FI67084C - Vid framstaellning av terapeutiskt vaerdefulla cefalosporiner anvaendbara 7(2-(2-(skyddad-amino)-4-tiazolyl)-2-metoxiiminoacetamido)cefalosporinderivat - Google Patents

Description

67084

Terapeuttisesti arvokkaiden kefalosporiinien valmistuksessa käyttökelpoiset 7-/2-(2-(suojattu-amino)-4-tiatsolyyli)-2-metoksi-iminoasetamido/kefalosporiinijohdannaiset 5 Jakamalla erotettu hakemuksesta 791703

Keksinnön kohteena on uudet 7-/3-(2-(suojattu-amino)-

4-tiatsolyyli)-2-metoksi-iminoasetamidq7kefalosporiinijoh-dafhnaiset, joiden kaava on 10 H H

CH3ON“C— CONH—^11 / J ^Lch2-s-x

15 RHN^ ^ S / COOH

jossa X on l,2,5,6-tetrahydro-2-metyyli—5,6-diokso-as-triatsin-3-yyliryhmä tai sen vastaava tautomeerinen ryhmä 2,5-dihydro-6-hydroksi-2-metyyli-5-okso-as-triatsin-3-20 yyliryhmä, R on lohkaistavissa oleva suojaryhmä ja karb-oksiryhmä voi olla suojatussa muodossa syn-isomeerina, tai seoksena, jossa syn-isomeeri on vallitsevana.

Kaavan II mukaiset kefalosporiinijohdannaiset ovat arvokkaita välituotteita valmistettaessa farmakologisesti 25 vaikuttavia kefalosporiineja. Lohkaisemalla kaavan II mukaisesta yhdisteestä pois suojaryhmä R ja haluttaessa myös mahdollisesti läsnäoleva karboksin suojaryhmä voidaan kaavan II mukainen yhdiste muuttaa farmakologisesti arvokkaaksi kefalosporiiniyhdisteeksi, jonka kaava on 30

H H

CH3QN = C— CONH—i_j^S \ ^ H2N S ^ COOR1 f i 67084 jossa X1 on 1,2,5,6-tetrahydro-2-metyyli-5,6-diokso-as-tri-atsin-3-yyliryhxnä tai 2,5-dihydro-6-R-^-O-2-metyyli-5-okso-as-triatsin-3-yyliryhmä ja R^ on vety tai helposti hydrolysoituva esteri tai eetteriryhmä, syn-isomeerinä tai seokse-5 sena, jossa syn-isomeeri on vallitsevana, sekä näiden yhdisteiden suoloiksi tai sellaisten kaavan I mukaisen yhdisteiden hydraateiksi, joissa R1 on vety tai kaavan I mukaisten yhdisteiden suolojen hydraateiksi.

Kaavan I mukaisten yhdisteiden helposti hydrolysoi-10 tavilla estereillä tarkoitetaan sellaisia kaavan I mukaisia yhdisteitä, joiden karboksiryhmä on helposti hydrolysoitavissa olevana esteriryhmänä. Esimerkkejä tällaisista estereistä, jotka voivat olla tavanomaisia, ovat alemmat alkano-yylioksialkyyliesterit, esim. asetoksimetyyli-, pivaloyyli-15 oksimetyyli-, 1-asetoksietyyli- ja 1-pivaloyylioksietyyli-esterit; alemmat alkoksikarbonyylioksialkyyliesterit, esim. metoksikarbonyylioksimetyyli-, 1-etoksikarbonyylioksietyyli-ja 1-isopropoksikarbonyylioksietyyliesterit; laktonyylieste-rit, esim. ftalidyyli- ja tioftalidyyliesterit; alemmat 20 alkoksimetyyliesterit, esim. metoksimetyyliesteri; ja alemmat alkanoyyliaminometyyliesterit, esim. asetamidometyyli-esteri. Myös muut esterit, esim. bentsyyli- ja syanometyyli-esterit, voivat olla käyttökelpoisia.

Kaavan I mukaisten yhdisteiden helposti hydrolysoi-25 tavilla eettereillä tarkoitetaan sellaisia kaavan I mukaisia yhdisteitä, joissa X tarkoittaa 2,5-dihydro-6-hydroksi- 2-metyyli-5-okso-as-triatsin-3-yyliryhmää, jonka enolinen OH-ryhmä on helposti hydrolysoitavan eetteriryhmän muodossa. Eetteriryhninä tulevat kysymykseen samat ryhmät, jotka jo 30 edellä mainittiin helposti hydrolysoitavien esteriryhmien kohdalla. Tällaisten eetterien edustajia ovat siis esimerkiksi alemmat alkanoyylioksialkyylieetterit, esim. asetoksi-metyyli-, pivaloyylioksimetyyli-, 1-asetoksietyyli- ja 1-pi-valoyylioksietyylieetterit; alemmat alkoksikarbonyylioksi-35 alkyylieetterit, esim. metoksikarbonyylioksimetyyli-, 1-et- oksikarbonyylioksietyyli- ja 1-isopropoksikarbonyylioksi-etyylieetterit; laktonyylieetterit, esim. ftalidyyli- ja 67084 tioftalidyylieetteri; alemmat alkoksimetyylieetterit, esim. metoksimetyylieetterit; ja alemmat alkanoyyliaminometyyli-eetterit, esim. asetamidometyylieetteri.

