ES2970487T3 - Composición repelente de artrópodos hematófagos - Google Patents

Composición repelente de artrópodos hematófagos Download PDF

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Abstract

La presente invención se refiere a una composición repelente de artrópodos hematófagos, y más específicamente se refiere a una composición repelente contra artrópodos hematófagos que transmiten enfermedades a animales, incluidos los humanos, o que directamente causan malestar o estrés debido a la succión de sangre. La composición repelente de artrópodos hematófagos según la presente invención no sólo tiene una excelente repelencia contra artrópodos hematófagos tales como mosquitos y ácaros, sino que también tiene una repelencia duradera y, por lo tanto, puede usarse como repelente de artrópodos hematófagos capaz de proteger a animales, incluidos los humanos. (Traducción automática con Google Translate, sin valor legal)

Description

DESCRIPCIÓN
Composición repelente de artrópodos hematófagos
Campo técnico
La presente invención se refiere a una composición repelente de artrópodos hematófagos, más específicamente a una composición repelente de artrópodos hematófagos que transmiten enfermedades a animales, incluyendo humanos, o causan directamente. La composición repelente comprende 3,4-malestar o estrés por succión de sangre. dimetoxibenzaldehído y uno o más tipos de aceite esencial vegetal, seleccionados a partir del grupo formado por litsea cubeba y gaulteria, en donde la relación de mezcla entre el aceite esencial y 3,4-dimetoxibenzaldehído está entre 1:1 y 1:5 en términos de relación ponderal.
Antecedentes de la técnica
Los animales hematófagos son los animales que transmiten enfermedades al succionar sangre no solo de animales como las aves de corral sino también de humanos o causan un estrés como la interrupción del sueño y la pérdida de peso al succionar sangre directamente, y los ejemplos de artrópodos hematófagos incluyen un mosquito, una garrapata (garrapata, garrapata nigua o similares), una mosca (mosca de los establos, mosca negra, mosca tse-tsé o similares), un tábano, un piojo púbico(Pthirus pubis),una chinche, un ácaro o similares.
Entre estos artrópodos, un mosquito transmite a los humanos una enfermedad infecciosa como la malaria, la fiebre amarilla, el dengue, la encefalitis japonesa, el virus del Nilo occidental, el virus del Zika, el chikungunya o similares (Service, M.W., Management of vectors. In: Youdeowei, A.,Service, M.W. (Eds.), Pest and Vectors Management in the Tropics, pp. 265-280, 1983). Además, los artrópodos arácnidos que parasitan principalmente en animales como la garrapata nigua yHaemaphysalis longicornisson los principales mediadores que transmiten la enfermedad de Lyme, la fiebre maculosa, la rickettsia, fiebre severa con síndrome de trombocitopenia, la enfermedad de tsutsugamushi o similares.
Se sabe que un repelente es el medio más adecuado para bloquear la transmisión de enfermedades causadas por artrópodos hematófagos. El repelente sintético orgánico disponible comercialmente desde la década de 1950 y más ampliamente utilizado hasta ahora es DEET (N,N-dietil-m-toluamida), cuya repelencia ha sido reconocida contra varios insectos, incluyendo mosquitos (McCabe, E.T. et al., Insect repellents, III. N,N-diethylamides, Journal of Organic Chemistry. 19: 493-498, 1954). Sin embargo, además de su excelente efecto, se sabe que DEBT tiene varios efectos secundarios, como olor desagradable, daños en plásticos o caucho, inhibición del sistema nervioso central, causando dermatitis, daños en el ADN de mamíferos o similares (Katz, T. M., J. H. Miller, and A. A. Hebert, Insect repellents: historical perspectives and new developments. J. Am. Acad. Dermatol. 58: 865-871,2008).
Como otro repelente sintético, un compuesto de hidrazida y un agente de control de artrópodos nocivos que contienen el compuesto de hidrazida se divulgan en la publicación de solicitud de patente coreana N° 2009-0130037, y compuestos de 1,2,4-tiadiazol y una composición de control de artrópodos que contiene los compuestos de 1,2,4-tiadiazol se divulgan en el registro de patente coreana N° 1012547. Además, en la publicación de solicitud de patente coreana N° 2016-0079851, se divulgan benzamidas sustituidas para el control de artrópodos.
