FI105029B - Menetelmä terapeuttisesti käyttökelpoisten 4-amino-2-ureido-pyrimidiini-5-karboksyylihappoamidien valmistamiseksi, välituotteita ja niiden valmistus - Google Patents

Description

.105029

Menetelmä terapeuttisesti käyttökelpoisten 4-amino-2-urei-- do-pyrimidiini-5-karboksyylihappoamidien valmistamiseksi, välituotteita ja niiden valmistus 5 Keksintö koskee terapeuttisesti käyttökelpoisten 4- amino-2-ureido-pyrimidiini- 5-karboksyylihapon tertiääris-ten amidien ja niiden happoadditiosuolojen valmistusta, välituotteita sekä näiden valmistusta.

Aikaisemmin on esitetty, että 4-amino-2-ureido-pyr-10 imidiini-5-karboksyylihappo-(N-fenyyli-amideja) voidaan käyttää liikalihavuuden ja lipidiaineenvaihdunnan häiriöiden hoitoon [vrt. EP-patenttijulkaisu 0 012 361 = US-patentti nro 4 285 946]. Tämän lisäksi on kuvattu näiden yhdisteiden niiden rakenteen suhteen spesifistä 15 ryhmää, nimittäin vastaavia N-(3-trifluorimetyyli-fe- nyyli)amideja, joita käytetään tromboosien ennaltaehkäi-syyn ja hoitoon [vrt. EP-patenttijulkaisu 0 206 297 = US-patentti nro 4 705 792].

Lääkeaineiksi ehdotettujen N-fenyyliamidien, nimit-20 täin monosubstituoitujen, sekundääristen amidien siedettä vyys ei kuitenkaan ole täysin tyydyttävä. Nämä sekundääriset amidit estävät liian suurena annostuksena tietyssä määrin joidenkin solulajien proliferaatiota. Tällainen sivuvaikutus ei ole toivottava käytettäessä niitä tera-25 peuttisina aineina lipidiaineenvaihdunnan häiriöiden hoi dossa .

Keksinnön tehtävänä oli saada aikaan yhdisteitä, joilla hyvän siedettävyyden ohella on terapeuttisesti arvokas hypolipideeminen eli veren rasva-arvoja alentava 30 vaikutus. Tässä yhteydessä tehtävänä oli erityisesti myös ; .. löytää yhdisteitä, joilla riittävän hypolipideemisen • i > vaikutuksen ohella havaittaisiin ainoastaan voimakkaasti • vähentyneessä määrässä solujen proliferäätiota eli uudis- kasvua estäviä ominaisuuksia tai niitä ei havaittaisi enää -105029 ollenkaan verrattuna EP-patenttijulkaisussa 0 012 361 kuvattuihin yhdisteisiin.

Jo lääkeaineiksi ehdotettujen, EP-patenttijulkai-sussa 0 012 361 kuvattujen sekundääristen N-fenyyliamidien 5 toisena epäedullisena ominaisuutena on pidettävä niiden vaikealiukoisuutta - sekä emäksenä että myös happoadditio-suolana - veteen sekä fysiologisesti siedettäviin liuottimiin tai liuotinseoksiin, mukaan lukien tällaisten liuottimien seokset veden kanssa.

10 Nyt on havaittu, että tertiäärisillä 4-amino-2-ur- eido-pyrimidiini-5-karboksyylihappo-(N-fenyyliamideilla), joiden amidityppiatomi on disubstituoitu substituoidulla fenyyliryhmällä ja toisella hiilivetyryhmällä, on hyvä lipidiarvoja alentava vaikutus, jolloin määrättyjen solu-15 jen kasvua estävä komponentti on amidityppiatomiin mono-substituoituihin yhdisteisiin verrattuna, tuskin enää havaittavissa tai ainoastaan hyvin heikosti.

Esillä oleva keksintö koskee kaavan I mukaisten amino-2-ureidopyrimidiini-5-karboksyylihappoamidien ja 20 niiden hyvin vesiliukoisten, fysiologisesti käytettävien happoadditiosuolojen valmistusta, •wv *· CH3 Ν-"ν>λ u o

30 M

* # * * jossa kaavassa R4 on C2_3-alkyyli, allyyli tai sykloprop-yylimetyyli. Nämä yhdisteet valmistetaan keksinnön mukaan siten, että jonka kaava on 35 - 105029 3 CH Τ' NCV " ίθ1 -.5 V (ΙΙ)

H N. N—C II I

y 'n-c-h *

o H

jossa 10 R4 merkitsee samaa kuin kaavassa I, tai kaavan II mukaisen yhdisteen suola tai suolaseos syklisoidaan 0 - 240 °C:n lämpötilassa lisäämällä liuotinta tai ilman liuotinlisäys-tä kaavan I mukaiseksi yhdisteeksi tai kaavan I mukaisen yhdisteen suolaksi tai suolaseokseksi, saatu kaavan I 15 mukainen yhdiste mahdollisesti muutetaan veteen hyvin liukenevaksi suolaksi tai saatu suola tai suolaseos muutetaan mahdollisesti veteen hyvin liukenevaksi suolaksi.

y

20 JL

X’ JxD N 0 iHj ν,ΛΛ H 0 25

Kaavan I mukainen yhdisteryhmä käsittää myös - jos se on rakenteellisesti mahdollista - stereoisomeerit ja -jos esiintyy kiraalisia yhdisteitä - optisesti aktiiviset enantiomeerit.

30 EP-patenteissa 0 012 361 ja 0 206 297 on kuvattu * · kaavan I mukaisia yhdisteitä, joissa R4 on (Ci.j) alkyyli tai (C3.4) alkenyyli, mutta näitä ei ole spesifisesti kuvattu.

Edelleen on havaittu, että kaavan I mukaiset 35 tertiääriset 4-amino-2-ureido-pyrimidiini-5-karboksyyli- - 105029 4 happoamidit liukenevat yllättäen hyvin veteen määrättyjen keskivahvojen tai vahvojen happojen kanssa muodostettuina f suoloina. Veteen hyvin liukenevilla yhdisteillä (suoloilla) tarkoitetaan veteen helposti liukenevia, liukoisia ja 5 niukkaliukoisia yhdisteitä julkaisussa: "Deutsches

Arzneibuch" (9. Ausgabe 1986, Amtliche Ausgabe, Deutscher Apotheker-Verlag Stuttgart) sivulla 19 ilmoitetun määritelmän mukaisesti.

Tämä erittäin edullinen ominaisuus, edellä mainit-10 tujen kaavan I mukaisten yhdisteiden suolojen hyvä liukoisuus veteen, on erittäin yllättävää, koska sekä vastaavan rakenteen omaavien yhdisteiden, jotka eivät sisällä fenyy-liryhmän ohella mitään ylimääräistä hiilivetyryhmää amidi-typpiatomissa, suolat että myös vapaat emäkset liukenevat 15 erittäin huonosti veteen. Niinpä esimerkiksi 4-amino-2- (4,4-dimetyyli - imidatsoiidin-2-on-1-yyli)pyrimidiini-5 -karboksyylihappo- [N-(3-trifluorimetyyli-fenyyli)amidin] hydrokloridista vedessä voidaan valmistaa 23 °C:ssa vain yksi 0,93 x 10~3 molaarinen liuos, mikä merkitsee, että 20 1 massaosa tätä yhdistettä liukenee 2 500 osaan vettä ja : on siis hyvin vaikealiukoinen. Vapaina emäksinä olevat yh disteet I liukenevat kuten myös 4-amino-2-(4,4-dimetyyli-imidatsoiidin-2-on-1-yyli)pyrimidiini-5-karboksyylihappo-[N-(3-trifluorimetyyli-fenyyli)amidi vapaana emäksenä sa-25 moin erittäin huonosti veteen.

Näiden ominaisuuksien ja yleisesti EP-patenttijul-kaisussa 0 012 361 kuvattujen yhdisteiden kohdalla todettavan sekä vapaiden emästen että myös suolojen huonon veteen liukenemisen johdosta, ei ollut missään tapauksessa 30 odotettavissa, että kaavan I mukaisten yhdisteiden suolat ·· liukenevat hyvin veteen.

• I

Myös julkaisun: "Deutsches Arzneibuch" mukaan "niukkaliukoiseksi" esitetty luokittelu tarkoittaa EP-patentti julkaisussa 0 012 361 kuvattuihin sekundäärisiin 105029 amideihin verrattuna yllättävän suurta parannusta liukoisuudessa veteen.

Huomattava parannus kaavan I mukaisten yhdisteiden suolojen liukoisuudessa veteen oli yllättävää myös sikäli, 5 että yhdisteiden I rakenteellinen erikoisuus, nimittäin vetyatomin korvaaminen amidi-typpiatomissa hiilivetyryh-mällä R4:lie ilmoitetuissa merkityksissä, tarkoittaa vetyä kohtaan lipofiilisen ryhmän liittämistä. Tämän vaihdon johdosta - vety vaihdetaan hiileen - häviää rakenteessa 10 potentiaalinen vetysiltasidos. Kaavan I mukaisten yhdisteiden rakenteen pitäisi tämän johdosta tulla vähemmän polaariseksi. Tämän ei puolestaan pitäisi missään tapauksessa johtaa suolojen parempaan liukoisuuteen veteen. Sekundäärisillä amidiryhmillä (joissa on rakenneyksikkö 15 HN-CO) on tunnetusti suuri taipumus muodostaa vetysiltasi-doksia, jotka yleensä johtavat polaarisempiin ja tämän johdosta hydrofiilisempiin aineisiin. Kaavan I mukaisilla yhdisteillä on sekundäärisen amidiryhmän sisältäviin analogisiin yhdisteisiin verrattuna yllättäen päinvastainen 20 vaikutus siten, että tertiäärisen amidiryhmän sisältävissä yhdisteissä I syntyy suolanmuodostuksen yhteydessä selvästi hydrofiilisiä aineita.

Kaavan I mukaisten yhdisteiden suolojen hyvä liukoisuus veteen tuo keksinnön mukaisille yhdisteille I muu- ·, 25 tamia merkittäviä etuja käytettäessä niitä lääkeaineina.

Kaavan I mukaisten yhdisteiden hyvin veteen 1lukevat suolat vaikuttavat näiden ominaisuuksien johdosta edullisesti näiden vaikuttavien aineiden imeytymiseen hoidettavan potilaan elimistöön. Tämän johdosta tuloksena on 30 myös edullinen vaikutus vaikuttavan aineen biologiseen • ... hyväksikäytettävyyteen kyseessä olevassa elimistössä.

* · <

Hyvä liukoisuus veteen tuo etuja erityisesti myös näiden vaikuttavien aineiden galeenisille valmisteille. Vaikuttavat aineet, jotka muodostavat hyvin vesiliukoisia 35 suoloja ovat tunnetusti galeenisesti yksinkertaisempia ja « 105029 varmempia käsitellä tai työstää kuin veteen huonosti liukenevat tai lähes veteenliukenemattomat yhdisteet. Kokonaisuuden kannalta katsottuna yksinkertaistuvat monet ongelmat, jotka koskevat kaavan I mukaisten yhdisteiden val-5 mistusta ja käyttöä lääkeaineina. Tämän lisäksi vesiliukoinen lääkeaine, kuten kaavan I mukaisten yhdisteiden kokonaan veteen liukenevat suolat ovat helpompia ja varmempia käyttää myös esimerkiksi annostuksen kannalta.

Seuraavassa taulukossa 1 on esitetty vertailun 10 vuoksi rakenteellisesti vastaavien sekundääristen amidien suolojen liukoisuudet veteen. Kuten taulukosta 1 käy ilmi, esitettyjen sekundääristen amidien kohdalla (nro 1 - 11), joilla on eri substituutiomallit fenyyliryhmässä, on kyse niukasti veteen liukenevasta yhdisteestä nro 6 aina peräti 15 veteen huonosti liukeneviin ja hyvin huonosti liukeneviin suoloihin.

Taulukossa 2 on esitetty esimerkkinä keksinnön mukaisten yhdisteiden I veteen sitä vastoin liukenevien ja helposti liukenevien suolojen liukoisuudet.

• I 1 • · · · 7 105029 lr —...... r— — i I c • d os - -H (0

C Ή tO

<D . O

•r~> I (0 3 Μ · O O * Λ p ο · ö &5 S t »n p to · ίο cj P o c to <d p •h nj <u ·· <o geo g CD cn ΗΛίΚ *0 _____________ P c ΪΠ 0) (0 CO) (0

0) P PI

'D ? -P'pjS oo to o 3 > c,ocOOT-i5ri- P Q) a ·· - - - - -

p p ·* [fi op O O O O O

(0 0) rx C O I

> Τ3 \ Ο -H 0

3 3 ^ )-v W -P C

^ s -Toy- ------- c* 0 >-( ·Η.

(N ϋ \ Ρ η 3 ζ X "> 0 m S S ™ η ιχ>·Η / ίο to ^ Ο) 0> *- Ο) Ο

ΟΉ ο: Ο Ή3 O O C0 Ο) CM

cn \ 0 3 χ e ~ >-> S m 0 0) X / — \ Ό ζ —( ζ

(0 ·Η \\ // I

no) Ζ —< Λ :0rrooCMi-CM

1-1 ,-, to \ /.° & *5 in ro cd ιτΓ ιη

Ο ΰ" ,Z-y |.Η“ CM CM CM CM CVJ

fo 3 J \ PI -P

x & ~ Z X ------- 3 CN >, ν' ca

Ή rH /\ rH

3 o C _T - 0 (0 0) 1 γν 3 H o P <-> ω « * * * to <0 -H ------

to tx> to O

*H r—I

3 (0 » _

wc N X X u. X O

•H (0 (0 I ------ X ®

rH I

3 2 H e Tgxxxöx -P 0) ______ Ρ Ό c x: O) :<o p c

Ό CH

Di h NXXXXX

1 ______

; Λ C

W Ή •P

c to CO CO CO CO CO

•p -p _ X X X X X

* 0) ' N OOOOO

C P ______

Q) to TO -P

•H O 0 ox: p

P) >i 2 t— CM CO Ί" LO

. I · 8 105029 0 C •H fO rH (0

W

Ϊ 1" m co cm in h-

2 * ^ in N N CM CM

cn · os en o; +j 03 a) ·· £ C Ö

0) CN H K

j

03 03 P I

e'lij c ™ ® CO CO CD CO

Ulcdo^- OOOOO C O I O-H O «P c

*H

U £ cn 2 g °1 ‘Ί °° ®

o HP v ft CO CM CM CO CO

X OP x -P s»l 03 i—i ~

cOrr^inCMCMf^CO

^ <' •tf" ^ in in

- CM CM CM CM CM CM

O :o3-H

H .j-p a: --------- 0 U 03 '—I I I—i 0 I o 03 I pj E-ι in ****** n

X

^ o _

N X O X O X X

r>

X

„ o

N o X O X X X

n *N XXXXXU £

—---— — — ——- ' 1 *H

'·' U *H

· N- h- 9 fj ««XXX * ^ N OOOOOX 2 «2 -------T3 ,—ι >1 3 JP in

2 O T- ,| II

2 CO CO CD T- 1- "

· I

105029 9

I, „ I I ΓΠ I

fl 3 (Ö I -H <0 I H (II

m ° ' n . «CO. Is».

O · CO CNJ £j « (0 · T— Cm C\J ^ ^ tn <o tn Φ 4-> (0 CD ·· e c o

Φ CM

λ-η λ; κ "Ί a> (0 φ <o t Its 8 8 8 8 ;= ω m op (D t (0 h- Is»*

3 C O I

3 Ο ·Η O

W «-PC

0 —,------ * :0 5 h cc E-—irrino'fr^m

« -. λ=Λ . S& » s' 8f S' S

? “λ°>-“ 1------- 1-1 \ » 3 *«««« «NO z - DC (¾ 3 / -'------- Ο ω o rri

Jy^ \ (O

3 M y-^ CC X X I X X

Ή C z —z 3 Φ V // «Λ z -/< _ a: x x x x x E-ι Ή \ ,°________ S - /-f •h or^\ z

1 IX

* « oc "

c O

Φ CM ^

« 1° x V

* x- 9, ^ Y

§ c o' o’ ο υ 5 c *2c X X X X X '-a C Ή •H p rn co co co co co n j? WXXXXX° φ ccooooo.* hi _______ o u n >1 ffi

CO CO CO CO CO

^ X X X X X „ X O O O O O 11

O

;· · Z - CM 00 fs. CD * 10 105029

Kaavan I mukaisten yhdisteiden valmistuksessa käytettävät kaavan II mukaiset guanidiini-johdannaiset ovat uusia yhdisteitä. Keksintö koskee tämän johdosta myös kaavan II mukaisia yhdisteitä molempina mahdollisina stereo-5 isomeerisinä muotoina, E- ja Z-muotona, sekä niiden happo-additiosuoloja.

Keksintö koskee edelleen menetelmää kaavan II mukaisten yhdisteiden ja niiden suolojen valmistamiseksi. Menetelmälle on tunnusomaista, että yhdiste, jolla on 10 kaava III

CH, H N. Ji- 15 j| NHj (HI) 0

tai sen suola saatetaan reagoimaan yhdisteen kanssa, jolla on kaava IV

20 CF

HyUS) il B4 (iv)

25 rS R

fi7 jossa R4 merkitsee samaa kuin kaavassa II ja R7 on (C^.4) -alkyyli, orgaanisen liuottimen tai laimennusaineen läsnä 30 ollessa, jolloin muodostuu kaavan II mukainen yhdiste tai sen suola, ja saatu kaavan II mukainen yhdiste muutetaan mahdollisesti suolaksi tai saatu suola muutetaan mahdollisesti kaavan II mukaiseksi yhdisteeksi.

Siinä tapauksessa, että yhdistettä III käytetään 35 suolan muodossa, käytetään lisäksi edullisesti ekvimolaa- « · 11 105029 rista määrää emäksistä yhdistettä kaavan III mukaisen yhdisteen kanssa tapahtuvassa reaktiossa.

Yhdisteet II muodostuvat yleensä stereoisomeeri-seoksena (E ja Z) . Mutta ne voivat muodostua myös puhtaina 5 stereoisomeereinä (E- tai Z-muoto). Yhdisteet II tai niiden suolat toimivat lähtötuotteina kaavan I mukaisten yhdisteiden tai niiden hyvin vesiliukoisten suolojen valmistuksessa. Yhdisteet II muodostavat yksihappoisina emäksinä happoadditiosuoloja. Niiden muodostukseen soveltuvat peri-10 aatteessa kaikki protonihapot; suolanmuodostukseen käytetään edullisesti vahvoja - keskivahvoja happoja. Esimerkkeinä mainittakoon seuraavat: kloori-, bromi-, fluori- tai jodivetyhappo, rikki-, fosfori-, typpi- tai perkloorihap-po, (C^) alkaanifosfonihapot, sulfonihapot, kuten metaani-, 15 bentseeni-, tolueeni- tai trifluorimetaani-sulfonihappo, sulfamiinihappo, metyylirikkihappo, etikka-, kloorietik-ka-, dikloorietikka-, trikloorietikka- tai trifluorietik-kahappo, muurahais-, propioni-, oksaali-, maloni-, maleii-ni-, meripihka-, glutaari-, omena-, viini-, sitruuna-, 20 fumaari-, maito-, glykoli- tai palorypälehappo, bentsoe-happo tai fenyyliryhmään substituoidut bentsoehapot, kuten toluyylihappo tai p-nitro-bentsoehappo tai salisyylihappo, furaanikarboksyyli- ja/tai mantelihappo.

