FI59411C - Analogifoerfarande foer framstaellning av ett penamderivat anvaendbart saosom ett antibakteriskt medel - Google Patents

Description

---- ffc1 .... KUULUTUSJULKAISU

lBJ (11) UTLÄGGNINGSSKRIFT 5941 1 C Patentti myönnetty 10 03 1031 gfa Patent meddelat (51) K*.ik.3/te«.a3 0 07 D 499/64, 499/28

SUOMI —FINLAND (21) Ptt*nttrh»k»mu« —P«t*nUn*öknin| 302U/7U

(22) Hakcmltptlvf — AnsttVnlnpdtf l6.lO.7li (23) Alkupllvt—>GlMghttsdtg l6.lO.7li (41) Tullut |ulkiMka1 — Uhrit offtntllg l8.0li 75 PUMtkl. ffcilfrthallltM, (44) H k^Mu.kte,

Patent» och reglsterstyralsan ' Ansakin uttsgd oeh utUkrifun pubikmd 30.0U.8l (32)(33)(31) ^ry4««y ·*»βίΐ«·«»—*·|Μ prterit·» 17.10.73 12.03.7U usa(us) U07097, U50U35 (71) Pfizer Inc., 235 East U2nd Street,New York, N.Y., USA(US) (72) Wayne Ernest Barth, East Iyne, Connecticut, USA(US) (7U) Oy Kolster Ab (5U) Analogiamenetelmä antibakteerisena aineena käytettävän penaamijohdannaisen valmistamiseksi - Analogiförfarande för framställning av ett penamderivat användbart säsom ett antibakteriskt medel Tämän keksinnön kohteena on analogiamenetelmä antibakteerisena aineena käytettävän penaamijohdannaisen valmistamiseksi, jolla on kaava 0

7 m CH

R-CH-C-NHX S3 m2 j f p-CH3 QJ-N-^C^N]( \ //

N—N

H

ja sen farmaseuttisesti hyväksyttävien suolojen valmistamiseksi, jossa kaavassa 7 ....

R on 2-tienyyli, 3-tienyyli tai (RT) / 2 59411 T 7 jossa (R )1 ja (R )” ovat kukin vety- tai klooriatomeja tai hydroksi- tai amino-ryhmiä. Menetelmälle on tunnusomaista, että penaami, jolla on kaava: “z S_/s CH3 f PCH3

0^ N ' χ ^N ''"N

\ //

N“ N

H

saatetaan asylointireaktioon hapon kanssa jolla on kaava:

RT-CH-C0-0H

nh2 tai sen reaktiivisen johdannaisen kanssa sinänsä tunnetulla tavalla, USA-patenteissa n:o 3 *+27 302 ja 3 *+68 97*+ esitetään penaami-johdannaisia, joissa esiintyy tetratsolyyli-ryhmä osana 6-asyyliamino-substituentista; kuitenkin ovat tämän keksinnön mukaisesti valmistetut yhdisteet ainutlaatuisia siinä, että niissä tetratsolyyli-ryhmä on suoraan sidottu penaami-ytimeen.

Suurella osalla aiemmin tunnetuista penaami-yhdisteistä on karboksyylihappo-ryhmä (tai tämän suola) kiinnittynyt 3-asemaan. Kuitenkin tunnetaan myös penaami-yhdisteitä, joissa C-3-asemassa on muita karboksyylihappojohdannaisia. Penaami-3-karboksyylihapon estereitä ovat esittäneet mm. Kirchner et ai., Journal of Organic Chemistry, 1*+, 388 (l9*+9); Carpenter, Journal of the American Chemical Society, 70, 296*+ (19*+Ö); Johnson, Journal of the American Chemical Society, 75, 3636 (1953); Bernden et ai., Journal of the Chemical Society (London), 3733 (1953) ja Jansen ja Russell, Journal of the Chemical Society (London), 2127 (1965); ja penaami-3-karboksamideja ovat esittäneet esimerkiksi Holysz ja Stavely, Journal of the American Chemical Society, 72, bj60 (1950) ja Huang et ai,, Antimicrobial Agents and Chemotherapy, 1+93 (1963). Peron et ai., Journal of Medicinal Chemistry, 7, *+83 (196U) valmistivat useita 6-(substituoitu amino)-2,2-dimetyyli-penaami-3-karboksyy-lihappo-atsideja, jotka tämän jälkeen muutettiin vastaaviksi 3~isosyanaateiksi ja 3-bentsyylikarbamaateiksi. Peron et ai., (loc.cit.) esittivät myös tiettyjä 3-(hydroksimetyyli)penaami-johdannaisia, Bentsyylipenisiniinin yksinkertaisen amidin dehydratointi tuottaa vastaavan nitriilin (Khoskhlov et ai., Doklady Akad.

Sei. Nauk S.S.S.R., 135, 875 (1960)). Yleensä ovat alan asiantuntijat olleet sitä mieltä, että modifiointi 3-asemassa ei todennäköisesti tuota parannettuja tuloksia.

3 59411 Välituotteiden valmistus on selitetty patenttihakemuksessa 80 2003.