Esimerkkejä kaavan I mukaisten yhdisteiden suoloista 5 ovat alkalimetallisuolat, kuten natrium- ja kaliumsuola; ammoniumsuola; maa-alkalimetallisuolat, kuten kalsiumsuola; suolat orgaanisten emästen kanssa, kuten suolat amiinien kanssa, esim. suolat N-etyylipiperidiinin, prokaiinin, di-bentsyyliamiinin, N,N'-dibentsyylietyylietyleenidiamiinin, 10 alkyyliamiinien tai dialkyyliamiinien kanssa, sekä suolat aminohappojen kanssa, kuten esim. suolat arginiinin tai ly-siinin kanssa. Suolat voivat olla monosuoloja tai myös di-suoloja. Toinen suolanmuodostus voi esiintyä yhdisteissä 2,5-dihydro-6-hydroksi-2-metyyli-5-oksa-as-triatsin-3-yyli-15 ryhmän hydroksitähteen kanssa.

Kaavan I mukaiset yhdisteet muodostavat samoin addi-tiosuoloja orgaanisten tai epäorgaanisten happojen kanssa. Esimerkkejä tällaisista suoloista ovat hydrohalogenidit, esim. hydrokloridit, hydrobromidit, hydrojodidit, sekä muut 20 mineraalihapposuolat, kuten sulfaatit, nitraatit, fosfaatit ja vastaavat, alkyyli- ja mono-aryylisulfonaatit, kuten etaanisulfonaatit, tolueenisulfonaatit, bentseenisulfonaa-tit ja vastaavat, ja myös muut orgaaniset happofeuolat, kuten asetaatit, tartraatit, maleaatit, sitraatit, bentsoaatit, 25 salisylaatit, askorbaatit ja vastaavat.

Kaavan I mukaiset yhdisteet (mukaan luettuna niiden suolat, helposti hydrolysoitavat esterit ja eetterit) voivat olla hydratoituja. Hydratointi voi tapahtua valmistusmenetelmän yhteydessä tai vähitellen lähes vedettömän 30 tuotteen hygroskooppisten ominaisuuksien seurauksena.

Keksinnön mukaiset tuotteet voivat esiintyä syn-isomeerisessä muodossa, N-r-C— CONH-( AT k ^ RHN \ och3 4 67084 tai anti-isomeerisessä muodossa, N t— C CONH-\ 5 / n RHN ^ / ch3o tai näiden molempien muotojen seoksina. Edullisena pidetään syn-isomeeristä muotoa tai seoksia, joissa syn-isomeerinen 10 muoto on vallitsevana.

Edullisena pidettyjä kaavan I mukaisia lopputuotteita ovat: (6R,7R)-1-£2-(2-amino-4-tiatsolyyli)-2-(Z-metoksi-imino)-asetamidö7-3-(2,5-dihydro-6-hydroksi-2-metyyli-5-okso-as-15 triatsin-3-yyli)tio^metyyliJ-e-okso-S-tia-l-atsabisyklo- £4 . 2.07-okt-2-eeni-2-karboksyylihappo ja sen suolat sekä vastaavat hydraatit.

Edullinen välituote on: (6R,7R)-Ί-£2-Cl-(2-klooriasetaraido)-4-tiatsolyyli/-2-(Z-20 metoksi-imino)asetamido7-2-/-/lS,5 -dihydro-6-hydroksi-2-metyyli-5-okso-as-triatsin-3-yyli)-tiq7metyyli7“8-okso- 5-tia-l-atsa-bisyklo/4.2.07okt-2-eeni-2-karboksyylihappo.

