FI109028B - Välituotteet käytettäväksi steroidi-5-alfa-reduktaasin inhibiittoreiden valmistamiseksi - Google Patents

Description

109028 Välituotteet käytettäväksi steroidi-5-alfa-reduktaasin inhibiittoreiden valmistamiseksi - Mellanprodukter som används vid framställning av inhibitorer för steroid-5-alfa-reduktas 5 Tämä hakemus on jaettu kantahakemuksesta 882007 (patentti 95712).

Keksintö koskee välituotteita määrättyjen substituoitujen synteettisten steroidiyhdis-teiden akrylaattianalogien valmistamiseksi. Näitä yhdisteitä käytetään nisäkkäiden steroidi-5-alfa-reduktaasin ehkäisemisessä.

Steroidihormonien luokka, joka tunnetaan androgeeneina, aiheuttaa fyysisiä ominai-10 suuksia, jotka erottavat urokset naaraista. Niistä useista elimistä, jotka muodostavat androgeeneja, valmistavat kivekset näitä hormoneja kaikkein eniten. Aivokeskukset säätävät pääasiallisesti androgeenin tuotantomäärää. Seurauksena on useita fyysisiä ilmiöitä ja sairaustiloja, jos tehoton muodostumisen säätö aiheuttaa androgeenihor-monin liian suuren muodostumisen. Esim. tavalliset näppylät, talivuoto, naisten liika-15 karvoitus ja alkava prostatan liikakasvu ovat seurauksena kasvaneista androgeenita-soista. Lisäksi liittyy alkava osittainen kaljuuntuminen korkeisiin androgeenitasoihin.

.V: Testosteroni on pääasiallinen kivesten erittämä androgeeni ja on pääasiallinen and- rogeenisteroidi urosten plasmassa. Nykyisin on tunnettua, että 5-alfa-pelkistetyt y . androgeenit ovat aktiivisia hormoneja eräissä kudoksissa, kuten prostatassa ja tali- :v.20 rauhasessa. Kiertävä testosteroni toimii täten dihydrotestosteronin (DHT) esihor-• · | monina, sen 5-alfa-pelkistettynä analogina, näissä kudoksissa, mutta ei muissa, ku-ten lihaksissa ja kiveksissä. Steroidi-5-alfa-reduktaasi on NADPH-riippuvainen ent-’ * ’ ‘ syymi, joka muuttaa testosteronin DHT:ksi. Tämän entsyymin tärkeys urosten kehityksessä korostui dramaattisesti, kun todettiin, että geneettinen steroidi-5-alfareduk-·.·: 25 taasi puuttuu miespuolisilta pseudohermafrodiiteilta. Imperato-McGinley J. et ai.

(1979), J. Steroid Biochem. 11:637648.

; Kasvaneiden DHT-määrien tärkeyden toteaminen useissa sairaustiloissa on stimu- • · * · · · ’ loinut useita yrityksiä valmistaa synteettisesti tämän entsyymin inhibiittoreita. Usei- den tunnettujen steroidi-5-alfa-reduktaasin inhibiittoreiden rakenteita on esitetty « » ....:30 taulukossa 1.

109028 2

Taulukko 1 5-alfa-reduktaasi-inhibiittorit (1) ?°OH (1) Ki =l,lxl0-6 M Hsiaja Voight (Palautuva) 1973 (2) \*»° lxlO*6 M Robaire, et ai., (Palautumaton) 1977 (3) V—noh 3,5x10‘8 Blohm, et ai., (Palautumaton) 1980 _____ (4) V-N 5x10'9 M Liang, et ai, ^ (Palautuva) 1983 (5) \-»o 1,25x1ο-6 M Petrow, et ai., (Palautumaton) 1981 ... Ensimmäinen kuvattu inhibiittori oli 17-beeta-karboksyylihappo (1), jonka ovat ku- 5 vanneet Hsiaja Voight 1973, J. Invest. Dermat. 62:224-227. Secosteroidi (2) oli : ’. : seuraava kuvattu inhibiittori ja sitä on myös käytetty 5-alfa-reduktaasin affiniteetin : · merkkiaineena. Robaire B. et ai. (1977), J. Steroid Biochem. 8:307-310. Diatsoke- ’;. töni (3) on kuvattu voimakkaaksi steroidi-5-alfa-reduktaasin ajasta riippuvaksi inhi- biittoriksi. Blohm T.R. et ai. (1980). Biochem. Biophys. Res. Comm. 95: 273-280; 109028 3 US-patentti 4 317 817. Yhdiste (4) on esimerkki steroidi-5-alfa-reduktaasin 4-atsa-steroidi-inhibiittoreiden ryhmästä, joka on kuvattu US-patentissa 4 377 584, ja Liang T. et ai. (1983), J. Steroid Biochem. 19:385-390. 6-metyleeni-steroidin (5) on myös osoitettu olevan ajasta riippuva steroidi-5-alfareduktaasin inaktivaattori. Pet-5 row V. et ai. (1981), Steroids 38:121-140.

Myös muita steroidi-5-alfa-reduktaasi-inhibiittoreita on kuvattu. US-patentissa 4 361578 kuvataan luokkaa homosteroidi-entsyymi-inhibiittorit. US-patentti 4 191 759 koskee 17-beeta-karboksi-4-androsten-3-onin amideja, jotka ovat aktiivisia steroidi-5-alfa-reduktaasin inhibiittoreina. JP-patenteissa J60146855-A ja 10 J60116657-A on esitetty erilaisia aniliinijohdannaisia, joilla on erilaisia aktiivisuuk sia, kuten 5-alfa-reduktaasia estävä aktiivisuus. JP-patentissa I60142941-A kuvataan fenyyh-substituoituja ketoneja, joilla on 5-alfa-reduktaasia ehkäisevä vaikutus, ja EP-patentissa 173 516-A on kuvattu erilaisia fenyylisubstituoituja amideja, joilla on samankaltainen aktiivisuus. JP-patentissa J59053417-A on kuvattu terpeenijoh-15 dannaisia, jotka ovat aktiivisia steroidi-5-alfa-reduktaasin inhibiittoreita.

Substituoitujen androsteenijohdannaisten palladiumin avulla katalysoitua karbony-lointia on myös kuvattu. Cacchi S. et ai. (1985), Tet. Letters 26:1109-1112. Näiden synteettisten yhdisteiden biologista aktiivisuutta ei kuitenkaan ole esitetty.

Steroidisten 3-kloori-3,5-dieenien valmistusta ovat kuvanneet Deghenghi R. ja R.

20 Gaudry, Canadian J. Chem. (1962) 40: 818-820.

Fosforitrihalidien käyttöä steroidisten A4-3-ketonien muuttamiseksi vastaaviksi 3-:: : halo-3,5-dieeneiksi on myös esitetty. Ross J. A. ja M. D. Martz, J. Org. Chem.

I (1964)29:27842785.

: . · . Esillä oleva keksintö perustuu toteamukseen, että steroidi-5-alfa-reduktaasi voidaan .:. 25 ehkäistä määrätyillä substituoiduilla synteettisten steroidiyhdisteiden akrylaattiana- j ’ logeilla. Nämä yhdisteet ovat voimakkaita entsyyminestoaineita.

Keksinnön oleelliset tunnusmerkit on esitetty oheisissa patenttivaatimuksissa.

·., Keksinnön mukaisesti on aikaansaatu uusia välituotteita ja uusia menetelmiä, jotka ':' ovat käyttökelpoisia valmistettaessa 5-alfa-reduktaasia ehkäiseviä yhdisteitä.

....: 30 Kaavan (Ia) mukaiset yhdisteet ovat käyttökelpoisia farmaseuttisissa seoksissa.

109028 4 ί ;

Λ X Y

o (la) jossa kaavassa: renkaassa A on aina 2 kaksoissidosta, renkaissa B, C ja D on mahdollisesti kaksoissidoksia, jotka on merkitty katkoviival-5 la edellyttäen, että renkaassa C ei ole Cg-Cu-kaksoissidosta, kun renkaassa B on C7-C8-kaksoissidos, j M on O tai S, Z on (CH2) ja n on 0*2, X on H, Cl, F, Br, I, CF3 tai Q-Q-alkyyli, 10 Y on H, CF3, F tai Cl, CF3 edellyttäen, että Y on H, kun ei ole Cs-Cö-kaksoissidosta, R1 on H tai Ci-g-alkyyli, •R2 puuttuu tai on H tai CF3, jolloin R2 puuttuu, kun se hiili, johon se on kiinnittynyt, on kaksoissitoutunut, ja •::: R10 puuttuu, kun esiintyy C4-C5-, C5-C6- tai C5-Ci0-kaksoissidos, tai se on alfa-vety, '·' * 15 ja •: · · · R3 on •: ’' (1) alfa-vety, alfa-hydroksyyli tai alfa-asetoksi, ja/tai (a) * » » β-W-C-R4 i 5 109028 o

II

jossa W on sidos tai Ci_i2-alkyyli, ja R4 on 5 (i) vety, (ii) hydroksyyli, (iii) Ci-g-alkyyli, (iv) hydroksi-Ci-g-alkyyli, (v) Ci-g-alkoksi, i 10 (vi) NR5R6, jossa R5 ja R6 on kumpikin valittu itsenäisesti seuraavista: vety, Ci-g-alkyyli, C3^-sykloalkyyli, fenyyli, tai R5 ja R6 muodostavat yhdessä sen typpiato-min kanssa, johon ne ovat kiinnittyneet, 5-6-jäsenisen kyllästetyn renkaan, jossa voi olla yksi muu heteroatomi, nimittäin happi tai typpi, tai (vii) OR7, jossa R7 on vety, alkalimetalli, Ci_i8-alkyyli, bentsyyli, tai 15 (b) beeta-Alk-OR8, jossa Alk on Ci.i2-alkyyU ja R8 on (1) fenyyli-Ci^-alkyylikarbonyyli, (ii) C5.io-sykloalkyylikarbonyyli, I * · · : (iii) bentsoyyli, .! (iv) Ci.g-alkoksikarbonyyli, » · ,; j * 20 (v) amino tai Ci.8-alkyylisubstituoitu aminokarbonyyli, (vi) vety, tai : · (vii) Ci-g-alkyyli, (2) =CH-W-CO-R4 tai =CH-W-OR8, joissa W on sidos tai Ci.i2-alkyyli, ja R4 ja R8 • ‘ tarkoittavat samaa kum edellä, ja R on myös vety tai Ci.2o-alkyylikarbonyyli, 6 109028 (3)

O

jossa pilkkuviiva korvaa 17-alfa-vedyn, (4) alfa-vety ja beeta-NHCOR9 , jossa R9 on Ci.i2-alkyyli tai beeta-NR5R6, jossa R5 5 ja R6 tarkoittavat samaa kuin edellä, (5) alfa-vety ja beeta-syano, (6) alfa-vety ja beeta-tetratsolyyli, tai (7) keto, tai niiden farmaseuttisesti sopivat suolat.

Edellä ja koko tässä selityksessä ja patenttivaatimuksissa on steroidirenkaiden hii-10 liatomit ja renkaat merkitty seuraavasti: 17 C D \l6 2^Ζ'^γ^ί''Ύ^Η^/ 7 109028

Kaavio I

p 14 r2 1) Li/NH3 2) n-fenyylitrifluorimetyylisulfonimidi (a) R14 - f I trietyyliamiini, p*

trifenyylifosfiini-palladium(II)asetaatti Cj.g-alkOH, CO O

CFr|| ^ ft

O

(b) R14 ^CH3|

r2 1) Li/OH

✓s. J- -► { 2) HC1 0 (c) .:: Ri4 r2 : HOykA/ ° (d)

Kaavio I koskee kaavan (Ia) mukaisten yhdisteiden valmistusta, joissa on kaksoissi-.,; ·' dos asemassa C3-C4, X on H ja n on 1. Lähtöaineina käytetyt 4-eeni-3-oni-yhdisteet 109028 8 ί ovat tunnettuja ja helposti saatavissa, ja niitä valmistetaan synteettisesti tunnetuista esituotteista tunnettujen menetelmien avulla. Kaavion I mukaisesti lisätään liuos, jossa on 4-eeni-3-oni-yhdistettä (a) ja sopivaa orgaanista protonin luovuttavaa ainetta, kuten t-butanolia tai aniliinia, sopivassa orgaanisessa liuottimessa, edullisesti tet-5 rahydrofuraanissa (THF), pelkistävään metalliamiiniin, edullisesti litium/ammo-nium-(Li/NH3) liuokseen, reaktioseoksen muodostamiseksi. Tätä reaktioseosta sekoitetaan lämpötilassa välillä -100 ja -30 °C, edullisesti -78 °C, sammutetaan litiu-minpoistoaineella, kuten dibromietaanilla, bromibentseenillä tai edullisesti isopree-nilla, ja haihdutetaan jäännöksen muodostamiseksi. Kaavan (b) mukaisia yhdisteitä 10 valmistetaan sitten saattamalla jäännös reagoimaan sopivaan orgaaniseen liuotti-meen, edullisesti THFLiin, liuotettuna N-aryylitrihaloalkyylisulfonimidin, edullisesti N-fenyylitrifluorimetyylisulfonimidin, kanssa lämpötilassa välillä -20 ja +20 °C.

Kaavan (c) mukaisia yhdisteitä valmistetaan lisäämällä kaavan (b) mukaiseen yhdisteeseen, joka on liuotettu sopivaan orgaaniseen liuottimen, kuten dimetyyliformami-15 diin (DMF), orgaanista emästä, kuten trimetyyliamiinia, tai edullisesti trietyyli-amiinia, fosfiinia, kuten bis(difenyylifosfmo)propaania tai edullisesti trifenyylifos-fiinia, palladium(II)yhdistettä, kuten palladium(II)kloridia tai edullisesti palladium- (Il)asetaattia, ja Ci^-alkyylialkoholia (Ci^-alkOH), ja tämän jälkeen lisätään hiilimonoksidia (CO). Lisättäessä voimakasta emästä, kuten natriumhydroksidia, ka-20 liumhydroksidia tai edullisesti litiumhydroksidia, kaavan (c) mukaiseen yhdisteeseen liuotettuna sopivaan orgaaniseen liuottimeen, kuten THF ja metanoliin, jota seuraa vahvan hapon, edullisesti kloorivetyhapon, lisääminen, saadaan kaavan (d) mukaisia yhdisteitä.

* * · * 9 109028

Kaavio II

! R14 2 R 1) 2,6-di-t-butyyli-4-metyyIipyridiini i////Sns 2) trifluorimetaanisulfonihappoanhydridi (a) αιΛ trietyyliamiini, 2 bis(trifenyyli)fosfiini-palladium(II)ase- _ taatti_

C^-alkOH, CO O

O

(f) R14 r2 I J_ 1)K2C03> 2) H+ ::0 0 (g) :·.·. Ri4 .* R2 5 Η0γ v; 0 m • · . Kaaviossa II on esitetty kaavan (Ia) mukaisten yhdisteiden synteesi, joissa yhdis- k ,, j' teissä on Cs-C6-kaksoissidos ja n on 1. Lähtöaineina käytetään kaavan (a) mukaisia I ! » 109028 10 4-eeni-3-oniyhdisteitä, jotka on esitetty kaaviossa I. Kaavion II mukaisesti lisätään kaavan (a) mukaiseen yhdisteeseen, joka on liuotettu sopivaan orgaaniseen liuotti-meen, edullisesti metyleenikloridiin, 2,6-di-t-butyyli-4-metyylipyridiiniä. Sitten lisätään trihaloalkyyli-sulfonihappoanhydridiä, edullisesti trifluorimetaani-sulfoni-5 happoanhydridiä, kaavan (f) mukaisten yhdisteiden saamiseksi. Kaavan (f) mukaisiin yhdisteisiin lisätään liuotettuina sopivaan orgaaniseen liuottimeen, kuten DMF, orgaanista emästä, kuten trimetyyliamiinia tai edullisesti trietyyliamiinia, palla-dium(II)yhdistettä, kuten bis(di-fenyylifosfmo)propaani-palladium(II)asetaattia tai edullisesti bis(trifenyylifosfiini)palladium(II)asetaattia, ja Ci.6alkOH, jota seuraa 10 CO:n lisäys kaavan (g) mukaisten yhdisteiden saamiseksi. Kaavan (h) mukaisia suoloja valmistetaan sitten hydrolysoimalla voimakkaalla emäksellä, kuten natrium-hydroksidilla, litiumhydroksidilla, kaliumhydroksidilla tai edullisesti kaliumkarbonaatilla, kaavan (g) mukaisia esteriyhdisteitä. Kaavan (h) mukaisia vapaita happoja valmistetaan käsittelemällä näitä suoloja voimakkaalla hapolla, kuten kloorive-15 ty-, rikki- tai bromivetyhapoilla.

I k · • · k k • t · k k » · ti· i · k 11 109028

Kaavio III

R14 r2 1) Li/NH3 2) NH4C1 ^ (a) ! R14 n2 Λ 1) fenyyliselenyylikloridi 2) H202 (j) R14

^chJ

r2 _ 1)H202

2) NaOH

*v’. (k) *.·.' d14

: ·.·. OU

···:’ 9«. R2 * · » I '» * pyridinium-poly(vetyfluoridi) -► ’r: (i)

Kaavio III (jatkoa) 12 109028 R ^ p2 Λ 1) litium-bis(trimetyylisilyyli)amidi 2) fenyylitrifluorimetyylisulfonimidi F (m) R14 2 I | trietyyliamiini, 30 ^ trifenyylifosfiini-palladium(II)asetaatti

C^-alkOH, CO O

11 y cf3-s-ck

O F

(o) R14 1 *· Pd/hiili :,· j C^älkO^^v o f ; I'; R2 i)k2co3 c1_6aikoNJL / 2)H+ . ; o f (q)

Kaavio III (jatkoa) 13 109028 R2 H0\AA / O f (s)

Kaaviossa III esitetään sellaisten kaavan (Ia) mukaisten yhdisteiden synteesi, joissa X on fluori. Lähtöaineyhdisteet ovat 4-eeni-3-oni-yhdisteitä (a), jotka on esitetty 5 kaavioissa I ja II. Kaavion III mukaisesti lisätään kaavan (a) mukaiset yhdisteet liuotettuina sopivaan orgaaniseen liuottimeen, kuten THF ja t-butyylialkoholiin, metal-liamiiniliuokseen, edullisesti Li/NH3-liuokseen, reaktioseoksen muodostamiseksi, joka jäähdytetään lämpötilaan välille -100 ja -30 °C, edullisesti -78 °C, ja sammutetaan litiuminpoistoaineella, kuten dibromietaanilla, bromibentseenillä tai edullisesti 10 isopreenilla, enolaatin muodostamiseksi. Tätä enolaattia käsitellään sitten voimakkaan hapon ja emäksen, edullisesti ammoniumkloridin (NH4CI), suolalla kaavan (j) mukaisen yhdisteen saamiseksi. Lisättäessä fenyyliselenyylikloridia kaavan (j) mukaiseen yhdisteeseen, liuotettuna sopivaan orgaaniseen liuottimeen, edullisesti etyy-:, · * liasetaattiin, mitä seuraa hapetusaineen, edullisesti vetyperoksidin (H2O2) lisäämi- 15 nen, saadaan kaavan (k) mukainen yhdiste. Kaavan (1) mukaisia epoksidiyhdisteitä valmistetaan sitten lisäämällä hapetusainetta, edullisesti H2O2, kaavan (k) mukai- • · seen yhdisteeseen, joka on liuotettu sopivaan orgaaniseen liuottimeen, edullisesti ,:. metanoliin, ja jäähdytetty lämpötilaan 5-25 °C, edullisesti 15 °C, mitä seuraa voi-* ' · · i, makkaan emäksen, kuten NaOH, lisääminen.

* 20 Kaavan (1) mukaiset yhdisteet liuotetaan sitten sopivaan orgaaniseen liuottimeen, ‘: edullisesti THF, ja jäähdytetään lämpötilaan välillä -20 ja 0 °C ja lisätään fluoraus- ' ‘ ’: ainetta, kuten fluorivetyä, tai edullisesti pyridiniumpoly(fluorivetyä), sellaisten kaa- , ’ . van (m) mukaisten yhdisteiden saamiseksi, joissa X on fluori. Kaavan (m) mukaiset 1 I » ‘ ; yhdisteet liuotetaan sopivaan orgaaniseen liuottimeen, kuten THF, ja lisätään sitten , 25 metalliamidiemäksen, kuten litiumdi-isopropyyliamidin tai edullisesti litium-bis(tri- metyylisilyyli)amidin, liuokseen sopivassa orgaanisessa liuottimessa, kuten THF.

109028 14 Tähän reaktioseokseen lisätään sitten tri-yhdisteitä muodostavaa ainetta, kuten tri-fluorimetaanisulfonihappoanhydridiä tai edullisesti N-fenyylitrifluorimetaanisulfo-nimidiä, kaavan (o) mukaisten yhdisteiden saamiseksi.

Kaavan (p) mukaisia yhdisteitä valmistetaan sitten synteettisesti lisäämällä kaavan 5 (o) mukaiseen yhdisteeseen, liuotettuna sopivaan orgaaniseen liuottimeen, kuten DMF, orgaanista emästä, kuten trimetyyliamiinia tai edullisesti trietyyhamiinia, fos-fiinia, kuten bis(difenyylifosfmo)propaania tai edullisesti trifenyylifosfiinia, ja pal-ladium(II)yhdistettä, kuten palladium(II)kloridia tai edullisesti palladium(II)ase-taattia, jota seuraa CO:n lisääminen. Hydrattaessa kaavan (p) mukaisia yhdisteitä 10 liuotettuina sopivaan orgaaniseen liuottimeen, kuten etyyliasetaattiin ja heksaaniin, käyttäen sopivaa hydrausainetta, kuten platinadioksidia, Raney-nikkeliä tai edullisesti hiilellä olevaa palladiumia (Pd/hiili), saadaan kaavan (q) mukaisia yhdisteitä. Hydrolysoitaessa esteri emäksellä, kuten natriumhydroksidilla, kaliumhydroksidilla, litiumhydroksidilla tai edullisesti kaliumkarbonaatilla, liuotettuna vesipitoiseen 15 Ci^-alkyylialkoholiliuokseen, edullisesti metanoliin, saadaan kaavan (s) mukaisen yhdisteen suola. Käsiteltäessä tätä suolaa voimakkaalla hapolla saadaan kaavan (s) mukainen yhdiste.

