ES2987683T3

ES2987683T3 - Agentes de obtención de imágenes de la mieloperoxidasa

Info

Publication number: ES2987683T3
Application number: ES17871464T
Authority: ES
Inventors: John Chen; Cuihua Wang; Edmund Keliher
Original assignee: General Hospital Corp
Current assignee: General Hospital Corp
Priority date: 2016-11-16
Filing date: 2017-11-16
Publication date: 2024-11-15
Anticipated expiration: 2037-11-16
Also published as: CN110177581B; US20190315689A1; CN110177581A; US20220340524A1; EP3541431B1; US12570606B2; EP3541431A4; WO2018094005A1; EP3541431A1; US11352326B2

Abstract

En el presente documento se proporcionan compuestos útiles como agentes de obtención de imágenes. Los compuestos ejemplares proporcionados en el presente documento son útiles como agentes de obtención de imágenes de mieloperoxidasa utilizando técnicas de tomografía por emisión de positrones o de obtención de imágenes por fluorescencia. También se proporcionan métodos para preparar los compuestos proporcionados en el presente documento y métodos de diagnóstico utilizando compuestos radiomarcados y no marcados. (Traducción automática con Google Translate, sin valor legal)

Description

DESCRIPCIÓN

Agentes de obtención de imágenes de la mieloperoxidasa

Campo técnico

Esta invención se refiere a compuestos útiles como agentes de obtención de imágenes y más particularmente a compuestos útiles como agentes de obtención de imágenes de la mieloperoxidasa.

Antecedentes

La mieloperoxidasa (MPO) es una enzima oxidante que contiene hemo, producida principalmente por granulocitos neutrófilos y monocitos, y que desempeña un papel crucial en la defensa del huésped frente a patógenos por generación de especies reactivas de oxígeno (ROS) y otros oxidantes. Sin embargo, la actividad mal regulada de la MPO también contribuye al daño tisular.

US 2005/090529 A1 divulga compuestos de indazol 3,5 disustituido que modulan y/o inhiben las proteínas quinasas. WO 01/54681 A2 relata el uso de serotonina y triptófano, y compuestos relacionados, en el tratamiento de los síntomas del estrés.

WO2004/091480 divulga compuestos basados en una combinación de anillos de cinco y seis miembros como moduladores TIE para el uso en la muerte celular programada.

WO01/54681 divulga derivados del indol para el uso en el tratamiento de enfermedades cardíacas.

Resumen

La presente invención se expone en las reivindicaciones. En particular, la presente invención se refiere a un compuesto de Fórmula I:

o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, donde:

L1 se selecciona del grupo que consiste en un enlace, y -C(O)(C<1>-<6>alquileno)-;

R1 se selecciona del grupo formado por H, C<1>-<6>alquilo, C<2-6>alquenilo, C<2-6>alquinilo, y C<1-6>haloalquilo;

L2 es -C(O)(C<1>-<6>alquileno)-;

R2se selecciona del grupo formado por heteroarilo de 5-10 miembros, donde el heteroarilo de 5-10 miembros está opcionalmente sustituido por 1, 2, 3, o 4 sustituyentes seleccionados independientemente de OH, halo, C ^alcoxi, y C<1-6>haloalquilo;

L3 se selecciona del grupo formado por -C(O)(C<1-6>alquileno)-, -C(O)(C<1-6>alquilenoxi)-, -C(O)N(Ra3)(C<1-6>alquileno)-, -C(O)N(Ra3)(C<1-6>alquileno)-di(C<1-6>alquil)amino, y -C(O)N(Ra<3>)(C<1-6>alquilenoxi)-;

R3 se selecciona del grupo formado por C<1-6>alquilo, C<2-6>alquenilo, C<2-6>alquinilo, C<1-6>haloalquilo, C<1-6>alcoxi; o alternativamente, -L3-R3 forma un grupo oxo;

R4 es H;

y cada Ra1, Ra2, y Ra3 se selecciona independientemente del grupo formado por H, C<1-6>alquilo, C<2-6>alquenilo, C<2-6>alquinilo, y C<1-6>haloalquilo.

La presente invención también proporciona una composición farmacéutica que comprende un compuesto de la presente invención, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, y al menos un portador farmacéuticamente aceptable.

La presente invención también proporciona un método de obtención de imágenes de una muestra de células o tejidos, el método comprende:

i) esperar un tiempo suficiente para permitir que un compuesto de la presente invención se acumule en la muestra celular o tisular después de que dicho compuesto se haya administrado al sujeto; y

ii) obtener imágenes de la muestra celular o tisular con una técnica de obtención de imágenes.

La presente invención también proporciona un compuesto de la presente invención para el uso en un método de diagnóstico de una enfermedad o trastornoin vivoasociado con una actividad anormal de la mieloperoxidasa en un sujeto, donde el método comprende:

i) administrar al sujeto dicho compuesto

ii) esperar un tiempo suficiente para permitir que el compuesto se acumule en un lugar de la célula o tejido asociado con la enfermedad; y

iii) obtener imágenes de la célula o tejido con una técnica de obtención de imágenes.

La presente invención también proporciona un método de obtención de imágenes o detectar la actividad de la mieloperoxidasa en una muestra celular o tisular, el método comprende:

i) obtener imágenes de una muestra de células o tejidos con una técnica para la obtención de imágenes después de que la muestra de células o tejidos se haya puesto en contacto con un compuesto de la presente invención.

La presente invención también proporciona un método de detección de la actividad de la mieloperoxidasa en un sujeto, el método comprende: obtener imágenes del sujeto con una técnica de obtención de imágenes después de que se haya administrado al sujeto un compuesto de la presente invención, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo. La presente invención también proporciona un método de monitorización del tratamiento de una enfermedad o trastorno asociado con actividad anormal de la mieloperoxidasa en un sujeto, el método comprende:

i) obtener imágenes del sujeto con una técnica de obtención de imágenes después de que se haya administrado al sujeto un compuesto de la presente invención, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo;

ii) obtener imágenes de la célula o el tejido del sujeto con una técnica de obtención de imágenes después de haber administrado al sujeto una cantidad terapéuticamente eficaz de un compuesto terapéuti

trastorno; y

v) comparar la imagen del paso i) y la imagen del paso ii).

Cualquier divulgación que no entre dentro del alcance de las reivindicaciones se incluye con fines ilustrativos.

Salvo que se defina lo contrario, todos los términos técnicos y científicos aquí utilizados tienen el mismo significado que comúnmente entiende una persona con conocimientos ordinarios en la técnica a la que pertenece esta invención. En esta descripción se describen métodos y materiales para el uso en la presente invención; también pueden utilizarse otros métodos y materiales adecuados conocidos en la técnica. Los materiales, métodos y ejemplos son meramente ilustrativos y no pretenden ser limitativos. En caso de conflicto, prevalecerá la presente especificación, incluyendo las definiciones.

Descripción de las ilustraciones

La FIG. 1A muestra un sistema de síntesis de radiomarcado automatizado utilizado en la química de radiomarcado descrita en el Ejemplo 8.

La FIG. 1B muestra la estabilidad del Compuesto 9 almacenado en 1x PBS a temperatura ambiente durante 0, 0,5 h y 1,5 h.

La FIG. 1C muestra la estabilidad del Compuesto 9 almacenado en Na-ascorbato al 0,5% (p/v) en solución salina a temperatura ambiente durante 0, 1 h, 2 h, 3 h y 4 h.

La FIG. 2A muestra experimentosin vivoen Matrigel con el Compuesto 5. Muslo de control: GOX (4 pL, 1 mg/mL), muslo MPO: GOX (4 pL) MPO (15 pL).

La FIG. 2B muestra experimentosin vivoen Matrigel con el Compuesto 7. Muslo de control: GOX (4 pL, 1 mg/pL), muslo MPO: GOX (4 pL) MPO (15 pL).

La FIG. 3A muestra resultados representativos de la obtención de imágenes MPO-PET en matrigel utilizando el Compuesto 9. Muslo de control:<g>O<x>(4 pL, 1mg/pL), muslo MPO: GOX (4 pL) MPO (15 pL).

La FIG. 3B muestra resultados representativos de la obtención de imágenes MPO-PET en matrigel utilizando el Compuesto 9. La señal PET del experimento con matrigel es linealmente proporcional a la concentración de MPO (0,15 pL, 30 pL).

La FIG. 4A muestra la vida media en sangre del Compuesto 9.

La FIG. 4B muestra la biodistribución del Compuesto 9 en varios órganos.

Las FIG. 5A-5D muestran resultados representativos de un estudio dinámico del Compuesto 9 de MPO durante 3 horas: gel de MPO frente a gel de control (FIG. 5A); Datos cerebrales que muestran que el Compuesto 9 puede atravesar la barrera hematoencefálica (FIG. 5B); datos dinámicos en órganos (FIG. 5C-5D).

Las FIG. 6A-6B muestran datos representativos de un modelo de inflamación en una pata con CFA. (FIG. 6A) Pata derecha: PBS; Pata izquierda: Emulsión CFA (1/1 de CFA/PBS); (FIG. 6B) Pata izquierda: PF-1355 tratada; Pata derecha: no tratada.

La FIG. 6C muestra un análisis cuantitativo que demuestra que un inhibidor de la MPO disminuyó la captación del radiotrazador sensible a la MPO en la pata inflamada.

La FIG. 7A muestra la tomografía molecular de fluorescencia (FMT) a los 15, 30, 45 y 60 minutos después de la inyección del Compuesto 3 y AF-647, así como diferentes concentraciones de MPO embebida en matrigel en muslos de ratón. En el panel izquierdo se muestra un esquema de los puntos de inyección y las cantidades de MPO. La cuantificación de imágenes reveló un aumento lineal con el aumento de las cantidades de MPO, con incremento de la señal de fluorescencia a lo largo del tiempo.

La FIG. 7B muestra la obtención de imágenes de reflectancia de fluorescencia (FRI) de diferentes combinaciones de glucosa oxidasa (GOX), MPO y el inhibidor irreversible de MPO ABAH embebidos en matrigel en muslos de ratón e inyectados con el Compuesto 3 y AF-647 (paneles ii-vi). Los círculos delimitan los lugares de inyección de matrigel. ABAH se embebió en matrigel junto con MPO y GOX, o se administró por vía intraperitoneal (i.p.). También se inyectó en algunos ratones un análogo inespecífico que contenía un grupo tirosina (panel v). La imagen de campo claro que indica la posición del ratón se muestra en el panel i.

Las FIG. 8A-8C muestran imágenes representativas de ratones tratados con PMA para inducir dermatitis de contacto irritante en la pata trasera derecha, y vehículo como control negativo en la pata trasera izquierda. Los círculos delimitan las zonas de administración tópica de PMA o del vehículo. En la columna de la izquierda se presentan imágenes de campo claro para esbozar la anatomía. En la columna de la derecha se presentan imágenes de fluorescencia de la actividad de la MPO. Un ratón de tipo salvaje inyectado con el Compuesto 3 muestra un aumento de la fluorescencia en la pata trasera derecha (tratada con PMA) (fila superior). En un ratón MPO-KO inyectado con el Compuesto 3 (fila central) y en un ratón de tipo salvaje inyectado con un sensor de control no específico (fila inferior), no se detectó ninguna señal de fluorescencia por encima del fondo.

La FIG. 8D muestra la cuantificación de la señal de fluorescencia en las patas traseras de ratones tratados con PMA y con vehículo. (* p < 0,01, n.s. no significativo). ;;FIG. 9A-9C Los ratones fueron inyectados con Salmonella por vía intracerebral para inducir la formación de abscesos (FIG. 9A). Se obtuvieron imágenes de la reflectancia de fluorescencia de los cortes cerebrales coronales (FIG. 9B), indicando una señal de fluorescencia consistente con la actividad de MPO en el hemisferio ipsilateral pero no en el contralateral. La inyección de solución salina no desencadenó actividad MPO significativa. La correlación entre la actividad MPO del Compuesto 3 y la proteína MPO detectada con un anticuerpo MPO reveló un aumento de la proteína MPO tanto en el hemisferio ipsilateral como en el contralateral (FIG. 9C). La actividad de MPO sólo se detectó en el hemisferio ipsilateral. También se observaron áreas de proteínas de MPO pero sin actividad en el hemisferio ipsilateral. ;La FIG. 10A muestra imágenes fluorescentes representativas de ratones inyectados subcutáneamente con Streptococcus pneumoniae (SPn) para inducir celulitis bacteriana con formación de NETs, o con solución salina como control negativo. Los círculos delimitan los lugares de las inyecciones de SPn o del vehículo. Se presenta una imagen de campo claro (para referencia anatómica) e imágenes de fluorescencia de MPO-sensor (actividad MPO) y Sytox Green (ADN extracelular), así como una imagen de fluorescencia combinada (MPO-sensor más Sytox Green). La colocalización de la actividad MPO con el ADN extracelular es consistente con la formación de NET en el lugar de la infección. ;La FIG. 10B muestra el aumento de los niveles de actividad MPO y ADN extracelular observado en el muslo inyectado con SPn, pero no en el muslo inyectado con solución salina (* p < 0,001).

La FIG. 11 muestra resultados representativos del experimento de cambio de colorin vitrodescrito en el Ejemplo 15. No se observó cambio de color cuando no se añadió MPO (vial n° 2). La peroxidasa de rábano (HRP) y la<m>P<o>pueden oxidar el agente PET, que sufrió una oligomerización para provocar un cambio de color cuando se combinó con H<2>O<2>o glucosa/GOX (equivalente de H<2>O<2>) (viales n° 3, 4, 5).

La FIG. 12 muestra el valor de captación estandarizado (SUV) de 3'-deoxi-3'-18F-fluorotimidina (18F-FLT) y el Compuesto 9 en el cerebro.

Descripción detallada

La MPO se ha detectado en diversas enfermedades inflamatorias agudas y crónicas, incluyendo la aterosclerosis (véase, por ej., Brennan et al, 2001, The Journal of Clinical Investigation, 107(4):419:430; y Nicholls et al, 2005, Arteriosclerosis, Thrombosis, and Vascular Biology, 25(6): 1102-1111), enfermedad de Alzheimer (véase, por ej., Maki et al, The Journal of Biological Chemistry, 2009, 284(5):3158-3169; y Reynolds et al, Experimental Neurology, 1999, 155(1);31-41), accidente cerebrovascular (véase, por ej., Forghani et al, Journal of cerebral blood flow and metabolism: Official Journal of the International Society of Cerebral Blood Flow and Metabolism, 2015, 35(3):485-493), esclerosis múltiples (véase, por ej., Gray et al, Neuroscience Letters, 2008, 444(2):195-198; y Gray et al, Brain Pathology, 2008, 18(l):86-95), infarto de miocardio (véase, por ej., Brennan et al, N. Engl. J. Med. 2003, 349, 1595-1604), fibrilación atrial (véase, por ej., Rudolph et al, Nature Medicine, 2009, 16(4):470-474), entre otros, y ha sido reconocida como un importante biomarcador de la inflamación. Dadas sus funciones en los procesos inflamatorios, se han desarrollado varios métodos de obtención de imágenes para detectar la actividad de la MPO, como el luminol (véase, por ej., Gross et al, Nature Medicine, 2009, 15(4)455-461; y Zhang et al, Nature Medicine, 2013, 19(4):500-505), oxazine conjugated nanoparticles (véase, por ej., Panizzi et al, Journal of the American Chemical Society, 2009, 131(43):15739-15744), o SNAPF (sulfonaftoaminofenilfluoresceína) (véase, por ej., Shepherd et al, Chemistry & Biology, 2007, 14(11):1221-1231). Sin embargo, la penetración tisular inadecuada y/o la falta de especificidad han limitado hasta ahora el uso de estos agentes en investigación y están pendientes los estudios traslacionales en humanos. Estudios anteriores han arrojado bis-5-HT-DTPA activable para la obtención de imágenes por resonancia magnética (RM), que han sido validados en animales con enfermedades inflamatorias (véase, por ej., Chen et al, Brain: A Journal of Neurology, 2008, 131(Pt 4):1123-1133; Nahrendorf et al, Circulation, 2008, 117(9): 1153-1160; and Swirski et al, The Journal of Clinical Investigation, 2010, 120(7):2627-2634). Para detectar los eventos inflamatorios tempranos y la inflamación neurológica donde la capacidad de cruzar la barrera hematoencefálica es esencial, son altamente deseables modalidades de obtención de imágenes más sensibles.

Aquí se proporcionan nuevas sondas de tomografía por emisión de positrones (PET) y de obtención de imágenes fluorescentes dirigidas a MPO y sus usos en aplicaciones relacionadas con enfermedades inflamatorias en animales.

Compuestos

La presente solicitud proporciona,inter alia,(entre otros) un compuesto de Fórmula VI:

o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, donde:

X se selecciona de un grupo formado por CH<2>, NH, O, y S;

Y se selecciona de un grupo formado por CH<2>, NH, O, y S;

L1 se selecciona del grupo formado por un enlace, -C(O)-, -C(O)O-, -C(O)NRa1-, -C(O)(C-i-6 alquileno)-, y -C(O)(C-i-6 alquilenoxi-;

R1 se selecciona de un grupo formado por R5, H, C<1-6>alquilo, C<2-6>alquenilo, C<2-6>alquinilo, C<1-6>haloalquilo, C<3-10>cicloalquilo, C<6-10>arilo, heterocicloalquilo de 4-10 miembros y heteroarilo de 5-10 miembros, donde cada C<1-6>alquilo, C<2-6>alquenilo, C<2-6>alquinilo, C<1-6>haloalquilo, C<3-10>cicloalquilo, C<6-10>arilo, heterocicloalquilo de 4-10 miembros y heteroarilo de 5-10 miembros está opcionalmente sustituido por 1, 2, 3 o 4 sustituyentes seleccionados independientemente entre OH, halo, C<1-6>alcoxi y C<1-6>haloalquilo;

L2 se selecciona del grupo formado por -(C<1-6>alquileno)-(C<3-10>cicloalquileno)-, -(C<1-6>alquileno)-(C<6-10>arileno)-, -(C<1-6>alquileno)-(heterocicloalquileno de 4-10 miembros)-, -(C<1-6>alquileno)-(heteroarileno de 5-10 miembros)-, -C(O)-, -C(O)O-, -C(O)NRa2-, -C(O)(C<1-6>alquileno)-, y -C(O)(C<1-6>alquilenoxi)-;

R2 se selecciona del grupo formado por R5, C^alcoxi, C<3-10>cicloalquilo, C<6-10>arilo, heterocicloalquilo de 4-10 miembros y heteroarilo de 5-10 miembros, donde cada C<1-6>alcoxi, C<3-10>cicloalquilo, C<6-10>arilo, heterocicloalquilo de 4-10 miembros y heteroarilo de 5-10 miembros está opcionalmente sustituido por 1, 2, 3 o 4 sustituyentes seleccionados independientemente de OH, halo, C<1-6>alcoxi y C<1-6>haloalquilo;

L3 se selecciona del grupo formado por un enlace, -C(O)-, -C(O)O-, -C(O)NRa3-, -C(O)(Ci-6 alquileno)-, -C(O)(Ci-6 alquilenoxi)-, -C(O)N(Ra3)(C<1-6>alquileno)-, -C(O)N(Ra3)(C<1-6>alquileno)-di(C<1-6>alquilo)amino, y -C(O)N(Ra3)(C<1-6>alquilenoxi)-;

R3 se selecciona del grupo formado por R5, H, C<1-6>alquilo, C<2-6>alquenilo, C<2-6>alquinilo, C<1 -6>haloalquilo, C<1 -6>alcoxi, C<3>-<10>cicloalquilo, C<6-10>arilo, heterocicloalquilo de 4-10 miembros, heteroarilo de 5-10 miembros y -C(O)N(Ra3)(C<1-6>haloalcoxi), donde cada C<1-6>alquilo, C<2-6>alquenilo, C<2-6>alquinil, C<1-6>haloalquil, C<1-6>alcoxi, C<3-10>cicloalquilo, C<6-10>arilo, heterocicloalquilo de 4-10 miembros, heteroarilo de 5-10 miembros, está opcionalmente sustituido por 1, 2, 3 o 4 sustituyentes seleccionados independientemente entre OH, halo, C<1-6>alcoxi y C<1-6>haloalquilo;

o alternativamente, -L3-R3 forma un grupo oxo;

R4 se selecciona del grupo formado por H, C<1-6>alquilo, C<2-6>alquenilo, C<2-6>alquinilo y C<1.6>haloalquilo; cada R5 se selecciona independientemente del grupo formado por una nanopartícula (por ej., dextrano, un dendrímero, óxido de hierro reticulado (CLIO), nano-oro, un punto cuántico y similares) y una molécula biológica (por ej., una proteína, un polipéptido, una molécula biológica funcional recombinante y similares);

R6, R7, R8 y R9 se seleccionan cada uno independientemente del grupo que consiste en H, C<1-40>alquilo, C<2-40>alquenilo, C<2-40>alquinilo, C<1-40>alcoxi, C<1.40>haloalquil, y C<1>-<40>haloalcoxi, -NH(C<1-40>alquilo), y -N(C<1-40>alquilo)<2>;

cada Ra1, Ra2, y Ra3 se selecciona independientemente del grupo formado por H, C<1-6>alquilo, C<2-6>alquenilo, C<2-6>alquinilo y C<1.6>haloalquilo; y

n es 0, 1, o 2.

En algunas realizaciones, n es 0. En algunas realizaciones, n es 1. En algunas realizaciones, n es 2.

En algunas realizaciones, X es NH.

En algunas realizaciones, R6, R7, R8, y R9 se seleccionan cada uno independientemente del grupo que consiste en H, C<1-20>alquilo, C<2-20>alquenilo, C<2-20>alquinilo, C<1-20>alcoxi, C<1-20>haloalquilo, C<1-20>haloalcoxi, -NH(C<1-20>alquilo), y -N(C<1-20>alquilo)<2>. En algunas realizaciones, R6, R7, R8 y R9 se seleccionan cada uno independientemente del grupo que consiste en H, C<1-10>alquilo, C<2-10>alquenilo, C<2-10>alquinilo, C<1.10>alcoxi, C<1.10>haloalquilo, C<1-10>haloalcoxi, -NH(C<1-10>alquilo) y -N(C<1-10>alquilo)<2>. En algunas realizaciones, R6, R7, R8, y R9 se seleccionan cada uno independientemente del grupo que consiste en H, C<1-6>alquilo, C<2-6>alquenilo, C<2-6>alquinilo, C<1.6>alcoxi, C<1.6>haloalquilo, C<1.6>haloalcoxi, -NH(C<1-6>alquilo), y -N(C<1-6>alquilo)<2>. En algunas realizaciones, R6, R7, R8, y R9 se seleccionan cada uno independientemente del grupo que consiste en H, C<1-6>alquilo, C<2-6>alquenilo C<2-6>alquinilo, C<1.6>alcoxi, C<1-6>haloalquilo, C<1.6>haloalcoxi, -NH(C<1-6>alquilo), y -N(CH3) (C<1.6>alquilo).