Kaavan I mukaisia kefalosporiiniyhdisteitä ja niiden estereitä/eettereitä, suoloja ja hydraatteja valmis-25 tetaan siten, että a) yhdisteestä, jonka kaava on

H H

CH30N— C CONH —4-Y

30 I I II

f~\ oA-n^>-c„2-s-x

RHN'^VS^' COOH

35 jossa X tarkoittaa samaa kuin edellä, lohkaistaan pois suo-jaryhmä R ja haluttaessa myös mahdollisesti läsnäoleva karb-oksin suojaryhmä tai 5 67084 b) kaavan I mukaisen yhdisteen helposti hydrolysoitavan esterin tai eetterin valmistamiseksi yhdiste I este-röidään tai eetteröidään tai

c) kaavan I mukaisen yhdisteen suolojen tai hydraat-5 tien tai suolojen hydraattien valmistamiseksi yhdiste I

muutetaan suolaksi tai hydraatiksi tai suolan hydraatiksi.

Kaavan II mukaisessa yhdisteessä esiintyvä karboksi-ryhmä voi olla suojattu, esim. esteröity helposti lohkaistavissa olevaksi esteriksi kuten silyyliesteriksi, trimet-10 yylisilyyliesteriksi. Kysymykseen tulevat myös edellä esitetyt, helposti hydrolysoitavat esterit. Karboksiryhmä voidaan suojata muodostamalla suola epäorgaanisen tai tertiää-risen orgaanisen emäksen kuten trietyyliamiinin kanssa. Mahdollisia R-suojaryhmiä ovat esimerkiksi happamesti-hydr-15 olyyttisesti lohkaistavissa olevat suojaryhmät, kuten esim. t-butoksikarbonyyli tai trityyli, tai myös emäksisesti-hydrolyyttisesti lohkaistavissa olevat suojaryhmät, kuten esim. trifluoriasetyyli. Edullisena pidettyjä R-suojaryhmiä ovat kloori-, bromi- ja jodiasetyyli, erityisesti kloori-20 asetyyli. Viimeksimainitut suojaryhmät voidaan lohkaista käsittelemällä tiourealla.

Kaavan II mukaisia yhdisteitä voidaan valmistaa esim. N-asyloimalla vastaava 7-aminoyhdiste, ja nimittäin siten, että annetaan yhdisteen, jonka yleinen kaava on 25

H H

h2n—-

-I J_CH2-S-X III

0 I

30 1

COOH

jossa X merkitsee samaa kuin edellä ja karboksiryhmä ja/tai aminoryhmä voi olla suojatussa muodossa, reagoida hapon kanssa, jonka yleinen kaava on 35

/ IS

i 6 67084

CH ON= C COOH

,/H\ 5 RHN "'Nk'' jossa R merkitsee samaa kuin edellä, tai tämän hapon reak-tiokykyisen johdannaisen kanssa ja mahdollisesti esiintyvä karboksisuojaryhmä lohkaistaan pois tietyissä tapauksissa.

10 Kaavan III mukaisessa 7-aminoyhdisteessä esiintyvä karboksiryhmä voi olla suojattu, ja nimittäin tavalla, jota on selvennetty edellä valmistettavan kaavan II mukaisen yhdisteen kohdalla. Kaavan III mukaisen yhdisteen aminoryhmä voi olla suojattu esim. silyylisuojaryhmällä, kuten tri-15 metyylisilyylillä.

Kaavan IV mukaisten happojen reaktiokykyisinä johdannaisina tulevat kysymykseen esim. halogenidit, so. kloridit, bromidit ja fluoridit; atsidit; anhydridit, erityisesti seka-anhydridit vahvempien happojen kanssa; reaktio-20 kykyiset esterit, esim. N-hydroksisukkinimidiesterit, ja amidit, esim. imidatsolidit.

Kaavan III mukaisen 7-aminoyhdisteen reaktio kaavan IV mukaisen hapon tai sen reaktiokykyisen funktionaalisen johdannaisen kanssa voidaan suorittaa sinänsä tunnetulla 25 tavalla. Niinpä voidaan esim. kaavan IV mukainen happo kon-densoida jollakin mainituista estereistä, joiden kaava on III, karbodi-imidin, disykloheksyylikarbodi-imidin avulla inertissä liuottimessa, kuten etikkahappoesterissä, asetonit-riilissä, dioksaanissa, kloroformissa, metyleenikloridissa, 30 bentseenissä tai dimetyyliformamidissa ja lopuksi voidaan esteriryhmä lohkaista pois. Karbodi-imidien sijasta voidaan käyttää kondensaatioaineina myös oksatsoliumsuoloja, esim. N-etyyli-5-fenyyli-isoksatsolium-3'-sulfonaattia.

Erään toisen suoritustavan mukaan annetaan kaavan III 35 mukaisen hapon suolan, esim. trialkyyliammoniumsuolan, kuten trietyyliammoniumsuolan, reagoida kaavan IV mukaisen 67084 hapon reaktiokykyisen, funktionaalisen johdannaisen kanssa kuten edellä mainittiin inertissä liuottimessa, esim. jossakin edellämainituista liuottimista.

