FI119513B - Muokatut hydroksipolymeerikonjugaatit, joilla on tappava vaikutus tuumorisoluihin - Google Patents

Muokatut hydroksipolymeerikonjugaatit, joilla on tappava vaikutus tuumorisoluihin Download PDF

Info

Publication number
FI119513B
FI119513B FI20075158A FI20075158A FI119513B FI 119513 B FI119513 B FI 119513B FI 20075158 A FI20075158 A FI 20075158A FI 20075158 A FI20075158 A FI 20075158A FI 119513 B FI119513 B FI 119513B
Authority
FI
Finland
Prior art keywords
dextran
modified
conjugate according
guanidine
aminoguanidine
Prior art date
Application number
FI20075158A
Other languages
English (en)
Swedish (sv)
Other versions
FI20075158A0 (fi
FI20075158A (fi
Inventor
Anders Holmberg
Lennart Meurling
Original Assignee
Dextech Medical Ab
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Dextech Medical Ab filed Critical Dextech Medical Ab
Publication of FI20075158A0 publication Critical patent/FI20075158A0/fi
Priority to FI20075158A priority Critical patent/FI119513B/fi
Priority to MX2009009533A priority patent/MX2009009533A/es
Priority to EP08717461A priority patent/EP2131867B1/en
Priority to PCT/EP2008/052714 priority patent/WO2008107471A2/en
Priority to US12/043,503 priority patent/US8106185B2/en
Priority to BRPI0808502-1A priority patent/BRPI0808502B1/pt
Priority to CN2008800070384A priority patent/CN101678121B/zh
Priority to CA2679960A priority patent/CA2679960C/en
Priority to JP2009552208A priority patent/JP5340964B2/ja
Publication of FI20075158A publication Critical patent/FI20075158A/fi
Application granted granted Critical
Publication of FI119513B publication Critical patent/FI119513B/fi
Priority to IL200756A priority patent/IL200756A/en

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C08—ORGANIC MACROMOLECULAR COMPOUNDS; THEIR PREPARATION OR CHEMICAL WORKING-UP; COMPOSITIONS BASED THEREON
    • C08B—POLYSACCHARIDES; DERIVATIVES THEREOF
    • C08B37/00—Preparation of polysaccharides not provided for in groups C08B1/00 - C08B35/00; Derivatives thereof
    • C08B37/0006—Homoglycans, i.e. polysaccharides having a main chain consisting of one single sugar, e.g. colominic acid
    • C08B37/0009—Homoglycans, i.e. polysaccharides having a main chain consisting of one single sugar, e.g. colominic acid alpha-D-Glucans, e.g. polydextrose, alternan, glycogen; (alpha-1,4)(alpha-1,6)-D-Glucans; (alpha-1,3)(alpha-1,4)-D-Glucans, e.g. isolichenan or nigeran; (alpha-1,4)-D-Glucans; (alpha-1,3)-D-Glucans, e.g. pseudonigeran; Derivatives thereof
    • C08B37/0021—Dextran, i.e. (alpha-1,4)-D-glucan; Derivatives thereof, e.g. Sephadex, i.e. crosslinked dextran
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K51/00—Preparations containing radioactive substances for use in therapy or testing in vivo
    • A61K51/02—Preparations containing radioactive substances for use in therapy or testing in vivo characterised by the carrier, i.e. characterised by the agent or material covalently linked or complexing the radioactive nucleus
    • A61K51/04—Organic compounds
    • A61K51/06—Macromolecular compounds, carriers being organic macromolecular compounds, i.e. organic oligomeric, polymeric, dendrimeric molecules
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/13—Amines
    • A61K31/155—Amidines (), e.g. guanidine (H2N—C(=NH)—NH2), isourea (N=C(OH)—NH2), isothiourea (—N=C(SH)—NH2)
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/70—Carbohydrates; Sugars; Derivatives thereof
    • A61K31/715—Polysaccharides, i.e. having more than five saccharide radicals attached to each other by glycosidic linkages; Derivatives thereof, e.g. ethers, esters
    • A61K31/716—Glucans
    • A61K31/721—Dextrans
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
    • A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
    • A61K47/54—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an organic compound
    • A61K47/555—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an organic compound pre-targeting systems involving an organic compound, other than a peptide, protein or antibody, for targeting specific cells
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
    • A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
    • A61K47/56—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an organic macromolecular compound, e.g. an oligomeric, polymeric or dendrimeric molecule
    • A61K47/61—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an organic macromolecular compound, e.g. an oligomeric, polymeric or dendrimeric molecule the organic macromolecular compound being a polysaccharide or a derivative thereof
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A61P35/04—Antineoplastic agents specific for metastasis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Optics & Photonics (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Materials Engineering (AREA)
  • Polymers & Plastics (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Medicinal Preparation (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
  • Polysaccharides And Polysaccharide Derivatives (AREA)