En algunas realizaciones, R6 es H.

En algunas realizaciones, R7 es H.

En algunas realizaciones, R8 es H.

En algunas realizaciones, R9 es H.

En algunas realizaciones, R6, R7, R8, y R9 son cada uno H.

En algunas realizaciones, el compuesto de Fórmula VI, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, es un compuesto de Fórmula I:

o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, donde:

L1 se selecciona del grupo formado por, -C(O)-, -C(O)O-, -C(O)NRa1-, -C(O)(C<1-6>alquileno)-, y -C(O)(C<1-6>alquilenoxi)R1 se selecciona del grupo formado por R5, H, C<1-6>alquilo, C<2-6>alquenilo, C<2-6>alquinilo, C<1-6>haloalquilo, C<3-10>cicloalquilo, C<6-10>arilo, heterocicloalquilo de 4-10 miembros y heteroarilo de 5-10 miembros, donde cada C<1-6>alquilo, C<2-6>alquenilo, C<2-6>alquinilo, C<1.6>haloalquilo, C<3-10>cicloalquilo, C<6-10>arilo, heterocicloalquilo de 4-10 miembros y heteroarilo de 5-10 miembros está opcionalmente sustituido por 1, 2, 3 o 4 sustituyentes seleccionados independientemente entre OH, halo, C<1-6>alcoxi y C<1-6>haloalquilo;

L<2>se selecciona del grupo formado p o r-(C<1>.<6>alquilenoHC<3.10>cicloalquileno)-, -(C<1-6>alquileno)-(C<6-10>arileno)-, -(C<1.6>alquileno)-( heterocicloalquileno de 4-10 miembros)-, - (C ^ alquileno)-(heteroarileno de 5-10 miembros)-, -C(O)-, -C(O)O-, -C(O)NRa2-, - C(O)(C<1>-<6>alquileno)-, y-C(O)(C<1>-<6>alquilenoxi)-;

R2 se selecciona del grupo formado por R5, C^6 alcoxi, C<3-10>cicloalquilo, C<6-10>arilo, heterocicloalquilo de 4-10 miembros, y heteroarilo de 5-10 miembros, donde cada C^6 alcoxi, C<3-10>cicloalquilo, C<6-10>arilo, heterocicloalquilo de 4-10 miembros, y heteroarilo de 5-10 miembros está opcionalmente sustituido por 1, 2, 3, o 4 sustituyentes seleccionados independientemente de OH, halo, C^6 alcoxi, y C^6 haloalquilo;

L3 se selecciona del grupo formado por un enlace, -C(O)-, -C(O)O-, -C(O)NRa3-, -C(O)(C<1-6>alquileno)-, -C(O)(C<1-6>alquilenoxi)-, -C(O)N(Ra3)(C<1-6>alquileno)-, -C(O)N(Ra3)(C<1-6>alquileno)-di(C<1-6>alquilo)amino, y -C(O)N(Ra3)(C<1-6>alquilenoxi)-;

R3 se selecciona del grupo formado por R5, H, C<1>-<6>alquilo, C<2-6>alquenilo, C<2-6>alquinilo, C^6 haloalquilo, C^6 alcoxi, C<3>-<10>cicloalquilo, C<6-10>arilo, heterocicloalquilo de 4-10 miembros, heteroarilo de 5-10 miembros, y -C(O)N(Ra3)(C<1-6>haloalcoxi), donde cada C<1-6>alquilo, C<2-6>alquenilo, C<2-6>alquinilo, C^6 haloalquilo, C^6 alcoxi, C3-10 cicloalquilo, C<6-10>arilo, 4-10 heterocicloalquilo de 4-10 miembros, heteroarilo de 5-10 miembros, opcionalmente sustituido por 1, 2, 3, o 4 sustituyentes seleccionados independientemente de OH, halo, C^6 alcoxi, y C^6 haloalquilo;

o alternativamente, -L3-R3 forma un grupo oxo;

R4 se selecciona del grupo formado por H, C^6 alquilo, C<2-6>alquenilo, C<2-6>alquinilo, y C^6 haloalquilo;

cada R5 se selecciona independientemente del grupo que consiste en una nanopartícula (por ej., dextrano, un dendrímero, óxido de hierro reticulado (CLIO), nano-oro, un punto cuántico, y similares), y una molécula biológica (por ej., una proteína, un polipéptido, una molécula biológica funcional recombinante, y similares); y

cada Ra1, Ra2, y Ra3 se selecciona independientemente del grupo formado por H, C<1-6>alquilo, C<2-6>alquenilo, C<2-6>alquinilo, y C<1-6>haloalquilo.

En algunas realizaciones:

L1 se selecciona del grupo formado por un enlace, -C(O)-, -C(O)O-, -C(O)NRa1-, -C(O)(C<1-6>alquileno)-, y -C(O)(C<1-6>alquilenoxi)-;

R1 se selecciona del grupo formado por H, C^6 alquilo, C<2-6>alquenilo, C<2-6>alquinilo, C^6 haloalquilo, C<3-10>cicloalquilo, C<6>-<10>arilo, heterocicloalquilo de 4-10 miembros, y heteroarilo de 5-10 miembros, donde cada C<1>-<6>alquilo, C<2>-<6>alquenilo, C<2-6>alquinilo, C^6 haloalquilo, C<3-10>cicloalquilo, C<6>-<10>arilo, heterocicloalquilo de 4-10 miembros, y heteroarilo de 5-10 miembros está opcionalmente sustituido por 1, 2, 3, o 4 sustituyentes seleccionados independientemente de OH, halo, C<1-6>alcoxi, y C<1-6>haloalquilo;

L2 se selecciona del grupo formado por -(C^6 alquileno)-(C3-10 cicloalquileno)-, -(C^6 alquileno)-(C<6-10>arileno)-, -(C^6 alquileno)-( heterocicloalquileno de 4-10 miembros)-, -(C^6 alquileno)-(heteroarileno de 5-10 miembros)-, -C(O)-, -C(O)O-, -C(O)NRa2-, - C(O)(C<1-6>alquileno)-, y-C(O)(C<1>-<6>alquilenoxi)-;

R2 se selecciona del grupo formado por C^6 alcoxi, C<3-10>cicloalquilo, C<6-10>arilo, heterocicloalquilo de 4-10 miembros y heteroarilo de 5-10 miembros, donde cada C ^alcoxi, C<3>-<10>cicloalquilo, C<6>-<10>arilo, heterocicloalquilo de 4-10 miembros, y heteroarilo de 5-10 miembros está opcionalmente sustituido por 1, 2, 3, o 4 sustituyentes seleccionados independientemente de OH, halo, C^6 alcoxi, y C^6 haloalquilo;

R3 se selecciona del grupo formado por H, C<1-6>alquilo, C<2-6>alquenilo, C<2-6>alquinilo, C^6 haloalquilo, C^6 alcoxi, C3-10 cicloalquilo, C<6-10>arilo, heterocicloalquilo de 4-10 miembros, heteroarilo de 5-10 miembros, y -C(O)N(Ra3)(C<1-6>haloalcoxi), donde cada C<1-6>alquilo, C<2-6>alquenilo, C<2-6>alquinilo, C^6 haloalquilo, C^6 alcoxi, C3-10 cicloalquilo, C<6-10>arilo, heterocicloalquilo de 4-10 miembros, heteroarilo de 5-10 miembros, está opcionalmente sustituido por 1, 2, 3, o 4 sustituyentes seleccionados independientemente de OH, halo, C^6 alcoxi, y C^6 haloalquilo;

o alternativamente, -L3-R3 forma un grupo oxo;

R4 se selecciona del grupo formado por H, C^6 alquilo, C<2-6>alquenilo, C<2-6>alquinilo, y C^6 haloalquilo; y cada Ra1, Ra2, y Ra3 se selecciona independientemente del grupo formado por H, C^6 alquilo, C<2-6>alquenilo, C<2-6>alquinilo, y C^6 haloalquilo.

En algunas realizaciones:

L1 se selecciona del grupo formado por un enlace, -C(O)-, -C(O)O-, -C(O)NRa1-, -C(O)(Ci-6 alquileno)-, y -C(O)(Ci-6 alquilenoxi)-;

R1 se selecciona del grupo formado por un grupo formado por H, C<1-6>alquilo, C<2-6>alquenilo, C<2-6>alquinilo, C<1-6>haloalquilo, C<3.10>cicloalquilo, C<6>-<10>arilo, heterocicloalquilo de 4-10 miembros, y heteroarilo de 5-10 miembros, donde cada C<1-6>alquilo, C<2-6>alquenilo, C<2-6>alquinilo, C<1.6>haloalquilo, C<3-10>cicloalquilo, C<6>-<10>arilo, heterocicloalquilo de 4-10 miembros y heteroarilo de 5-10 miembros está opcionalmente sustituido por 1, 2, 3 o 4 sustituyentes seleccionados independientemente entre OH, halo, C^6 alcoxi, y C<1-6>haloalquilo;

L2 se selecciona del grupo formado p o r-(C<1>.<6>alqueniloHC<3.10>cicloalquileno)-, -(C<1-6>alquileno)-(C<6-10>arileno)-, -(C<1.6>alquileno)-( heterocicloalquileno de 4-10 miembros)-, - (C ^ alquileno)-(heteroarileno de 5-10 miembros)-, -C(O)-, -C(O)O-, -C(O)NRa2-, - C(O)(C<1-6>alquileno)-, y-C(O)(C<1-6>alquilenoxi)-;

R2 se selecciona del grupo formado por C^6 alcoxi, C<3-10>cicloalquilo, C<6-10>arilo, heterocicloalquilo de 4-10 miembros, y heteroarilo de 5-10 miembros, donde cada C^6 alcoxi, C<3-10>cicloalquilo, C<6-10>arilo, heterocicloalquilo de 4-10 miembros y heteroarilo de 5-10 miembros está opcionalmente sustituido por 1, 2, 3 o 4 sustituyentes seleccionados independientemente entre OH, halo, C^6 alcoxi, y C^6 haloalquilo;

L3 se selecciona del grupo formado por un enlace, -C(O)-, -C(O)O-, -C(O)NRa3-, -C(O)(C<1-6>alquileno)-, -C(O)(C<1-6>alquilenoxi)-, -C(O)N(Ra3)(C<1-6>alquileno)-, y - C(O)N(Ra3)(C<1-6>alquilenoxi)-;

R3 se selecciona del grupo formado por H, C ^ alquilo, C<2-6>alquenilo, C<2-6>alquinilo, C^6 haloalquilo, C^6 alcoxi, C<3-10>cicloalquilo, C<6-10>arilo, heterocicloalquilo de 4-10 miembros, y heteroarilo de 5-10 miembros, donde cada C<1-6>alquilo, C2-6 alquenilo, C<2-6>alquinilo, C^6 haloalquilo, C^6 alcoxi, C<3-10>cicloalquilo, C<6-10>arilo, heterocicloalquilo de 4-10 miembros y heteroarilo de 5-10 miembros, está opcionalmente sustituido por 1, 2, 3 o 4 sustituyentes seleccionados independientemente entre OH, halo, C^6 alcoxi, y C^6 haloalquilo;

o alternativamente, -L3-R3 forma un grupo oxo;

y cada Ra1, Ra2, y Ra3 se selecciona independientemente del grupo formado por H, C<1-6>alquilo, C<2-6>alquenilo, C<2-6>alquinilo, y C^6 haloalquilo.

En algunas realizaciones, L1 se selecciona del grupo formado por un enlace, -C(O)-, -C(O)(C<1-6>alquileno)-, y -C(O)(C<1>-6 alquilenoxi)-. En algunas realizaciones, L1 se selecciona del grupo que consiste en un enlace y -C(O)(C<1-6>alquileno)-. En algunas realizaciones, L1 es un enlace. En algunas realizaciones, L1 es -C(O)(C<1-6>alquileno). En algunas realizaciones, L1 es -C(O)(n-butileno)-.

En algunas realizaciones, R1 se selecciona del grupo formado por H, C<3-10>cicloalquilo, C<6-10>arilo, heterocicloalquilo de 4-10 miembros, y heteroarilo de 5-10 miembros, donde cada C<1>-<6>alquilo, C<3-10>cicloalquilo, C<6>-<10>arilo, heterocicloalquilo de 4-10 miembros, y heteroarilo de 5-10 miembros está opcionalmente sustituido por 1, 2, 3, o 4 sustituyentes seleccionados independientemente de OH, halo, C^6 alcoxi, y C^6 haloalquilo. En algunas realizaciones, R1 se selecciona del grupo formado por H y heterocicloalquilo de 4-10 miembros, donde el heterocicloalquilo de 4-10 miembros está opcionalmente sustituido por 1, 2, 3 o 4 sustituyentes seleccionados independientemente entre OH, halo, C-6 alcoxi, y C<1-6>haloalquilo. En algunas realizaciones, R1 se selecciona del grupo formado por H y un heterocicloalquilo bicíclico de 8-10 miembros, donde el heterocicloalquilo bicíclico de 8-10 miembros está opcionalmente sustituido por 1, 2, 3, o 4 sustituyentes seleccionados independientemente de OH, halo, C^6 alcoxi y C<1-6>haloalquilo.

En algunas realizaciones, R1 es un heterocicloalquilo de 4-10 miembros, donde el heterocicloalquilo de 4-10 miembros está opcionalmente sustituido por 1,2, 3, o 4 sustituyentes seleccionados independientemente de OH, halo, C^alcoxi, y C<1-6>haloalquilo. En algunas realizaciones, R1 es un heterocicloalquilo de 4-10 miembros, donde el heterocicloalquilo de 4-10 miembros no está sustituido. En algunas realizaciones, R1 es un heterocicloalquilo bicíclico de 8-10 miembros, donde el heterocicloalquilo bicíclico de 8-10 miembros no está sustituido. En algunas realizaciones, R1 se selecciona de H y

En algunas realizaciones, R1 es H. En algunas realizaciones, R1 es:

En algunas realizaciones, R1 es R5

En algunas realizaciones, L2 se selecciona del grupo formado por -(Ci-6 alquileno)-(C<3>-io cicloalquileno)-, -(Ci-6 alquileno)-(C6-ioarileno)-, -(C<1 -6>alquileno)-(heterocicloalquileno de 4-10 miembros)-, -(C<1 -6>alquileno)-(heteroarileno de 5-10 miembros)-, - C(O)-, y-C(O)(C<1 -6>alquileno)-.

En algunas realizaciones, L2 se selecciona del grupo formado por -(C<1 -6>alquileno)-(heteroarileno de 5-10 miembros)-, -C(O)-, y -C(O)(C<1-6>alquileno)-. En algunas realizaciones, L2 se selecciona del grupo formado por -CH<2>-(heteroarileno de 5-10 miembros)-, -C(O)-, -C(O)CH<2>-, y -C(O)CH<2>CH<2>CH<2>CH<2>-. En algunas realizaciones, L2 se selecciona del grupo formado por -CH<2>-(heteroarileno de 5-6 miembros)-, -C(O)-, -C(O)CH<2>-, y -C(O)CH<2>CH<2>CH<2>CH<2>-. En algunas realizaciones, L2 se selecciona del grupo formado por -(C<1-6>alquileno)-(triazolilo)-, -C(O)-, y -C(O)(C<1-6>alquileno)-. En algunas realizaciones, L2 se selecciona del grupo formado por -CH<2>-(triazolillo)-, -C(O)-, y -C(O)CH<2>-, y -C(O)(nbutileno)-.

En algunas realizaciones, R2 se selecciona del grupo formado por C<1-6>alcoxi, C<6 -10>arilo, heterocicloalquilo de 4-10 miembros, y heteroarilo de 5-10 miembros, donde cada C<1-6>alcoxi, C<6-10>arilo, heterocicloalquilo de 4-10 miembros y heteroarilo de 5-10 miembros está opcionalmente sustituido por 1, 2, 3 o 4 sustituyentes seleccionados independientemente de OH, halo, C<1-6>alcoxi, y C<1-6>haloalquilo. En algunas realizaciones, R2 se selecciona del grupo formado por C<1 -6>alcoxi, C<6 -10>arilo, heterocicloalquilo de 4-10 miembros, y heteroarilo de 5-10 miembros, donde cada C<1-6>alcoxi, C<6-10>arilo, heterocicloalquilo de 4-10 miembros, y heteroarilo de 5-10 miembros está opcionalmente sustituido por un sustituyente seleccionado independientemente de OH, halo, C<1-6>alcoxi, y C<1-6>haloalquilo.

En algunas realizaciones, R2 se selecciona del grupo formado por C<1-6>alcoxi, fenilo, heterocicloalquilo bicíclico de 8 10 miembros, y heteroarilo bicíclico de 8-10 miembros, donde cada C<1-6>alcoxi, fenilo, heterocicloalquilo bicíclico de 8 10 miembros, y heteroarilo de 8-10 miembros está opcionalmente sustituido por 1,2, 3, o 4 sustituyentes seleccionados independientemente de OH, halo, C<1-6>alcoxi, y C<1-6>haloalquilo. En algunas realizaciones, R2 se selecciona del grupo formado por C<1-6>alcoxi, fenilo, heterocicloalquilo bicíclico de 8-10 miembros, y heteroarilo bicíclico de 8-10 miembros, donde cada C<1-6>alcoxi, fenilo, el heterocicloalquilo bicíclico de 8-10 miembros, y el heteroarilo de 8-10 miembros está opcionalmente sustituido por un sustituyente seleccionado independientemente de OH, halo, C<1-6>alcoxi, y C<1-6>haloalquilo.

En algunas realizaciones, R2 es C<1-6>alcoxi, donde el C<1-6>alcoxi es sustituido por C<1-6>haloalquilo. En algunas realizaciones, R2 es C<1-6>alcoxi, donde el C<1-6>alcoxi es sustituido por -CH<2>CH<2>F. En algunas realizaciones, el C<1-6>alcoxi es -CH<2>CH<2>O-CH<2>CH<2>O-. En algunas realizaciones, R<2>es -CH<2>CH<2>OCH<2>CH<2>OCH<2>CH<2>F.

En algunas realizaciones, R2 es C<6-10>arilo, donde el C<6-10>arilo es sustituido por un grupo halo. En algunas realizaciones, R2 es fenilo, donde el fenilo es sustituido por un grupo halo. En algunas realizaciones, R2 es fenilo, donde el fenilo está sustituido por fluoro. En algunas realizaciones, el fluoro es [18F]. En algunas realizaciones, R2 es 4- fluorofenilo. En algunas realizaciones, R2 es 4-[18F]fenilo.

En algunas realizaciones, R2 es un heterocicloalquilo de 4-10 miembros, donde el heterocicloalquilo de 4-10 miembros está opcionalmente sustituido por 1, 2, 3, o 4 sustituyentes seleccionados independientemente de OH, halo, y C<1-6>haloalquilo. En algunas realizaciones, R2 es un heterocicloalquilo de 4-10 miembros, donde el heterocicloalquilo de 4 10 miembros no está sustituido. En algunas realizaciones, R2 es un heterocicloalquilo bicíclico de 8-10 miembros, donde el heterocicloalquilo bicíclico de 8-10 miembros no está sustituido. En algunas realizaciones, R2 es:

En algunas realizaciones, R2 es un grupo heteroarilo de 5-10 miembros, donde el heteroarilo de 5-10 miembros está opcionalmente sustituido por un grupo OH. En algunas realizaciones, R2 es un grupo heteroarilo de 8-10 miembros, donde el heteroarilo de 8-10 miembros está opcionalmente sustituido por un grupo OH. En algunas realizaciones, R2 es un grupo heteroarilo bicíclico de 8-10 miembros, donde el heteroarilo bicíclico de 8-10 miembros está opcionalmente sustituido por un grupo OH. En algunas realizaciones, R2 es un grupo indol, donde el indol está opcionalmente sustituido por un grupo OH. En algunas realizaciones, R2 es 5-hidroxiindol. En algunas realizaciones, R2 es R5. En algunas realizaciones, L3 se selecciona del grupo formado por un enlace, - C(O)NRa3-, -C(O)N(Ra3)(C<1 -6>alquileno)-, -C(O)N(Ra3)(C<1-6>alquileno)-di(C<1-6>alquilo)amino, y -C(O)N(Ra3)(C<1-6>alquilenoxi)-. En algunas realizaciones, L3 se selecciona del grupo formado por un enlace, -C(O)N(Ra3)(C<1-6>alquileno)-, -C(O)N(Ra3)(C<1-6>alquileno)-di(C<1-6>alquilo)amino, y -C(O)N(Ra3)(CC<1-6>alquilenoxi)-. En algunas realizaciones, L3 se selecciona del grupo formado por un enlace, -C(O)NH(C<1-6>alquileno)-, -C(O)NH(C1-6alquileno)-N(CH3)2, y -C(O)NH(C<1-6>alquilenoxi)-.

En algunas realizaciones, L3 se selecciona del grupo formado por un enlace, - C(O)NRa3-, -C(O)N(Ra3)(C<1 -6>alquileno)-, y -C(O)N(Ra3)(C<1-6>alquilenoxi)-. En algunas realizaciones, L3 se selecciona del grupo formado por un enlace, -C(O)N(Ra3) (C<1-6>alquileno)-, y -C(O)N(Ra3)(C<1-6>alquilenoxi). En algunas realizaciones, L3 se selecciona del grupo formado por un enlace, -C(O)NH(C<1-6>alquileno)-, y -C(O)NH(C<1-6>alquilenoxi. En algunas realizaciones, L3 es un enlace. En algunas realizaciones, L3 es - C(O)NH(C<1 -6>alquileno)-. En algunas realizaciones, L3es -C(O)NH(hexileno)-. En algunas realizaciones, L3 es -C(O)NH(C<1-6>alquilenoxi)-. En algunas realizaciones, L3 es -C(O)NHCH<2>CH<2>OCH<2>CH<2>O. En algunas realizaciones, L3 es -C(O)N(Ra3)(C<1-6>alquileno)-di(C<1-6>alquilo)amino. En algunas realizaciones, L3 es -C(O)NH(C1-6alquileno)-N(CH3)2.