En los últimos años, se han realizado estudios sobre el uso de un aceite esencial vegetal como materia prima de un repelente de artrópodos hematófagos. Sin embargo, el aceite esencial vegetal tiene generalmente una mejor eficacia para artrópodos hematófagos como mosquitos y garrapatas y una menor persistencia del repelente en comparación con el repelente sintético orgánico y, por lo tanto, existe el problema de que se debe utilizar en una gran cantidad. Se sabe que 3,4-dimetoxibenzaldehído (veratraldehído) es repelente para mosquitos, como se enseña en los documentos WO2015116801 A2, CN101743963 B y KR20150056537 A.
Los inventores han descubierto que se puede maximizar el efecto repelente cuando se utiliza 3,4-dimetoxibenzaldehído como una mezcla en una relación específica con el aceite esencial de gaulteria o el aceite esencial de litsea cubeba.
DESCRIPCIÓN DETALLADA DE LA INVENCIÓN
PROBLEMAS TÉCNICOS A RESOLVER
Es objeto de la presente invención proporcionar una composición repelente de artrópodos hematófagos que exhiba una excelente repelencia y una protección duradera contra artrópodos hematófagos.
MEDIOS TÉCNICOS PARA LA SOLUCIÓN DE LOS PROBLEMAS
Para conseguir el objeto mencionado anteriormente, la presente invención proporciona una composición repelente de artrópodos hematófagos que comprende 3,4-dimetoxibenzaldehído como ingrediente eficaz.
En la presente invención, se caracteriza por que la composición repelente de artrópodos hematófagos comprende adicionalmente uno o más tipos de aceite esencial vegetal del grupo que consiste en litsea cubeba y gaulteria. En la presente invención, se caracteriza por que el artrópodo hematófago es una garrapata o un mosquito.
En la presente invención, se caracteriza por que la relación de mezcla entre el aceite esencial vegetal y 3,4-dimetoxibenzaldehído es 1:1 ~ 1:5 en términos de relación ponderal.
EFECTO VENTAJOSO DE LA INVENCIÓN
La composición repelente de artrópodos hematófagos según la presente invención no solo tiene una excelente repelencia contra artrópodos hematófagos como mosquitos y garrapatas, sino que también tiene una repelencia duradera y, por lo tanto, puede utilizarse como repelente de artrópodos hematófagos para proteger animales, incluyendo humanos.
MEJOR(ES) MODO(S) PARA REALIZAR LA INVENCIÓN
En la presente invención, se realiza una búsqueda de un nuevo compuesto sintético que tenga repelencia contra artrópodos hematófagos.
La repelencia de compuestos sintéticos se evaluó utilizando como sujeto un mosquito y una garrapata, que son artrópodos hematófagos representativos. Como resultado, fue posible confirmar que 3,4-exhibe dimetoxibenzaldehído repelencia contra mosquito y garrapata, que son artrópodos hematófagos.
Mientras tanto, en la presente invención se espera que, cuando se utiliza aceite esencial vegetal que es, como es sabido, más respetuoso con el medio ambiente y tiene menos efectos secundarios con una relación de mezcla específica de 3,4-dimetoxibenzaldehído, el efecto repelente contra artrópodos hematófagos puede maximizarse debido al efecto sinérgico mientras se reduce la cantidad de uso de 3,4-dimetoxibenzaldehído.
Se confirmó que, cuando se utilizan conjuntamente aceite esencial vegetal y 3,4-dimetoxibenzaldehído, la repelencia y la persistencia del repelente contraAedes albopicusadulto se mejoran en comparación con un caso en el que el aceite esencial vegetal o 3,4-dimetoxibenzaldehído se utilizan por separado.
Como tal, la composición repelente de artrópodos hematófagos de la presente invención se caracteriza por que comprende adicionalmente aceite esencial vegetal, seleccionado a partir de aceite de gaulteria y aceite de litsea cubeba.
El aceite esencial vegetal se obtiene a partir de una planta, y se puede obtener mediante el uso de cualquiera de los métodos como enfleurage, maceración, extracción con agua caliente, extracción por fermentación, lixiviación por filtración y extracción de fluidos supercríticos utilizando un disolvente común (por ejemplo agua, etanol, acetona, metanol, propanol, éter, hexano, acetato de etilo, cloroformo o un disolvente mixto). Más preferiblemente, puede ser aceite esencial vegetal que se obtiene por destilación de vapor de agua. Además, el aceite esencial puede ser aceite que se obtiene por separado a partir de una parte diferente de la planta, como raíces, tallos, hojas, pulpa de fruta, flores, frutos, semillas y/o pieles, o a partir de toda la planta.