Lähtöaineina kaavan II mukaisten yhdisteiden val-. 25 mistuksessa tarvittavat yhdisteet III ovat tunnettuja tai niitä voidaan valmistaa kuvattujen menetelmien mukaisesti (DE-patenttijulkaisu 2 853 221) .

Kaavan IV mukaisia yhdisteitä voidaan valmistaa tälle enolieetteri-tyypille tunnettujen menetelmien mu-30 kaisesti lähtien vastaavista N-syanasetyyli-N-(syklo)al-• .. kyyli-N-(substituoiduista)fenyyli-amiineista (vrt. esim.

Angew. Chemie Suppl. 1982, 1213 sekä EP-patenttijulkaisu 0 012 361) . Lähtöaineina kaavan IV mukaisten yhdisteiden valmistuksessa tarvittavia N-syanasetyyli-N-(syklo)alkyy-35 li- tai -alkenyyli-N-(substituoituja)fenyyli-amiineja vai-

• •I

12 105029 niistetään tunnettujen menetelmien mukaisesti (vrt. esim. GB-patenttijulkaisu nro 930 808) . Näiden syanasetyyliyh-disteiden valmistuksessa tarvittavat N-(syklo)alkyyli- tai -alkenyyli-aniliinit ovat tunnettuja tai niitä voidaan 5 valmistaa tunnettujen menetelmien mukaisesti, kuten esimerkiksi aniliini-N:n pelkistävällä alkyloinnilla tai pelkistämällä vastaavat karboksyyliamidit LiAlH4:llä.

Kaavan III mukaisen yhdisteen suolalla tarkoitetaan epäorgaanisten sekä orgaanisten happojen kanssa muodostet-10 tavia happoadditiosuoloja. Edullisena pidettyjä kaavan III mukaisten yhdisteiden suoloja ovat hydrobromidit, hydro-kloridit tai sulfaatit. Keksinnön mukaiseen menetelmään soveltuvat erityisesti hydrobromidit ja/tai -kloridit.

Kaavan III mukaisen amidino-imidatsolidinonin reak-15 tio kaavan IV mukaisen yhdisteen kanssa voi tapahtua mitä erilaisimmissa olosuhteissa. Tämä koskee sekä reaktioläm-pötilaa että myös mahdollisesti käytettäviä liuottimia tai laimennusaineita. Niinpä kaavan III mukaisen yhdisteen keksinnön mukainen reaktio kaavan IV mukaisen yhdisteen 20 kanssa voi tapahtua -100 °C:n ja +200 °C:n välisessä lämpötilassa lisäämällä liuotinta tai laimennusainetta tai ilman niiden lisäystä. Reaktio suoritetaan tarkoituksenmukaisesti -30 °C:n ja +100 °C.*n välisessä lämpötilassa, edullisesti +10 °C:ssa - +35 °C:ssa liuottimen tai laimen-25 nusaineen läsnä ollessa.

Liuottimena tai laimennusaineena voidaan käyttää periaatteessa kaikkia yhdisteitä III ja IV kohtaan (jatkuvasti) inerttejä liuottimia, mukaan lukien vesi. Edullisesti käytetään C^-alkoholeja, tetrahydrofuraania, diok-30 saania, alempia alifaattisia eettereitä, kuten dietyyli-, metyyli-t.-butyyli- sekä di-isopropyylieetteriä, asetonit-riiliä, N,N-dimetyyliformamidia, N,N-dimetyyliasetamidia, alempia glykoli- ja diglykoli-di- ja -monoeettereitä, kuten 1 , 2-dimetoksietaania, metyyliglykolia, etyyliglykolia, 35 diglykolidimetyyli- ja monometyylieettereitä, etyyliase- *· « 105029 13 taattia, metyyliasetaattia, tolueenia, pyridiiniä, asetonia, kloroformia ja/tai dikloorimetaania liuottimina tai laimennusaineina.

Edullisena pidettyjä liuottimia tai laimennusai-5 neita ovat C2.4-alkoholit, tetrahydrofuraani, dioksaani, l,2-dimetoksietaani, metyyli-t.-butyylieetteri ja/tai ase-tonitriili. Voidaan myös käyttää esitettyjen liuottimien seoksia, kuten myös esitettyjen liuottimien seoksia muiden liuottimien kanssa.

10 Kaavan III mukaisen yhdisteen keksinnön mukaises sa reaktiossa kaavan IV mukaisen yhdisteen kanssa voivat (stökiometriset) määräsuhteet, joissa näitä yhdisteitä käytetään, vaihdella suuresti. Yhdisteen III ja yhdisteen IV voidaan antaa reagoida keskenään ekvivalenttisissa tai 15 ei-ekvivalenttisissa määrissä. Viimeksi mainittu tarkoittaa, että jompaa kumpaa yhdistettä voidaan käyttää stökio-metrisenä ylimääränä. Edullisesti annetaan kaavan III mukaisen yhdisteen reagoida emäksenä kaavan IV mukaisen yhdisteen kanssa ekvivalenttisissa määrissä tai suhteessa, 20 jolloin yhdiste IV on stökiometrisenä ylimääränä. Jos yhdistettä III käytetään happoadditiosuolana, niin silloin myös sitä voidaan käyttää stökiometrisenä ylimääränä yhdisteeseen IV nähden.

Vaadittavat reaktioajat ovat riippuvaisia lämpöti-, 25 lasta, jossa reaktio suoritetaan. Ne voivat vaihdella suu resti. Jos käytetään +10 °C:n ja +60 °C:n välistä lämpötilaa, niin reaktioajat ovat yleensä 0,3 - 10 tuntia, jolloin reaktioajat ovat - kuten tunnettua - päinvastaisessa suhteessa lämpötilaan nähden.

30 Jos kaavan III mukaista yhdistettä käytetään suola- • na, niin keksinnön mukaisessa reaktiossa lisätään - tar koituksenmukaisesti ekvimolaarisena määränä - emäksistä yhdistettä tai emäksisestä yhdisteestä III poistetaan, ennen kuin yhdisteen IV lisäys tapahtuu, emäksisellä yhdis-35 teellä sen suola osittain tai täydellisesti. Tähän tarkoi- · · m 105029 tukseen käytetyn emäksisen yhdisteen annetaan edullisesti vaikuttaa ennen kaavan IV mukaisen yhdisteen lisäystä käytettyyn amidino-imidatsolidinonin III suolaan. Keksinnön mukainen reaktio voidaan täten suorittaa myös tässä suori-5 tusmuodossa "yksivaihereaktiona". Emäksisinä lisäaineina voidaan käyttää epäorgaanisia ja/tai orgaanisia emäksisiä yhdisteitä. Esimerkkeinä mainittakoon: alempien alkoholien alkali- tai maa-alkalialkoholaatit, alkali- tai maa-alka-lihydroksidit tai -hydridit, puhtaasti orgaanisina emäksi-10 nä tertiääriset amiinit, kuten alemmat trialkyyliamiinit ja/tai Ν,Ν-dimetyylianiliini, diatsabisykloundekeeni (DBU) sekä analogiset sykliset (trisubstituoidut) amidiinit, tetra-alkyyliammoniumhydroksidit, 2- tai 4-dialkyyliamino-pyridiinit ja/tai diatsabisyklo-[2.2.2]-oktaani (DABCO). 15 Emäksisinä lisäaineina käytetään edullisesti (C10)- alkoholien alkalialkoholaatteja, natriumhydridiä, DBU:ta ja DBU-analogisia amidiineja tai tetrametyyli-ammonium-hydroksidia, jolloin natrium- tai kaliummetylaatti ja/tai -etylaatti soveltuvat erityisen hyvin.

20 Keksinnön mukaisen menetelmän edullinen suori tusmuoto koostuu siitä, että liuenneessa muodossa olevan kaavan III mukaisen yhdisteen annetaan reagoida 10 -35 °C:ssa kaavan IV mukaisen yhdisteen kanssa, jossa R5, R6 ja R7 merkitsevät samaa kuin edellä, jolloin R7 on edulli-25 sesti metyyli tai etyyli. Sen jälkeen, kun reaktio on kes-tänyt 0,3-8 tuntia, muodostunut, yleensä vaikealiukoisena kiteytymänä erottunut kaavan II mukainen yhdiste eristetään suodattamalla erilleen ja kuivataan 10 °C:n ja 35 °C:n välisessä lämpötilassa, tarkoituksenmukaisesti 30 vakuumissa.

Sen perusteella, mitä tiedetään jo aluksi siteeratuista patenttijulkaisuista, oli yllättävää, että kaavan III mukaisen yhdisteen reaktiossa kaavan IV mukaisen yhdisteen kanssa voidaan kulloisetkin yhdisteet II eristää , · « . 15 105029 kiteisenä kiinteänä aineena, saantojen ja puhtausasteen ollessa hyvät.

EP-patenttijulkaisussa 0 012 361 kuvattujen yhdisteiden valmistuksessa ei ole havaittu kaavan II mukaisen 5 yhdisteen tyyppiä olevia yhdisteitä. Erityisesti kaavan II mukaisten yhdisteiden stabiilius on yllättävää. Se mahdollistaa näiden keksinnön mukaisessa menetelmässä lähtöaineena käytettävien yhdisteiden miellyttävän eristämisen saantojen ollessa hyvät.

10 Muodostuneiden kaavan II mukaisten yhdisteiden eristäminen on helposti mahdollista näiden yhdisteiden yleisen vaikealiukoisuuden johdosta, koska nämä yhdisteet liukenevat huonosti erityisesti keksinnön mukaiseen menetelmään soveltuviin liuottimiin.

15 Koska kaavan II mukaisten yhdisteiden annetaan esillä olevassa keksinnössä reagoida kaavan I mukaiseksi lopputuotteeksi tai näiden kaavan I mukaisten yhdisteiden hyvin liukoisiksi suoloiksi, ei ole aivan välttämätöntä eristää yhdisteitä II tai niiden suoloja puhtaassa muodos-20 sa. Pikemminkin voidaan suorittaa syklisointi muuttaen reaktio-olosuhteet yksivaihereaktioksi.

Kaavan II mukaisten yhdisteiden syklisointi emäksenä voi tapahtua lisäämällä liuotinta tai laimennusainet-ta tai ilman niiden lisäystä. Liuottimien tai laimennusai-25 neiden läsnä ollessa tapahtuva syklisointi suoritetaan 0 °C:n ja 130 °C:n välisessä lämpötilassa, edullisesti 40 - 95 °C:ssa. Ilman liuotin- tai laimennusainelisäystä tapahtuva syklisointi suoritetaan 60 °C:n ja 240 °C:n välisessä lämpötilassa, edullisesti 160 - 200 °C:ssa.

30 Jos kaavan II mukainen yhdiste syklisoidaan emäk senä kaavan I mukaisen yhdisteen muodostuessa, niin tällöin suoritusmuoto koostuu siitä, että tarkoituksenmukaisesti kuivaa kaavan II mukaista yhdistettä kuumennetaan 160 - 200 °C:n välisessä lämpötilassa 3-27 minuutin 35 ajan, edullisesti 10 - 20 minuutin ajan ja tämän jälkeen 16 105.029 jäähdytetään heti huoneenlämpötilaan. Lopuksi termisessä syklisoinnissa yhdisteestä II muodostunut yhdiste I eristetään. Tämä käsittää yleensä kahden havaittavissa määrissä myös muodostuneen sivutuotteen, 3-(syklo)alkyyli- tai 5 alkenyyli-aminobentsotrifluoridin (kaava V reaktiokaavios- sa I) ja kaavan VI mukaisen yhdisteen (vrt. kaavio I) erottamisen. Yhdiste VI voidaan helposti erottaa tislaten yhdisteestä I sen laimennettuihin vesipitoisiin emäksiin liukoisuuden johdosta ja kaavan V mukainen yhdiste suurel-10 ta osin sen suuremman haihtuvuuden johdosta. Yhdisteen V täydellinen erottaminen yhdisteestä I on yksinkertaisesti mahdollista uudelleenkiteyttämällä ja/tai pesemällä kiteinen yhdiste I sellaisilla liuottimilla, jotka liuottavat yhdisteen I huonosti ja yhdisteen V helposti.

15 Kaavan II mukaisen yhdisteen syklisointi happoaddi- tiosuolana suoritetaan edullisesti käyttämällä liuottimia tai laimennusaineita 0 °C:n ja 150 °C:n välisessä lämpötilassa, edullisesti 45 - 95 °C:ssa. Tämä kaavan II mukaisen yhdisteen suolan syklisointi voidaan myö suorittaa lisää-20 mättä liuotinta tai laimennusainetta 60 °C:n lämpötilassa, edullisesti 160 - 240 °C:ssa, edullisesti 200 °C:ssa.

Tälle kaavan II mukaisten yhdisteiden syklisointi-lajille lisäten liuottimia tai ilman liuotinlisäystä voidaan käyttää määriteltyjä, erikseen yhdisteestä II valmis-25 tettuja happoadditiosuoloja sekä myös seoksia, jotka koos- • · tuvat yhdisteestä II ja yhdestä tai useammasta haposta. Tällaisiin seoksiin voidaan käyttää kaikkia koostumuksia, alkaen pienimmistä määristä happoekvivalentteja, esim. alle 10"4 ekvivalenttia - aina 2 happoekvivalenttiin tai 30 jopa sen yli; edullisesti käytetään 0,8 - 1,6 happoekviva-· lenttia. Äärimmäisessä tapauksessa voidaan kaavan II mu kaisen yhdisteen syklisointi suorittaa hapossa, joka toimii samanaikaisesti liuottimena tai laimennusaineena. Tätä suoritusmuotoa pidetään edullisena, jos happoina ja lai-35 mennusaineena käytetään muurahais-, etikka- ja/tai propio- 105029 17 nihappoa. Kaavan II mukaisten yhdisteiden happoadditiosuo-lojen syklisoinnissa, kaavan I mukaisen yhdisteen muodostuessa, ei siis välttämättä tarvitse käyttää määrättyjä, erikseen valmistettuja suoloja.

5 Kaavan II mukaisen yhdisteen syklisointi käyttäen yhtä tai useampaa happoa liuottimien tai laimennusaineiden läsnä ollessa, on keksinnön mukaiseen menetelmään hyvin soveltuva suoritusmuoto.

Edullisena pidetty suoritusmuoto kaavan II mukaisen 10 yhdisteen suolojen syklisoinnissa tai kaavan II mukaisen yhdisteen syklisoinnissa lisäten yhtä tai useampaa happoa, tapahtuu siten, että yhdistettä II lämmitetään lisäten 0,2 - 2,5 tai enemmän, edullisesti 1 - 1,5 happoekviva-lenttia liuottimen tai laimennusaineen läsnä ollessa 15 25 °C:n ja 120 °C:n välisessä lämpötilassa, edullisesti 45 - 95 °C:ssa. Reaktion kesto on tällöin lämpötilasta riippuen 0,5 - 9 tuntia. Lopuksi lisäämällä sopivia liuottimia, joihin muodostuneen yhdisteen I vastaava suola liukenee huonosti, voidaan tämä erottaa kiteisenä. Tällä 20 tavalla onnistuu muodostuneen yhdisteen I yksinkertainen ja tehokas erottaminen muodostuneista sivutuotteista (vrt. reaktiokaavio I).

Edellä kuvatussa kaavan II mukaisten yhdisteiden syklisoinnissa voidaan käyttää periaatteessa kaikkia pro-25 tonihappoja. Esimerkkinä mainittakoon seuraavat: kloori-, bromi-, fluori- tai jodivetyhappo, rikki-, fosfori-, typpi- tai perkloorihappo, (C^)alkaanifosfonihapot, sulfoni-hapot, kuten metaani-, bentseeni-, tolueeni- tai trifluo-rimetaani-sulfonihappo, sulfamiinihappo, metyylirikkihap-30 po, etikka-, syanetikka-, kloorietikka-, dikloorietikka-, trikloorietikka- tai trifluorietikkahappo, muurahais-, propioni-, oksaali-, maloni-, maleiini-, meripihka-, glu-taari-, omena-, viini-, sitruuna-, fumaari-, maito-, glykoli- tai palorypälehappo, bentsoehappo tai fenyyliryhmään 35 substituoidut bentsoehapot, kuten toluyylihappo tai p-nit- 105029 18 ro-bentsoehappo tai salisyylihappo, furaanikarboksyyli-ja/tai mantelihappo.

Edullisesti käytetään etikka-, oksaali-, viini-, muurahais-, sitruuna-, omena-, fumaari-, dikloorietikka-5 trikloorietikka- ja/tai propionihappoa.

Erityisen hyvin tarkoitukseen soveltuvia ovat etikka-, oksaali-, viini-, muurahais- ja/tai sitruunahappo.

Liuottimiksi tai laimennusaineiksi soveltuvat tässä 10 kaavan II mukaisen yhdisteen syklisoinnissa suoloina tai suolaseoksina periaatteessa kaikki yhdisteitä II kohtaan inertit orgaaniset liuottimet ja/tai vesi. Edullisesti käytetään C^-alkoholeja, tetrahydrofuraania, dioksaania, metyyli-t.-butyylieetteriä, asetonitriiliä, N,N-dimetyyli-15 formamidia ja/tai asetamidia, alempia glykoli-di- ja -mo-noeettereitä, kuten 1,2-dimetoksietaania, metyyli- ja/tai etyyliglykolia, ja/tai metyyliasetaattia, etyyliasetaattia, asetonia, kloroformia, dikloorimetaania, muurahaishappoa ja/tai etikkahappoa.

20 Keksinnön mukaisen menetelmän edullisena pidetty suoritusmuoto koostuu siitä, että yhdistettä II lämmitetään jääetikan ja/tai muurahaishapon läsnä ollessa, joko lisäten yhtä tai useampaa keskivahvaa - vahvaa happoa tai ilman lisäystä 25 °C:n ja 120 °C:n välisessä lämpötilassa, 25 edullisesti 45 - 95 °C:ssa.

Jääetikka ja/tai muurahaishappo toimivat tällöin samalla liuottimena ja niitä käytetään kulloisenkin yhdisteen II määrään nähden stökiometrisenä ylimääränä. Mahdollisesti käytettävistä keskivahvoista - vahvoista hapoista 30 mainittakoon esimerkkinä oksaali-, sitrakoni-, viini-, ·· sitruuna-, trifluorietikka-, syanetikka-, kloorietikka-, dikloorietikka- ja/tai trikloorietikka- ja/tai polyfosfo-rihappo.