Erään toisen suoritustavan mukaan annetaan happohalo-5 genidin, edullisesti kaavan IV mukaisen hapon kloridin reagoida kaavan III mukaisen amiinin kanssa. Reaktio tapahtuu edullisesti happoa sitovan aineen läsnäollessa, esim. vesipitoisen alkalin, edullisesti natriumhydroksidin läsnäollessa, tai myös alkalimetallikarbonaatin, kuten kaliumkarbonaa-10 tin läsnäollessa, tai alempi-alkyloidun amiinin, kuten tri- etyyliamiinin läsnäollessa. Liuottimena käytetään edullisesti vettä, mahdollisesti seoksena inertin orgaanisen liuottimen kanssa, kuten tetrahydrofuraanin tai dioksaanin kanssa. Voidaan myös työskennellä aproottisessa orgaanisessa liuotti-15 messa, kuten esim. dimetyyliformamidissa, dimetyylisulfoksi-dissa tai heksametyylifosforihappotriamidissa. Käytettäessä silyloituja, kaavan III mukaisia lähtöyhdisteitä työskennellään vedettömässä väliaineessa.

Kaavan III mukaisen 7-aminoyhdisteen reaktio kaavan 20 IV mukaisen hapon tai sen reaktiokykyisen funktionaalisen johdannaisen kanssa voi tapahtua tarkoituksenmukaisesti noin -40°C:n ja huoneenlämpötilan välisessä lämpötilassa, esim. noin 0-10°C:ssa.

Edellä esitetyn suoritusmuodon a) mukaan lohkaistaan 25 kaavan II mukaisesta lähtöaineesta pois aminon suojaryhmä R. Happamen hydrolyysin avulla lohkaistavissa olevat suojaryh-mät poistetaan edullisesti alempien alkaanikarboksyylihap-pojen avulla, jotka karboksyylihapot voivat olla halogenoi-tuja. Käytetään varsinkin muurahaishappoa ja trifluori-30 etikkahappoa. Lämpötila on yleensä huoneen lämpötila, vaikkakin voidaan käyttää hieman korkeampaa tai hieman alhaisempaa lämpötilaa, esimerkiksi alueella 0-40°C olevaa lämpötilaa. Alkalisesti lohkaistavissa olevat suoja-ryhmät hydrolysoidaan laimealla natriumhydroksidivesiliuok-35 sella 0-30°C:ssa. Klooriasetyyli- ja jodiasetyylisuoja- 8 67084 ryhmät voidaan lohkaista pois tiourealla happamessa, neutraalissa tai alkalisessa väliaineessa noin 0-30°C:ssa. Hydrogenolyyttinen lohkaisu ei tässä sovi (esimerkiksi bentsyy in poislohkaisu), koska hydrogenolyysissa amino-5 ryhmän oksiimifunktio pelkistyy.

Suoritusmuodon a) loppuunsuorittamisen jälkeen voidaan reaktiotuotteessa mahdollisesti läsnäoleva karb-oksyylin suojaryhmä haluttaessa lohkaista pois. Jos suojäryhmä on silyyli (silyyliesteri), voidaan tämä loh-10 kaista pois erittäin helposti käsittelemällä reaktiotuotetta vedellä.

Alempi-alkanoyylioksialkyyli-, alempi-alkoksi-karbonyylioksialkyyli-, laktonyyli-, alempi-alkoksime-tyyli- ja alkanoyyliaminometyyliesterit lohkaistaan edul-15 lisesti pois entsymaattisesti sopivan esteraasin avulla noin 20-40°C:ssa. Jos karboksyyliryhmä suojataan suolan-muodostuksen avulla (esimerkiksi trietyyliamiinilla), voidaan tämän suolan muodostavan suojaryhmän poisto suorittaa käsittelemällä hapolla. Happona voidaan käyttää 20 esimerkiksi kloorivetyhappoa, rikkihappoa, fosforihappoa tai sitruunahappoa.

Karboksyylin suojaryhmä voidaan poistaa edellä esitetyllä tavalla myös ennen suojaryhmän R poistamista. Kaavan I mukaisen helposti hydrolysoituvan karboksyyli-25 happoesterin valmistamiseksi suoritusmuodon b) mukaan (-COOR^ = helposti hydrolysoituva esteriryhmä) saatetaan karboksyylihappo edullisesti reagoimaan vastaavan, es-teriryhmän sisältävän halogenidin, edullisesti jodidin kanssa. Reaktiota voidaan nopeuttaa emäksen, esimerkik-30 si alkalimetallihydroksidin tai -karbonaatin avulla tai orgaanisen amiinin kuten trietyyliamiinin avulla. Kun X on enolifunktion omaava 2,5-dihydro-6-hydroksi-2-metyyli-5-okso-as-triatsin-3-yyliryhmä se eetteröityy ja muodostuu vastaava helposti hydrolysoituva eetteri.