Mukavuuden vuoksi identifioidaan keksinnön mukaisesti valmistetut yhdisteet "penaamiri'-johdannaisina, joka "penam" on määritelty Shehan et ai'in julkaisussa Journal of the American Chemical Society, 75, 3293 (1953), viitaten rakenteeseen:

j-rS

0 k

Vaikkakaan käsite penaami ei normaalisti sisällä mitään stereokemiallisia implikaatioita, vastaa tämän keksinnön mukaisesti valmistettujen penaami-yhdisteiden stereo-kemia luonnossa esiintyvien penisilliinien stereokemiaa. Tätä terminologiaa käyttäen määritellään hyvin tunnettu antibioottinen penisilliini G (bentsyylipenisil-liini), ö-^-fenyyliasetamidoJ^^-dimetyylipenaarai^-karboksyylihappona.

Kuten alan asiantuntija havaitsee, voi asyyliryhmä sisältää asymmetrisen keskuksen, joten valmistettu yhdiste voi olla D-, L- tai DL-muodossa, jotka kaikki ovat keksinnön piiriin kuuluvia.

Keksinnön mukaisessa menetelmässä käytetty asylointiaine on edullisesti happohalogenidi, kuten happokloridi; sopiva määrä on noin yksi molaarinen ekvivalentti. Liuottimena on edullisesti kloorattu hiilivety, esim. kloroformi tai metyleenikloridi; eetteri, esim. tetrahydrofuraani tai 1,2-dimetoksietaani; esteri, esimerkiksi etyyliasetaatti tai butyyliasetaatti; alempi-alifaattinen ketoni, esimerkiksi asetoni tai metyylietyyliketoni; tai tertiäärinen amidi, esimerkiksi Ν,Ν-dimetyyliformamidi tai N-metyylipyrrolidoni; sopiva lämpötila on noin -Uo -noin 30°C ja edullisesti noin -10 - noin 10°C; mahdollisesti noin yksi mooliekvi-valentti happoa sitovaa ainetta, esim, trietyyliamiinia, pyridiiniä tai natriumbikarbonaattia, on läsnä. Reaktio kulkee loppuun lyhyessä ajassa, ts. noin tunnissa. Happohalogenidi lisätään lähtöaineen vesiliuokseen tai liuokseen veden ja muun inertin liuottimen seoksessa ympäristön lämpötilassa tai hieman alhaisemmassa lämpötilassa, jolloin liuottimen pH pidetään alueella noin 6,0 - noin 9,0 ennen lisäystä, sen aikana ja sen jälkeen.

Toinen käyttökelpoinen karboksyylihapon johdannainen on seka-anhydridi.

Tässä tapauksessa sopivan karboksyylihapon karboksylaattisuolaa käsitellään noin yhdellä mooliekvivalentilla alempi-alkyyliklooriformiaät.tia reaktiolle inertissä, aproottisessa orgaanisessa liuottimessa, lämpötila-alueella noin -20 - noin 20°C ja edullisesti lämpötilassa 0°C. Sopivia suoloja tähän menetelmään ovat alkali-metalli suolat , kuten natrium- ja kaliumsuolat, ja tertiääriset amiinisuolat, kuten trietyyliamiini-, tributyyliamiini-, N-etyylipiperidiini-, N,N-dimetyylianiliini-, N-metyylimorfoliini- ja pyridiinisuolat; ja sopivia liuottimia ovat esimerkiksi kloroformi, metyleenikloridi, asetonitriili, tetrahydrofuraani, dioksaani ja * 59411 Ν,Ν-dimetyyliformamidi. Näin muodostunutta karboksyylihappo-hiilihappo-seka-anhydridiä käytetään tavallisesti in situ. Asylointi suoritetaan tavallisesti sekoittamalla ennalta valmistetun seka-anhydridin ja lähtöaineen liuokset; lähtöaine on edullisesti tertiäärisenä amiinisuolana, esimerkiksi trietyyliamiinisuolana, Asylointi suoritetaan tavallisesti lämpötila-alueella noin -30 - noin 20°C ja edullisesti lämpötilassa noin -10°C ja se vaatii tavallisesti muutamia tunteja edetäkseen loppuun, Useimmissa tapauksissa saatetaan seka-anhydridi ja lähtöaine kosketuksiin oleellisesti moolisuhteessa 1:1.

Käyttökelpoisia aktiivisia estereitä ovat esimerkiksi fenyyliesterit, kuten p-nitrofenyyli- ja 2,k,5-trikloorifenyyliesterit, tioesterit, kuten tiolifenyyli-ja tiolimetyyliesterit; ja N-hydroksiesterit, kuten N-hydroksisukkinimidi- ja N-hydroksiftalimidiesterit. Estereitä valmistetaan alalla hyvin tunnetuilla menetelmillä, ja asylointi suoritetaan sopivasti liuottamalla aktiivinen esteri ja lähtöaine tai tämän suola dipolaariseen aproottiseen liuottimeen, kuten N,N-dimetyyliformamidiin, Ν,Ν-dimetyyliasetamidiin tai N-metyylipyrrolidoniin. Liuos jätetään ympäristön lämpötilaan useiksi tunneiksi, esimerkiksi yli yön, ja sitten tuote eristetään standardimenetelmillä. Monissa tapauksissa voidaan tässä prosessissa käytetty aktiivinen esteri korvata vastaavalla happoatsidilla.