En la presente invención, la relación de mezcla entre el aceite esencial vegetal y 3,4-dimetoxibenzaldehído es 1:1 ~ 1:5 en términos de relación ponderal considerando la maximización de la propiedad de entremezclado y la repelencia. Más preferiblemente, la relación de mezcla es 1:4.
Los artrópodos hematófagos a los que se puede aplicar la composición repelente de artrópodos hematófagos pueden referirse a todos los organismos vivos que mantienen su vida recogiendo sangre o fluidos corporales de la piel de mamíferos o aves, y los ejemplos de ellos incluyen insectos pertenecientes a la familiaCulicidae,moscas hematófagas como la mosca de los establos, la mosca tse-tsé, el tábano o similares, chinches, piojos púbicos(Pthirus pubis)y piojos.
La composición repelente de artrópodos hematófagos según la presente invención puede formularse comprendiendo además un aditivo, vehículo o portador adecuado en función del propósito de uso o del entorno de la aplicación. El vehículo o soporte puede ser un material utilizado comúnmente para mejorar la facilidad de uso, la eficiencia económica, la formulación o la repelencia y el tiempo de repelencia. Los ejemplos de estos incluyen una fragancia, un agente emulsionante, alcoholes y un dispersante, pero no se limita a ellos.
Los ejemplos de la formulación incluyen un aerosol, un spray pulverizador, un gránulo, un polvo, una dispersión, un gránulo fino, una cápsula, un ungüento, una crema, una perla, un comprimido, un extracto, un extracto fluido y una loción, pero no se limita a ellos. Preferiblemente, la formulación se puede aplicar en forma de una crema, un spray pulverizador o un aerosol.
La composición repelente de artrópodos hematófagos de la presente invención puede dispersarse o distribuirse directamente en un área en la que se encuentran principalmente artrópodos hematófagos, o puede utilizarse directamente sobre la piel de un mamífero, incluidos los humanos y el ganado, o sobre la piel de un ave. Además, la composición se puede aplicar directamente a artículos domésticos como ropa, bolsos, bandas, tiendas de campaña o similares, o al interior de una casa.
Cuando la composición repelente de artrópodos hematófagos se aplica a un área en la que se encuentran principalmente artrópodos hematófagos, la aplicación se puede realizar por dispersión o distribución directa en el aire. Por ejemplo, cuando la composición se aplica a un espacio limitado como el interior de un edificio, se puede emplear un soporte poroso para la liberación continua de la composición repelente.
Cuando la composición repelente de artrópodos hematófagos se utiliza directamente sobre la piel de un mamífero o la piel de un ave, su uso se puede hacer mediante aplicación o pulverización de una cantidad adecuada sobre la piel. En un caso en el que la composición se utiliza directamente sobre una piel, no debe haber irritación, y si la hubiera, debe ser extremadamente pequeña para no causar ningún problema de la piel.
Además, cuando la composición repelente de artrópodos hematófagos es aplica a artículos domésticos, mediante la preparación de una cápsula en la que se soporta la composición repelente y la incorporación directa de la cápsula durante la producción de materiales de artículos domésticos, como tejidos, telas, bandas o plásticos, se puede hacer uso para exhibir la repelencia ya que la composición repelente soportada se distribuye en el aire conforme a la rotura de la cápsula por fricción, o a medida que la composición se incorpora directamente y después se libera gradualmente al aire.
La composición repelente de artrópodos hematófagos según la presente invención se puede utilizar para electrodomésticos como un purificador de aire, aire acondicionado, enfriador de aire o similares. La aplicación a estos electrodomésticos puede modificarse adecuadamente mediante un método común.
EJEMPLOS
A continuación, la presente invención se explica con mayor detalle en vista de los ejemplos. Sin embargo, es evidente que los siguientes ejemplos se aportan solo para la ejemplificación de la presente invención y para una persona con conocimiento común en la técnica pertinente sería evidente que el alcance de la presente invención se entienda de ninguna manera limitado por estos ejemplos.
Preparación de materiales y composición
Se adquirieron vainillina, isobutirato de vainillina, acetato de vainillina, 3,4-dimetoxibenzaldehído, 4-benciloxi-3-metoxibenzaldehído, hidrocloruro de 4-hidroxi-3-metoxibencilamina, vanillilacetona, 4-formil-2-metoxifenilcarbonato de terc-butilo, eugenol y similares en Tokyo Chemical Industry (TCI Chemical, Tokyo, Japan), y anís, laurel, cálamo, cananga, semilla de apio, davana, mirra, neroli, pachulí, semilla de perejil, estragón, litsea cubeba y gaulteria en Berje, Bloomfield, NJ, USA.