Tarpeen vaatiessa kaavan I mukaisesta yhdisteestä 35 poistetaan eristetty suola yleisesti tunnetulla tavalla, 105029 jollaista käytetään tällaisessa emästen muodostuksessa ja mahdollisesti lisäämällä vastaavaa happoa muutetaan (toiseksi) veteen hyvin liukenevaksi suolaksi.

Kaavan I mukaisten yhdisteiden suolanmuodostuksen 5 yhteydessä mainitut "happoekvivalentit" tarkoittavat kaavan I mukaisia yhdisteitä yksihappoisina emäksinä.

Keksinnön mukaista menetelmää kaavan I mukaisten yhdisteiden valmistamiseksi selvennetään seuraavalla kaaviolla, jossa R1 ja R2 tarkoittavat metyyliä ja R3, R5 ja R6 10 tarkoittavat vetyä.

Kaavio I

X* 15 *'X'

HN N—c' .C. R4 R M

n n 0 H ^_____ „ ...jfr" gf-

R /-"nh r4 r * R N N

„ :Λ· ... ’ :Λ· ."> « »

Kaavan II mukaisen yhdisteen syklisoinnissa sivutuotteena muodostunut 3-(syklo)alkyyli- tai alkenyyli-ami-no-bentsotrifluoridi V voidaan eristää ja johtaa takaisin 30 vastaavan yhdisteen IV valmistusprosessiin.

· Kaavan I mukaisilla yhdisteillä ja näiden yhdistei den veteen hyvin liukenevilla suoloilla on arvokkaita farmakologisia ominaisuuksia ja niitä voidaan tämän johdosta käyttää lääkeaineina. Niillä on esimerkiksi hypolipideemi-35 siä eli veren rasva-arvoja alentavia ominaisuuksia.

105029 20

Yllättäen todettiin, että kaavan I mukaiset yhdisteet ja näiden yhdisteiden veteen hyvin liukenevat suolat kohottavat LDL-reseptori-tasoa. Kaavan I mukaiset yhdisteet ja niiden veteen hyvin liukenevat suolat soveltuvat 5 tämän johdosta lipidiaineenvaihdunnan häiriöiden hoitoon, joihin voidaan vaikuttaa edullisesti stimuloimalla maksan LDL-reseptoria.

Keksintö koskee tämän johdosta myös kaavan I mukaisten yhdisteiden ja niiden veteen hyvin liukenevien 10 suolojen käyttöä mainittujen lipidiaineenvaihdunnan häi riöiden hoidossa.

Vaikutus perustuu LDL-reseptorin (apob/E reseptori) nopeaan suoraan stimulaatioon maksassa. Kaavan I mukaiset yhdisteet ja niiden veteen hyvin liukenevat suolat alenta-15 vat luonnollisen kolesteroli-kataboliatien stimuloinnin kautta aterogeenista eli rasvakerrostumia valtimoiden seinämiin muodostavaa LDL:ää ja VLDL:ää. HMG-CoA-reduktaasin inhibiittorit tai ioninvaihtohartsit sitä vastoin stimuloivat epäsuorasti LDL-reseptorien ilmentymistä maksaso-20 lussa alentamalla solunsisäistä kolesterolitasoa tai lisäämällä kolesterolin tarvetta sappihappojen biosynteesissä. Täten ei ole odotettavissa sivuvaikutuksia, jollaisia on havaittavissa statiineilla, johtuen niiden nopeasta HMG-CoA-reduktaasin estosta myös muissa elimissä kuin mak-25 sassa (esim. ubikinonin muodostukseen kohdistuva vaiku- · tus). Tällaisia sivuvaikutuksia ei ole myöskään tähän mennessä havaittu. Myöskään ioninvaihtohartsien kohdalla havaittuja hoitomyönteisyysongelmia, joita vaadittavat suuret päivittäiset 15 - 30 g:n suuruiset annokset aiheutta-30 vat, ei ole pelättävissä.

’· Rasvakerrostumien muodostumisessa valtimoiden sei nämiin erityisen vaarallisia ovat määrätyt kolesterolia kuljettavat lipoproteiinifraktiot, kuten partikkelikooltaan pienet LDL-fraktiot. Suurin osan LDL:n kataboliasta 35 (75 %) tapahtuu LDL-reseptorin vaikutuksesta maksassa.

105029

Maksasoluissa kolesteroli metaboloituu sitten osittain sappihapoiksi ja erittyy sapen muodossa, osittain tapahtuu myös kolesterolin suoraa erittymistä sapen kautta. Täten on periaatteessa jo tunnettua ja terapeuttisesti epäsuo-5 rasti vaikuttavien aineiden (kuten statiinien) avulla jo todistettu, että LDL-reseptori on ihanteellinen kohde veren rasva-arvoja alentavalle, valtimonkovetustautia ehkäisevälle aineelle ihmisellä.

Kaavan I mukaiset yhdisteet ja niiden veteen hyvin 10 liukenevat suolat kohottavat LDL-reseptori-tasoa. Lisääntynyt LDL- (IDL-, kylomikronijäänne-) partikkelien pääsy maksasoluihin, johtuen näin kohonneesta LDL-reseptori-tasosta solun ulkopinnalla, johtaa sitten LDL-kolesterolin voimistuneeseen hajoamiseen maksassa. HDL-tasoihin ei vai-15 kuteta.

Kaavan I mukaiset yhdisteet ja niiden veteen hyvin liukenevat suolat ovat täten ihanteellinen antiateroskle-roottisesti vaikuttava periaate. Seuraavat löydökset vahvistavat todetun vaikutusmekanismin, mikä osoittaa, että 20 kuvatut yhdisteet soveltuvat erinomaisen hyvin alentuneesta LDL-reseptori-aktiviteetista johtuvien hyperlipidemioi-den hoitoon (tila, joissa veren rasva-arvot ovat koholla).

la. Kaikkialla mallina tunnetussa humaanissa hepa-tosytooma-solulinjassa HepG2 LDL-reseptorin lähetti-RNA- 25 tasot kohoavat kaavan I mukaisten yhdisteiden vaikutukses- • · ta (taulukko I) .

lb. Myös rottien maksoissa kohoavat muutamien tuntien sisällä LDL-reseptorin lähetti-RNA-tasot kaavan I mukaisten yhdisteiden vaikutuksesta (taulukko II).

30 Stimulointi on alueella: 170 - 350 % kontrolleihin nähden (kontrolli = 100 %) .

Lähetti-RNA:n preparointi suoritettiin julkaisussa: "Chomczynski, P. und Sacchi, N., Anal. Biochem. 162, 156 -159 (1987)" kuvatun menetelmän mukaisesti. Elimissä (kuten 35 esim. maksassa) kuivajäässä oleva syväjäädytetty kudos ho- 22 105029 mogenoitiin ensiksi huhmareessa ja lähetti-RNA rikastettiin edelleen Oligo dt:n avulla standardimenetelmien mukaisesti (vrt. Sambrook, J., Fritsch, E. F. und Maniatis, T., Molecular Cloning, zweite Auflage, Gold Spring Harbor 5 (1989); tästä menetelmäkokoelmasta löytyvät myös kaikkien muiden tässä käytettyjen relevanttien molekyylibiologian standardimenetelmien kuvaukset) . 5 - 20 μπι näin saatua liuennutta lähetti-RNA:ta denaturoitiin standardimenetelmien mukaisesti ja erotettiin 1-prosenttisissa horisontaa-10 lisissä agaroosigeeleissä. Lähetti-RNA siirrettiin kapil-laariveren avulla Hybond N membraaneihin (Amersham). Spesifisenä hybridisointinäytteenä toimi osittainen LDL-re-septorin cDNA-klooni ja sisäisenä standardina plasmidi, joka sisälsi β-aktiini-geenin. Molemmat plasmidit merkat-15 tiin Amersham'in random Primer-kitin avulla, kunnes spesifinen aktiviteetti oli 5 x 109 cpm/^g. Esihybridisointi, hybridisointi ja suodattamien pesu tapahtuivat standardi-menetelmien mukaisesti. Suodattimet asetettiin lopuksi Cronex 4 -kalvoille (Dupont) yön ajaksi 14 päivään saakka 20 vahvistuskalvon läsnä ollessa -70 °C:een ja hybridisointi-signaalit määritettiin kalvonmustumisintensiteetin avulla kaupallisella laser-tiheysmittarilla. Lopuksi LDL-resepto-ribandien intensiteetin ja aktiinibandien intensiteetin osamäärä määritettiin sisäisenä standardina saantovaihto-25 ehtojen korjaamiseksi.

Taulukko 1 ilmoittaa LDL-reseptorin lähetti-RNA:n (mRNA:n) ilmentymisen stimuloinnin HepG2-soluissa valittujen kaavan I mukaisten yhdisteiden vaikutuksesta kokosee-rumissa (yhdisteiden loppukonsentraatio 10"6 M) 16 tunnin 30 inkuboinnin jälkeen. HepG2-soluja inkuboitiin RPMI 1640 ·· standardiväliaineessa vasikan sikiön seerumin kanssa (lop pukonsentraatio 10 %). Induktiokontrollina toimi seerumi-vapaa RPMI-väliaine. Lopuksi preparoitiin koko lähetti-RNA ja Northern-Blot-tekniikan avulla määritettiin relevantit 35 LDL-reseptorin mRNA- ja β-aktiinin mRNA-tasot. LDL-resep- 23 105029 torin mRNA-signaalin ja kontrollin β-aktiinin mRNA-signaa-lin (ilman ainelisäystä) osamäärä asetettiin 100 %:ksi ja yhdisteiden vaikutuksella saavutettu LDL-reseptorin lähet-ti-RNA-tason stimuloituminen ilmaistiin prosentteina kont-5 rolliin nähden.

Taulukko I

Yhdisteet Konsentraatio LDL-reseptorin mRNA

10 esimerkistä: 2 2 x 10'6 M 175 % 4 2 x 10’6 M 205 % 12 2 x 10'6 M 170 % 15 33 2 x 10‘6 M 205 % 40 2 x 10~6 M 180 % 42 2 x 10‘6 M 180 %

20 Lähetti- eli messenger-RNA = mRNA

Taulukko II osoittaa LDL-reseptorin lähetti-RNA:n ilmentymisen stimuloinnin rottien maksoissa 6 tunnin kuluttua valikoitujen kaavan I mukaisten yhdisteiden annos-" " 25 telusta (annos 30 mg/kg). Maksakudokset otettiin pois ja • i shokkijäädytettiin nestemäisessä typessä.

Lopuksi lähetti-RNA eristettiin edellä kuvatulla tavalla ja suhteelliset LDL-reseptorin lähetti-RNA-tasot määritettiin Northern-Blot-tekniikan avulla. Käsittele-30 mättömien kontrollieläinten lähetti-RNA-tasot asetettiin · 100-%:iksi ja LDL-reseptorin lähetti-RNA:n stimuloituminen laskettiin prosentteina kontrolliin nähden.

105029 24

Taulukko II

Yhdisteet Konsentraatio LDL-reseptorin mRNA

esimerkistä: 5 _ 2 30 mg/kg 300 % 4 30 mg/kg 221 % 33 30 mg/kg 350 % 40 30 mg/kg 340 %

10 Lähetti- eli messenger-RNA = mRNA

2. HMG-CoA-reduktaasin määrityksessä in vitro, joka on suoritettu rottien maksasta saadulla osittain puhdistetulla HMG-CoA-reduktaasilla (vrt. Avigan J. Bathena, 15 S.J., und Schreiner, M.E., J. Lipid Res. 16, 151 (1975) und Philippi, B.W., und Shapiro, D.J., J. Lipid Res. 20, 588 (1977)) eivät kaavan I mukaisten yhdisteiden hydroklo-ridit vaikuta entsyymiaktiviteettiin (hajonta 10 %) lisäyksen ollessa 10'5 M (loppukonsentraatio) kontrolli-inku-20 bointeihin verrattuna, lovastatiini-Na:n (avattu laktoni-rengas) IC50 on tässä kokeessa 3 x 10'9 M.

3. In vivo kohonnut LDL-reseptori-aktiviteetti heijastuu jälleen koe-eläimillä LDL-reseptorien vaikutuksesta (apoB/E-reseptori) metabolisoituvien lipoproteiinifrak- 25 tioiden alenemisena, s.o. havaitaan LDL- ja VLDL-tasojen •« lasku. Tätä tarkoitusta varten suoritettiin seuraava testi .

Normaali-rasva-arvot omaavien uros-rottien seerumin lipoproteiineihin kohdistuva vaikutus melkein pitkäaikai-30 sessa kokeessa ·· Ryhmät, jotka käsittivät kulloinkin 10 uros-rottaa, jotka olivat kantaa: HOE:WISKf(SPF 71) ja, joiden lähtö-paino oli yli 180 g,’ saivat kerran päivässä (aamuisin) testivalmistetta tai vertailuvalmistetta 1-prosenttisessa 35 vesipitoisessa Rtyloosi MH 300-liuoksessa mahaletkun avulla 105029 (0,5 ml/100 mg painokilo); kukin kontrolliryhmä sai ainoastaan välitysainetta. Viimeinen (7.) annostelu tapahtui 24 tuntia ennen verinäytteiden ottoa ja eläinten tappamista. Ruokaa ja vettä eläimet saivat vapaasti koko kokeen 5 ajan. 24 tuntia ennen verinäytteiden ottoa ruoka otettiin pois.

Seerumin lipoproteiinien analysoimiseksi sekoitettiin ryhmän kaikkien 10 rotan seerumi yhteen. Seerumin lipoproteiinit erotettiin preparatiivisella ultrasentrifu-10 gilla (KONTRON TGA 65, Rotor BECKMAN 50.4 Ti).

VLDL:n ja LDL:n erottamiseen käytettiin seuraavia ehtoja: Koga, S., Horwitz, D.L., und Scanu, A.M., Journal of lipid Research 10, 577 (1969) und Havel, R.J., Eder, H. A. und Bragdon, H.H., J. Olin. Invest. 34, 1345 (1955). 15 I. VLDL tiheys < 1,006 16 tuntia 40 000 rpm 2. LDL tiheys < 1,006 - 1,04 16 tuntia 40 000 rpm

Kolesteroli- ja triglyseridi-arvojen entsymaatti-20 seen määritykseen erotetuissa lipoproteiinifraktioissa käytettiin seuraavia testikombinaatioita: BOEHRINGER/Mann-heim (vrt. Siedel, J. Schlumberger, H., Klose, S., Ziegen-horn, J. und Wahlefeld, A.W., Clin. Chem. Clin. Biochem. 19, 838 (1981) und Wahlefeld, A.W.: H.O. Bermeier: Metho-j 25 den der enzymatischen Analyse, 2. Auflage, Band II, Verlag Chemie 1974, S. 1878). Proteiinit määritettiin Lowry' :n mukaan (Lowry, O.H., Roseborough, N.H., Farr, A.L. und Randell, R.J., J. Biol. Chem. 193, 265 (1951)).

Tulokset ovat yhteenkoottuina taulukossa III. Ver-30 tailuvalmisteena käytettiin klofibraattia.

• <

Taulukko III

105029

Seerumi % muutos kontrolliin nähden hoidon päättyessä 5 _

Yhdiste annos kolesteroli proteiini trigly- esimer- mg/kg/ seridit

kistä päivä VLDL LDL VLDL LDL VLDL

10 2 30 -96 -75 -40 -73 -81 10 -41 -32 -28 -28 -26 3 -30 -40 -7 -28 -40 1 -22 -28 -44 15 4 30 -70 -68 -13 -53 -29 10 +2 -39 -18 -33 12 30 -80 -66 -51 -30 -29 10 -63 -46 -34 -18 -51 20 3 -6 -26 -8 -5 -4 33 30 -95 -67 -33 -44 -100 10 -48 -47 -29 -33 -73 25 40 30 -57 -58 -52 -52 -41 10 -40 -53 -41 -38 -2 3 -19 -22 -11 -18 • · 105029 27 4. Vertailevat solujen proliferaatiota estävät tutkimukset :

Eksponentiaalisesti kasvavia kasvainsoluja (hiiren leukemia-soluja L 1210: keuhkoputken syöpäsoluja A 549; 5 paksusuolen syöpäsoluja HT29) viljellään konsentraationa: 5 x 103 solua/ml RPMI-standardi-väliaineessa 96-kuoppa-mik-rotiitterilevyillä. Inkubointi testiaine-konsentraatiosar-joilla tapahtuu 72 tunnin aikana 37 °C:ssa 5-prosenttises-sa C02-atmosfäärissä suhteellisen ilmankosteuden olles-10 sa 95 %. Jokainen yhdistekonsentraatio tai kontrolli testataan tällöin neljällä rinnakkaisella inkuboinnilla. 65 tunnin kuluttua lisätään 50 μΐ MTT:tä [3-(4,5-dimetyy-li-2-tiatsolyyli)-2,5-difenyyli-2H-tetratsolium-bromidia] 2,5 mg:ssa/ml PBS:ää. Koskemattomissa soluissa MTT pelkis-15 tyy punaiseksi liukenemattomaksi väriaineeksi. Käytetystä solulinjasta riippuen poistetaan edelleen 7-24 tunnin inkuboinnin jälkeen jäännös. Muodostunut liukenematon väriaine liuotetaan 100 μΐ-.aan DMS0:ta ravistellen varovasti ja ekstinktio mitataan Multiskan fotometri 340 CCrllä 20 (firma Flow) allonpituudella 492 nm.

Tulokset lasketaan määritettyjen testiaineiden eks-tinktioarvojen ja kontrolliarvojen osamäärinä. Määritettyjen yksittäisten arvojen poikkeamat vertailuarvojen sisällä ovat alle 15 %. Annos-vaikutusdiagrammeista luetaan an- · 25 netuille yhdisteille IC50-arvo.

Kaavan I mukaisia yhdisteitä voidaan käyttää niiden farmaseuttisesti hyväksyttävinä happoadditiosuoloina -tätä käyttömuotoa pidetään edullisena - tai vapaana emäksenä niiden farmakologisten ominaisuuksien johdosta lääke-30 aineina, jolloin ne annostellaan joko yksinään tai sekoitettuna sopivien kantaja-aineiden ja/tai sopivien laimen-nusaineiden ja mahdollisesti vielä myös muiden lisäaineiden kanssa.

Farmaseuttiset valmisteet sisältävät ei-toksisten, 35 inerttien, farmaseuttisesti sopivien kantaja-aineiden 28 1 0 5 0 2 9 ohella yhtä tai useampaa kaavan I mukaista vaikuttavaa ainetta tai koostuvat yhdestä tai useammasta kaavan I mukaisesta vaikuttavasta aineesta.