5-monosubstituoidun tetratsolin happamen luonteen ansiosta on uusilla yhdisteillä kyky muodostaa suoloja emäksisten aineiden kanssa ja näitä suoloja, joihin tässä hakemuksessa viitataan yleisesti "tetratsolaatti"-suoloina, pidetään tämän keksinnön piiriin kuuluvina. Suoloja voidaan valmistaa standardimenetelmillä, kuten saattamalla happamet ja emäksiset komponentit kosketuksiin, tavallisesti moolisuhteessa 1:1, vesipitoisessa, ei-vesipitoisessa tai osittain vesipitoisessa väliaineessa, tilanteen mukaan. Ne otetaan talteen suodattamalla, seostamalla ei-liuottimella, jota seuraa suodatus, haihduttamalla liuotin, tai vesiliuosten tapauksessa lyofilisoimalla. Emäksiset aineet, joita edullisesti käytetään suolan muodostukseen kuuluvat sekä orgaanisiin että epäorgaanisiin tyyppeihin, ja näitä ovat ammoniakki, orgaaniset amiinit, alkalimetallihydroksidit, -karbonaatit, -bikarbonaatit, -hydridit ja -alkoksidit, sekä maa-alkalimetallihydroksidit, -karbonaatit, -hydridit ja -alkoksidit. Edustavia esimerkkejä tällaisista emäksistä ovat primaariset amiinit, kuten n-propyyliamiini , n-butyyliamiini, aniliini, sykloheksyyliamiini, bentsyyliamiini, p-toluidiini ja oktyyliamiini; sekundaariset amiinit, kuten dietyyliamiini, N-metyylianiliini, morfoliini, pyrrolidiini ja piperidiini; tertiääriset amiinit, kuten trietyyliamiini, Ν,Ν-dimetyylianiliini, N-etyylipiperidiini, N-metyylimorfoliini ja 1 ,5_diatsabisyklo/i+ ,3,θ/ηοη-5-eeni; hydroksidit, kuten natriumhydroksidi, kaliumhydroksidi, ammoniumhydroksidi ja bariumhydroksidi; alkoksidit, kuten natriumetoksidi ja kaliumetoksidi; hydridit, kuten kalsiumhydridi ja natriumhydridi; karbonaatit, kuten kaliumkarbonaatti ja 5941 1 natriumkarbonaatti; ja bikarbonaatit, kuten natriumbikarbonaatti ja kaliumbi- karbonaatti.

Edelleen voivat emäksisen ryhmän sisältävät yhdisteet muodostaa happo-additiosuoloja. Mainittuja happo-additiosuoloja on myös pidettävä tämän keksinnön piiriin kuuluvina. Esimerkkejä erityisen arvokkaista happo-additiosuoloista ovat: hydrokloridi-, hydrobromidi-, fosfaatti-, perkloraatti-, sitraatti- tartraatti-, pamoaatti-, glutaraatti-, bentsoaatti-, sulfaatti-, laktaatti- ja aryylisulfonaatti-suolat.

Tämän keksinnön mukaisesti valmistetut antibakteeriset penaami-yhdisteet osoittavat aktiivisuutta suuresti erilaisia gram-positiivisia ja gram-negatiivisia bakteereita vastaan. In vitro-aktiivisuus voidaan todeta tavanomaisella kaksinkertaisella sarjalaimennustekniikalla aivoytimen infuusio-ravintoliemessä (Difco). Ravintoliemi ympätään bakteerikulttuurilla ja koe-antibiootilla ja sitten sitä inkuboidaan yli yön. Seuraavana päivänä koe luetaan visuaalisesti. Minimi-inhibi-toorinen väkevyys (MIC) on antibiootin alhaisin pitoisuus, joka estää sameuden, ts. joka estää mikro-organismin kasvun.

Tämän keksinnön mukaisten yhdisteiden in vivo aktiivisuus tekee ne sopiviksi bakteerien aiheuttamien infektioiden kontrolloimiseen imettäväisillä, ihminen mukaan lukien, sekä suun kautta että parenteraalisesti tapahtuvalla annostuksella. Yhdisteille löytyy laajaa käyttöä sellaisten infektioiden kontrolloimisessa, joita herkät gram-positiiviset ja gram-negatiiviset bakteerit aiheuttavat ihmisissä.

Keksinnön mukaisella menetelmällä valmistetuilla yhdisteillä on laaja vaikutusalue, ja ne tuhoavat erikoisen tehokkaasti Klebsiella pneumoniae-organis-mia, johon ampisilliini ei yleensä vaikuta, Sillä, että keksinnön mukaisella menetelmällä valmistetut yhdisteet tehoavat useiden eri organismien aiheuttamiin infektioihin, on suuri merkitys, koska käytettäessä antibiootteja, jotka tehoavat mahdollisesti vain yhteen patogeeniseen bakteeriin, voi syntyä superinfektioita. Tällaiset superinfektiot muodostavat nykyään vaikean kliinisen ongelman. Klebsiella pneumoniae-organismin on havaittu esiintyvän muiden gram-negatiivisten organismien, kuten Proteus pseudomonas- ja Enterobacter-lajin yhteydessä useiden eri organismien aiheuttamissa infektioissa, erikoisesti virtsatieinfektioissa. Keksinnön mukaisella menetelmällä valmistetuilla yhdisteillä on siten yhtä laaja vaikutusspektri kuin ampisilliini11a, mutta ne vaikuttavat huomattavasti tehokkaammin tiettyyn yleiseen patogeeniseen mikro-organismiin.