Insectos para prueba
En general, cada artrópodo hematófago tiene un tiempo activo diferente en el que busca un huésped para succionar sangre o exhibe una fuerte actividad hematófaga. En la presente invención, se seleccionaron como insectos representativos para prueba de garrapatasAedes aegypti(oAedes albopictus),que muestra una fuerte actividad hematófaga incluso durante el día, yHaemaphysalis longicornis,que es una importante plaga transmisora de enfermedades.
ElAedes aegyptiutilizado para la prueba en interiores era la colonia de mosquitos que ha sido subcultivada dentro de un edificio durante años sin haber sino expuesta a ningún insecticida, y desarrollada y mantenida por la Universidad Nacional de Seoul. Además, paraAedes albopicus,se obtuvieron huevos de la línea bajo la gestión de los Centros para el Control y la Prevención de Enfermedades de Corea, y se cultivaron y utilizaron en la presente invención. Además, en cuanto a las ninfas deHaemaphysalis longicornis,se utilizó el tipo de exteriores recolectado en la región alrededor de Bongdam-Myon, Hwasung-Shi, Kunggi-Do, Corea del Sur.
Durante el cultivo, para inducir el desove, se permitió que los mosquitos succionaran sangre directamente de un ratón, y se mantuvieron mediante suministro de 10 % (p/v) de agua azucarada para obtener carbohidratos adicionales que son necesarios. La larva se añadió a una bandeja de plástico (24x35x5cm) y fue abastecida con 0,5 g de pienso artificial estéril (polvo de malla 40 para pececillos/levadura, 4:1, p/p).
Las garrapatas se recogieron en un campo exterior y, después de ser añadidas a un vial forrado con algodón al que se había aplicado humedad de antemano, se transfirieron a la sala de pruebas. Las garrapatas se mantuvieron en condiciones que incluían temperatura de 26 ± 2 °C, humedad relativa de 70 ± 5 % y horas de luz:oscuridad de 16:8 horas.
Método de exposición a la piel
<Repelencia de mosquitos>
Para determinar la repelencia de las muestras preparadas contra adultos deAedes aegyptiandAedes albopicus,se realizó una prueba de jaula en brazo como método de exposición a la piel. Es decir, en el dorso de la mano de un guante de goma se creó un orificio con un diámetro de 5 cm y en el dorso expuesto de los probandos se aplicaron varias muestras preparadas mediante disolución en 100 pl de etanol y después se realizó la prueba cutánea. Los probandos eran varones sanos entre las edades de 21 y 40 años. El grupo de control fue tratado solo con 100 ¡ de etanol. Las hembras adultas (5 a 8 días de edad) deAedes aegyptioAedes albopicus(250 a 300 mosquitos) se añadieron a una jaula para el crecimiento de mosquitos adultos (25x25x25 cm3) y se adaptaron a las condiciones interiores durante 12 a 24 horas antes de iniciar la prueba. Cuando la parte superior del brazo del grupo de control se expone durante 1 minuto y se posan al menos 6 mosquitos en la parte superior del brazo o muestran un comportamiento hematófago, se determinó que al presión de la picadura era suficiente y después se realizó la prueba de repelencia. La prueba se detuvo con un intervalo de 30 minutos, mediante exposición de la parte superior del brazo que ha sido tratada con la composición anterior, durante 3 minutos, y cuando el mosquito adulto se posa en el brazo durante 2 segundos o más, o al menos dos mosquitos muestran el comportamiento de inyección bucal en la piel o succión directa de sangre a partir de pruebas consecutivas. El periodo de tiempo entre el momento del tratamiento inicial de un material y el momento en el que 2 o más mosquitos se posan continuamente en el área de tratamiento o muestran el comportamiento hematófago se definió como tiempo de protección completa (CPT). Además, para obtener la repelencia con respecto a la concentración, se realizó la exposición durante un periodo de tiempo constante independientemente de lo anterior y se calculó la repelencia mediante la siguiente fórmula. En consecuencia, se comparó el efecto entre cada una de las muestras de prueba. Todas las pruebas se realizaron por triplicado.