Description

119513
Muokatut hydroksipolymeerikonjugaatit, joilla on tappava vaikutus tuumorisoluihin 5 Keksinnön mukaiset muokatut hydroksipolymeerikonjugaatit ovat agmatiini tai aminoguanidiini -dekstraanikonjugaatteja, joilla on tuumoreita tappava vaikutus. Keksintö koskee myös menetelmää mainittujen konjugaattien valmistamiseksi sekä niiden käyttöä.
10 Guanidiiniyhdisteillä on monia kiinnostavia ja tärkeitä biolääketieteellisiä vaikutuksia ja tämän seurauksena useita käyttöjä. Niitä käytetään esimerkiksi vapaiden radikaalien poistajina, typpioksidisyntaasin (NOS) inhibiittoreina estämään typpioksidin muodostumista. On tunnettua, että niillä on tiettyjä antiproliferatiivisia vaikutuksia soluihin. Guanidiineja käytetään myös "vanhenemista estävinä" lääkkeinä, jossa vaikutus 15 saavutetaan suojautumalla alhaisen tiheyden lipoproteiinin hapettumiselta, estämällä ateroskleroottisten vammojen muodostuminen, hidastamalla diabeteksen kudoksia vaurioittavia vaikutuksia, esim. kardiovaskulaarisia vaurioita, inhiboimalla kehittyneen glykaation lopputuotteiden (AGE:t) muodostumista, kuten seuraavissa tieteellisissä julkaisuissa on esitetty (Yildiz et ai, Br J Pharmacol, 1998 kesäkuu; 124 (5):905-910; 20 Scaccini et ai., J Lipid Res, 1994, voi. 35, 1085-1092; Higashi et ai., J Biochem, 2004, > « V.· voi. 136, nro. 4, 533-539; Szende et ai., Cancer Cell Int, 2001, 1:3; Sell et ai, J Gerontol a :.·: : Soc Am, 2001, 56: B4Ö5-B411; Wang et ai., World J Gastroenterol. 2005, kesäkuu 7:11,
’ ' (25) 3830-3833; Zhang et ai, World J Gastroenterol. 2001, kesäkuu 7, 3):331 - 334; JP
♦ · ; “ ’ Beisswenger, Dartmouth Med, http//dartmed.dartmouth.edu/summerOO/html/bench_to_ 0 1 \ ” 25 bedside.shtml. Aminoguanidiinia toimitetaan tällä hetkellä reseptivapaana lääkkeenä # 0 *·· Yhdysvalloissa ja sen roolia erilaisten sairauksien hoidossa tutkitaan kliinisissä . „ tutkimuksissa.
i * J
Yli viiden vuosikymmenen ajan dekstraani on ollut vakiintunut lääkeaine, jota käytetään 30 estämään hypovoleemista sokkia, estämään emboliaa ja parantamaan mikroverenkiertoa.
Dekstraani ja sen myrkyttömät ominaisuudet ja korkea sietokyky on dokumentoitu erittäin hyvin (AS Segal, 1964, teoksessa: Modem medical monographs, toim. Wright, IS, Green 2 119513 & Stratton, NY, Lontoo, s. 5-17). Näin ollen sitä käytetään usein esimerkkinä fannaseuttisesti sovellettavissa olevista hydroksipolymeereistä.
5
Guanidiiniyhdisteillä ja dekstraaneilla ei ole juuri lainkaan toksista vaikutusta tuumorisoluihin, kuten kuviossa 1 on esitetty. Nyt on kuitenkin yllättäen havaittu, että silloin kuin guanidiiniyhdisteet on konjugoitu kovalenttisesti aktivoituun hydroksipolymeeriin, niillä esiintyy voimakasta antituumorista vaikutusta, joka on 10 vastaava tai joillakin annosteluilla jopa voimakkaampi kuin perinteisten antituumorilääkkeiden, kuten Adriamycin®:in vaikutus.
Keksinnön mukainen muokattu hydroksipolymeerikonjugaatti on agmatiini tai aminoguanidiini -dekstraani, jolla on tuumorisoluja tappava vaikutus. Muokattu 15 hydroksipolymeerikonjugaatti on hydroksipolymeeri, joka on substituoitu guanidiiniyhdisteillä, joilla on vähintään yksi vapaa aminoryhmä, ja jotka on yhdistetty kovalenttisesti hydroksipolymeeriosan aktivoituihin hydroksyyliryhmiin.
, e Keksinnön mukaiset guanidiiniyhdisteet ovat agmatiini tai aminoguanidiini ja • e * ' 20 hydroksipolymeeriosa on dekstraani, jonka molekyylipaino on 103-106 Daltonia ja joka aktivoidaan ennen substituointia mainituilla guanidiiniyhdisteillä.
y[ ’ Muokattu hydroksipolymeerikonjugaatti voi lisäksi käsittää kovalenttisesti yhdistettyjä I* * > ,·*, funktionaalisia ryhmiä, mukaan lukien radionuklidit, terapeuttiset yhdisteet, syöpälääkkeet » t i 9 | 25 jne.