Taulukossa II on esitetty keksinnön mukaisesti valmistettujen yhdisteiden sekä vertailuaineen aktiivisuudet.

6 59411

Tutkitut yhdisteet olivat:

7 /“Y

Yhdiste A: R' on \\ J—

Yhdiste B: R7 on Η,,Ν —^

Yhdiste C: R7 on ^

Yhdiste D: RT on

Yhdiste E: R7 on H0 —'

Cl

Yhdiste F: R7 on _/ \_ ηοΛ_/

Vertailuaine: /Ύ 2 /H3

\ // f-0-™ N.,_/ S V

^-' M ] ^CH

. .. )/-»-k

Ampisilliini O' COOH

Menetelmä

Minimi-inhibitooriset pitoisuudet (MIC) (^ig/ml) määritettiin yhdisteille A-F ja ampisilliinille käyttäen tavanomaista laimennusmenetelmää aivoytimen infuu-sioagarissa ja moninkertaista inokulaattoria (Steers et ai., Antibiotics and Chemotherapy, 9., 307 /19597; Ericsson et ai. Acta, Pathol. Microbiol. Scand.,

Sect. B, 217 /Suppl^, 6U Zl97l7)· Tavanomainen viljelyerä sisälsi noin 20 000 organismia. Inkubaatioaika oli 18 tuntia 37°C:ssa.

τ 59411

f—I LO VO MD CVI

•H <— - OI 1Λ ΙΛ r- to UJ.H "·>««"" "

• HS OONO-— -— POOOOOOOOOOOLOIOOJIOLO

ft-H OOOtOOOOOOOOJOJr-ojOI

a -H Nl Nl WWW OJ .OJ «- OJ -- T-

-¾ H A /s A A

• H " * <D I M ·Η — -PftAjrHcooNONOJto to 3 tn o ^ oo ro -- oj 10 oj lo lo lo 3 •H II h >i " » * * * * * OJ OJ O] LO LO ,¾

Tt tJBOOLOOOONOOJOOOOONOOLOO ·> ·> «- " « p ÄffilAdJ OJ -- O O LO O O OOJONONONOOJOJcd >H ,3 <P OJ OJ OJ OJ OJ r- -------3

I AA

• H

3 O I O Ή H H to M M ^ DIO-HOONOOnOJOJ OI LO w w -poo3HOJOJlooo----io »- w in ^ r- ia m tn 'b^i •Hiis^oO'-oroooojoioLooooooMDOjroroojoi la Ti ,3 3 t-OOJOJOO o -- ----01

X! K I OJ OJ -— OJ OJ

^ — -P Λ A

CO rH »H

§ S £ tn K a

•H 3 S

> O 0)

H Ω -H

Hl« -P LO LO NO OJ OJ

p O 0) I LO LO LO -— <— LO

P £> .p ("b Λ * Λ #- «- * ^ L ta -~T-to--roooiooooooojoooLOLOLOLOLo

I CO ·Η II OJ OJOOOOO--OOOOJOJOJOJOJ

O I Ti OJi-r-T-OJ----'-

3 O ,3 K . Λ A o A

-P I—I ί>π -— ^

•H S

>

• rH

C H

£ C Ö CU <u

-P Ö O -H

<U *H -p O O CT\ CM CM MD LA LA

C0*H 0)1 OJ (\J LA n Γ- ^ LA OJ OJ LA IA

^ Cjj 4-5 OJ rs A A Π Λ A A A A A A

O cd tn ooojooopooooooooo--ononoojojio

r-ja -H II -- OOOOOOtOO o -— -— OJ

3 -H Tl r-Ol'-r-OJ'-OJ--

Eh £ £5 PS A o Λ

M O

M C

pq -h

5 «J §'H

^ -p | H ON ON LA OO LA LTN LA C\J LA LA

3 WftS OirOOJhOJW C\J CM OJ LA LA LA

^ ίρ-j M. a a a a a a a a a a a a a p 'd II Ö OOMDOMDVDLAOOOO onoooolamdmdojcm cm CÖ Ä rv- (U CM O O LA O O O CM t-t-t-

Eh >H^ Ch CM r- <- CM CM

^ A Λ A

•H

rH

e g e U U On CO On co

-p (p -— ΓΟ LO f— LO LO OO LO f— LOIOIOLO

U3 ******** * * * * * * *

• H II OOOJOOJOJOOOOOOOOOIiooOJOJOJOJ

-O τ- -— -— loOiOOOO O -— OI -— äkn! ojojoiojoj >-1 _1__A_Λ Λ_A___ LO OJ O NO LO NO OJ On Ht OO On to On t-~ On -— CO -- nj- On no

ΙΟ OIOOO-— NOOOJOt— ONOOt^r-Or-OOOO

gj p OOHJ-OOI0JO------00OOOOOOOOOO

-p di <;<<β;<<ί<:<<ί<<;Η<<;<οΩ<ι<<:η C a -—-—-— 0J-— OJOJOJOJCOCOrOJ-— CO 00 o— t— o—