Sellaisia kaavan (s) mukaisia yhdisteitä, joissa X on jokin muu kuin vety tai fluori, valmistetaan käyttäen esim. sellaisia menetelmiä, jotka on esitetty esimerkeissä 23, 20 24 ja 25.

f t

4 ( I

• I * » · * ·

I I

• » « * « * « 1(4* > * · I · »

Hill I · t I I « »

• I I I

I I I I »

Kaavio IV

15 109028 η 14 R2 f _ talliumasetaatti-seskvihydraatti Ö)

CHlX

X ^ ^ __I alkyloimisaine (0 R14 R2 :.: : C^alkO.

• · ‘ if 1) litiumisopropyyli-sykloheksyyliamidi ® 2) fenyyliselenyylibromidi 3) vetyperoksidi ' (“) • 11 · 109028 16 R14 R2 f

I_ 1) LiOH

Ci^alkO^^ \ ^ 2) HC1 (V) R14 R2 ° (w)

Kaavio VI koskee kaavan (Ia) mukaisten yhdisteiden valmistusta, joissa n on 0. Tässä valmistuksessa käytetään lähtöaineina kaavan (j) mukaisia yhdisteitä, joita valmistettiin kaaviossa III kuvatulla tavalla. Kaavion IV mukaisesti johdetaan kaa-5 van (j) mukaisia yhdisteitä voimakkaaseen happoon, edullisesti jääetikkahappoon, ;;Y ja käsitellään talliumasetaattiseskvihydraatilla kaavan (t) mukaisten yhdisteiden \ valmistamiseksi. Kaavan (u) mukaisia yhdisteitä valmistetaan sitten käsittelemällä kaavan (t) mukaisia yhdisteitä sopivassa orgaanisessa liuottimessa, edullisesti di-etyylieetterissä, alkyloimisaineella, kuten alkyylihalidilla, ja emäksellä, esim. me-10 tyylijodidilla ja natriumkarbonaatilla, etyylijodidilla ja l,8-diatsabisyklo/5.4.0/-: : undek-7-eenillä tai diatsometaanilla.

Kaavan (u) mukaiset yhdisteet liuotetaan sitten sopivaan orgaaniseen liuottimeen, edullisesti THF:iin, jäähdytetään lämpötilaan välille -100 ja -30 °C, edullisesti -78 °C, ja lisätään metalliamidiemästä, edullisesti litium-isopropyylisykloheksyyli-15 amidia. Sitten lisätään fenyyhselenyylibromidia ja tämän jälkeen hapetusainetta, •: · · i edullisesti vetyperoksidia, jolloin saadaan kaavan (v) mukaisia yhdisteitä. Kaavan (w) mukaisia yhdisteitä valmistetaan sitten samoilla menetelmillä, joita käytettiin ; kaavan (d) mukaisten yhdisteiden synteettiseksi valmistamiseksi kaaviossa I.

17 109028

Kaavio V

t ^ 1) 2,6-di-t-butyyli-4-metyylipyridiini 2) trifluorimetaanisulfonihappoanhydridi 0<:ίί;^ΗΧ^ (m) R14 I «, 2 I j trietyyliamiini, ^ trifenyyIifosfiini-palladium(II)asetaatti

C^-alkOH, CO

O I

C4 ^ H 0 (aa) R14 18 109028 r2 I 1_ k2co3 CMalkO^^ i+ W R14 R2 (cc)

Kaavio V koskee sellaisten kaavan (Ia) mukaisten yhdisteiden valmistamista, joissa Δ1 on -CH=CH-. Kaaviossa V käytetään lähtöaineina kaavan (m) mukaisia yhdisteitä, jotka valmistettiin kaaviossa III kuvatulla tavalla. Kaavion V mukaisesti valmis-5 tetaan kaavan (aa) mukaisia yhdisteitä käyttäen samoja menetelmiä, joilla valmistet-j ·’ ’ tiin kaavan (f) mukaisia yhdisteitä kaaviossa II. Sitten valmistettiin kaavan (bb) *. mukaisia yhdisteitä samoilla menetelmillä, joita käytettiin kaavan (c) mukaisten yh- disteiden muodostamiseksi kaaviossa I. Tämän jälkeen käsiteltäessä kaavan (bb) • · · '· · mukaisia yhdisteitä samalla tavoin kuin muodostettaessa kaavan (s) mukaisia yhdis- .. . '· 10 teitä kaaviossa III, saadaan kaavan (cc) mukaisia yhdisteitä.

» * ♦ 19 109028

Kaavio VI

η 14 R2 ... JL J- 1) dibromantiini 2) LiBr 3) trietyyliamiini/bentseenitioli ^ a^Q 4) -m-klooriperbentsoehappo 1-6 5) trietyyliamiinii (dd) 6) K2C03 R14 R2 1) butanoni - 2) al(iPrO)3 R2 . :‘: 1) Li/NH3 f T -► : V 2)NH4C1 n 14 (fi) R2 ; · : Pd/hiili T ->- III h2 (gg) R14 20 109028 R2 1) fenyyliselenyylikloridi 2) H202 (gg1) R2 -► -► (hh) R14 R2 ·'·}} o (kk) * Kaaviossa VI on esitetty sellaisten kaavan (Ia) mukaisten yhdisteiden valmistus, jossa on C8-Ci4-kaksoissidos. Kaavan (dd) mukaiset lähtöaineet ovat tunnettuja ja niitä voidaan valmistaa synteettisesti tunnetuista materiaaleista tunnetuilla mene-,...: 5 telmillä. Kaavan (ee) mukaisia yhdisteitä valmistetaan käsittelemällä kaavan (dd) , · ·. mukaisia yhdisteitä ensin sopivassa orgaanisessa liuottimessa, kuten heksaanissa, bromausaineella, kuten N-bromisukkinamidilla tai edullisesti dibromantiinilla, ja heikolla emäksellä, edullisesti natriumbikarbonaatilla, ja kuumentamalla edullisesti : ’': palautusjäähdyttäen. Seosta käsitellään sitten litiumbromidilla (LiBr), se jäähdyte- 10 tään lämpötilaan välille -20 ja +20 °C, edullisesti 0 °C, ja sitä käsitellään trietyyli- ·, amiinilla ja bentseenitiolilla. Sitten suoritetaan käsittely hapetusaineella, kuten nat- 21 109028 i riumperjodaatilla, vetyperoksidilla tai edullisesti m-klooriperbentsoehapolla, sitten kuumennetaan lämpötilaan 40 - 100 °C, edullisesti 70 °C, ja käsitellään orgaanisella emäksellä, kuten trimetyyliamiinilla tai edullisesti trietyyliamiinilla. Käsiteltäessä voimakkaalla emäksellä, kuten natriumhydroksidilla, kalium-hydroksidilla, litium-5 hydroksidilla tai edullisesti kaliumkarbonaatilla, saadaan kaavan (ee) mukaisia yhdisteitä.

Kaavan (ee) mukaiset yhdisteet liuotetaan sitten sopivaan orgaaniseen liuottimeen, edullisesti tolueeniin, ja niitä käsitellään alkyyliketonilla, kuten sykloheksanonilla tai edullisesti butanonilla, mitä seuraa käsittely aliuniniumisopropoksidilla ja kuulo mentaminen, edullisesti palautusjäähdytyslämpötilassa, kaavan (fif) mukaisten yhdisteiden valmistamiseksi. Saatettaessa kaavan (ff) mukaiset yhdisteet reagoimaan siten kuin kaaviossa III on esitetty kaavan (j) mukaisten yhdisteiden kanssa saadaan kaavan (gg) mukaisia yhdisteitä. Hydrattaessa kaavan (gg) mukaisia yhdisteitä käytetään sopivia katalyytteja, kuten platinadioksidia, Raney-nikkeliä tai edullisesti 15 Pd/hiiltä, saadaan kaavan (gg') mukaisia yhdisteitä. Kaavan (hh) mukaisia yhdisteitä valmistetaan sitten lisäämällä fenyyliselenyylikloridia kaavan (gg') mukaiseen yhdisteeseen liuotettuna sopivaan orgaaniseen liuottimeen, edullisesti etyyliasetaattiin, minkä jälkeen lisätään hapetusainetta, edullisesti H2O2. Korvattaessa kaavan (hh) mukaisilla yhdisteillä kaavan (m) mukaiset yhdisteet kaaviossa III saadaan kaavan 20 (kk) mukaisia yhdisteitä.

» · •» · • · · • t

Kaavio VII

22 109028 R14 2

Kloraniili W R14 R2 -^ (H) R14 1L2 :¾ ΗΟγ%Α/ ··;; O (mm)

Kaaviossa VII on esitetty sellaisten kaavan (Ia) mukaisten yhdisteiden valmistami-: ·: nen, joissa Δ5 ja Δ7 ovat -CH=CH-kaaviossa I esitetyistä kaavan (a) mukaisista yh- ’ “: 5 disteistä. Käsiteltäessä kaavan (a) mukaisia yhdisteitä sopivassa liuottimessa, kuten , . t-butanolissa, kloraniihlla samalla kuumentaen, edullisesti palautusjäähdytyslämpö- tilassa, saadaan kaavan (11) mukaisia yhdisteitä. Tämän jälkeen käytettäessä kaavan (11) mukaisia yhdisteitä kaavan (a) mukaisten yhdisteiden sijasta kaaviossa II esite- - ’ tyssä menetelmässä saadaan kaavan (mm) mukaisia yhdisteitä.

23 109028

Kaavio VIII

R14 r2 koh_^ N-metyylinitrosourea ^ R14 031 R2 - ° N) . ; : R2 0 (00^

Kaaviossa VIII esitetään kaavan (Ia) mukaisten yhdisteiden valmistus, joissa n on 2, kaaviossa I esitetyistä kaavan (a) mukaisista yhdisteistä. Kaavan (nn) mukaisia yh- 5 disteitä valmistetaan käsittelemällä kaavan (a) mukaisia yhdisteitä sopivassa or-: gaanisessa liuottimessa, kuten dietyylieetterissä ja metanolissa, joka on jäähdytetty lämpötilaan välille -20 ja +20 °C, edullisesti 0 °C, voimakkaalla emäksellä, kuten natriumhydroksidilla, litiumhydroksidilla, kaliumkarbonaatilla tai edullisesti ka-_ liumhydroksidilla (KOH), jota seuraa käsittely diatsometaanin esituotteella, kuten 10 N-metyyli-N'-nitro-N-nitrosoguanidiinilla tai edullisesti N-metyylinitrosourealla.

24 109028 Käytettäessä kaavan (nn) mukaisia yhdisteitä kaavan (a) mukaisten yhdisteiden sijasta kaavion II mukaisessa menetelmässä saadaan kaavan (oo) mukaisia yhdisteitä.

Kaavio IX

R14 2 R etyleeniglykoli /n/ p-tolueenisulfonihappo W R» R2 2^^^ - m-klooriperbentsoehappo (PP) „14 R2 :·.'·; 1) HY1 (kaasu), CHC13 :·-► ^ I 2)H+ V^O ö"' (qq) \ 3.

25 109028 i j I ljl4 li- 1) 2,6-di-t-butyyli-4-metyylipyridiini 2) tri fluori metaanisul fonihappoanhydri di (rr) Y‘ R14 tnetyyliamiini bis(trifenyylifosfiini)palladium(II)asetaatti

n JL JL J C^-alkOH, CO

CF3-S-CK^^^V^/ Ο γ! (SS) R2 ···· 0 Y1 ’ *;* (tt) • ‘ ·': Kaaviossa IX esitetään sellaisten kaavan (Ia) mukaisten yhdisteiden valmistus, jois- .: · sa Y on kloori tai fluori (Y1), kaaviossa I esitetyistä yhdisteistä, joilla on kaava (a).

Kaavan (pp) mukaisia yhdisteitä valmistetaan saattamalla kaavan (a) mukaiset yh-5 disteet reagoimaan sopivan ketoryhmän suojaavan aineen, kuten etyleeniglykolin, kanssa happokatalyytin, kuten p-tolueenisulfonihapon, läsnä ollessa. Käsiteltäessä kaavan (pp) mukaisia yhdisteitä sopivalla hapetusaineella, edullisesti m-klooriper-bentsoehapolla, sopivassa orgaanisessa liuottimessa, kuten dikloorimetaanissa, saa-daan kaavan (qq) mukaisia epoksidiyhdisteitä.

10 Kaavan (rr) mukaisia yhdisteitä valmistetaan sitten lisäämällä kaasumaista fluorive-‘ tyä tai kloorivetyä kaavan (qq) mukaiseen yhdisteeseen sopivassa orgaanisessa liu- ' i ottimessa, kuten kloroformissa, tai (kun Y1 = F) lisäämällä booritrifluoridi-eteraattia ) i * 26 109028 kaavan (qq) mukaiseen yhdisteeseen sopivassa orgaanisessa liuottimessa, edullisesti bentseeni-eetterissä, mitä seuraa käsittely voimakkaalla hapolla, edullisesti kloori-vedyllä, jääetikkahapossa. Sitten lisätään 2,6-di-t-butyyli-4-metyylipyridiiniä ja tämän jälkeen trifluorimetaanisulfoni-happoanhydridiä kaavan (rr) mukaiseen yhdis-5 teeseen, jolloin saadaan kaavan (ss) mukainen yhdiste. Saatettaessa kaavan (ss) mukainen yhdiste reagoimaan sopivassa orgaanisessa liuottimessa, edullisesti dimetyy-liformamidissa, trietyyliamiinin, Ci^-alKOH:n, bis(trifenyylifosfiini)palladiiim(II)-asetaatin ja hiilimonoksidin kanssa, saadaan kaavan (tt) mukainen yhdiste. Kaavan (tt) mukaisen yhdisteen vapaa happo valmistetaan haluttaessa aikaisemmissa kaa-10 vioissa esitettyjä menetelmiä käyttäen. Sellaisia kaavan (I) mukaisia yhdisteitä, joissa Y on trifluorimetyyli, valmistetaan esim. sellaisilla menetelmillä, jotka on esitetty esimerkissä 26.

Sellaisia kaavan (Ia) mukaisia yhdisteitä, joissa M on rikki, valmistetaan sellaisista kaavan (Ia) mukaisista yhdisteistä, joissa M on happi, käyttäen tunnettuja menetel-15 miä, esim. sellaista, joka on kuvattu jäljempänä esimerkissä 35.

i · • 1 f f ·

Kaavio X

27 109028 O _ (a) fosforitribromidi tai oksalyylibromidi (b) valinnainen vaihe (vaiheet) ryhmän ^ ^ Ri4 muuttamiseksi ,ρ-Λ 1 ί^ΎΎ^ (ii) 1) butyylilitium 2) hiilidioksidi 3) happo tai , trietyyhamiini, trifenyylifosfiinipalla-

ί : dium(II)asetaatti, Ci.6-alkOH, CO

T

_ i · CHj | |_o _I_ . ί * · ·

Kaaviossa X on esitetty edullinen synteettinen menetelmä sellaisten kaavan (Ia) . ‘ , mukaisten yhdisteiden valmistamiseksi, joissa on kaksoissidokset asemissa C3-C4 ja • ; 5 C5-C6. Lähtöaineena käytetään kaaviossa I esitettyjä 4-eeni-3-oni-yhdisteitä, joilla on kaava (a). X1 on bromi, kloori, fluori tai jodi. Kaavion X mukaisesti käsitellään :· kaavan (i) mukaisia yhdisteitä karboksyylihappohalidilla, kuten asetyylikloridilla, asetyylibromidilla, oksalyylikloridilla tai edullisesti oksalyylibromidilla, kaavan (ii) 109028 28 j i i 5 mukaisten yhdisteiden saamiseksi. Vaihtoehtoisesti voidaan kaavan (ii) mukaisia yhdisteitä valmistaa käsittelemällä kaavan (i) mukaisia yhdisteitä fosforitrihalidilla tai fosforipentahalidilla, kuten fosforyylikloridilla, fosforipentakloridilla tai edullisesti fosforitribromidilla, hapossa, edullisesti etikkahapossa. Tässä menetelmässä 5 voidaan haluttaessa käyttää haluttuja erilaisten lyhmien toisiinsavaihtamismenetel-miä, kuten ryhmän R14, käyttäen orgaanisessa kemiassa tunnettuja tavanomaisia menetelmiä, erikoisesti estereiden muuttamista ensin karboksyylihapoiksi, sitten happohalideiksi ja sitten karboksiamideiksi.

Kaavan (iii) mukaisia yhdisteitä, eli kaavan (Ia) mukaisia yhdisteitä, jotka ovat tyy-10 dyttämättömiä asemissa C3-C4 ja Cs-C6, valmistetaan sitten lisäämällä alkyylilitium-reagenssia, kuten n-butyylilitiumia, s-butyylilitiumia tai t-butyylilitiumia, yhdisteeseen (ii), jota seuraa käsittely karboksyloimisaineella, kuten dietyylikarbonaatilla, etyyli-kloroformaatilla tai edullisesti hiilidioksidilla. Vaihtoehtoisesti voidaan kaavan (iii) mukaisia yhdisteitä valmistaa lisäämällä palladiumkatalyyttiä, edullisesti 15 trifenyylifosfiinipalladium(II)asetaattia, emäksen, edullisesti trietyyliamiinin ja Ci_6-alkoholin, edullisesti metanolin, läsnä ollessa hiilimonoksidikehässä.

Kaaviossa X on esitetty sellaisten kaavan (Ia) mukaisten yhdisteiden valmistus, joissa X ja Y ovat vety. Kaaviossa X valmistetaan sellaisia kaavan (Ia) mukaisia yhdisteitä, joissa X tai Y on jokin muu kuin vety, korvaamalla kaavan (i) mukainen 20 lähtöaine sopivasti substituoidulla lähtöaineella. Yhdisteet on valittu siten, että ne voidaan muuttaa tunnetuilla menetelmillä halutun kaavan (Ia) mukaisen yhdisteen , : ryhmiksi R2 ja R3, esimerkiksi sellaisten lisävaiheiden avulla, jotka edellä on esitet- : ty.

. < Edellä esitetyissä kaavioissa on lähtöaineet valittu siten, että ryhmät R2 ja R14 kaa- • Λ Λ 25 van (a) mukaisessa yhdisteessä ovat samat kuin ryhmät R ja R valmistettavassa •;;; kaavan (Ia) mukaisessa yhdisteessä. Vaihtoehtoisesti valitaan ryhmät ja R14 kaavan ‘ ' (a) mukaisessa yhdisteessä siten, että ne voidaan muuttaa tunnetuilla menetelmillä λ ^ halutun kaavan (Ia) mukaisen yhdisteen ryhmiksi R ja R synteettisen menetelmän * ‘ : lisävaiheiden avulla.

. f ^ 30 Esim. sellaiset kaavan (Ia) mukaiset yhdisteet, joissa R on karboksyylihappo, muu- : tetaan vastaaviksi amideiksi reaktion avulla amiinien tai substituoitujen amiinien kanssa vastaavien happokloridien välityksellä. Samalla tavoin valmistetaan sellaisia j. kaavan (Ia) mukaisia yhdisteitä, joissa R3 on CH3CHCOOH, hapettamalla vastaava alkoholi.

29 109028

Valmistettaessa yhdisteitä, joilla on kaava (Ia), valmistetaan synteettisesti uusia välituotteita, joilla on seuraava kaava (V): R14

CH3J

r2 /

f \ I

O \ I ; 11 cf3-s-o^ Rioy

O X Y

jossa kaavassa: 5 A-, B-, C- ja D-renkaiden kaksoissidokset ja X, Y, Z, R2, R10 ja R14 on määritelty kaavassa (Ia).

Valmistettaessa synteettisesti kaavan (Ia) mukaisia yhdisteitä ovat uusia välituotteita sellaiset, joilla on kaava (VI) n 14 CH3 f ch3 y * » « * • *» : (VI) • I » * » » # .’I': 10 jossa kaavassa:

X1 on bromi, kloori, fluori tai jodi, ja R14 on O

il 15 β-C-R4 30 109028 jossa kaavassa R4 on NR5R6, jossa R5 ja R6 on kumpikin itsenäisesti vety tai Ci_8-alkyyli.

Koska kaavan (Ia) mukaisilla yhdisteillä on steroidi-5-alfa-reduktaasia ehkäisevä aktiivisuus, ovat ne terapeuttisesti käyttökelpoisia käsiteltäessä sellaisia sairauksia 5 ja tiloja, joissa DHT-aktiivisuuden pieneneminen aikaansaa halutun terapeuttisen vaikutuksen. Tällaisia sairauksia ja tiloja ovat esimerkiksi tavalliset näppylät, tali-vuoto, naisten liika-karvoitus, prostatasairaudet, kuten alkava prostatan laajentuminen, ja miesten osittainen kaljuuntuminen. Keksinnön mukaisten useiden yhdisteiden tehokkuus tutkittiin estämään ihmisen steroidi-5-alfa-reduktaasin vaikutusta 10 käyttäen ihmisen suurentuneen prostatan kudoksia. Tutkittaessa niiden kykyä estää ihmisen entsyymien vaikutusta käytettiin seuraavaa menetelmää: Jäädytettyä ihmisen prostataa sulatettiin ja hienonnettiin pieniksi palasiksi (5 mm3). Kudos homogenoitiin 3-5 tilavuusosassa 20 mM kaliumfosfaattia, pH 6,5, puskurin sisältäessä 0,33 M sakkaroosia, 1 mM ditiotreitolia ja 50 μΜ NADPH, yhdessä 15 tuotteen "Brinkmann Polytron" kanssa (Sybron Corporation, Westbury, New York). Liuosta käsiteltiin ääniaaltojen avulla 3-5 min laitteella "Sonifier" (Branson Sonic Power Co), mitä seurasi homogenoiminen käsin lasisessa Dounce-homogenoimis-laitteessa (Kontes Glass Company, Vineland, New Jersey).