En algunas realizaciones, R3 se selecciona del grupo formado por H, C<1-6>haloalquilo, C<3-10>cicloalquilo, C<6 -10>arilo, heterocicloalquilo de 4-10 miembros, heteroarilo de 5-10 miembros, y -C(O)N(Ra3)(C<1-6>haloalcoxi), donde cada C<1.6>haloalquilo, C<3-10>cicloalquilo, C<6-10>arilo, heterocicloalquilo de 4-10 miembros y heteroarilo de 5-10 miembros está opcionalmente sustituido por 1, 2, 3 o 4 sustituyentes seleccionados independientemente entre OH, halo, C<1-6>alcoxi, y C<1-6>haloalquilo. En algunas realizaciones, R3 se selecciona del grupo formado por H, C<1-6>haloalquilo, heteroarilo de 5-10 miembros, y -C(O)N(Ra3)(C<1-6>haloalcoxi), donde cada C<1-6>haloalquilo, y heteroarilo de 5-10 miembros está opcionalmente sustituido por 1, 2, 3 o 4 sustituyentes seleccionados independientemente entre OH, halo, C<1-6>alcoxi, y C<1-6>haloalquilo. En algunas realizaciones, R3 se selecciona del grupo formado por H, C<1-6>haloalquilo, heteroarilo de 5-10 miembros, y -C(O)N(Ra3)(C<1-6>haloalcoxi), donde cada C<1-6>haloalquilo, y el heteroarilo de 5-10 miembros está opcionalmente sustituido por un sustituyente seleccionado independientemente entre OH, halo, C<1-6>alcoxi, y C<1-6>haloalquilo.

En algunas realizaciones, R3 se selecciona del grupo formado por H, C<1-6>haloalquilo, C<3-10>cicloalquilo, C<6-10>arilo, heterocicloalquilo de 4-10 miembros y heteroarilo de 5-10 miembros, donde cada C<1-6>haloalquilo, C<3-10>cicloalquilo, C<6-10>arilo, heterocicloalquilo de 4-10 miembros y heteroarilo de 5-10 miembros está opcionalmente sustituido por 1,2, 3 o 4 sustituyentes seleccionados independientemente de OH, halo, C<1-6>alcoxi, y C<1-6>haloalquilo. En algunas realizaciones, R3 se selecciona del grupo formado por H, C<1-6>haloalquilo, y heteroarilo de 5-10 miembros, donde cada C<1-6>haloalquilo y heteroarilo de 5-10 miembros está opcionalmente sustituido por 1, 2, 3 o 4 sustituyentes seleccionados independientemente de OH, halo, C<1-6>alcoxi, y C<1-6>haloalquilo. En algunas realizaciones, R3 se selecciona del grupo formado por H, C<1-6>haloalquilo, y heteroarilo de 5-10 miembros, donde cada C<1-6>haloalquilo y heteroarilo de 5-10 miembros está opcionalmente sustituido por un sustituyente seleccionado independientemente de OH, halo, C ^alcoxi, y C<1-6>haloalquilo.

En algunas realizaciones, R3 se selecciona del grupo formado por H, C<1-6>haloalquilo, un heteroarilo bicíclico de 8-10 miembros, y -C(O)N(Ra3)(C<1-6>haloalcoxi), donde cada C<1-6>haloalquilo, y el heteroarilo bicíclico de 8-10 miembros está opcionalmente sustituido por 1, 2, 3 o 4 sustituyentes seleccionados independientemente de OH, halo, C<1-6>alcoxi, y C<1-6>haloalquilo. En algunas realizaciones, R3 se selecciona del grupo formado por H, C<1-6>haloalquilo, heteroarilo bicíclico de 8-10 miembros, y -C(O)N(Ra3)(C<1-6>haloalcoxi), donde cada C<1-6>haloalquilo, y el heteroarilo bicíclico de 8 10 miembros está opcionalmente sustituido por un sustituyente seleccionado independientemente de OH, halo, C<1-6>alcoxi y C<1-6>haloalquilo. En algunas realizaciones, R3 se selecciona del grupo formado por H, C<1-6>haloalquilo, heteroarilo bicíclico de 8-10 miembros, y -C(O)N(Ra3)(C<1-6>haloalcoxi), donde el heteroarilo de 8-10 miembros está opcionalmente sustituido por un grupo OH.

En algunas realizaciones, R3 se selecciona del grupo formado por H, C<1-6>haloalquilo, y un heteroarilo bicíclico de 8 10 miembros, donde cada C<1-6>haloalquilo, y heteroarilo bicíclico de 8-10 miembros está opcionalmente sustituido por 1, 2, 3, o 4 sustituyentes seleccionados independientemente de OH, halo, C<1-6>alcoxi, y C<1 -6>haloalquilo. En algunas realizaciones, R3 se selecciona del grupo formado por H, C<1-6>haloalquilo, y heteroarilo bicíclico de 8-10 miembros, donde cada C<1-6>haloalquilo, y heteroarilo bicíclico de 8-10 miembros está opcionalmente sustituido por un sustituyente seleccionado independientemente entre OH, halo, C<1-6>alcoxi, y C<1-6>haloalquilo. En algunas realizaciones, R3 se selecciona del grupo formado por H, C<1-6>haloalquilo, y heteroarilo bicíclico de 8-10 miembros, donde el heteroarilo de 8-10 miembros está opcionalmente sustituido por un grupo OH.

En algunas realizaciones, R3 es H. En algunas realizaciones, R3 es C<1-6>haloalquilo. En algunas realizaciones, R3 es C<1-4>haloalquilo. En algunas realizaciones, R3 es -CH<2>CH<2>F. En algunas realizaciones, R3 es un heteroarilo de 5-10 miembros opcionalmente sustituido por un sustituyente seleccionado independientemente entre OH, halo, C<1-6>alcoxi, y C<1-6>haloalquilo. En algunas realizaciones, R3 es un heteroarilo bicíclico de 8-10 miembros opcionalmente sustituido por un sustituyente seleccionado independientemente de OH, halo, C<1-6>alcoxi, y C<1-6>haloalquilo. En algunas realizaciones, R3 es un heteroarilo bicíclico de 8-10 miembros opcionalmente sustituido por un grupo OH. En algunas realizaciones, R3 es un grupo indol, donde el indol está opcionalmente sustituido por un grupo OH. En algunas realizaciones, R3 es 5-hidroxiindol. En algunas realizaciones, R3 es -C(O)N(R R3)(C<1-6>haloalcoxi). En algunas realizaciones, R3-C(O)NH(C<1-6>haloalcoxi). En algunas realizaciones, R3 es -C(O)NHCH<2>CH<2>OCH<2>CH<2>OCH<2>CH<2>F. En algunas realizaciones, R3 es -C(O)NHCH<2>CH<2>OCH<2>CH<2>OCH<2>CH<2>-18F. En algunas realizaciones, R3 es R5.

En algunas realizaciones, L3-R3 forma un grupo oxo (es decir =O).

En algunas realizaciones, R4 es H.

En algunas realizaciones, R1, R2, y R3 son cada uno un grupo R5 seleccionado independientemente. En algunas realizaciones, R1, R2, y R3 son cada uno el mismo grupo R5.

En algunas realizaciones, cada Ra1, Ra2 y Ra3 es H.

En algunas realizaciones:

L1 se selecciona del grupo formado por un enlace, -C(O)-, -C(O)(C<1-6>alquileno)-, y -C(O)(C<1-6>alquilenoxi)-;

R1 se selecciona del grupo formado por H, C<3-10>cicloalquilo, C<6-10>arilo, heterocicloalquilo de 4-10 miembros y heteroarilo de 5-10 miembros, donde cada C<1-6>alquilo, C<3-10>cicloalquilo, C<6-10>arilo, el heterocicloalquilo de 4-10 miembros y el heteroarilo de 5-10 miembros están opcionalmente sustituidos por 1, 2, 3 o 4 sustituyentes seleccionados independientemente entre OH, halo y C<1-6>haloalquilo;

L2 se selecciona del grupo formado por-(C<1-6>alquileno)-(C<3-10>cicloalquileno-, -(C<1-6>alquileno)-(C<6-10>arileno)-, -(C<1-6>alquileno)-( heterocicloalquileno de 4-10 miembros) (C<1.6>alquileno)-( heteroarileno de 5-10 miembros)-, -C(O)-, y -C(O)(C<1-6>alquileno)-;

R2 se selecciona del grupo formado por C<1-6>alcoxi, C<6-10>arilo, heterocicloalquilo de 4-10 miembros y heteroarilo de 5 10 miembros, donde cada C<1-6>alcoxi, C<6-10>arilo, heterocicloalquilo de 4-10 miembros y heteroarilo de 5-10 miembros está opcionalmente sustituido por 1, 2, 3 o 4 sustituyentes seleccionados independientemente de OH, halo, y C<1-6>haloalquilo;

L3 se selecciona del grupo formado por un enlace, -C(O)NRa3-, -C(O)N(Ra3)(C<1-6>alquileno)-, -C(O)N(Ra3)(C<1-6>alquileno)-di(C<1-6>alquilo)amino, y -C(O)N(Ra3)(C<1-6>alquilenoxi)-; y

R3 se selecciona del grupo formado por H, C<1-6>haloalquilo, C<3-10>cicloalquilo, C<6-10>arilo, heterocicloalquilo de 4-10 miembros, heteroarilo de 5-10 miembros, y - C(O)N(Ra3)(C<1-6>haloalcoxi), donde cada C<1-6>haloalquilo, C<3-10>cicloalquilo, C<6-10>arilo, heterocicloalquilo de 4-10 miembros y heteroarilo de 5-10 miembros están opcionalmente sustituidos por 1, 2, 3 o 4 sustituyentes seleccionados independientemente entre OH, halo y C<1-6>haloalquilo;

o alternativamente, -L3-R3 forma un grupo oxo.

En algunas realizaciones:

L1 se selecciona del grupo formado por un enlace y -C(O)(C<1-6>alquileno)-;

R1 se selecciona del grupo formado por H y un heterocicloalquilo de 4-10 miembros, donde el heterocicloalquilo de 4 10 miembros está opcionalmente sustituido por 1, 2, 3, o 4 sustituyentes seleccionados independientemente de OH, halo, y C<1-6>haloalquilo;

L2 se selecciona del grupo formado por -(C<1-6>alquileno-(heteroarileno de 5-10 miembros)-, -C(O)-, y -C(O)(C<1-6>alquileno);

R2 se selecciona del grupo formado por C<1-6>alcoxi, C<6-10>arilo, heterocicloalquilo de 4-10 miembros y heteroarilo de 5 10 miembros, donde cada C<1-6>alcoxi, C<6-10>arilo, heterocicloalquilo de 4-10 miembros, y heteroarilo de 5-10 miembros está opcionalmente sustituido por 1, 2, 3, o 4 sustituyentes seleccionados independientemente de OH, halo, y C<1-6>haloalquilo;

L3 se selecciona del grupo formado por un enlace, -C(O)N(Ra3)(C<1-6>alquileno)-, - C(O)N(Ra3)(C<1-6>alquileno)-di(C<1-6>alquil)amino, y -C(O)N(Ra3)(C<1-6>alquilenoxi)-; y

R3 se selecciona del grupo formado por H, C<1-6>haloalquilo, heteroarilo de 5-10 miembros, y -C(O)N(Ra3)(C<1-6>haloalcoxi), donde cada C<1-6>haloalquilo, y heteroarilo de 5-10 miembros está opcionalmente sustituido por 1, 2, 3 o 4 sustituyentes seleccionados independientemente de OH, halo, y C<1-6>haloalquilo;

o alternativamente, L3-R3 forma un grupo oxo.

En algunas realizaciones:

L1 se selecciona del grupo formado por un enlace y -C(O)(C<1-6>alquileno)-;

R1 se selecciona del grupo formado por H y un heterocicloalquilo de 4-10 miembros, donde el heterocicloalquilo de 4 10 miembros está opcionalmente sustituido por un sustituyente seleccionado independientemente de OH, halo, y C<1-6>haloalquilo;

L2 se selecciona del grupo formado por -(C<1-6>alquileno)-( heteroarileno de 5-10 miembros)-, -C(O)-, y -C(O)(C<1-6>alquileno);

R2 se selecciona del grupo formado por C<1-6>alcoxi, C<6-10>arilo, heterocicloalquilo de 4-10 miembros y heteroarilo de 5 10 miembros, donde cada C<1-6>alcoxi, C<6-10>arilo, heterocicloalquilo de 4-10 miembros, y heteroarilo de 5-10 miembros está opcionalmente sustituido por un sustituyente seleccionado independientemente entre OH, halo, y C<1-6>haloalquilo; L3 se selecciona del grupo formado por un enlace, -C(O)N(Ra3)(C<1-6>alquileno)-, - C(O)N(Ra<3>)(C<1-6>alquileno)-di(C<1-6>alquilo)amino, y -C(O)N(Ra3)(C<1>-<6>alquilenoxi)-; y

R3 se selecciona del grupo formado por H, C<1-6>haloalquilo, heteroarilo de 5-10 miembros, y -C(O)N(Ra3)(C<1-6>haloalcoxi), donde cada C<1-6>haloalquilo, y el heteroarilo de 5-10 miembros está opcionalmente sustituido por un sustituyente seleccionado independientemente entre OH, halo, y C<1-6>haloalquilo;

o alternativamente, L3-R3 forma un grupo oxo.

En algunas realizaciones R4 es H. En algunas realizaciones Ra3 es H.

En algunas realizaciones:

L1 se selecciona del grupo formado por un enlace y -C(O)(n-butileno)-;

R1 se selecciona del grupo formado por H y heterocicloalquilo bicíclico no sustituido de 8-10 miembros;

L2 se selecciona del grupo formado por -(C<1-6>alquileno)-( heteroarileno de 5-6 miembros)-, -C(O)-, y -C(O)(C<1-6>alquileno);

R2 se selecciona del grupo formado por C<1-6>alcoxi, fenilo, heterocicloalquilo bicíclico de 8-10 miembros, y heteroarilo bicíclico de 8-10 miembros, donde cada uno C<1-6>alcoxi, fenilo, el heterocicloalquilo bicíclico de 8-10 miembros y el heteroarilo bicíclico de 8-10 miembros están opcionalmente sustituidos por un sustituyente seleccionado independientemente de OH, halo, and C<1-6>haloalquilo;

L3 se selecciona del grupo formado por un enlace, -C(O)NH(C<1-6>alquileno)-, - C(O)N(Ra3)(C<1-6>alquileno)-di(C<1-6>alquilo)amino, y-C(O)NH(C<1>-<6>alquilenoxi)-; y

R3 se selecciona del grupo formado por H, C<1-6>haloalquilo, heteroarilo bicíclico de 8-10 miembros, y -C(O)N(Ra3)(C<1-6>haloalcoxi), donde cada C<1-6>haloalquilo y heteroarilo bicíclico de 8-10 miembros está opcionalmente sustituido por un sustituyente seleccionado independientemente de OH, halo, y C<1-6>haloalquilo;

o alternativamente, L3-R3 forma un grupo oxo.

En algunas realizaciones:

L1 se selecciona del grupo formado por un enlace y -C(O)(n-butileno)-;

R1 se selecciona del grupo formado por H y

L2 se selecciona del grupo formado por -(C<1-6>alquileno)-(triazolilo)-, -C(O)-, y -C(O)(C<1-6>alquileno)-;

R2 se selecciona del grupo formado por C<1-6>alcoxi, fenilo, heterocicloalquilo bicíclico de 8-10 miembros, y heteroarilo bicíclico de 8-10 miembros, donde cada C<1-6>alcoxi, fenilo, el heterocicloalquilo bicíclico de 8-10 miembros, y el heteroarilo bicíclico de 8-10 miembros está opcionalmente sustituido por un sustituyente seleccionado independientemente de OH, halo, y C<1-6>haloalquilo;

L3 se selecciona del grupo formado por un enlace, -C(O)NH(C<1-6>alquileno)-, - C(O)NH(C<1-6>alquileno)-N(CH<3>)<2>, y -C(O)NH(C<1>-<6>alquilenoxi)-; y

R3 se selecciona del grupo formado por H, C<1-6>haloalquilo, heteroarilo bicíclico de 8-10 miembros, y -C(O)N(Ra3)(C<1>-6 haloalcoxi), donde cada C<1-6>haloalquilo y un heteroarilo bicíclico de 8-10 miembros está opcionalmente sustituido por un sustituyente seleccionado independientemente de OH, halo, y C<1-6>haloalquilo.

En algunas realizaciones:

L1 se selecciona del grupo formado por un enlace y -C(O)(n-butileno)-;

R1 se selecciona del grupo formado por H y

L2 se selecciona del grupo formado por -CH<2>-(triazolilo)-, -C(O)-, y - C(O)(C<1-6>alquileno)-;

R2 se selecciona del grupo formado por C<1-6>alcoxi, fenilo e indol, donde cada C<1-6>alcoxi, fenilo,

e indol está opcionalmente sustituido por un sustituyente seleccionado independientemente entre OH, halo y C<1-6>haloalquilo;

L3 se selecciona del grupo formado por un enlace, -C(O)NH(C<1-6>alquileno)-, - C(O)NH(C<1-6>alquileno)-N(CH<3>)<2>y -C(O)NH(C<1 -6>alquilenoxi)-; y

R3 se selecciona del grupo formado por H, C<1 -6>haloalquilo, - C(O)NHCH<2>CH<2>OCH<2>CH<2>OCH<2>CH<2>F, e indol, donde cada C<1-6>haloalquilo e indol está opcionalmente sustituido por un sustituyente seleccionado independientemente entre OH, halo, y C<1-6>haloalquilo.

En algunas realizaciones:

L1 se selecciona del grupo formado por un enlace, -C(O)-, -C(O)(Ci-6 alquileno)-, y -C(O)(Ci-6 alquilenoxi)-;

R1 se selecciona del grupo formado por H, C<3-10>cicloalquilo, C<6-10>arilo, heterocicloalquilo de 4-10 miembros y heteroarilo de 5-10 miembros, donde cada C<1-6>alquilo, C<3-10>cicloalquilo, C<6-10>arilo, heterocicloalquilo de 4-10 miembros y heteroarilo de 5-10 miembros está opcionalmente sustituido por 1, 2, 3 o 4 sustituyentes seleccionados independientemente de OH, halo y C<1-6>haloalquilo;

L2 se selecciona del grupo formado por -(C<1-6>alquileno)-(C<3-10>cicloalquileno)-, -(C<1-6>alquileno)-(C<6-10>arileno)-, -(C<1.6>alquileno)-( heterocicloalquileno de 4-10 miembros)-, -(C<1-6>alquileno)-(heteroarileno de 5-10 miembros)-, -C(O)-, y -C(O)(C<1-6>alquileno)-;

L3 se selecciona del grupo formado por un enlace, -C(O)NRa3-, -C(O)N(Ra3)(C<1-6>alquileno)-, y-C(O)N(Ra3)(C<1-6>alquilenoxi); y

R3 se selecciona del grupo formado por H, C<1-6>haloalquilo, C<3-10>cicloalquilo, C<6-10>arilo, heterocicloalquilo de 4-10 miembros y heteroarilo de 5-10 miembros, donde cada C<1-6>haloalquilo, C<3-10>cicloalquilo, C<6-10>arilo, heterocicloalquilo de 4-10 miembros y heteroarilo de 5-10 miembros está opcionalmente sustituido por 1, 2, 3 o 4 sustituyentes seleccionados independientemente de OH, halo, y C<1-6>haloalquilo;

o alternativamente, -L3-R3 forma un grupo oxo.

En algunas realizaciones:

L1 se selecciona del grupo formado por un enlace y -C(O)(C<1-6>alquileno)-;

R1 se selecciona del grupo que consiste en H y heterocicloalquilo de 4-10 miembros, donde el heterocicloalquilo de 4 10 miembros está opcionalmente sustituido por 1, 2, 3, o 4 sustituyentes seleccionados independientemente de OH, halo, y C<1-6>haloalquilo;

R2 se selecciona del grupo formado por C<1-6>alcoxi, C<6-10>arilo, heterocicloalquilo de 4-10 miembros, y heteroarilo de 5 10 miembros, donde cada C<1-6>alcoxi, C<6-10>arilo, heterocicloalquilo de 4-10 miembros y heteroarilo de 5-10 miembros está opcionalmente sustituido por 1, 2, 3 o 4 sustituyentes seleccionados independientemente de OH, halo, y C<1-6>haloalquilo;

L3 se selecciona del grupo formado por un enlace, -C(O)N(Ra3)(C<1-6>alquileno)-, y -C(O)N(Ra<3>)(C<1-6>alquilenoxi)-; y R3 se selecciona del grupo formado por H, C<1-6>haloalquilo, y heteroarilo de 5-10 miembros, donde cada C<1-6>haloalquilo, y el heteroarilo de 5-10 miembros está opcionalmente sustituido por 1, 2, 3 o 4 sustituyentes seleccionados independientemente entre OH, halo, y C<1-6>haloalquilo;

o alternativamente, -L3-R3 forma un grupo oxo.

En algunas realizaciones:

L1 se selecciona del grupo formado por un enlace y -C(O)(C<1-6>alquileno)-;

R1 se selecciona del grupo formado por un enlace H y heterocicloalquilo de 4-10 miembros, donde el heterocicloalquilo de 4-10 miembros está opcionalmente sustituido por un sustituyente seleccionado independientemente de OH, halo, y C<1-6>haloalquilo;

R2 se selecciona del grupo formado por C<1-6>alcoxi, C<6-10>arilo, heterocicloalquilo de 4-10 miembros, y heteroarilo de 5 10 miembros, donde cada C<1-6>alcoxi, C<6-10>arilo, heterocicloalquilo de 4-10 miembros, y heteroarilo de 5-10 miembros está opcionalmente sustituido por un sustituyente seleccionado independientemente de OH, halo, y C<1-6>haloalquilo; L3 se selecciona del grupo formado por un enlace, -C(O)N(Ra3)(C<1-6>alquileno)-, y -C(O)N(Ra<3>)(C<1-6>alquilenoxi)-; y R3 se selecciona del grupo formado por H, C<1-6>haloalquilo, y heteroarilo de 5-10 miembros, donde cada uno C<1-6>haloalquilo, y el heteroarilo de 5-10 miembros está opcionalmente sustituido por un sustituyente seleccionado independientemente de OH, halo, y C<1-6>haloalquilo;

o alternativamente, -L3-R3 forma un grupo oxo.

En algunas realizaciones R4 es H. En algunas realizaciones Ra3 es H.

En algunas realizaciones:

L1 se selecciona del grupo formado por un enlace y -C(O)(n-butileno)-;

R1 se selecciona del grupo formado por H y heterocicloalquilo bicíclico de 8-10 miembros no sustituido;

R2 se selecciona del grupo formado por C<1-6>alcoxi, fenilo, heterocicloalquilo bicíclico de 8-10 miembros, y heteroarilo bicíclico de 8-10 miembros, donde cada C<1-6>alcoxi, fenilo, heterocicloalquilo bicíclico de 8-10 miembros y heteroarilo bicíclico de 8-10 miembros están opcionalmente sustituidos por un sustituyente seleccionado independientemente de OH, halo, y C<1-6>haloalquilo;

L3 se selecciona del grupo formado por un enlace, -C(O)NH(C<1-6>alquileno)-, y - C(O)NH(C<1-6>alquilenoxi)-; y R3 se selecciona del grupo formado por H, C<1-6>haloalquilo, y heteroarilo bicíclico de 8-10 miembros, donde cada C<1-6>haloalquilo y heteroarilo bicíclico de 8-10 miembros está opcionalmente sustituido por un sustituyente seleccionado independientemente entre OH, halo, y C<1-6>haloalquilo;

o alternativamente, -L3-R3 forma un grupo oxo.