Cd 3 O O O O LO tO LO LO LO LO LO LO LO LO LO LO LO NO VO NO VO

**J C

tn cd cd ai s tn en tn en en -h en en en <υ tu tu 3 ojoj 3 3 3 i—I OOO ededtd ·Η 330) ai a> a> cd ööö -h -h -h o tn <υ o cd

3 3 3 0 -H-H-Htd3S3 3 S tiO t)0 O

3 3 3 0 MtjDMTiOOO a O O O Cd 3 cd cd (d -H -H -H -H 3 3 3 -H a S S -H O 3 3 o

•H tj-ir-Hr—| r-J 3 3 3 -P 3 3 3 -H ,3 W (U (D rH

a tn tn U1 00000>a><l>3tL><l>aJBP-<DCdcdO

tn 333inoooocdcdcdP<33Ccdi»ja

•H 0003 p,p<p<hO-P3k3B

3 oooocdcdtdcdcntntntn 3 cd o o oi

cd OOOO-H-H-H-ncdcdcdcdcdedcdOcda-P-P-P

W) OOOOP,3j3P3B33HHrHaH OOO

3 OOOoooooOOOOHi—IH Hcdcdtdcd

0 (—I rH rH O -H »H -H -H aSSSdJtDtUtQtD *rj O P P

1 >>!>5>>Ρ33330000·Η·Η·Η33Ρ000 o Äj3ÄP<<Da)a)<i)TiTJTJT)cntntnajocd333 3 ΟιΛΡίΟ,Β,ΒΡΡ! 3 3 3 3 P P P -P a ^ O <» tu ,¾ 3cdcd3oooo(ij<iJti)o<iiajajOH3Ppp

•h -p-p-p.pcncncncncncncncnrHrHr-l3cdiUS.3S

S WCQCQCQWWWWCLiflHCHCqWWUdaHWCQW'WCiq 5941 1 8 γΗ • h ir\ CO ·Η "

•H G OJ O

fVH o is <υ -p

CO IA O

«H C\J O

Ti 1— Ä w ai

•P

CO LA O

•H OJ O

Ti «-

fC

CO rH

2 Ö Q

CO tj£ D

•H Λ -P

> —^ CO IA O

•H ·Η OJ O

•h JK Ti *- P O Λ 3 S S a) I co co O I m

Cl O -H

-PM CO

-P -H S O ^ CD J» ;3 cd ai cr\ cd

Cl -P * p, O ή co OJ o cd M Ή t— LTN -p 3 Ö T) E-< <D J3 cd

C X CO

• H CO

Cl Ή

Cd Ai cd ·Η a _ ce •H PP Ai

(h CO

CP CD CM ro

-P « I

·· co vo o o M -H O '— M Td i—

J3 *H

O !>h H

a; ° 3 co M 3

3 S

cd <: 3

E-C CD

ω a P CM Ή CO i— Cd

•H Λ M

Td 00 uo ja cm a >H tcö -- ^

CD

I O C~- On H

Cd Cc O O ·Η -P CD O O > q a m <

cd 3 o t— K

id ö e·— e—

•H

•H

Td

•H CD

tn Vh

H

§Ch cd

CD -H

ÖO -P CJ

Cc O Ö O cd cd I J3 Td

O O -H

Ch Ch fc»

Jd -PO

• H Ή Cl 2 O Ph 9 59411

Taulukko III

In vitro-aktiivisuus Kletsiella pneumoniae :11e MIC-arvo* (pg/ml)

Kanta-numero MIC-arvoX (ug/ml)_

Yhdiste A Ampisilliini-___trihydraatti 53A009 6,25 25 53A015 3,12 50 53A022 6,25 50 53A021 12,5 50 53A028 6,25 25 53A01+2 6,25 100 53AOW 3,12 1,56 53AOU7 6,25 50 53A056 12,5 50 53A063 25 >200 53A061+ 3,12 25 53A067 >200 >200 53A068 6,25 50 53A069 12,5 >200 53A076 12,5 50 53A077 >200 >200 53A079 25 50 53A082 25 100 x . -2 . .

Viljelmän laimennus oli 10 kaikissa tapauksissa 10 5941 1

Taulukko IV

_MIC-arvo* (μκ/ml)_

Kanta- Yhdiste B Yhdiste C Yhdiste D Yhdiste E Yhdiste F Ampisilliini numero 53A015 12,5 12,5 6,25 12,5 6,25 50 53A028 12,5 25 25 12,5 6,25 50 53A068 25 25 25 12,5 6,25 50 53A069 100 50 25 12,5 12,5 >200 53A070 >200 >200 > 200 >200 >200 >200 53A072 6,25 12,5 12,5 25 6,25 50 53A073 25 50 50 12,5 25 50 53A075 100 >200 >200 200 100 100 53A076 25 50 100 12,5 25 25 53A078 6,25 12,5 100 50 6,25 50 53A080 50 50 50 12,5 25 100 53A081 25 50 50 6,25 25 50 53A086 12,5 50 50 6,25 25 50 53A088 > 200 >200 > 200 > 200 >200 >200 53A089 25 25 25 25 12,5 50 53A090 6,25 3,12 3,12 6,25 3,12 25 53A091 25 50 12,5 6,25 25 50 53A093 6,25 25 25 3,12 3,12 50 x —2 .