Prostatan osasia saatiin differentiaali-sentrifugoimisen avulla nopeudella 600 tai 20 1000 x g 20 minuutin kuluessa ja nopeudella 140 000 x g 60 min kuluessa lämpöti- ; ; lassa 4 °C. Pallonen, joka saatiin 140 000 x g sentrifugoinnista, pestiin 5-10 kertai- ,1 »

sella määrällä edellä mainittua puskuria ja sentrifugoitiin vielä nopeudella * v. 140 000 x g. Saatu pallonen suspendoitiin 20 mM:iin kaliumfosfaattipuskuria, pH

v l » ,. t 6,5, joka sisälsi 20 % glyserolia, 1 mM ditiotreitolia ja 50 μΜ NADPH. Suspendoi- 25 tua, hajotettua liuosta varastoitiin lämpötilassa -80 °C.

« i · t >11* : : Vakiomäärä [14C]-testosteronia (52-55 mCi/mmoolia; New England Nuclear, Bos ton, MA) etanolissa ja vaihtelevia määriä potentiaalista inhibiittoria etanolissa saos-,: tettiin koeputkessa ja väkevöitiin kuiviin tuotteessa SAVANT Speed Vac. Ku hunkin putkeen lisättiin puskuria, 20 μΐ 10 mM NADPH, ja määrätty määrä hieno-30 jakoista prostataliuosta lopputilavuuden ollessa 1,0 ml 50 mM natriumsitraatissa, ' pH 5,0. Kun liuosta oli haudottu 20-30 min lämpötilassa 37 °C, lopetettiin reaktio lisäämällä 4 ml etyyliasetaattia ja kantaja-aineiksi 0,25 pmoolia kutakin seuraavista: testosteroni, dihydrotestosteroni, androstaanidioli ja androstaanidioni. Orgaaninen kerros poistettiin toiseen koeputkeen ja haihdutettiin kuiviin tuotteessa "Speed 35 Vac." Jäännös liuotettiin 20-30 μΐ kloroformia, lisättiin 20 x 20 cm esikanavoitua I 31 109028 piioksidigeeli-TLC-levyä (Si 250F-PA, Baker Chemical) ja kehitettiin kahdesti asetoni-kloroformilla ¢1:9). Radiokemikaalinen pitoisuus substraatin ja tuotteen juovissa määrättiin laitteella BIO-SCAN Imaging Scanner (Bioscan Inc., Washington D.C.). Laskettiin sen talteenotetun säteilymerkkiaineen prosenttimäärä, joka oli 5 muuttunut tuotteeksi ja tästä määrättiin entsyymin aktiivisuus. Kaikki inkubointikä- sittelyt suoritettiin siten, ettei enempää kuin 12 % substraattia (testosteronia) kulutettu.

Kokeessa saadut arvot syötettiin tietokoneeseen lineaariseksi funktioksi laskemalla entsyymiaktiivisuuden käänteisarvo (1/nopeus) vaihtelevan inhibiittoriväkevyyden 10 funktiona (Dixon M. (1953), Biochem. J. 55, 170). Olettamalla, että steroidi-inhibiittori on kilpaileva testosteronin inhibiittori, voidaan estovakion (KO arvo laskea yhtälöstä 1:

Kj = (B/A)/(S/Km + 1) Yhtälö 1 jossa yhtälössä B on korkeusero 1/nopeusakselilla, A on viivan kaltevuus, S on ko-15 keessa käytetyn substraatin (testosteronin) väkevyys ja Km on Michaelis-Menton-vakio substraatille (testosteronille), joka erillisellä kokeella määrättynä oli 4,5 μΜ.

Taulukossa Π on esitetty edellä olevan kokeen tulokset ja siitä ilmenee, että kokeillut keksinnön mukaiset yhdisteet ovat voimakkaita ihmisen steroidi-5-alfa-reduktaa-sin estoaineita.

! * » i « * · 20 Taulukko Π * ·

Ihmisen prostatan steroidi-5-alfa-reduktaasin estovakiot * * * * · - Yhdiste IQ (nM) * 5000 :·; 25 Y : :’j 2000

Yhdiste Kj (nM)

Taulukko Π (jatkoa) 32 109028 T1'1 c’i 30 a 1 *1= Ys’> ,.£0' gcferr a iv ;ζγ'-> -rO^Tr 52

* · · I

• C^1| I [ / A

«J... r-V -O

· >·

Taulukko Π (jatkoa)

Yhdiste Kj(nM) 33 109028 5 -'«ΌοΓ· 2200 β " 'v^ 30 io 9 *3*----- V · .

** ’S--'* j - 32 . : · > Λ*: 15 j£y~, •: ’· *“» 50 .!» e :T: /’V* „ V*Yeei ,f,\ * ϊ

Taulukko II (jatkoa)

Yhdiste Kj (nM) 34 109028 .‘fr4*’ 5 110 i F'r*"* ,^£>05 “* 900 a- J * .ry*' ^^prr4** 35 * 0,1 f* 10 * *. ^ *£ΓΤ) ®·ι 170 r*-V e * S· j * -gw - t

:.: : HO

IV 15 • · • · · * » • · · III» ’ Määrättyjä keksinnön mukaisia yhdisteitä kokeiltiin myös niiden in vivo -aktiivi- ···’ 20 suuden suhteen estämään steroidi-5-alfa-reduktaasin vaikutusta. Urospuolisille Charles River CD -rotille, jotka olivat 48 vrk vanhoja ja painoivat noin 200 g, an-·:··: nettiin 10 mg/kg N,N-di-isopropyyli-androst-3,5-dieeni-17-beeta-karboksiamidi-3- karboksyylihappoa liuotettuna propyleeniglykoliin ja laimennettuna normaaliseen suolaliuokseen. Yhdisteen antamisen jälkeen eläimet tapettiin, vatsanpuoleiset pros-· · · 25 tatat poistettiin ja NHT-arvot määrättiin seuraavalla menetelmällä.

109028 35

Prostatakudos poistettiin, puhdistettiin, punnittiin, hienonnettiin ja pestiin fosfaatti-puskurilla. Kudos homogenoitiin sitten fosfaattipuskurissa ja uutettiin lisäämällä etyyliasetaattia ja sitä sekoitettiin kehäsekoittajassa 45 min. Etyyliasetaatti haihdutettiin, jäännökseen lisättiin etanolia ja sitten suodatettiin sentrifugoimalla käyttäen 5 0,45 pm suodatuspaperia. Aineosat erotettiin sitten käyttäen käänteisfaasi-HPLC- käsittelyä ja DHT-fraktio otettiin talteen. Tämä fraktio kuivattiin ja sekoitettiin tavanomaiseen DHT-koepuskuriin, jota valmistaa Amersham. DHT-arvot määrättiin sitten tavanomaisten menetelmien, kuten radioimmunokokeen, avulla.

Yhdisteellä käsitellyissä rotissa pienenivät prostatan DHT-arvot 40 % verrattuna vä-10 liaineella käsiteltyihin vertailueläimiin 4 tuntia yhdisteen antamisen jälkeen. Pienentyneet DHT-arvot säilyivät yli 8 tuntia annostelun jälkeen ja palautuivat vertailuarvoihin 24 tunnin kuluttua käsittelyn jälkeen. Yksi edellä mainitun yhdisteen metyy-liesterin 10 mg/kg suuruinen annos pienensi prostatan DHT-arvoja 48 % väliaineella käsiteltyihin vertailueläimiin verrattuna 6 tunnin kuluttua. Täten, vaikkakin tämä 15 yhdiste ei ehkäise steroidi-5-alfa-reduktaasia in vitro, aikaansaa tämän yhdisteen annostelu in vivo entsyymin huomattavan ehkäisyn.

Tutkittiin myös N,N-di-isopropyyli-androst-3,5-dieeni-17-beetakarboksi-amidi-3-karboksyylihapon vaikutus prostatan kasvuun. Annettaessa tätä yhdistettä 0,5-50 mg/kg kahdesti päivässä oraalisesti 14 vrk ajan nuorille rotilla aikaansaatiin an-20 noksen suuruudesta riippuva prostatan kasvun pieneneminen. Niiden eläinten pros-. tatan paino, jotka saivat maksimiannoksen tätä yhdistettä, oli 40-50 % pienempi kuin vertailueläimillä.

• · ’;' · ‘ Käyttäen edellä kuvattuja menetelmiä tutkittiin myös 17-beeta-N-t-butyylikarboksi- amidiandrost-3,5-dieeni-3-karboksyylihapon vaikutus in vivo. Rotille annettiin yksi ,.!: ‘ 25 oraalinen annos väliainetta tai tätä yhdistettä 5, 10, 20 tai 50 mg/kg. Kaikkia näitä v : annoksia käytettäessä pieneni prostatan dihydrotestosteronimäärä huomattavasti, noin 50 %, vertailueläimiin verrattuna, mutta testosteroniarvot pysyivät muuttumat-: · · · tornina.

• » •; · * Rotille annettiin myös 10 mg/kg tätä yhdistettä j a määritettiin prostatan testosteroni- 30 ja dihydrotestosteroniarvot useita kertoja 24 tunnin kuluessa. Dihydrotestostero- ·:··: niarvot pienenivät huomattavasti, noin 60 %, vertailueläimiin verrattuna kaikkina ’. ajankohtina 2-8 tuntia käsittelyn jälkeen ja palautuivat vertailuarvoihin 24 tunnin ’;;; kuluttua käsittelystä. Prostatan testosteroniarvot pysyivät pääasiallisesti vakioina.

36 109028

Rotille annettiin myös tätä yhdistettä 1, 5, 10, 25 tai 50 mg/kg kahdesti vuorokaudessa 2 viikon ajan sen seikan selvittämiseksi, aiheuttiko toistuva käsittely vatsan-puoleisen prostatan painon pienenemisen. Vatsanpuoleisen prostatan paino oli 90 % vertailuarvosta annoksen ollessa 5 mg/kg ja 65 % annoksen ollessa 10 ja 50 mg/kg.

5 Sukurauhasten paino pieneni huomattavasti kaikissa käsittelyarvoissa.

Ekvivalenttisia yhdisteitä kaavan I mukaisiin yhdisteisiin nähden ovat sellaiset yhdisteet, jotka vastaavat näitä yhdisteitä, mutta joissa substituentteja on lisätty kaavan (Ia) mukaisten yhdisteiden substituoimattomiin asemiin tai joissa metyyliryhmä asemassa C-13 puuttuu tai on korvattu C^-alkyylilla edellyttäen, että näillä yhdis-10 teillä on samanlainen farmaseuttinen käyttökelpoisuus kuin kaavan (Ia) mukaisilla yhdisteillä.

Seuraavat esimerkit kuvaavat kaavan (Ia) mukaisten yhdisteiden valmistusta ja näitä yhdisteitä sisältäviä farmaseuttisia seoksia. Nämä esimerkit eivät rajoita keksinnön piiriä, jonka määräävät oheen liitetyt patenttivaatimukset.

15 Esimerkki 1 20-alfa-(hydroksimetyyli)-5-alfa-pregn-3-eeni-3-karboksyylihappo (i) 20-alfa-(hydroksimetyyli)-pregn-4-eeni-3-oni

Pregn-4-eeni-3-oni-20-alfa-karboksialdehydiä (16,4 g, 50 mmoolia) jäähdytettiin etanolissa (250 ml) ja THF:ssa (50 ml) lämpötilaan 0 °C ja siihen lisättiin tipoittain ; 20 liuos, jossa oli natriumboorihydridiä (NaBFLj) 125 ml:ssa etanolia. Reaktioseosta : sekoitettiin yli yön lämpötilassa 25 °C. Reaktio-seokseen lisättiin etikkahappoa sik- . V: si, kunnes pH oli neutraali ja liuos haihdutettiin sitten ylimääräisen etanolin poista- j ‘ · ’; miseksi. Jäännös liuotettiin trikloorimetaaniin ja pestiin kyllästetyllä bikarbonaatti- .:. liuoksella, vedellä ja suolaliuoksella. Orgaaninen kerros kuivattiin sitten natriumsul-/··. 25 faatilla ja haihdutettiin kuiviin, jolloin saatiin 13,9 g (82 %) 20-alfa-(hydroksime-tyyli)-pregn-4-eeni-3-onia.

• (ii) 20-alfa-(t-butyylidimetyylisilyylioksimetyyli)-pregn-4-eeni-3-oni • t ·’ Liuosta, jossa oli 20-alfa-(hydroksimetyyli)-pregn-4-eeni-3-onia (1,2 g, 3,5 mmoo- ! lia), t-butyylidimetyylisilyylikloridia (627 mg, 4,15 mmoolia) ja imidatsolia ’: ‘': 30 (287 mg, 4,22 mmoolia) DMF:ssa (40 ml), sekoitettiin yli yön lämpötilassa 40 °C.

,!. Reaktioseos kaadettiin sitten jääveteen ja emulsio pestiin kolmesti etyyliasetaatilla.

. Orgaaniset kerrokset yhdistettiin, pestiin kylmällä laimealla kloorivetyhapolla, vedellä ja suolaliuoksella, kuivattiin natriumsulfaatilla ja haihdutettiin kuiviin. Ki- i 109028 37 teetettäessä uudelleen metanolista saatiin 1,1 g (70 %) 20-alfa-(t-butyylidimetyyli-silyylioksimetyyli)-pregn-4-eeni-3-onia.

(iii) 20-alfa-(t-butyylidimetyylisiloksimetyyli)-3-(trifluorimetyylisulfonaatti)-5-alfa-pregn-3-eeni 5 Ammoniakkia (200 ml) tislattiin kahdesti pyöreäpohjaisessa kolmikaulapullossa, joka oli varustettu kuivajäälauhduttajalla ja argon-kaasun syöttölaitteella. Liti-um(Li)-lankaa (120 mg, 17,4 mmoolia) liuotettiin ammoniakkiin (NH3). Sitten lisättiin liuos, jossa oli 20-alfa-(t-butyylidimetyylisiloksi-metyyli)-pregn-4-eeni-3-onia (3 g, 6,76 mmoolia) ja aniliinia (49,5 ml, 5,4 mmoolia) THF:ssa (50 ml), Li/NH3-10 liuokseen.

Reaktioseosta sekoitettiin lämpötilassa -78 °C 15 min ja sitä sammutettiin sitten isopreenilla siksi, kunnes sininen väri poistui. Haihtuvat aineet haihdutettiin (liiallisen vaahtoamisen välttämiseksi) lämmittämällä hitaasti paineessa 0,5 mmHg 1 1/2 tunnin ajan. Jäännös liuotettiin uudelleen THF:iin (50 ml) ja jäähdytettiin lämpöti-15 laan 0 °C. Reaktioseokseen lisättiin N-fenyylitrifluorimetyylisulfonimidin (7 g, 20 mmoolia) liuos THF:ssa (10 ml) ja sekoittamista jatkettiin yli yön lämpötilassa 4 °C. Liuotin haihdutettiin sitten ja jäännöstä käsiteltiin kromatografisesti piioksidi-geelipatsaassa eluoimalla 3-%:sella etyyliasetaatilla heksaanissa, jolloin saatiin 2,24 g (57 %) 20-alfa-(t-butyylidi-metyylisiloksimetyyli)-3-(trifluorimetyylisulfo-20 naatti)-5-alfa-pregn-3-eenia.

• * » · · jiV (iv) 20-alfa-(t-butyyIidimetyylisiloksimetyyli)-3-karbometoksi-5-aIfa-pregn-3- ‘. ; eeni • · * * · « · 20-alfa-(t-butyylidimetyylisiloksimetyyli)-3-(trifluorimetyylisulfonaatti)-5-alfa-··· pregn-3-eenia (100 mg, 0,173 mmoolia) liuotettiin metanoliin (0,5 ml) ja DMF:iin

Mil 25 (1 ml). Liuokseen lisättiin sitten trietyyliamiinia (55 μΐ, 0,386 mmoolia), trifenyyli- fosfiinia (9 mg, 0,034 mmoolia) ja palladium(II)asetaattia (3,8 g, 0,017 mmoolia) ja ii<; CO:n annettiin kuplia liuoksen läpi 5 min. Reaktioseosta sekoitettiin sitten yli yön ... lämpötilassa 45 °C 1 atm CO-kehässä, laimennettiin etyyli-asetaatilla ja pestiin ve- :' dellä neutraaliin pH-arvoon. Orgaaninen kerros kuivattiin natriumsulfaatilla ja haih- 30 dutettiin. Tumma öljy puhdistettiin kromatografisesti piioksidigeelillä eluoimalla 10-%:sella etyyliasetaatilla heksaanissa, jolloin saatiin 52 mg (61 %) haluttua tuotetta 20-alfa-(t-butyylidi-metyylisiloksimetyyli)-3-karbometoksi-5-alfa-pregn-3-eenia.

109028 38 (v) 20-aIfa-(hydroksimetyyli)-3-karbometoksi-5-alfa-pregn-3-eeni 20-alfa-(t-butyylidimetyylisiloksimetyyli)-3-karbometoksi-5-alfa-pregn-3-eenia (500 mg, 1,05 mmoolia) liuotettiin THF:iin (20 ml) ja siihen lisättiin 2 ml tetrabu-tyyliammoniumfluoridin 1-moolista liuosta THFissa. Reaktioseosta sekoitettiin sitr 5 ten huoneen lämpötilassa 3,5 tuntia ja se laimennettiin vedellä. Vesipitoinen seos pestiin huolellisesti dikloorimetaanilla. Orgaaniset kerrokset yhdistettiin, kuivattiin natriumsulfaatilla ja haihdutettiin kuiviin. Puhdistettaessa kromatografisesti ja eluoitaessa 20-%:sella etyyliasetaatilla heksaanissa saatiin 300 mg (78 %) 20-alfa-hydroksimetyyli-3-karbometoksi-5-alfa-pregn-3-eenia.

10 (vi) 20-alfa-(hydroksimetyyli)-5-alfa-pregn-3-eeni-3-karboksyyIihappo 20-alfa-(hydroksimetyyli)-3-karbometoksi-5-alfa-pregn-3-eenia (300 mg, 0,802 mmoolia) liuotettiin THF:iin (15 ml) ja metanoliin (15 ml). Sitten lisättiin li-tiumhydroksidia (8 ml 1-n vesiliuosta) ja reaktioseosta sekoitettiin yli yön. Reaktio-seos laimennettiin sitten vedellä ja haihdutettiin ylimääräisen metanolin ja THF:n 15 poistamiseksi. Vesiliuos hapotettiin 5-%:sella kloorivetyhapolla ja pestiin useita kertoja etyyli-asetaatilla. Orgaaniset kerrokset yhdistettiin, pestiin suolaliuoksella, kuivattiin natriumsulfaatilla ja haihdutettiin kuiviin. Kiteytettäessä uudelleen etyyliasetaatista ja heksaanista saatiin 242 mg (84 %) haluttua happoa, 20-alfa-(hydrok-simetyyli)-5-alfa-pregn-3-eeni-3-karboksyylihappoa, sp. 197-203 °C.

.: : 20 Esimerkki 2 k · · y. N,N-di-isopropyyli-5-aIfa-androst-3-eeni-17-beeta-karboksi-amidi-3-karbok- ’. ·. syylihappo " | # (i) 17-beeta-(hydroksimetyyli)-androst-4-eeni-3-oli ' Noin 750 ml kuivaa THF lisättiin pyöreäpohjaiseen kolmikaulapulloon, joka oli va- 25 rustettu lauhduttajalla, argon-kaasun syöttölaitteella ja mekaanisella sekoittajalla.

•: · · Pullo jäähdytettiin lämpötilaan 0 °C ja siihen lisättiin hitaasti litium-aluminium- . ‘ . hydridia (LAH) (11,39 g, 0,3 moolia). Kun kaikki LAH oli lisätty, lämmitettiin pul lo huoneen lämpötilaan. LAH-lietteeseen lisättiin sitten erittäin hitaasti liuos, jossa < f » oli metyyli-androst-4-eeni-3-oni-17-beeta-karboksylaattia (66 g, 0,2 moolia) 600 : : 30 ml:ssa THF. Steroidin lisäämisen jälkeen lämmitettiin reaktioseos hitaasti palautus-i · jäähdytyslämpötilaan. 2 tunnin kuluttua sammutettiin ylimääräinen LAH 11,4 ml:lla vettä, 11,4 ml:lla 15 % natriumhydroksidia (NaOH) ja 28 ml:lla vettä. Suolat poistettiin suodattamalla ja pestiin noin 1 litralla lämmintä THF. Väkevöitäessä yhdiste- 39 109028 tyt orgaaniset liuokset saatiin 63 g (94 %) 17-beeta-(hydroksimetyyli)-androst-4-eeni-3-olia alfa-ja beeta-isomeerien seoksena.

(ii) 3-okso-17-beeta-(hydroksimetyyli)-4-androsteeni

Liuosta, jossa oli 17-beeta-(hydroksimetyyli)-androst-4-eeni-3-olia (27 g), 5 0,089 moolia) 1200 ml:ssa trikloorimetaania, käsiteltiin aktivoidulla mangaani dioksidilla (66 g). Seos suodatettiin 3 tunnin kuluttua. Väkevöitäessä saatiin 26 g (96 %) 3-oksi-17-beeta-(hydroksimetyyli)-4-androsteenia (sp. 151 °C).

(iii) 3-okso-17-beeta-(t-butyyiidimetyylisiIyylioksimetyyli)-4-androsteeni

Liuokseen, jossa oli 3-oksi-17-beeta-(hydroksimetyyli)-4-and-rosteenia (15 g, 10 0,05 moolia) 200 ml:ssa DMF, lisättiin 5,8 g (0,085 moolia) imidatsolia ja tämän jälkeen 9,7 g (0,065 moolia) t-butyylidimetyylisilyylikloridia. Reaktioseosta sekoitettiin huoneen lämpötilassa argonkehässä 2,5 tuntia. Reaktioseos kaadettiin sitten 250 ml:aan jäävettä ja pestiin kolme kertaa etyyliasetaatilla. Yhdistetyt orgaaniset kerrokset pestiin kahdesti kylmällä 5-%:lla kloorivetyhapolla ja kerran kyllästetyllä 15 natriumbikarbonaattiliuoksella ja suolaliuoksella. Orgaaninen kerros kuivattiin nat-riumsulfaatilla ja haihdutettiin. Kiteytettäessä uudelleen metanolista saatiin 16,9 g (82 %) 3-oksi-17-beeta-(t-butyylidimetyylisilyylioksimetyyli)-4-anchOSteenia valkoisena kiteisenä kiinteänä aineena.

