FI104857B - Bestämning av graden av nekros i hjärtmuskeln med en immunokemisk metod och lämpliga antikroppar för denna - Google Patents

Claims (10)

1. Diagnostiskt förfarande för bestämning av nekros hos hjärtmuskeln genom iiranunkemisk bestämning av haiten av hjärtmuskelspecifikt troponin I-C-komplex i människans blod, kännetecknat därav, att (1) plasma eller serum 5 inkuberas med en primär antikropp specifik för troponin I, troponin C eller I-C; (2) det bildade immunkomplexet med troponin I-C innehällande primärantikroppen separeras; och (3) den avskiljda mängden av immunkomplex mäts med en sekundär, märkt antikropp (anti troponin I, anti troponin C 10 eller anti troponin I-C) sä, att man inte mäter eventuell inverkan av fritt troponin I eller fritt troponin C; eller, om den primära antikroppen är specifik för enbart troponin I-C, kan man mätä det bildade immunkomplexet även kompetitivt med hjälp av märkt troponin I-C. 15

2. Förfarande enligt patentkravet 1, kännetecknat därav, att man utför en annan mätning av sädant troponin I-C komplex, där allt troponin I överförts i I-C komplexform genom tillsats av externt troponin C i ett överskott av 1 -300 gänger troponin I mängden som finns i patienternas 20 plasma eller serum, innehällande hjärtmuskelbaserat troponin I.

3. Förfarande enligt patentkravet 2, kännetecknat därav, att tillfört troponin C härrör frän människan eller djur eller att det har producerats med rekombinantteknik. 25

4. Förfarande enligt patentkravet 2, kännetecknat därav, att man för bestämning av troponin I-C komplexet använder en antikropp, som producerats mot artificiellt troponin C, vilket i sin tur producerats t.ex. med hjälp av rekombinantteknik sä, att troponin C kan bilda komplex med 30 troponin I.

5. Förfarande enligt patenkravet 2, kännetecknat därav, att 104857 man till provet tillsätter troponin C i en halt av 1 mikrogram - 1 milligram per ml blod i samband med provtagningen, eller alternativt tillsätter troponin C p& förhand i provröret, eller troponin C tillsätts till det 5 senare avskiljda serumet.

6. Förfarande enligt n&got av patentkraven 1 - 5, kännetecknat därav, att signalen mäts medelst tidsfördröjd fluorescens.

7. Förfarande enligt patentkravet 1 eller 2, kännetecknat 10 därav, att mängden hjärtmuskelnekros uppskattas med hjälp av förhällandet melian signalerna som f&s utan tillsats av troponin C och med nämnda tillsats.

8. Diagnostiskt förfarande för bestämning av nekros hos hjärtmuskeln genom analys av människans blod, kännetecknat 15 därav, att troponin I som härrör frän hjärtat bestäms ur människans plasma eller serum enligt nägot tidigare känt förfarande och att troponin I-C komplexet bestammes enligt patentkravet 1 eller 2 och att förhällandet används för uppskattning av graden av nekros hos hjärtmuskeln.

9. Diagnostiskt förfarande för bestämning av nekros hos hjärtmuskeln genom analys av människans blod, kännetecknat • · därav, att plasma eller serum inkuberas skilt med tvenne, för troponin I specifika primärantikroppar, varvid den ena antikroppen binds vid en sädan epitop hos troponin I som är 25 belägen vid bindningspunkten till troponin C, och den andra antikroppen binds vid vilken som heist annan epitop hos ·: troponin I, och de sälunda bildade antikropp - antigen -komplexen detekteras med märkta antikroppar, som binds vid andra epitoper än de ovannämnda epitoperna hos troponin I, 30 och förhällandet mellan de vid komplexen bundna märkta antikropparna används för uppskattning av graden av nekros hos hjärtmuskeln.

10. Diagnostiskt förfarande för bestämning av nekros hos 104857 hjärtmuskeln genom analys av människans blod, kännetecknat därav, att man immunkemiskt ur människans plasma eller serum samtidigt bestämmer troponin I-C komplexet, som härrör frän hjärtat, och troponin I som härrör fr&h hjärtat 5 och som kan bilda komplex med troponin C, medelst dubbelmärkning i de märkta antikroppama, eller att den ena antikroppen är märkt med en markör och att tillfört extemt troponin C är märkt med en annan markör. 1 « • · «