Viljelmän laimennus oli 10 kaikissa tapauksissa 11 5941 1

Seuraavat esimerkit valaisevat keksintöä. Infrapunaspektri (IR) mitataan kaliumbromidi-kiekkoina (KBr-kiekkoina) tai Nujol-seoksina ja diagnostiset absorp-tioviivat ilmoitetaan aaltolukuina (cm ^). Ydinmagneettiset resonanssispektrit (NMR) mitataan arvolla 60 MHz liuoksille deuterokloroformissa (CDCl^), perdeutero-dimetyylisulfoksidissa (DMSO-d^) tai deuteriumoksidissa (D^O), ja piikkien asema ilmaistaan miljoonasosina (ppm) tetrametyylisilaanista tai natrium-2,2-dimetyyli-2-silapentaani-5-sulfonaatista alakenttään päin. Piikkien muodoille käytetään seu-raavia ilmaisuja: s, singletti; d, dupletti; t, tripletti; q, kvartetti; m, multipletti.

Esimerkki 1 6-(D-2-amino-2-fenyyliasetamido)-2,2-dimetyyli-3-(5-tetratsolyyli )penaami

Liuokseen, joka sisältää 23,8 ml etyyliklooriformiaatt'ia 600 ml:ssa asetonia, lisätään sekoittaen 25 ml N--metyylimorfoliinin 3-% liuosta asetonissa. Saatu liuos jäähdytetään lämpötilaan -40°C, ja sitten lisätään 75,2 g natrium-N-(2-metoksi-karbonyyli-1-metyylivinyyli)-D-2-amino-2-fenyyliasetaattia. Lämpötila säädetään arvoon -20°C ja sekoittamista jatketaan 28 lhimratin ajan. Liuos jäähdytetään uudelleen lämpötilaan -1+0°C ja siihen lisätään jääkylmä liuos, joka on valmistettu sus-pendoimalla 60,0 g 6-amino-2,2-dimetyyli-3-(5-tetratsolyyli)penaamia 250 ml:aan vettä ja säätämällä pH tämän jälkeen arvoon 7,0. Saatua liuosta sekoitetaan 30 minuutin ajan ilman lisäjäähdytystä, ja sitten asetoni poistetaan haihduttamalla vakuumissa. Vesipitoiseen jäännökseen lisätään yhtä suuri tilavuus tetrahydrofu-raania ja sitten lämpötilassa 5°C pH säädetään arvoon 1,5 laimealla kloorivety-hapolla. Seosta pidetään tässä lämpötilassa ja pH:ssa 30 minuutin ajan ja sitten tetrahydrofuraani poistetaan haihduttamalla vakuumissa. Vesipitoista jäännöstä uutetaan etyyliasetaatilla ja eetterillä ja uutteet heitetään pois. Jäljelle jäävän vesifaasin pH kohotetaan arvoon 5,^» jolloin tuote alkaa kiteytyä. Tunnin kuluttua se suodatetaan ja kuivataan. Raaka saanto on 68,8 g.

Tuote suspendoidaan veteen lämpötilassa 25°C ja pH alennetaan arvoon 1,5. Lyhyen ajan sekoittamisen jälkeen suodatetaan liukenemattomat materiaalit ja suo-dosta uutetaan eetterillä. Sitten vesiliuos jäähdytetään lämpötilaan 5°C ja pH säädetään arvoon 5j2. Saostunut kiinteä aine suodatetaan, jolloin saadaan 62,7 g (58,7 %-n saanto) 6-(D-2*-amino-2-fenyyliasetamido)-2,2-dimetyyli-3-(5-tetratso-lyyli)penaani-trihydraattia, sp. 201-202°C, +228,2 (1 % CH^OH:ssa). * IR (KBr-kiekko): 1780 cm 1 (^3-laktaami). NMR (DMS0-dg/D20:ssa): 7,60 ppm (s, 5H), 5,70 ppm (d, 1H), 5,55 ppm (d, 1H), 5,20 ppm (s, 1H), 5,15 ppm (d, 1H), 1,50 ppm (s, 3H), 0,90 ppm (s, 3H).

5941 1 12

Analyysi - laskettu: C^H^O^^S.SH^Orlle {%): C u,95i h 5,89·, N 22,9hi S 7,50 Löydetty {%): C U5,01; H 5,8U; N 22,81; S 7,3*». Natrium-N-(2-metoksikarbonyyli-1-metyylivinyyli)-D-2-amino-2-fenyyliasetaat-ti valmistetaan metyyliasetoasetaatista ja D-2-amino-2-fenyyli-etikkahaposta menetelmällä, jota ovat käyttäneet Long et ai. (J. Chem. Soc., London, Part C. 1920 (1971)) vastaavalle p-hydroksiyhdisteelle,

Samalla tavalla valmistettiin taulukossa V esitetyt yhdisteet.

Taulukko V

Yhdiste _ . TT5

„ Saanto IR

n:o *' R* (%) (cm ]) Alaviite 1 D 3-HOCgH^- 5 1776, 1686 1,2 2 L U-HOCgH^- 7 2 3 D (Γ I 28 1770 2 1* D 3-Cl-U-HOCgH3- UU 1783 1, 2 5 DL l+-ClCgH^- 7 1785, 1695 1 , 2, 3 6 DL 3-ClCgH^- 1U 1780, 1700 1, 2, 3 7 D | I 38 1770, 1680 2 \S^ 8 D U-NHgGgHj^- »t I77O 1, 2 9 D 3-NHgCgH^- 13 1775, 1650 2, k 10 DL 3,MH0) C,H - J 3 1770, 168!+ 2 X) . . ..