35 Tällöin käytetään edullisesti ylimäärä vastaavaa halo- 9 67084 genidia. Esteröinti/eetteröintireaktio suoritetaan edullisesti inertissä orgaanisessa liuottimessa kuten dimetyyli-asetamidissa, heksametyylifosforihappotriamidissa, dimetyyli-sulfoksidissa tai edullisesti dimetyyliformamidissa. Lämpö-5 tila on edullisesti noin 0-40°C.

Kaavan I mukaisten yhdisteiden suolat ja hydraatit sekä suolojen hydraatit voidaan valmistaa sinänsä tunnetulla tavalla esimerkiksi saattamalla kaavan I mukainen karboksyy-lihappo reagoimaan ekvivalentin määrän kanssa haluttua emäs-10 tä, tarkoituksenmukaisesti liuottimessa kuten vedessä tai orgaanisessa liuottimessa kuten etanolissa, metanolissa, asetonissa jne. Käytettäessä lajta ekvivalenttia emästä tapahtuu suolanmuodostus myös tautomeerisessä enolimuodossa (2,5-dihydro-6-hydroksi-2-metyyli-5-okso-as-triatsin-3-yyliryhmä X), 15 jolloin muodostuudisuola. Suolanmuodostuslämpötila ei ole kriittinen. Se on yleensä huoneen lämpötila, mutta se voi olla myös hieman korkeampi tai hieman alempi, noin 0-50°C.

Kaavan I mukaisen karboksyylihapon hydraatteja muodostuu tavallisesti automaattisesti valmistusprosessin aikana 20 seurauksena alkuaan vedettömän tuotteen hydroskooppisista ominaisuuksista. Valmistettaessa tarkoituksella hydraatti, voidaan täysin tai osittain vedetön tuote panna kosteaan ilmakehään esimerkiksi noin 10-40°C:ssa.

Kaavan III mukaisia 7-aminoyhdisteitä voidaan valmistaa 25 saattamalla yhdiste, jonka kaava on: H H s H2«4—f ^

J-n J—CH,-Y

30 0^ 2

COOH

jossa Y on poistuva ryhmä reagoimaan yhdisteen kanssa, jonka kaava on

35 HS - X VI

jossa X tarkoittaa samaa kuin edellä.

10 67084

Poistuvana ryhmänä kaavassa V tulevat kysymukseen esimerkiksi halogeeni, kuten kloori, bromi tai jodi, asyyli-oksiryhmä, esimerkiksi alkanoyylioksiryhmät kuten asetoksi, alemmat alkyyli- tai aryylisulfonyylioksiryhmät kuten mesyy-5 lioksi tai tosyylioksi tai atsidoryhmä.

Kaavan V mukaisen yhdisteen reaktio kaavan VI mukaisen tiolin kanssa voidaan toteuttaa sinänsä tunnetulla tavalla esimerkiksi lämpötilassa noin 40-80°C, tarkoituksenmukaisesti noin 60°C:ssa, vedessä tai puskuriliuoksessa, 10 jonka pH on noin 6-7, edullisesti 6,5.

Kaavan I mukaisilla yhdisteillä sekä vastaavilla helposti hydrolysoitavilla estereillä, eettereillä ja suoloilla tai näiden tuotteiden hydraateilla on antibioottinen, erityisesti bakterisidinen vaikutus. Niillä on laaja vaiku-15 tusspektri, joka käsittää gram-positiiviset ja gram-negatii-viset mikro-organismit, mukaanluettuna β -laktamaasia muodostavat stafylokokit ja erilaiset (b -laktamaasia muodostavat gram-negatiiviset bakteerit, kuten esim. Pseudomonas aeruginosa, Haemophilus influenzae, Eschrichia coli, Serratia 20 marcescens, Proteus- ja Klebsiella-lajit.