Ei-toksisilla, inerteillä, farmaseuttisesti sopi-5 villa kantaja-aineilla tarkoitetaan kaikenlaisia farmaseuttisesti hyväksyttäviä kiinteitä, puolikiinteitä tai nestemäisiä laimennusaineita, täyteaineita ja formulointi-apuaineita, jotka vaikuttavaan aineeseen sekoittamisen jälkeen saattavat tämän annosteluun soveltuvaan muotoon. 10 Kaavan I mukaisten yhdisteiden sopivina käyttömuo toina tulevat kyseeseen esimerkiksi tabletit, lääkerakeet, kapselit, pillerit, vesipitoiset liuokset, suspensiot tai emulsiot, mahdollisesti steriilit injisoitavat liuokset, ei-vesipitoiset emulsiot, suspensiot ja liuokset, sprayt 15 sekä valmistemuodot, joissa vaikuttavan aineen vapautuminen on hidastettua.

Terapeuttisesti vaikuttavia yhdisteitä tulee olla edellä esitetyissä farmaseuttisissa valmisteissa tarkoituksenmukaisesti konsentraatiossa: noin 0,1, edullisesti 20 0,5-99,0, edullisesti 70,0 painoprosenttia kokonaisseok- sesta.

Liuosten sekä spray-muodossa olevien aerosolien käyttökonsentraatiot ovat yleensä 0,1 - 20, edullisesti 0,5-5 painoprosenttia.

25 Edellä esitetyt farmaseuttiset valmisteet voivat sisältää kaavan I mukaisten vaikuttavien aineiden lisäksi myös muita farmaseuttisia vaikuttavia aineita.

Edellä esitettyjen farmaseuttisten valmisteiden valmistus tapahtuu tavanomaisella tavalla tunnettujen me-30 netelmien mukaisesti, esim. sekoittamalla vaikuttavaan aineeseen tai vaikuttaviin aineisiin kantaja-ainetta tai kantaja-aineita. Esimerkeissä (123 ja 124) on kuvattu sopivia tablettikoostumuksia.

m 105029 29

Vaikuttavia aineita tai farmaseuttisia valmisteita voidaan annostella suun kautta, parenteraalisesti, intra-peritoneaalisesti ja/tai peräsuolen kautta.

Esim. veren rasva-arvoja alentavina aineina käytet-5 täviä kaavan I keksinnön mukaisia yhdisteitä, edullisesti niiden suoloja, voidaan käyttää valmistettaessa farmaseuttisia valmisteita, jotka sisältävät vaikuttavan määrän aktiivista ainetta yhdessä kantaja-aineiden kanssa ja, jotka soveltuvat enteraaliseen ja parenteraaliseen annos-10 teluun. Edullisesti käytetään tabletteja tai kapseleita (gelatiinikapseleita), jotka sisältävät vaikuttavaa ainetta yhdessä laimennusaineiden tai kantaja-aineiden, esim. laktoosin, dekstroosin, ruokosokerin, mannitolin, sorbitolin, selluloosan, eri tärkkelyslajien ja/tai glyserolin 15 kanssa, ja liukuaineiden, kuten piimään, talkin, stearii-nihapon tai sen suolojen, kuten magnesium- tai kalsium-stearaatin ja/tai polyetyleeniglykolin kanssa. Tabletit sisältävät samoin sideaineita, kuten magnesiumkarbonaattia, magmesiumaluminiumsilikaattia, tärkkelystä, gelatii-20 nia, traganttia, metyyliselluloosaa, natriumkarboksimetyy-liselluloosaa ja/tai polyvinyylipyrrolidonia ja tarvittaessa väriaineita, makua parantavia aineita ja makeutus-aineita. Injisoitavat liuokset ovat edullisesti isotonisia vesipitoisia liuoksia tai suspensioita, jotka voivat olla 25 steriloituja ja voivat sisältää apuaineita, kuten säilöntä-, stabilointi-, kostutus- ja/tai emulgointlaineita, liukenemista välittäviä aineita, suoloja osmoottisen paineen säätelemiseksi ja/tai puskuriaineita. Farmaseuttisia valmisteita, jotka voivat haluttaessa sisältää muita far-30 makologisesti vaikuttavia aineita, valmistetaan esim.

tavanomaisten sekoitus-rakeistus- ja drageerausmenetelmien avulla ja ne sisältävät 0,1 - edullisesti 80 %, edullisesti noin 5 - noin 65 % vaikuttavaa ainetta.

Annostelu suun kautta tapahtuu farmaseuttisesti 35 tavanomaisina valmisteina, esimerkiksi tabletteina, lääke- 105029 30 rakeina tai kapseleina, jotka sisältävät esim. päivittäistä annosta kohti 5 - 1 000 mg, edullisesti 20 - 200 mg vaikuttavaa ainetta seoksena tavanomaisen kantaja-aineen ja/tai täyteaineen kanssa, jolloin 5 - 200 mg:n suuruiset 5 kerta-annokset voidaan annostella edullisesti 1-3 kertaa päivässä.

Voi kuitenkin olla tarpeellista poiketa mainituista annostuksista ja nimittäin riippuen potilaasta ja hänen painostaan, sairauden lajista ja vaikeusasteesta, valmis-10 teen lajista ja lääkeaineen annostelutavasta sekä ajankohdasta tai aikavälistä, jonka aikana annostelu tapahtuu. Niinpä voi joissakin tapauksissa riittää, että käytetään pienempää annosta vaikuttavaa ainetta kuin mitä edellä mainittu määrä on, kun taas toisissa tapauksissa täytyy 15 edellä mainittu vaikutusainemäärä ylittää. Vaikuttavien aineiden kulloinkin tarpeellisen optimaalisen annostuksen ja annostelutavan voi jokainen asiantuntija helposti määrittää asiantuntemuksensa perusteella.

Seuraavat esimerkit valaisevat keksintöä. Esimerkit 20 5-10, 13-17, 19-24, 26-32, 34-39, 41-43, 45-58, 60-64, 66, 70-77, 79-81, 83, 84, 89, 91-98 ja 100-122 eivät kuulu patenttivaatimusten määrittelemän keksinnön piiriin.

Lämpötilat on ilmoitettu °C:na.

Seuraavissa esimerkeissä ilmoitetut sulamis- tai : ' 25 hajoamispisteet ovat korjaamattomia.

Ohutkerroskromatografiät suoritettiin DC-valmisle-vyillä, silikageeli 60, F-254, firma Riedel-de Haen AG, ja mikäli esimerkeissä ei ole ilmoitettu mitään muuta eluoin-tiainetta, käytettiin eluointiaineena CH2C12/C2H50H:ta 10:1 30 (v/v).

Esimerkki 1

Suspensiota, jossa oli 1,267 g (3 mmol) yhdistettä II, jossa R1 ja R2 merkitsevät CH3:a, R3, R5 ja R6 merkitsevät vetyä ja R4 on C2H5, 3 ml:ssa jääetikkaa, sekoitet- 35 tiin 5 tuntia 50 °C:ssa ja lopuksi haihdutettiin vakuumis- 105029 31 sa. Jäljelle jäävä jäännös liuotettiin H20/CH2C12:een. Vesipitoisen faasin pH saatettiin 2N NaOH:lla arvoon 9. Faasien erottamisen jälkeen vesipitoinen faasi uutettiin kaksi kertaa CH2Cl2:lla. Yhdistetyt CH2Cl2-uutteet pestiin 5 H20:lla, kuivattiin MgS04:llä, suodatettiin ja haihdutettiin vakuumissa. Jäännös (1,07 g) liuotettiin eetteriin, minkä jälkeen tapahtui kiteytyminen. Kiteinen massa imu-suodatettiin, pestiin eetterillä ja kuivattiin 15 tunnin ajan 100 °C:ssa vakuumissa (6 mbar). Saatiin 0,86 g 10 (67,9 %:n saanto) DC-puhdasta 4-amino-2-(4,4-dimetyyli- 2-okso-imidatsolidin-l-yyli) pyrimidiini-5-karboksyyli-happo-(N-etyyli-N-(3-trifluorimetyyli-fenyyli)amidia) , jp.: 186 - 187 °C.

C19H21F3N602 (422,43) 15 Laskettu: C 54,02 H 5,01 F 13,49 N 19,90 % Löydetty: C 53,5 H 5,2 F 12,9 N 19,7 %

Esimerkki 2

Liuokseen, jossa oli 3,80 g (9 mmol) esimerkin 1 mukaan valmistettua 4-amino-2-(4,4-dimetyyli-2-okso-imi-20 datsolidin-l-yyli)pyrimidiini-5-karboksyylihappo-(N-etyy li-N- (3-trifluorimetyyli-fenyyli) amidia) 20 ml:ssa asetonia, tiputettiin huoneenlämpötilassa 1,52 ml 6,6 molaaris-ta HCl-liuosta eetterissä ja muodostunutta suspensiota sekoitettiin 20 minuutin ajan jäällä jäähdyttäen. Tämän 25 jälkeen kiteet imusuodatettiin, pestiin asetonilla ja eetterillä ja kuivattiin 10 tuntia vakuumissa (6-7 mbar) 100 °C:ssa. Saatiin 3,83 g (= 92,7 %:n saanto) 4-amino-2-(4,4-dimetyyli-2-okso-imidatsolidin-l-yyli)pyrimidiini-5-karboksyylihappo-(N-etyyli-N-(3-trifluorimetyyli-fenyyli)-30 amidi)hydrokloridia, jonka jp. on 264 - 265 °C (hajoten). C19H22C1F3N602 (458,89)

Laskettu: C 49,73 H 4,83 Cl 7,73 F 12,42 N 18,32 % Löydetty C 48,9 H 5,0 Cl 7,6 F 12,3 N 17, 8 % 105029 32

Esimerkki 3

Suspensiota, jossa oli 1,746 g (4 mmol) yhdistettä II, jossa R1 ja R2 merkitsevät CH3:a, R3, R5 ja R6 merkitsevät vetyä ja R4 on isopropyyli, 4 ml:ssa jääetikkaa, sekoi-5 tettiin 3 tuntia 50 °C:ssa ja lopuksi haihdutettiin vakuu-missa. Jäljelle jäävä jäännös liuotettiin 5 ml:aan 2N suolahappoa ja 10 ml:aan eetteriä. Faasien erottamisen jälkeen suolahappoinen, vesipitoinen faasi uutettiin useita kertoja eetterillä, lopuksi pH saatettiin 6N natronli-10 peällä arvoon 9 - 10 ja sitten uutettiin useita kertoja CH2Cl2:lla. Yhdistetyt CH2Cl2-uutteet pestiin muutamalla ml :11a vettä ja kuivattiin Na2S04:llä. Suodattamisen jälkeen CH2C12 poistettiin tislaamalla vakuumissa ja jäljelle jäävä jäännös liuotettiin 5-6 ml:aan eetteriä. Eetteri-15 liuoksesta tapahtui kiteytyminen. Kiteinen aine imusuoda-tettiin, pestiin eetterillä ja kuivattiin 16 tunnin ajan 100 °C:ssa. Saatiin 1,14 g (65,3 %:n saanto) DC-puhdasta 4-amino-2-(4,4-dimetyyli-2-okso-imidatsolidin-l-yyli)py-rimidiini-5-karboksyylihappo-(N-isopropyyli-N-(3-trifluo-20 rimetyyli-fenyyli)amidia), jp.: 202 - 203 °C.

C20H23F3N6O2 (43 6,45)

Laskettu: C 55,04 H 5,31 F 13,06 N 19,26 % Löydetty: C 55,0 H 5,5 F 12,4 N 19,1 %

Esimerkki 4 :: " 25 Liuokseen, jossa oli 6,55 g (15 mmol) esimerkin 3 mukaan valmistettua 4-amino-2-(4,4-dimetyyli-2-okso-imi-datsoiidin-1-yyli)pyrimidiini-5-karboksyylihappo-(N-iso-propyyli-N-(3-trifluorimetyyli-fenyyli)amidia) 35 ml:ssa asetonia, tiputettiin huoneenlämpötilassa 2,5 ml 6,6 mo-30 laarista HCl-liuosta eetterissä ja muodostunutta suspen siota sekoitettiin 2 tunnin ajan huoneenlämpötilassa. Tämän jälkeen kiteet imusuodatettiin, pestiin asetonilla ja kuivattiin 10 tuntia vakuumissa 100 °C:ssa. Saatiin 6,84 g (= 96,5 %:n saanto) 4-amino-2-(4,4-dimetyyli-2-okso-imi- 35 datsolidin-l-yyli)pyrimidiini-5-karboksyylihappo-(N-iso- 105029 propyyli-N-(3-trifluorimetyyli-fenyyli)amidi)hydroklori-dia, jonka jp. on 279 - 280 °C (hajoten).

C20H24ClF3N6O2 (472,92)

Laskettu: Cl' 7,50 % 5 Löydetty Cl' 7,6 %

Esimerkki 5

Suspensiota, jossa oli 16,70 g (37 mmol) yhdistettä II, jossa R1 ja R2 merkitsevät CH3:a, R3, R5 ja R6 merkitsevät vetyä ja R4 on n-butyyli, 41 ml:ssa jääetikkaa, sekoi-10 tettiin 4 tuntia 60 °C:ssa, jolloin muodostui liuos. Tämä haihdutettiin vakuumissa. Jäännös liuotettiin 300 ml:aan CH2Cl2:ta ja tätä liuosta ravisteltiin kolme kertaa kulloinkin 40 ml:n kanssa 2N NaOH:ta ja kaksi kertaa kulloinkin 50 ml:n kanssa vettä. Kuivaamisen ja suodattamisen 15 jälkeen CH2Cl2-liuos haihdutettiin vakuumissa. Jäljelle jäävä öljyinen jäännös (16,5 g) liuotettiin 15 ml:aan etyyliasetaattia ja lisättiin eetteriä, kunnes samentuminen alkoi, minkä jälkeen kiteet saostuivat. Sen jälkeen, kun oli sekoitettu 2 tuntia jäähauteessa, kiinteä aine 20 imusuodatettiin, pestiin eetterillä ja kuivattiin 20 tuntia 100 °C:ssa. Saatiin 9,48 g (56,8 %:n saanto) puhdasta 4-amino-2-(4,4-dimetyyli-2-okso-imidatsolidin-l-yyli)py-rimidiini-5-karboksyylihappo-(N-butyyli-N-(3-trifluorimetyyli-fenyyli) amidia) , jp.: 154 - 155 °C.

25 C21H25F3N602 (450,48)

Laskettu: C 55,99 H 5,59 F 12,65 N 18,66 % Löydetty: C 55,3 H 5,6 F 12,5 N 18,4 %

Esimerkki 6

Liuokseen, jossa oli 4,96 g (11 mmol) edellä olevan 30 esimerkin mukaan valmistettua yhdistettä I (R1, R2 = CH3, R3, Rs, R6 = H; R4 = n-C4H9) 25 ml:ssa asetonia, lisättiin huoneenlämpötilassa 1,9 ml 6,17 molaarista HCl-liuosta eetterissä. Muodostuvaa suspensiota sekoitettiin 2 tuntia jäällä jäähdyttäen. Tämän jälkeen kiteet imusuodatettiin, 35 pestiin asetonilla eetterissä ja kuivattiin 15 tuntia 105029 34 100 °C:ssa vakuumissa (6 mbar). Saatiin 5,44 g (~ 100 %) puhdasta 4-amino-2-(4,4-dimetyyli-2-okso-imidatsolidin-l-yyli)pyrimidiini-5-karboksyylihappo-(N-butyyli-N-(3-tri-fluorimetyyli-fenyyli)amidi)hydrokloridia, jp.: 266 - 5 267 °C (hajoten).

C21H26C1F3N602 (486,94)

Laskettu: Cl" 7,28 % Löydetty Cl* 7,3 %

Esimerkki 7 10 Esimerkissä 5 kuvatun työskentelytavan mukaisesti 14,76 g (32,8 mmol) yhdistettä II (R1, R2 = CH3, R3, R5, R6 = H; R4 = sek.-C4H9) ja 36 ml jääetikkaa sekoitettiin 4 tunnin ajan 60 °C:ssa. Tämän jälkeen käsiteltiin edelleen, kuten esimerkissä 5 kuvattiin. Saatiin 9,17 g (62 %:n saanto) 15 DC-puhdasta 4-amino-2-(4,4-dimetyyli-2-okso-imidatsolidin-

1-yyli)pyrimidiini-5-karboksyylihappo-(N-sek.-butyyli-N-(3-trifluorimetyyli-fenyyli)amidia), jp.: 149 - 150 °C

(hajoten).

C21H25F3N602 (450,48) 20 Laskettu: C 55,99 H 5,59 F 12,65 N 18,66 % Löydetty: C 55,8 H 5,5 F 12,3 N 18,6 %

Esimerkki 8

Esimerkissä 6 kuvatun työskentelytavan mukaisesti 4,51 g (10 mmol) esimerkin 7 mukaan valmistettua yhdistet-: 25 tä I (R1, R2 = CH3, R3, R5, R6 = H; R4 = sek.-C4H9) muutet

tiin hydrokloridiksi. Saatiin 4,81 g (= 98,8 %) puhdasta 4-amino-2-(4,4-dimetyyli - 2-okso-imidatsolidin-1-yyli)py-rimidiini-5-karboksyylihappo-(N-sek.-butyyli-N-(3-trifluo-rimetyyli-fenyyli)amidi)hydrokloridia, jp. : 282 - 283 °C

30 (hajoten).

C21H26C1F3N602 (486,94)

Laskettu: Cl" 7,28 % Löydetty Cl" 7,35 %.

35 1 0 5 0 2 9

Esimerkki 9

Seosta, jossa oli 13,57 g (26,9 mmol) yhdistettä II (R1, R2 = CH3, R3, R5, R6 = H; R4 = CH (CH3)-CH2CH2-CH=C (CH3) 2) ja 30 ml jääetikkaa sekoitettiin 4 tunnin ajan 50 -5 55 °C:ssa, jolloin 15 minuutin kuluttua oli muodostunut liuos. Tämän jälkeen haihdutettiin vakuumissa. Jäljelle jäävä jäännös (11,3 g) kromatografioitiin (28 mm 0 x 400 mm (H) ) -silikageeli/CH2Cl2-pylväällä. Sen jälkeen, kun oli eluoitu 900 ml :11a CH2Cl2:ta, eristettiin 1,5 g esivyöhyk-10 keitä. Tämän jälkeen eluoitiin CH2C12/C2H50H: 11a 100:1 - 10:1 (käyttäen koko ajan kohoavaa C2H5OH-pitoisuutta) 7 fraktiona (kulloinkin 400 ml) 8,7 g melkein puhdasta -puhdasta tuotetta öljymäisessä muodossa. Tämän jälkeen saatiin kiteyttämällä isopropyylieetteri/isoheksaanista 15 7,1 g puhdasta 4-amino-2-(4,4-dimetyyli-2-okso-imidatsoli- din-l-yyli)pyrimidiini-5-karboksyylihappo-(N-(2-metyyli-hept-2-en-6-yyli)-N-(3-trifluorimetyyli-fenyyli)amidia), jonka jp. oli 106 - 107 °C. Emäliuosjäännös (1,06 g ) oli samoin lähes puhdasta yhdistettä I (R1, R2 = CH3, R3, R5, 20 R6 = H; R4 = CH(CH3) -CH2CH2-CH=C (CH3) 2) , joten yhteensä saatiin 8,16 g (= 60 %:n saanto) tätä yhdistettä.