(iv) 17-beeta-(t-butyyIidimetyylisilyylioksimetyyli)-3-(trifluorimetyylisulfonaat-20 ti)-5-alfa-androst-3-eeni * · · • · • · .V: Ammoniakkia (300 ml) tislattiin kahdesti pyöreäpohjaisessa kolmikaulapullossa, ·*·': joka oli varustettu kuivajäälauhduttajalla ja argon-kaasunsyöttölaitteella. 250 mg

* « I

(3 ekv.) Li-lankaa liuotettiin ammoniakkiin ja sekoitettiin 15 min kuivuuden var-mistamiseksi. Sitten lisättiin juuri tislattua aniliinia 0,53 ml (0,8 ekv.). Sitten lisät-25 tiin tipoittain Li/NH3-liuokseen sellainen liuos, jossa oli 3 g (7,2 mmoolia) 3-okso-17-beeta-(t-butyylidimetyylisilyylioksimetyyli)-4-androsteenia 50 ml:ssa kuivaa THF. Sitten lisättiin vielä 50 ml THF liukenemisen edistämiseksi. Reaktioseosta I · ;·' sekoitettiin lämpötilassa -78 °C 2 tuntia ja siihen lisättiin sitten isopreenia siksi, kunnes sininen väri hävisi. Haihtuvat aineet haihdutettiin (liian suuren vaahtoami-•: · · · 30 sen välttämiseksi) hitaasti lämmittämällä paineessa 0,5 mmHg 1,5 tunnin kuluessa.

öljymäinen jäännös liuotettiin uudelleen kuivaan THF:iin (100 ml) ja jäähdytettiin •;;; lämpötilaan 0 °C. Sitten lisättiin liuos, jossa oli 7,7 g (3 ekv.) N-fenyylitrifluori- ’ · · · * metyylisulfonimidiä 50 ml:ssa THF ja pullo suljettiin tiiviisti ja sekoittamista jatket- i 40 109028 i tiin yli yön lämpötilassa 4 °C. Seos väkevöitiin sitten kuiviin ja käsiteltiin kromato-grafisesti piioksidilla ja eluoimalla heksaanilla. Kiteytettäessä uudelleen etyyliase-j taatista saatiin 2,5 g (63 %) 17-beeta-(t-butyylidimetyylisilyyhoksimetyyli)-3- (trifluorimetyyhsulfonaatti)-5-alfa-adrost-3-eenia (sp. 120-121 °C).

5 (v) metyyli-17-beeta-(t-butyylidimetyylisilyyIioksimetyyIi)-5-alfa-androst-3-ee- ni-3-karboksylaatti

Liuokseen, jossa oli 3 g (5,46 mmoolia) 17-beeta-(t-butyylidi-metyylisilyylioksime-tyyli)-3-(trifluorimetyylisulfonaatti)-5-alfa-androst-3-eenia 10 mlissa DMF ja 10 ml:ssa metanolia, lisättiin 1,5 ml (2 ekv.) trietyyliamiinia ja 123 mg (0,03 ekv.) 10 katalyyttia, bis(trifenyylifosfiini)palladium(II)asetaattia. Hiilimonoksidin (CO) annettiin kuplia liuoksen läpi 5 min ja reaktioseosta sekoitettiin sitten huoneen lämpötilassa yli yön 1 atm CO-paineessa. Seos laimennettiin etyyliasetaatilla ja pestiin vedellä neutraaliin pH-arvoon. Orgaaninen kerros kuivattiin natriumsulfaatilla ja haihdutettiin. Suoritettaessa kromatografinen käsittely piioksidigeelin avulla ja elu-15 oimalla peräkkäisesti 5, 10 ja 20 %:lla etyyli-asetaattia heksaanissa ja kiteyttämällä tämän jälkeen uudelleen metanolista, saatiin metyyli-17-beeta-(t-butyylidimetyy-lisilyylioksimetyyli)-5-alfa-androst-3-eeni-3-karboksylaattia.

(vi) 3-karbometoksi-3-androsteeni-17-beeta-karboksyylihappo

Metyyli-17-beeta-(t-butyylidimetyylisilyylioksimetyyli)-5-alfa-androst-3-eeni-3- * i ‘ · 20 karboksylaattia (500 mg) liuotettiin 150 mliaan asetonia. Jonesin reagenssia lisättiin i '.: siksi, kunnes punainen väri jäi pysyväksi. Sitten lisättiin isopropanolia ylimääräisen v,: Jonesin reagenssin neutraloimiseksi. Asetoni dekantoitiin ja jäljelle jääneet kromi- suolat liuotettiin sitten veteen ja pestiin kolme kertaa dikloorimetaanilla. Orgaaniset ! kerrokset yhdistettiin ja johdettiin florosilpatsaan läpi ja väkevöitin, jolloin saatiin ; ’ i‘; 25 360 mg (99 %) 3-karbometoksi-3-androsteeni- 17-beeta-karboksyylihappoa.

(vii) 3-karbometoksi-3-androsteeni-17-beeta-N,N-di-isopro-pyylikarboksiamidi ·'**: 3-karbometoksi-3-androsteeni-17-beeta-karboksyylihappoa (360 mg), 0,78 mmoo- . . lia) suspendoitiin 10 ml:aan kuivaa tolueenia ja käsiteltiin 0,4 milliä oksalyyliklori- * '; dia 2 tuntia argonkehässä. Reaktioseos haihdutettiin sitten (1 mmHg) ja jäännös liu- ’ ‘ 30 otettiin 10 mliaan kuivaa THF. Sitten lisättiin liuos, jossa oli 0,6 ml di-isopropyyli- amiinia 2 mlissa kuivaa THF ja reaktioseosta sekoitettiin 1 tunti. Seos laimennettiin ": jäävedellä ja uutettiin dikloorimetaanilla. Orgaaninen kerros pestiin sitten kahdesti kylmällä 5-%:sella kloorivetyhapolla, natriumhydroksidilla ja suolaliuoksella, kui- i i 41 109028 vattiin natriumsulfaatilla ja haihdutettiin. Käsiteltäessä kromatografisesti piioksidi-geelillä ja eluoitaessa 20 % etyyliasetaatilla heksaanissa, mitä seurasi uudelleenki-teyttäminen dietyylieetteristä, saatiin 3-karbometoksi-3-androsteeni-17-beeta-N,N-diisopropyylikarboksiamidia.

5 (viii) N,N-di-isopropyyli-5-alfa-androst-3-eeni~17-beeta-karboksiamidi-3-kar-boksyylihappo 3-karbometoksi-3-androsteeni-17-beeta-N,N-di-isopropyylikarboksiamidia (300 mg, 0,7 mmoolia) ja 300 mg K2CO3 lisättiin 20 ml:aan 10:l-metanoli-vesi-liuosta ja kuumennettiin palautusjäähdyttäen argonkehässä 20 h. Seos väkevöitiin 10 sitten kuiviin ja laimennettiin vedellä. Vesipitoinen kerros huuhdottiin etyyliasetaatilla ja hapotettiin. Emulsio pestiin useita kertoja dikloorimetaanilla. Orgaaninen kerros kuivattiin natriumsulfaatilla ja haihdutettiin. Tuote kiteytettiin uudelleen liuottamalla etyylieetteriin, lisäämällä etyyliasetaattia ja väkevöimällä, jolloin saatiin N,N-di-isopropyyli-5-alfa-androst-3-eeni-17-beeta-karboksiamidi-3-karboksyyli-15 happoa, sp. 159-162 °C.

Esimerkki 3 N,N-di-isopropyyli-androst-3,5-dieeni-17-beeta-karboksi-amidi-3-karboksyyli- happo (i) androst-4-eeni-3-oni-17-beeta-karboksyylihappo 4 · f 1 · · f.1; 20 Metyyli-androst-4-eeni-3-oni-17-beeta-karboksylaattia (20 g, 60 mmoolia) liuotet-*, ·. tiin 700 ml:aan 20/1-metanoli-vesiliuosta, lisättiin kaliumhydroksidia (7 g) ja liuos- ;v. ta kuumennettiin palautusjäähdyttäen argonkehässä 24 h. Reaktioseos hapotettiin ’' t sitten 5 % kloorivetyhapolla ja siihen lisättiin 250 ml vettä. 1 tunnin pituisen seisot- ‘;;; tamisen jälkeen seos suodatettiin ja kuivattiin, jolloin saatiin 18 g (94 %) androst-4- t t · ·’ 25 eeni-3-oni-17b-eeta-karboksyylihappoa valkoisena kiteisenä kiinteänä aineena.

i · · (ii) androst-4-eeni-3-oni-17-beeta-N,N-di-isopropyylikarboksiamidi * » ·;·1 Liuosta, jossa oli androst-4-eeni-3-oni-17-beeta-karboksyylihappoa (18 g), : ·: 0,06moolia) 350 ml:ssa tolueenia, kuivattiin aseotrooppisesti siksi, kunnes noin : ”: 100 ml tislettä oli saatu talteen. Liuos jäähdytettiin sitten lämpötilaan 10 °C, lisättiin ’ I 30 pyridiiniä (6,7 ml, 0,08 moolia) ja tämän jälkeen hitaasti liuos, jossa oli oksalyyli- ’ : kloridia (7,2 ml, 0,08 moolia) 10 ml:ssa tolueenia. Reaktioseosta sekoitettiin huo- * 1 ’ 1 neen lämpötilassa (argonkehässä) 2 tuntia ja se jäähdytettiin sitten lämpötilaan 0 °C.

Sitten lisättiin di-isopropyyliamiinin (89 ml, 0,6 moolia) liuos 40 ml:ssa tolueenia 42 109028 tipoittain niin, että lämpötila ei ylittänyt 40 °C. Reaktioseosta sekoitettiin 1 h ja siihen lisättiin sitten 300 ml jäävettä. Kerrokset erotettiin ja vesipitoinen kerros uutettiin neljästi etyyliasetaatilla (800 ml). Orgaaniset kerrokset yhdistettiin ja pestiin 5 % kloorivetyhapolla ja suolaliuoksella. Orgaaninen kerros kuivattiin sitten natri-5 umsulfaatilla ja haihdutettiin kuiviin. Kiteytettäessä uudelleen liuottamalla 10 mkaan tolueenia ja lisäämällä 200 ml heksaania saatiin 16,5 g (69 %) androst-4-eeni-3-oni-17-beeta-N,N-di-isopropyylikarboksiamidia (sp. 236-239 °C).

(iii) 17-beeta-(N,N-di-isopropyylikarboksiamidi)-3-(trifluorimetyylisulfonaat-ti)-androst-3,5-dieeni 10 Androst-4-eeni-3-oni-17-beeta-N,N-di-isopropyylikarboksiamidia (5 g, 12,5 mmoo-ha) huotettiin 50 ml: aan metyleenikloridia. Steroidiliuokseen hsättiin sitten 2,6-di-t-butyyli-4-metyy-hpyridiiniä (3,08 g, 17,0 mmoolia) ja sitä sekoitettiin huoneen lämpötilassa 15 min. Liuokseen lisättiin trifuorimetaanisulfonihappoanhydridiä (3,5 ml, 19 mmoolia) ja sekoittamista jatkettiin 30 min. Reaktioseos laimennettiin sitten 50 15 ml:lla metyleenikloridia ja se suodatettiin. Orgaaninen kerros pestiin kahdesti 5-%:sella kloorivetyhapolla, kyllästetyllä natriumbikarbonaatilla ja suolaliuoksella. Se kuivattiin sitten natriumsulfaatilla ja haihdutettiin. Tuote puhdistettiin kromatografi-sesti piioksidigeelillä eluoimalla 20 % etyyliasetaatilla heksaanissa, jolloin saatiin 4 g (61 %) 17-beeta-(N,N-di-isopropyylikarboksiamidi)-3-(trifluorimetyylisulfo-20 naatti)-androst-3,5-dieenia.

(iv) 3-karbometoksi-androst-3,5-dieeni-17-beeta-N,N-di-isopropyylikarboksi-amidi • · · t t I ·

Liuokseen, jossa oli 17-beeta-(N,N-di-isopropyylikarboksiamidi)-3-(trifluorimetyy-*;: lisulfonaatti)-androst-3,5-dieenia (4 g, 7,5 mmoolia) 60 ml:ssa 1:1 metanolin DMF- 25 liuosta, lisättiin bis(trifenyylifosfiini)palladium(II)asetaattia (570 mg) ja suuri yli-, · t määrä (20 ml) trietyyliamiinia. Hiilimonoksidin annettiin kuplia liuoksen läpi 5 min 1! ja reaktioseosta sekoitettiin lämpötilassa 65 °C yli yön 1 atm CO-paineessa. Seos • laimennettiin sitten etyyliasetaatilla ja pestiin vedellä neutraaliin pH-arvoon. Orgaaninen kerros kuivattiin natriumsulfaatilla ja haihdutettiin ruskeaksi öljyksi. Puhdis- : : 30 tettaessa kromatografisesti piioksidigeelillä ja eluoitaessa 20-%:sella etyyliasetaatil-

• · I

’... · la heksaanissa, jota seurasi uudelleenkiteyttäminen etyylieetteristä ja heksaanista, . ·. : saatiin 2,1 g (64 %) 3 -karbometoksi-androst-3,5-dieeni-17-beeta-N,N-di-isopropyy- ,.,.: likarboksiamidia, sp. 159-162 °C.

i 43 109028 (v) N,N-di-isopropyyli-androst-3,5-dieeni-17-beeta-karboksi-amidi-3-karbok-syylihappo 3 -karbometoksi-androst-3,5-dieeni-17-beeta-N,N-di-isopropyyli-karboksiamidia (1,4 g, 3,17 mmoolia) ja 1 g K3CO3 lisättiin 88 ml:aan 10:l-metanoli-vesiliuosta ja 5 kuumennettiin palautusjäähdyttäen argonkehässä 20 h. Seos väkevöitiin sitten kuiviin ja laimennettiin vedellä. Vesipitoinen kerros huuhdottiin etyyliasetaatilla ja ha-potettiin. Emulsio pestiin useita kertoja dikloorimetaanilla. Orgaaninen kerros kuivattiin natriumsulfaatilla ja haihdutettiin. Tuote kiteytettiin uudelleen liuottamalla etyylieetteriin, lisäämällä etyyliasetaattia ja väkevöimällä, jolloin saatiin N,N-di-10 isopropyyli-androst-3,5-dieeni- 17-beeta-karboksiamidi-3-karboksyylihappoa (sp. 230-234 °C).

Esimerkki 4 17-beeta-(N,N-di-isopropyylikarboksiamidi)-4-fluori-5-aIfa-androst-3-eeni-3- karboksyylihappo 15 (i) 3-okso-17-beeta-(hydroksimetyyli)-5-aIfa-androstaani

Ammoniakkia (500 ml) tislattiin pyöreäpohjaiseen kolmikaulapulloon, joka oli varustettu kuivajäälauhduttajalla ja argon-kaasunlisäyslaitteella. Litiumlankaa (3 g) liuotettiin ammoniakkiin ja sekoitettiin 15 min kuivuuden takaamiseksi. Sitten lisättiin liuos, jossa oli 3-okso-17-beeta-(hydroksimetyyli)-4-androsteenia (valmistettu 20 siten kuin esimerkissä 2 (ii) on kuvattu, 37,5 g, 0,123 moolia) 625 ml.ssa THF ja t-butyylialkoholia (6,25 ml, 0,8 ekv.) tipoittain tähän Li/NH3-liuokseen. Reaktioseos-: ‘; ta sekoitettiin lämpötilassa -78 °C 2 tuntia ja siihen lisättiin isopreenia siksi, kunnes • tl « : v. sininen väri katosi. Saatu enolaatti käsiteltiin sitten ammoniumkloridilla ja ammoni- . ·. akin annettiin haihtua. Jäännökseen lisättiin asetonia ja seosta kuumennettiin varo- 25 vasti palautusjäähdyttäen. Asetoniliuos suodatettiin sitten ja haihdutettiin kuiviin, " jolloin saatiin 24,7 g (79 %) 3-okso-17-beeta-(hydroksimetyyli)-5-alfa-androstaa- •;;; nia.

• · (ii) 3-okso-5-alfa-androstaani-17-beeta-karboksyylihappo

MM

Otsikossa mainittu yhdiste valmistettiin esimerkin 2 (vi) mukaisesti käyttämällä 3-·;·' 30 oksi-17-beeta-(hydroksimetyyli)-5-alfa-androstaania metyyli-17-beeta-(t-butyylidi- • / ·.: metyylisilyylioksi-metyyli)-5-alfa-androst-3-eeni-3-karboksylaatin sijasta.

44 109028 (iii) 3-okso-5-alfa-androstaani-17-beeta-N,N-di-isopropyyHkarboksiamidi 3-okso-5-alfa-androstaani- 17-beeta-karboksyylihappoa suspendoitiin tolueeniin (100 ml) ja lisättiin ylimäärin oksalyylikloridia (8 ml). Reaktioseosta sekoitettiin 1 tunti lämpötilassa 25 °C (argonkehässä). Haihtuvat aineet poistettiin sitten 5 (0,5 mmHg, 2 tuntia). Jäännös suspendoitiin uudelleen THFiiin (25 ml), jäähdytet tiin lämpötilaan 0 °C ja lisättiin di-isopropyyliamiinia (10 ml). Reaktioseosta sekoitettiin lämpötilassa 0 °C 2 h ja se laimennettiin sitten vedellä. Vesipitoinen seos uutettiin etyyliasetaatilla ja haihdutettiin. Puhdistettaessa kromatografisesti piioksi-digeelillä eluoimalla 20 % etyyliasetaatilla heksaanissa saatiin 3,15 g (78 %) 3-10 okso-5-alfa-androstaani-17-beeta-N,N-di-isopropyyli-karboksiamidia.

(iv) 3-okso-5-alfa-androst-l-eeni-17-beeta-N,N-di-isopropyyIikarboksiamidi

Liuokseen, jossa oli 3-okso-5-alfa-androstaani-17-beeta-N,N-di-isopropyylikarbok-siamidia (2,3 g, 5,74 mmoolia) 100 ml:ssa etyyliasetaattia, lisättiin fenyylisele-nyylikloridia (1,1 g, 5,74 mmoolia) ja reaktioseosta sekoitettiin 2 h. Reaktioseos 15 pestiin sitten 5-% natriumbikarbonaattiliuoksella ja suolaliuoksella. Etyyliase-taattiliuos jäähdytettiin sitten lämpötilaan 0 °C ja siihen lisättiin 50 ml THF. Sitten lisättiin hitaasti vetyperoksidia (6 ml 30 % liuosta) ja reaktioseosta sekoitettiin 2 h. Reaktioseos pestiin sitten 5-% natriumbikartonaattiliuoksella ja suolaliuoksella ja se haihdutettiin kuiviin. Puhdistettiin kromatografisesti piioksidigeelillä eluoimalla 20 20-% etyyliasetaatilla heksaanissa saatiin 1,3 g (56,5 %) 3-okso-5-alfa-androst-l- eeni-17-beeta-N,N-di-isopro-pyylikarboksiamidia.

: (v) 3-okso-5-alfa-androstaani-l,2-alfa-epoksidi-17-beeta-N,N-di-isopropyyli- karboksiamidi 3-okso-5-alfa-androst-l-eeni-17-beeta-N,N-di-isopropyylikarboksiamidia (4,6 g, 25 11,5 mmoolia) liuotettiin 50 inhaan metanoha ja jäähdytettiin lämpötilaan 15 °C.

i · , , . .

'Liuokseen hsättiin vetyperoksidia (0,8 ml 30 % liuosta) ja tämän jälkeen natrium- • ’ hydroksidia (0,16 ml 10 % liuosta) 2 mkssa metanolia. Jääkylpy poistettiin ja se koittamista jatkettiin huoneen lämpötilassa 1 h. Reaktioseos kaadettiin sitten jääve-‘ ’ teen ja pestiin kahdesti dikloorimetaanilla. Orgaaniset kerrokset yhdistettiin ja pes- ... · 30 tiin vedellä ja suolaliuoksella, kuivattiin natriumsulfaatilla ja haihdutettiin. Hangat- : -,1 taessa asetonin kanssa saatiin 4,0 g (83,7 %) haluttua epoksidia 3-okso-5-alfa- • · ....: androstaani- 1,2-alfa-epoksidi- 17-beeta-N,N-di-isopropyyli-karboksiamidia.

* »· 109028 45 j (vi) 3-okso-4-fluori-5-aIfa-androst-l-eeni-17-beeta-N,N-di-isopropyylikarboksi-amidi 3-okso-5-alfa-androstaani-l,2-alfa-epoksidi-17-beeta-N,N-di-isopropyylikarboksi-amidia (1,7 g, 4 mmoolia) liuotettiin 25 ml:aan THF ja jäähdytettiin lämpötilaan 5 -20 °C. Liuokseen lisättiin sitten hitaasti pyridiniumpoly(fluorivetyä) (10 ml) (ar- gonkehässä). Reaktioseos lämmitettiin lämpötilaan 0 °C, sitä sekoitettiin 30 min, lämmitettiin sitten huoneen lämpötilaan ja sekoitettiin vielä 15 min. Reaktioseos kaadettiin jääveteen ja pestiin etyyliasetaatilla. Orgaaninen kerros pestiin vedellä, 5 % natriumbikarbonaattiliuoksella ja suolaliuoksella, kuivattiin natriumsulfaatilla 10 ja haihdutettiin. Puhdistettaessa kromatografisesti piioksidigeelillä eluoimalla 20 % etyyliasetaatilla heksaanissa saatiin 750 mg (44 %) haluttua 3-okso-4-fluori-5-alfa-androst- 1-eeni- 17-beeta-N,N-di-isopropyylikarboksiamidia.