% de Repelencia = (Número de insectos que muestran comportamiento hematófago en grupo
sin tratamiento - Número de insectos que muestran comportamiento hematófago en grupo con
tratamiento)/Número de insectos que muestran comportamiento hematófago en grupo sin tratamiento) x
100
<Repelencia de garrapatas>
Al tener como sujeto el grupo de exteriores deHaemaphysalis longicornisrecogido en la región alrededor de Bongdam-Myon, Hwasung-Shi, Kunggi-Do, Corea del Sur, se determinó la repelencia contra garrapatas mediante empleo de un método de la yema del dedo. En 50plde etanol, cada muestra se disolvió en una cantidad de 2 mg y después se trató en el segundo nódulo de un tercer dedo. Con un intervalo de 5 minutos, se liberaron 10 ninfas de garrapata en la uña, cada veinticinco minutos después del tratamiento, y se evaluó la repelencia. Todas las pruebas se realizaron por triplicado.
% de Repelencia = (Número de insectos que muestran comportamiento hematófago en grupo
sin tratamiento - Número de insectos que muestran comportamiento hematófago en grupo con
tratamiento)/Número de insectos que muestran comportamiento hematófago en grupo sin tratamiento) x
100
Ejemplo 1: Evaluación de la repelencia de compuestos sintéticos contra artrópodos hematófagos
1-1: evaluación de repelencia contra Aedes aegypti (ejemplo de referencia)
Para evaluar la repelencia de los compuestos sintéticos (4 mg) de la Tabla 1 contraAedes aegyptiadulto se realizó la prueba de jaula en brazo mencionada anteriormente y el tiempo de protección completa (CPT) se muestra en la Tabla 1.
Según la Tabla 1, el CPT de vainillina era 30 minutos, el CPT de isobutirato de vainillina era 45 minutos, el CPT de acetato de vainillina era 63 minutos, el CPT de 3,4-dimetoxibenzaldehído era 70 minutos, el CPT de 4-benciloxi-3-metoxibenzaldehído era 22 minutos, el CPT de hidrocloruro de 4-hidroxi-3-metoxibencilamina era 10 minutos, el CPT de vanillilacetona el CPT de 10 minutos, el CPT de 4-formil-2-metoxifenilcarbonato de terc-butilo era 10 minutos, el CPT de eugenol, que es un compuesto de control positivo natural, era 10 minutos, y el CPT de DEBT, que se ha utilizado como un compuesto sintético de control positivo, era 90 minutos.
Es decir, DEET como compuesto de control mostró la repelencia más excelente, seguido de 3,4-dimetoxibenzaldehído y acetato de vainillina, que mostraron el CPT de más de 1 hora, lo que indica que tienen una repelencia mucho más excelente en comparación con eugenol, que muestra un CPT de 10 minutos, como compuesto de control derivado de plantas.
1-2: evaluación de repelencia contra Aedes albopicus (ejemplo de referencia)
Para determinar la repelencia de 3,4-dimetoxibenzaldehído, que ha demostrado una excelente repelencia contraAedes aegyptiadulto en 1-1 más arriba, contra otros artrópodos hematófagos se establecieron 4 bloques de concentración paraAedes albopicus,y se realizó la prueba de jaula en brazo durante 180 minutos. Después se calculó la repelencia y esta se muestra en la Tabla 2. Como referencia, la comparación de la repelencia de mosquitos se realizó mediante el uso de aceite de clavo como grupo de control positivo natural y DEET como grupo de control positivo sintético.
Tabla 2
según la Tabla 2, el clavo utilizado como grupo de control positivo mostró una rápida disminución de la repelencia, es decir, bajo el tratamiento durante 60 minutos, repelencia de 69 % al tratamiento de 0,25 mg/cm2, repelencia de 60 % al tratamiento de 0,20 mg/cm2 y repelencia de 44 % al tratamiento de 0,10 mg/cm2.
Por otro lado, en todos los niveles de concentración del tratamiento, 3,4-dimetoxibenzaldehído mostraba una repelencia comparable a la de DEET como un grupo de control positivo. En términos de CPT, esta repelencia también era comparable a la de DEBT.
1-3: evaluación de repelencia contra Haemaphysalis longicornis (ejemplo de referencia)
Para determinar la repelencia de 3,4-dimetoxibenzaldehído, que ha demostrado una excelente repelencia contraAedes aegyptiadulto en 1-1 más arriba, contra otros artrópodos hematófagos se establecieron 4 bloques de concentraciónde Haemaphysalis longicornis,y se realizó el método de la yema del dedo durante 300 minutos. Los resultados se muestran en la Tabla 3.