Muokattu hydroksipolymeerikonjugaatti on edullisesti guanidiini-dekstraanikonjugaatti, jonka keskimääräinen molekyylipaino on noin 70 kD ± 25 kD ja jossa 15-60 %, edullisesti 20-50 %, dekstraanin glukoosiosista on substituoitu guanidiiniyhdisteillä 30 agmatiini tai aminoguanidiini, joissa on vähintään yksi vapaa aminosivuryhmä. Mainitut guanidiiniyhdisteet on yhdistetty kovalenttisesti mainitun dekstraanin aktivoituihin hydroksyyliryhmiin.
3 119513
Esillä oleva keksintö koskee myös mainittujen guanidiinihydroksipolymeerikonjugaattien käyttöä lääkkeinä, erityisesti valmistettaessa lääkkeitä tuumorien hoitamiseen. Lääkkeet ovat tuumoreita tappavia koostumuksia, jotka käsittävät keksinnön muokattua 5 hydroksipolymeerikonjugaattia'ja vähintään farmaseuttisesti hyväksyttävää adjuvanttia. Lääkkeitä tai tuumoreita tappavia koostumuksia voidaan annostella paikallisesti, intravesikaalisesti, alueellisesti, peritoneaalisesti, intratuumorisesti, systeemisesti tai intravenoosisesti.
10 Esillä olevassa keksinnössä esitetään myös menetelmä muokatun agmatiini tai aminoguanidiini -dekstraanikonjugaatin valmistamiseksi. Esillä olevassa menetelmässä guanidiiniyhdiste, jolla on vähintään yksi vapaa aminoryhmä, sekoitetaan eluentin kanssa, joka on saatu puhdistettaessa aktivoitua dekstraania geeli suodatuksen avulla. Dekstraani aktivoidaan hapetusreaktiolla, jossa perjodaattisuolaa lisätään vesipitoiseen liuokseen, 15 joka käsittää mainittua hydroksipolymeeriä, jonka jälkeen lisätään konsentroitua rikkihappoa ja reaktio lopetetaan lisäämällä etyleeniglykolia. Tämän mukaisesti aktivoitu hydroksipolymeeri puhdistetaan seuraavaksi geelisuodatuksen avulla.
Kuviossa 1 on esitetty dekstraanin ja aminoguanidiinin toksiset vaikutukset verrattuna * * * / ' 20 antrasykliiniin = Adriamycin®:iin, käyttämällä eläviä uroteelisyöpäsoluja (RT4, ATCC, e » s ] Manassas, USA). Y-akseleilla on esitetty prosentuaalinen selviytyminen ja x-akseleilla on : . esitetty inkuboinnin konsentraatio.
5 * 2 «
Kuviossa 2 on esitetty guanidiini-dekstraanikonjugaattien amgdx = aminoguanidiini-25 dekstraani, agmdx = agmatiini-dekstraani toksiset vaikutukset verrattuna antrasykliiniin = Adriamycin^nin uroteelisyöpäsoluilla (RT4, ATCC, Manassas, USA). Y-akseleilla on esitetty prosentuaalinen selviytyminen ja x-akseleilla on esitetty inkuboinnin konsentraatio. Uroteelisyöpäsolujen selviytyminen on <1 = 0. Alempi arvo tarkoittaa 100 : % solukuolemaa.
30
Kuviossa 3 on esitetty guanidiini-dekstraanikonjugaattien amgdx = aminoguanidiini-dekstraani, agmdx = agmatiini-dekstraani toksiset vaikutukset venattuna antrasykliiniin = Adriamycin :iin uroteelisyöpäsoluilla (5637, ATCC, Manassas, USA). Y-akseleilla on 4 119513 esitetty prosentuaalinen selviytyminen ja x-akseleilla on esitetty inkuboinnin konsentraatio. Uroteelisyöpäsolujen selviytyminen on <1 = 0.
5 Kuviossa 4 on esitetty guanidiini-dekstraanikonjugaattien amgdx = aminoguanidiini-dekstraani, agmdx = agmatiini-dekstraani toksiset vaikutukset verrattuna antrasykliiniin = Adriamycin®:iin eturauhassyöpäsoluilla (PC3, ATCC, Manassas, USA).
Eturauhassyöpäsolujen selviytyminen on <1 =0.
10 Kuviossa 5 on esitetty guanidiini-dekstraanikonjugaattien amgdx = aminoguanidiini-dekstraani, agmdx = agmatiini-dekstraani toksiset vaikutukset verrattuna antrasykliiniin = Adriamycin^iin rintasyöpäsoluilla (MDA231, ATCC, Manassas, USA).
Rintasyöpäsolujen selviytyminen on <1 =0.
15 Kuviossa 6 on esitetty guanidiini-dekstraanikonjugaattien amgdx = aminoguanidiini-dekstraani, agmdx = agmatiini-dekstraani toksiset vaikutukset verrattuna antrasykliiniin = Adriamycin®:iin munuaissyöpäsoluilla (A498, ATCC, Manassas, USA).