Esimerkki (6R,7R)-7-/2-(2-amino-4-tiatsolyyli)-2-(Z-metoksi-imino-asetamidq7-3-/~/2,5-dihydro-6-hydroksi-2-metyyli-5-okso-as-triatsin-3-yyli)tio7metyyli7-8-25 okso-5-tia-l-atsabisyklo/4.2.Q7okt-2-eeni-2-karb- oksyylihapon dinatriumsuolan valmistus 15,3 g (6R,7R)-7-/2-Z?-(2-klooriasetamido)-4-tiat-solyyli7-2-(Z-metoksi-imino)-asetamidp7-3-/~ ΖΓ2,5-dihydro- 6-hydroksi-2-metyyli-5-okso-as-triatsin-3-yyli)tio7metyyli7-30 8-okso-5-tia-l-atsabisykloZ4·2.07okt-2-eeni-2-karboksyyli- happpoa (fraktio I, katso seuraavasta) suspendoidaan yhdessä 5 g:n tiourean kanssa 150 ml:aan vettä. Hyvän typpi-kaasutuksen alaisena ja sekoittaen säädetään pH kyllästetyllä natriumvetykarbonaattiliuoksella arvoon 6,7-7,0, jol-35 loin muodostuu oranssinvärinen liuos. Autotitraattorin avulla pidetään reaktioliuoksen pH natriumvetykarbonaatti- 11 67084 liuosta lisäämällä vakiona 6,8:ssa 6 tunnin ajan. Senjälkeen lisätään vielä 2,5 g tioureaa ja liuosta sekoitetaan edelleen 3 tunnin ajan, jolloin pH pidetään vakiona 6,8:ssa lisäämällä kyllästettyä natriumvetykarbonaattiliuosta. Sen-5 jälkeen punaista liuosta säilytetään yön ajan jääkaapissa, jolloin se tulee tummemmaksi. Tämän liuoksen pH säädetään lisäämällä 100-%:ista muurahaishappoa arvoon 2,0-2,5, jolloin aine saostuu. Tämä imusuodatetaan ja pestään 100 ml:11a 10-%:ista muurahaishappoa. Emäliuos heitetään pois. Ruskehta-10 va suodoskakku suspendoidaan 200 ml:aan vettä ja pH saatetaan trietyyliamiinilla arvoon 7, jolloin muodostuu ruskea liuos. Tätä liuosta sekoitetaan 2 g:n aktiivihiiltä kanssa 30 min. ajan, erotetaan hiilestä ja yhä vielä ruskean suodoksen pH saatetaan 100-%:isella muurahaishapolla hyvin sekoittaen ar-15 voon 3,5. Tällöin saostunut aine imusuodatetaan, pestään 50 ml:11a 10-%:ista muurahaishappoa ja heitetään pois. Tummankeltaisen suodoksen pH saatetaan 100-%:isella muurahaishapolla arvoon 2-2,5, jolloin aine saostuu. Tämä imusuodatetaan, pestään jäävedellä ja kuivataan. Saatu kefalosporiinihappo 20 suspendoidaan - tarkoituksena muuttaa dinatriumsuolaksi - seokseen, joka koostuu 40 ml:sta asetonia ja 40 ml:sta vettä ja lisätään 20 ml 2-etyylikapronihappo-natriumsuolan 2-n liuosta etikkaesterissä. Tällöin muodostuvaan oranssinväriseen liuokseen lisätään 50 ml asetonia, jolloin ruskea hart-25 si saostuu, ja se erotetaan suodattamalla. Keltaista suodos-ta sekoitetaan 30 min. ajan, jolloin dinatriumsuola kiteytyy. Seokseen lisätään vielä annoksittain 50 ml asetonia ja säilytetään yön ajan jääkaapissa. Kiteet imusuodatetaan, pestään peräjälkeen asetoni-vesi-seoksella (85:15), puhtaal-30 la asetonilla ja alhaalla kiehuvalla petrolieetterillä, ja kuivataan yön ajan vakuumissa 40°C:ssa. Saadaan otsikkoyh-diste beigen värisinä kiteinä. = -144° (c = 0,5 ve dessä.

NMR-spektri: (D20) S (ppm) : noin 3,58 (2-CU^) (AB-q, 2), 35 3,62 (NCH3) (s, 3) 3,98 (OCH3) (s, 3, 4, 22) (3-CH2) (AB-q, 2), 5,20 (H-6) (d,l), 5,77 (H-7) (d, 1), 6,99 (tiatsoli-H) (s, 1) .

67084

Mikroanalyysi (C^gH^gNg0.jS2Na2.3,5 H20) (MG = 661,59) Laskettu: C 32,68, H 3,50, N 16,94 S 14,54, H20 9,53 % Löydetty: C 32,89, H 3,46, N 16,96 S 14,54, H20 9,50 % Lähtöaineena käytettyä (6R,7R)-7-/2-/2-(2-kloori-5 asetamido)-4-tiatsolyyli/-2-(Z-metoksi-imino)asetamido7- 3-/- Γ( 2,5-dihydro-6-hydroksi-2-metyyli-5-okso-as-triatsin- 3-yyli)tio/metyyliy-Ö-okso-S-tia-l-atsabisyklo/i.2.Ö/okt- 2-eeni-2-karboksyylihappoa voidaan valmistaa seuraavasti: 22,24 g 2-(2-klooriasetamido-tiatsol-4-yyli)-2-(Z-10 metoksi-imino)etikkahappoa suspendoidaan 240 ml:aan metylee-nikloridia. Tähän suspensioon lisätään 13,39 ml trietyyli-amiinia, jolloin muodostuu vaaleankeltainen liuos. Tämä liuos jäähdytetään 0-5°C:seen ja lisätään 16,72 g fosfori-pentakloridia, sekoitetaan 5 min. ajan 0-5°C:ssa ja 20 min.