Luettelo yhdisteistä: 1. 6-(D-2-amino-2-^3-hydroksifenyyli7asetamido)-2,2-dimetyyli-3-(5~tetratso-lyyli)penaami 2. 6-(L-2-amino-2-^+-hydroksifenyyli7asetamido)-2,2-dimetyyli-3-(5-tetratso-lyyli)penaami 3. 6-(D-2-amino-2-/2-tienyyli7asetamido)-2,2,-dimetyyli-3-(5-tetratsolyyli)-penaami lt, 6-(D-2-amino-2-/3-kloori-U-hydroksifenyyli7asetamido)-2,2-dimetyyli- 3-(5_tetratsolyyli)penaami 5. 6-(DL-2-amino-2-/5-kloorifenyyli7asetamido)-2,2-dimetyyli-3-(5-tetratso-lyyli )penaami ' i3 5941 1 6. 6-(DL-2-amino-2-/3-kloorifenyyli7asetamido)-2,2-dimetyyli-3-(5“tetratsolyy-li)penaami 7. 6-(D-2-amino-2-/3~tienyyli7asetamido)-2 ,2-dimetyyli~3-( 5~tetratsolyyli )- penaami 8. 6-(0-2-βΜΪηο-2-/4-βχιιΐηοΓθηγ7ΐΐ7Β8θΐ8ΐιηΐ^ο)-2,2-0ΐιιιβΐ}ν1ΐ-3-( 5-tetratsolyy-li )penaami 9· 6-(D-2-amino-2-/3-aminofenyyli7asetamido)-2,2-dimetyyli-3-(5-tetratsolyy-li)penaami 10 · 6-(DL-2-amino-2-/3,4-dihydroksifenyyli7asetamido )-2,2-dimetyyli-3_ (5-tetratsolyyli)penaami

Alaviitteet taulukkoon V: 1. Isobutyyliklooriformiaattia käytetään seka-anhydridin muodostamiseen 2. Lähtö-enamiinit saadaan kondensoimalla sopivaa glysiiniä metyyliaseto-asetaatin kanssa menetelmällä, jonka ovat esittäneet Long, et ai. (Journal of the Chemical Society (London), Part C, 1920 (197 0). Kirjallisuudessa kuvatut ^-aminohapot valmistetaan julkaistuilla menetelmillä. Uudet (Χ,-aminohapot valmistetaan vastaavista aldehydeistä Strecker-synteesin kautta, tekniikalla, jonkaotoat esittäneet Greenstein and Winitz, "Chemistry of the Amino Acids", John Wiley and Inc.,

New York/London, 1961, ss. 698-700 ja näissä esitetyt viitteet. Strecker-synteesi tuottaa DL-aminohappoja, jotka jaetaan optisesti aktiivisiin isomeereihinsa tavanomaisella tavalla (kts. Greenstein and Winitz loc.cit., ss. 715~755» Nishimura, et ai., Nippon Kagaku Zasshi, 82, 1688 (1960 /Chemical Abstracts, 58, 11464 (1963)7); ja belgialainen patentti n:o 795 874).

3. Yhdiste eristetään trietyyliamiinisuolana 4. Aminoryhmät lähtöaineessa suojataan bentsyylioksikarbonyyliryhmillä liittämisen aikana ja ne poistetaan hydrogenolyysillä liittämisen jälkeen

Esimerkki 2 6-(£-2-amino-2-/It-hydroksifenyyli7a>setamido )-2,2-dimetyyli-3-( 5-tetratsolyyli )penaami

Liuokseen, joka sisältää 0,19 ml etyyliklooriformiaattia 15 ml:ssa kuivaa asetonia ja joka on jäähdytetty lämpötilaan 0°C, lisätään 1 tippa N-metyyliformo-liinia, jonka jälkeen lisätään 576 mg natrium-N-(2-metoksikarbonyyli-1-metyyli-vinyyli )-D-2-amino-2-(4-hydroksifenyyli)asetaattia (Long et ai., Journal of the Chemical Society (London) Part C, 1920 (1970). Seosta sekoitetaan vielä 30 minuutin ajan ja sitten se jäähdytetään lämpötilaan -35°C. Sitten siihen lisätään 6-amino- 2,2-dimetyyli-3-(5-tetratsolyyli)penaamin natriumsuolan jääkylmä liuos, joka on valmistettu lisäämällä 10—JS natriumhydroksidia suspensioon, joka sisältää 436 mg 5 *i' .· u 59411 6-amino-2,2-dimetyyli-3~(5-tetratsolyyli)penaamia 5 ml:ssa vettä (jotta saadaan pH 7,8), jota seuraa laimentaminen 25 ml;lla asetonia, Jäähdytyshaude poistetaan ja reaktioseosta sekoitetaan vielä 30 minuutin ajan, Tämän jälkeen asetoni poistetaan haihduttamalla alennetussa paineessa ja sitten vesipitoiseen jäännökseen lisätään 20 ml metyyli-isobutyyliketonia. Kaksifaasinen systeemi jäähdytetään lämpötilaan 10°C, tehdään happamaksi pH-arvoon 0,9 laimealla kloorivetyhapolla ja sitten sitä sekoitetaan lämpötilassa 10°C yhden tunnin ajan. Metyyli-isobutyyliketonifaasi heitetään pois, Vesifaasin pH nostetaan arvoon 6,6 ja sitten sitä pidetään jääkaapissa 3 tunnin ajan. Muodostunut saostuma suodatetaan, jolloin saadaan 320 mg 6-(D-2-amino-2-/U-hdyroksifenyyli7asetamido-2,2-dimetyyli-3-(5-tetratsolyyli)-penaamia. Tuotteen infrapunaspektri (KBr-kiekko) osoittaa absorptioita kohdilla 1775 cm ^ (fb -laktaamikarbonyyli) ja 1680 cm ^ (amidi I-juova), NMR-spektri (DMS0-d6/D20) osoittaa absorptioita kohdilla 7»35 ppm ja 6,85 ppm (2 duplettia, aromaattiset vedyt), 5»60 ppm (kvartetti, C-5- ja C-6-vedyt), 5»10 ppm (multipletti , bentsyyli-vety ja C-3-vety), 1,U5 ppm (singletti, C-2-metyyli-vedyt) ja 0,95 ppm (singletti, C-2-metyyli-vedyt).