Munuaissyöpäsolujen selviytyminen on <1 = 0.
e * /*;' 20 * s » l Keksijät ovat havainneet, että tietyillä guanidiiniyhdisteillä, joilla on erittäin matala 9 » » * t . , luontainen toksisuus, on korkea tuumorisoluja tappava vaikutus silloin, kun ne >"[ ' konjugoidaan kovalenttisesti myrkyttömään hydroksyylipolymeeriin, kuten dekstraaniin.
* 1 ·
Tuumorisoluja tappava vaikutus on vastaava kuin vakiintuneilla 25 antrasykliinisyöpälääkkeillä, kuten Farmorubicine® ja Adriamycine®, tai joillakin .1 \ konsentraatioilla korkeampi kuin vakiintuneilla syöpälääkkeillä. Näyttää todennäköiseltä, = että mainittujen polymeeri-guanidiinikonjugaattien ainesosien vaarattomasta luonteesta johtuen voidaan olettaa, että tällaisten konjugaattien käsittely on esim. hoitohenkilökuntaa ja potilaiden hoitoon liittyviä sivuvaikutuksia ajatellen edullista perinteisiin 30 kemoterapeuttisiin syöpälääkkeisiin verrattuna.
Oletetaan, että kohdistus tai selektiivisyys tuumorisoluja kohtaan saavutetaan nopeasti jakautuvien tuumorisolujen kasvaneiden metabolisten tarpeiden kautta, jotka solut 119513 tarvitsevat amino-5-guanidinopentaanihappoa ja rakenteellisesti samankaltaisia guanidiiniyhdisteitä ja muita polyamiinin muodostuksen ainesosia (D Scott Lind, Am Soc Nutr Sei, 2004, J Nutr, 134:2837-2841; E Wayne, Turk J Med Sei, 2003, 33, 195-205).
5 Mainittujen guanidiiniyhdisteiden sisäänotto soluihin välittyy pääasiassa Na+:sta riippumattoman emäksisen aminohappovälityssysteemin y+ kautta (Cendan el ai, Ann Surg Oncol, 1995, 2:257-265).
Keksinnön mukainen hydroksipolymeerikonjugaatti on yhdiste, jonka runkoyhdisteenä on 10 dekstraani. Dekstraanin molekyylipaino on välillä 103—106 Daltonia. Tyypillisesti dekstraani on substituoitu 15-60~prosenttisesti, edullisesti 20-50-prosenttisesti guanidiinisivuryhmillä agmatiini tai aminoguanidiini, eli 20-50 % dekstraanirungon glukoosiosista on substituoitu mainituilla guanidiiniryhmillä.
15 Yhdestä analysoidusta erästä osoitettiin, että 100 mg:ssa aminoguanidiini- dekstraanikonjugaattia, jossa dekstraanipolymeerin keskimääräinen molekyylipaino on 70 kD, noin 30 mg koostuu guanidiinisivuryhmistä. Toisin sanoen 273 μτηοΐ aminoguanidiinia on yhdistetty 1,4 pmokiin dekstraani70:tä, mikä tarkoittaa että noin 50 % glukoosiosista on substituoitu guanidiiniryhmallä. Toisesta erästä havaittiin, että 100 * t t * ä 4 ,* 20 mg:ssa aminoguanidiini-dekstraanikonjugaattia, jossa dekstraanipolymeerin * ϊ ψ i J 5 ! keskimääräinen molekyylipaino on 70 kD, noin 10 mg koostuu guanidiinisivuryhmistä.
» » ; . Toisin sanoen 90 μιηοΐ aminoguanidiinia on yhdistetty 1,3 pmokiin dekstraani70:tä, mikä s * φ j»" ’ tarkoittaa että noin 18 % glukoosiosista on substituoitu guanidiiniryhmallä.
• 1 * » * 25 Lääkettä annostellaan edullisesti paikallisesti, esim. intravesikaalisella annostelulla, , V. alueellisesti, esim. annostelemalla vatsakalvononteloon, intratuumorisesti, eli injektoimalla suoraan kiinteään tuumoriin, tai systeemisesti, eli intravenoosisella annostelulla. Kaikki nämä annostelureitit ovat mahdollisia ja ne riippuvat spesifisestä terapeuttisesta sovelluksesta.
Keksinnön mukainen dekstraanipolymeeri on substituoitu guanidiinisivuryhmillä agmatiini tai aminoguanidiini. Guanidiiniryhmät on yhdistetty kovalenttisesti mainittuun dekstraanipolymeeriin guanidiiniyhdisteiden vapaiden aminosivuryhmien kautta.
30 6 119513
Substituutiota edeltää mainitun dekstraanipolymeerin aktivointi hapettamalla, mikä mahdollistaa reaktion mainittujen vapaiden aminosivuryhmien kanssa, jolloin muodostuu guanidiiniyhdisteiden sidoksia, ja tätä seuraavalla pelkistyksellä saadaan stabiileja 5 amiinisidoksia (Matsunaga et ai., Nucl Med Biol. 2005, 32, 279-285).