C25H31F3N602 (504,57)

Laskettu: C 59,51 H 6,19 F 11,30 N 16,66 % Löydetty: C 59,5 H6,2 F 11,0 N 16,4 % : 25 Esimerkki 10

Vastaavasti, kuten esimerkissä 6 saatiin lähtien 3,46 g:sta (6,86 mmol) edellä olevan esimerkin 9 mukaan saatua, 20 ml:aan etyyliasetaattia liuotettua yhdistettä I (R1, R2 = CH3, R3, R5, R6 = H; R4 = CH (CH3) -CH2CH2-CH=C (CH3) 2) 30 ja 1,06 ml:sta 6,6 molaarista HCl-liuosta eetterissä, 3,50 g (saanto = 94 %) puhdasta, kiteistä 4-amino-2-(4,4-dimetyyli-2-okso-imidatsolidin-l-yyli)pyrimidiini-5-kar-boksyylihappo-(N- (2-metyyli-hept-2-en-6-yyli)-N-(3-tri-fluorimetyyli-fenyyli)amidi)hydrokloridia, jp·: 248 - 35 249 °C.

105029 C25H32C1F3N602 (541,04)

Laskettu: Cl' 6,55 % Löydetty Cl' 6,5 %.

Esimerkki 11 5 Esimerkissä 5 kuvatun työskentelytavan mukaisesti 10,0 g (22,3 mmol) yhdistettä II (R1, R2 = CH3, R3, R5, R6 = H; R4 = syklopropyylimetyyli) ja 24,6 ml jääetikkaa sekoitettiin 4 tunnin ajan 60 °C:ssa (sen jälkeen, kun oli sekoitettu 20 min. ajan, muodostui liuos) ja lopuksi käsi-10 teltiin edelleen, kuten esimerkissä 5 kuvattiin. Saatiin 6,67 g (66,7 %:n saanto) DC-puhdasta 4-amino-2-(4,4-dime-tyyli -2 -okso- imidatsolidin- 1 -yyli) pyrimidiini- 5 -karbok-syylihappo-(N-syklopropyylimetyyli-N-(3-trifluorimetyyli-fenyyli)amidia), jp.: 193 - 194 °C.

15 C21H23F3N602 (44 8,46)

Laskettu: C 56,24 H 5,17 F 12,71 N 18,74 % Löydetty: C 55,9 H5,l F 12,1 N 18,9 %

Esimerkki 12

Esimerkissä 6 kuvatun työskentelytavan mukaisesti 20 5,67 g (12,64 mmol) esimerkin 11 mukaan valmistettua yhdistettä I (R1, R2 = CH3, R3, R5, R6 = H; R4 = syklopro pyylimetyyli) muutettiin hydrokloridiksi. Saatiin 5,84 g (= 95,3 %) puhdasta 4-amino-2-(4,4-dimetyyli-2-okso- imidatsolidin-l-yyli)pyrimidiini- 5 -karboksyylihappo-~ -- 25 (N-syklopropyylimetyyli-N-(3-trifluorimetyyli-fenyyli)- amidi)hydrokloridia, jp.: 265 - 266 °C.

C21H24C1F3N602 (4 84,93)

Laskettu: Cl" 7,31 % Löydetty Cl" 7,5 %.

30 Esimerkissä 5 kuvatun työskentelytavan mukaisesti valmistettiin seuraavan taulukon 3 esimerkeissä 13-27 esitettyjä yhdisteitä I (R1, R2 = CH3, R3 = H, vertaa seu-raava kaava).

Taulukossa 3 esitetyistä yhdisteistä (esimerkit 35 13 - 27) valmistettiin esimerkissä 6 kuvatun työskentely tavan mukaisesti hydroklorideja (esimerkit 28 - 42), jotka ovat yhteenkoottuina seuraavassa taulukossa 4.

37 105029

O

P

I § „ N O CD 00 T}-_ O N-_ I <o äS to m" r^T rf ui r£ cd I n SL ui rj- co V in co *·

| t»· CM

I z O) Oi I 1- C\l L.__£_____£___ B in I x v-1 i - «o '3 u 5? in T- co in o co cp in

N UI OJ ^ O W ID

z <2? ®" £:" ®" ?2 " «-<oV“ S fc E S? 8 8 ?

_ I V-/ N CV T-' CV h- co' CV

oo \ , LL t— T- t- T- ▼- T- τ- Ο 3 -------- | ti 0=\ ^ ^ ; s s n ,η Λί aT /^λ X τι- -v- ri τί- τ*-" in tj- 3 L 2 / λζ -------- <o α> \\ λ HE 2 —7 o m o cv h- tn cv Tf c\j

• H \ / m N 00 CO Oi 0O_ 0_ O

tn ψ-Λ (ΰ Q* op -V-" Oi T-" in T-' w / \ j u i75 >? -V- τί- in tn m V”-------- 0 o O) O ▼- «O "O CO h"» 1 x .Ococficoino'tco

ooCDCDCOTl-O’-CO

^^t-CVCVt-CVt-CV

to ι_ _ cc ι x ω x x x x *α: u-ÖXÖllXÖ h' h- m in

o n <o x x ,P ,P

« x x x cm tv 9 9 CC OOOOOc-c ε co t* in co h» co Oi |hc " ^ | ^ ^ I1" I ^ l1" 105029 38

hiili ! im I

2 __ O CM Tf CM CM CO Tf CO

% & fc ” s' s' p s 8 8 — r- T- (Ο tO Ο Γ) z ao* co c~·’ co σ>" oo co

to coco t\J co co o> I

to’ t-“ 1-" to" cm’ to

I to to CO to N-_ CO

I Tf·* to* to" to’ to" Tf" to" 'O CD 0)0) CM CM CM_ CO_ •n CM" to" N-" ·Μ·" to" 'M·’ N-"

j^^lO toto ΙΟ IO to IO

OJ (Ό O) ID CO IO CM C" rf to o to cn to co T- — z 00 co’ CO h-Γ co" O) CO 00 o----------

M

4-) CMlON··*— T- CM O) CM

(0 N- tO CM CH CO T- CM CO

tO* tM* CM* t-· IO" CO* tO CM* “ LL t-r-T-T- T- T-T-T— cn o co ο ω T- co ^ ip to £ 00 tO CO T- tO CO_ N-_ Tf M X Tf* IO* IO* tO* IO* Tf Tf* to" P---------

r—H

2 J (0 0)0)0 t o> n· co "3 CO CD CO h- to CM 0_ T-_ H ra cm" to* to" N to" to" JQ to to to to to to to to cn o 8 to o ° g _( T- CM CM CD a)T-Tf • Ο ώ to d) ώ ιό d)C7)to

ft o f (Μ T- O) O) 00 g CO

fj ___ CM T- CM T- T- t— CM T-

'oc UL X X X U- XXX

‘a: xxxx x x u. x "~n **o

X X

U O

? -C> l" X~ g ^ 0 5 i y. si V * S' κ X Ά i" i" x ΐ B tt H,

„ O X X X X X

X VqOOcmOnO

e R ο T- c\i co Tf to to r>-

^ £ CM CM CM CM CM CM CM CM

105029

Taulukko 4 Esimerkit 28 - 42

Taulukossa 3 esimerkeissä 13 - 27 esitettyjen yhdisteiden I hydrokloridit 5

Esim. Seuraavan Jp. Laskettu Cl Löydetty Cl no. esimerkin [ °C] mukaisen" 10 yhdisteen hydrokloridi 28 13 269-70 7,66 7,4 29 14 271-73 14,79 14,3 15 30 15 250 6,78 6,6 31 16 288 14,37 14,0 32 17 278-79 7,44 7,4 33 18 251 7,50 7,3 34 19 293 13,98 13,7 20 35 20 284-85 7,22 7,2 36 21 264 7,28 7,1 37 22 285-86 7,08 6,8 38 23 274-75 6,88 6,8 39 24 281-82 6,65 6,7 25 40 25 268-69 7,53 7,5 41 26 282-83 7,05 6,6 42 27 270-72 7,11 7,2 30 Esimerkki 43

Seosta, jossa oli 2,86 g (7 mmol) yhdistettä II (R1 = CH3, R2, R3, R\ R6 - H; R4 = C2H5) , 5 ml jääetikkaa ja 0,70 ml 6,17 molaarista HCl-liuosta eetterissä, sekoitettiin 2 tunnin ajan 70 °C:ssa (7 minuutin kuluttua oli 35 muodostunut liuos) ja sitten haihdutettiin vakuumissa.

105029 40 Jäännös liuotettiin 80 ml:aan CH2Cl2:ta, liuosta ravisteltiin kolme kertaa kulloinkin 15 ml:n kanssa N NaOH:ta ja kaksi kertaa kulloinkin 7 ml:n kanssa vettä, CH2Cl2-liuos kuivattiin Na2S04:llä ja suodattamisen jälkeen tämä liuos 5 haihdutettiin vakuumissa. Jäljelle jäävä jäännös liuotettiin 2 ml:aan etyyliasetaattia. Eetterin lisäyksen jälkeen tapahtui kiteytyminen. Sen jälkeen, kun oli sekoitettu 1 tunnin ajan jäähauteessa, kiteet imusuodatettiin, pestiin eetterillä ja kuivattiin 15 tuhnin ajan 100 °C:ssa 10 vakuumissa (5-8 mbar). Saatiin 1,88 g (= 65,7 %:n saanto) DC-puhdasta 4-amino-2-(4-metyyli-2-okso-imidatsolidin-1-yyli)pyrimidiini-5-karboksyylihappo-(N-etyyli-N-(3-tri-f luorimetyyli-f enyyli) amidia) , jp. : 207 - 208 °C (vrt.

esimerkit 56 ja 57) .

15 Esimerkki 44

Seosta, jossa oli 2,53 g (6 mmol) yhdistettä II (R1, R2, = CH3, R3, R5, R6 = H; R4 = C2H5) , 360 mg (4 mmol) oksaalihappoa ja 5 ml propionihappoa sekoitettiin 2 tunnin ajan 70°C:ssa (10 minuutin kuluttua oli muodostunut liuos) ja 20 tämän jälkeen haihdutettiin vakuumissa. Jäljelle jäänyttä jäännöstä käsitelttiin edelleen, kuten esimerkissä 43 kuvattiin. Saatiin 1,72 g (= 68 %:n saanto) puhdasta 4-ami-no-2-(4,4-dimetyyli-2-okso-imidatsolidin-l-yyli)pyrimidii-ni-5-karboksyylihappo-(N-etyyli-N-(3-trifluorimetyyli-fe-25 nyyli)amidia), jp.: 186 - 187 °C (vrt. esimerkki 1).

Esimerkki 45

Seosta, jossa oli 4,645 g (10 mmol) yhdistettä II (R1, R2, = CH3, R3, R5, R6 = H; R4 = n-C5Hu) , 300 mg vedetöntä oksaalihappoa ja 8,33 ml vedetöntä muurahaishappoa 30 sekoitettiin 3 tunnin ajan 50 °C:ssa, jolloin 10 minuutin kuluttua muodostui liuos. Tämän jälkeen seos haihdutettiin vakuumissa ja jäännös liuotettiin 100 ml:aan etyyliasetaattia. Tähän liuokseen lisättiin 20 ml 2 N NäOH:ta ja sitä ravisteltiin 5 minuutin ajan läpikotaisin. Faasien 35 erottamisen jälkeen orgaanista liuosta ravisteltiin kolme 41 105029 kertaa kulloinkin 2 ml:n kanssa 2 N NaOHrta ja kaksi kertaa kulloinkin 10 ml:n kanssa vettä, kuivattiin MgS04:llä, suodatettiin ja haihdutettiin vakuumissa. Jännöstä liuotettiin eetteriin, minkä jälkeen tapahtui kiteytyminen.

5 Kiteinen aine eristettiin imusuodattamalla ja kuivattiin 17 tunnin ajan 100 °C:ssa vakuumissa. Saatiin 2,88 g (= 62 %:n saanto) puhdasta 4-amino-2-(4,4-dimetyyli-2-okso-imidatsolidin-1-yyli)pyrimidiini-5-karboksyylihap-po-(N-pentyyli-N-(3-trifluorimetyyli-fenyyli)amidia), 10 jp.: 167 - 168 °C C22H27F3N602 (464,51)

Laskettu: C 56,89 H 5,86 F 12,27 N 18,09 % Löydetty: C 56,7 H6,l F 12,0 N 18,1 %

Esimerkki 46

15 Seosta, jossa oli 4,645 g (10 mmol) yhdistettä II

(R1, R2, = CH3, R3, Rs, R6 * H; R4 = n-C5H13) , 300 mg vedetöntä oksaalihappoa ja 9 ml jääetikkaa sekoitettiin 3 tunnin ajan 60°C:ssa, ja sitten työstettiin vastaavalla tavalla, kuin edellä olevassa esimerkissä 45 kuvattiin. Saatiin 20 3,13 g (= 67,5 %:n saanto) samaa yhdistettä I, kuin esi merkissä 45 kuvattiin, jp.: 167 - 168 °C.

Esimerkki 47

Esimerkissä 6 kuvatun työskentelytavan mukaisesti 5,11 g (11 mmol) esimerkkien 45 ja 46 mukaan valmistettua : 25 yhdistettä I (R1, R2 = CH3, R3, Rs, R6 = H; R4 = n-CjH^) muutettiin hydrokloridiksi. Saatiin 5,35 g (=97,1 %:n saanto) puhdasta 4-amino-2-(4,4-dimetyyli-2-okso-imidat-solidin-1-yyli)pyrimidiini-5-karboksyylihappo-(N-pentyy li-N- (3-trifluorimetyyli-fenyyli)amidi)hydrokloridia, 30 jp.: 246 - 247 °C.

*2 105029 C22H28C1F3N602 (500,97)

Laskettu: C 52,75 H 5,63 Cl' 7,08 F 11,38 N 16,78 % Löydetty: C 52,8 H 5,4 Cl' 6,6 F 10,9 N 16,8 %

Esimerkki 48

5 Seosta, jossa oli 3,944 g (10 mmol) yhdistettä II

(R1 = CH3, R2, R\ R5, R6 = H; R4 = CH3) , 300 mg vedetöntä oksaalihappoa ja 8,7 ml jääetikkaa sekoitettiin 3 tunnin ajan 60 °C:ssa, jolloin noin 30 minuutin kuluttua muodostui liuos. Tämä haihdutettiin vakuumissa ja jäännös liuo-10 tettiin 100 ml:aan CH2Cl2:ta. Muodostunutta seosta sekoitettiin perusteellisesti 20 ml:n kanssa 2 N NaOH:ta. Faasien erottamisen jälkeen orgaanista faasia ravisteltiin peräkkäin kaksi kertaa kulloinkin 6 ml:n kanssa N NaOH:ta ja kaksi kertaa kulloinkin 10 ml:n kanssa vettä, kuivat-15 tiin MgS04:llä, suodatettiin ja haihdutettiin vakuumissa. Jäljelle jäänyt jäännös liuotettiin 15 ml:aan eetteriä, minkä jälkeen tapahtui heti kiteytyminen. Kiteinen aine eristettiin imusuodattamalla ja kuivattiin 15 tunnin ajan 100 °C:ssa vakuumissa (6 mbar). Saatiin 2,80 g (= 71 %:n 20 saanto) puhdasta 4-amino-2-(4-metyyli-2-okso-imidatsoli-din-l-yyli)pyrimidiini-5-karboksyylihappo-(N-metyyli-N-(3-trifluorimetyyli-fenyyli)amidia), jp.: 237 - 238°C. C17H17F3N602 (3 94,3 7)

Laskettu: C 51,78 H 4,35 F 14,45 N 21,31 % 25 Löydetty: C 51,5 H4,4 F 14,5 N 21,0%.

Esimerkki 49

Esimerkissä 48 kuvatun työskentelytavan mukaisesti käyttäen samansuuruista seosta syklisoitiin sama yhdiste II 360 mg:n oksaalihappoa läsnä ollessa (esimerkin 48 30 300 mg:n sijasta). Tällöin saatiin 2,77 g (= 70,2 %:n saanto) yhdistettä I (R1 = CH3, R2, R3, R5, R6 = H; R4 = CH3) esimerkin 48 mukaisesti. Jp.: 237 - 238 °C.

Esimerkki 50

Esimerkin 6 mukaisesti muutettiin 4,34 g (11 mmol) 35 esimerkkien 48 ja 49 mukaan valmistettua yhdistettä I (R1 = 105029 43 CH3, R2, R3, R5, R6 = H; R4 = CH3) hydrokloridiksi. Saatiin 4,71 g (= 99,4 %:n saanto) puhdasta 4-amino-2-(4-metyyli-2-okso-imidatsolidin-l-yyli)pyrimidiini-5-karboksyylihap-po-(N-metyyli-(3-trifluorimetyyli-fenyyli)amidi)hydroklo-5 ridia, jp.: 190 - 192 °C.

C17H18C1F3N602 (43 0,84)

Laskettu: Cl' 8,23 % Löydetty Cl' 8,1 %.

Esimerkki 51 10 Esimerkissä 5 kuvatun työskentelytavan mukaisesti 0,54 g (1,2 mmol) yhdistettä II (R1 = CH3, R2, R3, R5, R6 = H; R4 = syklopentyyli) ja 1,32 ml jääetikkaa sekoitettiin 4 tunnin ajan 60 °C:ssa ja lopuksi käsiteltiin edelleen. Saatiin 0,32 g (59,3 %:n saanto) DC-puhdasta 4-amino-2-(4-15 metyyli-2-okso-imidatsolidin-l-yyli)pyrimidiini-5-karbok- syylihappo-(N-syklopentyyli-N-(3-trifluorimetyyli-fenyyli) amidia), jp.: 219 - 220 °C (etyyliasetaatista < < eetteristä) .

^-21^23^3^6^2 (448,46) 20 Laskettu: C 56,24 H 5,17 F 12,71 N 18,74 % Löydetty: C 56,0 H5,l F 12,6 N 18,5 %.

Esimerkki 52

Esimerkin 6 mukaisesti muutettiin 126 mg (0,28 mmol) esimerkin 51 mukaan valmistettua yhdistettä I (R1 = 25 CH3, R2, R3, R5, R6 = H; R4 = syklopentyyli) hydrokloridiksi. Saatiin 135 mg (= 99,4 %) puhdasta 4-amino-2-(4-metyyli-2-okso-imidatsolidin-1-yyli)pyrimidiini- 5-karboksyylihappo-(N-syklopentyyli-N-(3-trifluorimetyyli-fenyyli)amidi)hyd-rokloridia, jp.: 270 - 271 °C.