(vii) 17-beeta-(N,N-di-isopropyyIikarboksiamidi)-3-(trifluorimetyylisulfonaat-ti)-4-fluori-5-alfa-androst-l,3-dieeni 15 Liuos, jossa oli litium-bis(trimetyylisilyyli)amidia (4,2 mmoolia, 2,2 ekv.) 2 ml:ssa THF, jäähdytettiin lämpötilaan -78 °C. Sitten lisättiin liuos, jossa oli 3-okso-4-fluori-5-alfa-androst- 1-eeni- 17-beeta-N,N-di-isopropyylikarboksiamidia (800 mg, 1,9 mmoolia) 10 ml:ssa THF ja reaktioseosta sekoitettiin 1 tunti. Sitten lisättiin liuos, jossa oli N-fenyyhtrifluorimetaanisulfonimidiä (857 mg, 2,4 mmoolia) 8 ml:ssa 20 THF ja reaktioseosta sekoitettiin 1,5 tuntia lämpötilassa -78 °C. Reaktioseos haihdutettiin sitten kuiviin ja sitä käsiteltiin kromatografisesti piioksidigeelillä eluoimalla 20-% etyyliasetaatilla heksaanissa. Hangattaessa tuotetta heksaani- ja eetteriliu-· oksessa saatiin 460 mg (46 %) haluttua tuotetta 17-beeta-(N,N-di-isopropyyli- '· · 1 karboksiamidi)-3-(trifluorimetyylisulfonaatti)-4-fluori-5-alfa-androst-l,3-dieenia.

• · 25 (viii) 3-karbometoksi-4-fluori-5-aIfa-androst-l,3-dieeni-17-beeta-N,N-di-iso- . . propyylikarboksiamidi : : Otsikossa mainittu yhdiste valmistettiin esimerkin 1 (iv) mukaisesti käyttämällä 17- beeta-(N,N-di-isopropyylikarboksiamidi)-3-(trifluorimetyylisulfonaatti)-4-fluori-5-: alfa-androst-l,3-dieenia 20-alfa-(t-butyylidimetyylisilyylioksimetyyli)-3-(trifluori- ' ‘: 30 metyyhsulfonaatti)-5-alfa-pregn-3 -eenin sijasta.

109028 46 ! (ix) 3-karbometoksi-4-fluori-5-alfa-androst-3-eeni-17-beeta-N,N-di-isopropyy-likarboksiamidi 3-karbometoksi-4-fluori-5-alfa-androst-l,3-dieeni-17-beeta-N,N-di-isopropyylikar-boksiamidia (120 mg, 0,26 mmoolia) 15 ml:ssa 2:1 etyyliasetaatin ja heksaanin liu-5 osta hydrattiin lämpötilassa 25 °C 1 atm paineessa käyttäen katalyyttinä 20 mg 10 % hiilellä olevaa palladiumia. Liuos suodatettiin katalyytin poistamiseksi ja vä-I kevöitiin, jolloin saatiin valkoista kiinteää ainetta (120 mg). Kiteytettäessä uudel leen metanolista ja asetonista saatiin 55 mg (46 %) haluttua 3-karbometoksi-4-fluori-5-alfa-androst-3-eeni-17-beeta-N,N-di-isopropyylikarboksiamidia, 10 sp. 171-172 °C.

(x) 17-beeta-(N,N-di-isopropyylikarboksiamidi)-4-fluori-5-alfa-androst-3-ee-ni-3-karboksyylihappo

Otsikossa mainittu yhdiste valmistettiin esimerkin 2 (viii) mukaisesti käyttämällä 2-karbometoksi-4-fluori-5-alfa-androst-3-eeni-17-beeta-di-isopropyylikarboksiamidia 15 3-karbometoksi-5-alfa-androst-3-eeni-17-beeta-N,N-di-isopropyylikarboksiamidin sijasta.

Esimerkki 5 20-alfa-(hydroksimetyyli)-4-fluori-5-alfa-pregn-3-eeni-3-karboksyylihappo (i) 20-alfa-(hydroksimetyyli)-5-alfa-pregnan-3-oni :.: : 20 Otsikossa mainittu yhdiste valmistettiin esimerkin 4 (i) mukaisesti käyttämällä 20- I V alfa-(hydroksimetyyli)-pregn-4-eeni-3-onia 3-okso-17-beeta-(hydroksimetyyli)-4- . Y: androsteenin sijasta.

“ (ii) 20-alfa-(hydroksimetyyli)-5-alfa-pregn-l-eeni-3-oni < t | f · : y: Otsikossa mainittu yhdiste valmistettiin esimerkin 4 (iv) mukaisesti käyttämällä 20- 25 alfa-(hydroksimetyyli)-5-alfa-pregnan-3-onia 3-okso-5-alfa-androstaani-17-beeta- •: · ; N,N-di-isopropyyli-karboksiamidin sijasta.

(iii) 20-aIfa-(hydroksimetyyli)-l,2-aIfa-epoksidi-5-alfa-pregnan-3-oni yOtsikossa mainittu yhdiste valmistettiin esimerkin 4 (v) mukaisesti käyttämällä 20-alfa-(hydroksimetyyli)-5-alfa-pregn-1 -eeni-3-onia 3-okso-5-alfa-androst- l-eeni-17-, 30 beeta,-N,N-di-isopropyylikarboksiamidin sijasta.

109028 47 ! (iv) 20-alfa-(hydroksimetyyli)-4-fluori-5-alfa-pregn-l-eeni-3-oni

Otsikossa mainittu yhdiste valmistettiin esimerkin 4 (vi) mukaisesti käyttämällä 20-alfa-(hydroksimetyyli)-1,2-alfa-epoksidi-5-alfa-pregnan-3 -onia 3 -okso-1,2-alfa- epoksidi-5-alfa-androstaani-17-beeta-N,N-di-isopropyylikarboksiamidin sijasta.

5 (v) 20-alfa-(t-butyylidimetyylisilyylioksimetyyli)-4-fluori-5-alfa-pregn-l-eeni-3- oni

Otsikossa mainittu yhdiste valmistettiin esimerkin 1 (ii) mukaisesti käyttämällä 20-alfa-(hydroksimetyyli)-4-fluori-5-alfa-pregn- l-eeni-3-onia 20-alfa-(hydroksimetyy-li)-pregn-4-eeni-3-onin sijasta.

10 (vi) 20-alfa-(t-butyylidimetyyIisilyyIioksimetyyli)-4-fluori-3-(trifluorimetyyli- sulfonaatti)-S-alfa-pregn-l,3-dieeni

Otsikossa mainittu yhdiste valmistettiin esimerkin 4 (vii) mukaisesti käyttämällä 20-alfa-(t-butyylidimetyylisilyylioksimetyyli)-4-fluori-5-alfa-pregn-l-eeni-3-onia 3-okso-4-fluori-5-alfa-androst- 1-eeni- 17-beeta-N,N-di-isopropyylikarboksiamidin si-15 jasta.

(vii) 3-karbometoksi-20-alfa-(t-butyylidimetyyIisilyyIioksimetyyli)-4-fluori-5-alfa-pregn-l,3-dieeni

Otsikossa mainittu yhdiste valmistettiin esimerkin 4 (viti) mukaisesti käyttämällä . ·. 20-alfa-(t-butyylidimetyylisilyylioksimetyyli)-4-fluori-3-(trifluorimetyylisulfonaat- 20 ti)-5-alfa-pregn-1,3-dieenia 17-beeta-(N,N-di-isopropyylikarboksiamidi)-3-(trifluo- ... rimetyylisulfonaatti)-4-fluori-5-alfa-androst- 1,3-dieenin sijasta.

. .: (viii) 3-karbometoksi-20-alfa-(t-butyylidimetyylisilyylioksimetyyli)-4-fluori-5- aIfa-pregn-3-eeni » · ·

Otsikossa mainittu yhdiste valmistettiin esimerkin 4 (ix) mukaisesti käyttämällä 3-. 25 karbometoksi-20-alfa-(t-butyylidimetyylisilyylioksimetyyli)-4-fhiori-5-alfa- pregn-l,3-dieenia 3-karbometoksi-4-fluori-5-alfa-androst-l,3-dieeni-17-beeta-N,N-di-isopropyylikarboksiamidin sijasta.

(ix) 3-karbometoksi-20-alfa-(hydroksimetyyli)-4-fliiori-5-alfa-pregn-3-eeni

Liuokseen, jossa oli 3-karbometoksi-20-alfa-(t-butyylidimetyylisilyylioksimetyy-' ’ ·:, 30 li)-4-fluori-5-alfa-pregn-3-eenia (610 mg, 1,2 mmoolia) THF.ssa, 20 ml, lisättiin 48 109028 2,4 mmoolia tetrabutyyliammoniumfluoridia ja reaktioseosta sekoitettiin lämpötilassa 25 °C 3,5 tuntia argonkehässä. Reaktioseos kaadettiin sitten eetteriin ja pestiin vedellä ja suolaliuoksella, kuivattiin natriumsulfaatilla ja haihdutettiin. Suoritettaessa kromatografinen käsittely piioksidigeelillä eluoimalla 15-% etyyliasetaatilla 5 heksaanissa saatiin 200 mg (43 %) haluttua 3-karbometoksi-20-alfa-(hydroksime-tyyli)-4-fluori-5-alfapregn-3-eenia, sp. 177 °C.

(x) 20-alfa-(hydroksimetyyi)-4-fluori-5-alfa-pregn-3-eeni-3-karboksyylihappo

Otsikossa mainittu yhdiste (sp. 233-236 °C, metanoliasetonista) valmistettiin esimerkin 1 (vi) mukaisesti käyttämällä 3-karbometoksi-20-alfa-(hydroksimetyyli)-4-10 fluori-5-alfa-pregn-3-eenia 20-alfa-(hydroksimetyyli)-3-karbometoksi-5-alfa-pregn-3-eenin sijasta.

Esimerkki 6 20-alfa-(hydroksimetyyli)-A-nor-5-alfa-pregn-l-eeni-2-karboksyyIihappo (i) 20-alfa-(hydroksimetyyli)-A-nor-5-alfa-pregnan-2-alfa-karboksyylihappo 15 20-alfa-(hydroksimetyyli)-5-alfa-pregnaani-3-onia (8 g, 24,1 mmoolia) suspendoi-tiin 160 ml:ssa 95-% etikkahappoa, käsiteltiin talliumasetaattiseskvihydraatilla | (30,4 g, 74,5 mmoolia) ja lämmitettiin lämpötilaan 85 °C. 3 tunnin kuluttua reaktio- seos jäähdytettiin ja kaadettiin jääveteen. Sakka suodatettiin liuotettiin uudelleen etyyliasetaattiin, pestiin vedellä ja suolaliuoksella, kuivattiin natriumsulfaatilla ja 20 haihdutettiin. Saatu öljy liuotettiin metanoliin, sitä käsiteltiin KOH-vesiliuoksella ;;·/ (8 g 50 ml:ssa vettä), lämmitettiin lämpötilaan 100 °C 40 min kuluessa, jäähdytet- '· ·* tiin huoneen lämpötilaan ja sekoitettiin 18 h. Reaktioseos laimennettiin vedellä ja pestiin etyyliasetaatilla. Vesipitoinen liuos hapotettiin väkevällä kloorivetyhapolla ja pestiin useita kertoja etyyli-asetaatilla. Orgaaniset kerrokset yhdistettiin, pestiin ; ” 25 vedellä ja suolaliuoksella, kuivattiin natriumsulfaatilla ja haihdutettiin. Kiteytettäes- sä uudelleen metanolista ja asetonista saatiin 4,9 g (58 %) 20-alfa-(hydroksime-tyyli)-A-nor-5-alfa-pregnan-2-alfa-karboksyylihappoa.

(ii) 20-alfa-(hydroksimetyyli)-2-aIfa-karbometoksi-A-nor-5-alfa-pregnaani . 20-alfa-(hydroksimetyyli)-A-nor-5-alfa-pregnan-2-alfa-karboksyylihappoa (4,9 g, ' ; 30 13,5 mmoolia) suspendoitiin 200 ml:aan dietyylieetteriä ja käsiteltiin noin 67 mmoolilla diatsometaania eetteriliuoksena ja reaktioseosta sekoitettiin 6 tuntia.

;' Ylimääräinen diatsometaani ja eetteri poistettiin tyhjössä ja kiteytettäessä uudelleen 109028 49 f metanolista saatiin 3,6 g (72 %) 20-alfa-(hydroksimetyyli)-2-alfa-karbometoksi-A-nor-5-alfa-pregnaania.

(iii) 2-alfa-karbometoksi-20-alfa-(t-butyylidimetyylisilyyIioksimetyyIi)-A-nor-5-alfa-pregnaani 5 Otsikossa mainittu yhdiste valmistettiin esimerkin 1 (ii) mukaisesti käyttämällä 20-alfa-(hydroksimetyyli)-2-alfa-karbometoksi-A-nor-5-alfa-pregnaania 20-alfa-(hyd-roksimetyyli)-pregn-4-eeni-3-onin sijasta.

(iv) 2-karbometoksi-20-alfa-(t-butyylidimetyylisilyylioksimetyyli)-A-nor-5-alfa-pregn-2-eeni 10 2-alfa-karbometoksi-20-alfa-(t-butyylidimetyylisilyylioksimetyyli)-A-nor-5-alfa-pregnaania (960 mg, 2 mmoolia) liuotettiin 30 ml THF ja jäähdytettiin lämpötilaan -78 °C. Sitten lisättiin litiumisopropyylisykloheksyyliamidia (5 ml 0,72 M liuosta) ja liuosta sekoitettiin 30 min lämpötilassa -78 °C, lämmitettiin huoneen lämpötilaan ja sekoitettiin vielä 1 h.

15 Reaktioseos jäähdytettiin jälleen lämpötilaan -78 °C, siihen lisättiin fenyyliselenyy-libromidin (960 ml, 4 mmoolia) liuos 6 ml:ssa THF ja sekoitettiin 30 min. Reaktioseos lämmitettiin sitten huoneen lämpötilaan, sitä sekoitettiin 1 tunti, se kaadettiin kylmään kyllästettyyn NFLjCl-liuokseen ja pestiin etyyliasetaatilla. Orgaaniset kerrokset yhdistettiin ja pestiin kylmällä 5-%:sella kloorivetyhapolla, 5-%:sella nat-20 riumbikarbonaattiliuoksella, vedellä ja suolaliuoksella. Etyyliasetaattiliuos jäähdy-: ·: : tettiin sitten lämpötilaan 10 °C ja siihen lisättiin vetyperoksidia (1 ml 30 % liuosta).

’. · Reaktioseosta sekoitettiin sitten huoneen lämpötilassa 2 tuntia, se laimennettiin ve- v.: dellä ja pestiin kyllästetyllä H2C03-lmoksella, laimennettiin natriumsulfiitilla ja : * · ’: suolaliuoksella, kuivattiin natriumsulfaatilla ja haihdutettiin. Puhdistettaessa kroma- • · · 25 tografisesti piioksidigeelillä eluoimalla 3 % etyyliasetaatilla heksaanissa, jota seura-si uudelleen kiteyttäminen metanolista, saatiin 680 mg (72 %) isomeerien 5:1-seosta: 2-karbometoksi-20-alfa-(t-butyylidimetyylisilyylioksi-metyyli)-A-nor-5- t : alfa-pregn-1 -eenia ja haluttua isomeeriä, 2-karbometoksi-20-alfa-(t-butyylidimetyy- lisilyylioksimetyyli)-A-nor-5-alfa-pregn-2-eenia. Nämä isomeerit erotettiin toisis-’:' ’ 30 taan, jolloin saatiin 100 mg haluttua otsikossa mainittua yhdistettä.

(v) 20-alfa-(hydroksimetyyli)-2-karbometoksi-A-nor-5-alfa-pregn-2-eeni • · Otsikossa mainittu yhdiste valmistettiin esimerkin 1 (v) mukaisesti käyttämällä 2-. 1 ’; karbometoksi-20-alfa-(t-butyylidimetyylisilyylioksimetyyli)-A-nor-5-alfa-pregn-2- 50 109028 i j f | eenia 20-alfa-(t-butyylidimetyylisilyylioksimetyyli)-3-karbometoksi-5-alfa-pregn-3- eenin sijasta.

(vi) 20-alfa-(hydroksimetyyli)-A-nor-5-alfa-pregn-l-eeni-2-karboksyylihappo

Otsikossa mainittu yhdiste (sp. 235 °C metanolista) valmistettiin esimerkin 1 (vi) 5 mukaisesti käyttämällä 20-alfa-(hydroksimetyyli)-2-karbometoksi-A-nor-5-alfa-pregn-2-eenia 20-alfa-(hydroksimetyyli)-3-karbometoksi-5-alfa-pregn-3-eenin sijasta.

Esimerkki 7 17-beeta-N,N-di-isopropyylikarboksiamidi-5-alfa-androst-l,3-dieeni-3-karbok-10 syylihappo (i) 17-beeta-(N,N-di-isopropyylikarboksiamidi)-3-(trifluorimetyylisulfonaat-ti)-5-alfa-androst-l,3-dieeni

Otsikossa mainittu yhdiste valmistettiin esimerkin 4 (vii) mukaisesti käyttämällä 3-okso-5-alfa-androst- 1-eeni- 17-beeta-N,N-di-isopropyylikarboksiamidia 3-okso-4-15 fluori-5-alfa-androst-l-eeni-17-beeta-N,N-di-isopropyylikarboksiamidin sijasta.

(ii) 3-karbometoksi-5-alfa-androst-l,3-dieeni-17-beeta-N,N-di-isopropyylikar-boksiamidi

Otsikossa mainittu yhdiste (sp. 174-176 °C) valmistettiin esimerkin 1 (iv) mukaises-: ti käyttämällä 17-beeta-(N,N-di-isopropyylikarboksiamidi)-3-(trifluorimetyylisulfo- 20 naatti)-5-alfa-androst-1,3-dieenia 20-alfa-(t-butyylidimetyylisilyylioksimetyyli)-3- •.:: (trifluorimetyylisulfonaatti)-5-alfa-pregn-3-eenin sijasta.

• 1 · (iii) 17-beeta-N,N-di-isopropyylikarboksiamidi-5-alfa-and-rost-l,3-dieeni-3-karboksyylihappo

Otsikossa mainittu yhdiste (sp. 163 °C) valmistettiin esimerkin 2 (viii) mukaisesti : · : 25 käyttämällä 3-karbometoksi-5-alfa-androst-1,3 -dieeni- 17-beeta-N,N-di-isopropyyli- karboksiamidia 3-karbometoksi-5-alfa-androst-3-eeni-17-beeta-N,N-di-isopropyyli-karboksiamidin sijasta.

19-nor-5-alfa-androst-3-eeni-17-beeta-oli-3-karboksyylihappo 51 109028

Esimerkki 8

Otsikossa mainittu yhdiste valmistettiin esimerkin 1 (ii-vi) mukaisesti käyttämällä 19-nor-testosteronia 20-alfa-(hydroksimetyyli)-pregn-4-eeni-3-onin sijasta.

5 Esimerkki 9 5-alfa-pregn-3-eeni-(20R)-3,20-dikarboksyylihappo (i) 3-karbometoksi-5-aIfa-pregn-3-eeni-(20R)-20-karboksyylihappo

Liuokseen, jossa oli 20-alfa-(hydroksimetyyli)-3-karbometoksi-5-alfa-pregn-3-eenia, joka oli valmistettu esimerkissä 1 kuvatulla tavalla (374 mg, 1,0 mmoolia) 25 10 ml:ssa asetonia, lisättiin Jonesin reagenssia tipoittain siksi, kunnes punainen väri jäi pysyväksi. Sitten lisättiin isopropanolia ylimääräisen hapetusaineen neutraloimisek-si. Liuos dekantoitiin kumimaisista kromisuoloista, väkevöitiin ja jaettiin dikloori-metaanin ja veden kesken. Suolat liuotettiin veteen ja uutettiin dikloorimetaanilla. Yhdistetyt orgaaniset kerrokset pestiin sitten suolaliuoksella, kuivattiin natriumsul-15 faatilla ja haihdutettiin, jolloin saatiin 3-karbometoksi-5-alfa-pregn-3 -eeni-(20R)-20-karboksyylihappo.

(ii) 5-alfa-pregn-3-eeni-(20R)-3,20-dikarboksyylihappo

Otsikossa mainittu yhdiste valmistettiin esimerkin 1 (vi) mukaisesti käyttämällä 3-karbometoksi-5-alfa-pregn-3-eeni-(20R)-20-karboksyylihappoa 20-alfa-(hydroksi-20 metyyli)-3-karbometoksi-5-alfa-pregn-3-eenin sijasta.

Esimerkki 10 • » · » * . . N,N-di-isopropyyli-5-alfa-pregn-3-eeni-(20R)-20-karboksiamidi-3-karboksyyli- happo

Otsikossa mainittu yhdiste valmistettiin esimerkin 2 (vii-viii) mukaisesti käyttämäl-:25 lä 3-karbometoksi-5-alfa-pregn-3-eeni-(20R)-20-karboksyylihappoa, joka oli val-mistettu esimerkin 9 mukaisesti, 3-karbometoksi-3-androsteeni-17-beeta-karbok-syylihapon sijasta.

52 109028

Esimerkki 11 f

S

5-alfa-3-eeni-17-beeta-karboksialdehydi-3-karboksyylihappo (i) 3-karbometoksi-5-alfa-androst-3-eeni-17-beeta-karboksikloridi

Liuos, jossa oli 3-karbometoksi-3-androsteeni-17-beeta-karboksyylihappoa 5 (462 mg, 1,0 mmoolia), suspendoitiin 10 ml:aan tolueenia ja sitä käsiteltiin 0,5 ml:lla oksalyylikloridia 2 tuntia. Haihtuvat aineet poistettiin sitten paineessa 1 mmHg, jolloin jäljelle jäi jäännöksenä 3-karbometoksi-5-alfa-androst-3-eeni-17-beeta-karboksyylikloridi.

(ii) 3-karbometoksi-5-aIfa-androst-3-eeni-17-beeta-karboksialdehydi 10 Liuosta, jossa oli 3-karbometoksi-5-alfa-androst-3-eeni-17-beeta-karboksyyliklori-dia (480 mg, 1,0 mmoolia) 10 ml:ssa tetrahydrofuraania, käsiteltiin litium-tri-t-butoksialuminiumhydridillä (254 mg, 1,0 mmoolia) lämpötilassa 0 °C 1 h, jolloin saatiin veden avulla tapahtuvan jatkokäsittelyn jälkeen 3-karbometoksi-5-alfa-androst-3 -eeni-17-beeta-karboksialdehydiä.