Esimerkkitapauksessa aminoguanidiini muodostaa hydratsonisidoksen hydroksipolymeeriosan kanssa. Hydratsonisidos voidaan pelkistää edelleen, jolloin saadaan guanidinohydratsiinisidos. Sopivia guanidiiniyhdisteitä ovat agmatiini ja 10 aminoguanidiini.
Muihin funktionaalisiin ryhmiin, joita voidaan lisäksi yhdistää mainittuihin guanidiinihydroksipolymeerikonjugaattiyhdisteisiin, sisältyvät kemoterapeuttiset lääkkeet, radionuklidit, kuten Tc-99m, 1-131, Y-90, Re-188, Sm-153, hormonit, 15 hormoniantagonistit, kuten tamoksifeeni, peptidit, kuten somatostatiini, toksiinit, monoklonaaliset vasta-aineet tai näiden fragmentit, vapaiden radikaalien poistajat, kuten amifostiini tai proteiinit. Tällaisten funktionaalisten ryhmien yhdistäminen voidaan saada aikaan suoraan tai bifunktionaalisten kelaattien kautta, jotka on yhdistetty hydroksipolymeeriin ennen funktionaalisten ryhmien sisällyttämistä.
* * s ♦ 6 « .·; 2o * * "s ; Esimerkki 1 tt!·: 11° ’ Dekstraanin aktivointi s * " ' 3 i t * 25 Lääkelaatuinen dekstraani PM70 (150 mg) liuotettiin 6 ml:aan vettä. Lisättiin , * natriumperjodaattia 120 mg ja tämän jälkeen 25 μΐ konsentroitua rikkihappoa. Yhdistettyä liuosta sekoitettiin 30 minuuttia. Hapettumisen pysäyttämiseksi ja ylimääräisen perjodaatin tuhoamiseksi lisättiin etyleeniglykolia, 75 μΐ, ja reaktiota jatkettiin vielä 15 minuuttia. Aktivoitu dekstraani puhdistettiin pienimolekyylisistä yhdisteistä 30 geelisuodatuksella yhden millilitran annoksina PD-10-kolonneilla, jossa eluenttina oli 0,1 M asetaatti, pH 6,5. Jokaisessa erotuksessa saatiin 2 ml aktivoitua dekstraaniliuosta.
Konjugointi 7 119513
Eluenttiin, 1 ml, joka oli saatu yllä olevalla menetelmällä, sekoitettiin A) agmatiinisulfaattia, 110 mg, ja natriumsyaaniboorihydridiä, 5 mg, B) aminoguanidiinihydrokloridia, 65 mg.
Liuoksia sekoitettiin yön yli huoneenlämmössä ja ne erotettiin pienimolekyylisistä 5 yhdisteistä PD 10 -kolonneilla, siten että eluenttina oli PBS. Jokaisesta reaktiosta saatiin kaksi millilitraa puhdistettua konjugaattiliuosta.
Fluorometrinen svtotoksisuusmääritvs (kuviot 1 - 6) 10 Fluorometrinen sytotoksisuusmääritys suoritettiin Larssonin ja Nygrenin esittämällä tavalla (Larson et ai., Anticancer Res, 1989, 9:1111-1119).
Lyhyesti sanottuna noin 10 000 solua ympättiin kuoppaa kohti (96-kuoppaiset mikrotiitterilevyt, Falcon, Becton Dickinson, Meylan, Ranska). Lisättiin antrasykliiniä ja 15 guanidiini-dekstraanikonjugaattia, jossa oli aminoguanidiini- tai agmatiiniryhmiä, ckvimolaarisilla konsentraatioilla (0,1, 0,5, 1, 2 ja 4 μΜ). Kontrollikuoppiin annettiin sama määrä PBS:a. 72 tunnin inkuboinnin jälkeen mikrotiitterilevyt sentrifugoitiin (200 x g, 3 minuuttia) ja alusta poistettiin levyjä napauttamalla. Solut pestiin PBS:11a. , v, Fluoreseiinidiasetaattia (FDA, Sigma, Tukholma, Ruotsi) liuotettiin DMSO:iin ja pidettiin s - » ; , , 20 jäädytettynä lämpötilassa -20 °C varastoliuoksena (10 mg/ml). FDA-varastoliuos ... : laimennettiin PBS:lla konsentraatioon 10 pg/ml ja jokaiseen kuoppaan lisättiin 200 μΐ.
; : Tämän jälkeen levyjä inkuboitiin 30 minuuttia lämpötilassa 37 °C. 96-kuoppaista pyyhkäisyfluorometriä käytettiin laskemaan emittoituva fluoresenssi elävistä soluista. ;' ’ ’; Tiedot siirrettiin tietokoneelle ja tulokset laskettiin. Tulokset on esitetty kuvioissa 1-5, y- 25 akselien esittäessä prosentuaalista solujen selviytymistä ja x-akselien esittäessä t; koeaineiden molaarisuutta.
Seuraavia tuumorisolulinjoja käytettiin (toimittaja ATCC, Manassas, US): RT4, 5637 (uroteelisyÖpä), MDA231 (rintasyöpä), PC3 (eturauhassyöpä), A498 (munuaissolusyöpä). 30