3 0 C21H24C1F3N602 (4 84,93)

Laskettu: Cl' 7,31 % Löydetty Cl' 7,2 %.

Esimerkki 53

Esimerkin 51 mukaisesti sekoitettiin 1,80 g (4,26 35 mmol) 1-syano-l-[N-butyyli-N-(3-trifluorimetyyli-fenyyli)- 105029 44 karbamoyyli]-2-[(imino-(2-okso-imidatsolidin-l-yyli)metyyli) amino] eteeniä (yhdiste II, R1, R2, R3, R5, R6 = H; R4 = n-C4H9) ja 4,7 ml jääetikkaa 4 tunnin ajan 60 °C:ssa ja lopuksi käsiteltiin edelleen. Saatiin 0,85 g (= 47,3 %:n 5 saanto) puhdasta 4-amino-2-(2-okso-imidatsolidin-l-yyli)-pyrimidiini-5-karboksyylihappo-(N-butyyli-N-(3-trifluori-metyyli-fenyyli)amidia), jp.: 234 - 235 °C.

C19H21F3N602 (422,43)

Laskettu: C 54,02 H 5,01 F 13,49 N 19,90 % 10 Löydetty: C 54,1 H 4,9 F 12,8 N 20,0 %

Esimerkki 54

Seosta, jossa oli 1,32 g (3,12 mmol) yhdistettä II (R1, R2, R3, R5, R6 = H; R4 = n-C4H9) , 94 mg (1,04 mmol) vedetöntä oksaalihappoa ja 2,81 ml jääetikkaa, sekoitet-15 tiin 3 tunnin ajan 60 °C:ssa ja tämän jälkeen käsiteltiin edelleen, kuten esimerkissä 5 kuvattiin. Saatu jäännös (1,08 g) kiteytettiin eetteristä. Saatiin 0,91 g (= 69 %:n saanto) puhdasta yhdistettä I, jossa R1, R2, R3, R5 ja R6 merkitsevät vetyä ja R4 on n-C4H9 (vrt. esimerkki 53), 20 jp.: 234 - 235 °C.

Esimerkki 55

Esimerkin 6 mukaisesti muutettiin 1,65 g (3,9 mmol) esimerkkien 53 ja 54 mukaan saatua yhdistettä I hydroklo-ridiksi. Tällöin saatiin 1,74 g (97,2 %) 4-amino-2-(2-ok-25 so-imidatsolidin-1-yyli)pyrimidiini- 5-karboksyylihappo-(N- butyyli-N-(3-trifluorimetyyli-fenyyli)amidi)hydrokloridia, jp.: 212 - 213 °C.

C19H22C1F3N602 (458,89)

Laskettu: Cl' 7,73 % 30 Löydetty Cl' 7,7 %.

Esimerkki 56

Seosta, jossa oli 4,084 g (10 mmol) yhdistettä II (R1 iCH3; R2, R3, R5, R6 = H; R4 = C2H5) , 360 mg (4 mmol) vedetöntä oksaalihappoa ja 9 ml jääetikkaa sekoitettiin 35 3 tunnin ajan 60 °C:ssa ja tämän jälkeen käsiteltiin edel- « « 105029 leen, kuten esimerkissä 5 kuvattiin. Saatiin (kiteyttämällä eetteristä) kuivaamisen jälkeen 2,83 g (69,3 %:n saanto) puhdasta 4-amino-2-(4-metyyli-2-okso-imidatsolidin-l-yyli)pyrimidiini-5-karboksyylihappo-(N-etyyli-N-(3-tri-5 fluorimetyyli-fenyyli)amidia), jp.: 208 - 209 °C.

C18H19F3N602 (408,40)

Laskettu: C 52,94 H 4,69 F 13,96 N 20,58 % Löydetty: C 52,5 H4,5 F 12,4 N 20,8 %.

Esimerkki 57 10 Vastaavaa seosmäärää (10 mmol) käyttäen sekoitet tiin samaa yhdistettä II kuin esimerkissä 56 ja 540 mg vedetöntä oksaalihappoa (6 mmol) ja 8,5 ml jääetikkaa 3 tunnin ajan 60 °C:ssa. Sen jälkeen, kun oli käsitelty edelleen vastaavasti, kuten esimerkissä 5 kuvattiin, saa-15 tiin 2,86 g (70 %:n saanto) yhdistettä I (R1 = CH3, R2, R3, R5, R6 = H; R4 = C2H5) , jp.: 208 - 209 °C.

Esimerkki 58

Esimerkin 6 mukaisesti saatiin lähtien 4,49 g:sta (11 mmol) esimerkkien 56 ja 57 mukaan valmistettua yhdis-20 tettä I 4,57 g (93,4 %:n saanto) 4-amino-2-(4-metyyli-2-okso-imidatsolidin-l-yyli)pyrimidiini-5-karboksyylihappo-(N-etyyli-N-(3-trifluorimetyyli-fenyyli)amidi)hydroklori-dia, jp.: 242 - 243 °C.

C18H20ClF3N6O2 (444,86) 25 Laskettu: Cl" 7,97 % Löydetty Cl" 8,2 %.

Esimerkki 59 a) Seosta, jossa oli 6,34 g (15 mmol) yhdistettä II (R\ R2 = CH3; R\ R5, R6 = H; R4 = C2H5) , 450 mg vedetöntä 30 oksaalihappoa ja 13 ml jääetikkaa sekoitettiin 3 tunnin ajan 65 °C:ssa ja lopuksi käsiteltiin edelleen, kuten esimerkissä 5 kuvattiin. Kiteyttämällä eetteristä saatiin 4,52' g (= 71,3 %: n saanto) yhdistettä I (R1, R2 = CH3; R3, R5, R6 = H; R4 - C2H5) , jp.: 186 - 187 °C.

46 105029 b) Vastaavalla tavalla sekoitettiin seosta, jossa oli 5,07 g (12 mmol) samaa yhdistettä II, 360 mg vedetöntä oksaalihappoa ja 10,4 ml vedetöntä muurahaishappoa 3 tunnin ajan 65 °C:ssa ja lopuksi käsiteltiin edelleen. Saa-5 tiin 3,04 g (= 60 %:n saanto) yhdistettä I (R1, R2 = CH3; R3, R5, R6 = H; R4 = C2H5) , jp.: 186 - 187 °C.

Esimerkki 60

Suspensioon, jossa oli 881 mg (2 mmol) 4-amino-2-(4,4-dimetyyli-2-okso-imidatsoiidin-1-yyli)pyrimidiini-10 5-karboksyylihappo- (N-etyyli-N-(2-fluori-5-trifluorime-tyylifenyyli)amidia) (esimerkin 17 mukaista yhdistettä I) 13,3 ml:ssa etyyliasetaattia, lisättiin huoneenlämpötilassa 2,05 ml molaarista HN03-liuosta etyyliasetaatissa. Tällöin muodostui lyhyen ajan sisällä liuos, josta kiteinen 15 aine erottui. Tämä imusuodatettiin sen jälkeen, kun oli sekoitettu 1 tunnin ajan (jäähauteessa), pestiin etyyliasetaatilla ja eetterillä ja kuivattiin 15 tunnin ajan 80 °C:ssa vakuumissa (6-8 mbar). Saatiin 1,02 g 4-amino-' 2-(4,4-di-metyyli-2-okso-imidatsolidin-l-yyli)pyrimidiini- 20 5-karboksyylihappo-(N-etyyli-N-(2-fluori-5-trifluorimetyy- li-fenyyli)amidi-nitraattia, jp.: 235 - 236 °C. Tämä nitraatti liukenee veteen konsentraation ollessa 1,7 paino-%, s.o. 1 osa liukenee 57,5 osaan vettä.

C19H21F4N705 (503,43) '·· 25 Laskettu: C 45,33 H 4,20 F 15,10 N 19,48 % Löydetty: C 44,8 H4,5 F 14,6 N 19,1 %

Esimerkki 61

Liuokseen, jossa oli 933 mg (2 mmol) 4-amino-2-(4,4-dimetyyli-2-okso-imidatsolidin-1-yyli)pyrimidiini-5-30 karboksyylihappo- (N-syklopropyylimetyyli-N-(2-fluori-5- trifluorimetyyli-fenyyli)amidia) (esimerkin 26 mukaista yhdistettä I) 6 ml:ssa asetonia, lisättiin huoneenlämpötilassa 0,38 ml 33-%:ista HBr-liuosta jääetikassa. Tämän jälkeen kiteinen aine saostui. Sen jälkeen, kun oli sekoi-35 tettu 2 tuntia jäähauteessa, kiinteä aine imusuodatettiin, • 47 105G29 pestiin eetterillä ja kuivattiin 16 tunnin ajan vakuumissa (6-7 mbar). Saatiin 1,06 g käytetyn yhdisteen I (esimerkki 26) hydrobromidia (= 96,8 %:n saanto), jp.: 296. Tämä hydrobromidi liukenee veteen konsentraation ollessa 5 1,5 paino-%, s.o. 1 osa liukenee 65,8 osaan vettä.

C21H23BrF4N602 (547,37)

Laskettu: C 46,08 H 4,24 Br 14,60 N 15,35 % Löydetty C 45,9 H 3,9 Br 14,7 N 15,5 %.

Esimerkki 62 10 Seosta, jossa oli 2,66 g (7 mmol) yhdistettä II (R1, R2, R3, R5, R6 = H; R4 = CH3) , 0,72 g (8 mmol) vedetöntä oksaalihappoa ja 4,5 ml jääetikkaa sekoitettiin 1 tunti 85 °C:ssa ja lopuksi käsiteltiin edelleen, kuten esimerkissä 5 kuvattiin. Saatiin 1,58 g (= 59,4 %:n saanto) 15 DC-puhdasta 4-amino-2-(2-okso-imidatsolidin-l-yyli)pyrimi-diini-5-karboksyylihappo-(N-metyyli-N-(3-trifluorimetyyli-fenyyli)amidia), jp.: 249 - 250 °C.

C16H15F3N602 (380,35)

Laskettu: C 50,53 H 3,98 F 14,99 N 22,10 % 20 Löydetty: C 50,3 H3,9 F 14,7 N 22,0 %.

Esimerkki 63

Seosta, jossa oli 2,17 g (5,7 mmol) samaa yhdistettä II kuin esimerkissä 62 ja 600 mg polyfosforihappoa (firma Riedel-de-Haen) ja 5,7 ml jääetikkaa, sekoitettiin 25 2 tuntia 70 °C:ssa ja lopuksi käsiteltiin edelleen, ku ten esimerkissä 5 kuvattiin. Tämän jälkeen saatiin 0,89 g (= 41 %:n saanto) esimerkin 62 mukaan valmistettua yhdistettä I (R\ R2, R3, R5, R6 = H; R4 = CH3) , jp.: 249 - 250 °C.

30 Esimerkki 64 2,853 g (7,5 mmol) esimerkkien 62 ja 63 mukaan valmistettua yhdistettä I muutettiin esimerkin 6 mukaisesti hydrokloridiksi. Saatiin 3,12 g 4-amino-2-(2-okso-imidat1 soi idin-1-yyli)pyrimidi ini- 5 -karboksyylihappo-(N-metyy- 48 105029 li-N-(3-trifluorimetyyli-fenyyli)amidi)hydrokloridia, jp.: 201 - 202 °C.

C16H16C1F3N602 (416,81)

Laskettu: Cl" 8,51 % 5 Löydetty: Cl" 8,1 %.

Esimerkki 65

Seosta, jossa oli 2,535 g (6 mmol) yhdistettä II (R1, R2 = CH3; R3, R5, R6 = H; R4 = C2H5) , 841 mg (4 mmol) sitruunahappomonohydraattia ja 4,25 ml jääetikkaa, sekoi-10 tettiin 2 tuntia 70 °C:ssa ja lopuksi käsiteltiin edelleen, kuten esimerkissä 5. Saatiin 1,86 g (= 73,4 %:n saanto) puhdasta yhdistettä I (R1, R2 = CH3; R3, R5, R6 = H; R4 = C2Hs) , jp. : 186 - 187 °C.

Esimerkki 66

15 Seoksella, jossa oli 2,775 g (6 mmol) yhdistettä II

(R1, R2 = CH3; R3, Rs, R6 = H; R4 = syklopentyyli) , 645 mg (5 mmol) dikloorietikkahappoa ja 4,25 ml jääetikkaa, meneteltiin samoin kuin esimerkissä 65 kuvattiin. Saatiin 1,45 g (= 52,3 %:n saanto) 4-amino-2-(4,4-dimetyyli-2- 20 okso-imidatsolidin-1-yyli)pyrimidiini-5-karboksyylihap- po-(N-syklopentyyli-N-(trifluorimetyyli-fenyyli)amidia), jp.: 135 - 139 °C.

Esimerkki 67

Seoksella, jossa oli 2,535 g (6 mmol) yhdistettä II 25 (R1, R2 = CH3; R3, R5, R6 = H; R4 = C2H5) , 820 mg (5 mmol) trikloorietikkahappoa ja 4,25 ml jääetikkaa, meneteltiin samoin kuin esimerkissä 65 kuvattiin. Saatiin 1,97 g (77,7 %:n saanto) DC-puhdasta 4-amino-2-(4,4-dimetyyli-2-okso-imidatsoiidin-1-yyli)pyrimidiini-5-karboksyylihappo-30 (N-etyyli-N-(3-trifluorimetyyli-fenyyli)amidia.

Esimerkki 68

Seoksella, jossa oli 3,04 g (7 mmol) yhdistettä II (R1, R2 = CH3; R3, R5, R6 = H; R4 = CH2CH=CH2) , 665 mg (5,83 mmol) trikloorietikkahappoa ja 5 ml jääetikkaa, menetel-35 tiin samoin kuin esimerkissä 65 kuvattiin. Saatiin 2,00 g • · 105029 49 (65,8 %:n saanto) 4-amino-2-(4,4-dimetyyli-2-okso-imidat-solidin-l-yyli)pyrimidiini-5-karboksyylihappo-(N-allyyli-N-(3-trifluorimetyyli-fenyyli)amidia), jp.: 187 - 188 °C.

Esimerkki 69 5 Seosta, jossa oli 3,04 g (7 mmol) samaa yhdistettä II, kuin esimerkissä 68 ja 515 mg (4,44 mmol) fumaarihap-poa ja 6 ml jääetikkaa, sekoitettiin 1 tunti 85 °C:ssa ja lopuksi työstettiin esimerkissä 5 kuvatulla tavalla. Saatiin 2,08 g (68,4 %:n saanto) samaa yhdistettä I, kuin 10 esimerkissä 68, jp.: 188 - 189 °C.

Esimerkki 70

Seosta, jossa oli 2,84 g (7 mmol) yhdistettä II

(R1 = CH = CH2; R2, R3, R5, R6 = H; R4 = CH3) , 486 mg (5,5 mmol) syanetikkahappoa ja 5 ml jääetikkaa, sekoitet-15 tiin 1,5 tuntia 75 °C:ssa ja lopuksi työstettiin esimerkissä 5 kuvatulla tavalla. Eetteristä kiteyttämisen jälkeen saatiin 1,75 g (= 61,6 %:n saanto) 4-amino-2-(4-vi-nyyli-2-okso-imidatsolidin-l-yyli)pyrimidiini-5-karboksyy-lihappo-(N-metyyli-N-(3-trifluorimetyyli-fenyyli)amidia), 20 jp.: 203 -204 °C.

C18H17F3N602 (4 06,38)

Laskettu: C 53,20 H 4,22 F 14,03 N 20,68 % Löydetty: C 53,3 H4,3 F 14,0 N 20,4 %.

Esimerkki 71 25 Seosta, jossa oli 2,84 g (7 mmol) samaa yhdistettä II, kuin esimerkissä 70, 5 ml jääetikkaa ja 0,90 ml 6,17 molaarista HCl-liuosta eetterissä, sekoitettiin 2 tuntia 70 °C:ssa ja lopuksi työstettiin esimerkissä 5 kuvatulla tavalla. Saatiin 2,0 g (70,4 %:n saanto) samaa yhdistettä 30 I, kuin esimerkissä 70, jp.: 203 - 204 °C.

Esimerkki 72 4,07 g (10 mmol) esimerkkien 70 ja 71 mukaan valmistettua yhdistettä I muutettiin esimerkin 6 mukaisesti hydrokloridiksi. Saatiin 4,10 g (92,6 %:n saanto) 4-amino-35 2-(4-vinyyli - 2-okso-imidatsolidin-1-yyli)pyrimidiini-5 - « 105029 50 karboksyylihappo-(N-metyyli-N-(3-trifluorimetyyli-fenyy-li)amidi)hydrokloridia, jp.: 210 - 211 °C.

C1BH18C1F3N602 (442,85)

Laskettu: Cl" 8,01 % 5 Löydetty Cl" 7,7 %.

Esimerkki 73

Seosta, jossa oli 2,84 g (7 mmol) samaa yhdistettä II kuin esimerkissä 70, 1,05 g p-tolueenisulfonihappo-mo-nohydraattia ja 5 ml jääetikkaa, sekoitettiin 2 tuntia 10 70 °C:ssa ja tämän jälkeen käsiteltiin edelleen, kuten esimerkissä 5. Saatiin 2,03 g (= 71,5 %:n saanto) puhdasta 4-amino-2-(4-vinyyli-2-okso-imidatsolidin-l-yyli)pyrimi-diini-5-karboksyylihappo-(N-metyyli-N-(3-trifluorimetyyli-fenyyli)amidia), jp.: 203 - 204 °C.

15 Esimerkki 74

Seosta, jossa oli 3,06 g (7 mmol) yhdistettä II (R1 = CH3; R2, R\ R5, R6 = H; R4 = CH2CH (CH3) 2) , 1,0 ml 33-%:ista HBr-liuosta jääetikassa (~ 5,6 mmol) ja 5 ml jääetikkaa, sekoitettiin 1,5 tuntia 75 °C:ssa ja sitten 20 käsiteltiin edelleen, kuten esimerkissä 5. Saatiin 1,37 g (44,8 %:n saanto) 4-amino-2-(4-metyyli-2-okso-imidatsoli-din-l-yyli)-pyrimidiini-5-karboksyylihappo-(N-isobutyyli-N-(3-trifluorimetyyli-fenyyli)amidia) (yhdistettä I, R4 = CH2CH(CH3)2) , jp. : 202 - 203 °C.

25 C20H23F3N6O2 (436,45)

Laskettu: C 55,04 H 5,31 F 13,06 N 19,26 % Löydetty: C 55,1 H5,2 F 12,5 N 18,9 %.