15 ajan ilman jäähdytystä. Keltainen liuos haihdutetaan vakuu- missa 35°C:ssa. Haihdutusjäännöstä ravistellaan kaksi kertaa n-heptaanin kanssa ja viimeksimainittu dekantoidaan. Hartsi-maista jäännöstä käsitellään 240 ml:11a tetrahydrofuraania ja liukenematon trietyyliamiinihydrokloridi suodatetaan.

20 Keltainen suodos sisältää happokloridia.

22 g (7R,7R)-7-amino-3-desasetoksi-3-/X2,5-dihydro- 6-hydroksi-2-metyyli-5-okso-as-triatsin-3-yyli)tio7~kefalo-sporaanihappoa suspendoidaan seokseen, jossa on 300 ml vettä ja 150 ml tetrahydrofuraania. Suspensioon tiputetaan hy-25 vän typpikaasutuksen alaisena autotitraattorin avulla 2-n natronlipeää, kunnes muodostuu ruskeanpunainen liuos, jonka pH on 8. Tämä jäähdytetään 0-5°C:seen ja 15 min. aikana lisätään tipoittain edellä valmistettu happokloridin liuos tetrahydrofuraanissa. Senjälkeen sekoitetaan 2 1/2 tunnin 30 ajan 25°C:ssa. Asylointiseoksen pH pidetään vakiona 8:ssa lisäämällä 2-n natronlipeätä. Käytännöllisesti katsoen mustasta liuoksesta poistetaan vakuumissa 40°C:ssa tetrahydro-furaani. Nyt lisätään 100 ml 2-n rikkihappoa. Tällöin saostunut aine imusuodatetaan, pestään vedellä ja imusuodate-35 taan hyvin. Kostea, ruskea suodoskakku liuotetaan 1,5 litraan asetonia. Tumma liuos suodatetaan vähäisestä määrästä tummaa liukenematonta ainetta Hyflon kautta, lisätään hiiltä, i i 13 67084 sekoitetaan 30 min, ajan ja suodatetaan jälleen Hyflon kautta. Oranssinpunainen suodos kuivataan natriumsulfaatilla, väkevöidään vakuumissa ja haihdutetaan etikkahappoesterin kanssa. Tällöin saostuu musta hartsi, joka suodatetaan ja 5 heitetään pois. 2-faasinen, vielä vettä sisältävä suodos tislataan atseotrooppina kolme kertaa bentseenillä vakuumissa 40°C:ssa. Tällöin saostunut aine imusuodatetaan ja kuivataan vakuumissa 40°C:ssa. Viimeksimainittua sekoitetaan kaksi kertaa kulloinkin 1 litran kanssa asetonia, jolloin jää 10 jäljelle ruskea hartsi, joka heitetään pois. Yhdistetyt oranssinväriset asetoniuutteet väkevöidään vakuumissa 40°C:ssa noin 150 ml:aan, jolloin ruskea hartsi suodatetaan ja heitetään pois. Suodokseen lisätään 1 litra etikkahappoesteriä ja väkevöidään vakuumissa 40°C:ssa. Tällöin saostunut aine 15 imusuodatetaan, pestään etikkahappoesterillä ja sen jälkeen eetterillä (_ (6R,7R)-7-/2-Tj-2- (2-klooriasetamido)-4-tiatsol-yyll7-2-(Z-metoksi-imino)asetamido7-3-/" 7~(2,5-dihydro-6-hydr-oksi-2-metyyli-5-okso-as-triatsin-3-yyli) tip7-metyyli7-8-okso-5-tia-l-atsabisyklo/3.2.07okt-2-eeni-karboksyylihappo, 20 fraktio I: beigenvärinen amorfinen happo7. Tätä fraktiota I voidaan käyttää suoraan halutun lopputuotteen valmistamiseksi.