Según la Tabla 3, se descubrió que 3,4-dimetoxibenzaldehído muestra repelencia dependiente del tiempo y del tratamiento también contraHaemaphysalis longicornis.Cuando el nivel de tratamiento es 0,02 mg/cm2 o superior, la repelencia de 78 % o superior se mantuvo frente aHaemaphysalis longicornisincluso 4 horas después del tratamiento. A 0,01 mg/cm2 se mantuvo la repelencia de 65 %.
A partir de los anteriores resultados se reconoció que, para mosquitos y garrapatas, 3,4-dimetoxibenzaldehído exhibe una repelencia más excelente que el clavo, que es un ingrediente eficaz de un repelente natural disponible comercialmente en Corea del Sur.
Ejemplo 2: evaluación de repelencia de una muestra de mezcla que contiene aceite esencial y compuesto sintético contra artrópodos hematófagos
2-1: evaluación de repelencia solo de aceite esencial contra artrópodos hematófagos (ejemplo de referencia)
Para determinar la repelencia solo del aceite esencial vegetal contraAedes albopicusadultos y ninfas deHaemaphysalis longicornis,se realizó la prueba de jaula en brazo y el método de la yema de los dedos, de la misma manera que en los Ejemplos 1-2 y 1-3, con cada uno de los 16 tipos de aceite esencial de la Tabla 4. Después se calculó la repelencia y esta se muestra en la Tabla 4.
Según la Tabla 4, se descubrió que, 30 minutos después del tratamiento, el aceite esencial vegetal que mostró una fuerte repelencia de 90 % o superior para los 2 tipos de artrópodos hematófagos era laurel y semilla de apio, y el aceite esencial vegetal que mostró una fuerte repelencia de 90 % o superior paraHaemaphysalis longicornisera anís, laurel, cálamo, semilla de apio, neroli, pachulí, semilla de perejil y estragón.
Además, el aceite esencial vegetal que mostró una fuerte repelencia de 80 % o superior paraHaemaphysalis longicornisincluso después de 30 minutos era cananga, davana, mirra o similares, y la planta que mostró la fuerte repelencia de 80 % o superior paraAedes albopicusadulto era anís, laurel, cálamo, semilla de apio, litsea cubeba, gaulteria o similares.
La repelencia de esos aceites esenciales vegetales tiende a disminuir con el tiempo, es decir, 60 minutos después del tratamiento, la planta que muestra una repelencia de 70 % o superior paraHaemaphysalis longicornisyAedes albopicusera laurel y semilla de perejil mostró una fuerte repelencia de 90 % paraHaemaphysalis longicornis.Sin embargo, 90 minutos después del tratamiento, la mayoría de las plantas que mostraban la repelencia exhibieron una repelencia drásticamente disminuida de 50 % o menor.
2-2: evaluación de repelencia de aceite esencial mixto contra artrópodos hematófagos (ejemplo de referencia)Como se ha mostrado en 2-1, el aceite esencial vegetal tiene el problema de que, después de una aplicación sobre la piel, se produce un cambio de concentración debido a una pérdida como la causada por la evaporación en el aire o la absorción en la piel. Para resolver este problema, se examinó si la mezcla de 2 tipos de aceite vegetal en una relación adecuada puede exhibir una repelencia mejorada contra mosquitos.
Puesto que es prácticamente imposible tener evaluaciones para combinaciones completas de los 16 tipos de un aceite esencial, se seleccionaron 6 tipos, es decir, 2 tipos que mostraban actividad elevada (laurel, cálamo), 2 tipos que mostraban actividad media (cananga, gaulteria) y 2 tipos que mostraban baja actividad (albahaca, litsea cubeba), y se mezclaron entre sí en una relación de 1:1, 1:4 o 4:1. Después se realizó la prueba de jaula en brazo. Se calculó la repelencia y esta se muestra en la Tabla 5.
[Tabla 5]
A partir de la tabla 5 se reconoce que se puede obtener una repelencia mejorada adicionalmente con una amplia relación de intermezclado como 1:4 o 4:1 que 1:1 entre los dos tipos de aceite esencial con fuerte actividad repelente (es decir, laurel, cálamo). Esta tendencia sigue siendo la misma para la combinación entre los aceites esenciales con baja repelencia (es decir, albahaca, litsea cubeba).
Además, se descubrió que la mezcla en una relación adecuada de aceites esenciales vegetales que muestran la repelencia a cierto nivel conduce a una repelencia mejorada adicionalmente en comparación con el tratamiento solo con aceite esencial, cuando la determinación se realiza con la misma cantidad.