15 (iii) 5-alfa-3-androst-3-eeni-17-beeta-karboksialdehydi-3-karboksyyIihappo

Otsikossa mainittu yhdiste valmistettiin esimerkin 2 (viii) mukaisesti käyttämällä 3-karbometoksi-5-alfa-androst-3-eeni-17-beeta-karboksialdehydia 3-karbometoksi-3-androsteeni-17-beeta-N,N-di-isopropyylikarboksiamidin sijasta.

Esimerkki 12 • · • · ·

• · · I

! * · *: 20 5-alfa-androst-3-eeni-17-beeta-(l-oksobutyyli)-3-karboksyylihappo (i) 3-karbometoksi-17-beeta-(l-oksobutyyli)-5-alfa-androst-3-eeni II· ·· Liuosta, jossa oli 3-karbometoksi-5-alfa-androst-3-eeni-17-beeta-karboksyyliklori- • · · ··“ dia (480 mg, 1 mmooli), joka oli valmistettu esimerkin 11 mukaisesti, 10 ml:ssa v · THF; käsiteltiin 1,0 mmoolilla di-n-butyylikuparilitiumia lämpötilassa -78 °C. Re- 25 aktio lopetettiin lisäämällä ammoniumkloridin vesiliuosta. Uutettaessa dikloorime-': · ·: taanilla ja väkevöitäessä tämän jälkeen orgaaniset uutteet ja käsiteltäessä jäännöstä ·”*: kromatografisesti, saatiin 3-karbometoksi-17-beeta-(l-oksobutyyli)-5-alfa- . ‘ . androst-3-eenia.

t t * · > » » (ii) 5-alfa-androst-3-eeni-17-beeta-(l-oksobutyyli)-3-karboksyylihappo 53 109028 j

Otsikossa mainittu yhdiste valmistettiin esimerkin 1 (vi) mukaisesti käyttämällä 3-karbometoksi-17-beeta-(l-oksobutyyli)-5-alfa-androst-3-eenia 20-alfa-(hydroksime-tyyli)-3-karbometoksi-5-alfa-pregn-3-eenin sijasta.

5 Esimerkki 13

Androst-3,5-dieeni-17-beeta-oli-3-karboksyylihappo

Otsikossa mainittu yhdiste valmistettiin esimerkin 3 (iii-v) mukaisesti käyttämällä kaupan olevaa testosteroniasetaattia androst-4-eeni-3-oni-17-beeta-N,N-di-i sopro-pyylikarboksiamidin sijasta.

10 Esimerkki 14

Androst-3,5-dieeni-17-oni-3-karboksyylihappo

Otsikossa mainittu yhdiste valmistettiin esimerkin 9 (i) mukaisesti käyttämällä and-rost-3,5-dieeni-17-beeta-oli-3-karboksyylihappoa (esimerkki 13) 20-alfa-(hydroksi-metyyli)-3 -karbometoksi-5-alfa-pregn-3 -eenin sijasta.

15 Esimerkki 15

Etyyli-pregn-3,5,17(20)-trieeni-3-karboksi-21-oaatti

Liuos, jossa oli natriumetoksidia (680 mg, 10 mmoolia) 5 ml:ssa etanolia, lisättiin , ,· · seokseen, jossa oli esimerkissä 14 valmistettua androst-3,5-dieeni-17-oni-3-karbok- : syylihappoa (942 mg, 3 mmoolia) ja metyylidietyylifosfonoasetaattia (2,12 g, , Y: 20 10 mmoolia) ja saatua seosta kuumennettiin palautusjäähdyttäen 4 tuntia. Seos jääh- : ’. ’. dytettiin, väkevöitiin, laimennettiin laimealla etikkahapolla ja pestiin eetterillä. Yh distetyt eetteriuutteet pestiin vedellä ja suolaliuoksella ja väkevöitiin, jolloin saatiin ' , etyyli-pregn-3,5,17(20)-trieeni-3-karboksi-21-oaattia.

Esimerkki 16 * , , 25 Androst-3,5,16-trieeni-17-N,N-di-isopropyyIikarboksamidi-3-karboksyylihap- P° (i) Androst-3,5,16-trieeni-17-(trifluorimetyylisulfonaatti)-3-karboksyylihappo

Liuokseen, jossa oli androst-3,5-dieeni-17-oni-3-karboksyylihappoa (314 mg, 1 mmooli), joka oli valmistettu esimerkissä 14 kuvatulla tavalla, 10 ml:ssa mety- i 54 109028 leenikloridia, lisättiin 2,6-di-t-butyyli-4-metyylipyridiiniä (272 mg, 1,5 mmoolia) ja trifluorimetaanisulfonihappoanhydridiä (0,3 ml, 1,6 mmoolia) ja liuosta sekoitettiin 4 tuntia. Reaktioseos laimennettiin sitten metyleenikloridilla, pestiin 10 % kloorive-tyhapolla, suolaliuoksella ja väkevöitiin, jolloin saatiin raakaa and-rost-3,5,16-5 trieeni-17-(trifluorimetyylisulfonaatti)-3 -karboksyylihappoa.

(ii) Androst-3,5,16-trieeni-17-N,N-di-isopropyylikarboksiamidi-3-karboksyyli-happo

Seosta, jossa oli androst-3,5,16-trieem-17-(trifluorimetyylisulfonaatti)-3-karboksyy-lihappoa (447 mg, 1 mmooli), trietyyliamiinia (200 mg, 2 mmoolia), di-isopro-10 pyyliamiinia (4 g, 40 mmoolia) ja bis(trifenyylifosfiim)paUadium(II)asetaattia (22 mg, 0,03 mmoolia) 4 ml:ssa DMF, sekoitettiin hiilimonoksidikehässä 4 tuntia.

Seos laimennettiin sitten 10 % kloorivetyhapolla ja pestiin perusteellisesti dikloori-metaanilla. Dikloorimetaaniliuos pestiin suolaliuoksella, kuivattiin ja väkevöitiin, ja jäännös kiteytettiin uudelleen dietyylieetteristä, jolloin saatiin androst-3,5,16-15 trieeni-17-N,N-di-iso-propyylikarboksiamidi-3 -karboksyylihappoa.

Esimerkki 17 2',3'-alfa-tetrahydrofuraani-2'-spiro-17-(3,5-androstadieeni)-3-karboksyyH- happo

Otsikossa mainittu yhdiste valmistettiin esimerkin 3 (iii-v) mukaisesti käyttämällä 20 2',3'-alfa-tetrahydofuraani-2'-spiro- 17-(androst-4-eeni-3-onia) androst-4-eeni-3- . ; *: oni-17-beeta-N,N-di-isopropyylikarboksiamidin sijasta.

» t ·

Esimerkki 18

» I

i · · t « '\ 3-karbometoksi-17-beeta-asetamido-3,5-androstadieeni • » · •;;; Otsikossa mainittu yhdiste valmistettiin esimerkin 3 (iii-iv) mukaisesti käyttämällä * # · ‘ 25 17-beeta-asetamido-4-androsteeni-3-onia androst-4-eeni-3-oni-17-beeta-N,N-di-iso- propyylikarboksiamidin sijasta.

• ·« · t i 55 109028 I Esimerkki 19

Androst-3,5-dieeni-17-alfa-oli-3,17-beeta-dikarboksyyIihappo (i) 17-beeta-syano-17-aIfa-asetoksiandrost-4-eeni-3-oni 4-androsteeni-3,17-dionia (20 g) liuotettiin varovaisesti lämmittäen asetonisyano-5 hydriiniin (30 ml). Muutaman minuutin kuluttua muodostuneet kiteet erotettiin suodattamalla, pestiin pentaanilla ja liuotettiin sitten pyridiinin (50 ml) ja etikkahap-poanhydridin (50 ml) seokseen. 48 tunnin kuluttua poistettiin haihtuvat aineet alipaineessa. Jäännös liuotettiin siten eetteriin ja pestiin peräkkäin 5 % kloorivetyha-polla ja natriumbikarbonaatin vesiliuoksella. Orgaaninen liuos kuivattiin ja väkevöi-10 tiin, jolloin saatiin 17-syano-17-asetoksiandrost-4-eeni-3-onin C-17-epimeerien seos. Kromatografisessa käsittelyssä saatiin 17-beeta-syano-17-alfa-asetoksi-androst-4-eeni-3 -onia.

(ii) 3-karbometoksi-17-beeta-syano-17-alfa-asetoksiandrost-3,5-dieeni

Otsikossa mainittu yhdiste valmistettiin esimerkin 3 (iii-iv) mukaisesti käyttämällä 15 17-syano-17-asetoksiandrost-4-eeni-3 -onia androst-4-eeni-3 -oni-17-beeta-N,N-di- isopropyylikarboksiamidin sijasta.

(iii) Androst-3,5-dieeni-17-aIfa-oli-3,17-beeta-dikarboksyyIihappo

Liuos, jossa oli 3-karbometoksi-17-beeta-syano-17-alfa-asetoksiandrost-3,5-dieenia metanolissa, jäähdytettiin lämpötilaan 15 °C. Liuokseen johdettiin sitten kuivaa 20 kloorivetyhappoa ja seoksen annettiin seistä huoneen lämpötilassa 2 tuntia. Liuotin • · '· : poistettiin sitten alipaineessa. Sitten lisättiin seos, jossa oli 1:1 THF-vettä ja ylimää- i rin natriumhydroksidia ja saatua seosta sekoitettiin 2 tuntia. Reaktioseos hapotettiin 1 · sitten ja uutettiin kloroformilla. Väkevöitäessä orgaaninen huos saatiin androst-3,5-dieeni-17-alfa-oli-3,17-beeta-dikarboksyylihappoa, joka kiteytettiin uudelleen me- • i · 25 tanohsta.

Esimerkki 20 •: · : 5-alfa-androst-3,8(14)-dieeni-17-beeta-oli-3-kaboksyylihappo : (i) Androst-5,7-dieeni-3-beeta,17-beeta-dioli

Seosta, jossa oli androst-5-eeni-3-beeta,17-beeta-diohdiasetaattia (3,75 g, : · ·: 30 10 mmoolia), dibromantiinia (2,03 g, 7 mmoolia) ja natriumbikarbonaattia (4,54 g, 54 mmoolia) heksaanissa (200 ml), kuumennettiin palautusjäähdyttäen 0,5 h. Seos * ·

• » I

109028 56 i jäähdytettiin sitten ja suodatettiin ja suodos haihdutettiin kuiviin. Jäännös liuotettiin 50 ml:aan tolueenia ja sitä käsiteltiin litiumbromidilla (2 g) 5 ml:ssa asetonia. Seosta sekoitettiin lämpötilassa 0 °C 2 h ja sitä käsiteltiin sitten 2 ml:lla trietyyliamiinia ja 1,5 ml:lla bentseenitiolia. Kun oli sekoitettu huoneen lämpötilassa 1,5 h, lisättiin 5 100 ml etyyliasetaattia ja orgaaninen liuos pestiin 1-n kloorivetyhapolla ja vedellä.

Orgaaninen faasi kuivattiin ja väkevöitiin. Jäännös liuotettiin sitten 75 ml: aan etyyliasetaattia, jäähdytettiin lämpötilaan 0 °C ja sitä käsiteltiin 2,6 g:lla m-klooriper-bentsoehappoa 2 h. Seos pestiin 10 % natriumbikarbonaattiliuoksella ja väkevöitiin. Jäännös liuotettiin 100 ml:aa tolueenia, sitä käsiteltiin trietyyliamiinilla (3,6 ml), 10 kuumennettiin lämpötilassa 70 °C 24 h, jäähdytettiin ja pestiin vedellä. Orgaaninen liuos väkevöitiin ja sitä käsiteltiin kromatografisesti, jolloin saatiin androst-5,7-dieeni-3-beeta, 17-beeta-dioli-diasetaattia. Tätä diasetaattia käsiteltiin K2C03:lla 10:1 metanoli-vesiliuoksella yli yön, jolloin uuttamisen jälkeen saatiin androst-5,7-dieeni-3-beeta, 17-beeta-diolia.

15 (ii) Androst-4,7-dieeni-3,17-dioni

Liuosta, jossa oli androst-5,7-dieeni-3-beeta, 17-beeta-diolia (2,9 g, 10 mmoolia) 150 ml:ssa tolueenia, kuivattiin aseotrooppisesti 1 tunnin ajan. Sitten lisättiin bu-tanonia (15 ml) ja tämän jälkeen aluminiumisopropoksidia (1,7 g, 8 mmoolia) ja seosta kuumennettiin palautusjäähdyttäen 2,5 h. Liuos väkevöitiin sitten 25 ml tila-20 vuuteen, laimennettiin trikloorimetaanilla ja pestiin 5-% kloorivetyhapolla, natriumbikarbonaatin vesiliuoksella ja suolaliuoksella. Väkevöimisen ja kromatografisen käsittelyn jälkeen saatiin androst-4,7-dieeni-3,17-dionia.

(iii) 5-alfa-androst-7-eeni-3-oni-l 7-beeta-oli v. Otsikossa mainittu yhdiste valmistettiin esimerkin 4 (i) mukaisella menetelmällä t » 1, 25 käyttämällä androst-4,7-dieeni-3,17-dionia 3-okso-17-beeta-(hydroksimetyyli)-4- " ; androsteenin sijasta.

Il· T: (iv) 5-alfa-androst-8(14)-eeni-3-oni-l 7-beeta-oli

Liuosta, jossa oli 5-alfa-androst-7-eeni-3-oni-17-beeta-olia etyyliasetaatissa, hydrat-’ 11 ’ tiin huoneen lämpötilassa ja 1 atm paineessa käyttäen katalyyttinä 10 % hiilellä ole- • ’ 30 vaa palladiumia 8 h. Suodatettaessa katalyytin poistamiseksi ja väkevöitäessä saa- tiin 5-alfa-androst-8(14)-eeni-3-oni- 17-beeta-olia.

lii» < i » I * ; » (v) 5-alfa-androst-l,8(14)-dieeni-3-oni-17-beeta-oli 57 109028

Otsikossa mainittu yhdiste valmistettiin esimerkin 5 (ii) mukaisella menetelmällä käyttäen 5-alfa-androst-8(14)-eeni-3-oni-17-beeta-olia 20-alfa-(hydroksimetyyli)-5-alfa-pregnan-3 -onin sijasta.

5 (vi) 5-alfa-androst-3,8(14)-dieeni-17-beeta-oli-3-karboksyylihappo

Otsikossa mainittu yhdiste valmistettiin esimerkin 5 (v-x) mukaisesti käyttäen 5-alfa-androst-1,8(14)-dieeni-3-oni-17-beeta-olia 20-alfa-(hydroksimetyyli)-pregn-4-eeni-3-onin sijasta.

Esimerkki 21 10 N,N-di-isopropyyli-androst-3,5,7-trieeni-17-beeta-karboksiamidi-3-karboksyy-lihappo (i) Androst-4,6-dieeni-3-oni-17-beeta-N,N-di-isopropyyIikarboksiamidi

Androst-4-eeni-3-om-17-beeta-N,N-di-isopropyylikarboksiamidia (12 g, 30 mmoo-lia) ja kloraniilia (8,95 g, 36,4 mmoolia) 700 ml:ssa t-butanolia kuumennettiin pa-15 lautusjäähdyttäen 3,5 h, jäähdytettiin ja suodatettiin. Suodos väkevöitiin ja jäännös liuotettiin 700 ml:aan trikloorimetaania ja pestiin peräkkäin 4 x 150 ml vettä, 3 x 150 ml natriumbikarbonaatin vesiliuosta, 3 x 150 ml 5 % natriumhydroksidia ja 3 x 150 ml suolaliuosta, kuivattiin natriumsulfaatilla ja väkevöitiin, jolloin saatiin and-, ·, rost-4,6-dieeni-3-oni-17-beeta-N,N-di-isopropyylikarboksi-amidia.

• < j · I * « ( * · > ·* 20 (ii) N,N-di-isopropyyli-androst-3,5,7-trieeni-17-beeta-karboksiamidi-3-karbok- f 4 •, ’·,: syylihappo t * · tl* t · ”, ·. Otsikossa mainittu yhdiste valmistettiin esimerkin 3 (iii-v) mukaisesti käyttäen and-rost-4,6-dieeni-3-oni-17-beeta-N,N-di-isopropyylikarboksiamidia androst-4-eeni-3- > I · ' om-17-beeta-N,N-di-isopropyylikarboksiamidin sijasta.

I I

I t * i r i * * i

» I

t t · t t „ 109028 3ö

Esimerkki 22 A-homo-5-alfa-4-eeni-17-beeta-N,N-di-isopropyylikarboksiamidi-4-karboksyy- lihappo (i) A-homo-5-aIfa-androstan-4-oni-17-beeta-N,N-di-isopropyyIikarboksiamidi 5 Liuokseen, jonka lämpötila oli 0 °C ja jossa oli 3-okso-5-alfa-androstaani-17-beeta-N,N-di-isopropyylikarboksiamidia (15 g), joka oli valmistettu esimerkin 4 mukaisesti, ja KOH:ta (28 g) eetterissä (500 ml) ja metanolissa (850 ml), lisättiin 20 g N-metyylinitrosoureaa 20 min kuluessa. 5 tunnin kuluttua lisättiin 300 ml 10 % kloo-rivetyhappoa ja seos suodatettiin ja väkevöitiin orgaanisten liuottimien poistamisek-10 si. Saatu vesipitoinen suspensio uutettiin eetterillä ja eetteriliuos kuivattiin ja väke-vöitiin. Käsiteltäessä jäännöstä kromatografisesti saatiin A-homo-5-alfa-androstaa-ni-4-oni-17-beeta-N,N-di-isopropyylikarboksiamidia.

(ii) A-homo-5-alfa-4-eeni-17-beeta-N,N-di-isopropyylikarboksiamidi-4-karbok-syylihappo 15 Käyttämällä esimerkin 3 (iii-v) mukaista menetelmää ja and-rost-4-eeni-3 -oni-17-beeta-N,N-di-isopropyylikarboksiamidia A-homo-5-alfa-androstaani-4-oni-17-bee-ta-N,N-di-isopropyylikarboksiamidin sijasta saatiin 3-eeni- ja 4-eeni-A-homo-4-karboksyylihappojen seos. Kromatografisen käsittelyn ja uudelleenkiteyttämisen jälkeen saatiin puhdasta A-homo-5-alfa-androst-4-eeni-17-beeta-N,N-di-isopropyy-20 likarboksiamidi-4-karboksyylihappoa.

I « · *

Esimerkki 23 i > t N,N-di-isopropyyli-4-kloori-androst-3,5-dieeni-17-beeta-karboksiamidi-3-kar- t · · boksyylihappo (i) 3-okso-androstaani-4,5-alfa-epoksidi-17-beeta-N,N-di-isopropyylikarboksi- » I · v : 25 amidi ,,,,: Otsikossa mainittu yhdiste valmistettiin esimerkin 4 (v) mukaisesti käyttäen and- ... rost-4-eeni-3-oni-17-beeta-N,N-di-isopro-pyylikarboksiamidia-3-okso-5-alfa- androst- 1-eeni- 17-beeta,-N,N-di-isopropyylikarboksiamidin sijasta.

4 · · (ii) 3-okso-4-kloori-4-androsteeni-17-beeta-N,N-di-isopropyylikarboksiamidi : · 30 Kloorivetykaasuvirta johdettiin 3-okso-androstaani-4,5-alfa-epoksidi-17-beeta-N,N- di-isopropyylikarboksiamidin kloroformiliuoksen läpi 2 min. Liuos pestiin sitten » I · 109028 59 vedellä, kuivattiin (Na2S04) ja väkevöitiin, jolloin saatiin 3-okso-4-kloori-4-kloori-4-androsteeni- 17-beeta-N,N-di-isopropyylikarboksiamidia.

j (iii) N,N-di-isopropyyli-4-kloori-androst-3,5-dieeni-17-beeta-karboksiamidi-3-{ karboksyylihappo 5 Otsikossa mainittu yhdiste valmistettiin esimerkin 3 (iii-v) mukaisesti käyttäen 3-okso-4-kloori-4-androsteeni-17-beeta-N,N-di-isopropyylikarboksiamidia androst-4-eeni-3-oni- 17-beeta-N,N-di-isopropyylikarboksiamidin sijasta.

Esimerkki 24 N,N-di-isopropyyli-4-metyyli-5-alfa-androst-3-eeni-17-beeta-karboksiamidi-3-10 karboksyylihappo (i) 3-okso-17-beeta-(hydroksimetyyli)-4-metyyli-4-androseteeni

Seosta, jossa oli kalium-t-butoksidia (5 g) 100 ml:ssa t-butanolia, kuumennettiin pa-lautusjäähdytyslämpötilaan. Sitten lisättiin liuos, jossa oli 3-okso-17-beeta-(hydrok-simetyyli)-4-androsteenia (10 g) t-butanolissa ja tämän jälkeen metyylijodidin (2,7 15 g) liuosta t-butanolissa. Kuumentamista jatkettiin 3 h. Seos jäähdytettiin, hapotettiin ja uutettiin dikloorimetaanilla. Dikloorimetaaniliuos pestiin suolaliuoksella, kuivattiin ja väkevöitiin, jolloin saatiin 3-okso-17-beeta-(hydroksimetyyli)-4-metyyli-4-androsteenia.

(ii) N,N-di-isopropyyli-4-metyyli-5-alfa-androst-3-eeni-17-beeta-karboksiami-20 di-3-karboksyylihappo '··, Otsikossa mainittu yhdiste valmistettiin esimerkin 2 (iii-viii) mukaisesti käyttämällä ; ! 3-okso-17-beeta-(hydroksimetyyli)-4-metyyli-4-androsteenia (3-okso-17-beeta- (hydroksimetyyli)-4-androsteenin sijasta.