Esimerkki 75

Samalla tavalla ja samalla yhdisteellä II, kuin 30 esimerkissä 74, suoritettiin syklisointireaktio saman yhdisteen I muodostuessa (kuten esimerkissä 74) käyt täen seosta, joka koostui 3,06 g:sta (7 mmol) mainittua yhdistettä II, 1,2 ml:sta 33-%:ista HBr/CH3COOH-liuosta (~ 6,7 mmol) ja 5,0 ml:sta muurahaishappoa. Saatiin 0,98 g 105029 (32 %:n saanto) yhdistettä I (R1 = CH3; R2, R3, R5, R6 = H; R4 - CH2CH(CH3)2) , jp.: 202 - 203 °C Esimerkki 76

Seosta, jossa oli 2,62 g (6 mmol) samaa yhdistettä 5 II, kuin esimerkissä 74 ja 6,6 ml propionihappoa, sekoitettiin 2 tuntia 70 °C:ssa ja tämän jälkeen käsiteltiin edelleen esimerkissä 5 kuvatulla tavalla. Saatiin 1,65 g (63 %:n saanto) samaa yhdistettä I (R1 = CH3; R2, R3, R5, R6 = H; R4 - CH2CH(CH3)2) kuin esimerkissä 74, jp. : 202 -10 203 °C.

Esimerkki 77

Seosta, jossa oli 2,78 g (6 mmol) yhdistettä II (R1 = CH=CH2; R2, R3, R5, R6 = H; R4 = n-C5H13) , 5 ml pro pionihappoa ja 270 mg oksaalihappoa, sekoitettiin 3 tuntia 15 60 °C:ssa ja sitten käsiteltiin edelleen, kuten esimerkis sä 5. Saatiin 1,86 g (67 %:n saanto) puhdasta 4-amino-2-(4-vinyyli-2-okso-imidatsolidin-1-yyli)pyrimidiini-5-kar-boksyylihappo-(N-pentyyli-N-(3-trifluorimetyyli-fenyyli)-amidia) (yhdistettä I, R1 = CH=CH2; R2, R3, Rs, R6 = H; R4 = 20 n-C5Hn) , jp.: 133 - 134 °C.

^-22^25^3^6^2 (462,4 9)

Laskettu: C 57,13 H 5,45 F 12,32 N 18,17 % Löydetty: C 56,6 H 5,1 F 11,6 N 18,1 %.

Esimerkki 78 25 Seosta, jossa oli 3,04 g (7 mmol) yhdistettä II (R1, R2 = CH3; R3, Rs, R6 = H; R4 = CH2CH=CH2) , 0,45 ml (~ 5,8 mmol) trifluorietikkahappoa ja 5,0 ml jääetikkaa, sekoitettiin 2 tuntia 70 °C:ssa ja sitten käsiteltiin edelleen, kuten esimerkissä 5 kuvattiin. Saatiin 2,00 g (65,8 %:n 30 saanto) yhdistettä I (R1, R2 = CH3; R3, R5, R6 = H; R4 = CH2CH=CH2) , jp.: 189 °C.

Esimerkki 79

Seosta, jossa oli 2,63 g (6 mmol) yhdistettä II (R1 = CH=CH2; R2, R3, R6 = H; R4 = C2H5; R5 = F), 304 mg 35 (4 mmol) glykolihappoa ja 5,2 ml jääetikkaa, sekoitettiin 105029 52 3 tuntia 60 °C:ssa ja tämän jälkeen käsiteltiin edelleen, kuten esimerkissä 5. Saatiin 1,69 g (64,3 %:n saanto) puhdasta 4-amino-2-(4-vinyyli-2-okso-imidatsolidin-l-yyli)py-rimidiini-5-karboksyylihappo-(N-etyyli-N-(2-fluori-5-tri-5 fluorimetyyli-fenyyli)amidia) (yhdistettä I, R1 = CH=CH2; R2, R3, R6 = H; R4 = C2H5; R5 = F) , jp.: 240 - 241 °C. C19H18F4N602 (438,40)

Laskettu: C 52,05 H 4,14 F 17,34 N 19,17 % Löydetty: C 51,9 H 3,9 F 17,0 N 19,1 %.

10 Esimerkki 80

Seosta, jossa oli 3,14 g (7 mmol) yhdistettä II (R1 = CH=CH2; R2, R3, R6 = H; R4 = CH2CH (CH3) 2) , 5 ml jää-etikkaa ja 1,05 g (5,5 mmol) p-tolueenisulfonihappomono-hydraattia, sekoitettiin 2,5 tuntia 67 - 69 °C:ssa ja sit-15 ten käsiteltiin edelleen, kuten esimerkissä 5. Saatiin 1,67 g (53,2 %:n saanto) DC-puhdasta 4-amino-2-(4-vinyyli-2-okso-imidatsolidin-l-yyli)pyrimidiini-5-karboksyylihap-po-(N-isobutyyli-N- (3-trifluorimetyyli-fenyyli)amidia), jp.: 185 -186 °C.

20 C21H23F3N602 (448,46)

Laskettu: C 56,24 H 5,17 F 12,71 N 18,74 % Löydetty: C 55,7 H 5,2 F 12,1 N 18,7 %.

Esimerkki 81

Seosta, jossa oli 2,41 g (5 mmol) yhdistettä II

25 (R1 = CH3; R2, R3, R5 = H; R4 = CH3CHCH2CH (CH3) 2; R6 = F), 270 mg (3 mmol) oksaalihappoa ja 4,2 ml propionihappoa, sekoitettiin 2 tuntia 70 °C:ssa ja tämän jälkeen käsi teltiin edelleen, kuten esimerkissä 5. Saatiin 1,50 g (62,3 %:n saanto) yhdistettä I (R1 = CH3; R2, R3, R5 = H; 30 R4 = CH3CHCH2CH(CH3)2; R6 = F) , jp.: 135 - 137 °C.

C22H26F4N602 (482,50)

Laskettu: C 54,77 H 5,43 F 15,75 N 17,42 % Löydetty: C 54,1 H 5,0 F 15,2 N 17,0 %.

53 105029

Esimerkki 82

Suspensioon, jossa oli 16,8 g (107,6 mmol) 1-amidi-no-4,4-dimetyyli-2-okso-imidatsolidiiniä (yhdistettä III: R1, R2 =CH3; R3 = H) 75 ml: ssa vedetöntä asetonitriiliä, 5 tiputettiin sekoittaen 20 °C:ssa liuos, jossa oli 40 g (85 -90 %:ista) 2-syano-3-etoksi-akryylihappo-[N-allyyli-N-(3-trifluorimetyyli-fenyyli)amidia] (yhdistettä IV: R4 = CH2CH=CH2, R5, R6 = H; R7 * C2H5) 82 ml:ssa vedetöntä ase tonitriiliä ja sekoitettiin 2 tuntia 20 °C:ssa ja 3 tuntia 10 20 - 23 °C:ssa. Tällöin kiinteä aine saostui. Seos lai mennettiin 150 ml :11a eetteriä, tämän annettiin seistä 15 tuntia 4-6 °C:ssa, tämän jälkeen kiinteä aine imusuo-datettiin ja pestiin edelleen eetterillä. Kiinteä aine suspendoitiin 200 ml:aan vettä, sekoitettiin 30 min. ajan 15 huoneenlämpötilassa, imusuodatettiin, pestiin edelleen vedellä ja kuivattiin 48 tunnin ajan huoneenlämpötilassa (20 - 24 °C:ssa) P4O10:llä vakuumissa (160 - 180 mbar) .

Saatiin 27,8 g (saanto = 59,5 %) 1-syano-l-[N-allyyli-N-(3-trifluorimetyyli-fenyyli)karbamoyyli]-2-[(imino-(4,4-20 dimetyyli-2-okso-imidatsolidin-l-yyli)metyyli)amino]eteeniä (yhdistettä II: R1, R2 =CH3; R\ R5, R6 = H; R4 = CH2CH=CH2) , jp.: 184 - 185 °C.

C20H21F3N6O2 (434,44)

Laskettu: C 55,29 H 4,87 F 13,12 N 19,35 % :··· 25 Löydetty: C 54,7 H 4,6 F 12,5 N 18,9 %

Esimerkki 83

Suspensioon, jossa oli 5,69 g (40 mmol) 1-amidino-4-metyyli-2-okso-imidatsolidiiniä (yhdistettä III: R1=CH3; R2, R3 = H) 30 ml: ssa abs.. asenitriiliä, tiputettiin se-30 koittaen 20 °C:ssa liuos, jossa oli 11,93 g (40 mmol) 2-syano-3-etoksi-akryylihappo-[N-metyyli-N-(3-trifluorime-tyyli-fenyyli) amidia] (yhdistettä IV: R4 = CH3; R5, R6 = H; R7 = C2H5) 30 ml:ssa abs. asetonitriiliä ja sekoitettiin 3 tuntia 20 °C:ssa. Sitten lisättiin 100 ml eetteriä, se-35 koitettiin vielä 1 tunnin ajan jäällä jäähdyttäen ja lo- 105029 puksi saostunut kiinteä aine imusuodatettiin. Tämä pestiin pienellä määrällä kylmää asetonitriiliä ja eetterillä, sitten se suspendoitiin 200 ml:aan vettä, sekoitettiin 30 min. ajan huoneenlämpötilassa ja kiinteä aine imusuo-5 datettiin uudelleen ja kuivattiin 50 tunnin ajan P4O10:llä vakuumissa (6-8 mbar). Saatiin 12,2 g (saanto = 77,4 %) DC-puhdasta 1-syano-l-[N-metyyli-N-(3-trifluorimetyyli-fe-nyyli)karbamoyyli]-2-[(imino-(4-metyyli-2-okso-imidatsoli-din-l-yyli)-metyyli)amino]eteeniä (yhdistettä II: R1, R4 = 10 CH3; R2, R3, R5, R6 = H) , jp.: 195 - 196 °C.

C17H17F3N602 (3 94,37)

Laskettu: C 51,78 H 4,35 F 14,45 N 21,31 % Löydetty: C 52,0 H4,l F 14,1 N 21,4 %.

Esimerkki 84 15 Liuos, jossa oli 20 g (noin 86 %:ista = ~ 5,5 mmol) yhdistettä IV (R4, R7 = C2H5; R6 = H) 4 2 ml: ssa abs. asetonitriiliä, tiputettiin esimerkeissä 82 ja 83 kuvatulla tavalla suspensioon, jossa oli 7,82 g (55 mmol) yhdistettä III (R1 = CH3; R2, R3 = H) 38 ml: ssa absoluuttista aseto-20 nitriiliä, sekoitettiin ja lopuksi käsiteltiin edelleen. Saatiin 11,3 g (saanto = 50,4 %) DC-puhdasta 1-syano-l-[N-etyyli-N-(3-trifluorimetyyli-fenyyli)karbamoyyli]-2-[(imino-(4-metyyli-2-okso-imidatsolidin-l-yyli)metyyli)-amino] eteeniä (yhdistettä II: R1 =CH3; R2, R3, R5, R6 = H; R4 25 C2H5) , jp.: 180 - 181 °C.

C18H19F3N602 (408,40)

Laskettu: C 52,94 H 4,69 F 13,96 N 20,58 % Löydetty: C 52,5 H4,7 F 12,9 N 21,1 %

Esimerkki 85 30 Suspensioon, jossa oli 11,0 g (70 mmol) 1-amidino- 4,4-dimetyyli-2-okso-imidatsolidiiniä 45 ml:ssa dimetok-sietaania (DME), tiputettiin sekoittaen 18 - 20 °C:ssa liuos, jossa oli 27,5 g (80 - 85 %:ista) 2-syano-3-etoksi-akryylihappo-[N-syklopropyylimetyyli-N-(3 -trifluorimetyy 35 li-fenyyli) amidia] (yhdistettä IV: R4 = CH2 -<, R5, R6 = H; « 105029 55 R7 = C2H5) 48 mltssa abs. DME:tä ja sekoitettiin 3,5 tuntia 20 - 23 °C:ssa. Tämän jälkeen reaktioseos haihdutettiin vakuumissa korkeintaan 25 °C:n haudelämpötilassa. Öljymäi-nen jäännös liuotettiin 200 ml:aan eetteriä ja ravistel-5 tiin 50 ml:n kanssa 2 N HClrää. Tällöin kiteytymä saostui (muodostuneen yhdisteen II hydrokloridi (R1, R2 = CH3; R3, R5, R6 = H; R4 = CH2 -<i) ) . Tämä imusuodatettiin ja pestiin eetterillä ja vedellä. Tämän jälkeen tämä kiteinen aine suspendoitiin 150 ml:aan vettä ja 10 - 18 °C:ssa tiputet-10 tiin 2 N NaOH:ta, kunnes pH oli 8,7 - 8,9. Sitten sekoitettiin 1 tunti jäällä jäähdyttäen, kiinteä aine imusuodatettiin ja pestiin vedellä ja kuivattiin 50 tunnin ajan 22 - 24 °C:ssa P205:llä vakuumissa (6-8 mbar) . Saatiin 11,2 g (saanto = 38,3 %) 1-syano-l-[N-syklopropyylimetyy-15 li-N-(3-trifluorimetyyli-fenyyli)-karbamoyyli]-2-[(imino-(4,4-dimetyyli-2-okso-imidatsolidin-1-yyli)metyyli)amino]-eteeniä (yhdistettä II: R1, R2 =CH3; R3, R5, R6 = H; R4 = CH2 -<), jp.: 180 - 181 °C (hajoten).

C2iH23F3N602 (448,46) 20 Laskettu: C 56,24 H 5,17 F 12,71 N 18,74 % Löydetty: C 56,4 H 5,1 F 12,4 N 19,1 %.

Esimerkki 86

Suspensioon, jossa oli 449 mg (1 mmol) esimerkin 85 mukaan saatua yhdistettä II 2,5 ml:ssa vettä, lisättiin 25 huoneenlämpötilassa 0,5 ml 2 N HCl:ää, sekoitettiin 10 minuuttia huoneenlämpötilassa ja 40 minuuttia jäällä jäähdyttäen ja sitten imusuodatettiin. Kiteitä kuivattiin 28 tunnin ajan 23 - 25 °C:ssa P4O10:llä vakuumissa (6-8 mbar). Saatiin 0,46 g (saanto 94,9 %) 1-syano-l-[N-syklo-30 propyylimetyyli-N-(3-trifluorimetyyli-fenyyli)karbamoyy li] -2-[(imino-(4,4-dimetyyli-2-okso-imidatsolidin-l-yyli)-metyyli)amino]eteeni-hydrokloridia, jp. : 179 - 180 °C.

C21H24C1F3N602 (484,93)

Laskettu: Cl' 7,31 % 35 Löydetty Cl' 7,4 %.

9 56 105029

Esimerkki 87

Suspensioon, jossa oli 3,91 g (25 mmol) 1-amidi-no-4,4-dimetyyli-2-okso-imidatsolidiiniä 16 ml:ssa abs. DME:tä, tiputettiin 20 °C:ssa liuos, jossa oli 8,2 g (puh-5 distamatonta, noin 90 %:ista) 2-syano-3-etoksi-akryylihap-po-[N-isopropyyli-N-(3-trifluorimetyyli-fenyyli)amidia] (yhdistettä IV: R4 = CH(CH3)2; R5, R6 = H; R7 = C2H5) 20 ml:ssa abs. DME:tä ja sekoitettiin 4,5 tuntia 22 -24 °C:ssa. Tämän jälkeen seos haihdutettiin vakuumissa 10 korkeintaan 25 °C:n haudelämpötilassa. Öljymäinen jäännös liuotettiin 250 mlraan eetteriä ja ravisteltiin kuusi kertaa kulloinkin 25 ml:n kanssa vettä. Tämän jälkeen eette-riliuos kuivattiin MgS04:llä, suodatettiin ja haihdutettiin vakuumissa (< 26 °C). Jäännös (12,7 g) oli osittain 15 kiteistä. Tämä liuotettiin 40 ml:aan eetteriä, lisättiin 2 ml pentaania, annettiin seistä 2 päivää 4-6 °C:ssa ja lopuksi kiteet imusuodatettiin. Sen jälkeen, kun oli kuivattu (48 tuntia, 6-8 mbar, 20 - 24 °C, P4O10) saatiin 5,12 g (saanto = 47 %) DC-puhdasta yhdistettä II (R1, R2 = 20 CH3; R3, R5, R6 = H; R4 = CH(CH3)2 ), jp.: 121 - 122 °C. C20H23F3N6O2 (436,45)

Laskettu: C 55,04 H 5,31 F 13,06 N 19,26 % Löydetty: C 54,9 H 5,6 F 12,4 N 18,5 %.

Esimerkki 88 25 Vastaavalla tavalla, kuten esimerkissä 86 kuvat tiin, muutettiin 1 mmol (437 mg) esimerkin 87 mukaan valmistettua yhdistettä II hydrokloridiksi. Saatiin 400 mg (saanto 84,6 %) 1-syano-l-[N-isopropyyli-N-(3-trifluorimetyyli-fenyyli) karbamoyyli]-2-[(imino-(4,4-dimetyyli-2-ok-30 so-imidatsolidin-l-yyli)metyyli)amino]eteeni-hydroklori-dia, jp.: 258 - 260 °C.

C20H24ClF3N6O2 (4 72,92)

Laskettu: Cl' 7,50 % Löydetty Cl' 7,4 %.

. 57 105029

Esimerkki 89

Vastaavalla tavalla, kuten esimerkissä 86 kuvattiin, muutettiin 1 mmol {479 mg) esimerkin 97 mukaan valmistettua yhdistettä II hydrokloridiksi. Saatiin 1,02 g 5 (99 %) 1-syano-l-[N-(1,3-dimetyyli-l-butyyli)-N-(3-tri- fluorimetyyli-fenyyli)karbamoyyli]-2-[(imino-(4,4-dimetyy- li-2-okso-imidatsolidin-l-yyli)metyyli)amino]eteeni-hydro-kloridia, jp.: 255 - 256 °C.

C23H30ClF3N6O2 (515,00) 10 Laskettu: C 53,64 H 5,87 Cl' 6,88 F 11,07 N 16,32 % Löydetty: C 53,4 H 5, Cl1 6,4 F 10,6 N 16,1 %.

Käyttäen esimerkeissä 82 - 84, 85 ja 87 kuvattuja työskentelytapoja, jotka eroavat toisistaan ennen kaikkea työstön suhteen, valmistettiin seuraavassa taulukossa 5 15 esitettyjä yhdisteitä II (esimerkit 90 - 112). Taulukossa 5 esitettyjen yksittäisten yhdisteiden kohdalla on kulloinkin viitattu esimerkkiin, jonka mukaan tätä yhdistettä II on valmistettu.

A

I I

105029 ““<0 I f "“f 3 Π3 -Γ-Η +J M C £<ÖP| --.-.

(ö 3 (u-i-wm! 5 5 5 (ö <D-H tn 30) 3 (Λ 3

to B> OJBO CO CO CO

cv «- n _Z__8 g g_ m * o> cm’ to’ in UL t- t- ΤΟ σ> to X in V »r —j;----- >ί «Ί ®.