En algunas realizaciones:

L1 se selecciona del grupo formado por un enlace y -C(O)(n-butileno)-;

R1 se selecciona del grupo formado por H y

R2 se selecciona del grupo formado por C<1-6>alcoxi, fenilo, heterocicloalquilo bicíclico de 8-10 miembros y heteroarilo bicíclico de 8-10 miembros, donde cada C<1-6>alcoxi, fenilo, heterocicloalquilo bicíclico de 8-10 miembros y heteroarilo bicíclico de 8-10 miembros está opcionalmente sustituido por un sustituyente seleccionado independientemente de OH, halo, y C<1-6>haloalquilo;

L3 se selecciona del grupo formado por un enlace -C(O)NH(C<1-6>alquileno)-, y - C(O)NH(C<1-6>alquilenoxi)-; y R3 se selecciona del grupo formado por H, C<1-6>haloalquilo, y heteroarilo bicíclico de 8-10 miembros, donde cada uno C<1-6>haloalquilo y el heteroarilo bicíclico de 8-10 miembros está opcionalmente sustituido por un sustituyente seleccionado independientemente entre OH, halo y C<1-6>haloalquilo.

En algunas realizaciones:

L1 se selecciona del grupo formado por un enlace y -C(O)(n-butileno)-;

R1 se selecciona del grupo formado por H y

R2 se selecciona del grupo formado por C<1-6>alcoxi, fenilo,

e indol, donde cada C<1.6>alcoxi, fenilo, y el indol está opcionalmente sustituido por un sustituyente seleccionado independientemente entre OH, halo y C<1-6>haloalquilo;

L3 se selecciona del grupo formado por un enlace, -C(O)NH(C<1-6>alquileno)-, y - C(O)NH(C<1-6>alquilenoxi)-; y R3 se selecciona del grupo formado por H, C<1-6>haloalquilo, e indol, donde cada C<1-6>haloalquilo e indol está opcionalmente sustituido por un sustituyente seleccionado independientemente entre OH, halo y C<1-6>haloalquilo. En algunas realizaciones:

L1 es un enlace;

R1 es H;

L3 es un enlace;

y R3 es H.

En algunas realizaciones:

L1 es un enlace;

R1 es H;

L2 se selecciona del grupo formado por-C(O)- and -C(O)(C<1>-<6>alquileno)-.

R2 es C<6>-<10>arilo que está opcionalmente sustituido por 1, 2, 3 o 4 sustituyentes seleccionados independientemente entre OH, halo y C<1-6>haloalquilo;

L3 es un enlace; y

R3 es H.

En algunas realizaciones:

L1 es un enlace;

R1 es H;

L2 es -C(O)-.

L3 es un enlace; y

R3 es H.

En algunas realizaciones:

L1 es un enlace;

R1 es H; y

L3-R3 forma un grupo oxo.

En algunas realizaciones:

L1 es un enlace;

R1 es H;

L2 se selecciona del grupo formado por -C(O)-, -C(O)O-, y -C(O)NRa2-;

-L3-R3 forma un grupo oxo; y

Ra2 es H.

En algunas realizaciones:

L1 es un enlace;

R1 es H;

L2 es -C(O)NRa2-;

R2 es C<6>-<1>oarilo que está opcionalmente sustituido por 1, 2, 3 o 4 sustituyentes seleccionados independientemente entre OH, halo y C<1-6>haloalquilo;

-L3-R3 forma un grupo oxo;

y Ra2 es H.

En algunas realizaciones el compuesto de Fórmula VI o de Fórmula I es un compuesto de Fórmula II:

o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, donde R1, L1, L2, y R2 son los definidos anteriormente. En algunas realizaciones, el compuesto de Fórmula VI o de Fórmula I es un compuesto de Fórmula III:

o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, donde L2y R2 son los definidos anteriormente.

En algunas realizaciones, el compuesto de Fórmula VI o de Fórmula I es un compuesto de Fórmula IV:

o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, donde L2, R2, L3 y R3 son como los definidos anteriormente. En algunas realizaciones, el compuesto de Fórmula VI o de Fórmula I es un compuesto de Fórmula V:

o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, donde L2 and R2 son como los definidos anteriormente.

En algunas realizaciones, el compuesto de Fórmula VI o Fórmula I es un compuesto seleccionado del grupo formado por:

��

o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.

En algunas realizaciones, el compuesto de Fórmula VI o Fórmula I es:

o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.

Síntesis

Como se apreciará, los compuestos aquí proporcionados, incluidas sus sales, pueden prepararse utilizando técnicas de síntesis orgánica conocidas y pueden sintetizarse siguiendo cualquiera de las numerosas rutas de síntesis posibles.

La síntesis de los intermedios 1 y 2f se muestra en el Esquema 1. Brevemente, el ácido 5-hidroxi-indol acético (5-HIAA) se acopló con 5-hidroxi-L-triptófano utilizando N, N'--diclohexilcarbodiimida (DCC) y N-hidroxisuccinimida (NHS) como agentes de acoplamiento para obtener el intermedio 1 en una producción del 62%. El orden de adición (5-HIAA reaccionó primero con DCC y NHS) del sustrato minimizó la formación del subproducto de homoacoplamiento del 5-hidroxi-L-triptófano.

La reacción de trietilenglicol con cloruro de tosilo dio el intermedio 2a, seguido de la reacción con azida sódica que proporcionó el intermedio mono-sustituido 2b, que se trató con trifenilfosfeno y luego con agua para obtener el intermedio 2c. El intermedio 2c se protegió posteriormente con Boc, seguido de fluoración con TBAf a 60 °C para obtener el intermedio 2e. La desprotección Boc del intermedio 2e con TFA proporcionó el intermedio 2f y la producción global de los tres pasos fue del 50%.

Esquema 1

Los compuestos de Fórmula VI (por ej., compuestos de Fórmula I) aquí proporcionados también pueden prepararse utilizando métodos análogos a los mostrados en el Esquema 2, mediante la sustitución de los materiales de partida apropiados.

Esquema 2

Los compuestos de Fórmula VI (por ej., compuestos de Fórmula I) aquí proporcionados también pueden prepararse utilizando métodos análogos a los mostrados en el Esquema 3.

Esquema 3

Los compuestos de Fórmula VI (por ej., los compuestos de Fórmula I) aquí proporcionados también pueden prepararse utilizando métodos análogos a los mostrados en el Esquema 4.

Esquema 4

Los compuestos de Fórmula VI (por ej. los compuestos de Fórmula I) aquí proporcionados también pueden prepararse utilizando métodos análogos a los mostrados en el Esquema 5.

Esquema 5

Los compuestos de Fórmula VI (por ej., compuestos de Fórmula I) aquí proporcionados también pueden prepararse utilizando métodos análogos a los mostrados en el Esquema 6.

Esquema 6

Los compuestos de Fórmula VI (por ej., compuestos de Fórmula I) aquí proporcionados también pueden prepararse utilizando métodos análogos a los mostrados en el Esquema 7.

Esquema 7

X ' - H O O H

X ; - H O O i

Los compuestos radiomarcados de Fórmula VI (por ej., compuestos de Fórmula I) aquí proporcionados pueden prepararse, por ejemplo, utilizando métodos análogos a los que se muestran a continuación en el procedimiento proporcionado en el Esquema 8.

Esquema 8

Los métodos sintéticos para la incorporación de radioisótopos en compuestos orgánicos son bien conocidos en la técnica, y una persona con conocimientos ordinarios en la materia reconocerá fácilmente otros métodos aplicables a los compuestos aquí proporcionados.

Un experto en la materia apreciará que los procesos descritos no son los medios exclusivos mediante los cuales los compuestos aquí proporcionados pueden ser sintetizados y que se dispone de un amplio repertorio de reacciones orgánicas sintéticas para ser potencialmente empleadas en la síntesis de los compuestos aquí proporcionados. El experto en la materia sabe cómo seleccionar e implementar rutas sintéticas adecuadas. Los métodos sintéticos adecuados de los materiales de partida, intermedios y productos pueden identificarse consultando la bibliografía, incluyendo fuentes de referencia como: Advances in Heterocyclic Chemistry, Vols. 1-107 (Elsevier, 1963-2012); Journal of Heterocyclic Chemistry Vols. 1-49 (Journal of Heterocyclic Chemistry, 1964-2012); Carreira, et al. (Ed.) Science of Synthesis, Vols. 1-48 (2001-2010) and Knowledge Updates KU2010/1-4; 2011/1-4; 2012/1-2 (Thieme, 2001-2012); Katritzky, et al. (Ed.) Comprehensive Organic Functional Group Transformations, (Pergamon Press, 1996); Katritzky et al. (Ed.); Comprehensive Organic Functional Group Transformations II (Elsevier, 2nd Edition, 2004); Katritzky et al. (Ed.), Comprehensive Heterocyclic Chemistry (Pergamon Press, 1984); Katritzky et al., Comprehensive Heterocyclic Chemistry Ii, (Pergamon Press, 1996); Smith et al., March's Advanced Organic Chemistry: Reactions, Mechanisms, and Structure, 6th Ed. (Wiley, 2007); Trost et al. (Ed.), Comprehensive Organic Synthesis (Pergamon Press, 1991).

Las reacciones para preparar los compuestos aquí descritos pueden realizarse en disolventes adecuados que pueden seleccionarse fácilmente por un experto en la técnica de la síntesis orgánica. Los disolventes adecuados pueden ser sustancialmente no reactivos con los materiales de partida (reactivos), los intermedios o los productos a las temperaturas a las que se realizan las reacciones (por ej., temperaturas que pueden oscilar entre la temperatura de congelación del disolvente y la temperatura de ebullición del disolvente). Una reacción determinada puede llevarse a cabo en un disolvente o en una mezcla de más de un disolvente. En función del paso de reacción concreto, el experto puede seleccionar los disolventes adecuados para un paso de reacción determinado.

La preparación de los compuestos aquí descritos puede implicar la protección y desprotección de varios grupos químicos. La necesidad de protección y desprotección, así como la selección de los grupos protectores adecuados, los puede determinar fácilmente un experto en la materia. La química de los grupos protectores puede encontrarse, por ejemplo, en TW.Greene and P G. M. Wuts, Protective Groups in Organic Synthesis, 3rd Ed., Wiley & Sons, Inc., New York (1999).

Las reacciones pueden monitorizarse según cualquier método adecuado conocido en la técnica. Por ejemplo, la formación de productos puede controlarse por medios espectroscópicos, como la espectroscopia de resonancia magnética nuclear (por ej., 1H o 13C), la espectroscopia infrarroja, la espectrofotometría (por ej., UV-visible), la espectrometría de masas, o por métodos cromatográficos como la cromatografía líquida de alta resolución (HPLC), la cromatografía líquida-espectroscopia de masas (LCMS), o la cromatografía de capa fina (TLC). Aquellos expertos en la materia pueden purificar los compuestos por diversos métodos, como la cromatografía líquida de alta resolución (HPLC) y la cromatografía de sílice de fase normal.

En varios lugares de la presente especificación se describen sustituyentes de enlace divalente. Se pretende específicamente que cada sustituyente de enlace divalente incluya las formas anterior y posterior del sustituyente de enlace. Por ejemplo, -NR(CR'R")n-incluye tanto -NR(CR'R")n- como -(CR'R")nNR-. Cuando la estructura requiera claramente un grupo de enlace, las variables de Markush enumeradas para ese grupo se entenderán como grupos de enlace.

El término "n-miembros" donde n es un número entero describe típicamente el número de átomos que forman anillos en una fracción donde el número de átomos que forman anillos es n. Por ejemplo, el piperidinilo es un ejemplo de anillo heterocicloalquilo de 6 miembros, el pirazolilo es un ejemplo de anillo heteroarilo de 5 miembros, el piridilo es un ejemplo de anillo heteroarilo de 6 miembros y el 1,2,3,4-tetrahidro-naftaleno es un ejemplo de grupo cicloalquilo de 10 miembros.

Tal como se usa aquí, la frase "opcionalmente sustituido" significa no sustituido o sustituido. Tal como se usa aquí, el término “sustituido” significa que se elimina un átomo de hidrógeno y se sustituye por un sustituyente. Debe entenderse que la sustitución en un átomo determinado está limitada por la valencia.

A lo largo de las definiciones, el término "Cn-m" indica un intervalo que incluye los extremos, donde n y m son números enteros e indican el número de carbonos. Los ejemplos incluyen C<1-4>, C<1-6>, y similares.

Tal como se usa aquí, el término "Cn-m alquilo", empleado solo o en combinación con otros términos, se refiere a un grupo hidrocarburo saturado que puede ser de cadena recta o ramificada, con n a m carbonos. Ejemplos de moléculas de alquilo incluyen, entre otros, grupos químicos como metilo, etilo, n-propilo, isopropilo, n-butilo, tere-butilo, isobutilo, sec-butilo; homólogos superiores tales como 2-metil-1 -butilo, n-pentilo, 3-pentilo, n-hexilo, 1,2,2-trimetilpropilo, y similares. En algunas realizaciones, el grupo alquilo contiene de 1 a 6 átomos de carbono, de 1 a 4 átomos de carbono, de 1 a 3 átomos

Tal como se usa aquí, "Cn-m alquenilo" se refiere a un grupo alquilo que tiene uno o más enlaces dobles carbonocarbono y que tiene de n a m carbonos. Los grupos alquenilo de ejemplo incluyen, entre otros, etinilo, n-propenilo, isopropenilo, n-butenilo, see-butenilo, y similares. En algunas realizaciones, la fracción de alquenilo contiene de 2 a 6, de 2 a 4, o de 2 a 3 átomos de carbono.

Tal como se usa aquí, "Cn-m alquinilo se refiere a un grupo alquilo que tiene uno o más enlaces triples carbono-carbono y de n a m carbonos. Los grupos alquilo de ejemplo incluyen, entre otros, etinilo, propin-1-ilo, propin-2-ilo, y similares. En algunas realizaciones, la fracción alquinilo contiene de 2 a 6, de 2 a 4, o de 2 a 3 átomos de carbono.

Tal como se usa aquí, el término "Cn-m alquileno", empleado solo o en combinación con otros términos, se refiere a un grupo de enlace alquilo divalente que tiene de n a m carbonos. Los ejemplos de grupos alquileno incluyen, entre otros, etano-1,2-diilo, propano-1,3-diilo, propano-1,2-diilo, butano-1,4-diilo, butano-1,3-diilo, butano-1,2-diilo, 2-metilpropano-1,3-diilo y similares. En algunas realizaciones, la fracción de alquileno contiene de 2 a 6, de 2 a 4, de 2 a 3, de 1 a 6, de 1 a 4 o de 1 a 2 átomos de carbono.

Tal como se usa aquí, el término "Cn-m alcoxi empleado solo o en combinación con otros términos, se refiere a un grupo de fórmula "-O-alquilo" o "-(O-alquileno)p", o "-(alquileno-O)p-. donde el grupo alquilo o alquileno tiene de n a m carbonos y p es un número entero del 1 al 6. Algunos ejemplos de grupos alcoxi son metoxi, etoxi, propoxi (por ej., npropoxi e isopropoxi), tere-butoxi, -(CH<2>OCH<2>OCH<2>)-, -(CH<2>CH<2>OCH<2>CH<2>O)-, -(OCH<2>)-, - (OCH<2>OCH<2>CH<2>)-, -(CH<2>CH<2>OCH<2>CH<2>O)-, -(CH<2>CH<2>OCH<2>CH<2>OCH<2>CH<2>)- y similares. En algunas realizaciones, el grupo alquilo tiene de 1 a 6, 1 a 4, o 1 a 3 átomos de carbono. En algunas realizaciones, p es 1. En algunas realizaciones, p es 2. En algunas realizaciones, p es 3. En algunas realizaciones, p es 4. En algunas realizaciones, p es 5. En algunas realizaciones, p es 6.

Tal como se usa aquí, el término "arilo," empleado solo o en combinación con otros términos, se refiere a un grupo hidrocarburo aromático, que puede ser monocíclico o policíclico (por ej., con 2, 3 o 4 anillos fusionados). El término "Cn-m arilo" se refiere a un grupo arilo que tiene de n a m átomos de carbono en anillo. Los grupos arilo incluyen, por ej., fenilo, naftilo, antracenilo, fenantrenilo, indanilo, indenilo y similares. En algunas realizaciones, Los grupos arilo tienen de 6 a aproximadamente 20 átomos de carbono, de 6 a aproximadamente 15 átomos de carbono, o de 6 a aproximadamente 10 átomos de carbono. En algunas realizaciones, el grupo arilo es un fenilo sustituido o no sustituido. Tal como se usa aquí, el término "di(Cn-m-alquilo)amino" se refiere a un grupo de fórmula -N(alquilo)<2>, donde cada uno de los dos grupos alquilo tiene, independientemente, de n a m átomos de carbono. En algunas realizaciones, cada grupo alquilo tiene, independientemente, de 1 a 6, de 1 a 4, o de 1 a 3 átomos de carbono. En algunas realizaciones, a di(Cn-m-alquilo)amino es -N(CH<3>)<2>(es decir, dimetilamino).

Tal como se usa aquí, "halo" se refiere a F, Cl, Br, o I. En algunas realizaciones, un halo es F, Cl, o Br. En algunas realizaciones, un halo es F. En algunas realizaciones, un halo es [18F],

Tal como se usa aquí, el término "Cn-m haloalquilo", empleado solo o en combinación con otros términos, se refiere a un grupo alquilo que tiene de un átomo de halógeno a 2s+1 átomos de halógeno que pueden ser iguales o diferentes, donde “s” es el número de átomos de carbono en el grupo alquilo, donde el grupo alquilo tiene de n a m átomos de carbono. En algunas realizaciones, el grupo haloalquilo sólo está fluorinado. En algunas realizaciones, el grupo alquilo tiene de 1 a 6, de 1 a 4, o de 1 a 3 átomos de carbono.

Tal como se usa aquí, el término "Cn-m haloalcoxi", empleado solo o en combinación con otros términos, se refiere a un grupo de fórmulas "-O-alquilo" o "-(O-alquileno)p-", o "-(alquileno-O)p-., donde el grupo alquilo o alquileno tiene de n a m carbonos, p es un número entero de 1 a 6, y cada grupo alquilo y alquileno tiene de un átomo de halógeno a 2s+1 átomos de halógeno que pueden ser iguales o distintos. Algunos ejemplos de grupos haloalcoxi incluyen OCF<3>, OCH<2>CF<3>, OCH<2>CHF<2>, OCH<2>CH<2>F, OCF<2>CF<3>, OCF<2>CF<2>CF<2>, OCH<2>CH<2>CF<3>, - CH<2>OCH<2>OCH<2>F, -CH<2>OCH<2>OCHF<2>, -CH2OCH2OCF3, -(CF2CF2OCH2CH2O)-, - (OCF2)-, -(OCF2OCH2CH2)-, -(CH2CH2OCH2CH2OCH2CH2)-, -CH<2>CH<2>OCH<2>CH<2>OCH<2>CH<2>F, y similares. En algunas realizaciones, el grupo haloalcoxi tiene de 1 a 6, de 1 a 4 o de 1 a 3 átomos de carbono. En algunas realizaciones, p es 1. En algunas realizaciones, p es 2. En algunas realizaciones, pe 3. En algunas realizaciones, p es 4. En algunas realizaciones, p es 5. En algunas realizaciones, p es 6. En algunas realizaciones, el grupo haloalcoxi es un grupo fluoroalcoxi. En algunas realizaciones, el grupo haloalcoxi es un grupo fluoroalcoxi [18F]-.

Tal como se usa aquí, "cicloalquilo" se refiere a hidrocarburos cíclicos no aromáticos que incluyen grupos alquilo y/o alquenilo ciclizados. Los grupos cicloalquilo pueden incluir grupos monocíclicos o policíclicos (por ej., con 2, 3 o 4 anillos fusionados) y espirociclos. Los grupos cicloalquilo pueden tener 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 o 10 carbonos formadores de anillos (C<3-10>). Los átomos de carbono que forman el anillo de un grupo cicloalquilo pueden estar opcionalmente sustituidos por oxo o sulfido (por ej., C(O) o C(S)). Los grupos cicloalquilo también incluyen los cicloalquilidenos. Los grupos cicloalquilo ejemplo incluyen ciclopropilo, ciclobutilo, ciclopentilo, ciclohexilo, cicloheptilo, ciclopentenilo, ciclohexenilo, ciclohexadienilo, cicloheptatrienilo, norbornilo, norpinilo, norcarnilo y similares. En algunas realizaciones, cicloalquilo es ciclopropilo, ciclobutilo, ciclopentilo, ciclohexilo, ciclopentilo o adamantilo. En algunas realizaciones, el cicloalquilo tiene de 6 a 10 átomos de carbono formadores de anillos. En algunas realizaciones, el cicloalquilo es adamantilo. También se incluyen en la definición de cicloalquilo las moléculas que tienen uno o más anillos aromáticos fusionados al (es decir, que tienen un enlace en común con) anillo de cicloalquilo, por ejemplo, los derivados benzo o tienilo del ciclopentano, ciclohexano y similares. Un grupo cicloalquilo que contiene un anillo aromático fusionado puede unirse a través de cualquier átomo formador de anillo, incluido un átomo formador de anillo del anillo aromático fusionado.

Tal como se usa aquí, "heteroarilo" se refiere a un heterociclo aromático monocíclico o policíclico que tiene al menos un miembro del anillo heteroatómico seleccionado entre azufre, oxígeno y nitrógeno. En algunas realizaciones, el anillo heteroarilo tiene 1, 2, 3, o 4 miembros de anillo heteroatómicos seleccionados independientemente entre nitrógeno, azufre y oxígeno. En algunas realizaciones, cualquier N formador de anillo en una fracción de heteroarilo puede ser un N-óxido. En algunas realizaciones, el heteroarilo tiene de 5 a 10 átomos de anillo y 1, 2, 3 o 4 heteroátomos de anillo seleccionados independientemente entre nitrógeno, azufre y oxígeno. En algunas realizaciones, el heteroarilo tiene 5-6 átomos de anillo y 1 o 2 heteroátomos de anillo seleccionados independientemente entre nitrógeno, azufre y oxígeno. En algunas realizaciones, el heteroarilo es un anillo heteroarilo de cinco o seis miembros. Un anillo heteroarilo de cinco miembros es un heteroarilo con un anillo que tiene cinco átomos de anillo donde uno o más (por ej., 1,2 o 3) átomos de anillo se seleccionan independientemente entre N, O y S. Los heteroarilos de anillo de cinco miembros de ejemplo son tienilo, furilo, pirrolilo, imidazolilo, tiazolilo, oxazolilo, pirazolilo, isotiazolilo, isoxazolilo, 1,2,3-triazolilo, tetrazolilo, 1,2,3-tiadiazolilo, 1,2,3-oxadiazolilo, 1,2,4- triazolilo, 1,2,4-tiadiazolilo, 1,2,4-oxadiazolilo, 1,3,4-triazolilo, 1,3,4-tiadiazolilo y 1,3,4-oxadiazolilo. Un anillo heteroarilo de seis miembros es un heteroarilo con un anillo que tiene seis átomos de anillo donde uno o más (por ej., 1, 2 o 3) átomos de anillo se seleccionan independientemente entre N, O y S. Los heteroarilos de anillo de seis miembros ejemplares son piridilo, pirazinilo, pirimidinilo, triazinilo y piridazinilo.