Esimerkki 25 25 N,N-di-isopropyyli-4-trifluorimetyyli-androst-3,5-dieeni-17-beeta-karboksi-amidi-3-karboksyylihappo (i) 3-okso-4-trifluorimetyyli-4-androsteeni-17-beeta-N,N-di-isopropyylikarbok-siamidi

Liuos, jossa oli 3-okso-4-androsteeni-17-beeta-N,N-di-isopro-pyylikarboksiamidia ,; ’ 30 (1 g) 10 ml:ssa pyridiiniä, jäähdytettiin lämpötilaan -78 °C. Trifluorimetyylijodidi- : ‘ ': kaasua lauhdutettiin kuivajää-asetonikylvyssä ja lisättiin jäähdytettyyn steroidipyri- 60 109028 diiniliuokseen. Saatua liuosta fotolysoitiin käyttäen keskisuuren paineen omaavaa 450 vatin elohopeahöyry-lamppua huoneen lämpötilassa 18 h. Reaktioseos laimennettiin sitten etyyliasetaatilla, pestiin kylmällä laimealla kloori-vetyhapolla, 5 % natriumbisulfiitilla, vedellä ja suolaliuoksella, kuivattiin vedettömän natriumsulfaa-5 tin avulla ja väkevöitiin kuiviin. Puhdistettaessa piioksidigeelipatsaassa eluoimalla 20 % etyyliasetaatilla heksaanissa saatiin 3-okso-4-trifluorimetyyli-4-androstee-ni-17-beeta-N,N-di-isopropyyli-karboksiamidia.

(ii) N,N-di-isopropyyli-4-trifluorimetyyli-androst-3,5-dieeni-17-beeta-karboksi-amidi-3-karboksyylihappo 10 Otsikossa mainittu yhdiste valmistettiin esimerkin 3 (iii-v) mukaisesti käyttäen 3-okso-4-trifluorimetyyli-4-androsteeni-17-beeta-N,N-di-isopropyylikarboksiamidia androst-4-eeni-3-oni- 17-beeta,-N,N-di-isopropyylikarboksiamidin sijasta.

Esimerkki 26 N,N-di-isopropyyli-6-trifluorimetyyU-androst-3,5-dieeni-17-beeta-karboksi-15 amidi-3-karboksyylihappo (i) 3-okso-6-trifluorimetyyli-4-androsteeni-17-beeta-N,N-di-isopropyylikarbok-siamidi 17-beeta-N,N-di-isopropyylikarboksiamidi-3-(trifluorimetyyli-sulfonaatti)-and- rost-3,5-dieenia (1 g) liuotettiin 10 ml:aan pyridiiniä ja fotolysoitiin käyttäen kes- 20 kisuuren paineen omaavaa 450 vatin Hanovia-elohopeahöyrylamppua huoneen · lämpö-tilassa 18 h. Reaktioliuos laimennettiin etyyliasetaatilla ja pestiin kylmällä : '.: laimealla kloorivetyhapolla, vedellä ja suolaliuoksella, kuivattiin vedettömällä mag- • · ·,v nesiumsulfaatilla ja haihdutettiin kuiviin. Käsiteltäessä kromatografisesti piiok- i* · ’: sidigeelipatsaassa ja eluoitaessa 20 % etyyliasetaatilla heksaanissa saatiin 3-okso-6- • ·· 25 trifluorimetyyli-4-androsteeni-17-beeta-N,N-di-isopropyylikarboksiamidia.

» · · * (ii) N,N-di-isopropyyli-6-trifluorimetyyli-androst-3,5-dieeni-17-beeta-karboksi-amidi-3-karboksyyIihappo • ‘ ‘ : Otsikossa mainittu yhdiste valmistettiin esimerkin 3 (iii-v) mukaisesti käyttäen 3- . · . okso-6-trifluorimetyyli-4-androsteeni-17-beeta-N,N-di-isopropyylikarboksiamidia ’ · 30 androst-4-eeni-3-oni-17-beeta-N,N-di-isopropyylikarboksiamidin sijasta.

it·» * > · » 109028 ; 61 Esimerkki 27 17-beeta-N,N-di-isopropyylikarboksiamidi-6-fluori-androst-3,5-dieeni-3-kar- boksyylihappo (i) 17-beeta-N,N-di-isopropyylikarboksiamidi-5-alfa-andros-steeni-3-spiro-2'-5 dioksolaani

Liuokseen, jossa oli 3-okso-4-androsteeni-17-beeta-N,N-di-isopropyylikarboksi-amidia (8 g) 300 ml:ssa bentseeniä, lisättiin 30 ml etyleeniglykolia ja p-toluee-nisulfonihappoa (240 mg). Saatua liuosta kuumennettiin palautusjäähdyttäen argon-kehässä ja vesi otettiin talteen käyttäen Dean Stark -keräyslaitetta 30 h kuluessa.

10 Reaktioseoksen annettiin sitten jäähtyä huoneen lämpötilaan ja se laimennettiin etyyliasetaatilla. Orgaaninen kerros pestiin 5 % natriumbikarbonaatilla, suolaliuoksella, kuivattiin vedettömällä magnesiumsulfaatilla ja haihdutettiin kuiviin. Raaka materiaali puhdistettiin piioksidigeelipatsaassa käyttäen eluoimisliuottimena 20 % etyyli-asetaattia heksaanissa, jolloin saatiin 7 g 17-beeta-N,N-di-isopropyylikarbok-15 siamidi-5-alfa-androsteeni-3-spiro-2'-dioksolaania (80 %).

(ii) 17-beeta-N,N-di-isopropyylikarboksiamidi-5-alfa-, 6-alfa-epoksi-androstaa-ni-3-spiro-2'-dioksolaani

Liuokseen, jossa oli 17-beeta-N,N-di-isopropyylikarboksiamidi-5-androsteeni-3- spiro-2'-dioksolaania (4,43 g, 10 mmoolia) 100 ml:ssa kuivaa diMoorimetaania 20 lämpötilassa 0 °C, lisättiin m-klooriperbentsoehapon (2,8 g) liuos 40 ml:ssa dikloo- ;, · · rimetaania tipoittain tiputussuppilon avulla. Kun m-klooriperbentsoehappo oli lisät- ty, annettiin reaktioseoksen lämmetä huoneen lämpötilaan ja sitä sekoitettiin vielä , V: 30 min. Reaktioseos pestiin sitten 10-%:sella natriumsulfiitin vesiliuoksella 4 kertaa :: ·. ·: ja sen jälkeen 5-%: sella natriumbikarbonaatin vesiliuoksella ja suolaliuoksella, kui- 25 vattiin vedettömällä magnesiumsulfaatilla ja väkevöitiin siirappimaiseksi aineeksi.

‘ . Käsittelyn jälkeen kromatografisessa patsaassa ja eluoimisen jälkeen 30 % etyyli- • · · asetaatilla heksaanissa saatiin 2,76 g 17-beeta-N,N-di-isopropyylikarboksiamidi-5-alfa, 6-alfa-epoksiandrostaani-3-spiro-2'-dioksolaania valkoisena kiinteänä aineena (61%).

. 30 (iii)3-okso-6-fluori-4-androsteeni-17-beeta-N,N-di-isopropyylikarboksiamidi ':: 17-beeta-N,N-di-isopropyylikarboksiamidi-5-alfa-,6-alfa-epoksi-androstaani-3- spiro-2'-dioksolaania (2,5 g) liuotettiin 50:50 (til./til.) -seokseen, jossa oli bent-seeniä ja eetteriä, tähän liuokseen lisättiin booiitrifluoridieteraattia (2,5 ml) argon- » · 109028 62 kehässä. Reaktioliuosta sekoitettiin huoneen lämpötilassa argonkehässä 4 tuntia ja siihen lisättiin sitten 5-%:sta natriumkarbonaatin vesiliuosta. Orgaaninen kerros pestiin vedellä ja suolaliuoksella, kuivattiin vedettömällä magnesiumsulfaatilla ja haihdutettiin kuiviin alipaineessa. Jäännöstä käsiteltiin 15 ml:lla kyllästettyä kloorivetyä 5 jääetikkahapossa. Saatua liuosta sekoitettiin huoneen lämpötilassa argonkehässä 1,5 tuntia ja se laimennettiin sitten etyyliasetaatilla. Etyyliasetaattiliuos pestiin 5 % natriumbikarbonaatin vesiliuoksella, vedellä ja suolaliuoksella, kuivattiin vedettömällä magnesiumsulfaatilla ja haihdutettiin kuiviin. Raaka materiaali puhdistettiin piiok-sidigeelipatsaassa eluoimalla 25 % etyyliasetaatilla heksaanissa, jolloin saatiin ΒΙΟ okso-6-beeta-fluori-4-androsteeni-17-beeta-N,N-di-isopropyylikarboksiamidia (675 mg; 30 %) ja 3-okso-6-alfa-fhiori-4-androsteeni-17-beeta-N,N-di-isopropyyli-karboksiamidia (900 mg, 40 %).

(iv) 17-beeta-N,N-di-isopropyylikarboksiamidi-3-(trifluorimetyylisulfonaat-ti)-6-fluori-androst-3,5-dieeni 15 Liuokseen, jossa oli 3-okso-6-fluori-4-androsteeni-17-beeta-N,N-di-isopropyyli-karboksiamidin (1,4 g) epimeerejä 50 ml:ssa kuivaa dikloorimetaania, lisättiin 2,6-di-t-butyyli-4-metyylipyridiiniä (850 mg) ja tämän jälkeen trifluorimetaanisulfoni-happoanhydridiä (0,75 ml) argonkehässä. Saatua liuosta sekoitettiin huoneen lämpötilassa argonkehässä 3 h. Liuotin poistettiin sitten alipaineessa. Jäännös liuotettiin 20 uudelleen etyyliasetaattiin, joka pestiin kylmällä, laimealla ldoorivetyhapolla, vedellä ja suolaliuoksella, kuivattiin vedettömällä magnesiumsulfaatilla ja haihdutettiin öljyksi. Patsaskromatografisen käsittelyn jälkeen (piioksidigeeli, 10% etyyli- • · · *.;*.* asetaattia heksaanissa) saatiin 17-beeta-N,N-di-isopropyylikarboksiamidi-3-(trifluo- • * » ·, */ rimetyylisulfonaatti)-6-fluori-androst-3,5-dieenia ja 17-beeta-N,N-di-isopropyyli- 25 karboksiamidi-3 -(trifhiorimetyyhsulfonaatti)-6-fluori-androst-2,4-dieenia.

• · · I · *·· (v) etyyIi-17-beeta-N,N-di-isopropyylikarboksiamidi-6-fluori-androst-3,5-diee- • I * · . ·: ·. ni-3-karboksylaatti

Seokseen, jossa oli 17-beeta-N,N-di-isopropyylikarboksiamidi-3-(trifluorimetyyli-' ’·' ‘: sulfonaatti)-6-fluori-androst-3,5-dieenia (250 mg), trietyyliamiinia (0,12 ml), etano- ‘: 30 lia (1,5 ml), N,N-dimetyyliformamidia (2 ml) ja bis(trifenyylifosfiini)palladium(II)- . · . : asetaattia (25 mg), johdettiin hiilimonoksidia 10 min. Reaktioseosta sekoitettiin i t ‘,,atm hiilimonoksidi-paineessa huoneen lämpötilassa yli yön ja se laimennettiin sitten etyyliasetaatilla. Etyyliasetaattiliuos pestiin kylmällä, laimealla kloorivetyhapolla, vedellä ja suolaliuoksella, kuivattiin vedettömällä magnesiumsulfaatilla ja väke-./· 35 voitiin kuivaksi. Käsiteltäessä piioksidigeelipatsaassa kromatografisesti eluoimalla 63 109028 10 % etyyliasetaatilla heksaanissa saatiin 108 mg etyyli- 17-beeta-N,N-di-isopro-pyylikarboksamidi-6-fluoriandrost-3,5-dieeni-3-karboksylaattia (55 %).

(vi) 17-beeta-N,N-di-isopropyylikarboksiamidi-6-fluori-androst-3,5-dieeni-3- karboksyylihappo 5 Otsikossa mainittu yhdiste valmistettiin esimerkin 2 (viii) mukaisesti käyttäen etyy-li-17-beeta-N,N-di-isopropyylikarboksiamidi-6-fluori-androst-3,5-dieeni-3-karbok-sylaattia 3-karbometoksi-3-androsteeni-17-beeta-N,N-di-isopropyylikarboksiamidin sijasta. Tuotteen sp. oli 225-226 °C (uudelleen kiteytettynä asetonitriilistä).

Esimerkki 28 10 N-t-butyyli-androst-3,5-dieeni-17-beeta-karboksiamidi-3-karboksyyHhappo (i) androst-4-eeni-3-oni-17-beeta-N-t-butyyli-karboksiamidi

Otsikossa mainittu yhdiste valmistettiin esimerkin 3 (ii) mukaisesti käyttäen tert-butyyliamiinia di-isopropyyliamiinin sijasta.

(ii) 17-beeta-(N-t-butyylikarboksiamidi)-3-(trifluorimetyylisulfonaatti)- 15 androst-3,5-dieeni

Otsikossa mainittu yhdiste valmistettiin 45 % saannolla esimerkin 3 (iii) mukaisesti käyttäen androst-4-eeni-3-oni-17-beeta-N-t-butyylikarboksiamidia androst-4-eeni-3-oni- 17-beeta-N,N-di-isopropyylikarboksiamidin sijasta.

f » (iii) 3-karbometoksiandrost-3,5-dieeni-17-beeta-N-t-butyylikarboksiamidi * · * » 20 Otsikossa mainittu yhdiste valmistettiin esimerkin 3 (iv) mukaisesti käyttäen 17- • ‘ : beeta-(N-t-butyylikarboksiamidi)-3-(trifluorimetyylisulfonaatti)-androst-3,5-dieenia ( I · .:. 17-beeta-(N,N-di-isopropyylikarboksiamidi)-3 -(trifluorimetyylisulfonaatti)-and- ’ ·: ·. rost-3,5-dieenin sijasta.

(iv) N-t-butyyliandrost-3,5-dieeni-17-beeta-karboksiamidi-3-karboksyylihappo , ··. 25 Otsikossa mainittu yhdiste valmistettiin esimerkin 3 (v) mukaisesti käyttäen 3- •' karbometoksi-androst-3,5-dieeni- 17-beeta-N-t-butyylikarboksiamidia 3-karbome- :· J toksiandrost-3,5-dieeni- 17-beeta-N,N-di-isopropyylikarboksiamidin sijasta. Otsi- : ‘: kossa mainittu yhdiste kiteytettiin uudelleen asetonitriilistä, sp. 247-250 °C.

* I t · t tili » « »

1 I

* » · i 109028 64

Esimerkki 28A

N-t-butyyli-androst-3,5-dieeni-17-beeta-karboksiamidi-3-karboksyylihappo (i) N-t-butyyli-androst-3,5-dieeni-3-bromi-17-beeta-karboksiamidi Jään avulla jäähdytettyyn liuokseen, jossa oli 3-okso-androst-4-eeni-17-karboksyy-5 lihappoa (10 g, 30 mmoolia) tolueenissa (100 ml), lisättiin liuos, jossa oli oksalyyli-bromidia (24,2 g, 11 ml, 112 mmoolia) tolueenissa (100 ml). Reaktioseosta lämmitettiin huoneen lämpötilaan siksi, kunnes kaasun kehittyminen päättyi.

Ylimääräinen oksalyylibromidi haihdutettiin huoneen lämpötilassa ja jäljelle jäänyt androst-3,5-dieeni-3-bromi-17-beeta-happobromidi tolueeniliuoksessa jäähdytettiin 10 jään avulla. Sitten lisättiin hitaasti t-butyyliamiinia (40 ml) tolueenissa (70 ml) ja seosta sekoitettiin 19 tuntia.

Reaktioseosta laimennettiin vedellä (200 ml) ja tolueenilla (100 ml). Orgaaninen liukoinen aine erotettiin ja pestiin vedellä (2 x 250 ml), kuivattiin magnesiumsulfaatilla ja haihdutettiin, öljyn ja kiinteän aineen muodostama jäännös käsiteltiin kro-15 matografisesti piioksidigeelipatsaassa ja eluoitiin 5:1 -heksaani-etyyliasetaatilla, jol loin saatiin 5,5 g valkoista kiinteää ainetta, sp. 174-177 °C (40,3 %).

(ii) N-t-butyyli-androst-3,5-dieeni-17-beeta-karboksiamidi-3-karboksyylihappo N-butyylilitiumia (2,5 M heksaanissa, 90 ml, 225 mmoolia) lisättiin 20 min kuluessa liuokseen, jossa oli androst-3,5-dieeni-3-bromi-17-beeta-N-t-butyylikarboksi-·.. i : 20 amidia (25 g, 57,7 mmoolia) kuivassa tetrahydrofuraanissa (650 ml), joka oli jääh- * i * • dytetty lämpötilaan -64 °C. 2,5 tunnin kuluttua lisättiin reaktioseokseen kuivaa V: CO:ta 1 tunnin ajan, se laimennettiin tolueenilla (500 ml), 10 % kloorivety- happoliuoksella (100 ml) ja vedellä (500 ml). Orgaaninen liukoinen uute erotettiin, I · · pestiin vedellä (2 x 300 ml), kuivattiin magnesiumsulfaatilla ja haihdutettiin. Raaka . 25 vaalea, kiinteä aine kiteytettiin uudelleen etyyliasetaatista, jolloin saatiin 3,5 g val koista kiinteää ainetta, sp. 242-249 °C.

Esimerkki 28B

. I

N-t-butyyli-androst-3,5-dieeni-3-bromi-17-beeta-karboksiamidi-3-karboksyyli- happo 30 (i) Metyyli-androst-3,5-dieeni-3-bromi-17-beeta-karboksylaatti 109028 65

Metyyli-androst-4-eeni-17-beeta-karboksylaattia (100 g, 316 mmoolia) liuotettiin jääetikkahappoon (500 ml) ja tähän lisättiin fosforitribromidia (119 g, 80 ml, 440 mmoolia) 15 min kuluessa. Kun oli sekoitettu huoneen lämpötilassa 2 h, suodatettiin muodostunut keltainen sakka, pestiin metanolilla (400 ml) ja kuivattiin tyh-5 jössä, jolloin saatiin 97,6 g (81,4 %) valkoista kiinteää ainetta, sp. 178-180 °C.

(ii) Androst-3,5-dieeni-3-bromi-17-beeta-karboksyylihappo

Liuos, jossa oli kaliumhydroksidia (50 g, 890 mmoolia) 9:l-metanolivedessä (500 ml), lisättiin metyyli-androst-3,5-dieeni-3-bromi-17-beeta-karboksylaatin lietteeseen. Kun oli kuumennettu palautusjäähdyttäen 41 h, jäähdytettiin saatu keltainen 10 liuos ja se saatettiin pH-arvoon 4 10 % kloorivetyliuoksen avulla. Muodostunut val koinen kiinteä aine suodatettiin ja pestiin vedellä. Kuivaamisen jälkeen tyhjössä lämpötilassa 40 °C saatiin 49 g (100 %) tuotetta, sp. 248-250 °C.

(lii) N-t-butyyli-androst-3,5-dieeni-3-bromi-17-beeta-karboksiamidi

Oksalyylikloridia (17 ml, 190 mmoolia) lisättiin jäähdytettyyn seokseen, jossa oli 15 androst-3,5-dieeni-3-bromi-17-beeta-karboksyylihappoa (30 g, 79 mmoolia) kuivassa tolueenissa (300 ml) 14 min kuluessa. Reaktioseosta sekoitettiin huoneen lämpötilassa siksi, kunnes kaasun kehittyminen oli päättynyt (noin 1,5 tuntia).

Ylimääräinen oksalyylikloridi poistettiin väkevöimällä tyhjössä huoneen lämpötilassa. Reaktioseos jäähdytettiin jään avulla ja siihen lisättiin t-butyyliamiinia (102 , f: 20 ml, 954 mmoolia) 10 min kuluessa. Reaktioseosta sekoitettiin huoneen lämpötilassa • ν ’. 1,5 h.

• · • t ’ · ‘ ’ Seos laimennettiin vedellä (300 ml) ja tolueenilla (50 ml). Orgaaninen kerros erotet- I. .* thn, pestiin vedellä (2 x 300 ml), kuivattiin magnesiumsulfaatilla ja haihdutettiin.

Saatu vaaleankeltainen kiinteä aine lietettiin ensin metanoli-veteen (7:3, 200 ml) ja v · 25 sitten asetonitriili-veteen (39:11, 300 ml). Suodattamisen ja kuivaamisen jälkeen tyhjössä saatiin 33,2 g (77,5 %) valkoista kiinteää tuotetta.

» il··* 1 · ,(iv) N-t-butyyli-androst-3,5-dieeni-17-beeta-karboksiamidi-3-karboksyylihap-po | · t · * % · t ‘., * N-butyylilitiumia (2,5 M heksaanissa, 90 ml, 225 mmoolia) lisättiin 20 min kulues- • » 30 sa liuokseen, jossa oli androst-3,5-dieeni-3-bromi-17-beeta-N-t-butyylikarboksi- » .., · ‘ amidia (25 g, 57,7 mmoolia) kuivassa tetrahydrofuraanissa (650 ml), joka oli jääh- I · · dytetty lämpötilaan -64 °C. 2,5 tunnin kuluttua johdettiin reaktioseokseen kuivaa

S

66 109028 CO:a 1 tunti, se laimennettiin tolueenilla (500 ml), 10-%:sella kloorivetyhappo-liuoksella (100 ml) ja vedellä (500 ml). Orgaaninen liukoinen uute erotettiin, pestiin vedellä (2 x 300 ml), kuivattiin magnesiumsulfaatilla ja haihdutettiin. Raaka vaalea, kiinteä aine kiteytettiin uudelleen etyyliasetaatista, jolloin saatiin 3,5 g valkoista 5 kiinteää ainetta, sp. 242-249 °C.

Esimerkki 28C

N,N-di-isopropyyli-androst-3,5-dieeni-17-beeta-karboksi-amidi-3-karboksyyli- happo

Otsikossa mainittu yhdiste valmistettiin käyttäen di-isopropyyliamiinia t-butyyli-10 amiinin sijasta esimerkin 28B mukaisessa menetelmässä.