;Qfl) O 5 s a -±TO____ 8 8? _ ai ai ai Z ▼- t— T-

? 8 K

X ci N iO

U. t* T" "« q 8 8 X in xc «sr - —p---- l-P CM CV <0

* r/} | \ O CO CO

tn .-Va _ X’ K S’ o “-{oV- ' \ - ώ Λ r^ •3 *-* i"o r- h- r- en oo 3 / ^)— T- K esi T- «-en -H 0=\ I---- ; I s7>* 1= x x “Ί ”---- r * α: i u. x ---- ac

M

X

to to O

X X ~

*r csj c\j I

X O O O

• (n n n

CM X X X

cc ϋ o o rj n o

- XII

CC o o o e

to M S S S

H R - -J— —— 105029 -1--- Ί

(0 I

3 (O ·*Η*γ· . _

+jnce<04- $ S

<β 3 0)·ΗΛί K _ jm [u fg in in «3Φ·βΜ3α: » eo α a « m 'CQWXU6U]------ O) »n cm o> co co co <o" 2 T- r- r- T- r- IO l>> 00 (O (O, cm’ cJ" T-* r-- m" U. T- T- »- »- T- in ♦ o> o m.

X in m” in co in -j,.-------

I 4J

O O CM CO CO

pgo s »___So' » 88_

S S 8 8 S8 S

00 to co’ oo’ N-’ CO

in m h> *- X

co co cm cm_ σ> co ^ cm" cm cm" cm’ in 'äs S S> S <8 8 O I in in in in co in * --3------- +J l-P c» c» en a> co χ

(0 {/34J O) O) 00 00 r-_ CO

n uni,, in in co’ co r^" in — t -[Ci O tn m m in in in H »o O) CM h- O S-1C CM CO CO ΪΛ C~- M '— rO) <-8 rs rfi 1-Λ ^------- * ^ CC X X X I X U.

6-1 “cc xxxxxx

(M CM

"Ä "n

X I

o o

X X

m o O U

T '-χ CM CM

CM -/5 X X

0 Λ ϋ o

1 Si X I

O) O Ξ O O O

X O X T™ o o v v o ia X no

CC o X O O X X

* n n π π π n CM xxxxxx

CC OOOOOO

ne9 Γ5 r? r> r> xxxxxx X o o o o o o ~~e •H o ... cnj-iDM-mcoc^co WC CD σ> CT) O) O) O) 105029 60 Π3 Γ 3 Π3 -Γ+Η SSSJÄ? ? ? ? as-gsis a a_JL_J_a a_ <0 o N N. 0) z 55 52 £ a 5?

CO CO C» M- OO

o" — m' to" cm" LL t— T— T— t~ t— m_ r-~_ o_ o_ X to in ir V in

I in I σ> I cm I — I I

Sigo___a » a a a_

in CO CM o Q

Π io » O T-_ O) _ cn" to" to" otj cm" ai Z t- — i-t-CM — fM Q CM O) Q) O) — to CO ft 0» » to' —" cm" to' M·" to'

Ll_ y— j— r~ y— Ύ— y—

h- o> m in op τα) — if N_ 35 O

I I -ν' to" in" m" to" ui 3------- I 4-> m T- to t: co cm ^ oj+j cm in T- o in o o o a" a in" x s x Λ5------- +J __ Ό · o 4 ώ yo ώ iή Λ ~ Iff 2-. ? 8 - - - g 5 - s ? m I io cc xxx x x x o------- Λί

^ “cc XIXLLXX

I—1 — d ^ & 5

. I Q

o X- I

V υ

5 5 Y

O n I

M» X CJ X X 5f X O X cm u o o Π Π D Π c xixx

ac υ o o o x I

n n rj d

XXIX

x ο ο ο υ I x Ί= HO O — CM CO 5 (β M O) o o o o o

M C fr ^ "" ^ I

105029 61 <b' ΓΊ 3 <ti ·τ4γ- +> M C g iö-Η s «n 33 liddi-rixw ®P *9 9 ÄStSg&S s S S S 3 UI Kl> ¢) EM_____ ____ « n oi n <r z a g___s’ s g_ «- PJ 0 3 3' (M* C\i ΓΪ U. r- T- T- r*

O) O O CO

X 3" 3* ui 3* 3 ~T~>ϊ 1 +* „ >^1 O T- CM 3 00 a s___a a a_ T- cp oi * 00 k· n c4 h· © *- _ r- θί K 00 O O) Z t\|?-T-r-CQi- <n φ m q s 5Γ o k n o Λ V cd 10 oJ f"»’

Li. r- r- ^ f- T- r-

^ m T- r? <N

^ CO CO *tm *-e N

q I 3' in in in 3’ 3"

Ai --3--------- +J ι-p co 3 f- 3 o yo iO cq jj h*e O N Cil Λ C) •ΓΟ fO(U/% r-" iri t <0 CO Csf _ i_qr£iO m in Λ in in m m

n OcO U*> fil Λ <0c!j CM

o t-Γο en <0 mo f-~ 3 δ h- oi n p co

^ J *—i r* fl) Τ-ΙΠ r- h. r U) r O) CNJO

X---------

^ CC I X U. X I X

3 _________

<TJ

Fh ΙΛ _ ^ CC X X X I X U-

CM

*~n

t I Q

9. o

X I

00 ,n

" O «X

V X X o X CM

cc o υ ϊ υ o ” ^cixxxxx

CM CM

X X

o o

rj rj r> rj M H

^ I I I X X X

tr u o υ u o o ΓΈ 1 -h o I m l< tn in h- op g> o m 2 o o o o o T- n W w . t— t~ t— r- r- m— 105029 62 -1-~1 —

flj I

3 (Ο -Γ+Η _

•PPCgfl-P S

rddtU-ri^W JV

iöO)-Hcor>a) a a w tn s> qjscn__ o> to __ 00 00* 7 T- r* U- o »«.

X in in I -ϊ*

>hP «0 O

:0(11,, «Q h- «rt in ί r*.

N T- _ oo' oo" Z T- r-

r- CM

h- co cm' cm U. r- T- (0 o in X m in (0 3 •π I -P 3 $2 — W-P - - r0<UQ $ ft m ___ Μ Ο, Ο Λ ώ λ; ho o Is* ω v t p J «—i T- N t- M·

rH

P io

(0 CC XX

gn---

“cc XX

CM

^r>

X

o Ϊ o - x" x «r X u> x υ o *&: ϊ x

CM CM

5 5

Il II

- IX

CC O O

* — _—- ε P 0 ^ o, WP £ 2 wc *- T- • * saauasBnsLss^^=Bssssss= 105029

Esimerkki 113

Liuokseen, jossa oli 1,315 g (3 mmol) esimerkin 79 mukaan valmistettua yhdistettä I (R1 = CH=CH2; R2, R3, R6 = H; R4 = C2H5; R5 = F) 10 mlrssa asetonia, lisättiin huoneen-5 lämpötilassa 0,57 ml 6,17 molaarista HCl-liuosta eetterissä. Muodostunutta suspensiota sekoitettiin 1,5 tunnin ajan jäällä jäähdyttäen. Tämän jälkeen kiteet imusuodatettiin, pestiin asetonilla ja eetterillä ja kuivattiin 15 tunnin ajan 100 °C:ssa vakuumissa (5-8 mbar). Saatiin 1,40 g 10 (saanto 98,3 %) puhdasta 4-amino-2-U-vinyyli^-okso-imi-datsolidin-l-yyli) pyrimidiini-5-karboksyylihappo- (N-etyy-li-N-(2-fluori-5-trifluorimetyyli-fenyyli)amidi)hydroklo-ridia, jp.: 259 - 260 °C (hajoten).

C19H19C1F4N602 (474,87) 15 Laskettu: Cl' 7,47 % Löydetty Cl' 7,4 %.

Esimerkin 113 tai esimerkin 6 mukaisesti valmistettiin seuraavassa taulukossa 6 (esimerkit 114 - 117) esitettyjä yhdisteiden I hydroklorideja.

20

Taulukko 6 Esimerkit 114 - 117

Esimerkki Seuraavan Jp. Laskettu Löydetty no. esimerkin [°C] Cl' % Cl' % 25 mukaisen yhdisteen I hydrokloridi 114 74 - 76 276-77 7,50 7,7 30 115 81 284-85 6,83 6,8 116 80 269-70 7,31 7,5 117 77 247-48 7,11 7,2 • · 1 64 105029

Esimerkki 118

Seosta, jossa oli 2,80 g (6,41 mmol) yhdistettä II (R1, R2 = C2H5; R3, R5, R6 = H; R4 = CH3) , 210 mg vedetöntä oksaalihappoa ja 4,75 ml jääetikkaa, sekoitettiin 2,5 tun-5 nin ajan 70 °C:ssa, jolloin 20 minuutin kuluttua muodostui liuos. Tämän jälkeen haihdutettiin vakuumissa. Jäännös liuotettiin 70 ml:aan CH2Cl2:ta ja ravisteltiin peräkkäin kolme kertaa kulloinkin 20 ml:n kanssa n NaOH:ta ja lopuksi kaksi kertaa kulloinkin 20 ml:n kanssa vettä. CH2C12-10 liuos kuivattiin MgS04:llä, suodatettiin ja haihdutettiin vakuumissa. Jäännös liuotettiin noin 15 ml:aan eetteriä, jolloin tapahtui kiteytyminen. Kiteinen tuote imusuodatet-tiin ja pestiin eetterillä ja kuivattiin 17 tunnin ajan 100 °C:ssa vakuumissa. Saatiin 1,81 g (saanto 64,6 %) 15 puhdasta 4-amino-2-(4,4-dietyyli-2-okso-imidatsolidin-l-yyli)pyrimidiini-5-karboksyylihappo-(N-metyyli-N-(3-tri-fluorimetyyli-fenyyli)amidia) , jp.: 185 - 187 °C C20H23F3N6O2 (436,45)

Laskettu: C 55,04 H 5,31 N 19,26 % 20 Löydetty: C 54,8 H5,2 N 19,2 %

Esimerkki 119

Esimerkissä 6 kuvatun työskentelytavan mukaisesti muutettiin 3,60 g (8,25 mmol) esimerkin 118 mukaan valmistettua yhdistettä I (R1, R2 = C2H5; R3, R5, R6 = H; R4 = CH3) 25 hydrokloridiksi. Saatiin 3,42 g (saanto 87,7 %) puhdasta 4-amino-2-(4,4-dietyyli-2-okso-imidatsolidin-1-yyli)pyri-midiini-5-karboksyylihappo-(N-metyyli-N-(3-trifluorimetyy-li-fenyyli)amidi)hydrokloridia, jp.: 196 - 197 °C C20H24ClF3N6O2 (472,92) 30 Laskettu: C 50,80 H 5,12 Cl' 7,50 F 12,05 N 17,77 % Löydetty: C 50,9 H 4,9 Cl" 7,4 F 11,6 N 17,7 %.

Esimerkki 120 Käyttäen esimerkeissä 82 - 84 kuvattuja työskentelytapoja saatiin lähtien 6,58 g:sta (24,8 mmol) 1-amidino-35 4,4-dietyyli-2-okso-imidatsolidiini-hydrobromidia (yhdiste ,« i 65 105029 III: R1, R2 = C2H5; R3 = H hydrobromidina) ja 3,87 g:sta (26,1 mmol) diatsabisykloundekeenia (DBU) apuemäksenä ja 7,40 g: sta (24,8 mmol) yhdistettä IV (R4 = CH3; R5, R6 = H; R7 = C2H5) 3,94 g (saanto 36,4 %) puhdasta 1-syano-l-[N-me-5 tyyli-N-(3-trifluorimetyyli-fenyyli)karbamoyyli]-2-[(imi-no-(4,4-dietyyli-2-okso-imidatsolidin-1-yyli)metyyli)amino] eteeniä (yhdistettä II: R1, R2 =C2H5; R3, R5, R6 = H; R4 = CH3) , jp. : 184 - 187 °C.

(436,45) 10 Laskettu: C 55,04 H 5,31 N 19,26 % Löydetty: C 55,5 H4,9 N 19,5 %.

Esimerkki 121

Esimerkin 118 mukaisesti saatiin lähtien 4,52 g:sta (10 mmol) yhdistettä II (R1, R2 = CH3; R\ R5, R6 - H; R4 = 15 CH3OCH2CH2) , 360 mg:sta vedetöntä oksaalihappoa ja 7 ml:sta jääetikkaa 2,65 g (saanto 58,6 %) puhdasta 4-amino-2-(4,4-dimetyyli-2-okso-imidatsoi idin-1-yyli)pyrimidiini-5-kar-boksyylihappo-(N-(2-metoksi-etyyli-N-(3-trifluorimetyyli-fenyyli) amidia) , jp.: 192 - 193 °C 2 0 C20H23F3N6O3 (4 52,45)

Laskettu: C 53,09 H 5,12 N 18,58 % Löydetty: C 52,8 H5,0 N 18,8 %.

Lähtöaineena tarvittavaa yhdistettä II (R1, R2 = CH3; R3, R5, R6 = H; R4 = CH3OCH2CH2) valmistettiin esimer-25 keissä 82 - 84 kuvatun työskentelytavan mukaisesti lähtien vastaavista yhdisteistä III (R1, R2 = CH3; R3 = H) ja IV (R4 = CH3OCH2CH2; R5, R6 = H; R7 = C2H5) . jp.: 170 - 171 °C.

Esimerkki 122

Esimerkissä 6 kuvatun työskentelytavan mukaisesti, 30 muutettiin 2,51 g (5,6 mmol) esimerkin 121 mukaan valmistettua yhdistettä I (R1, R2 = CH3; R3, R5, R6 = H; R4 = CH3OCH2CH2) hydrokloridiksi. Saatiin 2,70 g (saanto ~ 100 %) puhdasta 4-amino-2-(4,4-dimetyyli-2-okso-imidatsolidin-l-yyli)pyrimidiini-5-karboksyylihappo-(N-(2-metoksi-etyy- • · · 105029 66 li)-N- (3-trifluorimetyyli-fenyyli)amidi)hydrokloridia, jp. : 181 - 182 °C.

C20H24ClF3N6O3 (488,92)

Laskettu: C 49,13 H 4,95 Cl' 7,25 F 11,66 N 17,19 % 5 Löydetty: C 48,9 H 4,8 Cl' 7,3 F 11,6 N 17,0 %

Esimerkki 123

Seuraavan koostumuksen omaavan kalvotabletin valmistus 10 _

Aineosat/tabletti Paino (mg) .1. Esimerkin 2 mukainen yhdiste I 100 2. Laktoosi 35 15 3. Maissitärkkelys 20 4. Mikrokiteinen selluloosa 10 5. Natrium-tärkkelysglykolaatti 8 6. Piidioksidi 5 7. Magnesiumstearaatti 2 20 8. Kalvolakka 10

Kokonaispaino 190 i 25 a) Aineet 1-4 sekoitetaan, kompaktoidaan ja viedään Fre- witt-seulan läpi (seulan aukko 1,0 mm).

b) Kohdasta a) saadut rakeet puuteroidaan aineilla 5-7 ja puristetaan.

c) Kohdasta b) saadut tabletit lakataan vesipitoisella 30 kalvolakalla.

« ·

• I

. · · 105029

Esimerkki 124

Seuraavan koostumuksen omaavan kalvotabletin valmistus 5 Aineosat/tabletti Paino (mg) 1. Esimerkin 12 mukainen yhdiste I 100 2. Laktoosi 11 3. Hydroksipropyylimetyyliselluloosa 60 10 4. Mikrokiteinen selluloosa 7 5. Magnesiumstearaatti 2 6, Kalvolakka 10

Kokonaispaino 190 15 a) Aineet 1-4 sekoitetaan, kompaktoidaan ja viedään Fre-witt-seulan läpi (seulan aukko 1,0 mm).

b) Kohdasta a) saadut rakeet puuteroidaan aineella 5 ja 20 puristetaan.

c) Kohdasta b) saadut tabletit lakataan vesipitoisella kalvolakalla.

Tämän tablettilajin kohdalla on kyse valmisteesta, 25 jossa vaikuttavan aineen vapautuminen on hidastettua.

« 9 I i • 1

t I

Claims (7)

1. Menetelmä terapeuttisesti käyttökelpoisten 4-amino-2-ureidopyrimidiini-5-karboksyylihappoamidien val-5 mistamiseksi, joilla on kaava Γ’ϋ sh io (i) CHj Lj JJ R1 CHS N-~L H 0 15 jossa R4 on C2-3-alkyyli, allyyli tai syklopropyylimetyyli, sekä niiden hyvin vesiliukoisten, fysiologisesti käytettävien happoadditiosuolojen valmistamiseksi, tunnettu siitä, että yhdiste, jolla on kaava II 20 ““tK ν'Χ,Λ

25 HY o H jossa R4 merkitsee samaa kuin kaavassa I, tai kaavan II mukaisen 30 yhdisteen suola tai suolaseos syklisoidaan 0 - 240 °C:n ·' lämpötilassa lisäämällä liuotinta tai ilman liuotinlisäys- tä kaavan I mukaiseksi yhdisteeksi tai kaavan I mukaisen yhdisteen suolaksi tai suolaseokseksi, saatu kaavan I mukainen yhdiste mahdollisesti muutetaan veteen hyvin liu-35 kenevaksi suolaksi tai saatu suola tai suolaseos muutetaan " mahdollisesti veteen hyvin liukenevaksi suolaksi. > 105029 69

2. Yhdisteet, joilla on kaava II 5 “’ΥΑ H N .N-C II I (11) Y 'n'C^H * o H 10 jossa R4 on C2.3-alkyyli, allyyli tai syklopropyylimetyyli, sekä niiden happoadditiosuolat.

3. Menetelmä yhdisteiden valmistamiseksi, joilla on kaava II 15 HN N—C il f (II)

20 U 4

0 H jossa R4 on C2.3-alkyyli, allyyli tai syklopropyylimetyyli, • 25 sekä niiden happoadditiosuolojen valmistamiseksi, tunnettu siitä, että yhdiste, jolla on kaava III CH, 30 \ (III) . / HNV M- Y nh, o tai sen suola saatetaan reagoimaan yhdisteen kanssa, jolla 35 on kaava IV 105029 ., 5 £ " (IV) 5 ^ H O R7 jossa R4 merkitsee samaa kuin kaavassa II ja R7 on (C^Jal-10 kyyli, orgaanisen liuottimen tai laimennusaineen läsnä ollessa, jolloin muodostuu kaavan II mukainen yhdiste tai sen suola, ja saatu kaavan II mukainen yhdiste muutetaan mahdollisesti suolaksi tai saatu suola muutetaan mahdollisesti kaavan II mukaiseksi yhdisteeksi. 15 ,« • · • · * n 5 105029 71