiliuosta, ja kerran kyllästetyllä nat-riumkloridiliuoksella. Liuos kuivattiin magnesiumsulfaatilla ja sitä käsiteltiin 15 gramman kanssa aktiivi-puuhiiltä, suodatettiin 75 gramman piidioksidi-kerroksen läpi. Suodatinkakku pestiin litralla dikloorimetaania ja haihdutettiin kuiviin. Jäännös liuotettiin 450 ml:aan etyyliasetaattia ja sen jälkeen sitä pidettiin tunnin ajan huoneen lämpötilassa ja tunnin ajan jäähauteessa. Tuote suodatettiin erilleen ja pestiin 50 ml:11a etyyliasetaattia, sitten 100 ml:11a n-heksaania ja kuivattiin. Suodos haihdutettiin kuiviin, liuotettiin 100 ml:aan etyyliasetaattia, pidettiin 2 tuntia huoneen lämpötilassa, suodatettiin, ja pestiin 15 ml :11a etyyliasetaattia ja 100 ml:11a n-heksaania. Tuotteen, jonka sp. oli 172-174°C, saanto oli 76,6 % (115 g).

Esimerkki 14 17 /-N,N-dietyyllkarbamoyyll-4-metyyli-4-atsa-5a£-andcostan-3-ani A. 17/1 -karbamoyyli-4-metyyli-4-atsa-5<0-androstan-3-oni

Tolueeniliuokseen, jossa oli 17/ -karbonyylikloori-4-metyyli- 4-atsa~5Ai’ -androstan-3-onia lisätään liuos, jossa on ammoniakkia tetrahydrofuraanissa, ja reaktioseosta sekoitetaan 2 tuntia huoneen lämpötilassa. Lisättäessä vettä ja uutettaessa etyyliasetaatilla saadaan amidi-välituotetta.

28 67389 B. 17 -N,N-dietyylikarbamoyyli-4-metyyli-4-atsa-5-*' -andros-tan-3-oni

Vaiheen A tuote etyloidaan etyylibromidilla siten, että läsnä on ekvimoolimäärä natriuinhydridiä tolueeniliuoksessa. Käyttämällä kaksi moolia etyylibromidia moolia kohden vaiheen A tuotetta saadaan lopputuotetta.

Esimerkki 15 17/^ -N fN-dietyylikarbamoyyli-ä-metyyli-ä-atsa-S^-androstan- 3-oni A. 17 ^-N-etyylikarbamoyyli-4-metyyli-4-atsa-5 cC-androstan- 3-oni

Tolueeniliuokseen, jossa oli 17^-karbonyylikloridi-4-metyy-li-4-atsa-5<<-androstan-3-onia lisätään liuos, jossa on monoetyyli-amiinia tetrahydrofuraanissa, ja reaktioseosta sekoitetaan 2 tuntia huoneen lämpötilassa. Lisäämällä vettä ja uuttamalla etyyliasetaatilla saadaan 17 «3-N-etyylikarbamoyyli-tuotetta.

B. 17/¾ -N ,N-dietyylikarbamoyyli-4-metyyli-4-atsa-5<>C -androstan-3-oni

Vaiheen A tuote etyloidaan käyttämällä etyylibromidia ja natriumhydridiä samalla tavalla kun on selostettu esimerkin 14 vaiheessa B, mutta käyttämällä mooli etyylibromidia moolia kohden vaiheen A tuotetta.

Claims (1)

1. 6 7 3 8 9 29 Patenttivaatimus Menetelmä terapeuttisesti käyttökelpoisen 4-atsa-17-substi-tuoitu-5-androstan-3-onijohdannaisen valmistamiseksi, jonka kaava on Z A R' f I jcrr O I R" R jossa A on tai -CH=CH-, R on vety, metyyli tai etyyli, R' on vety tai metyyli, R" on vety tai Λ -metyyli, Z on (1) okso, (2) vety ja hydroksi, (3) vety ja (Y)nQ, jossa n on 0 tai 1, Y on alempi alkyleeni, ja Q on -CON(alempi-alkyyli)2, -CONH(alempi-alkyyli), -COOH tai vastaava suola tai esteri, -OH, -NH2(alempi-alkyyli^, -NH(alempi-alkyyli), <4) k J (5) vety ja syaani, ja sen farmaseuttisesti hyväksyttävien suolojen valmistamiseksi, tunnettu siitä, että (a) yhdiste jonka kaava on χ*·η±ι o - · \ R„ jossa A, R', R" ja Z merkitsevät samaa kuin edellä, / 30 6 7 3 8 9 (1) hapetetaan vastaavaksi 5-okso-3,5-seko-androstaani-karboksyylihappo-yhdisteeksi, (2) vaiheen (1) tuotetta käsitellään kaavan RNI^ mukaisella amiinilla, jolloin saadaan vastaava 4-atsa-5-androstan-3-oni-yh-diste, jonka 4-asemassa on substituentti R, ja (3) vaiheen (2) tuotetta hydrataan katalyyttisesti kaavan I mukaiseksi yhdisteeksi, tai (b) sellaisen kaavan I mukaisen yhdisteen valmistamiseksi, jossa A on -CH=CH-, (1) edellä saatua 1,2-tyydyttynyttä yhdistettä käsitellään litiumdi-isopropyyliamidilla vastaavaksi enolaatiksi, (2) enolaatti saatetaan reagoimaan difenyylidisulfidin kanssa, jolloin saadaan vastaava fenyylitio-yhdiste, (3) vaiheen (2) tuote hapetetaan vastaavaksi sulfoksidi-yhdisteeksi, ja (4) vaiheen (3) sulfoksidi-yhdistettä kuumennetaan, jolloin saadaan haluttu kaavan I mukainen yhdiste, jossa A on -CH=CH-, ja haluttaessa saatu kaavan I mukainen yhdiste muutetaan farmaseuttisesti hyväksyttäväksi suolaksi. 67389 Förfarande för framställning av ett terapeutiskt användbart 4-aza-17-substituerad-5-androstan-3-on-derivat med formeln t - rö fiT R„ R väri A är -CH2“CH2“ eller -CH=CH-, R är väte, metyl eller etyl, R' är väte eller metyl, R" är väte eller β -metyl, Z är (1) oxo, (2) väte och hydroxi, (3) väte och (Y)nQ, väri n är O eller 1, Y är lägre alkylen, och Q är -CON(lägre-alkyl)2, -CONH(lägre-alkyl), -COOH eller motsvarande sait eller ester, -OH, -NH2, -N(lägre-alkyl) 9, -NH(lägre-alkyl), «> ΓΊ \ '·' (5) väte eller cyan, och farmaceutiskt godtagbara salter därav, kännetecknat därav, att (a) en förening med formeln Z A R* rrr " 11 Tl" väri A, R’, R" och Z har ovan nämnd betydelse, (1) oxideras tili motsvarande 5-oxo-3,5-seko-androstan-3-karboxylsyra-förening,