Claims (6)

119513
1. Muokattu hydroksipolymeerikonjugaatti, jolla on tuumorisoluja tappava vaikutus, tunnettu siitä, että muokattu hydroksipolymeerikonjugaatti on hydroksipolymeeri 5 dekstraani, joka on substituoitu guanidiiniyhdisteillä agmatiini tai aminoguanidiini, joilla on vähintään yksi vapaa aminoryhmä, ja jotka on yhdistetty kovalenttisesti mainitun hydroksipolymeeriosan aktivoituihin hydroksyyliryhmiin.
2. Patenttivaatimuksen 1 mukainen muokattu hydroksipolymeerikonjugaatti, tunnettu 10 siitä, että mainitun hydroksipolymeeri dekstraanin molekyylipaino on 103—106 Daltonia.
3. Patenttivaatimuksen 1 mukainen muokattu hydroksipolymeerikonjugaatti, tunnettu siitä, että muokattu hydroksipolymeerikonjugaatti käsittää lisäksi kovalenttisesti yhdistettyjä funktionaalisia ryhmiä. 15
4. Patenttivaatimuksen 3 mukainen muokattu hydroksipolymeerikonjugaatti, tunnettu siitä, että mainitut funktionaaliset lisäryhmät ovat radionuklideja.
5. Patenttivaatimuksen 3 mukainen muokattu hydroksipolymeerikonjugaatti, tunnettu » « V.’ 20 siitä, että mainitut funktionaaliset lisäryhmät ovat terapeuttisia yhdisteitä. « s « > * * i » s «·. a j « : m
6. Patenttivaatimuksen 3 mukainen muokattu hydroksipolymeerikonjugaatti, tunnettu j;* siitä, että mainitut funktionaaliset lisäryhmät ovat syöpälääkkeitä. » t « 1 4 Λ 4 1
7. Patenttivaatimuksen 1 mukainen muokattu hydroksipolymeerikonjugaatti, tunnettu . . siitä, että muokattu hydroksipolymeerikonjugaatti on guanidiini-dekstraanikonjugaatti, -7 jonka keskimääräinen molekyylipaino on noin 70 kD ± 25 kD ja jossa 15-60 %, edullisesti 20-50 % dekstraanin glukoosiosista on substituoitu guanidiiniyhdisteillä agmatiini tai aminoguanidiini, joilla on vähintään yksi vapaa aminosivuryhmä, ja mainitut 30 guanidiiniyhdisteet on yhdistetty kovalenttisesti mainitun dekstraanin aktivoituihin hydroksyyliryhmiin. 119513
8. Minkä tahansa patenttivaatimuksen 1-7 mukainen muokattu hydroksipolymeerikonjugaatti, tunnettu siitä, että mainittu hydroksipolymeerikonjugaatti voidaan annostella paikallisesti, intravesikaalisesti, alueellisesti, peritoneaalisesti, intratuumorisesti, systeemisesti tai intravenoosisesti. 5
9. Tuumoreita tappava koostumus, tunnettu siitä, että mainittu tuumoreita tappava koostumus käsittää patenttivaatimuksen 1 mukaista muokattua hydroksipolymeerikonjugaattia ja vähintään yhtä farmaseuttisesti hyväksyttävää adjuvanttia. 10
10. Menetelmä patenttivaatimuksen 1 mukaisen muokatun hydroksipolymeerikonjugaatin valmistamiseksi, tunnettu siitä, että guanidiiniyhdiste agmatiini tai aminoguanidiini, jolla on vähintään yksi vapaa aminoryhmä, sekoitetaan eluentin kanssa, joka käsittää geelisuodatuksella puhdistettua aktivoitua dekstraania. 15
11. Patenttivaatimuksen 10 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että aktivoitu dekstraani saadaan hapetusreaktiolla, jossa perjodaattisuolaa lisätään vesipitoiseen liuokseen, joka käsittää dekstraania, jonka jälkeen lisätään konsentroitua rikkihappoa, ja jossa hapetusreaktio pysäytetään lisäämällä etyleeniglykolia, jonka jälkeen seuraa puhdistus * » * /';* 20 geelisuodatuksella. «60 » ί i ‘ I » » i » S
6 S «OB * S ? t 14 9 J 3 C 4 ·* ft * O ίο 119513
FI20075158A 2007-03-07 2007-03-07 Muokatut hydroksipolymeerikonjugaatit, joilla on tappava vaikutus tuumorisoluihin FI119513B (fi)