Tal como se usa aquí, "heterocicloalquilo" se refiere a heterociclos monocíclicos o policíclicos no aromáticos que tienen uno o más heteroátomos formadores de anillos seleccionados entre O, N o S. Se incluyen en heterocicloalquilo los grupos heterocicloalquilo monocíclicos de 4, 5, 6 y 7 miembros. Los grupos heterocicloalquilo también pueden incluir espirociclos. Los grupos heterocicloalquilo de ejemplo incluyen pirrolidin-2-ona, 1,3-isoxazolidin-2-ona, piranilo, tetrahidrofurano, oxetanilo, azetidinilo, morfolino, tiomorfolino, piperazinilo, tetrahidrofuranoil, tetrahidrotienilo, piperidinilo, pirrolidinilo, isoxazolidinilo, isotiazolidinilo, pirazolidinilo, oxazolidinilo, tiazolidinilo, imidazolidinilo, azepanilo, benzazapeno y similares. Los átomos de carbono formadores de anillos y los heteroátomos de un grupo heterocicloalquilo pueden estar opcionalmente sustituidos por oxo o sulfido (por ej., C(O), S(O), C(S), o S(O)<2>, etc.). El grupo heterocicloalquilo puede estar unido mediante un átomo de carbono formador de anillo o un heteroátomo formador de anillo. En algunas realizaciones, el grupo heterocicloalquilo contiene de 0 a 3 dobles enlaces. En algunas realizaciones, el grupo heterocicloalquilo contiene de 0 a 2 dobles enlaces. También se incluyen en la definición de heterocicloalquilo las moléculas que tienen uno o más anillos aromáticos fusionados (es decir, con un enlace común) al anillo cicloalquilo, por ejemplo, los derivados benzo o tienilo de la piperidina, morfolina, azepina, etc. Un grupo heterocicloalquilo que contenga un anillo aromático fusionado puede unirse a través de cualquier átomo formador de anillo, incluido un átomo formador de anillos del anillo aromático fusionado. En algunas realizaciones, el heterocicloalquilo tiene 4-10, 4-7 o 4-6 átomos de anillo con 1 o 2 heteroátomos seleccionados independientemente entre nitrógeno, oxígeno o azufre y con uno o más miembros de anillo oxidados.

En algunos lugares, las definiciones o realizaciones se refieren a anillos específicos (por ej., un anillo de azetidina, un anillo de piridina, etc.). Salvo que se indique lo contrario, estos anillos pueden unirse a cualquier miembro del anillo siempre que no se supere la valencia del átomo. Por ejemplo, un anillo de azetidina puede unirse en cualquier posición del anillo, mientras que un anillo de piridin-3-ilo se une en la posición 3.

El término "compuesto" tal como se usa aquí, incluye todos los estereoisómeros, isómeros geométricos, tautómeros e isótopos de las estructuras representadas. Los compuestos aquí identificados por su nombre o estructura como una forma tautomérica particular incluyen otras formas tautoméricas, salvo que se especifique lo contrario.

Los compuestos aquí proporcionados también incluyen formas tautoméricas. Las formas tautoméricas resultan del intercambio de un enlace simple con un enlace doble adyacente junto con la migración concomitante de un protón.

Las formas tautoméricas incluyen tautómeros prototrópicos que son estados de protonación isoméricos que tienen la misma fórmula empírica y carga total. Algunos ejemplos de tautómeros prototrópicos son los pares cetona - enol, pares amida - ácido imídico, pares lactamo - lactim, pares enamina - imina, y formas anulares en las que un protón puede ocupar dos o más posiciones de un sistema heterocíclico, por ejemplo, 1H- y 3H-imidazol, 1H-, 2H- y 4H- 1,2,4-triazol, 1H- y 2H- isoindol, y 1H- y 2H-pirazol. Las formas tautoméricas pueden estar en equilibrio o bloqueadas estéricamente en una forma mediante una sustitución adecuada.

Salvo que se definan específicamente, los compuestos que aquí se proporcionan también pueden incluir todos los isótopos de los átomos presentes en los compuestos intermedios o finales. Los isótopos incluyen aquellos átomos que tienen el mismo número atómico pero diferente número másico. Salvo que se indique lo contrario, cuando un átomo se designa como isótopo o radioisótopo (por ej., deuterio, [11C], [18F]), se entiende que el átomo comprende el isótopo o radioisótopo en una cantidad al menos superior a la abundancia natural del isótopo o radioisótopo. Por ejemplo, cuando un átomo se designa como "D" o "deuterio", se entiende que la posición tiene deuterio en una abundancia al menos 3000 veces superior a la abundancia natural de deuterio, que es del 0,015% (es decir, al menos un 45% de incorporación de deuterio). Los isótopos de ejemplo que pueden incorporarse a los compuestos aquí proporcionados incluyen, entre otros, 2H, 3H, 11C, 13C, 14C, 13N, 15N, 15O, 17O, 18O, 18F, 35S, 36Cl, 82Br, 75Br, 76Br, 77Br,

Todos los compuestos, y sus sales farmacéuticamente aceptables, pueden encontrarse junto con otras sustancias como agua y disolventes (por ej. hidratos y solvatos) o pueden aislarse.

En algunas realizaciones, la preparación de compuestos puede implicar la adición de ácidos o bases para afectar, por ejemplo, a la catálisis de una reacción deseada o a la formación de formas salinas como sales de adición de ácidos.

Los ácidos de ejemplo pueden ser ácidos inorgánicos u orgánicos e incluyen, entre otros, ácidos fuertes y débiles.

Algunos ejemplos de ácidos son el ácido clorhídrico, el ácido bromhídrico, el ácido sulfúrico, el ácido fosfórico, el ácido p-toluenosulfónico, el ácido 4-nitrobenzoico, el ácido metanosulfónico, el ácido bencenosulfónico, el ácido trifluoroacético y el ácido nítrico. Algunos ácidos débiles son, entre otros, el ácido acético, el ácido propiónico, el ácido butanoico, el ácido benzoico, el ácido tartárico, el ácido pentanoico, el ácido hexanoico, el ácido heptanoico, el ácido octanoico, el ácido nonanoico y el ácido decanoico.

Las bases de ejemplo incluyen hidróxido de litio, hidróxido de sodio, hidróxido de potasio, carbonato de litio, carbonato de sodio, carbonato de potasio y bicarbonato de sodio. Algunos ejemplos de bases fuertes incluyen, entre otros, hidróxido, alcóxidos, amidas metálicas, hidruros metálicos, dialquilamidas metálicas y arilaminas, donde: los alcóxidos incluyen las sales de litio, sodio y potasio de los óxidos de metilo, etilo y t-butilo; las amidas metálicas incluyen amida de sodio, amida de potasio y amida de litio; los hidruros metálicos incluyen hidruro de sodio, hidruro de potasio e hidruro de litio; y las dialquilamidas metálicas incluyen sales de litio, sodio y potasio de amidas sustituidas con metilo, etilo, n-propilo, /so-propilo, n-butilo, tere-butilo, tri-metilsililo y ciclohexilo.

En algunas realizaciones, los compuestos aquí proporcionados, o sus sales, están sustancialmente aislados. Por "sustancialmente aislado" se entiende que el compuesto está al menos parcial o sustancialmente separado del entorno en el que se formó o se detectó. La separación parcial puede incluir, por ejemplo, una composición enriquecida en los compuestos aquí proporcionados. La separación sustancial puede incluir composiciones que contengan al menos aprox. el 50%, al menos aprox. el 60%, al menos aprox. el 70%, al menos aprox. el 80%, al menos aprox. el 90%, al menos aprox. el 95%, al menos aprox. el 97%, o al menos aprox. el 99% en peso de los compuestos aquí proporcionados, o sales de los mismos. Los métodos para aislar compuestos y sus sales son habituales en la técnica.

Las expresiones "temperatura ambiente" y "temperatura del espacio" o "rt", tal como aquí se utilizan, se entienden en la técnica, y se refieren en general a una temperatura, por ej. una temperatura de reacción, que es aproximadamente la temperatura del espacio en el que se lleva a cabo la reacción, por ejemplo, una temperatura comprendida entre unos 20 °C y unos 30 °C.

La frase "farmacéuticamente aceptable" se emplea aquí para referirse a aquellos compuestos, materiales, composiciones y/o formas de dosificación que son, dentro del ámbito del buen juicio médico, adecuados para el uso en contacto con los tejidos de seres humanos y animales sin excesiva toxicidad, irritación, respuesta alérgica u otro problema o complicación, proporcional a una relación beneficio/riesgo razonable.

La presente solicitud también incluye sales farmacéuticamente aceptables de los compuestos aquí descritos. Tal como se utiliza aquí, "sales farmacéuticamente aceptables" se refiere a derivados de los compuestos descritos donde el compuesto original se modifica mediante la conversión de una fracción ácida o básica existente a su forma salina. Ejemplos de sales farmacéuticamente aceptables incluyen, entre otros, sales minerales o de ácidos orgánicos de residuos básicos como las aminas; sales alcalinas u orgánicas de residuos ácidos como los ácidos carboxílicos, y similares. Las sales farmacéuticamente aceptables de la presente solicitud incluyen las sales no tóxicas convencionales del compuesto original formadas, por ejemplo, a partir de ácidos inorgánicos u orgánicos no tóxicos. Las sales farmacéuticamente aceptables de la presente solicitud pueden sintetizarse a partir del compuesto original que contiene una fracción básica o ácida mediante métodos químicos convencionales. Generalmente, dichas sales pueden prepararse haciendo reaccionar las formas ácidas o básicas libres de estos compuestos con una cantidad estequiométrica de la base o el ácido apropiados en agua o en un disolvente orgánico, o en una mezcla de ambos; generalmente, son preferibles medios no acuosos como éter, acetato de etilo, alcoholes (por ej., metanol, etanol, isopropanol o butanol) o acetonitrilo (MeCN). Pueden encontrarse los listados de sales adecuadas en Remington's Pharmaceutical Sciences, 17th ed., Mack Publishing Company, Easton, Pa., 1985, p. 1418 and Journal of Pharmaceutical Science, 66, 2 (1977). Los métodos convencionales para preparar formas salinas se describen, por ejemplo, en Handbook of Pharmaceutical Salts: Properties, Selection, and Use, Wiley-VCH, 2002.

Métodos de uso

La presente solicitud proporciona además un método de obtención de imágenes de una muestra de células o tejidos. Tal como aquí se utiliza, el término "sujeto" se refiere a cualquier animal, incluyendo mamíferos. Por ejemplo, ratones, ratas, otros roedores, conejos, perros, gatos, cerdos, ganado vacuno, ovejas, caballos, primates y seres humanos. En algunas realizaciones, el sujeto es un humano.

En algunas realizaciones, el método comprende:

i) administrar al sujeto un compuesto aquí propuesto (por ej., un compuesto de cualquiera de las Fórmulas I-VI, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo);

ii) esperar un tiempo suficiente para permitir que el compuesto se acumule en la muestra de células o tejidos; y iii) obtener imágenes de la muestra de células o tejidos con una técnica de obtención de imágenes. En algunas realizaciones, el método comprende además la obtención de imágenes de la muestra celular o tisular antes del paso i). En algunas realizaciones, el método es un métodoin vitro.En algunas realizaciones, el método es un métodoin vivo.

La presente solicitud proporciona además un método de diagnóstico de una enfermedad o trastorno (cuyo método no forma parte de la invención reivindicada) asociado a una actividad anormal de la mieloperoxidasa (MPO) en un sujeto. En algunas realizaciones, el método comprende:

i) administrar al sujeto un compuesto aquí presentado (por ej., un compuesto de cualquiera de las Fórmulas I-VI, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo);

ii) esperar un tiempo suficiente para permitir que el compuesto se acumule en un sitio celular o tisular asociado con la enfermedad; y

iii) obtener imágenes de las células o tejidos con una técnica de obtención de imágenes. En algunas realizaciones, el método comprende además la obtención de imágenes del sujeto antes del paso i). En algunas realizaciones, el método es un métodoin vitro.En algunas realizaciones, el método es un métodoin vivo.

En algunas realizaciones, el tiempo suficiente es de unos 5 minutos a unas 6 horas, por ejemplo, de unos 5 minutos a unas 6 horas, de unos 5 minutos a unas 4 horas, de unos 5 minutos a unas 2 horas, de unos 5 minutos a una 1 hora, de unos 5 minutos a unos 30 minutos, de unos 30 minutos a unas 6 horas, de unos 30 minutos a unas 4 horas, de unos 30 minutos a unas 2 horas, de unos 30 minutos a 1 hora, de una 1 hora a unas 6 horas, de una 1 hora a unas 4 horas, de una 1 hora a unas 2 horas, de unas 2 horas a unas 6 horas, de unas 2 horas a unas 4 horas, o de unas 4 horas a unas 6 horas.

La presente solicitud proporciona además un método de obtención de imágenes de la actividad de la mieloperoxidasa (MPO) en una célula. En algunas realizaciones, el método comprende:

i) contactar la célula con un compuesto aquí propuesto (por ej., un compuesto de cualquiera de las Fórmulas I-VI, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo); y

ii) obtener imágenes de la célula con una técnica de obtención de imágenes.

La presente solicitud proporciona además un método de obtención de imágenes de la actividad de la mieloperoxidasa (MPO) en una muestra de tejido. En algunas realizaciones, el método comprende:

i) contactar la muestra de tejido con un compuesto aquí propuesto (por ej., un compuesto de cualquiera de las Fórmulas I-VI, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo); y

ii) obtener imágenes de la muestra de tejido con una técnica de obtención de imágenes.

La presente solicitud proporciona además un método de detección de la actividad mieloperoxidasa (MPO) en una muestra de células o tejidos. En algunas realizaciones, el método comprende:

i) contactar la muestra celular o tisular con un compuesto aquí propuesto (por ej., un compuesto de cualquiera de las Fórmulas I-VI, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo); y

La presente solicitud proporciona además un método (cuyo método no forma parte de la invención reivindicada) de detección de la actividad mieloperoxidasa en un sujeto. En algunas realizaciones, el método comprende:

i) administrar al sujeto un compuesto aquí propuesto (por ej., un compuesto de cualquiera de las Fórmulas I-VI, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo); y

ii) obtener imágenes del sujeto con una técnica de obtención de imágenes.

La presente solicitud proporciona además un método de monitorización del tratamiento de una enfermedad o trastorno (cuyo método no forma parte de la invención reivindicada) asociado con una actividad anormal de la mieloperoxidasa (MPO) en un sujeto, el método comprende:

i) administrar al sujeto un compuesto aquí propuesto (por ej., un compuesto de cualquiera de las Fórmulas I-VI o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo);

ii) obtener imágenes del sujeto con una técnica de obtención de imágenes;

iii) administrar al sujeto una cantidad terapéuticamente eficaz de un compuesto terapéuti

o trastorno;

iv) obtener imágenes de la célula o tejido del sujeto con una técnica de obtención de imágenes; y

v) comparar la imagen del paso i) y la imagen del paso iv).

En algunas realizaciones, el método comprende además administrar al sujeto un compuesto aquí propuesto (por ej., un compuesto de cualquiera de las Fórmulas I-VI, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo) después de la administración del paso iii) y antes de la obtención de imágenes del paso iv). En algunas realizaciones, el compuesto terapéutico es útil en el tratamiento de una enfermedad o trastorno asociado con una actividad anormal de la mieloperoxidasa (MPO). En algunas realizaciones, el compuesto terapéutico es un compuesto terapéutico aquí propuesto.

En algunas realizaciones, la técnica de obtención de imágenes se selecciona del grupo formado por la técnica de fluorescencia y la tomografía por emisión de positrones (PET). En algunas realizaciones, la técnica de obtención de imágenes es la de fluorescencia. En algunas realizaciones, la obtención de imágenes de fluorescencia se selecciona del grupo formado por la tomografía molecular de fluorescencia (FMT) y la obtención de imágenes de fluorescencia refractaria (FRI). En algunas realizaciones, la técnica de obtención de imágenes es la tomografía por emisión de positrones.

En algunas realizaciones, el compuesto es:

y la técnica de obtención de imágenes es la de fluorescencia. En algunas realizaciones, la obtención de imágenes de fluorescencia se selecciona del grupo que consiste en tomografía molecular de fluorescencia (FMT) y obtención de imágenes de fluorescencia refractaria (FRI).

En algunas realizaciones, el compuesto se selecciona del grupo que consiste en:

y la técnica de obtención de imágenes es la tomografía por emisión de positrones.

En algunas realizaciones, la enfermedad o trastorno asociado con una actividad anormal de la mieloperoxidasa se selecciona del grupo que consiste en cáncer, una enfermedad reumática, una enfermedad infecciosa, una enfermedad del sistema nervioso central, un trastorno cardiovascular, un trastorno autoinmune y la inflamación asociada a uno o más de un cáncer, una enfermedad reumática, una enfermedad infecciosa, una enfermedad del sistema nervioso central, un trastorno cardiovascular y un trastorno autoinmune. En algunas realizaciones, la enfermedad o trastorno asociado con la actividad anormal de la mieloperoxidasa se selecciona del grupo que consiste en cáncer, una enfermedad reumática, una enfermedad infecciosa, una enfermedad del sistema nervioso central, un trastorno cardiovascular y un trastorno autoinmune. En algunas realizaciones, la enfermedad o trastorno asociado con la actividad anormal de la mieloperoxidasa se selecciona del grupo que consiste en la inflamación asociada a uno o más de un cáncer, una enfermedad reumática, una enfermedad infecciosa, una enfermedad del sistema nervioso central, un trastorno cardiovascular y un trastorno autoinmune.

En algunas realizaciones, la enfermedad o trastorno asociado con una actividad anormal de la mieloperoxidasa es un cáncer. En algunas realizaciones, el cáncer comprende un tumor sólido. En algunas realizaciones, el cáncer es un tumor sólido. En algunas realizaciones, el cáncer se selecciona del grupo que consiste en cáncer de vejiga, cáncer de mama, carcinoma, cáncer de cuello de útero, cáncer colorrectal, cáncer de endometrio, glioma, cáncer de cabeza y cuello, cáncer de hígado, cáncer de pulmón, melanoma, cáncer de ovario, cáncer de páncreas, cáncer de próstata, cáncer de riñón, cáncer de piel, cáncer de estómago, cáncer de testículo, leucemia y cáncer de tiroides. En algunas realizaciones, el cáncer es un tumor sólido asociado a uno o varios de los siguientes tipos: cáncer de vejiga, cáncer de mama, carcinoma, cáncer de cuello de útero, cáncer colorrectal, cáncer de endometrio, glioma, cáncer de cabeza y cuello, cáncer de hígado, cáncer de pulmón, melanoma, cáncer de ovario, cáncer de páncreas, cáncer de próstata, cáncer de riñón, cáncer de piel, cáncer de estómago, cáncer de testículo, cáncer de tiroides o cualquier combinación de los mismos. En algunas realizaciones, la enfermedad o trastorno asociado con la actividad anormal de la mieloperoxidasa es la inflamación asociada con uno o más cánceres seleccionados del grupo que consiste en cáncer de vejiga, cáncer de mama, carcinoma, cáncer de cuello uterino, cáncer colorrectal, cáncer de endometrio, glioma, cáncer de cabeza y cuello, cáncer de hígado, cáncer de pulmón, melanoma, cáncer de ovario, cáncer de páncreas, cáncer de próstata, cáncer de riñón, cáncer de piel, cáncer de estómago, cáncer de testículo, cáncer de tiroides, leucemia, o cualquier combinación de los mismos.

En algunas realizaciones, la enfermedad o trastorno asociado con una actividad anormal de la mieloperoxidasa es una enfermedad del sistema nervioso central. En algunas realizaciones, la enfermedad del sistema nervioso central se selecciona del grupo que consiste en la enfermedad de Alzheimer, accidente cerebrovascular, epilepsia, enfermedad de Parkinson y la inflamación asociada a la enfermedad de Alzheimer, accidente cerebrovascular, epilepsia y enfermedad de Parkinson. En algunas realizaciones, la enfermedad del sistema nervioso central se selecciona del grupo que consiste en la enfermedad de Alzheimer, accidente cerebrovascular, epilepsia y enfermedad de Parkinson. En algunas realizaciones, la enfermedad del sistema nervioso central es la inflamación asociada con una o más de las enfermedades de Alzheimer, y accidente cerebrovascular, epilepsia y enfermedad de Parkinson.

En algunas realizaciones, la enfermedad o trastorno asociado con una actividad anormal de la mieloperoxidasa es un trastorno cardiovascular. En algunas realizaciones, el trastorno cardiovascular se selecciona del grupo que consiste en aterosclerosis, infarto de miocardio, fibrilación auricular, vasculitis e inflamación asociada con una o más de aterosclerosis, infarto de miocardio, fibrilación auricular y vasculitis. En algunas realizaciones, el trastorno cardiovascular se selecciona del grupo que consiste en aterosclerosis, infarto de miocardio, fibrilación auricular y vasculitis. En algunas realizaciones, el trastorno cardiovascular es una inflamación asociada a una o más de las siguientes enfermedades: aterosclerosis, infarto de miocardio, fibrilación auricular y vasculitis.

En algunas realizaciones, la enfermedad o trastorno asociado con una actividad anormal de la mieloperoxidasa es un trastorno autoinmune. En algunas realizaciones, el trastorno autoinmune se selecciona del grupo que consiste en esclerosis múltiple, meningitis, encefalitis e inflamación asociada con una o más de esclerosis múltiple, meningitis y encefalitis. En algunas realizaciones, el trastorno autoinmune es la inflamación asociada a una o más de las siguientes enfermedades: esclerosis múltiple, meningitis y encefalitis.

En algunas realizaciones, la enfermedad o trastorno asociado con una actividad anormal de la mieloperoxidasa es una enfermedad reumática. En algunas realizaciones, la enfermedad reumática se selecciona del grupo que consiste en artritis reumatoide, osteoartritis y artritis inflamatoria. En algunas realizaciones, la enfermedad reumática es una artritis inflamatoria. En algunas realizaciones, la artritis inflamatoria se selecciona del grupo que consiste en gota y enfermedad por depósito de pirofosfato cálcico (CPPD). En algunas realizaciones, a enfermedad o trastorno asociado con la actividad anormal de la mieloperoxidasa es la inflamación asociada con una o más de las siguientes enfermedades: artritis reumatoide, osteoartritis y artritis inflamatoria.