Etikkahappoesteriemäliuos väkevöidään voimakkaasti vakuumissa 40°C:ssa, laimennetaan eetterillä ja saostunut 25 aine imusuodatetaan Z36R,7R)-l-[2-£2-(2-klooriasetamido)- 4-tiatsolyyljJ-2- (Z-metoksi-imino) asetamido7-3-/r/72,5-di-hydro-6-hydroksi-2-metyyli-5-okso-as-triatsin-3-yyli)tio7~ metyyli7-8-okso-5-tia--l-atsabisyklo74.2.07okt-2-eeni-2-karboksyylihappo, fraktio II; vaalean beigen värinen amor-30 finen happo, ohutkerroskromatograafisesti hieman puhtaampi kuin fraktio I?·

Dinatriumsuolan valmistamiseksi liuotetaan 3,5 g happoa (fraktio II) seokseen, jossa on 20 ml asetonia ja II ml vettä. Liuokseen lisätään 7 ml 2-n liuosta, jossa on 35 2-etyylikapronihappo-natriumsuolaa etikkahappoesterissä, jolloin dinatriumsuola kiteytyy. Nyt lisätään vielä annok- i4 6 7 0 8 4 sittain 25 ml asetonia ja seosta säilytetään 2 tunnin ajan pakastekaapissa. Sen jälkeen kiteet imusuodatetaan, pestään peräjälkeen 25 ml:lla jääkylmää asetoni-vesi-seosta (80:20), puhtaalla asetonilla ja alhaalla kiehuvalla petrolieetteril-5 lä ja kuivataan yli yön korkeavakuumissa 40°C:ssa. Saadaan (6R,7R) -7-/2-/2- (2-klooriasetamido) -4-tiatsolyyl_i7-2- (2-metoksi-imino)asetamido/-3-/7/~(2-dihydro-6-hydroksi-2-metyy-li-5-okso-as-triatsin-3-yyli) tidy-metyyir/'-S-okso-S-tia-l-atsabisyklo^ .2.0/okt-2-eeni-2-karboksyylihapon dinatrium-10 suola vaaleankeltaisina kiteinä. l&Öq = “142,7° (c = 1 vedessä).

NMR-spektri (D20) £ (ppm): noin 3,6 (2-CH2), 3,63 (NCH-j) , 4,05 (OCH3), 4,27 (3-CH2), 4,43 (-CH2Cl), 5,23 (H-6), 5,83 (H-7), 7,47 (5-tiatsolyyli).

Claims (2)

1. Välituotteet käytettäväksi valmistettaessa terapeuttisesti arvokkaita kefalosporiinijohdannaisia, joi-5 den yleinen kaava on I I i Sv CH3ON=C—CONH—-S' \ τ

10 N-1 ^_N J_CH-S-X1 A\ 0 τ H2N S^s^S coor1 15 jossa X1 on 1,2,5,6-tetrahydro-2-metyyli-5,6-diokso-as- triatsin-3-yyliryhmä tai 2,5-dihydro-6-R10-2-metyyli-5-okso-as-triatsin3-yyliryhmä ja R^ on vetyatomi tai -COOR^ vastaavasti R^O- on helposti hydrolysoituva esteri- tai eetteriryhmä, synisomeerina tai seoksena, jossa 20 syn-isomeeri on vallitsevana, sekä valmistettaessa näi den yhdisteiden suoloja tai sellaisten kaavan I mukaisten yhdisteiden hydraatteja, joissa R^ on vety, tai kaavan I mukaisten yhdisteiden suolojen hydraatteja, tunnettu siitä, että ne ovat 7-/2-(2-(suojattu-araino)-4-25 tiatsolyyli)-2-metoksi-iminoasetamidq7~kefalosporiini- johdannaisia, joiden yleinen kaava on II

30. S S ch3on = c—CONH—l-f X. 35 I 11 N-1 J_N J CH--S-X X \ ο^Ύ1- 2 RHN^^X S ^ COOH 67084 jos9a X on 1,2,5,6-tetrahydro-2-metyyli-5,6-diokso-aa-triatsin-3-yyliryhmä tai 2,5-dihydro-6-hydroksi-2-metyy-li-5-okso-as-triatsin-3-yyliryhmä, R on lohkaistavissa oleva suojaryhmä ja karboksiryhmä voi olla suojatussa 5 muodossa, jolloin kaavan II mukaiset yhdisteet ovat syn-isomeerina tai seoksena, jossa syn-isomeeri on vallitsevana .

2. Patenttivaatimuksen 1 mukainen kefalosporiini-johdannainen, tunnettu siitä, että se on (6R,7R)-10 1-/2-f2-(2-klooriasetamido)-4-tiatsolyyli7_2-(Z-metoksi- imino)asetamido7-3-//2,5-dihydro-6-hydroksi-2-metyyli-5-okso-as-triatsin-3-yyli)-tio7metyyli7“8-okso-5-tia-l-atsa-bisyklo/4,2,Q7okt-2-eeni-2-karboksyylihappo. 67084