Priority Applications (10)

Application Number Priority Date Filing Date Title
FI20075158A FI119513B (fi) 2007-03-07 2007-03-07 Muokatut hydroksipolymeerikonjugaatit, joilla on tappava vaikutus tuumorisoluihin
US12/043,503 US8106185B2 (en) 2007-03-07 2008-03-06 Modified hydroxypolymer conjugates with killing effect on tumor cells
EP08717461A EP2131867B1 (en) 2007-03-07 2008-03-06 Modified hydroxypolymer conjugates with killing effect on tumor cells
PCT/EP2008/052714 WO2008107471A2 (en) 2007-03-07 2008-03-06 Modified hydroxypolymer conjugates with killing effect on tumor cells
MX2009009533A MX2009009533A (es) 2007-03-07 2008-03-06 Conjugados de hidroxipolimero modificado con efecto letal en celulas tumorales.
BRPI0808502-1A BRPI0808502B1 (pt) 2007-03-07 2008-03-06 Conjugado de hidróxi-polímero modificado, composição tendo um efeito exterminador de célula de tumor, e, método para produzir o conjugado de hidróxi-polímero modificado
CN2008800070384A CN101678121B (zh) 2007-03-07 2008-03-06 对肿瘤细胞具有杀伤作用的改性羟基聚合物共轭物
CA2679960A CA2679960C (en) 2007-03-07 2008-03-06 Modified hydroxypolymer conjugates with killing effect on tumor cells
JP2009552208A JP5340964B2 (ja) 2007-03-07 2008-03-06 腫瘍細胞に対する殺傷効果を備えた修飾されたヒドロキシポリマーコンジュゲート
IL200756A IL200756A (en) 2007-03-07 2009-09-06 Conjugated hydroxypolymer polymers with cancer cell killing capabilities

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
FI20075158A FI119513B (fi) 2007-03-07 2007-03-07 Muokatut hydroksipolymeerikonjugaatit, joilla on tappava vaikutus tuumorisoluihin
FI20075158 2007-03-07

Publications (3)

Publication Number Publication Date
FI20075158A0 FI20075158A0 (fi) 2007-03-07
FI20075158A FI20075158A (fi) 2008-09-08
FI119513B true FI119513B (fi) 2008-12-15

Family

ID=37930070

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
FI20075158A FI119513B (fi) 2007-03-07 2007-03-07 Muokatut hydroksipolymeerikonjugaatit, joilla on tappava vaikutus tuumorisoluihin

Country Status (10)

Country Link
US (1) US8106185B2 (fi)
EP (1) EP2131867B1 (fi)
JP (1) JP5340964B2 (fi)
CN (1) CN101678121B (fi)
BR (1) BRPI0808502B1 (fi)
CA (1) CA2679960C (fi)
FI (1) FI119513B (fi)
IL (1) IL200756A (fi)
MX (1) MX2009009533A (fi)
WO (1) WO2008107471A2 (fi)

Families Citing this family (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
EP2139461A2 (en) * 2007-03-20 2010-01-06 Recepticon Aps Amino derivatives to prevent nephrotoxicity and cancer
EP2274018B1 (en) * 2008-04-07 2013-12-18 Dextech Medical AB Modified hydroxypolymer conjugates with bone-seeking and tumor-killing moieties
WO2011040599A1 (ja) 2009-10-02 2011-04-07 シャープ株式会社 血管状態モニタリング装置およびモニタリング方法
JP5386634B2 (ja) * 2010-03-19 2014-01-15 シャープ株式会社 測定結果処理装置、測定システム、測定結果処理方法、制御プログラムおよび記録媒体
FI127538B (fi) 2016-06-22 2018-08-31 Dextech Medical Ab Muunneltuja dekstraanikonjugaatteja