En algunas realizaciones, la enfermedad o trastorno asociado con una actividad anormal de la mieloperoxidasa es una enfermedad infecciosa. En algunas realizaciones, la enfermedad infecciosa es una enfermedad fúngica o una enfermedad bacteriana. En algunas realizaciones, la enfermedad fúngica es una enfermedad asociada a C.albicans.En algunas realizaciones, la enfermedad infecciosa comprende una infección por levaduras. En algunas realizaciones, la infección por levaduras es una infección asociada con C.tropicalis.En algunas realizaciones, la enfermedad o trastorno asociado a una actividad anormal de la mieloperoxidasa es la inflamación asociada a una enfermedad infecciosa o bacteriana.

Tal como se usa aquí, la expresión "cantidad terapéuticamente eficaz" se refiere a la cantidad de compuesto activo o agente farmacéutico que provoca la respuesta biológica o medicinal buscada en un tejido, sistema, animal, individuo o ser humano por un investigador, veterinario, médico u otro profesional clínico. En algunas realizaciones, la dosis del compuesto, o de una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, administrada a un sujeto o individuo es de aprox. 1 mg a aprox. 2 g, aprox. 1 mg a aprox. 1000 mg, aprox. 1 mg a aprox. 500 mg, aprox. 1 mg a aprox. 100 mg, aprox. 1 mg a 50 mg, o aprox. 50 mg a aprox. 500 mg.

Tal como se usa aquí, el término "tratar" o "tratamiento" se refiere a una o más de las siguientes acciones (1) inhibir la enfermedad; por ejemplo, inhibir una enfermedad, afección o trastorno en un individuo que experimenta o muestra la patología o sintomatología de la enfermedad, afección o trastorno (es decir, detener el desarrollo ulterior de la patología y/o sintomatología); y (2) mejorar la enfermedad; por ejemplo, mejorar una enfermedad, afección o trastorno en un individuo que experimenta o muestra la patología o sintomatología de la enfermedad, afección o trastorno (es decir, revertir la patología y/o sintomatología), como disminuir la gravedad de la enfermedad o reducir o aliviar uno o más síntomas de la enfermedad.

Terapias de combinación

Uno o más agentes terapéuticos adicionales como, por ejemplo, agentes antiinflamatorios, esteroides, inmunosupresores, agentes quimioterapéuticos u otros agentes como anticuerpos terapéuticos, pueden utilizarse en combinación con los compuestos de la presente solicitud para el tratamiento de las enfermedades aquí indicadas. Ejemplos de anticuerpos para uso en terapia combinada incluyen, entre otros, trastuzumab (por ej. anti-HER2), ranibizumab (por ej. anti-VEGF-A), bevacizumab (por ej. anti-VEGF), panitumumab (por ej. anti-EGFR), cetuximab (por ej. anti-EGFR), rituxan (anti-CD20) y anticuerpos dirigidos a c-MET

Ejemplos de esteroides son los corticosteroides, como la cortisona, dexametasona, hidrocortisona, metilprednisolona, prednisolona y prednisona.

Ejemplos de compuestos antiinflamatorios incluyen aspirina, salicilatos de colina, celecoxib, diclofenaco potásico, diclofenaco sódico, diclofenaco sódico con misoprostol, diflunisal, etodolac, fenoprofeno, flurbiprofeno, ibuprofeno, ketoprofeno, meclofenamato sódico, ácido mefenámico, nabumetona, naproxeno, naproxeno sódico, oxaprozina, piroxican, rofecoxib, salsalato, salicilato sódico, sulindaco, tolmetina sódica y valdecoxib.

Algunos ejemplos de inmunosupresores son la azatioprina, clorambucil, ciclofosfamida, ciclosporina, daclizumab, infliximab, metotrexato y tacrolimus.

Uno o más de los siguientes agentes pueden utilizarse en combinación con los compuestos aquí proporcionados y se presentan como una lista no limitativa: un agente citostático, cisplatino, doxorrubicina, taxol, etopósido, irinotecán, topotecán, paclitaxel, docetaxel, epotilonas, tamoxifeno, 5-fluorouracilo, metotrexato, temozolomida, ciclofosfamida, tipifarnib, gefitinib, clorhidrato de erlotinib, anticuerpos para EGFR, mesilato de imatinib, gemcitabina, mostaza uracilo, clormetina, ifosfamida, melfalán, clorambucilo, pipobromán, trietilenomelamina, trietilenotiofosforamina, busulfán, carmustina, lomustina, estreptozocina, dacarbazina, floxuridina, citarabina, 6-mercaptopurina, 6-tioguanina, fosfato de fludarabina, oxaliplatino, ácido folínico, pentostatina, vinblastina, vincristina, vindesina, bleomicina, dactinomicina, daunorrubicina, epirrubicina, idarrubicina, mitramicina, desoxicoformicina, mitomicina-C, L-asparaginasa, teniposida, 17a-etinilestradiol, dietilestilbestrol, testosterona, prednisona, fluoximesterona, propionato de dromostanolona, testolactona, acetato de megestrol, metilprednisolona, metiltestosterona, prednisolona, triamcinolona, clorotrianiseno, hidroxiprogesterona, aminoglutetimida, estramustina, medroxiprogesteronaacetato, leuprolida, flutamida, toremifeno, goserelina, carboplatino, hidroxiurea, amsacrina, procarbazina, mitotano, mitoxantrona, levamisol, vinorelbina, anastrazol, letrozol, capecitabina, reloxafina, hexametilmelamina, bevacizumab, bexxar, velcade, zevalin, trisenox, xeloda, porfimer, erbitux, tiotepa, altretamina, trastuzumab, fulvestrant, exemestano, rituximab, alemtuzumab, clofarabina, cladribina, afidicolina, sunitinib, dasatinib, tezacitabina, triapina, didox, trimidox, amidox, bendamustina, ofatumumab e idelalisib.

En algunas realizaciones, el agente terapéutico adicional es útil para el tratamiento de la esclerosis múltiple. En algunas realizaciones, el agente terapéutico adicional se selecciona del grupo que consiste en interferón beta-1a, interferón beta-1b, peginterferón beta-1a, acetato de glatirámero, teriflunomida, fingolimod, mitoxantrona, dimetilfumarato, natalizumab, ozanimod, laquinimod, alemtuzumab, daclizumab, rituximab, ocrelizumab y ofatumumab.

Composiciones y formulaciones farmacéuticas

Cuando se emplean como productos farmacéuticos, los compuestos aquí proporcionados pueden administrarse en forma de composiciones farmacéuticas. Estas composiciones pueden prepararse como se describe aquí o donde sea, y pueden administrarse por diversas vías, dependiendo de si se desea un tratamiento local o sistémico y del área a tratar. La administración puede ser tópica (transdérmica, epidérmica, oftálmica y en las membranas mucosas, incluyendo la administración intranasal, vaginal y rectal), pulmonar (por ej., por inhalación o insuflación de polvos o aerosoles, incluyendo por nebulizador; intratraqueal o intranasal), oral o parenteral. La administración parenteral puede ser intravenosa, intraarterial, subcutánea, intraperitoneal, intramuscular, por inyección o infusión, o intracraneal (por ej., intratecal o intraventricular). La administración parenteral puede ser en forma de una dosis única en bolo, o puede ser, por ejemplo, mediante una bomba de perfusión continua. En algunas realizaciones, los compuestos aquí propuestos son adecuados para la administración parenteral. En algunas realizaciones, los compuestos aquí presentados son adecuados para la administración intravenosa. Las composiciones y formulaciones farmacéuticas para administración tópica pueden incluir parches transdérmicos, pomadas, lociones, cremas, geles, gotas, supositorios, aerosoles, líquidos y polvos. Pueden ser necesarios o deseables portadores farmacéuticos convencionales, bases acuosas, en polvo u oleosas, espesantes y similares. En algunas realizaciones, las composiciones farmacéuticas aquí proporcionadas son adecuadas para administración parenteral. En algunas realizaciones, las composiciones aquí proporcionadas son adecuadas para la administración intravenosa.

También se proporcionan composiciones farmacéuticas que contienen, como principio activo, un compuesto propuesto aquí (por ej., un compuesto de cualquiera de las Fórmulas I-VI, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo), en combinación con uno o más portadores farmacéuticamente aceptables (excipientes). En la elaboración de las composiciones aquí previstas, el principio activo se mezcla típicamente con un excipiente, se diluye con un excipiente o se encapsula dentro de un soporte de este tipo en forma de, por ejemplo, una cápsula, saquito, papel u otro envasado. Cuando el excipiente sirve como diluyente, puede ser un material sólido, semisólido o líquido, que actúa como vehículo, portador o medio para el principio activo. Así, las composiciones pueden presentarse en forma de comprimidos, píldoras, polvos, pastillas para chupar, sobres, bolsitas, elixires, suspensiones, emulsiones, soluciones, jarabes, aerosoles (sólidos o líquidos), pomadas, cápsulas de gelatina blanda y dura, supositorios, soluciones inyectables estériles y polvos estériles envasados.

Algunos ejemplos de excipientes adecuados incluyen, entre otros, lactosa, dextrosa, sacarosa, sorbitol, manitol, almidones, goma acacia, fosfato de calcio, alginatos, tragacanto, gelatina, silicato de calcio, celulosa microcristalina, polivinilpirrolidona, celulosa, agua, jarabe y metilcelulosa. Las formulaciones pueden incluir, además, entre otros, agentes lubricantes como talco, estearato de magnesio y aceite mineral; agentes humectantes; agentes emulsionantes y de suspensión; agentes conservantes como metilhidroxibenzoatos y propilhidroxibenzoatos; agentes edulcorantes; agentes aromatizantes, o combinaciones de los mismos.

El compuesto activo puede ser eficaz en un amplio rango de dosis y suele administrarse en una cantidad farmacéuticamente eficaz. Se entenderá, sin embargo, que la cantidad del compuesto realmente administrada será determinada generalmente por un médico, según las circunstancias relevantes, incluyendo la vía elegida de administración, el compuesto real administrado, la edad, el peso, y la respuesta del sujeto individual, la severidad de los síntomas del sujeto, y similares.

Ejemplos

La invención se describe con más detalle en los siguientes ejemplos, que no limitan el alcance de la invención descrita en las reivindicaciones.

Métodos generales y materiales

Todas las sustancias químicas necesarias para este trabajo se obtuvieron de Sigma Chemical Co. salvo que se indique lo contrario. El 5-hidroxi-L-triptófano se obtuvo de Chem-Impex Int'l. Inc. (Wood Dale, IL). La 5-hidroxitriptamina se obtuvo de Alfa Aesar (Ward Hill, MA). La mieloperoxidasa se obtuvo de Lee Biosolutions (St. Louis, MO). La matriz de matrigel se obtuvo de VWR International (Radnor, PA). Medio de Eagle modificado de Dulbecco (DMEM). Los ratones hembra C57Bl/6J (6-10 semanas) se adquirieron en Jackson Laboratory. La glucosa oxidasa (GOX) se adquirió a Affymetrix (Santa Clara, CA).

El análisis estadístico se realizó con el programa Prism 5.0 (Graphpad, La Jolla, CA). Los valores P <0,05 se consideraron significativos. Los datos se compararon mediante la prueba t de Student o la prueba U de Mann-Whitney. La correlación se determinó calculando el coeficiente de correlación de Pearson. La intensidad de fluorescencia se cuantificó mediante el software ImageJ, y los resultados se presentaron como unidades de fluorescencia relativa (RFU).

Intermedio 1. (S)-3-(5-hidroxi-1H-indol-3-il)-2-(2-(5-hidroxi-1H-indol-3-il)acetamido)ácido propanoico

A una solución de ácido 2-(5-hidroxi-1H-indol-3-il)acético (191 mg, 1,0 equiv.) en DMF (3 mL) se añadió N-hidroxisuccinimida (126 mg, 1,1 equiv.) y W,W-diclohexilcarbodiimida (DCC) (216 mg, 1,05 equiv.) a temperatura ambiente y la mezcla de reacción se agitó durante 30 min. Después, se filtró la solución y se añadió lentamente a una solución de 5-hidroxitriptófano (264 mg, 1,2 equiv.) y trimetilamina (Et<3>N) (280 pmL, 2,0 equiv.) en DMF (3 mL). A continuación, la mezcla de reacción se agitó durante 1 h más. Tras la filtración, la solución se purificó mediante cromatografía de fase inversa utilizando un gradiente de acetonitrilo/agua, 0-100% durante 20 min para obtener el Intermedio deseado 1 (243 mg, 62%). 1H NMR (500 MHz, DMSO) 812,52 (amplitud, 1H), 10,49 (s, 1H), 10,47 (s, 1H), 7,99 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 7,09 (m, 2H), 6,99 (s, 1H),6. 94 (s, 1H), 6,81 (m, 2H), 6,56 (m, 2H), 4,30 (dd, 1H), 3,95 (s, 1H), 3,41 (m, 2H), 3,03 (dd, 1H), 2,92 (dd, 1H); 13C NMR (125 MHz, DMSO) 8173,4, 170,6, 150,2, 150,1, 130,6, 130,5, 128,0, 127,8, 124,0, 123,9, 111,6, 111,5, 111,25, 111,22,108,7, 107,7, 102,6, 102,1, 52,8, 48,6, 27,3; LCMS encontrado m/z 394,3 (M+1).

Intermedio 2. 2-(2-(2-fluoroetoxi)etoxi)etanamina (Intermedio 2f)

Paso 1. (etano-1,2-diNbis(oxi))bis(etano-2,1-diN) bis(4-metilbencenosulfonato) (Intermedio 2a)

A una solución de trietilenglicol (750 mg, 1,0 equiv.) en DCM (20 mL) se añadió trietilamina (2,1 mL, 3,0 equiv.) y a continuación cloruro de tosilo (2,29 g, 2,4 equiv.) por porciones y la mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 2 h. La mezcla de reacción se lavó con solución NH<4>Cl saturada (20 mL x 3) y después con salmuera. La mezcla resultante se secó posteriormente y se evaporó. El residuo se purificó mediante columna flash en el eluyente de acetato de etilo/hexano (1/5, después 1/1) para obtener un polvo blanco (2,11 g, 92%). 1H NMR 1H (500 MHz, DMSO) 87,77 (d, J = 8,0 Hz, 4H), 7,46 (d, J = 8,0 Hz, 4H), 4,09 (t, 4H), 3,53 (t, 4H), 3,38 (t, 4H), 2,41 (s, 6H); NMR 13C (125 MHz, DMSO) 8145,3, 132,9, 130,6, 128,1, 70,4, 70,0, 68,3, 21,5; LCMS encontrado m/z 459,5: (M+1).

Paso 2. 2-(2-(2- azidoetoxi)etoxi)etil 4-metilbencenosulfonato (Intermedio 2b)

A una solución del intermedio 2a (1,38 g, 1,0 equiv.) en DMSO se añadió azida sódica (191 mg, 0,95 equiv.) por porciones y la reacción se calentó a 60 °C y se agitó durante 1 h. La reacción se dejó enfriar a temperatura ambiente y se extrajo con agua y acetato de etilo (15 mL x 3), la fase orgánica combinada se lavó con salmuera, se secó y se evaporó. El residuo se purificó mediante cromatografía flash con el eluyente de acetato de etilo/hexano (1/4) para obtener el compuesto deseado 2b (593 mg, 58%). 1H NMR (500 MHz, DMSO) 87,78 (d, J = 8,0 Hz, 2H), 7,47 (d, J = 8,0 Hz, 2H), 4,10 (t, 2H), 3,60 (m, 6H), 3,49 (t, 2H), 3.40 (t, 2H), 2,49 (s, 3H). 40 (t, 2H), 2,49 (s, 3H); 13C NMR (125 MHz, DMSO) 8145,3, 132,9, 130,6, 128,1, 70,4, 70,2, 70,0, 69,7, 68,4, 50,4, 21,5; LCMS encontrado m/z 330,2 (M+1).

Paso 3. 2-(2-(2- aminoetoxi)etoxi)etil 4-metilbencenosulfonato (Intermedio 2c)

A una solución del intermedio 2b (494 mg, 1 equiv.) en THF anhidro (5 mL) se añadió trifenilfosfina (786 mg, 2 equiv.) por porciones a 0 °C. La reacción se calentó a temperatura ambiente y se agitó durante otras 5 h. Después se añadieron dos gotas de agua y la mezcla de reacción se agitó durante 2 h. A continuación se añadieron 3 mL de HCl 1 M a la mezcla de reacción, el THF se evaporó, y la fase acuosa se lavó con acetato de etilo. A continuación, se añadieron 3 mL de HCl 1 M a la mezcla de reacción, se evaporó el THF y se lavó la fase acuosa con acetato de etilo. Después, la solución anterior se purificó mediante cromatografía de fase inversa utilizando un gradiente de acetonitrilo/agua, 0-100% durante 20 min) para obtener el intermedio deseado 2c (377 mg, 83%). 1H NMR (500 MHz, DMSO) 87,79 (amplitud, 2H), 7,78 (s, 1H), 7,50 (t, J = 8,0 Hz, 2H), 7,12 (t, J = 8,0 Hz, 2H), 4,10 (m, 1H), 3,58 (m, 6H), 3,54 (t, 2H), 3.49 (m, 1H), 2,96 (t, 2H), 2,41 (s, 3H). 49 (m, 1H), 2,96 (t, 2H), 2,41 (s, 3H); 13C NMR (125 MHz, DMSO) 8 145,8, 132,8, 130,6, 128,5, 72,7, 70,4, 70,1,68,4, 67,1, 60,6, 21,2; LCMS encontrado m/z: 304,1 (M+1).

Paso 4. 2,2- dimetil-4-oxo-3,8,11-trioxa-5-azatridecan-13-il 4-metilbencenosulfonato (Intermedio 2d)

A una solución del intermedio 2c (303 mg, 1,0 equiv.) en DCM (5 mL) se añadió Et<3>N (1,5 equiv.) y dicarbonato de diterc-butilo (Boc<2>O) (1,2 equiv.) a temperatura ambiente y la reacción se agitó durante 2 h. La disolución de la reacción se evaporó y se extrajo con acetato de etilo (5 mL x 3), se lavó con salmuera (3 mL x 3), se secó sobre Na<2>SO<4>anhidro y se evaporó para obtener el intermedio 2d sin más purificación.

Paso 5. terc-butilo (2-(2-(2- fluoroetoxi)etoxi)etil)carbamato (Intermedio 2e)

A una solución del intermedio 2d en THF (4 mL) se añadió la solución de fluoruro de tetrabutilamonio (TBAF) (1 mL, 2 M) y la mezcla de reacción se calentó a 60 °C y se agitó durante 30 min. El disolvente se evaporó y el residuo resultante se extrajo con acetato de etilo (5 mL x 3), se lavó con salmuera (3 mL x 3), se secó sobre Na<2>SO<4>anhidro y se evaporó. El residuo se lavó a través de un absorbente de sílice con el eluyente de acetato de etilo/hexano en una proporción de 1/3 para obtener el intermedio 2e.

Paso 6. 2-(2-(2-fluoroetoxi)etoxi)etanamina (Intermedio 2f)

El intermedio 2e se añadió a una mezcla de ácido trifluoroacético (TFA) al 10% en DCM (2 mL) a temperatura ambiente y se agitó durante 30 min. El TFA y el disolvente se eliminaron por evaporación y el residuo se purificó mediante cromatografía flash con gradiente DCM/MeOH (95/5 a 90/10 conteniendo 1% Et<3>N) para obtener el intermedio 2f. La producción global de los tres pasos es del 50%. 1H NMR (500 MHz, DMSO): 8.31 (amplitud, 2H), 4,56 (m, 1H), 4,46 (m, 1H), 3,68 (m, 1H), 3,62 (m, 3H), 3,58 (m, 4H), 2,92 (m, 2H); 13C NMR (125 MHz, DMSO): 84,2, 82,9, 70,2, 70,1, 67,0, 39,6. LCMS encontrado m/z:152,1 (M+1).

Ejemplo 1. (S)-N-(2-(2-(2- fluoroetoxi)etoxi)etil)-3-(5-hidroxi-1H-indol-3-il)-2-(2-(5-hidroxi-1H-indol-3-il)acetamido)propanamida (Compuesto 8)

A una solución del Intermedio 1 (80 mg, 1,0 eq.) en DMF (2 mL) se añadió hidroxibenzotriazol (HOBt) (48 mg, 1,5 eq.) y clorhidrato de N-(3-dimetilaminopropil)-N'-etilcarbodiimida (EDC-HCl) (51 mg, 1,5 eq.) a temperatura ambiente. Tras agitar durante 30 min, se añadió lentamente una solución de 2f (39 mg, 1,3 eq.) en DMF (1,5 mL) y se agitó a temperatura ambiente durante 1 h más. La mezcla de reacción se purificó por HPLC con 0/100 CH3CN/H2O/0,5%TFA como sistema disolvente para obtener un sólido blanco (58 mg, 55%). 1H NMR (500 MHz, DMSO) 8 10,50 (s, 1H), 10,38 (s, 1H), 7,82 (m, 1H), 7,10 (m, 2H), 6,99 (d, 1H), 6,91 (s, 1H), 6,85 (s, 1H), 6,82 (s, 1H), 6,58 (m, 2H), 4,53 (d, 1H), 4,46 (m, 1H), 4,43 (d, 1H), 3,63 (m, 1H), 3,57 (m, 1H), 3,48 (m, 2H), 3,47 (m, 1H), 3,44 (m, 3H), 3,25 (m, 2H), 3,17 (m, 1H), 2,93 (m, 1H), 2,82 (m, 1H) 8 13C NMR (125 MHz, DMSO): 171,9; 170,9; 158,7; 150,7; 150,6; 131,1; 131,0; 128,6; 128,5; 124,6; 124,4,112,0, 111,9, 109,4, 108,2, 103,1, 102,9, 84,1, 82,8, 70,1, 70,0, 69,2, 53,8, 49,1, 38,9, 33,0, 28,6. LCMS encontrado m/z 527,1 (M+1).

Ejemplo 2. Síntesis alternativa de (A)-N-(2-(2-(2-fluoroetoxi)etoxi)etil)-3-(5-hidroxi-1H-indol-3-il)-2-(2-(5-hidroxi-1H-indol-3-il)acetamido)propenamida

(Compuesto 8)

Paso 1. (S)-1-(5- hidroxi-1H-indol-3-il)-4-((5-hidroxi-1H-indol-3-il)metil)-2,5-dioxo-9,12-dioxa-3, 6-diazatetradecan-14-il 4-metilbencenosulfonato

A una solución del Intermedio 1 (236 mg, 1,0 eq.) en DMF (3 mL) se añadió HOBt (121 mg, 1,5 eq.) y EDC-HCl (172 mg, 1,5 eq.) a temperatura ambiente. Después de agitar durante 30 min, se añadió gota a gota una solución del Intermedio 2c (265 mg, 1,3 eq.) en DMF (1,5 mL), y la mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 1 h. La mezcla de reacción se extrajo con acetato de etilo (10 mL x 3). La fase orgánica combinada se lavó con salmuera, se secó sobre Na<2>SO<4>anhidro y se concentró hasta la desecación. La mezcla se utilizó para el paso siguiente sin purificación adicional.