Como tal, se descubrió que, para el desarrollo de un repelente, el mezclado de aceites en una relación adecuada (1:4 o 4:1) en lugar del simple mezclado es mucho más favorable para tener protección de humanos contra la plaga hematófaga.
2-3: evaluación de repelencia de compuestos sintéticos y aceites esenciales contra artrópodos hematófagos (las mezclas marcadas con * son según la invención)
Para determinar el efecto repelente sinérgico contra artrópodos hematófagos según el uso mixto de un compuesto sintético y un aceite esencial vegetal, se mezcló litsea cubeba que demostró tener baja repelencia cuando se usa mezclada solo con el compuesto sintético evaluado en 1 -1 más arriba en una relación de mezcla de 1:1, 1:4 o 4:1. Después se realizó la prueba de jaula en brazo contraAedes aegyptiadulto y el tiempo de protección completa (CPT) se muestra en la Tabla 6.
[Tabla 6]
A partir de la Tabla 6 se reconoce que, cuando se utilizó litsea cubeba como un aceite esencial vegetal, vainillina, 4-benciloxi-3-metoxibenzaldehído, 3,4-dimetoxibenzaldehído, vanillilacetona, hidrocloruro de 4-hidroxi-3-metoxibencilamina y 4-formil-2-metoxifenilcarbonato de terc-butilo mostraron repelencia mejorada respecto a un caso en el que cada uno de los compuestos se utilizan por separado y, en particular, 3,4-dimetoxibenzaldehído mostró una repelencia enormemente mejorada según el uso mixto.
2-4: evaluación de repelencia de 3,4-dimetoxibenzaldehído y aceite esencial de gaulteria contra artrópodos hematófagos (según la invención)
Para determinar el efecto repelente sinérgico contra los artrópodos hematófagos según el uso mixto de un compuesto sintético y un aceite esencial vegetal, se realizó el ensayo de jaula en brazo paraAedes albopicusadulto mediante uso solo de gaulteria, que demostró tener repelencia media cuando se usa por separado, o 3,4-dimetoxibenzaldehído, que demostró tener una excelente repelencia, o una mezcla de ellos en la que se mezclan entre sí en una relación de mezcla de 1:4. El tiempo de protección completa (CPT) se muestra en la Tabla 7.
Tabla 7]
, minutos
WG, aceite de gaulteria; DBA, 3,4-dimetoxibenzaldehído.
A partir de la Tabla 7 se descubrió que, en comparación con un caso en el que el tratamiento se realiza solo con gaulteria (WG, 4mg) o solo con 3,4-dimetoxibenzaldehído (4mg), se obtiene un CPT notablemente superior cuando se usan gaulteria y 3,4-dimetoxibenzaldehído como una mezcla (5mg:20mg o 0,5mg:2mg), y el resultado también es notablemente superior que con clavo y DEET como un grupo de control positivo, mostrando un CPT de 10 minutos y 90 minutos.
2-5: evaluación de repelencia de 3,4-dimetoxibenzaldehído e icaridina contra artrópodos hematófagos (ejemplo de referencia)
Para evaluar la posibilidad de comercialización de 3,4-dimetoxibenzaldehído, se disolvió en etanol y se añadió a un pulverizador manual una emulsión (tipo spray) que contenía 7 % de icaridina, que se utiliza ampliamente como repelente de síntesis química, 3,5 % de icaridina y 3,5 % de 3,4-dimetoxibenzaldehído. Después de la aplicación uniforme de la mezcla en la parte inferior de una muñeca, se realizó la exposición a una jaula (35x35x35cm) en la que se recogieron 160 hembras adultas deAedes albopicus5 a 10 días después de su emergencia durante 3 minutos con un intervalo de 1 hora. Después se midió el CPT y el resultado se muestra en la Tabla 8.
[Tabla 8
t
A partir de la Tabla 8 se descubrió que, en comparación con el preparado de icaridina al 7 %, el preparado de mezcla al 7 % (es decir, icaridina 3,5 % 3,4-dimetoxibenzaldehído 3,5 %) con la misma cantidad de componentes efectivos muestra una repelencia mejorada de 60 minutos o más tiempo, lo cual es significativo estadísticamente (P = 0,05).