Family Cites Families (14)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
FR2309556A1 (fr) * 1975-04-29 1976-11-26 Aries Robert Aminoguanidines derivees de la rifamycine
JPS61223002A (ja) * 1985-03-26 1986-10-03 ポリデツクス　フア−マス−テイカルズ，リミテツド ジエチルアミノエチルデキストラン類の製造方法
JP2602535B2 (ja) * 1988-09-02 1997-04-23 ダイセル化学工業株式会社 アミノエチル化水溶性高分子とその製法
US20050090553A1 (en) * 1992-06-30 2005-04-28 Shapiro Howard K. Compositions and method for treatment of chronic inflammatory diseases
US6033719A (en) * 1996-04-25 2000-03-07 Medtronic, Inc. Method for covalent attachment of biomolecules to surfaces of medical devices
DE19621038A1 (de) * 1996-05-24 1997-11-27 Boehringer Ingelheim Kg Aminoguanidine, Verfahren zu ihrer Herstellung und Arzneimittel, die diese Verbindungen enthalten
JP2002511496A (ja) * 1998-04-13 2002-04-16 マサチューセッツ インスティテュート オブ テクノロジー 細胞表面相互作用を調節するためのコームコポリマー
US6288124B1 (en) * 1998-05-22 2001-09-11 Rima Kaddurah-Daouk Methods of inhibiting undesirable cell growth using an aminoguanidine compound
SE9803482D0 (sv) * 1998-10-13 1998-10-13 Anders Holmberg Ion exchange tumor targeting (IETT)
WO2000023023A1 (en) 1998-10-20 2000-04-27 The University Of North Carolina At Chapel Hill Methods of hydrating mucosal surfaces
US20020107363A1 (en) * 2000-09-20 2002-08-08 Amgen, Inc. B7-Like molecules and uses thereof
US7033602B1 (en) * 2002-06-21 2006-04-25 Advanced Cardiovascular Systems, Inc. Polycationic peptide coatings and methods of coating implantable medical devices
CN1475210A (zh) * 2002-08-13 2004-02-18 中国人民解放军军事医学科学院毒物药 胍丁胺的新用途
CA2648732A1 (en) * 2005-06-23 2006-12-28 Aplagen Gmbh Supravalent compounds

Also Published As

Publication number Publication date
FI20075158A0 (fi) 2007-03-07
JP2010520346A (ja) 2010-06-10
IL200756A (en) 2014-01-30
US20080221066A1 (en) 2008-09-11
JP5340964B2 (ja) 2013-11-13
BRPI0808502A2 (pt) 2014-07-29
CA2679960C (en) 2015-05-19
BRPI0808502B1 (pt) 2021-09-28
WO2008107471A2 (en) 2008-09-12
CN101678121A (zh) 2010-03-24
FI20075158A (fi) 2008-09-08
CA2679960A1 (en) 2008-09-12
IL200756A0 (en) 2010-05-17
WO2008107471A3 (en) 2009-01-08
EP2131867B1 (en) 2012-07-25
US8106185B2 (en) 2012-01-31
CN101678121B (zh) 2012-02-15
EP2131867A2 (en) 2009-12-16
MX2009009533A (es) 2009-11-23

Similar Documents

Publication Publication Date Title
EP2258397B1 (en) Polymer conjugate of physiologically active substance
US8808749B2 (en) Polymer conjugate of bioactive substance having hydroxy group
FI119513B (fi) Muokatut hydroksipolymeerikonjugaatit, joilla on tappava vaikutus tuumorisoluihin
KR100578382B1 (ko) 항암제의 전달체용 수용성 키토산 나노입자 및 그 제조방법
EP2994153B1 (de) Peptide und peptid-wirkstoff-konjugate für renales targeting
US7754684B2 (en) Macromolecular platinum chelates
KR20110020779A (ko) 도세탁셀 고분자 유도체 및 그 제조 방법 및 그 용도
EP3072910A1 (en) Derivative of styrene-maleic acid copolymer
Choi et al. Highly efficient method for 125I-radiolabeling of biomolecules using inverse-electron-demand Diels–Alder reaction
EP2994152A2 (de) Konjugate zum schutz vor nephrotoxischen wirkstoffen
FI127538B (fi) Muunneltuja dekstraanikonjugaatteja
EP1685153A1 (en) Targeting compositions and preparation thereof
TWI404527B (zh) 治療癌症之金屬-多醣體共軛物之組成與其合成方法
JP2002508758A (ja) 生物的に活性な材料
JP2021176932A (ja) カルボキシ化分解性ポリロタキサン及びその製造方法
EP2274018B1 (en) Modified hydroxypolymer conjugates with bone-seeking and tumor-killing moieties
Wang et al. 99m Tc (CO) 3–AOPA colchicine conjugate as a potential tumor imaging agent
KR102726951B1 (ko) Her2-발현 암에 대한 신규 항체-약물 접합체 및 이의 용도
KR20230063061A (ko) Her2-발현 암에 대한 신규 항체-약물 접합체 및 이의 용도
WO2013035579A1 (ja) 薬物を封入した肝臓集積性ナノ粒子
WO2005049096A2 (en) Protein and polymer conjugates as chelants with enhanced blood retention

Legal Events

Date Code Title Description
FG Patent granted

Ref document number: 119513

Country of ref document: FI