Esimerkki 3 6-(D-2-amino-2-/^-hydroksifenyyli7asetamido)-2,2-dimetyyli-3~(5-tetratsolyyli )penaamin kaliumsuola

Liuokseen, joka sisältää 1,9*+ g 6-(.D-2-amino-2-A-hydroksifenyyli7asetamido)- 2,2-dimetyyli-3-(5-tetratsolyyli)penaamia 100 ml:ssa metanolia, lämpötilaan -30°C jäähdytettynä lisätään tipoittain 5 ml kaliumhydroksidin 1,0-n liuosta metanolissa. Seoksen annetaan lämmetä lämpötilaan 0°C, ja sitten se lisätään tipoittain sekoittaen 700 ml:aan eetteriä. Saostunut kiinteä aine poistetaan suodattamalla ja kuivataan korkeassa vakuumissa. Tämä tuottaa 1,65 g (76 %\n saanto) otsikon mukaisen yhdisteen kaliumsuolaa, sp, 185°C (haj.),

Kun yllä esitetty menettely toistetaan, paitsi että kaliumhydroksidi korvataan ekvimolaarisella määrällä natriumhydroksidia, on tuote 6-(D-2-amino-2-A-hydroksifenyyli7asetamido)-2,2-dimetyyli-3-( 5-tetratsolyyli )penaamin natrium-suola.

Esimerkki U

6-(D-2-amino-fenyyliasetamido)-2,2-dimetyyli-3~(5-tetratsolyyli)penaami-hydrokloridi

Suspensiota, joka sisältää 50 mg 6-(D-2-«mino-2-fenyyliasetamido)-2,2-dimetyyli-3-(5-tetratsolyyli)penaamia 2 ml:ssa de-ionisoitua vettä, sekoitetaan 5 minuutin ajan ympäristön lämpötilassa ja sitten pH säädetään arvoon 2,^5 laimealla kloorivetyhapolla, Näin saatu liuos lyofilisoidaan välittömästi, jolloin saadaan 52 mg 6-(D-2-amino-2-fenyyliasetamido)-2,2-dimetyyli-3-(5-tetratsolyyli)penaami-hydrokloridia keveänä valkoisena kiinteänä aineena, »y

Claims (3)

15 5941 1

1. Analogiamenetelmä antibakteerisena aineena käytettävän penaamijohdannaisen valmistamiseksi, jolla on kaava: RT-CH-C-NH^ / S \/'CH3 NHp | f PCH3 j-N-k

0. N \ // h"-11 ja sen farmaseuttisesti hyväksyttävien suolojen valmistamiseksi, jossa kaavassa 7 ..... R on 2-tienyyli, 3-tienyyli tai ?3f> (R7)" 7 7 jossa (R )· ja (R )" ovat kukin vety- tai klooriatomeja tai hydroksi- tai amino-ryhmiä, tunnettu siitä, että penaami, jolla on kaava: NH0 S CH. 2 -v,_3 I ^CH3 o J--N \ „ \ // N —N h/ saatetaan asylointireaktioon hapon kanssa, jolla on kaava: R7-CH-CO-OH nh2 tai sen reaktiivisen johdannaisen kanssa sinänsä tunnetulla tavalla.

2. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä 6-(D-2-amino-2-fenyyliasetamido)- 2,2-dimetyyli-3-(5-tetratsolyyli)penaamin valmistamiseksi, tunnettu siitä, 5941 1 l6 että käytetään kaavan // \ CH-CO-OH \=J nh2 mukaista asylointiainetta tai sen reaktiivista johdannaista.

3. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä 6-(D-2-amino-/£-hydroksifenyyli7-asetamido)-2,2-dimetyyli-3-(5_tetratsolyyli)penaamin valmistamiseksi, tunnet-t u siitä, että käytetään kaavan HO-^ y-CH-CO-OH \=/ »h2 mukaista asylointiainetta tai sen reaktiivista johdannaista. 17 5 941 1