Ejemplo de prueba 1: evaluación de la repelencia en interiores del spray de 3,4-dimetoxibenzaldehído (ejemplo de referencia)
Para determinar el contenido efectivo para desarrollar un repelente basado en la repelencia de 3,4-dimetoxibenzaldehído se evaluó la repelencia en interiores. Cada uno de los preparados de etanol que contenían 5 %, 7 %, 10 %, o 15 % de 3,4-dimetoxibenzaldehído, spray de clavo al 2 %, preparado en aerosol de DEET al 19 % y spray de icaridina al 7 %, que están aprobados por el Ministerio de Seguridad de Alimentos y Medicamentos de Corea del Sur, se aplicó 3 veces (para el preparado en aerosol, 2 segundos), en el dorso de una mano y, después de usar guantes de goma con un orificio de 5 cm formado en el dorso, se realizó cada 30 minutos la exposición durante 1 minuto a una jaula (35x35x35cm) en la que se encontraban contenidas 120 hembras adultas deAedes albopicus(5 a 10 días de edad). Después se calculó la repelencia y esta se describe en la Tabla 9. Todas las pruebas se realizaron por triplicado.
A partir de la Tabla 9 se muestra que el spray de clavo al 2 % exhibe una repelencia extremadamente pobre de 20 %, incluso 10 minutos después del tratamiento. Por otro lado, el spray de 3,4-dimetoxibenzaldehído al 15 % exhibe casi la misma repelencia que el preparado en aerosol de DEET al 19 %, y los sprays que contienen 3,4-dimetoxibenzaldehído al 5 % o en una cantidad superior tienen una repelencia más excelente que el spray de icaridina al 7 %.
Sobre la base de los resultados anteriores, se reconoce que, para el desarrollo de un repelente que contiene 3,4-dimetoxibenzaldehído como un ingrediente efectivo, es apropiado que este contenga 3,4-dimetoxibenzaldehído al 5 % o en una cantidad superior.
Ejemplo de prueba 2: evaluación de la repelencia en exteriores del spray de 3,4-dimetoxibenzaldehído (ejemplo de referencia)
Para evaluar la repelencia de 3,4-dimetoxibenzaldehído contra un grupo real de mosquitos en exteriores se colocaron tres probandos sanos de entre 30 y 40 años, que llevaban pantalones cortos, en las colinas y el bosque de bambú cerca del embalse de Ilwol de Suwon, Corea del Sur, y se aplicó el spray en la parte inferior de la rodilla. Después se expusieron los probandos a los mosquitos entre las 15 y las 21 horas mientras estaban sentados en una silla durante 5 a 15 minutos y se midió el CPT, que se muestra en la Tabla 10. Todas las pruebas se realizaron por triplicado. [Tabla 10]
Composición Co CP Observaciones Spray de 3,4-d 4 45 ( Repetido 3 veces 6 150 Repetido 3 veces 9 150 Repetido 7 veces 12 150 Repetido 3 veces 15 180 Repetido 4 veces Spray de icarid 7 140 Repetido 5 veces Spray de clavo 2 15 Repetido 3 veces Según la Table 10, cada spray que contenía 3,4-dimetoxibenzaldehído al 4 %, 6 %, 9 %, 12 % o 15 % tiene el CPT de 45 minutos, 150 minutos, 150 minutos, 150 minutos y 180 minutos respectivamente, en el que los sprays al 6 % hasta al 12 % tenían el mismo CPT para el grupo de mosquitos de exteriores.
El spray de icaridina al 7 % exhibió el CPT de 140 minutos, mostrando repelencia similar al spray que contenía 3,4-dimetoxibenzaldehído al 6 % o más.
Sin embargo, el spray de clavo al 2 % exhibía el CPT de 15 minutos, lo que indica que no es adecuado como repelente. Más arriba se explican en detalle partes específicas de la presente invención y esas descripciones son solo una realización preferida para una persona con un conocimiento común en la técnica pertinente. Se entiende que el alcance real de la presente invención está definido por las reivindicaciones adjuntas.

Claims (2)

REIVINDICACIONES
1. Una composición repelente de artrópodos hematófagos que comprende 3,4-dimetoxibenzaldehído como un ingrediente efectivo,
comprendiendo la composición adicionalmente uno o más tipos de aceite esencial vegetal del grupo que consiste en litsea cubeba y gaulteria,
en donde la relación de mezcla entre el aceite esencial y 3,4-dimetoxibenzaldehído está entre 1: 1 y 1:5 en términos de relación ponderal.
2. La composición repelente de artrópodos hematófagos según la reivindicación 1, en donde el artrópodo hematófago es una garrapata o un mosquito.
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