Paso 2. (S)-terc-butilo 3-(2-(2-(1-( terc-butoxicarbonil)-5-((terc-butoxicarbonil)oxi)-1H-indol-3-il)acetamido)-3-oxo-3-((2-(2-(2-(tosiloxi)etoxi)etoxi)etil)amino)propil)-5-((terc-butoxicarbonil)oxi)-1H-indol-1-carboxilato

A la suspensión del compuesto preparado en el Paso 1, (270 mg, 1,0 equiv.) en DCM (5 mL) se añadió B<0>C<2>O (380 mg, 4,4 equiv.), NEt<3>(340<j>L, 6 equiv.) y W,W-dimetilaminopiridina (19 mg, 0,4 equiv.) a temperatura ambiente del espacio y se agitó durante 30 min. La mezcla de reacción se concentró y se separó mediante cromatografía flash con el eluyente de hexano/acetato de etilo (4/1, después 1/1) para obtener el polvo blanquecino deseado (190 mg, 45%).

Paso 3. (S)-terc-butil 3-(2-(2-(1-(terc-butoxicarbonil)-5-((terc-butoxicarbonil)oxi)-1H-indol-3-il)acetamido)-3-((2-(2-(2-fluoroetoxi)etoxi)etil)amino)-3-oxopropil)-5-((terc-butoxicarbonil)oxi)-1H-indol-1-carboxilato

A una solución de TBAF 1 M en THF se añadió el producto preparado en el Paso 2 (30 mg, 1,0 eq.). La mezcla de reacción se calentó a 60 °C y se agitó durante 30 min. Tras enfriar a temperatura ambiente, se evaporó el disolvente y el residuo resultante se disolvió con acetato de etilo (9 mL). La fase orgánica combinada se lavó con salmuera, se secó sobre Na<2>SO<4>anhidro y se concentró. La mezcla obtenida se utilizó en el paso siguiente sin purificación adicional.

1H NMR (500 MHz, DMSO) 88,48 (d, 1H), 8,17 (m, 1H), 7,8 (m, 1H), 7,52 (s, 1H), 7,51 (s, 1H), 7,43 (d, 1H), 7,33(d, 1H), 7,1 (m, 1H), 4. 62 (dd, 1H), 4,06 (t, 2H), 3,52 (m, 2H), 3,37 (m, 4H), 3,34 (m, 4H), 3,29 (m, 2H), 2,98 (m, 1H), 2,87 (m,1H), 1,60 (s, 9H), 1,57 (s, 9H), 1,49 (s, 9H), 1,48 (s, 9H); 13C NMR (125 MHz, DMSO) 8 171,4, 169,6, 152,2, 152,1,149,2, 146,7, 146,6, 145,3, 132,8, 132,7, 131,4, 131,2, 130,5, 128,2, 118,5, 116,9, 115,7, 115,5, 112,5, 112,3, 110,3,110,2, 84,2, 84,1, 83,4, 83,3, 70,4, 70,0, 69,9, 69,3, 68,3, 53,1,42,3, 27,9 (solapamiento, 6), 27,7 (solapamiento, 6), 21,5. LCMS encontrado m/z 928,0 (M+1).

Paso 6. (S)-N-(2-(2-(2- fluoroetoxi)etoxi)etil)-3-(5-hidroxi-1H-indol-3-il)-2-(2-(5-hidroxi-1H-indol-3-il)acetamido) propenamida

A 2 M de HCl en acetonitrilo (0,5 mL) se añadió el producto preparado en el Paso 5 (12 mg) y la mezcla de reacción se agitó a 60 °C durante 30 min. El disolvente se evaporó y el residuo se separó mediante HPLC preparativa para obtener el producto deseado. La producción global de los pasos 5-6 fue del 60%.

Ejemplo 3. Síntesis de (S)-N-(6- fluorohexil)-3-(5-hidroxi-1H-indol-3-il)-2-(2-(5-hidroxi-1H-indol-3-il)acetamido) propanamida (Compuesto 4)

El Compuesto 4 se preparó según los procedimientos descritos para la preparación del Compuesto 8. 1H NMR (500 MHz, DMSO) 810,50 (d, 1H), 10,41 (d, 1H), 8,54 (amplitud, 1H), 7,84 (d, 1H), 7,69 (m, 1H), 7,10 (m, 2H), 7,00 (d,1H), 6,91 (d, 1H), 6,84 (m, 2H), 6,57 (m, 2H), 4,44 (m, 2H), 4,32 (m, 1H), 2,92 (m, 4H), 1,54 (m, 2H), 1,22 (m, 4H), 1,11 (m, 2H); 13C NMR (125 MHz, DMSO) 8: 171,0, 170,4, 150,2, 136,2, 130,6, 128,0, 124,1, 123,8, 122,8, 113,8, 111,5,111,3, 111,1, 109,0, 107,8, 102,6, 90,1, 86,1, 84,5, 82,9, 80,9, 53,4, 41,3, 39,0, 38,4, 32,5, 29,8, 28,7, 25,8, 24,3; LCMSF encontrado m/z: 495,3 (M+1).

Ejemplo 4. Síntesis de (S)-4-fluoro-N-(3-(5-hidroxi-1H-indol-3-il)-1 -((2-(5-hidroxi-1H-indol-3-il)etil)amino)-1-oxopropano-2-il)benzamida (Compuesto 6)

(S)-2-amino-3-(5-hidroxi-1H-indol-3-il)-N-(2-(5-hidroxi-1H-indol-3-il)etil)propanamida y el intermedio 2k se hicieron reaccionar en presencia de trietilamina para proporcionar el Compuesto 6 frío, como se muestra en el Esquema 6. Se preparó (S)-2-amino-3-(5- hidroxi-1H-indol-3-il)-N-(2-(5-hidroxi-1H-indol-3-il)etil)propanamida a partir de 5-hidroxi-L-triptófano y serotonina con protección Boc, tratado con el agente de acoplamiento EDC y HOBt, y posterior desprotección Boc. El intermedio 2k se preparó mediante acoplamiento DCC del ácido 4-fluorobenzoico con NHS. 1H NMR (500 MHz, DMSO) 810,48(d, 1H), 10,44 (d, 1H), 8,49 (d, 1H), 8,16 (m, 1H), 7,91 (m, 1H), 7,27 (m, 2H), 7,11 (m, 3H), 7,01 (m, 2H), 6,86 (d, 1H),6,59 (m, 2H), 4,67 (m, 1H), 3,34 (m, 2H), 3,15 (dd, 1H), 3,04 (dd, 1H), 2,72 (m,2H); 13C NMR (125 MHz, DMSO) 8:171,5, 165,1, 162,6, 150,2, 130,8, 130,7, 130,2, 128,0, 127,9, 124,0, 123,1, 115,2, 114,7, 111,7, 111,5, 111,3, 111,2,110,8, 109,7, 102,6, 102,3, 54,3, 39,2, 27,7, 25,3; LCMS encontrado m/z (M+1): 501,3.

Ejemplo 5. N-((S)-3-(5- hidroxi-1H-indol-3-il)-1-((2-(5-hidroxi-1H-indol-3-yl)etil)amino)-1-oxopropano-2-il)-5-((3aS,4S,6aR)-2- oxohexahidro-1H-tieno[3,4-d]imidazol-4-il)pentanamida (Compuesto 3)

Paso 1. (S)-2-((terc- butoxicarbonilo)amino)-3-(5-hidroxi-1H-indol-3-il) ácido propanoico

A una solución de K<2>CO<3>(440 mg, 3,2 mmol) en agua (4 mL), se añadió L-5-hidroxi-triptófano (5-HT, 330 mg, 1,5 mmol). Después, se añadió una solución de di-terc-butil dicarbonato (392 mg, 1,8 mmol) en THF (2 ml) a la solución y la mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 2 h. La mezcla de reacción se ajustó a un pH 2-3 añadiendo HCl 1M. Tras evaporar para eliminar el THF, la solución resultante se extrajo con acetato de etilo (10 mL x 3), la fase orgánica se lavó con salmuera (5 mL x 3), se secó sobre Na<2>CO<3>anhidro y se evaporó. El residuo se separó mediante cromatografía flash (acetato de etilo como eluyente) para obtener el producto deseado (76%). 1H NMR: 12,48 (s, 1H), 10,48 (s, 1H), 8,59 (s, 1H), 7,11 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 7,02 (d, J = 2,0 Hz, 1H), 6,93 (D, J = 8,5 Hz, 1H), 6,81 (d, J = 2,0 Hz, 1H), 6,57 (dd, J1 = 8,5 Hz, J2 = 2,0 Hz, 1H), 4,09 (m, 1H), 3,00 (dd, J1 = 28 Hz, J2 = 5 Hz, 1H), 2,86 (dd, J1 = 28 Hz, J2 =5 Hz, 1H); , 1,32 (s, 9H); 13C NMR: 174,0, 155,4, 150,2, 130,6, 127,7, 124,1, 111,7, 111,2, 109,1, 102,0, 78,0, 54,3, 28,2, 26,9; LCMS encontrado m/z: 321,3 (M+1).

Paso 2. (S)-terc- 3-(5-hidroxi-1H-indol-3-il)-1-((2-(5-hidroxi-1H-indol-3-il)etil)amino)-1-oxopropano-2-il)carbamato

A una solución del producto del Paso 1 (192 mg, 0,6 mmol) en DMF (3 mL) se añadió EDC.HCl (140 mg, 0,72 mmol) y HOBt (108 mg, 0,72 mmol), y la mezcla resultante se agitó durante 10 min. A continuación, se añadió una solución de serotonina de base libre (110 mg, 0,5 mmol) preparada previamente en DMF (2 mL) y la mezcla de reacción se agitó durante otras 2 h. A continuación, la mezcla de reacción se extrajo con acetato de etilo (10 mL x 3), la capa orgánica se lavó con salmuera (5 mL x 3), se secó sobre Na<2>CO<3>anhidro y se evaporó. El residuo se separó mediante cromatografía flash (acetato de etilo como eluyente) para obtener un sólido blanco (196 mg, (82%. 1H NMR: 10,45 (s, 2H), 8,56 (s, 1H), 8,54 (s, 1H), 7,89 (t, 1H), 7,10 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 7,09 (d, J = 9,0 Hz, 1H), 7,0 (m, 2H),<6 , 8 8>(d, J = 1.5 Hz, 1H), 6,83 (d, J = 2,0 Hz, 1H), 6,67 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 6,57 (m, 2H), 4,12 (m, 1H), 3,26 (m, 2H), 2,96 (dd, J1 = 14.5 Hz, J2 = 4,5 Hz, 1H), 2,79 (dd, J1 = 14,5 Hz, J2 = 4,5 Hz, 1H), 2,66 (m, 2H), 1,32 (s, 9H); 13C NMR: 171,8, 155,1, 150,15, 150,13, 130,8, 130,6, 128,1, 127,8, 123,9, 123,0, 111,6, 111,4, 111,2, 111,1, 110,7, 109,3, 102,5, 102,2, 77,9, 55,0, 40,1, 28,2, 28,0, 25,2; LCMS encontrado m/z: 479,3 (M+1).

Paso 3. N-((S)-3-(5- hidroxi-1H-indol-3-il)-1-((2-(5-hidroxi-1H-indol-3-il)etil)amino)-1 - oxopropan-2-il)-5-((3aS,4S,6aR)-2-oxohexahidro-1H-tieno[3,4-d]imidazol-4-il)pentanamida

A una solución de TFA al 10% en DCM (2 mL) se añadió el producto del Paso 2 (95 mg), y la mezcla de reacción se agitó durante 5 h a temperatura ambiente. A continuación, la mezcla de reacción se evaporó para eliminar el disolvente y se utilizó sin purificación adicional. A la solución del compuesto obtenido en DMF (2 mL) se añadió TEA (140<j>L, 1 mmol) y biotina-NHS (54 mg, 0,16 mmol). La mezcla de reacción se agitó durante 4 h a temperatura ambiente. A continuación, la mezcla de reacción se purificó mediante HPLC preparativa (gradiente: 0-100% de acetonitrilo/agua) para obtener el producto deseado, el Compuesto 3(36 mg, 40%). 1H NMR: 10,5 (s, 1H), 10,4 (s, 1H), 7,96 (t, 1H), 7,89 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 7,10 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 7,09 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 6,99 (m, 2H), 6,88 (d, J = 2,0 Hz, 1H), 6,82 (d, J = 2,0 Hz, 1H), 6,57 (m, 2H), 6,39 (b, 2H), 4,47 (m,1H), 4,26 (m, 1H), 4,04 (m, 1H), 3,26 (m, 2H), 3,00 (m, 2H), 2,78 (m, 3H), 2,65 (m, 2H), 2,07 (m, 2H), 1,55 (m, 1H), 1,42 (m, 3H), 1,20 (m, 2H); 13C NMR: 173,6, 173,2, 164,4, 151,8, 132,5, 132,3, 129,7, 129,5, 125,6, 124,8, 113,3, 113,1,112,9, 112,8, 112,4, 111,0, 104,2, 103,9, 62,6, 60,9, 57,0, 54,9, 36,6, 36,6, 29,7, 29,6, 29,5, 27,1,26,9, 26,8, 26,0; LCMS encontrado m/z: 605,3 (M+1).

Ejemplo 6. N-((S)-1-((2-(1H-indol-3-il) etil)amino)-3-(1H-indol-3-il)-1-oxopropano-2-il)-5-((3aS,4S,6aR)-2-oxohexahidro-1H-tieno [3,4-d]imidazol-4-il)pentanamida

(Compuesto 18)

El análogo inespecífico, Compuesto 18, se sintetizó según el procedimiento descrito en el Ejemplo 5, sustituyendo el L-triptófano por 5-HT. El L-triptófano no puede ser oxidado por MPO. 1H NMR (500 MHz, DMSO) 8: 10,80 (d,1H), 10,77 (d, 1H), 8,02 (m, 1H), 7,93 (d, 1H), 7,58 (d, 1H), 7,52 (d, 1H), 7,32 (m, 2H), 7,10 (m, 2H), 7,05 (m, 2H), 6,95 (m, 2H), 6,38 (amplitud, 1H), 4,51 (dt, 1H), 4,27 (m, 2H), 4,05 (m, 2H), 3,31 (m, 2H), 2,99 (m, 3H), 2,76 (m, 3H), 2,55 (d,2H), 2,07 (m, 2H); 13C NMR (125 MHz, DMSO) 8: 171,7, 171,3, 162,5, 136,0, 135,8, 127,1, 126,9, 123,2, 122,4, 120,7, 120,6, 118,3, 118,0(2), 117,9, 111,5, 111,1, 111,0, 110,1,60,7 (2), 59,0, 55,1, 53,1 (2), 34,7, 27,8, 27,7, 27,6, 24,9, 24,8. LCMS encontrado m/z: 572,2 (M+1).

Ejemplo 7. Química del radiomarcado

La química de radiomarcado se realizó mediante síntesis automatizada de los siguientes pasos: (1) secado azeotrópico de [18F]-fluoruro; (2) [18F]-fluoración; (3) desprotección Boc; y (4) purificación por HPLC, seguida de formulación en fase sólida del producto final. El módulo de síntesis se operó en las siguientes secuencias con referencias numéricas a la FIG. 1. Las síntesis automatizadas se realizaron en un módulo sintetizador automatizado Synthra (Hamburgo, Alemania) modelo RN Plus. La desprotección Boc se realizó con 0,4 mmol de HCl acuoso a 95 °C añadido directamente a la mezcla de reacción de marcado sin purificación previa. La síntesis de dos pasos se puede acabar aprox. en 80 min con una producción radioquímica total del 47% tras la corrección del decaimiento.

1. [18F]- El fluoruro, recibido de PETNET (Waltham, MA), se produjo por la reacción nuclear 18O(p,n)18F y se suministró al vial del reactivo A (A) del módulo de radiosíntesis mediante jeringa tras mezclarlo con bicarbonato de tetrabutilamonio (TBAT, 75 mM en H<2>O, 250 j L) y acetonitrilo (MeCN, 300 j L).

2. La síntesis automatizada comenzó con la adición de la mezcla de [18F]-fluoruro/TBAB (A) y MeCN (B) al recipiente de reacción 1 (RV1).

3. La mezcla (RV1) se secó azeotrópicamente a 65 °C bajo flujo de N<2>y vacío durante 5 min, después a 98 °C bajo flujo de N<2>y vacío durante 8 min, y a continuación se enfrió a 50 °C.

4. El precursor TsO-protegido del Compuesto 8 (5 mg en 400<j>L de MeCN), precargado en C, se añadió a RV1. RV1 se presurizó a 2 atm con argón (V14) y la mezcla de reacción se mantuvo a 70 °C durante 10 min.

5. A continuación, la mezcla de reacción se enfrió a 50 °C, se purgó a través de la válvula V18 y el ácido clorhídrico (1,5 M en agua, 400<j>L) precargado en D se añadió a RV1. El reactor se selló mediante el cierre de la válvula V18 y la mezcla de reacción se calentó hasta 70 °C, temperatura que se mantuvo durante 17 min, después se enfrió a 30 °C.

6. La mezcla de reacción (RV1) se diluyó con una mezcla de MeCN/H<2>O (25/370 j L) precargada en E.

7. La mezcla de reacción cruda (RV1) se transfirió al circuito de HPLC utilizando presión de argón por medio de un detector de fluidos (a través de V8 y V9), se inyectó en una columna semi-preparativa (Machery-Nagel Nucleodur Pyramid C18 semi-preparativa, 250 x 10,00 mm, 5 mm), y se eluyó con 25:75 CH<3>CN/H<2>O (0,075% de ácido fórmico) por volumen a un caudal de 5,5 jl/min. El eluyente se monitorizó por UV (A = 254 nm) y detectores radioquímicos conectados en serie.

8. Un cromatograma típico de HPLC semi-preparativo es el siguiente. La fracción que contiene el producto radioquímico principal (tR = 20,1 min) se recogió, a través de la válvula 20, en un recipiente de dilución de 50 mL, que se precargó con 20 mL de ascorbato sódico acuoso al 0,5% (p/v).

9. A continuación, la fracción HPLC diluida se cargó en un cartucho Sep-pak Plus C18 SPE (C18 SPE) (Waters; preactivado con 5 mL de EtOH seguido de 10 mL H<2>O).

10. El cartucho C18 SPE se lavó con 5 mL de ascorbato sódico acuoso al 0,5% (p/v), precargado en G para eliminar restos de sales, fase móvil de HPLC y fluoruro [18F] y, después, el Compuesto 9 se eluyó con 1,5 mL de MeCN precargado en F, en un vial de recogida.

11. Este material se retiró del módulo de síntesis automatizado y se concentró a presión reducida.

El Compuesto 9 se degradó con el tiempo cuando se almacenó en 1x PBS para inyección a temperatura ambiente el espacio como se muestra en la FIG.1B. Sin estar limitado por la teoría, se especula que el oxígeno disuelto en el disolvente causó la degradación del Compuesto 9. Para inhibir la degradación, se utilizó en su lugar 0,5% (p/v) de ascorbato sódico acuoso en solución salina para la formulación, y el Compuesto 9 resultante fue estable durante al menos 4 h a temperatura ambiente como se muestra en la FIG. 1C.

Ejemplo 8. Obtención de imágenes PET-CT

Validación in vivo

Experimento de Matrigel

Se inyectaron 300 j l de una mezcla 1:1 de matrigel y medio esencial mínimo (MEM) que contenía GOX y/o diferentes concentraciones de MPO (0, 15 jl, 30 ml) por vía subcutánea en la cara ventral de los muslos del ratón. Transcurridos 30 min, se inyectaron por vía intravenosa 300-600 jC i del Compuesto 9 de MPO. Al cabo de 2 h, se escaneó a los ratones usando PET

Para validar la eficacia de los agentes MPO PET para aplicacionesin vivo,se realizaron experimentos de implantación en matrigel embebiendo MPO en matrigel junto con glucosa oxidasa (GOX) como donante de H<2>O<2>. El matrigel es una mezcla proteínica gelatinosa que es líquida a 0 °C pero forma un gel a temperatura corporal, al tiempo que sigue siendo difusible a las moléculas del torrente sanguíneo cuando se inyecta en animales vivos (véase, por ej., Chen et al, Radiology, 2006, 240(2):473-481). Las mezclas MPO/matrigel se inyectaron por vía subcutánea en los muslos del ratón, seguidas de la inyección de los trazadores MPO PET 30 min después. Como se muestra en las FIG. 2A-2C, el Compuesto 9 demostró superioridades sobre los Compuestos 5 y 7, incluyendo una elevada ratio de señal en el fondo, menor captación en hígado y corazón y no se observó defluoración. La señal de la parte MPO fue aproximadamente 1,7 veces superior a la de la parte de control. Aunque el Compuesto 5 dio una señal de la parte MPO similar a la de la parte de control (Fig. 2B), se observó una alta captación en corazón e hígado y un alto fondo de defluoración. El Compuesto 7 dio tanto baja señal como alta captación cardíaca (Fig. 2A).

Para verificar la especificidad del Compuesto 9 sobre MPO, se embebieron diferentes concentraciones de MPO (0, 15 |jL, 30 mL) en matrigel para los experimentos de implantación. Se observó un aumento lineal de la señal proporcional a las concentraciones de MPO, como se muestra en la FIG. 3B

Farmacocinética y biodistribución

Se evaluó la farmacocinética y la biodistribución del Compuesto 9 en ratones de tipo salvaje C57BL/6. Tras la inyección sistémica intravenosa (i.v.) en la vena de la cola, se recogieron muestras de sangre para determinar la tasa de eliminación del Compuesto 9 de la sangre. Se recogieron los órganos principales del ratón y se midió la radiactividad. Los datos se ajustaron mediante un modelo de desintegración exponencial en dos fases para obtener una semivida corta de 0,26 min y una semivida lenta de 4,66 min, siendo la semivida rápida la responsable del 94,7% del aclaramiento, como se muestra en la FIG. 4A. La biodistribución de varios órganos se muestra en la FIG. 4B. Además de las heces, el hígado y el riñón mostraron la mayor radiactividad, seguidos de los huesos y la linfa.

Las FIG. 5A-5D muestran los resultados de un estudio dinámico de MPO utilizando el Compuesto 9.