Esimerkki 28D

Androst-3,5-dieeni-3-metoksikarbonyyli-17-beeta-t-butyylikarboksiamidi

Seosta, jossa oli N-t-butyyli-androst-3,5-dieeni-3-bromi-17-beeta-karboksiamidia (42 mg), joka oli valmistettu esimerkissä 28B kuvatulla tavalla, palladium(II)-15 asetaattia (20 mg), trifenyylifosfiinia (40 mg), metanolia (5 ml), dimetyyliforma-midia (5 ml) ja trietyyliamiinia (3 ml), kuumennettiin lämpötilassa 85-95 °C hiili-monoksidikehässä siksi, kunnes lähtöaine oli kulunut loppuun. Otsikossa mainittu yhdiste erotettiin kromatografisesti piioksidigeelipatsaassa käyttäen elutoimisainee-,·. na 6:l-heksaani-etyyliasetaattia.

• ’ 20 Esimerkki 28E

I » i * · ; Androst-3,5-dieeni-3-metoksikarbonyyli-17-beeta-N,N-di-isopropyylikarboksi- > I * amidi v : Otsikossa mainittu yhdiste valmistettiin esimerkin 28D mukaisesti käyttäen N,N-di- isopropyyliamiinia N-t-butyyliamiinin sijasta.

| I I I

, · >, 25 Esimerkki 29 t I * « N,N-di-isopropyyli-5-alfa-androst-2-eeni-17-beeta-karboksi-amidi-3-karbok- syylihappo (i) 17-beeta-(N,N-di-isopropyylikarboksiamidi)-3-(trifluoriinetytyylisulf<maat- j 11 i ti)-5-alfa-androst-2-eeni 67 109028

Otsikossa mainittu yhdiste valmistettiin esimerkin 4 (vii) mukaisesti käyttäen 3-okso-5-alfa-androstaani-17-beeta-N,N-di-isopropyylikarboksiamidia 3-okso-4-fhiori-5-alfa-androst-l-ee-ni-17-beeta-N,N-di-isopropyylikarboksiamidin sijasta.

(ii) 3-karbometoksi-5-alfa-androst-2-eeni-17-beeta-N,N~di-isopropyylikarbok-5 siamidi

Otsikossa mainittu yhdiste valmistettiin esimerkin 3 (iv) mukaan käyttäen 17-beeta-(N,N-di-isopropyylikarboksiamidi)-3-trifluorimetyylisulfonaatti)-5-alfa-androst-2-eenia 17-beeta-(N,N-di-isopropyylikarboksiamidi)-3-(trifluorimetyylisulfonaatti)-androst-3,5-dieenin sijasta.

10 (iii) N,N-di-isopropyyli-5-alfa-androst-2-eeni-17-beeta-karboksiamidi-3-kar-boksyylihappo

Otsikossa mainittu yhdiste valmistettiin esimerkin 3 (v) mukaisesti käyttäen 3-karbometoksi-5-alfa-androst-2-eeni-17-beeta-N,N-di-isopropyylikarboksiamidia 3-karbometoksiandrost-3,5-dieeni-17-beeta-N,N-di-isopropyylikarboksiamidin sijaan.

15 Otsikossa mainittu yhdiste kiteytettiin uudelleen asetonitriilistä, sp. 203-205 °C.

Esimerkki 30 N,N-di-isopropyyli-androst-2,4-dieeni-17-beeta-karboksiamidi-3-karboksyyli- happo (i) 17-beeta-(N,N-di-isopropyyIikarboksiamidi)-3-(trifluorimetyylisuIfonaatti)-' . : : 20 androst-2,4-dieeni

Otsikossa mainittu yhdiste valmistettiin esimerkin 4 (vii) mukaisesti käyttäen 3-oksoandrost-4-eeni-17-beeta-N,N-di-iso-propyylikarboksiamidia 3-okso-4-fluori-5- « · · :< ·* alfa-androst-l-eeni-17-beeta-N,N-di-isopropyylikarboksiamidin sijasta. Otsikossa mainittu yhdiste kiteytettiin uudelleen metanolista, sp. 165-168 °C.

25 (ii) 3-karbometoksiandrost-2,4-dieeni-17-beeta-lV,N-di-isopropyylikarboksi- amidi • ·

Otsikossa mainittu yhdiste valmistettiin esimerkin 3 (iv) mukaisesti käyttäen 17-. ·. : beeta-(N,N-di-isopropyylikarboksiamidi)-3 -(trifluorimetyylisulfonaatti)- ....: androst-2,4-dieenia 17-beeta-(N,N-di-isopropyylikarboksiamidi)-3-(trifluorimetyy- • 30 lisulfonaatti)-androst-3,5-dieenin sijasta. Otsikossa mainitun yhdisteen sp. oli .,. ‘ 162 °C hankaamisen jälkeen metanolin kanssa.

68 109028 (iii) N,N-di-isopropyyli-androst-2,4-dieeni-17-beeta-karboksiamidi-3-karbok-syylihappo

Otsikossa mainittu yhdiste valmistettiin esimerkin 3 (v) mukaisesti käyttämällä 3-karbometoksi-androst-2,4-dieeni-17-beeta-N,N-di-isopropyylikarboksiamidia 3-kar-5 bometoksi-androst-3,5-dieeni- 17-beeta-N,N-di-isopropyylikarboksiamidin sijasta.

Otsikossa mainittu yhdiste kiteytettiin edelleen metanoliasetonista, sp. 227 °C.

Esimerkki 31 N,N-di-isopropyyli-5-alfa-androstaani-17-beeta-karboksiamidi-3-beeta-kar- boksyylihappo 10 (i) 3-beeta-karbometoksi-5-alfa-androstaani-17-beeta-N,N-di-isopropyylikar- boksiamidi 3-karbometoksi-5-alfa-androst-2-eeni-17-beeta-N,N-di-isopro-pyylikarboksiamidia (87 mg, 0,19 mmoolia) (esimerkki 29 (ii)) 15 ml:ssa etyyliasetaatin ja etikkahapon 10:l-liuosta hydrattiin lämpötilassa 25 °C 1 atm paineessa käyttäen 20 mg 10 % hii-15 lellä olevaa palladiumia. Liuos suodatettiin katalyytin poistamiseksi ja väkevöitiin, jolloin saatiin 77 mg (88 %) otsikossa mainittua yhdistettä.

(ii) N,N-di-isopropyyli-5-aIfa-androstaani-17-beeta-karboksiamidi-3-beeta-kar-boksyylihappo

Otsikossa mainittu yhdiste valmistettiin esimerkin 3 (v) mukaisesti käyttämällä 3-: 20 beeta-karbometoksi-5-alfa-androstaani-17-beeta-N,N-di-isopropyylikarboksiamidia !' * ’: 3-karbometoksiand-rost-3,5-dieeni-17-beeta-N,N-di-isopropyylikarboksiamidin si- jasta. Otsikossa mainittu yhdiste kiteytettiin uudelleen asetonitriilistä, sp.

:v: 142-144 °C.

* * * i .! ·

Esimerkki 32 > # · 25 N,N-di-isopropyyli-estr-3,5(10)dieeni-17-beeta-karboksiamidi-3-karboksyyli-....: happo (i) 3-metoksi-estr-l,3,5(10),16-tetraeeni-17-N,N-di-isopropyylikarboksiamidi

IM

/-,: Otsikossa mainittu yhdiste valmistettiin käyttäen esimerkin 3 (iii, iv) mukaista kahta vaihetta ja metyyliestronia androst-4-eeni-3-oni-17-beeta-N,N-di-isopropyylikar-•,30 boksiamidin ja di-isopropyyliamiinia metanohn sijaan.

(ii) 3-metoksi-estr-l,3,5(10)-trieeni-17-beeta-N,N-di-isopropyylikarboksiamidi i 109028 69 3-metoksi-estr-l,3,5(10),16-tetraeeni-17-N,N-di-isopropyyli-karboksiamidia (4,45 g, 11,3 mmoolia) hydrattiin 100 ml:ssa etyyliasetaatin ja etanolin 3:1 liuosta lämpötilassa 25 °C ja 1 atm paineessa PtC^ita (350 mg) käyttäen 6 h. Liuos suodatettiin katalyytin poistamiseksi ja väkevöitiin, jolloin saatiin 4,36 g (98 %) otsikossa 5 mainittua yhdistettä.

(iii) 3-okso-estr-5(10)eeni-17-beeta-N,N-di-isopropyylikarboksiamidi

Liuokseen, jossa oli 3-metoksi-estr-l,3,5(10)-trieeni-17-beeta-N,N-di-isopropyyli-karboksiamidia (1,4 g, 3,5 mmoolia) nestemäisessä ammoniakissa (25 ml), THF:ssa (10 ml) ja t-butanolissa (10 ml), lisättiin lämpötilassa -33 °C 0,5 g litiumlankaa.

i 10 Liuosta sekoitettiin 5 h ja siihen lisättiin sitten hitaasti metanolia (10 ml). Ammo· niakin annettiin haihtua ja jäännös jaettiin sitten veden ja kloroformin kesken. Orgaaninen faasi väkevöitiin valkoiseksi kiinteäksi aineeksi, joka suspendoitiin meta-noli-vesi-seokseen ja sitä käsiteltiin sitten 1,4 g:lla oksaalihappoa 1,5 h. Reaktioseos laimennettiin sitten vedellä ja uutettiin etyyliasetaatilla. Orgaaninen faasi väkevöi-15 tiin ja jäännöstä käsiteltiin kromatografisesti (piioksidi, 1:9 etyyliasetaattiheksaani), jolloin saatiin 0,4 g otsikossa mainittua yhdistettä.

(iv) N,N-di-isopropyyli-estr-3,5(10)-dieeni-17-beeta-karboksiamidi-3-karbok-syylihappo

Otsikossa mainittu yhdiste valmistettiin esimerkin 29 (i-iii) mukaisesti käyttäen 3-20 oksoestr-5( 10)-eeni- 17-beeta-N,N-di-isopropyylikarboksiamidia 3-okso-5-alfa- androstaani-17-beeta-N,N-di-isopropyylikarboksiamidin sijasta. Otsikossa mainittu : . ·. yhdiste kiteytettiin uudelleen asetonitriilistä, sp. 250-253 °C.

'.v Esimerkki 33 • 1 1 .:. N,N-di-isopropyyli-estr-3,5-dieeni-17-beeta-karboksiamidi-3-karboksyyIihappo ,··. 25 (i) 3-oksoestr-4-eeni-17-beeta-N,N-di-isopropyylikar boksia midi

« ( I

3-oksoestr-5(10)-eeni-17-beeta-N,N-di-isopropyylikarboksiamidia (esimerkki : “· 29(iii)) liuotettiin metanoliin ja 10 % HCl-vesiliuokseen (2:1) ja kuumennettiin lämpötilassa 65 °C 1 tunti, jäähdytettiin ja uutettiin huolellisesti kloroformilla. Or-; gaaniset uutteet väkevöitiin, jolloin saatiin otsikossa mainittu yhdiste valkoisena ' ! 30 kiinteänä aineena.

I 1 109028 70 (ii) N,N-di-isopropyyli-estr-3,5-dieeni-17-beeta-karboksiamidi-3-karboksyyIi-happo

Otsikossa mainittu yhdiste valmistettiin esimerkin 3 (iii-v) mukaisesti käyttäen 3-okso-estr-4-eeni-17-beeta-N,N-di-isopropyylikarboksiamiinia androst-4-eeni-5 oni-17-beeta-N,N-di-isopropyylikarboksiamidin sijasta. Otsikossa mainitun yhdisteen sp. oli 215 °C.

Esimerkki 34 17-beeta-(N,N-di-isopropyylikarboksiamidi)-androst-3,5,ll-trieeni-beeta-kar- boksyylihappo 10 (i) Androst-4-eeni-3-oni-ll-oli-17-beeta-karboksyylihappo

Kortikosteronia liuotettiin metanoliin ja sitä käsiteltiin peqodihapon vesiliuoksella huoneen lämpötilassa 18 h. Liuos laimennettiin sitten vedellä androst-4-eeni-3-oni-ll-oli-17-beeta-karboksyylihapon saostamiseksi, joka otettiin talteen suodattamalla.

15 (ii) Androst-4-eeni-3,ll-dioni-17-beeta-karboksyylihappo

Liuokseen, jossa oli androst-4-eeni-3-oni-ll-oli-17-beeta-karboksyylihappoa asetonissa, lisättiin Jonesin reagenssia tipoittain siksi, kunnes punainen väri säilyi. Sitten lisättiin isopropanolia ylimääräisen hapetusaineen neutraloimiseksi. Liuos de-kantoitiin ja saadut kromisuolat pestiin huolellisesti asetonilla. Yhdistetyt orgaaniset ,;'.' 20 liuokset suodatettiin sitten magnesiumsulfaatin läpi ja väkevöitiin, jolloin saatiin androst-4-eeni-3,ll-dioni-17-beeta-karboksyylihappo.

(iii) Androst-4-eeni-3,l-dioni-17-beeta-(N,N-di-isopropyylikarboksiamidi) ;;; Otsikossa mainittu yhdiste valmistettiin esimerkin 3 (ii) mukaisesti käyttäen and- 4 · · ’ rost-4-eeni-3,ll-dioni-17-beeta-karboksyylihappoa androst-4-eeni-3-oni-17-beeta- 25 karboksyylihapon sijasta.

« · (iv) 17-beeta-(N,N-di-isopropyyHkarboksiamidi)-3-(trifluorimetyylisuIfonaat-ti)-l l-okso-androst-3,5-dieeni •: · ·: Otsikossa mainittu yhdiste valmistettiin esimerkin 3 (iii) mukaisesti käyttäen and- rost-4-eeni-3,1 l-dioni-17-beeta-(N,N-di-isopropyylikarboksiamidia) androst-4-• ; 30 eeni-3-oni-17-beeta-(N,N-di-isopropyylikarboksiamidin) sijasta.

71 109028 (v) 3-karbometoksi-ll-okso-androst-3,5-dieeni-17-beeta-(N,N-di-isopropyyli-karboksiamidi)

Otsikossa mainittu yhdiste valmistettiin esimerkin 3 (iv) mukaisesti käyttäen 17-beeta-(N,N-di-isopropyylikarboksiantidi)-3-(trifluorimetyylisulfonaatti)-ll-okso-5 androst-3,5-dieenia 17-beeta-(N,N-di-isopropyylikarboksiamidi)-3-(trifluorimetyy-lisulfonaatti)-androst-3,5-dieenin sijasta.

(vi) 3-karbometoksi-ll-(trifluonmetyylisulfonaatti)-androst-3,5,ll-trieeni-17-beeta-(N,N-di-isopropyylikarboksiamidi)

Otsikossa mainittu yhdiste valmistettiin esimerkin 4 (vi) mukaisesti käyttäen 3-10 karbometoksi-ll-okso-androst-3,5-dieeni-17-beeta-(N,N-di-isopropyylikarboksi-amidia) 3-okso-4-fluori-5-alfa-androst- 1-eeni- 17-beeta-(N,N-di-isopropyylikarbok-siamidin) sijasta.

(vii) 3-karbometoksi-androst-3,5,ll-trieeni-17-beeta-(N,N-di-isopropyylikar-boksiamidi) 15 Otsikossa mainittu yhdiste valmistettiin Cacchin menetelmällä (Tet. Lett. 25 (42) 4821-4824 (1984) käyttäen 3-karbometoksi-ll-(trifluorimetyylisulfonaatti)- androst-3,5,1 l-trieeni-17-beeta-(N,N-di-isopropyylikarboksiamidia) 17-beeta-ase-toksiandrosta-3,5-dieeni-3-yyli-triflaatin sijasta.

(viii) 17-beeta-(N,N-di-isopropyylikarboksiamidi)-androst-3,5,ll-trieeni-3-kar- 20 boksyylihappo » »

Otsikossa mainittu yhdiste valmistettiin esimerkin 3 (v) mukaisesti käyttäen 3-: ‘: karbometoksiandrost-3,5,1 l-trieeni-17-beeta-(N,N-di-isopropyyli-karboksiamidia) • · · 3-karbometoksi-androst-3,5-dieeni-17-beeta-(N,N-di-isopropyylikarboksiamidin) . : ·. sijasta.

25 Esimerkki 35 I · 17-beeta-(N-t-butyylikarboksiamidi)-androst-3,5,ll-trieeni-3-karboksyylihap- . · . : po : i Esimerkin 35 mukaisessa menetelmässä käytettäessä N-t-butyyliamiinia di-isopro- pyyliamiinin sijasta saadaan 17-beeta-(N-t-butyylikarboksiamidi)-androst-3,5,ll-30 trieeni-3-karboksyyli-happo.

• I

109028 72

Esimerkki 36 17-beeta-(N,N-di-isopropyylikarboksiamidi)-androst-3,5-dieeni-3-tiokarbok- syylihappo

Liuos, jossa oli 17-beeta-(N,N-di-isopropyylikarboksiami-di)-androst-3,5-dieeni-3-5 karboksyylihappoa (1 mmooli), suspendoitiin 10 ml.aan tolueenia ja sitä käsiteltiin 0,5 ml:lla oksalyylikloridia 2 h. Saatu liuos lisättiin sitten hitaasti liuokseen, jossa oli THF ja rikkivetyä, jonka läpi rikkivedyn annettiin poreilla. Seos laimennettiin sitten etyyliasetaatilla, pestiin vedellä, kuivattiin ja väkevöitiin ja jäännös kiteytettiin uudelleen asetonitriilistä, jolloin saatiin otsikossa mainittu yhdiste.

10 Esimerkki 37 17-beeta-(N-t-butyylikarboksiamidi)-androst-3,5-dieeni-3-tiokarboksyylihappo

Esimerkin 36 mukaisella menetelmällä korvattaessa 17-beeta-(N,N-di-isopropyyli-karboksiamidi)-androst-3,5-dieeni-3-karboksyylihappo 17-beeta-(N-t-butyylikar-boksiamidi)-androst-3,5-dieeni-3-karboksyylihapolla saadaan 17-beeta-(N-t-butyy-15 likarboksiamidi)-androst-3,5-dieeni-3-tiokarboksyylihappo.

Esimerkit 38-47

Seuraavat yhdisteet valmistettiin käyttäen di-isopropyyliamiinia t-butyyli-amiinin sijasta ja käyttämällä vastaavasti esimerkkien 2, 3, 4, 7, 27, 29, 30, 31, 32 ja 33 mukaisia menetelmiä: 20 N-t-butyyli-5-alfa-androst-3-eeni- 17-beeta-karboksiamidi-3-karboksyylihappo, . . * 17-beeta-(N-t-butyylikarboksiamidi)-6-fluori-5 -alfa-androst-3 -eeni-3 -karboksyyli- happo, « » * 17-beeta-(N-t-butyylikarboksiamidi)-6-fluori-androst-3,5-diee-ni-3-karboksyyli-. happo, 25 3-karbometoksi-N-t-butyyli-androst-3,5-dieeni-17-beeta-karboksiamidi, 1 · ’; 17-beeta-N-t-butyylikarboksiamidi-5-alfa-androst-l,3-dieeni-3-karboksyylihappo, '. N-t-butyyli-5-alfa-androst-2-eeni- 17-beeta-karboksiamidi-3-karboksyylihappo, ti·* :.,,! N-t-butyyli-androst-2,4-dieeni-17-beeta-karboksiamidi-3-karboksyylihappo, 109028 73 N-t-butyyli-5-alfa-androstaani-17-beeta-karboksiamidi-3-karboksyylihappo, N-t-butyyli-estr-3,5-10)-dieeni-17-beeta-karboksiamidi-3 -karboksyylihappo ja N-t-butyyli-estr-3,5-dieeni-17-beeta-karboksiamidi-3-karboksyylihappo.

Vaikkakin keksinnön edullisimmat toteuttamismuodot on kuvattu edellä, on ymmär-5 rettävä, etteivät esitetyt tarkat ohjeet rajoita keksintöä ja että keksintöön voidaan tehdä muunnoksia joutumatta silti pois keksinnön piiristä.

» · *

Claims (4)

109028

1. Yhdiste, jolla on kaava: R14 ch3 J CH3 y (A) jossa kaavassa

5 X1 on bromi, kloori, fluori tai jodi, ja R14 on O II β-C-R4 10 jossa kaavassa R4 on NR5R6, jossa R5 ja R6 on kumpikin itsenäisesti vety tai Ci.g-alkyyli.

. 2. Patenttivaatimuksen 1 mukainen yhdiste, tunnettu siitä, että se on N-t-butyy- li-androst-3,5-dieeni-3 -bromi-17 β -karboksiamidi tai N,N-di-isopropyyli-an- drost-3,5-dieeni-3-bromi-17β-karboksiamidi. :. .: 15

3. Menetelmä sellaisten yhdisteiden valmistamiseksi, joilla on kaava: » » I · : : : CH3 J *·*: CH3 y (A) s > » ' 1! jossa kaavassa 109028 X1 on bromi, kloori, fluori tai jodi, ja R14 on O II 5 β-C-R4 jossa kaavassa R4 on NR5R6, jossa R5 ja R6 on kumpikin itsenäisesti vety tai Ci-g-alkyyli, tunnettu siitä, että yhdistettä, jolla on kaava R14' CH3 j CH3 y (B) 10 jossa R14 tarkoittaa samaa kuin R14 tai se on β-karboksyyliryhmä tai β-Ci.s-alkoksikarbonyyliryhmä, käsitellään karboksyylihappohalogenidilla tai fosforipoly-halogenidilla, ja tarvittaessa saatu yhdiste muutetaan kaavan (A) mukaiseksi yhdisteeksi. •

4. Kaavan (A) R14 ··*; CH3 ? : ^^3 y (A) » 15 jossa kaavassa X1 on bromi, kloori, fluori tai jodi, ja 76 109028 R14 on O II β-C-R4 5 jossa kaavassa R4 on NRSR6, jossa R5 ja R6 on kumpikin itsenäisesti vety tai Ci_8-alkyyli, mukaisen yhdisteen käyttö välituotteena sellaisen yhdisteen valmistamiseksi, jolla on kaava R14 CH3 ? CH3 \ (I) O 10 jossa kaavassa R14 tarkoittaa samaa kuin edellä. • · t I t I ( *