Inflamación por CFA y tratamiento con inhibidor de MPO PF-1355

Cada pareja contenía un animal tratado y otro no tratado; número de parejas, n = 3. Se inyectó la emulsión 1/1 de CFA/PBS (40 jL ) por vía subcutánea en la cara dorsal de una pata delantera bajo anestesia de isoflurano, y se inyectó PBS (40 mL) en la otra pata delantera como control. Después de 1 h, al grupo tratado se le administró PF-1355 (50 mg/kg) por sonda, y luego se le trató cada 6 h durante otras 3 veces, y al grupo de control se le trató con vehículo (10 mL/kg) en consecuencia. Pasadas 24 h, se inyectaron 300-600 uCi del Compuesto 9 por vía intravenosa. Después de otras 2 h, se escaneó cada pareja de ratones lado por lado.

Tras validar la eficacia del Compuesto 9 MPO en experimentos con matrigel, se investigó la especificidad del agente en la inflamación. El adyuvante completo de Freund (CFA) o su emulsión pueden causar inflamación cuando se inyectan por vía subcutánea al animal. La emulsión de CFA se inyectó en un lado dorsal de la pata delantera del ratón y el otro lado se inyectó con PBS. Pasadas 24 h, se inyectó el Compuesto 9 por vía intravenosa y se escaneó 2 h después de la inyección. Como se muestra en la FIG. 6A, la señal del lado CFA fue 4 veces mayor que la de la inyección del vehículo. Para verificar aún más la especificidad del Compuesto 9 MPO, los ratones fueron tratados con el inhibidor de MPO PF-1355 1 h después de la inyección de la emulsión CFA y continuamente cada 6 h después durante 4 veces antes de inyectar el Compuesto 9. El grupo de control se trató con vehículo tras la inyección de CFA. A continuación, se escaneó cada par de ratones de los grupos tratado y no tratado. La señal del grupo tratado disminuyó significativamente en comparación con la del grupo no tratado debido a la inhibición de la actividad de MPO mediante PF-1355, como muestra la FIG. 6B. El porcentaje medio de inhibición de los tres pares fue del 59%, como puede verse en la Tabla 1.

Tabla 1

Estos datos demuestran que el Compuesto 9 es específico para la inflamación y la actividad MPO y puede utilizarse como agente de seguimiento del tratamiento para informar del progreso inflamatorio. Los valores indicados son en SUV.

Ejemplo 9. Validaciónin vivode la sensibilidad y especificidad del Compuesto 3

Para todos los experimentos con animales se utilizaron ratones hembra C57BL/6J o MPO-knockout (de Jackson Laboratories, Bar Harbor, ME) de entre cuatro y diez semanas de edad. Los ratones fueron alimentados con dieta sin biotina durante 5 días antes de proceder a la obtención de las imágenes con tomografía molecular fluorescente (FMT) o imágenes refractarias a la fluorescencia (FRI).

Para validar la sensibilidad del Compuesto 3, se embebieron diferentes concentraciones de MPO humana purificada (Lee Biosolutions, St. Louis, MO) y glucosa oxidasa (GOX, como donante de H<2>O<2>, Affymetrix, Santa Clara, CA) en una mezcla 1:1 de matrigel (BD Bioscience, San Jose, CA) y medio esencial mínimo (MEM, Corning, Corning, NY), y se inyectaron 400 pL de esta mezcla por vía subcutánea en la cara ventral del muslo. Transcurridos 30 minutos, se inyectaron por vía intravenosa 2 nmol del Compuesto 3 en 100 pL de solución salina tamponada con fosfato (PBS). Una hora más tarde, se inyectaron por vía intravenosa 25 pL de estreptavidina AlexaFluor- 647 (2 mg/mL, SA-647, Invitrogen, Carlsbad, CA) y se realizó un FMT cada 15 minutos durante un total de 60 minutos. Se tomaron imágenes de los ratones en un sistema FMT específico (Perkin Elmer, Waltham, MA) a 635 nm de excitación y 655 nm de emisión.

Para validar la especificidad del Compuesto 3, se inyectó a los ratones una mezcla 1:1 de MEM y matrigel como se ha indicado antes, que contenía una combinación de GOX, MPO, y/o hidrazida de ácido 4-aminobenzoico (ABAH, un inhibidor de MPO irreversible específico, Sigma). Además, se inyectó ABAH por vía intraperitoneal (i.p.) en algunos ratones. El Compuesto 3 o el análogo inespecífico, Compuesto 18, (2 nmol en 10 pL de PBS) se inyectaron por vía intravenosa 30 minutos después, y 25 pL de SA-647 (2 mg/mL) se inyectaron 60 minutos después. La obtención de imágenes mediante un sistema<f>R<i>específico (Olympus OV-110, Tokio, Japón) se realizó 30 minutos después de la inyección de SA-647. AlexaFluor-647 unido al sensor MPO se detectó a 595-635 nm de excitación y 675/50 nm de emisión. Se detectó un aumento lineal de la señal con concentraciones crecientes de MPO, mientras que no se detectó ninguna señal por encima del fondo con la inyección de vehículo (FIG. 7A), lo que demuestra que nuestra sonda es sensible a la actividad de la MPO.

En la obtención de imágenes de reflectancia de fluorescencia (FRI), se detectó un aumento de la señal fluorescente con MPO y GOX, que se inhibió fácilmente mediante la adición de ABAH, como se muestra en la FIG. 7B. Con MPO pero sin GOX, no se detectó fluorescencia, lo que demuestra que el Compuesto 3 no se activó sólo por H<2>O<2>, como se muestra en la FIG. 7B. La ausencia de MPO y GOX tampoco produjo fluorescencia apreciable, como se muestra en la FIG. 7B. La inyección sistémica (intraperitoneal) de ABAH también dio lugar a la abrogación de la señal de fluorescencia consistente con la inhibición satisfactoria de MPO, como se muestra en la FIG. 7B. Por último, el análogo inespecífico que contenía tirosina en lugar de fracciones de 5-HT mostró sensibilidad tanto a GOX como a MPO, como se muestra en la FIG. 7B. Estos resultados muestran la especificidad del Compuesto 3 respecto a MPO.

Ejemplo 10. Dermatitis de contacto irritante

Ratones hembra C57Bl/6J (tipo salvaje, Jackson Laboratories, Bar Harbor, ME) y ratones MPO-knockout (KO, Jackson Laboratories) fueron tratados tópicamente con 0,08 pmol de Phorbol 12-miristato 13-acetato (PMA, Sigma, St. Louis, MO) en una pata trasera y con vehículo en la otra para inducir una dermatitis de contacto irritante. Este modelo está bien descrito en la bibliografía y desencadena una rápida inflamación con afluencia de neutrófilos en la piel. 6 horas después de la inducción, se inyectó por vía intravenosa a los ratones 2 nmol del Compuesto 3 o del análogo inespecífico, el Compuesto 18. 1 hora después, se inyectaron por vía intravenosa 2,5 pg de SA-647 para que se uniera al Compuesto 3 biotinilado. Los ratones se sometieronin vivoa la técnica de obtención de imágenes mediante un sistema FRIin vivoespecífico, tal como se ha descrito antes en el Ejemplo 11.

Aplicando estos resultados a modelos de enfermedad en ratones, se investigó la especificidad de la sonda en la dermatitis de contacto irritante. Cuando los ratones de tipo salvaje fueron tratados tópicamente con PMA para inducir una dermatitis de contacto irritante, se observó un aumento de la señal de fluorescencia en la pata trasera tratada con PMA, pero no en la pata trasera tratada con vehículo de la FIG. 8A. En ratones MPO knockout tratados con PMA e inyectados con el Compuesto 3, no se detectó fluorescencia sobre el fondo, como se muestra en la FIG. 8B. Del mismo modo, la inyección del análogo inespecífico en ratones de tipo salvaje tratados con PMA no produjo fluorescencia sobre el fondo, como se muestra en la FIG. 8C. La cuantificación de la fluorescencia confirmó estos hallazgos, ya que la intensidad de fluorescencia fue de 130,5±4,7 para PMA en comparación con 34,4 ± 8,6 para el vehículo (p < 0,01) en ratones de tipo salvaje inyectados con el Compuesto 3, 36,9 ± 9,8 para PMA en comparación con 43,9 ± 10,8 para el vehículo (p > 0,05) en ratones MPO-KO inyectados con el Compuesto 3, y 50,1 ± 5,8 para PMA en comparación con 28,4 ± 5,5 para el vehículo (p > 0,05) en ratones de tipo salvaje inyectados con el sensor de control no específico, como se muestra en la FIG. 8D.

Ejemplo 11. Abscesos cerebrales

A continuación, se anestesiaron ratones hembra C57Bl/6J y se fijaron en un marco estereotáctico para la cabeza (David Kopf Instruments, Tujunga, CA). Se suspendieron 1-3 x 106 unidades formadoras de colonias (UFC) de bacterias Salmonella (ATCC n° 14028) en 2 pL de PBS y se inyectaron lentamente en la sustancia blanca frontal profunda (2,0 mm lateral y 1,2 mm anterior al bregma) a una profundidad de 3,0 mm. 23 horas más tarde, se inyectó a los ratones por vía intravenosa 2 nmol del Compuesto 3, como se ha indicado antes, seguido de una inyección intravenosa de SA-647. Después, se anestesió a los ratones con isoflurano y se perfundieron transcardialmente con 20 mL de PBS helado. Se recogieron los cerebros y se seccionaron en cortes coronales de 1 mm utilizando un cortador cerebral (Harvard Apparatus, Holliston, MA) y se sometieron inmediatamente a FRI como se ha descrito anteriormente. Los cerebros de ratones inyectados con salmonela también se embebieron en OCT (Sakura,Torrance, CA) y se congelaron en isopentano refrigerado (Sigma) y se almacenaron a 80 °C hasta el seccionamiento. Se cortaron secciones seriadas de 6 pm en un criostato (Thermo scientific). Las secciones se descongelaron a temperatura ambiente durante 10-20 minutos y se rehidrataron en PBS durante 10 minutos. A continuación, las secciones se incubaron en tampón de bloqueo (1% de suero de caballo en PBS) durante 30 minutos a temperatura ambiente, y se incubaron con la sonda específica de MPO diluida en tampón de incubación (1% de albúmina de suero bovino, 1% de suero de asno normal, 0,3% de Triton X-100 y 0,01% de azida sódica en PBS) durante toda la noche a 4 °C. Al mismo tiempo, las secciones adyacentes se incubaron con anticuerpos fluorescentes anti-MPO diluidos en tampón de incubación. Las secciones se lavaron en tampón de lavado 3 veces y luego se incubaron con el anticuerpo SA-AF-647, posteriormente se lavaron en tampón de lavado 3 veces. A continuación, las secciones se tiñeron con DAPI (4', 6-diamidino-2-fenilindol, Invitrogen) y se montaron con un medio de montaje antidecoloración. Las imágenes se capturaron con una cámara digital (Nikon DXM 1200-F, Nikon Inc., NY).

Después, se indujeron abscesos en el SNC en los lóbulos frontales de los ratones de tipo salvaje mediante inyección intracerebral de salmonela, como se muestra en la FIG. 9A, seguida de inyección del Compuesto 3 y AF-647 a las 23 horas. La FRIex vivode los cortes cerebrales coronales dio lugar a un aumento de la señal de fluorescencia consistente con la actividad MPO en el hemisferio ipsilateral, pero no en el hemisferio contralateral. Por el contrario, la inyección de solución salina en lugar de bacterias no dio lugar a una señal de MPO significativamente elevada, como se muestra en la FIG. 9B. La cuantificación de la intensidad de la fluorescencia confirmó estos resultados, ya que la señal fue de 43242 (valor medio) en el hemisferio ipsilateral y de 10972 (valor medio) en el hemisferio contralateral, como se muestra en la FIG. 9B.

Al añadir el Compuesto 3 seguido de SA-647 a seccionesex vivorecién congeladas de áreas de absceso y control, se detectó un aumento de la señal fluorescente consistente con la actividad de MPO en el hemisferio ipsilateral, pero no en el hemisferio contralateral. Las secciones adyacentes incubadas con un anticuerpo anti-MPO para teñir la proteína MPO demostraron señal tanto en el hemisferio ipsilateral como en el contralateral. En el área de control contralateral, se detectaron células con tinción positiva para proteínas MPO pero sin actividad apreciable de MPO, como se muestra en la FIG. 9C. Además, las áreas con actividad MPO a menudo mostraban relativamente menos proteínas de MPO.

Ejemplo 12. Obtención de imágenes de trampas extracelulares de neutrófilos

Se inyectaron ratones hembra C57Bl/6J por vía subcutánea en la cara dorsal del muslo con 108 CFU de streptococcus pneumonia (SPn, ATCC n° 6303) para inducir celulitis bacteriana. 6 horas después de la inducción, se inyectó a los ratones por vía intravenosa 2 nmol de MPO. 1 hora después, se inyectó por vía intravenosa 2,5 |jg de Strepavidin-AlexaFluor-647 para que se uniera al Compuesto 3 biotinilado. Para distinguir la liberación de gránulos de neutrófilos (donde MPO y otras proteínas de los gránulos son secretadas al fagosoma o al espacio extracelular) de la formación de NET (donde los neutrófilos liberan cadenas de cromatina con MPO), se inyectó por vía intravenosa 1 jg del colorante de ADN impermeable a la membrana Sytox Green (Invitrogen) a la misma hora. A continuación, se procedió a la obtención de imágenes de los ratonesin vivomediante un sistema de IRF específico, tal como se ha descrito antes en el Ejemplo 11. El AlexaFluor-647 unido al sensor MPO se detectó a 595-635 nm de excitación y 675/50 nm de emisión. Sytox Green se detectó a 460-490 nm de excitación y 530/40 nm de emisión.

Después, la formación de NET se visualizóin vivoen un modelo de ratón de celulitis bacteriana inyectando a los ratones con Streptococcus pneumonia (SPn) y obteniendo imágenes tanto de MPO con Compuesto 3 como de ADN extracelular con Sytox Green. Se detectó un aumento de la señal de fluorescencia tanto del Compuesto 3 como del Sytox Green en los muslos inyectados con SPn, pero no en el muslo contralateral inyectado sólo con PBS, como se muestra en las FIG. 10A-10B. Las áreas positivas de actividad MPO correspondían a áreas de ADN extracelular (Sytox Green), lo que sugiere la presencia de NETs en el lugar de la celulitis bacteriana inducida por SPn. La cuantificación de la fluorescencia mostró un aumento de la señal en el lado inyectado con SPn (212,5±22,9 RFU), pero no en el lado inyectado con PBS, como se muestra en la FIG. 10A-B (49,4±15,5 RFUs, p < 0,01).

Las NET se han descrito recientemente y cada vez hay más pruebas de su implicación no sólo en las infecciones, sino también en la trombosis y la autoinmunidad. Hasta ahora, la investigación sobre NET fuera de los sistemasin vitrose realizaba mediante evaluación histológica post mortem o microscopía de fluorescencia. Mediante la co-inyección del Compuesto 3 con Sytox Green, se obtuvieron imágenes de los sitios de actividad de la MPO y del ADN extracelular, dos componentes moleculares definitorios de NET (35). Sin tener en cuenta la teoría, la colocalización de estos dos marcadores sugiere la formación de NETin vivo.

El Compuesto 3 permitió la detección de dermatitis, abscesos del SNC y celulitis con una ratio CNR de aproximadamente 4. Esto es mucho más alto que una sonda MPO fluorescente previamente reportada (SNAPF), donde se encontraron ratios CNR de alrededor de 1,4 y 1,6in vitro e in vivo,respectivamente. Además, la CNR para SNAPFin vivose calculó utilizando ratones transgénicos con sobreexpresión de MPO humana. Dado que la MPO humana es aproximadamente 10 veces más activa que la MPO murina, se espera que la ratio CNR sea aún mayor en humanos utilizando la sonda MPO aquí descrita(es decir,el Compuesto 3). Para investigar la especificidad, se utilizaron ratones MPO knockout y se inyectó a ratones de tipo salvaje una sonda de control no específica. En ambos casos, no se detectaron señales por encima del fondo, lo que demuestra la especificidad del sistema de sonda. Ejemplo 13. Cambio de colorin vitro

Condiciones

Cada vial contenía 2 mM del compuesto 19F 9in PBS (150 j L, 5% DMSO) y los siguientes agentes, y se incubó a 37 °C durante 1 h:

Vial 1: control (2 mM Compuesto 19F 8 sólo)

Vial 2: Glucosa (6 j L, 1M), GOX (4 j L, 1 mg/mL);

Vial 3: H<2>O<2>(2 j L), HRP (peroxidasa de rábano, 1 j L);

Vial 4: H<2>O<2>(2 j L), MPO (10 j L);

Vial 5: H<2>O<2>(2 j L), MPO (10 j L);

Comparado con el vial 1, el vial 2 no presentó ningún cambio de color en ausencia de MPO. Los viales 3, 4 y 5 cambiaron a amarillo o marrón con el tiempo desde la oligomerización del compuesto 19F en presencia de MPO y H<2>O<2>, como se muestra en la FIG. 11.

Ejemplo 16. Ensayo de la barrera hematoencefálica

Se inyectó por vía intravenosa a ratones hembra C57Bl/6J con 3'-desoxi-3'-18F-fluorotimidina (FLT) o Compuesto 9 (300-600 pCi). Se obtuvieron imágenes de los ratones 2 horas después de la inyección de los trazadores PET. Como se muestra en la FIG. 12, el Compuesto 9 mostró una mayor captación en el cerebro en comparación con FLT, un compuesto incapaz de atravesar la barrera hematoencefálica (b Bb ), lo que demuestra que el Compuesto 9 puede atravesar la BBB intacta y puede ser un agente útil para obtención de imágenes para reportar enfermedades neurológicas.

Ejemplo 17. (S)-6-(dimetilamino)-N-(2-(2-(2- fluoroetoxi)etoxi)etil)-2-((S)-3-(5-hidroxi-1H-indol-3-il)-2-(2-(5-hidroxi-1H-indol-3-l)acetamido)propanamido)hexanamida

El compuesto del Ejemplo 17 se preparó según procedimientos similares a la síntesis del Compuesto 8 (véase, por ej., el Ejemplo 1 y el Esquema 3). En resumen, la N-Boc-N-dimetil-L-lisina se acopló con el Intermedio 2f utilizando clorhidrato de (3-dimetilaminopropil)-N'-etilcarbodiimida (EDC.HCl) y N-hidroxisuccinimida (NHS) como agentes de acoplamiento. La posterior desprotección del grupo Boc mediante ácido trifluoroacético al 10% dio lugar a (S)-2-amino-6-(dimetil amino)-N-(2-(2-(2-fluoroetoxi)etoxi)etil)-hexanamida, que se acopló con el Intermedio 1 para obtener el compuesto del título. 1H NMR (500 MHz, DMSO) 8 12,52 (amplitud, 1H), 10,46 (s, 1H), 10,42 (s, 1H), 9,25 (amplitud, 1H), 8,54 (m,2H), 7,96 (m, 2H), 7,61 (dd, 1H), 7,05 (d, 1H), 7,03 (d, 1H), 6,94 (m, 2H), 6,75 (m, 2H), 6,51 (m, 2H), 4,48 (m, 2H), 4,36 (m, 2H), 3,33-3,58 (m, 6H), 2,79-3,10 (m, 4H), 2,57-2,66 (m, 4H), 2,47 (s, 6H), 1,40-1,47 (m, 4H), 1,10 (m, 2H); 13C NMR (500 MHz, DMSO) 8174,0, 171,9, 171,2, 150,7, 150,6, 131,0, 128,5, 128,4, 128,3, 124,6 (2), 112,2, 112,0, 111,7,109,3, 109,2, 108,2, 103,0, 102,6, 84,3, 82,7, 70,2, 70,0, 69,3, 56,9, 53,9, 53,2, 52,6, 42,5, 38,9, 32,7, 31,7, 28,1,23,7,22,5 LCMS encontrado m/z 683,5 (M+1).

Ejemplo 18. (S)-6-(dimetilamino)-N-(2-(2-(2-(fluoro-18F) etoxi)etoxi)etil)-2-((S)-3-(5-hidroxi-1H-indol-3-il)-2-(2-(5-hidroxi-1H-indol-3-il)acetamido)propanamido)hexanamida sal de ácido clorhídrico

El radiomarcado [18F]- se realizó de acuerdo con los procedimientos descritos en el Ejemplo 7, comenzando con el precursor protegido con Boc del Ejemplo 17. La desprotección con Boc se realizó con HCl 1M para obtener el compuesto final, que mostró una mayor solubilidad.

Otras realizaciones

Debe entenderse que, si bien la invención se ha descrito junto con la descripción detallada de la misma, la descripción anterior pretende ilustrar y no limitar el alcance de la invención, que se define por el alcance de las reivindicaciones adjuntas. Otros aspectos, ventajas y modificaciones están dentro del alcance de las reivindicaciones siguientes.

Claims

REIVINDICACIONES 1. Un compuesto de Fórmula 1

o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, donde: L1 se selecciona del grupo formado por un enlace y -C(O)(C-i-6 alquileno)-; R1 se selecciona del grupo formado por H, C<1-6>alquilo, C<2-6>alquenilo, C<2-6>alquinilo y C<1-6>haloalquilo; L2 es -C(O)(C<1-6>alquileno)-; R2 se selecciona del grupo formado por heteroarilo de 5-10 miembros, donde el heteroarilo de 5-10 miembros es opcionalmente sustituido por 1, 2, 3, o 4 sustituyentes independientemente seleccionados de OH, halo, C<1-6>alcoxi, y C<1-6>haloalquilo; L3 se selecciona del grupo formado por -C(O)(C<1-6>alquileno)-, -C(O)(C<1-6>alquilenoxi-, -C(O)N(Ra3)(C<1-6>alquileno)-, -C(O)N(Ra3)(C<1-6>alquileno)-di(C<1-6>alquilo)amino, y -C(O)N(Ra3)(C<1-6>alquilenoxi)-; R3 se selecciona del grupo formado por C<1-6>alquilo, C<2>-<6>alquenilo, C<2-6>alquinilo, C<1-6>haloalquilo, C<1.6>alcoxi; o alternativamente, -L3-R3 forma un grupo oxo; R4 es H; y cada Ra1, Ra2, and Ra3 se selecciona independientemente del grupo formado por H, C<1-6>alquilo, C<2-6>alquenilo, C<2-6>alquinilo y C<1-6>haloalquilo.
2. El compuesto de la reivindicación 1, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, donde Ra3 es H.
3. El compuesto de la reivindicación 1, donde el compuesto de Fórmula I es un compuesto de Fórmula IV:

o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.
4. El compuesto de la reivindicación 1, donde el compuesto de Fórmula I es un compuesto de Fórmula V:

o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.
5. El compuesto de la reivindicación 1, donde el compuesto de Fórmula I es un compuesto seleccionado del grupo formado por: